CN111534575A - 一种微流控核酸检测卡盒及试剂盒 - Google Patents

Abstract

本发明适用于核酸检测技术领域，提供了一种微流控核酸检测卡盒及试剂盒，包括：卡盒支架，试剂操作件，软质连接件，流路件，扩增腔；所述试剂操作件设于所述卡盒支架内上部，并设置有一个样本裂解腔，多个储液腔以及一个泵操作腔，所述试剂操作件上设置有一条第一微流管道以及一条第二微流管道，所述第一微流管道一端连接所述泵操作腔；所述流路件上设置有一条第三微流管道以及多条第四微流管道；所述扩增腔设于所述流路件下方；所述软质连接件上的阀组件可以控制所述泵操作腔与样本裂解腔、储液腔之间的开断以及所述泵操作腔与所述扩增腔之间的开断。本发明检测功能强大，检测通量高，检测速度快，自动化程度高，使用简便。

Description

一种微流控核酸检测卡盒及试剂盒

技术领域

本发明属于核酸检测技术领域，尤其涉及一种微流控核酸检测卡盒及试剂盒。

背景技术

现阶段基于核酸检测层面的分子诊断技术越来越被广泛应用于现实生活中，主要包括临床检测分析，食品安全检测，环境监测等应用领域。其中在临床分析检测中，可以为疾病的早期辅助筛查诊断，预防，检测用药及预后评估等提供有效的技术支撑。基于分子生物学的核酸检测流程一般包括病原体样本的收集，样本的核酸提取，PCR扩增，后期的信号分析及结果判读等步骤。传统的核酸检测首先需要建设专业的分区PCR实验室来完成上述检测流程；其次，实验室需要配置昂贵的诸如PCR仪器的实验室设备；再者，繁琐的检测流程需要依赖专业人员的手工操作，无法实现自动化，等等。上述条件导致目前只有部分三甲医院才有资质和能力去开展相关核酸检测项目，很多二甲或者二甲以下的一些基层医疗机构无法开展相关检测项目。因此亟待开发一种集核酸提取、扩增、信号处理的，能够实现自动化的，摆脱对传统PCR实验室依赖的，大型三甲医院，普通医疗机构都能获取的核酸检测分析系统。

微流控芯片技术(Microfluidics)采用集成化的理念，首先通过将不同的检测试剂预先包埋或者冷冻干燥在不同的腔室，然后通过配套仪器控制微流控芯片上的微阀，泵，微流道等组件实现不同腔室间试剂的反应、分离、检测等复杂的操作步骤，最终按照实验顺序依次完成核酸检测的所有流程，进而实现核酸检测的自动化。

目前，国外采用微流控理念的明星产品主要包括Cepheid公司的GeneXpert，生物梅里埃公司的FilmArray，因为上述产品均能实现核酸检测的集成化，自动化和便携化，因而在国外获得了良好的市场效应。国内采用微流控理念的核酸检测产品主要包括北京博晖创新公司推出的HPV分型检测平台，但是存在配套仪器复杂，成本高昂，检测耗时长等缺点。博奥公司的碟式微流控平台采用环介导等温扩增技术来进行核酸检测，但该检测平台没有集成样本的前处理，前处理操作需要在PCR实验室内手工完成或者依赖实验室其他设备，无法摆脱专业PCR实验室。

截止目前，其他研究机构或者研究学者已提出了多种核酸检测平台，但存在这样或者那样的缺陷，有的无核酸提取前处理功能，有的无配套仪器，有的卡盒检测通量低，有的微流控卡盒设计复杂而成本高昂，有的仪器并行处理能力低等缺陷。已开发的系统不能很好的满足现实的应用需求。

发明内容

本发明提供一种基于实时荧光聚合酶链式反应的全自动化微流控核酸检测卡盒，旨在解决上述技术问题。

本发明是这样实现的，提供了一种基于实时荧光聚合酶链式反应的全自动化微流控核酸检测卡盒，包括：

卡盒支架；

试剂操作件，设于所述卡盒支架内上部，所述试剂操作件上设置有一个样本裂解腔、多个储液腔以及一个泵操作腔，所述试剂操作件上分别设置有一条第一微流管道以及一条第二微流管道，所述第一微流管道一端连接所述泵操作腔；

软质连接件，紧密的设于所述试剂操作件下部，所述软质连接件上设置多个阀对接孔，所述阀对接孔中嵌有多根阀轴用以控制所述阀对接孔的开断；

流路件，所述流路件紧密的设于所述软质连接件下方，所述流路件上设置有一条第三微流管道及多条第四微流管道；

扩增腔，所述扩增腔设于所述流路件下方；

所述卡盒支架将所述试剂操作件、软质连接件以及所述流路件紧密的固定在其中；

通过控制所述软质连接件上的阀组件控制所述泵操作腔与所述样本裂解腔，所述泵操作腔与所述储液腔之间的开断，以及所述泵操作腔与所述扩增腔之间的开断。

更进一步地，所述卡盒支架包括两个侧边支架，所述两个侧边支架通过卡扣结构相互配合固定。

更进一步地，所述多个储液腔包括：设置在所述试剂操作件上的储液腔一、储液腔二、储液腔三、储液腔四、以及储液腔五。

更进一步地，所述阀轴组件包括：设于所述软质连接件上的阀通孔、以及内嵌于所述阀通孔内的阀轴，所述阀轴上还设置有旋转连接部，通过旋转所述阀轴使所述阀对接孔接通或者断开所述泵操作腔与所述样本裂解腔之间的连接，所述泵操作腔与所述储液腔之间的连接，以及所述泵操作腔与所述扩增腔之间的连接。

更进一步地，所述多个阀对接孔包括：阀对接孔一、阀对接孔三、阀对接孔七、阀对接孔八、以及阀对接孔十五。

更进一步地，所述扩增腔包括：设置在所述卡盒支架中流路件下方的扩增腔一、扩增腔二、扩增腔三、扩增腔四、扩增腔五、扩增腔六、扩增腔七、以及扩增腔八。

更进一步地，所述扩增腔一、所述扩增腔二、所述扩增腔三、所述扩增腔四、所述扩增腔五、所述扩增腔六、所述扩增腔七、以及所述扩增腔八并排设置。

更进一步地，所述扩增腔内预埋有引物和探针。

更进一步地，所述第一微流管道的部分结构位于所述试剂操作件的表面并通过密封膜密封；

和/或，所述第二微流管道的部分结构位于所述试剂操作件的表面并通过密封膜密封；

和/或所述第三微流管道的部分结构位于所述流路件表面并通过密封膜密封。

和/或所述多条第四微流管道的部分结构位于所述流路件表面并通过密封膜密封。

本发明同时提供一种核酸检测试剂盒，包括如上任一所述的微流控核酸检测卡盒，其中，所述试剂操作件的储液腔一~五内依次分别预载有：缓冲液、磁珠溶液、乙醇溶液、核酸洗脱溶液、以及核酸扩增预混液。

本发明所达到的有益效果：

1、本发明所述的微流控核酸检测卡盒，其检测功能强大，检测通量高，检测速度快，自动化程度高，使用简便。检测时只需要加入待检测样本和裂解液的混合液；检测过程中的样本裂解、核酸吸附、核酸清洗、核酸洗脱、溶液分配均集成在卡盒中进行；核酸的扩增可在配套的仪器中自动化完成，核酸检测结果可以在配套仪器提供的不同波色激发光环境中被实时读取并呈现在仪器的软件界面上。基于该卡盒的结构，能够有效的实现核酸检测过程的自动化，具有应用面广泛，使用方便等特点。

2、本发明提供的微流控核酸检测卡盒，在一种实施例下，嵌入的多个阀组件的控制方式简单，在配套仪器的控制下，能有效实现微流管道的打开和关闭。

3、本发明提供的微流控核酸检测卡盒，在一种实施例下，阀轴设于软质连接件中，使阀组件接通性能良好，关闭性能良好，气密性优良，能有效实现卡盒中流体的操控，在PCR扩增过程中能紧闭扩增腔，避免因PCR扩增而产生的气溶胶污染。

4、本发明提供的微流控核酸检测卡盒，在一种实施例下，储液腔一、储液腔二、储液腔三、储液腔四、储液腔五分别预存了缓冲液、磁珠溶液、乙醇溶液、核酸洗脱液、核酸扩增预混液。使用时，操作人员只需要往样本裂解腔中加入待检测样本和裂解液的混合液，然后通过配套仪器按照既定流程完成后续的检测步骤，具有操作简单、使用方便的特点。

5、本发明提供的微流控核酸检测卡盒下方的多个扩增腔室，可采用冷冻干燥技术预先包埋引物和探针，根据引物和探针的组合，可以实现不同指标的检测。多个腔室中的引物探针对可以相互之间搭配组合，可以多个扩增腔的引物探针对完全不同，同一个腔室内的引物探针对也不同，搭配配套的仪器，以采用8个扩增腔为例，理论最多同时可实现48个标志物的联合检测，具有多指标联合检测能力强的特点。

6、本发明提供的微流控核酸检测卡盒可应用于各种类型医院、疾控中心、进出口海关，也可以应用于其他各种现场检测场景，比如偏远地区的乡村诊所、户外环境监测等。

附图说明

图1示出了本发明的微流控核酸检测卡盒的外观示意图；

图2示出了本发明的微流控核酸检测卡盒的结构爆炸示意图；

图3示出了本发明的试剂操作件的结构示意图；

图4示出了本发明的软质连接件嵌入阀轴时的结构示意图；

图5示出了本发明的阀轴的结构示意图；

图6示出了本发明的微流控核酸检测卡盒检测时的实时荧光曲线结果图。

其中，1、卡盒支架；2、试剂操作件；3、软质连接件；4、流路件；5、阀轴；6、扩增腔；2-1、样本裂解腔；2-2、储液腔一；2-3、储液腔二；2-4、储液腔三；2-5、储液腔四；2-6、储液腔五；2-7、第一微流管道；2-8、第二微流管道；2-9、泵操作腔；2-10、活塞；3-1、阀对接孔一；3-3、阀对接孔三；3-7、阀对接孔七；3-8、阀对接孔八；3-15、阀对接孔十五；4-1、第三微流管道；4-2、第四微流管道；5-1、阀通孔；5-2、阀切口；6-1、扩增腔一、6-2、扩增腔二、6-3、扩增腔三、6-4、扩增腔四、6-5、扩增腔五、6-6、扩增腔六、6-7、扩增腔七、6-8、扩增腔八。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

本发明提供了一种基于实时荧光聚合酶链式反应的全自动化微流控核酸检测卡盒，包括：卡盒支架1、试剂操作件2、软质连接件3、流路件4、以及扩增腔6。

其中，如图1，所述卡盒支架1包括两个侧边支架，所述两个侧边支架通过卡扣结构相互配合锁死；

如图1-3，试剂操作件2设于所述卡盒支架1内上部，所述试剂操作件2上设置有一个样本裂解腔2-1，多个储液腔，所述多个储液腔包括储液腔一2-2、储液腔二2-3、储液腔三2-4、储液腔四2-5以及储液腔五2-6，泵操作腔2-9，试剂操作件表面设有一条第一微流管道2-7，一条第二微流管道2-8，泵操作腔2-9内嵌有一活塞2-10，活塞2-10在前后运动的时候，可以为微流控卡盒中液体的流动提供动力；

如图1，4，5，所述软质连接件3，紧密的设于所述试剂操作件2下部，所述软质连接件3上设置有多个阀对接孔；软质连接件3中嵌有多根阀轴5，阀轴5上有阀通孔5-1，旋转阀轴5，阀通孔5-1与软件连接件3上的阀对接孔对准时，会接通软质连接件3的阀对接孔，再次旋转阀轴5，会切断软质连接件3的阀对接孔。

其中，所述阀对接孔包括：阀对接孔一3-1、阀对接孔三3-3、阀对接孔七3-7、阀对接孔八3-8、以及阀对接孔十五3-15。可选的，还可以是阀对接孔二、阀对接孔四至五，阀对接孔九至十四等，具体需要根据实际情况进行选择连接。

如图1，2，所述流路件4紧密的设于所述软质连接件3下方，所述流路件4上设置有一条第三微流管道4-1和八条第四微流管道4-2；

如图1，2，扩增腔6设于所述流路件4下方，所述扩增腔6包括：设置在所述卡盒支架1下方的扩增腔一6-1、扩增腔二6-2、扩增腔三6-3、扩增腔四6-4、扩增腔五6-5、扩增腔六6-6、扩增腔七6-7、以及扩增腔八6-8。扩增腔一6-1~扩增腔八6-8与流路件4上的八条第四微流管道4-2依次对应连接。

可选的，所述扩增腔一6-1、扩增腔二6-2、扩增腔三6-3、扩增腔四6-4、扩增腔五6-5、扩增腔六6-6、扩增腔七6-7、以及扩增腔八6-8并排设置。

如图1，所述卡盒支架1将所述试剂操作件2、软质连接件3以及所述流路件4紧密的固定在其中，确保各部件之间连接的紧密性；

所述试剂操作件2上的第一微流管道2-7一端连接着泵操作腔2-9，另一端依次连接着软质连接件3上的阀对接孔七3-7、第三微流管道4-1；第三微流管道4-1连接着阀对接孔一3-1~对接孔六；阀对接孔一3-1~对接孔六依次连接着试剂操作件2上的样本裂解腔2-1，储液腔一2-2~储液腔五2-6；故泵操作腔2-9依次通过第一微流管道2-7，阀对接孔七3-7，第三微流管道4-1，阀对接孔一3-1~对接孔六实现了与样本裂解腔2-1、储液腔一2-2~储液腔五2-6的连接；

所述试剂操作件2上的第二微流管道2-8一端与泵操作腔2-9连接，另一端依次连接着阀对接孔八3-8~阀对接孔十五3-15，流路件4上的八条第四微流管道4-2，八个扩增腔6；故泵操作腔2-9依次通过第二微流管道2-8、阀对接孔八3-8~阀对接孔十五3-15、八条第四微流管道4-2实现了与八个扩增腔6的连接；

所述软质连接件3上的阀对接孔中间设有阀轴5，旋转阀轴5会切断或者接通阀对接孔，首先可以实现第一微流管道2-7与第三微流管道4-1的切断与接通，进而实现泵操作腔2-9与样本裂解腔2-1、储液腔一2-2~储液腔五2-6的切断与接通；其次，可以实现第二微流管道2-8与第四微流管道4-2的切断与接通，进而可以实现泵操作腔2-9与八个扩增腔6的切断与接通；

所述扩增腔一6-1~扩增腔八6-8预埋有引物和探针。本发明提供的微流控核酸检测卡盒下方的多个扩增腔6，可采用冷冻干燥技术预先包埋引物和探针，根据引物和探针的组合，可以实现不同指标的联合检测。多个腔室中的引物探针对可以相互之间搭配组合，可以多个扩增腔6的引物探针对完全不同，同一个腔室内的引物探针对也不同，搭配配套的仪器，以采用8个扩增腔6为例，理论上最多可实现48个标志物的联合检测，具有多指标联合检测能力强的特点。

所述试剂操作件2的第一微流管道2-7和第二微流管道2-8位于所述试剂操作件2的表面并通过密封膜密封；

所述流路件4的一条第三微流管道4-1和八条第四微流管道4-2连通位于所述流路件4的表面并通过密封膜密封。

本发明还提供了一种核酸检测试剂盒，包括如上述的核酸检测卡盒，其中，所述试剂操作件2的储液腔一2-2至储液腔五2-6内依次分别预载有：缓冲液、磁珠溶液、乙醇溶液、核酸洗脱溶液、以及核酸扩增预混液。在一种实施例下，通过将储液腔一2-2、储液腔二2-3、储液腔三2-4、储液腔四2-5、储液腔五2-6依次分别预存缓冲液、磁珠溶液、乙醇溶液、核酸洗脱液、核酸扩增预混液。使用时，操作人员只需要往样本裂解腔加入待检测样本和裂解液的混合液，然后通过配套仪器按照既定流程完成后续的检测步骤，具有操作简单、使用方便的特点。

本实施例中微流控核酸检测卡盒的使用方法如下：

（1）、用移液枪取待检测样本和裂解液的混合液加入微流控核酸检测卡盒的样本裂解腔2-1；

（2）、打开与微流控核酸检测卡盒配套的仪器，启动核酸检测软件，将卡盒插入仪器；

（3）、在仪器软件界面上选择卡盒的检测项目种类，设定仪器的运行参数，确认启动检测流程；

（4）、仪器样本裂解腔加热模块为卡盒的样本裂解腔2-1提供75℃高温环境10 min，完成样本裂解，释放核酸；

（5）、仪器旋转阀轴5，打开阀对接孔七3-7，接着仪器打开储液腔一2-2对应的阀对接孔二3-2，通过第一微流控管道2-7和第三微流管道4-1接通泵操作腔2-9和储液腔一2-2，活塞2-10往外运动，将储液腔一2-2中的缓冲液吸入泵操作腔2-9中，然后旋转阀轴5关闭阀对接孔二3-2；仪器接着打开样本裂解腔2-1对应的阀对接孔一3-1，通过第一微流控管道2-7和第三微流管道4-1接通样本裂解腔2-1和泵操作腔2-9，活塞2-10往内运动，将缓冲液压入样本裂解腔2-1，等待3min，仪器旋转阀轴5，关闭阀对接孔一3-1；

（6）、仪器旋转阀轴5，打开储液腔二2-3对应的阀对接孔三3-3，通过第一微流控管道2-7和第三微流管道4-1接通泵操作腔2-9和储液腔二2-3，活塞2-10往外运动，将储液腔二2-3中的磁珠溶液吸入泵操作腔2-9中，然后旋转阀轴5关闭阀对接孔三3-3，仪器接着打开样本裂解腔2-1对应的阀对接孔一3-1，通过第一微流控管道2-7和第三微流管道4-1接通样本裂解腔2-1和泵操作腔2-9，活塞2-10往内运动，将磁珠溶液压入样本裂解腔2-1，等待3min，仪器中磁铁模块紧贴样本裂解腔2-1，等待30s，磁珠被吸附到磁铁附近，活塞2-10往外运动，将样本裂解腔2-1中的废液吸入到泵操作腔2-10，旋转阀轴5，关闭阀对接孔一3-1；仪器旋转阀轴5，打开储液腔二2-3对应的阀对接孔三3-3，通过第一微流控管道2-7和第三微流管道4-1接通泵操作腔2-10和储液腔二2-3，活塞2-10往内运动，将泵操作腔2-9中的废液压入储液腔二2-3，然后旋转阀轴5关闭阀对接孔三3-3；

（7）、仪器旋转阀轴5，打开储液腔三2-4对应的阀对接孔四3-4，通过第一微流控管道2-7和第三微流管道4-1接通泵操作腔2-9和储液腔三2-4，活塞2-10往外运动，将储液腔三2-4中的乙醇溶液吸入泵操作腔2-9中，然后旋转阀轴5关闭阀对接孔四3-4；仪器接着打开样本裂解腔2-1对应的阀对接孔一3-1，通过第一微流控管道2-7和第三微流管道4-1接通样本裂解腔2-1和泵操作腔2-9，活塞2-10往内运动，将乙醇溶液压入样本裂解腔2-1，仪器中的裂解腔搅拌模块将磁珠搅散开，等待1min，仪器中磁铁模块紧贴样本裂解腔2-1，等待30s，磁珠被吸附到磁铁附近，活塞2-10往外运动，将样本裂解腔2-1的废液吸入到泵操作腔2-9，旋转阀轴5，关闭阀对接孔一3-1；仪器旋转阀轴5，打开储液腔三2-4对应的阀对接孔四3-4，通过第一微流控管道2-7和第三微流管道4-1接通泵操作腔2-9和储液腔三2-4，活塞2-10往内运动，将泵操作腔2-9中的废液压入储液腔三2-4，然后旋转阀轴5关闭阀对接孔四3-4；

（8）、仪器旋转阀轴，打开储液腔四2-5对应的阀对接孔五3-5，通过第一微流控管道2-7和第三微流管道4-1接通泵操作腔2-9和储液腔四2-5，活塞2-10往外运动，将储液腔四2-5中的核酸洗脱溶液吸入泵操作腔2-9中，然后旋转阀轴5关闭阀对接孔五3-5；仪器接着打开样本裂解腔2-1对应的阀对接孔一3-1，通过第一微流控管道2-7和第三微流管道4-1接通样本裂解腔2-1和泵操作腔2-9，活塞2-10往内运动，将核酸洗脱溶液压入样本裂解腔2-1，仪器中的裂解腔搅拌模块将磁珠搅散开，仪器样本裂解腔加热模块为卡盒的样本裂解腔2-1提供65℃高温环境5 min，核酸从磁珠上洗脱到核酸洗脱液中，仪器中磁铁模块紧贴样本裂解腔2-1，等待30s，磁珠被吸附到磁铁附近，活塞2-10往外运动，将样本裂解腔2-1的核酸溶液吸入到泵操作腔2-9，旋转阀轴5，关闭阀对接孔一3-1；

（9）、仪器旋转阀轴5，打开储液腔五2-6对应的阀对接孔六3-6，通过第一微流控管道2-7和第三微流管道4-1接通泵操作腔2-9和储液腔五2-6，活塞2-10往外运动，将储液腔五2-6中的核酸扩增预混液吸入泵操作腔2-9中，与第（8）步中的核酸洗脱液混合均匀成核酸扩增液，然后旋转阀轴5关闭阀对接孔六3-6；

（10）、仪器旋转阀轴5，打开扩增腔一6-1对应的阀对接孔八3-8，通过第二微流管道2-8和第四微流管道4-2接通泵操作腔2-9和扩增腔一6-1，活塞2-10往里运动，将第（9）步中的核酸扩增液压入到扩增腔一6-1中，仪器旋转阀轴5，关闭扩增腔一6-1对应的阀对接孔八3-8；

（11）、依照第（10）步操作，仪器将核酸扩增液依次压入到扩增腔二6-2~扩增腔八6-8中，完成核酸溶液的分配过程；

（12）、仪器开始自动进行PCR扩增循环，自动采集每个反应循环中的荧光信号，并将采集到的荧光信号经过处理后实时呈现在软件界面上；

（13）操作人员根据荧光曲线分析结果并出具检测报告；

（14）软件界面上点击完成实验，仪器自动弹出微流控核酸检测卡盒并将其取出，关闭仪器电源。

实验结果：

实验结果如图6所示，图中8条曲线1~8分别对应扩增腔一6-1~扩增腔八6-8，其中荧光强度明显增强的为阳性结果，表示待检测样本含有待检测的病原体，其中荧光强度没有明显变化的为阴性结果，表示待检测样本不含有待检测的病原体。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种微流控核酸检测卡盒，其特征在于，包括：

卡盒支架；

试剂操作件，设于所述卡盒支架内上部，所述试剂操作件上设置有一个样本裂解腔、多个储液腔以及一个泵操作腔，所述试剂操作件上设置有一条第一微流管道以及一条第二微流管道，所述第一微流管道一端连接所述泵操作腔；

软质连接件，紧密的设于所述试剂操作件下部，所述软质连接件上设置多个阀对接孔，所述阀对接孔中嵌有多根阀轴用以控制所述阀对接孔的开断；

流路件，所述流路件紧密的设于所述软质连接件下方，所述流路件上设置有一条第三微流管道及多条第四微流管道；

扩增腔，所述扩增腔设于所述流路件下方；

所述卡盒支架将所述试剂操作件、软质连接件以及所述流路件紧密的固定在其中；

通过控制所述软质连接件上的阀组件控制所述泵操作腔与所述样本裂解腔，所述泵操作腔与所述储液腔之间的开断，以及所述泵操作腔与所述扩增腔之间的开断。

2.如权利要求1所述的微流控核酸检测卡盒，其特征在于，所述卡盒支架包括两个侧边支架，所述两个侧边支架通过卡扣结构相互配合固定。

3.如权利要求1所述的微流控核酸检测卡盒，其特征在于，所述多个储液腔包括：设置在所述试剂操作件上的储液腔一、储液腔二、储液腔三、储液腔四、以及储液腔五。

4.如权利要求1所述的微流控核酸检测卡盒，其特征在于，所述阀轴组件包括：设于所述软质连接件上的阀通孔、以及内嵌于所述阀通孔内的阀轴，所述阀轴上还设置有旋转连接部，通过旋转所述阀轴使所述阀对接孔接通或者断开所述泵操作腔与所述样本裂解腔之间的连接，所述泵操作腔与所述储液腔之间的连接，以及所述泵操作腔与所述扩增腔之间的连接。

5.如权利要求1所述的微流控核酸检测卡盒，其特征在于，所述多个阀对接孔包括：阀对接孔一、阀对接孔三、阀对接孔七、阀对接孔八、以及阀对接孔十五。

6.如权利要求1所述的微流控核酸检测卡盒，其特征在于，所述扩增腔包括：设置在所述卡盒支架中流路件下方的扩增腔一、扩增腔二、扩增腔三、扩增腔四、扩增腔五、扩增腔六、扩增腔七、以及扩增腔八。

7.如权利要求6所述的微流控核酸检测卡盒，其特征在于，所述扩增腔一、所述扩增腔二、所述扩增腔三、所述扩增腔四、所述扩增腔五、所述扩增腔六、所述扩增腔七、以及所述扩增腔八并排设置。

8.如权利要求1所述的微流控核酸检测卡盒，其特征在于，所述扩增腔内预埋有引物和探针。

9.如权利要求1所述的微流控核酸检测卡盒，其特征在于，所述第一微流管道的部分结构位于所述试剂操作件的表面并通过密封膜密封；

和/或，所述第二微流管道的部分结构位于所述试剂操作件的表面并通过密封膜密封；

和/或所述第三微流管道的部分结构位于所述流路件表面并通过密封膜密封；

和/或所述多条第四微流管道的部分结构位于所述流路件表面并通过密封膜密封。

10.一种核酸检测试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1-9任一所述的微流控核酸检测卡盒，其中，所述试剂操作件的储液腔一至储液腔五内依次分别预载有：缓冲液、磁珠溶液、乙醇溶液、核酸洗脱溶液、以及核酸扩增预混液。

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