CN111837960A - 一种适用于喀斯特地貌金丝黄菊的育种方法 - Google Patents
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Abstract
本申请公开了植物种植技术领域的一种适用于喀斯特地貌金丝黄菊的育种方法，步骤一、取金丝黄菊的枝干作为外植体，在超净工作台中，放入70％酒精中消毒35‑40秒，再放入1‰的升汞溶液中消毒13‑15分钟；步骤二、将步骤一得到的外植体接种于以MS为基本培养基，附加0.3‑0.6mg/L的6‑苄基腺嘌呤、0.1‑0.3mg/L的萘乙酸和0.6‑0.7mg/L的褪黑色素的培养基上培养8‑10d，得到不定芽；步骤三、将步骤二中得到的不定芽置于增殖培养基中培养48‑52d，得到丛生芽；步骤四、将步骤三中得到的丛生芽剪切为单芽置于生根培养基中培养11‑13d，得到生根苗；步骤五、将生根苗移栽到育苗盘中，炼苗33‑36d，而后定植到大田，进行田间管理。这样的到的植株具有较高的抗涝性，能够适应喀斯特地貌的地理环境。
Description
技术领域
本发明属于植物种植技术领域，特别涉及一种适用于喀斯特地貌金丝黄菊的育种方法。
背景技术
金丝黄菊为菊科菊属多年生草本植物，原产于江西修水，性味甘苦，富含黄酮、多种氨基酸、维生素和微量元素是我国传统常用中药材之一，具有药茶兼用功能，主要以头状花序入药。作为一种理想的茶用菊花，金丝黄菊因其外型美观(体积大，花型好，能够成球状)，气味芳香且口感极佳，不仅能清热祛风，明目解毒，还能抑制毛细血管的通透性，发挥良好的消炎作用，对口干、火旺、目涩，或由寒、湿引起的肢体疼痛、麻木等疾病具有一定的疗效。
金丝黄菊适宜的生长条件是气候凉爽、通风透光。种植地块以土质结构疏松、透气及排水良好、有机质含量高、pH值6.2～6.7的砂质土壤最为适宜。金丝黄菊忌湿，黏地和低洼地不宜种植，土壤湿度大时生长不良，若长期积水，则易烂根死亡。金丝黄菊忌连作，连年在同一地块上种植，病虫害多，产量和品质大幅度下降。
贵州地势属于典型的喀斯特地貌，属亚热带湿润季风气候，四季分明、春暖风和、雨量充沛、雨热同期。雨量过多导致种植黄菊收成不佳。
发明内容
本发明意在提供一种适用于喀斯特地貌金丝黄菊的育种方法，以使金丝黄菊能够适应喀斯特地貌的地理环境，提高贵州地区的金丝黄菊种植质量。
本方案中的一种适用于喀斯特地貌金丝黄菊的育种方法，包括以下步骤：
步骤一、外植体获取：取金丝黄菊的枝干作为外植体，用软纱布擦拭表面污垢，流水冲洗2-3min，在超净工作台中，放入70％酒精中消毒35-40秒，再放入1‰的升汞溶液中消毒13-15分钟，最后放入无菌水中冲洗干净，将外植体放于已灭菌的接种盘中；
步骤二、不定芽的诱导：将步骤一得到的外植体剪切成1.2-1.8cm2的长度，接种于以MS为基本培养基，附加0.3-0.6mg/L的6-苄基腺嘌呤、0.1-0.3mg/L的萘乙酸和0.6-0.7mg/L的褪黑色素的培养基上，在培养温度22-24℃，光照强度24-26μmol/m2·s，光照时间为10-12h/d的条件下进行培养8-10d，得到不定芽；
步骤三、不定芽的增殖培养：将步骤二中得到的不定芽置于增殖培养基中，在培养温度22-24℃，光照强度24-26μmol/m2·s，光照时间为10-12h/d的条件下进行培养48-52d，得到丛生芽；
步骤四、不定芽的生根：将步骤三中得到的丛生芽剪切为单芽置于生根培养基中，在培养温度22-24℃，光照强度24-26μmol/m2·s，光照时间为10-12h/d的条件下进行培养11-13d，得到生根苗；
步骤五、练苗：将生根苗移栽到育苗盘中，炼苗33-36d，而后定植到大田，进行田间管理。
优选的，所述无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水。
优选的，所述增殖培养基以MS为基本培养基，附加3-5mg/L的6-糠基氨基嘌呤和0.2-0.3mg/L的萘乙酸。
优选的，所述增值培养基的PH值为5.8-6.8。
优选的，所述生根培养基是以1/2MS为基本培养基，附加0.4-0.8mg/L的萘乙酸、0.2-1mg/L的吲哚丁酸、0.8-1.2g/L的活性炭和4-6g/L的琼脂。
优选的，所述生根培养基的pH值为5.8。
本方案的有益效果：本发明利用组织培养技术，在分化增殖培养基中添加一定浓度的褪黑素素诱发胚性细胞或愈伤组织、腋芽、不定芽突变，利用该诱变剂残效期短的特性，连续诱变，不需要进行继代直接形成丛芽后，再依次转接到生根培养基形成完整植株。这样的到的植株具有较高的抗涝性，能够适应喀斯特地貌的地理环境，提高了金丝黄菊的存活率，提高了金丝黄菊的产量。
具体实施方式
下面通过具体实施方式进一步详细说明：
实施例1：一种适用于喀斯特地貌金丝黄菊的育种方法，包括以下步骤：
步骤一、外植体获取：取金丝黄菊的枝干作为外植体，用软纱布擦拭表面污垢，流水冲洗2min，在超净工作台中，放入70％酒精中消毒40秒，再放入1‰的升汞溶液中消毒13分钟，最后放入无菌水中冲洗干净，将外植体放于已灭菌的接种盘中，无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水；
步骤二、不定芽的诱导：将步骤一得到的外植体剪切成1.2cm2的长度，接种于以MS为基本培养基，附加0.3mg/L的6-苄基腺嘌呤、0.1mg/L的萘乙酸和0.6mg/L的褪黑色素的培养基上，在培养温度22℃，光照强度24μmol/m2·s，光照时间为10h/d的条件下进行培养8d，得到不定芽；
步骤三、不定芽的增殖培养：将步骤二中得到的不定芽置于增殖培养基中，在培养温度22℃，光照强度24μmol/m2·s，光照时间为10h/d的条件下进行培养48d，得到丛生芽，增殖培养基以MS为基本培养基，附加3mg/L的6-糠基氨基嘌呤和0.2mg/L的萘乙酸，增值培养基的PH值为5.8；
步骤四、不定芽的生根：将步骤三中得到的丛生芽剪切为单芽置于生根培养基中，在培养温度22℃，光照强度24μmol/m2·s，光照时间为10h/d的条件下进行培养11d，得到生根苗，生根培养基是以1/2MS为基本培养基，附加0.4mg/L的萘乙酸、0.2mg/L的吲哚丁酸、0.8g/L的活性炭和4g/L的琼脂，生根培养基的pH值为5.8；
步骤五、练苗：将生根苗移栽到育苗盘中，炼苗33-36d，而后定植到大田，进行田间管理。
实施例2：一种适用于喀斯特地貌金丝黄菊的育种方法，包括以下步骤：
步骤一、外植体获取：取金丝黄菊的枝干作为外植体，用软纱布擦拭表面污垢，流水冲洗2.5min，在超净工作台中，放入70％酒精中消毒35秒，再放入1‰的升汞溶液中消毒14分钟，最后放入无菌水中冲洗干净，将外植体放于已灭菌的接种盘中，无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水；
步骤二、不定芽的诱导：将步骤一得到的外植体剪切成1.6cm2的长度，接种于以MS为基本培养基，附加0.5mg/L的6-苄基腺嘌呤、0.2mg/L的萘乙酸和0.65mg/L的褪黑色素的培养基上，在培养温度23℃，光照强度25μmol/m2·s，光照时间为11h/d的条件下进行培养9d，得到不定芽；
步骤三、不定芽的增殖培养：将步骤二中得到的不定芽置于增殖培养基中，在培养温度23℃，光照强度25μmol/m2·s，光照时间为11h/d的条件下进行培养50d，得到丛生芽，增殖培养基以MS为基本培养基，附加4mg/L的6-糠基氨基嘌呤和0.3mg/L的萘乙酸，增值培养基的PH值为6.2；
步骤四、不定芽的生根：将步骤三中得到的丛生芽剪切为单芽置于生根培养基中，在培养温度23℃，光照强度25μmol/m2·s，光照时间为11h/d的条件下进行培养12d，得到生根苗，生根培养基是以1/2MS为基本培养基，附加0.6mg/L的萘乙酸、0.6mg/L的吲哚丁酸、1g/L的活性炭和5g/L的琼脂，生根培养基的pH值为5.8；
步骤五、练苗：将生根苗移栽到育苗盘中，炼苗34d，而后定植到大田，进行田间管理。
实施例3：一种适用于喀斯特地貌金丝黄菊的育种方法，包括以下步骤：
步骤一、外植体获取：取金丝黄菊的枝干作为外植体，用软纱布擦拭表面污垢，流水冲洗3min，在超净工作台中，放入70％酒精中消毒37秒，再放入1‰的升汞溶液中消毒15分钟，最后放入无菌水中冲洗干净，将外植体放于已灭菌的接种盘中，无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水；
步骤二、不定芽的诱导：将步骤一得到的外植体剪切成1.8cm2的长度，接种于以MS为基本培养基，附加0.6mg/L的6-苄基腺嘌呤、0.3mg/L的萘乙酸和0.7mg/L的褪黑色素的培养基上，在培养温度24℃，光照强度26μmol/m2·s，光照时间为12h/d的条件下进行培养10d，得到不定芽；
步骤三、不定芽的增殖培养：将步骤二中得到的不定芽置于增殖培养基中，在培养温度24℃，光照强度26μmol/m2·s，光照时间为12h/d的条件下进行培养52d，得到丛生芽，增殖培养基以MS为基本培养基，附加5mg/L的6-糠基氨基嘌呤和0.3mg/L的萘乙酸，增值培养基的PH值为6.8；
步骤四、不定芽的生根：将步骤三中得到的丛生芽剪切为单芽置于生根培养基中，在培养温度24℃，光照强度26μmol/m2·s，光照时间为12h/d的条件下进行培养13d，得到生根苗，生根培养基是以1/2MS为基本培养基，附加0.8mg/L的萘乙酸、1mg/L的吲哚丁酸、1.2g/L的活性炭和6g/L的琼脂，生根培养基的pH值为5.8；
步骤五、练苗：将生根苗移栽到育苗盘中，炼苗36d，而后定植到大田，进行田间管理。
Claims (6)
1.一种适用于喀斯特地貌金丝黄菊的育种方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤一、外植体获取：取金丝黄菊的枝干作为外植体，用软纱布擦拭表面污垢，流水冲洗2-3min，在超净工作台中，放入70％酒精中消毒35-40秒，再放入1‰的升汞溶液中消毒13-15分钟，最后放入无菌水中冲洗干净，将外植体放于已灭菌的接种盘中；
步骤二、不定芽的诱导：将步骤一得到的外植体剪切成1.2-1.8cm2的长度，接种于以MS为基本培养基，附加0.3-0.6mg/L的6-苄基腺嘌呤、0.1-0.3mg/L的萘乙酸和0.6-0.7mg/L的褪黑色素的培养基上，在培养温度22-24℃，光照强度24-26μmol/m2·s，光照时间为10-12h/d的条件下进行培养8-10d，得到不定芽；
步骤三、不定芽的增殖培养：将步骤二中得到的不定芽置于增殖培养基中，在培养温度22-24℃，光照强度24-26μmol/m2·s，光照时间为10-12h/d的条件下进行培养48-52d，得到丛生芽；
步骤四、不定芽的生根：将步骤三中得到的丛生芽剪切为单芽置于生根培养基中，在培养温度22-24℃，光照强度24-26μmol/m2·s，光照时间为10-12h/d的条件下进行培养11-13d，得到生根苗；
步骤五、练苗：将生根苗移栽到育苗盘中，炼苗33-36d，而后定植到大田，进行田间管理。
2.根据权利要求1所述的一种适用于喀斯特地貌金丝黄菊的育种方法，其特征在于：所述无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水。
3.根据权利要求2所述的一种适用于喀斯特地貌金丝黄菊的育种方法，其特征在于：所述增殖培养基以MS为基本培养基，附加3-5mg/L的6-糠基氨基嘌呤和0.2-0.3mg/L的萘乙酸。
4.根据权利要求3所述的一种适用于喀斯特地貌金丝黄菊的育种方法，其特征在于：所述增值培养基的PH值为5.8-6.8。
5.根据权利要求4所述的一种适用于喀斯特地貌金丝黄菊的育种方法，其特征在于：所述生根培养基是以1/2MS为基本培养基，附加0.4-0.8mg/L的萘乙酸、0.2-1mg/L的吲哚丁酸、0.8-1.2g/L的活性炭和4-6g/L的琼脂。
6.根据权利要求5所述的一种适用于喀斯特地貌金丝黄菊的育种方法，其特征在于：所述生根培养基的pH值为5.8。
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