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CN111543439A - 一种农用杀菌组合物 - Google Patents

一种农用杀菌组合物 Download PDF

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CN111543439A
CN111543439A CN202010423726.1A CN202010423726A CN111543439A CN 111543439 A CN111543439 A CN 111543439A CN 202010423726 A CN202010423726 A CN 202010423726A CN 111543439 A CN111543439 A CN 111543439A
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CN
China
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fermentation
streptomyces parvus
agricultural
pyraclostrobin
isopyrazam
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CN202010423726.1A
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张文娟
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Weinan Vocational & Technical College
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Weinan Vocational & Technical College
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Abstract

本发明公开了一种农用杀菌组合物，其杀菌组分包括Streptomyces parvus发酵液干燥物，以及吡唑醚菌酯、吡唑萘菌胺中的一种；所述Streptomyces parvus发酵液干燥物与吡唑醚菌酯的质量比为10:1～1:15；所述Streptomyces parvus发酵液干燥物与吡唑萘菌胺的质量比为40:1～1:10。本发明组分复配合理，杀菌效果好，且其活性和杀菌效果不是各组分活性的简单叠加，与现有的单一制剂相比，除具有显著的杀菌效果外，而且有显著的增效作用，对作物安全性好。本发明对香蕉叶斑病、黄瓜白粉病、柑橘炭疽病、草莓白粉病的防治效果较佳。

Description

一种农用杀菌组合物
技术领域
本发明属于复配农药技术领域，涉及一种杀菌组合物，该杀菌组合物包含杀菌成分 Streptomyces parvus发酵液和吡唑醚菌酯或吡唑萘菌胺的复配。本发明还公开了该杀菌组合物在农业领域的应用。
背景技术
随着农业经济的发展，农药日益成为农业生产中不可缺少的生产资料，在粮食等作物的稳产、高产和产品质量等方面起着极其重要的作用。另一方面，农药的使用关系到农产品的安全问题，特别是农药残留的问题，不仅涉及国民身体健康，同时也已经成为一个国家农产品出口的重要障碍。随着人们环保意识的提高，以及人类可持续发展的不断深化，积极开发、推广应用生物农药成为全球的共识。
近年来，农药企业巨头如先正达、杜邦、拜耳等公司均涉足生物农药领域，从而再次掀起了生物农药的开发热潮。我国农药产品的结构，目前仍以化学农药为主，据统计，其市场份额占全部农药的90％以上，而生物农药的市场份额不足10％。我国在生物农药的开发和利用方面，先后有很多生物农药投入生产和应用，如灭瘟素、春雷霉素、井冈霉素、赤霉素、多抗霉素、阿维菌素、农抗120、中生菌素、宁南霉素等，这些生物农药为我国的粮食生产与粮食安全做出了重大贡献。从宏观上来看，我国是一个生物农药应用的大国，但生物农药的品种和数量都很有限，其市场占有率也不高，与我国绿色防控、绿色食品生产的要求还存在着很大的差距。迄今我国还没有真正独创的生物农药品种，这与我国的大国地位很不相称。因此，积极筛选和开发高效低毒生物农药新品种对我国农业生产及提高我国的国际地位都有十分重要的意义。
天然产物具有丰富的结构和化学多样性，是农药研发的理想资源。微生物源生物农药因不危害人畜、无土壤残留、不污染环境、不杀伤天敌，有利于生态平衡和稳定，备受人们青睐。而作为微生物来源重要组成部分的农用抗生素，由于其具有合成农药无法比拟的优越性，已越来越受到人们的重视。我国是农用抗生素研究和应用的大国。到目前为止，已登记过的农用抗生素品种达二十余种，其中井冈霉素、赤霉素、阿维菌素、中生菌素、嘧啶核苷类抗生素(农抗、宁南霉素等是生产和应用的主要品种。农用抗生素的年产值达20多亿元人民币，占生物农药的90％。国外在抗生素方面研究的特点是，以医用为主，如抗菌、抗肿瘤、抗病毒、免疫抑制剂等研究较多，而农用抗生素研究相对较少。这也给我们开发新的农用抗生素提供了契机。随着传统抗生素的广泛使用，细菌的耐药性迅速增加，而从传统的土壤微生物中发现结构新颖的活性化合物却出现了明显的下降趋势。而另一方面，天然产物的独特优势又决定了微生物天然产物研究无法被化学合成研究结果所取代。因此，微生物天然产物未来的发展方向日益引起人们的关注，不容回避。
发明内容
Streptomyces parvus是从污染环境土壤中筛选出的一种代谢农用活性物质的放线菌菌株，有关Streptomyces parvus的分离及鉴定信息参见发明人已发表的论文(Antibacterial Activity and Composition of the Fermentation Broth ofStreptomyces Parvus 33，Jundishapur J Microbiol.2017 August；10(8)：e12677)。发明人以部分农作物病原真菌、病原细菌为研究对象，评价了Streptomyces parvus发酵液的室内活体抑菌活性。目前，有关 Streptomyces parvus的农业应用还停留在试验研究阶段，尚未用于田间作物病害的防治，为了推进Streptomyces parvus相关研究成果在农林业领域上的推广实施，结合前期的试验验证数据，本发明将Streptomyces parvus发酵液与现有杀菌成分(吡唑醚菌酯或吡唑萘菌胺)复配，给出一种农用杀菌组合物。
为了实现上述目的，本发明采取如下的技术方案：一种农用杀菌组合物，其杀菌组分包括Streptomyces parvus发酵液干燥物，以及吡唑醚菌酯、吡唑萘菌胺中的一种；
所述Streptomyces parvus发酵液干燥物与吡唑醚菌酯的质量比为10:1～1:15；
所述Streptomyces parvus发酵液干燥物与吡唑萘菌胺的质量比为40:1～1:10。
Streptomyces parvus发酵液干燥物与吡唑醚菌酯复配组合使用，在二者质量比为 35:1～1:15的范围内，表现出协同增效的作用，增强了对植物病害的防治效果。
吡唑醚菌酯属于甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂，主要作用于真菌的线粒体呼吸链中的细胞色素bel复合物，阻止电子传递从而抑制真菌生长。作为重要的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂之一，自从投放市场以来，杀菌谱广、靶标病菌多，同时还在提升作物抗逆性、促进作物生长、抗衰老、增强免疫性等方面均具有优异的效果。吡唑醚菌酯在田间的使用缺陷主要表现为：一是吡唑醚菌酯的杀菌作用显效时间介于保护剂和治疗剂之间，需要合理的确定吡唑醚菌酯使用时间；二是药液随着水分蒸发而局部浓度过高造成灼伤药斑，降低作物产品品质。本发明采用Streptomyces parvus发酵液干燥物与吡唑醚菌酯复配使用的方案，通过微生物发酵产物的协同作用，减少吡唑醚菌酯的使用浓度和用量，降低或减弱吡唑醚菌酯单剂使用产生要害的风险。
吡唑萘菌胺是先正达开发的一个重要的含吡唑环的SDHI类杀菌剂。SDHIs杀菌剂是通过病原菌线粒体呼吸电子传递链上的蛋白复合体Ⅱ(即琥珀酸脱氢酶或琥珀酸--泛醌还原酶)发生作用。随着更多SDHIs杀菌剂的推出及应用范围的扩大，世界各地相继报道SDHIs杀菌剂的抗性问题。目前在田间作物植株中发现许多种对SDHIs杀菌剂的产生抗性的病菌，且具有较高风险的病菌主要为灰霉菌、链格孢菌、蔓枯病菌、多主棒孢菌、白粉菌等。不同作用机理的杀菌剂与吡唑萘菌胺复配，既可以延缓产品的抗性问题，又可以维持后专利期产品的市场份额。为了探寻吡唑萘菌胺的应用新途径或新方式，本发明将放线菌Streptomyces parvus发酵液干燥物与吡唑萘菌胺复配。
本发明给出一种Streptomyces parvus的优选发酵方法：将Streptomyces parvus接入种子培养基(选用改良高氏1号，购自青岛高科技工业园海博生物技术有限公司)，扩大培养作为发酵菌种；将发酵菌种接入盛装有发酵培养基的50L发酵罐中，开启搅拌，设定发酵条件进行发酵生产。发酵参数设置：装液量20L/50L，初始pH7.5，转速130rpm，发酵温度28℃，发酵时间5d。发酵培养基组成：可溶性玉米淀粉5g、玉米浆2g、蛋白胨4g、可溶性纤维素1g、葡萄糖5g、磷酸氢二钾0.5g、碳酸钙3g、氯化钠0.5g、硫酸镁0.5g。
所述Streptomyces parvus发酵液干燥物是以放线菌Streptomyces parvus的发酵液为原料，采用喷雾干燥的方式制备成的粉状物。过滤除去Streptomyces parvus菌体，将所得无菌滤液采用喷雾干燥方法制得Streptomyces parvus发酵液干燥物。喷雾干燥参数设置：进风温度115℃，送料量6％。
另一层面，本发明探讨了所述农用杀菌组合物在防治作物病害上的应用。
具体地，应用所述农用杀菌组合物可以防治的所述作物病害包括香蕉叶斑病、黄瓜白粉病、柑橘炭疽病、草莓白粉病。
具体地，在应用所述农用杀菌组合物时，所述农用杀菌组合物制备成便于防治作物病害的制剂使用。
关于所述农用杀菌组合物的制剂形式，优选地，按照本领域技术人员所公知的方法可以配制的制剂剂型可以为悬浮剂、水分散粒剂、可湿性粉剂、可分散油悬浮剂或水乳剂。在制备上述剂型时，可以根据需要选择使用不同的农药制剂辅助成分(助剂)。所述辅助成分为分散介质、分散剂、乳化剂、润湿剂、增稠剂、消泡剂、防冻剂、崩解剂、粘结剂、填料中的一种或几种。
对悬浮剂，可使用的助剂有：分散剂如聚羧酸盐、木质素磺酸盐、烷基萘磺酸盐(扩散剂NNO)、TERSPERSE 2020(美国亨斯迈公司出品，烷基萘磺酸盐类)中一种或多种；乳化剂如农乳700#(通用名：烷基酚甲醛树脂聚氧乙烯醚)、农乳2201、斯盘-60# (通用名：失水山梨醇硬脂酸酯)、吐温-60#(通用名：聚氧乙烯失水山梨醇硬脂酸酯)、农乳1601#(通用名：三苯乙基苯酚聚氧丙烯聚氧乙烯嵌段聚合物)、TERSPERSE 4894 (美国亨斯迈公司出品)中的一种或多种；润湿剂如烷基酚聚氧乙烯基醚甲醛缩合物硫酸盐、烷基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、苯乙基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、烷基硫酸盐、烷基磺酸盐、萘磺酸盐、TERSPERSE 2500(美国亨斯迈公司出品)中一种或多种；增稠剂如黄原胶、聚乙烯醇、膨润土、硅酸镁铝中一种或多种；防腐剂如甲醛、苯甲酸、苯甲酸钠中一种或多种；稳定剂如环氧大豆油、环氧氯丙烷、磷酸三苯酯中一种或多种；消泡剂如有机硅类消泡剂；防冻剂如乙二醇、丙二醇、甘油、尿素、无机盐类如氯化钠中一种或多种；水为去离子水。
对于水分散粒剂来说，本领域技术人员很熟悉使用相应的助剂完成本发明。分散剂如聚羧酸盐(TERSPERSE 2700、T36、GY-D06等)、木质素磺酸盐、烷基萘磺酸盐中一种或多种；润湿剂如烷基硫酸盐、烷基磺酸盐、萘磺酸盐中一种或多种；崩解剂如硫酸铵、硫酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、淀粉及其衍生物、膨润土中一种或多种；粘结剂如淀粉、葡萄糖、聚乙烯醇、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、蔗糖中的一种或多种；填料如硅藻土、高岭土、白炭黑、轻钙、滑石粉、凹凸棒土、陶土一种或多种。
对可湿性粉剂，可使用的助剂有：分散剂如聚羧酸盐类(TERSPERSE 2700、T36、GY-D06等)、木质素磺酸盐类(Ufoxane 3A、Borresperse NA、Borresperse CA-SA等)、萘和烷基萘甲醛缩合物磺酸盐类(NNO、MF、Morwet D-425、Tamol NN、TERSPERSE2020 等)、拉开粉BX(二丁基萘磺酸钠)、EO-PO嵌段聚醚类、烷基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、烷基酚聚氧乙烯基醚甲醛缩合物硫酸盐(SOPA)，中一种或多种；润湿剂如硫酸盐类(K-12)、磺酸盐类(ABS-Na、BX、Terwet 1004等)、复合润湿剂(Morwet EFW) 中一种或多种；填料如硅藻土、高岭土、轻钙、滑石粉、白炭黑、凹凸棒土、陶土、硫酸铵、尿素、蔗糖、葡萄糖、玉米淀粉、硫酸钠、多聚磷酸钠等一种或多种。
对可分散油悬浮剂，可使用的助剂有：分散剂如聚羧酸盐、木质素磺酸盐、烷基萘磺酸盐(扩散剂NNO)、TERSPERSE 2020(美国亨斯迈公司HUNTSMAN出品，烷基萘磺酸盐类)中一种或多种；乳化剂如BY(蓖麻油聚氧乙烯醚)系列乳化剂(BY-110、 BY-125、BY-140)、农乳700#(通用名：烷基酚甲醛树脂聚氧乙烯醚)、农乳2201、斯盘-60#(通用名：山梨醇酐单硬脂酸酯)、吐温-60#(通用名：失水山梨醇单硬脂酸酯聚氧乙烯醚)、农乳1601#(通用名：苯乙基苯酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚)、TERSPERSE 4894(美国亨斯迈公司出品)中的一种或多种；润湿剂如烷基酚聚氧乙烯基醚甲醛缩合物硫酸盐、烷基酚聚氧乙烯醚磷酸酯、苯乙基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、烷基硫酸盐、烷基磺酸盐、萘磺酸盐、TERSPERSE 2500(美国亨斯迈公司出品)中一种或多种；增稠剂如白炭黑、聚乙烯醇、膨润土、硅酸镁铝中一种或多种；防冻剂如乙二醇、丙二醇、甘油、尿素、无机盐类如氯化钠中一种或多种；分散介质如大豆油、菜籽油、玉米油、油酸甲酯、柴油、机油、矿物油中一种或多种。
对水乳剂，可使用的助剂有：乳化剂如壬基酚聚氧乙烯(EO＝10)醚磷酸酯、三苯乙基苯酚聚氧乙烯醚磷酸酯、农乳700#(通用名：烷基酚甲醛树脂聚氧乙烯醚)、农乳 2201#、斯盘-60#(通用名：失水山梨醇硬脂酸酯)、吐温-60#(通用名：聚氧乙烯失水山梨醇硬脂酸酯)、TX-10(通用名：辛基酚聚氧乙烯(10)醚)、农乳1601(通用名：三苯乙基苯酚聚氧丙烯聚氧乙烯嵌段聚合物)、农乳600#、农乳400#中一种或多种；溶剂如二甲苯、甲苯、环己酮、溶剂油(牌号：S-150、S-180、S-200)一种或多种；稳定剂如亚磷酸三苯酯、环氧氯丙烷、环氧大豆油中一种或多种；防冻剂：乙二醇、丙二醇、甘油、尿素、无机盐类如氯化钠中一种或多种；增稠剂如黄原胶、聚乙烯醇、膨润土、硅酸镁铝中一种或多种；防腐剂如甲醛、苯甲酸、苯甲酸钠中一种或多种，水为去离子水。
本发明所述农用杀菌组合物的优点或有益效果：
所述农用杀菌组合物中第一活性成分Streptomyces parvus发酵液干燥物，第二活性成分选用吡唑醚菌酯、吡唑萘菌胺中的一种。所述Streptomyces parvus发酵液干燥物与吡唑醚菌酯的质量比为10:1～1:15范围内，二者表现出协同增效的作用；所述Streptomyces parvus发酵液干燥物与吡唑萘菌胺的质量比为40:1～1:10范围内，二者表现出协同增效的作用。本发明创新性的探索Streptomyces parvus发酵液干燥物在植物病害防治上的用途，与吡唑醚菌酯、吡唑萘菌胺中的一种组合使用，可以很好地用于香蕉叶斑病、黄瓜白粉病、柑橘炭疽病、草莓白粉病等病害的防治。此外，所述杀菌组合物的优点还表现在组分合理，兼具治疗和保护作用，杀菌效果好，用药成本低，对作物安全性好，符合农药制剂的安全性要求。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细阐述。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明，凡在本发明的精神和原则之内所做的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
实施例1
本实施例采用菌丝体干重测量法，测定Streptomyces parvus发酵液干燥物(以SP表示)与吡唑醚菌酯(以PSN表示)、吡唑萘菌胺(以IZM表示)中的一种组合对香蕉叶斑病菌的联合毒力。
将药剂配置成高浓度的母液，并稀释成系列浓度的药液，按照不同剂量加入定量的液体培养基中，配成带药液体培养基，每个浓度处理均设4次重复。用无菌移液器定量吸取预先培养的含菌丝体的液体培养液，注入含药液体培养基中，同时设空白对照。置于28℃下恒温振荡条件培养10天后，将菌丝体用滤纸过滤，在电热恒温鼓风干燥箱中 85℃烘干，完全干燥后用电子天平称量菌丝体干重，与空白对照比较，计算各处理对菌丝生长的抑菌效果。利用SPSS软件计算EC50及相关系数(SR)，结果见表1和表2。
表1 SP与PSN复配对香蕉叶斑病菌的室内毒力
Figure RE-GDA0002535995340000061
Figure RE-GDA0002535995340000071
表2 SP与IZM复配对香蕉叶斑病菌的室内毒力
处理药剂 实测EC50(mg/L) 理论EC50(mg/L) SR
SP 53.33
IZM 9.53
SP60:IZM1 44.27 50.47 1.14
SP50:IZM1 36.20 49.59 1.37
SP40:IZM1 31.14 47.95 1.54
SP30:IZM1 28.67 46.44 1.62
SP20:IZM1 26.04 43.75 1.68
SP10:IZM1 21.62 37.61 1.74
SP5:IZM1 17.06 30.20 1.77
SP1:IZM1 8.88 16.17 1.82
SP1:IZM2 6.20 11.04 1.78
SP1:IZM4 6.02 10.30 1.71
SP1:IZM6 5.94 9.92 1.67
SP1:IZM8 6.04 9.79 1.62
SP1:IZM10 6.19 9.72 1.57
SP1:IZM15 6.69 9.63 1.44
SP1:IZM30 7.33 9.61 1.31
从表1的测定结果可知，Streptomyces parvus发酵液干燥物与吡唑醚菌酯以质量比为10﹕1～1﹕15组合使用，对香蕉叶斑病菌表现出协同增效的作用；在质量比为1﹕1～1﹕10范围内，相关系数(SR)超过1.7，最大达到1.77(SP1:PSN5)。从表2的测定结果可知，Streptomyces parvus发酵液干燥物与吡唑萘菌胺以质量比为40﹕1～1﹕10组合使用，对香蕉叶斑病菌表现出协同增效的作用；在质量比为10﹕1～1﹕4范围内，相关系数(SR)超过1.7，最大达到1.82(SP1:IZM1)。
实施例2
本实施例测定Streptomyces parvus发酵液干燥物(以SP表示)与吡唑醚菌酯(以PSN表示)、吡唑萘菌胺(以IZM表示)中的一种组合对黄瓜白粉病菌的联合毒力。
试验方法参考《中华人民共和国农业行业标准NY/T1156.11-2008农药室内生物测定试验准则杀菌剂第11部分：防治瓜类白粉病试验盆栽法》，试验对象为黄瓜白粉病菌sphaerotheca fuliginea。供试作物为易感白粉病的黄瓜幼苗，盆栽培养至2～4片真叶期。用加有少量表面活性剂(吐温80)的纯净水，洗取长满白粉病菌黄瓜叶片上的新鲜孢子，用双层纱布过滤，制成孢子浓度为1×105个孢子/毫升的悬浮液，备用。
将药剂配制成需要的处理药剂，首先将单剂及各混配药剂设置5个不同浓度梯度(防效在5％～90％的范围内按等比级数设定)。每处理3盆，4次重复，并设只含溶剂和表面活性剂而不含有效成分的处理作空白对照。用孢子悬浮液在药剂处理前24h接种，将药液均匀喷施于叶面至全部润湿，待药液自然风干后备用。接种和药剂处理后的盆栽黄瓜自然风干，然后移至恒温室，在温度20℃～24℃的条件下培养7天～10天。待空白对照病叶率达到80％以上时，分级调查各处理发病情况，每处理至少调查30片叶，分级标准为：
0级：无病；
1级：病斑面积占整片叶面积的5％以下；
3级：病斑面积占整片叶面积的6％～15％；
5级：病斑面积占整片叶面积的16％～25％；
7级：病斑面积占整片叶面积的26％～50％；
9级：病斑面积占整片叶面积的50％～75％；
11级：病斑面积占整片叶面积的75％以上。
计算公式：
病情指数＝[Σ(各级病叶数×相对级数值)/(调查总叶片数×11)]×100；
防治效果(％)＝[(对照病情指数-处理病情指数)/对照病情指数]×100。
按照Wadley法求出各组合物的增效系数(SR)，测定结果见表3和表4。
表3 SP与PSN复配对黄瓜白粉病菌的室内毒力
处理药剂 实测EC<sub>50</sub>(mg/L) 理论EC<sub>50</sub>(mg/L) SR
SP 41.24 -- --
PSN 18.65 -- --
SP40:PSN1 31.11 40.75 1.31
SP20:PSN1 28.22 40.63 1.44
SP15:PSN1 27.40 40.55 1.48
SP12:PSN1 26.43 39.38 1.49
SP10:PSN1 25.99 40.28 1.55
SP8:PSN1 25.19 40.06 1.59
SP5:PSN1 24.35 39.69 1.63
SP2:PSN1 22.80 38.99 1.71
SP1:PSN1 21.35 37.15 1.74
SP1:PSN2 19.28 34.31 1.78
SP1:PSN5 11.02 18.85 1.71
SP1:PSN10 11.14 18.82 1.69
SP1:PSN12 11.39 18.80 1.65
SP1:PSN15 11.88 18.78 1.58
SP1:PSN20 12.67 18.75 1.48
SP1:PSN30 13.02 17.84 1.37
表4 SP与IZM复配对黄瓜白粉病菌的室内毒力
Figure RE-GDA0002535995340000091
Figure RE-GDA0002535995340000101
从表3的测定结果可知，Streptomyces parvus发酵液干燥物与吡唑醚菌酯以质量比为10﹕1～1﹕15组合使用，对香蕉叶斑病菌表现出协同增效的作用。从表4的测定结果可知，Streptomyces parvus发酵液干燥物与吡唑萘菌胺以质量比为40﹕1～1﹕10组合使用，对香蕉叶斑病菌表现出协同增效的作用。
实施例3
本实施例测定Streptomyces parvus发酵液干燥物(以SP表示)与吡唑醚菌酯(以PSN表示)、吡唑萘菌胺(以IZM表示)中的一种组合对柑橘炭疽病菌的联合毒力。
采用NY/T1156.6-2006的平皿菌丝生长抑制法，将各处理药剂分别稀释成浓度为1μg/mL的含药PDA平板，在无菌操作条件下用直径5mm的灭菌打孔器，自菌落边缘切取菌饼，用接种器将菌饼接种于含药的PDA平板中央，菌丝面朝上，盖上皿盖，置于24℃下恒温培养48小时，用卡尺测量菌落直径，单位为mm，每个菌落用十字交叉法垂直测量直径各一次，取其平均值。按照Wadley法求出各组合物的增效系数(SR)，测定结果见表5和表6。
菌丝生长抑制率的计算：抑制率(％)＝[(空白对照菌丝直径-药剂处理菌丝直径)/空白对照菌丝直径]×100
表5 SP与PSN复配对柑橘炭疽病菌的室内毒力
Figure RE-GDA0002535995340000102
Figure RE-GDA0002535995340000111
表6 SP与IZM复配对柑橘炭疽病菌的室内毒力
处理药剂 实测EC50(mg/L) 理论EC50(mg/L) SR
SP 30.64 -- --
IZM 5.89 -- --
SP60:IZM1 20.66 29.13 1.41
SP50:IZM1 19.68 28.93 1.47
SP40:IZM1 18.86 28.67 1.52
SP30:IZM1 18.15 28.31 1.56
SP20:IZM1 17.48 27.79 1.59
SP10:IZM1 16.55 26.98 1.63
SP5:IZM1 13.12 22.17 1.69
SP1:IZM1 11.25 18.90 1.68
SP1:IZM2 3.61 5.98 1.66
SP1:IZM4 3.75 5.97 1.59
SP1:IZM6 3.84 5.96 1.55
SP1:IZM8 3.94 5.95 1.51
SP1:IZM10 3.92 5.88 1.50
SP1:IZM15 4.12 5.94 1.44
从表5的测定结果可知，Streptomyces parvus发酵液干燥物与吡唑醚菌酯以质量比为10﹕1～1﹕15组合使用，对香蕉叶斑病菌表现出协同增效的作用。从表6的测定结果可知，Streptomyces parvus发酵液干燥物与吡唑萘菌胺以质量比为40﹕1～1﹕10组合使用，对香蕉叶斑病菌表现出协同增效的作用。
实施例4
本实施例测定Streptomyces parvus发酵液干燥物(以SP表示)与吡唑醚菌酯(以PSN表示)、吡唑萘菌胺(以IZM表示)中的一种组合对香蕉叶斑病的田间药效。
试验在广西武鸣县香蕉叶斑病历年发病较重的香蕉种植地进行。试验方法参照《GB/T17980.95-2004农药田间药效试验准则(二)杀菌剂防治香蕉叶斑病药效试验》。试验药剂及用量详见表7。另设空白对照，每处理4次重复，每小区10株香蕉，共48 个小区，随机区组排列。采用常规喷雾法，均匀喷洒全株。第1次施药在香蕉叶斑病发病初期，14天后第二次用药，共施药2次。
调查与统计方法：第一次药后14天和第二次药后14天调查叶片发病情况。每小区随机调查3株，每株香蕉从顶叶往下调查8～13片叶(未打开心叶不计)，记录调查的总叶数、各级病叶数。
分级方法：
0级：无病斑；
1级：病斑面积占整个叶面积的5％以下；
3级：病斑面积占整个叶面积的6％～15％；
5级：病斑面积占整个叶面积的16％～25％；
7级：病斑面积占整个叶面积的26％～50％；
9级：病斑面积占整个叶面积的50％以上。
根据病情指数计算防效，试验结果见表7。于每次药后目测观察施药后对香蕉生长、叶色、花果等的影响情况，考查药剂对香蕉植株的安全性。
病情指数＝[∑(各级病叶数×相对级数值)/(调查总叶片数×9)]×100
防治效果(％)＝[(对照病情指数-处理病情指数)/对照病情指数]×100
表7防治香蕉叶斑病的田间防效
Figure RE-GDA0002535995340000121
表7结果显示，与清水对照、Streptomyces parvus发酵液干燥物、吡唑醚菌酯、吡唑萘菌胺单剂相比，Streptomyces parvus发酵液干燥物与吡唑醚菌酯、吡唑萘菌胺中的组合制剂(WP)对香蕉叶斑病的田间药效明显提升，并且对香蕉植株安全，未见药害发生。
实施例5
本实施例测定Streptomyces parvus发酵液干燥物(以SP表示)与吡唑醚菌酯(以PSN表示)、吡唑萘菌胺(以IZM表示)中的一种组合对柑橘炭疽病的田间药效。
试验在江西省赣州市柑橘种植地进行。试验药剂及用量详见表8。另设空白对照，每处理4次重复，每小区5株柑橘树，共48个小区，随机区组排列，区间设保护株。采用常规喷雾法，均匀喷洒全株。在柑橘幼果期和果实膨大期各施药1次，共施药2次。
调查与统计方法：
在第一次药后14天和第二次药后14天进行病情指数调查，每个小区随机调查3株柑橘树，每株按东、西、南、北、中取样，每点调查果实25个，记录调查总果数、各级病果数，计算病情指数，结果见表8。
分级标准为：
0级：无病；
1级：病斑相连面积占整个果实面积5％以下；
3级：病斑相连面积占整个果实面积5％～10％；
5级：病斑相连面积占整个果实面积11％～25％；
7级：病斑相连面积占整个果实面积26％～50％；
9级：病斑相连面积占整个果实面积50％以上。
病情指数及防治效果计算方法：
病情指数＝[∑(各级病叶数×相对级数值)/(调查总叶片数×9)]×100
防治效果(％)＝[(对照病情指数-处理病情指数)/对照病情指数]×100
表8防治柑橘炭疽病的田间药效
Figure RE-GDA0002535995340000131
Figure RE-GDA0002535995340000141
表8结果显示，与清水对照、Streptomyces parvus发酵液干燥物、吡唑醚菌酯、吡唑萘菌胺单剂相比，Streptomyces parvus发酵液干燥物与吡唑醚菌酯、吡唑萘菌胺中的组合制剂(WP)对柑橘炭疽病的田间药效明显提升，并且对柑橘植株安全，未见药害发生。
实施例6
本实施例测定Streptomyces parvus发酵液干燥物(以SP表示)与吡唑醚菌酯(以PSN表示)、吡唑萘菌胺(以IZM表示)中的一种组合对草莓白粉病的田间药效。
试验在陕西省兴平市草莓地进行。试验方法参照《GB/T17980.119-2004农药田间药效试验准则(一)杀菌剂防治草莓白粉病药效试验》。试验药剂及用药量详见表9。另设空白对照，每处理4次重复，每小区20棵草莓，共48个小区，随机区组排列。采用常规喷雾法，均匀喷洒全株。第1次施药在草莓白粉病发病初期，14天后第二次用药，共施药2次。
调查与统计方法：
在第一次药后14天和第二次药后14天进行病情指数调查，每个小区随机调查5个点，每点调查3株的全部叶片，每片叶按照病斑占叶面积的百分率分级记录，记录调查总叶数、各级病叶数，计算病情指数，结果见表9。
分级标准为：
0级：无病；
1级：病斑相连面积占整个果实面积5％以下；
3级：病斑相连面积占整个果实面积5％～10％；
5级：病斑相连面积占整个果实面积11％～25％；
7级：病斑相连面积占整个果实面积26％～50％；
9级：病斑相连面积占整个果实面积50％以上。
病情指数及防治效果计算方法：
病情指数＝[∑(各级病叶数×相对级数值)/(调查总叶片数×9)]×100
防治效果(％)＝[(对照病情指数-处理病情指数)/对照病情指数]×100
表9防治草莓白粉病的田间药效
Figure RE-GDA0002535995340000151
表9结果显示，与清水对照、Streptomyces parvus发酵液干燥物、吡唑醚菌酯、吡唑萘菌胺单剂相比，Streptomyces parvus发酵液干燥物与吡唑醚菌酯、吡唑萘菌胺中的组合制剂(WP)对草莓白粉病的田间药效明显提升，并且对草莓植株安全，未见药害发生。
综上所述，本发明的组合物是采用两种活性成分复配，其活性和杀菌效果不是各组分活性的简单叠加，与现有的单一制剂相比，除具有显著的杀菌效果外，而且有显著的增效作用，对作物安全性好，符合农药制剂的安全性要求。

Claims (6)

1.一种农用杀菌组合物，其杀菌组分包括Streptomycesparvus发酵液干燥物，以及吡唑醚菌酯、吡唑萘菌胺中的一种；
所述Streptomycesparvus发酵液干燥物与吡唑醚菌酯的质量比为10:1～1:15；
所述Streptomycesparvus发酵液干燥物与吡唑萘菌胺的质量比为40:1～1:10。
2.根据权利要求1所述农用杀菌组合物，其特征在于，所述Streptomycesparvus发酵液干燥物的制备方法为：过滤除去Streptomycesparvus菌体，将所得无菌滤液进行喷雾干燥，喷雾干燥进风温度115℃，送料量6％。
3.根据权利要求1所述农用杀菌组合物，其特征在于，制备所述Streptomycesparvus发酵液的方法：将Streptomycesparvus接入种子培养基，扩大培养作为发酵菌种；将发酵菌种接入发酵罐中，搅拌，发酵；
发酵参数设置：装液量20L/50L，初始pH7.5，转速130rpm，发酵温度28℃，发酵时间5d；
发酵培养基组成：可溶性玉米淀粉5g、玉米浆2g、蛋白胨4g、可溶性纤维素1g、葡萄糖5g、磷酸氢二钾0.5g、碳酸钙3g、氯化钠0.5g、硫酸镁0.5g。
4.权利要求1至3中任一项所述农用杀菌组合物在防治作物病害上的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述作物病害包括香蕉叶斑病、黄瓜白粉病、柑橘炭疽病、草莓白粉病。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述农用杀菌组合物制备成便于防治作物病害的制剂使用。
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