CN1349845A - 分离脐血干细胞防冻剂的透析方法及透析装置 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种分离脐血干细胞防冻剂的透析方法及透析装置,其特征在于:一、采用逆流透析的方法,即将脐带血从装置一端送入,将透析液从装置另一端侧向管口逆向送入装置;二、该装置包括套筒和多孔薄膜纤维管;500根以上的纤维管沿轴向设于套筒内。采用该方法及装置可在几分钟之内将95%的DMSO除去,使用该装置不会发生细胞粘连现象。有效地解决了离心法中的细胞聚集、细胞丢失、渗透损伤以及细菌污染诸问题,使细胞的回收率及其功能活性有了较大幅度的提高。
Description
本发明涉及一种分离脐血干细胞防冻剂DMSO的透析方法及透析装置。
在造血干细胞(HPC)低温保存中，必须加入含防冻剂DMSO的低温保护液以防止细胞的低温损伤。然而，由于DMSO在室温和/或体温下对人体有毒性，因此，复温后还须将细胞保护液中的DMSO取出才能输入人体。目前，一般是采用离心法来分离掉DMSO。但在该方法中由高速旋转产生的机械力和渗透压，会导致细胞聚集成团且使大量细胞受损；另外，由于离心分离装置不是一个封闭系统，因而该方法及装置操作上的非密封性，也会使脐血干细胞受到细菌污染。
本发明的目的在于：为克服上述现有技术中存在的不足之处，提供一种新型扩散式清洗分离脐血干细胞防冻剂的透析方法及透析装置。
其发明目的是通过下述技术解决方案实现的。
分离脐血干细胞防冻剂的透析方法，其特征在于：
A、将加入了低温保护液的脐带血从透析装置套筒的一端口送入透析装置，并从套筒另一端口流出，
B、将透析液从透析装置套筒脐带血流出端的侧面管口逆向泵入透析装置。
一种使用权利要求1所述的分离脐血干细胞防冻剂的透析方法的透析装置，其特征在于：包括套筒和多孔薄膜纤维管；套筒为圆柱筒形，两端开口，其两端侧面分别设有管口；500根以上的纤维管沿轴向设于套筒内。
所述套筒两端端部，纤维管与纤维管以及纤维管与套筒内壁之间的间隙处设有封堵的固体片块。
所述套筒的内径为4～10mm，长度为4～10cm，为一微型套筒。
所述套筒可由对人体无毒、无害的刚性材料，如玻璃、有机玻璃或不锈钢等制成。
所述纤维管其内径为100～200μm，管壁厚度15～30μm，且管壁为多孔膜。
所述纤维管管材为空隙率70％的三醋酸纤维素薄膜。
本发明的透析装置设计合理，结构简单，采用本发明的透析方法及透析装置，可在几分钟之内将脐带血中95％的DMSO除去，且在操作过程中不发生细胞粘连现象。有效地解决了离心法中的细胞聚集、细胞丢失、渗透损伤以及细菌污染诸问题，使细胞的回收率及其功能活性有了较大幅度的提高。
图1为本实用新型结构示意图，
图2为图1的A-A剖视图。
下面结合附图，对本发明作进一步地说明。
实施例：
该分离脐血干细胞防冻剂的透析装置，包括套筒1和多孔薄膜纤维管2。
套筒1为圆柱筒形，可用对人体无毒、无害的刚性材料如玻璃、有机玻璃、不锈钢等制成。套筒1的内径为6mm，长度为8cm，其两端开口供细胞悬浮液流进和流出；其两端侧面分别开有管口3，供透析液(清洗剂)流进和流出；500根多孔薄膜纤维管沿轴向装在套筒1内。
所述套筒1两端端部，多孔薄膜纤维管2与多孔薄膜纤维管2以及多孔薄膜纤维管2与套筒1内壁之间的间隙用硅橡胶之类的材料形成的固体片块5进行封堵，以使透析液与细胞悬浮液不相混，保证血液从多孔薄膜纤维管2中流过，而透析液只能在多孔薄膜纤维管2管簇间流动。套筒1的两端口上套装着带孔口的端盖4。
所述多孔薄膜纤维管为三醋酸纤维素薄膜管，其内径为150μm，管壁厚度20μm，且管壁上有微孔，其孔径的大小仅能容DMSO分子通过，其空隙率为70％。
其使用中的操作过程是这样的：
将加入了低温保护液的脐带血样品用专门的降温装置降温，然后置于液氮中保存。一段时期后，如需使用，再将脐带血复温。
首先，将复温后含DMSO的脐血干细胞悬浮液(血液)从透析装置套筒1的一端部送进透析装置，并使其在套筒1内的多孔薄膜纤维管2中流动，且从另一端口流出。
接着，将透析液从透析装置套筒1脐带血流出端的侧面的管口3泵入，并在泵的作用下使其在多孔薄膜纤维管2外的缝隙之间沿与血液相反方向流动(逆流透析)。多孔薄膜纤维管2内的DMSO通过多孔薄膜管壁由细胞悬浮液逐渐扩散到透析液中。利用泵使细胞悬浮液循环往复地通过透析器(封闭系统)，直到大部分DMSO从细胞悬浮液中清除掉方可进入临床使用。
Claims (6)
1、分离脐血干细胞防冻剂的透析方法，其特征在于：
A、将加入了低温保护液的脐带血从透析装置套筒的一端口送入透析装置，并从套筒另一端口流出，
B、将透析液从透析装置套筒脐带血流出端的侧面管口逆向泵入透析装置。
2、一种使用权利要求1所述的分离脐血干细胞防冻剂的透析方法的透析装置，其特征在于：包括套筒和多孔薄膜纤维管；套筒为圆柱筒形，两端开口，其两端侧面分别设有管口；500根以上的纤维管沿轴向设于套筒内。
3、根据权利要求2所述的分离脐血干细胞防冻剂的透析器，其特征在于：所述套筒两端端部，纤维管与纤维管以及纤维管与套筒内壁之间的间隙处设有封堵的固体片块。
4、根据权利要求2所述的分离脐血干细胞防冻剂的透析器，其特征在于：所述套筒的内径为4～10mm，长度为4～10cm，为一微型套筒。
5、根据权利要求2所述的分离脐血干细胞防冻剂的透析器，其特征在于：所述纤维管其内径为100～200μm，管壁厚度15～30μm，且管壁为多孔膜。
6、根据权利要求5所述的分离脐血干细胞防冻剂的透析器，其特征在于：所述纤维管管材为空隙率70％的三醋酸纤维素薄膜。
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101505811B (zh) * | 2006-08-24 | 2012-05-23 | 弗雷泽纽斯医疗保健控股有限公司 | 从患者血液中除去液体的装置 |
| CN102036688B (zh) * | 2007-10-05 | 2014-07-02 | 伊西康公司 | 使用人脐带组织来源的细胞进行肾脏组织的修复和再生 |
| CN105994250A (zh) * | 2016-05-19 | 2016-10-12 | 电子科技大学 | 一种基于微流控和膜分离技术的细胞低温保护剂添加或去除方法 |
-
2001
- 2001-06-22 CN CN 01113725 patent/CN1349845A/zh active Pending
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| CN105994250A (zh) * | 2016-05-19 | 2016-10-12 | 电子科技大学 | 一种基于微流控和膜分离技术的细胞低温保护剂添加或去除方法 |
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