CN120000694A - 一种用于缓解呼吸道不适的组合物及其应用和产品 - Google Patents

Abstract

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种用于缓解呼吸道不适的组合物及其应用和产品。本发明提供了一种用于缓解呼吸道不适的组合物，由益生元和复合益生菌组合物组成；所述的益生元为低聚果糖和聚葡萄糖；所述的复合益生菌组合物为长双歧杆菌长亚种BB536、短双歧杆菌M‑16V和长双歧杆菌婴儿亚种M63。本发明提供的组合物能够缓解气道炎症、调节机体微生态平衡、调节免疫、显著下调IgE，有明显的抗炎抗过敏作用。该组合物能有效治疗感染性或过敏性呼吸道疾病，缓解咳嗽并下调促炎因子含量，减轻炎症。本发明能够有效改善鼻敏感症状，缓解鼻敏感复发频率。本发明的组合物在缓解呼吸道不适方面具备良好的应用前景。

Description

一种用于缓解呼吸道不适的组合物及其应用和产品

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种用于缓解呼吸道不适的组合物及其应用和产品。

背景技术

呼吸道是人体进行气体交换的通道，它从鼻腔开始，一直延伸到肺部。主要包括鼻腔、咽、喉、气管、支气管等部分。呼吸道不适是一种较为宽泛的健康问题，涵盖了多种症状及引发原因。

就症状而言，咳嗽较为常见，通常是由于呼吸道受到灰尘、烟雾、病原体等刺激，人体通过咳嗽反射来清除异物与过多分泌物。咳痰也是症状之一，多因呼吸道炎症致使黏膜分泌物增多所致。气喘和呼吸急促同样频繁发生，往往是支气管痉挛或呼吸道狭窄等情况造成的。此外，咽喉疼痛和干痒也属于呼吸道不适的表现，可能是感染或环境干燥等因素引发。

从引发原因来看，分为感染诱发的呼吸道不适和过敏诱发的呼吸道不适。感染诱发的呼吸道不适占据重要地位，主要是由各种病原体如病毒、细菌、支原体、衣原体等侵入呼吸道后大量繁殖所导致的。这些病原体可以通过空气飞沫、直接接触或间接接触等途径传播。例如，流感病毒主要通过患者咳嗽、打喷嚏时产生的飞沫传播，当健康人吸入这些带有病毒的飞沫后，病毒就会在呼吸道黏膜上黏附、侵入细胞并进行复制，引发炎症反应。

过敏诱发的呼吸道不适是因为个体具有过敏体质，当接触到特定的过敏原时，免疫系统会产生异常的免疫反应。常见的过敏原包括花粉、尘螨、动物毛发和皮屑、霉菌等。以花粉过敏为例，当花粉进入鼻腔或呼吸道后，身体的免疫系统会错误地将其识别为有害的外来物质，促使免疫细胞释放如组胺等化学物质，从而导致呼吸道的过敏症状。再者，空气污染、刺激性气体以及过度用嗓等情况，同样会造成呼吸道出现不适症状。

在缓解呼吸道不适领域，传统的应对方式侧重于药物干预以对抗致病微生物、缓解症状，但随着科研探索的持续深入，借助益生菌的独特功效，开发含益生菌的组合物用于呼吸道疾病的预防与治疗已然成为当下的研究热点。部分益生菌能够强化免疫防病原体入侵、调节失衡免疫助康复、抑制病原体黏附，减感染危害；同时能够调节免疫降过敏敏感性、修复黏膜屏障过敏原、减轻炎症与气道高反应控哮喘。专利CN115948275B提供了一株植物乳植杆菌及其在预防和治疗呼吸道疾病中的应用。该菌株的活菌和发酵上清液都具有抑制呼吸道主要致病菌肺炎链球菌的生长、杀灭呼吸道致病微生物的用途，对于预防和治疗由细菌感染导致的呼吸道不适具有非常重要的应用价值。

目前，益生菌在缓解呼吸道不适的研究已经初见成效，将益生元与益生菌相结合，开发一种含有益生菌的组合物，对缓解呼吸道不适具有重要的应用前景。

发明内容

针对上述不足，本发明提供了一种用于缓解呼吸道不适的组合物及其应用和产品。本发明提供了一种用于缓解呼吸道不适的组合物，由益生元和复合益生菌组合物组成；所述的益生元为低聚果糖和聚葡萄糖；所述的复合益生菌组合物为长双歧杆菌长亚种BB536、短双歧杆菌M-16V和长双歧杆菌婴儿亚种M63。本发明提供的组合物能够缓解气道炎症、调节机体微生态平衡、调节免疫、显著下调IgE，有明显的抗炎抗过敏作用。该组合物能有效治疗感染性或过敏性呼吸道疾病，缓解咳嗽并下调促炎因子含量，减轻炎症。本发明能够有效改善鼻敏感症状，缓解鼻敏感复发频率。本发明的组合物在缓解呼吸道不适方面具备良好的应用前景。

本发明的技术方案包括：

第一方面，本发明提供了一种用于呼吸道疾病的组合物，所述的组合物由益生元和复合益生菌组合物组成；

所述的益生元为低聚果糖和聚葡萄糖；所述的复合益生菌组合物为长双歧杆菌长亚种BB536(Bifidobacteriumlongumsubsp.longum BB536)、短双歧杆菌M-16V(BifidobacteriumbreveM-16V)和长双歧杆菌婴儿亚种M63(Bifidobacteriumlongumsubsp.infantisM63)。

具体地，所述的复合益生菌组合物中长双歧杆菌长亚种BB536、短双歧杆菌M-16V和长双歧杆菌婴儿亚种M63的活菌数比例为1-3：2-3：0.5-1.5。

优选地，所述的的复合益生菌组合物中长双歧杆菌长亚种BB536、短双歧杆菌M-16V和长双歧杆菌婴儿亚种M63的活菌数比例为2：2.4：1。

具体地，所述的组合物按重量份计包括15-50份低聚果糖、15-50份聚葡萄糖和2-5份复合益生菌组合物。

优选地，所述的组合物按重量份计包括17-50份低聚果糖、15-42份聚葡萄糖和2-5份复合益生菌组合物。

具体地，所述的组合物中含有至少1×10⁶CFU/g的复合益生菌组合物。

优选地，所述的组合物中含有1×10⁶-1×10¹²CFU/g的复合益生菌组合物。

进一步优选地，所述的组合物中含有1×10⁸-1×10¹⁰CFU/g的复合益生菌组合物。

第二方面，本发明提供了上述的组合物在制备预防、辅助治疗或治疗呼吸道疾病的药物中的应用。

具体地，所述的呼吸道疾病包括：感染性呼吸道疾病或过敏性呼吸道疾病。

优选地，所述的感染性呼吸道疾病包括：急慢性鼻炎、喉炎、咽炎、急慢性气管炎、急慢性肺炎或支气管炎。

优选地，所述的过敏性呼吸道疾病包括：花粉症、变应性鼻炎、过敏性咳嗽、过敏性哮喘或过敏性鼻炎。

第三方面，本发明提供了一种药物，所述的药物包括上述的组合物。

具体地，所述的药物的剂型包括经胃肠道给药剂型或未经胃肠道给药剂型。

优选地，所述的经胃肠道给药剂型包括但不限于片剂、散剂、颗粒剂、溶液剂、胶囊剂、乳剂、混悬剂、油剂。

优选地，所述的非经胃肠道给药剂型包括但不限于注射给药剂型、呼吸道给药剂型、皮肤给药剂型、粘膜给药剂型和腔道给药剂型。

具体地，所述的药物中的组合物为药物的唯一或主要活性成分。

具体地，所述的药物还包括药学上可接受的辅料。

优选地，所述的药学上可接受的辅料包括但不限于：溶剂、稀释剂、崩解剂、沉淀抑制剂、表面活性剂、助流剂、粘合剂、润滑剂、分散剂、助悬剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、防腐剂、稳定剂、水合剂、乳化加速剂、缓冲剂、吸收剂、着色剂、香味剂、甜味剂、离子交换剂、脱模剂、涂布剂、矫味剂或抗氧化剂。

第四方面，本发明提供了一种益生菌食品，所述的益生菌食品包括上述的组合物。

优选地，所述的益生菌食品的剂型包括液体剂型、固体剂型或半固体剂型。

具体地，所述的益生菌食品还包括食品学上可接受的营养物质。

优选地，所述的益生菌食品学上可接受的营养物质包括膳食纤维、蛋白质、脂类物质、矿物质、维生素中的一种或多种。

优选地，所述的益生菌食品包括但不限于：糖果、豆奶、酸奶、罐头、饼干、巧克力、糕点、奶油、干酪、乳酪、乳粉、冰激凌、雪糕、果酱、果泥、蜜饯、凉果、果脯、面包、蛋卷、蛋白饮料、固体饮料、乳酸菌饮料、植物蛋白饮料、碳酸饮料、咖啡或膨化食品。

第五方面，本发明提供了一种保健品，所述的保健品包括上述的组合物。

优选地，所述的营养物质包括膳食纤维、蛋白质、脂类物质、矿物质、维生素中的一种或多种。

优选地，所述的保健品的剂型包括片剂、胶囊、颗粒剂、丸剂、凝胶糖果、粉剂、口服液或滴剂。

第七方面，本发明提供了上述药物、食品或保健品应用，所述的应用包括向受试者给予有效量的保健品、食品或药品。

具体地，所述的受试者为哺乳动物。

优选地，所述的受试者为人。

本发明的有益效果为：

本发明提供了一种用于缓解呼吸道不适的组合物，所述的组合物由益生元和复合益生菌组合物组成；所述的益生元为低聚果糖和聚葡萄糖；所述的复合益生菌组合物为长双歧杆菌长亚种BB536、短双歧杆菌M-16V和长双歧杆菌婴儿亚种M63。本发明提供的组合物合物能够缓解气道炎症、能够调节机体微生态平衡、调节免疫、显著下调IgE，有明显的抗炎抗过敏作用。该组合物能有效治疗感染性呼吸道疾病，缓解咳嗽并下调促炎因子含量，减轻炎症。本发明能够有效改善鼻敏感症状，缓解鼻敏感复发频率。本发明的组合物在缓解呼吸道不适方面具备良好的应用前景。

附图说明

图1为肺泡灌洗液炎症因子表达水平；图中的A为TNF-α表达水平；B为IL-1β表达水平；*代表具有显著性差异p＜0.05；**代表具有显著性差异p＜0.01；***代表具有显著性差异p＜0.001。

图2为血清总IgE水平；图中*代表具有显著性差异p＜0.05；**代表具有显著性差异p＜0.01；***代表具有显著性差异p＜0.001。

图3为血清中IL-6、IL-8表达水平；图中的A为IL-6表达水平；B为IL-8表达水平；*代表具有显著性差异p＜0.05；**代表具有显著性差异p＜0.01；***代表具有显著性差异p＜0.001。

具体实施方式

下面结合具体实施例，对本发明作进一步详细的阐述，下述实施例不用于限制本发明，仅用于说明本发明。以下实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，下述实施例中所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。本发明所用的菌株均选自可用于婴幼儿食品的菌种名单。

基础实施例1菌株的活化与培养

1、MRS培养基的制备

蛋白胨10g/L、牛肉粉5g/L、酵母粉4g/L、葡萄糖20g/L、Tween801mL/L、磷酸氢二钾2.0g/L、乙酸钠5.0g/L、柠檬酸三铵2.0g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.05g/L、琼脂粉15g/L溶于去离子水中，121℃灭菌15min-20min。

2、菌株的活化

1)将长双歧杆菌长亚种BB536接种于MRS液体培养基中活化，在37℃条件下培养48h进行活化，得到长双歧杆菌长亚种BB536活化液。

2)将短双歧杆菌M-16V接种于MRS液体培养基中活化，在37℃条件下培养48h进行活化，得到短双歧杆菌M-16V活化液。

3)将长双歧杆菌婴儿亚种M63接种于MRS液体培养基中活化，在37℃条件下培养48h进行活化，得到长双歧杆菌婴儿亚种M63活化液。

3、菌株的培养

1)将长双歧杆菌长亚种BB536活化液按5％(v/v)的接种量接种于MRS液体培养基中，37℃下培养24h，得到菌液。将菌液在4℃，3000rpm下离心10min后，用PBS洗涤菌体沉淀两次后，将洗涤后的菌体沉淀使用PBS调整至细胞浓度为10⁹CFU/mL的长双歧杆菌长亚种BB536菌悬液。

2)将短双歧杆菌M-16V活化液按5％(v/v)的接种量接种于MRS液体培养基中，37℃下培养24h，得到菌液。将菌液在4℃，3000rpm下离心10min后，用PBS洗涤菌体沉淀两次后，将洗涤后的菌体沉淀使用PBS调整至细胞浓度为10⁹CFU/mL的短双歧杆菌M-16V菌悬液。

3)将长双歧杆菌婴儿亚种M63活化液按5％(v/v)的接种量接种于MRS液体培养基中，37℃下培养24h，得到菌液。将菌液在4℃，3000rpm下离心10min后，用PBS洗涤菌体沉淀两次后，将洗涤后的菌体沉淀使用PBS调整至细胞浓度为10⁹CFU/mL的长双歧杆菌婴儿亚种M63菌悬液。

实施例1组合物的制备

实施例1的组合物按重量份计由42份低聚果糖、17份聚葡萄糖和5份复合益生菌组合物组成。制备方法如下：

(1)将长双歧杆菌长亚种BB536菌悬液、短双歧杆菌M-16V菌悬液和长双歧杆菌婴儿亚种M63菌悬液按照2：2.4：1的活菌数比例混合，冷冻干燥后获得复合益生菌组合物。

(2)将42份低聚果糖、17份聚葡萄糖、5份复合益生菌组合物混合均匀，即为组合物。

实施例2组合物的制备

实施例2的组合物按重量份计由17份低聚果糖、42份聚葡萄糖和5份复合益生菌组合物组成。制备方法如下：

(1)将长双歧杆菌长亚种BB536菌悬液、短双歧杆菌M-16V菌悬液和长双歧杆菌婴儿亚种M63菌悬液按照3：3：1.5的活菌数比例混合，冷冻干燥后获得复合益生菌组合物。

(2)将17份低聚果糖、42份聚葡萄糖、5份复合益生菌组合物混合均匀，即为组合物。

实施例3组合物的制备

实施例3的组合物按重量份计由50份低聚果糖、15份聚葡萄糖和2份复合益生菌组合物组成。制备方法如下：

(1)将长双歧杆菌长亚种BB536菌悬液、短双歧杆菌M-16V菌悬液和长双歧杆菌婴儿亚种M63菌悬液按照1：2：0.5的活菌数比例混合，冷冻干燥后获得复合益生菌组合物。

(2)将50份低聚果糖、15份聚葡萄糖、2份复合益生菌组合物混合均匀，即为组合物。

对比例1组合物的制备

对比例1的组合物按重量份计由42份低聚果糖和5份复合益生菌组合物组成。制备方法如下：

(1)将长双歧杆菌长亚种BB536菌悬液、短双歧杆菌M-16V菌悬液和长双歧杆菌婴儿亚种M63菌悬液按照2：2.4：1的活菌数比例混合，冷冻干燥后获得复合益生菌组合物。

(2)将42份低聚果糖、5份复合益生菌组合物混合均匀，即为组合物。

对比例2组合物的制备

对比例2的组合物按重量份计由17份聚葡萄糖和5份复合益生菌组合物组成。制备方法如下：

(1)将长双歧杆菌长亚种BB536菌悬液、短双歧杆菌M-16V菌悬液和长双歧杆菌婴儿亚种M63菌悬液按照2：2.4：1的活菌数比例混合，冷冻干燥后获得复合益生菌组合物。

(2)将17份聚葡萄糖、5份复合益生菌组合物混合均匀，即为组合物。

对比例3组合物的制备

对比例3的组合物按重量份计由42份低聚果糖、17份聚葡萄糖和5份复合益生菌组合物组成。制备方法如下：

(1)将长双歧杆菌长亚种BB536菌悬液和长双歧杆菌婴儿亚种M63菌悬液按照2：3.4的活菌数比例混合，冷冻干燥后获得复合益生菌组合物。

(2)将42份低聚果糖、17份聚葡萄糖、5份复合益生菌组合物混合均匀，即为组合物。

对比例4组合物的制备

对比例4的组合物按重量份计由42份低聚果糖、17份聚葡萄糖和5份复合益生菌组合物组成。制备方法如下：

(1)将长双歧杆菌长亚种BB536菌悬液和短双歧杆菌M-16V菌悬液按照2：3.4的活菌数比例混合，冷冻干燥后获得复合益生菌组合物。

(2)将42份低聚果糖、17份聚葡萄糖、5份复合益生菌组合物混合均匀，即为组合物。

对比例5复合益生菌组合物的制备

对比例5的复合益生菌组合物的制备方法如下：

将长双歧杆菌长亚种BB536菌悬液、短双歧杆菌M-16V菌悬液和长双歧杆菌婴儿亚种M63菌悬液按照2：2.4：1的活菌数比例混合，冷冻干燥后获得复合益生菌组合物。

实验例1组合物对MH-S小鼠肺泡巨噬细胞的抗炎作用

MH-S小鼠肺泡巨噬细胞购买自武汉普诺赛，货号为CL-0597。用含10％胎牛血清的RPMI1640培养基(含100U/ml青霉素和0.1mg/ml链霉素)。5％CO₂，37℃恒温培养箱中培养。待细胞融合度达到80％时进行传代，取对数生长期的细胞用于后续实验。

MH-S细胞调节细胞浓度为1×10⁵个/mL，按照每孔1mL接种至12孔板中，37℃，5％CO₂培养24h，待细胞贴壁生长后，随机分为对照组、LPS组、实施例1组-实施例3组、对比例1组-对比例5组。除对照组外，各组加入100ng/mL的脂多糖(LPS)诱导构建MH-S细胞炎症模型。实施例1-实施例3组、对比例1组-对比例5组分别加入1mL实施例1-3或对比例1-4制备得到的组合物(100μg/mL)或对比例5制备得到的复合益生菌组合物(100μg/mL)，对照组和LPS组加入等量RPMI1640培养基，培养24h后，3000rpm离心10min，收集上清液，使用ELISA试剂盒测定TNF-α表达水平。

测定结果如表1所示：

表1组合物对MH-S小鼠肺泡巨噬细胞的抗炎作用

注：表中的小写字母a-g代表组之间具有显著差异(p＜0.05)。

从表2中可以看出，LPS组的MH-S细胞TNF-α的表达水平显著高于对照组，表明LPS诱导的炎症细胞模型建立成功。实施例1-实施例3制备得到的组合物降TNF-α的效果更佳，能将TNF-α表达水平降低至150pg/mL以下。对比例1组和对比例2组的组合物分别省略低聚果糖或聚葡萄糖虽然具有较好的抗炎效果，但效果均不如实施例1-3组合物好。对比例5不添加益生元低聚果糖和聚葡萄糖，抗炎效果下降更加明显。对比例3省略了短双歧杆菌M-16V菌悬液抗炎效果降低最多。对比例4显示，省略了长双歧杆菌婴儿亚种M63，其抑制炎症因子表达能力变差。

实验例2组合物对过敏性呼吸道疾病的影响

过敏性哮喘(bronchial asthma，哮喘)是由多种细胞特别是肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞参与的慢性气道炎症，是由IgE介导的适应性免疫应答引起的。OVA致哮喘小鼠模型常用于过敏性哮喘模型构建。本实验例采用6-8周龄雌性SPF级BALB/c小鼠，进行试验。

1、致敏剂与激发剂配制：

将OVA溶于PBS中配制成浓度为1mg/mL的OVA溶液，加入等体积氢氧化铝佐剂，得到含有终浓度为0.5mg/mL OVA、10mg/mL氢氧化铝的致敏剂。

将OVA溶于PBS中配制成浓度为1％的OVA溶液，即为激发剂。

2、分组与给药

BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、实施例1组-实施例3组、对比例5组共6组，每组5只。除对照组外，其余各组分别于第0、7天腹腔注射200μL致敏剂(含100μg OVA和2mg氢氧化铝)，对照组腹腔注射等体积生理盐水。除对照组外，其余各组于第14天，使用激发剂进行雾化激发，每天1次，连续激发一周，对照组小鼠雾化吸入等体积生理盐水。每次雾化激发1h前，各组小鼠进行灌胃给药。实施例1组-实施例3组、对比例5组分别灌胃给予500mg/kg组合物或复合益生菌组合物(组合物或复合益生菌组合物均用生理盐水配制成溶液)，对照组和模型组给予等体积生理盐水。

3、肺泡灌洗液炎症因子水平测定

末次激发24h后，处死各组小鼠，使用PBS冲洗小鼠肺部得到肺泡灌洗液，采用ELISA试剂盒(上海信裕生物科技有限公司)检测各组小鼠肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β的含量。

测定结果如图1所示，模型组小鼠肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β的含量与对照组相比明显增加(p＜0.001)，表明OVA致哮喘小鼠模型构建成功。实施例1-3组制备得到的组合物能够显著降低OVA致哮喘小鼠肺泡灌洗液中的TNF-α和IL-1β含量(p＜0.001)，表明本发明的提供的组合物能够缓解气道炎症。其中，实施例1制备得到的组合物能够将IL-1β降低至正常水平，与对照组小鼠相比无显著性差异(p＞0.05)。

4、血清总IgE水平

小鼠摘眼取血，使用ELISA试剂盒(碧云天)测定小鼠血清中总IgE水平。

测定结果如图2所示，对照组小鼠的IgE水平较低，为5.24±0.4ng/mL，模型组小鼠血清总IgE水平明显增加，达到79.51±5.12ng/mL。实施例1-3组和对比例5组的IgE水平较模型组均有下降，但与正常水平还有一定差距，其中实施例1组的IgE水平下降最明显。以上结果表明，本发明实施例1-3制备得到的组合物能够调节机体微生态平衡、调节免疫，能够显著下调IgE，有明显的抗过敏的作用。

实验例3组合物对感染性呼吸道疾病的影响

1、分组与给药

本实验例采用6-8周龄雌性SPF级BALB/c小鼠，进行试验。

BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组、实施例1-实施例3组，共6组，每组5只。除对照组外，其余各组小鼠鼻滴入20μL10⁶肺炎支原体，每天一次，持续5天。造模完成后，阳性对照组灌胃给予氨溴特罗(1.5mL/kg)、实施例1-实施例3组组分别灌胃给予实施例1-3制备得到的组合物(用生理盐水配制成溶液，500mg/kg)，每天给药1次，连续给药6天，对照组和模型组灌胃给予等体积生理盐水。

2、血清炎症因子水平测定

小鼠摘眼取血，使用ELISA试剂盒(上海信裕生物科技有限公司)测定小鼠血清中IL-6、IL-8表达水平。

图3为小鼠血清中IL-6、IL-8表达水平，模型组小鼠血清中IL-6、IL-8的含量与对照组相比明显增加(p＜0.001)。阳性对照组、实施例1-3组IL-6、IL-8水平较模型组均有明显下降(p＜0.001)。本发明组合物与阳性对照药物相比无显著性差异。

以上结果表明，本发明提供的组合物能够有效缓解支原体肺炎引起的咳嗽，并下调血清中促炎因子含量，达到减轻炎症的效果。

实验例4人群体感实验

1、受试者选择与检测方法

选择6个月-14岁(不含)，自诉最近2周内出现过鼻敏感症状(鼻敏感主要症状包括鼻痒、喷嚏、流鼻水、鼻塞)困扰，没有针对鼻敏感症状接受过手术治疗的50名受试者，每位受试者连续留置使用测试产品12周。以定量问卷的方式进行产品效果反馈，问卷内容包括受试者未使用测试产品前、使用7天后、使用1个月后、使用2个月后、使用3个月后的儿童鼻敏感症状。本次测试为消费者留置测试，检测环境为受试者日常生活环境。

2、检测指标

检测指标包括鼻敏感症状改善情况(0-10分：0分表示完全没有改善，10分表示非常大的改善)、分症状困扰程度(0-10分：0分表示完全没有困扰，10分表示非常困扰)和鼻敏感复发频率的变化。

描述性统计：百分比/平均值

差异性统计：百分比使用T检验进行显著性检验；平均值使用重复测量方差分析进行显著性检验；p＜0.05：在95％的置信水平下，数据存在显著差异；p＜0.1：在90％的置信水平下，数据存在显著差异。

3、检测流程

实施例1制备得到的组合物2g/L用37℃温水冲泡服用，每天食用1包，共使用3个月，于使用产品后的第7天、一个月、两个月、三个月后，对产品进行评价。

4、检测结果

4.1鼻敏感症状改善情况：

鼻敏感症状改善情况结果如表2所示：

表2鼻敏感症状改善情况

改善情况	使用7天	使用1个月	使用2个月	使用3个月
					有改善(1-10分)	76％	100％	100％	100％
显著改善(8-10分)	8％	30％	46％	72％
					明显改善(5-7分)	26％	42％	50％	26％
有点改善(1-4分)	42％	28％	4％	2％
					完全没有改善(0分)	24％	-	-	-
评分(分)	3.26	6.3	7.06	8.22
					评分变化％	-	93.25％	116.56％	152.15％

注：表中评分值越大，表示改善程度越大；评分变化％＝(使用后评分-使用前评分)/使用前评分×100％；其中使用后评分为使用1个月、使用2个月或使用3个月的评分；使用前评分为使用7天的评分。

4.2分症状困扰程度：

分症状困扰程度结果如表3-表4所示：

表3鼻敏感症状人数改善情况

表4鼻敏感症状评分改善情况

注：表中评分值越大，表示鼻敏感症状困扰程度越大；评分变化％＝(使用后评分-使用前评分)/使用前评分×100％；其中使用后评分为使用7天、使用1个月、使用2个月或使用3个月的评分；使用前评分为使用前的评分。

4.3鼻敏感复发频率的变化：

鼻敏感复发频率结果如表5所示：

表5鼻敏感复发频率结果

	使用1个月(％)	使用2个月(％)	使用3个月(％)
				明显减少+有所减少	82	90	94
明显减少	20	44	52
				有所减少	62	46	42
没什么变化	12	8	4
				有所增加	6	2	2
明显增加	-	-	-

5、结果讨论

以上测定结果显示，使用本发明组合物7天后，76％(38/50)的受试者认可鼻敏感症状有改善，其中66％鼻塞的受试者认可症状有改善；74％的受试者认可症状有改善；62％打喷嚏的受试者认可症状有改善；70％流鼻涕的受试者认可症状有改善。

使用本发明组合物1个月后，鼻敏感症状改善明显，100％的受试者认可鼻敏感症状有改善；鼻塞评分平均值从7.66分降低至5.16，降低了31.33％；鼻痒评分平均值从6.38降低至3.62，降低了43.26％；打喷嚏评分平均值从5.82降低至4.25，降低了26.98；流鼻涕评分平均值从6.32降低至4.42，降低了30.06％。鼻敏感复发频率明显减少人数为44％，有所减少人数为46％。

使用本发明组合3个月后，所有受试者鼻敏感症状均有改善，其中显著改善(8-10分)受试者占72％，明显改善(5-7分)受试者占26％。鼻塞评分平均值降低了45.95％；鼻痒评分平均值降低了52.66％；打喷嚏评分平均值降低了46.39％；流鼻涕评分平均值降低了51.58％。鼻敏感复发频率明显减少+有所减少人数为94％。

上述详细说明是针对本发明其中之一可行实施例的具体说明，该实施例并非用以限制本发明的专利范围。应当指出的是，凡未脱离本发明所为的等效实施或变更，均应包含于本发明技术方案的范围内。因此，本发明专利的保护范围应以所附要求为准。

Claims (18)

1.一种用于缓解呼吸道不适的组合物，其特征在于，所述的组合物由益生元和复合益生菌组合物组成；

所述的益生元为低聚果糖和聚葡萄糖；所述的复合益生菌组合物为长双歧杆菌长亚种BB536(Bifidobacteriumlongumsubsp.longum BB536)、短双歧杆菌M-16V(BifidobacteriumbreveM-16V)和长双歧杆菌婴儿亚种M63(Bifidobacteriumlongumsubsp.infantisM63)。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的复合益生菌组合物中长双歧杆菌长亚种BB536、短双歧杆菌M-16V和长双歧杆菌婴儿亚种M63的活菌数比例为1-3：2-3：0.5-1.5。

3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的组合物按重量份计包括15-50份低聚果糖、15-50份聚葡萄糖、2-5份复合益生菌组合物。

4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的组合物中含有至少1×10⁶CFU/g的复合益生菌组合物。

5.一种益生菌食品，其特征在于，所述的益生菌食品包括权利要求1-4任一项所述的组合物。

6.根据权利要求5所述的益生菌食品，其特征在于，所述的益生菌食品的剂型包括液体剂型、固体剂型或半固体剂型。

7.根据权利要求5所述的益生菌食品，其特征在于，所述的益生菌食品还包括食品学上可接受的营养物质。

8.根据权利要求7所述的益生菌食品，其特征在于，所述的食品学上可接受的营养物质包括膳食纤维、蛋白质、脂类物质、矿物质、维生素中的一种或多种。

9.一种保健品，其特征在于，所述的保健品包括权利要求1-4任一项所述的组合物。

10.根据权利要求9所述的保健品，其特征在于，所述的保健品中还包括营养学上可接受的营养物质。

11.根据权利要求10所述的保健品，其特征在于，所述的营养物质包括膳食纤维、蛋白质、脂类物质、矿物质、维生素中的一种或多种。

12.根据权利要求9所述的保健品，其特征在于，所述的保健品的剂型包括片剂、胶囊、颗粒剂、丸剂、凝胶糖果、粉剂、口服液或滴剂。

13.权利要求1-4任一项所述的组合物在制备预防、辅助治疗或治疗呼吸道疾病的药物中的应用。

14.根据权利要求13所述的应用，其特征在于，所述的呼吸道疾病包括：感染性呼吸道疾病或过敏性呼吸道疾病。

15.一种药物，其特征在于，所述的药物包括权利要求1-4任一项所述的组合物。

16.根据权利要求15所述的药物，其特征在于，所述的药物的剂型包括经胃肠道给药剂型或非经胃肠道给药剂型。

17.根据权利要求15所述的药物，其特征在于，所述的药物中的组合物为药物的唯一或主要活性成分。

18.根据权利要求15所述的药物，其特征在于，所述的药物还包括药学上可接受的辅料。