CN113939301A - 人乳寡糖用于在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性患者中治疗症状 - Google Patents

Abstract

本发明涉及人乳寡糖(HMO)、包括HMO的合成组合物用于在非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性患者中预防性地降低症状严重性和/或发生率、以及用于在患者中降低非胃肠道症状的严重性和/或发生率，以及其方法。

Description

人乳寡糖用于在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性患者中 治疗症状

技术领域

本发明涉及用于在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的人中管理症状的方法、化合物和组合物。

背景技术

非乳糜泻(non-coeliac)小麦敏感性，也称为非乳糜泻麸质(gluten)敏感性，是伴随乳糜泻疾病和小麦过敏的与麸质相关的病症(Leccioli等人Nutrients 9,1203(2017))。非乳糜泻小麦敏感性是一种非过敏性和非自身免疫性病状(condition)，其中，食用小麦和/或麸质会导致与其它麸质相关病症相似的症状。该病状被视为小麦和/或麸质敏感性，因为症状通过小麦和/或麸质移除得以缓解，并且在再次引入小麦和/或麸质时重新出现。然而，患有这种病状的患者没有表现出与乳糜泻疾病或麸质过敏相关联的特征性自身免疫或过敏标志物。尽管如此，其临床症状类似于乳糜泻和麸质过敏的症状。最常见的胃肠道症状包括腹胀、腹痛、上腹痛、腹泻和便秘。非胃肠道症状包括疲倦、头痛、焦虑、“头脑模糊”或难以集中注意力、抑郁和皮疹。这些症状可以在暴露于小麦和/或麸质后的数小时至数天内发生，然后可以在移除小麦和/或麸质后消失。

非乳糜泻小麦敏感性的病因尚不清楚。如乳糜泻疾病和麸质过敏中所见，这种病状可能涉及许多诱因。起始诱因主要涉及肠道上皮暴露于小麦和/或麸质，从而导致免疫介导的和/或非免疫介导的应答。由于缺乏T细胞参与以及Toll样受体(TLR)明显参与的证据，这种病状可能更多是先天性免疫应答而非适应性免疫应答。

由于尚未确定具体的诱因，因此该病状可能涉及与乳糜泻和麸质过敏不同的机制。麸质，即乳糜泻疾病的诱因，可能是该病状的重要诱因，但人们越来越怀疑它是主要诱因还是根本诱因。其它一些食物来源的刺激也可能是重要的诱因。这些包括α淀粉酶/胰蛋白酶抑制剂(ATI)，可发酵的寡糖、二糖、单糖和多元醇(FODMAPS)以及其它短链果聚糖。尤其是ATI与病理有关。在动物和人类研究模型中已经显示了ATI在引发免疫应答中的作用，并且认为其是乳糜泻疾病和非乳糜泻小麦敏感性的重要口服抗原(oral antigen)。ATI通过激活TLR复合物，主要触发涉及巨噬细胞、嗜中性粒细胞和肠道树突状细胞的先天性免疫应答。相反，麦醇溶蛋白(gliadin)似乎不是主要诱因，因为并没有特征性地发现典型的麦醇溶蛋白诱导的肠应答，此外，麦醇溶蛋白主要激活适应性免疫标志物(例如IL-6，IL-21和INF-γ)，在患有非乳糜泻小麦敏感性患者中未发现。

患有非乳糜泻小麦敏感性的患者表现出TLR2表达水平升高、上皮内α和β淋巴细胞数量增加以及T调节细胞数量减少。同样，这些患者的脂多糖结合蛋白(LBP)和可溶性CD14蛋白水平升高。此外，这些患者的脂肪酸结合蛋白2(FABP2)——肠上皮细胞损伤的标志物的循环水平升高(Uhde等，Gut 65,1930(2016))。现在已经接受的是，患有非乳糜泻小麦敏感性的患者表现出肠通透性增加，这允许抗原穿过固有层(lamina propria)。

肠道微生物群的变化也可能在非乳糜泻小麦敏感性中起作用。在患者中观察到的免疫标志物主要是先天性免疫应答标志物，这提供了微生物群起作用的证据。然而，微生物群作用的证据尚不清楚。从组成角度来看，似乎患者的产丁酸(butyrate-producing)细菌和双歧杆菌的丰度可能较低。

另外，存在一些该病状在具有某些遗传易感性的个体中发生的证据。遗传易感性高于一般人群，但低于患有乳糜泻疾病(具有强遗传成分)的患者。然而，与基因的这种关联目前尚不清楚。

该病状的诊断很复杂，许多患者不愿接受该过程。诊断的第一步是排除乳糜泻疾病和小麦和/或麸质过敏。这通过将患者置于含麸质的饮食中6周时间来完成。在此期间进行若干测试以排除小麦过敏(即小麦特异性IgE和皮肤点刺试验)和乳糜泻(即IgA-tTG、IgG-DGP和IgA-EMA)。如有必要，可以进行十二指肠活检以确认。第二步包括使患者开始无麸质饮食6周时间，并监测症状应答。该症状应答使用胃肠道症状评定量表(GSRS)和数字评定量表(NRS)评估。如果患者在开始饮食的6周内没有症状改善，则应排除该病状的诊断，需要探索其它诊断，比如IBS和其它功能性肠病。第三步涉及再引入含麸质的饮食。在该步骤中，将患者随机分配到两个方案之一。患者接受无麸质饮食+安慰剂或者无麸质饮食+麸质一周。然后，患者接受严格无麸质饮食的1周清除期，然后进行交换(crossover)1周。引入无麸质饮食后30％症状改善或引入含麸质饮食后30％症状出现则表示阳性结果。低于该30％的值，则认为结果为阴性。

诊断困难意味着该病状的患病率尚不清楚。然而，该病状正在成为更常见的诊断。结果，据报道该病状的患病率在西方人群中差异很大，从0.6-6％不等。这种诊断能力缺乏导致患者在自我诊断后开始无麸质饮食，而没有其医生的任何正式临床测试或管理建议。因此，食用无麸质食品在西方世界变得越来越流行。2015年7月进行的一项盖洛普民意调查(Gallup poll)显示，有20％的美国人选择无麸质饮食，而17％的美国人表示他们避免食用无麸质食物。

目前，尚无治愈该病状的方法，唯一可接受的治疗方法是让患者置于无麸质饮食，这通常有助于解决肠道和肠外症状。然而，建议随后继续终身食用无麸质饮食。这样的营养后果尚不清楚，因为含麸质的谷物还含有许多必需的营养素；特别是纤维。另外，去除含麸质的食物会对患者的生活质量产生重大影响。更好的选择是，能够为患者提供一种干预措施，在不会引起麻烦的症状的情况下，允许人食用小麦和/或麸质。

因此，仍然需要用于管理人的非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的方法和化合物，以允许食用小麦和/或麸质。此外，仍然需要在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者中降低非胃肠道症状的严重性和/或发生率的方法和化合物。

发明内容

本发明的第一方面涉及一种人乳寡糖(HMO)，其用于以下用途：

-在非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性患者中预防性地降低症状严重性和/或发生率，

-将小麦和/或麸质再引入患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者的饮食中，

-在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者中，在将小麦和/或麸质再引入所述患者的饮食中时，降低发生或再次发生非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性症状的风险，和/或

-在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者中降低非胃肠道症状的严重性和/或发生率。

本发明的第二方面涉及一种合成组合物，其用于以下用途：

-在非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性患者中预防性地降低症状严重性和/或发生率，

-将小麦和/或麸质再引入患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者的饮食中，

-在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者中，在将小麦和/或麸质再引入所述患者的饮食中时，降低发生或再次发生非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性症状的风险，和/或

-在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者中降低非胃肠道症状的严重性和/或发生率，

组合物包括至少一种人乳寡糖(HMO)。

优选地，合成组合物含有1g至15g的量的HMO；更优选地，2g至10g。例如，合成组合物可以含有3g至7g的HMO。

合成组合物可以含有双歧杆菌，例如长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)和/或两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)。

本发明的第三方面涉及一种包装物(pack)，其用于以下用途：

-在非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性患者中预防性地降低症状严重性和/或发生率，

-将小麦和/或麸质再引入患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者的饮食中，

-在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者中，在将小麦和/或麸质再引入所述患者的饮食中时，降低发生或再次发生非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性症状的风险，和/或

-在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者中降低非胃肠道症状的严重性和/或发生率，

包装物包括至少14个单独的(individual)日剂量的有效量的至少一种人乳寡糖(HMO)。

优选地，包装物中的每个剂量含有约1g至15g的人乳寡糖，优选2g至10g，更优选3g至7g。

包装物优选地包含至少约21个日剂量；例如，约28个日剂量。

包装物可以含有双歧杆菌，例如长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)和/或两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)。

本发明的第四方面涉及一种在非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性患者中预防性地降低症状严重性和/或发生率的方法，该方法包括在食用小麦和/或麸质之前向人施用有效量的至少一种人乳寡糖(HMO)。

优选地，在食用小麦和/或麸质之前，施用人乳寡糖至少1周、更优选至少2周的时间段。

优选地，在食用小麦和/或麸质之后，额外地施用人乳寡糖。

本发明的第五方面涉及一种将小麦和/或麸质再引入患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者的饮食中的方法，该方法包括在食用小麦和/或麸质之前向人施用有效量的至少一种人乳寡糖(HMO)。

优选地，在食用小麦和/或麸质之前，施用人乳寡糖至少1周、更优选至少2周的时间段。

优选地，在食用小麦和/或麸质之后，额外地施用人乳寡糖。

本发明的第六方面涉及一种在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者中，在将小麦和/或麸质再引入所述患者的饮食中时，降低发生或再次发生非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性症状的风险的方法，该方法包括在食用小麦和/或麸质之前向患者施用有效量的至少一种人乳寡糖(HMO)。

优选地，在食用小麦和/或麸质之前，施用人乳寡糖至少1周、更优选至少2周的时间段。

优选地，在食用小麦和/或麸质之后，额外地施用人乳寡糖。

本发明的第七方面涉及一种在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者中降低非胃肠道症状的严重性和/或发生率的方法，该方法包括向患者施用有效量的至少一种人乳寡糖(HMO)。

优选地，非胃肠道症状是睡眠困难、头痛、精力不足、无法集中注意力、焦虑、抑郁和皮疹中的一种或多种。

优选地，在食用小麦和/或麸质之前，施用至少一种人乳寡糖(HMO)。更优选地，在食用小麦和/或麸质之后，额外地施用人乳寡糖。

施用HMO的量优选有效地增加人肠中产丁酸细菌和/或双歧杆菌的丰度。此外，施用HMO的量优选有效地改善人的肠屏障性能，特别是在结肠中。

优选地，向人每天施用1g至15g的量的HMO；更优选每天2g至10g。例如，可以向人每天施用3g至7g。优选地，向人施用HMO至少1周；更优选至少2周的时间段。

在初始阶段期间可以向患者施用较高剂量，在维持阶段期间施用较低剂量。优选地，在初始阶段期间向人施用HMO至少1周；更优选至少2周的时间段。初始阶段可以发生在食用小麦和/或麸质之前。在维持阶段期间可以向人施用HMO至少4周；更优选至少8周的时间段。维持阶段可以发生在食用小麦和/或麸质之后。在初始阶段期间施用的剂量优选为每天约3g至约10g(例如每天约4g至约7.5g)，在维持阶段期间施用的剂量优选为每天约2g至约7.5g(例如每天约2g至约5g)。

在某些实施方式中，HMO可以是中性HMO或酸性HMO。中性HMO可以是一种或多种岩藻糖基化HMO或一种或多种非岩藻糖基化HMO。优选地，HMO选自2’-FL、3-FL、DFL、LNT、LNnT、3’-SL、6’-SL、LNFP-I或其混合物。优选地，HMO包括2’-FL以及在LNnT和LNT中的至少一种；2’-FL和DFL中的至少一种以及LNnT和LNT中的至少一种(例如2’-FL、DFL以及LNnT和LNT中的至少一种)；2’-FL和6’-SL；DFL和6’-SL；2’-FL、DFL和6’-SL；2’-FL、6’-SL以及LNnT和LNT中的至少一种；2’-FL、DFL、6’-SL以及LNnT和/或LNT中的至少一种。

具体实施方式

现已令人惊讶地发现，向患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者口服或肠内施用一种或多种人乳寡糖(HMO)能够预防性地降低随后食用小麦和/或麸质的非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性患者的症状严重性和/或发生率。此外，一种或多种人乳寡糖(HMO)的口服或肠内施用使患者能够将小麦和/或麸质再引入饮食中。还令人惊奇地发现，向患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者口服或肠内施用一种或多种人乳寡糖(HMO)降低患者中非胃肠道症状的严重性和/或发生率。HMO还优先增加胃肠道中双歧杆菌(bifidobacteria)的丰度，特别是青春双歧杆菌(B.adolescentis)系统发生组的双歧杆菌、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)和/或两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)。这些细菌产生乳酸(lactate)和乙酸(acetate)，而乳酸和乙酸又可以被产丁酸细菌转化成丁酸(butyrate)。

人乳寡糖是人乳中发现的可溶性聚糖的异质混合物。它们是人乳中仅次于乳糖和脂质的第三种最丰富的固体成分，其以5-25g/l的浓度存在(Bode:Human milkoligosaccharides and their beneficial effects，见：Handbook of dietary andnutritional aspects of human breast milk(Zibadi等著)，pp.515-31，瓦赫宁根学术出版社(Wageningen Academic Publishers)(2013))。HMO对小肠中的酶水解具有抵抗力，因此在很大程度上未被消化和吸收，并完好无损地到达结肠。到达结肠的大多数HMO充当底物，通过选择性刺激特定细菌的生长来塑造肠道生态系统。据信，HMO实质上调节婴儿肠道菌群，并在配方粉喂养(formula-fed)和母乳喂养(breast-fed)的婴儿的微生物群差异中起决定性作用。这些差异包括与配方粉喂养的婴儿中更多样性的肠道微生物群相比，母乳喂养的婴儿的肠道中双歧杆菌占优势。据信这对婴儿有益，因为认为双歧杆菌属物种的菌株对肠道健康具有积极作用。

HMO还优先增加胃肠道中双歧杆菌的丰度，特别是青春双歧杆菌(B.adolescentis)系统发育组的双歧杆菌，长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)和/或两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)。

在本说明书中，以下术语具有以下含义：

“青春双歧杆菌系统发育组的双歧杆菌”是指选自以下的细菌：青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)、角形双歧杆菌(Bifidobacterium angulatum)、链状双歧杆菌(Bifidobacteriumcatenulatum)、假链状双歧杆菌(Bifidobacteriumpseudocatenulatum)、Bifidobacterium kashiwanohense、齿双歧杆菌(Bifidobacteriumdentum)和Bifidobacterium stercoris(Duranti等Appl.Environ.Microbiol.79,336(2013)；Bottacini等Microbial Cell Fact.13:S4(2014))。优选地，青春双歧杆菌系统发育组的双歧杆菌是青春双歧杆菌和/或假链状双歧杆菌。

“有效量”是指以足量提供HMO以在人中引起期望的治疗结果的组合物的量。有效量可以以一个或多个剂量施用，以实现期望的治疗结果。

“肠内施用”意指用于将组合物递送至非婴儿的任何常规形式，其引起组合物在胃肠道(包括胃)中的沉积。肠内施用的方法包括通过鼻胃管或空肠管、经口、舌下和直肠饲喂。

“人乳寡糖”或“HMO”意指在人母乳中发现的复杂碳水化合物(Urashima等:MilkOligosaccharides,Nova Science Publisher(2011)；ChenAdv.Carbohydr.Chem.Biochem.72,113(2015))。HMO具有在还原末端包括乳糖单元的核心结构，其可以通过一个或多个β-N-乙酰基-氨基乳糖苷(β-N-acetyl-lactosaminyl)乳糖胺基和/或一个或多个β-乳-N-二糖基(β-lacto-N-biosyl)单元延长，并且该核心结构可以被αL-吡喃岩藻糖基(fucopyranosyl)和/或α-N-乙酰基-神经氨酰基(唾液酸基)部分所取代。在这方面，非酸性(或中性)HMO不含唾液酸残基，酸性HMO在其结构中具有至少一个唾液酸残基。非酸性(或中性)HMO可以是岩藻糖基化或非岩藻糖基化的。这类中性非岩藻糖基化HMO的实例包括乳-N-四糖(LNT)、乳-N-新四糖(LNnT)、乳-N-新六糖(LNnH)、对-乳-N-新六糖(pLNnH)、对-乳-N-六糖(pLNH)和乳-N-六糖(LNH)。中性岩藻糖基化HMO的实例包括2’-岩藻糖基乳糖(2’-FL)、乳-N-岩藻五糖I(LNFP-I)、乳-N-二岩藻六糖I(LNDFH-I)、3-岩藻糖基乳糖(3-FL)、二岩藻糖基乳糖(DFL)、乳-N-岩藻五糖II(LNFP-II)、乳-N-岩藻五糖III(LNFP-III)、乳-N-二岩藻己糖III(LNDFH-III)、岩藻糖基-乳-N-六糖II(FLNH-II)、乳-N-岩藻五糖V(LNFP-V)、乳-N-二岩藻六糖II(LNDFH-II)、岩藻糖基-乳-N-六糖I(FLNH-I)、岩藻糖基-对-乳-N-六糖I(FpLNH-I)、岩藻糖基-对-乳-N-新六糖II(FpLNnH II)和岩藻糖基-乳-N-新六糖(FLNnH)。酸性HMO的实例包括3’-唾液酸乳糖(3’-SL)、6’-唾液酸乳糖(6’-SL)、3-岩藻糖基-3’-唾液酸乳糖(FSL)、LST a、岩藻糖基-LST a(FLST a)、LST b、岩藻糖基-LST b(FLST b)、LST c、岩藻糖基-LST c(FLST c)、唾液酸基-LNH(SLNH)、唾液酸基-乳-N-六糖(SLNH)、唾液酸基-乳-N-新六糖I(SLNH-1)、唾液酸基-乳-N-新六糖II(SLNH-II)和二唾液酸基-乳-N-四糖(DSLNT)。

“微生物群(microbiota)”、“微生物区系(microflora)”和“微生物组(microbiome)”是指通常栖息于身体器官或部分、特别是人的胃肠道器官的活微生物群体。胃肠道微生物群的最主要成员包括厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、放线菌门(Actinobacteria)、变形菌门(Proteobacteria)、互养菌门(Synergistetes)、疣微菌门(Verrucomicrobia)、梭杆菌门(Fusobacteria)和广古菌门(Euryarchaeota)这些门的微生物。在属水平上微生物包括拟杆菌属(Bacteroides)、栖粪杆菌属(Faecalibacterium)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)、罗斯氏菌属(Roseburia)、Alistipes、柯林斯氏菌(Collinsella)、布劳特氏菌属(Blautia)、粪球菌属(Coprococcus)、瘤胃球菌属(Ruminococcus)、真杆菌属(Eubacterium)和多尔氏菌属(Dorea)；在物种水平上微生物包括单形拟杆菌(Bacteroides uniformis)、Alistipesputredinis、Parabacteroides merdae、布氏瘤胃球菌(Ruminococcus bromii)、Dorealongicatena、粪拟杆菌(Bacteroides caccae)、多形拟杆菌(Bacteroidesthetaiotaomicron)、霍氏真杆菌(Eubacterium hallii)、扭链瘤胃球菌(Ruminococcustorques)、粪普拉梭杆菌(Faecalibacterium prausnitzii)、酸奶瘤胃球菌(Ruminococcuslactaris)、产气柯林斯菌(Collinsella aerofaciens)、Dorea formicigenerans、普通拟杆菌(Bacteroides vulgatus)和罗斯拜瑞氏菌(Roseburia intestinalis)。胃肠微生物群包括位于或附着于覆盖胃肠道上皮的粘液层的粘膜相关微生物群，以及胃肠道腔中发现的腔相关微生物群。

“微生物群的调节”意指对微生物群施加调节或控制的影响，例如导致双歧杆菌(Bifidobacterium)、Barnesiella、粪杆菌属(Faecalibacterium)和/或其它产丁酸细菌的固有(indigenous)肠道丰度增加的影响。在另一实例中，影响可以引起活泼瘤胃球菌(Ruminococcus gnavus)和/或变形菌门(Proteobacteria)的肠道丰度的减少。“变形菌门”是革兰氏阴性菌门，包括许多种病原菌，例如埃希氏菌属(Escherichia)、沙门氏菌属(Salmonella)、弧菌属(Vibrio)、螺杆菌属(Helicobacter)、耶尔森氏菌属(Yersinia)和许多其它著名的属。

“非乳糜泻小麦敏感性”是指在不受乳糜泻疾病或小麦过敏影响的受试者中，与摄入含麸质食物有关的肠道和肠外症状为特征的综合征。“非乳糜泻麸质敏感性”具有相同的含义，并且这两个术语可以互换使用。含麸质的食物通常包括含麸质的谷物比如小麦、大麦和黑麦。

“非婴儿人”或“非婴儿”意指3岁及年龄更大的人。非婴儿人可以是儿童、青少年、成人或老年人。

“口服施用”是指用于通过口将组合物递送至人的任何常规形式。因此，口服施用是肠内施用的一种形式。

在本文中，“预防性治疗”或“预防”是指为减少疾病发作或复发的风险而给予的治疗或采取的行动。

“预防性地降低症状严重性和/或发生率”是指在暴露于小麦和/或麸质后的稍后时间点降低症状的严重性和/或发生率。

“双歧杆菌的相对丰度”是指人的胃肠道微生物群中一双歧杆菌物种相对于其它双歧杆菌的丰度。

“双歧杆菌的相对生长”是指人的胃肠道微生物群中一双歧杆菌物种相对于其它双歧杆菌的生长。

“二级预防”是指在高风险患者中预防病况发作，或在已经患有该病况的患者中预防症状复发。“高风险”患者是指容易患病的个体，例如有该病况家族史的人。

“合成组合物”是指人工制备的组合物，并且优选地是指含有至少一种以化学和/或生物学方式离体产生(例如通过化学反应、酶促反应或重组)的化合物的组合物。在一些实施方式中，本发明的合成组合物可以与天然存在的组合物相同，但优选不同。合成组合物通常包括一种或多种能够减少人的小麦和/或麸质敏感性的症状或诱导耐受性的化合物，包括一种或多种HMO。另外，在一些实施方式中，合成组合物可以包括一种或多种营养学或药学活性组分，其不会不利地影响上述化合物的功效。下问另外描述了本发明的合成组合物的一些非限制性实施方式。

“治疗”是指解决医学病状或疾病，目的是改善或稳定被治疗的人的预后或解决潜在的营养需求。因此，治疗包括通过解决被治疗者的营养需求而进行的医疗病状或疾病的饮食或营养管理。“治疗(treating)”和“治疗(treatment)”具有语法上对应的含义。

“疗法”是指为减少或消除疾病或病理病状的症状而给予的治疗或采取的措施。

可以通过公知的方法从哺乳动物(包括但不限于人、牛、绵羊、猪或山羊物种)分泌的一种或多种乳中分离或富集HMO。还可以通过使用微生物发酵、酶促方法、化学合成或这些技术的组合的公知方法来生产HMO。作为实例，使用化学法，可以如WO 2011/100980和WO2013/044928中所述制造LNnT，可以如WO 2012/155916和WO 2013/044928中所述合成LNT，可以如WO 2013/091660所述制造LNT和LNnT的混合物，可以如WO 2010/115934和WO 2010/115935中所述制造2’-FL，可以如WO 2013/139344中所述制造3-FL，可以如WO 2010/100979中所述制造6’-SL及其盐，可以如WO 2012/113404中所述制备唾液酸化寡糖，可以如WO2012/113405中所述制备人乳寡糖的混合物。作为酶促制造的实例，可以如WO 2012/007588中所述制造唾液酸化寡糖，可以如WO 2012/127410中所述制造岩藻糖基化寡糖，可以如WO2012/156897和WO 2012/156898中所述有利地制备人乳寡糖的多样化混合物。可以在WO01/04341和WO 2007/101862中找到描述如何使用基因修饰的大肠杆菌制造核心(非岩藻糖基化中性)人乳寡糖(任选地被岩藻糖或唾液酸取代)的生物技术方法。

在上述方面中的任一项中，HMO可以是单一HMO或任何适合于本发明目的的HMO的混合物。

在一个实施方式中，混合物包括以下组分、由以下组分组成或基本上由以下组分组成：中性HMO，优选至少第一中性HMO和至少第二中性HMO，其中第一中性HMO是岩藻糖基化中性HMO，第二中性HMO是核心HMO(也称为非岩藻糖基化中性HMO)。特别地，HMO的混合物可以含有岩藻糖基化HMO和核心HMO，所述岩藻糖基化HMO选自2’-FL、3-FL、DFL、LNFP-I、LNFP-II、LNFP-III、LNFP-V、LNDFH-I、LNDFH-II、LNDFH-III、FLNH-I、FLNH-II、FLNnH、FpLNH-I和F-pLNnH II，所述核心HMO选自LNT、LNnT、LNH、LNnH、pLNH和pLNnH。更优选地，中性HMO的混合物含有以下组分、由以下组分组成或基本上由以下组分组成：选自2’-FL、3-FL和DFL的岩藻糖基化HMO，以及选自LNT和LNnT的核心HMO；有利地，混合物包括以下组分、由以下组分组成或基本上由以下组分组成：2’-FL以及在LNnT和LNT中的至少一种；或者2’-FL和DFL中的至少一种以及在LNnT和LNT中的至少一种；或者2’-FL、DFL以及在LNnT和LNT中的至少一种。

在其它实施方式中，混合物包括以下组分、由以下组分组成或基本上由以下组分组成：至少第一(酸性)HMO和至少第二(中性)HMO，其中第一(酸性)HMO选自3’-SL、6’-SL和FSL，第二(中性)HMO选自2’-FL、3-FL、DFL、LNT和LNnT；有利地，混合物包括以下组分、由以下组分组成或基本上由以下组分组成：2’-FL和6’-SL；或者6’-SL以及在2’-FL和DFL中的至少一种；或者2’-FL、6’-SL以及在LNnT和LNT中的至少一种；或者2’-FL、DFL、6’-SL以及在LNnT和/或LNT中的至少一种。

此外，在一个实施方式中，合成组合物可以是营养组合物的形式。例如，营养组合物可以是食物组合物、补液溶液(rehydration solution)、医疗食品或用于特殊医疗目的的食品、营养补品等。营养组合物可以含有蛋白质、脂质和/或可消化的碳水化合物的来源，并且可以是粉末或液体的形式。可以将组合物设计成作为唯一的营养来源或者作为营养补充剂。

合适的蛋白质来源包括乳蛋白、大豆蛋白、大米蛋白、豌豆蛋白和燕麦蛋白或其混合物。乳蛋白可以是乳蛋白浓缩物、乳蛋白分离物，乳清蛋白或酪蛋白或两者的混合物的形式。蛋白质可以是完整蛋白质或者部分水解或广泛水解的水解蛋白质。水解蛋白提供易于消化的优势，这对于患有发炎或受损胃肠道(GI tract)的人来说至关重要。蛋白质也可以游离氨基酸的形式提供。蛋白质可以占营养组合物能量的约5％至约30％，通常约10％至20％。

蛋白质来源可以是以下的来源：谷氨酰胺、苏氨酸、半胱氨酸、丝氨酸、脯氨酸或这些氨基酸的组合。谷氨酰胺来源可以是谷氨酰胺二肽和/或富含谷氨酰胺的蛋白质。由于谷氨酰胺被肠细胞用作能量源，因此可以包括谷氨酰胺。苏氨酸、丝氨酸和脯氨酸是产生粘蛋白的重要氨基酸。粘蛋白覆盖胃肠道，并且可以改善肠屏障功能和粘膜愈合。半胱氨酸是谷胱甘肽的主要前体，谷胱甘肽是机体抗氧化防御的关键。

合适的可消化碳水化合物包括麦芽糊精、水解或改性的淀粉或玉米淀粉、葡萄糖聚合物、玉米糖浆、玉米糖浆固体、高果糖玉米糖浆、来源于大米的碳水化合物、来源于豌豆的碳水化合物、来源于马铃薯的碳水化合物、木薯淀粉、蔗糖、葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖、蜂蜜、糖醇(例如麦芽糖醇、赤藓糖醇、山梨糖醇)或其混合物。优选地，组合物减少了或不含添加的乳糖或其它FODMAP碳水化合物。通常，可消化碳水化合物提供营养组合物能量的约35％至约55％。特别合适的可消化碳水化合物是低葡萄糖当量(DE)麦芽糊精。

合适的脂质包括中链甘油三酸酯(MCT)和长链甘油三酸酯(LCT)。优选地，脂质是MCT和LCT的混合物。例如，MCT可以占脂质的约30重量％至约重量70％，更具体地占约50重量％至约60重量％。MCT具有更易于消化的优势，这对胃肠道发炎或受损的人来说至关重要。通常，脂质提供营养组合物能量的约35％至约50％。脂质可以含有必需脂肪酸(Ω-3和Ω-6脂肪酸)。优选地，这些多不饱和脂肪酸提供脂类质来源总能量的低于约30％。

长链甘油三酸酯的合适来源是菜籽油、葵花籽油、棕榈油、大豆油、乳脂、玉米油、高油酸(high oleic)油和大豆卵磷脂。分馏椰子油是中链甘油三酸酯的合适来源。营养组合物的脂质分布优选设计为具有约4:1至约10:1的多不饱和脂肪酸Ω-6(n-6)与Ω-3(n-3)之比。例如，n-6与n-3的脂肪酸比例可以为约6:1至约9:1。

营养组合物还可以包括维生素和矿物质。如果营养组合物旨在作为唯一的营养来源，则其优选包括完整的维生素和矿物质谱。维生素的实例包括维生素A、B-复合物(如B1、B2、B6和B12)、C、D、E和K、烟酸和酸性维生素，如泛酸、叶酸和生物素。矿物质的实例包括钙、铁、锌、镁、碘、铜、磷、锰、钾、铬、钼、硒、镍、锡、硅、钒和硼。

营养组合物还可以包括类胡萝卜素，如叶黄素、番茄红素、玉米黄质和β-胡萝卜素。所包括的类胡萝卜素的总量可以在约0.001μg/ml至约10pg/ml范围内变化。可以以约0.001μg/ml至约10pg/ml的量包括叶黄素，优选地约0.044pg/ml至约5pg/ml的叶黄素。可以以约0.001pg/ml至约10pg/ml的量包括番茄红素，优选约0.0185pg/ml至约5pg/ml的番茄红素。β-胡萝卜素可以占约0.001pg/ml至约10mg/ml，例如约0.034pg/ml至约5pg/ml的β-胡萝卜素。

营养组合物优选还含有浓度降低的钠；例如，约300mg/l至约400mg/l。剩余电解质的浓度可以设定成在不给肾脏功能带来过多肾溶质负担的情况下满足需要。例如，钾优选在约1180至约1300mg/l的范围内存在；氯化物优选在约680至约800mg/l的范围内存在。

营养组合物还可以含有各种其它常规成分，如防腐剂，乳化剂，增稠剂，缓冲剂，纤维素(fibres)和益生元(例如低聚果糖、低聚半乳糖)、益生菌(例如动物双歧杆菌(B.animalis)乳酸亚种(subsp.lactis)BB-12、乳酸双歧杆菌(B.lactis)HN019、乳酸双歧杆菌Bi07、婴儿双歧杆菌(B.infantis)ATCC 15697、鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)GG、鼠李糖乳杆菌HNOOl、嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)LA-5、嗜酸乳杆菌NCFM、发酵乳杆菌(L.fermentum)CECT5716、长双歧杆菌(B.longum)BB536、长双歧杆菌AH1205、长双歧杆菌AH1206、短双歧杆菌(B.breve)M-16V、罗伊氏乳杆菌(L.reuteri)ATCC 55730、罗伊氏乳杆菌ATCC PTA-6485、罗伊氏乳杆菌DSM 17938)，抗氧化剂/抗炎化合物，其包括生育酚、类胡萝卜素、抗坏血酸/维生素C、抗坏血酸棕榈酸酯、多酚、谷胱甘肽和超氧化物歧化酶(甜瓜)，其他生物活性因子(例如生长激素、细胞因子、TFG-β)，着色剂，调味剂和稳定剂，润滑剂等。

营养组合物可以配制成可溶粉末、液体浓缩物或即用型制剂。组合物可以通过鼻胃管或经口服饲喂给有需要的人。也可以存在各种调味剂、纤维素和其它添加剂。

营养组合物可以通过用于制备固体或液体形式的营养组合物的任何常用制造技术来制备。例如，可以通过合并各种进料溶液来制备组合物。可以通过加热和混合脂质源，然后在加热和搅拌的同时添加乳化剂(例如卵磷脂)、脂溶性维生素和至少一部分蛋白质源来制备脂肪蛋白(protein-in-fat)进料溶液。然后通过在加热和搅拌的同时向水中添加矿物质、痕量和超痕量矿物质、增稠剂或悬浮剂来制备碳水化合物进料溶液。在添加碳水化合物(例如，HMO和可消化碳水化合物源)之前，将所得溶液在持续加热和搅拌下保持10分钟。然后将所得进料溶液在加热和搅拌下共混在一起，并将pH调节至6.6-7.0，然后对组合物进行高温短时加工，在此期间将组合物进行热处理、乳化和均质化，然后使其冷却。添加水溶性维生素和抗坏血酸，如果需要，将pH调节至所需范围，添加调味剂，添加水，以达到所需的总固体含量。

对于液体产品，则可以将所得溶液无菌包装以形成无菌包装的营养组合物。以这种形式，营养组合物可以是即食或浓缩液体形式。另外可选地，可以将组合物喷雾干燥并加工和包装成可重构粉末。

当营养产品是即食营养液体时，以液体的重量计，液体中HMO的总浓度优选为约0.1％至约1.5％，包括约0.2％至约1.0％，例如约0.3％至约0.7％。当营养产品是浓缩营养液时，以液体的重量计，液体中HMO的总浓度优选为约0.2％至约3.0％，包括约0.4％至约2.0％，例如约0.6％至约1.5％。

在另一实施方式中，营养组合物为单位剂型。单位剂型可以含有可接受的食品级载体，例如磷酸盐缓冲盐溶液，乙醇在水中的混合物，水，和乳液如油/水或水/油乳液，以及各种润湿剂或赋形剂。单位剂型也可以含有当施用于人时不会产生有害、过敏或其它不良反应的其它物质。载体和其它物质可以包括溶剂、分散剂、包衣剂、吸收促进剂、控释剂和一种或多种惰性赋形剂，如淀粉、多元醇、制粒剂、微晶纤维素、稀释剂、润滑剂、粘合剂和崩解剂。

本发明的单位剂型可以口服施用，例如作为含有预定量混合物的片剂、胶囊或丸剂，或者作为含有预定浓度混合物的粉剂或颗粒剂，或者含有预定浓度混合物的在水性或非水性液体中的凝胶剂、糊剂、溶液剂、混悬剂、乳液剂、糖浆、大丸剂、药糖剂(electuary)或浆剂。口服施用的组合物可以包括一种或多种粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、调味剂和湿润剂。口服施用的组合物例如片剂可以任选地被包衣，并且可以配制为提供持续、延迟或受控的HMO的释放。

本发明的单位剂型也可以通过鼻胃管施用或直接输注到胃肠道或胃中。

本发明的单位剂型还可包括治疗剂，如抗生素、益生菌、止痛药和抗炎剂。用于人的这样的组合物的合适剂量可以基于因素如人的病况、免疫病状、体重和年龄以常规方式确定。在某些情况下，剂量的浓度将与在人母乳中组合物的HMO所发现的浓度相似。所需量通常为每天约1g至约15g，在某些实施方式中为每天约2g至约10g，例如每天约3g至约7g。适当的剂量方案可以通过本领域技术人员已知的方法来确定。

在另一实施方式中，HMO可以配制为药物组合物。药物组合物可以含有药学上可接受的载体，例如，磷酸盐缓冲盐溶液，乙醇在水的混合物，水和乳液(如油/水或水/油乳液)，以及各种润湿剂或赋形剂。药物组合物还可以含有当施用于非婴儿时不会产生有害、过敏或其它有害的反应的其它物质。载体和其它物质可以包括溶剂、分散剂、包衣剂、吸收促进剂、控释剂和一种或多种惰性赋形剂，如淀粉、多元醇、制粒剂、微晶纤维素、稀释剂、润滑剂、粘合剂和崩解剂。

药物组合物可以口服施用，例如作为含有预定量的片剂、胶囊或丸剂，或作为含有预定浓度的粉剂或颗粒剂，或含有预定浓度的在水性或非水性液体中的凝胶剂、糊剂、溶液剂、混悬剂、乳液剂、糖浆、大丸剂、药糖剂或浆剂。口服施用的组合物可以包括粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、调味剂和湿润剂。口服施用的组合物例如片剂可以任选地被包衣，并且可以被配制为提供持续、延迟或受控的其中混合物的释放。

药物组合物也可以通过直肠栓剂、气雾剂管、鼻胃管或直接输注到胃肠道或胃中施用。

药物组合物还可以包括治疗剂，如抗生素、益生菌、止痛剂和抗炎剂。用于人的这些组合物的合适剂量可以基于例如病况、免疫状态、体重和年龄的因素以常规方式确定。在某些情况下，剂量将会是与人母乳中发现的HMO的浓度相似的浓度。所需的量通常范围为每天约1g至约15g，在某些实施方式中为每天约2g至约10g，例如每天约3g至约7g。适当的剂量方案可以通过常规方法确定。

对于在非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性患者中降低症状严重性和/或发生率，或者将小麦和/或麸质再引入非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性患者的饮食中，需要施用的HMO的量将取决于以下因素而变化：例如疲劳的风险和严重性，任何潜在的医学状况或疾病，年龄，组合物的形式，和被施用的其它药物。此外，量可以根据是否是预防性地使用HMO(剂量可以较高时)或者是否是在维持期间使用HMO(剂量可以较低时)而有所不同。然而，所需的量可以由医生来容易地设定，通常在每天约1g至约15g的范围内，在某些实施方式中，每天约2g至约10g，例如每天约3g至约7g。可以基于若干因素来确定合适的剂量，所述因素包括，例如，体重和/或病况，正在治疗或预防的疲劳的严重性，其它病情和/或疾病，副作用的发生率和/或严重性，和施用方式。适当的剂量范围可以通过本领域技术人员已知的方法来确定。在食用小麦和/或麸质之前的初始阶段期间，剂量可以较高(例如每天3g至15g，优选每天3mg至10g)。在维持阶段期间，剂量可以减少(例如每天1g至10g，优选每天2g至7.5g)。

实施例

实施例1

总共招募40位男性和女性患者参与研究。每位患者均自我诊断患有小麦和/或麸质敏感性。参与者完成基线筛查调查，其中他们指示任何其它医学状况以及各种胃肠道的严重程度和生活质量症状。对于测量症状，使用5点李克特(Likert)量表，其中评分1表示“无症状”，评分5表示“严重症状”。

为每个参与者提供日剂量约4g HMO的足够3周量的HMO。HMO提供为单独的2’-FL或者4:1混合的2’-FL和LNnT(按重量计)。参与者保持正常饮食。

摄入3周后，每位参与者完成第二次调查，其中他们指示各种胃肠道的严重程度和生活质量症状。使用相同的5点李克特量表来评估症状。

然后，为每位参与者提供日剂量约4g HMO的足够另一3周的额外量的HMO。在6周、9周和12周后重复此过程。

在12周的过程中，参与者指示胃肠道症状减轻；特别是疼痛、腹泻、腹胀和胀气(gas)。此外，患者指示疲劳得以改善。

实施例2

使用非乳糜泻麸质敏感性共认标准(consensus criteria)，从胃肠病门诊中心招募年龄在18-75岁之间的非乳糜泻小麦敏感性患者。如果患者对乳糜泻特异性IgA抗肌内膜和/或抗TG2抗体呈阳性，或他们表现出乳糜泻的组织学特征，则将患者排除在外。此外，如果患者对小麦过敏特异性IgE血清学或皮肤点刺试验呈阳性，则将其排除在外。其它排除标准是炎性肠病、精神疾病、腹部大手术(尤其是肠切除术)、糖尿病、全身自身免疫性疾病、既往过敏性发作、任何全身性疾病、孕妇或哺乳期妇女以及已经接受药物疗法的患者。

在初次访问(筛查)时，向每位患者提供关于研究的书面和口头信息，并要求患者签署知情同意书。通过全面回顾临床病史对每位患者进行评估，收集血液样本进行适格(eligibility)分析。将粪便采样装置分配给每个患者。指导患者将其样本保存在冰箱中，直到下一次访问。每位患者均接受无麸质饮食教育。饮食由专门的医务人员进行说明，并为每位患者提供描述饮食的传单，列出允许的和不允许的食物以及建议阅读食物标签的方式。另外为患者提供其注册中心的直接联系链接(通过电子邮件和电话)，以询问有关其饮食的任何疑问。

总共包括80名患者。将患者随机分成两组，每组40位患者，其中一组食用治疗产品，一组则为安慰剂产品，进行8周。治疗产品含5克2’-FL和LNnT的组合，而安慰剂产品含5克葡萄糖。两种产品都是单位剂量容器中的粉末的形式。

在第二次访问(干预开始)时，将检查适格标准，并将适格的受试者在试验中随机分为两个组。对身体和精神健康的症状、胃肠道症状、生活质量和粪便稠度进行评估(通过SF36、GSRS、BSFS和QoL问卷进行测量)。试验补充材料与电子依从性日记的使用说明书一起分发。收集粪便样本，并分发用于收集新样本的设备。患者应严格接受无麸质饮食8周。

收集血液样本用于生物标志物和免疫细胞研究以及生物储备。将血液样本中的血清转移到冷冻管中并保存在-80℃下。测量以下生物标志物：TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-6、IL-12、IL-10、MIP-1β、hs-CRP、脂多糖结合蛋白、脂肪酸结合蛋白2、类胰蛋白酶、抗鞭毛蛋白(antiflagellin)、连蛋白(zonulin)、组胺、前列腺素2和皮质醇。对血液进行流式细胞术以确定免疫细胞的水平。

粪便样品在-80℃下保存直至分析。使用16S rRNA基因序列对粪便样品进行微生物分析。

8周后的第三次访问时，收集粪便样本，收集血液样本，并评估身体和精神健康的症状，胃肠道症状，生活质量和粪便稠度(通过SF36、GSRS、BSFS和QoL问卷进行测量)。分发用于补充新样本的试验补充材料和装置。然后使每位患者接受对应于日剂量10g麸质的含麸质饮食，持续1周。

在干预结束时(第9周)，每位患者访问医疗团队。进行体格检查并重新评估症状(通过GSRS、IBS-SSS、BSFS和QoL量表等进行测量)。收集试验补充产品以检查依从性。如前所述收集粪便样本和血液样本并进行分析。

与安慰剂组相比，接受治疗产品的患者报告GSRS评分降低，以及粪便稠度的改善。血液分析表明，治疗患者的炎症标志物水平降低，肠通透性降低，表明粘膜屏障改善，并且调节性免疫细胞增加。粪便分析表明，接受治疗的患者的细菌过度生长/营养不良的水平降低，双歧杆菌水平更高；特别是青春双歧杆菌系统发育组成员，长双歧杆菌和两歧双歧杆菌。此外，接受治疗产品的患者表明头痛的频率和严重性降低，精力水平改善，睡眠困难改善，焦虑减少，抑郁减少，“头脑模糊”或无法集中注意力减少，生活质量改善。

实施例3

测试2’-FL和LNnT在杯状细胞的人LS174T细胞培养模型中诱导MUC2、TFF3、ΕΙΜβ、CHST5和GAL3ST2表达的能力。人LS174T细胞系获自美国典型培养物保藏中心(theAmerican Type Culture Collection，ATCC)。在37℃、含5％CO₂的空气中，将LS174T细胞保存在根据说明书补充的最低必需培养基(MEM)中。将2’-FL和LNnT溶解在细胞培养级水中至所需浓度。将LS174T细胞用含有0或5mg HMO/ml的HMO溶液处理。

收集LS174T细胞并将其悬浮在Trizol试剂中，并根据制造商的说明书使用RNA分析试剂盒(Qiagen)分离总RNA，并使用Nanodrop分析(Thermo Fisher Scientific)对RNA分离物进行定量。使用高容量cDNA反转录试剂盒(Applied Biosystems)对RNA分离物进行反转录，以生成cDNA，然后使用该cDNA通过定量RT-PCR评估基因表达。

对于定量RT-PCR，特异性TaqMAN基因表达检验获自于Applied Biosystems获得，其包括用于MUC2、TFF3、CHST5和GAL3ST2的表达检验。使用TaqMAN PCR Master Mix(Applied Biosystems)进行实时定量PCR。使用Applied Biosystems 7900HT快速实时PCR系统在384孔板中一式两份进行反应。结果使用SDS 2.3软件分析，并通过delta Ct方法进行计算。将所有样品标准化为Gus-β表达，并相对于未处理对照计算诱导倍数。基因表达表示为相比较于无HMO对照细胞的增长倍数。将该实验重复三遍。

结果表明，与对照培养物相比，用2’-FL和LNnT处理增加MUC2和TFF3基因的表达。杯状细胞基因的表达增加是特异性的，不是普遍的，如分别由CHST5和GAL3ST2的最小诱导或缺乏诱导所证明。MUC2和TFF3是粘膜屏障的关键成分，并改善粘膜屏障功能。

实施例4

将HMO 2’-FL和LNnT以4:1的质量比引入到旋转混合器中。将0.25w％的硬脂酸镁引入到混合器中，并将混合物混合10分钟。然后使混合物在流化床中团聚(agglomerated)，装入5克棒状包装物中，并将包装物密封。

Claims (21)

1.一种人乳寡糖(HMO)，其用于以下用途：

·在非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性患者中预防性地降低症状严重性和/或发生率，

·将小麦和/或麸质再引入患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者的饮食中，

·在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者中，在将小麦和/或麸质再引入所述患者的饮食中时，降低发生或再次发生非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性症状的风险，和/或

·在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者中降低非胃肠道症状的严重性和/或发生率。

2.一种合成组合物，其用于以下用途：

·在非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性患者中预防性地降低症状严重性和/或发生率，

·将小麦和/或麸质再引入患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者的饮食中，

·在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者中，在将小麦和/或麸质再引入所述患者的饮食中时，降低发生或再次发生非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性症状的风险，和/或

·在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者中降低非胃肠道症状的严重性和/或发生率，

所述组合物包括至少一种人乳寡糖(HMO)。

3.根据权利要求2所述的用途的合成组合物，其含有1g至15g、优选2g至10g、更优选3g至7g的量的所述人乳寡糖。

4.根据权利要求1所述的用途的人乳寡糖或者根据权利要求2或3所述的用途的合成组合物，其中所述人乳寡糖包括2’-FL、3-FL、DFL、LNT、LNnT、3’-SL、6’-SL、LNFP-I或其混合物。

5.根据权利要求4所述的用途的人乳寡糖或合成组合物，其中所述人乳寡糖为2’-FL和DFL中的至少一种，以及LNnT和LNT中的至少一种。

6.一种包装物，其用于以下用途

·在非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性患者中预防性地降低症状严重性和/或发生率，

·将小麦和/或麸质再引入患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者的饮食中，

·在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者中，在将小麦和/或麸质再引入所述患者的饮食中时，降低发生或再次发生非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性症状的风险，和/或

·在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者中降低非胃肠道症状的严重性和/或发生率，

所述包装物包含至少14个单独的日剂量的有效量的至少一种人乳寡糖(FIMO)。

7.根据权利要求6所述的用途的包装物，其中每个剂量含有约1g至15g、优选2g至10g、更优选3g至7g的所述人乳寡糖。

8.根据权利要求6或权利要求7所述的用途的包装物，其包括至少约21个日剂量；例如，约28个日剂量。

9.一种在非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性患者中预防性地降低症状严重性和/或发生率的方法，所述方法包括在食用小麦和/或麸质之前向所述患者施用有效量的至少一种人乳寡糖(FIMO)。

10.一种将小麦和/或麸质再引入患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者的饮食中的方法，所述方法包括在食用小麦和/或麸质之前向所述患者施用有效量的至少一种人乳寡糖(FIMO)。

11.一种在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者中，在将小麦和/或麸质再引入所述患者的饮食中时，降低发生或再次发生非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性症状的风险的方法，所述方法包括在食用小麦和/或麸质之前向所述患者施用有效量的至少一种人乳寡糖(HMO)。

12.根据权利要求9至11中任一项所述的方法，其中向所述患者每天施用2g至10g的量的所述HMO。

13.根据权利要求9至12中任一项所述的方法，其还包括在食用小麦和/或麸质之后，施用有效量的至少一种人乳寡糖。

14.根据权利要求9至13中任一项所述的方法，其中在食用小麦和/或麸质之前，施用所述人乳寡糖至少1周、更优选至少2周的时间段。

15.一种在患有非乳糜泻小麦和/或麸质敏感性的患者中降低非胃肠道症状的严重性和/或发生率的方法，所述方法包括向所述患者施用有效量的至少一种人乳寡糖(HMO)。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述非胃肠道症状是睡眠困难、头痛、精力不足、无法集中注意力、焦虑、抑郁和皮疹中的一种或多种。

17.根据权利要求15或权利要求16所述的方法，其中向所述患者每天施用2g至10g的量的所述HMO。

18.根据权利要求9至17中任一项所述的方法，其中在食用小麦和/或麸质之前的初始阶段期间，向人施用较高剂量，并且在食用小麦和/或麸质之后，施用较低维持剂量。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述较高剂量为每天约3g至约10g(例如每天约4g至约7.5g)，较低剂量为每天约2g至约7.5g(例如每天约2g至约5g)。

20.根据权利要求9至19中任一项所述的方法，其中所述人乳寡糖包括2’-FL、3-FL、DFL、LNT、LNnT、3’-SL、6’-SL、LNFP-I或其混合物。

21.根据权利要求20所述的方法，其中所述人乳寡糖为2’-FL和DFL中的至少一种，以及LNnT和LNT中的至少一种。