CN119817812A - 营养组合物及营养组合物的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了营养组合物及营养组合物的应用。所述营养组合物包括质量比为2:1至80:1的中长链脂肪酸甘油三酯(MLCT)和乳脂肪球膜(MFGM)，两者组合具有协同改善腹泻、体内或体外抑制金黄色葡萄球菌和/或调节肠道菌群的效果。

Description

营养组合物及营养组合物的应用

技术领域

本公开涉及食品技术领域，特别涉及用于抑制金黄色葡萄球菌和/或改善腹泻的营养组合物、包含所述营养组合物的食品以及所述营养组合物的用途。

背景技术

感染性腹泻呈高流行性和高发病率，发展中国家因腹泻病所致的医疗负担和经济负担严重，故仍然是值得关注的全球性公共卫生问题。世界卫生组织(World HealthOrganization，WHO)估计，全球每天有数千万人罹患腹泻病，每年发生腹泻病达17亿例次，其中有220万例患者因严重腹泻而死亡 (缪晓辉等，中华消化杂志，2013,33 (12): 793-802.)。此外，感染性腹泻病在儿童中发病率高、流行广泛，严重危害儿童健康，也是造成儿童营养不良的主要原因(倪鑫等，中国医药科学，2020，10(21):249-256)。感染性腹泻是由细菌、真菌、病毒或寄生虫引起的以腹泻为主要临床表现的肠道传染病。

金黄色葡萄球菌为一种人兽共患革兰阳性菌，在30%～50%的健康成年人体内检出，并且约有20%的感染者可持续携带该细菌; 其可造成牛、羊、猪、鸡等其他动物的慢性感染(吴运谱等，实验动物科学，2024，41(03):85-89)。金黄色葡萄球菌可引起的疾病严重程度不一，从中等程度感染如皮肤感染到致命疾病如严重肺炎及败血症，疾病治疗过程可因抗生素耐药而变得复杂，且还迄今无有效疫苗，为世界范围内由感染性病原体所导致发病和死亡的最常见病因之一。金黄色葡萄球菌诱发的慢性感染及抗生素耐药，其使得公共卫生领域面临严峻挑战。此外，金黄色葡萄球菌也是诱发感染性腹泻的重要病原菌。

中长链脂肪酸甘油三酯(medium and long-chain triacylglycerols, MLCT)作为新型结构脂质中的明星产品，受到了广泛关注。MLCT 的主要结构特点是一个甘油骨架上同时结合有中链脂肪酸和长链脂肪酸。早期研究表明MLCT 具有降低血脂、抑制肥胖、降低糖尿病和心血管疾病，以及降低癌症发生风险等诸多保健功能(赖运栋等，中国油料作物学报，2024，46(04):719-727.)。此外，MLCT的脂肪酸组成更接近母乳，有利于脂肪消化吸收，提高脂类营养素的吸收，抑制体脂肪的积累，能够快速稳定供能(Cheng X, Jiang C, JinJ, Jin Q, Akoh CC, Wei W, Wang X. Medium- and Long-Chain Triacylglycerol:Preparation, Health Benefits, and Food Utilization. Annu Rev Food SciTechnol. 2024 Jun;15(1):381-408.)。目前已知乳脂肪球膜 (MFGM) 对提高认知能力，改善代谢，降低感染性疾病发病率等均具有重要作用 (张波等，中国儿童保健杂志，2016，24(01):43-47.)。

国内外尚未见任何关于MLCT、MFGM对金黄色葡萄球菌感染及腹泻的作用的相关报道，研究MLCT、MFGM及其组合的作用对于开发具有抗感染性腹泻功效的食物、药物具有重要的意义。

本领域中仍然需要能够改善腹泻、体内或体外抑制金黄色葡萄球菌和/或调节肠道菌群的方法。

发明内容

本发明是鉴于本领域中的上述问题作出的。

本发明第一方面提供了一种营养组合物，所述营养组合物中包含中长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜，其中中所述中长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜的质量比为2:1至80:1。

本发明第二方面提供了包含本发明第一方面所述营养组合物的食品。

本发明第三方面提供了本发明第一方面所述营养组合物在制备用于改善(例如缓解或治疗)腹泻的产品中的应用。

本发明第四方面提供了本发明第一方面所述营养组合物在制备用于抑制金黄色葡萄球菌感染的产品中的应用。

本发明第五方面提供了本发明第一方面所述营养组合物在制备用于调节肠道菌群(例如腹泻受试者中肠道菌群)的产品中的应用。

本发明第六方面提供了本发明第一方面所述营养组合物用于改善腹泻的非治疗目的的应用。

本发明第七方面提供了本发明第一方面所述营养组合物用于抑制金黄色葡萄球菌感染的非治疗目的的应用。

本发明发现，当将中长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜以所限定的质量比组合使用时，两者之间存在协同作用，能够协同改善腹泻、特别是改善(例如缓解或治疗)由金黄色葡萄球菌引起的腹泻，(体内或体外)抑制金黄色葡萄球菌。

附图说明

图1显示样品处理后斑马鱼肠道荧光强度。P值为各实例组与模型对照组的差异显著性分析。**表示P < 0.01，***表示 P < 0.001。

图2显示组合物样品处理后斑马鱼肠道荧光强度。P值为各实例组与模型对照组的差异显著性分析，**表示P < 0.01，***表示 P < 0.001。

图3 显示样品处理斑马鱼的肠道典型图。

图4显示样品处理后斑马鱼金黄色葡萄球菌荧光强度。P值为各实例组与模型对照组的差异显著性分析，*表示P < 0.05，**表示P < 0.01，***表示 P < 0.001。

图5显示样品处理后斑马鱼金黄色葡萄球菌荧光强度典型图。

具体实施方式

提供以下定义以便于本领域技术人员理解本发明。除非另有定义，否则本文中使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的相同含义。本文描述优选的材料和方法，但在本发明测试的实践中可以使用类似于或等效于本文所述的那些方法和材料的任何方法和材料。还应理解，本文所使用的术语仅是用于描述特定实施方案的目的，并且不意图具限制性。

术语定义

除非另有指示或定义，否则所有所用术语均具有本领域中的通常含义，该含义将为本领域技术人员所了解。此外，除非另有说明，否则未具体详述的所有方法、步骤、技术及操作均可以且已经以本身已知的方式进行，该方式将为本领域技术人员所了解。

如本文所用，术语“中长链脂肪酸甘油三酯”或“MLCT”，是一种特殊的甘油三酯，其甘油三酯骨架上同时存在中链脂肪酸和长链脂肪酸。如本文所用，术语“中长链脂肪酸甘油三酯”或“MLCT”，是一种特殊的甘油三酯，其甘油三酯骨架上同时存在中链脂肪酸和长链脂肪酸。本领域公知MLCT是以食用植物油和中链甘油三酯为原料，通过脂肪酶进行酯交换反应，经蒸馏分离、脱色、脱臭等工艺而制成。中长链脂肪酸甘油三酯可以来源于中长链脂肪酸食用油。

如本文所用，术语“中链脂肪酸”是指碳链中具有6-12个碳原子的脂肪酸，例如己酸、庚酸、辛酸、壬酸、癸酸、十一烷酸、十二烷酸等；术语“长链脂肪酸”是指碳链中具有14个以上碳原子、一般地14-30个碳原子的脂肪酸，例如肉豆蔻酸、棕榈酸、油酸、亚油酸、硬脂酸、亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸等。术语“中链脂肪酸甘油三酯”和“长链脂肪酸甘油三酯”分别是指“中链脂肪酸”和“长链脂肪酸”与甘油的酯化反应产物；术语“中长链脂肪酸甘油三酯”是指在分子结构中同时含有中链脂肪酸残基和长链脂肪酸残基的甘油三酯类。本发明对使用的中长链脂肪酸甘油三酯没有特别要求，可使用本领域通常使用的中长链脂肪酸甘油三酯。中长链脂肪酸甘油三酯可以纯品形式使用，也可以富含中长链脂肪酸甘油三酯的非纯品形式使用。例如，本发明使用的中长链脂肪酸甘油三酯可以包含C₆-C₁₂脂肪酸残基和C₁₄-C₃₀脂肪酸残基。C₆-C₁₂脂肪酸残基可以源自如下的一种或多种：己酸、庚酸、辛酸、壬酸、癸酸、十一烷酸、十二烷酸等。C₁₄-C₃₀脂肪酸残基可以源自如下的一种或多种：肉豆蔻酸、棕榈酸、十七烷酸、油酸、亚油酸、硬脂酸、十九烷酸、二十碳五烯酸、二十一酸、二十二碳四烯酸、二十二碳六烯酸、二十三碳酸、二十四碳烯酸、二十五碳五烯酸、二十六碳六烯酸、花生四烯酸等。在一些实施方式中，所述C₆-C₁₂脂肪酸残基源自如下的一种或多种：己酸、辛酸、癸酸和月桂酸；和/或所述C₁₄-C₃₀脂肪酸残基源自如下的一种或多种：肉豆蔻酸、棕榈酸、油酸、亚油酸、硬脂酸、亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸。在一些实施方式中，C₆-C₁₂脂肪酸残基对所述C₁₄-C₃₀脂肪酸残基的重量比为0.124至2.000。在某些实施方式中，C₆-C₁₂脂肪酸残基对所述C₁₄-C₃₀脂肪酸残基的重量比可为0.124、0.125、0.130、0.140、0.150、0.160、0.170、0.180、0.190、0.200、0.300、0.400、0.500、0.600、0.700、0.800、0.900、1.000、1.100、1.200、1.300、1.400、1.500、1.600、1.700、1.800、1.900、2.000、或它们中的任意两者所限定的范围内。在一些实施方式中，所述“中长链脂肪酸甘油三酯”可参照专利CN115369132A的方法进行制备。

如本文所用，术语“乳脂肪球膜”或“MFGM”，英文Milk Fat Globule Membrane，是一种存在于母乳中的复杂生物膜结构。乳脂肪球膜是包襄在乳脂肪液滴表面，由极性脂质、胆固醇和蛋白质等组成的复杂的3层磷脂蛋白膜。对于本发明的乳脂肪球膜的来源，原则上没有特别限制，通常可以通过从动物乳或其制品中提取而得到，在一些优选的实施方案中，这样的动物乳或其制品可以为牛乳、羊乳、骆驼乳、马乳或基于它们的乳制品(例如奶酪)等，更优选的，可以从牛乳，包括牛初乳或牛常乳中进行提取。对于从上述动物乳或其制品中提取MFGM的方法，本发明没有特别限定，例如可以使用酸化的酸化沉淀-离心-等电点富集-干燥的方法进行，或者也可以使用现有的膜过滤的方法分离得到MFGM。另外，对于MFGM，也可以通过市售的商品而得到，包括乳脂肪球膜乳清蛋白粉和乳脂肪球膜乳蛋白粉等。乳脂肪球膜乳清蛋白粉指以生乳或乳清为原料，经分离、浓缩、干燥等工序制成的含有乳脂肪球膜的粉末状产品。乳脂肪球膜乳蛋白粉指以生乳或稀奶油为原料，经分离、浓缩、干燥等工序制成的含有乳脂肪球膜的粉末状产品。作为本发明的MFGM的商品来源包括Lacprodan®MFGM-10、Lacprodan®PL-20、Cor-Power®SM2、lipid-rich MFGM fraction或者酪乳粉浓缩物BPC50、BPC60、G600、PC700、HilmarCor-Power®WPC7500MEGM ENRICHED WPC等。

如本文所用，“金黄色葡萄球菌”也称“金葡菌”，属于葡萄球菌属，是革兰氏阳性菌代表，为一种常见的食源性致病微生物，广泛存在于自然环境中。金黄色葡萄球菌 在适当的条件下，能够产生肠毒素，引起食物中毒。肠毒素是一种单链小分子蛋白，分子量约26-29k Da，相对分子质量较低，具有热稳定性，对人体肠道产生破坏，导致呕吐腹泻等症状。

如本文所用，“试剂盒”是指一组经包装的相关组分，如一种或多种化合物或组合物和一种或多种相关材料，如溶剂、溶液、缓冲液、说明书或干燥剂。所述“试剂盒”中包含中长链脂肪酸甘油三酯和/或乳脂肪球膜。所述“试剂盒”用于体外抑制金黄色葡萄球菌，包括抑制金黄色葡萄球菌的生长、增殖和/或代谢产物的产生。

发明详述

营养组合物

本发明第一方面提供了一种营养组合物，所述营养组合物包含中长链脂肪酸甘油三酯(MLCT)和乳脂肪球膜(MFGM)，其中所述中长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜的质量比为2:1至80:1。

本发明发现，当将中长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜以所限定的质量比组合使用时，两者之间存在协同作用，能够协同改善腹泻、特别是改善(例如缓解或治疗)由金黄色葡萄球菌引起的腹泻，和/或(体内或体外)抑制金黄色葡萄球菌。

在一些实施方式中，所述营养组合物由中长链脂肪酸甘油三酯(MLCT)和乳脂肪球膜(MFGM)组成。

在实施方式中，所述营养组合物中所述中长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜的质量比为2:1至80:1，例如2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1、15:1、20:1、25:1、30:1、35:1、40:1、45:1、50:1、55:1、60:1、65:1、70:1、75:1、80:1或它们中的任意两者所限定的范围内。优选地，所述中长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜的质量比为2:1至40:1，在所述范围内，协同效果更加显著，特别是能够协同地改善腹泻、特别是协同地改善(例如缓解或治疗)由金黄色葡萄球菌引起的腹泻，和协同地(体内或体外)抑制金黄色葡萄球菌。更优选地，所述中长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜的质量比为3:1至40:1，在所述范围内，在改善腹泻、特别是协同地改善(例如缓解或治疗)由金黄色葡萄球菌引起的腹泻方面的协同效果更显著。进一步优选地，所述中长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜的质量比为3:1至20:1、优选3:1至10:1，在所述范围内，在(体内或体外)抑制金黄色葡萄球菌方面的协同效果更显著。

产品

本发明第二方面涉及食品，其包含本发明第一方面所述的营养组合物。

以上关于本发明第一方面的所有描述均适用于此，在此不再赘述。

在一些实施方式中，所述食品可例如为功能性食品、保健食品、或保健品。

在一些实施方式中，所述食品为普通食品或特殊食品。作为示例，所述食品可选自乳制品、糖果、饮料、面包和饼干，例如所述食品可选自奶粉或发酵食品。在一些实施方式中，所述奶粉为婴幼儿奶粉、例如婴幼儿配方奶粉。

在一些实施方式中，所述食品为婴幼儿食品例如婴幼儿配方食品。

在一些实施方式中，所述食品可为粉剂、片剂或液剂。

在一些实施方式中，基于所述食品的干基重量，中长链脂肪酸甘油三酯的含量可为0.1%至30.0%。作为示例，基于所述产品的重量，中长链脂肪酸甘油三酯的含量可为0.1、0.2、0.5、0.8、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0、12.0、13.0、14.0、15.0、16.0、17.0、18.0、19.0、20.0、21.0、22.0、23.0、24.0、25.0、26.0、27.0、28.0、29.0、30.0干基重量%、或它们中的任意两者所限定的范围内。乳脂肪球膜的含量可根据二者的比例进行计算。

在一些实施方式中，基于所述产品的干基重量，乳脂肪球膜的含量可为0.0005%至30%。作为示例，基于所述产品的重量，乳脂肪球膜的含量可为0.0005、0.001、0.005、0.01、0.05、0.1、0.2、0.5、0.8、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0、12.0、13.0、14.0、15.0、16.0、17.0、18.0、19.0、20.0、21.0、22.0、23.0、24.0、25.0、26.0、27.0、28.0、29.0、30.0干基重量%、或它们中的任意两者所限定的范围内。

此外，本领域技术人员容易理解，除本发明第一方面的营养组合物以外，所述食品还包括选自如下的一种或多种：生牛乳、脱盐乳清粉、浓缩乳清蛋白、乳糖、食用植物调和油、低聚果糖、低聚半乳糖、核苷酸、胆碱、维生素、矿物质、DHA和牛磺酸。

例如，当所述食品为奶粉时，除本发明第一方面所述的营养组合物以外，奶粉还可包括蛋白质例如α-乳白蛋白、乳脂肪球膜蛋白；糖类例如乳糖；脂质；矿物质例如钙、铁、磷等；维生素；其它添加剂例如乳清粉、酒石酸氢胆碱、二十二碳六烯酸、花生四烯酸、核桃油等。

所述食品可采用本领域通常使用的制备方法生产，在此不再赘述。

应用

本发明还涉及本发明第一方面的营养组合物的应用。

在第三方面中，所述应用为在制备用于改善(例如缓解或治疗)腹泻的产品中的应用。

在一些实施方式中，所述腹泻是细菌性腹泻。所述细菌性腹泻可例如由金黄色葡萄球菌感染引起。

在第四方面中，所述应用为在制备用于抑制金黄色葡萄球菌感染的产品中的应用。

在一些实施方式中，所述抑制为体内抑制或体外抑制。

在一些实施方式中，所述抑制包括抑制金黄色葡萄球菌的生长、增殖或代谢产物产生。

在第五方面中，所述应用为在制备用于调节肠道菌群(例如腹泻受试者中肠道菌群)的产品中的应用。在一些实施方式中，所述肠道菌群包括金黄色葡萄球菌。

在第六方面中，所述应用为用于改善腹泻的非治疗目的的应用。

在一些实施方式中，所述腹泻是细菌性腹泻。所述细菌性腹泻可例如由金黄色葡萄球菌感染引起。

在第七方面中，所述应用为用于抑制金黄色葡萄球菌感染的非治疗目的的应用。

在一些实施方式中，所述抑制为体内抑制或体外抑制。

在一些实施方式中，所述抑制包括抑制金黄色葡萄球菌的生长、增殖或代谢产物产生。

以上关于本发明第一方面的所有描述均适用于此，在此不再赘述。

本发明第三至第五方面的所述产品可例如为食品或药物。

对于所述食品，以上关于本发明第二方面的描述均适用于此，在此不再赘述。

对于所述药物，在一些实施方式中，其剂型包括但不限于片剂、颗粒粉末剂、胶囊和液体剂。

在一些实施方式中，所述组合物、食品或药品在人体口服时，中长链脂肪酸甘油三酯的服用剂量为0.1~30 g/天，例如为0.1 g/天，0.2 g/天，0.3 g/天，0.4 g/天，0.5 g/天，0.6 g/天，0.7 g/天，0.8 g/天，0.9 g/天，1 g/天，2 g/天，3 g/天，4 g/天，5 g/天，6 g/天，7 g/天，8 g/天，9 g/天，10 g/天，11 g/天，12 g/天，13 g/天，14 g/天，15 g/天，16 g/天，17 g/天，18 g/天，19 g/天，20 g/天，21 g/天，22 g/天，23 g/天，24 g/天，25 g/天，26g/天，27 g/天，28 g/天，29 g/天，或30 g/天或其间的任何范围。所述乳脂肪球膜的服用剂量可根据与中长链脂肪酸甘油三酯的比例进行换算。

在一些实施方式中，所述乳脂球膜的服用剂量为0.0005~30 g/天，例如为0.0005g/天，0.0006 g/天，0.0007 g/天，0.0008 g/天，0.0009 g/天，0.001 g/天，0.002g/天，0.003 g/天，0.004 g/天， 0.005 g/天，0.006 g/天，0.007 g/天，0.008 g/天，0.009g/天，0.01 g/天，0.02 g/天，0.03 g/天，0.04g/天，0.05 g/天，0.06 g/天，0.07 g/天，0.08 g/天，0.09 g/天，1 g/天，2 g/天，3 g/天，4 g/天，5 g/天，6 g/天，7 g/天，8 g/天，9g/天，10 g/天，11 g/天，12 g/天，13 g/天，14 g/天，15 g/天，16 g/天，17 g/天，18 g/天，19 g/天，20 g/天，21 g/天，22 g/天，23 g/天，24 g/天，25 g/天，26 g/天，27 g/天，28 g/天，29 g/天，或30 g/天或其间的任何范围。中长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜可以配制成组合物或制剂以便于受试者服用。或者，中长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜可以不配制成同一组合物而单独地服用，例如同时服用或分开服用。在分开服用的情况下，中长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜可以在一天内间隔一定时间进行。长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜也可以在一天内分几次进行服用。两种组分间隔施用的时间或者分开施用的次数是本领域技术人员容易确定的。

实施例

参考以下实例将更容易理解本发明，所述实例仅用于说明本发明的某些方面和实施例，且不意图限制本发明。

如无相反说明，本实施例中采用的试剂均为商购材料或常规材料。下述所有实施例中中长链脂肪酸甘油三酯(MLCT)来源于中长链脂肪酸食用油(纯度为69±10 %)，由青岛海智源生命科技有限公司生产，生产批号为Y1505-22120101。

乳脂肪球膜(MFGM)，购自Arla，产品名称为Lacprodan®MFGM-10，批次为P510216，该原料中磷脂含量为8±2 %，蛋白质含量为71.5±5重量%，鞘磷脂g/100g磷脂为25±10g。

万古霉素来源于上海麦克林生化科技股份有限公司，白色粉末，批号C12976208。

实施例1 MLCT或MFGM改善腹泻功效评价

随机选取受精后4天(4 dpf)野生型AB品系斑马鱼于6孔板中，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼。水溶给予样品(浓度见表1)，阳性对照万古霉素1000 μg/mL浓度，同时设置正常对照组和模型对照组，每孔容量为3 mL。28℃处理8 h后，各实验组均水溶给予尼罗红作为肠内容物的荧光指示剂，喂饲过夜，第二天，洗去样品和尼罗红，继续水溶给予样品(浓度见表1、图1)。除正常对照组外，其余实验组均水溶给予金黄色葡萄球菌建立斑马鱼腹泻模型。28℃处理30 h后，每个实验组随机选取10尾斑马鱼置于荧光显微镜下拍照，用NIS-Elements D 3.20高级图像处理软件分析并采集数据，分析斑马鱼肠道荧光信号强度，以该指标统计学分析结果评价样品改善金黄色葡萄球菌诱导的腹泻功效。统计学处理结果采用mean ± SE表示。用SPSS 26.0软件进行统计学分析，p < 0.05表明差异具有统计学意义。

随按照上述方法，将MLCT、MFGM分别设置不同的剂量进行斑马鱼给药，以评价不同浓度的两个单组分改善腹泻的功效(肠道荧光强度)。给药剂量如表1所示，给药结果如表1和图1所示。

表1 单组分改善腹泻功效(肠道荧光强度)功效评价实验结果

注：P值为中长链脂肪酸甘油三酯组或MFGM组与模型对照组肠道荧光强度的差异显著性分析结果。

由表1和图1的结果可知，4dpf野生型AB品系斑马鱼经过金黄色葡萄球菌诱导后，与正常对照组相比，其肠道荧光强度显著下降(P＜0.05)，说明金黄色葡萄球菌诱导的腹泻模型建模成功。而阳性对照(万古霉素1000 μg/mL)，单体中长链脂肪酸甘油三酯(125 µg/mL，250 µg/mL，500 µg/mL，750 µg/mL)和MFGM(15.6 µg/mL，31.2 µg/mL, 41.6µg/mL)均具有显著改善腹泻的功效，具体表现为：与模型对照组相比斑马鱼肠道荧光强度变强(P<0.05)。单体中长链脂肪酸甘油三酯在浓度为250 µg/mL条件下改善腹泻的功效最强，当其浓度进一步增加(500 µg/mL，750 µg/mL)时，其改善腹泻的功效变弱或相似，因而浓度250µg/mL为中长链脂肪酸甘油三酯改善腹泻功效的最优浓度。单体MFGM在浓度为31.2 µg/mL条件下改善腹泻的功效最强，当其浓度进一步增加(41.6 µg/mL)时斑马鱼改善腹泻的功效反而变弱，到浓度增加到62.5 µg/mL时反而没有改善腹泻的功效了。因而，31.2 µg/mL为MFGM改善腹泻功效的最优浓度。

实施例2 MLCT和MFGM的组合物改善腹泻功效评价

随机选取4 dpf野生型AB品系斑马鱼于6孔板中，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼。水溶给予样品(浓度见表2、图2、图3)，阳性对照万古霉素 1000 μg/mL浓度，同时设置正常对照组和模型对照组，每孔容量为3 mL。28℃处理8 h后，各实验组均水溶给予尼罗红作为肠内容物的荧光指示剂，喂饲过夜，第二天，洗去样品和尼罗红，继续水溶给予样品(浓度见表2、图2、图3)。除正常对照组外，其余实验组均水溶给予金黄色葡萄球菌建立斑马鱼腹泻模型。28℃处理30 h后，每个实验组随机选取10尾斑马鱼置于荧光显微镜下拍照，用NIS-Elements D 3.20高级图像处理软件分析并采集数据，分析斑马鱼肠道荧光信号强度，以该指标统计学分析结果评价样品改善金黄色葡萄球菌诱导的腹泻功效。

给药剂量和结果如表2所示。给药结果如表2，图2和图3所示。

表2 组合物改善腹泻功效(肠道荧光强度)功效评价实验结果

注：P值为中长链脂肪酸甘油三酯组或MFGM组与模型对照组肠道荧光强度的差异显著性分析结果。

由表2、图2和图3的结果可知，与模型对照组相比，实例3~10组合物均具有改善腹泻的功效，具体表现为肠道荧光强度增强(P<0.05)。与单独MLCT(浓度250 µg/mL)和单独MFGM(浓度31.2 µg/mL)在最优浓度下作用相比，MLCT和MFGM之间配比为(2-80)：1的实例3~9中斑马鱼肠道荧光强度数值均显著增强，表明MLCT和MFGM之间在改善腹泻方面存在协同作用；MLCT和MFGM之间配比为(3-40)：1的实例4~8中斑马鱼肠道荧光强度数值进一步增强，表明MLCT和MFGM之间在改善腹泻方面的协同作用更为显著。

实施例3 MLCT和MFGM的组合物抑制金黄色葡萄球菌的功效实验

随机选取4 dpf野生型AB品系斑马鱼于6孔板中，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼。水溶给予样品(浓度见表3)，阳性对照万古霉素 1000 μg/mL浓度，同时设置模型对照组，每孔容量为3 mL。28℃处理24 h后，所有实验组均水溶给予金黄色葡萄球菌建立斑马鱼金黄色葡萄球菌感染模型。28℃下CM-DiI将金黄色葡萄球菌标记处理6 h后，每个实验组随机选取10尾斑马鱼置于荧光显微镜下拍照，用NIS-Elements D 3.20高级图像处理软件分析并采集数据，分析斑马鱼肠道金黄色葡萄球菌荧光强度，以该指标统计学分析结果评价样品抑菌功效。统计学处理结果采用mean ± SE表示。用SPSS 26.0软件进行统计学分析，p< 0.05表明差异具有统计学意义。

给药剂量如表3所示。给药结果如表3，图4和图5所示。

表3 抗金黄色葡萄球菌功效评价功实验

注：P值为中长链脂肪酸甘油三酯组或MFGM组与模型对照组金黄色葡萄球菌荧光强度的差异显著性分析结果。

由表3、图4、图5结果可知，与金黄色葡萄球菌诱导的模型对照组相比，阳性对照(万古霉素，1000µg/mL)，单体中长链脂肪酸甘油三酯(250 µg/mL)、MFGM(31.2 µg/mL)及实例2-10均具有显著抗金黄色葡萄球菌的功效，具体表现为与模型对照组相比斑马鱼金黄色葡萄球菌荧光强度变弱(P<0.05)。与单体中长链脂肪酸甘油三酯(250 µg/mL)和MFGM(31.2µg/mL)相比，MLCT和MFGM之间配比为(2-40)：1的实例3-8中金黄色葡萄球菌荧光强度变弱，表明MLCT和MFGM之间在抗金黄色葡萄球菌方面存在协同作用；MLCT和MFGM之间配比为(3-20)：1的实例4-7中金黄色葡萄球菌荧光强度更低，表明MLCT和MFGM之间在抗金黄色葡萄球菌方面的协同作用更强；MLCT和MFGM之间配比为(3-10)：1的实例4-6中金黄色葡萄球菌荧光强度进一步降低，表明MLCT和MFGM之间在抗金黄色葡萄球菌方面的协同作用进一步增强。

最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (23)

1.营养组合物，其特征在于，包含中长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜，其中所述中长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜的质量比为2:1至80:1。

2.根据权利要求1所述的营养组合物，其特征在于，所述中长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜的质量比为2:1至40:1。

3.根据权利要求2所述的营养组合物，其特征在于，所述中长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜的质量比为3:1至40:1。

4.根据权利要求3所述的营养组合物，其特征在于，所述中长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜的质量比为3:1至20:1。

5.根据权利要求4所述的营养组合物，其特征在于，所述中长链脂肪酸甘油三酯和乳脂肪球膜的质量比为3:1至10:1。

6.食品，其特征在于，包含权利要求1-5任一项所述的营养组合物。

7.根据权利要求6所述的食品，其特征在于，所述食品选自乳制品、糖果、饮料、面包和饼干中的一种或多种。

8.根据权利要求6所述的食品，其特征在于，所述食品为奶粉或发酵食品。

9.根据权利要求8所述的食品，其特征在于，所述奶粉为婴幼儿配方奶粉。

10.根据权利要求6所述的食品，其特征在于，所述食品为婴幼儿食品。

11.根据权利要求1-5任一项所述的营养组合物在制备用于改善腹泻的产品中的应用。

12.根据权利要求11所述的应用，其特征在于，所述腹泻是细菌性腹泻。

13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述细菌性腹泻由金黄色葡萄球菌感染引起。

14.根据权利要求11所述的应用，其特征在于，所述产品为食品或药物。

15.根据权利要求11所述的应用，其特征在于，所述产品为保健食品。

16.根据权利要求1-5任一项所述的营养组合物在制备用于抑制金黄色葡萄球菌感染的产品中的应用，所述抑制为体内抑制或体外抑制。

17.根据权利要求16所述的应用，其特征在于，所述产品为食品或药物。

18.根据权利要求16所述的应用，其特征在于，所述产品为保健食品。

19.根据权利要求1-5任一项所述的营养组合物在制备用于调节腹泻受试者中肠道菌群的产品中的应用。

20.根据权利要求19所述的应用，其特征在于，所述产品为食品或药物。

21.根据权利要求19所述的应用，其特征在于，所述产品为保健食品。

22.根据权利要求1-5任一项所述的营养组合物用于改善腹泻的非治疗目的的应用。

23.根据权利要求1-5任一项所述的营养组合物用于抑制金黄色葡萄球菌感染的非治疗目的的应用。