CN119836296A - 用il-7蛋白和vegf拮抗剂的组合治疗肿瘤的方法 - Google Patents

Abstract

本公开涉及用IL‑7蛋白与VEGF拮抗剂的组合治疗癌症(或肿瘤)的方法。在一些方面，本文提供的方法还包括向受试者施用另外的治疗剂(例如免疫检查点抑制剂)。

Description

用IL-7蛋白和VEGF拮抗剂的组合治疗肿瘤的方法

相关申请的交叉引用

本PCT申请要求2021年12月30日提交的美国临时申请第63/295,336号和2022年1月3日提交的韩国专利申请第10-2022-0000051号的优先权权益，所述申请的全部内容以引用的方式整体并入本文。

对经由EFS-WEB以电子方式提交的序列表的引用

在与本申请一起提交的.XML文件(文件名4241_029PC02_Seque nceListing_ST26；大小：122,317字节；创建日期：2022年12月30日)中以电子方式提交的序列表的内容以引用的方式整体并入本文。

技术领域

本公开总体上涉及可用于治疗受试者(例如人受试者)中的肿瘤的组合治疗方案。具体而言，本文提供的治疗方案包括IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合。在一些方面，治疗方案还包括另外的治疗剂，例如免疫检查点抑制剂。本文提供了使用此类治疗方案治疗肿瘤的方法，其包括增强抗肿瘤免疫应答。

背景技术

人癌症包含许多遗传和表观遗传改变，产生免疫系统可识别的新抗原。Sjoblom等人,Science 314:268-74(2006)。包含T淋巴细胞和B淋巴细胞的适应性免疫系统具有强大的抗癌潜力，对多种肿瘤抗原具有广泛的应答能力和高度特异性。此外，免疫系统表现出相当大的可塑性和记忆元件。成功利用适应性免疫系统的所有这些属性将使免疫疗法在所有癌症治疗模式中为独特的。

近年来，已很好地建立了癌症免疫疗法，并且其现在已成为可用于许多癌症患者的更成功的治疗选择之一。Scott,A.M.,等人,Cancer Immun 12:14(2012)。除了靶向参与癌细胞增殖和存活的抗原外，抗体还可以激活或拮抗在癌症免疫监视中重要的免疫途径。并且，经过大量努力，已成功开发了若干种免疫检查点途径抑制剂，其中一些已获得食品和药物管理局(Food and Drug Administration)的批准，例如抗CTLA-4抗体：伊匹单抗(ipilimumab)抗PD-1抗体：纳武单抗(nivolumab)帕博利珠单抗(pembrolizumab)和抗PD-L1抗体：阿特珠单抗(atezolizumab)度伐利尤单抗(durvalumab)阿维鲁单抗(avelumab)

尽管取得了这些进步，但患有某些恶性肿瘤(例如，转移性或难治性实体瘤)的患者的预后仍然很差。仅一部分此类患者实际上经历了长期癌症缓解，许多患者对抗体没有反应，或者最初有反应但最终对抗体产生抗性。Sharma,P.,等人,Cell 168(4):707-723(2017)。此外，许多癌症患者淋巴细胞减少，因为已知许多可用的标准护理癌症治疗(例如，化学疗法和放射疗法)会引起淋巴细胞减少症。Grossman,S.A.,等人,J Natl Compr CancNetw 13(10):1225-31(2015)。检查点抑制剂，诸如抗PD-1抗体，已经显示在此类癌症患者中的功效有限。Yarchoan,M.,等人,J Clin Oncol 35:e14512(2017)。因此，对于癌症患者，包括淋巴细胞减少症患者，仍然需要具有可接受的安全特性和高功效的新治疗选项。

发明内容

本文提供了一种治疗有需要的受试者的肿瘤的方法，其包括向受试者施用IL-7蛋白与血管内皮生长因子(“VEGF”)的拮抗剂(“VEGF拮抗剂”)的组合。

在一些方面，在施用后受试者的肿瘤体积减小。在一些方面，在施用后肿瘤体积减小至少约5％、至少约10％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％或约100％。

本文还提供了一种增强有需要的受试者的抗肿瘤免疫应答的方法，其包括向受试者施用IL-7蛋白与血管内皮生长因子(“VEGF”)拮抗剂(“VEGF拮抗剂”)的组合。

在一些方面，在施用后受试者的抗肿瘤免疫应答增加至少约1倍、至少约2倍、至少约3倍、至少约4倍、至少约5倍、至少约10倍、至少约15倍、至少约20倍、至少约25倍、至少约30倍、至少约40倍或至少约50倍。在一些方面，增加的抗肿瘤免疫应答包括：(i)肿瘤体积减小；(ii)肿瘤特异性T细胞的效应子活性增加；(iii)肿瘤特异性效应T细胞数量增加；(iv)肿瘤中肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)数量增加；(v)肿瘤中髓源性抑制细胞(MDSC)数量减少；(vi)肿瘤中调节性T细胞(Treg)数量减少；(vii)受试者存活持续时间延长；(viii)肿瘤、肿瘤引流淋巴结(TDLN)或两者中CD8+T细胞上TOX表达降低；(ix)肿瘤、TDLN或两者中干细胞样T细胞数量增加；或(x)其组合。

在一些方面，将IL-7蛋白和VEGF拮抗剂同时施用至受试者。在一些方面，将IL-7蛋白和VEGF拮抗剂依次施用至受试者。

在一些方面，向受试者施用另外的治疗剂。在一些方面，另外的治疗剂包括免疫检查点抑制剂、免疫检查点活化剂、标准护理治疗或其组合。

在一些方面，免疫检查点抑制剂包括CTLA-4拮抗剂(例如，抗CTLA-4抗体)、PD-1拮抗剂(例如，抗PD-1抗体、抗PD-L1抗体)、TIM-3拮抗剂(例如，抗TIM-3抗体)或其组合。在一些方面，免疫检查点活化剂包括OX40激动剂(例如，抗OX40抗体)、LAG-3激动剂(例如，抗LAG-3抗体)、4-1BB(CD137)激动剂(例如，抗CD137抗体)、GITR激动剂(例如，抗GITR抗体)或其组合。在一些方面，标准护理治疗包括化学疗法、放射或两者。

在一些方面，IL-7蛋白不是野生型IL-7。

在一些方面，IL-7蛋白包含由1至10个氨基酸残基组成的寡肽。在一些方面，寡肽包括蛋氨酸(M)、甘氨酸(G)、蛋氨酸-蛋氨酸(MM)、甘氨酸-甘氨酸(GG)、蛋氨酸-甘氨酸(MG)、甘氨酸-蛋氨酸(GM)、蛋氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸(MMM)、蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(MMG)、蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(MGM)、甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸(GMM)、蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸(MGG)、甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(GMG)、甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(GGM)、甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GGG)、蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(MGGM)(SEQ ID NO:41)、蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸(MMGG)(SEQ ID NO:42)、甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸(GGMM)(SEQ ID NO:43)、蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(MGMG)(SEQ ID NO:44)、甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(GMMG)(SEQ ID NO:45)、甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(GGGM)(SEQ ID NO:46)、蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸(MGGG)(SEQ ID NO:47)、甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GMGG)(SEQ IDNO:48)、甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(GGMG)(SEQ ID NO:49)、甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸(GGMMM)(SEQ ID NO:50)、甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸(GGGMM)(SEQ ID NO:51)、甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(GGGGM)(SEQ ID NO:52)、蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸(MGMMM)(SEQ ID NO:53)、蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸(MGGMM)(SEQ ID NO:54)、蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(MGGGM)(SEQID NO:55)、蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸(MMGMM)(SEQ ID NO:56)、蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(MMGGM)(SEQ ID NO:57)、蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸(MMGGG)(SEQ ID NO:58)、蛋氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(MMMGM)(SEQ ID NO:59)、蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(MGMGM)(SEQ ID NO:60)、甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(GMGMG)(SEQ ID NO:61)、甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(GMMMG)(SEQ ID NO:62)、甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(GGMGM)(SEQ ID NO:63)、甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(GGMMG)(SEQ ID NO:64)、甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(GMMGM)(SEQ ID NO:65)、蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(MGMMG)(SEQ ID NO:66)、甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(GMGGM)(SEQ ID NO:67)、蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(MMGMG)(SEQ ID NO:68)、甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GMMGG)(SEQ ID NO:69)、甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GMGGG)(SEQ ID NO:70)、甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GGMGG)(SEQ ID NO:71)、甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GGGGG)(SEQ ID NO:72)或其组合。在一些方面，寡肽是蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(MGM)。

在一些方面，IL-7蛋白包含半衰期延长部分。在一些方面，所述半衰期延长部分包括Fc、白蛋白、白蛋白结合多肽、Pro/Ala/Ser(PAS)、人绒毛膜促性腺激素β亚基的C末端肽(CTP)、聚乙二醇(PEG)、长的非结构化亲水氨基酸序列(XTEN)、羟乙基淀粉(HES)、白蛋白结合小分子或其组合。在一些方面，其中半衰期延长部分是Fc。

在一些方面，Fc是杂合Fc，其包含铰链区、CH2结构域和CH3结构域，其中铰链区包含人IgD铰链区，其中CH2结构域包含人IgD CH2结构域的一部分和人IgG4 CH2结构域的一部分，并且其中CH3结构域包含人IgG4 CH3结构域的一部分。

在一些方面，IL-7蛋白包含与SEQ ID NO:1-6、15-26和80-85中任一者所列出的序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。

在一些方面，VEGF拮抗剂包含特异性结合VEGF的抗体或其抗原结合片段(“抗VEGF抗体”)、编码抗VEGF抗体的多核苷酸、反义寡核苷酸、siRNA、shRNA、miRNA、靶向VEGF的dsRNA、适体、PNA或包含它们的载体。在一些方面，VEGF拮抗剂是抗VEGF抗体。在一些方面，抗VEGF抗体包括阿柏西普(aflibercept)(和)、贝伐单抗(bevacizumab)(和)、兰尼单抗(ranibizumab) 或其组合。

在一些方面，肿瘤来源于癌症，癌症包括乳腺癌、头颈癌、子宫癌、脑癌、皮肤癌、肾癌(renal cancer)、肺癌、结直肠癌、前列腺癌、肝癌、膀胱癌、肾脏癌(kidney cancer)、胰腺癌、甲状腺癌、食管癌、眼癌、胃(胃部)癌、胃肠癌、卵巢癌、癌(carcinoma)、肉瘤、白血病、淋巴瘤、骨髓瘤或其组合。在一些方面，脑癌包括胶质母细胞瘤。在一些方面，胶质母细胞瘤包括复发性胶质母细胞瘤。在一些方面，胶质母细胞瘤是标准护理疗法难治的。在一些方面，皮肤癌包括默克尔细胞癌(Merkel cell carcinoma，MCC)、基底细胞癌(BCC)、皮肤鳞状细胞癌(cSCC)、黑色素瘤或其组合。

在一些方面，IL-7蛋白经肌内、肠胃外地、皮下、眼部、静脉内、腹膜内、皮内、眶内、脑内、颅内、脊柱内、脑室内(intraventricular)、鞘内、脑池内、囊内或肿瘤内施用至受试者。在一些方面，VEGF拮抗剂经静脉内、肠胃外地、肌内、皮下、眼部、腹膜内、皮内、眶内、脑内、颅内、脊柱内、脑室内、鞘内、脑池内、囊内或肿瘤内施用至受试者。在一些方面，另外的治疗剂经肠胃外地、静脉内、肌内、皮下、眼部、腹膜内、皮内、眶内、脑内、颅内、脊柱内、脑室内、鞘内、脑池内、囊内或肿瘤内施用至受试者。

在一些方面，IL-7蛋白以大于约600μg/kg、大于约700μg/kg、大于约800μg/kg、大于约900μg/kg、大于约1,000μg/kg、大于约1,100μg/kg、大于约1,200μg/kg、大于约1,300μg/kg、大于约1,400μg/kg、大于约1,500μg/kg、大于约1,600μg/kg、大于约1,700μg/kg、大于约1,800μg/kg、大于约1,900μg/kg或大于约2,000μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约610μg/kg与约1,200μg/kg之间、约650μg/kg与约1,200μg/kg之间、约700μg/kg与约1,200μg/kg之间、约750μg/kg与约1,200μg/kg之间、约800μg/kg与约1,200μg/kg之间、约850μg/kg与约1,200μg/kg之间、约900μg/kg与约1,200μg/kg之间、约950μg/kg与约1,200μg/kg之间、约1,000μg/kg与约1,200μg/kg之间、约1,050μg/kg与约1,200μg/kg之间、约1,100μg/kg与约1,200μg/kg之间、约1,200μg/kg与约2,000μg/kg之间、约1,300μg/kg与约2,000μg/kg之间、约1,500μg/kg与约2,000μg/kg之间、约1,700μg/kg与约2,000μg/kg之间、约610μg/kg与约1,000μg/kg之间、约650μg/kg与约1,000μg/kg之间、约700μg/kg与约1,000μg/kg之间、约750μg/kg与约1,000μg/kg之间、约800μg/kg与约1,000μg/kg之间、约850μg/kg与约1,000μg/kg之间、约900μg/kg与约1,000μg/kg之间或约950μg/kg与约1,000μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约700μg/kg与约900μg/kg之间、约750μg/kg与约950μg/kg之间、约700μg/kg与约850μg/kg之间、约750μg/kg与约850μg/kg之间、约700μg/kg与约800μg/kg之间、约800μg/kg与约900μg/kg之间、约750μg/kg与约850μg/kg之间或约850μg/kg与约950μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约650μg/kg、约680μg/kg、约700μg/kg、约720μg/kg、约740μg/kg、约750μg/kg、约760μg/kg、约780μg/kg、约800μg/kg、约820μg/kg、约840μg/kg、约850μg/kg、约860μg/kg、约880μg/kg、约900μg/kg、约920μg/kg、约940μg/kg、约950μg/kg、约960μg/kg、约980μg/kg、约1,000μg/kg、约1,020μg/kg、约1,040μg/kg、约1,060μg/kg、约1,080μg/kg、约1,100μg/kg、约1,120μg/kg、约1,140μg/kg、约1,160μg/kg、约1,180μg/kg、约1,200μg/kg、约1,220μg/kg、约1,240μg/kg、约1,260μg/kg、约1,280μg/kg、约1,300μg/kg、约1,320μg/kg、约1,340μg/kg、约1,360μg/kg、约1,380μg/kg、约1,400μg/kg、约1,420μg/kg、约1,440μg/kg、约1,460μg/kg、约1,480μg/kg、约1,500μg/kg、约1,520μg/kg、约1,540μg/kg、约1,560μg/kg、约1,580μg/kg、约1,600μg/kg、约1,620μg/kg、约1,640μg/kg、约1,660μg/kg、约1,680μg/kg、约1,700μg/kg、约1,720μg/kg、约1,740μg/kg、约1,760μg/kg、约1,780μg/kg、约1,800μg/kg、约1,820μg/kg、约1,840μg/kg、约1,860μg/kg、约1,880μg/kg、约1,900μg/kg、约1,920μg/kg、约1,940μg/kg、约1,960μg/kg、约1,980μg/kg或约2,000μg/kg的剂量施用。

在一些方面，IL-7蛋白以一周一次、两周一次、三周一次、四周一次、五周一次、六周一次、七周一次、八周一次、九周一次、10周一次、11周一次或12周一次的给药频率施用。在一些方面，IL-7蛋白以八周一次的给药频率施用。

在一些方面，VEGF拮抗剂以约0.1mg/kg至约20mg/kg的剂量施用至受试者。在一些方面，VEGF拮抗剂以一周一次、两周一次、三周一次、四周一次、五周一次、六周一次、七周一次、八周一次、九周一次、10周一次、11周一次或12周一次的给药频率施用。在一些方面，VEGF拮抗剂以两周一次的给药频率施用。

在一些方面，抗VEGF抗体是贝伐单抗。在一些方面，贝伐单抗以约5mg/kg至约15mg/kg的剂量施用。在一些方面，贝伐单抗以约5mg/kg、约7.5mg/kg、约10mg/kg、约12.5mg/kg或约15mg/kg的剂量施用。

在一些方面，抗VEGF抗体是阿柏西普。在一些方面，阿柏西普以约4mg/kg至约15mg/kg的剂量施用。在一些方面，阿柏西普以约4mg/kg的剂量施用。

附图说明

图1A和1B示出了在结肠腺癌动物模型中IL-7蛋白和VEGF拮抗剂组合治疗的抗肿瘤效果。图1A提供肿瘤接种和治疗施用的时间表的示意图。图1B提供了不同治疗组动物在肿瘤接种后的不同时间点的肿瘤体积(mm³)的比较。治疗组包括：(1)IL-7配制缓冲剂+同种型对照抗体(“对照”)；(2)IL-7蛋白+同种型对照抗体(“IL-7”)；(3)IL-7配制缓冲剂+VEGF拮抗剂(例如抗VEGF抗体)(“a-VEGF”)；和(4)IL-7蛋白+VEGF拮抗剂(“IL-7+a-VEGF”)。数据示出为平均值±S.E.M.。使用GraphPad Prism 9.1.0软件进行统计学分析(单因素ANOVA)。“**”＝p<0.01；并且“****”＝p<0.0001。

图2提供了实施例3和4中描述的2期研究的施用方案示意图。

图3提供了实施例3和4中描述的2期研究的一般概述。

图4A和4B提供了实施例3和4中描述的2期研究的中期结果。图4A示出了参与2期研究的20名受试者的当前状态。具体而言，提供了受试者的以下状态：(1)存活(灰色条)，(2)死亡(深灰色条)，(3)对治疗有部分响应(黑色圆圈)，(4)疾病稳定(黑色三角形)，(5)疾病进展未确认(空心正方形)，(6)疾病进展确认(黑色正方形)，以及(7)治疗结束(黑色菱形)。图4B示出了初始施用治疗后第0周和第4周的绝对淋巴细胞计数。(*)表示通过Wilcoxan配对符号等级检验得出的4周和0周(基线)之间的统计学显著差异。

具体实施方式

本公开提供了包含IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合的组合方案，其可用于治疗肿瘤。如本文所证明的，与单独IL-7蛋白或VEGF拮抗剂相比，施用IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合可以导致抗肿瘤免疫力极大地改善。因此，在一些方面，本文所述的组合方案为许多癌症提供了有效且可行的治疗选择。本申请全篇提供了本公开的附加方面。

在更详细地描述本公开之前，应当理解，本公开不限于所描述的特定组合物或方法，这些组合物或方法当然可变化。本领域技术人员在阅读本公开时将显而易见的是，本文所描述且说明的各个单独方面具有离散的组分和特征，所述组分和特征可容易地与任何另外的若干方面的特征分离或组合而不偏离本公开的范围或精神。任何叙述的方法均可以叙述的事件的顺序或以在逻辑上可能的任何其它顺序进行。

本文提供的标题并非是对本公开的各个方面的限制，所述各个方面可通过参考说明书整体来限定。还应理解，本文使用的术语仅出于描述特定方面的目的，并且并不意图是限制性的，因为本公开的范围将仅受所附权利要求限制。

I.定义

为了更容易理解本公开，首先定义某些术语。如本申请中所用，除非本文另外明确提供，否则以下术语中的每一者应具有下文所述的含义。其它定义阐述于本申请通篇中。

术语“一个(种)(a/an)”实体是指一个(种)或多个(种)所述实体；例如“一个(种)核苷酸序列”应理解为表示一个(种)或多个(种)核苷酸序列。因此，术语“一个(a)”或(“一个(an)”)、“一个或多个”和“至少一个”在本文中可互换使用。

另外，本文所用的“和/或”应视为具或不具另一者的两个指定特征或组分中的每一者的特定公开。因此，如本文短语(例如“A和/或B”)中所用的术语“和/或”意图包括“A和B”、“A或B”、“A”(单独)和“B”(单独)。同样，如在诸如“A、B和/或C”的短语中使用术语“和/或”意图包括以下方面的每一方面：A、B和C；A、B或C；A或C；A或B；B或C；A和C；A和B；B和C；A(单独的)；B(单独的)；和C(单独的)。

应当理解，本文无论在何处用措辞“包含/包括(comprising)”来描述方面，都还提供了以“由……组成”和/或“基本上由……组成”描述的其它类似方面。

除非另有定义，否则本文所用的所有技术和科学术语皆具有与本公开相关的领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。举例来说，Concise Dictionary ofBiomedicine and Molecular Biology,Juo,Pei-Show,第2版,2002,CRC Press；TheDictionary of Cell and Molecular Biology,第5版,2013,Academic Press；以及OxfordDictionary Of Biochemistry And Molecular Biology,第2版,2008,Oxford UniversityPress对技术人员提供本公开中使用的许多术语的综合词典。

单位、前缀和符号以其国际单位制(Système International de Unites，SI)接受的形式表示。数值范围包括限定范围的数字。当列举值的范围时，应当理解，还具体公开了所述范围的所列举的上限与下限之间的每个中间整数值及其每个分数，以及此类值之间的每个子范围。任何范围的上限和下限都可以独立地包括在该范围内或从该范围中排除，并且其中包括任一个限值、两个限值都不包括或包括两个限值的每个范围也涵盖于本公开中。因此，本文所列举的范围应理解为该范围内的所有值的简写形式，包括所列举的端点。例如，1至10的范围被理解为包括来自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10组成的组中的任何数值、数值组合或子范围。

在明确列举值(例如，10)的情况下，应当理解，与所列举的值(例如，±10％)大致相同数量或量的值也在本公开的范围内。在公开组合的情况下，还具体公开了该组合的元素的每个子组合，并且所述子组合在本公开的范围内。相反，在分别公开不同元素或元素组的情况下，也公开了其组合。在本公开的任何要素被公开为具有多个替代方案的情况下，特此还公开了其中每个替代方案单独地或与其他替代方案的任何组合被排除在外的本公开的实施例；本公开的多于一个要素可具有此类排除，并且特此公开了具有此类排除的要素的所有组合。

术语“约”在本文中用于意指近似、大致、大约或在……左右。当术语“约”与数值范围结合使用时，其通过使边界延伸高于和低于阐述的数值来修饰那个范围。一般而言，术语“约”可以通过例如上或下(高或低)10％的变化来修饰高于及低于所述值的数值。

如本文所用，术语“白介素-7”或“IL-7”是指IL-7多肽及其衍生物和类似物，例如，在标准生物测定或对IL-7受体结合亲和力的测定中，其与野生型成熟哺乳动物IL-7具有实质的氨基酸序列同一性和大致上等效的生物活性。例如，IL-7是指具有以下氨基酸序列的重组或非重组多肽的氨基酸序列：i)IL-7多肽的天然或天然存在的等位基因变体，ii)IL-7多肽的生物活性片段，iii)IL-7多肽的生物活性多肽类似物，或iv)IL-7多肽的生物活性变体。本公开的IL-7多肽可以从任何物种，例如人、母牛或绵羊获得。IL-7核酸和氨基酸序列是本领域熟知的。例如，人IL-7氨基酸序列的Genbank登录号为P13232(SEQ ID NO:1)；小鼠IL-7氨基酸序列的Genbank登录号为P10168(SEQ ID NO:3)；大鼠IL-7氨基酸序列的Genbank登录号为P56478(SEQ ID NO:2)；猴IL-7氨基酸序列的Genbank登录号为NP_001279008(SEQ ID NO:4)；母牛IL-7氨基酸序列的Genbank登录号为P26895(SEQ ID NO:5)；并且绵羊IL-7氨基酸序列的Genbank登录号为Q28540(SEQ ID NO:6)。在一些方面，本公开的IL-7多肽是IL-7蛋白的变体。从本公开显而易见的是，在一些方面，可用于本公开的IL-7多肽不包含信号肽(参见例如表1A)。

表1A.示例性IL-7蛋白的序列

如本文所用，术语“血管内皮生长因子”或“VEGF”是指由许多细胞产生并刺激血管形成(即血管新生)的蛋白质。VEGF是包含五个主要成员的蛋白质家族的一部分：VEGF-A(也称为“VEGF”)、胎盘生长因子(PGF)、VEGF-B、VEGF-C和VEGF-D。除非另有说明，否则术语“VEGF”是指VEGF-A家族成员，包括所有同种型(参见例如1B表)及其变体。由于替代性启动子使用、选择性剪接和/或替代性起始，存在至少17种已知的人VEGF同种型(即VEGF-A)。不同VEGF同种型的序列提供于表1B(如下)中。

表1B：人VEGF序列

如本文所用，“施用”是指使用本领域技术人员已知的各种方法和递送系统中的任一种将治疗剂或包含治疗剂的组合物以物理方式引入至受试者。本文所述的治疗剂的不同施用途径包括静脉内、腹膜内、肌内、皮下、脊髓或其他肠胃外施用途径，例如通过注射或输注进行。如本文所用的短语“肠胃外施用”意指除肠内和局部(topical)施用以外的施用模式，通常通过注射进行，并且包括但不限于静脉内、腹膜内、肌内、动脉内、鞘内、淋巴内、病灶内、囊内、眶内、心脏内、皮内、经气管、气管内、肺、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、心室内、玻璃体内、硬膜外和胸骨内注射和输注，以及体内电穿孔。可替代地，本文所述的治疗剂可经由非肠胃外途径施用，诸如局部、表皮或粘膜施用途径，例如鼻内、口服、阴道、直肠、舌下或局部施用。施用还可以实施例如一次、多次和/或在一个或多个延长时段内实施。

术语“抗体(antibody/antibodies)”是本领域的术语，并且在本文中可互换使用，并且是指具有特异性结合抗原的抗原结合位点的分子。如本文所用的术语包括完整抗体及其任何抗原结合片段(即，“抗原结合部分”)或单链。在一个方面，“抗体”是指包含至少两条重链(H)和两条轻链(L)并通过二硫键相互连接的糖蛋白或其抗原结合部分。在一些方面，“抗体”指包含单个可变结构域(例如VHH结构域)的单链抗体。每条重链包含重链可变区(本文中缩写为VH)和重链恒定区。在一些天然存在的抗体中，重链恒定区包含三个结构域CH1、CH2和CH3。在一些天然存在的抗体中，每条轻链包含轻链可变区(本文缩写为VL)和轻链恒定区。轻链恒定区包含一个结构域CL。

VH和VL区可进一步细分为高变区，称为互补决定区(CDR)，其间散布着较保守的区域，称为框架区(FR)。每个VH和VL包含三个CDR和四个FR，以下列顺序从氨基末端向羧基末端排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。重链和轻链的可变区含有与抗原相互作用的结合结构域。抗体的恒定区可以介导免疫球蛋白与宿主组织或因子的结合，宿主组织或因子包括各种免疫系统细胞(例如，效应细胞)和经典补体系统的第一组分(C1q)。

抗体通常以高亲和力特异性结合它们的同源抗原，高亲和力反映在10^-5至10^-11M或更小的解离常数(K_D)上。一般认为任何大于约10^-4M的K_D指示非特异性结合。如本文所用，与抗原“特异性结合”的抗体是指以高亲和力与抗原和大致上相同的抗原结合，但不以高亲和力与不相关的抗原结合的抗体，高亲和力意味着K_D为10^-7M或更小、10^-8M或更小、5x 10^-9M或更小、或在10^-8M与10^-10M之间或更小。如果抗原与给定抗原具有高度序列同一性，例如与给定抗原的序列具有至少80％、至少90％、至少95％、至少97％或至少99％的序列同一性，则该抗原与给定抗原“基本上相同”。举例来说，在一些方面，特异性结合VEGF的抗体还可以与来自某些灵长类动物物种的VEGF抗原(例如食蟹猴抗VEGF抗体)具有交叉反应性，但不能与来自其他物种的VEGF分子或与VEGF以外的分子发生交叉反应。

免疫球蛋白可以来源于任何已知的同种型，包括但不限于IgA、分泌型IgA、IgG和IgM。IgG亚类也为本领域技术人员所熟知，并且包括但不限于人IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。“同种型”是指由重链恒定区基因编码的抗体类别或亚类(例如IgM或IgG1)。在一些方面，同种型的一个或多个氨基酸可以被突变以改变效应子功能。举例来说，术语“抗体”包括天然存在的和非天然存在的Ab；单克隆和多克隆Ab；嵌合和人源化Ab；人或非人Ab；全合成Ab；和单链抗体。非人抗体可以通过重组方法人源化，以降低其在人体中的免疫原性。在没有明确说明的情况下，并且除非上下文另外指示，否则术语“抗体”还包括上述免疫球蛋白中任一种的抗原结合片段或抗原结合部分，并且包括单价和二价片段或部分，以及单链抗体。

“分离的抗体”是指基本上不含具有不同抗原特异性的其他抗体的抗体(例如，特异性结合VEGF的分离的抗体基本上不含特异性结合除VEGF以外的抗原的抗体)。然而，特异性结合VEGF的分离的抗体可以与其他抗原(诸如来自不同物种的VEGF分子)具有交叉反应性。另外，分离的抗体可以大致上不含其他细胞物质和/或化学物质。

术语“单克隆抗体”(“mAb”)是指单一分子组成的抗体分子的非天然存在的制备剂，即，其主要序列基本相同，并且对特定表位表现出单一结合特异性和亲和力的抗体分子。mAb是分离的抗体的实例。mAb可以通过杂交瘤、重组、转基因或本领域技术人员已知的其他技术产生。

“人”抗体(HuMAb)是指具有可变区的抗体，其中框架区和CDR区均来自人种系免疫球蛋白序列。此外，如果抗体含有恒定区，那么恒定区也来源于人种系免疫球蛋白序列。本公开的人抗体可以包含不由人种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如，通过体外随机或定点诱变或通过体内体细胞突变引入的突变)。然而，如本文所用，术语“人抗体”不旨在包括其中来源于另一哺乳动物物种(诸如小鼠)的种系的CDR序列已接枝到人框架序列上的抗体。术语“人”抗体和“完全人”抗体同义地使用。

“人源化抗体”是指其中非人抗体的CDR结构域外部的一些、大部分或全部氨基酸被来源于人免疫球蛋白的相应氨基酸替换的抗体。在人源化形式的抗体的一方面中，CDR结构域外部的一些、大部分或全部氨基酸已经被来自人免疫球蛋白的氨基酸替换，而一个或多个CDR区内的一些、大部分或全部氨基酸没有变化。氨基酸的少量添加、缺失、插入、取代或修饰是允许的，只要它们不消除抗体结合特定抗原的能力。“人源化”抗体保留了与原始抗体相似的抗原特异性。

“嵌合抗体”是指可变区来源于一种物种而恒定区来源于另一物种的抗体，诸如可变区来源于小鼠抗体而恒定区来源于人抗体的抗体。

“抗抗原”抗体是指特异性结合至抗原的抗体。例如，抗PD-1抗体特异性结合PD-1，并且抗VEGF抗体特异性结合VEGF。

抗体的“抗原结合部分”(也称为“抗原结合片段”)是指抗体的一个或多个片段，其保留了与整个抗体所结合的抗原特异性结合的能力。

如本文所用，术语“特异性结合(specific binding)”、“选择性结合(selectivebinding)”、“选择性结合(selectively binds)”和“特异性结合(specifically binds)”是指抗体与预定抗原上的表位结合。通常，抗体(i)当通过例如在BIACORE^TM2000仪器中使用预定抗原作为分析物并且使用抗体作为配体的表面等离子体共振(SPR)技术，或对抗体与抗原阳性细胞的结合的Scatchard分析来确定时，以大约小于10^-7M，诸如大约小于10^-8M、10^-9M或10^-10M或者甚至更小的平衡解离常数(K_D)结合，并且(ii)以比其与除预定抗原或密切相关的抗原以外的非特异性抗原(例如BSA、酪蛋白)结合的亲和力大至少两倍的亲和力与预定抗原结合。

如本文所用的术语“天然存在的”当应用于对象时是指对象可见于自然界中的事实。例如，存在于生物体(包括病毒)中的多肽或多核苷酸序列是天然存在的，其可以从天然来源中分离，并且不能在实验室中被人有意修饰。

“多肽”是指包含至少两个连续连接的氨基酸残基的链，链的长度没有上限。蛋白质中的一个或多个氨基酸残基可以含有修饰，诸如但不限于糖基化、磷酸化或二硫键形成。“蛋白质”可以包含一种或多种多肽。除非另外说明，否则术语“蛋白质”和“多肽”可互换使用。

如本文所用的术语“核酸分子”，旨在包括DNA分子和RNA分子。核酸分子可以是单链或双链的，并且可以是cDNA。

“保守氨基酸取代”是指氨基酸残基被具有相似侧链的氨基酸残基取代。具有相似侧链的氨基酸残基的家族在本领域中已被定义。这些家族包括：具有碱性侧链的氨基酸(例如，赖氨酸、精氨酸、组氨酸)；具有酸性侧链的氨基酸(例如，天冬氨酸、谷氨酸)；具有不带电荷的极性侧链的氨基酸(例如，甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、色氨酸)；具有非极性侧链的氨基酸(例如，丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸)；具有β-支化侧链的氨基酸(例如，苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸)；以及具有芳族侧链的氨基酸(例如，酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸)。在一些方面，抗体中预测的非必需氨基酸残基被来自相同侧链家族的另一个氨基酸残基替代。鉴定不会消除抗原结合的核苷酸和氨基酸保守性取代的方法是本领域熟知的(参见例如Brummell等人,Biochem.32:1180-1187(1993)；Kobayashi等人Protein Eng.12(10):879-884(1999)；以及Burks等人Proc.Natl.Acad.Sci.USA 94:412-417(1997))。

对于核酸，术语“大致同源性”指示两种核酸或其指定序列在最佳对齐并且比较时，在适当的核苷酸插入或缺失的情况下，至少约80％的核苷酸、至少约90％至95％或至少约98％至99.5％的核苷酸为相同的。可替代地，当片段在选择性杂交条件下与链的互补序列杂交时，存在大致同源性。

对于多肽，术语“大致同源性”指示两种多肽或其指定序列在最佳对齐并且比较时，在适当的氨基酸插入或缺失的情况下，至少约80％的氨基酸、至少约90％至95％或至少约98％至99.5％的氨基酸为相同的。

两个序列之间的同一性百分比是在考虑需要被引入以达成两个序列的最优比对的空位的数目和每个空位的长度的情况下，由序列共有的相同位置的数目的函数(即同源性％＝相同位置的数目/位置的总数目x100)。序列的比较和两个序列之间同一性百分比的确定可以使用数学算法来完成，例如，如以下非限制性实施例中所述。

两个核苷酸序列之间的同一性百分比可以使用GCG软件包(可从worldwideweb.gcg.com获得)中的GAP程序，使用NWSgapdna.CMP矩阵以及40、50、60、70或80的缺口权重和1、2、3、4、5或6的长度权重来确定。两个核苷酸或氨基酸序列之间的同一性百分比还可以使用已经并入ALIGN程序(2.0版)中的E.Meyers和W.Miller(CABIOS,4:11-17(1989))的算法，使用PAM120权重残基表、空位长度罚分12、空位罚分4来确定。此外，两个氨基酸序列之间的同一性百分比可以使用已经并入GCG软件包(可从worldwideweb.gcg.com获得)的GAP程序中的Needleman和Wunsch(J.Mol.Biol.(48):444-453(1970))算法，使用Blossum 62矩阵或PAM250矩阵以及16、14、12、10、8、6或4的缺口权重和1、2、3、4、5或6的长度权重来确定。

本文所述的核酸和蛋白质序列可进一步作为“查询序列”用于相对于公共数据库进行搜索以例如鉴定相关序列。此类搜索可使用Altschul,等人(1990)J.Mol.Biol.215:403-10的NBLAST和XBLAST程序(2.0版)进行。BLAST核苷酸搜索可用NBLAST程序(计分＝100，字长＝12)来进行以获得与本文所述的核酸分子同源的核苷酸序列。BLAST蛋白质搜索可用XBLAST程序(计分＝50，字长＝3)来进行以获得与本文所述的蛋白质分子同源的氨基酸序列。为了出于比较目的获得空位对齐，可以如Altschul等人,(1997)Nucleic AcidsRes.25(17):3389-3402中所述利用空位BLAST。当使用BLAST和空位BLAST程序时，可以使用各个程序(例如，XBLAST和NBLAST)的默认参数。参见worldwideweb.ncbi.nlm.nih.gov。

核酸可以存在于完整细胞中，存在于细胞溶解物中或以部分纯化或大致上纯的形式存在。当通过标准技术，包括碱/SDS处理、CsCl显带(banding)、柱色谱、琼脂糖凝胶电泳和其他本领域熟知的技术，从其他细胞组分或其他污染物例如其他细胞核酸(例如染色体的其他部分)或蛋白质中纯化出来时，核酸是“分离的”或“呈现为大致上纯的”。参见F.Ausubel,等人,编Current Protocols in Molecular Biology,Greene Publishing andWiley Interscience,New York(1987)。

可以根据提供基因序列的标准技术来突变核酸，例如cDNA。对于编码序列，这些突变可根据需要影响氨基酸序列。具体地，考虑了与本文所述的天然V、D、J、恒定、转换和其他此类序列大致上同源或来源于这些序列的DNA序列(其中“来源于”表示序列与另一序列相同或从另一序列修饰)。

如本文所用，术语“载体”旨在指能够转运已与其连接的另一核酸的核酸分子。一种类型的载体是“质粒”，其是指可将额外DNA区段连接到其中的环状双链DNA环。另一类型的载体是病毒载体，其中额外的DNA区段可连接到病毒基因组中。一些载体能够在引入了它们的宿主细胞中自主复制(例如，具有细菌复制起点的细菌载体和附加型(episomal)哺乳动物载体)。其他载体(例如，非附加型哺乳动物载体)可在引入到宿主细胞中之后整合到宿主细胞的基因组中，并且由此与宿主基因组一起复制。此外，一些载体能够指导它们可操作地连接的基因的表达。此类载体在本文中称为“重组表达载体”(或简称为“表达载体”)。一般而言，在重组DNA技术中有用的表达载体通常呈质粒的形式。在本说明书中，“质粒”和“载体”可互换使用，因为质粒是最常使用的载体形式。然而，还包括提供等效功能的其他形式的表达载体，诸如病毒载体(例如，复制缺陷型逆转录病毒、腺病毒和腺相关病毒)。

如本文所用，术语“重组宿主细胞”(或简称“宿主细胞”)旨在指以下细胞，其包含不天然存在于细胞中的核酸，并且可以是已引入重组表达载体的细胞。应理解，此类术语不仅意指特定的主体细胞，而且意指此类细胞的后代细胞。因为一些修饰可能由于突变或环境影响而出现在后代中，此类子代实际上不可能与亲代细胞相同，但仍包括在如本文所用的术语“宿主细胞”的范围内。

如本文所用，术语“连接的”或“缀合的”是指两个或更多个分子的缔合。连接可以是共价或非共价的。连接也可以是遗传的(即重组融合)。可以使用多种本领域公认的技术，诸如化学缀合和重组蛋白生产，来实现此类连接。

“癌症”是指特征在于体内异常细胞不受控制地生长的各种各样的疾病。不受调控的细胞分裂和生长导致恶性肿瘤的形成，所述恶性肿瘤侵入邻近组织，并且还可以通过淋巴系统或血流转移到身体的远侧部分。如本文所用的“癌症”是指原发性、转移性和复发性癌症。可用本公开治疗的合适癌症的非限制性实例在本公开的别处提供。

术语“融合蛋白”是指通过将两个或更多个最初编码单独的蛋白质的基因连接起来所产生的蛋白质。这种融合基因的翻译产生具有来源于每个原始蛋白质的功能特性的单个多肽或多个多肽。在一些方面，两个或更多个基因可以在其核苷酸序列中包含取代、缺失和/或添加。

“Fc受体”或“FcR”是与免疫球蛋白的Fc区结合的受体。与IgG抗体结合的FcR包含FcγR家族的受体，包括这些受体的等位基因变体和选择性剪接形式。FcγR家族由三种激活性受体(小鼠中为FcγRI、FcγRIII和FcγRIV；人中为FcγRIA、FcγRIIA和FcγRIIIA)和一种抑制性受体(FcγRIIB)组成。人FcγR的各种特性是本领域已知的。大多数先天效应细胞类型共表达一种或多种激活性FcγR和抑制性FcγRIIB，而自然杀伤(NK)细胞选择性表达一种激活性Fc受体(小鼠中为FcγRIII，而人中为FcγRIIIA)，但不表达小鼠和人中的抑制性FcγRIIB。人IgG1与大多数人Fc受体结合，并且就其结合的激活性Fc受体的类型而言，认为它等效于鼠IgG2a。

“Fc区”(片段可结晶区)或“Fc结构域”或“Fc”是指抗体重链的C末端区，其介导免疫球蛋白与宿主组织或因子的结合，包括与位于免疫系统的各种细胞(例如效应细胞)上的Fc受体或经典补体系统的第一组分(C1q)的结合。因此，Fc区包含除第一恒定区免疫球蛋白结构域(例如，CH1或CL)以外的抗体恒定区。在IgG、IgA和IgD抗体同种型中，Fc区包含两个相同的蛋白质片段，其来源于抗体的两条重链的第二(CH2)和第三(CH3)恒定结构域；IgM和IgE Fc区包含每条多肽链中的三个重链恒定结构域(CH结构域2-4)。对于IgG，Fc区包含免疫球蛋白结构域CH2和CH3以及CH1与CH2结构域之间的铰链。虽然免疫球蛋白重链的Fc区边界的定义可能有所不同，但如本文所定义，人IgG重链Fc区定义为从IgG1的氨基酸残基D221、IgG2的氨基酸残基V222、IgG3的氨基酸残基L221和IgG4的氨基酸残基P224延伸到重链的羧基末端，其中编号是根据如Kabat中的EU索引进行的。人IgG Fc区的CH2结构域从氨基酸237延伸到氨基酸340，并且CH3结构域位于Fc区中CH2结构域的C末端侧，即其从IgG的氨基酸341延伸到氨基酸447或446(如果不存在C末端赖氨酸残基)或445(如果不存在C末端甘氨酸和赖氨酸残基)。如本文所用，Fc区可以是天然序列Fc，包括任何同种异型变体，或变体Fc(例如，非天然存在的Fc)。Fc也可以单独地或在包含Fc的蛋白质多肽(诸如“包含Fc区的结合蛋白”，也称为“Fc融合蛋白”(例如，抗体或免疫粘附))的上下文中指此区域。

“天然序列Fc区”或“天然序列Fc”包含与天然存在的Fc区的氨基酸序列相同的氨基酸序列。天然序列人Fc区包括天然序列人IgG1 Fc区、天然序列人IgG2 Fc区、天然序列人IgG3 Fc区和天然序列人IgG4Fc区以及其天然存在的变体。天然序列Fc包括Fc的各种同种异型(参见，例如，Jefferis等人(2009)mAbs 1:1)。

此外，本公开的Fc(天然的或变体)可以是与天然形式相比具有天然糖链、增加的糖链或减少的糖链的形式，或者可以是去糖基化形式。免疫球蛋白Fc糖链可以通过常规方法，诸如化学法、酶法和使用微生物的基因工程方法进行修饰。从Fc片段中去除糖链导致与第一补体组分C1的C1q部分的结合亲和力急剧减小，以及ADCC或CDC的减小或丧失，从而不会在体内诱导任何不必要的免疫应答。在这点上，去糖基化(deglycosylated)或无糖基化(aglycosylated)形式的免疫球蛋白Fc区作为药物载体可能更适合本公开的目的。如本文所用，术语“脱糖基化”是指其中糖从Fc片段中被酶促去除的Fc区。此外，术语“无糖基化”是指Fc片段由原核生物以非糖基化形式产生，并且优选在大肠杆菌中产生。

如本文所用，术语“免疫应答”是指脊椎动物内对外源剂的生物应答，所述应答保护有机体抵抗这些剂和由其引起的疾病。例如，术语“抗肿瘤免疫应答”是指针对肿瘤抗原的免疫应答。免疫应答是由免疫系统的细胞(例如，T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤(NK)细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞、树突细胞或中性粒细胞)和由这些细胞中的任一种或肝产生的可溶性大分子(包括抗体、细胞因子和补体)的作用介导的，所述免疫应答导致选择性靶向、结合、损伤、破坏侵入病原体、感染了病原体的细胞或组织、癌细胞或其他异常细胞或者(在自身免疫或病理性炎症的情况下)正常的人细胞或组织和/或将它们从脊椎动物体内消除。免疫应答包括例如T细胞的激活或抑制，例如效应T细胞或Th细胞，诸如CD4⁺或CD8⁺T细胞，或Treg细胞的抑制。

术语“免疫疗法”是指通过包括诱导、增强、抑制或改变免疫应答的方法来治疗患有疾病或有患病或复发风险的受试者。受试者的“治疗”或“疗法”是指对受试者进行的任何类型的干预或过程，或向受试者施用活性剂，目的是逆转、缓解、改善、抑制、减缓或预防症状、并发症或疾患或与疾病相关的生化指标的发作、进展、发展、严重程度或复发。

术语“效应T细胞”(Teff)是指具有细胞溶解活性的T细胞(例如CD4⁺和CD8⁺T细胞)以及以及辅助性T(Th)细胞(其分泌细胞因子并激活和引导其他免疫细胞)但不包括调节性T细胞(Treg细胞)。IL-7蛋白和VEGF拮抗剂(例如抗VEGF抗体)的组合激活和/或增加受试者肿瘤或血液中Teff细胞(例如CD4⁺和CD8⁺T细胞)的频率。

如本文所用，术语“调节性T细胞”(Treg)是指具有减少或抑制效应T细胞的诱导和增殖并由此调节免疫应答的能力的T细胞群。在一些方面，Treg可以通过分泌抗炎细胞因子诸如IL-10、TGF-β和IL-35来抑制免疫应答，所述抗炎细胞因子可以干扰初始T细胞的活化和初始T细胞向效应T细胞的分化。在一些方面，Treg还可以产生细胞溶解性分子诸如颗粒酶B，细胞溶解性分子可以诱导效应T细胞的凋亡。在一些方面，调节性T细胞是天然调节性T细胞(nTreg)(即，在胸腺内发育)。在一些方面，调节性T细胞是诱导性调节性T细胞(iTreg)(即，在暴露于某些刺激后在外周组织中分化成Treg的初始T细胞)。用于鉴定Treg的方法是本领域已知的。例如，Treg表达可以使用流式细胞术测量的某些表型标志物(例如，CD25、Foxp3或CD39)。参见例如国际公开号WO 2017/062035 A1；Gu J，等人,Cell Mol Immunol14(6):521-528(2017)。在一些方面，Treg是CD45RA^-CD39⁺T细胞。

如本文所用，术语“肿瘤浸润淋巴细胞”或“TIL”是指已从外周(例如，从血液)迁移到肿瘤中的淋巴细胞(例如，效应T细胞)。在一些方面，肿瘤浸润淋巴细胞是CD4+TIL。在一些方面，肿瘤浸润淋巴细胞是CD8+TIL。

刺激免疫应答或免疫系统的能力增强可能由T细胞共刺激受体的激动活性增强和/或抑制性受体的拮抗活性增强引起。刺激免疫应答或免疫系统的能力的增加可以通过EC50的倍数增加或在测量免疫应答的测定(例如，测量细胞因子或趋化因子释放、细胞溶解活性(在靶细胞上直接测定或通过检测CD107a或颗粒酶间接测定)和增殖的变化的测定)中的最大活性水平来反映。刺激免疫应答或免疫系统活性的能力可以增强至少10％、30％、50％、75％、2倍、3倍、5倍或更多。

例如IL-7蛋白的“变体”被定义为被一个或多个氨基酸改变的氨基酸序列。变体可以具有“保守性”变化，其中取代的氨基酸具有相似的结构或化学性质，例如用异亮氨酸替代亮氨酸。更罕见地，变体可具有“非保守”变化，例如用色氨酸替换甘氨酸。相似的微小变化还可包括氨基酸缺失或插入，或两者兼有。使用本领域熟知的计算机程序，例如用于分子建模或产生比对的软件，可以发现确定哪些和多少氨基酸残基可以被取代、插入或缺失而不丧失生物活性的指导。例如，本公开中包括的变体IL-7蛋白包括保留IL-7活性的IL-7蛋白。类似地，本文所述的VEGF拮抗剂的变体是指保持对VEGF的拮抗活性的变体。还包含添加、取代或缺失的变体也包括在本公开中，只要所述变体保持与非变体(例如野生型)对应物基本等同的生物活性。例如，保留与IL-7蛋白的全长形式相当的生物活性的IL-7的截短物包括在本公开中。本文所述的治疗剂(例如，IL-7蛋白和/或VEGF拮抗剂)的活性可以使用本领域已知的任何合适的方法来测量。

为了确定两个氨基酸序列或两个核酸的百分比同一性，将序列对齐以达到最佳比较目的(例如，可以在第一个氨基酸或核酸序列的序列中引入空位以实现与第二个氨基酸或核酸序列的最佳对齐)。两个序列之间的百分比同一性是由序列共享的相同位置的数量的函数(即，％同源性＝相同位置的数量/位置的总数X 100)。两个序列之间的百分比同源性的确定可以使用数学算法来完成。用于比较两个序列的数学算法的优选的非限制性实例是如Karlin和Altschul(1990)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87:2264-68的算法，如Karlin和Altschul(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90:5873-77中所修改。这种算法被并入Altschul,等人,(1990)J.Mol.Biol.215:403-10的NBLAST和XBLAST程序中。BLAST核苷酸搜索可以用NBLAST程序进行，得分＝100，字长＝12。BLAST蛋白质搜索可以用XBLAST程序进行，得分＝50，字长＝3。为了出于比较目的获得空位对齐，可以如Altschul等人,(1997)Nucleic Acids Research.25(17):3389-3402中所述利用空位BLAST。当使用BLAST和空位BLAST程序时，可以使用各个程序(例如，XBLAST和NBLAST)的默认参数。

“受试者”包括任何人或非人动物，术语“非人动物”包括(但不限于)脊椎动物，例如非人灵长类动物、绵羊、狗和啮齿类动物，例如小鼠、大鼠和豚鼠。在一些方面，受试者是人。术语“受试者”和“患者”在本文中可互换使用。

术语“治疗有效量”或“治疗有效剂量”是指提供所需生物、治疗和/或预防结果的剂的量。所述结果可以是疾病的一种或多种体征、症状或病因的减少、改善、缓和、减轻、延迟和/或缓解，或者生物系统的任何其他所需的改变。关于实体瘤，有效量包含足以引起肿瘤皱缩和/或足以减小肿瘤生长速率(例如抑制肿瘤生长)或足以防止或延迟其它不希望细胞增殖的量。在一些方面，有效量是足以延迟肿瘤发展的量。在一些方面，有效量是足以防止或延迟肿瘤复发的量。有效量可以一次或多次施用来施用。有效量的药物或组合物可以：(i)减少癌细胞的数量；(ii)减小肿瘤大小；(iii)在一定程度上抑制、延缓、减慢并可以阻止癌细胞浸润到外周器官；(iv)抑制(即，在一定程度上减慢并可以阻止肿瘤转移；(v)抑制肿瘤生长；(vi)防止或延迟肿瘤的发生和/或复发；和/或(vii)在一定程度上缓解一种或多种与癌症相关的症状。在一些方面，“治疗有效量”是在临床上证明其实现癌症显著减少或癌症(例如晚期实体瘤)进展(消退)减缓的IL-7蛋白的量和VEGF拮抗剂(例如，抗VEGF抗体)的量的组合。治疗剂促进疾病消退的能力可使用熟练从业者已知的多种方法来评估，诸如在临床试验期间在人受试者中，在预测在人中的功效的动物模型系统中，或通过在体外测定中测定剂的活性。

术语“给药频率”是指在特定时间段内向受试者施用治疗剂(例如，IL-7蛋白和/或VEGF拮抗剂)的次数。给药频率可以表示为每给定时间的剂量数，例如，每天一次、每周一次或每两周一次。如本文所用，“给药频率”适用于受试者接受治疗剂的多次(或重复)施用的情况。本文所述的任何IL-7蛋白和VEGF拮抗剂的合适给药频率在本公开的别处提供。

如本文所用，术语“标准护理”是指被医学专家接受为对某种类型的疾病的适当治疗并且被医疗保健专业人员广泛使用的治疗。所述术语可以与以下术语中的任一者互换使用：“最佳实践”、“标准医疗护理”和“标准疗法”。如本公开中别处进一步描述的，在一些方面，标准护理包括化学疗法(例如替莫唑胺)。在一些方面，标准护理包括放射疗法。在一些方面，标准护理包括放射疗法和化学疗法(例如替莫唑胺)。

如本文所用，术语“药物”是指旨在向人或非人哺乳动物施用以预防或治疗疾病或其他不期望的疾患的任何生物活性剂(例如，IL-7蛋白和/或VEGF拮抗剂)。药物包括激素、生长因子、蛋白质、肽和其他化合物。在一些方面，本文所公开的药物是抗癌剂。除非另有说明，否则术语“药物”可以与术语“治疗剂”可互换使用。

例如，“抗癌剂”促进受试者的癌症消退或预防进一步的肿瘤生长。在一些方面，治疗有效量的药物促进癌症消退至消除癌症的程度。“促进癌症消退”意指单独或与抗肿瘤剂组合施用有效量的药物导致肿瘤生长或大小减少、肿瘤坏死、至少一种疾病症状的严重性降低、疾病无症状期的频率和持续时间增加或预防由疾病折磨引起的损伤或残疾。此外，关于治疗的术语“有效”和“有效性”包括药理有效性和生理安全性。药理有效性是指药物促进患者的癌症消退的能力。生理安全性是指由药物施用引起的在细胞、器官和/或生物体水平上的毒性或其他不良生理反应(不良反应)的水平。

举例来说，对于肿瘤的治疗，相对于未治疗的受试者，或在一些方面，相对于用标准护理疗法治疗的患者，治疗有效量的抗癌剂可以抑制细胞生长或肿瘤生长至少约10％、至少约20％、至少约40％、至少约60％或至少约80％。在一些方面，可以观察到肿瘤消退并持续至少约20天、至少约40天或至少约60天的时间段。虽然对治疗有效性进行了这些最终测量，但免疫治疗药物的评估也必须考虑到“免疫相关”的应答模式。

如本文所用，术语“免疫检查点抑制剂”是指完全或部分减少、抑制、干扰或调节一种或多种检查点蛋白的分子。检查点蛋白调控T细胞活化或功能。许多检查点蛋白是已知的，诸如CTLA-4及其配体CD80和CD86；和PD-1及其配体PD-L1和PD-L2。Pardoll,D.M.,NatRev Cancer 12(4):252-64(2012)。这些蛋白质负责T细胞应答的共刺激或抑制性相互作用。免疫检查点蛋白调控并维持自身耐受性以及生理免疫应答的持续时间和幅度。免疫检查点抑制剂包括抗体或来源于抗体。可用于本公开的合适的免疫检查点抑制剂在本公开的别处提供。

如本文所用，术语“参考受试者”是指未接受本文所述的组合治疗(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)的相应受试者(例如，癌症受试者)。在一些方面，参考受试者是指接受单独的IL-7蛋白或单独的VEGF拮抗剂的相应受试者。在一些方面，参考受试者既没有接受IL-7蛋白也没有接受VEGF拮抗剂。术语“参考受试者”也可以是指同一受试者(即，用本文提供的方法治疗的受试者)，但在施用IL-7蛋白和VEGF拮抗剂的组合之前。在一些方面，术语“参考受试者”是指受试者群体(例如，癌症受试者)的平均值。

如本文所用，术语“ug”和“uM”可分别与“μg”和“μΜ”互换使用。

本文所述的各个方面更详细描述于以下小节中。

II.本公开的方法

本文提供了一种治疗有需要的受试者的肿瘤(或癌症)的方法，其包括向受试者施用白介素-7(IL-7)蛋白与血管内皮生长因子(“VEGF”)拮抗剂(“VEGF拮抗剂”)的组合。在本公开的别处提供了可用于所述方法的IL-7蛋白和VEGF拮抗剂的非限制性实例。如本文所证明的，与单独的任一种治疗剂相比，包含IL-7蛋白和VEGF拮抗剂(诸如本文所述的那些)的治疗方案可与显著提高的抗肿瘤免疫力相关。

因此，在一些方面，施用本文所述的组合治疗(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)可以增加受试者的抗肿瘤免疫应答。在一些方面，与参考受试者的相应值相比，在施用后，抗肿瘤免疫应答增加至少约0.5倍、至少约1倍、至少约2倍、至少约3倍、至少约4倍、至少约5倍、至少约6倍、至少约7倍、至少约8倍、至少约9倍、至少约10倍、至少约15倍、至少约20倍、至少约25倍、至少约30倍、至少约40倍或至少约50倍。例如，在一些方面，与施用组合治疗前受试者的抗肿瘤免疫应答相比，受试者的抗肿瘤免疫应答增加。在一些方面，与接受单独IL-7蛋白或单独VEGF拮抗剂的施用的相应受试者相比，受试者的抗肿瘤免疫应答增加。在一些方面，与未接受IL-7蛋白或VEGF拮抗剂的相应受试者相比，受试者的抗肿瘤免疫应答增加。

在一些方面，抗肿瘤免疫应答增加可与以下一种或多种治疗效果相关：(i)肿瘤体积和/或生长减小；(ii)肿瘤特异性T细胞的效应子活性(例如，杀死肿瘤细胞的能力)增加；(iii)例如在肿瘤中肿瘤特异性效应T细胞数量增加；(iv)例如在肿瘤中肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)数量增加；(v)例如在肿瘤中髓源性抑制细胞(MDSC)数量降低；(vi)例如在肿瘤中调节性T细胞(Treg)数量降低；(vii)受试者存活持续时间延长；(viii)例如在肿瘤、肿瘤引流淋巴结(TDLN)或两者中CD8+T细胞上TOX的表达降低；(ix)例如在肿瘤、TDLN或两者中干细胞样T细胞数量增加；或(x)其任何组合。除非另有说明，否则术语“数值”既是指绝对数字也是指百分比。上文或本公开中别处描述的任何治疗效果可以使用本文提供的和/或本领域已知的任何合适的方法来确定。

在一些方面，施用本文所述的组合治疗(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)减小了受试者的肿瘤体积。在一些方面，与参考受试者的相应值相比，肿瘤体积减小至少约5％、至少约10％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％或至少约100％。在一些方面，施用本文所述的组合治疗(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)可以减少受试者中肿瘤的生长(“肿瘤生长”)。在一些方面，与参考受试者的相应值相比，肿瘤生长减少至少约5％、至少约10％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％或至少约100％。

在一些方面，施用本文所述的组合治疗(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)可以增加受试者中肿瘤特异性T细胞(例如，CD8⁺T细胞和/或CD4⁺T细胞)的效应子活性。在一些方面，与参考受试者的相应值相比，效应子活性增加至少约0.5倍、至少约1倍、至少约2倍、至少约3倍、至少约4倍、至少约5倍、至少约6倍、至少约7倍、至少约8倍、至少约9倍、至少约10倍、至少约15倍、至少约20倍、至少约25倍、至少约30倍、至少约40倍或至少约50倍。在一些方面，效应子活性包括可用于治疗癌症的T细胞(例如CD8⁺T细胞和/或CD4⁺T细胞)的任何细胞溶解活性。这种效应子活性的非限制性实例包括在抗原刺激时产生效应子分子(例如细胞因子、穿孔素和/或颗粒酶)的能力；识别和杀死肿瘤细胞的能力；或者两者。

在一些方面，施用本文所述的组合治疗(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)可以增加受试者中肿瘤特异性效应T细胞(例如，CD8⁺和/或CD4⁺)的数量。在一些方面，与参考受试者的相应值相比，肿瘤特异性效应T细胞的数量增加至少约0.5倍、至少约1倍、至少约2倍、至少约3倍、至少约4倍、至少约5倍、至少约6倍、至少约7倍、至少约8倍、至少约9倍、至少约10倍、至少约15倍、至少约20倍、至少约25倍、至少约30倍、至少约40倍或至少约50倍。

不受任何理论束缚，在一些方面，数量的增加是由于肿瘤特异性效应T细胞增殖的增加。因此，在一些方面，与参考受试者的相应值相比，在施用本文所述的组合治疗(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)后，肿瘤特异性效应T细胞的增殖增加至少约0.5倍、至少约1倍、至少约2倍、至少约3倍、至少约4倍、至少约5倍、至少约6倍、至少约7倍、至少约8倍、至少约9倍、至少约10倍、至少约15倍、至少约20倍、至少约25倍、至少约30倍、至少约40倍或至少约50倍。在一些方面，肿瘤特异性效应T细胞数量的增加是由于T细胞存活和/或持续存在的能力。在一些方面，与参考受试者的相应值相比，在施用后，肿瘤特异性效应T细胞在受试者中存活和/或持续存在的能力增加至少约0.5倍、至少约1倍、至少约2倍、至少约3倍、至少约4倍、至少约5倍、至少约6倍、至少约7倍、至少约8倍、至少约9倍、至少约10倍、至少约15倍、至少约20倍、至少约25倍、至少约30倍、至少约40倍或至少约50倍。在一些方面，本文所述的组合治疗(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)在施用于受试者时，可增加肿瘤特异性效应T细胞的增殖和存活/持久性。

在一些方面，肿瘤特异性效应T细胞是肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)。因此，在一些方面，施用本文所述的组合治疗(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)可以增加受试者肿瘤中的TIL数量。在一些方面，与参考受试者的相应值相比，受试者肿瘤中的TIL数量增加至少约0.5倍、至少约1倍、至少约2倍、至少约3倍、至少约4倍、至少约5倍、至少约6倍、至少约7倍、至少约8倍、至少约9倍、至少约10倍、至少约15倍、至少约20倍、至少约25倍、至少约30倍、至少约40倍或至少约50倍。在一些方面，受试者肿瘤中TIL数量的增加可能与TIL从外周向肿瘤募集的增加相关。在一些方面，与参考受试者的相应值相比，在施用本文所述的组合治疗(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)后，肿瘤中TIL的募集增加至少约0.5倍、至少约1倍、至少约2倍、至少约3倍、至少约4倍、至少约5倍、至少约6倍、至少约7倍、至少约8倍、至少约9倍、至少约10倍、至少约15倍、至少约20倍、至少约25倍、至少约30倍、至少约40倍或至少约50倍。

在一些方面，施用本文所述的组合治疗(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)可以减少受试者肿瘤中的调节性T细胞(Treg)数量。在一些方面，调节性T细胞是CD4⁺调节性T细胞。在一些方面，调节性T细胞是Foxp3⁺。在一些方面，与参考受试者的相应值相比，肿瘤中的调节性T细胞数量和/或百分比减少至少约5％、至少约10％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％或约100％。

在一些方面，施用本文所述的组合治疗(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)可以减少受试者肿瘤中髓源性抑制细胞(MDSC)的数量。如本文所用，术语“髓源性抑制细胞”(MDSC)是指免疫细胞的异质性群体，其由髓源性、未成熟状态和有效抑制T细胞应答的能力来定义。已知它们在某些病理条件，诸如慢性感染和癌症下会扩增。在一些方面，MDSC是单核细胞MDSC(M-MDSC)。在一些方面，MDSC是多形核MDSC(PMN-MDSC)。在一些方面，与参考受试者的相应值相比，在施用后，肿瘤中的MDSC数量减少至少约5％、至少约10％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％或约100％。

对本领域技术人员来说将显而易见的是，在一些方面，上文所述的一种或多种治疗效果可以导致(i)受试者的存活率(例如，无进展存活率)增加，(ii)反应率增加，(iii)疾病进展减缓，或(iv)其组合。因此，在一些方面，施用本文所述的组合治疗(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)可以延长受试者(例如，患有肿瘤的受试者)的存活持续时间。在一些方面，与参考受试者的相应值相比，存活持续时间延长了至少约0.5倍、至少约1倍、至少约2倍、至少约3倍、至少约4倍、至少约5倍、至少约6倍、至少约7倍、至少约8倍、至少约9倍、至少约10倍、至少约15倍、至少约20倍、至少约25倍、至少约30倍、至少约40倍或至少约50倍。在一些方面，与参考受试者相比，在施用后，受试者的存活持续时间延长了至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月、至少约6个月、至少约7个月、至少约8个月、至少约9个月、至少约10个月、至少约11个月或至少约1年或更长时间。在一些方面，在施用后，受试者的存活持续时间延长的水平高于参考受试者的存活持续时间(高约一个月、高约两个月、高约三个月、高约四个月、高约五个月、高约六个月、高约七个月、高约八个月、高约九个月、高约十个月、高约十一个月或高约一年)。

在一些方面，施用本文所述的组合治疗(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)可以延长受试者(例如，癌症患者)的无进展存活持续时间。例如，与参考受试者相比，受试者的无进展存活期延长了至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月、至少约6个月、至少约7个月、至少约8个月、至少约9个月、至少约10个月、至少约11个月或至少约1年。

在一些方面，施用本文所述的组合治疗(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)可以增加一组受试者的反应率。例如，与参考受试者的相应值相比，一组受试者的反应率增加至少约0.5倍、至少约1倍、至少约2倍、至少约3倍、至少约4倍、至少约5倍、至少约6倍、至少约7倍、至少约8倍、至少约9倍、至少约10倍、至少约15倍、至少约20倍、至少约25倍、至少约30倍、至少约40倍或至少约50倍。

在一些方面，施用本文所述的组合治疗(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)可以减缓癌症的进展。在一些方面，与参考受试者的相应值相比，在施用后，疾病的进展减少至少约5％、至少约10％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％或约100％。

在一些方面，施用本文所述的组合治疗(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)可降低例如存在于肿瘤、肿瘤引流淋巴结或两者中的CD8+T细胞中TOX的表达。在一些方面，与参考受试者的相应值相比，在施用后，CD8+T细胞中TOX的表达降低了至少约5％、至少约10％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％或至少约100％。不受任何理论束缚，至少在CD8+T细胞上，TOX被认为在T细胞衰竭的诱导中起重要作用。参见例如Khan等人,Nature 571:211-218(2019)。因此，在一些方面，本文所述的组合治疗(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)在施用于受试者时可有助于减少T细胞耗竭。

在一些方面，施用本文所述的组合治疗可以增加例如存在于肿瘤、肿瘤引流淋巴结或两者中的干细胞样T细胞的数量。如本文所用，“干细胞样T细胞”是指分化程度较低但保留效应子活性(例如，杀死肿瘤细胞的能力)的T细胞。干细胞样T细胞可以使用本领域已知的任何合适的方法(例如，流式细胞术)通过它们的表型表达来鉴定。在一些方面，可用于本公开的干细胞样T细胞是TCF1+和TOX-。在一些方面，干细胞样T细胞另外是TIM3-。在一些方面，与参考受试者的相应值相比，在施用后，干细胞样T细胞数量增加至少约0.5倍、至少约1倍、至少约2倍、至少约3倍、至少约4倍、至少约5倍、至少约6倍、至少约7倍、至少约8倍、至少约9倍、至少约10倍、至少约15倍、至少约20倍、至少约25倍、至少约30倍、至少约40倍或至少约50倍。

在一些方面，以该方法治疗的受试者是非人动物，例如大鼠或小鼠。在一些方面，所述方法中所治疗的受试者是人。

如由本公开清楚的，本文所述的组合疗法(例如，IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)可用于治疗本领域已知的任何合适的癌症。可以用本文提供的公开内容治疗的癌症(或肿瘤)的非限制性实例包括鳞状细胞癌、小细胞肺癌(SCLC)、非小细胞肺癌、鳞状非小细胞肺癌(NSCLC)、非鳞状NSCLC、胃肠癌、肾癌(例如透明细胞癌)、卵巢癌、肝癌(例如肝细胞癌)、结直肠癌、子宫内膜癌、肾脏癌(例如肾细胞癌(RCC))、前列腺癌(例如激素难治性前列腺腺癌)、甲状腺癌、胰腺癌、子宫颈癌、胃癌(stomach cancer)、膀胱癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌和头颈癌(或癌(carcinoma))、胃癌(gastric cancer)、生殖细胞瘤、儿科肉瘤、鼻窦自然杀伤细胞、黑色素瘤(例如转移性恶性黑色素瘤，诸如皮肤或眼内恶性黑色素瘤)、骨癌、皮肤癌、子宫癌、肛区癌、睾丸癌、输卵管癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、阴道癌、外阴癌、食管癌(例如食管胃结合部癌)、小肠癌、内分泌系统癌症、副甲状腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、儿童实体瘤、输尿管癌、肾盂癌、肿瘤血管新生、垂体腺瘤、卡波西肉瘤(Kaposi'ssarcoma)、表皮样癌、鳞状细胞癌、T-细胞淋巴瘤、环境诱导性癌症(包括由石棉诱导的那些)、病毒相关癌症或病毒来源的癌症(例如人乳头瘤病毒(HPV相关或来源的肿瘤))以及来源于两种主要血液细胞谱系(即骨髓细胞系(其产生粒细胞、红细胞、血小板、巨噬细胞和肥大细胞)或淋巴细胞系(其产生B细胞、T细胞、NK细胞和浆细胞))的血液恶性肿瘤，诸如所有类型的白血病、淋巴瘤和骨髓瘤，例如急性、慢性、淋巴细胞性和/或骨髓性白血病，诸如急性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)和慢性骨髓性白血病(CML)、未分化的AML(MO)、成髓细胞性白血病(Ml)、成髓细胞白血病(M2；伴随细胞成熟)、早幼粒细胞白血病(M3或M3变体[M3V])、骨髓单核细胞性白血病(M4或伴随嗜酸性粒细胞增多症的M4变体[M4E])、单核细胞性白血病(M5)、红白血病(M6)、巨核细胞白血病(M7)、分离性粒细胞肉瘤和绿色瘤；淋巴瘤，诸如霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin'slymphoma，HL)、非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)、B细胞血液学恶性肿瘤(例如B细胞淋巴瘤)、T细胞淋巴瘤、淋巴浆细胞样淋巴瘤、单核细胞样B细胞淋巴瘤、黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤、间变性(例如Ki1⁺)大细胞淋巴瘤、成人T细胞淋巴瘤/白血病、套细胞淋巴瘤、血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤、血管中心性淋巴瘤、肠道T细胞淋巴瘤、原发性纵膈B细胞淋巴瘤、前体T淋巴母细胞淋巴瘤、T-淋巴母细胞性；和淋巴瘤/白血病(T-Lbly/T-ALL)、外周T细胞淋巴瘤、淋巴母细胞性淋巴瘤、移植后淋巴细胞增生性病症、真性组织细胞性淋巴瘤、原发性渗出性淋巴瘤、B细胞淋巴瘤、淋巴母细胞性淋巴瘤(LBL)、淋巴谱系的造血肿瘤、急性淋巴母细胞白血病、弥漫性大B细胞淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤(Burkitt's lymphoma)、滤泡性淋巴瘤、弥漫性组织细胞淋巴瘤(DHL)、免疫母细胞大细胞淋巴瘤、前体B淋巴母细胞淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤(CTLC)(也称为蕈样肉芽肿或塞扎里综合征(Sezary syndrome))和淋巴浆细胞样淋巴瘤(LPL)伴随华氏巨球蛋白血症(Waldenstrom's macroglobulinemia)；骨髓瘤，诸如IgG骨髓瘤、轻链骨髓瘤、非分泌性骨髓瘤、冒烟型骨髓瘤(也称为惰性骨髓瘤)、孤立性浆细胞瘤和多发性骨髓瘤、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、毛细胞淋巴瘤；骨髓谱系的造血肿瘤、间充质来源的肿瘤(包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤)；精原细胞瘤、畸胎癌、间充质来源的肿瘤(包括纤维肉瘤、横纹肌肉瘤(rhabdomyoscaroma)和骨肉瘤)；以及其他肿瘤，包括黑色素瘤、着色性干皮症、角化棘皮瘤、精原细胞瘤、甲状腺滤泡状癌和畸胎癌、淋巴谱系的造血肿瘤，例如T细胞肿瘤和B细胞肿瘤，包括但不限于T细胞病症，诸如T-幼淋巴细胞白血病(T-PLL)，包括小细胞和脑形细胞类型的肿瘤；T细胞类型的大颗粒淋巴细胞白血病(LGL)；a/d T-NHL肝脾淋巴瘤；外周/胸腺后T细胞淋巴瘤(多形性和免疫母细胞性亚型)；血管中心性(鼻)T细胞淋巴瘤；头部或颈部癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌；急性骨髓淋巴瘤以及其任何组合。

在一些方面，可以治疗的癌症(或肿瘤)包括乳腺癌、头颈癌、子宫癌、脑癌、皮肤癌、肾癌、肺癌、结直肠癌、前列腺癌、肝癌、膀胱癌、肾脏癌、胰腺癌、甲状腺癌、食管癌、眼癌、胃(胃部)癌、胃肠癌、癌、肉瘤、白血病、淋巴瘤、骨髓瘤或其组合。在一些方面，可以用本公开治疗的癌症(肿瘤)包括胰腺癌。在一些方面，可以治疗的癌症(肿瘤)包括脑癌。在一些方面，脑癌包括神经胶质瘤。在一些方面，脑癌包括胶质母细胞瘤。在一些方面，胶质母细胞瘤包括原发性胶质母细胞瘤。在一些方面，胶质母细胞瘤包括继发性胶质母细胞瘤。在一些方面，可以用本公开治疗的胶质母细胞瘤是难治的(例如，对于先前的癌症疗法，例如包括放射疗法和/或化学疗法的标准护理，例如替莫唑胺)。在一些方面，可以治疗的癌症(肿瘤)包括皮肤癌。皮肤癌的非限制性实例包括：默克尔细胞癌(MCC)、基底细胞癌(BCC)、皮肤鳞状细胞癌(cSCC)、黑色素瘤或其组合。

在一些方面，本文提供的公开内容(例如，包含IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合的治疗)还可用于治疗转移性癌症、不可切除的难治性癌症(例如，先前癌症治疗，例如免疫疗法和/或标准护理难治的癌症)和/或复发性癌症。在一些方面，先前的癌症疗法包括化学疗法。在一些方面，化学疗法包括铂基(platinum-based)疗法。在一些方面，基于铂的疗法包括选自由以下组成的组的基于铂的抗肿瘤药：顺铂、卡铂、奥沙利铂、奈达铂、四硝酸曲铂(triplatin tetranitrate)、菲铂(phenanthriplatin)、吡铂、赛特铂(satraplatin)及其任何组合。在一些方面，基于铂的疗法包括顺铂。在一些方面，基于铂的疗法包含卡铂。

在一些方面，用本文提供的公开内容治疗的受试者已接受了一种、两种、三种、四种、五种或更多种先前的癌症治疗。在一些方面，受试者是未经治疗的(即，从未接受过先前的癌症治疗)。在一些方面，受试者已在其他癌症治疗方面取得了进展。在一些方面，先前的癌症治疗包括免疫疗法。在一些方面，先前的癌症治疗包括化学疗法。在一些方面，先前的癌症治疗包括放射疗法。在一些方面，先前的癌症治疗包括标准护理，例如化学疗法(例如替莫唑胺)和/或放射疗法。在一些方面，肿瘤已复发。在一些方面，肿瘤是转移性的。在一些方面，肿瘤是非转移性的。因此，如本公开中别处进一步描述的，在一些方面，用本公开治疗的受试者患有先前癌症治疗(例如，标准护理)难治的癌症。在一些方面，可用本公开治疗的受试者患有标准护理(例如放射疗法和/或替莫唑胺)难治的胶质母细胞瘤。

在一些方面，本文公开的IL-7蛋白的单位剂量(例如，用于人用途)可以在约0.001mg/kg至约10mg/kg的范围内。在一些方面，IL-7蛋白的单位剂量在约0.01mg/kg至约2mg/kg的范围内。在一些方面，单位剂量在约0.02mg/kg至约1mg/kg的范围内。

在一些方面，本文所公开的IL-7蛋白可以基于重量的剂量施用至受试者。在一些方面，IL-7蛋白可以约20μg/kg与约600μg/kg之间的基于重量的剂量施用。在一些方面，本公开的IL-7蛋白可以约20μg/kg、约60μg/kg、约120μg/kg、约240μg/kg、约360μg/kg、约480μg/kg或约600μg/kg的基于重量的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以60μg/kg的剂量施用至受试者。在一些方面，IL-7蛋白以120μg/kg的剂量施用至受试者。在一些方面，IL-7蛋白以240μg/kg的剂量施用至受试者。

在一些方面，本文所公开的IL-7蛋白可以以大于约600μg/kg的剂量施用至受试者。在一些方面，IL-7蛋白以大于约600μg/kg、大于约700μg/kg、大于约800μg/kg、大于约900μg/kg、大于约1,000μg/kg、大于约1,100μg/kg、大于约1,200μg/kg、大于约1,300μg/kg、大于约1,400μg/kg、大于约1,500μg/kg、大于约1,600μg/kg、大于约1,700μg/kg、大于约1,800μg/kg、大于约1,900μg/kg或大于约2,000μg/kg的剂量施用至受试者。

在一些方面，本公开的IL-7蛋白以610μg/kg与约1,200μg/kg之间、650μg/kg与约1,200μg/kg之间、约700μg/kg与约1,200μg/kg之间、约750μg/kg与约1,200μg/kg之间、约800μg/kg与约1,200μg/kg之间、约850μg/kg与约1,200μg/kg之间、约900μg/kg与约1,200μg/kg之间、约950μg/kg与约1,200μg/kg之间、约1,000μg/kg与约1,200μg/kg之间、约1,050μg/kg与约1,200μg/kg之间、约1,100μg/kg与约1,200μg/kg之间、约1,200μg/kg与约2,000μg/kg之间、约1,300μg/kg与约2,000μg/kg之间、约1,500μg/kg与约2,000μg/kg之间、约1,700μg/kg与约2,000μg/kg之间、约610μg/kg与约1,000μg/kg之间、约650μg/kg与约1,000μg/kg之间、约700μg/kg与约1,000μg/kg之间、约750μg/kg与约1,000μg/kg之间、约800μg/kg与约1,000μg/kg之间、约850μg/kg与约1,000μg/kg之间、约900μg/kg与约1,000μg/kg之间或约950μg/kg与约1,000μg/kg之间的剂量施用。

在一些方面，本公开的IL-7蛋白以610μg/kg与约1,200μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以650μg/kg与约1,200μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约700μg/kg与约1,200μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约750μg/kg与约1,200μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约800μg/kg与约1,200μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约850μg/kg与约1,200μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约900μg/kg与约1,200μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约950μg/kg与约1,200μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，本文所公开的IL-7蛋白以约1,000μg/kg与约1,200μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,050μg/kg与约1,200μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,100μg/kg与约1,200μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,200μg/kg与约2,000μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,300μg/kg与约2,000μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,500μg/kg与约2,000μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,700μg/kg与约2,000μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约610μg/kg与约1,000μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约650μg/kg与约1,000μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约700μg/kg与约1,000μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约750μg/kg与约1,000μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约800μg/kg与约1,000μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约850μg/kg与约1,000μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，本公开的IL-7蛋白以约900μg/kg与约1,000μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约950μg/kg与约1,000μg/kg之间的剂量施用。

在一些方面，IL-7蛋白以约700μg/kg与约900μg/kg之间、约750μg/kg与约950μg/kg之间、约700μg/kg与约850μg/kg之间、约750μg/kg与约850μg/kg之间、约700μg/kg与约800μg/kg之间、约800μg/kg与约900μg/kg之间、约750μg/kg与约850μg/kg之间或约850μg/kg与约950μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约700μg/kg与约900μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约750μg/kg与约950μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约700μg/kg与约850μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约750μg/kg与约850μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约700μg/kg与约800μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约800μg/kg与约900μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约750μg/kg与约850μg/kg之间的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约850μg/kg与约950μg/kg之间的剂量施用。

在一些方面，IL-7蛋白以约650μg/kg、约680μg/kg、约700μg/kg、约720μg/kg、约740μg/kg、约750μg/kg、约760μg/kg、约780μg/kg、约800μg/kg、约820μg/kg、约840μg/kg、约850μg/kg、约860μg/kg、约880μg/kg、约900μg/kg、约920μg/kg、约940μg/kg、约950μg/kg、约960μg/kg、约980μg/kg、约1,000μg/kg、约1,020μg/kg、约1,020μg/kg、约1,040μg/kg、约1,060μg/kg、约1,080μg/kg、约1,100μg/kg、约1,120μg/kg、约1,140μg/kg、约1,160μg/kg、约1,180μg/kg、约1,200μg/kg、约1,220μg/kg、约1,240μg/kg、约1,260μg/kg、约1,280μg/kg、约1,300μg/kg、约1,320μg/kg、约1,340μg/kg、约1,360μg/kg、约1,380μg/kg、约1,400μg/kg、约1,420μg/kg、约1,440μg/kg、约1,460μg/kg、约1,480μg/kg、约1,500μg/kg、约1,520μg/kg、约1,540μg/kg、约1,560μg/kg、约1,580μg/kg、约1,600μg/kg、约1,620μg/kg、约1,640μg/kg、约1,660μg/kg、约1,680μg/kg、约1,700μg/kg、约1,720μg/kg、约1,740μg/kg、约1,760μg/kg、约1,780μg/kg、约1,800μg/kg、约1,820μg/kg、约1,840μg/kg、约1,860μg/kg、约1,880μg/kg、约1,900μg/kg、约1,920μg/kg、约1,940μg/kg、约1,960μg/kg、约1,980μg/kg或约2,000μg/kg的剂量施用。

在一些方面，IL-7蛋白以约650μg/kg的剂量施用。在一些方面，本文所公开的IL-7蛋白以约680μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约700μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约720μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约740μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约750μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约760μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约780μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约800μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约820μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约840μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约850μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约860μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约880μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约900μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约920μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约940μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约950μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约960μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约980μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,000μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,020μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,040μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,060μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,080μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,100μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,120μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,140μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,160μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,180μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,200μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,220μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,240μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,260μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,280μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,300μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,320μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,340μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,360μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,380μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,400μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,420μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,440μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,460μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,480μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,500μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,520μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,540μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,560μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,580μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,600μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,620μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,640μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,660μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,680μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,700μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,720μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,740μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,760μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,780μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,800μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,820μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,840μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,860μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,880μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,900μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,920μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,940μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,960μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约1,980μg/kg的剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白以约2,000μg/kg的剂量施用。

在一些方面，IL-7蛋白可以固定剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白可以约0.25mg至约9mg的固定剂量施用。在一些方面，IL-7蛋白可以约0.25mg、约1mg、约3mg、约6mg或约9mg的固定剂量施用。

在一些方面，本文公开的受试者接受上述任何剂量的IL-7蛋白的单次施用。在一些方面，本文所公开的IL-7蛋白以多剂量(即，重复施用)施用至受试者。在一些方面，向受试者施用IL-7蛋白至少两次、至少三次、至少四次、至少五次、至少六次、至少七次、至少八次、至少九次或至少十次或更多次。

在受试者(例如患有肿瘤的受试者)接受多次IL-7蛋白施用的情况下，在一些方面，IL-7蛋白以约一周一次、约两周一次、约三周一次、约四周一次、约五周一次、约六周一次、约七周一次、约八周一次、约九周一次、约10周一次、约11周一次或约12周一次的给药频率施用，例如以上述剂量之一施用。在一些方面，IL-7蛋白以约每10天一次、约每20天一次、约每30天一次、约每40天一次、约每50天一次、约每60天一次、约每70天一次、约每80天一次、约每90天一次或约每100天一次的给药频率施用。在一些方面，IL-7蛋白三周施用一次。在一些方面，IL-7蛋白每周施用一次。在一些方面，IL-7蛋白两周施用一次。在一些方面，IL-7蛋白四周施用一次。在一些方面，IL-7蛋白六周施用一次。在一些方面，IL-7蛋白八周施用一次。在一些方面，IL-7蛋白九周施用一次。在一些方面，IL-7蛋白12周施用一次。在一些方面，IL-7蛋白每10天施用一次。在一些方面，IL-7蛋白每20天施用一次。在一些方面，IL-7蛋白每30天施用一次。在一些方面，IL-7蛋白每40天施用一次。在一些方面，IL-7蛋白每50天施用一次。在一些方面，IL-7蛋白每60天施用一次。在一些方面，IL-7蛋白每70天施用一次。在一些方面，IL-7蛋白每80天施用一次。在一些方面，IL-7蛋白每90天施用一次。在一些方面，IL-7蛋白每100天施用一次。如本文所述，在一些方面，IL-7蛋白以约1,200μg/kg的剂量和约8周的给药间隔施用。

在一些方面，VEGF拮抗剂(例如，与本文所述的IL-7蛋白组合)可以任何合适的剂量和/或给药频率施用至受试者以治疗本文所述的肿瘤。在一些方面，VEGF拮抗剂以约0.001mg/kg至约20mg/kg的剂量施用至受试者。在一些方面，VEGF拮抗剂以约1mg/kg至约20mg/kg的剂量施用。在一些方面，VEGF拮抗剂(例如贝伐单抗)以约5mg/kg至约15mg/kg的剂量施用。在一些方面，VEGF拮抗剂(例如，贝伐单抗)以约5mg/kg、约7.5mg/kg、约10mg/kg、约12.5mg/kg或约15mg/kg的剂量施用。在一些方面，VEGF拮抗剂以约5mg/kg的剂量施用至受试者。在一些方面，VEGF拮抗剂以约7.5mg/kg的剂量施用至受试者。在一些方面，VEGF拮抗剂以约10mg/kg的剂量施用至受试者。在一些方面，VEGF拮抗剂以约12.5mg/kg的剂量施用至受试者。在一些方面，VEGF拮抗剂以约15mg/kg的剂量施用至受试者。在一些方面，VEGF拮抗剂(例如，阿柏西普)以约4mg/kg至约15mg/kg的剂量施用至受试者。在一些方面，VEGF拮抗剂(例如阿柏西普)以约4mg/kg的剂量施用。

在一些方面，本文公开的受试者接受上述任何剂量的VEGF拮抗剂(例如，与IL-7蛋白组合)的单次施用。在一些方面，本文公开的VEGF拮抗剂以多个剂量(即重复施用)施用至受试者(例如单独施用或与IL-7蛋白组合施用)。在一些方面，向受试者施用VEGF拮抗剂至少约两次、至少约三次、至少约四次、至少约五次、至少约六次、至少约七次、至少约八次、至少约九次或至少约十次或更多次。

在受试者(例如，患有肿瘤的受试者)接受多次VEGF拮抗剂(例如，单独或与IL-7蛋白组合)施用的情况下，在一些方面，VEGF拮抗剂以约一天一次、约两天一次、约三天一次、约四天一次、约五天一次、约六天一次、约一周一次、约两周一次、约三周一次、约四周一次、约五周一次、约六周一次、约七周一次、约八周一次、约九周一次、约10周一次、约11周一次或约12周一次的给药频率施用，例如以本文所述的剂量之一施用。如本文所述，在一些方面，VEGF拮抗剂(例如贝伐单抗)以约10mg/kg的剂量和约2周的给药间隔施用。

因此，在一些方面，本文所述的受试者(例如，患有肿瘤)接受单剂量的IL-7蛋白(例如，本文所述的剂量之一)和单剂量的VEGF拮抗剂(例如，本文所述的剂量之一)。在这些方面，IL-7蛋白和VEGF拮抗剂可以同时施用至受试者。例如，在一些方面，IL-7蛋白和VEGF拮抗剂可以作为在药学上可接受的载体中的单一组合物同时施用。在一些方面，IL-7蛋白和VEGF拮抗剂可以作为单独的组合物同时施用。在一些方面，IL-7蛋白和VEGF拮抗剂依次施用至受试者。在依次向受试者施用IL-7蛋白和VEGF拮抗剂的情况下，在一些方面，施用IL-7蛋白和施用VEGF拮抗剂之间的持续时间为至少约一天、至少约两天、至少约三天、至少约四天、至少约五天、至少约六天、至少约一周、至少约两周、至少约三周、至少约四周、至少约五周、至少约六周、至少约七周、至少约八周、至少约九周、至少约十周、至少约11周、至少约12周或更长时间。在一些方面，在施用VEGF拮抗剂之前向受试者施用IL-7蛋白。在一些方面，在施用VEGF拮抗剂后向受试者施用IL-7蛋白。

在一些方面，本文所述的受试者(例如，患有肿瘤)接受单剂量的IL-7蛋白(例如，本文所述剂量之一)和多剂量(例如，至少约2个、至少约3个或至少约4个剂量)的VEGF拮抗剂。在一些方面，本文所述的受试者(例如，患有肿瘤)接受多剂量的IL-7蛋白(例如，本文所述的剂量之一)和单剂量的VEGF拮抗剂(例如，本文所述的剂量之一)。在一些方面，本文所述的受试者(例如，患有肿瘤)接受多剂量的IL-7蛋白(例如，本文所述的剂量之一)和多剂量的VEGF拮抗剂(例如，本文所述的剂量之一)。

在向受试者施用多剂量的IL-7蛋白和/或VEGF拮抗剂的情况下，在一些方面，向受试者同时施用至少一种剂量的IL-7蛋白和至少一种剂量的VEGF拮抗剂(例如，作为单一组合物或两种单独的组合物)。在一些方面，向受试者同时施用多种剂量中每一种的IL-7蛋白和多种剂量中每一种的VEGF拮抗剂(例如，作为单一组合物或两种单独的组合物)。在一些方面，向受试者依次施用多种剂量中一种或多种的IL-7蛋白和多种剂量中一种或多种的VEGF拮抗剂。在一些方面，(i)同时施用多种剂量中至少一种的IL-7蛋白和多种剂量中至少一种的VEGF拮抗剂(例如，作为单一组合物或两种单独的组合物)，和(ii)依次施用多种剂量中至少一种的IL-7蛋白和多种剂量中至少一种的VEGF拮抗剂(例如，在单独的天内)。

从本公开中清楚的是，在一些方面，受试者接受多个周期的本文所述的治疗方案(IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)。在一些方面，受试者接受至少约两个、至少约三个、至少约四个、至少约五个、至少约六个、至少约七个、至少约八个、至少约九个、至少约10个周期的治疗方案。在一些方面，受试者接受两个周期的治疗方案。在一些方面，受试者接受三个周期的治疗方案。在一些方面，受试者接受四个周期的治疗方案。在一些方面，受试者接受五个周期的治疗方案。在一些方面，受试者接受六个周期的治疗方案。在一些方面，受试者接受七个周期的治疗方案。在一些方面，受试者接受八个周期的治疗方案。在一些方面，受试者接受九个周期的治疗方案。在一些方面，受试者接受10个周期的治疗方案。在向受试者施用多个周期的治疗方案的情况下，在一些方面，每个治疗周期是相同的。在一些方面，一个或多个治疗周期是不同的(例如不同的剂量和/或给药间隔)。

在一些方面，每个治疗周期为约一周、约两周、约三周、约四周、约五周、约六周、约七周、约八周、约九周、约10周、约11周或约12周长。如本文所述，在一些方面，每个治疗周期为约8周长。除非另有说明，否则每个治疗周期包括至少一个剂量的IL-7蛋白和至少一个剂量的VEGF拮抗剂。在一些方面，每个治疗周期包括一个剂量的IL-7蛋白和一个剂量的VEGF拮抗剂。在一些方面，每个治疗周期包括一个剂量的IL-7蛋白和两个剂量的VEGF拮抗剂。在一些方面，每个治疗周期包括一个剂量的IL-7蛋白和三个剂量的VEGF拮抗剂。在一些方面，每个治疗周期包括一个剂量的IL-7蛋白和四个剂量的VEGF拮抗剂。在一些方面，每个治疗周期包括一个剂量的IL-7蛋白和五个剂量的VEGF拮抗剂。如本文所证实(参见例如实施例3)，在一些方面，每个治疗周期包括一个剂量的IL-7蛋白和四个剂量的VEGF拮抗剂，以两周的给药间隔施用。例如，在一些方面，在治疗周期的第1天向受试者施用IL-7蛋白和VEGF拮抗剂，然后在治疗周期的第15、29和43天施用额外剂量的VEGF拮抗剂。

在一些方面，本文所述的IL-7蛋白和VEGF拮抗剂的组合治疗可以与一种或多种另外的治疗剂一起使用。此类另外的治疗剂的非限制性实例包括：化学疗法药物、小分子药物、放射、刺激对给定癌症的免疫应答的抗体或其组合。因此，在一些方面，本文提供了一种治疗有需要的受试者的肿瘤的方法，其包括向受试者施用IL-7蛋白与VEGF拮抗剂和另外的治疗剂的组合。这种组合的非限制性实例可包括：增强肿瘤抗原呈递的疗法(例如，树突细胞疫苗、分泌GM-CSF的细胞疫苗、CpG寡核苷酸、咪喹莫特(imiquimod))；例如通过抑制CTLA-4和/或PD1/PD-L1/PD-L2途径和/或耗尽或阻断Treg或其他免疫抑制细胞(例如，髓源性抑制细胞)来抑制负性免疫调节的疗法；例如用刺激CD-137、OX-40和/或CD40或GITR途径和/或刺激T细胞效应子功能的激动剂刺激正向免疫调控的疗法；系统性增加抗肿瘤T细胞的频率的疗法；例如使用CD25的拮抗剂(例如，达利珠单抗(daclizumab))或通过离体抗CD25珠耗竭来耗竭或抑制Treg，诸如肿瘤中的Treg的疗法；影响肿瘤中抑制性髓样细胞的功能的疗法；增强肿瘤细胞免疫原性的疗法(例如，蒽环类抗生素)；过继性T细胞或NK细胞转移，包括遗传修饰的细胞，例如由嵌合抗原受体修饰的细胞(CAR-T疗法)；抑制代谢酶，诸如吲哚胺二氧化酶(IDO)、二氧化酶、精氨酸酶或一氧化氮合成酶的疗法；逆转/预防T细胞无能或衰竭的疗法；在肿瘤部位处引发先天免疫活化和/或炎症的疗法；免疫刺激性细胞因子的施用；或免疫抑制性细胞因子的阻断。

在一些方面，可与IL-7蛋白和VEGF拮抗剂的组合治疗一起使用的另外的治疗剂包括免疫检查点抑制剂(即，阻断通过特定免疫检查点途径的信号传导)。因此，在一些方面，本公开提供了一种治疗有需要的受试者的肿瘤的方法，其包括向受试者施用IL-7蛋白与VEGF拮抗剂和免疫检查点抑制剂的组合。可用于本方法的免疫检查点抑制剂的非限制性示例包括CTLA-4拮抗剂(例如，抗CTLA-4抗体)、PD-1拮抗剂(例如，抗PD-1抗体、抗PD-L1抗体)、TIM-3拮抗剂(例如，抗TIM-3抗体)或其组合。此类免疫检查点抑制剂的非限制性实例是本领域已知的。例如，合适的抗PD-1拮抗剂描述于例如美国专利号6,808,710；7,488,802；8,008,449；8,168,757；8,354,509；8,609,089；8,779,105；和9,217,034；以及美国专利号7,635,757；7,943,743；8,217,149；8,981,063；和9,624,298中，所述专利各自以引用的方式整体并入本文。合适的抗CTLA-4拮抗剂描述于例如美国专利号5,977,318；6,051,227；6,682,736；6,984,720；7,034,121；7,605,238；10,479,833；以及国际公布号WO 2007/113648中，所述专利各自均以引用的方式整体并入本文。合适的TIM-3拮抗剂描述于例如美国专利号10,508,149；10,533,052；10,894,830中，所述专利各自以引用的方式整体并入本文。

在一些方面，可以使用的另外的治疗剂包括免疫检查点活化剂(即，促进通过特定免疫检查点途径的信号传导)。在一些方面，免疫检查点活化剂包括OX40激动剂(例如，抗OX40抗体)、LAG-3激动剂(例如，抗LAG-3抗体)、4-1BB(CD137)激动剂(例如，抗CD137抗体)、GITR激动剂(例如，抗GITR抗体)或其任何组合。

在一些方面，本文提供的治疗方案(IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)不与一种或多种其他抗癌治疗组合使用。因此，在一些方面，正在用IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合治疗的受试者不接受一种或多种以下抗癌治疗：(1)任何批准或实验用于治疗癌症的伴随治疗，包括化学疗法、激素治疗、免疫治疗、放射疗法、研究药物或草药治疗；(2)免疫抑制剂，包括但不限于环磷酰胺、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤和沙利度胺；(3)粒细胞集落刺激因子和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(例如，聚乙二醇非格司亭(pegfilgrastim))；以及(4)免疫刺激剂(例如IFN-α、IFN-γ和IL-2)。

II.A.可用于本公开的IL-7蛋白

本文公开了可与VEGF拮抗剂组合用于治疗癌症(或肿瘤)的IL-7蛋白。在一些方面，可用于本发明的用途的IL-7蛋白可以是野生型IL-7或修饰的IL-7(即，非野生型IL-7蛋白)(例如，IL-7变体、IL-7功能片段、IL-7衍生物或其任何组合，例如融合蛋白、嵌合蛋白等)，只要IL-7蛋白含有IL-7的一种或多种生物活性，例如能够与IL-7R结合，例如诱导早期T细胞发育，促进T细胞稳态即可。参见ElKassar和Gress.J Immunotoxicol.2010年3月；7(1):1–7。在一些方面，本公开的IL-7蛋白不是野生型IL-7蛋白(即，包含一个或多个修饰)。此类修饰的非限制性实例可包括寡肽和/或半衰期延长部分。参见WO 2016/200219，其以引用的方式整体并入本文。

IL-7与其受体结合，所述受体由与胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromallymphopoietin，TSLP)(Ziegler和Liu,2006)共享的两条链IL-7Rα(CD127)，以及IL-2、IL-15、IL-9和IL-21的共用γ链(CD132)构成。γc由大多数造血细胞表达，而IL-7Rα几乎仅在淋巴样细胞上表达。在与其受体结合后，IL-7通过两种不同的途径发出信号：分别为负责分化和存活的Jak-Stat(Janus激酶信号转导子和转录激活剂)和PI3K/Akt。如在已接受抗IL-7中和单克隆抗体(MAb)的小鼠(Grabstein等人,1993)、IL-7-/-小鼠(von Freeden-Jeffry等人,1995)、IL-7Rα-/-小鼠(Peschon等人,1994；Maki等人,1996)、γc-/-小鼠(Malissen等人,1997)和Jak3-/-小鼠(Park等人,1995)中所观察到的，不存在IL-7信号传导导致胸腺细胞减少。在不存在IL-7信号传导的情况下，小鼠缺乏T细胞、B细胞和NK-T细胞。IL-7α-/-小鼠(Peschon等人,1994)具有与IL-7-/-小鼠(von Freeden-Jeffry等人,1995)相似但更严重的表型，可能是因为在IL-7α-/-小鼠中TSLP信号传导也被废除。IL-7是γδ细胞(Maki等人,1996)和NK-T细胞(Boesteanu等人,1997)发育所必需的。

在一些方面，可用于本公开的IL-7蛋白包含如SEQ ID NO:1至6中任一者所示的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含与SEQ ID NO:1至6的序列具有约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％或更高序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含与SEQ ID NO:1中所示的序列具有至少约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含与SEQID NO:2中所示的序列具有至少约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含与SEQ ID NO:3中所示的序列具有至少约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含与SEQ ID NO:4中所示的序列具有至少约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含与SEQ ID NO:5中所示的序列具有至少约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含与SEQ ID NO:6中所示的序列具有至少约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％的氨基酸序列。

在一些方面，IL-7蛋白包括修饰的IL-7或其片段，其中修饰的IL-7或片段保留野生型IL-7的一种或多种生物活性。因此，在一些方面，可用于本公开的IL-7蛋白包含SEQ IDNO:1-6中任一者所示的氨基酸序列的片段，其中所述片段保留了野生型IL-7蛋白的一种或多种生物活性。在一些方面，IL-7蛋白可以来源于人、大鼠、小鼠、猴、母牛或绵羊。

在一些方面，人IL-7可以具有由SEQ ID NO:1(Genbank登录号P13232)表示的氨基酸序列；大鼠IL-7可以具有由SEQ ID NO:2(Genbank登录号P56478)表示的氨基酸序列；小鼠IL-7可以具有由SEQ ID NO:3(Genbank登录号P10168)表示的氨基酸序列；猴IL-7可以具有由SEQ ID NO:4(Genbank登录号NP 001279008)表示的氨基酸序列；母牛IL-7可以具有由SEQ ID NO:5(Genbank登录号P26895)表示的氨基酸序列，并且绵羊IL-7可以具有由SEQ IDNO:6(Genbank登录号Q28540)表示的氨基酸序列。对本领域技术人员来说将显而易见的是，在SEQ ID NO:1-6中任一者所提供的IL-7蛋白具有单一肽，但是IL-7蛋白的成熟形式不包含信号肽。因此，从本公开清楚的是，在一些方面，可以与本文提供的方法一起使用的IL-7蛋白缺乏信号肽。此类示例性IL-7蛋白的氨基酸序列提供在SEQ ID NO:80至85中(也参见表1A)。

因此，在一些方面，与SEQ ID NO:80至85中任一者所示的氨基酸序列相比，可用于本公开的IL-7蛋白包含具有约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％或更高的序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含与SEQ ID NO:80中所示的序列具有至少约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含SEQ ID NO:80中所示的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含与SEQ ID NO:81中所示的序列具有至少约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含SEQ ID NO:81中所示的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含与SEQ ID NO:82中所示的序列具有至少约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含SEQ ID NO:82中所示的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含与SEQ ID NO:83中所示的序列具有至少约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含SEQ ID NO.83中所示的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含与SEQ ID NO:84中所示的序列具有至少约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含SEQ ID NO:84中所示的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含与SEQ IDNO:85中所示的序列具有至少约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％的氨基酸序列。在一些方面，IL-7蛋白包含SEQ ID NO:85中所示的氨基酸序列。

在一些方面，可用于本公开的IL-7蛋白包括IL-7融合蛋白。在一些方面，IL-7融合蛋白包含(i)寡肽和(i)IL-7或其变体(例如，SEQ ID NO:1-6和80-85中任一者所示的IL-7蛋白)。在一些方面，寡肽连接至IL-7或其变体的N末端区域。

在一些方面，本文所公开的寡肽由1至10个氨基酸组成。在一些方面，寡肽由至少1个、至少2个、至少3个、至少4个、至少5个、至少6个、至少7个、至少8个、至少9个或10个氨基酸组成。在一些方面，寡肽的一个或多个氨基酸选自由蛋氨酸、甘氨酸及其组合组成的组。在一些方面，寡肽选自由以下组成的组：蛋氨酸、甘氨酸、蛋氨酸-蛋氨酸、甘氨酸-甘氨酸、蛋氨酸-甘氨酸、甘氨酸-蛋氨酸、蛋氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸、蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸、蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸、甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸、蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸、甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸、甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸和甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸。在一些方面，寡肽是蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸。

在一些方面，IL-7融合蛋白包含(i)IL-7或其变体，和(ii)半衰期延长部分。在一些方面，半衰期延长部分延长了IL-7或其变体的半衰期。在一些方面，半衰期延长部分连接至IL-7或其变体的C末端区域。

在一些方面，IL-7融合蛋白包含：(i)IL-7(第一结构域)；(ii)第二结构域，其包含具有1至10个由蛋氨酸、甘氨酸或其组合(例如MGM)组成的氨基酸残基的氨基酸序列；以及(iii)包含半衰期延长部分的第三结构域。在一些方面，半衰期延长部分可以连接到第一结构域或第二结构域的N末端或C末端。另外，包括第一结构域和第二结构域的IL-7可以连接到第三结构域的两个末端。

半衰期延长部分的非限制性实例包括Fc、白蛋白、白蛋白结合多肽、Pro/Ala/Ser(PAS)、人绒毛膜促性腺激素β亚基的C末端肽(CTP)、聚乙二醇(PEG)、长的非结构化亲水氨基酸序列(XTEN)、羟乙基淀粉(HES)、白蛋白结合小分子及其组合。

在一些方面，半衰期延长部分是Fc。在一些方面，Fc来自修饰的免疫球蛋白，其中抗体依赖性细胞毒性(ADCC)或补体依赖性细胞毒性(CDC)由于与Fc受体和/或补体的结合亲和力的修饰而减弱。在一些方面，修饰的免疫球蛋白可选自由以下组成的组：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1、IgA2、IgD、IgE及其组合。在一些方面，Fc是杂合Fc(“hFc”或“hyFc”)，其包含铰链区、CH2结构域和CH3结构域。在一些方面，本文公开的杂交Fc的铰链区包含人IgD铰链区。在一些方面，杂交Fc的CH2结构域包含人IgD CH2结构域的一部分和人IgG4 CH2结构域的一部分。在一些方面，杂交Fc的CH3结构域包含人IgG4 CH3结构域的一部分。因此，在一些方面，本文所公开的杂合Fc包含铰链区、CH2结构域和CH3结构域，其中铰链区包含人IgD铰链区，其中CH2结构域包含人IgD CH2结构域的一部分和人IgG4 CH2结构域的一部分，并且其中CH3结构域包含人IgG4 CH3结构域的一部分。

在一些方面，本文所公开的Fc可以是Fc变体。如本文所用，术语“Fc变体”是指通过取代Fc区中的一部分氨基酸或通过组合不同种类的Fc区而制备的Fc。Fc区变体可以防止在铰链区处被切断。具体而言，在一些方面，Fc变体包含SEQ ID NO:9的第144个氨基酸和/或第145个氨基酸处的修饰。在一些方面，第144个氨基酸(K)和/或第145个氨基酸(K)被G或S取代。

在一些方面，本文所公开的Fc或Fc变体可由下式表示：N'-(Z1)p–Y-Z2-Z3-Z4-C，其中：

N'包含N末端；

Z1包含具有在SEQ ID NO:7的位置90至98处的氨基酸残基中的从位置98处的氨基酸残基至N末端的5至9个连续的氨基酸残基的氨基酸序列；

Y包含具有在SEQ ID NO:7的位置99至162处的氨基酸残基中的从位置162处的氨基酸残基至N末端的5至64个连续的氨基酸残基的氨基酸序列；

Z2包含具有在SEQ ID NO:7的位置163至199处的氨基酸残基中的从位置163处的氨基酸残基至C末端的4至37个连续的氨基酸残基的氨基酸序列；

Z3包含具有在SEQ ID NO:8的位置115至220处的氨基酸残基中的从位置220处的氨基酸残基至N末端的71至106个连续的氨基酸残基的氨基酸序列；并且

Z4包含具有在SEQ ID NO:8的位置221至327处的氨基酸残基中的从位置221处的氨基酸残基至C末端的80至107个连续的氨基酸残基的氨基酸序列。

在一些方面，本文公开的Fc区可以包含SEQ ID NO:9(hyFc)、SEQ ID NO:10(hyFcM1)、SEQ ID NO:11(hyFcM2)、SEQ ID NO:12(hyFcM3)或SEQ ID NO:13(hyFcM4)的氨基酸序列。在一些方面，Fc区可以包含SEQ ID NO:14的氨基酸序列(非裂解性小鼠Fc)。

可与本公开一起使用的Fc区的其他非限制性实例描述于美国专利号7,867,491中，所述专利以引用的方式整体并入本文。

在一些方面，本文所公开的IL-7融合蛋白包含寡肽和半衰期延长部分两者。

在一些方面，IL-7蛋白可以与白蛋白、其变体或片段融合。IL-7-白蛋白融合蛋白的实例可见于国际申请公布号WO 2011/124718 A1。在一些方面，IL-7蛋白任选地通过柔性接头与前祖B细胞生长刺激因子(PPBSF)融合。参见US2002/0058791A1。在一些方面，可用于本公开的IL-7蛋白是具有特定三维结构的IL-7构象体。参见US 2005/0249701A1。在一些方面，IL-7蛋白可以与Ig链融合，其中IL-7蛋白中的氨基酸残基70和91被糖基化，IL-7蛋白中的氨基酸残基116未被糖基化。参见US 7,323,549 B2。在一些方面，不包含潜在T细胞表位(从而减少抗IL-7T细胞应答)的IL-7蛋白也可用于本公开。参见US2006/0141581 A1。在一些方面，在羧基末端螺旋D区具有一个或多个氨基酸残基突变的IL-7蛋白可用于本公开。尽管对受体的结合亲和力较低，但IL-7突变体仍可充当IL-7R部分激动剂。参见US2005/0054054A1。上文列出的专利或出版物中描述的任何IL-7蛋白均以引用的方式整体并入本文。

此外，可用于本公开的另外的IL-7蛋白的非限制性实例描述于：US 7708985；US8034327；US 8153114；US 7589179；US 7323549；US 7960514；US 8338575；US 7118754；US7488482；US 7670607；US 6730512；WO0017362；GB2434578A；WO 2010/020766 A2；WO91/01143；Beq等人,Blood,第114卷(4),816,2009年7月23日；Kang等人,J.Virol.Doi:10.1128/JVI.02768-15；Martin等人,Blood,第121卷(22),4484,2013年5月30日；McBride等人,Acta Oncologica,34:3,447-451,2009年7月8日；和Xu等人,Cancer Science,109:279-288,2018，所述参考以引用的方式整体并入本文。

在一些方面，本文所公开的寡肽直接连接至IL-7或其变体的N末端区域。在一些方面，寡肽通过接头连接至N末端区域。在一些方面，本文所公开的半衰期延长部分直接连接至IL-7或其变体的C末端区域。在一些方面，半衰期延长部分通过接头连接到C末端区域。在一些方面，接头是肽接头。在一些方面，肽接头包含由Gly和Ser残基组成的10至20个氨基酸残基的肽。在一些方面，接头是白蛋白接头。在一些方面，接头是化学键。在一些方面，化学键包括二硫键、二胺键、硫化物-胺键、羧基-胺键、酯键、共价键或其组合。当接头是肽接头时，在一些方面，所述连接可以发生在任何连接区域中。它们可以使用本领域已知的交联剂偶联。在一些方面，交联剂的实例可以包括N-羟基琥珀酰亚胺酯，例如1,1-双(重氮乙酰基)-2-苯基乙烷、戊二醛和4-叠氮水杨酸；酰亚胺酯，包括二琥珀酰亚胺酯，诸如3,3'-二硫代双(琥珀酰亚胺基丙酸酯)，和双官能马来酰亚胺，诸如双-N-马来酰亚胺-1,8-辛烷，但不限于此。

在一些方面，本文所公开的IL-7融合蛋白的IL-7(或其变体)部分包含与在SEQ IDNO:15-20中所示的氨基酸序列具有至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少98％或至少99％同一性的氨基酸序列。在一些方面，本文公开的IL-7融合蛋白的IL-7(或其变体)部分包含SEQ ID NO:15-20中所示的氨基酸序列。

在一些方面，IL-7融合蛋白包含：包含具有IL-7活性或其类似活性的多肽的第一结构域；包含由蛋氨酸、甘氨酸或其组合组成的具有1至10个氨基酸残基的氨基酸序列的第二结构域；和与第一结构域的C末端偶联的第三结构域，其为修饰的免疫球蛋白的Fc区。

在一些方面，可与本方法一起使用的IL-7融合蛋白包含与在SEQ ID NO:21-25中所示的氨基酸序列具有至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少98％或至少99％同一性的氨基酸序列。在一些方面，本公开的IL-7融合蛋白包含SEQ ID NO:21-25中所示的氨基酸序列。在一些方面，本文公开的IL-7融合蛋白包含SEQ ID NO:26和27中所示的氨基酸序列。

除非另有说明，否则本文所述的IL-7蛋白(包括融合蛋白)可以使用任何合适的施用途径施用至受试者(例如，与VEGF拮抗剂的组合)。在一些方面，IL-7蛋白经静脉内、肠胃外地、肌内、皮下、眼部、腹膜内、皮内、眶内、脑内、颅内、脊柱内、脑室内、鞘内、脑池内、囊内或肿瘤内施用至受试者。在一些方面，将IL-7蛋白经肌内施用至受试者。

II.B.VEGF拮抗剂

在一些方面，本公开提供了一种治疗有需要的受试者的肿瘤的方法，其包括向受试者施用IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合。如本文所用，术语“VEGF拮抗剂”是指能够中和、阻断、抑制、消除、降低和/或干扰VEGF活性，包括其与一种或多种VEGF受体的结合的任何分子。VEGF拮抗剂包括干扰VEGF和天然VEGF受体之间的相互作用的分子，例如结合VEGF或VEGF受体并阻止或以其他方式阻碍VEGF和VEGF受体之间的相互作用的分子。因此，在一些方面，本文所述的VEGF拮抗剂可以特异性靶向VEGF本身。在一些方面，本文所述的VEGF拮抗剂特异性靶向一种或多种VEGF受体。

除非另有说明，否则可用于本公开的VEGF拮抗剂可以是蛋白质、肽、核酸、小分子或其组合。在一些方面，可用于本公开的VEGF拮抗剂包括靶向VEGF的反义寡核苷酸、siRNA、shRNA、miRNA、dsRNA、适体、PNA(肽核酸)或包含它们的载体。在一些方面，VEGF拮抗剂包括特异性结合VEGF或一种或多种VEGF受体(VEGFR)(分别为“抗VEGF抗体”和“抗VEGFR抗体”)的抗体或其抗原结合片段、编码抗VEGF抗体和/或抗VEGFR抗体的多核苷酸或包含其多核苷酸的载体。

合适的VEGF拮抗剂的非限制性实例是本领域已知的，包括例如阿柏西普(和)、贝伐单抗(和)、兰尼单抗雷莫芦单抗(ramucirumab)索拉非尼(sorafenib)舒尼替尼(sunitinib)帕唑帕尼(pazopanib)达沙替尼(dasatinib)瑞戈非尼(regorafenib)卡博替尼(cabozantinib)乐伐替尼(lenvatinib)帕纳替尼(ponatinib)阿西替尼(axitinib)替沃扎尼(tivozanib)凡德他尼(vandetanib)或其任何组合。

在一些方面，可用于本公开的VEGF拮抗剂是抗VEGF抗体。在一些方面，VEGF拮抗剂是贝伐珠单抗，例如，如美国公布号2015/0147317中所述，所述专利以引用的方式整体并入本文。在一些方面，VEGF拮抗剂是贝伐单抗的变体。例如，在一些方面，这种变体与贝伐珠单抗交叉竞争。在一些方面，贝伐单抗变体与贝伐单抗结合相同的表位。在一些方面，贝伐单抗变体具有与贝伐单抗相同的CDR。因此，在一些方面，本文提供的方法(例如，治疗肿瘤)包括向有需要的受试者施用IL-7蛋白与贝伐单抗(或其变体)的组合。对于这些方面，贝伐单抗(或其变体)可以本领域已知的任何合适剂量(例如，FDA批准的剂量)，例如约5mg/kg至约15mg/kg之间的剂量施用至受试者。例如，在一些方面，贝伐单抗(或其变体)以约5mg/kg、约7.5mg/kg、约10mg/kg、约12.5mg/kg或约15mg/kg的剂量与IL-7蛋白组合施用。在一些方面，贝伐单抗(或其变体)以约10mg/kg的剂量与IL-7蛋白组合施用。如本文所述，在一些方面，这种方法还包括向受试者施用另外的治疗剂(例如，免疫检查点抑制剂)。

在一些方面，可用于本公开的VEGF拮抗剂是阿柏西普，例如，如美国专利号11,135,266中所述，所述专利以引用的方式整体并入本文。在一些方面，VEGF拮抗剂是阿柏西普的变体。在一些方面，阿柏西普变体与阿柏西普交叉竞争。在一些方面，阿柏西普与阿柏西普结合相同的表位。在一些方面，阿柏西普变体具有与阿柏西普相同的CDR。因此，在一些方面，本文提供的方法(例如，治疗肿瘤)包括向有需要的受试者施用IL-7蛋白与阿柏西普(或其变体)的组合。对于这些方面，阿柏西普(或其变体)可以本领域已知的任何合适剂量(例如，FDA批准的剂量)，例如约4mg/kg至约15mg/kg之间的剂量施用至受试者。例如，在一些方面，阿柏西普(或其变体)以约4mg/kg的剂量与IL-7蛋白组合施用。如本文所述，在一些方面，这种方法可以还包括向受试者施用另外的治疗剂(例如，免疫检查点抑制剂)。

在一些方面，可与本公开一起使用的VEGF拮抗剂是兰尼单抗，例如，如美国专利号7,169,901中所述，所述专利以引用的方式整体并入本文。在一些方面，VEGF拮抗剂是兰尼单抗的变体。在一些方面，兰尼单抗变体与兰尼单抗交叉竞争。在一些方面，兰尼单抗变体与兰尼单抗结合相同的表位。在一些方面，兰尼单抗变体具有与兰尼单抗相同的CDR。因此，在一些方面，本文提供的方法(例如，治疗肿瘤)包括向有需要的受试者施用IL-7蛋白与兰尼单抗(或其变体)的组合。对于这些方面，兰尼单抗(或其变体)可以本领域已知的任何合适剂量(例如，FDA批准的剂量)施用至受试者。在一些方面，这种方法还包括向受试者施用另外的治疗剂(例如，免疫检查点抑制剂)。

在一些方面，VEGF拮抗剂是雷莫芦单抗，例如，如美国专利号8,057,791中所述，所述专利以引用的方式整体并入本文。在一些方面，VEGF拮抗剂是雷莫芦单抗的变体。在一些方面，雷莫芦单抗变体与雷莫芦单抗交叉竞争。在一些方面，雷莫芦单抗变体与雷莫芦单抗结合相同的表位。在一些方面，雷莫芦单抗具有与雷莫芦单抗相同的CDR。因此，在一些方面，本文提供的方法(例如，治疗肿瘤)包括向有需要的受试者施用IL-7蛋白与雷莫芦单抗(或其变体)的组合。对于此类方面，雷莫芦单抗(或其变体)可以本领域已知的任何合适剂量(例如，FDA批准的剂量)施用至受试者。在一些方面，这种方法还包括向受试者施用另外的治疗剂(例如，免疫检查点抑制剂)。

除非另有说明，否则本文所述的VEGF拮抗剂可以使用任何合适的施用途径施用至受试者(例如，与IL-7蛋白的组合)。在一些方面，VEGF拮抗剂经静脉内、肠胃外地、肌内、皮下、眼部、腹膜内、皮内、眶内、脑内、颅内、脊柱内、脑室内、鞘内、脑池内、囊内或肿瘤内施用至受试者。在一些方面，VEGF拮抗剂经静脉内施用至受试者。因此，在一些方面，本文提供的治疗方法包括向受试者肌内施用至少一个剂量的IL-7蛋白并静脉内施用至少一个剂量的VEGF拮抗剂。

III.核酸、载体和宿主细胞

本文所述的一些方面涉及编码本文描述的治疗剂(例如，IL-7蛋白和/或VEGF拮抗剂)的一种或多种核酸分子。核酸可以存在于完整细胞中，存在于细胞溶解物中或以部分纯化或大致上纯的形式存在。当通过标准技术(包括碱性/SDS处理、CsCl显带、柱色谱、限制性内切酶、琼脂糖凝胶电泳和其他本领域熟知的方法)从其他细胞组分或其他污染物例如其他细胞核酸(例如其他染色体DNA，例如，连接至自然界中分离的DNA的染色体DNA)或蛋白质中纯化出来时，核酸是“分离的”或“呈现为大致上纯的”。参见，F.Ausubel等人,编(1987)Current Protocols in Molecular Biology,Greene Publishing and WileyInterscience,New York。本文所述的核酸可以是例如DNA或RNA，并且可以包含或可以不包含内含子序列。在一些方面，核酸是cDNA分子。本文所述的核酸可以使用本领域已知的标准分子生物学技术获得。

本文公开的一些核酸分子是编码IL-7蛋白(例如本文公开的)的核酸分子，其可与VEGF拮抗剂组合使用，例如用于治疗肿瘤。编码本文所公开的IL-7蛋白的示例性核酸序列在SEQ ID NO:29-39中示出。

在一些方面，本公开提供了一种载体，其包含编码本文公开的治疗剂(例如，IL-7蛋白和/或VEGF拮抗剂)的分离的核酸分子。在一些方面，载体可以用于基因疗法。

当用作基因疗法(例如，在人中)时，编码本文公开的治疗剂(例如，IL-7蛋白和/或VEGF拮抗剂)的核酸可以0.1mg至200mg范围内的剂量施用。在一些方面，剂量在0.6mg至100mg的范围内。在一些方面，剂量在1.2mg至50mg的范围内。

用于本公开的合适的载体包括表达载体、病毒载体和质粒载体。在一些方面，载体是病毒载体。

如本文所用，表达载体是指任何核酸构建体，其含有用于插入的编码序列的转录和翻译所必需的元件，或者对于RNA病毒载体而言，被引入到适当的宿主细胞中时，用于复制和翻译所必需的元件。表达载体可以包括质粒、噬菌粒、病毒及其衍生物。

如本文所用，病毒载体包括但不限于来自以下病毒的核酸序列：逆转录病毒，诸如莫洛尼(Moloney)鼠白血病病毒、哈维(Harvey)鼠肉瘤病毒、鼠乳腺肿瘤病毒和劳氏(Rous)肉瘤病毒；慢病毒；腺病毒；腺相关病毒；SV40型病毒；多瘤病毒；爱泼斯坦-巴尔(Epstein-Barr)病毒；乳头状瘤病毒；疱疹病毒；痘苗病毒；脊髓灰质炎病毒；以及RNA病毒，诸如逆转录病毒。人们可以容易地使用本领域熟知的其他载体。一些病毒载体基于非致细胞病变的真核病毒，其中非必需基因已经被感兴趣的基因替换。非致细胞病变病毒包括逆转录病毒，其生命周期包括将基因组病毒RNA逆转录为DNA，随后将原病毒整合到宿主细胞DNA中。

在一些方面，载体来源于腺相关病毒。在一些方面，载体来源于慢病毒。慢病毒载体的实例公开于WO9931251、W09712622、W09817815、W09817816和WO9818934中，所述专利各自以引用的方式整体并入本文。

其他载体包括质粒载体。质粒载体已在本领域中广泛描述，并且是本领域技术人员熟知的。参见，例如，Sambrook等人,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,第二版,Cold Spring Harbor Laboratory Press,1989。在最近几年中，已经发现质粒载体由于其不能在宿主基因组内复制并整合到宿主基因组中而特别有利于在体内将基因递送至细胞。然而，这些具有与宿主细胞相容的启动子的质粒可以从在质粒内可操作地编码的基因表达肽。可从商业供应商处获得的一些常用质粒包括pBR322、pUC18、pUC19、各种pcDNA质粒、pRC/CMV、各种pCMV质粒、pSV40和pBlueScript。特定质粒的另外的实例包括：pcDNA3.1，目录号V79020；pcDNA3.1/hygro，目录号V87020；pcDNA4/myc-His，目录号V86320；和pBudCE4.1，目录号V53220，其全部来自Invitrogen(Carlsbad,CA.)。其他质粒是本领域普通技术人员熟知的。另外，可以使用标准分子生物学技术来定制设计质粒，以去除和/或添加特定DNA片段。

本公开还涵盖一种用于制备本文所公开的治疗剂(例如IL-7蛋白)的方法。在一些方面，这种方法可以包括在细胞中表达治疗剂(例如，IL-7蛋白)，所述细胞包含编码治疗剂的核酸分子，例如，SEQ ID NO:29-39。关于用于制备本文公开的IL-7蛋白的方法的其他详情在例如美国专利号11,041,007中提供，所述专利以引用的方式整体并入本文。本文涵盖包含这些核苷酸序列的宿主细胞。可以使用的宿主细胞的非限制性实例包括永生杂交瘤细胞、NS/0骨髓瘤细胞、293细胞、中国仓鼠卵巢(CHO)细胞、HeLa细胞、人羊水来源的细胞(CapT细胞)、COS细胞或其组合。

IV.药物组合物

本文还提供了在生理学可接受的载体、赋形剂或稳定剂中包含一种或多种具有所需纯度的治疗剂(例如IL-7蛋白和/或VEGF拮抗剂)的组合物(Remington'sPharmaceutical Sciences(1990)Mack PublishingCo.,Easton,PA)。在一些方面，本文公开的组合物包含IL-7蛋白或VEGF拮抗剂。如本文所公开的，此类组合物可以组合使用(例如，包含IL-7蛋白的第一组合物和包含VEGF拮抗剂的第二组合物)。在一些方面，本文公开的组合物包含IL-7蛋白和VEGF拮抗剂。

可接受的载剂、赋形剂或稳定剂在采用的剂量和浓度下对接受者是无毒的，并且包括缓冲剂诸如磷酸盐、柠檬酸盐和其他有机酸；抗氧化剂(包括抗坏血酸和蛋氨酸)；防腐剂(诸如十八烷基二甲基苄基氯化铵；氯化六甲双铵；氯化苯甲烃铵、氯化苄乙氧铵；苯酚、丁醇或苄醇；对羟基苯甲酸烷基酯，诸如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯；儿茶酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇；及间甲酚)；低分子量(小于约10个残基)的多肽；蛋白质，诸如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白等；亲水性聚合物，诸如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，诸如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖及其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，诸如EDTA；糖，诸如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨糖醇；成盐抗衡离子，诸如钠；金属络合物(例如，Zn-蛋白络合物)；和/或非离子表面活性剂，诸如或聚乙二醇(PEG)。

在一些方面，本文公开的组合物包含一种或多种选自以下的另外的组分：增量剂、稳定剂、表面活性剂、缓冲剂或其组合。

可用于本公开的缓冲剂可以是用于在添加另一种酸或碱后将溶液的酸度(pH)维持在选定值附近的弱酸或弱碱。合适的缓冲剂可以通过保持组合物的pH控制来最大化药物组合物的稳定性。合适的缓冲剂还可以确保生理相容性或优化溶解度。流变学、粘度和其他特性也可取决于组合物的pH。常见缓冲剂包括但不限于Tris缓冲剂、Tris-Cl缓冲剂、组氨酸缓冲剂、TAE缓冲剂、HEPES缓冲剂、TBE缓冲剂、磷酸钠缓冲剂、MES缓冲剂、硫酸铵缓冲剂、磷酸钾缓冲剂、硫氰酸钾缓冲剂、琥珀酸盐缓冲剂、酒石酸盐缓冲剂、DIPSO缓冲剂、HEPPSO缓冲剂、POPSO缓冲剂、PIPES缓冲剂、PBS缓冲剂、MOPS缓冲剂、乙酸盐缓冲剂、磷酸盐缓冲剂、卡可酸盐缓冲剂、甘氨酸缓冲剂、硫酸盐缓冲剂、咪唑缓冲剂、盐酸胍缓冲剂、磷酸盐-柠檬酸盐缓冲剂、硼酸盐缓冲剂、丙二酸盐缓冲剂、3-甲基吡啶缓冲剂、2-甲基吡啶缓冲剂、4-甲基吡啶缓冲液、3,5-二甲基吡啶缓冲剂、3,4-二甲基吡啶缓冲剂、2,4-二甲基吡啶缓冲剂、Aces、丙二酸二乙酯缓冲剂、N-甲基咪唑缓冲剂、1,2-二甲基咪唑缓冲剂、TAPS缓冲剂、bis-Tris缓冲剂、L-精氨酸缓冲剂、乳酸盐缓冲剂、羟乙酸盐缓冲剂或其组合。

在一些方面，本文所公开的组合物还包含增量剂。可以将增量剂添加到药物产品中，以便增加产品的体积和质量，从而促进其精确计量和处理。可与本公开一起使用的增量剂包括但不限于氯化钠(NaCl)、甘露醇、甘氨酸、丙氨酸或其组合。

在一些方面，本文所公开的组合物还可包含稳定剂。可与本公开一起使用的稳定剂的非限制性实例包括：蔗糖、海藻糖、棉子糖、精氨酸或其组合。

在一些方面，本文所公开的组合物包含表面活性剂。在一些方面，表面活性剂可选自以下：烷基乙氧基化物、壬基酚聚氧乙烯醚、胺乙氧基化物、聚环氧乙烷、聚环氧丙烷、脂肪醇诸如十六醇或油醇、椰油酰胺MEA、椰油酰胺DEA、聚山梨醇酯、十二烷基二甲胺氧化物或其组合。在一些方面，表面活性剂是聚山梨酯20或聚山梨酯80。

在一些方面，包含IL-7蛋白的组合物可以使用VEGF拮抗剂的相同制剂(例如，其将与IL-7蛋白组合使用)来配制。在一些方面，IL-7蛋白和VEGF拮抗剂使用不同的制剂配制。

药物组合物可以被配制用于向受试者的任何施用途径。施用途径的具体实例包括肌内、皮下、眼部、静脉内、腹膜内、皮内、眶内、脑内、颅内、脊柱内、心室内、鞘内、脑池内、囊内或瘤内。本文还预期了以皮下、肌内或静脉内注射为特征的肠胃外施用。可以制备呈常规形式的注射剂，作为液体溶液或混悬液、适合用于在注射前在液体中溶解或悬浮的固体形式或作为乳剂。注射剂、溶液和乳剂还含有一种或多种赋形剂。合适的赋形剂是例如水、盐水、右旋糖、甘油或乙醇。此外，如果需要，待施用的药物组合物还可以含有少量无毒的辅助物质，诸如润湿剂或乳化剂、pH缓冲剂、稳定剂、增溶剂和其他这样的试剂，诸如例如乙酸钠、脱水山梨醇单月桂酸酯、三乙醇胺油酸酯和环糊精。

用于肠胃外制剂的药学上可接受的载剂包括水性媒介物、非水性媒介物、抗微生物剂、等渗剂、缓冲剂、抗氧化剂、局部麻醉剂、悬浮剂和分散剂、乳化剂、螯合剂(sequestering/chelating agent)和其他药学上可接受的物质。水性媒介物的实例包括氯化钠注射液、林格氏(Ringers)注射液、等渗右旋糖注射液、无菌水注射液、葡萄糖和乳酸林格氏注射液。非水性肠胃外媒介物包括植物来源的不挥发油、棉籽油、玉米油、芝麻油和花生油。可以将抑菌或抑制真菌浓度的抗微生物剂添加到包装在多剂量容器中的肠胃外制剂中，所述多剂量容器包括苯酚或甲酚、汞、苯甲醇、三氯叔丁醇、对羟基苯甲酸甲酯和丙酯、硫柳汞、苯扎氯铵(benzalkonium chloride)和苄索氯铵(benzethoniumchloride)。等渗剂包括氯化钠和右旋糖。缓冲剂包括磷酸盐和柠檬酸盐。抗氧化剂包括硫酸氢钠。局部麻醉剂包括盐酸普鲁卡因。悬浮剂和分散剂包括羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮。乳化剂包括聚山梨酯80(80)。金属离子的多价螯合剂或螯合剂包括EDTA。药物载剂还包括用于水混溶性媒介物的乙醇、聚乙二醇和丙二醇；以及用于pH调节的氢氧化钠、盐酸、柠檬酸或乳酸。

用于肠胃外施用的制剂包括准备注射的无菌溶液、准备在使用前与溶剂混合的无菌干燥可溶性产品(诸如冻干粉，包括皮下注射片剂)、准备注射的无菌悬浮液、准备在使用前与媒介物混合的无菌干燥不溶性产品和无菌乳剂。溶液可以是水性的或非水性的。

如果静脉内施用，则合适的载剂包括生理盐水或磷酸盐缓冲盐水(PBS)以及含有增稠剂和增溶剂(诸如葡萄糖、聚乙二醇和聚丙二醇及其混合物)的溶液。

如用于局部和全身施用所述来制备包含抗体的外用混合物。所得混合物可以是溶液、悬浮液、乳液等，并且可以配制成霜剂、凝胶、软膏、乳剂、溶液、酏剂、洗剂、混悬液、酊剂、糊剂、泡沫剂、气雾剂、冲洗剂、喷雾剂、栓剂、绷带、皮肤贴剂或适用于外用施用的任何其他制剂。

本文所述的抗体或其抗原结合部分可被配制成用于局部应用的气雾剂，例如通过吸入(参见例如，美国专利号4,044,126、4,414,209和4,364,923，其描述了用于递送可用于治疗炎性疾病，特别是哮喘的类固醇的气雾剂)。这些用于施用至呼吸道的制剂可以呈用于雾化器的气雾剂或溶液形式，或者作为单独或与惰性载剂(诸如乳糖)组合的用于吹入的微细粉末。在这种情况下，制剂的颗粒的直径在一方面将小于50微米，在一方面小于10微米。

本文公开的治疗剂(例如，IL-7蛋白和/或VEGF拮抗剂)可以被配制成凝胶、霜剂和洗剂的形式用于局部(local或topical)应用，例如局部应用于皮肤和粘膜，例如在眼睛中，以及应用于眼睛或脑池内或脊柱内应用。外用施用预期用于透皮递送，并且还用于施用至眼或粘膜，或用于吸入疗法。还可以单独或与其他药学上可接受的赋形剂组合施用抗体的鼻溶液。

包括离子电渗和电泳装置的透皮贴剂是本领域技术人员熟知的，并且可用于施用抗体。例如，此类贴剂公开于美国专利号6,267,983、6,261,595、6,256,533、6,167,301、6,024,975、6,010715、5,985,317、5,983,134、5,948,433和5,860,957中，所述专利各自以引用的方式整体并入本文。

在一些方面，包含本文所述的治疗剂(例如，IL-7蛋白和/或VEGF拮抗剂)的药物组合物是冻干粉末，其可以被复原以溶液、乳液和其他混合物的形式施用。其还可以被复原并配制成固体或凝胶。通过将本文所述的抗体或其抗原结合部分或其药学上可接受的衍生物溶解在合适的溶剂中来制备冻干粉末。在一些方面，冻干粉末是无菌的。溶剂可含有赋形剂，所述赋形剂改善粉末或由粉末制备的复原溶液的稳定性或其他药理组分。可以使用的赋形剂包括但不限于右旋糖、山梨糖醇、果糖、玉米糖浆、木糖醇、甘油、葡萄糖、蔗糖或其他合适的剂。溶剂还可含有缓冲剂，诸如柠檬酸盐、磷酸钠或磷酸钾或本领域技术人员已知的其他此类缓冲剂，在一方面，为约中性pH。随后对溶液进行无菌过滤，然后在本领域技术人员已知的标准条件下冻干，从而提供所需的制剂。在一些方面，可以将所得溶液分配到小瓶中用于冻干。每个小瓶可以含有单个剂量或多个剂量的化合物。冻干粉末可以在合适的条件下，例如在约4℃至室温下储存。

用注射用水复原该冻干粉末，提供了用于肠胃外施用的制剂。为了复原，将冻干粉末添加到无菌水或其他合适的载剂中。精确的量取决于所选的化合物。此类量可以凭经验确定。

本文提供的组合物也可以配制成靶向待治疗受试者身体的特定组织、受体或其他区域。许多此类靶向方法是本领域技术人员熟知的。本文预期了用于本发明组合物的所有此类靶向方法。对于靶向方法的非限制性实例，参见，例如，美国专利号6,316,652、6,274,552、6,271,359、6,253,872、6,139,865、6,131,570、6,120,751、6,071,495、6,060,082、6,048,736、6,039,975、6,004,534、5,985,307、5,972,366、5,900,252、5,840,674、5,759,542和5,709,874。

待用于体内施用的组合物可以是无菌的。这易于通过例如无菌过滤膜的过滤来实现。

以下实施例仅是说明性的，并且不应解释为以任何方式限制本公开的范围，因为在阅读本公开后，许多改变和等效物对于本领域技术人员而言将变得清楚。

实施例

实施例1：IL-7蛋白和VEGF拮抗剂组合治疗对肿瘤体积的影响

为了评估IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合对肿瘤体积的影响，使用结肠腺癌动物模型。简言之，将MC-38结肠腺癌肿瘤细胞(5×10⁵个细胞，皮下)移植到每只C57BL/6小鼠中。在肿瘤接种后第8天(平均肿瘤大小为约60mm³)，用IL-7-HyFc蛋白和拮抗性抗VEGF抗体(阿柏西普)单独或组合治疗动物。用IL-7配制缓冲剂和同种型对照抗体治疗对照动物。将IL-7蛋白施用一次(即肿瘤接种后第8天)(肌内；每只小鼠10mg/kg)。在两周内(即肿瘤接种后第8、11、15和18天)每周两次施用拮抗性抗VEGF抗体(静脉内；每个剂量每只小鼠10mg/kg)。然后，监测动物在不同的时间点的肿瘤体积。图1A提供了给药方案的图形描绘，并且表2(如下)提供了不同的治疗组。

表2.治疗组

如图1B所示，与对照动物(即第1组)相比，用单独的IL-7蛋白治疗的动物(即第2组)或用单独的抗VEGF抗体治疗的动物(即第3组)表现出肿瘤体积减小。然而，在来自组合治疗组(即第4组)的小鼠中，肿瘤体积减小更为显著。在肿瘤接种后第18天，来自不同治疗组的平均肿瘤体积如下：第1组：635.30mm³；第2组：269.46mm³；第3组：257.99mm³；并且第4组：86.33mm³。

上述结果表明，本文所述的组合治疗(IL-7蛋白与VEGF拮抗剂的组合)可以可用于治疗某些癌症。此外，数据进一步显示，本文所述的IL-7蛋白能够提高VEGF拮抗剂例如可商购获得的和/或先前显示具有抗肿瘤效果的那些VEGF拮抗剂的抗肿瘤效果。

实施例2：分析IL-7蛋白、VEGF拮抗剂和免疫检查点抑制剂的三联组合治疗的抗肿瘤效果

为了进一步评估本文所述的组合治疗的抗肿瘤效果，将用单独IL-7蛋白或其与VEGF拮抗剂(例如，抗VEGF抗体)的组合治疗肿瘤动物模型(例如，结肠腺癌动物模型)。在一些方面，一些动物将进一步接受免疫检查点抑制剂的施用。因此，在一些方面，一些动物将用IL-7蛋白、VEGF拮抗剂和免疫检查点抑制剂的三联组合进行治疗。在施用后，将评估动物的抗肿瘤免疫应答，例如通过监测在治疗后不同时间点的肿瘤体积。

实施例3：IL-7蛋白和VEGF拮抗剂组合治疗在人胶质母细胞瘤受试者中的效果

为了评估本文所述的治疗方案的功效和安全性，正在患有复发性胶质母细胞瘤的人受试者中进行2期研究。如图2所示和下文进一步描述的，合格的受试者(参见例如下文进一步描述的纳入标准和排除标准)已经接受了本文所述的IL-7蛋白与贝伐单抗(即VEGF拮抗剂)(本文也称为“研究药物”)的组合的施用。合格的受试者将接受最多六个周期(一个周期＝八周)的组合治疗，或直至疾病进展或出现不可接受的毒性。在治疗施用前，每八周进行一次肿瘤评估。图3提供了该研究的总体概述。

测试受试者

合格的受试者被诊断为患有胶质母细胞瘤(例如，复发性胶质母细胞瘤)，在标准治疗(同步化学疗法和/或替莫唑胺辅助化学疗法)后证实疾病进展。

IL-7蛋白施用

IL-7蛋白以1,200μg/kg的剂量和8周的给药间隔通过肌内施用至合格的受试者。如上所述，无严重毒性且无疾病进展的临床明确证据的受试者将接受最多6个周期的IL-7蛋白治疗(基于研究者的临床意义和风险评估)。在每个剂量步骤中，向受试者施用的IL-7蛋白的量可以基于每个周期第一天时受试者的体重来确定。对超重受试者的剂量没有限制。

贝伐单抗施用

贝伐单抗以每2周10mg/kg的剂量通过静脉内施用来施用至合格的受试者，直至出现疾病进展或不可接受的毒性(如本实施例中别处所述)。

剂量调整

IL-7蛋白的剂量可在以下条件下根据研究者的判断减少至960μg/kg：注射部位或全身的不良皮肤反应。如果受试者在施用IL-7蛋白后出现不可接受的毒性(3级或更高级CTCAE)，则应停止施用IL-7蛋白。如果毒性在28天内消退，则可以恢复IL-7蛋白施用。对于出现临床上可管理的毒性(3级免疫相关不良事件)但表现出明显临床获益迹象(例如肿瘤缩小或疾病稳定)的受试者，可在密切监督下继续施用IL-7蛋白。如果初始施用后，绝对淋巴细胞计数(ALC)(与治疗相关)超过20,000个细胞/mm³(对应于3级NCI CTC)，则应暂时停止进一步施用。如果ALC降低到低于正常水平的上限(4,000个细胞/mm³)，则可以恢复施用。

至于VEGF拮抗剂，当受试者体重变化超过约10％时，可以调整剂量。否则，一般不建议调整剂量。如果出现不良事件，根据研究者的判断，可暂时或永久停止施用VEGF激动剂。

注射部位反应

注射部位可能发生的常见不良反应包括：过敏反应(例如皮疹、荨麻疹、发红)、瘙痒、肿胀和红斑。合适剂量的类固醇(例如，约5-7.5mg剂量的泼尼松龙)可用作姑息治疗。抗组胺药也可用于预防目的(例如，在治疗前至少14天向受试者施用)。

禁止的治疗

在本研究过程中，禁止进行以下治疗：(1)任何已批准或实验用于治疗癌症的伴随治疗，包括化学疗法、激素疗法、免疫疗法、放射疗法、研究药物或草药疗法；(2)免疫抑制剂，包括但不限于环磷酰胺、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤和沙利度胺；(3)粒细胞集落刺激因子和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(例如，聚乙二醇非格司亭)；以及(4)免疫刺激剂(例如IFN-α、IFN-γ和IL-2)。

纳入标准

用于确定受试者资格的纳入标准包括以下内容：(1)年龄≥19岁；(2)组织学诊断的胶质母细胞瘤患者，其在尝试标准疗法(RT/CCRT和/或辅助化学疗法(TMZ))后被证实疾病进展；(3)卡氏活动状态(Karnofsky Performance Status)；KPS≥60或ECOG状态0-2；(4)预期寿命超过12周；和(5)足够的血液学和终末器官功能。

排除标准

表现出一种或多种以下情况的受试者已被排除在本研究之外：(1)在第一个剂量的研究药物前的5年内出现除研究疾病以外的恶性肿瘤；(2)在当前研究之前接受过贝伐单抗或其他VEGF拮抗剂；(3)身体质量指数(BMI)≥30kg/m2；(4)平扫CT或MRI证实颅内出血；(5)有临床意义的心血管疾病；(6)当前研究前6个月的动脉或静脉血栓栓塞史；(7)不受控制的高血压(血压≥150/90mmHg，接受适当的降压疗法)；(8)高血压危象或高血压脑病史；(9)接受治疗性抗凝治疗(除了低分子量肝素或华法林)；(10)怀孕或哺乳；(11)活动性病毒感染；(12)自身免疫性疾病/综合征；(13)在第1周期第1天之前的4周内施用减毒活疫苗，或预期在当前研究期间将需要这种减毒活疫苗；(14)对嵌合或人源化抗体或融合蛋白的严重过敏反应、过敏性反应或其他超敏反应史；(15)筛查期间的严重感染，包括但不限于感染并发症、菌血症或重症肺炎；以及(16)先前的同种异体骨髓移植或先前的实体器官移植。

实施例4：涉及人胶质母细胞瘤受试者中的IL-7蛋白和VEGF拮抗剂组合治疗的2期研究的中期结果

除了上文提供的实施例3之外，图4A和4B提供了研究的中期结果。有20名受试者参加了该研究，并且如图4A所示，14名受试者仍在接受治疗(患者编号2、5、6、9和11-20)并且四名受试者已确认进展(患者编号1、4、7和10)。在已确认进展的受试者中，两名受试者已退出研究(患者编号4和7)。并且，如图4B所示，在初始施用后4周，几乎所有受试者的绝对淋巴细胞计数都有显著增加。其他结果(例如临床反应和存活状态)正在进行中。

上述结果显示了本文所述的组合治疗在治疗癌症诸如胶质母细胞瘤中的治疗潜力。

Claims (48)

1.一种治疗有需要的受试者的肿瘤的方法，其包括向所述受试者施用IL-7蛋白与血管内皮生长因子(“VEGF”)拮抗剂(“VEGF拮抗剂”)的组合。

2.如权利要求1所述的方法，其中在所述施用后所述受试者的肿瘤体积减小。

3.如权利要求2所述的方法，其中在所述施用后所述肿瘤体积减小至少约5％、至少约10％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％或约100％。

4.一种增加有需要的受试者的抗肿瘤免疫应答的方法，其包括向所述受试者施用IL-7蛋白与血管内皮生长因子(“VEGF”)拮抗剂(“VEGF拮抗剂”)的组合。

5.如权利要求4所述的方法，其中在所述施用后所述受试者的所述抗肿瘤免疫应答增加至少约1倍、至少约2倍、至少约3倍、至少约4倍、至少约5倍、至少约10倍、至少约15倍、至少约20倍、至少约25倍、至少约30倍、至少约40倍或至少约50倍。

6.如权利要求4或5所述的方法，其中增加的抗肿瘤免疫应答包括：(i)肿瘤体积减小；(ii)肿瘤特异性T细胞的效应子活性增加；(iii)肿瘤特异性效应T细胞的数量增加；(iv)肿瘤中肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)的数量增加；(v)肿瘤中髓源性抑制细胞(MDSC)的数量减少；(vi)肿瘤中调节性T细胞(Treg)的数量减少；(vii)所述受试者的存活持续时间延长；(viii)肿瘤、肿瘤引流淋巴结(TDLN)或两者中CD8+T细胞上TOX的表达降低；(ix)肿瘤、TDLN或两者中干细胞样T细胞的数量增加；或(x)其组合。

7.如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述IL-7蛋白和所述VEGF拮抗剂同时施用至所述受试者。

8.如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述IL-7蛋白和所述VEGF拮抗剂依次施用至所述受试者。

9.如权利要求1至8中任一项所述的方法，其中向所述受试者施用另外的治疗剂。

10.如权利要求9所述的方法，其中所述另外的治疗剂包括免疫检查点抑制剂、免疫检查点活化剂、标准护理治疗或其组合。

11.如权利要求10所述的方法，其中所述免疫检查点抑制剂包括CTLA-4拮抗剂(例如，抗CTLA-4抗体)、PD-1拮抗剂(例如，抗PD-1抗体、抗PD-L1抗体)、TIM-3拮抗剂(例如，抗TIM-3抗体)或其组合。

12.如权利要求10或11所述的方法，其中所述免疫检查点活化剂包括OX40激动剂(例如，抗OX40抗体)、LAG-3激动剂(例如，抗LAG-3抗体)、4-1BB(CD137)激动剂(例如，抗CD137抗体)、GITR激动剂(例如，抗GITR抗体)或其组合。

13.如权利要求10至12中任一项所述的方法，其中所述标准护理治疗包括化学疗法、放射或两者。

14.如权利要求1至13中任一项所述的方法，其中所述IL-7蛋白不是野生型IL-7。

15.如权利要求1至14中任一项所述的方法，其中所述IL-7蛋白包含由1至10个氨基酸残基组成的寡肽。

16.如权利要求15所述的方法，其中所述寡肽包括蛋氨酸(M)、甘氨酸(G)、蛋氨酸-蛋氨酸(MM)、甘氨酸-甘氨酸(GG)、蛋氨酸-甘氨酸(MG)、甘氨酸-蛋氨酸(GM)、蛋氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸(MMM)、蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(MMG)、蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(MGM)、甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸(GMM)、蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸(MGG)、甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(GMG)、甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(GGM)、甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GGG)、蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(MGGM)(SEQ ID NO:41)、蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸(MMGG)(SEQ ID NO:42)、甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸(GGMM)(SEQ ID NO:43)、蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(MGMG)(SEQ IDNO:44)、甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(GMMG)(SEQ ID NO:45)、甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(GGGM)(SEQ ID NO:46)、蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸(MGGG)(SEQ ID NO:47)、甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GMGG)(SEQ ID NO:48)、甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(GGMG)(SEQ ID NO:49)、甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸(GGMMM)(SEQ ID NO:50)、甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸(GGGMM)(SEQ ID NO:51)、甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(GGGGM)(SEQ ID NO:52)、蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸(MGMMM)(SEQ ID NO:53)、蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸(MGGMM)(SEQ ID NO:54)、蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(MGGGM)(SEQ ID NO:55)、蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸(MMGMM)(SEQ ID NO:56)、蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(MMGGM)(SEQID NO:57)、蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸(MMGGG)(SEQ ID NO:58)、蛋氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(MMMGM)(SEQ ID NO:59)、蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(MGMGM)(SEQ ID NO:60)、甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(GMGMG)(SEQ ID NO:61)、甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(GMMMG)(SEQ ID NO:62)、甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(GGMGM)(SEQ ID NO:63)、甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(GGMMG)(SEQ ID NO:64)、甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(GMMGM)(SEQ ID NO:65)、蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(MGMMG)(SEQ ID NO:66)、甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(GMGGM)(SEQ ID NO:67)、蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸(MMGMG)(SEQ ID NO:68)、甘氨酸-蛋氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GMMGG)(SEQ ID NO:69)、甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GMGGG)(SEQ ID NO:70)、甘氨酸-甘氨酸-蛋氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GGMGG)(SEQ ID NO:71)、甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GGGGG)(SEQ ID NO:72)或其组合。

17.如权利要求18所述的方法，其中所述寡肽是蛋氨酸-甘氨酸-蛋氨酸(MGM)。

18.如权利要求1至17中任一项所述的方法，其中所述IL-7蛋白包含半衰期延长部分。

19.如权利要求18所述的方法，其中所述半衰期延长部分包括Fc、白蛋白、白蛋白结合多肽、Pro/Ala/Ser(PAS)、人绒毛膜促性腺激素β亚基的C末端肽(CTP)、聚乙二醇(PEG)、长的非结构化亲水氨基酸序列(XTEN)、羟乙基淀粉(HES)、白蛋白结合小分子或其组合。

20.如权利要求19所述的方法，其中所述半衰期延长部分是Fc。

21.如权利要求18或20所述的方法，其中所述Fc是杂合Fc，其包含铰链区、CH2结构域和CH3结构域，

其中所述铰链区包含人IgD铰链区，

其中所述CH2结构域包含人IgD CH2结构域的一部分和人IgG4CH2结构域的一部分，并且

其中所述CH3结构域包含人IgG4 CH3结构域的一部分。

22.如权利要求1至21中任一项所述的方法，其中所述IL-7蛋白包含与SEQ ID NO:1-6、15-26和80-85中任一者所示的序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。

23.如权利要求1至22中任一项所述的方法，其中所述VEGF拮抗剂包含特异性结合所述VEGF的抗体或其抗原结合片段(“抗VEGF抗体”)、编码所述抗VEGF抗体的多核苷酸、反义寡核苷酸、siRNA、shRNA、miRNA、靶向VEGF的dsRNA、适体、PNA或包含它们的载体。

24.如权利要求23所述的方法，其中所述VEGF拮抗剂是抗VEGF抗体。

25.如权利要求24所述的方法，其中所述抗VEGF抗体包括阿柏西普(和)、贝伐单抗(和)、兰尼单抗或其组合。

26.如权利要求1至25中任一项所述的方法，其中所述肿瘤来源于癌症，所述癌症包括乳腺癌、头颈癌、子宫癌、脑癌、皮肤癌、肾癌、肺癌、结直肠癌、前列腺癌、肝癌、膀胱癌、肾脏癌、胰腺癌、甲状腺癌、食管癌、眼癌、胃(胃部)癌、胃肠癌、卵巢癌、癌、肉瘤、白血病、淋巴瘤、骨髓瘤或其组合。

27.如权利要求26所述的方法，其中所述脑癌包括胶质母细胞瘤。

28.如权利要求27所述的方法，其中所述胶质母细胞瘤包括复发性胶质母细胞瘤。

29.如权利要求27或28所述的方法，其中所述胶质母细胞瘤是标准护理疗法难治的。

30.如权利要求26至29中任一项所述的方法，其中所述皮肤癌包括默克尔细胞癌(MCC)、基底细胞癌(BCC)、皮肤鳞状细胞癌(cSCC)、黑色素瘤或其组合。

31.如权利要求1至30中任一项所述的方法，其中所述IL-7蛋白经肌内、肠胃外地、皮下、眼部、静脉内、腹膜内、皮内、眶内、脑内、颅内、脊柱内、脑室内、鞘内、脑池内、囊内或肿瘤内施用至所述受试者。

32.如权利要求1至31中任一项所述的方法，其中所述VEGF拮抗剂经静脉内、肠胃外地、肌内、皮下、眼部、腹膜内、皮内、眶内、脑内、颅内、脊柱内、脑室内、鞘内、脑池内、囊内或肿瘤内施用至所述受试者。

33.如权利要求9至32中任一项所述的方法，其中所述另外的治疗剂经肠胃外地、静脉内、肌内、皮下、眼部、腹膜内、皮内、眶内、脑内、颅内、脊柱内、脑室内、鞘内、脑池内、囊内或肿瘤内施用至所述受试者。

34.如权利要求1至33中任一项所述的方法，其中所述IL-7蛋白以大于约600μg/kg、大于约700μg/kg、大于约800μg/kg、大于约900μg/kg、大于约1,000μg/kg、大于约1,100μg/kg、大于约1,200μg/kg、大于约1,300μg/kg、大于约1,400μg/kg、大于约1,500μg/kg、大于约1,600μg/kg、大于约1,700μg/kg、大于约1,800μg/kg、大于约1,900μg/kg或大于约2,000μg/kg的剂量施用。

35.如权利要求1至34中任一项所述的方法，其中所述IL-7蛋白以约610μg/kg与约1,200μg/kg之间、约650μg/kg与约1,200μg/kg之间、约700μg/kg与约1,200μg/kg之间、约750μg/kg与约1,200μg/kg之间、约800μg/kg与约1,200μg/kg之间、约850μg/kg与约1,200μg/kg之间、约900μg/kg与约1,200μg/kg之间、约950μg/kg与约1,200μg/kg之间、约1,000μg/kg与约1,200μg/kg之间、约1,050μg/kg与约1,200μg/kg之间、约1,100μg/kg与约1,200μg/kg之间、约1,200μg/kg与约2,000μg/kg之间、约1,300μg/kg与约2,000μg/kg之间、约1,500μg/kg与约2,000μg/kg之间、约1,700μg/kg与约2,000μg/kg之间、约610μg/kg与约1,000μg/kg之间、约650μg/kg与约1,000μg/kg之间、约700μg/kg与约1,000μg/kg之间、约750μg/kg与约1,000μg/kg之间、约800μg/kg与约1,000μg/kg之间、约850μg/kg与约1,000μg/kg之间、约900μg/kg与约1,000μg/kg之间或约950μg/kg与约1,000μg/kg之间的剂量施用。

36.如权利要求1至35中任一项所述的方法，其中所述IL-7蛋白以约700μg/kg与约900μg/kg之间、约750μg/kg与约950μg/kg之间、约700μg/kg与约850μg/kg之间、约750μg/kg与约850μg/kg之间、约700μg/kg与约800μg/kg之间、约800μg/kg与约900μg/kg之间、约750μg/kg与约850μg/kg之间或约850μg/kg与约950μg/kg之间的剂量施用。

37.如权利要求1至36中任一项所述的方法，其中所述IL-7蛋白以约650μg/kg、约680μg/kg、约700μg/kg、约720μg/kg、约740μg/kg、约750μg/kg、约760μg/kg、约780μg/kg、约800μg/kg、约820μg/kg、约840μg/kg、约850μg/kg、约860μg/kg、约880μg/kg、约900μg/kg、约920μg/kg、约940μg/kg、约950μg/kg、约960μg/kg、约980μg/kg、约1,000μg/kg、约1,020μg/kg、约1,040μg/kg、约1,060μg/kg、约1,080μg/kg、约1,100μg/kg、约1,120μg/kg、约1,140μg/kg、约1,160μg/kg、约1,180μg/kg、约1,200μg/kg、约1,220μg/kg、约1,240μg/kg、约1,260μg/kg、约1,280μg/kg、约1,300μg/kg、约1,320μg/kg、约1,340μg/kg、约1,360μg/kg、约1,380μg/kg、约1,400μg/kg、约1,420μg/kg、约1,440μg/kg、约1,460μg/kg、约1,480μg/kg、约1,500μg/kg、约1,520μg/kg、约1,540μg/kg、约1,560μg/kg、约1,580μg/kg、约1,600μg/kg、约1,620μg/kg、约1,640μg/kg、约1,660μg/kg、约1,680μg/kg、约1,700μg/kg、约1,720μg/kg、约1,740μg/kg、约1,760μg/kg、约1,780μg/kg、约1,800μg/kg、约1,820μg/kg、约1,840μg/kg、约1,860μg/kg、约1,880μg/kg、约1,900μg/kg、约1,920μg/kg、约1,940μg/kg、约1,960μg/kg、约1,980μg/kg或约2,000μg/kg的剂量施用。

38.如权利要求1至37中任一项所述的方法，其中所述IL-7蛋白以一周一次、两周一次、三周一次、四周一次、五周一次、六周一次、七周一次、八周一次、九周一次、10周一次、11周一次或12周一次的给药频率施用。

39.如权利要求38所述的方法，其中所述IL-7蛋白以八周一次的给药频率施用。

40.如权利要求1至39中任一项所述的方法，其中所述VEGF拮抗剂以约0.1mg/kg至约20mg/kg的剂量施用至所述受试者。

41.如权利要求1至40中任一项所述的方法，其中所述VEGF拮抗剂以一周一次、两周一次、三周一次、四周一次、五周一次、六周一次、七周一次、八周一次、九周一次、10周一次、11周一次或12周一次的给药频率施用。

42.如权利要求41所述的方法，其中所述VEGF拮抗剂以两周一次的给药频率施用。

43.如权利要求25至42中任一项所述的方法，其中所述抗VEGF抗体是贝伐单抗。

44.如权利要求43所述的方法，其中所述贝伐单抗以约5mg/kg至约15mg/kg的剂量施用。

45.如权利要求44所述的方法，其中所述贝伐单抗以约5mg/kg、约7.5mg/kg、约10mg/kg、约12.5mg/kg或约15mg/kg的剂量施用。

46.如权利要求25到42中任一项所述的方法，其中所述抗VEGF抗体为阿柏西普。

47.如权利要求46所述的方法，其中所述阿柏西普以约4mg/kg至约15mg/kg的剂量施用。

48.如权利要求47所述的方法，其中所述阿柏西普以约4mg/kg的剂量施用。