CN113817624A - 一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌及制备方法及其应用 - Google Patents
一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌及制备方法及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113817624A CN113817624A CN202010562296.1A CN202010562296A CN113817624A CN 113817624 A CN113817624 A CN 113817624A CN 202010562296 A CN202010562296 A CN 202010562296A CN 113817624 A CN113817624 A CN 113817624A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- root
- streptomyces
- streptomycete
- knot nematode
- phytopathogen
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 title claims abstract description 52
- 241000243785 Meloidogyne javanica Species 0.000 title claims abstract description 43
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 title claims abstract description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims abstract description 33
- 241001655322 Streptomycetales Species 0.000 claims abstract description 20
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims abstract description 20
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 15
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000003973 irrigation Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000002262 irrigation Effects 0.000 claims abstract description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 claims abstract description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims abstract description 4
- 241001446247 uncultured actinomycete Species 0.000 claims abstract description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 claims abstract 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 27
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 15
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 13
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 claims description 10
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 8
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 claims description 8
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 claims description 7
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 7
- 241000813090 Rhizoctonia solani Species 0.000 claims description 6
- 244000000005 bacterial plant pathogen Species 0.000 claims description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 6
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 5
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 claims description 5
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims description 4
- 241001133184 Colletotrichum agaves Species 0.000 claims description 4
- 244000241257 Cucumis melo Species 0.000 claims description 4
- 235000015510 Cucumis melo subsp melo Nutrition 0.000 claims description 4
- 229930189330 Streptothricin Natural products 0.000 claims description 4
- FJJCIZWZNKZHII-UHFFFAOYSA-N [4,6-bis(cyanoamino)-1,3,5-triazin-2-yl]cyanamide Chemical compound N#CNC1=NC(NC#N)=NC(NC#N)=N1 FJJCIZWZNKZHII-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 4
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 claims description 4
- NRAUADCLPJTGSF-VLSXYIQESA-N streptothricin F Chemical compound NCCC[C@H](N)CC(=O)N[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](OC(N)=O)[C@@H](CO)O[C@H]1\N=C/1N[C@H](C(=O)NC[C@H]2O)[C@@H]2N\1 NRAUADCLPJTGSF-VLSXYIQESA-N 0.000 claims description 4
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 claims description 3
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 claims description 3
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 claims description 3
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 claims description 3
- 102000012286 Chitinases Human genes 0.000 claims description 3
- 108010022172 Chitinases Proteins 0.000 claims description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 3
- 241000223221 Fusarium oxysporum Species 0.000 claims description 3
- 229910021380 Manganese Chloride Inorganic materials 0.000 claims description 3
- GLFNIEUTAYBVOC-UHFFFAOYSA-L Manganese chloride Chemical compound Cl[Mn]Cl GLFNIEUTAYBVOC-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 claims description 3
- 239000002647 aminoglycoside antibiotic agent Substances 0.000 claims description 3
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 claims description 3
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 claims description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 3
- 235000021552 granulated sugar Nutrition 0.000 claims description 3
- 230000036512 infertility Effects 0.000 claims description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims description 3
- 239000011565 manganese chloride Substances 0.000 claims description 3
- 229940099607 manganese chloride Drugs 0.000 claims description 3
- 235000002867 manganese chloride Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 3
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 claims description 3
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000003415 peat Substances 0.000 claims description 3
- 239000003910 polypeptide antibiotic agent Substances 0.000 claims description 3
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 claims description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 3
- 235000019710 soybean protein Nutrition 0.000 claims description 3
- JPFWJDMDPLEUBD-UHFFFAOYSA-N Polyoxin D Natural products OC1C(O)C(C(NC(=O)C(C(O)C(O)COC(N)=O)N)C(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C(C(O)=O)=C1 JPFWJDMDPLEUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 2
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- JPFWJDMDPLEUBD-ITJAGOAWSA-N polyoxorim Polymers O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H]([C@H](NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)COC(N)=O)N)C(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(C(O)=O)=C1 JPFWJDMDPLEUBD-ITJAGOAWSA-N 0.000 claims description 2
- 241000222199 Colletotrichum Species 0.000 claims 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 claims 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 abstract description 2
- 241000244206 Nematoda Species 0.000 description 9
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 7
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 241000545263 Salacia <hydroid> Species 0.000 description 5
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 5
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- IBSREHMXUMOFBB-JFUDTMANSA-N 5u8924t11h Chemical compound O1[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](OC)C[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](OC)C[C@H](O[C@@H]2C(=C/C[C@@H]3C[C@@H](C[C@@]4(O3)C=C[C@H](C)[C@@H](C(C)C)O4)OC(=O)[C@@H]3C=C(C)[C@@H](O)[C@H]4OC\C([C@@]34O)=C/C=C/[C@@H]2C)/C)O[C@H]1C.C1=C[C@H](C)[C@@H]([C@@H](C)CC)O[C@]11O[C@H](C\C=C(C)\[C@@H](O[C@@H]2O[C@@H](C)[C@H](O[C@@H]3O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](OC)C3)[C@@H](OC)C2)[C@@H](C)\C=C\C=C/2[C@]3([C@H](C(=O)O4)C=C(C)[C@@H](O)[C@H]3OC\2)O)C[C@H]4C1 IBSREHMXUMOFBB-JFUDTMANSA-N 0.000 description 3
- 239000005660 Abamectin Substances 0.000 description 3
- 240000007124 Brassica oleracea Species 0.000 description 3
- 235000003899 Brassica oleracea var acephala Nutrition 0.000 description 3
- 235000011301 Brassica oleracea var capitata Nutrition 0.000 description 3
- 235000001169 Brassica oleracea var oleracea Nutrition 0.000 description 3
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 3
- 241000508269 Psidium Species 0.000 description 3
- 229950008167 abamectin Drugs 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 2
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 description 2
- 241001143352 Meloidogyne Species 0.000 description 2
- 229930182764 Polyoxin Natural products 0.000 description 2
- 241000918585 Pythium aphanidermatum Species 0.000 description 2
- 241001052560 Thallis Species 0.000 description 2
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 2
- YEBIHIICWDDQOL-YBHNRIQQSA-N polyoxin Polymers O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](C(C=O)N)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(C(O)=O)=C1 YEBIHIICWDDQOL-YBHNRIQQSA-N 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 239000005959 Fosthiazate Substances 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 241000257303 Hymenoptera Species 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- 239000002169 Metam Substances 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 241000208292 Solanaceae Species 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- 230000000895 acaricidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000642 acaricide Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- DKVNPHBNOWQYFE-UHFFFAOYSA-N carbamodithioic acid Chemical compound NC(S)=S DKVNPHBNOWQYFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000012990 dithiocarbamate Substances 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- DUFVKSUJRWYZQP-UHFFFAOYSA-N fosthiazate Chemical compound CCC(C)SP(=O)(OCC)N1CCSC1=O DUFVKSUJRWYZQP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003958 fumigation Methods 0.000 description 1
- 230000007773 growth pattern Effects 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 239000002917 insecticide Substances 0.000 description 1
- HYVVJDQGXFXBRZ-UHFFFAOYSA-N metam Chemical compound CNC(S)=S HYVVJDQGXFXBRZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000005645 nematicide Substances 0.000 description 1
- 230000024121 nodulation Effects 0.000 description 1
- 239000003987 organophosphate pesticide Substances 0.000 description 1
- 230000017448 oviposition Effects 0.000 description 1
- 244000000003 plant pathogen Species 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 230000007226 seed germination Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
- A01N63/28—Streptomyces
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
本发明公开了一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌，从天然健康的土壤中，筛选出一株放线菌为萨拉赛链霉菌，其制备方法如下：1)先取萨拉赛链霉菌株菌落于改良的锥形细胞培养瓶进行培养，制备培养液；进行接种至麸皮、燕麦为主要载体上后发酵；干燥冷却。使用时以成品的0.2％对水，在定植前后、植物生长期间或病害发生初期，通过灌根、穴施或者与栽培基质混合等方式方式施用，能够帮助植物减少青枯病等病害威胁。
Description
技术领域
本发明涉及领域，特别是涉及一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌及制备方法及其应用。
背景技术
根结线虫(Meloidogyne)是一种植物寄生性害虫，能够广泛对多种蔬菜、茄科类等作物造成危害，据估计全球约有12.3％的作物因线虫的危害而遭受到损失。我国主要根结线虫因存活时间长，繁殖速度快，产卵量大，其卵和2龄幼虫随根瘤在土壤中或直接在土壤中越冬，在土壤中无寄主植物的情况下可存活3年之久，存活时间长。
而我国因线虫造成的危害超过2000万亩，每年农业损失超过700亿。由于长年的农药使用，导致土壤的微生物相失衡，病原微生物的抗药性越来越强，对作物造成的危害也越来越大。透过天然拮抗微生物制剂的施用减少农药的使用，利用微生物天然生物特性来降低土壤病虫害的危害，才能建立永续绿色的农业环境。
链霉菌是放线菌的一属，在土壤中分布极广，现有已知已有1000多种抗生素皆是由链霉属菌提炼而来如链霉素、四环霉素等，在土壤中可生产多种具生物活性分子的物质，不仅能够抑制病菌，并且还能保护植物根系健康，促进植物生长，在土壤中扮演着重要的角色。
根结线虫(Meloidogyne)是一种具高适应力的绝对寄生性植物病原，几乎可寄生在绝大部分的高等植物上，根结线虫寄生后的特点是被寄生部位的根系、叶片或茎部肿大成瘤状，因而得名根结线虫。作物被寄生后，作物根尖受感染后肿大根系减少，作物叶面逐渐呈现黄化，严重影响作物生长。除此之外，植物根系受感染后，易造成其他土壤病原病菌入侵，进一步造成植株的病害，因此对作物收成影响极大。线虫适应能力极强，只要地温高于10-15度，根结线虫皆可完成完整的生活史。尤其当土壤酸化(土壤值pH3-5)时，根结线虫的活动及繁殖力更为活跃，常常造成农民大面积的作物伤害，导致减产30-50％以上甚至绝收。
现在遇到土壤线虫的一般解决办法，是使用农药-阿维菌素，一种广谱性的杀虫、杀螨剂，然长久使用下来已造成线虫及多种病原菌的抗药性产生，且阿维菌素属高毒性农药，对蜜蜂及水生动物均有毒性。现在普遍使用方法为阿维菌素复配其他农药如噻唑膦(一种有机磷类杀虫剂)、威百亩(一种二硫代氨基甲酸酯类杀线虫剂)搭配熏蒸方式来杀线虫；然而持续加强农药施用非但无法彻底杀灭土壤中之线虫及病原菌，反而导致土壤生态毁灭、病原微生物抗药性越来越高，且有食品安全疑虑，是治标不治本之方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌，能够有效降低土壤中之线虫及病原菌的危害。
为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是：提供一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌，从天然健康的土壤中，筛选出一株放线菌为萨拉赛链霉菌。
一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌制备方法，其制备方法的步骤如下：
1)先取萨拉赛链霉菌株菌落于改良的锥形细胞培养瓶进行培养，制备培养液；
2)进行接种至麸皮、燕麦为主要载体上后发酵；
3)干燥冷却。
一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌的应用，使用时以成品的0.2％对水，在定植前后、植物生长期间或病害发生初期，通过灌根、穴施或者与栽培基质混合等方式方式施用，能够帮助植物减少青枯病等病害威胁。
进一步的是，所述1)制备培养液的步骤如下：萨拉赛链霉菌是先经液态摇瓶培养，以糖蜜5％,砂糖5％,大豆蛋白5％,碳酸钙1％,磷酸二氢钾0.5％,氯化锰0.02％为液体培养基，于37度C恒温，转速150rpm下，摇瓶培养7天，至每毫升萨拉赛链霉菌营养细胞浓度至108cfu/ml以上。
进一步的是，所述2)在进行固体发酵前，物料、细胞培养瓶及发酵箱须先进行灭菌处理，以确保为无菌状态。
进一步的是，所述2)以煮熟之麸皮85％、几丁聚糖5％为主原料，将主原料放置于细胞培养瓶中，并接种萨拉赛链霉菌10％，并将细胞培养瓶放入无菌发酵箱中，于无菌发酵箱中，通入无菌空气，通过无菌水，通气量为20-30L/min,温度控制在37度C，发酵3天后移至不锈钢无菌发酵罐中发酵，以麸皮20％、虾蟹壳粉20％、玉米芯15％、燕麦10％、蚵壳粉10％、泥炭土5％、接种萨拉赛链霉菌20％，于不锈钢发酵罐中发酵，发酵培养7天。
进一步的是，所述3)发酵完成后，随即经过2-4天的低温40度c冷却干燥至水分10％以下，去除水分的同时，并维持了菌体的高存活率。
进一步的是，所述培养生长期间定期抽样检测菌数活性、转孢情况以及pH值等参数。
进一步的是，所述萨拉赛链霉菌还对多种病原菌有抑制效果，如立枯丝核菌(R.solani)、炭疽病菌(C.gloeosporioides)、瓜类萎凋病(F.oxysporum)…等病原菌。
进一步的是，所述萨拉赛链霉菌产生丰富的二次代谢物质及多种胞外酵素以及多种天然抗生物质，如几丁质分解酵素(Chitinase)、纤维素酶(Cellulose)、淀粉酶、胺基糖苷类抗生素aminoglycosides，糖肽类抗生素glycopeptides如链丝菌素(streptothricin)、多抗霉素(polyoxinD)等。
本发明的有益效果是：本发明的一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌，能够在定植前后、植物生长期间或病害发生初期，通过灌根、穴施或者与栽培基质混合等方式施用，能够帮助植物减少青枯病等病害威胁。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明中记载的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌及制备方法及其应用的萨拉赛链霉菌对抗瓜类萎凋病之拮抗试验图；
图2是本发明一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌及制备方法及其应用的萨拉赛链霉菌对抗稻米粒枯病之拮抗试验图；
图3为本发明一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌及制备方法及其应用的萨拉赛链霉菌对抗西红柿青枯病之拮抗试验图；
图4为本发明一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌及制备方法及其应用的萨拉赛链霉菌于几丁聚糖培养基上之生长情形图；
图5为本发明一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌及制备方法及其应用的萨拉赛链霉菌菌落生长型态图；
图6为本发明一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌的不同浓度处理甘蓝幼苗猝倒病之防治效果；
图7为本发明一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌的不同浓度处理甘蓝幼苗立枯病之防治效果；
图8为本发明一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌使用对根结线虫密度的影响；
图9为番石榴树干基部之膨大之结瘤情形图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面结合附图对本发明的具体实施方式进行详细说明。这些优选实施方式的示例在附图中进行了例示。附图中所示和根据附图描述的本发明的实施方式仅仅是示例性的，并且本发明并不限于这些实施方式。
在此，还需要说明的是，为了避免因不必要的细节而模糊了本发明，在附图中仅仅示出了与根据本发明的方案密切相关的结构和/或处理步骤，而省略了与本发明关系不大的其他细节。
以及，在本发明的描述中，术语“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
请参阅图1至图9，本发明实施例包括：
一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌，从天然健康的土壤中，筛选出一株放线菌为萨拉赛链霉菌。
一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌制备方法，其制备方法的步骤如下：
1)先取萨拉赛链霉菌株菌落于改良的锥形细胞培养瓶进行培养，制备培养液；
2)进行接种至麸皮、燕麦为主要载体上后发酵；
3)干燥冷却。
进一步的是，所述1)制备培养液的步骤如下：萨拉赛链霉菌是先经液态摇瓶培养，以糖蜜5％，砂糖5％，大豆蛋白5％，碳酸钙1％，磷酸二氢钾0.5％，氯化锰0.02％为液体培养基，于37度C恒温，转速150rpm下，摇瓶培养7天，至每毫升萨拉赛链霉菌营养细胞浓度至108cfu/ml以上。
进一步的是，所述2)在进行固体发酵前，物料、细胞培养瓶及发酵箱须先进行灭菌处理，以确保为无菌状态。
进一步的是，所述2)以煮熟之麸皮85％、几丁聚糖5％为主原料，将主原料放置于细胞培养瓶中，并接种萨拉赛链霉菌10％，并将细胞培养瓶放入无菌发酵箱中，于无菌发酵箱中，通入无菌空气，通过无菌水，通气量为20-30L/min，温度控制在37度C，发酵3天后移至不锈钢无菌发酵罐中发酵，以麸皮20％、虾蟹壳粉20％、玉米芯15％、燕麦10％、蚵壳粉10％、泥炭土5％、接种萨拉赛链霉菌20％，于不锈钢发酵罐中发酵，发酵培养7天。
进一步的是，所述3)发酵完成后，随即经过2-4天的低温40度c冷却干燥至水分10％以下，去除水分的同时，并维持了菌体的高存活率。
进一步的是，所述培养生长期间定期抽样检测菌数活性、转孢情况以及pH值等参数。
一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌的应用，使用时以成品的0.2％对水，在定植前后、植物生长期间或病害发生初期，通过灌根、穴施或者与栽培基质混合等方式方式施用，能够帮助植物减少青枯病等病害威胁。
萨拉赛链霉菌还对多种病原菌有抑制效果，如立枯丝核菌(R.solani)、炭疽病菌(C.gloeosporioides)、瓜类萎凋病(F.oxysporum)…等病原菌。
萨拉赛链霉菌对抗不同病原菌之拮抗试验
萨拉赛链霉菌处理对甘蓝种子发芽率与立枯病罹病率之影响
萨拉赛链霉菌产生丰富的二次代谢物质及多种胞外酵素以及多种天然抗生物质，如几丁质分解酵素(Chitinase)、纤维素酶(Cellulose)、淀粉酶、胺基糖苷类抗生素aminoglycosides，糖肽类抗生素glycopeptides如链丝菌素(streptothricin)、多抗霉素(polyoxinD)等。
试验作物：番石榴
试验方法：将实验分为2组，一组为实验组A，一组为对照组B
A.萨拉赛链霉菌土壤处理，每株浇灌萨拉赛链霉菌发酵菌液200x稀释液1000ml，B.未处理对照组，每组重复15棵植株。后按周采集番石榴根圈土壤，依照改良型柏门氏漏斗线虫分离法进行根结线虫二龄幼虫数计数取平均值(单位为虫数/100公克土壤)，作为虫数消长评估指标依据。
线虫数量之检视办法：以100公克土壤或介质为单位，于60孔目网筛上，静置清水24小时后，将指形管中收集之线土倒入镜检皿中检视二龄幼虫之数量。
试验结果：经15周之试验与数据分析结果，显示土壤经萨拉赛链霉菌处理后，可大幅降低根结线虫二龄幼虫密度。由最初检测之根结线虫二龄幼虫密度达每100公克土壤94只二龄幼虫，植株树干基部处可见膨大之结瘤情形，显示根结线虫发生已相当严重，经每2周施用一次萨拉赛链霉菌，至第15周根结线虫二龄幼虫密度已降至每100公克土壤5只二龄幼虫，植株亦恢复生机，与对照组每100公克土壤117只二龄幼虫相较下有显著差异，亦较原来虫体密度降低约3倍降至危害水平之下。
萨拉赛链霉菌处理土壤放线菌之密度变化
此外，需要说明的是，在本说明书中，“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。
应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
Claims (10)
1.一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌，其特征在于从天然健康的土壤中，筛选出一株放线菌为萨拉赛链霉菌。
2.一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌制备方法，其制备方法的步骤如下：
1)先取萨拉赛链霉菌株菌落于改良的锥形细胞培养瓶进行培养，制备培养液；
2)进行接种至麸皮、燕麦为主要载体上后发酵；
3)干燥冷却。
3.一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌的应用，其特征在于：使用时以成品的0.2％对水，在定植前后、植物生长期间或病害发生初期，通过灌根、穴施或者与栽培基质混合等方式方式施用，能够帮助植物减少青枯病等病害威胁。
4.根据权利要求2所述的一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌制备方法，其特征在于所述1)制备培养液的步骤如下：萨拉赛链霉菌是先经液态摇瓶培养，以糖蜜5％,砂糖5％,大豆蛋白5％,碳酸钙1％,磷酸二氢钾0.5％,氯化锰0.02％为液体培养基，于37度C恒温，转速150rpm下，摇瓶培养7天，至每毫升萨拉赛链霉菌营养细胞浓度至108cfu/ml以上。
5.根据权利要求2所述的一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌制备方法，其特征在于所述2)在进行固体发酵前，物料、细胞培养瓶及发酵箱须先进行灭菌处理，以确保为无菌状态。
6.根据权利要求2所述的一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌制备方法，其特征在于所述2)以煮熟之麸皮85％、几丁聚糖5％为主原料，将主原料放置于细胞培养瓶中，并接种萨拉赛链霉菌10％，并将细胞培养瓶放入无菌发酵箱中，于无菌发酵箱中，通入无菌空气，通过无菌水，通气量为20-30L/min,温度控制在37度C，发酵3天后移至不锈钢无菌发酵罐中发酵，以麸皮20％、虾蟹壳粉20％、玉米芯15％、燕麦10％、蚵壳粉10％、泥炭土5％、接种萨拉赛链霉菌20％，于不锈钢发酵罐中发酵，发酵培养7天。
7.根据权利要求2所述的一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌制备方法，其特征在于所述3)发酵完成后，随即经过2-4天的低温40度c冷却干燥至水分10％以下，去除水分的同时，并维持了菌体的高存活率。
8.根据权利要求2所述的一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌制备方法，其特征在于：所述培养生长期间定期抽样检测菌数活性、转孢情况以及pH值等参数。
9.根据权利要求3所述的一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌的应用，其特征在于：所述萨拉赛链霉菌还对多种病原菌有抑制效果，如立枯丝核菌(R.solani)、炭疽病菌(C.gloeosporioides)、瓜类萎凋病(F.oxysporum)…等病原菌。
10.根据权利要求1所述的一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌，其特征在于：所述萨拉赛链霉菌产生丰富的二次代谢物质及多种胞外酵素以及多种天然抗生物质，如几丁质分解酵素(Chitinase)、纤维素酶(Cellulose)、淀粉酶、胺基糖苷类抗生素aminoglycosides，糖肽类抗生素glycopeptides如链丝菌素(streptothricin)、多抗霉素(polyoxin D)等。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010562296.1A CN113817624A (zh) | 2020-06-19 | 2020-06-19 | 一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌及制备方法及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010562296.1A CN113817624A (zh) | 2020-06-19 | 2020-06-19 | 一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌及制备方法及其应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113817624A true CN113817624A (zh) | 2021-12-21 |
Family
ID=78924437
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010562296.1A Pending CN113817624A (zh) | 2020-06-19 | 2020-06-19 | 一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌及制备方法及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113817624A (zh) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5549889A (en) * | 1992-04-13 | 1996-08-27 | Research Corporation Technologies, Inc. | Nematocidal and fungicidal Streptomyces dicklowii biopesticide |
| CN101508968A (zh) * | 2009-03-06 | 2009-08-19 | 中国农业大学 | 一种防治植物寄生线虫的生物药剂及其应用 |
| CN101790995A (zh) * | 2010-02-08 | 2010-08-04 | 广东省农业科学院植物保护研究所 | 一种防治花生根结线虫的生物制剂及其制备方法与应用 |
| CN104684388A (zh) * | 2012-08-24 | 2015-06-03 | 拜尔农作物科学股份公司 | 包含杀虫萜烯混合物和生物防治剂的组合物 |
| US20160081335A1 (en) * | 2013-04-19 | 2016-03-24 | Bayer Cropscience Aktiengesellshaft | Binary insecticidal or pesticidal mixture |
-
2020
- 2020-06-19 CN CN202010562296.1A patent/CN113817624A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5549889A (en) * | 1992-04-13 | 1996-08-27 | Research Corporation Technologies, Inc. | Nematocidal and fungicidal Streptomyces dicklowii biopesticide |
| CN101508968A (zh) * | 2009-03-06 | 2009-08-19 | 中国农业大学 | 一种防治植物寄生线虫的生物药剂及其应用 |
| CN101790995A (zh) * | 2010-02-08 | 2010-08-04 | 广东省农业科学院植物保护研究所 | 一种防治花生根结线虫的生物制剂及其制备方法与应用 |
| CN104684388A (zh) * | 2012-08-24 | 2015-06-03 | 拜尔农作物科学股份公司 | 包含杀虫萜烯混合物和生物防治剂的组合物 |
| US20160081335A1 (en) * | 2013-04-19 | 2016-03-24 | Bayer Cropscience Aktiengesellshaft | Binary insecticidal or pesticidal mixture |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106399159B (zh) | 一种坚强芽孢杆菌菌剂及其制备方法与应用 | |
| CN110628664B (zh) | 防治根结线虫的远东假单胞菌及其制备方法与应用 | |
| CN113980877B (zh) | 一种复配微生物菌剂及其制备方法 | |
| CN104130958B (zh) | 一株枯草芽孢杆菌及其在防治牡丹根结线虫病上的应用 | |
| CN102212485A (zh) | 一种长柄木霉及其在防治蔬菜病害中的应用 | |
| CN105176828A (zh) | 球孢白僵菌XNBb-04菌株及其培养方法 | |
| CN106754426B (zh) | 一种棘孢木霉及其应用 | |
| CN102021122B (zh) | 一种高效杀虫真菌及其用途 | |
| CN117903951B (zh) | 一株淡紫拟青霉jbc033及其菌剂与应用 | |
| WO2017107872A1 (zh) | 一种微生物诱捕剂及应用 | |
| CN105238709A (zh) | 一株具有杀根结线虫活性的海洋放线菌及其应用 | |
| CN101054566B (zh) | 一种甘蓝枯萎病的生防制剂及其制备方法和专用菌株 | |
| CN109880764A (zh) | 一株贝莱斯芽孢杆菌及其在防治苹果病害中的应用 | |
| CN108396002B (zh) | 一株地衣芽孢杆菌及其在防治甜瓜枯萎病中的应用 | |
| CN103087946A (zh) | 一种微生物菌株及其应用 | |
| CN112063543B (zh) | 一种产脲酶细菌及其在制备用于防治烟草根结线虫病的菌剂中的应用 | |
| CN117925459B (zh) | 一株甘蔗内生粘质沙雷氏菌及其应用 | |
| CN108315268B (zh) | 一种淡紫拟青霉菌株及其应用 | |
| CN113817624A (zh) | 一种具拮抗根结线虫及植物病原菌的链霉菌及制备方法及其应用 | |
| CN110724640B (zh) | 番茄根结线虫生防菌、其制剂及其应用 | |
| CN109082389B (zh) | 一种兼具生物肥料与生物农药潜力的土壤链霉菌 | |
| CN108102992A (zh) | 一株金橙黄微小杆菌及其在防治番茄根结线虫中的应用 | |
| CN106635881A (zh) | 一株具有抑菌活性的致病杆菌菌株sn84及代谢物和其代谢物应用 | |
| CN1775942A (zh) | 一种捕食线虫真菌菌株及制备方法 | |
| CN120905095B (zh) | 一株贝莱斯芽孢杆菌菌株jz01、包含其的菌剂及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20211221 |
|
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |