CN111153903A

CN111153903A - 二氮杂二环辛烷衍生物的结晶及其制备方法和应用以及医药组合物

Info

Publication number: CN111153903A
Application number: CN202010091853.6A
Authority: CN
Inventors: 阿部隆夫; 古内刚; 坂卷仪晃; 三桥那佳子; 斋藤由美子
Original assignee: Meiji Seika Pharma Co Ltd
Current assignee: Meiji Seika Pharma Co Ltd
Priority date: 2013-10-08
Filing date: 2014-10-08
Publication date: 2020-05-15
Also published as: EP3613740A1; TW201605855A; RU2016116501A3; US12221443B2; AR132028A2; KR102388529B1; US20250059191A1; RU2019115119A3; IL289275A; CA3110803C; HK1219479A1; US10604522B2; US10131665B2; US20190031659A1; US20200181143A1; RU2695219C2; AR097971A1; NZ743374A; JP2021193107A; HK1250030A1

Abstract

本发明涉及有机合成领域，具体提供了下述式(VII)、特别是式(VII‑1)表示的二氮杂二环辛烷衍生物的结晶及其制备方法和应用以及医药组合物。本发明所述的制备方法能够再现性良好地以高收率制备上述式(VII)表示的化合物的结晶、特别是式(VII‑1)表示的化合物及其稳定性良好的结晶。

Description

二氮杂二环辛烷衍生物的结晶及其制备方法和应用以及医药组合物

本申请是申请号为201480055342.1、申请日为2014年10月08日、名称为“二氮杂二环辛烷衍生物的结晶及其制备方法”的中国发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明属于有机合成领域，涉及式(VII)、特别是式(VII-1)表示的二氮杂二环辛烷衍生物的结晶及其制备方法和应用以及一种医药组合物。

背景技术

专利4515704(专利文献1)中对新的杂环化合物、制备方法及它们的医药用途进行了例示，并且作为代表化合物公开了反式-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺钠(NXL104)。对于作为中间体特别限定的哌啶衍生物，在特开2010-138206(专利文献2)和特表2010-539147(专利文献3)中例示了制备方法，进一步，在WO2011/042560(专利文献4)中公开了NXL104及其结晶体的制备方法。

此外，在专利5038509(专利文献5)中，例示了(2S,5R)-7-氧代-N-(哌啶-4-基)-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(MK7655)，在特开2011-207900(专利文献6)和WO2010/126820(专利文献7)中公开了特别限定的哌啶衍生物和MK7655的制备方法。

本发明的发明人在特愿2012-122603(专利文献8)中公开了下述式(VII)表示的新的二氮杂二环辛烷衍生物。

[化学式1]

(上述式中，R³与后述相同)。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本专利第4515704号说明书

专利文献2：日本专利公开2010-138206号说明书

专利文献3：日本专利公表2010-539147号说明书

专利文献4：国际公开第WO2011/042560号

专利文献5：日本专利第5038509号说明书

专利文献6：日本专利公开2011-207900号说明书

专利文献7：国际公开第WO2010/126820号

专利文献8：日本专利申请2012-122603号说明书

发明内容

[化学式2]

合成线路1

(上述式中，R³与后述相同，OBn表示苄氧基，Boc为叔丁氧基羰基。)

伴随着上述式(VII)、特别是式(VII-1)表示的(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺的工业化研究的进行，指出了以下各种制备上的课题：1、非晶质形态的医药原体(API)、特别是冻干品由于在制备上难以操作，且稳定性也难以确保，因此需要以稳定的结晶状态供给；2、需要分离含有将侧链R³ONHC(＝O)-基中的保护基脱保护后所得到的酸的粗医药原体和确立向其稳定pH区域调整的步骤；3、需要在式(V)表示的化合物的硫酸化中控制侧链R³ONHC(＝O)-基也被硫酸化的过度反应，提高收率，避免副产物混入；4、上述式(V)表示的化合物在溶液中的稳定性、特别是反应溶剂浓缩中的稳定性低，且分离损耗也不能被忽视；5、上述式(IV)表示的化合物的收率也不能满意等。特别是从含有酸的粗的式(VII-1-CR)表示的化合物的分离、pH调整到式(VII-1)表示的化合物的结晶化的工序是化合物的稳定性、高溶解度和分解物或混入物的影响的复杂的因素，非常困难。

发明人对上述式(VII)表示的化合物的制备方法进行了详细地研究，确立了用于供给不影响式(VII)表示的化合物的结晶化的高纯度的式(VII)表示的化合物的溶液的一系列的制备方法和稳定性良好的结晶的制备方法。

即，(1)本发明涉及下述式(VII)表示的化合物的制备方法，其特征在于，使下述式(III)表示的化合物与化合物：R³ONH₂反应，形成下述式(IV)表示的化合物，在氢气氛围下与钯碳催化剂进行处理，同时或连续地在含水溶剂中在催化剂量的碱存在下通过三氧化硫-三甲基胺络合物进行硫酸化反应，用硫酸氢四丁基铵处理，得到下述式(VI)表示的化合物后，在侧链R³ONHC(＝O)-具有保护基时，用酸将该保护基除去，接着，在反应液中加入不良溶剂，使粗生成物沉淀化，形成下述式(VII-CR)表示的粗化合物后，交替加入式(VII-CR)表示的粗化合物和冰冷的缓冲液形成pH4-5.5的溶液，根据需要用合成吸附剂脱盐后浓缩，调温后根据需要进行接种，加入不良溶剂，进行结晶化。

[化学式3]

[化学式4]

[化学式5]

[化学式6]

[化学式7]

(上述各式中，OBn表示苄氧基，R¹表示2,5-二氧代吡咯烷-1-基、1,3-二氧代-3a,4,7,7a-四氢-1H-异吲哚-2(3H)-基、1,3-二氧代六氢-1H-异吲哚-2(3H)-基或3,5-二氧代-4-氮杂三环[5.2.1.0^2,6]癸-8-烯-4-基，R³表示C_1-6烷基或杂环基。R³可被0至5个R⁴修饰，R⁴也可以连续地取代。在此，R⁴为C_1-6烷基、杂环基、R⁵(R⁶)N-或保护基。此外，R⁵和R⁶各自独立地表示氢或C_1-6烷基，或一起形成杂环基团。进而，R³、R⁵及R⁶可在任意的位置闭环。)

此外，(2)根据本发明的另一方式，涉及下述式(IV)表示的化合物的制备方法，其特征在于，使下述式(III)表示的化合物与化合物：R³ONH₂反应。

[化学式8]

[化学式9]

(上述各式中，R¹、R³及OBn与上述相同)

此外，(3)根据本发明的另一方式，涉及下述式(VI)表示的化合物的制备方法，其特征在于，将下述式(IV)表示的化合物在氢气氛围下与钯碳催化剂进行处理，同时或连续地在含水溶剂中在催化剂量的碱存在下通过三氧化硫-三甲基胺络合物进行硫酸化反应，用硫酸氢四丁基铵处理。

[化学式10]

[化学式11]

(上述各式中，R³及OBn与上述相同)

此外，(4)根据本发明的另一方式，涉及下述式(VII-CR)表示的粗化合物的制备方法，其特征在于，在下述式(VI)表示的化合物在侧链R³ONHC(＝O)-具有保护基时，用酸将该保护基除去，接着，在反应液中加入酯系不良溶剂，使粗生成物沉淀化。

[化学式12]

[化学式13]

(上述各式中，R³与上述相同)

此外，(5)根据本发明的另一方式，涉及下述式(VII)表示的化合物的制备方法，其特征在于，交替加入下述式(VII-CR)表示的粗化合物和冰冷的缓冲液形成pH4-5.5的溶液，根据需要用合成吸附剂脱盐后浓缩，调温后根据需要进行接种，加入醇系不良溶剂，进行结晶化。

[化学式14]

[化学式15]

(上述各式中，R³与上述相同)

此外，(6)根据本发明的另一方式，涉及上述式(IV)、(VI)、(VII-CR)、(VII)中R³为选自

2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基、

2-氨基乙基、

2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)乙基、

2-(甲基氨基)乙基、

2-((叔丁氧基羰基)(异丙基)氨基)乙基、

2-(异丙基氨基)乙基、

2-(二甲基氨基)乙基、

(2S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙基、

(2S)-2-(氨基)丙基、

(2R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙基、

(2R)-2-(氨基)丙基、

3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙基、

3-(氨基)丙基、

(2S)-叔丁氧基羰基氮杂环丁烷-2-基甲基、

(2S)-氮杂环丁烷-2-基甲基、

(2R)-叔丁氧基羰基吡咯烷-2-基甲基

(2R)-吡咯烷-2-基甲基

(3R)-叔丁氧基羰基哌啶-3-基甲基、

(3R)-哌啶-3-基甲基、

(3S)-叔丁氧基羰基吡咯烷-3-基、

(3S)-吡咯烷-3-基、

1-(叔丁氧基羰基)氮杂环丁烷-3-基、

氮杂环丁烷-3-基的化合物的制备方法，其特征在于，该制备方法为(1)-(5)中任意一项所述的方法。

此外，(7)根据本发明的另一方式，本发明涉及下述式(VII-1)表示的化合物的制备方法，其特征在于，使下述式(III)表示的化合物在碱存在下与2-(氨基氧)乙基氨基甲酸叔丁酯反应，形成下述式(IV-1)表示的化合物，在氢气氛围下与钯碳催化剂进行处理，同时或连续地在含水溶剂中在催化剂量的碱存在下通过三氧化硫-三甲基胺络合物进行硫酸化反应，与硫酸氢四丁基铵进行处理，形成下述式(VI-1)表示的化合物后，用三氟乙酸除去叔丁氧基羰基(Boc)，接着，在反应液中滴加乙酸乙酯，由此使粗生成物沉淀化，形成下述式(VII-1-CR)表示的粗化合物后，交替加入式(VII-1-CR)表示的粗化合物和冰冷的磷酸缓冲液形成pH4-5.5的溶液，根据需要用合成吸附剂脱盐后浓缩，调温后根据需要进行接种，加入异丙醇进行结晶化。

[化学式16]

[化学式17]

[化学式18]

[化学式19]

[化学式20]

(上述各式中，R¹及OBn与上述相同)

此外，(8)根据本发明的另一方式，涉及下述式(IV-1)表示的化合物的制备方法，其特征在于，使下述式(III)表示的化合物在碱存在下与2-(氨基氧)乙基氨基甲酸叔丁酯反应。

[化学式21]

[化学式22]

(上述各式中，R¹及OBn与上述相同)

此外，(9)根据本发明的另一方式，涉及下述式(VI-1)表示的化合物的制备方法，其特征在于，将下述式(IV-1)表示的化合物在氢气氛围下与钯碳催化剂进行处理，同时或连续地在含水溶剂中在催化剂量的碱存在下通过三氧化硫-三甲基胺络合物进行硫酸化反应，与硫酸氢四丁基铵进行处理。

[化学式23]

[化学式24]

(上述各式中，OBn与上述相同)

此外，(10)根据本发明的另一方式，涉及下述式(VII-1-CR)表示的粗化合物的制备方法，其特征在于，将下述式(VI-1)表示的化合物用三氟乙酸除去叔丁氧基羰基(Boc)，接着，在反应液中滴加乙酸乙酯，由此使粗生成物沉淀化。

[化学式25]

[化学式26]

此外，(11)根据本发明的另一方式，涉及下述式(VII-1)表示的化合物的制备方法，其特征在于，交替加入下述式(VII-1-CR)表示的粗化合物和冰冷的磷酸缓冲液形成pH4-5.5的溶液，根据需要用合成吸附剂脱盐后浓缩，调温后根据需要进行接种，加入异丙醇进行结晶化。

[化学式27]

[化学式28]

此外，(12)根据本发明的另一方式，涉及式(VII-1)表示的化合物的I型结晶，其特征在于，该I型结晶在粉末X射线衍射图中，在晶面间距(d)7.34、5.66、5.53、5.30、5.02、4.66、4.37、4.28、4.06、3.68、3.62、3.47、3.36、3.30、3.16、3.11、3.03、2.99及

具有特征峰。

[化学式29]

此外，(13)根据本发明的另一方式，涉及(12)所述的I型结晶的制备方法，其特征在于，该制备方法为(1)-(11)中任意一项所述的方法。

此外，(14)根据本发明的另一方式，涉及(12)所述的I型结晶的制备方法，其特征在于，将上述式(VII-1)表示的化合物的溶液调温至20-25℃，接种I型结晶，搅拌后进一步加入异丙醇。

此外，(15)根据本发明的另一方式，涉及(12)所述的I型结晶的应用，其特征在于，用于制备含有根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

此外，(16)根据本发明的另一方式，涉及(12)所述的I型结晶的应用，其特征在于，用于制备含有选自由氨苄西林、阿莫西林、哌拉西林、替卡西林、氟氧头孢、头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、头孢洛林、头孢洛扎、亚胺培南、美罗培南、比阿培南、多尼培南、厄他培南和氨曲南组成的组中的β-内酰胺系抗生素、和根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

此外，(17)根据本发明的另一方式，涉及式(VII-1)表示的化合物的II型结晶，其特征在于，该II型结晶在粉末X射线衍射图中，在晶面间距(d)9.46、5.62、5.23、5.10、5.00、4.91、4.67、4.45、4.29、3.96、3.78、3.71、3.52、3.24、3.18、3.10、3.02、2.88、2.81、2.77、2.67、2.50及

具有特征峰。

[化学式30]

此外，(18)根据本发明的另一方式，涉及(17)所述的II型结晶的制备方法，其特征在于，该制备方法为(1)-(11)中任意一项所述的方法。

此外，(19)根据本发明的另一方式，涉及(17)所述的II型结晶的制备方法，其特征在于，将上述式(VII-1)表示的化合物的溶液调温至10-15℃，加入异丙醇进行搅拌。

此外，(20)根据本发明的另一方式，涉及(17)所述的II型结晶的应用，其特征在于，用于制备含有根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

此外，(21)根据本发明的另一方式，涉及(17)所述的II型结晶的应用，其特征在于，用于制备含有选自由氨苄西林、阿莫西林、哌拉西林、替卡西林、氟氧头孢、头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、头孢洛林、头孢洛扎、亚胺培南、美罗培南、比阿培南、多尼培南、厄他培南和氨曲南组成的组中的β-内酰胺系抗生素、和根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

此外，(22)根据本发明的另一方式，涉及式(VII-1)表示的化合物的III型结晶，其特征在于，该III型结晶在粉末X射线衍射图中，在晶面间距(d)8.32、6.10、5.98、5.51、5.16、5.07、4.85、4.70、4.61、4.35、4.20、4.06、4.00、3.95、3.77、3.73、3.65、3.42、3.39、3.36、3.26、3.23、3.13、3.09、2.99、2.81及

具有特征峰。

[化学式31]

此外，(23)根据本发明的另一方式，涉及(22)所述的III型结晶的制备方法，其特征在于，该制备方法为(1)-(11)中任意一项所述的方法。

此外，(24)根据本发明的另一方式，涉及(22)所述的III型结晶的制备方法，其特征在于，将上述式(VII-1)表示的化合物的溶液调温至20-25℃，接种III型结晶，加入异丙醇进行搅拌。

此外，(25)根据本发明的另一方式，涉及(22)所述的III型结晶的应用，其特征在于，用于制备含有根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

此外，(26)根据本发明的另一方式，涉及(22)所述的III型结晶的应用，其特征在于，用于制备含有选自由氨苄西林、阿莫西林、哌拉西林、替卡西林、氟氧头孢、头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、头孢洛林、头孢洛扎、亚胺培南、美罗培南、比阿培南、多尼培南、厄他培南和氨曲南组成的组中的β-内酰胺系抗生素、和根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

此外，(27)根据本发明的另一方式，涉及式(VII-1)表示的化合物的IV型结晶，其特征在于，该IV型结晶在粉末X射线衍射图中，在晶面间距(d)7.88、6.41、5.20、4.67、4.50、4.02、3.81、3.75、3.70、3.62、3.38、3.23、3.20及

具有特征峰。

[化学式32]

此外，(28)根据本发明的另一方式，涉及(27)所述的IV型结晶的制备方法，其特征在于，该制备方法为(1)-(11)中任意一项所述的方法。

此外，(29)根据本发明的另一方式，涉及(27)所述的IV型结晶的制备方法，其特征在于，将上述式(VII-1)表示的化合物的溶液调温至20-25℃，加入甲醇进行搅拌。

此外，(30)根据本发明的另一方式，涉及(27)所述的IV型结晶的制备方法，其特征在于，将(12)、(17)或(22)所述的I、II或III型结晶在甲醇、乙醇或异丙醇中搅拌。

此外，(31)根据本发明的另一方式，涉及(27)所述的IV型结晶的应用，其特征在于，用于制备含有根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

此外，(32)根据本发明的另一方式，涉及(27)所述的IV型结晶的应用，其特征在于，用于制备含有选自由氨苄西林、阿莫西林、哌拉西林、替卡西林、氟氧头孢、头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、头孢洛林、头孢洛扎、亚胺培南、美罗培南、比阿培南、多尼培南、厄他培南和氨曲南组成的组中的β-内酰胺系抗生素、和根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

此外，(33)根据本发明的另一方式，涉及(12)、(17)、(22)或(27)所述的I、II、III或IV型结晶的混合物的应用，其特征在于，用于制备含有根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

此外，(34)根据本发明的另一方式，涉及(12)、(17)、(22)或(27)所述的I、II、III或IV型结晶的混合物的应用，其特征在于，用于制备含有选自由氨苄西林、阿莫西林、哌拉西林、替卡西林、氟氧头孢、头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、头孢洛林、头孢洛扎、亚胺培南、美罗培南、比阿培南、多尼培南、厄他培南和氨曲南组成的组中的β-内酰胺系抗生素、和根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

根据本发明的一系列的制备方法，能够再现性良好地以高收率制备上述式(VII)表示的化合物的结晶、特别是式(VII-1)表示的化合物及其稳定性良好的结晶。

[化学式33]

合成线路2

作为直接阻碍式(VII)表示的化合物的结晶化的因素，为在一系列的工序中副产的分解物被带入下一工序和调整pH时式(VII)表示的化合物的分解，通过本次确立式(VI)表示的化合物和式(VII-CR)表示的化合物的制备方法，进一步含有酸的式(VII-CR)表示的化合物的分离、中和、脱盐的一系列步骤，可完全抑制式(VII)表示的化合物的分解，以高收率得到能够结晶化的高纯度的上述式(VII)表示的化合物的溶液。

与由上述式(1)表示的化合物合成式(IV)表示的化合物相比，能够以高纯度且高收率得到上述式(III)表示的化合物、特别是R¹为2,5-二氧代吡咯烷-1-基、1,3-二氧代-3a,4,7,7a-四氢-1H-异吲哚-2(3H)-基、1,3-二氧代六氢-1H-异吲哚-2(3H)-基或3,5-二氧代-4-氮杂三环[5.2.1.0^2,6]癸-8-烯-4-基的化合物。

溶液中不稳定的上述式(V)表示的化合物伴随着规模的提高，存在收率降低的趋势，通过一步或连续反应由式(IV)表示的化合物合成式(VI)表示的化合物，避免了式(V)表示的化合物在浓缩中的分解物的生成、因分离损耗导致的收率降低、进一步硫酸化工序中过反应物的混入。作为式(IV)表示的化合物的脱苄基化反应的溶剂，优选为醇系溶剂，但在下一工序的硫酸化中通常使用的三氧化硫-吡啶络合物在醇系溶剂中会失活而无法使用。此次发现的三氧化硫-三甲基胺络合物在醇系溶剂中的稳定性优良，能够一步或连续地实施硫酸化反应。

在式(VII-CR)表示的化合物的制备工序中，通过利用以在反应液中吸湿性低的酯系溶剂或醚系溶剂为代表的不良溶剂的沉淀化、特别是利用具有通用性的乙酸乙酯的沉淀化，能够以吸湿性低、分解物少、操作容易的固体再现性良好地制备式(VII-CR)表示的化合物。通过将湿状固体悬浮洗涤，能够使影响中和工序的酸成分的混入比率为10-30摩尔％的下一工序所容许的范围，也能够将HPLC面积比控制为99％以上的高纯度。

本发明中所得到的式(VII-1)表示的化合物的结晶形态，在含水溶剂中的悬浮条件下的长时间搅拌或固体状态的40℃稳定性试验中，没有观察到结晶形态的转变。进而，将式(VII-1)表示的化合物的III型结晶进行XRD-DSC实验，在60％RH下加热至160℃，接着，放冷至63℃，在约145℃左右转变为无水结晶后直接推移，在放冷后约90℃左右返回为III型结晶。由此可知，式(VII-1)表示的化合物的结晶形态、特别是III型结晶在通常条件下为稳定形态。

将式(VII-1)表示的化合物的非晶体和I、II、III及IV型结晶的水分、相关物质总量及含量的随时间变化在40℃(75％RH)条件下同时比较，如下述表1所示，非晶体的相关物质总量相对于实验开始时的0.5％，1个月时显著增加为6.6％，3个月时显著增加为12.3％，含量相对于开始时的99.4％，1个月时劣化为93.3％，3个月时劣化为87.5％。另一方面，I、II、III及IV型结晶的相关物质总量相对于实验开始时的0.0-0.1％，1个月时为0.0％，3个月时为0.0-0.5％，没有变化，含量相对于实验开始时的99.8-99.9％，1个月时为99.8-100.0％，3个月时为99.3-99.9％，此外，I、II、III及IV型结晶的水分相对于实验开始时的5.3-5.7％、0.1％，3个月、1个月时为5.5-5.9％、0.1％，没有变化，是稳定的。

[表1]

保存条件：40℃/75％RH，密闭容器

进一步，持续性地观察III型结晶在原料药包装容器中的接触稳定性，如下述表2、表3所示，相对于实验开始时含量、相关物质总量、水分为99.9％、0.09％、5.20％，40℃(75％RH，3个月)为99.9％、0.06％、5.29％，60℃(1个月)为99.9％、0.04％、5.08％，没有变化，是稳定的。

[表2]

内袋：单层低密度聚乙烯袋，尼龙制捆扎带

外袋：单层铝箔袋，热封

保存条件：40℃/75％RH

检测项目	开始时	1个月	2个月	3个月
					相关物质总量(％)	0.09	0.07	0.04	0.06
水分(％)	5.20	5.51	5.27	5.29
					含量(％)	99.9	99.9	99.9	99.9

[表3]

内袋：单层低密度聚乙烯袋，尼龙制捆扎带

外袋：单层铝箔袋，热封

保存条件：60℃

检测项目	开始时	2周	4周
				相关物质总量(％)	0.09	0.02	0.04
水分(％)	5.20	5.20	5.08
				含量(％)	99.9	99.9	99.9

附图说明

[图1]为I型结晶的粉末X射线结晶衍射。

[图2]为II型结晶的粉末X射线结晶衍射。

[图3]为III型结晶的粉末X射线结晶衍射。

[图4]为IV型结晶的粉末X射线结晶衍射。

具体实施方式

如上所述，本发明提供上述式(VII)表示的化合物、特别是式(VII-1)表示的化合物的稳定性良好的结晶及其制备方法。

[化学式34]

(上述式(VII)中，R³表示C_1-6烷基或杂环基。R³可被0至5个R⁴修饰，R⁴也可以连续地取代。在此，R⁴为C_1-6烷基、杂环基、R⁵(R⁶)N-或保护基。此外，R⁵和R⁶各自独立地表示氢或C_1-6烷基，或一起形成杂环基。进而，R³、R⁵及R⁶可在任意的位置闭环。)

以下，对结晶形态的式(VII)表示的化合物的制备方法进行详细地说明，但本发明并不限于所提及的具体例子的范围。

“C_1-6烷基”表示碳原子数为1-6的烷基，也可以为链状、支链状、环状。

“杂环基”表示一共具有1-3个选自氮原子、氧原子、硫原子的杂原子作为环成员的3-7元单环性杂饱和环或非芳香环。

“R⁵(R⁶)N-”表示被R⁵和R⁶取代的氨基，即表示氨基、单C_1-6烷基氨基或二C_1-6烷基氨基；或者表示R⁵和R⁶与氮原子一起形成的杂环基。

“修饰”是指将R³中的氢用R⁴取代、键合。

“R³可被0至5个R⁴修饰，R⁴也可以连续地取代。”表示可以将修饰R³的R⁴用R⁴进一步修饰，可举出R³-(R⁴)_0-5、R³-(R⁴-R⁴ _0-4)、R³-(R⁴-R⁴ _0-3)₂、R³-(R⁴-R⁴ _0-2)₃、R³-(R⁴-R⁴ _0-1)₄等。

作为“保护基”的具体例子可举出Protective Groups in Organic Synthesis(T.W.Greene et al.,Wiley,New York(1999).记载的作为氨基和羟基的保护基的氨基甲酸酯型保护基和三烷基硅基，优选举出三异丙基硅基(TIPS)、叔丁基二甲基硅基(TBDMS或TBS)、叔丁氧基羰基(Boc)、三甲基硅基乙氧基羰基(Teoc)、4-甲氧基苄氧基羰基(PMZ、Moz)或二苯基甲氧基羰基。

作为“C_1-6烷基”的具体例子，可举出甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、仲丁基、异丁基、戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、新戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、异戊基或己基等的链状或支链状C_1-6烷基；环丙基、环丁基、环戊基或环己基等C_3-6环烷基；环丙基甲基、环丁基甲基或环戊基甲基等的用C_3-5环烷基取代的甲基，优选为甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、环丙基、环丁基、环丙基甲基或环丁基甲基。

作为“杂环基”的具体例子，可举出氮丙啶、环氧乙烷、环硫乙烷、氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、硫杂环丁烷、吡咯烷、四氢呋喃、四氢噻吩、咪唑啉、噁唑烷、噻唑烷、吡唑烷、哌啶、四氢-2H-吡喃、四氢-2H-硫代吡喃、六氢哒嗪、哌嗪、吗啉、硫代吗啉、1,2-噁唑烷、1,3-噁唑烷、1,2-氧氮杂环己烷、1,3-氧氮杂环己烷、1,4-二噁烷、1,2-噻唑烷、1,3-噻唑烷、1,2-噻嗪、1,3-噻嗪、氮杂环庚烷、氧杂环庚烷、硫杂环庚烷、1,4-二氮杂环庚烷、1,4-氧氮杂环庚烷、1,4-硫氮杂环庚烷、1,2,5-三氮杂环庚烷、1,4,5-氧二氮杂环庚烷、1,2,5-氧二氮杂环庚烷、1,4,5-硫二氮杂环庚烷、1,5,2-二氧氮杂环庚烷、1,5,2-氧杂氮杂环庚烷、3,4-二氢-2H-吡咯、4,5-二氢-1H-吡唑、4,5-二氢-1H-咪唑、4,5-二氢-1,2-噁唑、4,5-二氢-1,3-噁唑、4,5-二氢-1,3-噻唑、2,3,4,5-四氢吡啶、1,2,3,6-四氢吡嗪、5,6-二氢-4H-1,2-噁嗪或3,6-二氢-2-H-1,4-噁嗪等，优选为氮杂环丁烷、吡咯烷、四氢呋喃、哌啶、四氢-2H-吡喃、咪唑啉、1,3-噁唑烷、1,3-噻唑烷、六氢哒嗪、哌嗪、吗啉、1,2-氧氮杂环己烷、氮杂环庚烷、1,4-二氮杂庚烷或1,2-氧氮杂环庚烷。在此，上述具体例子当然也包括与保护基例如叔丁氧基羰基(Boc)键合的基团。

作为“R⁵(R⁶)N-”的具体例子，可举出氨基、甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、异丙基氨基、丁基氨基、叔丁基氨基、仲丁基氨基、异丁基氨基、戊基氨基、1,1-二甲基丙基氨基、1,2-二甲基丙基氨基、新戊基氨基、1-甲基丁基氨基、2-甲基丁基氨基、异戊基氨基、己基氨基、N,N-二甲基氨基、N,N-二乙基氨基、N,N-二丙基氨基、N,N-二(异丙基)氨基、N,N-二丁基氨基、N,N-二(叔丁基)氨基、N,N-二(仲丁基)氨基、N,N-二(异丁基)氨基、N,N-二戊基氨基、N,N-二(1,1-二甲基丙基)氨基、N,N-二(1,2-二甲基丙基)氨基、N,N-二(新戊基)氨基、N,N-二(1-甲基丁基)氨基、N,N-二(2-甲基丁基)氨基、N,N-二(异戊基)氨基或N,N-二(己基)氨基等，优选为氨基、甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、异丙基氨基、N,N-二甲基氨基或N,N-二乙基氨基。在此，上述具体例子当然也包括与保护基例如叔丁氧基羰基(Boc)键合的基团。

R⁵(R⁶)N-的R⁵和R⁶键合形成杂环基时的具体例子，可举出氮杂环丁烷-1-基、吡咯烷-1-基、哌啶-1-基或氮杂环庚烷-1-基。在此，上述具体例子当然也包括与作为保护基例如叔丁氧基羰基(Boc)键合的基团。

“R³、R⁵及R⁶可在任意的位置闭环”是指：在R³表示C_1-6烷基、且修饰R³的R⁴、即R⁵(R⁶)N-所含的R⁵或R⁶表示C_1-6烷基时，R³和R⁵或R⁶可一起形成3-7元饱和环。

接着，进一步列举代表例对形成R³O-的C_1-6烷基和杂环基用R⁴规定的取代基修饰的具体例子进行更详细地说明，当然并不限于例示的具体的例子的范围。

“C_1-6烷基”用R⁵(R⁶)N-的代表例的氨基(H₂N-)修饰的具体的例子，可举出2-氨基乙基、2-氨基丙基、3-氨基丙基、2-氨基-1-甲基乙基、2-氨基丁基、3-氨基丁基、4-氨基丁基、2-氨基-1,1-二甲基乙基、2-氨基-1-甲基丙基或3-氨基-2-甲基丙基等。在此，上述具体例子当然也包括与保护基、例如R⁵OCO-所包括的叔丁氧基羰基(Boc)键合的基团。

杂环基用C_1-6烷基的代表例的甲基修饰时的具体的例子，可举出1-甲基氮杂环丁烷、3-甲基氮杂环丁烷、1-甲基吡咯烷、3-甲基吡咯烷、1-甲基咪唑啉、3-甲基噁唑烷、1-甲基吡唑烷、1-甲基哌啶、4-甲基哌啶、2-甲基四氢-2H-吡喃、4-甲基四氢-2H-吡喃、1-甲基哌嗪、1,4-二甲基哌嗪、4-甲基吗啉、4-甲基-硫代吗啉、1-甲基氮杂环庚烷、1-甲基-1,4-二氮杂环庚烷或1,4-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷等。在此，上述具体例子当然也包括与保护基例如叔丁氧基羰基(Boc)键合的基团。

杂环基用R⁵(R⁶)N-的代表例的氨基(H₂N-)修饰的具体的例子，可举出3-氨基氮杂环丁烷、3-氨基吡咯烷、3-氨基-四氢呋喃、3-氨基-四氢噻吩、4-氨基吡唑烷、4-氨基哌啶、4-氨基-四氢-2H-吡喃、4-氨基-四氢-2H-硫代吡喃、4-氨基-六氢哒嗪、4-氨基-1,2-噁唑烷、4-氨基-1,2-氧氮杂环己烷、4-氨基氮杂环庚烷、4-氨基氧杂环庚烷或6-氨基-1,4-二氮杂环庚烷等。在此，上述具体例子当然也包括与保护基例如叔丁氧基羰基(Boc)键合的基团。

C_1-6烷基的代表例的甲基或乙基用杂环基修饰的具体的例子，可举出氮杂环丁烷-2-基甲基、氮杂环丁烷-3-基甲基、吡咯烷-2-基甲基、吡咯烷-3-基甲基、四氢呋喃-3-基甲基、四氢噻吩-3-基甲基、吡唑烷-4-基甲基、1,2-噁唑烷-3-基甲基、哌啶-2-基甲基、哌啶-3-基甲基、哌啶-4-基甲基、四氢-2H-吡喃-4-基甲基、四氢-2H-硫代吡喃-4-基甲基、六氢哒嗪-4-基甲基、哌嗪-2-基甲基、1,2-氧氮杂环己烷-3-基甲基、吗啉-2-基甲基、吗啉-3-基甲基、硫代吗啉-2-基甲基、硫代吗啉-3-基甲基、氮杂环庚烷-2-基甲基、氮杂环庚烷-4-基甲基、氧杂环庚烷-2-基甲基、氧杂环庚烷-4-基甲基、1,4-二氮杂环庚烷-2-基甲基、1,4-二氮杂环庚烷-6-基甲基、2-(氮杂环丁烷-1-基)乙基、2-(吡咯烷-1-基)乙基、2-(吡唑烷-1-基)乙基、2-(哌啶-1-基)乙基、2-(六氢哒嗪-1-基)乙基、2-(哌嗪-1-基)乙基、2-(吗啉-4-基)乙基、2-(硫代吗啉-4-基)乙基、2-(1,2-噁唑烷-2-基)乙基、2-(1,2-氧氮杂环己烷-2-基)乙基、2-(氮杂环庚烷-1-基)乙基或2-(1,4-二氮杂环庚烷-1-基)乙基等。在此，上述具体例子当然也包括与保护基例如叔丁氧基羰基(Boc)键合的基团。

作为根据本发明提供的化学式(IV)、(VI)、(VII-CR)、(VII)表示的化合物的具体的例子，为选自

{2-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}氨基甲酸叔丁酯、

{2-[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}氨基甲酸叔丁酯四丁基铵、

(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺、

{2-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}(甲基)氨基甲酸叔丁酯、

{2-[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}(甲基)氨基甲酸叔丁酯四丁基铵、

(2S,5R)-N-[2-(甲基氨基)乙氧基]-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺、

{2-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}(丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯、

{2-[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}(丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯四丁基铵、

(2S,5R)-7-氧代-N-[2-(丙烷-2-基氨基)乙氧基]-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺、

(2S,5R)-6-苄氧基-N-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺、

(2S,5R)-N-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺四丁基铵、

(2S,5R)-N-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺、

{(2S)-1-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]丙烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯、

{(2S)-1-[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]丙烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯四丁基铵、

(2S,5R)-N-{[(2S)-2-氨基丙基]氧}-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺、

{(2R)-1-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]丙烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯、

{(2R)-1-[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]丙烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯四丁基铵、

(2S,5R)-N-{[(2R)-2-氨基丙基]氧}-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺、

{3-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]丙基}氨基甲酸叔丁酯、

{3-[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]丙基}氨基甲酸叔丁酯四丁基铵、

(2S,5R)-N-(3-氨基丙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺、

(2S)-2-{[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯、

(2S)-2-{[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯四丁基铵、

(2S,5R)-N-[(2S)-氮杂环丁烷-2-基甲氧基]-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺、

(2R)-2-{[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}吡咯烷-1-羧酸叔丁酯、

(2R)-2-{[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}吡咯烷-1-羧酸叔丁酯四丁基铵、

(2S,5R)-7-氧代-N-[(2R)-吡咯烷-2-基甲氧基]-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺、

(3R)-3-{[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}哌啶-1-羧酸叔丁酯、

(3R)-3-{[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}哌啶-1-羧酸叔丁酯四丁基铵、

(2S,5R)-7-氧代-N-[(3R)-哌啶-3-基甲氧基]-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺、

(3S)-3-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯、

(3S)-3-[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯四丁基铵、

(2S,5R)-7-氧代-N-[(3S)-吡咯烷-3-基氧]-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺、

3-{[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯、

3-{[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯四丁基铵、

(2S,5R)-N-(氮杂环丁烷-3-基甲氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺的化合物，可举出下述化合物组。

[化学式35]

(上述式中，P²表示叔丁氧基羰基(Boc)等的保护基或氢、P³表示苄氧基(OBn)、四丁基铵磺氧基或磺氧基。)

最优选为{2-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}氨基甲酸叔丁酯、

(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺，如上述式(IV-1)、(VI-1)、(VII-1-CR)、(VII-1)所示。

根据本发明提供的化合物为β-内酰胺酶抑制剂，显示出抑制β-内酰胺系抗菌剂被该酶分解的作用。因此，根据本发明提供的医药其前提是与β-内酰胺系抗菌剂合并使用。

根据本发明提供的医药，其特征在于，含有选自由式(VII)表示的化合物及其医学上容许的盐以及它们水合物或其溶剂化物所成的组中的物质作为有效成分，可经口给药或非经口给药，优选为非经口给药。本发明的化合物与β-内酰胺系抗生素可以与因不同情况而配制的药剂并用，同时或者使用各自的给药方法，或者也可以预先将两种药剂混合的通常使用1或2种以上的制剂用添加物(载体)，来制备医药组合物进行给药。

作为经口给药的医药组合物的具体例子，可举出片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、水性和非水性的经口给药用溶液以及悬浮液等。

作为非经口给药的给药途径，可举出鼻腔内、点眼、点耳、经皮、气管内、直肠内、泌尿器内、皮下、肌肉内以及静脉内等。

作为非经口给药的医药组合物的具体例子，可举出作为静脉给药用的使用了容许粉末化形态的医药组合物的溶剂的静脉注射溶液等。容许的溶剂是指例如注射用灭菌水、生理盐水溶液、葡萄糖溶液、林格氏液、加入了对羟苯甲酸甲酯和对羟苯甲酸丙酯的注射用无菌水或加入了苯甲醇的注射用无菌水等。

静脉给药用的粉末形态的医药组合物，可通过使作为活性药物成分的本发明的化合物与β-内酰胺系抗生素经过无菌化工序，分注到密封小瓶来制备。

在此，可与本发明的化合物合并使用的β-内酰胺系抗生素，可举出青霉素、头孢烯、碳青霉烯类等。

作为青霉素类的具体例子，可举出苄青霉素、苯氧乙基青霉素、氯唑西林、双氯西林、氨苄西林、环己西林、阿莫西林、酞氨西林、巴氨西林、仑氨西林、阿帕西林、哌拉西林、磺苄西林、匹美西林、舒他西林、苯氧甲基青霉素、羧苄西林、阿度西林、苯丙青霉素、依匹西林、替卡西林、吡苄西林、阿洛西林、美洛西林以及其它公知的青霉素等。

作为头孢烯类的具体例子，可举出头孢克洛、头孢唑啉、头孢三嗪、头孢羟氨苄、头孢匹林、头孢孟多酯钠、头孢拉定、头孢氨苄、头孢菌素、头孢吡肟、头孢西丁、头孢克肟、头孢齐定(セフジジム)、头孢妥仑、头孢地尼、头孢磺啶、头孢噻利、头孢唑兰、头孢噻肟、头孢他啶、头孢洛林、头孢替安、头孢唑肟、头孢布烯、头孢替唑、头孢特仑(セフテタム)、头孢曲松、头孢尼西、头孢匹胺、头孢匹罗、头孢拉宗、头孢丙烯、头孢哌酮、头孢泊肟、头孢米诺、头孢美唑、头孢甲肟、头孢拉定、头孢沙定、头孢呋辛、头孢洛扎(セフトロザン)(CXA101)、(6R,7R)-3-[5-氨基-4-[3-(2-氨基乙基)脲]-1-甲基-1H-吡唑-2-鎓-2-基甲基]-7-[2-(5-氨基-1,2,4-噻二唑-3-基)-2-[(Z)-1-羧基-1-甲基乙氧基亚氨基]乙酰胺]-3-头孢烯-4-羧酸硫酸氢盐)以及其它公知的头孢烯类等。

作为碳青霉烯类的例子，有亚胺培南、帕尼培南、美罗培南、比阿培南、多尼培南、厄他培南、泰比培南等，可根据需要合并使用西司他丁钠等DHP-1抑制剂。

碳青霉烯类、青霉素类以及头孢烯类以外的β-内酰胺系抗生素，可举出如氨曲南、卡芦莫南、拉氧头孢、氟氧头孢、氯碳头孢、法罗培南、利替培南的β-内酰胺系抗生素等。

特别适合与本发明的化合物合并使用的青霉素类中，有氨苄西林、阿莫西林、羧苄西林、哌拉西林、阿洛西林、美洛西林以及替卡西林等。这样的青霉素类，可以以例如钠盐等的医药上容许的盐的形式使用。作为其它的形态，氨苄西林或阿莫西林可以以注射用悬浮液或注入用悬浮液用的两性离子(氨苄西林·三水合物或阿莫西林·三水合物)的微粒子形式，与式(VII)表示的化合物并使用。特别适合与本发明的化合物合并给药的头孢烯类中，有头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶以及头孢吡肟等，它们可以以例如钠盐等的医药上容许的盐的形式使用。特别适合与本发明的化合物合并给药的碳青霉烯类，为亚胺培南、美罗培南、比阿培南、多尼培南以及厄他培南。

特别适合与本发明的化合物合并给药的碳青霉烯类、青霉素类以及头孢烯类以外的β-内酰胺系抗生素的例子可举出氨曲南。

以下，依次对本发明提供的下述式(VII)表示的化合物及其结晶的制备方法进行说明。

[化学式36]

(上述式(III)、(IV)、(VI)、(VII-CR)、(VII)中，OBn、R¹及R³与上述相同。)

由下述式(III)表示的化合物形成式(IV)表示的化合物的工序可以按照以下的方式来实施。

[化学式37]

(上述式(IV)中，OBn、R¹及R³与上述相同。)

所使用的溶剂，可举出水、甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、二噁烷、二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、2,2,2-三氟乙醇等，优选为乙酸乙酯、二噁烷、二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷，这些溶剂可以单独或混合使用。

反应中所使用的化合物：R³ONH₂，可由在R³的具体例子中例示的化合物选择，相对于式(III)表示的化合物，可以以1-2当量的范围使用，优选为1-1.3当量。

反应中所使用的碱，可举出碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、三乙胺、二异丙基乙胺、二甲基丁胺、三丁胺、N-甲基吗啉、吡啶、N-甲基咪唑、4-二甲氨基吡啶等，优选为三乙胺，无机碱时可作为水溶液使用。相对于式(III)表示的化合物，碱可以以0-2当量的范围使用，优选为0-1.5当量。反应温度为-25-50℃的范围，优选为-10-10℃的范围。反应时间可以以1小时-24小时的范围、优选为1小时-16小时的范围来实施。

式(IV)表示的化合物，可在反应结束后用适当的溶剂将反应液稀释，可通过依次用水、稀释的酸、碱水溶液(例如稀盐酸、硫酸一氢钾、柠檬酸或碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水等)洗涤，将溶剂浓缩来进行分离。作为稀释所使用的有机溶剂，可举出二乙醚、乙酸乙酯、乙酸丁酯、甲苯、二氯甲烷、氯仿，优选为乙酸乙酯。生成物可以通过通常的后处理操作和精制操作分离，也可以仅通过后处理而供给下一工序。

由下述式(IV)表示的化合物形成下述式(VI)表示的化合物的工序可以按照以下的方式来实施。

[化学式38]

反应所使用的溶剂，可举出水、甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈，这些溶剂可以单独或混合使用。在同时实施脱苄基化反应和硫酸化时，优选为含水溶剂，在连续进行时优选在硫酸化时加水。加水量为溶剂的50-200vol％的范围，优选为75-125vol％。

相对于式(IV)表示的化合物，钯碳的量可以以5-100wt％的范围使用，优选为5-30wt％。

用于氢化分解的氢的供给源为氢气，氢气压可以在大气压-1MPa的范围中选择，优选为大气压-0.5MPa。氢的供给量至少使用化学计算量以上的量。

氢化分解的反应温度为10-50℃的范围，优选为20-30℃的范围。反应时间可以以0.5-3小时的范围、优选为0.5-2小时的范围来实施。

作为硫酸化试剂使用的三氧化硫-三甲基胺络合物，相对于式(IV)表示的化合物，可以以1-2当量的范围使用，优选使用1-1.3当量。

硫酸化所使用的碱，可举出三乙胺、三丁胺、二异丙基乙胺、N-甲基吗啉、磷酸氢二钠，优选为三乙胺，相对于式(IV)表示的化合物，可以以0.1-1当量、优选为0.1-0.3当量的范围使用。

硫酸化的反应温度为0-50℃的范围，优选为15-30℃。反应时间可以以12-48小时的范围、优选为12-24小时的范围来实施。

反应结束后，过滤催化剂等的不溶物，将溶剂浓缩后的浓缩液投入到磷酸二氢钠水溶液，接着，在水溶液中加入1-3摩尔当量的硫酸氢四丁基铵，通过用乙酸乙酯等的有机溶剂提取、溶剂浓缩，可得到式(VI)表示的化合物。所得到的式(VI)表示的化合物可以不分离精制，作为浓缩溶液用到下一工序。

由下述式(VI)表示的化合物形成上述式(VII-CR)表示的化合物的工序可以按照以下方式来实施。

[化学式39]

在将R³O-NHC(＝O)-基中根据情况所含的保护基、特别是叔丁氧基羰基(Boc)进行脱保护的工序中所使用的溶剂，可举出乙酸乙酯、四氢呋喃、二噁烷、二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、2,2,2-三氟乙醇等，优选为二氯甲烷或乙酸乙酯，这些溶剂可以单独或混合使用。所使用的溶剂量，相对于式(VI)表示的化合物的实质量，可以以2-10vol/wt的范围使用，优选为2-6vol/wt。

脱保护中所使用的酸，可举出盐酸、硫酸、磷酸、甲酸、三氟乙酸、甲磺酸、三氟甲磺酸、氯甲磺酸、四氟硼酸等，优选为三氟乙酸。相对于式(VI)表示的化合物的实质量，酸可以以2-10vol/wt的范围使用，优选为2-6vol/wt。酸的添加可以在-50-0℃的范围实施，优选为-20-0℃的范围。反应温度为-5-20℃的范围，优选为-5-5℃。反应时间可以以0.5-5小时的范围、优选为0.5-3小时的范围来实施。

脱保护结束后、冷却反应液并加入不良溶剂形成式(VII-CR)表示的化合物的工序按照以下的方式来实施。所使用的不良溶剂可举出醚系不良溶剂或酯系不良溶剂，优选为酯系不良溶剂，例如可举出乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙酸丁酯等，进一步优选为乙酸乙酯。所使用的量，相对于反应液的量，可使用1-3倍量，优选为1.5-2倍量。不良溶剂可以预先冷却至-5-5℃，通过分次或滴加而加入反应液中。不良溶剂添加结束后，进一步进行搅拌。过滤取出沉淀，根据需要进行数次悬浮洗涤，将所得到的湿状固体进行真空干燥，干燥10小时以上使产品温度达到室温，能够得到式(VII-CR)表示的化合物。

由下述式(VII-CR)表示的化合物形成上述式(VII)表示的化合物的工序可以按照以下的方式来实施。

[化学式40]

作为在上述式(VII-CR)表示的化合物的pH调整中所使用的缓冲液，优选为pH6.5的磷酸缓冲液。浓度可以根据上述式(VII-CR)表示的化合物中残存的三氟乙酸的量而改变，可以在0.1-0.5M的范围中选择，优选为0.2M。全部用量，相对于(VII-CR)表示的化合物表示的化合物的实质量，可以以10-50vol/wt的范围使用。

pH的调整，预先将5-7vol/wt的磷酸缓冲液冷却至0-10℃，将式(VII-CR)表示的化合物和冷却的磷酸缓冲液以形成pH4-5.5、优选为pH4.2-4.8之间的方式交替地一点一点地添加溶解，最终调整至pH4.6，接着，在相对于式(VII-CR)表示的化合物的净重(力価)，总量为低于25vol/wt时，加入水稀释至25vol/wt，在溶液温度15℃以下减压浓缩至20vol/wt。进一步，通过0.2M磷酸氢二钠水溶液使溶液的pH为pH5.4、用水稀释形成36vol/wt的水溶液来实施。

上述pH调整后的水溶液的脱盐根据需要通过使用合成吸附剂的柱精制来实施。合成吸附剂可使用三菱化成ダイヤイオンHP-20或セパビーズSP-207等，优选为セパビーズSP-207。相对于式(VII-CR)表示的化合物的净重，合成吸附剂的量可以以55-65vol/wt的范围使用。可以通过将上述水溶液吸附到合成吸附剂中，用水65-70vol/wt脱盐，用10％异丙醇150-200vol/wt洗提来实施。使活性组分为20-25vol/wt的范围。使用将所得到的活性组分在溶液温度20℃以下减压浓缩至5-7vol/wt而成的浓缩液实施结晶化。

结晶多种形态可以为溶剂和或无水状态(例如无水物、一水合物、二水合物)。式(VII-1)表示的化合物的结晶多种形态存在I、II、III及IV型结晶。I和III型结晶可以在0-35℃、优选在20-25℃的室温下、更优通过接种结晶种进行结晶化，II型结晶可以在15℃以下的冷却和添加不良溶剂的过饱和条件下在无结晶种下进行结晶化。IV型结晶可以以式(VII-1)表示的化合物的溶解性良好的醇系溶剂如甲醇作为不良溶剂在室温下进行结晶化，通过在醇溶剂中在脱水条件下进行再结晶来得到I-III型结晶。

I、II及III型结晶以DSC、在含水异丙醇中的溶解度、粉末X射线衍射图的晶面间距图形来区别。在含水异丙醇中的溶解度，I型结晶最低，II和III型结晶为同等程度。

上述式(VII)表示的化合物的结晶化可以按照以下的方式来实施。初期药液量调整为溶解度最低的结晶形态可充分溶解的浓度。式(VII-1)表示的化合物为10-30％、优选为10-20％的范围。优选接种的结晶形态事先准备好结晶种。I型结晶的结晶种可以在室温下得到，III型结晶的结晶种可以通过在15-25％的范围的浓度下反复进行连续结晶化而无混入地得到。结晶种的量可使用0.01-20％，优选使用0.01-2％。

所使用的不良溶剂可举出甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、乙腈、四氢呋喃，优选为醇系不良溶剂，例如可举出甲醇、乙醇、异丙醇。不良溶剂的量可以以分离损耗为1％以下的方式根据溶解度调整。式(VII-1)表示的化合物，相对于初期药液量，可使用1-10倍量，优选使用6-7倍量。添加不良溶剂的时机，可以在接种I型结晶后的混合物形成为浆料状态后添加，在接种II和III型结晶后直接添加，IV型结晶在未接种下进行滴加。

关于IV型结晶，也可以不形成水溶液地将I、II或III型结晶在甲醇、乙醇或异丙醇中悬浮搅拌而得到。

药液的温度调节在控制所期望的结晶多种形态方面是重要的因素，可以参考在设定温度下的结晶多种形态的析出速度而确定。式(VII-1)表示的化合物中，I、III、IV型结晶控制在20-25℃的范围，II型结晶控制在15℃以下。此外，在不从水溶液、而将I、II或III型结晶在溶剂中悬浮搅拌的IV型结晶时，与I、II或III型结晶在溶剂中的溶解度一并控制在20-100℃的范围，优选为20-65℃的范围。

搅拌时间依赖于析出速度，可以搅拌1-24小时，优选为1-15小时。

析出的结晶可以通过通常的过滤、洗涤、通风干燥或真空干燥，得到结晶形态的式(VII)表示的化合物。为溶剂化的结晶时，可以通过产品温度、干燥减量、加湿限定真空干燥、加湿通风干燥等的控制方法来避免过干燥。

实施例

以下，通过实施例进一步详细地说明本发明，但本发明并不限于这些实施例，可以有各种变更例。

参考例1

(2S,5R)-5-(苄氧基氨基)哌啶-2-羧酸甲酯的二盐酸盐

工序1

(2S,5S)-5-羟基哌啶-2-羧酸甲酯

在2M氯化氢-甲醇溶液(12.8L)中加入市售的(2S,5S)-5-羟基哌啶-2-羧酸(柱前衍生HPLC含量84％，实质912.22g，洗涤用2M氯化氢-甲醇3.1L)，使其回流3小时(内部温度63-67℃)。将反应液冷却后，加入1,4-二噁烷(12.8L)，将溶剂减压馏去。在残渣(4.1kg)中加入乙酸乙酯(18.3L)和冰冷的44％碳酸钾水溶液(23.7L)，分层出有机层，进一步用乙酸乙酯(3×18.3L)提取水层。用50％碳酸钾水溶液(7.3L)将各个有机层分液，合并有机层，用无水碳酸钾(2.37kg)干燥、过滤，将溶剂减压馏去。使残渣溶解于甲苯(9.1L)中，加入活性炭9.2g搅拌30分钟，过滤，将溶剂减压馏去。用乙酸乙酯(9.1L)将残渣置换浓缩，得到淡黄色油状的标题化合物1130g(柱前衍生HPLC含量78.9％，实质891.57g，收率89％)。

工序2

(2S,5S)-5-羟基-1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-2-羧酸甲酯

将(2S,5S)-5-羟基哌啶-2-羧酸甲酯(柱前衍生HPLC含量78.8％，实质459.48g)的脱水乙酸乙酯溶液(7.4L)冷却至-40℃，加入三乙胺(1300g)，接着在-40～-12℃下花费30分钟滴加三氟乙酸酐(1349g，洗涤用脱水乙酸乙酯100mL)。滴加结束后用15分钟升温至-2℃，搅拌75分钟，进一步在混合物加入水(1277mL)，在25℃下搅拌1小时。将混合物投入水(8.4L)中(用乙酸乙酯4.5L洗涤)，进一步用乙酸乙酯(2×9.8L)提取，将合并有机层依次用1M盐酸(8.5L)、饱和碳酸氢钠水溶液(8.5L)、饱和食盐水(8.5L)洗涤，用无水硫酸钠(1.8kg)干燥，过滤。将有机层的溶剂减压馏去后，在残渣中加入乙酸乙酯(3.6L)置换浓缩，将残渣真空干燥，得到标题化合物793.4g(HPLC含量81.5％，实质648.66g，收率88％)。

工序3

(2S,5R)-5-(苄氧基氨基)-1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-2-羧酸甲酯

将(2S,5S)-5-羟基-1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-2-羧酸甲酯(HPLC含量81.5％，实质556.23g)的脱水乙腈溶液4.0L冷却至-40℃，加入2,6-二甲基吡啶(259.24g)(用乙腈100mL洗涤)，在-43℃～-37℃下花费1小时10分钟滴加三氟甲磺酸酐(645.72g)(用乙腈100mL洗涤)。将反应液在-35℃下搅拌50分钟后，在-35℃以下滴加苄氧基胺(550.27g)，用乙腈(500mL)洗涤。使反应液缓缓地升高至-5℃后，加入2,6-二甲基吡啶(259.24g)，在5℃下搅拌40小时。将混合物浓缩至1.8L后，用乙酸乙酯(12.4L)稀释，用水(12.4L)、10％柠檬酸水溶液(4×8L+4.7L)、饱和碳酸氢钠水溶液(6.3L)、饱和食盐水(7.2L)依次洗涤。用无水硫酸钠将有机层干燥，过滤后，减压浓缩。将残渣真空干燥，得到标题化合物867.73g(HPLC含量71.56％，产率79％)。

工序4

(2S,5R)-5-(苄氧基氨基)-1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-2-羧酸甲酯的盐酸盐

用乙酸乙酯(4.8L)稀释(2S,5R)-5-(苄氧基氨基)-1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-2-羧酸甲酯(HPLC含量70.13％，实质673.20g)，投入活性炭48g，搅拌1小时，将混合物过滤，用乙酸乙酯2L洗涤。用乙酸乙酯4.7L稀释滤液，在室温下添加1M氯化氢-乙酸乙酯溶液(2.7L)，搅拌15分钟，接着投入己烷28.6L，在0℃下冷却。搅拌3小时后，将结晶过滤，用己烷/乙酸乙酯＝4/1(3L)洗涤后，真空干燥得到标题化合物724.0g(HPLC含量91.72％，产率90％)。

工序5

(2S,5R)-5-(苄氧基氨基)哌啶-2-羧酸甲酯的二盐酸盐

使(2S,5R)-5-(苄氧基氨基)-1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-2-羧酸甲酯盐酸盐(HPLC含量92.01％，实质732.25g)溶解于2M氯化氢-甲醇溶液(15L)中，将其加热回流27小时。将混合物冷却至室温，减压浓缩至3L。将混合物中用甲醇2.7L稀释，接着加入乙酸乙酯16.3L，搅拌1小时。将析出的结晶过滤，用乙酸乙酯(3×1.1L)洗涤，真空干燥后得到标题化合物572.0g(HPLC含量98.06％，产率92％)。

¹H NMR(400MHz,D₂O)δ1.40-1.51(m,1H),1.61-1.72(m,1H),1.90-1.94(m,1H),2.25-2.30(m,1H),2.80(t,J＝11.2Hz,1H),3.19-3.27(m,1H),3.51-3.55(m,1H),3.66(s,3H),3.87-3.91(m,1H),4.68(s,2H),7.27(s,5H)；MS m/z 265[M-2HCl+H]⁺.

参考例2

(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸

工序1

(2S,5R)-5-(苄氧基氨基)哌啶-2-羧酸甲酯

在(2S,5R)-5-(苄氧基氨基)哌啶-2-羧酸甲酯的二盐酸盐(参考例1，1.319g)中加入乙酸乙酯(20mL)、50％碳酸钾水溶液(20mL)，进行分液，用乙酸乙酯(15mL)提取水层3次。用饱和食盐水洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤后，减压浓缩，真空干燥一整夜，得到标题化合物975mg(产率94％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.25-1.35(m,1H),1.49-1.59(m,1H),1.89-2.11(m,2H),2.45(t,J＝11.7Hz,1H),2.96-3.03(m,1H),3.28-3.39(m,2H),3.72(s,3H),4.68(s,2H),7.26-7.35(m,5H)；MS m/z 265[M+H]⁺.

工序2

(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸甲酯

在(2S,5R)-5-(苄氧基氨基)哌啶-2-羧酸甲酯(1.154g，4.37mmol)中加入脱水乙腈(198mL)，进行冰冷。在5℃以下依次滴加三乙胺(1.60mL)、双光气(0.389mL)，在2℃下搅拌20分钟。接着，在反应液中加入4-二甲基氨基吡啶(70.0mg)，在室温下搅拌10小时。将反应液减压浓缩，用乙酸乙酯进行置换浓缩3次后，将溶液浓缩至30mL。向其中加入乙酸乙酯(20mL)、水(40mL)，进行分液，将分离的水层用乙酸乙酯(30mL)提取2次。用5％柠檬酸水溶液(40mL)、6.5％碳酸氢钠水溶液(30mL)、5％食盐水(30mL)依次洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤后，减压浓缩。用乙酸乙酯(5.5mL)稀释所得到的残渣1.16g，加入正己烷(11mL)，接种晶种进行结晶化。进一步加入正己烷(49mL)，在0℃下搅拌1小时后，将结晶过滤，用正己烷(60mL)洗涤后，真空干燥，得到无色结晶性粉末的标题化合物882.3mg(产率71％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.65-1.70(m,1H),2.03-2.12(m,3H),2.90(d,J＝12.0Hz,1H),3.07(m,1H),3.32(m,1H),4.12(dd,J＝4.6&4.4Hz,1H),4.91(d,J＝11.2Hz,1H),5.06(d,J＝11.2Hz,1H),7.35-7.44(m,5H)；MS m/z 291[M+H]⁺.

工序3

(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸

在(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸甲酯(809.0mg，2.79mmol)中加入四氢呋喃(8mL)、水(3.6mL)，在4.9℃以下花费10分钟滴加0.5M氢氧化锂水溶液(6.41mL)。在2℃下将反应液搅拌2小时后，加入水(30mL)，用乙酸乙酯(25mL)洗涤。在分离的水层中加入乙酸乙酯(15mL)，用1M盐酸水溶液将水层调整至pH4.0，用乙酸乙酯提取2次(乙酸乙酯：共65mL)。用1M盐酸水溶液将分离的水层调整至pH3.4，用乙酸乙酯提取1次后，将水层调整至pH2.4，进行乙酸乙酯提取2次。用饱和食盐水(40mL)洗涤共计5次的乙酸乙酯提取液(175mL)，用无水硫酸钠干燥，过滤后，减压浓缩。用乙酸乙酯(5mL)稀释所得到的残渣759.1mg，加入己烷(3mL)，接种晶种进行结晶化。进一步加入乙酸乙酯/正己烷(5/3)溶液(8mL)搅拌后，加入正己烷(20mL)，在4℃下搅拌14小时。将结晶过滤，用正己烷(55mL)洗涤后，真空干燥，得到无色结晶性粉末的标题化合物633.6mg(产率82％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.67(m,1H),2.04-2.26(m,3H),2.85(d,J＝12.0Hz,1H),3.13(m,1H),3.35(m,1H),4.12(m,1H),4.91(d,J＝11.3Hz,1H),5.06(d,J＝11.3Hz,1H),7.37-7.44(m,5H)；MS m/z 277[M+H]⁺.

参考例3

(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸2,5-二氧代吡咯烷-1-基酯

[化学式41]

工序1

(2S,5R)-5-((苄氧基)氨基)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-羧酸

使(2S,5R)-5-(苄氧基氨基)哌啶-2-羧酸甲酯的二盐酸盐(参考例1，65.4g，200mmol)溶解于水(400mL)、1,4-二噁烷(270mL)中，进行冰冷，加入5M氢氧化钠水溶液(132mL)，搅拌1小时。在反应液中加入5M盐酸(12mL)、碳酸钾(27.6g)、二碳酸二叔丁酯(48g)，升温至室温，搅拌一整夜。将反应液浓缩后的水溶液用乙酸乙酯洗涤，用柠檬酸一水合物调整至pH3.3，用乙酸乙酯(500mL)提取2次，用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，将溶剂减压浓缩，进一步用乙酸乙酯置换浓缩，得到标题化合物68.7g(定量)。将该化合物不精制而直接用于下一工序。将一部分通过乙酸乙酯/己烷进行结晶化，确认其结构。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.46(s,9H),1.50-1.72(m,2H),1.98-2.10(m,2H),3.12-3.19(m,2H),4.13-4.20(m,1H),4.76(d,J＝11.5Hz),4.70(d,J＝11.5Hz),4.85-4.92(m,1H),7.26-7.35(m,5H)；MS m/z 351[M+H]⁺.

工序2

使(2S,5R)-5-((苄氧基)氨基)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-羧酸(参考例3的工序1，700mg，2mmol)溶解于脱水四氢呋喃(10mL)中，冷却至-20℃。在混合物中依次滴加氯甲酸异丁酯(300mg)和三乙胺(444mg)，搅拌15分钟。在反应液中加入1-羟基吡咯烷-2,5-二酮(253mg)，搅拌30分钟，在室温下进一步搅拌30分钟。将反应液用乙酸乙酯(35mL)稀释，用10％柠檬酸(10mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)、饱和食盐水(10mL)依次洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，将溶剂减压馏去，得到残渣985mg。将该残渣全部溶解于脱水氯仿(10mL)中，加入三乙胺(303mg)，进行冰冷。在混合物中加入三光气(237mg)，搅拌30分钟，加入甲醇(0.1mL)，搅拌30分钟。接着，滴加甲磺酸(1.3mL)的二氯甲烷(4.0mL)溶液，进一步搅拌30分钟。将混合物滴加到冰冷的1M碳酸氢钾水溶液(2.4g/20mL)中，搅拌30分钟，加入氯仿(10mL)进行分层，将有机层用1M盐酸(10mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)、饱和食盐水(10mL)依次洗涤。将有机层用无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。在残渣中进行接种，在固体中加入己烷/乙酸乙酯(1/2，3mL)，搅拌，过滤，用己烷/乙酸乙酯(1/1，3mL)、己烷(3mL)依次洗涤，得到结晶的标题化合物556mg(收率75％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.70-1.77(m,1H),2.04-2.27(m,3H),2.80-2.90(m,4H),3.09-3.19(m,2H),3.35(br.s.,1H),4.48(d,J＝6.9Hz,1H),4.92(d,J＝11.3Hz,1H),5.07(d,J＝11.3Hz,1H),7.35-7.45(m,5H)；MS m/z 374[M+H]⁺.

参考例4

(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(1R,2S,6R,7S)-3,5-二氧代-4-氮杂三环[5.2.1.0^2,6]癸-8-烯-4-基酯

[化学式42]

使(2S,5R)-5-((苄氧基)氨基)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-羧酸(参考例3的工序1，14.0g，41.09mmol)溶解于脱水四氢呋喃(200mL)中，冷却至-20℃左右。在混合物中滴加氯甲酸异丁酯(6.11g)，接着，滴加三乙胺(8.86g)，在该温度下搅拌15分钟。接着，在反应液中加入(1R,2S,6R,7S)-4-羟基-4-氮杂三环[5.2.1.0^2,6]癸-8-烯-3,5-二酮(7.87g)，在该温度下搅拌30分钟，进一步在室温下搅拌30分钟。将反应液用乙酸乙酯(700mL)稀释，用冰冷的10％柠檬酸(200mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)、饱和食盐水(200mL)依次洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤。将溶剂减压馏去并再次用乙酸乙酯置换浓缩所得到的残渣25.1g(实质收率92％)全部溶解于脱水氯仿(180mL)中，加入三乙胺(5.5g)，进行冰冷。在混合物中加入三光气(4.29g)，搅拌30分钟，接着，加入甲醇(1mL)，搅拌30分钟。在反应液中滴加甲磺酸(23.5mL)的二氯甲烷(30mL)溶液，进一步搅拌30分钟。将混合物滴加到冰冷的1M碳酸氢钾水溶液(43.5g/200mL)中，搅拌30分钟，加入氯仿(100mL)进行分层，将有机层用1M盐酸(200mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)、饱和食盐水(200mL)依次洗涤。将各水层用氯仿(100mL)依次逆提取。合并有机层用无水硫酸镁干燥，过滤。将溶剂减压浓缩所得到的残渣溶解于氯仿(70mL)中，加入己烷(100mL)，搅拌30分钟，晶析，进一步加入己烷(100mL)，搅拌1小时。将结晶过滤取出干燥，得到标题化合物15.4g(含量100％，收率88％)。

HPLC：COSMOSIL 5C18 MS-II 4.6X150mm,35℃,0.02M TFA/CH₃CN＝50/50,1.0mL/min,UV210nm,RT 7.1min；镜像异构体过量率为99.9％ee以上：CHIRALPAK AD-H、4.6x150mm、40℃,己烷/乙醇＝1/1、UV210nm、1mL/min、RT 37.3min(cf.对映异构体16.5min)；Mp 196℃；[α]26D+12.686(c 0.885,CHCl₃)；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.52(d,J＝9.1Hz,1H),1.70(m,1H),1.78(d,J＝9.1Hz,1H),2.01-2.26(m,3H),3.04-3.17(m,2H),3.32(m,3H),3.45(br.s.,2H),4.41(d,J＝6.7Hz,1H),4.91(d,J＝11.4Hz,1H),5.06(d,J＝11.4Hz,1H),6.19(br.s.,2H),7.33-7.46(m,5H)；MS m/z 438[M+H]⁺.

参考例5

(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1)

[化学式43]

工序1

{2-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}氨基甲酸叔丁酯(IV-1)

将(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(4.30g，15.56mmol)的脱水乙酸乙酯(47mL)溶液冷却至-30℃，依次加入氯甲酸异丁酯(2.17g，洗涤用脱水乙酸乙酯1mL)、三乙胺(1.61g，洗涤用脱水乙酸乙酯1mL)，在-30℃下搅拌1小时。在反应液中加入2-(氨基氧)乙基氨基甲酸叔丁酯(3.21g)的脱水乙酸乙酯(4mL)溶液(洗涤用脱水乙酸乙酯1mL)，花费1.5小时升温至0℃，进一步搅拌一整夜。将混合物用8％柠檬酸水溶液(56mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(40mL)、饱和食盐水(40mL)依次洗涤，用无水硫酸镁干燥后，过滤，浓缩至5mL，进一步用乙醇(10mL)置换浓缩至6mL。在所得到的溶液中加入乙醇(3mL)、己烷(8mL)，进行冰冷，接种，搅拌15分钟。花费2小时在混合物中滴加己烷(75mL)，搅拌一整夜。过滤取出析出结晶，用己烷洗涤，真空干燥，得到标题化合物5.49g(实质4.98g，收率74％)。

HPLC：COSMOSIL 5C18 MS-II 4.6X150mm,33.3mM磷酸盐缓冲液/MeCN＝50/50,1.0mL/min,UV210nm,RT 4.4min；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.44(s,9H),1.56-1.70(m,1H),1.90-2.09(m,2H),2.25-2.38(m,1H),2.76(d,J＝11.6Hz,1H),3.03(br.d.,J＝11.6Hz,1H),3.24-3.47(m,3H),3.84-4.01(m,3H),4.90(d,J＝11.6Hz,1H),5.05(d,J＝11.6Hz,1H),5.44(br.s.,1H),7.34-7.48(m,5H),9.37(br.s.,1H)；MS m/z 435[M+H]⁺.

工序2

{2-[({[(2S,5R)-6-羟基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}氨基甲酸叔丁酯(V-1)

在{2-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}氨基甲酸叔丁酯(3.91g，9.01mmol)的甲醇溶液(80mL)中，加入10％钯碳催化剂(含水50％，803mg)，在氢气氛围下，搅拌45分钟。用硅藻土过滤反应液，减压浓缩后，得到标题化合物3.11g(定量)。

HPLC：COSMOSIL 5C18 MS-II 4.6X150mm,33.3mM磷酸盐缓冲液/MeCN＝75/25,1.0mL/min,UV210nm,RT 3.9min；¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ1.44(s,9H),1.73-1.83(m,1H),1.86-1.99(m,1H),2.01-2.12(m,1H),2.22(br.dd.,J＝15.0,7.0Hz,1H),3.03(d,J＝12.0Hz,1H),3.12(br.d.,J＝12.0Hz,1H),3.25-3.35(m,2H),3.68-3.71(m,1H),3.82-3.91(m,3H)；MS m/z 345[M+H]⁺.

工序3

{2-[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}氨基甲酸叔丁酯四丁基铵(VI-1)

在{2-[({[(2S,5R)-6-羟基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}氨基甲酸叔丁酯(3.09g，8.97mmol)的二氯甲烷(80mL)溶液中，加入2,6-二甲基吡啶(3.20mL)、三氧化硫-吡啶络合物(3.58g)，在室温下搅拌一整夜。将反应液加入半饱和碳酸氢钠水溶液中，用氯仿洗涤水层后，在水层中加入硫酸氢四丁基铵(3.47g)和氯仿(30mL)，搅拌10分钟。用氯仿提取水层后，将所得到的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤后，减压浓缩，得到标题化合物5.46g(产率91％)。

HPLC：COSMOSIL 5C18 MS-II 4.6X150mm,33.3mM磷酸盐缓冲液/MeCN＝80/20,1.0mL/min,UV210nm,RT 2.0min；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.01(t,J＝7.4Hz,12H),1.37-1.54(m,8H),1.45(s,9H),1.57-1.80(m,9H),1.85-1.98(m,1H),2.14-2.24(m,1H),2.30-2.39(m,1H),2.83(d,J＝11.6Hz,1H),3.20-3.50(m,11H),3.85-3.99(m,3H),4.33-4.38(m,1H),5.51(br s,1H),9.44(br.s.,1H)；MS m/z 425[M-Bu₄N+2H]⁺.

工序4

在{2-[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}氨基甲酸叔丁酯四丁基铵(5.20g，7.82mmol)的二氯甲烷(25mL)溶液中，在冰冷下加入三氟乙酸(25mL)，在0℃下搅拌1小时。将反应液减压浓缩，将所得到的残渣用二乙醚洗涤后，用碳酸氢钠水溶液调整至pH7，用十八烷基硅胶柱层析精制(水)，冻干后，得到标题化合物1.44g(收率57％)。

HPLC：COSMOSIL 5C18 MS-II 4.6X150mm,33.3mM磷酸盐缓冲液/MeCN＝99/1,1.0mL/min,UV210nm,RT 3.1min；¹H NMR(400MHz,D₂O)δ1.66-1.76(m,1H),1.76-1.88(m,1H),1.91-2.00(m,1H),2.00-2.08(m,1H),3.02(d,J＝12.0Hz,1H),3.15(t,J＝5.0Hz,2H),3.18(br d,J＝12.0Hz,1H),3.95(dd,J＝7.8,2.2Hz,1H),4.04(t,J＝5.0Hz,2H),4.07(dd,J＝6.4&3.2Hz,1H)；MS m/z 325[M+H]⁺.

参考例6

(2S,5R)-N-[2-(甲基氨基)乙氧基]-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-2)

[化学式44]

工序1

{2-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}(甲基)氨基甲酸叔丁酯(IV-2)

通过与参考例5相同的方法，将由(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(390mg，1.41mmol)和(2-(氨基氧)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(436mg)得到的粗生成物进行硅胶柱层析，得到标题化合物347.8mg(收率55％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.46(s,9H),1.58-1.70(m,1H),1.88-2.07(m,2H),2.25-2.36(m,1H),2.70-3.08(m,2H),2.88(s,3H),3.23-3.41(m,2H),3.51-3.68(m,1H),3.83-4.10(m,3H),4.90(d,J＝11.4Hz,1H),5.06(d,J＝11.4Hz,1H),7.32-7.47(m,5H),10.11(brs,1H)；MS m/z 449[M+H]⁺.

工序2

{2-[({[(2S,5R)-6-羟基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}(甲基)氨基甲酸叔丁酯(V-2)

通过与参考例5相同的方法，由上述工序1的全部化合物得到标题化合物(定量)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ1.46(s,9H),1.73-1.83(m,1H),1.86-2.00(m,1H),2.01-2.13(m,1H),2.14-2.28(m,1H),2.93(s,3H),3.04(d,J＝10.8Hz,1H),3.08-3.18(m,1H),3.43-3.55(m,2H),3.65-3.72(m,1H),3.79-3.88(m,1H),3.92-4.05(m,2H)；MS m/z 359[M+H]⁺.

工序3

通过与参考例5相同的方法，由上述工序2的全部化合物，得到{2-[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}(甲基)氨基甲酸叔丁酯四丁基铵(定量)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.01(t,J＝7.2Hz,12H),1.36-1.53(m,8H),1.47(s,9H),1.57-1.77(m,9H),1.83-1.98(m,1H),2.13-2.25(m,1H),2.28-2.40(m,1H),2.82-2.96(m,4H),3.22-3.42(m,11H),3.60-4.08(m,3H),4.34(br.s.,1H),10.15(br.s.,1H)；MS m/z437[M-Bu₄N]^-.

使上述四丁基铵盐全部通过三氟乙酸脱保护，用十八烷基硅胶柱层析精制后，得到标题化合物149.4mg(3工序收率57％)。

¹H NMR(500MHz,D₂O)δ1.73-1.97(m,2H),1.98-2.07(m,1H),2.08-2.18(m,1H),2.74(s,3H),3.09(d,J＝12.0Hz,1H),3.21-3.32(m,3H),4.04(dd,J＝7.5,2.0Hz,1H),4.10-4.23(m,3H)；MS m/z 337[M-H]^-.

参考例7

(2S,5R)-7-氧代-N-[2-(丙烷-2-基氨基)乙氧基]-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-3)

[化学式45]

工序1

{2-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}(丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(IV-3)

使(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(414mg，1.50mmol)的脱水二氯甲烷(14.1mL)溶液在氩气氛围下冷却至0℃，依次加入氯甲酸异丁酯(245.9mg)、三乙胺(197mg)，搅拌30分钟。在该反应混合物中滴加(2-(氨基氧)乙基)(异丙基)氨基甲酸叔丁酯(596mg)，投入结束后升温至室温，搅拌一小时。将该反应混合物用0.5M盐酸、饱和食盐水依次洗涤，将有机层用硫酸镁干燥后，将减压浓缩得到的残渣进行硅胶柱层析，得到标题化合物578.4mg(收率81％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.15(d,J＝6.8Hz,6H),1.46(s,9H),1.55-1.70(m,1H),1.89-2.07(m,2H),2.25-2.37(m,1H),2.73-2.90(m,1H),2.98-3.08(m,1H),3.22-3.38(m,2H),3.40-3.60(m,1H),3.83-4.06(m,4H),4.90(d,J＝11.2Hz,1H),5.06(d,J＝11.2Hz,1H),7.35-7.46(m,5H),10.29(br.s.,1H)；MS m/z 477[M+H]⁺.

工序2

{2-[({[(2S,5R)-6-羟基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}(丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(V-3)

通过与参考例5相同的方法，由上述工序1的全部化合物，得到标题化合物(定量)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ1.09-1.23(m,6H),1.46(s,9H),1.73-2.27(m,4H),3.06(d,J＝11.6Hz,1H),3.08-3.50(m,4H),3.64-3.73(m,1H),3.79-3.98(m,3H)；MS m/z 387[M+H]⁺.

工序3

通过与参考例5相同的方法，由上述工序2的全部化合物，得到{2-[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}(丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯四丁基铵(定量)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.01(d,J＝7.4Hz,12H),1.10-1.20(m,6H),1.33-1.77(m,17H),1.46(s,9H),1.84-1.97(m,1H),2.12-2.25(m,1H),2.28-2.40(m,1H),2.79-2.95(m,1H),3.17-3.45(m,9H),3.50-3.67(m,1H),3.80-4.07(m,5H),4.34(br.s.,1H),10.36(br.s.,1H)；MS m/z 465[M-Bu₄N]^-.

使上述四丁基铵盐全部通过三氟乙酸脱保护，用十八烷基硅胶柱层析精制后，得到标题化合物252.1mg(3工序收率57％)。

¹H NMR(500MHz,D₂O)δ1.28(d,J＝6.5Hz,6H),1.74-1.83(m,1H),1.85-1.96(m,1H),1.98-2.14(m,2H),3.11(d,J＝12.5Hz,1H),3.22-3.30(m,3H),3.40(quint,J＝6.5Hz,1H),4.01(br d,J＝5.5Hz,1H),4.09-4.18(m,3H)；MS m/z 367[M+H]⁺.

参考例8

(2S,5R)-N-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-4)

[化学式46]

工序1

(2S,5R)-6-苄氧基-N-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(IV-4)

使(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(553mg，2.00mmol)的脱水二氯甲烷(10mL)溶液在氩气氛围下冷却至0℃，滴加氯甲酸异丁酯(289μL，2.20mmol)。接着，加入三乙胺(293μL，搅拌30分钟，由此，在反应体系内配制混合酸酐。在该反应混合物中一边用脱水二氯甲烷(7.0mL)洗涤，一边缓缓加入2-(氨基氧)-N,N-二甲基乙胺2盐酸盐(591mg)和三乙胺(930μL)，在该温度下搅拌一小时。将该反应混合物过滤后，用甲醇洗涤残渣，将滤液减压浓缩。将所得到的残渣溶解于二氯甲烷和水中，将用二氯甲烷提取的有机层用硫酸镁干燥后，减压浓缩。将所得到的残渣进行硅胶柱层析(氨基二氧化硅，氯仿/甲醇＝10/1)，得到无色油状的标题化合物291.1mg。(收率40％)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.45-1.85(m,4H),2.29(s,6H),2.60(t,J＝5.2Hz,2H),2.81(d,J＝11.6Hz,1H),2.97(br.d.,J＝11.6Hz,1H),3.28-3.34(m,1H),3.92-4.07(m,3H),4.90(d,J＝11.6Hz,1H),5.05(d,J＝11.6Hz,1H),7.35-7.48(m,5H)；MS m/z 363[M+H]⁺.

工序2

(2S,5R)-N-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6-羟基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(V-4)

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.74-1.84(m,1H),1.87-1.98(m,1H),2.03-2.12(m,1H),2.15-2.24(m,1H),2.36(s,6H),2.67-2.74(m,2H),3.07(br.d.,J＝11.6Hz,1H),3.12(br.d.,J＝11.6Hz,1H),3.67-3.72(m,1H),3.83(br.d.,J＝6.4Hz,1H),3.96-4.06(m,2H)；MS m/z 273[M+H]⁺.

工序3

将通过与参考例5相同的方法得到的反应混合物用氯仿稀释，水洗，得到(2S,5R)-N-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺吡啶鎓，用饱和碳酸氢钠水溶液中和后，用十八烷基硅胶柱层析精制后，得到标题化合物130.7mg(2工序收率43％)。

¹H NMR(400MHz,D₂O)δ1.68-1.84(m,2H),1.86-2.04(m,2H),2.80(s,6H),3.09-3.17(m,2H),3.17-3.29(m,2H),3.80-3.90(m,1H),4.02-4.13(m,3H)；MS m/z 353[M+H]⁺.

参考例9

(2S,5R)-N-{[(2S)-2-氨基丙基]氧}-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-5)

[化学式47]

工序1

{(2S)-1-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]丙烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯(IV-5)

通过与参考例7相同的方法，将由(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(414mg，1.50mmol)和(S)-(1-(氨基氧)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(550mg)得到的粗生成物进行硅胶柱层析，得到标题化合物585.6mg(收率87％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.17(d,J＝6.4Hz,3H),1.44(s,9H),1.55-1.70(m,1H),1.90-2.10(m,2H),2.26-2.34(m,1H),2.80(d,J＝12.0Hz,1H),3.06(br.d.,J＝12.0Hz,1H),3.27-3.34(m,1H),3.64-3.74(m,1H),3.86-3.98(m,3H),4.81(br.d.,J＝7.6Hz,1H),4.90(d,J＝11.6Hz,1H),5.05(d,J＝11.6Hz,1H),7.34-7.45(m,5H),9.68(br.s.,1H)；MSm/z 449[M+H]⁺.

工序2

{(2S)-1-[({[(2S,5R)-6-羟基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]丙烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯(V-5)

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ1.16(d,J＝6.4Hz,3H),1.44(s,9H),1.74-1.84(m,1H),1.86-1.98(m,1H),2.03-2.12(m,1H),2.21(br.dd.,J＝15.2,6.8Hz,1H),3.06(d,J＝12.0Hz,1H),3.14(br.d.,J＝12.0Hz,1H),3.68-3.72(m,1H),3.74-3.87(m,4H)；MS m/z359[M+H]⁺.

工序3

通过与参考例5相同的方法，由上述工序2的全部化合物，得到{(2S)-1-[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]丙烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯四丁基铵(定量)。MS m/z 437[M-Bu₄N]^-.

使上述四丁基铵盐全部通过三氟乙酸脱保护，用十八烷基硅胶柱层析精制后，得到标题化合物117.1mg(3工序收率26％)。

¹H NMR(400MHz,D₂O)δ1.17(d,J＝6.8Hz,3H),1.66-1.89(m,2H),1.91-2.08(m,2H),3.02(d,J＝12.0Hz,1H),3.18(br.d.,J＝12.0Hz,1H),3.47-3.58(m,1H),3.82(dd,J＝11.8,9.4Hz,1H),3.92-4.02(m,2H),4.05-4.10(m,1H)；MS m/z 339[M+H]⁺.

参考例10

(2S,5R)-N-{[(2R)-2-氨基丙基]氧}-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-6)

[化学式48]

工序1

{(2R)-1-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]丙烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯(IV-6)

通过与参考例7相同的方法，将由(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(414mg，1.50mmol)和(R)-(1-(氨基氧)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(569mg)得到的粗生成物进行硅胶柱层析，得到标题化合物625mg(收率93％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.14(d,J＝6.4Hz,3H),1.43(s,9H),1.53-1.70(m,1H),1.90-2.06(m,2H),2.28-2.36(m,1H),2.79(d,J＝12.0Hz,1H),3.02(br.d.,J＝12.0Hz,1H),3.28-3.33(m,1H),3.56-3.68(m,1H),3.84(dd,J＝11.2,3.6Hz,1H),3.92-4.04(m,2H),4.66(br d,J＝8.0Hz,1H),4.91(d,J＝11.2Hz,1H),5.06(d,J＝11.2Hz,1H),7.35-7.45(m,5H),9.94(br.s.,1H)；MS m/z 449[M+H]⁺.

工序2

{(2R)-1-[({[(2S,5R)-6-羟基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]丙烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯(V-6)

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ1.15(d,J＝6.4Hz,3H),1.44(s,9H),1.73-1.84(m,1H),1.86-2.00(m,1H),2.01-2.12(m,1H),2.19-2.29(m,1H),3.06(d,J＝11.6Hz,1H),3.10-3.20(m,1H),3.67-3.72(m,1H),3.73-3.92(m,4H)；MS m/z 359[M+H]⁺.

工序3

通过与参考例5相同的方法，由上述工序2的全部化合物，得到{(2R)-1-[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]丙烷-2-基}氨基甲酸叔丁酯四丁基铵(定量)。MS m/z 437[M-Bu₄N]^-.

使上述四丁基铵盐全部通过三氟乙酸脱保护，用十八烷基硅胶柱层析精制后，得到标题化合物212.6mg(3工序收率45％)。

¹H NMR(400MHz,D₂O)δ1.17(d,J＝6.8Hz,3H),1.66-1.78(m,1H),1.78-1.88(m,1H),1.90-2.06(m,2H),3.02(d,J＝12.0Hz,1H),3.18(br.d.,J＝12.0Hz,1H),3.48-3.58(m,1H),3.83(dd,J＝11.8,9.0Hz,1H),3.94(br.d.,J＝7.2Hz,1H),3.98(dd,J＝11.8,3.4Hz,1H),4.06-4.10(m,1H)；MS m/z 339[M+H]⁺.

参考例11

(2S,5R)-N-(3-氨基丙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-7)

[化学式49]

工序1

{3-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]丙基}氨基甲酸叔丁酯(IV-7)

通过与参考例5相同的方法，将由(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(390mg，1.41mmol)和(3-(氨基氧)丙基)氨基甲酸叔丁酯(730mg)得到的粗生成物进行硅胶柱层析，得到标题化合物398.1mg(收率63％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.44(s,9H),1.50-1.67(m,1H),1.75-1.86(m,2H),1.88-2.07(m,2H),2.28-2.37(m,2H),2.77(d,J＝11.0Hz,1H),3.01(br.d.,J＝11.0Hz,1H),3.20-3.38(m,3H),3.89-4.04(m,3H),4.90(d,J＝11.4Hz,1H),5.05(d,J＝11.4Hz,1H),5.17(br.s.,1H),7.36-7.45(m,5H),9.21(br.s.,1H)；MS m/z 449[M+H]⁺.

工序2

{3-[({[(2S,5R)-6-羟基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]丙基}氨基甲酸叔丁酯(V-7)

通过与参考例5相同的方法，由上述工序1的化合物(392.8mg，876μmol)，得到标题化合物(定量)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ1.43(s,9H),1.73-1.99(m,4H),2.01-2.12(m,1H),2.13-2.24(m,1H),3.07(d,J＝11.6Hz,1H),3.09-3.21(m,3H),3.69(br.s.,1H),3.80-3.96(m,3H)；MS m/z 359[M+H]⁺.

工序3

通过与参考例5相同的方法，由上述工序2的全部化合物，得到{3-[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]丙基}氨基甲酸叔丁酯四丁基铵(定量)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.01(t,J＝7.4Hz,12H),1.33-1.53(m,8H),1.47(s,9H),1.55-1.96(m,12H),2.14-2.23(m,1H),2.31-2.41(m,1H),2.85(br.d.,J＝11.2Hz,1H),3.15-3.42(m,11H),3.88-4.07(m,3H),4.35(br.s.,1H),5.27(br s,1H),9.26(br.s.,1H)；MS m/z 437[M-Bu₄N]^-.

使上述四丁基铵盐全部通过三氟乙酸脱保护，用十八烷基硅胶柱层析精制后，得到标题化合物138.4mg(3工序收率47％)。

¹H NMR(400MHz,D₂O)δ1.67-2.05(m,6H),3.00-3.19(m,4H),3.82-3.94(m,3H),4.05-4.10(m,1H)；MS m/z 337[M-H]^-.

参考例12

(2S,5R)-N-[(2S)-氮杂环丁烷-2-基甲氧基]-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-8)

[化学式50]

工序1

(2S)-2-{[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(IV-8)

通过与参考例8相同的方法，将由(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(553mg，2.00mmol)和(S)-2-((氨基氧)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(578mg)得到的粗生成物进行硅胶柱层析，得到标题化合物760.1mg(收率83％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.46(s,9H),1.56-1.70(m,1H),1.88-2.07(m,3H),2.23-2.34(m,2H),2.84(d,J＝11.6Hz,1H),3.02(d,J＝11.6Hz,1H),3.28(br s,1H),3.77-4.03(m,4H),4.06-4.15(m,1H),4.37-4.48(m,1H),4.89(d,J＝11.6Hz,1H),5.04(d,J＝11.6Hz,1H),7.34-7.44(m,5H),10.63(br.s.,1H)；MS m/z 461[M+H]⁺.

工序2

(2S)-2-{[({[(2S,5R)-6-羟基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(V-8)

通过与参考例5相同的方法，由上述工序1的化合物(699mg，1.52mmol)，得到标题化合物(定量)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ1.44(s,9H),1.74-1.85(m,1H),1.86-1.99(m,1H),2.02-2.14(m,1H),2.16-2.40(m,3H),3.06(d,J＝11.6Hz,1H),3.10-3.17(m,1H),3.67-3.74(m,1H),3.75-3.93(m,3H),4.01(dd,J＝10.6,10.6Hz,1H),4.14(dd,J＝10.6,10.6Hz,1H),4.37-4.47(m,1H)；MS m/z 371[M+H]⁺.

工序3

通过与参考例5相同的方法，由上述工序2的全部化合物，得到(2S)-2-{[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯四丁基铵(定量)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.01(t,J＝7.2Hz,12H),1.30-2.10(m,19H),1.46(s,9H),2.12-2.39(m,3H),2.89(br.d.,J＝12.0Hz,1H),3.23-3.39(m,9H),3.76-3.93(m,3H),3.95-4.06(m,1H),4.08-4.18(m,1H),4.33(br.s.,1H),4.37-4.50(m,1H)；MS m/z 449[M-Bu₄N]^-.

使上述四丁基铵盐全部通过三氟乙酸脱保护，用十八烷基硅胶柱层析精制后，得到标题化合物172.3mg(3工序收率32％)。

¹H NMR(500MHz,D₂O)δ1.71-1.83(m,1H),1.84-1.97(m,1H),1.98-2.16(m,2H),2.36-2.49(m,1H),2.50-2.61(m,1H),3.10(d,J＝12.0Hz,1H),3.22-3.30(m,1H),3.92-4.12(m,5H),4.25-4.36(m,1H),4.68-4.77(m,1H)；MS m/z 351[M+H]⁺.

参考例13

(2S,5R)-7-氧代-N-[(2R)-吡咯烷-2-基甲氧基]-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-9)

[化学式51]

工序1

(2R)-2-{[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(IV-9)

通过与参考例5相同的方法，将由(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(390mg，1.41mmol)和(R)-2-((氨基氧)甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(796mg)得到的粗生成物进行硅胶柱层析，得到标题化合物336mg(收率50％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.45(s,9H),1.52-1.72(m,1H),1.80-2.09(m,6H),2.27-2.39(m,1H),2.84(br.d.,J＝12.4Hz,1H),2.96-3.08(m,1H),3.28-3.44(m,3H),3.60-3.86(m,2H),3.89-4.06(m,1H),4.14-4.29(m,1H),4.90(d,J＝11.2Hz,1H),5.06(d,J＝11.2Hz,1H),7.32-7.47(m,5H),10.56(s,1H)；MS m/z 475[M+H]⁺.

工序2

(2R)-2-{[({[(2S,5R)-6-羟基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(V-9)

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ1.46(s,9H),1.73-2.27(m,8H),3.06(d,J＝11.6Hz,1H),3.09-3.18(m,1H),3.24-3.40(m,2H),3.67-3.71(m,1H),3.73-4.12(m,4H)；MS m/z 385[M+H]⁺.

工序3

通过与参考例5相同的方法，由上述工序2的全部化合物，得到(2R)-2-{[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}吡咯烷-1-羧酸叔丁酯四丁基铵(定量)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.01(t,J＝7.4Hz,12H),1.34-1.51(m,8H),1.46(s,9H),1.55-1.78(m,10H),1.80-2.01(m,4H),2.11-2.23(m,1H),2.29-2.42(m,1H),2.88(br.d.,J＝11.2Hz,1H),3.21-3.43(m,10H),3.60-3.86(m,2H),3.88-4.07(m,2H),4.16-4.28(m,1H),4.34(br.s.,1H),10.62(br s,1H)；MS m/z 463[M-Bu₄N+2H]⁺.

使上述四丁基铵盐全部通过三氟乙酸脱保护，用十八烷基硅胶柱层析精制后，得到标题化合物77.4mg(3工序收率30％)。

¹H NMR(500MHz,D₂O)δ1.66-2.18(m,8H),3.14(d,J＝12.8Hz,1H),3.23(br.d.,J＝12.8Hz,1H),3.30(t,J＝7.3Hz,2H),3.89(ddd,J＝8.2,8.2,3.4Hz,1H),3.92-4.01(m,2H),4.09-4.18(m,2H)；MS m/z 365[M+H]⁺.

参考例14

(2S,5R)-7-氧代-N-[(3R)-哌啶-3-基甲氧基]-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-10)

[化学式52]

工序1

(3R)-3-{[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}哌啶-1-羧酸叔丁酯(IV-10)

通过与参考例8相同的方法，将由(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(390mg，1.41mmol)和(R)-3-((氨基氧)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(527mg)得到的粗生成物进行硅胶柱层析，得到标题化合物333mg(收率48％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.15-2.10(m,8H),1.45(s,9H),2.25-2.40(m,1H),2.70-3.08(m,4H),3.27-3.37(m,1H),3.65-4.00(m,5H),4.90(d,J＝11.2Hz,1H),5.05(d,J＝11.2Hz,1H),7.34-7.46(m,5H),9.22(br.s.,1H)；MS m/z 489[M+H]⁺.

工序2

(3R)-3-{[({[(2S,5R)-6-羟基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}哌啶-1-羧酸叔丁酯(V-10)

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ1.24-1.37(m,1H),1.40-1.56(m,1H),1.45(s,9H),1.64-1.73(m,1H),1.75-2.00(m,4H),2.03-2.13(m,1H),2.15-2.26(m,1H),2.65-2.95(m,2H),3.06(d,J＝12.0Hz,1H),3.13(br.d.,J＝12.0Hz,1H),3.67-3.91(m,5H),4.01-4.08(m,1H)；MS m/z 399[M+H]⁺.

工序3

通过与参考例5相同的方法，由上述工序2的全部化合物，得到(3R)-2-{[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}哌啶-1-羧酸叔丁酯四丁基铵(定量)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.01(dd,J＝7.6&6.8Hz,12H),1.11-1.99(m,23H),1.46(s,9H),2.12-2.24(m,1H),2.30-2.42(m,1H),2.67-2.96(m,3H),3.19-3.38(m,9H),3.70-3.99(m,5H),4.35(br.s.,1H),9.16(br.s.,1H)；MS m/z 477[M-Bu₄N]^-.

使上述四丁基铵盐全部通过三氟乙酸脱保护，用十八烷基硅胶柱层析精制后，得到标题化合物106mg(3工序收率41％)。

¹H NMR(400MHz,D₂O)δ1.16-1.28(m,1H),1.54-1.88(m,5H),1.92-2.16(m,3H),2.72(t,J＝12.2Hz,1H),2.81(ddd,J＝12.8&12.8&3.5Hz,1H),3.02(d,J＝12.0Hz,1H),3.15-3.28(m,2H),3.37-3.44(m,1H),3.70(dd,J＝10.3&7.6Hz,1H),3.79(dd,J＝10.3&5.0Hz,1H),3.88-3.94(m,1H),4.06-4.10(m,1H)；MS m/z 377[M-H]^-.

参考例15

(2S,5R)-7-氧代-N-[(3S)-吡咯烷-3-基氧]-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-11)

[化学式53]

工序1

(3S)-3-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(IV-11)

通过与参考例5相同的方法，将由(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(553mg，2.00mmol)和(S)-3-(氨基氧)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(606mg)得到的粗生成物进行硅胶柱层析，得到标题化合物920.4mg(定量)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.46(s,9H),1.61-1.68(m,1H),1.89-2.09(m,3H),2.15-2.19(m,1H),2.28-2.34(m,1H),2.75(d,J＝11.6Hz,1H),2.95-3.06(m,1H),3.31(br s,1H),3.35-3.68(m,4H),3.97(d,J＝7.6Hz,1H),4.60(br.d.,J＝23.2Hz,1H),4.90(d,J＝11.6Hz,1H),5.05(d,J＝11.6Hz,1H),7.26-7.43(m,5H),9.08(br.d.,J＝23.2Hz,1H)；MSm/z461[M+H]⁺.

工序2

(3S)-3-[({[(2S,5R)-6-羟基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(V-11)

通过与参考例5相同的方法，由上述工序1的化合物(869mg，1.89mmol)，得到标题化合物(定量)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ1.47(s,9H),1.75-2.12(m,4H),2.13-2.25(m,2H),3.05(d,J＝12.0Hz,1H),3.13(br.d.,J＝12.0Hz,1H),3.25-3.50(m,2H),3.61(br.d.,J＝13.2Hz,1H),3.70(br.s.,1H),3.86(br d,J＝7.2Hz,1H),4.32-4.38(m,1H),4.54-4.62(m,1H)；MS m/z 371[M+H]⁺.

工序3

通过与参考例5相同的方法，由上述工序2的全部化合物，得到(3S)-3-[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯四丁基铵(定量)。MS m/z 449[M-Bu₄N]^-.

使上述四丁基铵盐全部通过三氟乙酸脱保护，用十八烷基硅胶柱层析精制后，得到标题化合物170.7mg(3工序收率26％)。

¹H NMR(400MHz,D₂O)δ1.71-1.92(m,2H),1.95-2.18(m,3H),2.21-2.30(m,1H),3.07(d,J＝12.2Hz,1H),3.24(br.d.,J＝12.2Hz,1H),3.31-3.45(m,3H),3.51(d,J＝13.6Hz,1H),3.99(br.d.,J＝6.0Hz,1H),4.10-4.14(m,1H),4.72-4.77(m,1H)；MS m/z 349[M-H]^-.

参考例16

(2S,5R)-N-(氮杂环丁烷-3-基甲氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-12)

[化学式54]

工序1

3-{[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(IV-12)

通过与参考例8相同的方法，将由(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(553mg，2.00mmol)和3-((氨基氧)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(564mg)得到的粗生成物进行硅胶柱层析，得到标题化合物699.7mg(收率76％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.43(s,9H),1.54-1.70(m,1H),1.87-2.06(m,2H),2.27-2.35(m,1H),2.75(d,J＝11.6Hz,1H),2.80-2.90(m,1H),3.01(br.d.,J＝11.6Hz,1H),3.32(br.s.,1H),3.68-3.76(m,2H),3.94(br.d.,J＝7.6Hz,1H),4.00-4.15(m,4H),4.90(d,J＝11.8Hz,1H),5.05(d,J＝11.8Hz,1H),7.35-7.44(m,5H),9.08(br s,1H)；MS m/z 461[M+H]⁺.

工序2

3-{[({[(2S,5R)-6-羟基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(V-12)

通过与参考例5相同的方法，由上述工序1的化合物(642mg，1.39mmol)，得到标题化合物(定量)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ1.43(s,9H),1.74-1.85(m,1H),1.86-1.97(m,1H),2.04-2.13(m,1H),2.16-2.24(m,1H),2.84-2.94(m,1H),3.05(d,J＝11.6Hz,1H),3.13(br.d.,J＝11.6Hz,1H),3.68-3.82(m,3H),3.83(br.d.,J＝6.8Hz,1H),3.97-4.06(m,4H)；MS m/z371[M+H]⁺.

工序3

通过与参考例5相同的方法，由上述工序2的全部化合物，得到3-{[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]甲基}氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯四丁基铵(定量)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.01(t,J＝7.2Hz,12H),1.37-1.51(m,8H),1.46(s,9H),1.54-1.75(m,9H),1.82-1.97(m,1H),2.13-2.25(m,1H),2.29-2.40(m,1H),2.77-2.95(m,2H),3.24-3.40(m,9H),3.64-4.16(m,7H),4.36(br.s.,1H),9.16(br.s.,1H)；MS m/z 449[M-Bu₄N]^-.

使上述四丁基铵盐全部通过三氟乙酸脱保护，用十八烷基硅胶柱层析精制后，得到标题化合物164.7mg(3工序收率34％)。

¹H NMR(400MHz,D₂O)δ1.65-1.89(m,2H),1.92-2.06(m,2H),3.06(d,J＝12.4Hz,1H),3.10-3.22(m,2H),3.90-4.00(m,5H),4.07-4.14(m,3H)；MS m/z 351[M+H]⁺.

参考例17

(3aR,7aS)-2-羟基-3a,4,7,7a-四氢-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮

[化学式55]

使硫酸羟胺(24.975g，0.152mol)溶解于水(100mL)中，加入(3aR,7aS)-3a,4,7,7a-四氢异苯并呋喃-1,3-二酮(45.228g)。花费15分钟在混合物一点一点地加入25％氢氧化钠水溶液(50g)，在90℃搅拌2小时。将混合物冷却至室温，将析出的结晶抽滤取出，脱液30分钟。将湿结晶在50℃下真空干燥2日，得到标题化合物42.87g(收率87％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ2.20-2.31(m,2H),2.56-2.65(m,2H),3.08-3.14(m,2H),5.91(dt,J＝0.9,2.7Hz,2H)；MS m/z 166[M-H]^-.

参考例18

(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(3aR,7aS)-1,3-二氧代-3a,4,7,7a-四氢-1H-异吲哚-2(3H)-基酯

[化学式56]

工序1

(2S,5R)-5-((苄氧基)氨基)哌啶-1,2-二羧酸1-叔丁基酯2-((3aR,7aS)-1,3-二氧代-3a,4,7,7a-四氢-1H-异吲哚-2(3H)-基)酯

[化学式57]

使(2S,5R)-5-((苄氧基)氨基)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-羧酸(参考例3的工序1，3.504g，10mmol)溶解于脱水四氢呋喃(50mL)中，冷却至-20℃左右。在混合物中滴加氯甲酸异丁酯(1.51g)，接着，滴加三乙胺(2.17g)，在该温度下搅拌15分钟。接着，在反应液中加入(3aR,7aS)-2-羟基-3a,4,7,7a-四氢-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮(参考例17，1.84g)，在该温度下搅拌30分钟，进一步在室温下搅拌30分钟。将反应液用乙酸乙酯(200mL)稀释，用冰冷的10％柠檬酸(60mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(60mL)、饱和食盐水(60mL)依次洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤。将滤液减压浓缩所得到的残渣进行硅胶柱层析(己烷/乙酸乙酯＝2/1)，得到无色泡状固体的标题化合物4.689g(收率94％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.47(bs,9H),1.59-1.75(m,2H),2.04-2.32(m,2H),2.16-2.35(m,2H),2.61(d,J＝15.2Hz,2H),3.14-3.24(m,4H),4.15-4.22(m,1H),4.71(q,J＝11.6Hz,2H),5.03(bs,1H),5.97(bs,2H),7.26-7.38(m,5H)；MS m/z 500[M+H]⁺.

工序2

使上述工序1的化合物(4.689g，9.386mmol)溶解于脱水氯仿(50mL)中，加入三乙胺(1.40g)，进行冰冷。在混合物中加入三光气(1.09g)，搅拌0.5小时，通过TLC确认向标题化合物的反应结束。在冰冷下在混合物加入甲醇(0.255mL)，搅拌30分钟后，加入甲磺酸(8.89g)，搅拌30分钟，通过TLC确认向标题化合物的反应结束。将混合物滴加到冰冷的1M碳酸氢钾水溶液(11.1g/100mL)中，搅拌0.5小时，加入氯仿(30mL)进行分层，将有机层用1M盐酸(70mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(70mL)、饱和食盐水(70mL)依次洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。将残渣溶解于氯仿(16mL)中，加入己烷(24mL)，搅拌15分钟，进一步加入己烷(8mL)，搅拌15分钟熟化。将析出的固体过滤取出，用氯仿/己烷(2/3)的混合液洗涤，减压干燥，得到无色结晶性粉末的标题化合物3.51g(收率88％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.67-1.77(m,1H),2.08(d,J＝14.2Hz,1H),2.14-2.26(m,2H),2.30(d,J＝13.8Hz,2H),2.55-2.66(m,2H),3.10-3.24(m,4H),3.34(bs,1H),4.45(d,J＝6.4Hz,1H),4.91(d,J＝11.2Hz,1H),5.06(d,J＝11.4Hz,1H),5.97(bs,2H),7.34-7.45(m,5H)；MS m/z 426[M+H]⁺.

参考例19

(3aR,7aS)-2-羟基六氢-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮

[化学式58]

使硫酸羟胺(24.975g、0.152mol)溶解于水(75mL)中，加入(3aR,7aS)-六氢异苯并呋喃-1,3-二酮(48.000g)。花费15分钟在混合物一点一点地加入25％氢氧化钠水溶液(50g)，在90℃下搅拌1小时。将混合物冷却至室温，用氯仿50mL提取2次，用无水硫酸钠干燥过滤。将滤液减压浓缩，将残渣溶解于氯仿，过滤不溶物，将溶剂减压浓缩。在残渣中加入乙酸乙酯溶解，将溶液减压浓缩，进一步真空干燥2日，得到无色固体的标题化合物49.35g(收率94％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.45(dt,J＝3.0,5.9Hz,4H),1.71-1.90(m,4H),2.84-2.92(m,2H),6.01(brs,1H)；MS m/z 168[M-H]^-.

参考例20

(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(3aR,7aS)-1,3-二氧代六氢-1H-异吲哚-2(3H)-基酯

[化学式59]

工序1

(2S,5R)-5-((苄氧基)氨基)哌啶-1,2-二羧酸1-叔丁基酯2-((3aR,7aS)-1,3-二氧代六氢-1H-异吲哚-2(3H)-基)酯

[化学式60]

使(2S,5R)-5-((苄氧基)氨基)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-羧酸(参考例3的工序1，3.504g，10mmol)溶解于脱水四氢呋喃(50mL)中，冷却至-20℃左右。在混合物中滴加氯甲酸异丁酯(1.51g)，接着，滴加三乙胺(2.17g)，在该温度下搅拌15分钟。接着，在反应液中加入(3aR,7aS)-2-羟基六氢-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮(参考例19，1.86g)，在该温度下搅拌30分钟，进一步在室温下搅拌30分钟。将反应液用乙酸乙酯(200mL)稀释，用冰冷的10％柠檬酸(60mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(60mL)、饱和食盐水(60mL)依次洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤。将滤液减压浓缩所得到的残渣进行硅胶柱层析(己烷/乙酸乙酯＝2/1)，得带无色泡状固体的标题化合物4.521g(收率90％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.35-1.58(m,13H),1.62(bs,1H),1.76(bs,2H),1.90(bs,4H),1.95-2.15(m,2H),3.00(bs,2H),3.15-3.30(m,2H),4.16-4.25(m,1H),4.72(q,J＝11.6Hz,2H),5.30-5.53(m,1H),7.26-7.38(m,5H)；MS m/z 502[M+H]⁺.

工序2

使上述工序1的化合物(4.521g，9.01mmol)溶解于脱水氯仿(50mL)中，加入三乙胺(1.350g)，进行冰冷。在混合物中加入三光气(1.043g)，搅拌0.5小时，通过TLC确认向标题化合物的反应结束。在冰冷下在混合物中加入甲醇(0.245mL)，搅拌30分钟后，加入甲磺酸(8.53g)，搅拌30分钟，通过TLC确认向标题化合物的反应结束。将混合物滴加到冰冷的1M碳酸氢钾水溶液(10.668g/90mL)中，搅拌0.5小时，加入氯仿(33mL)进行分层，将有机层用1M盐酸(70mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(70mL)、饱和食盐水(70mL)依次洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。将残渣进行硅胶柱层析(氯仿/乙酸乙酯＝6/1)，得到无色固体的标题化合物3.106g(收率81％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ1.50(bs,4H),1.62(bs,1H),1.68-1.84(m,1H),1.91(bs,4H),2.04-2.27(m,2H),3.02(bs,2H),3.15(s,2H),3.35(bs,1H),4.47(d,J＝6.6Hz,1H),4.92(d,J＝11.2Hz,1H),5.07(d,J＝11.4Hz,1H),7.34-7.45(m,5H)；MS m/z 428[M+H]⁺.

实施例1

实施例1a

[化学式61]

将(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(4.80kg，17.373mol)的脱水乙酸乙酯(62L)溶液冷却至-30℃，依次滴加氯甲酸异丁酯(2.52kg)、三乙胺(1.85kg)，在-30℃下搅拌15分钟。用30分钟在反应液中加入2-(氨基氧)乙基氨基甲酸叔丁酯的脱水乙酸乙酯溶液(15wt％，23.45kg)(洗涤用脱水乙酸乙酯2L)，花费1小时升温至0℃。将混合物用8％柠檬酸水溶液(65L)、5％碳酸氢钠水溶液(60L)、水(60L)依次洗涤，浓缩至24L。在浓缩液中加入乙酸乙酯(24L)，进行2次置换浓缩至24L的操作，在所得到的浓缩液中加入乙酸乙酯(29L)、己烷(72L)，搅拌一整夜。在混合物中滴加己烷(82L)，搅拌2小时。将析出结晶过滤取出，用己烷洗涤，真空干燥，得到标题化合物5.51kg(收率76％)。该化合物的仪器数据与参考例5的工序1的数据一致。

实施例1b

[化学式62]

使(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸2,5-二氧代吡咯烷-1-基酯(参考例3，373mg，1mmol)溶解于脱水二氯甲烷(5mL)中，在冰冷下加入2-(氨基氧)乙基氨基甲酸叔丁酯(194mg)的脱水二氯甲烷(2mL，洗涤用1mL)溶液，搅拌1小时。将反应液用乙酸乙酯(65mL)稀释，用10％柠檬酸(20mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)、饱和食盐水(20mL)依次洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩，得到标题化合物362mg(收率83％)。该化合物的仪器数据与参考例5的工序1的数据一致。

实施例1c

[化学式63]

使(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(1R,2S,6R,7S)-3,5-二氧代-4-氮杂三环[5.2.1.0^2,6]癸-8-烯-4-基酯(参考例4，49.7g，113.6mmol)悬浮于脱水乙酸乙酯(650mL)，在室温下加入2-(氨基氧)乙基氨基甲酸叔丁酯(24.2g)的脱水乙酸乙酯(134mL)溶液和三乙胺(13.8g)，搅拌2.5小时。将反应液用乙酸乙酯(0.8L)稀释，用冰冷的0.25M盐酸(1L)、饱和碳酸氢钠水溶液(1L)、水(1L)依次洗涤，减压浓缩，得到标题化合物48.08g(收率98％，HPLC面积比99％以上)。该化合物的仪器数据与参考例5的工序1的数据一致。

实施例1d

[化学式64]

使(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(3aR,7aS)-1,3-二氧代-3a,4,7,7a-四氢-1H-异吲哚-2(3H)-基酯(参考例18，425mg，1mmol)溶解于脱水氯仿(5mL)中，在冰冷下加入2-(氨基氧)乙基氨基甲酸叔丁酯(211mg)的脱水乙酸乙酯溶液(1.41g)和三乙胺(121mg)，搅拌30分钟。将反应液用乙酸乙酯(75mL)稀释，用10％柠檬酸水溶液(35mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(35mL)、饱和食盐水(35mL)依次洗涤，用无水硫酸镁干燥，将滤液减压浓缩。将残渣进行硅胶柱层析(己烷/乙酸乙酯＝1/2)，得到标题化合物481mg(定量)。该化合物的仪器数据与参考例5的工序1的数据一致。

实施例1e

[化学式65]

使(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(3aR,7aS)-1,3-二氧代六氢-1H-异吲哚-2(3H)-基酯(参考例20，427mg，1mmol)溶解于脱水氯仿(5mL)，在冰冷下加入2-(氨基氧)乙基氨基甲酸叔丁酯(211mg)的脱水乙酸乙酯溶液(1.41g)和三乙胺(121mg)，搅拌30分钟。将反应液用乙酸乙酯(75mL)稀释，用10％柠檬酸水溶液(35mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(35mL)、饱和食盐水(35mL)依次洗涤，用无水硫酸镁干燥，将滤液减压浓缩。将残渣进行硅胶柱层析(己烷/乙酸乙酯＝1/2)，得到标题化合物418mg(收率96％)。该化合物的仪器数据与参考例5的工序1的数据一致。

实施例2

[化学式66]

在{2-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}氨基甲酸叔丁酯(IV-1，5.52kg，12.705mol)的甲醇溶液(85L)中，加入10％钯碳催化剂(含水50％，0.55kg)，在氢气压(0.1MPa)下，搅拌1小时。过滤催化剂，将固体用甲醇(25L)洗涤。将滤液合并，在溶液温度10℃以下减压浓缩至39L。进行2次在浓缩液中加入乙腈(44L)在溶液温度10℃以下置换浓缩至39L的操作，将混合物冷却至0℃，搅拌一整夜。将析出结晶过滤取出，用乙腈(24L)洗涤，真空干燥，得到标题化合物3.63kg(收率83％)。该化合物的仪器数据与参考例5的工序2的数据一致。

实施例3

实施例3a

[化学式67]

在乙腈(51L)中依次加入水(51mL)、{2-[({[(2S,5R)-6-羟基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}氨基甲酸叔丁酯(V-1，3.53kg，10.251mol)、三氧化硫-吡啶络合物(3.95kg)、2,6-二甲基吡啶(2.21kg)，在35-45℃下搅拌一整夜。将混合物过滤除去不溶物，将固体用乙腈(11L)洗涤，合并滤液浓缩至17L。将浓缩液冷却至10℃以下，用9％磷酸二氢钠水溶液(60L)、乙酸乙酯(113L)分层，将有机层再次用9％磷酸二氢钠水溶液(11L)提取。在所得到的水层中加入乙酸乙酯(113L)、30％硫酸氢四丁基铵的水溶液(12.87kg)、37％磷酸二氢钠水溶液(56.5kg)，搅拌15分钟。使有机层分层，用20％磷酸二氢钠水溶液(60L)洗涤，用无水硫酸镁(2.5kg)干燥，过滤后，减压浓缩。将在浓缩液中析出的标题化合物的结晶用乙酸乙酯溶解，将总液量调整为20L，得到标题化合物的乙酸乙酯溶液32.55kg(实质6.25kg，收率92％)。将该溶液不进一步精制而供给下一工序。

实施例3b由{2-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}氨基甲酸叔丁酯(IV-1)一步合成

[化学式68]

在{2-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}氨基甲酸叔丁酯(IV-1，515mg，1.16mmol)的异丙醇(7mL)溶液中加入水(5mL)、三氧化硫-三甲基胺络合物(196mg)、三乙胺(0.0407mL)、10％钯碳催化剂(含水53.3％，95.0mg)，在氢气氛围下，在室温下搅拌2小时。追加10％钯碳催化剂(含水53.3％，63.5mg)，在氢气氛围下，在室温下搅拌3小时后，用氩气置换，在室温下搅拌1小时。将反应液的催化剂用硅藻土过滤，用异丙醇/水(1/1，40mL)洗涤后，微孔过滤，用异丙醇/水(1/1，15mL)洗涤，将异丙醇减压馏去。在所得到的水溶液中加入磷酸二氢钠(5.29g)、乙酸乙酯(20mL)、硫酸氢四丁基铵(476mg)，在室温下搅拌10分钟后，用乙酸乙酯提取2次。将有机层用硫酸钠干燥，过滤，浓缩后，得到标题化合物702mg(收率91％)。

实施例3c由{2-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}氨基甲酸叔丁酯(IV-1)连续合成

[化学式69]

在{2-[({[(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}氨基甲酸叔丁酯(IV-1，5.0g，11.51mmol)的异丙醇(80mL)溶液中加入10％钯碳催化剂(含水50％，0.5g)，在氢气氛围下搅拌2小时。将反应液的催化剂用硅藻土过滤，将固体用异丙醇(15mL)洗涤，合并滤液，加入水(47.5mL)、三氧化硫-三甲基胺络合物(1.8g)、三乙胺(0.237g)在25-30℃下搅拌24小时。将混合物减压浓缩至47mL，加入磷酸二氢钠(11.87g)、乙酸乙酯(200mL)、硫酸氢四丁基铵(4.688g)，搅拌10分钟。使有机层分层，将水层进一步用乙酸乙酯(2×100mL)提取，合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤。将滤液的有机溶剂减压浓缩，得到标题化合物的乙酸乙酯溶液(实质6.522g，收率85％)

实施例4

(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1-CR)

[化学式70]

实施例4a

将{2-[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}氨基甲酸叔丁酯四丁基铵(VI-1，788g，实质467.1g，0.701mol)的二氯甲烷(934mL)溶液在氮气气流下冷却至-20℃，用15分钟滴加三氟乙酸(934mL)，升温至0℃，搅拌1小时。将反应液冷却至-20℃，滴加二异丙醚(4.17L)，使混合物升温至-6℃，搅拌1小时。过滤沉淀，用二异丙醚(2×1L)悬浮洗涤，将湿固体真空干燥，得到标题化合物342.08g(实质222.35g，收率98％，HPLC面积比96.1％，CE/TFA27mol％)。

实施例4b

将{2-[({[(2S,5R)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛-2-基]羰基}氨基)氧]乙基}氨基甲酸叔丁酯四丁基铵(VI-1，乙酸乙酯溶液15.60kg，实质2.98kg)冷却，在溶液温度0℃以下浓缩至9L。在浓缩液中加入二氯甲烷(9L)，在氮气气流下将混合物冷却至-20℃。在-5℃以下在混合物中用约1小时滴加三氟乙酸(16.5L)，在-5-0℃下搅拌1小时。在反应液中在7℃以下分次添加冷却至0℃的乙酸乙酯(4×8.3L，24.6L，合计57.8L)，在0℃下搅拌一整夜。过滤沉淀，用乙酸乙酯(13.5L，9L)悬浮洗涤，真空干燥一整夜，得到标题化合物1.74kg(实质1.43kg，收率99％，HPLC面积比99.1％，CE/TFA10mol％，GC/EtOAc14％)。

实施例5

(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1)的I型结晶

实施例5a

使0.5M乙酸缓冲液(pH5.5，35mL)冰冷，交替加入(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1-CR，36g)和冷却的5M氢氧化钠水溶液，将pH调整为5.5，附加到十八烷基硅胶柱层析(3.6L)，用水洗提。收集活性组分，在水浴温度35℃下减压浓缩，将析出的结晶真空干燥一整夜。将所得到的结晶2.10g粉碎后，在冰冷下加入异丙醇/水(19/1，13mL)，在0℃下搅拌1小时。将悬浮液过滤，用冷异丙醇/水(19/1，80mL)洗涤，将所得到的结晶用真空泵干燥后，得到标题化合物1.68g(收率80％)。DSC吸热峰：111℃。在60％异丙醇水溶液中的溶解度：0.44％(10℃)、0.48％(20℃)。标题化合物在粉末X射线衍射图中，显示出如下述表4和图1所示的特征峰图形。另外，测定时，粉末X射线衍射装置使用株式会社リガク的RINT2100，作为X射线源，以CuKα1、管电压40kV、管电流40mA、扫描速度4°/min、扫描范围2θ＝3至40°来测定。

[表4]

实施例5b

使(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1-CR，实质4.253g)溶解于0.2M磷酸缓冲液(pH6.5，73mL)中，使pH为5.5，用水(20mL)稀释。将混合物浓缩至130mL，进行树脂精制(SP207，260mL)，用水(238mL)、10％异丙醇水溶液(780mL)洗提。收集活性组分，减压浓缩至30mL，投入活性炭(精制白鹭，87mg)，在室温下搅拌30分钟。将活性炭用薄膜过滤器过滤，将滤液冻干，得到非晶质形态的(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1)4.07g(收率95.7％)。使该非晶质形态的化合物(0.2g)溶解于水(0.8mL)中，在室温下加入异丙醇(1.2mL)，接种I型结晶(实施例5a，1mg)，用搅拌子搅拌3小时，将析出结晶过滤，干燥，得到标题化合物0.1g(收率50％)。该结晶在粉末X射线衍射图中显示出与实施例5a的结晶相同的峰图形。

实施例5c

交替加入(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1-CR，实质2.113g)和0.2M磷酸缓冲液(pH6.5，73mL)，调整pH为4.6，用水(27mL)稀释。将混合物减压浓缩至80mL后，用0.2M磷酸缓冲液(pH6.5，16mL)使pH为5.4，用水(48mL)稀释。将该混合物进行树脂精制(SP207，240mL)，用水(276mL)、10％异丙醇水溶液(720mL)洗提。收集活性组分，减压浓缩至12mL，投入活性炭(精制白鹭，40mg)，在室温下搅拌30分钟。将活性炭用薄膜过滤器过滤，用水稀释至14mL。在水溶液中接种I型结晶(实施例5b，6mg)，在室温下用搅拌子搅拌而得到的悬浮液中花费1小时滴加异丙醇(84mL)。滴加结束后，搅拌3小时，将析出结晶过滤，干燥，得到标题化合物1.834g(收率86.8％)。水分：5.37％，换算为脱水物含量为95.3％，HPLC面积比为99.3％。该结晶在粉末X射线衍射图中显示出与实施例5a的结晶相同的峰图形。

实施例6

(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1)的II型结晶

实施例6a

将0.2M磷酸缓冲液(pH6.5，0.8L)冷却至10℃以下，搅拌下一点一点地交替加入(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1-CR，实质49.96g)和冷却的0.2M磷酸缓冲液(pH6.5)，在pH为4.2-5.5之间调整pH，最终调整为pH5.5。将混合物用水稀释(总量1.8L)，在溶液温度18℃以下减压浓缩至1.6L。将浓缩液用水稀释至1.8L(HPLC面积比96.7％)，进行树脂(セパビーズSP207，3L)精制，用水(0.83L)和10％异丙醇水溶液洗提，收集活性组分。将活性组分合并(1.5L)，在溶液温度15℃以下减压浓缩至0.5L，加入活性炭(0.88g)，搅拌30分钟。将活性炭用薄膜过滤器过滤，用水(0.05L×2)洗涤。将滤液合并，在溶液温度15℃以下减压浓缩至0.2L，将溶液温度调整至10-15℃，用10分钟在混合物中滴加异丙醇(0.25L)，搅拌1小时后，进一步用15分钟滴加异丙醇(0.6L)。将搅拌混合物1小时析出的结晶过滤取出，用异丙醇(0.2L)洗涤，真空干燥使湿结晶的产品温度为20℃，得到标题化合物44.69g(收率85％，水分5.9％，HPLC面积比100％)。DSC吸热峰：92℃。在60％异丙醇水溶液中的溶解度：0.67％(10℃)、0.74％(20℃)。

此外，标题化合物在粉末X射线衍射图中显示出如下述表5和图2所示的特征峰图形。另外，测定时，粉末X射线衍射装置使用株式会社リガク的RINT2100，作为X射线源，以CuKα1、管电压40kV、管电流40mA、扫描速度4°/min、扫描范围2θ＝3至40°来测定。

[表5]

粉末X射线数据

II型结晶的粉末X射线衍射

实施例6b

(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1)的II型结晶的转变实验

取少量实施例6a的结晶悬浮液，用搅拌子在室温下搅拌1日，收集析出结晶，附加到粉末X射线结晶衍射，未观察到向其它结晶形态的转变。

实施例7

(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1)的III型结晶

实施例7a

将0.2M磷酸缓冲液(pH6.5，3.0L)冷却至10℃以下，搅拌下一点一点地交替加入(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1-CR，实质133.334g)和冷却的0.2M磷酸缓冲液(pH6.5，1.8L)，在pH为5.1-5.5之间调整pH，最终调整为pH5.3。将混合物在溶液温度18℃以下减压浓缩至3.6L。将浓缩液的pH用0.2M磷酸缓冲液(pH6.5)调整为pH5.5，用水稀释至4.8L，进行树脂(セパビーズSP207，7L)精制，用水(7.2L)和10％异丙醇水溶液洗提，收集活性组分。将活性组分合并(3.1L)，在溶液温度15℃以下减压浓缩至1.8L，加入活性炭(2.66g)，搅拌30分钟。将活性炭用薄膜过滤器过滤，用水(0.39L)洗涤。将滤液合并，在溶液温度18℃以下减压浓缩至0.6L。将浓缩液的溶液温度调整至20-25℃，滴加异丙醇(0.77L)后，接种II型结晶(实施例6a，0.63g)，搅拌1小时。在混合物中进一步花费1.5小时滴加异丙醇(1.93L)，搅拌30分钟。将析出的结晶过滤取出，用异丙醇(1L)洗涤，真空干燥使湿结晶的产品温度为20℃，得到含有少量II型结晶的标题化合物127.3g(收率90％，水分5.3％，HPLC面积比99.9％)。将该工序中所得到的结晶作为结晶种实施同样的工序，将进一步得到的结晶作为下一次的结晶种，由此通过粉末X射线结晶衍射得到单一的III型结晶的标题化合物。DSC吸热峰：102℃。在60％异丙醇水溶液中的溶解度：0.76％(10℃)、0.80％(20℃)。

标题化合物在粉末X射线衍射图中显示出如下述表6和图3所示的特征峰图形。另外，测定时，粉末X射线衍射装置使用株式会社リガク的RINT2100，作为X射线源，以CuKα1、管电压40kV、管电流40mA、扫描速度4°/min、扫描范围2θ＝3至40°来测定。

[表6]

粉末X射线数据

III型结晶的粉末X射线衍射

实施例7b

将0.2M磷酸缓冲液(pH6.5，7.2L)冷却至10℃以下，搅拌下一点一点地交替加入(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1-CR，实质1.2kg)和冰冷的0.2M磷酸缓冲液(pH6.5，3.5L)，在pH为4.2-4.8之间调整pH，最终调整至pH4.6。将混合物用水(19.3L)稀释(总量30L)，在溶液温度18℃以下减压浓缩至24L。将浓缩液的pH用0.2M磷酸缓冲液(pH6.5，2.4L)调整至pH5.4(HPLC面积比98.5％)，用水43.2L稀释，进行树脂(セパビーズSP207，75L)精制，用水(83L)和10％异丙醇水溶液洗提，收集活性组分。将活性组分合并(33L)，在溶液温度15℃以下下浓缩至7.2L，加入活性炭(24g)，搅拌30分钟。将活性炭用薄膜过滤器过滤，用水(0.4L×2)洗涤。将滤液合并，将溶液温度调整至20-25℃，接种III型结晶(实施例7a，3.6g)。在混合物中花费1小时滴加异丙醇(50.4L)，搅拌一整夜。将析出的结晶过滤取出，用异丙醇(4.8L)洗涤，真空干燥使湿结晶的产品温度为20℃，得到标题化合物1.17kg(收率90％，水分5.3％，HPLC面积比100％)。该结晶在粉末X射线衍射图中显示出与实施例7a的结晶相同的峰图形。

实施例7c

(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1)的III型结晶的转变实验

在实施例7a的工序中，取少量接种后的悬浮液和滴加异丙醇后的悬浮液，分别用搅拌子在室温下搅拌1日、4日，收集析出结晶，进行粉末X射线结晶衍射，未观察到向其它结晶形态的转变。

实施例7d

(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1)的III型结晶的XRD-DSC实验

通过XRD-DSC观察实施例7a的III型结晶经加热的结晶相的変化。加热、冷却条件为60％RH恒定，以升降温速度2℃/min由室温升温至160℃、冷却至63℃，连续地测定试样的DSC和XRD。另外，测定时，粉末X射线衍射装置使用株式会社リガク的Smart Lab和XRD-DSC，作为X射线源，以CuKα1、管电压45kV、管电流200mA、扫描速度80°/min、扫描范围2θ＝5至35°来测定。

实施例8

(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1)的IV型结晶

实施例8a

使实施例7a的III型结晶0.20g溶解于水2mL，搅拌下滴加甲醇(30mL)，在20-25℃下静置一整夜。将混合物过滤，用甲醇(2×2mL)洗涤，在室温下真空干燥一整夜，得到标题化合物0.13g(收率68％)。

标题化合物在粉末X射线衍射图中显示出如下述表7和图4所示的特征峰图形。另外，测定时，粉末X射线衍射装置使用株式会社リガク的RINT2100，作为X射线源，以CuKα1、管电压40kV、管电流40mA、扫描速度4°/min、扫描范围2θ＝3至40°来测定。

[表7]

粉末X射线数据

IV型结晶的粉末X射线衍射

实施例8b

在实施例7a的III型结晶25g中加入甲醇(200mL)，在20-25℃搅拌3.5小时。将混合物过滤，用甲醇(2×20mL)洗涤，在室温下真空干燥一整夜，得到标题化合物23g(收率99％)。该结晶在粉末X射线衍射图中显示出与实施例8a的结晶相同的峰图形。

实施例8c

在实施例7a的III型结晶25g中加入乙醇(200mL)，在20-25℃下搅拌3.5小时。将混合物过滤，用乙醇(2×20mL)洗涤，在室温下真空干燥一整夜，得到标题化合物23g(收率99％)。该结晶在粉末X射线衍射图中显示出与实施例8a的结晶相同的峰图形。

实施例8d

(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1)的IV型结晶的转变实验

取实施例8a-c的IV型结晶，加入异丙醇/水(6/1)，在25℃或40℃下悬浮搅拌1周。在12小时后、24小时后(1日)、48小时后(2日)、72小时后(3日)、96小时后(4日)及168小时后(1周)取样，通风干燥后，附加到粉末X射线衍射，在任意的搅拌时间均未观察到向其它结晶形态的转变。

实施例9a

(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1)的I-IV型结晶的稳定性评价

使实施例7a的III型结晶溶解于水中，冻干，得到非晶体的(2S,5R)-N-(2-氨基乙氧基)-7-氧代-6-(磺氧基)-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-甲酰胺(VII-1)。此外，将该非晶体的化合物和实施例5-8的I-IV型结晶分别称量到螺纹管中，实施各温湿度条件下稳定性试验。相关物质、含量、水分的测定方法如以下所述。结果如表9所示。

Claims

1.一种下述式(VII)表示的化合物的制备方法，其特征在于，使下述式(III)表示的化合物与化合物：R³ONH₂反应，形成下述式(IV)表示的化合物，在氢气氛围下与钯碳催化剂进行处理，同时或连续地在含水溶剂中在催化剂量的碱存在下通过三氧化硫-三甲基胺络合物进行硫酸化反应，用硫酸氢四丁基铵处理，形成下述式(VI)表示的化合物后，在侧链R³ONHC(＝O)-具有保护基时，用酸将该保护基除去，接着，在反应液中加入不良溶剂，使粗生成物沉淀化，形成下述式(VII-CR)表示的粗化合物后，交替加入式(VII-CR)表示的粗化合物和冰冷的缓冲液形成pH4-5.5的溶液，加入不良溶剂，进行结晶化，形成下述式(VII)表示的化合物，

[化学式80]

上述各式中，OBn表示苄氧基，R¹表示2,5-二氧代吡咯烷-1-基、1,3-二氧代-3a,4,7,7a-四氢-1H-异吲哚-2(3H)-基、1,3-二氧代六氢-1H-异吲哚-2(3H)-基或3,5-二氧代-4-氮杂三环[5.2.1.0^2,6]癸-8-烯-4-基，R³表示C_1-6烷基或杂环基；R³可被0至5个R⁴修饰，R⁴也可以连续地取代；在此，R⁴为C_1-6烷基、杂环基、R⁵(R⁶)N-或保护基；此外，R⁵和R⁶各自独立地表示氢或C_1-6烷基，或一起形成杂环基；进而，R³、R⁵及R⁶可在任意的位置闭环。

2.一种下述式(IV)表示的化合物的制备方法，其特征在于，使下述式(III)表示的化合物与化合物：R³ONH₂反应，形成下述式(IV)表示的化合物，

上述各式中，R¹、R³及OBn如权利要求1所述。

3.一种下述式(VI)表示的化合物的制备方法，其特征在于，将下述式(IV)表示的化合物在氢气氛围下与钯碳催化剂进行处理，同时或连续地在含水溶剂中在催化剂量的碱存在下通过三氧化硫-三甲基胺络合物进行硫酸化反应，用硫酸氢四丁基铵处理，形成下述式(VI)表示的化合物，

上述各式中，R³和OBn如权利要求1所述。

4.一种下述式(VII-CR)表示的粗化合物的制备方法，其特征在于，下述式(VI)表示的化合物在侧链R³ONHC(＝O)-具有保护基时，用酸将该保护基除去，接着，在反应液中加入酯系不良溶剂，使粗生成物沉淀化，形成下述式(VII-CR)表示的粗化合物，

上述各式中，R³如权利要求1所述。

5.一种下述式(VII)表示的化合物的制备方法，其特征在于，交替加入下述式(VII-CR)表示的粗化合物和冰冷的缓冲液形成pH4-5.5的溶液，加入醇系不良溶剂，进行结晶化，形成下述式(VII)表示的化合物，

上述各式中，R³如权利要求1所述。

6.根据权利要求1-5中任意一项所述的制备方法，其中，制备式(IV)、(VI)、(VII-CR)、(VII)中R³为选自下述基团的化合物，

2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基、

2-氨基乙基、

2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)乙基、

2-(甲基氨基)乙基、

2-((叔丁氧基羰基)(异丙基)氨基)乙基、

2-(异丙基氨基)乙基、

2-(二甲基氨基)乙基、

(2S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙基、

(2S)-2-(氨基)丙基、

(2R)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙基、

(2R)-2-(氨基)丙基、

3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙基、

3-(氨基)丙基、

(2S)-叔丁氧基羰基氮杂环丁烷-2-基甲基、

(2S)-氮杂环丁烷-2-基甲基、

(2R)-叔丁氧基羰基吡咯烷-2-基甲基

(2R)-吡咯烷-2-基甲基

(3R)-叔丁氧基羰基哌啶-3-基甲基、

(3R)-哌啶-3-基甲基、

(3S)-叔丁氧基羰基吡咯烷-3-基、

(3S)-吡咯烷-3-基、

1-(叔丁氧基羰基)氮杂环丁烷-3-基、

氮杂环丁烷-3-基。

7.一种下述式(VII-1)表示的化合物的制备方法，其特征在于，使下述式(III)表示的化合物在碱存在下与2-(氨基氧)乙基氨基甲酸叔丁酯反应，形成下述式(IV-1)表示的化合物，在氢气氛围下与钯碳催化剂进行处理，同时或连续地在含水溶剂中在催化剂量的碱存在下通过三氧化硫-三甲基胺络合物进行硫酸化反应，与硫酸氢四丁基铵进行处理，形成下述式(VI-1)表示的化合物后，用三氟乙酸除去叔丁氧基羰基(Boc)，接着，在反应液中滴加乙酸乙酯，由此使粗生成物沉淀化，形成下述式(VII-1-CR)表示的粗化合物后，交替加入式(VII-1-CR)表示的粗化合物和冰冷的磷酸缓冲液形成pH4-5.5的溶液，根据需要用合成吸附剂脱盐后浓缩，调温后根据需要进行接种，加入异丙醇进行结晶化，形成下述式(VII-1)表示的化合物，

[化学式93]

上述各式中，R¹及OBn如权利要求1所述。

8.一种下述式(IV-1)表示的化合物的制备方法，其特征在于，使下述式(III)表示的化合物在碱存在下与2-(氨基氧)乙基氨基甲酸叔丁酯反应，形成下述式(IV-1)表示的化合物，

上述各式中，R¹及OBn如权利要求1所述。

9.一种下述式(VI-1)表示的化合物的制备方法，其特征在于，将下述式(IV-1)表示的化合物在氢气氛围下与钯碳催化剂进行处理，同时或连续地在含水溶剂中在催化剂量的碱存在下通过三氧化硫-三甲基胺络合物进行硫酸化反应，与硫酸氢四丁基铵进行处理，形成下述式(VI-1)表示的化合物，

上述各式中，OBn如权利要求1所述。

10.一种下述式(VII-1-CR)表示的粗化合物的制备方法，其特征在于，将下述式(VI-1)表示的化合物用三氟乙酸除去叔丁氧基羰基(Boc)，接着，在反应液中滴加乙酸乙酯，由此使粗生成物沉淀化，形成下述式(VII-1-CR)表示的粗化合物，

11.一种下述式(VII-1)表示的化合物的制备方法，其特征在于，交替加入下述式(VII-1-CR)表示的粗化合物和冰冷的磷酸缓冲液，形成pH4-5.5的溶液，根据需要用合成吸附剂脱盐后浓缩，调温后根据需要进行接种，加入异丙醇进行结晶化，形成下述式(VII-1)表示的化合物，

12.一种式(VII-1)表示的化合物的I型结晶，其特征在于，在粉末X射线衍射图中，在晶面间距(d)7.34、5.66、5.53、5.30、5.02、4.66、4.37、4.28、4.06、3.68、3.62、3.47、3.36、3.30、3.16、3.11、3.03、2.99及

具有特征峰，

[化学式102]

13.根据权利要求1-11中任意一项所述的制备方法，其中，制备权利要求12所述的上述式的I型结晶。

14.一种权利要求12所述的I型结晶的制备方法，其特征在于，将式(VII-1)表示的化合物的溶液调温至20-25℃，接种I型结晶，搅拌后进一步加入异丙醇。

15.一种权利要求12所述的I型结晶的应用，其特征在于，用于制备含有根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

16.一种权利要求12所述的I型结晶的应用，其特征在于，用于制备含有选自由氨苄西林、阿莫西林、哌拉西林、替卡西林、氟氧头孢、头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、头孢洛林、头孢洛扎、亚胺培南、美罗培南、比阿培南、多尼培南、厄他培南和氨曲南组成的组中的β-内酰胺系抗生素、和根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

17.一种式(VII-1)表示的化合物的II型结晶，其特征在于，在粉末X射线衍射图中，在晶面间距(d)9.46、5.62、5.23、5.10、5.00、4.91、4.67、4.45、4.29、3.96、3.78、3.71、3.52、3.24、3.18、3.10、3.02、2.88、2.81、2.77、2.67、2.50及

具有特征峰，

[化学式103]

18.根据权利要求1-11中任意一项所述的制备方法，其中，制备权利要求17所述的II型结晶。

19.一种权利要求17所述的II型结晶的制备方法，其特征在于，将式(VII-1)表示的化合物的溶液调温至10-15℃，加入异丙醇进行搅拌。

20.一种权利要求17所述的II型结晶的应用，其特征在于，用于制备含有根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

21.一种权利要求17所述的II型结晶的应用，其特征在于，用于制备含有选自由氨苄西林、阿莫西林、哌拉西林、替卡西林、氟氧头孢、头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、头孢洛林、头孢洛扎、亚胺培南、美罗培南、比阿培南、多尼培南、厄他培南和氨曲南组成的组中的β-内酰胺系抗生素、和根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

22.一种式(VII-1)表示的化合物的III型结晶，其特征在于，在粉末X射线衍射图中，在晶面间距(d)8.32、6.10、5.98、5.51、5.16、5.07、4.85、4.70、4.61、4.35、4.20、4.06、4.00、3.95、3.77、3.73、3.65、3.42、3.39、3.36、3.26、3.23、3.13、3.09、2.99、2.81及

具有特征峰，

[化学式104]

23.根据权利要求1-11中任意一项所述的制备方法，其中，制备权利要求22所述的III型结晶。

24.一种权利要求22所述的III型结晶的制备方法，其特征在于，将式(VII-1)表示的化合物的溶液调温至20-25℃，接种III型结晶，加入异丙醇进行搅拌。

25.一种权利要求22所述的III型结晶的应用，其特征在于，用于制备含有根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

26.一种权利要求22所述的III型结晶的应用，其特征在于，用于制备含有选自由氨苄西林、阿莫西林、哌拉西林、替卡西林、氟氧头孢、头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、头孢洛林、头孢洛扎、亚胺培南、美罗培南、比阿培南、多尼培南、厄他培南和氨曲南组成的组中的β-内酰胺系抗生素、和根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

27.一种式(VII-1)表示的化合物的IV型结晶，其特征在于，在粉末X射线衍射图中，在晶面间距(d)7.88、6.41、5.20、4.67、4.50、4.02、3.81、3.75、3.70、3.62、3.38、3.23、3.20及

具有特征峰，

[化学式105]

28.根据权利要求1-11中任意一项所述的制备方法，其中，制备权利要求27所述的IV型结晶。

29.一种权利要求27所述的IV型结晶，其特征在于，将式(VII-1)表示的化合物的溶液调温至20-25℃，加入甲醇进行搅拌。

30.一种权利要求27所述的IV型结晶的制备方法，其特征在于，将权利要求12、17或22所述的I、II或III型结晶在甲醇、乙醇或异丙醇中搅拌。

31.一种权利要求27所述的IV型结晶的应用，其特征在于，用于制备含有根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

32.一种权利要求27所述的IV型结晶的应用，其特征在于，用于制备含有选自由氨苄西林、阿莫西林、哌拉西林、替卡西林、氟氧头孢、头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、头孢洛林、头孢洛扎、亚胺培南、美罗培南、比阿培南、多尼培南、厄他培南和氨曲南组成的组中的β-内酰胺系抗生素、和根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

33.一种权利要求12、17、22或27所述的I、II、III或IV型结晶的混合物的应用，其特征在于，用于制备含有根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

34.一种权利要求12、17、22或27所述的I、II、III或IV型结晶的混合物的应用，其特征在于，用于制备含有选自由氨苄西林、阿莫西林、哌拉西林、替卡西林、氟氧头孢、头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、头孢洛林、头孢洛扎、亚胺培南、美罗培南、比阿培南、多尼培南、厄他培南和氨曲南组成的组中的β-内酰胺系抗生素、和根据需要的医学上容许的载体而成的医药组合物。

35.一种医药组合物，其特征在于，所述医药组合物含有选自由氨苄西林、阿莫西林、哌拉西林、替卡西林、氟氧头孢、头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、头孢吡肟、头孢洛林、头孢洛扎、亚胺培南、美罗培南、比阿培南、多尼培南、厄他培南和氨曲南组成的组中的β-内酰胺系抗生素、和根据需要的医学上容许的载体。