CN111904973B - ssc-miR-122在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用 - Google Patents
ssc-miR-122在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111904973B CN111904973B CN202010729733.4A CN202010729733A CN111904973B CN 111904973 B CN111904973 B CN 111904973B CN 202010729733 A CN202010729733 A CN 202010729733A CN 111904973 B CN111904973 B CN 111904973B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- mir
- ssc
- replication
- respiratory syndrome
- virus
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 108091053965 Sus scrofa miR-122 stem-loop Proteins 0.000 title claims abstract description 56
- 241001135989 Porcine reproductive and respiratory syndrome virus Species 0.000 title claims abstract description 38
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 19
- 230000010076 replication Effects 0.000 title claims abstract description 18
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 title abstract description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 12
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims abstract description 7
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract description 9
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 abstract description 9
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 abstract description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 6
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 abstract description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 abstract description 3
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 abstract description 2
- 230000002155 anti-virotic effect Effects 0.000 abstract 2
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 abstract 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 39
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 23
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 16
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 14
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 13
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 10
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 239000012124 Opti-MEM Substances 0.000 description 6
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 5
- 101710087110 ORF6 protein Proteins 0.000 description 3
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 3
- 101710095001 Uncharacterized protein in nifU 5'region Proteins 0.000 description 3
- 210000001132 alveolar macrophage Anatomy 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 3
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 3
- 208000005342 Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 238000011530 RNeasy Mini Kit Methods 0.000 description 2
- 238000005034 decoration Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 108091027963 non-coding RNA Proteins 0.000 description 2
- 102000042567 non-coding RNA Human genes 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000005723 virus inoculator Substances 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 206010038687 Respiratory distress Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 230000007416 antiviral immune response Effects 0.000 description 1
- 239000010242 baoji Substances 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 238000010805 cDNA synthesis kit Methods 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000000274 microglia Anatomy 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 230000006394 virus-host interaction Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/7105—Natural ribonucleic acids, i.e. containing only riboses attached to adenine, guanine, cytosine or uracil and having 3'-5' phosphodiester links
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Virology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及ssc‑miR‑122在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用，属于抗病毒药物技术领域。本发明提供了ssc‑miR‑122在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用，所述ssc‑miR‑122的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明为研究抗PRRSV病毒复制的药物提供了新的靶标，为进一步开发新的抗病毒策略奠定了基础，也为PRRSV感染后宿主抗病毒机制研究提供了候选miRNA。
Description
技术领域
本发明涉及抗病毒药物技术领域，具体涉及ssc-miR-122在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用。
背景技术
微小非编码RNA(miRNA)是一类长度为20～25个核苷酸(nt)的内源性小非编码RNA，是基因表达的重要调控因子，通过识别互补序列靶元素，在转录后水平通过抑制mRNA翻译或诱导mRNA降解来调控基因表达。miRNA几乎参与调控了各个领域的所有细胞生命活动的发生，在哺乳动物中它们可能负责调控约50％的编码基因。最近的证据表明，在病毒感染和宿主天然免疫中，miRNA也发挥着重要作用，参与病毒与宿主的互作。
猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive And Respiratory Syndrome，PRRS)，以引起母猪繁殖障碍、仔猪和生长育肥猪呼吸困难为主要特征的接触性传染病。它的病原猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)，是一种单股正链RNA病毒，主要感染猪肺泡巨噬细胞(PAM)、成熟单核细胞、小胶质细胞等抗原递呈细胞，抑制宿主抗病毒免疫反应。传统的疫苗不能有效的防控，迫切需要发展新的抗病毒策略。
发明内容
本发明的目的在于提供ssc-miR-122在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用。本发明为研究抗PRRSV病毒复制的药物提供了新的靶标，为进一步开发新的抗病毒策略奠定了基础，也为PRRSV感染后宿主抗病毒机制研究提供了候选miRNA。
本发明提供了ssc-miR-122在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用，所述ssc-miR-122的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提供了增加ssc-miR-122表达量的物质在制备拮抗猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用，所述ssc-miR-122的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明提供了ssc-miR-122在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用。试验结果表明，在PAM细胞中增加ssc-miR-122的表达量可以抑制PRRSV复制，减少该miRNA的表达量可以促进PRRSV复制。本发明为研究抗PRRSV病毒复制的药物提供了新的靶标，为进一步开发新的抗病毒策略奠定了基础，也为PRRSV感染后宿主抗病毒机制研究提供了候选miRNA。
附图说明
图1为本发明提供的PAM细胞以MOI为0.5接种GSWW/2015毒株，24小时后提取总miRNA，实时荧光定量PCR结果。
图2为本发明提供的PAM细胞中分别转染NC和ssc-miR-122的模拟物，24小时后提取细胞总miRNA，实时荧光定量PCR结果。
图3为本发明提供的PAM细胞中分别转染NC和ssc-miR-122抑制剂，24小时后提取细胞总miRNA，实时荧光定量PCR结果。
图4为本发明提供的PAM细胞中分别转染NC和ssc-miR-122模拟物，24小时后以MOI为0.5接种GSWW/2015毒株，感染24小时后提取总RNA，实时荧光定量PCR结果。
图5为本发明提供的PAM细胞中分别转染NC和ssc-miR-122抑制剂，24小时后以MOI为0.5接种GSWW/2015毒株，感染24小时后提取总RNA，实时荧光定量PCR结果。
具体实施方式
本发明提供了ssc-miR-122在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用，所述ssc-miR-122的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示(UGGAGUGUGACAAUGGUGUUUGU)。
本发明还提供了增加ssc-miR-122表达量的物质在制备拮抗猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用，所述ssc-miR-122的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。感染PPRSV毒株24小时后，ssc-miR-122在猪肺泡巨噬细胞(PAM)中的表达量下降。在PAM细胞中增加ssc-miR-122的表达量(ssc-miR-122模拟物，SEQ ID NO.1，UGGAGUGUGACAAUGGUGUUUGU)可以抑制PRRSV复制，减少该miRNA的表达量(ssc-miR-122抑制剂，SEQ ID NO.2，ACAAACACCAUUGUCACACUCCA)可以促进PRRSV复制。本发明为研究拮抗PRRSV病毒复制的药物提供了新靶标，也为深入认识PRRSV感染后宿主抗病毒信号通路提供了候选miRNA。
下面结合具体实施例对本发明所述的ssc-miR-122在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用做进一步详细的介绍，本发明的技术方案包括但不限于以下实施例。
实施例1
猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM)分离：选取1月龄内的PRRSV阴性健康猪，麻醉处死后无菌分离肺脏，用无菌PBS缓冲液灌洗肺脏。将收集的灌洗液400g离心10分钟后弃去上清，加入50mL PBS缓冲液重悬沉淀细胞，重复2次后收集沉淀细胞，用含10％FBS的RPMI-1640完全培养基重悬细胞，接种于12孔板，37℃温箱培养(或以1×107个细胞/mL冻存)。贴壁细胞即为PAM，培养6小时左右，更换含10％FBS的新鲜RPMI-1640完全培养基。
病毒接种：将GSWW/2015毒株(Weijie B,Zhijia W,Pu S,et al.The molecularcharacteristic analysis of PRRSV GSWW/2015 strain and its pathogenicity topigs[J].BMC Veterinary Research,2018,14(1):240，GSWW/2015毒株的NCBI登录号为：KX767091)以MOI为0.5接种于PAM细胞，同时设未接病毒Mock对照，补充含2％FBS的RPMI-1640培养基至1mL，于细胞培养箱进行培养。
总miRNA提取，第一链cDNA合成及实时荧光定量PCR：接毒后24小时收集细胞，用Qiagen miRNeasy Mini Kit提取总miRNA。采用广州易锦生物技术有限公司的All-in OneTMmiRNA First-Strand cDNA Synthesis Kit反转录总miRNA，每25μL体系加入500ng总miRNA；反转录程序为37℃60分钟，85℃ 5分钟；以反转录得到的cDNA为荧光定量PCR的模板；引物稀释为10μM；采用广州易锦生物技术有限公司的All-in OneTM miRNA qPCR kit并根据说明书配置体系和和设定程序；根据荧光定量PCR实验的Ct值，以U6为内参，用
公式计算出接毒组和对照组之间的ssc-miR-122分子表达变化倍数。如图1(PAM细胞以MOI为0.5接种GSWW/2015毒株，24小时后提取总miRNA，实时荧光定量PCR结果)所示，RT-QPCR结果显示ssc-miR-122在GSSWW/2015感染的PAM细胞中下调表达。ssc-miR-122上游引物序见SEQ ID NO.3(CTGTGGAGTGTGACAATGGTGTTTGT)，U6上游引物序列见SEQ ID NO.4(CTCGCTTCGGCAGCACA)，通用下游引物序列见SEQ ID NO.5(AACGCTTCACGAATTTGCGT)。
ssc-miR-122模拟物增加ssc-miR-122在PAM细胞中的表达。将2.5μL 100μM的ssc-miR-122模拟物和NC(阴性对照)模拟物(uuguacuacacaaaaguacug，SEQ ID NO.9，由吉玛公司合成)分别加入125μL Opti-MEM培养基中混匀，将2.5μl Lipofectamine 3000Reagent加入125μL Opti-MEM培养基中混匀，室温静置5分钟；将稀释好的模拟物溶液与Lipofectamine 3000Reagent充分混匀，室温静置15分钟；用Opti-MEM培养基润洗预先接种在12孔板的PAM细胞，接着将模拟物和脂质体的混合液加入各孔细胞中，最后补加745μL10％FBS RPMI-1640培养基，轻轻摇晃。最终于细胞培养箱培养，24小时后收集细胞。提取总miRNA，进行反转录，用实时荧光定量PCR检测ssc-miR-122表达水平。如图2(PAM细胞中分别转染NC和ssc-miR-122的模拟物，24小时后提取细胞总miRNA，实时荧光定量PCR结果)所示，转染ssc-miR-122的模拟物后，ssc-miR-122的表达量增加极其显著。
ssc-miR-122抑制剂减少ssc-miR-122在PAM细胞中的表达。将1.25μL 100μM的ssc-miR-122抑制剂和NC(阴性对照)抑制剂(CAGUACUUUUGUGUAGUACAA，SEQ ID NO.10由吉玛公司合成)分别加入125μL Opti-MEM培养基中混匀，将1.25μl Lipofectamine3000Reagent加入入125μL Opti-MEM培养基中混匀，室温静置5分钟；将稀释好的抑制剂溶液与Lipofectamine 3000Reagent充分混匀，室温静置15分钟；用Opti-MEM培养基润洗预先接种在12孔板的PAM细胞，接着将抑制剂和脂质体的混合液加入各孔细胞中，最后补加747.5μL 10％FBS RPMI-1640培养基，轻轻摇晃。最终于37℃恒温、5％CO2的温箱培养，24小时后收集细胞。提取总miRNA，进行反转录，用实时荧光定量PCR检测ssc-miR-122表达水平。如图3(PAM细胞中分别转染NC和ssc-miR-122抑制剂，24小时后提取细胞总miRNA，实时荧光定量PCR结果)所示，转染ssc-miR-122的抑制剂后，ssc-miR-122的表达量减少极其显著。
增加ssc-miR-122的表达量对PRRSV复制的影响。PAM细胞以50nM浓度转染ssc-miR-122模拟物和阴性对照模拟物，24小时后，以MOI为0.5的GSWW/2015接种细胞，24小时后收获病毒，弃上清后收集细胞，用Qiagen RNeasy Mini Kit提取总RNA；利用宝生物工程(大连)有限公司的试剂盒(RR036A)反转录，然后用实时荧光定量PCR测定PRRSV病毒ORF6的表达量，以GAPDH为内参计算PRRSV ORF6 mRNA相对表达量。PRRSV ORF6上下游引物序列分别见序列表SEQ ID NO.6(CGGCAAATGATAACCACGC)和SEQ ID NO.7(TTCTGCCACCCAACACGAG)。如图4(PAM细胞中分别转染NC和ssc-miR-122模拟物，24小时后以MOI为0.5接种GSWW/2015毒株，感染24小时后提取总RNA，实时荧光定量PCR结果)所示，增加ssc-miR-122表达量的PAM细胞中，PRRSV的复制水平下降。ssc-miR-122有抑制病毒复制的功能。
减少ssc-miR-122的表达量对PRRSV复制的影响。PAM细胞以25nM浓度转染ssc-miR-122抑制剂和阴性对照抑制剂，24小时后，以MOI为0.5的GSWW/2015接种细胞，24小时后收获病毒，弃上清后收集细胞，用Qiagen RNeasy Mini Kit提取总RNA；利用宝生物工程(大连)有限公司的试剂盒(RR064A)绝对定量PCR测定PRRSV病毒的拷贝数，PRRSV探针序列见序列表SEQ ID NO.8(TGTGCCGTTRACCGTAGTGGAGCC)。如图5(PAM细胞中分别转染NC和ssc-miR-122抑制剂，24小时后以MOI为0.5接种GSWW/2015毒株，感染24小时后提取总RNA，实时荧光定量PCR结果)所示，减少ssc-miR-122表达的PAM细胞中，PRRSV的复制水平上升。提示ssc-miR-122有抑制病毒复制的功能。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
序列表
<110> 中国农业科学院兰州兽医研究所
<120> ssc-miR-122在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用
<160> 10
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 23
<212> RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
uggaguguga caaugguguu ugu 23
<210> 2
<211> 23
<212> RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
acaaacacca uugucacacu cca 23
<210> 3
<211> 26
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
ctgtggagtg tgacaatggt gtttgt 26
<210> 4
<211> 17
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
ctcgcttcgg cagcaca 17
<210> 5
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
aacgcttcac gaatttgcgt 20
<210> 6
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
cggcaaatga taaccacgc 19
<210> 7
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 7
ttctgccacc caacacgag 19
<210> 8
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 8
tgtgccgttr accgtagtgg agcc 24
<210> 9
<211> 21
<212> RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 9
uuguacuaca caaaaguacu g 21
<210> 10
<211> 21
<212> RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 10
caguacuuuu guguaguaca a 21
Claims (1)
1. ssc-miR-122作为唯一活性成分在制备拮抗猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV复制的药物中的应用，所述ssc-miR-122的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010729733.4A CN111904973B (zh) | 2020-07-27 | 2020-07-27 | ssc-miR-122在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010729733.4A CN111904973B (zh) | 2020-07-27 | 2020-07-27 | ssc-miR-122在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111904973A CN111904973A (zh) | 2020-11-10 |
| CN111904973B true CN111904973B (zh) | 2021-12-03 |
Family
ID=73281101
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010729733.4A Active CN111904973B (zh) | 2020-07-27 | 2020-07-27 | ssc-miR-122在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111904973B (zh) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115068611B (zh) * | 2022-06-24 | 2023-04-18 | 天津市农业科学院 | ssc-miR-374b-3p在制备抗PDCoV增殖药物中的应用 |
| CN115161321B (zh) * | 2022-06-24 | 2023-04-18 | 天津市农业科学院 | ssc-miR-30c-3p在制备抗PDCoV增殖药物中的应用 |
| CN119113117B (zh) * | 2024-09-13 | 2025-08-01 | 中国农业科学院农业基因组研究所 | 抑制miR-1386-z表达的试剂在制备预防和/或治疗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的药物中的应用 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110382692A (zh) * | 2016-04-19 | 2019-10-25 | 博德研究所 | 新型crispr酶以及系统 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PT1747023E (pt) * | 2004-05-04 | 2011-04-11 | Univ Leland Stanford Junior | Métodos e composições para reduzir quantidades de genoma viral numa célula alvo |
| CA2728816A1 (en) * | 2008-06-27 | 2009-12-30 | Novartis Forschungsstiftung Zweigniederlassung Friedrich Miescher Instit Ute For Biomedical Research | Prediction of antiviral therapy response |
| CA2989830A1 (en) * | 2015-06-18 | 2016-12-22 | The Broad Institute, Inc. | Crispr enzyme mutations reducing off-target effects |
| CN107828788B (zh) * | 2017-11-02 | 2020-03-27 | 中国农业科学院兰州兽医研究所 | 一种PRRSV感染相关的lncRNA及其siRNA在抑制病毒复制中的应用 |
-
2020
- 2020-07-27 CN CN202010729733.4A patent/CN111904973B/zh active Active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110382692A (zh) * | 2016-04-19 | 2019-10-25 | 博德研究所 | 新型crispr酶以及系统 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN111904973A (zh) | 2020-11-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111904973B (zh) | ssc-miR-122在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用 | |
| CN111840310B (zh) | ssc-miR-151-3p在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用 | |
| CN110885823B (zh) | 一种长链非编码RNA猪Lnc-000649及其应用 | |
| Li et al. | Gga-miR-30d regulates infectious bronchitis virus infection by targeting USP47 in HD11 cells | |
| Zhao et al. | gga-miR-21 modulates Mycoplasma gallisepticum (HS strain)-Induced inflammation via targeting MAP3K1 and activating MAPKs and NF-κB pathways | |
| CN117281824B (zh) | Trim基因的过表达剂在制备抑制猪塞内卡病毒复制的产品中的应用 | |
| CN107828788B (zh) | 一种PRRSV感染相关的lncRNA及其siRNA在抑制病毒复制中的应用 | |
| Najib et al. | Viral hemorrhagic septicemia virus (VHSV) infection-mediated sequential changes in microRNAs profile of Epithelioma papulosum cyprini (EPC) cells | |
| Sui et al. | Integrated miRNA and mRNA expression profiles reveal differentially expressed miR-222a as an antiviral factor against duck hepatitis a virus type 1 infection | |
| Zhang et al. | Downregulation of miR-122 by porcine reproductive and respiratory syndrome virus promotes viral replication by targeting SOCS3 | |
| CN102453699A (zh) | 悬浮培养敏感细胞及利用其生产蓝耳病疫苗的方法 | |
| CN114540309A (zh) | 一种用于高效扩增rna病毒的重组细胞及其扩增方法和应用 | |
| Nafeez Ahmed et al. | Development and characterization of brain cell line from Trachinotus blochii and its application in virological and gene expression studies | |
| US9909127B2 (en) | Inhibitor for inhibiting avian influenza virus and a pharmaceutical composition containing the same | |
| Gao et al. | MiR-361 and miR-34a suppress foot-and-mouth disease virus proliferation by activating immune response signaling in PK-15 cells | |
| Fang et al. | Design of miRNA sponges for MDV-1 as a therapeutic strategy against lymphomas | |
| CN111676222A (zh) | 抑制Mettl3基因表达的shRNA及其重组腺相关病毒与应用 | |
| CN115068611B (zh) | ssc-miR-374b-3p在制备抗PDCoV增殖药物中的应用 | |
| CN102234687A (zh) | 抑制锌指蛋白ZBTB20的miRNA或其前体的应用 | |
| CN117467625A (zh) | 乌鳢水泡病毒传代致弱毒株及其应用 | |
| Sahare et al. | Inhibition of infectious bursal disease virus by vector delivered SiRNA in cell culture | |
| CN108531485B (zh) | 猪miR-27b-3p作为猪蓝耳病病毒抑制物的应用 | |
| CN116064557B (zh) | 激活猪的ogfod2基因表达的制剂在制备猪抗伪狂犬病毒感染药物中的应用 | |
| CN112063620A (zh) | 抑制猪流行性腹泻病毒M基因表达的shRNA | |
| CN116059371B (zh) | 激活猪的vash2基因表达的制剂在制备猪抗伪狂犬病毒感染药物中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |