CN1269421C - 生产源于浆果的产物的方法和组合物 - Google Patents
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Abstract
描述了一种使用吸附树脂(15)从一种可食用浆果中分离花色素苷、生物类黄酮和酚类的混合物的方法,该吸附树脂是可以再生的。该含有可消费载体的混合物在食品中特别有用并且作为一种食物增补剂或营养产品。
Description
相互参照有关的申请
本申请要求于1999年5月24日递交的美国申请序号09/317,310以及1999年2月16日递交的临时申请序号60/120,178的优先权。
关于联邦政府资助研究或开发的声明
无
发明背景
(1)
发明概述
本发明涉及一种制备可食用的得自浆果,尤其得自樱桃的组合物的方法,并且涉及使用源于浆果的组合物作为植物性/营养性(phytoceutical/nutraceutical)食物增补剂或作为一种食品添加剂的方法。本发明尤其提供一种天然的浆果组合物,尤其是樱桃组合物,该组合物含有花色素苷、生物类黄酮和酚类的混合物,作为食物增补剂或作为食品添加剂。
(2)
有关技术的描述
许多源于植物的化合物,作为它们通过维持低水平的活性氧中间体而作为细胞抗氧化剂、通过抑制前列腺素的合成而作为抗炎剂或作为与细胞增殖有关的酶的抑制剂的能力,也可以赋予食物重要的、好的、药理学或“营养性”特性。这些活性在改善慢性疾病中可能是重要的,所述疾病包括癌症、关节炎和心血管疾病(Kinsella等,Food Tech.85-89(1993))。因此,就天然产品而言,食物增补剂/食品行业和营养品公司有机会使用这些化合物,所述化合物不仅能够象合成的抗氧化剂一样有效地提高食品的稳定性而且能够给消费者提供明显的健康益处。
一直将象花色素苷的着色剂看作酸樱桃的质量指标。最重要的是,最近的研究结果表明花色素苷如矢车菊色素-3-葡萄糖苷具有强的抗氧化活性(Tsuda,T.等,J.Agric.Food Chem.42:2407-2410(1994))。加入抗氧化剂是增加食物产品的贮存期限的常用方法之一,认为该食物产品的贮存期限与脂质过氧化有关。在预防癌发生中天然的抗氧化剂可以发挥重要的作用。食物抗氧化剂可以有效地对抗有生命体系中的过氧化损害(Halliwell,B.和J.M.C.Gutteridge,“生物学和医学中的自由基”,Oxford University Press,New York 416-494(1989);Osawa,T.等,“食物抗氧化剂在防御氧化损害中的作用。关于抗引起突变和抗癌发生的机理”;Kuroda,Y.;Shankel,D.M.,Waters,M.D.编著;Plenum Publishing.New York 139-153(1990))。
早期的研究已经表明MONTMORENCY樱桃含有花色素苷矢车菊色素-3-龙胆二糖苷和矢车菊色素-3-芸香糖苷(Li,K.C.等,J.Am.Chem.Soc.78:979-980(1956))。在七种酸樱桃品种中有六种也发现了矢车菊色素-3-葡萄糖基芸香糖苷(Harborne,J.B.等,Phytochemistry 3:453-463(1964))。Dekazos(Dekazos,E.D.,J.Food Sci.35:237-241(1970))报道在MONTMORENCY樱桃中的花色素苷色素为与矢车菊色素-3-槐糖苷、矢车菊色素-3-芸香糖苷及矢车菊色素-3-葡萄糖苷一起的芍药花青素-3-芸香糖苷、芍药花青素和矢车菊色素。可是,鉴定矢车菊色素-3-葡萄糖基芸香糖苷以及矢车菊色素-3-葡萄糖苷、矢车菊色素-3-槐糖苷及矢车菊色素-3-芸香糖苷为酸樱桃中的主要色素。用HPLC保留值,Chandra等(Chandra,A.等,J.Agric.Food Chem.40:967-969(1992))报道在密歇根洲种植的MONTMORENCY樱桃中矢车菊色素-3-槐糖苷及矢车菊色素-3-葡萄糖苷分别是主要的和次要的花色素苷。类似地,查明在MONTMORENCY樱桃中矢车菊色素-3-木糖基芸香糖苷是次要的色素(Shrikhande,A.J.和F.J.Francis,J.Food Sci.38:649-651(1973))。
在先有技术中,首先通过吸附所述色素在一根MBERLITEXAD-2(Sigma Chemicals)柱上实现从BALATON和MONTMORENCY樱桃汁中生产纯的花色素苷(图1化合物1-3)(Chardra,A.等,J.Agric.Food Chem.41:1062-1065(1993))。用水洗脱该柱直到洗脱液的pH接近7.0。用MeOH洗脱与其它酚类一起吸附的色素。分别用C-18MPLC和HPLC分离和纯化产生的粗花色素苷,以便提供光谱研究用的纯的花色素苷。纯化500mg来自AMBERLITE XAD-2的粗MONTMORENCY花色素苷产生60mg纯花色素苷1-3,相比之下来自BALATON为391.43mg。该研究指出源于MONTMORENCY、由XAD-2获得的粗花色素苷含有高百分比的其它有机化合物。AMBERLITE XAD-2不允许重复使用该树脂。从未因任何目的尝试使用所述酚类和花色素苷的粗混合物。美国专利号5,266,685(Garbutt)、5,665,783(Katzakian等)及5,817,354(Mozaffar)描述了各种吸附树脂及它们在分离无关产物时的用途。这些专利仅仅是在使用吸附树脂中现有技术一般水平的例证。
美国专利号5,503,867(Pleva)描述了碎肉中全磨碎的樱桃和燕麦糠的用途。所使用的樱桃的量为10到15%(重量)并且相信加入燕麦糠是为了抵偿樱桃中的果汁。无论如何,樱桃肯定使肉具有风味,然而该产品的可口性不能普遍被接受。
最近关于含有樱桃组织的低脂牛肉末的稳定性研究提示该植物源含有有效的抗氧化剂,其不仅抑制脂质的过氧化而且也抑制在油炸食物期间杂环芳香胺及胆甾醇氧化产物的形成(Gomaa等,IFTAbstracts No.68E-7(1996))。为了解释这些观察的结果而采用的假设是经常在高等植物如樱桃的液泡中发现的多酚如类黄酮、花色素苷和花色素产生所述的抗氧化作用。
需要尤其用作食物增补剂/营养或食品添加剂的得自天然可食用浆果的组合物。
发明概述
本发明涉及一种生产作为一种组合物的包含源于可食用浆果的花色素苷、生物类黄酮和酚类的混合物的方法,该方法包括:
(a)提供一种源于浆果的含有花色素苷、生物类黄酮和酚类的水溶液;
(b)将水溶液中的花色素苷、生物类黄酮和酚类转移到树脂表面;
(c)用洗脱剂洗脱树脂表面以便从树脂的表面移去花色素苷、生物类黄酮和酚类;以及
(d)将洗脱剂与花色素苷、生物类黄酮及酚类分开。
另外,本发明涉及一种由可食用浆果生产作为组合物的花色素苷、生物类黄酮和酚类的方法,该方法包括:
(a)提供第一批浆果,其中樱桃是新鲜的或速冻并解冻的;
(b)破坏浆果并使果肉与果汁分离;
(c)从果肉中将花色素苷、生物类黄酮及酚类提取到水溶液中;
(d)将含有从所述果肉分离的花色素苷、生物类黄酮及酚类的水溶液中的花色素苷、生物类黄酮及酚类转移到吸附树脂颗粒上;
(e)用低级链烷醇洗涤树脂颗粒以便从树脂颗粒上移去花色素苷、生物类黄酮及酚类;
(f)将链烷醇与花色素苷、生物类黄酮及酚类分开;并且
(g)第二批樱桃用分离后的链烷醇和已经移去了花色素苷、生物类黄酮及酚类的树脂颗粒重复步骤(a)至(e)。
另外,本发明涉及一种可消费的组合物,该组合物以混合物的形式包含:
(a)从可食用浆果中分离的花色素苷、生物类黄酮及酚类的干燥的混合物;和
(b)一种食品级的载体,其中(a)与(b)的重量比在约0.1比100和100比0.1之间。
最后,本发明涉及一种喂养哺乳动物的方法,该方法包括:
喂给哺乳动物一种可消费的组合物,该组合物以混合物的形式包含:
(a)从可食用浆果中分离的花色素苷、生物类黄酮及酚类的干燥混合物;和
(b)一种食品级的载体,其中(a)与(b)的重量比在约0.1比100和100比0.1之间。最好所述组合物至少部分含有该浆果的干燥果肉。
在本发明方法中,所述樱桃为个体速冻的。
在本发明方法中,所述树脂颗粒以柱的形式使用。
在本发明方法中,所述浆果选自红莓、树莓、草莓、蓝莓、黑莓、接骨木浆果、红葡萄、鹅莓、巴巴多斯樱桃和苦果。
在本发明方法中,将花色素苷、生物类黄酮和酚类与来自浆果的果肉混合,然后干燥。或者将花色素苷、生物类黄酮和酚类干燥,然后与来自浆果的干燥果肉混合。
另外,可将所述花色素苷、生物类黄酮、酚类与果肉的混合物制成片剂。或者将花色素苷、生物类黄酮和酚类与来自浆果的果肉混合,然后干燥并且将所述花色素苷、生物类黄酮、酚类与果肉的混合物制成片剂。
在本发明的一个实施方案中,将花色素苷、生物类黄酮和酚类干燥,然后与来自浆果的干燥果肉混合并将所述花色素苷、生物类黄酮、酚类与果肉的混合物制成片剂。
术语“花色素苷”意指在樱桃中产生颜色的化合物。
术语“生物黄酮类”意指樱桃中含有的异黄酮类和类黄酮化合物。
术语“酚类”涉及源于樱桃的、具有苯基并具有一个或多个羟基的化合物。
一些可食用浆果为红莓、树莓、草莓、蓝莓、黑莓、接骨木桨果、红葡萄、鹅莓、巴巴多斯樱桃(西印度樱桃)和苦果。
图4显示由酸樱桃分离的酚类。
图5显示如实施例1和2描述的本发明方法的步骤。
图6为示意图,该图显示装有树脂珠的敞口容器10的用途,其用于从樱桃果汁中移去花色素苷和酚类。
最佳实施方案的描述
在本发明中使用的樱桃可以是甜的或酸的樱桃,然而优选后一种,因为它们除了含有其它有机酸外还含有高水平的苹果酸,苹果酸产生酸樱桃的酸味。本发明的方法分离可用于食品以提供酸味和风味的苹果酸和含其它有机酸的糖。最优选的是BALATON和MONTMORENCY樱桃。
可以将花色素苷、生物类黄酮和酚类的分离混合物压片并用作一种天然的营养性/食物增补剂。通常,所述片剂提供约1到200mg的花色素苷和生物类黄酮的日剂量,优选60-100mg的日剂量。一百颗樱桃提供60到100mg的花色素苷。按照0.1到50mg的日剂量提供酚类(图4)。一百颗樱桃提供1-50mg的酚类。通过分离单体化合物并将它们混合在一起可以调节花色素苷、生物类黄酮和酚类的量。最好使用通过树脂分离的花色素苷、生物类黄酮和酚类的天然混合物。
所述树脂具有可吸附花色素苷、生物类黄酮及酚类的表面。一类优选的可吸附树脂为聚合的交联树脂,该交联树脂由苯乙烯和二乙烯苯组成,如AMBERLITE系列树脂,例如AMBERLITE XAD-4和AMBERLITE XAD-16,商业上可从Rohm & Haas Co.,Philadelphia,PA获得。按照本发明适宜使用的其它聚合交联苯乙烯和二乙烯苯吸附树脂为Dow Chemical Company,Midland,Michigan等生产的XFS-4257、XFS-4022、XUS-40323及XUS-40322。
优选使用商业上可获得的、政府批准的(当要求时)苯乙烯-二乙烯基-苯(SDVB)交联共聚物树脂(例如AMBERLITE XAD-16)。因此,在优选的实施方案中,将商业上从Rohm和Haas Company获得并描述于美国专利号4,297,220中的AMBERLITE XAD-16作为所述树脂使用。该树脂是非离子的疏水、交联聚苯乙烯二乙烯基苯吸附树脂。AMBERLITE XAD-16具有大网络的结构,该结构既具有连续的聚合物相又具有连续的多孔相。在一个特别优选的实施方案中,本发明所使用的树脂的粒径在100-200微米范围内。
预期,其它吸附剂,如那些AMBERLITE XAD吸附剂系列中含有疏水大网络树脂珠粒、颗粒大小在100-200微米范围内的吸附剂,在本发明的方法中也将是有效的。此外,不同种类的AMBERLITE也适宜用于本发明,如AMERCHROM CG系列的吸附剂,其颗粒大小在100-200微米范围内。优选AMBERLITE XAD-16,因为它可以重复使用多次(超过100次)。可是,对食品而言,预期在本发明中使用政府批准的树脂将认为是重要的和/或理想的。
可以使用任何溶剂以移去吸附的花色素苷、生物类黄酮及酚类。优选含有1到4个碳原子的低级链烷醇而最优选乙醇,因为它被批准用于食品。典型地,乙醇与水共沸,可是可以使用纯乙醇。使含有樱桃中苹果酸和糖的水通过所述柱。收集这些水并且可以用于食品中作为调味剂。
优选由BALATON和MONTMORENCY樱桃中分离花色素苷、生物类黄酮及酚类。樱桃组合物的内容部分显示于1997年2月12日申请的美国申请系列号08/799,788中和部分显示于1998年12月11日申请的美国申请系列号60/111,945中。正如这些申请中所述,在密歇根洲和美国,Montmorency(欧洲酸樱桃(Prunus cerasus))种占酸樱桃栽培品种的95%以上。可是,在几个密歇根洲果园正种植Balaton酸樱桃(P.Cerasus),一种新的酸樱桃栽培品种以便代替Montmorency。该樱桃具有较高的花色素苷含量并称作甜品种。已经报道过Montmorency和Balaton酸樱桃的花色素苷含量(Wang等,1997;Chandry等,1993)。可是,以前未进行过Balaton酸樱桃中其它酚类化合物的详细研究。早期的研究显示MONTMORENCY樱桃含矢车菊色素-3-龙胆二糖苷和矢车菊色素-3-芸香糖苷(Li,K.C.等,J.Am.Chem.Soc.78:979-980(1956))。在七种酸樱桃种中有六种也发现了矢车菊色素-3-葡萄糖基芸香糖苷(Harbone,J.B.等,Phytochemistry3:453-463(1964)),Dekazos(Dekazos,E.D.,J.Food Sci.35:237-241(1970))报道在MONTMORENCY樱桃中花色素苷色素为与矢车菊色素-3-槐糖苷、矢车菊色素-3-芸香糖苷及矢车菊色素-3-葡萄糖苷一起的芍药花青素-3-芸香糖苷、芍药花青素和矢车菊色素。可是,证实矢车菊色素-3-葡萄糖基芸香糖苷以及矢车菊色素-3-葡萄糖苷、矢车菊色素-3-槐糖苷和矢车菊色素-3-芸香糖苷为酸樱桃中的主要的色素。采用HPLC保留值,Chandra等(Chandra,A.等,J.Agric.Food Chem.40:967-969(1992))报道,在密歇根洲种植的MONTMORENCY樱桃中矢车菊色素-3-槐糖苷和矢车菊色素-3-葡萄糖苷分别是主要的和次要的花色素苷。类似地,已查明矢车菊色素-3-木糖基芸香糖苷是MONTMORENCY樱桃中次要的色素(Shrikhande,A.J.和F.J.Francis,J.Food Sci.38:649-651(1973))。
使用术语“载体”或“填充剂”意指一种组合物,在组合物中加入载体或填充剂以便增加源于樱桃的纯组成的组合物体积。最好是干燥的樱桃果肉。这些载体或填充剂包括含有任何可食用淀粉的材料、蛋白质如脱脂干燥乳。在该组内有面粉、糖、大豆粗粉、麦芽糖糊精和各种调味品如盐、胡椒、香料和药草。填充剂使用量为该混合物的约10-6和106重量份之间。
按照食品的活性成分大约在0.1和10mg/g之间的量将该组合物加入食品。所述量的选择最好不影响食品的味道并且又能产生最有益的结果。正如本领域技术人员所熟悉的一样,所述食品可以是高水分(潮湿的)或低水分(干燥的)。当作为食物增补剂使用时,该片剂含有0.01到1g的活性成分。
已经发现了植物化学品的提取和分离方法(Chandra,A.等,J.Agric.Food Chem.41:1062(1992);Wang,H.等,J.Agric.Food Chem.45:2556-2560(1997))以及迅速筛选抗氧化活性的方法(Arora,A.和G.M.Strasburg,J.Amer.Oil Chem.Soc.74:1031-1040(1997))。利用这些方法鉴别和鉴定源于BALATON和MONTMORENCY樱桃的抗氧化化合物。连续用己烷、乙酸乙酯和甲醇提取压汁后的樱桃组织。在筛选测定中,甲醇和乙酸乙酯部分皆显示强的抗氧化活性。通过硅胶真空液相色谱法进一步纯化乙酸乙酯部分得到四个亚部分,用制备性反相HPLC进一步将显示最强的抗氧化活性的亚部分分成七个部分。附图2和3显示由BALATON樱桃分离出的生物类黄酮。因此在酸樱桃中有许多类似的或同系的化合物。
鉴别两种新的酚类化合物为:I)1-(3’-4’-二羟基肉桂酰基)-2,3-二羟基环戊烷,和II)1-(3’-4’-二羟基肉桂酰基)-2,5-二羟基环戊烷。由樱桃水果的乙酸乙酯提取物中分离的并用光谱方法鉴定的其它化合物包括:1-(3’-甲氧基,4’-羟基肉桂酰基)奎尼酸、2-羟基-3-(2’-羟基苯基)丙酸、2-羟基-3-(2’-羟基苯基)丙酸甲酯、D(+)-苹果酸、β-谷甾醇和β-谷甾醇葡萄糖苷。附图4显示一些分离得到的酚类。也鉴别和完全鉴定由果汁部分获得的花色素苷成分(Chandra,A.等,J.Agric.Food Chem.41:1062(1992);Wang,H.等,J.Agric.Food Chem.45:2556-2560(1997));该结果表明这些化合物具有有效的抗氧化活性。
实施例1和2
正如附图5所示,在一个工业用的WARING混合器中将个体速冻(IQF)的樱桃(该樱桃已经去核)解冻并混合。以10,000rpm离心该混合物并且倾去果汁。用乳酪布进一步挤压残余物即果肉以便移去额外的果汁。
在15℃冻干所述果肉。在AMBERLITE XAD-16HP树脂上处理果汁产生樱桃酸性物质、花色素苷、生物类黄酮和酚类。用乙醇(1-2L),然后用水(6L)洗涤1kg所述XAD-16树脂。在装入带有棉塞的玻璃柱(10ID×90cm长)之前使该XAD-16树脂在水中静置1小时。在装入欲分离的果汁之前用水(2L)洗涤该填充柱。每次纯化800ml果汁。将果汁加到柱表面上并且使其不流动而沉降。然后用水洗脱并且弃去开始的1L洗脱液。收集接着的2L洗脱液,因为其含有带酸味的樱桃果汁,该酸味是因其含有源于樱桃的苹果酸和糖。然后在BALATON樱桃果汁的情况下,另外用4L水洗柱而对于MONTMORENCY樱桃果汁另外用5L水洗柱。一旦收集了樱桃果汁,弃去用水洗脱的其余洗脱液。然后用乙醇(1.3-1.5L)洗脱该柱并收集含有花色素苷、生物类黄酮和酚类的红色溶液(700-800ml)。然后,在重复所述过程多次(超过100次)之前放干柱子并用10L水洗涤。
在真空(20毫托)下蒸发该红色醇溶液,除去乙醇并且用50ppm的抗坏血酸稳定水溶液并在10℃冻干。收集并储存该红色粉末。
实施例1的结果:
| BALATON樱桃 | |
| IQF樱桃的重量 | 15.74kg |
| 干燥果肉的重量 | 605g |
| 果汁体积 | 12.16L |
| 花色素苷、生物类黄酮及酚类(红色粉末)的重量 | 31.35g |
| 酸味副产品的体积(苹果酸和糖) | @35L |
实施例2的结果:
| MONTMORENCY樱桃 | |
| IQF樱桃的重量 | 30.45kg |
| 干燥果肉的重量 | 895g |
| 果汁体积 | 24.03L |
| 花色素苷、生物类黄酮及酚类(红色粉末)的重量 | 47g |
| 樱桃副产品的体积(苹果酸和糖) | @75L |
优选将实施例1和2的红色粉末与作为载体的干燥果肉混合并制片成1到1000mg的包括该载体的片子(一个成人的日剂量)。
可以将各种食品等级的酸加入到分离的花色素苷、生物类黄酮及酚类中以便预防分解。最好不要加入调味剂。优选抗坏血酸(维生素C)。可以在干燥樱桃化合物前或后加入所述酸。
对于小规模的处理,可以利用冻干除去水分。对于大规模的生产,优选在一个空气循环烤箱中干燥。
实施例3
正如附图6所示,提供一个敞口的容器10,其带有一根进口管线11和一根出口管线12,它们的阀门分别为13和14。给该敞口的容器10提供树脂珠15。将水引入容器10,然后通过出口管线12转移并弃去。将如实施例1中一样的樱桃果汁(没有果肉或核)引入到容器10中并且让其停留25分钟。水和果汁的温度在约20℃到30℃之间。然后通过出口管线12转移含有苹果酸和糖的樱桃果汁残余物并将其保留作为食品调味剂。然后再用来自于进口管线11的水洗涤容器中的树脂15并通过出口管线12转移并弃去。用通过进口管线11引入的95%乙醇提取在树脂颗粒上的花色素苷、生物类黄酮和酚类。从容器10中移去含有花色素苷、生物类黄酮和酚类的乙醇。从花色素苷、生物类黄酮和酚类中除去乙醇并在氮气下快速干燥。如实施例1一样,优选将得到的粉末与干燥的樱桃果肉或其它载体混合。用水洗洗该树脂颗粒,然后该树脂和乙醇可以循环多次。
实施例4
在各种条件下,在水溶液中用抗氧化活性的荧光测定方法测试源于樱桃的乙酸乙酯粗提物(含有花色素苷、生物类黄酮和酚类)。首先描述该荧光测定方法。
抗氧化活性的荧光测定方法(通用方法):因为需要筛选大量的化合物或提取物的抗氧化活性,所以要求采用一个模型系统,该模型系统可以适度地表现单独的所述组合物或在食物产品中的组合物的结构和功能特征。该试验也必须灵敏、迅速和经济。使用一种基于荧光的测定方法评估抗氧化功效(Arora,A.,和G.M.Strasburg,J.Am.Chem.Soc.1996)。制备由1-硬脂酰基-2-亚油酰基-sn-甘油-3-胆碱磷酸组成的大单室囊泡,该单室囊泡十分类似于生物膜的性质,而生物膜是过氧化的主要位点之一。将一种荧光探针即1,6-二苯基己三烯丙酸,加入该膜中以便极性首基固定该探针在水性界面附近,而疏水部分平行于脂肪酸链。该探针与过氧化期间产生的自由基反应,导致荧光强度随着时间降低。用一种过氧化引发剂(如亚铁金属离子或自由基发生剂AAPH(氮杂双-[2-脒基丙烷盐酸盐]))引发该反应并且在存在或缺乏待测的抗氧化组合物的情况下,测定荧光降低的动力学。测定一种给定浓度的化合物目前仅仅需要21分钟,仅仅消耗几微克脂质并且可以容易地用一个简单的荧光计进行测量。
按照MacDonald等描述的方法(MacDonald,R.C.等,Biochim.Biophys.Acta 1061:297-303(1991))由1-硬脂酰基-2-亚油酰基-sn-甘油-3-胆碱磷酸制备大单室囊泡(LUVs)。简单地将脂质溶解在氯仿中并且使用一个旋转蒸发器使其干燥成一层薄膜。将干燥的膜重新悬浮在水性缓冲液中并且使用Liposofast脂质体挤压机(Avestin,Inc.,Ottawa,Canada)将其重复地挤压通过100nm孔径的聚碳酸酯滤膜。用冷冻-断裂(freeze-fracture)扫描电子显微镜证实囊泡大小的均一性(80-100nm)和单室性。在制备期间,将所述荧光探针二苯基己三烯丙酸(DPH-PA)按照1∶350(探针∶脂质)的摩尔比率加入到该囊泡中。为了进行荧光实验,将含有DPH-PA的LUVs按照100μM的终浓度悬浮在100mM NaCl、pH7.0的50mM tris-HEPES缓冲液中。该荧光探针在384nm被激发并在423nm监测发射。由于加入了亚铁离子或自由基发生剂AAPH,LUVs中的脂质氧化受到抑制;通过DPH-PA的荧光强度的降低监测该过程,其荧光强度的降低是由于与经21分钟产生的自由基反应所导致的。使用作为时间函数的荧光强度降低的曲线测定脂质氧化的动力学。该结果显示用乙酸乙酯提取的粗花色素苷的混合物在抑制氧化方面是有效的。
可以使用溶剂提取的花色素苷、生物类黄酮和酚类;可是,由于该产品将作为一种食品并且因为费用的原因这并不是优选的。当使用优选的吸附树脂时,这一步是不必要的。也可以用色谱法分离和重组成分;可是,对于本发明的目的而言,这就太昂贵了,因为它涉及高压液相色谱法。
实施例5
采用描述于Wang等,J.Nat.Products 62:294-296(1999)、Wang等,J.of Ag.and Food Chemistry,47:840-844(1999)和Wang等,J.ofNat.Products,62:86-88(1999)中的测定方法,用环加氧酶1和2(COX-I和COX-II)测试所述组合物的抗炎活性。该结果是所述组合物呈现抗炎活性,具体地讲是强的抑制COX-I和COX-II的活性。
实施例6、7和8
加树莓、蓝莓和黑莓:
将树莓(339g)、蓝莓(350g)和黑莓(670g)解冻并在一个工业Waring混合器中分别与500ml水混合。以10,000rpm离心该混合物20分钟并且倾去果汁。用乳酪布进一步挤压残余物(果肉)以便移去剩余的果汁。离心后的果汁大约为775mL(树莓)、700mL(蓝莓)和1100mL(黑莓)。
在15℃冻干所述果肉。在XAD-16HP树脂上处理果汁以便将花色素苷和酚类与糖和酸分离。用乙醇(1-2L),然后用水(6L)洗涤所述XAD-16树脂(1kg)。在装入带有棉塞的玻璃柱(10×90cm)之前使该树脂在水中静置1小时。在装入欲分离的果汁之前用水(2L)洗涤该填充柱。每次纯化800ml果汁。将果汁加到柱表面上并且使其不流动而沉降。然后用水洗脱并且弃去开始1L的洗脱液。收集接着的2L洗脱液,因为其含有糖和酸。然后对于所有的果汁皆用另外3L水洗柱。在除去糖和酸后,每次用乙醇(对于树莓和蓝莓各用1.3L,而对于黑莓用1.0L)洗脱该柱并收集含有花色素苷和酚类的红色溶液(700ml)。然后在重复所述过程之前放干柱子并用10L水洗涤。
然后,在真空下蒸发该红色醇溶液,除去乙醇并且用50ppm的抗坏血酸稳定水溶液并在10℃冻干。收集该红色粉末并在-20℃储存。结果显示于表1中。
| 水果 | 重量(g) | 制备果汁所加的水(mL) | 离心后果汁的体积(mL) | 移去酸和糖所需要的水的体积(mL) | 用于洗脱花色素苷和酚类的乙醇体积(mL) | 冻干后残余物的重量(g) | 花色素苷和酚类的重量(g) |
| 树莓 | 339.0 | 500 | 775 | 6000 | 1300 | 13.76 | 0.6752 |
| 蓝莓 | 350.0 | 500 | 700 | 6000 | 1300 | 52.20 | 0.7110 |
| 黑莓 | 670.0 | 500 | 1100 | 6000 | 2000 | 51.65 | 1.4420 |
我们打算将以上描述仅仅作为本发明的例证并且本发明仅受此后所附的权利要求书所限制。
Claims (17)
1.一种由可食用浆果生产作为一种组合物的含有花色素苷、生物类黄酮和酚类的混合物的方法,该方法包括:
(a)提供一种源于所述浆果的、含有花色素苷、生物类黄酮和酚类的水溶液;
(b)从水溶液中将花色素苷、生物类黄酮和酚类转移到选自AMBERLITE XAD-4和AMBERLITE XAD-16的由苯乙烯和二乙烯苯组成的聚合交联树脂表面;
(c)用洗脱剂洗脱树脂表面以便从树脂的表面移去花色素苷、生物类黄酮和酚类;以及
(d)将洗脱剂与花色素苷、生物类黄酮及酚类分开,
其中的酚类是源于樱桃的、具有苯基并具有一个或多个羟基的化合物。
2.一种由可食用浆果生产作为组合物的花色素苷、生物类黄酮和酚类的混合物的方法,该方法包括:
(a)提供第一批樱桃,其中所述樱桃是新鲜的或速冻并解冻的;
(b)破坏浆果并使果肉与果汁分离;
(c)从果肉中将花色素苷、生物类黄酮及酚类提取到水溶液中;
(d)将含有从所述果肉分离的花色素苷、生物类黄酮及酚类的水溶液中的花色素苷、生物类黄酮及酚类转移到选自AMBERLITEXAD-4和AMBERLITE XAD-16的由苯乙烯和二乙烯苯组成的聚合交联树脂颗粒上;
(e)用C1-4链烷醇洗涤树脂颗粒以便从树脂颗粒上移去花色素苷、生物类黄酮及酚类;
(f)将C1-4链烷醇与花色素苷、生物类黄酮及酚类分开。
(g)第二批浆果用分离后的链烷醇和已经移去了花色素苷、生物类黄酮及酚类的树脂颗粒重复步骤(a)至(e),
其中的酚类是源于樱桃的、具有苯基并具有一个或多个羟基的化合物。
3.权利要求2的方法,其中的所述链烷醇为乙醇。
4.权利要求2或3中任意一项的方法,其中所述樱桃为个体速冻的。
5.权利要求2或3中任意一项的方法,其中所述树脂颗粒以柱的形式使用。
6.权利要求2或3中任意一项的方法,其中所述浆果选自红莓、树莓、草莓、蓝莓、黑莓、接骨木浆果、红葡萄、鹅莓、巴巴多斯樱桃和苦果。
7.权利要求1的方法,其中将花色素苷、生物类黄酮和酚类与来自浆果的果肉混合,然后干燥。
8.权利要求1的方法,其中将花色素苷、生物类黄酮和酚类干燥,然后与来自浆果的干燥果肉混合。
9.权利要求2或3中任意一项的方法,其中将花色素苷、生物类黄酮和酚类与来自浆果的果肉混合,然后干燥。
10.权利要求2或3中任意一项的方法,其中将花色素苷、生物类黄酮和酚类干燥,然后与干燥浆果果肉混合。
11.权利要求7的方法,其中另外将所述花色素苷、生物类黄酮、酚类与果肉的混合物制成片剂。
12.权利要求2或3中任意一项的方法,其中另外将花色素苷、生物类黄酮和酚类与来自浆果的果肉混合,然后干燥并且将所述花色素苷、生物类黄酮、酚类与果肉的混合物制成片剂。
13.权利要求2或3中任意一项的方法,其中将花色素苷、生物类黄酮和酚类干燥,然后与来自浆果的干燥果肉混合并将所述花色素苷、生物类黄酮、酚类与果肉的混合物制成片剂。
14.一种可消费的组合物,该组合物以混合物的形式包含:
(a)从一种可食用浆果中分离的花色素苷、生物类黄酮及酚类的干燥混合物;和
(b)一种能增加组合物体积的食品级载体,其中(a)与(b)的重量比在0.1比100和100比0.1之间,其中用权利要求1、2或3中任意一项的方法制备所述的花色素苷、生物类黄酮和酚类。
15.权利要求14的组合物,其中所述载体为该浆果的干燥果肉。
16.一种喂养哺乳动物的方法,该方法包括:喂给哺乳动物一种可消费的组合物,该组合物以混合物的形式包含:
(a)用权利要求1、2或3中任意一项的方法制备的从一种可食用浆果中分离的花色素苷、生物类黄酮及酚类的干燥混合物;和
(b)一种能增加组合物体积的食品级载体,其中(a)与(b)的重量比在0.1比100和100比0.1之间,
条件是所述哺乳动物不包括人类。
17.权利要求16的方法,其中所述载体为该浆果的干燥果肉。
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