CN120815216B - 一种具有抑菌修护作用的水凝胶敷料及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种具有抑菌修护作用的水凝胶敷料，包括以下重量份的各组分：金银花纯露18‑22份、桑黄多糖提取物6‑8份、明胶1‑3份、保湿剂2‑4份以及营养剂1‑3份。本发明采用超声协同纤维素酶法提取桑黄粉中的多糖，利用纤维素酶能够有效降解植物中的纤维素，进而有效破除植物细胞壁，使植物细胞多糖有效溶出，从而提高桑黄多糖的提取量，此过程简单、价格低廉、条件温和、对环境无污染，利于绿色工业化生产。本发明所制备的桑黄多糖不仅抗菌能力强，且抗氧化能力好，更易深层滋养肌肤。采取消炎抗菌能力强、来源天然的弱酸性金银花纯露代替去离子水制备化妆品，不仅因其呈弱酸性而更贴合肌肤，其所自行散发的特殊的植物香味还能愉悦身心。

Description

一种具有抑菌修护作用的水凝胶敷料及其制备方法

技术领域

本发明涉及护肤品技术领域，具体涉及一种具有抑菌修护作用的水凝胶敷料及其制备方法。

背景技术

桑黄作为我国传统名贵中草药，在民间素有“森林黄金”之尊称，多部中医药典籍均有记载其药用价值，如《本草纲目》中曾提及桑黄“利五脏，宣肠胃气，排毒气”。它属于寒性药物，味道苦涩。研究表明桑黄的主要活性成分包括多糖、黄酮、麦角甾醇、三萜类等（赵鹏，李彩霞，左凡娇，等. 桑黄化学成分、药理活性研究进展及质量标志物（Q-Marker）预测[J]. 药物评价研究），其中桑黄多糖作为核心活性成分，具有抗肿瘤、抗氧化、抗糖、提高免疫力、抗突变、清除自由基等功效。

桑黄多糖的提取方法多样，常用水浸提法、酶解法以及超声辅助提取法等。然而其作为生物大分子，本身提取难度较大，且在高温条件下易失活，这极大地限制了其提取效率。因此，通过创新手段优化桑黄多糖的提取与纯化工艺至关重要。本实验采用超声协同纤维素酶法提取桑黄粉中的多糖，同时结合超声促进活性成分释放，有效降低实验成本、提高提取效率，且全程无有害化学试剂添加，绿色无污染，简化传统复杂工艺，有望实现产业化生产。

植物纯露是指芳香植物经过蒸馏萃取精油的过程中得到的副产物，有特殊植物香气，含有微量的酯类、酮类、烯类以及醇类，具有亲水性，大多数纯露呈弱酸性，作为化妆品对肌肤具有舒缓、消炎作用。研究表明，金银花纯露富含绿原酸等，较其精油而言，其具有良好的消炎抗菌能力（王嘉璐，张彩凤，徐润杨，等. 金银花活性成分的功能及应用研究进展[J].食品安全导刊）。

水凝胶因其优异的生物相容性和仿生结构而广受关注。作为伤口敷料时，它能有效吸收分泌物、防止感染并维持湿润环境，从而促进细胞粘附。明胶凭借其强保湿性、可塑性和促进伤口愈合等优点，被广泛用于制备水凝胶伤口敷料。尽管桑黄多糖在医疗保健领域的功效已获广泛认可，但其在具有抑菌、抗氧化及修护功效的药妆和医美修复类化妆品中的应用仍处于探索阶段。特别是将桑黄多糖用于开发具有这些功效的天然水凝胶敷料，目前仍存在技术空白。

发明内容

本发明为解决现有技术中存在的问题，提供了一种将具有优良抗菌抗氧化作用的桑黄多糖等作为有效成分，应用于制备具备抑菌修护功能的水凝胶敷料的方法。

本发明属于植物提取和化妆品领域，本发明采用桑黄多糖和金银花纯露为主要原料，制备了一种具有抗氧化、温和保湿的护肤品，其工艺简单、绿色环保，填补了桑黄多糖用于化妆品领域的空白。

本发明的一种具有抑菌修护作用的水凝胶敷料，包括以下重量份的各组分：

金银花纯露 18-22份

桑黄多糖提取物 6-8份

明胶 1-3份

保湿剂 2-4份

营养剂 1-3份。

优选的是，桑黄多糖提取物通过超声协同纤维素酶法从桑黄粉中提取，提取率为2%~5%。

优选的是，桑黄多糖提取物的制备方法包括以下步骤:

脱脂处理：桑黄粉与90%乙醇按料液比1:20~1:30混合，80~85℃回流2~3 h；

酶解超声：脱脂桑黄粉按固液比1:20~1:30加水，加入0.5~1.0 g生物酶，40~55℃酶解90 min，80~100℃灭酶5~10 min，再经300~360 w超声0.5~2 h；

纯化：酶解液与79%乙醇按体积比1:5混合沉淀10~12 h，离心干燥得桑黄多糖提取物。

优选的是，酶解超声步骤中，脱脂桑黄粉加水配置成固液比为1:20~1:30的水溶液，酶解采用的生物酶为纤维素酶、木瓜蛋白酶、果胶酶、淀粉酶中的至少一种。

优选的是，保湿剂选自乙酰化透明质酸钠、甘油、聚谷氨酸钠中的至少一种。

优选的是，营养剂选自维生素C、泛醇、烟酰胺中的至少一种。

优选的是，金银花纯露制备方法为：金银花枝叶按料液比1:2加水，120℃蒸馏3 h，收集下层冷凝液即可得到金银花纯露。

一种具有抑菌修护作用的水凝胶敷料的制备方法，包括以下步骤：

S1、称取明胶粉末置于容器中，并向其中加入金银花纯露，持续搅拌，使明胶完全溶解得到凝胶水溶液；

S2、将桑黄多糖溶液、保湿剂、营养剂加入凝胶水溶液中继续搅拌均匀，冷却至室温，即可形成所需水凝胶敷料。

优选的是，凝胶水溶液中明胶质量浓度为10%~20%，搅拌温度为40~50℃。

本发明的优点:

本发明采用超声协同纤维素酶法提取桑黄粉中的多糖，利用纤维素酶能够有效降解植物中的纤维素，进而有效破除植物细胞壁，使植物细胞中的多糖有效溶出，从而提高桑黄多糖的提取量，此过程简单、价格低廉、条件温和、对环境无污染，利于绿色工业化生产。本发明所制备的桑黄多糖不仅抗菌能力强，且抗氧化能力好，更易深层滋养肌肤。采取消炎抗菌能力强、来源天然的弱酸性金银花纯露代替去离子水制备化妆品，不仅因其呈弱酸性而更贴合肌肤，其所自行散发的特殊的植物香味还能愉悦身心。故将桑黄多糖与金银花纯露联合使用，制备一款具有抑菌修护作用的水凝胶敷料，不仅温和不刺激，还可有效抑制活性自由基的活性，适合皮肤受损紧急舒缓，长期抗衰抗氧化。

附图说明

图1为桑黄多糖提取物的红外光谱图。

图2为水凝胶敷料的溶胀比示意图。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。

<实施例1>

（1）桑黄多糖的制备：

取5.0 g桑黄粉于250 mL圆底烧瓶中，加入90%的乙醇溶液125 mL，置于80℃的油浴锅内回流两小时，在该过程中桑黄粉中的脂质会溶出且溶于乙醇，两小时后，将烧瓶内的溶液进行抽滤，之后再加入90%的乙醇溶液125 mL，重复上述操作，进而使桑黄粉中的脂质全部溶出。抽滤得脱脂后桑黄粉，置于60℃真空干燥箱烘干至恒重，并将脱脂后的桑黄粉封存于自封袋保存备用。

取3.0 g脱脂后桑黄粉加入80 mL的去离子水中，加入0.5 g纤维素酶，反应温度为45℃，提取90 min。然后升温至80℃，灭酶5 min。在温度为80℃、功率为360 w的条件下超声1 h后，待温度降至50℃后，调节体系的pH至4。之后将上述溶液进行离心，由于所要提取的多糖溶于水，所以保留上清液，同时，为了使残渣去除干净，将离心后的上清液再进行抽滤，保留滤液。再将滤液进行旋转浓缩至20 mL左右，得到高浓度提取液。由于多糖不溶于乙醇，故而可向提取液中加入79%的乙醇使提取液中的多糖沉淀，桑黄浓缩液与乙醇体积比为1:5。静置12 h，使沉淀完全，再将醇沉后溶液进行离心，取沉淀，最后将沉淀冷冻干燥，得到桑黄多糖提取物，红外谱图如图1所示，其他提取方法如下表1所示。

表1

（2）金银花纯露的制备：

将新鲜的3 kg金银花枝叶剪段放至蒸馏瓶中，按照料液比为1:2添加6 kg去离子水，设置蒸馏温度为120℃，待水沸腾开始产生水蒸气则开启冷凝装置，设置加热温度为100℃，3 h后，将蒸馏出的芳香物在收集装置进行冷却、静置，收集下层的液体则为金银花纯露。

（3）成品的制备：

按照质量比重加入下列物质。将浓度为10%的明胶2份加入步骤（2）所制备的金银花纯露20份，50℃下制备明胶水溶液作为A相备用。步骤（1）制备的7份桑黄多糖加入A相中，随后加入保湿剂乙酰化透明质酸钠3份，营养剂维生素C 2份，搅拌均匀。直至产品冷却至室温，凝固成为成品试样。

<测试实验>

（1）抗菌性能实验

将160 μL水凝胶预聚液平铺到一个48孔板中，进行蓝光光照30 min，形成水凝胶支架。再配制10⁵ CFU/L的金黄色葡萄球菌菌悬液。将70 μL菌悬液涂布到M-H平板上，再将水凝胶支架平铺到M-H平板上，在恒温37℃环境中培养1 d，对平板上的抑菌圈进行观察并测量。如表所示，试样对于金黄色葡萄球菌的抑制作用较好，如表2所示。

表2

（2）水凝胶性能测试实验（溶胀比实验）

将试样浸没到磷酸盐缓冲溶液中，在恒温37℃环境下放置2 d。再取出，吸干材料表面多余的磷酸盐缓冲溶液，称重记录，记为V₁。之后，再将试样干燥，称重记录，记为V₂。然后计算水凝胶溶胀比，公式为：

实验结果参见图2，结果表明试样水凝胶溶胀比较好。

（3）创面愈合情况

创面愈合情况：根据患者面部皮肤缺损修补治疗手术中的创面愈合治疗和时间等，对创面愈合情况进行评价，具体分为优、良、差３个等级。并以此计算创面愈合优良率。创面瘢痕增生情况：根据温哥华瘢痕量表，对各组患者术后一定时间的创面瘢痕增生情况进行VSS评价。该评价采用Linker六级评分，即0~5分。VSS评分越高，则代表患者术后一定时间的创面瘢痕增生情况越严重。患者满意度情况：采用调查问卷的方式，对面部皮肤缺损修补治疗手术术后6个月的患者进行满意度访问。该评价总分设定为10分，其中，低于6分为不满意；6~7分表示满意；8~10分表示非常满意。以此计算患者满意度。本研究中各数据均使用SPSS 25.0软件进行处理，其中，“P<0.05”表示各组数据差异存在统计学意义。选取进行面部皮肤缺损修补治疗的患者92例。并进行随机分组,对照组和试验组的面部皮肤缺损修补治疗患者例数均为46例。患者纳入标准为:(1)知晓且自愿同意参与本研究;(2)患者年龄在18~60岁;(3)在面部受伤6h内接受面部手术治疗;(4)患者均为面部皮肤缺损。患者排除标准为:(1)曾接受过同类手术治疗;(2)患者有精神类疾病或感染类疾病;(3)患者的心、肝、肾功能严重异常。在面部皮肤缺损修补治疗中,对照组的各患者均通过普通皮瓣修复术治疗,试验组的各患者则均通过水凝胶敷料进行治疗。各组患者换药日期、包扎固定方式等均无差异。

实验结果参见下表3，试样水凝胶的创面愈合情况较好。

表3

（4）皮肤刺激性情况

使用0.5 mL水凝胶溶液进行试验，根据《消毒技术规范》（2002年版）中多次完整皮肤刺激试验方法进行。在试验前24 h，将豚鼠背部脊柱两侧的毛去掉，不得损伤皮肤。去毛范围，左、右各约3 cm×3 cm。试验时，将水凝胶溶液0.5 mL直接滴于面积为2.5 cm×2.5cm的2层~4层纱布上并敷贴在左侧去毛皮肤表面，然后用一层无刺激塑料膜覆盖，再用无刺激胶布固定。右侧涂0.5 mL 0.9%氯化钠注射液作对照，在涂抹后4 h，用温水清洗，除去残留物。每天涂抹一次，连续涂抹14 d，每次涂抹受试物4 h，用水或无刺激的适宜溶剂清洗残留受试物，在涂抹受试物24 h观察动物皮肤的红斑和水肿情况，根据皮肤刺激反应的评分标准进行评分，发现该水凝胶对豚鼠的多次完整皮肤刺激强度属无刺激性，符合《消毒技术规范》（2002年版）的要求。

实验结果如下表4所示，样品几乎无刺激性。

表4

上述实施案例只为说明本发明的技术方案及特点，其目的在于更好的让熟悉该技术的人士予以实施，并不能以此限制本发明的保护范围，凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰，均在本发明保护范围之内，其中未详细说明的为现有技术。

Claims (7)

1.一种具有抑菌修护作用的水凝胶敷料，其特征在于，包括以下重量份的各组分：

金银花纯露 18-22份

桑黄多糖提取物 6-8份

明胶 1-3份

保湿剂 2-4份

营养剂 1-3份;

所述水凝胶敷料的制备方法，包括以下步骤：

S1、称取明胶粉末置于容器中，并向其中加入金银花纯露，持续搅拌，使明胶完全溶解得到凝胶水溶液；

S2、将桑黄多糖溶液、保湿剂、营养剂加入凝胶水溶液中继续搅拌均匀，冷却至室温，即可形成所需水凝胶敷料;

凝胶水溶液中明胶质量浓度为10%~20%，搅拌温度为40~50℃。

2.根据权利要求1所述的一种具有抑菌修护作用的水凝胶敷料，其特征在于，桑黄多糖提取物通过超声协同纤维素酶法从桑黄粉中提取，提取率为2%~5%。

3.根据权利要求2所述的一种具有抑菌修护作用的水凝胶敷料，其特征在于，桑黄多糖提取物的制备方法包括以下步骤:

脱脂处理：桑黄粉与90%乙醇按料液比1:20~1:30混合，80~85℃回流2~3 h；

酶解超声：脱脂桑黄粉按固液比1:20~1:30加水，加入0.5~1.0 g生物酶，40~55℃酶解90 min，80~100℃灭酶5~10 min，再经300~360 w超声0.5~2 h；

纯化：酶解液与79%乙醇按体积比1:5混合沉淀10~12 h，离心干燥得桑黄多糖提取物。

4.根据权利要求3所述的一种具有抑菌修护作用的水凝胶敷料，其特征在于，酶解超声步骤中，脱脂桑黄粉加水配置成固液比为1:20~1:30的水溶液，酶解采用的生物酶为纤维素酶、木瓜蛋白酶、果胶酶、淀粉酶中的至少一种。

5.根据权利要求1所述的一种具有抑菌修护作用的水凝胶敷料，其特征在于，保湿剂选自乙酰化透明质酸钠、甘油、聚谷氨酸钠中的至少一种。

6.根据权利要求1所述的一种具有抑菌修护作用的水凝胶敷料，其特征在于，营养剂选自维生素C、泛醇、烟酰胺中的至少一种。

7.根据权利要求1所述的一种具有抑菌修护作用的水凝胶敷料，其特征在于，金银花纯露制备方法为：金银花枝叶按料液比1:2加水，120℃蒸馏3 h，收集下层冷凝液即可得到金银花纯露。