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CN111471591A - 一种皮肤细胞悬液的制备器及其制备方法 - Google Patents

一种皮肤细胞悬液的制备器及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种皮肤细胞悬液的制备器及其制备方法，包括制备器壳体以及设置在所述制备器壳体上的操作台，所述操作台上设置有消化池、洗涤池和悬液制备池，所述消化池用于消化皮肤组织，所述洗涤池用于洗涤消化后的皮肤组织，所述悬液制备池用于制备皮肤细胞悬液；第一过滤器和第二过滤器，分别可拆卸设置于所述消化池和所述悬液制备池内，二者均包括外套筒和内芯筒，所述外套筒环套在所述内芯筒的外部。本发明装置让临床医生在手术室中可以快速、高效地制备皮肤细胞悬液，直接用于皮肤缺损疾病的治疗，不需要复杂的实验室人员和设备，操作过程简单、快速，大大降低细菌等微生物污染的风险。

Description

一种皮肤细胞悬液的制备器及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种皮肤细胞悬液的制备器及其制备方法，属于医疗器械技术领域。
背景技术
现有的皮肤细胞悬液制备是在实验室内进行的，其制备过程如下：将待消化的皮肤组织放入离心管中，加入消化酶液，置于37℃水浴或孵箱内，不断震荡，待消化完毕后过滤，液体离心弃上清液，加入Hanks液或者无血清培养液离心漂洗1～2次，去除上清液，加培养液制成细胞悬液，操作过程比较复杂，需要专门的人员和设备才能完成，临床上使用极不方便。
发明内容
针对上述突出问题，本发明提供一种皮肤细胞悬液的制备器及其制备方法，本发明的装置结构简单，能够让临床医生在手术室中可以快速、高效地制备皮肤细胞悬液，直接用于烧伤、白癜风等皮肤缺损疾病的治疗，不需要复杂的实验室人员和设备，操作过程简单、快速，大大降低细菌等微生物污染的风险。
为实现上述目的，本发明采取以下技术方案：
本发明第一方面一种皮肤细胞悬液的制备器，包括如下部件：
制备器壳体以及设置在所述制备器壳体上的操作台，所述操作台上设置有消化池7、洗涤池8和悬液制备池9，所述消化池7用于消化皮肤组织，所述洗涤池8用于洗涤消化后的皮肤组织，所述悬液制备池9用于制备皮肤细胞悬液；
电路控制组件和加热组件，设置于所述制备器壳体内，所述电路控制组件用于控制所述消化池7的加热温度和时间，所述加热组件用于对所述消化池7进行加热；
第一过滤器和第二过滤器，分别可拆卸的设置于所述消化池7和所述悬液制备池9内，二者均包括外套筒5和内芯筒3，所述外套筒5环套在所述内芯筒3的外部，所述外套筒5的第一端设置有滤网1，其第二端设有第一夹持部2；所述内芯筒3的第一端设置有活塞，其第二端设置有第二夹持部4，所述活塞可在所述外套筒5的内壁上滑动。
所述的制备器，优选地，位于所述第一过滤器中的所述滤网1的筛孔直径小于10微米。
所述的制备器，优选地，位于所述第二过滤器中的所述滤网1的筛孔直径为50-100微米。
所述的制备器，优选地，还包括研磨棒6，所述研磨棒6用于研磨消化洗涤后的皮肤组织。
所述的制备器，优选地，所述操作台上还设置有储物仓10，用于容纳操作过程中所需的物品。
所述的制备器，优选地，所述操作台上还设置有加热按钮11，用于控制所述消化池7的加热。
所述的制备器，优选地，所述显示器12能够监控加热温度维持在37℃，并保持恒温，可以使消化酶活力维持在最佳水平。
所述的制备器，优选地，所述操作台上还设置有计时按钮13，用于控制所述消化池7的消化时间。方便了解消化时间，避免消化时间过短和过长，消化时间过短则消化不彻底，细胞分离不佳，消化时间过长则影响细胞的功能和完整。
所述的制备器，优选地，所述操作台上还设置有指示灯14，用于控制所述消化池 7加热情况。
所述的制备器，优选地，所述操作台上还设置有显示器12，用于显示加热温度和加热时间。
本发明第二方面提供一种皮肤细胞悬液的制备方法，利用本发明第一方面所述的制备器，具体步骤如下：
(1)将皮肤组织置于所述第一过滤器中，将所述第一过滤器置于所述消化池7 中加热消化，得到消化的皮肤组织；
(2)将消化的皮肤组织置于所述洗涤池8中洗涤，得到分离的皮肤组织细胞；
(3)将分离的皮肤组织细胞置于所述悬液制备池9，加入缓冲液，抽吸、挤压、过滤，得到皮肤细胞悬液。
所述的制备方法，优选地，所述步骤1包括如下具体步骤：将无菌水与消化酶混匀后注入所述第一过滤器中，然后将所述第一过滤器置于所述消化池7中加热，待温度达到37℃时，在所述第一过滤器中加入皮肤组织，加热一段时间后得到消化的皮肤组织。
所述的制备方法，优选地，所述步骤1中的消化酶为胰蛋白酶，所述第一过滤器中所述滤网1的筛网直径小于10微米。
所述的制备方法，优选地，所述步骤2包括如下具体步骤：将所述步骤1中容纳有消化的皮肤组织的所述第一过滤器从所述消化池7中取出，置于所述洗涤池8中，反复抽吸，所述洗涤池8中容纳有酶中止洗涤液，所述酶中止洗涤液用于中止消化反应，并使皮肤组织细胞分离，最终得到分离的皮肤组织细胞。
所述的制备方法，优选地，所述步骤3包括如下具体步骤：将所述步骤2中分离的皮肤组织细胞倒入所述悬液制备池9中的所述第二过滤器中，加入缓冲液，反复抽吸、挤压，过滤得到皮肤细胞悬液。
所述的制备方法，优选地，所述步骤3中的缓冲液为PBS(phosphate buffersaline) 缓冲液，所述第二过滤器中所述滤网1的筛网直径为50-100微米。
所述的制备方法，优选地，所述步骤3还包括如下具体步骤：利用研磨棒6碾压所述第二过滤器内残留的皮肤组织，直至达到所要制备的悬液体积为止。
本发明由于采取以上技术方案，其具有以下优点：
1、本发明中第一过滤器中的滤网筛孔直径远大于胰蛋白酶的直径，同时又远小于皮肤细胞的直径，使得胰蛋白酶在消化及中止消化过程中既能防止已分离的细胞流失，同时又有效地将胰蛋白酶排出；
2、本发明的皮肤细胞悬液制备方法，取小片皮肤经酶消化后分离细胞制成细胞悬液，然后直接喷洒或涂抹于磨削好的烧伤或白癜风病变部位，操作过程简单、细胞不需体外培养、需要时间短(提取皮肤、酶消化、细胞分离制成悬液等过程大约30分钟)、覆盖面积大(据需要，1平方厘米皮肤制成的悬液可覆盖40至80平方厘米病变区域)，临床意义重大；
3、本发明装置让临床医生在手术室中可以快速、高效地制备皮肤细胞悬液，直接用于烧伤、白癜风等皮肤缺损疾病的治疗，不需要复杂的实验室人员和设备，操作过程简单、快速，大大降低细菌等微生物污染的风险。
附图说明
图1为本发明装置的整体结构示意图；
图2为本发明装置中研磨棒的结构示意图；
图3为本发明装置的俯视图；
图中各标记如下：
1-滤网；2-第一夹持部；3-内芯筒；4-第二夹持部；5-外套筒；6-研磨棒；7-消化池；8-洗涤池；9-悬液制备池；10-储物仓，11-加热按钮，12-显示器，13-计时按钮， 14-指示灯。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
如图1-3所示，本实施例提供一种皮肤细胞悬液的制备器，包括如下部件：
制备器壳体以及设置在所述制备器壳体上的操作台，所述操作台上设置有消化池7、洗涤池8、悬液制备池9和显示器12，所述消化池7用于消化皮肤组织，所述洗涤池8用于洗涤消化后的皮肤组织，所述悬液制备池9用于制备皮肤细胞悬液；
电路控制组件和加热组件，设置于所述制备器壳体内，所述电路控制组件用于控制所述消化池7的加热温度和时间，所述加热组件用于对所述消化池7进行加热；
第一过滤器和第二过滤器，分别可拆卸设置于所述消化池7和所述悬液制备池9内，二者均包括外套筒5和内芯筒3，所述外套筒5环套在所述内芯筒3的外部，所述外套筒5的第一端设置有滤网1，其第二端设有第一夹持部2；所述内芯筒3的第一端设置有活塞，其第二端设置有第二夹持部4，所述活塞可在所述外套筒5的内壁上滑动。
本实施例中，优选地，位于所述第一过滤器中的所述滤网1的筛孔直径为8微米。
本实施例中，优选地，位于所述第二过滤器中的所述滤网1的筛孔直径为90微米。
本实施例中，优选地，还包括研磨棒6，所述研磨棒6用于研磨消化洗涤后的皮肤组织。
本实施例中，优选地，所述操作台上还设置有储物仓10，用于容纳操作过程中所需的物品。
本实施例中，优选地，所述操作台上还设置有加热按钮11，用于控制所述消化池 7的加热。
本实施例中，优选地，所述操作台上还设置有计时按钮13，用于控制所述消化池 7的消化时间。
本实施例中，优选地，所述操作台上还设置有指示灯14，用于控制所述消化池7 的加热情况。
实施例2
本实施例提供一种皮肤细胞悬液的制备方法，包括如下步骤：
(1)将无菌水10ml注入盛有胰蛋白酶2.5mg的瓶中，溶解混匀后注入所述消化池7的所述第一过滤器中，按下所述加热按钮11，待温度达到37℃显示灯变绿后，加入皮肤组织小块(皮肤组织，厚度0.1-0.2mm，用生理盐水洗涤并剪成2-5mm大小)，按下所述计时按钮13计时，待皮肤组织蓬松呈絮状(约25分钟)后，得到消化的皮肤组织；
(2)取出所述消化池7中的所述第一过滤器，将所述第一过滤器内的液体排出，然后在所述洗涤池8中反复抽取酶中止洗涤液，中止酶消化反应，并使组织细胞分离，抽吸所述第一过滤器，排出液体，得到分离的皮肤细胞；
(3)将内容物(分离的皮肤组织细胞)倒入所述悬液制备池9的所述第二过滤器中，加入少许细胞悬液制备液(PBS缓冲液)并反复抽吸、挤压，将分离的细胞过滤，所述第二过滤器内的残留皮肤组织可以用所述研磨棒6反复碾压并冲洗，直至达到需要制备的悬液体积为止。
上述步骤(1)中，将小块皮肤组织放入第一过滤器后消化，消化过程中反复抽吸几次可以使消化酶与待消化的皮肤块充分混合，有利于细胞的分离。
上述步骤(2)中，在洗涤过程中，通过反复抽吸使残留的消化酶中止和/或洗涤更充分。
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (9)

1.一种皮肤细胞悬液的制备器，其特征在于，包括如下部件：
制备器壳体以及设置在所述制备器壳体上的操作台，所述操作台上设置有消化池(7)、洗涤池(8)和悬液制备池(9)，所述消化池(7)用于消化皮肤组织，所述洗涤池(8)用于洗涤消化后的皮肤组织，所述悬液制备池(9)用于制备皮肤细胞悬液；
电路控制组件和加热组件，设置于所述制备器壳体内，所述电路控制组件用于控制所述消化池(7)的加热温度和时间，所述加热组件用于对所述消化池(7)进行加热；
第一过滤器和第二过滤器，分别可拆卸的设置于所述消化池(7)和所述悬液制备池(9)内，二者均包括外套筒(5)和内芯筒(3)，所述外套筒(5)环套在所述内芯筒(3)的外部，所述外套筒(5)的第一端设置有滤网(1)，其第二端设有第一夹持部(2)；所述内芯筒(3)的第一端设置有活塞，其第二端设置有第二夹持部(4)，所述活塞可在所述外套筒(5)的内壁上滑动。
2.根据权利要求1所述的制备器，其特征在于，位于所述第一过滤器中的所述滤网(1)的筛孔直径小于10微米，位于所述第二过滤器中的所述滤网(1)的筛孔直径为50-100微米。
3.根据权利要求1所述的制备器，其特征在于，还包括研磨棒(6)，所述研磨棒(6)用于研磨消化洗涤后的皮肤组织。
4.根据权利要求2所述的制备器，其特征在于，所述操作台上还设置有储物仓(10)，用于容纳操作过程中所需的物品。
5.一种皮肤细胞悬液的制备方法，其特征在于，利用权利要求1-4中任意一项所述的制备器，具体步骤如下：
(1)将皮肤组织置于所述第一过滤器中，将所述第一过滤器置于所述消化池(7)中加热消化，得到消化的皮肤组织；
(2)将消化的皮肤组织置于所述洗涤池(8)中洗涤，得到分离的皮肤组织细胞；
(3)将分离的皮肤组织细胞置于所述悬液制备池(9)，加入缓冲液，抽吸、挤压、过滤，得到皮肤细胞悬液。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)包括如下具体步骤：将无菌水与消化酶混匀后注入所述第一过滤器中，然后将所述第一过滤器置于所述消化池(7)中加热，待温度达到37℃时，最后在所述第一过滤器中加入皮肤组织，加热一段时间后得到消化的皮肤组织。
7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)包括如下具体步骤：将所述步骤(1)中容纳有消化的皮肤组织的所述第一过滤器从所述消化池(7)中取出，置于所述洗涤池(8)中，反复抽吸，所述洗涤池(8)中容纳有酶中止洗涤液，所述酶中止洗涤液用于中止消化反应，并使皮肤组织细胞分离，最终得到分离的皮肤组织细胞。
8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)包括如下具体步骤：将所述步骤(2)中分离的皮肤组织细胞倒入所述悬液制备池(9)中的所述第二过滤器中，加入缓冲液，反复抽吸、挤压，过滤得到皮肤细胞悬液。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)还包括如下具体步骤：利用研磨棒(6)碾压所述第二过滤器内残留的皮肤组织，直至达到所要制备的悬液体积为止。
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