[go: up one dir, main page]

CN111867589A - 在对象中治疗肿瘤的化合物及其用途 - Google Patents

在对象中治疗肿瘤的化合物及其用途 Download PDF

Info

Publication number
CN111867589A
CN111867589A CN201980018987.0A CN201980018987A CN111867589A CN 111867589 A CN111867589 A CN 111867589A CN 201980018987 A CN201980018987 A CN 201980018987A CN 111867589 A CN111867589 A CN 111867589A
Authority
CN
China
Prior art keywords
cancer
inhibitor
atm
topoisomerase
immune system
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201980018987.0A
Other languages
English (en)
Inventor
A·齐默尔曼
M·J·奥尔蒂斯鲁伊斯
H·达门
T·格龙巴赫尔
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Merck Patent GmbH
Pfizer Corp SRL
Original Assignee
Merck Patent GmbH
Pfizer Corp SRL
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Merck Patent GmbH, Pfizer Corp SRL filed Critical Merck Patent GmbH
Publication of CN111867589A publication Critical patent/CN111867589A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

本发明涉及可以用于诱导免疫原性细胞死亡(ICD)的化合物。在一些情况下，两种或更多种化合物被组合以诱导ICD。本发明还涉及ICD诱导化合物与刺激免疫系统的药剂(如免疫检查点抑制剂)的组合，特别是用于治疗癌症或抑制肿瘤生长。

Description

在对象中治疗肿瘤的化合物及其用途
技术领域
本发明涉及用于诱导免疫原性细胞死亡的化合物。本发明还涉及用于治疗肿瘤的联合疗法。特别地，本发明涉及拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂的联合施用。还公开了包括这些化合物的组合物和试剂盒。
背景技术
免疫原性细胞死亡(ICD)是一种可以触发免疫应答的细胞死亡形式。ICD的特征是从濒死细胞释放危险信号，其被称为损伤相关分子模式(DAMP)。重要的DAMP包括膜表面上的CALR、PDIA3、HSP70和HSP90的暴露以及从濒死细胞的HMGB1和ATP的释放。然后，这些DAMP触发免疫应答，例如通过与抗原呈递细胞(APC)上的模式识别受体(PRR)相互作用。
已经观察到癌症治疗的子集，如奥沙利铂和放疗，可以触发癌细胞的ICD，并且ICD被理解有助于该疗法的抗肿瘤作用。重要地，ICD刺激免疫系统攻击癌症，并因而提供针对癌症复发和转移的长效保护。仍然需要进一步鉴别可以促进ICD的药物。
发明内容
本文提供了诱导ICD的方法，例如治疗肿瘤，优选癌症，所述方法包括向对象施用拓扑异构酶抑制剂。任选地，将拓扑异构酶抑制剂与ATM(共济失调毛细血管扩张突变基因)抑制剂和/或刺激免疫系统的药剂一起施用。
本文还提供了治疗肿瘤(优选癌症)的方法，所述方法包括向对象施用拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂。
本文还提供了试剂盒和组合物，其包括拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂。
附图简述
图1显示了两种ATM抑制剂与各种化疗药物(包括拓扑异构酶抑制剂伊立替康、拓扑替康和依托泊苷)对35种癌细胞系的细胞生长的联合作用。该联合作用表示为叠加单一疗法作用的BLISS过量。阳性BLISS过量值为协同作用，且阴性BLISS过量值为拮抗作用。-0.1至0.1之间的值被认为接近于线性组合作用。
图2显示了两种不同的ATM抑制剂作为单药或与不同固定浓度的SN38联合对两种ATM富含细胞系(HCT116和SW620)和两种ATM缺陷细胞系(SKCO1和NCI-H23)生长抑制的作用。
图3显示了将两种ATM抑制剂与SN38在向小鼠皮下植入的人结肠异种移植模型中的联合作用。随时间跟踪肿瘤体积，并绘制(blot)在y轴上。载具治疗的肿瘤被认为是参考。通过与参考相比随时间的肿瘤体积减小，可以判断不同治疗方式和联合的抗肿瘤作用。每个治疗组使用10只动物，绘制平均肿瘤体积。
图4显示了拓扑异构酶抑制剂SN38作为单药或与ATM抑制剂联合对免疫原性细胞死亡诱导和凋亡的作用，正如A)钙网蛋白(CRT)、HSP70和HSP90的暴露增加，B)ATP和HMGB1释放增加，和C)半胱天冬酶-3/-7活化所示。对于每个实验，显示了两个生物学上的重复。未染色(未显示)和适当的同种型匹配的抗体用作FACS分析的对照。
发明详述
刺激免疫系统的药剂(如检查点抑制剂)治疗癌症的能力取决于肿瘤组织内肿瘤抗原特异性T细胞的存在。这要求肿瘤组织表达将自身与其非转化的对应物区分开来的抗原，例如，通过被称为新抗原(neoantigen)的新型蛋白产物。肿瘤新抗原负荷与免疫原性和敏感性(例如，对检查点抑制剂疗法的敏感性)密切相关，这意味着免疫原性较差的肿瘤应该在很大程度上对这些药物耐药。用于释放可被APC摄取的肿瘤抗原的疗法，如诱导免疫原性细胞死亡的那些，可能会促进有效的抗肿瘤免疫，特别是当进一步与刺激免疫系统的药剂(如检查点抑制剂)联合时。
本发明人发现拓扑异构酶抑制剂可以触发肿瘤细胞的ICD。此外，观察到拓扑异构酶抑制剂和ATM抑制剂的各种组合至少相加地或协同地作用，例如，在促进ICD方面。
因此，本公开提供了一种诱导ICD(例如肿瘤细胞，优选癌细胞的ICD)的方法，所述方法包括施用拓扑异构酶抑制剂和任选地额外施用ATM抑制剂和/或刺激免疫系统的药剂。
本公开还提供了一种治疗肿瘤的方法，所述方法包括施用拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂。在优选的实施方案中，被治疗的肿瘤为癌性或恶性肿瘤。
除另一种治疗方式外的一种治疗方式的施用是指在向对象施用另一种治疗方式之前、期间或之后施用一种治疗方式。这意味着对于拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂的施用，拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂中的每个以任何顺序(即同时或依次)或以单一组合物、制剂或单位剂型一起施用至患者。在一些实施方案中，拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂同时或依次施用。在某些实施方案中，以包括拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂的相同组合物同时施用拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂。在某些实施方案中，以分开的组合物同时施用拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂，即，其中各自以分开的单位剂型同时施用拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂。可以认识到，可以按照适当的给药方案在同一天或不同天并以任何顺序施用拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂。
如果在另一种治疗方式之外还施用一种治疗方式，则治疗方式在相同的治疗方案内施用。例如，它们一起用作一线、二线或三线治疗。
应当认识到，“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”的参考包括预防以及缓和已确定的病况的症状。因此，病状、病症或病况的“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”包括：(1)预防或延迟可能受到病状、病症或病况困扰或易受病状、病症或病况感染但尚未经历或表现出病状、病症或病况的临床或亚临床症状的人中发展的病状、病症或病况的临床症状的出现，(2)抑制病状、病症或病况，即阻止、减少或延迟疾病的发展或其复发(在维持治疗的情况下)或其至少一种临床或亚临床症状，或(3)缓解或减弱疾病，即导致病状、病症或病况或其至少一种临床或亚临床症状消退。
优选地，所述“对象”为人。通常，所述对象是诊断为患有肿瘤或癌症的一种或多种症状或具有患有肿瘤或癌症的一种或多种症状的风险的人。在某些实施方案中，“对象”可以是指非人哺乳动物，例如非人灵长类动物、犬、猫、兔、猪、小鼠或大鼠，或者用于筛选、表征和评价药物和疗法的动物。
根据本发明待治疗的特定类型的肿瘤或癌症包括但不限于选自由以下组成的组的肿瘤或癌症：结直肠癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、前列腺癌、肾癌、宫颈癌、骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、甲状腺癌、子宫内膜癌、子宫癌、膀胱癌、神经内分泌癌、头颈部癌、肝癌、鼻咽癌、睾丸癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、黑色素瘤、基底细胞皮肤癌、鳞状细胞皮肤癌、隆突性皮肤纤维肉瘤、Merkel细胞癌、胶质母细胞瘤、胶质瘤、肉瘤、间皮瘤和骨髓增生异常综合征。优选地，待治疗的肿瘤或癌症表达ATM。
在一些实施方案中，拓扑异构酶抑制剂抑制拓扑异构酶I和/或II。例如，拓扑异构酶抑制剂为拓扑替康、hycaptamine、伊立替康、卢比替康、6-乙氧基丙酰基-3′,4′-O-外亚苄基教酒菌素(6-ethoxypropionyl-3',4'-O-exobenzylidenechartreusin)、9-甲氧基-N,N-二甲基-5-硝基吡唑并[3,4,5-kl]吖啶-2-(6H)丙胺、1-氨基-9-乙基-5-氟-2,3-二氢-9-羟基-4-甲基-1H,12H-苯并[de]吡喃并[3′,4′:b,7]吲嗪并[1,2b]喹啉-10,13(9H,15H)-二酮、勒托替康、7-[2-(N-异丙基氨基)乙基]-(20S)喜树碱、BNP1350、BNPI1100、BN80915、BN80942、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、索布佐生、2′-二甲基氨基-2′-脱氧依托泊苷、GL331、N-[2-(二甲基氨基)乙基]-9-羟基-5,6-二甲基-6H-吡啶并[4,3-b]咔唑-1-甲酰胺、asulacrine、(5a,5aB,8aa,9b)-9-[2-[N-[2-(二甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基]乙基]-5-[4-羟基-3,5-二甲氧基苯基]-5,5a,6,8,8a,9-六氢呋喃并(3′,4′:6,7)萘并(2,3-d)-1,3-二氧杂环戊烯-6-酮、2,3-(亚甲二氧基)-5-甲基-7-羟基-8-甲氧基苯并[c]菲啶鎓、6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮、5-(3-氨基丙基氨基)-7,10-二羟基-2-(2-羟基乙基氨基甲基)-6H-吡唑并[4,5,1-de]吖啶-6-酮、N-[1-[2(二乙基氨基)乙基氨基]-7-甲氧基-9-氧代-9H-噻吨-4-基甲基]甲酰胺、N-(2-(二甲基氨基)乙基)吖啶-4-甲酰胺、6-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-3-羟基-7H-茚并[2,1-c]喹啉-7-酮和地美司钠。
优选地，拓扑异构酶抑制剂为喜树碱衍生物，优选伊立替康、拓扑替康或依托泊苷中的任何一种，更优选伊立替康。伊立替康也称为CPT-11，并且其具有以下结构：
Figure BDA0002679803640000041
除非另有说明，术语“伊立替康”还包括其药学上可接受的盐(例如盐酸盐)及其代谢物(如SN-38)。
优选地，在2至4周的时间段内，和优选在大约三周的时间段内，优选地，以20mg至300mg，更优选40mg至200mg的量向患者施用伊立替康，其中时间段优选被视为一个周期。更优选地，向患者施用的伊立替康的量以患者体表面积的每平方米的mg给出，即以mg/m2给出。因此，更优选地，在2至4周的时间段内和优选在大约三周的时间段内，以30mg/m2至100mg/m2，更优选50mg/m2至70mg/m2的量，例如以约60mg/m2的量，向患者施用伊立替康，其中时间段优选被视为一个周期。甚至更优选地，待向患者施用的伊立替康的量在一天，优选在对于伊立替康的一个周期开始时施用至患者。特别优选地，在一个由约21天组成的周期的第1天，以每天约40mg/m2至60mg/m2的量向患者施用伊立替康。对于伊立替康，向患者应用优选2至12个周期，更优选4至8个周期，和特别约6个周期，优选地基本上没有间断。上述关于伊立替康的整个程序/方案可以重复一次或多次，优选为1至12次和特别为2至6次，例如约5次，优选在程序/方案的各个重复之间具有间断。
优选地，ATM抑制剂的IC50低于1mM，更优选低于100μM，更优选低于1μM，更优选低于100nM，和最优选低于10nM。优选地，通过对ATM的IC50相对于对其他激酶的IC50的比值所测量，ATM抑制剂具有相对于其他激酶(优选ATR)至少10倍、更优选100倍、最优选至少1000倍的抑制ATM的特异性。
本领域技术人员熟知用于测量ATM抑制剂的IC50的试验。例如，借助以下生物化学ATM激酶试验可以确定IC50。试验由两个步骤组成：酶促反应和检测步骤。首先，加入底物蛋白p53和ATP，以不同浓度孵育ATM蛋白和测试物质。ATM介导p53在几个位置(包括在氨基酸S15)的磷酸化。借助特异性抗体和TR-FRET技术，确定磷酸化的p53的量。经基于TR-FRET(HTRFTM，Cisbio Bioassays)的384孔试验来进行酶促ATM试验。在第一步中，将纯化的人重组ATM(人ATM，全长，GenBank ID NM_000051，在哺乳动物细胞系中表达)与不同浓度的ATM抑制剂以及没有测试物质作为阴性或中性对照在试验缓冲液中孵育15分钟。试验缓冲液包括25mM的HEPES pH 8.0、10mM的Mg(CH3COO)2、1mM的MnCl2、0.1％的BSA和0.01％的
Figure BDA0002679803640000042
35、5mM的二硫苏糖醇(DTT)。使用ECHO 555(Labcyte)，将测试物质溶液分配至微滴定板中。在第二步中，加入纯化的人重组cmyc标记的p53(人p53，全长，GenBank ID BC003596，在Sf21昆虫细胞中表达)和ATP，和将反应混合物在22℃孵育30-35分钟。药理学上相关的试验体积为5μL。在反应混合物孵育期间的试验中，最终浓度为0.3–0.4nM的ATM、50–75nM的p53和10μM的ATP。加入EDTA终止酶促反应。在存在ATP的情况下，通过能够进行FRET的特异性抗体[以荧光铕(Eu)作为供体和d2作为受体标记(Cisbio Bioassays)]，检测ATM介导的反应导致的磷酸化的p53的形成。向反应混合物中加入2μl的含抗体的终止溶液(12.5mM的HEPES pH8.0、125mM的EDTA、30mM的氯化钠、300mM的氟化钾、0.1006％的吐温20、0.005％的
Figure BDA0002679803640000053
0.21nM的抗磷酸化-p53(ser15)-Eu抗体和15nM的抗cmyc-d2抗体)。孵育后，通常为2h[1.5至15h之间]，对于信号生成，在酶标仪(EnVision，PerkinElmer)中使用TRF模式(和具有激光激发)来分析板。在340nm波长处激发供体铕后，测量665nm处受体d2和以及615nm处供体Eu的发射荧光。磷酸化的p53的量与发射的光的量的商(即665nm和615nm处的相对荧光单位(RFU))直接成正比。通过Genedata Screener软件的手段，处理测量数据。尤其是，通过借助于非线性回归分析，将剂量/作用曲线拟合至数据点，来进行IC50测定。
IC50＝半数最大抑制浓度
ATP＝三磷酸腺苷
TR-FRET＝时间分辨荧光共振能量转移
Figure BDA0002679803640000051
＝均相时间分辨荧光
HEPES＝2(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪基)乙磺酸
Mg(CH3COO)2＝醋酸镁
MnCl2＝氯化锰(II)
BSA＝牛血清白蛋白
EDTA＝乙二胺四乙酸盐
TRF＝时间分辨荧光
ATM抑制剂可以选自以下组：
Figure BDA0002679803640000052
Figure BDA0002679803640000061
Figure BDA0002679803640000071
Figure BDA0002679803640000081
在一些实施方案中，ATM抑制剂为咪唑并[4,5-c]喹啉衍生物。更优选地，ATM抑制剂为选自由以下组成的组的任意一项：WO 2012/028233 A1的权利要求6的化合物或WO2016/155884 A1的权利要求18的化合物。最优选地，ATM抑制剂为3-氟-4-[7-甲氧基-3-甲基-8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-氧代-2,3-二氢咪唑并[4,5-c]-喹啉-1-基]苯甲腈(也称为化合物1)。
化合物1的详细描述见2012年3月8日公开的WO 2012/028233 A1。在WO 2012/028233 A1公开的表5中，化合物1被指定为化合物36。
除非另有说明，术语“化合物1”还包括其药学上可接受的盐。
化合物1的可能剂量描述于WO 2012/028233 A1。
在另一个优选实施方案中，ATM抑制剂为8-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(3-氟-5-甲氧基-吡啶-4-基)-7-甲氧基-3-甲基-1,3-二氢-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮或其药学上可接受的盐。
优选地，ATM抑制剂为化合物1或8-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(3-氟-5-甲氧基-吡啶-4-基)-7-甲氧基-3-甲基-1,3-二氢-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮或其药学上可接受的盐。
术语“刺激免疫系统的药剂”是指能够增加免疫系统活性的药物。在一些实施方案中，刺激免疫系统的药剂为免疫检查点抑制剂，如PD-1(程序性细胞死亡蛋白1)通路的拮抗剂(也称为“PD-1拮抗剂”)。优选地，刺激免疫系统的药剂为抗PD-L1(程序性死亡配体1)抗体。
“抗PD-L1抗体”是指阻断癌细胞上表达的PD-L1与PD-1结合的抗体。在其中治疗人对象的本发明的任何治疗方法、药物和用途中，抗PD-L1抗体与人PD-L1特异性结合，并阻断人PD-L1与人PD-1的结合。抗体可以为单克隆抗体、人抗体、人源化抗体或嵌合抗体，和可以包括人恒定区。在一些实施方案中，人恒定区选自由IgG1、IgG2、IgG3和IgG4恒定区组成的组，和在优选实施方案中，人恒定区为IgG1或IgG4恒定区。在一些实施方案中，抗原结合片段选自由Fab、Fab'-SH、F(ab')2、scFv和Fv片段组成的组。在WO 2007/005874、WO 2010/036959、WO 2010/077634、WO 2010/089411、WO 2013/019906、WO 2013/079174、WO 2014/100079、WO 2015/061668和美国专利号8,552,154、8,779,108和8,383,796中，描述了与人PD-L1结合并在本发明的治疗方法、药物和用途中有用的抗体的示例。例如，在本发明的治疗方法、药物和用途中用作PD-L1抗体的特异性抗人PD-L1抗体包括但不限于阿维单抗(avelumab)(MSB0010718C)、纳武单抗(nivolumab)(BMS-936558)、MPDL3280A(IgG1工程化的抗PD-L1抗体)、BMS-936559(全人源抗PD-L1的IgG4单克隆抗体)、MEDI4736(工程化的IgG1κ单克隆抗体，其在Fc结构域中具有三重突变以除去抗体依赖性细胞介导的细胞毒活性)、包括分别为WO 2013/079174的SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:25的重链和轻链可变区的抗体，和包括分别为WO 2015/118175的SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:3的轻链和重链序列的抗体。在一些优选的实施方案中，抗PD-L1抗体包括WO 2013/079174的重链序列SEQ ID NO:32和轻链序列SEQ ID NO:33。在一些优选的实施方案中，抗PD-L1抗体为阿维单抗。在一些实施方案中，抗PD-L1抗体用于治疗人对象。在一些实施方案中，PD-L1为人PD-L1。
在一些实施方案中，抗PD-L1抗体被静脉(例如，作为静脉输注)或皮下施用。优选地，抗PD-L1抗体以静脉输注施用。更优选地，抑制剂被施用50-80分钟，最优选以一小时的静脉输注施用。在一些实施方案中，抗PD-L1抗体每隔一周(即，每二周，或“Q2W”)以约10mg/kg体重的剂量施用。
在一些实施方案中，上述任何治疗方法与进一步的化疗(CT)、放疗(RT)或放化疗(CRT)联合使用。
放疗可以为以电子、光子、质子、α-发射体、其他离子、放射性核苷酸、硼捕获中子及其组合进行的治疗。在一些实施方案中，放疗包括约35-70Gy/20-35次。
“化疗”是一种涉及化疗药物的疗法，所述化疗药物是一种可用于治疗肿瘤或癌症的化合物。化疗药物的示例包括烷化剂，如塞替派(thiotepa)和环磷酰胺(cyclophosphamide)；烷基磺酸盐，如白消安(busulfan)、英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡(piposulfan)；氮丙啶类，如benzodopa、卡波醌(carboquone)、meturedopa和uredopa；乙撑亚胺类(ethylenimines)和甲基三聚氰胺类(methylamelamines)，包括六甲蜜胺(altretamine)、曲他胺(triethylenemelamine)、三亚乙基磷酰胺(trietylenephosphoramide)、三亚乙基硫代磷酰胺(triethiylenethiophosphoramide)和三羟甲基三聚氰胺(trimethylolomelamine)；多聚乙酰类(acetogenins)(特别是布拉它辛(bullatacin)和布拉它辛酮(bullatacinone))；δ-9-四氢大麻酚(delta-9-tetrahydrocannabinol)(屈大麻酚(dronabinol))；β-拉帕醌(beta-lapachone)；拉帕醇(lapachol)；秋水仙碱(colchicines)；桦木酸(betulinic acid)；喜树碱(camptothecin)(包括合成类似物拓扑替康(CPT-11(伊立替康)、乙酰基喜树碱(acetylcamptothecin)、scopolectin和9-氨基喜树碱(9-aminocamptothecin))；苔藓抑素(bryostatin)；培美曲塞(pemetrexed)；callystatin；CC-1065(包括其阿多来新(adozelesin)、卡折来新(carzelesin)和比折来新(bizelesin)合成类似物)；足叶草毒素(podophyllotoxin)；鬼臼酸(podophyllinic acid)；替尼泊苷(teniposide)；念珠藻素类(cryptophycins)(尤其是念珠藻素1和念珠藻素8)；尾海兔素(dolastatin)；duocarmycin(包括合成类似物KW-2189和CB1-TM1)；五加素(eleutherobin)；水鬼蕉碱(pancratistatin)；TLK-286；CDP323，一种口服α-4整联素抑制剂；sarcodictyin；spongistatin；氮芥类，如苯丁酸氮芥(chlorambucil)、萘氮芥(chlornaphazine)、cholophosphamide、雌莫司汀(estramustine)、异环磷酰胺(ifosfamide)、二氯甲基二乙胺(mechlorethamine)、盐酸氧氮芥(mechlorethamine oxide hydrochloride)、美法仑(melphalan)、新恩比兴(novembichin)、苯芥胆甾醇(phenesterine)、泼尼莫司汀(prednimustine)、曲洛磷胺(trofosfamide)，和乌拉莫司汀(uracil mustard)；亚硝基脲类(nitrosureas)，如卡莫司汀(carmustine)、氯脲霉素(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、洛莫司汀(lomustine)、尼莫司汀(nimustine)，和雷莫司汀(ranimnustine)；抗生素类，如烯二炔抗生素(例如，卡奇霉素(calicheamicin)，特别是卡奇霉素γ和卡奇霉素ω)(参见，例如，Nicolaou et al.(1994)Angew.Chem Intl.Ed.Engl.33:183)；dynemicin，包括dynemicinA；拉霉素(esperamicin)；以及新制癌菌素(neocarzinostatin)发色团和相关色蛋白(chromoprotein)烯二炔抗生素发色团、阿克拉霉素(aclacinomysin)、放线菌素(actinomycin)、authramycin、重氮丝氨酸(azaserine)、博莱霉素(bleomycin)、放线菌素C(cactinomycin)、carabicin、洋红霉素(carminomycin)、carzinophilin、色霉素(chromomycinis)、放线菌素D(dactinomycin)、道诺霉素(daunorubicin)、地托比星(detorubicin)、6-重氮基-5-氧代-L-正亮氨酸(6-diazo-5-oxo-L-norleucine)、多柔比星(doxorubicin)(包括吗啉代-多柔比星、氰基吗啉代-多柔比星、2-吡咯啉基-多柔比星、多柔比星HCl脂质体注射剂和脱氧多柔比星(deoxydoxurubicin))、表柔比星(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、伊达比星(idarubicin)、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素(mitomycin)(如丝裂霉素C)、霉酚酸(mycophenolic acid)、诺加霉素(nogalamycin)、橄榄霉素类(olivomycins)、培洛霉素(peplomycin)、泊非霉素(potfiromycin)、嘌呤霉素(puromycin)、quelamycin、罗多比星(rodorubicin)、链黑菌素(streptonigrin)、链脲霉素(streptozocin)、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司(ubenimex)、净司他汀(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代谢物类，如甲氨蝶呤(methotrexate)、吉西他滨(gemcitabine)、替加氟(tegafur)、卡培他滨(capecitabine)、埃博霉素(epothilone)和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，如二甲叶酸(denopterin)、甲氨蝶呤(methotrexate)、蝶罗呤(pteropterin)，和三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤类似物，如氟达拉滨(fludarabine)、6-巯基嘌呤(6-mercaptopurine)、硫咪嘌呤(thiamiprine)，和硫鸟嘌呤(thioguanine)；嘧啶类似物，如安西他滨(ancitabine)、阿扎胞苷(azacitidine)、6-氮尿苷(6-azauridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、双脱氧尿苷(dideoxyuridine)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、依诺他滨(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)，和伊马替尼(imatinib)(2-苯基氨基嘧啶衍生物)，以及其他c-Kit抑制剂；抗肾上腺类，如氨鲁米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)，和曲洛司坦(trilostane)；叶酸补充物，如亚叶酸(frolinic acid)；醋葡醛内酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamideglycoside)；氨基乙酰丙酸(aminolevulinic acid)；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶(amsacrine)；bestrabucil；比生群(bisantrene)；edatraxate；defofamine；地美可辛(demecolcine)；亚丝醌(diaziquone)；elfornithine；依利醋铵(elliptinium acetate)；依托格鲁(etoglucid)；硝酸镓(gallium nitrate)；羟基脲(hydroxyurea)；香菇多糖(lentinan)；lonidainine；美登素类(maytansinoids)，如美登素(maytansine)和安丝菌素(ansamitocin)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；mopidanmol；二胺硝吖啶(nitraerine)；喷司他汀(pentostatin)；phenamet；吡柔比星(pirarubicin)；洛索蒽醌(losoxantrone)；2-乙基酰肼(2-ethylhydrazide)；甲基苄肼(procarbazine)；PSK多糖复合物(JHS Natural Products,Eugene,OR)；雷佐生(razoxane)；利索新(rhizoxin)；西佐喃(sizofiran)；螺旋锗(spirogermanium)；细交链孢菌酮酸(tenuazonic acid)；三亚胺醌(triaziquone)；2,2',2"-三氯三乙胺(2,2',2"-trichlorotriethylamine)；单端孢霉烯族毒素类(trichothecenes)(特别是T-2毒素、verracurin A、漆斑菌素A(roridin A)和蛇形菌素(anguidine))；乌拉坦(urethan)；长春地辛(vindesine)；达卡巴嗪(dacarbazine)；甘露醇氮芥(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴卫矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；gacytosine；阿拉伯苷(arabinoside)(“Ara-C”)；噻替派(thiotepa)；紫杉烷类(taxoids)，例如紫杉醇(paclitaxel)、白蛋白工程化的紫杉醇纳米颗粒制剂，和多西他赛(doxetaxel)；苯丁酸氮芥(chloranbucil)；6-硫鸟嘌呤(6-thioguanine)；巯基嘌呤(mercaptopurine)；甲氨蝶呤(methotrexate)；铂类似物类，如顺铂和卡铂；长春花碱(vinblastine)；铂；依托泊苷(etoposide)(VP-16)；异环磷酰胺(ifosfamide)；米托蒽醌(mitoxantrone)；长春新碱(vincristine)；奥沙利铂(oxaliplatin)；leucovovin；长春瑞滨(vinorelbine)；novantrone；依达曲沙(edatrexate)；道诺霉素(daunomycin)；氨基蝶呤(aminopterin)；伊班膦酸盐(ibandronate)；拓扑异构酶抑制剂RFS2000；二氟甲基鸟氨酸(difluoromethylornithine)(DMFO)；类视色素类，如视黄酸；任何上述的药学上可接受的盐、酸或衍生物；以及上述两种或更多种的组合，如CHOP，一种环磷酰胺、多柔比星、长春新碱和泼尼松龙(prednisolone)的组合疗法的缩写，或FOLFOX，一种用奥沙利铂(oxaliplatin)与5-FU和leucovovin组合进行的治疗方案的缩写。
本说明书中提到的化合物以治疗有效量来使用。化合物的“治疗有效量”是指预防性或治疗性方面有效的量。在治疗肿瘤或癌症的情况下，施用治疗有效量的化合物将有助于预期的治疗作用，例如，在患者中缓解、改善、减轻或消除肿瘤或癌症的一种或多种表现，或在治疗肿瘤或癌症患者的过程中产生任何其他临床结果。一次剂量的施用不一定会产生治疗作用，且一系列剂量施用后才可以产生治疗作用。因此，可以在一次或多次施用中施用治疗有效量。这样的治疗有效量可以根据如个体的疾病状态、年龄、性别和体重以及化合物在个体中引起期望的反应的能力等因素而变化。治疗有效量也是化合物的任何毒性或有害作用被治疗有益作用超过的量。
本公开还涉及试剂盒和药学上可接受的组合物，其包括上述拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂。
“药学上可接受的”是指物质或组合物必须在化学和/或毒理学上与包括制剂的其他成分相容，和/或与接受其治疗的对象相容。“药学上可接受的载体”包括生理学上相容的任何和所有溶剂、分散介质、包衣、抗菌和抗真菌剂、等渗和吸收延迟剂等。药学上可接受的载体的示例包括水、盐水、磷酸盐缓冲盐水、右旋糖、甘油、乙醇等中的一种或多种，以及其组合。
本公开的组合物可以为多种形式。例如，这些包括液体、半固体和固体剂型，如液体溶液(例如，注射液和输注液)、分散剂或混悬剂、片剂、丸剂、散剂、脂质体和栓剂。优选形式取决于预期的施用方式和治疗应用。典型的优选组合物为注射液或输注液形式，如与用于人的被动免疫的那些相似的组合物。优选施用方式为胃肠外(例如，静脉、皮下、腹膜内或肌内)。在优选的实施方案中，组合物通过静脉输注或注射施用。在另一个优选实施方案中，组合物通过肌内或皮下注射施用。
用于口服施用的液体剂型包括但不限于药学上可接受的乳剂、微乳剂、溶液、混悬剂、糖浆和酏剂。除了拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和/或刺激免疫系统的药剂，液体剂型可以含有本领域常用的惰性稀释剂，如，例如水或其他溶剂、增溶剂和乳化剂，如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃醇、聚乙二醇和山梨醇脂肪酸酯及其混合物。除惰性稀释剂外，口服组合物还可以包括佐剂，如湿润剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、调味剂和香料。
可注射制剂，例如，无菌注射用水溶液或油质混悬剂，可以根据已知技术使用适当的分散剂或湿润剂和悬浮剂配制。无菌注射制剂也可以是溶于无毒的胃肠外可接受稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液、混悬剂或乳剂，例如，作为1,3-丁二醇中的溶液。可以使用的可接受的载具和溶剂为水、林格氏液，U.S.P.，和等渗氯化钠溶液。此外，常规使用无菌、固定油作为溶剂或悬浮介质。对于这种目的，可以使用任何柔和的固定油，包括合成的单或二甘油脂。此外，脂肪酸(如油酸)用于制备可注射剂。
可注射制剂可被灭菌，例如，通过细菌截留过滤器过滤，或加入无菌固体组合物形式的灭菌剂，使用前可以将其溶解或分散在无菌水或其他无菌可注射介质中。
为了延长拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和/或刺激免疫系统的药剂的作用，通常需要通过皮下或肌内注射来减缓吸收。这可以通过使用水溶性差的结晶或无定形材料的液体悬浮剂来实现。然后，吸收速率取决于其溶解速率，而所述溶解速率又可以取决于晶体大小和晶型。可选地，通过将化合物溶解或混悬于油性载具中来完成胃肠外施用拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和/或刺激免疫系统的药剂的延迟吸收。可注射长效(depot)形式是通过在生物可降解聚合物(如聚交酯-聚乙交酯)中形成拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和/或刺激免疫系统的药剂的微囊基质制成的。根据化合物与聚合物的比例和所用特定聚合物的性质，可以控制化合物释放的速率。其他生物可降解聚合物的示例包括聚(原酸酯类)和聚(酐类)。通过将化合物包封在与身体组织相容的脂质体或微乳剂中还制备了可注射长效制剂。
用于直肠或阴道施用的组合物优选栓剂，其可以通过将本发明的化合物与适当的无刺激性赋形剂或载体(如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡)混合制备，所述赋形剂或载体在环境温度下为固体，但在体温下为液体，并因此在直肠或阴道腔中熔化并释放活性化合物。
用于口服施用的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在这类固体剂型中，将活性化合物与至少一种惰性、药学上可接受的赋形剂或载体(如柠檬酸钠或磷酸二钙)和/或a)填充剂(filler)或填充剂(extender)(如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸)，b)粘合剂(如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶)，c)润湿剂(humectant)(如甘油)，d)崩解剂(如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠)，e)溶液阻滞剂(如石蜡)，f)吸收加速剂(如季铵化合物)，g)湿润剂(如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯)，h)吸收剂(如高岭土和膨润土粘土)，和i)润滑剂(如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂酸硫酸钠和其混合物)混合。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型也可以包括缓冲剂。
使用乳糖(lactose)或奶糖(milk sugar)以及高分子量聚乙二醇等赋形剂，类似类型的固体组合物也可以用作软胶胶囊和硬填充明胶胶囊的填充剂。用包衣和外壳(如肠溶包衣)和其他在药物制剂领域广为人知的包衣，可以制备片剂、糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒剂的固体剂型。它们可以任选含有遮光剂，以及也可以为仅释放活性成分或者优先地在肠道的某些部分任选地以延迟方式释放的组合物。可以使用的包埋组合物的示例包括聚合物质和蜡。
拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和/或刺激免疫系统的药剂也可以是具有上述一种或多种赋形剂的微囊化形式。使用包衣和外壳(如肠溶包衣、控释包衣)和其他在药物制剂领域广为人知的包衣，可以制备片剂、糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒剂的固体剂型。在这类固体剂型中，拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和/或刺激免疫系统的药剂可以与至少一种惰性稀释剂(如蔗糖、乳糖或淀粉)混合。与常规做法一样，这类剂型还可以包括除惰性稀释剂以外的额外的物质，例如，压片润滑剂和其他压片助剂，如硬脂酸镁和微晶纤维素。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型也可以包括缓冲剂。它们可以任选含有遮光剂，以及也可以为仅释放活性成分或者优先地在肠道的某些部分任选地以延迟方式释放的组合物。可以使用的包埋组合物的示例包括聚合物质和蜡。
拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和/或刺激免疫系统的药剂的局部或经皮施用剂型包括软膏剂、糊剂、乳膏剂、洗剂、凝胶、散剂、溶液、喷雾剂、吸入剂或贴剂。在无菌条件下，将活性成分与药学上可接受的载体以及可能需要的任何必要的防腐剂或缓冲液混合。眼用制剂、滴耳剂和滴眼剂也考虑在本发明的范围内。此外，本发明考虑使用透皮贴剂，其具有提供将化合物控制释放到身体的附加优点。通过将化合物溶解或分配至适当介质中，可以制成这类剂型。吸收促进剂也可以用于增加化合物通过皮肤的通量。速率可以通过提供速率控制膜或通过将化合物分散在聚合物基质或凝胶中被控制。
典型地，拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和/或刺激免疫系统的药剂被并入适用于向对象施用的药物组合物中，其中药物组合物包括拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和/或刺激免疫系统的药剂和药学上可接受的载体。在许多情况下，优选的是在组合物中包括等渗剂，例如糖、多元醇(如甘露醇、山梨醇)或氯化钠。药学上可接受的载体还可以包括少量辅助物质，如湿润剂或乳化剂、防腐剂或缓冲液，其可以增强拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和/或刺激免疫系统的药剂的保质期或有效性。
在制备和储存条件下，治疗组合物通常必须是无菌且稳定的。组合物可以配制成溶液、微乳、分散体、脂质体或其他适合高药物浓度的有序结构。将拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和/或刺激免疫系统的药剂以所需量与所需的上述所列成分的一种或组合合并在适当的溶剂中，然后过滤除菌，可以制备无菌可注射溶液。通常，通过将活性成分加入含有碱性分散介质和从上述所列的那些中的所需其他成分的无菌载具中，来制备分散剂。在用于制备无菌可注射溶液的无菌粉末的情况下，优选的制备方法是真空干燥和冷冻干燥，从先前其无菌过滤的溶液中获得活性成分和任何额外的期望的成分的粉末。溶液的适当流动性可以例如通过使用包衣(如卵磷脂)、通过在分散情况下维持所需的粒度和通过使用表面活性剂来保持。通过在组合物中包括有延迟吸收的药物，例如单硬脂酸盐和明胶，可以实现可注射组合物的延长吸收。
在一个实施方案中，阿维单抗为预期用于IV施用的无菌、澄清和无色溶液。阿维单抗小瓶的内容物无热原，且不含抑菌防腐剂。阿维单抗配制成20mg/mL的溶液，并在一次性玻璃瓶中提供，用橡胶隔膜塞住，并用铝制聚丙烯易拉(flip-off)密封件密封。出于施用目的，阿维单抗必须用0.9％氯化钠(生理盐水溶液)稀释。在施用期间使用具有由聚醚砜(PES)制成的同轴的、低蛋白质结合的0.2微米过滤器的管道。
在另一个方面，本发明涉及一种试剂盒，所述试剂盒包括选自由拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂组成的组的一种化合物和包装插页，所述包装插页包括使用上述三种化合物中的任何一种与其他两种化合物组合来在对象中治疗肿瘤(优选癌症)的说明。还提供了一种试剂盒，所述试剂盒包括刺激免疫系统的药剂(优选抗PD-L1抗体)以及包装插页，所述包装插页包括使用刺激免疫系统的药剂联合拓扑异构酶抑制剂和ATM抑制剂来在对象中治疗肿瘤(优选癌症)的说明。还提供了一种试剂盒，所述试剂盒包括拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂以及包装插页，所述包装插页包括使用拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药物来在对象中治疗肿瘤(优选癌症)的说明。试剂盒的化合物可以包含在分开的容器中。可选地，两种或更多种化合物包含在同一容器中。试剂盒可以包括第一容器、第二容器、第三容器和包装插页，其中第一容器包括至少一个剂量的包括拓扑异构酶抑制剂的药物，第二容器包括至少一个剂量的ATM抑制剂的药物，第三容器包括至少一个剂量的刺激免疫系统的药剂的药物，且所述包装插页包括使用药物治疗对象的肿瘤或癌症的说明。第一容器、第二容器和第三容器可以包含相同或不同形状(例如，小瓶、注射器和瓶)和/或材料(例如，塑料或玻璃)。试剂盒还可以包括可以有助于施用药物的其他材料，如稀释剂、过滤器、IV袋和管线、针和注射器。
在一些实施方案中，本公开涉及以下：
1.拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂，用于在对象中治疗肿瘤(优选癌症)的方法，其中将拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂同时或依次施用至所述对象。
2.根据项1的用于所述用途的化合物，其中拓扑异构酶抑制剂为拓扑异构酶I抑制剂，优选伊立替康。
3.根据项1或项2的用于所述用途的化合物，其中ATM抑制剂为咪唑并[4,5-c]喹啉衍生物，优选化合物1或8-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(3-氟-5-甲氧基-吡啶-4-基)-7-甲氧基-3-甲基-1,3-二氢-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮，更优选化合物1。
4.根据项1至项3中任何一项的用于所述用途的化合物，其中刺激免疫系统的药剂为免疫检查点抑制剂，优选PD-1拮抗剂，更优选抗PD-L1抗体。
5.根据项1至项4中任何一项的用于所述用途的化合物，其中拓扑异构酶抑制剂为伊立替康，ATM抑制剂为化合物1，且刺激免疫系统的药剂为PD-1拮抗剂。
6.根据项1至项5中任何一项的用于所述用途的化合物，其中所述肿瘤或癌症选自由以下组成的组：结直肠癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、前列腺癌、肾癌、宫颈癌、骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、甲状腺癌、子宫内膜癌、子宫癌、膀胱癌、神经内分泌癌、头颈部癌、肝癌、鼻咽癌、睾丸癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、黑色素瘤、基底细胞皮肤癌、鳞状细胞皮肤癌、隆突性皮肤纤维肉瘤、Merkel细胞癌、胶质母细胞瘤、胶质瘤、肉瘤、间皮瘤和骨髓增生异常综合征。
7.根据项1至项5中任何一项的用于所述用途的化合物，其中所述肿瘤或癌症表达ATM。
8.一种在对象中治疗肿瘤(优选癌症)的方法，其中所述方法包括向所述对象同时或依次施用拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂。
9.根据项8的方法，其中拓扑异构酶抑制剂为拓扑异构酶I抑制剂，优选伊立替康。
10.根据项8或项9的方法，其中ATM抑制剂为咪唑并[4,5-c]喹啉衍生物，优选化合物1或8-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(3-氟-5-甲氧基-吡啶-4-基)-7-甲氧基-3-甲基-1,3-二氢-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮，更优选化合物1。
11.根据项8至项10中任何一项的方法，其中刺激免疫系统的药剂为免疫检查点抑制剂，优选PD-1拮抗剂，更优选抗PD-L1抗体。
12.根据项8至项11中任何一项的方法，其中拓扑异构酶抑制剂为伊立替康，ATM抑制剂为化合物1，且刺激免疫系统的药剂为PD-1拮抗剂。
13.根据项8至项12中任何一项的方法，其中所述肿瘤或癌症选自由以下组成的组：结直肠癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、前列腺癌、肾癌、宫颈癌、骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、甲状腺癌、子宫内膜癌、子宫癌、膀胱癌、神经内分泌癌、头颈部癌、肝癌、鼻咽癌、睾丸癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、黑色素瘤、基底细胞皮肤癌、鳞状细胞皮肤癌、隆突性皮肤纤维肉瘤、Merkel细胞癌、胶质母细胞瘤、胶质瘤、肉瘤、间皮瘤和骨髓增生异常综合征。
14.根据项8至项13中任何一项的方法，其中所述肿瘤或癌症表达ATM。
15.一种试剂盒或组合物，其包括：
(a)拓扑异构酶抑制剂；
(b)ATM抑制剂；和
(c)刺激免疫系统的药剂。
16.根据项15的试剂盒或组合物，其中拓扑异构酶抑制剂为拓扑异构酶I抑制剂，优选伊立替康。
17.根据项15或项16的试剂盒或组合物，其中ATM抑制剂为咪唑并[4,5-c]喹啉衍生物，优选化合物1或8-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(3-氟-5-甲氧基-吡啶-4-基)-7-甲氧基-3-甲基-1,3-二氢-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮，更优选化合物1。
18.根据项15至项17中任何一项的试剂盒或组合物，其中刺激免疫系统的药剂为免疫检查点抑制剂，优选PD-1拮抗剂，更优选抗PD-L1抗体。
19.根据项15至项18中任何一项的试剂盒或组合物，其中拓扑异构酶抑制剂为伊立替康，ATM抑制剂为化合物1，且刺激免疫系统的药剂为PD-1拮抗剂。
20.根据项15至项19中任何一项的试剂盒或组合物，其用作药物。
21.根据项15至项19中任何一项的试剂盒或组合物，其用于治疗肿瘤(优选癌症)的方法。
22.根据项21的用于所述用途的试剂盒或组合物，其中所述肿瘤或癌症选自由以下组成的组：结直肠癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、前列腺癌、肾癌、宫颈癌、骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、甲状腺癌、子宫内膜癌、子宫癌、膀胱癌、神经内分泌癌、头颈部癌、肝癌、鼻咽癌、睾丸癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、黑色素瘤、基底细胞皮肤癌、鳞状细胞皮肤癌、隆突性皮肤纤维肉瘤、Merkel细胞癌、胶质母细胞瘤、胶质瘤、肉瘤、间皮瘤和骨髓增生异常综合征。
23.根据项21或项22的用于所述用途的试剂盒或组合物，其中所述肿瘤或癌症表达ATM。
24.一种在对象中治疗肿瘤(优选癌症)的方法，其中所述方法包括将根据项15至项19中任何一项的组合物或试剂盒的化合物同时或依次施用至所述对象。
25.根据项24的方法，其中所述肿瘤或癌症选自由以下组成的组：结直肠癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、前列腺癌、肾癌、宫颈癌、骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、甲状腺癌、子宫内膜癌、子宫癌、膀胱癌、神经内分泌癌、头颈部癌、肝癌、鼻咽癌、睾丸癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、黑色素瘤、基底细胞皮肤癌、鳞状细胞皮肤癌、隆突性皮肤纤维肉瘤、Merkel细胞癌、胶质母细胞瘤、胶质瘤、肉瘤、间皮瘤和骨髓增生异常综合征。
26.根据项24或项25的方法，其中所述肿瘤或癌症表达ATM。
27.拓扑异构酶抑制剂，其用于通过诱导免疫原性细胞死亡来治疗肿瘤(优选癌症)。
28.根据项27的用于所述用途的拓扑异构酶抑制剂，其中所述肿瘤或癌症选自由以下组成的组：结直肠癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、前列腺癌、肾癌、宫颈癌、骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、甲状腺癌、子宫内膜癌、子宫癌、膀胱癌、神经内分泌癌、头颈部癌、肝癌、鼻咽癌、睾丸癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、黑色素瘤、基底细胞皮肤癌、鳞状细胞皮肤癌、隆突性皮肤纤维肉瘤、Merkel细胞癌、胶质母细胞瘤、胶质瘤、肉瘤、间皮瘤和骨髓增生异常综合征。
29.根据项27或项28的用于所述用途的拓扑异构酶抑制剂，其中所述肿瘤或癌症表达ATM。
30.一种拓扑异构酶抑制剂，其用于诱导免疫原性细胞死亡，优选用于诱导表达ATM的细胞的免疫原性细胞死亡。
31.根据项27至项30任意一项中的用于所述用途的拓扑异构酶抑制剂，其中拓扑异构酶抑制剂为拓扑异构酶I抑制剂，优选伊立替康。
32.根据项27至项31任意一项中的用于所述用途的拓扑异构酶抑制剂，其中拓扑异构酶抑制剂与ATM抑制剂同时或依次施用。
33.根据项32的用于所述用途的拓扑异构酶抑制剂，其中ATM抑制剂为咪唑并[4,5-c]喹啉衍生物，优选化合物1或8-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(3-氟-5-甲氧基-吡啶-4-基)-7-甲氧基-3-甲基-1,3-二氢-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮，更优选化合物1。
34.根据项27至项33任意一项中的用于所述用途的拓扑异构酶抑制剂，其中拓扑异构酶抑制剂与刺激免疫系统的药剂同时或依次施用。
35.根据项34的用于所述用途的拓扑异构酶抑制剂，其中刺激免疫系统的药剂为免疫检查点抑制剂，优选PD-1拮抗剂，更优选抗PD-L1抗体。
36.根据项27至项35中任何一项中的用于所述用途的拓扑异构酶抑制剂，其中拓扑异构酶抑制剂为伊立替康，ATM抑制剂为化合物1，且刺激免疫系统的药剂为PD-1拮抗剂。
37.一种在对象中诱导免疫原性细胞死亡，优选诱导表达ATM的细胞的免疫原性细胞死亡的方法，其中将拓扑异构酶抑制剂施用于所述对象。
38.根据项37的在对象中诱导免疫原性细胞死亡的方法，其中拓扑异构酶抑制剂为拓扑异构酶I抑制剂，优选伊立替康。
39.根据项37或项38的在对象中诱导免疫原性细胞死亡的方法，其中拓扑异构酶抑制剂与ATM抑制剂同时或依次施用。
40.根据项37或项39中任意一项的在对象中诱导免疫原性细胞死亡的方法，其中ATM抑制剂为咪唑并[4,5-c]喹啉衍生物，优选化合物1或8-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(3-氟-5-甲氧基-吡啶-4-基)-7-甲氧基-3-甲基-1,3-二氢-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮，更优选化合物1。
41.根据项37至项40任意一项的在对象中诱导免疫原性细胞死亡的方法，其中拓扑异构酶抑制剂与刺激免疫系统的药剂同时或依次施用。
42.根据项37至项41任意一项的在对象中诱导免疫原性细胞死亡的方法，其中刺激免疫系统的药剂为免疫检查点抑制剂，优选PD-1拮抗剂，更优选抗PD-L1抗体。
43.根据项37至项42任意一项的在对象中诱导免疫原性细胞死亡的方法，其中拓扑异构酶抑制剂为伊立替康，ATM抑制剂为化合物1，且刺激免疫系统的药剂为PD-1拮抗剂。
44.拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂，其用于通过在对象中诱导免疫原性细胞死亡来治疗肿瘤(优选癌症)的方法，其中将拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂同时或依次施用至所述对象。
45.根据项44的用于所述用途的化合物，其中拓扑异构酶抑制剂为拓扑异构酶I抑制剂，优选伊立替康。
46.根据项44或项45的用于所述用途的化合物，其中ATM抑制剂为咪唑并[4,5-c]喹啉衍生物，优选化合物1或8-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(3-氟-5-甲氧基-吡啶-4-基)-7-甲氧基-3-甲基-1,3-二氢-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮，更优选化合物1。
47.根据项44至项46任意一项中的用于所述用途的化合物，其中刺激免疫系统的药剂为免疫检查点抑制剂，优选PD-1拮抗剂，更优选抗PD-L1抗体。
48.根据项44至项47任意一项中的用于所述用途的化合物，其中拓扑异构酶抑制剂为伊立替康，ATM抑制剂为化合物1，且刺激免疫系统的药剂为PD-1拮抗剂。
49.根据项44至项48任意一项中的用于所述用途的化合物，其中所述肿瘤或癌症选自由以下组成的组：结直肠癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、前列腺癌、肾癌、宫颈癌、骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、甲状腺癌、子宫内膜癌、子宫癌、膀胱癌、神经内分泌癌、头颈部癌、肝癌、鼻咽癌、睾丸癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、黑色素瘤、基底细胞皮肤癌、鳞状细胞皮肤癌、隆突性皮肤纤维肉瘤、Merkel细胞癌、胶质母细胞瘤、胶质瘤、肉瘤、间皮瘤和骨髓增生异常综合征。
50.根据项44至项49任意一项中的用于所述用途的化合物，其中所述肿瘤或癌症表达ATM。
51.一种通过在对象中诱导免疫原性细胞死亡来治疗肿瘤(优选癌症)的方法，其中所述方法包括向所述对象同时或依次施用拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂。
52.根据项51的方法，其中拓扑异构酶抑制剂为拓扑异构酶I抑制剂，优选伊立替康。
53.根据项51或项52的方法，其中ATM抑制剂为咪唑并[4,5-c]喹啉衍生物，优选化合物1或8-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(3-氟-5-甲氧基-吡啶-4-基)-7-甲氧基-3-甲基-1,3-二氢-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮，更优选化合物1。
54.根据项51至项53任意一项的方法，其中所述刺激免疫系统的药剂为免疫检查点抑制剂，优选PD-1拮抗剂，更优选抗PD-L1抗体。
55.根据项51至项54任意一项的方法，其中拓扑异构酶抑制剂为伊立替康，ATM抑制剂为化合物1，且刺激免疫系统的药剂为PD-1拮抗剂。
56.根据项51至项55任意一项的方法，其中所述肿瘤或癌症选自由以下组成的组：结直肠癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、前列腺癌、肾癌、宫颈癌、骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、甲状腺癌、子宫内膜癌、子宫癌、膀胱癌、神经内分泌癌、头颈部癌、肝癌、鼻咽癌、睾丸癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、黑色素瘤、基底细胞皮肤癌、鳞状细胞皮肤癌、隆突性皮肤纤维肉瘤、Merkel细胞癌、胶质母细胞瘤、胶质瘤、肉瘤、间皮瘤和骨髓增生异常综合征。
57.根据项51至项56任意一项的方法，其中所述肿瘤或癌症表达ATM。
58.拓扑异构酶抑制剂在制备用于在对象中治疗肿瘤(优选癌症)的药物中的用途，其中将拓扑异构酶抑制剂与ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂同时或依次施用至所述对象。
59.根据项58的用途，其中拓扑异构酶抑制剂为拓扑异构酶I抑制剂，优选伊立替康，或其药学上可接受的盐。
60.根据项58或项59的用途，其中ATM抑制剂为咪唑并[4,5-c]喹啉衍生物，优选化合物1或8-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(3-氟-5-甲氧基-吡啶-4-基)-7-甲氧基-3-甲基-1,3-二氢-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮，更优选化合物1。
61.根据项58至项60任意一项的用途，其中刺激免疫系统的药剂为免疫检查点抑制剂，优选PD-1拮抗剂，更优选抗PD-L1抗体。
62.根据项58至项61任意一项的用途，其中拓扑异构酶抑制剂为伊立替康或其药学上可接受的盐，ATM抑制剂为化合物1，且刺激免疫系统的药剂为PD-1拮抗剂。
63.根据项58至项62任意一项的用途，其中所述肿瘤或癌症选自由以下组成的组：结直肠癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、前列腺癌、肾癌、宫颈癌、骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、甲状腺癌、子宫内膜癌、子宫癌、膀胱癌、神经内分泌癌、头颈部癌、肝癌、鼻咽癌、睾丸癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、黑色素瘤、基底细胞皮肤癌、鳞状细胞皮肤癌、隆突性皮肤纤维肉瘤、Merkel细胞癌、胶质母细胞瘤、胶质瘤、肉瘤、间皮瘤和骨髓增生异常综合征。
64.根据项58至项63任意一项的用途，其中所述肿瘤或癌症表达ATM。
65.拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂，其用作药物，其中将拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂同时或依次施用至对象。
66.根据项65的用于所述用途的化合物，其中拓扑异构酶抑制剂为拓扑异构酶I抑制剂，优选伊立替康。
67.根据项65或项66的用于所述用途的化合物，其中ATM抑制剂为咪唑并[4,5-c]喹啉衍生物，优选化合物1或8-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(3-氟-5-甲氧基-吡啶-4-基)-7-甲氧基-3-甲基-1,3-二氢-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮，更优选化合物1。
68.根据项65至项67任意一项的用于所述用途的化合物，其中刺激免疫系统的药剂为免疫检查点抑制剂，优选PD-1拮抗剂，更优选抗PD-L1抗体。
69.根据项65至项68任意一项的用于所述用途的化合物，其中拓扑异构酶抑制剂为伊立替康，ATM抑制剂为化合物1，且刺激免疫系统的药剂为PD-1拮抗剂。
本文引用的所有参考文献均通过引用并入本发明的公开中。
应理解，本发明不限于本文所述的特定分子、药物组合物、用途和方法，因为这些物质当然可以变化。还可以理解的是这里所使用的术语只是为了描述特定的实施方案的目的，而不是为了限制在仅由所附的权利要求中所定义的本发明的保护范围。在说明书中详细描述了根据本发明必不可少的技术。未详细描述对应于本领域技术人员公知的已知标准方法的其他技术，或者在引用的参考文献、专利申请或标准文献中更详细地描述了这些技术。如果在申请中没有给出其他提示，则它们仅用作示例，根据本发明它们不被认为是必要的，但是它们可以由其他合适的工具和生物材料代替。此外，本文所述的每个实施方案均在其范围内设想本文所述化合物的药学上可接受盐。因此，本文所述的所有化合物的描述中隐含短语“或其药学上可接受的盐”。
与本发明的任何特定方面有关的描述的任何特征，包括任选的、适合的和优选的特征，也可以是本发明任何其他方面的特征，包括任选的、适合的和优选的特征。
尽管与本文描述的那些类似或等同的方法和材料可用于本发明的实践或测试，但下文描述了合适的实施例。在实施例中，使用不含污染活性的标准试剂和缓冲剂(无论何时)。特别地，这些实施例被解释为使得它们不限于明确说明的特征组合，但是只要解决了本发明的技术问题，示例性特征可以不受限制地再次组合。类似地，任何权利要求的特征可以与一个或多个其他权利要求的特征组合。已经概述和详细描述的本发明通过以下实施例进行说明而不受限制。
实施例
实施例1-评估ATM抑制剂与拓扑异构酶抑制剂组合对35种细胞系生长的作用
独立检测了两种ATM抑制剂(咪唑并[4,5-c]喹啉衍生物，其中“ATMi 1”对应于化合物1)与多种化疗药剂的组合，所述多种化疗药剂包括拓扑异构酶I抑制剂SN-38(伊立替康的活性代谢物)和拓扑替康以及拓扑异构酶II抑制剂依托泊苷，以分析对细胞生长抑制的联合作用。ATM抑制剂以1μM使用，和拓扑异构酶抑制剂以增加的浓度使用：SN38以3.91E-10M、1.56E-09M、6.25E-09M、2.5E-08M和1E-07M，拓扑替康以1.95E-09M、7.81E-09M、3.13E-08M、1.25E-07M和5E-07M，以及依托泊苷以1.95E-08M、7.810E-08M、3.13E-07M、1,25E-06M和5E-06M。用所述组合处理35种不同的癌细胞系。
实验条件/处理方案：在标准条件下，将细胞接种于96孔微量滴定板中。处理前，将细胞静置48小时。处理进行120小时，并通过加入三氯乙酸而终止，然后由磺酰罗丹明B染色。组合包括同时添加两种药剂对。
通过与使用用于组合的相同浓度的这些化合物单药疗法观察到的抑制进行比较而测量的其细胞生长抑制，确定了化合物的联合作用。使用BLISS独立模型(E1+2＝E1+E2–E1E2)，联合作用计算为超过单药疗法作用的线性组合的过量。平均BLISS过量计算为所有抑制剂浓度下单药疗法作用的线性组合的平均过量。高于0.1的阳性BLISS过量值表示协同作用，且低于-0.1的BLISS过量值表示拮抗作用。两种ATM抑制剂和多种化疗药剂(包括上述拓扑异构酶抑制剂)的组合对于35种细胞系的BLISS过量测定值示于图1。
实施例2-评估ATM抑制剂与拓扑异构酶抑制剂组合对体外细胞生长的作用
测试了两种ATMi抑制剂(咪唑并[4,5-c]喹啉衍生物，其中“ATMi 1”对应于化合物1)与伊立替康的活性代谢物(SN38)组合。在模型设置中对ATM和SN38的抑制剂以连续稀释来测试，以便将每种浓度的ATM抑制剂与每种浓度的组合伙伴来组合进行测试。对于SN38，使用了2.5E-08M、6.3E-09M、1.6E-09M、4E-10M、9.8E-11、2.4E-11M和0M，且对于ATM抑制剂，使用了1.0E-5M、2.5E-06M、6.3E-07、1.6E-07、3.9E-08、9.8E-09M和0M。将细胞接种于96孔板上，并在第二天加入化合物。72h后，使用Alamar Blue试剂测定活力。通过将空白对照设定为-100％和未处理的对照设定为0％，完成了归一化。
当存在SN38的固定浓度时，各ATMi浓度的生长抑制示于图2。为了进行比较，还显示了SN38的连续稀释所诱导的生长抑制。在表达野生型ATM的细胞系(结肠癌细胞系HCT116和SW620)中，通过与SN38组合，可以证明明显的联合作用，其导致浓度反应曲线拐点向较低ATMi浓度偏移并导致生长抑制的增加。对于不表达ATM的细胞系(SKCO1和NCI-H23)，未能检测到联合作用。在这种情况下，诱导的生长抑制仅是拓扑异构酶抑制的结果。用两种不同的ATMi可以证明该作用。
实施例3-在CRC异种移植模型中评估ATM抑制剂与拓扑异构酶抑制剂组合的治疗 作用
在小鼠中的人结肠癌异种移植模型SW620(皮下肿瘤植入)中，测试了两种不同ATM抑制剂(咪唑并[4,5-c]喹啉衍生物，其中“ATMi 1”对应于化合物1)与伊立替康组合的治疗作用。用伊立替康和各个ATM抑制剂的组合的三个1周周期或各个单药疗法对照臂来治疗动物。一个周期由以下组成：一次伊立替康应用(ip)，剂量为50mg/kg，随后为24h后的100和50mg/kg的ATMi 1，或10和25mg/kg的ATMi 2(po)，并应用于随后的四天。
治疗对肿瘤体积的作用示于图3。
与伊立替康治疗臂相比，向伊立替康添加各个较高ATMi剂量产生显著更高的功效。例如，在三个1周治疗周期结束时(第21天)用ATMi 2进行的研究中，各(25mg/kg)组合组(n＝10)的平均肿瘤体积为53mm3-与起始体积相比减少～87％，而伊立替康组(n＝10)的平均肿瘤体积增加223％至～220mm3。停止治疗后一周(d28)，与肿瘤起始体积相比，组合臂的5/10只动物仍无进展(肿瘤体积的增加＜73％)，而3/10只疾病稳定(肿瘤体积变化在减少30％和增加73％之间)，和2/10只部分反应(肿瘤体积的减少＞30％)。在伊立替康臂中，所有动物在第28天均显示进展性疾病。
治疗被良好地耐受。与载具处理的动物相比，在单药疗法臂或组合治疗臂中未观察到体重减轻。两种ATM抑制剂显示了相似的结果。
实施例4-评估ATM抑制剂与拓扑异构酶抑制剂组合对结肠癌细胞系的免疫原性细 胞死亡的作用
ATMi抑制剂已与伊立替康的活性代谢物(SN38)组合使用。对ATM的抑制剂和SN38以单一药剂和以组合在组合的GI50的浓度下进行了测试。SN38的GI50作为用于诱导免疫原性细胞死亡的阳性对照包括在内。用作单一药剂或组合的浓度为0.4nM的SN38和250nM的ATMi2，且SN38的GI50为2nM。通过流式细胞术分析了细胞表面钙网蛋白、HSP70和HSP90的表达，通过ATPlite试验PerkinElmer分析了ATP分泌，通过HMGB1 Elisa(IBL International)分析了HMGB1释放，且通过Caspase-Glo 3/7试验系统(测量半胱天冬酶-3/7活性)分析了细胞凋亡。
在相同样品中进行DAMP(钙网蛋白、HSP70、HSP90、HMGB1和ATP)分析。接种后24小时处理细胞，并在处理后72小时进行分析。细胞用于FACS分析，且上清液用于ATP和HMGB1测量。按照相同的处理方案平行进行Caspase-Glo 3/7。
对于FACS分析，使用未染色样品作为门控对照，且使用同种型样品测量非特异性抗体结合。％PE阳性细胞代表具有测试的标志物的细胞表面表达的细胞(所有标志物均与PE偶联并独立检测)。根据商业供应商提供的方案，进行ATP分泌、HMGB1释放和细胞凋亡(数据表示为两次独立生物学重复的平均值)。
如图4所反映，通过SN38(GI50)和ATMi 2和SN38的组合的细胞表面钙网蛋白Hsp70和Hsp90表达增加、ATP和HMGB1释放和细胞凋亡(半胱天冬酶-3-7的活化)的增加，观察到明显的免疫原性细胞死亡的诱导，但当这些化合物以以用于组合的浓度作为单一药剂时未观察到。

Claims (15)

1.拓扑异构酶抑制剂、ATM抑制剂和刺激免疫系统的药剂，用于在对象中治疗肿瘤，优选癌症的方法，其中所述拓扑异构酶抑制剂、所述ATM抑制剂和所述刺激免疫系统的药剂被同时或依次施用于所述对象。
2.权利要求1的用于所述用途的化合物，其中所述拓扑异构酶抑制剂为拓扑异构酶I抑制剂，优选伊立替康，或其药学上可接受的盐。
3.权利要求1或2的用于所述用途的化合物，其中所述ATM抑制剂为咪唑并[4,5-c]喹啉衍生物，优选3-氟-4-[7-甲氧基-3-甲基-8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-氧代-2,3-二氢咪唑并[4,5-c]-喹啉-1-基]苯甲腈，或其药学上可接受的盐。
4.权利要求1至3任意一项的用于所述用途的化合物，其中所述刺激免疫系统的药剂为免疫检查点抑制剂，优选PD-1拮抗剂，更优选抗PD-L1抗体。
5.权利要求1至4任意一项的用于所述用途的化合物，其中所述拓扑异构酶抑制剂为伊立替康或其药学上可接受的盐，所述ATM抑制剂为3-氟-4-[7-甲氧基-3-甲基-8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-氧代-2,3-二氢咪唑并[4,5-c]-喹啉-1-基]苯甲腈或其药学上可接受的盐，且所述刺激免疫系统的药剂为PD-1拮抗剂。
6.权利要求1至5任意一项的用于所述用途的化合物，其中所述肿瘤或癌症选自由以下组成的组：结直肠癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、前列腺癌、肾癌、宫颈癌、骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、甲状腺癌、子宫内膜癌、子宫癌、膀胱癌、神经内分泌癌、头颈部癌、肝癌、鼻咽癌、睾丸癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、黑色素瘤、基底细胞皮肤癌、鳞状细胞皮肤癌、隆突性皮肤纤维肉瘤、Merkel细胞癌、胶质母细胞瘤、胶质瘤、肉瘤、间皮瘤和骨髓增生异常综合征。
7.权利要求1至6任意一项的用于所述用途的化合物，其中所述肿瘤或癌症表达ATM。
8.一种试剂盒或药学上可接受的组合物，其包括：
(a)拓扑异构酶抑制剂；
(b)ATM抑制剂；和
(c)刺激免疫系统的药剂。
9.根据权利要求8的试剂盒或组合物，其中所述拓扑异构酶抑制剂为拓扑异构酶I抑制剂，优选伊立替康，或其药学上可接受的盐。
10.根据权利要求8或9的试剂盒或组合物，其中所述ATM抑制剂为咪唑并[4,5-c]喹啉衍生物，优选3-氟-4-[7-甲氧基-3-甲基-8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-氧代-2,3-二氢咪唑并[4,5-c]-喹啉-1-基]苯甲腈，或其药学上可接受的盐。
11.根据权利要求8至10任意一项的试剂盒或组合物，其中所述刺激免疫系统的药剂为免疫检查点抑制剂，优选PD-1拮抗剂，更优选抗PD-L1抗体。
12.根据权利要求8至11任意一项的试剂盒或组合物，其中所述拓扑异构酶抑制剂为伊立替康或其药学上可接受的盐，所述ATM抑制剂为3-氟-4-[7-甲氧基-3-甲基-8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-氧代-2,3-二氢咪唑并[4,5-c]-喹啉-1-基]苯甲腈或其药学上可接受的盐，且所述刺激免疫系统的药剂为PD-1拮抗剂。
13.根据权利要求8至12任意一项的试剂盒或组合物，其用作药物。
14.一种拓扑异构酶抑制剂，其用于通过诱导免疫原性细胞死亡来治疗肿瘤，优选癌症。
15.一种拓扑异构酶抑制剂，其用于诱导免疫原性细胞死亡。
CN201980018987.0A 2018-03-14 2019-03-13 在对象中治疗肿瘤的化合物及其用途 Pending CN111867589A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP18161849 2018-03-14
EP18161849.7 2018-03-14
PCT/EP2019/056287 WO2019175243A1 (en) 2018-03-14 2019-03-13 Compounds and uses thereof to treat tumors in a subject

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111867589A true CN111867589A (zh) 2020-10-30

Family

ID=61655700

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201980018987.0A Pending CN111867589A (zh) 2018-03-14 2019-03-13 在对象中治疗肿瘤的化合物及其用途

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20210353614A1 (zh)
EP (1) EP3765019A1 (zh)
JP (1) JP2021517145A (zh)
KR (1) KR20200131270A (zh)
CN (1) CN111867589A (zh)
AU (1) AU2019233596A1 (zh)
CA (1) CA3093499A1 (zh)
IL (1) IL277158A (zh)
MX (1) MX2020009478A (zh)
RU (1) RU2020133020A (zh)
WO (1) WO2019175243A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2024056074A1 (zh) * 2022-09-16 2024-03-21 应世生物科技(南京)有限公司 Fak抑制剂及拓扑异构酶抑制剂的药物组合及用途

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP4213803A1 (en) * 2020-09-18 2023-07-26 Merck Patent GmbH Pharmaceutical preparation
WO2024189299A1 (en) * 2023-03-10 2024-09-19 University Of Southampton Inhibitors for treating solid tumours

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103068803A (zh) * 2010-08-28 2013-04-24 默克专利股份公司 作为DNA-PK抑制剂的咪唑并[4,5-c]喹啉类化合物
WO2017049199A1 (en) * 2015-09-16 2017-03-23 Board Of Regents, University Of Texas System Combination of topoisomerase-i inhibitors with immunotherapy in the treatment of cancer

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104356236B (zh) 2005-07-01 2020-07-03 E.R.施贵宝&圣斯有限责任公司 抗程序性死亡配体1(pd-l1)的人单克隆抗体
CA2998281C (en) 2008-09-26 2022-08-16 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Human anti-pd-1 antobodies and uses therefor
EP4331604B9 (en) 2008-12-09 2025-07-23 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-pd-l1 antibodies and their use to enhance t-cell function
ES2629337T3 (es) 2009-02-09 2017-08-08 Inserm - Institut National De La Santé Et De La Recherche Médicale Anticuerpos contra PD-1 y anticuerpos contra PD-L1 y usos de los mismos
CA2778714C (en) 2009-11-24 2018-02-27 Medimmune Limited Targeted binding agents against b7-h1
BR112013014076A2 (pt) * 2010-12-06 2016-11-22 Cure Cancer Worldwide Corp métodos de direcionamento metabólico de células de câncer usando quimio- e imunotherapia para tratamento de câncer
KR20190133790A (ko) 2011-08-01 2019-12-03 제넨테크, 인크. Pd-1 축 결합 길항제 및 mek 억제제를 사용하는 암 치료 방법
ES2808152T3 (es) 2011-11-28 2021-02-25 Merck Patent Gmbh Anticuerpos anti-PD-L1 y usos de los mismos
AR093984A1 (es) 2012-12-21 2015-07-01 Merck Sharp & Dohme Anticuerpos que se unen a ligando 1 de muerte programada (pd-l1) humano
US10202454B2 (en) 2013-10-25 2019-02-12 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Anti-PD-L1 monoclonal antibodies and fragments thereof
HUE054873T2 (hu) 2014-02-10 2021-10-28 Merck Patent Gmbh Célzott TGF-béta-gátlás
DK3560924T3 (da) 2015-04-02 2021-06-28 Merck Patent Gmbh Imidazolonylquinoliner og deres anvendelse som atm-kinase-inhibitorer
AU2017237394A1 (en) * 2016-03-21 2018-11-01 Astrazeneca Ab Cinnolin-4-amine compounds and their use in treating cancer
IL272352B2 (en) * 2017-08-11 2023-10-01 Merck Patent Gmbh Pharmaceutical preparation comprising 3-fluoro-4-[7-methoxy-3-methyl-8-(1-methyl-1 h-pyrazol-4-yl)-2-oxo-2,3-dihydro-imidazo[4,5-c]quinolin-1 -yl]-benzonitrile

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103068803A (zh) * 2010-08-28 2013-04-24 默克专利股份公司 作为DNA-PK抑制剂的咪唑并[4,5-c]喹啉类化合物
WO2017049199A1 (en) * 2015-09-16 2017-03-23 Board Of Regents, University Of Texas System Combination of topoisomerase-i inhibitors with immunotherapy in the treatment of cancer

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JUSTIN GREENE等: "The novel ATM inhibitor (AZ31) enhances antitumor activity in patient derived xenografts that are resistant to irinotecan monotherapy", 《ONCOTARGET》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2024056074A1 (zh) * 2022-09-16 2024-03-21 应世生物科技(南京)有限公司 Fak抑制剂及拓扑异构酶抑制剂的药物组合及用途

Also Published As

Publication number Publication date
CA3093499A1 (en) 2019-09-19
US20210353614A1 (en) 2021-11-18
KR20200131270A (ko) 2020-11-23
JP2021517145A (ja) 2021-07-15
EP3765019A1 (en) 2021-01-20
IL277158A (en) 2020-10-29
AU2019233596A1 (en) 2020-10-08
WO2019175243A1 (en) 2019-09-19
MX2020009478A (es) 2020-10-22
RU2020133020A (ru) 2022-04-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2022202686B2 (en) Methods of treating and preventing graft versus host disease
CN112472699A (zh) 改善比生群及衍生物的治疗益处的组合方法
TW202228700A (zh) 治療及預防異體抗體所驅動之慢性移植體對抗宿主疾病之方法
US20210353614A1 (en) Compounds and uses thereof to treat tumors in a subject
TW202320792A (zh) 包含ｆｇｆｒ抑制劑及ｋｒａｓ抑制劑之組合療法
CN113286614A (zh) 用于治疗癌症的pd-1拮抗剂、atr抑制剂和铂化物质的组合
CN114615995A (zh) PD-1、TGFβ和ATM联合抑制与放疗联合用于癌症治疗
HK40086449A (zh) 治疗和预防移植物抗宿主病的方法
WO2025237957A1 (en) Composition for treatment of estrogen-dependent cancer comprising a mettl-3 inhibitor and a topoisomerase-1 inhibitor
CN118632696A (zh) 包含fgfr抑制剂和kras抑制剂的组合疗法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20201030

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication