CN1117585C - 具有抗螺杆菌活性的乳链菌素合用甘油单月桂酸酯 - Google Patents

Abstract

本发明公开的是以乳链菌素和GML作为杀灭螺杆菌的活性成分的组合物，以及使用GML/乳链菌素组合物根除螺杆菌定居和治疗螺杆菌感染的方法。

Description

具有抗螺杆菌活性的乳链菌素合用甘油单月桂酸酯

                               技术领域

本发明涉及主要由含羊毛硫氨酸的细菌素-乳链菌素，配以甘油单月桂酸酯组成的组合物，及该组合物在治疗螺杆菌类细菌感染上的应用。

                               背景技术

很多涉及GML或乳链菌素抗微生物活性的科学文献都讨论到它们在无螯合剂或其它增效剂存在下有抗革兰氏阳性菌的活性而无抗革兰氏阴性菌的活性。

甘油单月桂酸酯(GML)也称作甘油一月桂酸酯，是甘油的月桂酸酯。它用作表面活性剂、防腐剂和化妆品中的去脂剂和化妆清洁剂，作为食品防腐剂仅被有限地应用。

GML被美国食品药物管理局(FDA)认可为安全的。联邦管理法规(CFR)第21章第184部分在那些被确认为GRAS(一般认为安全)的化合物中包括单酸甘油酯。CFR第21章184.1505节进一步叙述了单酸甘油酯(包括GML)符合食品化学品药典的规格，可用于食品，除了现行有益的制造实践外别无限制。

GML和其它天然存在或合成的单酸甘油酯(包括饱和或不饱和脂肪酸)对革兰氏阳性菌有活性〔Kabara，J.J.，1986.Dietary lipids as anticariogenicagents.J.Environ.Pathol.Toxicol.Oncol.6：87-113〕，但一般认为对革兰氏阴性菌无活性〔Schlievert，et al.，1992.Effect of glycerol monolaurateon bacterial growth and toxin production.Antimicrob.Ag.Chemother.36：626-631.〕。

其它多元醇(如糖)的脂肪酸酯据报告对革兰氏阳性菌也有抗微生物活性〔Conley，A.J.& J.J.Kabara，1973.Antimicrobial action of esters ofpolyhydric alcohols.Antimicrob.Ag.Chemother.4：501-506〕。

有人报告，在增效剂如螯合剂的存在下，这些化合物中有些化合物(包括GML)对革兰氏阴性菌的一些常见菌种(如大肠杆菌和其它肠杆菌科菌及绿脓杆菌)具有抑制作用，而在无增效剂存在下，这些菌种是不受这类酯的影响的〔Shibasaki，I.& Kato，1978.Combined effects on antibacterial activity of fatty acidsand their esters against Gram-negative bacteria.In Kabara，J.J.ed.Symposium on the Phatmacological Effect of Lipids.The American OilChemists’Society Champaign，Illinois，pp 15-24.〕。这些作者还报告了在存在柠檬酸盐作为螯合剂时GML对水中培养的大肠杆菌的杀菌活性。

授予Kato等的美国专利No.4,485,029揭示了甘油单月桂酸酯合用一种或几种抗微生物剂(如对羟基苯甲酸酯)及任意的一种有机表面活性剂，在接触透镜清洁、消毒、防腐用组合物中的应用。Kato等并未揭示GML组合物可用于治疗革兰氏阴性菌感染，也未揭示GML可与含如乳链菌素这样的细菌素的羊毛硫氨酸合用。

GML用作抗革兰氏阴性病原体(其终宿主为哺乳动物)的抗微生物剂不加增效剂时的应用，以前没有被证实过。GML是高度亲脂性的，在水中难溶。因此，其抗微生物活性的研究一般被迫使用乙醇浓提物，这在某些药理学应用上是不能接受的。

乳链菌素是具有抗微生物性质的多肽，由自然界各种乳链球菌的菌株产生。乳链菌素被用作食物防腐剂，以抑制细菌生长和某些种类革兰氏阳性芽胞杆菌的芽孢出芽。乳链菌素被发现以低浓度天然存在于牛乳和乳酪中，据信对人是完全无毒和无变态反应性的。

乳链菌素作为在经巴氏消毒的乳酪涂抹食品、经巴氏消毒的混合乳酪涂抹食品、及经巴氏消毒的乳酪涂抹食品或经巴氏消毒的混合乳酪涂抹食品与水果、蔬菜或肉类中的之间食物成分，被FDA认为是安全的。由于是多肽，一旦进入小肠，保留在食物中的乳链菌素的任何残基即被迅速消化。

虽然现有技术教导，乳链菌素对革兰氏阴性菌无效，只对非常有限的革兰氏阳性菌有效，但是，含乳链菌素的组合物，特别是与各种非杀菌剂合用，被证明对各种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌有高度活性(美国专利No.5,135,910；5,217,950和5,260,271)。最近，有人描述了乳链菌素在螯合剂存在下对另外的革兰氏阴性菌包括螺杆菌属的丝幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)的杀菌活性(美国专利No.5,304,540和5,334,582)。

共同转让的美国专利4,980,163；5,135,910；5,217,950；5,260,271；5,334,582和5,304,540公开了表面活性剂(包括甘油酯)作为含羊毛硫氨酸的细菌素的杀菌活性增效剂。例如，美国专利No.5,135,910；5,217,950和5,260,271公开了甘油一月桂酸酯或一油酸酯与含羊毛硫氨酸的细菌素如乳链菌素合用，在杀灭革兰氏阳性菌中的无乳链球菌和单核细胞增多性李司忒氏菌(Listeriamonocytogenes)上是有效的。美国专利No.4,980,163公开了甘油一酯与溶葡萄菌素、含羊毛硫氨酸的细菌素如乳链菌素和螯合剂EDTA合用，增强组合物对金黄色葡萄球菌和无乳链球菌的杀菌活性。美国专利4,980,163；5,135,910；5,217,950；和5,260,271中没有提示乳链菌素和甘油酯组合物对革兰氏阴性菌(如螺杆菌属)会有活性。

很多胃肠道病原体是革兰氏阴性菌。鉴于现有技术的教导，可以预想到GML或表面活性剂单独对这些微生物无活性。这种病原体的例子是幽门螺杆菌(在现有技术中也鉴定为幽门弯曲杆菌(Campylobacter pylori)，一种定居(colonize)胃粘膜的微需氧的革兰氏阴性杆菌。这是一种非常独特的微生物，因为它在人胃的不适宜生存的酸性环境中生长〔Hazell，et al.，1986.Campylobacter pylorisand gastritis：association with intracellular spaces and adaptation toan environment of mucus as inportant factors in colonization of the gastricepithelium.J.Infect.Dis.153：658-663〕。螺杆菌属的其他种感染各种哺乳动物的胃。

现已确定，各种胃肠道疾病(包括胃炎、溃疡和某些胃肠道癌症)的发病机理与幽门螺杆菌有关，这一发现彻底改革了治疗这些常见病的方法〔Marshall，1988.The Campylobacter pylori story.Scand.J.Gastroenterol.146(Suppl.)：58-66；Glise，1990.Epidemiology in peptic ulcer disesse.Current statusand future aspects.Scand.J.Gastroenterol.25：13-18；Clarkson，et al.，1993.Gastric cancer and Helicobacter pylori infection.J.Clin.Pathol.46：997-999；Yamada，et al.，1994.Helicobacter pylori peptic ulcerdisease.JAMA 272：65-69〕。在易感个体，螺杆菌属定居也与冠脉疾病和中风有关。

虽然幽门螺杆菌(H.pylori)对很多抗微生物剂敏感，但尚未证明单一疗法在临床上的有效性。而且，早已产生了对两种抗微生物剂甲硝唑和clarithromycin耐药的菌株〔Boron，et al.，1994.Helicobacter pylori bindsto blood group antigens.Scientific Amer.Science & Med.1：28-37〕。现行较佳的胃溃疡治疗涉及用三种不同的抗微生物剂进行治疗，它们中有些可能耐受性差〔Marshall，1993.Treatment strategies for Helicobacter pyloriinfection.Gastroenterol.Clin.North Am.22：183-198〕。无一治疗方案完全有效地单独根治H.pylori，很多患者由于对治疗方案耐受性差而不能完成一个疗程〔Bell，et al.，1993.Helicobacter pylori eradication：efficacy andside dffect profile of a combination of omeprazole，amoxycillin andmetronidazole compared with four alternative regimens.Quart.J.Med.86：743-750)。故而，需要有新的药剂。可能这种病状根本不能靠单一的抗菌剂治愈，因此，为了达到可靠的长期根治及好的耐受性和顺应性，需要将新的疗法与现有的或其它新的药剂联合使用。

我们发现，GML和乳链菌素的浓提物单独使用时在杀菌效应上是次优的，但合用时相互协同增强对螺杆菌属菌株的杀菌活性。虽然乳链菌素在缺乏GML的试验中要求增强剂(如螯合剂)的存在，以对幽门螺杆菌和大多数其它革兰氏阴性杆菌发挥有效的杀菌活性，但乳链菌素和GML的协同增强效应并不需要螯合剂或其它非杀菌性增强剂的存在。因此，在缺乏螯合剂的情况下，乳链菌素与低浓度GML抗H.pylori的强大的协同效应是惊人的。

螺杆菌属和其它胃肠道杆菌存在于粘膜环境中。粘液是粘膜上皮细胞分泌的粘弹性层，在上皮细胞与其密接环境之间形成保护屏障。粘液层的有关组分是粘蛋白，它是一种二硫化物交联的多磺化糖蛋白复合基质。这形成了一层半液体层，成为一种屏障，分子必须通过其间以达到下面的上皮细胞。药学活性剂通过这样高度多磺化的屏障可能成问题；带负电荷的分子可被粘膜排拆，而带正电荷的分子可被吸引，由于饱和层的形成而可能被阻隔。因此，排列于胃肠道粘膜上皮细胞上的粘液层对杀菌剂的有效性可能产生屏障。

在胃中，螺杆菌属的杆菌定居于粘液层。粘液层中的螺杆菌受到保护，不被胃内容物破坏，否则胃内容物对微生物的存活是有害的。为了根除胃中的H.pylori，局部作用的抗螺杆菌剂必须能渗透或克服粘液形成的屏障。治疗这种感染的一个待选的方法可能是通过用粘液分解剂破坏粘液可导致螺杆菌从粘液微环境释放出来。粘液的破坏可将细菌暴露于包含抗微生物剂的胃腔内容物中；使细菌易于受在局部起作用的抗微生物剂的杀伤。

已知对粘蛋白有活性的药剂包括分解酶，例如糖水解酶类，如美国专利No.5,328,846公开的α淀粉酶，或蛋白酶类，如链霉蛋白酶(Kimura et al.，Am.J.Gastroenterol.90″60-63，1995)，及巯基化合物，如N-烷基半胱氨酸类，WR2721和N-(2-巯基丙基)-甘氨酸(MPG)。本发明涉及破坏胃的粘液环境、使胃中的螺杆菌属细菌暴露于有效量的乳链菌素和GML组合物以杀灭所暴露的细菌的方法。

                            发明内容

本发明涉及主要由乳链菌素和GML组成的组合物，它们的浓度各自单独使用是次优的，但合并使用则对螺杆菌属革兰氏阴性杆菌，特别对Helicobacterpylori是杀菌性的。乳链菌素和GML组合物适合于哺乳动物内服，对破坏H.pylori的定居和治疗由H.pylori定居引起的感染或其它疾病状态是有效的。从剂型容易给药和耐受性的角度来看，乳链菌素和GML或类似的化合物用作抗哺乳动物细菌感染的活性物质是有益的。

于是，本发明提供了一种体外抑制螺杆菌属细菌定居的方法，其特征在于包括在需要所述抑制作用之处使用主要由有效量的GML、有效量的乳链菌素和药学上可接受的载体组成且不含螯合剂的组合物。此外，本发明还提供了GML-乳链菌素组合物用于制备根除螺杆菌属细菌定居或治疗由尤其引起的感染或其它疾病状态的药物中的用途，所述组合物主要由在无螯合剂存在下有效量的GML、有效量的乳链菌素和药学上可接受的载体组成。

本发明涉及治疗螺杆菌属革兰氏阴性杆菌(特别是H.pylori)引起的胃肠道感染的组合物和治疗的方法。对本发明的治疗方法敏感的其它细菌是与螺杆菌关系非常密切的杆菌属，如空肠弯曲菌(Campylobacter)。螺杆菌包括(但不限于)H.pylori(人)、H.canis(狗)、H.acinonyx，H.pullorum，H.muridarum，H.cinaedi，H.fennelliae，H.nemestrinae，H.pumetensis，H.bizzozeronii，H.mustelae(雪貂)和H.felis(猫)。后两种螺杆菌经常用于螺杆菌感染的雪貂和小鼠模型。本发明的组合物还可应用于杀灭定居于口腔的幽门螺杆菌，因此，用于破坏细菌定居或治疗口腔H.oylori感染的方法中。

乳链菌素浓提物30-100μg/ml或GML浓提物10μg/ml单独而不是合并使用时对H.pylori的存活力影响极小，但是，10μg/ml GML和30-100μg/ml乳链菌素合并使用，则迅速产生该微生物成活力的显著降低。成活力的降低程度与合用GML的乳链菌素的浓度成比例。将单独使用时作用次优的浓度的乳链菌素和GML合并使用，产生的协同效应是它们单独使用时的现有技术所不能预见的，因为以前证明，乳链菌素在这样的浓度单独使用时无抗幽门螺杆菌活性。

具有类似于乳链菌素的性质的其它羊毛硫氨酸也可使用。本发明的还有一些实施方案涉及包括与乳链菌素合用的化学上类似于GML的分子作为活性成分的组合物及使用这些组合物的方法。这样的分子来自甘油(或其它多羟基化合物，如糖)和脂肪酸。

为了根除H.pylori定居或治疗因H.pylori定居而引起的感染或其它疾病状态，GML和乳链菌素可以作为分开的组合物使用时合起来给药或相继给药，或作为配制的单一组合物给药，并可与其它用于治疗胃肠道疾病的药学活性物质(例如铋盐，如碱式柠檬酸铋或碱式水杨酸铋)联合用药。为了治疗与胃肠道中H.pylori的存在有关的某些疾病和症状，这些组合物可与其它药物(如西咪替丁、雷尼替丁、奥美拉唑、lansoprazole、抗酸药、脲酶抑制剂)联合使用或合并使用。在这些治疗中，外加的活性药剂可考虑与GML-乳链菌素组合物同时或间歇地给药，给药方式可根据需要在治疗过程中加以改变。

本发明的有关具体实施方案涉及治疗方法，它包括将GML-乳链菌素组合物与粘液分解剂前后使用。粘液分解剂减少或消除粘液对抗菌剂作用的影响。粘液可起阻止药剂到达存在于粘膜上皮中的感染存在部位的作用。粘液分解剂通过各种机制降低粘液的粘滞度、破坏其完整性。巯基粘液分解化合物，如N-烷基-半胱氨酸、青霉胺、N-(2-巯基丙基)甘氨酸和WR2721(巯基乙基-1，3-二氨基丙烷)，减少粘蛋白基质的二硫键桥。粘液也可通过暴露于水解酶(如消化粘蛋白的糖水解酶和蛋白酶及核酸酶)而被裂解。特别是，链霉蛋白酶(一种蛋白酶)，如美国专利No.4,440,749和4,485,095所公开的那样，对于裂解粘蛋白基质是有用的，这些专利在此引为参考。

各别地或共同地起局部作用的乳链菌素和GML，其作用可能得益于被降到正常以下或另外被粘液分解剂裂解的粘液层的粘度。但是，粘液分解剂裂解粘液层的最适条件常常与某些抗螺杆菌剂的作用不一致。

特别是，在这些粘液分解剂所需要的中性或微碱性pH最适条件下，乳链菌素会被链霉蛋白酶消化而灭活及与巯基化合物反应。另一方面，如果在粘液分解剂作用后将乳链菌素或其它敏感杀菌剂与乳链菌素一起在合适的酸性赋形剂中合并使用以降低胃腔中的pH，则在一种情况下巯基的活性，在另一种情况下酶的活性，在胃中会被低pH和胃蛋白酶的再激活而抑制或灭活。那些不被酸或胃蛋白酶灭活或抑制的杀菌剂及其联合使用则会对螺杆菌发挥更有效的作用，以更有效地治愈螺杆菌感染。事实上，细菌微环境的破坏及暴露于酸性pH，本身会部分地不利于对酸敏感的螺杆菌的存活，进一步有助于杀菌剂发挥作用。

此外，Kimura等公开的链霉蛋白酶的使用要求在该情况下使用的抗生素通过鼻胃管从胃中除去，以便防止它们继续产生副作用。本发明的实施方案包括使用酸稳定性杀菌剂，它们然后通过吸收(在用单酸甘油酯的情况下)或通过胰酶破坏(在用乳链菌素的情况下)从肠道消除，并不需要除正常胃排空之外从胃清除杀菌剂。这显然是有利的，因为不再需要通过鼻胃管从胃除去抗螺杆菌药物，这是不舒服的、费钱的，对于某些患者来说可能是不可接受的。

巯基粘液分解化合物在pH7.0或更高的pH下最适地减少二硫键。与巯基化合物同时给予合适的缓冲液如碳酸氢盐或同时给予胃酸抑制剂，可产生中性至碱性的胃部环境。因为极少粘液分解酶能在胃的高度酸性环境中起作用或存活，它们在酸性环境下易被胃蛋白酶消化，因此，它们也必须与提高胃内容物pH的药剂一起服用。因此，在用胃蛋白酶如链霉蛋白酶治疗H.pylori时，可以合用抗分泌剂如H₂拮抗剂或质子泵抑制剂以抑制酸的分泌，这样，蛋白酶就释放到中性或弱碱性环境中。换一种方法，或与这种治疗合用，可使蛋白酶释放到中和胃酸的弱碱性缓冲液如碳酸氢盐中。再换一种方法，可在给予粘液分解剂前分别给予升高pH的缓冲液或抗分泌剂。

因为乳链菌素是含巯基的多肽，因此，粘液分解剂(巯基化合物)或蛋白酶应在乳链菌素-GML组合物之前而不是同时给予。

在本发明的另一个实施方案中，GML-乳链菌素治疗和用粘液分解剂治疗合并进行的治疗可扩展到包括用其它杀菌剂进行的治疗。在胃中快速及局部作用以杀灭螺杆菌的杀菌剂可望比诸如吸收到全身循环或进入肠壁的抗生素等药剂具有较少的副作用。这样的抗生素可对正常肠道微生物群产生不良影响，使机会性病原体定居肠道。因此，最好是不采纳与抗生素共同给药，除非它是消除环境下的感染最有效的方法。

组合物的活性组分典型的每天剂量可因所治疗的感染、所治疗疾病的感染部位和症状而异。乳链菌素组分的口服有效剂量在0.5mg-5000mg的范围内，GML组分的口服有效剂量在0.1mg-2000mg的范围内。乳链菌素和GML较佳的剂量范围分别为10mg-2000mg和10mg-1000mg。

如Kimura et al.，Am.J.Gastroenterol.90：60-63，1995(该文全文在此引为参考)所公开的，诸如链霉蛋白酶这样的粘液分解剂可以单次18,000-36,000酪氨酸单位的剂量范围给药。N-烷基半胱氨酸可以单剂0.1-1.0g的剂量范围给药。

根除螺杆菌属细菌的定居和治疗其感染的本发明方法包括将有效量的GML-乳链菌素组合物给需要这种治疗的患者投药。在一个实施方案中，该方法包括在用粘液分解剂治疗后1-4小时给予GML-乳链菌素组合物；粘液分解剂与制酸剂或弱碱性缓冲液如碳酸氢盐合并给药。在另一个实施方案中，利用水解酶或巯基化合物作为粘液分解剂的方法包括在给予粘液分解剂前用胃酸分泌抑制剂或碱性缓冲液对患者进行预处理，使胃内容物的pH升高；而给予粘液分解剂又在乳链菌素-GML组合物给药之前。

                            具体实施方式

                         实施例1

在无螯合剂的情况下，乳链菌素和GML对H.pylori的协同杀菌活性

本实施例的所有杀菌活性试验均在37℃进行30分钟。测得的参数是暴露于GML和/或乳链菌素的细菌的存活，如用标准稀释和平板技术测得的存活计数(每ml菌落形成单位〔CFU/ml〕)。培养基、生长和试验条件如下：所有螺杆菌培养物均在GasPak中在微需氧条件下进行培养。将H.pylori在酪蛋白胰蛋白酶解大豆琼脂+5％去纤维蛋白的绵羊血液上培养2-4天，然后接种到NYCIII肉汤中，在轻微振摇下培养过夜。〔NYCIII肉汤每升包含：1g可溶性淀粉(Difco)、15g蛋白胨#3(Difco)、5g NaCl、4g K₂HPO₄、1g KH₂PO₄、5g葡萄糖、25ml新鲜的酵母提取液(Gibco)、120ml无γ-球蛋白的马血清(sigma)〕。用于试验GML和乳链菌素活性的悬浮液以10％蔗糖配成。在酪蛋白胰蛋白酶解物大豆琼脂-5％绵羊血液上培养3-5天后进行存活计数。

图1表示不同浓度GML和不同浓度乳链菌素联合使用对H.pylori ATCC43504菌株的效应。将细菌悬浮液分份，单独或联合暴露于不同浓度的药剂中。细菌的存活表示为与未培养(0时间)对照悬浮液的相对值。乳链菌素单独使用，在浓度为30-300μg/ml时对H.pylori的成活力作用很小或没有(存活率≥10％)。在无乳链菌素的情况下，GML浓度为1和3μg/ml时，接种物的存活率也只有很少或没有降低(存活率≥10％)。培养物暴露于这些浓度的GML+300μg/ml的乳链菌素时，观察到成活力的轻微进一步降低。当细菌单独暴露于10μg/ml GML时，也是＞10％的细菌存活。然而，在10μg/ml GML中加入增加量的乳链菌素(30、100或300μg/ml)，则培养物的存活力产生明显的降低；此效应的程度随着乳链菌素浓度的增加而增加。较高浓度的GML单独(30或100μg/ml)使细菌悬浮液灭菌。

本发明的含GML-乳链菌素组合物以含有效量的这两种活性成分和药学上可接受的载体的剂型口服给药为佳。包含有效量粘液分解剂和药学上可接受的载体的药学上的粘液分解药剂可在含GML-乳链菌素制剂之前服用。

本发明的组合物也可配制成抗酸组合物，或与抗酸剂合并使用，这样，服药会导致例如比服药前高的胃内pH环境。GML-乳链菌素组合物在这样的条件下仍对病原菌有效。进一步包含制酸剂的含GML-乳链菌素制剂也可在含有效量粘液分解剂和药学上可接受的载体的药学上的粘液分解药剂后服用。

药学上可接受的载体可以是固体、半固体或液体稀释剂的形式。药学上可接受的载体可包括纤维素衍生物、明胶、乳糖、淀粉等。制剂可以是溶液、胶体或乳剂、粉剂、片剂、胶囊或凝胶等剂型。

干的剂型可压成片，片剂可以药学上惰性的成分如糖进行包衣，药学上惰性的成分可含有其它药学上可接受的替代物，如阿拉伯树胶、明胶、滑石粉或二氧化钛，也可涂以各种染料。可制成硬凝胶胶囊，它包含活性成分的颗粒及固体载体，如乳糖、马铃薯淀粉、玉米淀粉、纤维素衍生物或明胶。

口服用的液体制剂可制成糖浆或悬浮液剂型，包含含GML-乳链菌素组合物，加糖、水和甘油或丙二醇。如果需要的话，这样的液体制剂可包含着色剂、调味剂、甜味剂如糖精，及增稠剂如纤维素衍生物。

通过用包括增稠剂、乳化剂，或形成胶体悬浮液的颗粒，对简单的水性制剂进行改性，显然可达到剂量分配给药。使用乳化剂如卵磷脂，在形成更适用于定居区域给药的稳定的乳剂上是特别有用的。

Claims (10)

1.一种体外抑制螺杆菌属细菌定居的方法，其特征在于包括在需要所述抑制作用之处使用主要由有效量的GML、有效量的乳链菌素和药学上可接受的载体组成且不含螯合剂的组合物。

2.如权利要求1所述的方法，其中GML的用量为0.1mg-2000mg，乳链菌素的用量为0.5mg-5000mg。

3.如权利要求2所述的方法，其中GML的用量为10mg-1000mg，乳链菌素的用量为10mg-2000mg。

4.如权利要求1所述的方法，其中在GML-乳链菌素组合物之前先使用有效量的粘液分解剂。

5.如权利要求4所述的方法，其中粘液分解剂为巯基化合物。

6.如权利要求4所述的方法，其中粘液分解剂为水解酶。

7.如权利要求6所述的方法，其中酶为链霉蛋白酶。

8.如权利要求4所述的方法，其中粘液分解剂与其量能有效升高处理区域pH至7或更高的抗酸剂或缓冲剂联合使用。

9.如权利要求4所述的方法，其中粘液分解剂之前先使用其量能有效升高处理位置的pH至7或更高的抗酸剂或缓冲剂。

10.GML-乳链菌素组合物用于制备根除螺杆菌属细菌定居或治疗由其引起的感染或其它疾病状态的药物中的用途，所述组合物主要由在无螯合剂存在下有效量的GML、有效量的乳链菌素和药学上可接受的载体组成。