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CN111492978A - 一种大花序桉1212品种的组培快繁方法 - Google Patents

一种大花序桉1212品种的组培快繁方法 Download PDF

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CN111492978A
CN111492978A CN202010421506.5A CN202010421506A CN111492978A CN 111492978 A CN111492978 A CN 111492978A CN 202010421506 A CN202010421506 A CN 202010421506A CN 111492978 A CN111492978 A CN 111492978A
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CN
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eucalyptus
seedlings
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days
tissue culture
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Application number
CN202010421506.5A
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沈云
庞贞武
黄汉宁
吴兵
詹定举
吴满芳
吕华丽
黄全东
俸荣娣
梁彩娟
孙雪阳
徐香梅
覃汉夫
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangxi Bagui Forest Flower Seedlings Co ltd
Original Assignee
Guangxi Bagui Forest Flower Seedlings Co ltd
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    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
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Abstract

本发明涉及桉树栽培技术领域，具体涉及一种大花序桉1212品种的组培快繁方法，该方法通过采用大花序桉优良种源的优良单株，对其进行伐倒促萌，采集芽条诱导无菌芽，经过对无菌芽的继代培养、生根培养以及轻基质育苗，获得再生植株。本发明大花序桉1212品种的组培快繁方法操作难度低、生产成本低，无菌繁殖体系生长稳定、继代苗增殖系数高、重复性好、生根苗生根率高，生产的组培苗成活率高，遗传性状稳定，林相整齐，苗木能够保持优树的优良遗传特性，适合大面积种植，易于大规模生产推广。

Description

一种大花序桉1212品种的组培快繁方法
技术领域
本发明涉及桉树栽培技术领域，具体涉及一种大花序桉1212品种的组培快繁方法。
背景技术
大花序桉(学名:Eucalyptus cloeziana F. Muell.)为桃金娘科桉树属大乔木树种，自然分布于澳大利亚昆士兰州中部和北部，原产地树高35～40m，最高可达40～55m，胸径可达1～2m。该树种生长迅速，干形通直、圆满，自然整枝良好。木材黄褐色，纹理通直，结构均匀，沉重、坚固、硬度高、耐久，是一种很好的锯材，有桉树中的“红木”之称，可用于高级家具、实木地板、机械构件、建筑、矿柱、坑木等。大花序桉树种耐干旱瘠薄、抗病虫害能力强，生长迅速，尤其是后期生长优势非常明显，是具有培育价值的大径材树种。
我国引种大花序桉始于1972年，广西、广东、海南、福建、四川等省区均做了引种试验。1982～1989年中国与澳大利亚技术合作东门桉树示范林项目分别于1983、1989年在广西东门林场建立2个大花序桉种源试验,但目前只有1989年建立的试验林保存比较完整，该试验林参试种源11个。1990年代广西象州县引种大花序桉,7年生14株保留木平均胸径达20.5cm,平均树高达22.4m,经受-4℃的低温天气检验, 大花序桉没有受到冻害。广西林业科学研究院于2004年在广西钦州、玉林2个地点建立大花序桉种源/家系试验林。5.5年生大花序桉种源在上述 2 个试验点间生长差异极显著,种源间差异极显著, 而种源和地点的互作效应也极显著。广东对大花序桉引种也进行了研究，在粤中地区的研究表明，大花序桉5 年生的材积增长率仍在不断上升,与尾叶桉等其他桉树相比最为显著,认为其极具大径级用材(锯材)培育潜力。
当前桉树造林品种较少，单一无性系大面积连片种植十分普遍，林分严重病虫灾害发生风险较大。此外，培育目标单一，绝大多数是纸浆材或旋切板材原料，抗市场风险能力较弱。大花序桉生长迅速，后期生长优势明显，轮伐周期比尾叶桉、尾巨桉稍长，大花序桉的优越性非常明确，发展大花序桉可丰富桉树造林树种，增加林分多样性，可降低林分病虫灾害严重发生风险，同时增加锯材品种，提高造林业主抗市场风险能力。大花序桉由于经营周期较长，营造林措施对水土、植被的影响可得到较好恢复，因而人工林环境更加友好，将可逐渐改变人们对桉树林的偏见，对桉树的种种误解自然而然会慢慢消除，有利于发展桉树人工林的良性发展。
大花序桉1212是从澳大利亚引种的大花序桉优良种源林分中筛选优良单株，伐倒促萌，经无性繁殖得到的优良大花序桉品种。大花序桉为多年生异花授粉的本本植物，常规实生苗育苗、造林分化大，苗相不整、生长不一，不能保证优树优良特性。本发明利用组织培养技术，可在短时间获得大量遗传性状一致的苗木，解决了大花序桉1212苗木短缺和造林分化大的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种大花序桉1212品种的组培快繁方法，该方法通过采用大花序桉优良资源的优良单株伐倒促萌，采集芽条诱导无菌芽，不经过愈伤组织途径,直接由芽器官离体诱导无菌芽进行组织培养，通过继代培养、生根培养以及轻基质育苗，快速获得大量的再生植株。使用该方法得到的再生植株，结果稳定，重复性良好，能够大规模推广育苗，组培苗成活率高，遗传性状稳定，苗木能够保持优树的优良遗传性状，不易发生变异。
为实现本发明的目的，采取如下技术方案：
一种大花序桉1212品种的组培快繁方法，采用大花序桉优良种源的优良单株，对其进行伐倒促萌，采集芽条诱导无菌芽，经过对无菌芽的继代培养、生根培养以及轻基质育苗，获得再生植株；所述的大花序桉1212品种的组培快繁方法，具体包括如下步骤：
（1）外植体建立：从澳大利亚引种的大花序桉优良种源林分中筛选优良单株，伐倒促萌，剪取芽条，将采回的芽条去除叶片后，剪成3-5cm的茎段，用自来水冲洗30-35min，饱和洗衣粉溶液洗涤10-12min，再用自来水冲洗干净；
（2）外植体消毒：将步骤（1）得到的外植体置于高压灭菌处理过的无菌瓶中，用体积浓度75%酒精溶液浸泡40s，倒掉酒精用无菌水清洗2-3次，置于0.1%升汞溶液中并适当搅拌，消毒8min，倒去升汞至专用收集罐中，用无菌水清洗3-4次，然后在体积浓度为0.5%的杀菌剂S106中浸泡28-32min；
（3）无菌芽诱导：沥干水分，置于高压灭菌处理的接种碟上，使用灭菌处理的镊子、手术刀将接触药液的芽条两端切口切除，而后把芽条切成长度1-2cm的带芽茎段，接种到以试管为载体的诱导培养基上，暗培养7天，而后见光培养，光照强度1500-2000lux，温度25±2℃，培养25-30天；
（4）继代培养：培养25-30天，外植体开始萌芽，当无菌萌芽长到1cm以上，选取无污染的无菌芽，用镊子从试管抽出外植体，切割后将无菌芽转入以广口瓶为载体的继代增殖培养基中，全光培养光照强度1500-2000lux，培养7-10天，增大光照强度至2000-3000lux，以促进丛芽增殖和生长，当丛生芽长到1-2cm时，转瓶到新的增殖培养基上继代培养，获取大量继代苗；
（5）生根培养：当继代苗达到一定量后，开始生根培养，剪取1.1-1.4cm的顶芽接入生根培养基中；
（6）炼苗：在培养室培养7天后，切口冒出根点或短根，将生根瓶苗捡出，转移到大棚炼苗；
（7）移栽：炼苗34-36天，根长至1-3cm，苗高3cm以上，洗去培养基，移栽至轻基质营养杯中，培养85-95天，得到再生植株；
（8）移栽后肥料管理：苗木移入营养杯14-16天后进行施肥，用质量浓度0.2%复合肥水溶液喷叶面，喷完立即用清水清洗苗木，每隔7天喷1次，遇到低温或雨天可延长；随苗木的生长，当苗高达到12-13公分，可加大施肥浓度，并可适当增加钾肥的用量，促进苗木木质化，待苗高达20公分时，停止施肥。
上述的大花序桉1212品种的组培快繁方法中，从澳大利亚引种的大花序桉优良种源，通过栽培试验、测定分析，经过测量胸径、树高、蓄积、连年生长量、木材材性以及干形指标，综合对比后，在适合本地生长的种源中选择优树。
上述的大花序桉1212品种的组培快繁方法，步骤（3）无菌芽诱导中，所述的诱导培养基为：改良MS+6-BA 1.5mg/L +KT 0.5mg/L+NAA 0.3mg/L+核黄素15mg/L+蔗糖30g/L+琼脂 4g/L，pH 5.8-6.2。
上述的大花序桉1212品种的组培快繁方法，步骤（4）继代培养中，所述的继代增殖培养基为：改良MS+6-BA 1.0mg/L +NAA 0.3mg/L+核黄素15mg/L+蔗糖30g/L+琼脂 4g/L，pH5.8-6.2。
上述的大花序桉1212品种的组培快繁方法，步骤（5）生根培养中，所述的生根培养基为：1/3改良MS+ABT1 3.0mg/L +IAA 1.0mg/L+维生素C 5mg/L+活性炭20mg/L+蔗糖15g/L+琼脂 4g/L，pH 5.8-6.2。
上述的大花序桉1212品种的组培快繁方法，步骤（7）移栽中，所述的轻基质营养杯中所用的轻基质为用KMnO4 消毒过的, 各类基质按照体积比椰糠:泥炭土:炭化谷壳/炭化木糠=6:3:1的比例进行混合拌匀制得的育苗基质。
上述的大花序桉1212品种的组培快繁方法，还包括苗木移栽后的病虫害防治，具体为：幼苗期叶片小，感病少，苗木长到10-15公分，叶片逐渐变大，通风，透气性差，易得茎腐病；苗木移苗15天后断根后叶片逐渐脱落，叶片粘在叶柄上，容易大面积发生茎腐病；防治茎腐病，首先少施氮肥，防止苗木贪长幼嫩，提高其抗病能力；在高温高湿、病害发生流行季节，每7天喷淋1次杀菌药，可用敌克松、甲基托布津或代森锌600-800倍液喷淋苗木根茎部；对于已发生病害的苗木，及时拔除并进行焚烧处理，以彻底消灭病菌，防止苗木再次受到感染；大花序桉苗期虫害主要有方子虫和菜青虫，方子虫用毒死蜱乳油1200-1400倍液浇灌防治；菜青虫用4.5%氯氰菊酯水乳剂800-1000倍液防治，间隔7-10天喷1次，连续喷2-3次。
本发明用于制备培养基的各组分化合物可以从化学词典或农作物栽培的教科书检索到其名称和作用，本发明采用这些化合物进行组合制备不同价段用的培养基对大花序桉1212品种进行组培快繁最为适合，是经过多次试验筛选才最终确定的。
大花序桉1212是从澳大利亚引种的大花序桉优良种源林分中筛选优良单株，伐倒促萌，经无性繁殖得到的优良大花序桉品种。在东门林场2004年建立的大花序桉种源/家系试验林中，采用优势木对比法，选出3～5株优势木，实测并计算平均高、胸径、材积。候选优树生长指标超过上述平均标准（胸径>20%,树高>5%,材积>50%），即可入选；2018年将选取优树伐倒促萌，通过无性快繁技术建立大花序桉1212组培快繁体系。大花序桉1212品种干形通直，生长快，后期生长优势明显，适合培育大径材。
本发明的有益效果为：
1、本发明采用大花序桉优良资源的优良单株萌芽作为外殖体，在组培快繁方法中，组培无菌芽获得方式是由芽器官（带潜伏芽的茎段）离体诱导丛生芽，不经过愈伤组织途径，无菌芽诱导过程中没有经过脱分化过程，培育的组培苗遗传性状稳定，能够完整保持母树的遗传特性，不易发生变异。
2、本发明的大花序桉1212品种的组培快繁方法操作难度低、生产成本低，无菌繁殖体系生长稳定、继代苗增殖系数高、重复性好、生根苗生根率较高，生根率90%左右，生产的组培苗成活率高，遗传性状稳定，林相整齐，苗木能够保持优树的优良遗传特性，适合大面积种植，可以应用于大规模商品化育苗，易于大规模生产推广。
3、采用本发明的大花序桉1212品种的组培快繁方法可在短时间获得大量整齐一致，遗传性状稳定的再生植株，解决了大花序桉1212苗木短缺和造林分化大的问题。
附图说明
图1是本发明实施例2继代培养步骤中培养得到的大花序桉1212无菌芽继代增殖苗；
图2是本发明实施例2中进行生根培养得到的大花序桉1212瓶内生根苗；
图3是本发明实施例2中进行生根培养得到的大花序桉1212瓶内生根苗的瓶底图；
图4是本发明实施例2移栽步骤中苗木移栽至轻基质营养杯后培养的大花序桉1212小苗。
具体实施方式
下面对本发明的具体实例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解，从而对本发明的保护范围作出更为清楚明确的界定。
实施例1
一种大花序桉1212品种的组培快繁方法，采用大花序桉优良种源的优良单株，对其进行伐倒促萌，采集芽条诱导无菌芽，经过对无菌芽的继代培养、生根培养以及轻基质育苗，获得再生植株；
所述的大花序桉1212品种的组培快繁方法，具体包括如下步骤：
（1）外植体建立：从澳大利亚引种的大花序桉优良种源林分中筛选优良单株（即：从澳大利亚引种的大花序桉优良种源，通过栽培试验、测定分析，经过测量胸径、树高、蓄积、连年生长量、木材材性以及干形指标，综合对比后，在适合本地生长的种源中选择优树），伐倒促萌，剪取芽条，将采回的芽条去除叶片后，剪成3-5cm的茎段，用自来水冲洗35min，饱和洗衣粉溶液洗涤11min，再用自来水冲洗干净；
（2）外植体消毒：将步骤（1）得到的外植体置于高压灭菌处理过的无菌瓶中，用体积浓度75%酒精溶液浸泡40s，倒掉酒精用无菌水清洗2次，置于0.1%升汞溶液中并适当搅拌，消毒8min，倒去升汞至专用收集罐中，用无菌水清洗3次，然后在体积浓度为0.5%的杀菌剂S106中浸泡28min；
（3）无菌芽诱导：沥干水分，置于高压灭菌处理的接种碟上，使用灭菌处理的镊子、手术刀将接触药液的芽条两端切口切除，而后把芽条切成长度1-2cm的带芽茎段，接种到以试管为载体的诱导培养基上，所述的诱导培养基为：改良MS+6-BA1.5mg/L +KT0.5mg/L+NAA0.3mg/L+核黄素15mg/L+蔗糖30g/L+琼脂 4g/L，pH 5.8-6.2；暗培养7天，而后见光培养，光照强度1500-2000lux，温度25±2℃，培养28天；
（4）继代培养：培养28天，外植体开始萌芽，当无菌萌芽长到1cm以上，选取无污染的无菌芽，用镊子从试管抽出外植体，切割后将无菌芽转入以广口瓶为载体的继代增殖培养基中，所述的继代增殖培养基为：改良MS+6-BA1.0mg/L +NAA 0.3mg/L+核黄素15mg/L+蔗糖30g/L+琼脂 4g/L，pH 5.8-6.2；全光培养光照强度1500-2000lux，培养8天，增大光照强度至2000-3000lux，以促进丛芽增殖和生长，当丛生芽长到1-2cm时，转瓶到新的增殖培养基上继代培养，获取大量继代苗；
（5）生根培养：当继代苗达到一定量后，开始生根培养，剪取1.1-1.4cm的顶芽接入生根培养基中，所述的生根培养基为：1/3改良MS+ABT13.0mg/L +IAA 1.0mg/L+维生素C 5mg/L+活性炭20mg/L+蔗糖15g/L+琼脂 4g/L，pH 5.8-6.2；
（6）炼苗：在培养室培养7天后，切口冒出根点或短根，将生根瓶苗捡出，转移到大棚炼苗；
（7）移栽：炼苗34-36天，根长至1-3cm，苗高3cm以上，洗去培养基，移栽至轻基质营养杯中，培养85天，得到再生植株；所述的轻基质营养杯中所用的轻基质为用KMnO4 消毒过的,各类基质按照体积比椰糠:泥炭土:炭化谷壳=6:3:1的比例进行混合拌匀制得的育苗基质；
（8）移栽后肥料管理：苗木移入营养杯15天后进行施肥，用质量浓度0.2%复合肥水溶液喷叶面，喷完立即用清水清洗苗木，每隔7天喷1次，遇到低温或雨天可延长；随苗木的生长，当苗高达到12-13公分，可加大施肥浓度，并可适当增加钾肥的用量，促进苗木木质化，待苗高达20公分时，停止施肥；
（9）病虫害防治：防治茎腐病，首先少施氮肥，防止苗木贪长幼嫩，提高其抗病能力；在高温高湿、病害发生流行季节，每7天喷淋1次杀菌药，用甲基托布津800倍液喷淋苗木根茎部；对于已发生病害的苗木，及时拔除并进行焚烧处理，以彻底消灭病菌，防止苗木再次受到感染；大花序桉苗期虫害方子虫用毒死蜱乳油1200倍液浇灌防治；菜青虫用4.5%氯氰菊酯水乳剂1000倍液防治，间隔9天喷1次，连续喷3次。
实施例2
一种大花序桉1212品种的组培快繁方法，采用大花序桉优良种源的优良单株，对其进行伐倒促萌，采集芽条诱导无菌芽，经过对无菌芽的继代培养、生根培养以及轻基质育苗，获得再生植株；
所述的大花序桉1212品种的组培快繁方法，具体包括如下步骤：
（1）外植体建立：从澳大利亚引种的大花序桉优良种源林分中筛选优良单株（即：从澳大利亚引种的大花序桉优良种源，通过栽培试验、测定分析，经过测量胸径、树高、蓄积、连年生长量、木材材性以及干形指标，综合对比后，在适合本地生长的种源中选择优树），伐倒促萌，剪取芽条，将采回的芽条去除叶片后，剪成3-5cm的茎段，用自来水冲洗30min，饱和洗衣粉溶液洗涤10min，再用自来水冲洗干净；
（2）外植体消毒：将步骤（1）得到的外植体置于高压灭菌处理过的无菌瓶中，用体积浓度75%酒精溶液浸泡40s，倒掉酒精用无菌水清洗3次，置于0.1%升汞溶液中并适当搅拌，消毒8min，倒去升汞至专用收集罐中，用无菌水清洗4次，然后在体积浓度为0.5%的杀菌剂S106中浸泡30min；
（3）无菌芽诱导：沥干水分，置于高压灭菌处理的接种碟上，使用灭菌处理的镊子、手术刀将接触药液的芽条两端切口切除，而后把芽条切成长度1-2cm的带芽茎段，接种到以试管为载体的诱导培养基上，所述的诱导培养基为：改良MS+6-BA1.5mg/L +KT0.5mg/L+NAA0.3mg/L+核黄素15mg/L+蔗糖30g/L+琼脂 4g/L，pH 5.8-6.2；暗培养7天，而后见光培养，光照强度1500-2000lux，温度25±2℃，培养30天；
（4）继代培养：培养30天，外植体开始萌芽，当无菌萌芽长到1cm以上，选取无污染的无菌芽，用镊子从试管抽出外植体，切割后将无菌芽转入以广口瓶为载体的继代增殖培养基中，所述的继代增殖培养基为：改良MS+6-BA1.0mg/L +NAA 0.3mg/L+核黄素15mg/L+蔗糖30g/L+琼脂 4g/L，pH 5.8-6.2；全光培养光照强度1500-2000lux，培养7天，增大光照强度至2000-3000lux，以促进丛芽增殖和生长，当丛生芽长到1-2cm时，转瓶到新的增殖培养基上继代培养，获取大量继代苗；
（5）生根培养：当继代苗达到一定量后，开始生根培养，剪取1.1-1.4cm的顶芽接入生根培养基中，所述的生根培养基为：1/3改良MS+ABT13.0mg/L +IAA 1.0mg/L+维生素C 5mg/L+活性炭20mg/L+蔗糖15g/L+琼脂 4g/L，pH 5.8-6.2；
（6）炼苗：在培养室培养7天后，切口冒出根点或短根，将生根瓶苗捡出，转移到大棚炼苗；
（7）移栽：炼苗35天，根长至1-3cm，苗高3cm以上，洗去培养基，移栽至轻基质营养杯中，培养90天，得到再生植株；所述的轻基质营养杯中所用的轻基质为用KMnO4 消毒过的, 各类基质按照体积比椰糠:泥炭土:炭化木糠=6:3:1的比例进行混合拌匀制得的育苗基质；
（8）移栽后肥料管理：苗木移入营养杯15天后进行施肥，用质量浓度0.2%复合肥水溶液喷叶面，喷完立即用清水清洗苗木，每隔7天喷1次，遇到低温或雨天可延长；随苗木的生长，当苗高达到12-13公分，可加大施肥浓度，并可适当增加钾肥的用量，促进苗木木质化，待苗高达20公分时，停止施肥；
（9）病虫害防治：幼苗期叶片小，感病少，苗木长到10-15公分，叶片逐渐变大，通风，透气性差，易得茎腐病；苗木移苗15天后断根后叶片逐渐脱落，叶片粘在叶柄上，容易大面积发生茎腐病；防治茎腐病，首先少施氮肥，防止苗木贪长幼嫩，提高其抗病能力；在高温高湿、病害发生流行季节，每7天喷淋1次杀菌药，用敌克松700倍液喷淋苗木根茎部；对于已发生病害的苗木，及时拔除并进行焚烧处理，以彻底消灭病菌，防止苗木再次受到感染；大花序桉苗期虫害方子虫用毒死蜱乳油1200倍液浇灌防治；菜青虫用4.5%氯氰菊酯水乳剂900倍液防治，间隔8天喷1次，连续喷2-3次。
下表1为采用本发明实施例1和实施例2的方法培养得到的大花序桉1212品种组培苗繁育结果：
Figure 349606DEST_PATH_IMAGE001
从上表1中可以看出，本发明大花序桉1212品种的组培快繁方法，增殖系数高，生根率达89%以上，移栽成活率在85%以上，组培苗移栽后能迅速适应露天环境，生长较快，抗外界不良环境能力强。目前已采用本发明大花序桉1212品种的组培快繁方法进行了大批量生产大花序桉1212品种种苗，创造了较大的经济效益、生态效益和社会效益。

Claims (7)

1.一种大花序桉1212品种的组培快繁方法，其特征在于： 采用大花序桉优良种源的优良单株，对其进行伐倒促萌，采集芽条诱导无菌芽，经过对无菌芽的继代培养、生根培养以及轻基质育苗，获得再生植株；
所述的大花序桉1212品种的组培快繁方法，具体包括如下步骤：
（1）外植体建立：从澳大利亚引种的大花序桉优良种源林分中筛选优良单株，伐倒促萌，剪取芽条，将采回的芽条去除叶片后，剪成3-5cm的茎段，用自来水冲洗30-35min，饱和洗衣粉溶液洗涤10-12min，再用自来水冲洗干净；
（2）外植体消毒：将步骤（1）得到的外植体置于高压灭菌处理过的无菌瓶中，用体积浓度75%酒精溶液浸泡40s，倒掉酒精用无菌水清洗2-3次，置于0.1%升汞溶液中并适当搅拌，消毒8min，倒去升汞至专用收集罐中，用无菌水清洗3-4次，然后在体积浓度为0.5%的杀菌剂S106中浸泡28-32min；
（3）无菌芽诱导：沥干水分，置于高压灭菌处理的接种碟上，使用灭菌处理的镊子、手术刀将接触药液的芽条两端切口切除，而后把芽条切成长度1-2cm的带芽茎段，接种到以试管为载体的诱导培养基上，暗培养7天，而后见光培养，光照强度1500-2000lux，温度25±2℃，培养25-30天；
（4）继代培养：培养25-30天，外植体开始萌芽，当无菌萌芽长到1cm以上，选取无污染的无菌芽，用镊子从试管抽出外植体，切割后将无菌芽转入以广口瓶为载体的继代增殖培养基中，全光培养光照强度1500-2000lux，培养7-10天，增大光照强度至2000-3000lux，以促进丛芽增殖和生长，当丛生芽长到1-2cm时，转瓶到新的增殖培养基上继代培养，获取大量继代苗；
（5）生根培养：当继代苗达到一定量后，开始生根培养，剪取1.1-1.4cm的顶芽接入生根培养基中；
（6）炼苗：在培养室培养7天后，切口冒出根点或短根，将生根瓶苗捡出，转移到大棚炼苗；
（7）移栽：炼苗34-36天，根长至1-3cm，苗高3cm以上，洗去培养基，移栽至轻基质营养杯中，培养85-95天，得到再生植株；
（8）移栽后肥料管理：苗木移入营养杯14-16天后进行施肥，用质量浓度0.2%复合肥水溶液喷叶面，喷完立即用清水清洗苗木，每隔7天喷1次，遇到低温或雨天可延长；随苗木的生长，当苗高达到12-13公分，可加大施肥浓度，并可适当增加钾肥的用量，促进苗木木质化，待苗高达20公分时，停止施肥。
2.根据权利要求1所述的大花序桉1212品种的组培快繁方法，其特征在于：从澳大利亚引种的大花序桉优良种源，通过栽培试验、测定分析，经过测量胸径、树高、蓄积、连年生长量、木材材性以及干形指标，综合对比后，在适合本地生长的种源中选择优树。
3.根据权利要求1所述的大花序桉1212品种的组培快繁方法，其特征在于：步骤（3）无菌芽诱导中，所述的诱导培养基为：改良MS+6-BA1.5mg/L +KT0.5mg/L+NAA 0.3mg/L+核黄素15mg/L+蔗糖30g/L+琼脂 4g/L，pH 5.8-6.2。
4.根据权利要求1所述的大花序桉1212品种的组培快繁方法，其特征在于：步骤（4）继代培养中，所述的继代增殖培养基为：改良MS+6-BA1.0mg/L +NAA 0.3mg/L+核黄素15mg/L+蔗糖30g/L+琼脂 4g/L，pH 5.8-6.2。
5.根据权利要求1所述的大花序桉1212品种的组培快繁方法，其特征在于：步骤（5）生根培养中，所述的生根培养基为：1/3改良MS+ABT13.0mg/L +IAA 1.0mg/L+维生素C 5mg/L+活性炭20mg/L+蔗糖15g/L+琼脂 4g/L，pH 5.8-6.2。
6.根据权利要求1所述的大花序桉1212品种的组培快繁方法，其特征在于：步骤（7）移栽中，所述的轻基质营养杯中所用的轻基质为用KMnO4消毒过的, 各类基质按照体积比椰糠:泥炭土:炭化谷壳/炭化木糠=6:3:1的比例进行混合拌匀制得的育苗基质。
7.根据权利要求1所述的大花序桉1212品种的组培快繁方法，其特征在于：还包括苗木移栽后的病虫害防治，具体为：防治茎腐病，首先少施氮肥，防止苗木贪长幼嫩，提高其抗病能力；在高温高湿、病害发生流行季节，每7天喷淋1次杀菌药，可用敌克松、甲基托布津或代森锌600-800倍液喷淋苗木根茎部；对于已发生病害的苗木，及时拔除并进行焚烧处理，以彻底消灭病菌，防止苗木再次受到感染；大花序桉苗期虫害方子虫用毒死蜱乳油1200-1400倍液浇灌防治；菜青虫用4.5%氯氰菊酯水乳剂800-1000倍液防治，间隔7-10天喷1次，连续喷2-3次。
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