CN118974032A

CN118974032A - N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1h-吡唑-3-甲酰胺盐酸盐的新形式

Info

Publication number: CN118974032A
Application number: CN202280094492.8A
Authority: CN
Inventors: 南基然; 金在昇; 全宝罗美
Original assignee: Qurient Co Ltd
Current assignee: Qurient Co Ltd
Priority date: 2022-03-30
Filing date: 2022-03-30
Publication date: 2024-11-15
Also published as: IL315474A; MX2024011114A; US20250188058A1; AU2022451503A1; JP2025511099A; EP4499627A1; WO2023186294A1; CA3246140A1; KR20240168318A

Abstract

本发明涉及Axl/Mer受体酪氨酸激酶和CSF1R(集落刺激因子1受体)抑制剂的新形式，特别是N‑(5‑((6,7‑二甲氧基喹啉‑4‑基)氧基)吡啶‑2‑基)‑1‑丙基‑4‑(2,2,2‑三氟‑乙氧基)‑1H‑吡唑‑3‑甲酰胺盐酸盐的新形式。

Description

N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基- 4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺盐酸盐的新形式

技术领域

本发明涉及Axl/Mer受体酪氨酸激酶和CSF1R(集落刺激因子1受体)的抑制剂的新形式，特别是N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺盐酸盐的新形式。

背景技术

Axl/Mer受体酪氨酸激酶(Axl/Mer RTK)是TAM(酪氨酸、Axl、Mer)受体酪氨酸激酶的一员。这类TAM受体酪氨酸激酶的特征在于其胞外域由两个免疫球蛋白样结构域和两个纤连蛋白3型样结构域组成。Axl/Mer通路的激活通过同源蛋白配体，即分别由生长停滞特异性蛋白6(Gas6)和蛋白S(Pros1)实现。

多种此类TAM受体酪氨酸激酶的抑制剂已经被描述了，例如Myers et al.,2019,Mol.Cancer,18,94；https://doi.org/10.1186/s12943-019-1022-2。

众所周知，CSF1R能够调节髓系祖细胞向异质性单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞(DC)和骨吸收破骨细胞的分化。此外，活化的CSF1R促进已分化的巨噬细胞的存活、增殖、分化和趋化(Geissmann F et al.,Science.2010Feb 5；327(5966):656-61)。

基于CSF1R在免疫细胞中的作用，靶向CSF1R或其配体的各种免疫疗法和癌症治疗方法正在开发中，目前正处于临床阶段。

WO2019/229251中已经描述了多种此类抑制剂，包括化合物N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺，也称为“Q702”。

该领域中仍然存在对Axl/Mer受体酪氨酸激酶和CSF1R的改进的合适抑制剂的持续需求，这些抑制剂应具有高生物利用度、良好的溶解性和良好的稳定性。

发明内容

这些目标通过化合物N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺盐酸盐得以实现，

其具有以下化学式

并且在通过Cu-Kα射线(Cu-Kα)辐射获得的X射线粉末衍射(XRPD)谱图中具有来自第一组峰中的至少一个或多个峰，所述第一组峰为：

8.2°2θ、9.9°2θ、11.4°2θ、15.2°2θ、15.4°2θ、19.9°2θ、21.4°2θ、21.7°2θ、22.9°2θ、23.3°2θ、25.5°2θ、25.7°2θ、25.9°2θ、28.2°2θ和28.7°2θ，±0.2°2θ；

其中，优选地，所述化合物具有来自所述第一组峰中的至少两个峰、至少三个峰、至少四个峰、至少五个峰、至少六个峰或更多峰，该化合物在本文中也被称为(N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺盐酸盐的“形式A”)。

在一个实施方式中，所述化合物在通过Cu-K Kα射线(Cu-Kα)辐射获得的X射线粉末衍射(XRPD)谱图中具有来自第二组峰中的至少两个峰，所述第二组峰为：

3.8°2θ、7.6°2θ、10.7°2θ、12.9°2θ、16.5°2θ、17.2°2θ、24.6°2θ、24.8°2θ、29.5°2θ、29.9°2θ和31.1°2θ，±0.2°2θ；

其中，优选地，所述化合物具有来自所述第二组峰中的至少三个峰或至少四个峰，该化合物在本文中也被称为(N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺盐酸盐的“形式A”)。

在一个实施方式中，所述化合物具有来自所述第一组峰和/或所述第二组峰中的所有峰，该化合物在本文中也被称为(N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺盐酸盐的“形式A”)。

在一个实施方式中，所述化合物具有通过Cu-Kα射线(Cu-Kα)辐射获得的X射线粉末衍射(XRPD)谱图，如下所示：

该化合物在本文中也被称为(N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺盐酸盐的“形式A”)。

在一个实施方式中，所述化合物具有显示在115℃至150℃的范围内、优选在135℃至148℃的范围内、更优选在135℃至146℃的范围内、甚至更优选在140℃至146℃的范围内、甚至更优选在144℃至146℃的范围内、甚至更优选在约145℃处、最优选在约145.8℃处的差示扫描量热法(DSC)热图。

在一个实施方式中，所述化合物具有如下所示的差示扫描量热法(DSC)热图：

在一个实施方式中，所述化合物通过包括以下步骤的方法生产：

-以任意顺序提供规定量的N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺游离碱和规定量的盐酸，使得所述游离碱和所述盐酸按1：1的化学计量比提供；

-将所述游离碱溶解在适当的溶剂或溶剂混合物中，所述溶剂或溶剂混合物为选自甲醇、乙醇、四氢呋喃(THF)、丙酮、水，以及水与甲醇、乙醇、四氢呋喃(THF)和丙酮中任意的混合物；并可选择性地加入1-5倍反应体积的水；

-加入约一半的所述规定量的盐酸；

-加入晶种量(seeding amount)的N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺盐酸盐的形式A，该形式A如本文例如权利要求1-4中任一项所定义，以促进形式A的形成和沉淀；

-在30min至5h内加入另一半的所述规定量的盐酸；

-搅拌30min至2h、优选30min至1h的规定时间；

-在1至20h、优选在2-10h内加入5-15倍、优选约10倍反应体积的水；

任选地分离沉淀的形式A，优选通过过滤、筛分或溶剂蒸发分离沉淀的形式A。

在另一方面，本发明还涉及一种制造本文所定义的化合物的方法，所述方法包括以下步骤：

-加入约一半的所述规定量的盐酸；

-加入晶种量的N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺盐酸盐的形式A，该形式A如本文例如权利要求1-4中任一项所定义，以促进形式A的形成和沉淀；

-在30min至5h内加入另一半的所述规定量的盐酸；

-搅拌30min至2h、优选30min至1h的规定时间；

在另一方面，本发明还涉及一种药物组合物，其包含至少一种如本文所定义的化合物，以及至少一种药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。

在该药物组合物的一个实施方式中，其还包含至少一种其他药学活性成分。

在另一方面，本发明还涉及用于治疗选自过度增生性疾病(hyperproliferativedisorders)、炎症性疾病(inflammatory disorders)和神经退行性疾病(neurodegenerative disorders)中的疾病的如本文所定义的化合物或药物组合物。

在该用途的化合物或药物组合物的一个实施方式中，所述过度增生性疾病为癌症，优选为选自腺癌、听神经瘤、急性淋巴细胞白血病、急性髓系白血病、肾上腺皮质癌、艾滋病相关癌症、艾滋病相关淋巴瘤、肛门癌、阑尾癌、星形细胞瘤、非典型畸胎样/横纹肌样瘤、壶腹癌、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、骨肉瘤和骨恶性纤维组织细胞瘤、脑干胶质瘤、脑肿瘤、中枢神经系统非典型畸胎样/横纹肌样瘤、颅咽管瘤、室管膜母细胞瘤、室管膜瘤、髓母细胞瘤、髓上皮瘤、中等分化程度的松果体实质肿瘤、幕上原始神经外胚层肿瘤和松果体母细胞瘤、脑和脊髓肿瘤、乳腺癌、脐尿管肿瘤、伯基特淋巴瘤、类癌瘤、脉络膜黑色素瘤、胃肠道癌、中枢神经系统淋巴瘤、宫颈癌、子宫体癌(corpus cancer)、脊索瘤、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓系白血病、慢性骨髓增生性疾病、结肠癌、结直肠癌、皮肤T细胞淋巴瘤、硬纤维瘤、蕈样肉芽肿(mycosis fungoides)、子宫内膜癌、食管癌、嗅神经母细胞瘤、尤文氏肉瘤肿瘤家族(Ewing sarcoma family of tumors)、颅外生殖细胞肿瘤、性腺外生殖细胞肿瘤(extragonadal germ cell tumor)、肝外胆管癌、耳肿瘤、眼内黑色素瘤、视网膜母细胞瘤、胆囊癌、胃癌、胃肠道类癌肿瘤(gastrointestinal carcinoid tumor)、胃肠道间质肿瘤、胃肠道间质细胞瘤、妇科肿瘤、卵巢生殖细胞肿瘤、妊娠滋养细胞肿瘤、胶质瘤、胆囊癌、毛细胞白血病、头颈癌、心脏癌、肝细胞癌、组织细胞增生症(histiocytosis)、下咽癌、血液系统肿瘤、胰岛细胞瘤(内分泌胰腺瘤)、肾细胞癌、肾癌、朗格汉斯细胞组织细胞增生症、喉癌、白血病、唇和口腔癌、肝癌、肺癌、非小细胞肺癌、小肠肿瘤、小细胞肺癌、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、原发性中枢神经系统淋巴瘤、巨球蛋白血症、骨和骨肉瘤的恶性纤维组织细胞瘤(malignant fibrous histiocytoma ofbone and osteosarcoma)、黑色素瘤、梅克尔细胞癌、间皮瘤、隐匿原发灶的转移性鳞状细胞颈癌(metastatic squamousneck cancer with occult primary)、脊髓瘤、多发性内分泌肿瘤综合征、骨髓增生异常综合征、骨髓增生异常/骨髓增生性肿瘤、髓系白血病、多发性骨髓瘤、骨髓增生性疾病、鼻腔和鼻窦癌(nasal cavity and paranasal sinus cancer)、鼻咽癌、神经母细胞瘤、口腔癌、口咽癌、骨肉瘤和骨恶性纤维组织细胞瘤、卵巢癌、卵巢上皮癌、卵巢低恶性潜能肿瘤、少突胶质瘤、浆细胞瘤、胰腺癌、乳头状瘤病、甲状旁腺癌、阴茎癌、咽癌、垂体瘤、浆细胞肿瘤/多发性骨髓瘤、胸膜肺母细胞瘤(pleuropulmonary blastoma)、前列腺癌、直肠癌、肾细胞癌、移行细胞癌(transitional cell cancer)、呼吸道癌、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、肉瘤、皮肤睾丸癌、尤文氏肉瘤、卡波西肉瘤、子宫肉瘤、非黑色素瘤皮肤癌、黑色素瘤皮肤癌、皮肤癌、小肠癌、软组织肉瘤、鳞状细胞癌、鳞状细胞颈癌、胃癌、软组织肿瘤、睾丸癌、喉癌、胸腺瘤和胸腺癌、甲状腺癌、肾盂和输尿管移行细胞癌(transitional cell cancer of the renalpelvis and ureter)、滋养细胞肿瘤、睾丸癌、妊娠期癌症(gestational cancer)、泌尿系统肿瘤、输尿管和肾盂癌、尿道癌、尿路上皮癌、子宫癌、阴道癌、外阴癌、华氏巨球蛋白血症和肾母细胞瘤(macroglobulinemia and wilms tumor)、导致体内潜在腔隙的积液(tumors that cause effusions in potential spaces of the body)、胸腔积液、心包积液、腹腔积液又称腹水(肿)、巨细胞瘤(GCT)、骨GCT、色素沉着的绒毛结节性滑膜炎(pigmented villonodular synovitis，PVNS)、腱鞘巨细胞瘤(TGCT)、腱鞘的TGCT(TGCT-TS)中的癌症。

在该用途的化合物或药物组合物的一个实施方式中，所述炎症性疾病为选自骨关节炎、炎症性肠综合征、移植排斥反应、系统性红斑狼疮、溃疡性结肠炎、克罗恩病、慢性阻塞性肺疾病、肺气肿、川崎病、噬血细胞综合征(巨噬细胞活化综合征)、多中心网状组织细胞增生症、动脉粥样硬化、原发性进展型多发性硬化症、I型糖尿病、II型糖尿病、胰岛素抵抗、高血糖、肥胖、脂解(lipolysis)、嗜酸性粒细胞增多症、骨质疏松症、骨折风险增加、派杰氏病(Paget's disease)、高钙血症、感染介导的骨溶解(例如骨髓炎)、假体周围或磨损碎片介导的骨溶解、子宫内膜异位症、炎症性疼痛、慢性疼痛和骨痛中的疾病。

在该用途的化合物或药物组合物的一个实施方式中，所述神经退行性疾病为选自宾斯旺格型痴呆(Binswanger type dementia)、前脑畸形(prosencephaly)、小头畸形、脑瘫、先天性脑积水、腹水(abdominal dropsy)、进行性核上性麻痹、青光眼、威尔逊病、阿尔茨海默病及其他痴呆症、帕金森病(PD)及与PD相关的疾病、多发性脑梗死性痴呆(multiinfarct dementia)、额颞叶痴呆(Frontotemporal dementia)、假性痴呆、朊蛋白病、运动神经元疾病、亨廷顿病、脊髓小脑性共济失调和脊髓性肌萎缩中的疾病。

在该用途的化合物或药物组合物的一个实施方式中，所述用途是与另一种药学活性药物或疗法，特别是放射疗法、化学治疗剂、靶向药物和免疫检查点抑制剂药物联合使用。

在另一方面，本发明还涉及一种治疗选自过度增生性疾病、炎症性疾病和/或神经退行性疾病中的疾病的方法，所述方法包括向有需要的患者施用如本文所定义的化合物或如本文所定义的药物组合物。

在另一方面，本发明还涉及一种如本文所定义的化合物在制备用于治疗选自过度增生性疾病、炎症性疾病和/或神经退行性疾病中的疾病的药物中的用途。

在上述两个方面中，所述疾病选自过度增生性疾病、炎症性疾病和/或神经退行性疾病，所述化合物和所述药物组合物如本文所定义。

如本文所用，术语“Q702”是指化合物N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺。同样，术语“Q702盐”或“Q702HCl”或“Q702 HCl盐”，如本文所用，分别指该化合物的一般盐或HCl形式或HCl盐。

术语“Q702 HCl的形式A”，如本文所用，是指Q702 HCl的特定晶型，其由XRPD谱图中的多个峰或其整个XRPD谱图所定义。该形式A的这些峰和谱在本文中进行了概述和描述，例如在权利要求1-4中，或在图8中。

术语“晶种量”或“形式A的晶种量”，如本文所用，是指任何适合且足够用作Q702HCl的形式A的结晶的成核位点或点，或促进Q702 HCl的形式A的更多晶体生长的Q702 HCl的形式A的量。

本领域技术人员能够根据每种情况下选择的反应条件和反应规模确定并识别出该量。例如，加晶种结晶(seeding crystallisation)在Parambil,2017,“EngineeringCrystallography:From Molecule to Crystal to Functional Form(pp.235-245)”(DOI:10.1007/978-94-024-1117-1_13)中进行了综述。

附图说明

此外，参考随附的附图，其中：

图1显示了在本发明过程中鉴定出的不同Q702 HCl盐形式的XRPD谱图，分别为图1a中的形式A至F(从上到下)、图1b中的形式G至L(从上到下)和图1c中的形式M至R(从上到下)。

图2显示了通过旋转蒸发和冷冻干燥制备的无定形Q702 HCl的XRPD谱图。

图3显示了Q702 HCl盐形式C的XRPD谱图。

图4显示了Q702 HCl盐形式C的TGA分析数据(开放式盘)。

图5显示了Q702 HCl盐形式C的TGA分析数据(封闭式盘)。

图6显示了Q702 HCl盐形式C的¹H NMR谱图。

图7显示了Q702 HCl盐形式C的DVS数据。

图8显示了Q702 HCl盐形式A的XRPD谱图。

图9显示了Q702 HCl盐形式A的TGA分析数据(封闭式盘)。

图10显示了Q702 HCl盐形式A的TGA分析数据(开放式盘)。

图11显示了Q702 HCl盐形式A的¹H NMR谱图。

图12显示了Q702 HCl盐形式A的DVS数据。

图13显示了Q702 HCl盐形式A的DVS动力学图。

图14显示了DVS分析前(上)和后(下)Q702 HCl盐形式A的XRPD谱图。

图15显示了暴露于40℃和75％RH前(上)和后(下)的Q702 HCl盐形式A的XRPD谱图。

图16显示了暴露于40℃和75％RH 15天后的Q702 HCl盐形式A的¹H NMR谱图。

图17显示了实施例3中的结晶实验1的结果，其上方四条迹线显示了反应不同阶段的XRPD谱图，且下方迹线(标记为“PS02379-129-N-P.brmi”)为Q702形式A的参考迹线。

图18显示了实施例3中的结晶实验2的结果，其上方四条迹线显示了反应不同阶段的XRPD谱图，且下方迹线(标记为“PS02379-129-N-P.brmi”)为Q702形式A的参考迹线。

图19显示了实施例3中的结晶实验3的结果，其上方四条迹线显示了反应不同阶段的XRPD谱图，且下方迹线(标记为“PS02379-129-N-P.brmi”)为Q702形式A的参考迹线。

图20显示了实施例3中的结晶实验4的结果，其上方四条迹线显示了反应不同阶段的XRPD谱图，且下方迹线(标记为“PS02379-129-N-P.brmi”)为Q702形式A的参考迹线。

图21显示了实施例3中的结晶实验5的结果，其上方四条迹线显示了反应不同阶段的XRPD谱图，且下方迹线(标记为“HCl Pat C.txt”)为Q702形式A的参考迹线。

图22显示了实施例3中结晶实验6至9的结果，其上方四条迹线显示了实验不同阶段的XRPD谱图，且下方迹线显示了形式A的参考迹线，标记为“PS02379-129-N-P.brmi”。

图23显示了Q702 HCl盐形式A暴露于25℃和60％RH 24个月后的XRPD谱图叠加，其上方迹线显示了暴露于25℃和60％RH 24个月后的XRPD谱图，中间迹线(标记为“C18051198-N(C18051198-N18001M)”)为Q702形式A的参考迹线，且下方迹线显示了初步制备的Q702形式A，即未经24个月暴露的状态。

图24显示了Q702 HCl盐形式A暴露于40℃和75％RH 6个月后的XRPD谱图叠加，其上方迹线显示了暴露于25℃和60％RH 24个月后的XTPD谱图，且下方迹线显示了初步制备的Q702形式A，即未经6个月暴露的状态。

图25显示了在小鼠中口服给药Q702 HCl形式A和Q702游离碱(均为30.0mg/kg)后的平均血浆浓度叠加图。

具体实施方式

此外，参见以下实施例，这些实施例用于说明本发明，而非限制本发明。

实施例

实施例1

最佳盐的筛选

如WO 2019/229251所述，制备了化合物N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(“Q702”)。

这是用于识别稳定的结晶盐以开发为治疗药物形式。其方法是在广泛且多样化的成核条件下生成固体，这些条件旨在模拟开发和配制过程中使用的工艺条件和溶剂。为此，进行了基于溶剂的实验，特别是蒸发实验(evaporation experiment)、蒸汽应力实验(vapour stress experiment)(环境温度和40℃)、浆料实验(slurry experiment)(环境温度和40℃)。这些实验所得的所有固体均通过XRPD进行分析，并将所得的图谱(patterns)/形式与起始材料进行比较。在材料充足的情况下，对具有新型XRPD图谱/形式的固体进行了进一步分析(例如通过NMR或热重分析(TGA))。此外，还测试了盐在各种溶剂以及水溶液中的溶解度。

更具体地，进行了以下的筛选方法：

盐筛选方法

实验在～30mg的规模下进行，采用1：1的化学计量比(成盐剂：游离酸(saltformer:free acid))。

蒸发

在每种溶剂中配制Q702溶液，并通过0.2μm PTFE过滤器进行过滤。将过滤后的溶液置于通风橱中，在环境温度下用穿孔铝箔覆盖的小瓶中蒸发。将所得的固体通过XRPD进行分析。

浆料实验

向给定的溶剂中加入足量的Q702盐(无定形/无序盐(disordered salts))，直到在所需温度(20℃或40℃)下仍有未溶解的固体残留。密封小瓶并将浆料保持在选定的温度下，并用磁力搅拌器搅拌1-11天。通过离心分离固体并在空气中干燥后，进行XRPD分析。

蒸汽应力

将约30mg的Q702盐(无定形/无序盐)加入小瓶中，并将其未密封地放置在含有1mL选定溶剂的更大密封容器内。经过1-6天后，将样品取出并通过XRPD进行分析。蒸汽应力实验在环境温度和40℃下进行。

此外，使用了以下分析技术：

用于所产生盐的分析技术

X射线粉末衍射(XRPD)

XRPD分析使用配备Cu X射线管和Pixcel检测系统的Panalytical Xpert Pro衍射仪进行。等温样品在透射模式下置于低密度聚乙烯膜之间进行分析。使用默认的XRPD程序(范围3-40°2θ，步长0.013°，计数时间22秒，运行时间～5min)以及更长的运行时间(计数时间46秒，运行时间～11min)、(计数时间97秒，运行时间～22min)和(计数时间591秒，运行时间～2小时)。使用HighScore Plus 2.2c软件对XRPD形式进行分类、处理和索引。

差示扫描量热法(DSC)

DSC分析在Perkin Elmer Jade差示扫描量热仪上进行。将精确称量的样品置于卷边铝盘(crimped aluminium pan)中(即封闭但不气密(closed but not gas tight))。每个样品在氮气下以10℃/min的速率加热至最高300℃。使用铟金属作为校准标准。在相变起始点报告温度，精确到0.01度。

热重差热分析(TG/DTA)

热重分析在Mettler Toledo TGA/DSC1 STARe仪器上进行。校准标准为铟和锡。样品置于铝样品盘中，插入TG炉中并精确称量。使热流信号在30℃下稳定1分钟，然后在氮气流中以10℃/分钟的速率加热至300℃。

动态蒸汽吸附(DVS)

动态蒸汽吸附(DVS)使用Hiden Analytical Instruments IGAsorp蒸汽吸附平衡仪进行。将约30mg的样品置于金属丝网蒸汽吸附平衡盘中，装入IGAsorp蒸汽吸附平衡仪，并保持在25℃±0.1℃。样品经历以10％增量从0到90％RH的阶梯曲线，然后以10％增量从90％RH到0％RH脱附。平衡标准设置为99.0％阶梯完成，每个增量最少60分钟且最多5小时。监测吸附循环中的重量变化，以确定样品的吸湿性质。数据收集间隔以秒为单位。

¹H/¹³C核磁共振谱(NMR)

NMR分析在Bruker 500MHz仪器上在甲醇-d₄或DMSO-d₆中进行。仪器参数列在相关的谱图上。

溶解度测量

溶解度通过a)通过等分试样添加估算溶解度，和b)HPLC测量：

a)通过等分试样添加估算溶解度

在环境温度下，将测试溶剂的等分试样加入到精确称量的Q702材料，例如特定的Q702盐，如Q702的羟乙基磺酸盐或盐酸盐的样品(～20mg)中。等分试样体积通常为100-1000μL。通过目视检查确定测试材料的完全溶解。基于提供完全溶解所用的总溶剂量，估算溶解度。

如果在加入最后一份等分试样后仍未发生溶解(通常为溶剂的～50倍体积)，则将样品用Clarity结晶站进行以下温度循环方案的两个循环：

·从20℃以0.5℃/分钟加热到溶剂沸点(或100℃，以较低者为准)的3℃以内。

·以0.2℃/分钟冷却至20℃。

·搅拌速度600rpm。

通过样品小瓶的红外(IR)透射数据，溶解和沉淀事件分别被记录为IR完全透射点和通过IR检测到的浑浊开始点。

样品在环境温度下保持18小时，以最大限度地增加沉淀的可能性。任何可回收的固体均通过XRPD进行分析。Q702材料的溶解度值以范围表示，并四舍五入到最接近的整数。

b)通过HPLC测定平衡溶解度

用于测定在各种溶剂中平衡溶解度的HPLC方法概述如下。Q702的保留时间通常为18.4±0.143min。使用粒径为2.6μm的Phenomenex Kinetex柱。

结果

不同Q702盐在水/水溶液中的溶解度

就溶解度而言，所生成的各种盐在水溶液中表现出以下溶解度值，总结在表1中：

表1：Q702的各种结晶盐的水溶解度

1.结晶盐在去离子水(pH＝6.8)中浆化(slurried)过夜，并测量溶液pH值。

2.结晶盐在去离子水(pH＝6.8)中浆化过夜后，过滤固体，并通过XRPD分析。

3.溶液在过滤后析出，并重新溶解在DMSO和ACN中。沉淀可能是由于形成了溶解性较低的盐形式，例如水合物。

从表1可以看出，羟乙基磺酸盐在水溶液中的溶解度最高，但在实际操作中难以重现这种盐，尤其是难以在适合XRPD分析的规模上重现，更不用说用于制造目的了。酮戊二酸盐和乙基磺酸盐(“乙磺酸盐”)也是如此。磷酸盐、柠檬酸盐、乙基二磺酸盐和草酸盐的水溶解度显著降低，而硫酸盐和对甲苯磺酸盐的水溶解度则是所有盐中最低的。相比之下，盐酸盐示出了1.95mg/mL的溶解度，是迄今为止所有生产的盐中最好的。具体原因尚待阐明。盐酸盐的表现明显优于例如硫酸盐(0.27mg/mL)和溶解度最差的对甲苯磺酸盐(0.026mg/mL)，这是完全出人意料的并且无法通过其他系统预期，例如阿苯达唑，其HCl、硫酸盐和对甲苯磺酸盐的水溶解度值相对类似(Paulekuhn eet al,2013,Pharmazie,volume 68,pages 555-5)。

实施例2

Q702HCl盐的多晶型筛选

基于实施例1中出人意料的发现，本发明人进一步研究了Q702的盐酸盐，以了解是否存在不同的多晶型形式，并确定具有适当性质的稳定形式。为此，进行了结晶实验，并通过XRPD使用其图谱/形式与起始材料进行比较分析了所得固体。为了识别Q702的HCl盐的不同形式，实施了以下筛选方法：

筛选方法

温度循环

在环境温度下向Q702 HCl盐样品(～20mg)中加入测试溶剂(1mL)，并使用Clarity结晶站进行以下温度循环方案的两个循环：

-从20℃以1℃/min加热至50-80℃(根据溶剂的沸点而定)

-以1℃/min冷却至20℃

-搅拌速度-600rpm

缓慢蒸发

在每种溶剂中制备Q702 HCl盐的溶液，并通过0.2μm PTFE过滤器进行过滤。将过滤后的溶液置于通风橱中，在环境温度下在穿孔铝箔覆盖的小瓶中蒸发。将所得的固体通过XRPD进行分析。

浆料实验

向给定的溶剂中加入足够的Q702 HCL盐(结晶和/或无定形)，直到在所需温度(5℃、20℃、40℃或50℃)仍有未溶解的固体残留。密封小瓶并将浆料保持在选定的温度下，并用磁力搅拌器搅拌5-8天。通过离心分离固体并在空气中干燥后，进行XRPD分析。

蒸汽扩散

将Q702 HCl盐的溶液通过0.2μm PTFE过滤器过滤到干净的小瓶中。将小瓶未密封地置在含有反溶剂等分试样的更大的小瓶中。将该更大的小瓶密封，并在环境温度下静置。样品未形成固体，因此在通过XRPD分析前需在空气中蒸发。

糊剂的超声波处理(Sonication ofpastes)

将Q702 HCl盐(～20mg)加入到包含50-150μL选定溶剂的小瓶中，以形成糊剂。使用Cole-Parmer 130W超声处理器的脉冲程序以70％强度进行超声波处理。若固体在环境温度下溶解，则样品应保持不加盖以便蒸发。从这些实验中回收的湿糊剂通过XRPD进行分析。

蒸汽应力

将约20mg(结晶和/或无定形)加入到小瓶中，并将其未密封地放置在含有1mL选定溶剂的更大密封容器内。经过7-8天后，将样品取出并通过XRPD进行分析。

使用结晶材料的湿度应力

将约25mg Q702 HCl盐加入到四个单独的小瓶中，并将其未密封地放置在以下相对湿度室(具有由过饱和盐溶液控制的相对湿度条件的密封柜)中8天，随后通过XRPD分析：

-室1–23％相对湿度

-室2–59％相对湿度

-室3–75％相对湿度

-室4–98％相对湿度

使用无定形材料的湿度应力

将约20mg无定形Q702 HCl盐加入到两个单独的小瓶中，并将其未密封地放置在以下相对湿度室(具有由过饱和盐溶液控制的相对湿度条件的密封柜)中6天，随后通过XRPD分析：

-室1–59％相对湿度

-室2–75％相对湿度，40℃

热应力

将约20mg无定形Q702 HCl盐加入到小瓶中，用氮气冲洗后，密封并放置在50℃的加热块中7天，随后进行分析。

压缩

将Q702 HCl盐(50mg)加入到KBr压片模具中，并使用液压机在～740MPa的压力下压制过夜。将得到的固体圆盘从压机中取出，并立即进行通过XRPD进行分析。

研磨

将约50mg Q702 HCl盐加入到带有玛瑙研磨球的研磨室中。使用Retsch MM200混合研磨机，以25Hz的频率研磨3×2分钟。期间定期停止研磨，并刮下附着在研磨室内的粉末。将得到的研磨材料使用XRPD进行分析。

脱溶剂实验

将样品置于热板上加热至～100-116℃，并在氮气气流下保持20-40min。样品冷却至环境温度后立即通过XRPD进行分析。

产生的盐的分析技术

为了不同形式的分析，使用了多种分析技术，包括X射线粉末衍射(XRPD)、差示扫描量热法(DSC)、热重差热分析(TG/DTA)、¹H/¹³C核磁共振谱(NMR)、动态蒸汽吸附(DVS)、通过等分试样添加估算溶解度和通过HPLC测量平衡溶解度等方法，所有方法如实施例1中所述。

此外，还使用了以下额外的分析技术：

用于水分含量的容量卡尔费休(KF)分析

使用Mettler Toledo V30 KF滴定仪进行容量KF分析。通过注射器将经称量的溶剂加入KF池中。搅拌溶液后自动滴定，对照标准KF试剂滴定剂测定样品的水分含量。

结果

1.Q702HCl盐在不同溶剂中的溶解度

对于在不同溶剂中的溶解度，通过等分试样添加法估算了Q702 HCl盐在9种溶剂系统中的溶解度。环境温度下，Q702 HCl盐在四种溶剂中具有>20mg/mL的溶解度。所得的溶解度数据如表2所示。根据这些数据和溶解度筛选结果，将溶剂分为下表中概述的三组，以定义筛选实验的范围。

表2：Q702 HCl盐在20℃时的溶解度估算值

表3：按类别分组的溶剂系统

2.多晶型筛选

本发明人尝试在广泛且多样的成核条件下生成固体，设计为模拟开发和配制期间使用的工艺条件和溶剂。

通过XRPD分析来自结晶实验的所有固体，并将所得图谱/形式与起始材料表现出的图谱/形式进行比较。新型XRPD图谱/形式按照发现顺序分配了字母描述符(形式B、形式C等)。当有足够的材料可用时，对具有新型XRPD图谱/形式的固体进行进一步分析(例如NMR或TGA)，以允许将新型图谱/形式暂时指定为多晶型物、溶剂化物、水合物、降解物或其混合物。

无定形材料的生成

该实验计划的关键目标是获得用于筛选的无定形材料，因为本发明人相信此类固体没有“记忆”并且随后的压力可以最大限度地提高发现新晶体形式的机会。如果无定形材料在环境温度下非常不稳定，则可以使用无序(结晶度差)材料代替。

通过冷冻干燥分离无定形材料。将Q702游离碱材料(7.5g批次)在具有0.5M HCl的乙腈(ACN)：水的50：50混合物中制备溶液，然后在液氮中冷冻并在真空下干燥。获得白色材料，XRPD显示其为无定形(图2)。该材料的¹H NMR谱图(数据未示出)符合分子结构并且未检测到溶剂。

基于溶剂的筛选技术

基于溶剂的实验在玻璃小瓶中以约20mg的规模进行。所采用的方法已在上文进一步详细描述。本发明人相信，以这种方式改变成核条件可以最大限度地提高发现新形式的机会以及这些形式在典型加工条件下出现的频率。不同的实验产生了不同的图谱/形式，根据XRPD获得的分析，将其分为18种不同的形式A-R。

总计，在本研究期间获得了18种独特的结晶固体(总结于表4中)并基于图1a-1c所示的XRPD图谱/形式标记为形式A-R。将Q702游离碱在具有0.5M HCl的ACN：水中冷冻干燥也可生成无定形材料。

表4：发明人获得的物理形式的总结

更具体而言，在生成这些不同形式时，采用了以下筛选技术：

温度循环

如上进一步概述，对样品进行温度循环程序，结果示于表5中。获得了指定为形式F、G和H的三种新型固体。HCl形式F从EtOAc中分离，形式G从丙酮中分离，形式H作为混合物从ACN中分离。

表5：温度循环实验筛选结果

在小瓶中蒸发

如上进一步所述，进行Q702 HCl盐溶液的缓慢蒸发。结果示于表6中。获得了指定为形式E和形式G的两种新型固体。形式E使用EtOH和MeOH两次分离，而在7.9和8.9°2θ处具有额外峰的形式G使用丙酮分离。无定形材料从DMSO获得，而无定形和HCl形式C材料的混合物从DCM获得。

对于在环境温度下不产生任何固体材料的蒸汽扩散实验，在空气中蒸发几天(见表7)。获得了命名为形式L和形式P的两种新型固体。无序形式L从在EtOH中使用MTBE作为反溶剂的实验分离，而形式P从在DMSO中使用MTBE作为反溶剂的实验分离。

对于40℃不产生任何固体材料下的蒸汽扩散实验，将其在空气中蒸发几天(见表“8”)。使用水作为反溶剂在EtOH中生成形式B材料，其在9.8°2θ处减去一个峰。一种称为形式O的新型固体使用水作为反溶剂从DMSO中分离。在MeOH中使用水作为反溶剂的实验提供了在8.0°2θ处具有额外峰的无序形式C。

表6：在小瓶中蒸发的筛选结果

表7：在环境温度下的蒸汽扩散实验的蒸发结果

表8：在40℃下的蒸汽扩散实验的蒸发结果

在5℃下的浆料实验

将无定形Q702 HCl盐在各种溶剂中的悬浮液在5℃下浆化7-8天，然后分离并且通过XRPD进行分析(见表9)。在MTBE中和在DCM：庚烷的5：45混合物中的两个实验产生了无定形材料。在乙醇：水的5：45混合物、丙酮：水的5：45混合物和THF：水的5：45混合物中进行的另外三个实验得到含有具有额外峰的形式B材料。形式G材料在丙酮中的实验中获得，而形式F在EtOAc、MEK(甲基乙基酮)和iPrOAc(乙酸异丙酯)中三次分离得到。

表9：在5℃下的浆料实验的筛选结果

在20℃下的浆料实验

将Q702游离碱材料在不同浓度的酸储备溶液中的悬浮液在20℃下搅拌5天，然后通过XRPD进行分离和分析(见表10)。

表10：在20℃下的浆料实验的筛选结果

FB：游离碱

在40℃和50℃下的浆料实验

将Q702 HCl盐在各种溶剂中的悬浮液在50℃下搅拌6天，然后分离并且通过XRPD进行分析(见表11)。一种命名为形式K的新型固体从DMSO：MTBE的1：3混合物中分离得到。形式A从EtOH：水的1：3混合物和MeOH：水的1：3混合物的两个实验中分离得到。形式C从MTBE和MIBK中的两个实验中获得，而形式H从ACN中分离。一个在40℃的丙酮中的实验获得了无序形式G材料。

表11：在40℃和50℃下的浆料实验的筛选结果

蒸汽扩散

如上所述进行蒸汽扩散实验。然而，这两个实验都没有产生任何固体材料。

在40℃下的蒸汽扩散

如上所述进行在40℃下的蒸汽扩散实验。然而，所有实验均未产生任何固体材料。

超声

在各种溶剂中制备无定形Q702 HCl盐的悬浮液并进行如上概述的脉冲程序。样品储存在5℃下(见表12)，然后分离并且通过XRPD进行分析。对于在丙酮：MTBE的20：80混合物和在DCM中两个实验，样品保持为无定形材料。无序形式C、F和H从iPrOAc、ACN和EtOAc中分离。在THF中的一个实验获得了形式C材料。获得了命名为形式I和形式M的两种新型固体。具有无定形成分的形式I从乙醇中分离，而形式M从二噁烷中分离。

表12：超声实验的筛选结果

^1.本实验在冷藏前已形成溶液。然后通过XRPD分析形成的固体。

固态筛选技术

基于非溶剂的(固态)筛选方法包括球磨、压缩热、蒸汽和湿度应力(进一步参见上文)。这些技术模拟了大规模处理，例如在热反应器壁上或在干燥和压片操作过程中可能遇到的条件。本发明人相信，以这种方式改变成核条件可最大限度地提高发现新形式的机会以及这些形式在典型加工条件下出现的频率。

压缩

使用模压机来模拟压片过程中所经历的单轴应力，该应力最高可达300 MPa。减压后很快对样品进行分析，以限制在1 bar压力下发生形态转换的可能性(见表13)。衍射图(未示出)显示样品由无序的HCl C材料组成。

表13：压缩实验的筛选结果

研磨

使用球磨机来模拟在干混和湿法制粒等配制步骤过程中所经历的磨碎效果。对Q702HCl盐的样品进行研磨。研磨完成后很快对样品进行分析，以限制形式进一步变化的可能性(见表14)。从所得XRPD(未示出)可以清楚地看出，当干磨时，HCl形式C材料变得更加无序。

表14：研磨实验的筛选结果

去溶剂化

溶剂化或水合化合物的去溶剂化是筛选新型固体形式的有效方法。将样品在氮气流下加热至所需温度20-40分钟。结果如下表所示。Q702 HCl形式C材料保持为形式C，Q702HCl形式A+C保持为形式A+C。

表15：去溶剂化实验的结果

热应力

将无定形Q702 HCl盐在密封小瓶中在氮气下于50℃下受热应力7天，并通过XRPD进行分析。表16中所示的样品保持无定形。

表16：热应力实验的筛选结果

蒸汽应力

将冷冻干燥产生的X射线无定形材料暴露在溶剂蒸汽饱和的空气中7-8天，然后通过XRPD进行分析。由于无定形材料失去了长程有序性，因此处于高能状态。暴露于蒸汽中使固体塑化，允许有限的分子活动性，因此是产生亚稳态溶剂化物和水合物的有用方法。

对于使用无定形材料进行的蒸汽应力实验，两个实验获得了无序形式C材料。在EtOH：EtOAc的20：80混合物中和在EtOAc中的产生了形式F材料。形式G材料从MEK中分离，而无序形式G材料从THF中分离。在EtOH：MTBE的50：50混合物中的一个实验产生了无序形式I+A材料。形式L材料从MeOH：THF的50：50混合物中获得。命名为形式N的一种新型固体从DMSO：水的20：80混合物中分离。结果如表17所示。

蒸汽应力实验还在环境温度下使用Q702 HCl盐进行。使用Q702游离碱材料进行了一个实验。结果示于表18中。形式I材料从乙醇中分离，而无序形式H材料从ACN中分离。在THF：水的13：1混合物中的一个实验产生了无序的形式C材料，而在MTBE中的一项实验则产生了具有无定形成分的形式C。使用Q702游离碱材料和在水中的0.5MHCl进行一个实验。使用MeOH作为溶剂并产生了形式L材料。

表17：使用无定形Q702材料的蒸汽应力结果

表18：使用结晶Q702材料的蒸汽应力实验的筛选结果

湿度应力

将冷冻干燥产生的X射线无定形材料暴露于各种受控湿度条件下6天，然后通过XRPD进行分析。结果示于表19中。两个样品均保持为无定形材料。在40℃/75％RH下，观察到样品的重量增加了6.13％(见表20)，表明该材料具有吸湿性。

湿度应力实验还使用晶体Q702 HCl形式C材料进行，并受应力8天。结果示于表21中。所有样品保持为Q702 HCl形式C材料。对于在98％RH应力下的样品，观察到2.99％的重量增加(见表22)。对于在75％RH应力下的样品，观察到11.05％的重量损失，而在4℃/75％RH下，观察到1.96％的重量损失。

表19：使用无定形材料进行湿度实验的结果

表20：在40℃/75％RH下使用无定形材料受应力的样品重量变化

表21：使用HCl形式C材料的湿度实验结果

表22：使用HCl形式C材料受应力的样品重量变化

多晶型筛选的结论

使用基于溶剂和非溶剂的技术进行了约80次实验。在本研究中观察到18种独特的结晶固体(见表4)并标记为形式A-R。将Q702游离碱在具有0.5M HCl的ACN：水中冷冻干燥也会生成无定形材料。

综合运用本文描述的方法，使用表23中总结的不同技术，识别并制备了18种不同的图谱/形式：

表23：Q702的不同形式的HCl盐的制备

Evap＝蒸发，VS＝蒸汽应力

Q702 HCl盐的无定形形式代表了各种其他结晶形式的起点。然而，结果是，除了形式A、B、C、D、E、Q和R之外，本实施例中产生的所有其他晶型都是溶剂化物。此外，非溶剂化物形式B、D、E、Q和R具有低结晶度；因此，两种最有希望的结晶图谱/形式是非溶剂化形式A和形式C。

实施例3

Q702HCl盐的形式A和C的比较

Q702 HCl盐形式C的制备

具有形式C的样品的制备

将Q702游离碱(约500 mg)在玻璃小瓶中称重。加入不含抑制剂的THF(9.38 mL)和0.5 M HCl(1.883 mL)。将样品在氮气下蒸发至干燥。一旦开始结晶，就用HCl形式C材料作为晶种接种。将材料放置在空气中干燥。干燥后，通过XRPD进行分析：形式B+C。

将丙酮：水的20：80混合物(3333μL)加入到样品中，并在40℃下搅拌两天。将样品离心3 min并倒出液体。将样品放置在空气中干燥，然后通过XRPD进行分析：HClC材料。

Q702HCl盐形式C材料的表征

Q702 HCl盐C型材料通过多种分析技术进行表征，包括XRPD、TGA、DSC、¹HNMR、¹³CNMR、PLM、DVS、FT-IR、UV-vis、IDR和CHN元素分析。XRPD数据表明，该材料是晶体但无序，并且即使在尝试提高结晶度后仍含有一些无定形成分(见图3)。

通过使用开放式和/或封闭式盘配置的TGA对不同批次的形式C材料进行了分析，以更好地了解材料的性质。

使用开放式的盘盖，样品在TG分析期间在30-167℃范围内重量损失了8％(见图4)，随后在167-257℃范围内重量进一步损失了8％。总重量损失相当于6摩尔当量的水。1：1盐的HCl含量为6.4％，因此重量损失远大于HCl的损失。这表明HCl盐形式C材料很有可能是水合的。另一个样品在30-166℃范围内重量损失了5.7％，在167-236℃范围内重量进一步损失了6.1％。总重量损失相当于4摩尔当量的水。重量损失的差异可能是由于样品未完全干燥。

由于盘盖减慢了汽化，因此在封闭式盘配置中观察到的重量损失要小得多。一个样品(见图5)显示，在74-175℃范围内重量损失了4.8％，在178-279℃范围内重量进一步损失了6.3％。另一个样品在TG分析期间显示，在30-90℃范围内重量损失了3％，随后在90-120℃范围内重量损失了22％，很有可能是由于水分损失(高达3摩尔当量)。然而，这可能是由于样品是湿的。

通过DVS分析评估吸湿性(见图7)。等温图显示40-80％RH之间的总重量增加为0.7％w/w，根据欧洲药典分类，这表明该样品具有轻微吸湿性。DVS后样品的XRPD分析(数据未示出)与HCl形式C的XRPD分析相符，并且未检测到样品中的物理变化。

HCl形式C在40℃/75％相对湿度下受应力15天。XRPD分析显示其仍为HCl盐形式C。¹HNMR谱图表明样品符合分子结构并且未检测到溶剂(数据未示出)。

HCl形式C在100℃下在氮气流下在热板中去溶剂化。XRPD分析显示样品仍为HCl C材料(数据未示出)。

Q702 HCl盐的形式A的制备

Q702HCl盐形式A材料

形式A材料由表24中列出的几个不同实验产生，但两个样品是还含有形式C材料的混合物。通过XRPD分析，形式A材料是晶体(见图8)。

表24：形式A的生产

使用封闭式盘对HCl形式A进行TG分析显示，从60℃开始，重量持续逐渐损失(见图9)。较大的吸热很有可能是由于熔化，起始温度为139℃。在69-171℃范围内记录的重量损失为4.2％，相当于1.4摩尔当量的水。在171-279℃范围内记录的第二次重量损失为7.3％。

使用开放式盘进行对HCl形式A的TG/DSC分析显示，在30-145℃范围内重量损失了6.8％，相当于2摩尔当量水(见图10)。在151-239℃范围内记录的第二次重量损失为6.9％，这很有可能是由于熔化。观察到起始温度为142℃。

形式A材料的¹H NMR谱图表明样品符合分子结构(见图11)。未检测到溶剂。与Q702游离碱的谱图相比，观察到峰移动，这表明发生了盐形成。

通过DVS分析评估吸湿性(见图12和13)。等温图显示40-80％RH之间的总重量增加为0.5％w/w，根据欧洲药典分类，这表明该样品具有轻微吸湿性。DVS后样品的XRPD分析(见图14)与HCl形式A的XRPD分析相符，并且未检测到样品中的物理变化。

形式A在40℃/75％下受应力15天。应力后XRPD分析显示材料保持为形式A(见图15)。形式A材料的¹H NMR谱图表明样品符合分子结构(见图16)。未检测到溶剂。因此，结果表明，这种形式在这些条件下是绝对稳定的。

在所有研究的形式中，形式A具有最佳的稳定性，并且在更大的规模上也可以重复生产：

Q702HCl盐的小规模制备

将10.0g Q702游离碱溶解在丙酮中，并以如下表25所示的指定量加入HCl溶液，以制备Q702在丙酮和HCl/水中的浆料。过滤、干燥后，晶体图谱/形式变为形式A。

表25：小规模制备Q702 HCl盐

Q702HCl盐的中等规模制备

将72g Q702游离碱溶解在丙酮中，并以表26中所示的指定量加入HCl溶液，以制备Q702在丙酮和HCl/水中的浆料。湿滤饼的XRPD表明获得了形式C。过滤和干燥后，以形式C获得69.3g的Q702 HCl盐，其HPLC纯度为99.8％，测定产率为88.3％。

表26：中等规模制备Q702 HCl盐

因此，似乎存在与规模相关的因素或其他因素偏向一种形式而不是另一种形式。因此，发明人推测，在结晶过程中可能存在晶型的变化，或者两种晶型之间存在某种相互转化，这可能取决于各种因素，例如HCl溶液的加入速率等。为了进一步测试这一点，发明人进行了如下概述的在不同条件下的各种结晶实验。

实验A：追踪结晶过程中晶型的变化

在结晶实验中使用五批各5g的Q702游离碱来制备相应的HCl盐，在结晶实验中跟踪各个晶型的形成和/或变化。为此，aq.HCl的加入时间延长至6h。在加入aq.HCl的过程中，产物Q702 HCl盐会以某种形式沉淀，这通过XRPD进行检查。在结晶过程中，在各种实验中，将形式A接种到反应中，以观察形式A的这种临时加入/接种是否会对最终形式产生任何影响。不同的实验、反应条件和结果总结于下表27中。

表27：有和没有晶种的结晶实验

实验1-5各个阶段的XRPD谱图如图17-21所示。图17-20中所示的迹线显示了表27的各实验1-4的不同阶段，以及形式A的参考XRPD谱图的附加参考迹线(标记为“PS02379-i29-N-P.brml”)作为各图17-20中的最下方迹线。在图21中，形式C的参考XRPD谱图的相应参考迹线(标记为“HCl Pat C.txt”)也显示为图21中的最下方迹线。结果表明，在这个规模下，在指定的反应条件下，形式A似乎在实验1-4中占优势。在实验5中，形式C占优势并且似乎在反应的早期就存在。

实验B：研究形式A和形式C的相互转化

为了测试不同晶型之间是否存在某种相互转化，通过将50mg形式A和50mg形式C在母液(形式A母液中的批次1；形式C母液中的批次2)中搅拌来研究晶型的相互转化。两者都给出了目标形式A，并且可以得出结论，在这些条件下(PS03606-51-N-1-P/实验6、PS03606-51-N-2-P/实验7)，形式A更稳定。

此外，进行了另外两个实验来评估形式C是否可以转化为形式A：在第一个实验中，通过将形式C溶解在丙酮/H₂O＝1:1(14V)中来进行重结晶，并加入水(21V)以在20-25℃下沉淀固体(PS03606-52-N-1-P/实验8)。在第二个实验中，将形式C在40℃下制备为丙酮/H₂O＝2:8(10V)中的热浆料(PS03606-52-N-2-P/实验9)。两个实验的XRPD表明两个实验的结果均是目标形式A。(图22)

在图22中，形式A的参考XRPD谱图的相应参考迹线(标记为“PS02379-129-N-P.brml”)也显示为该图22中的最下方迹线。

对Q702 HCl盐的形式A进行了24个月的长期稳定性测试。XRPD结果表明形式A在24个月内保持稳定(表28)。

表28：Q702 HCl盐的形式A的稳定性结果

实施例4

药代动力学研究

在该实施例中，在对雄性SD大鼠口服施用Q702的HCl盐的形式A及其游离碱(FB)后，使用血浆中的形式A和游离碱进行药代动力学研究。

准确称取适量的Q702 HCl的形式A或游离碱，并与适量的载体(水)混合，得到澄清溶液或均匀的悬浮液。对雄性SD大鼠给药30mg/kg体重的标称剂量。给药后，在0h、0.083h、0.25h、0.5h、1h、2h、4h、8h、12h和24h时间点中的每个时间点采集0.2mL血液。对于这种血液采集，从每只动物的颈静脉或其他合适部位采集血液到预冷的塑料微量离心管中，其中含有5μL的1000IU肝素钠作为抗凝剂。通过在约4℃、3200g下离心10分钟将血样处理为血浆。收集血浆并转移至预先标记的聚丙烯管中，在干冰上快速冷冻并保存在-60℃以下的温度，直到进行LC-MS/MS分析。使用具有至少6个非零校准标准的校准曲线进行LC-MS/MS方法分析。

使用Phoenix WinNonlin 6.3软件程序通过非房室方法绘制和分析血浆浓度与时间的关系。根据给药途径计算相关的药代动力学参数，例如对于口服施用，计算了C_max、T_max、T_1/2和AUC_(0-t)(如表29和图25所示)。

表29：药代动力学数据

从平均AUC值来看，Q702 HCl盐形式A的血浆暴露水平似乎比游离碱的血浆暴露水平高33％。

使用相对生物利用度，其计算如下：

相对生物利用度(％)＝(AUC_test/AUC_ref)×(dose_ref/dose_test)×100

其中test＝HCl盐的形式A，ref＝Q702的游离碱

结果表明，Q702 HCl盐形式A的相对生物利用度是游离碱生物利用度的144.2％。生物利用度的巨大差异是完全出人意料的。

Claims

1.N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺盐酸盐化合物，

其具有以下化学式

其中，优选地，所述化合物具有来自所述第一组峰中的至少两个峰、至少三个峰、至少四个峰、至少五个峰、至少六个峰或更多峰(N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺盐酸盐的“形式A”)。

2.根据权利要求1所述的化合物，其在通过Cu-K Kα射线(Cu-Kα)辐射获得的X射线粉末衍射(XRPD)谱图中具有来自第二组峰中的至少两个峰，所述第二组峰为：

其中，优选地，所述化合物具有来自所述第二组峰中的至少三个峰或至少四个峰(N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺盐酸盐的“形式A”)。

3.根据权利要求1-2中任一项所述的化合物，其中所述化合物具有来自所述第一组峰和/或所述第二组峰中的所有峰(N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺盐酸盐的“形式A”)。

4.根据前述任一项权利要求所述的化合物，其通过Cu-Kα射线(Cu-Kα)辐射获得的X射线粉末衍射(XRPD)谱图如下所示(N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺盐酸盐的“形式A”)：

5.根据前述任一项权利要求所述的化合物，其具有显示起始温度在115℃至150℃的范围内、优选在135℃至148℃的范围内、更优选在135℃至146℃的范围内、甚至更优选在140℃至146℃的范围内、甚至更优选在144℃至146℃的范围内、甚至更优选在约145℃处、最优选在约145.8℃处的吸热的差示扫描量热法(DSC)热图。

6.根据权利要求5所述的化合物，其具有如下所示的差示扫描量热法(DSC)热图：

7.根据前述任一项权利要求所述的化合物，其通过包括以下步骤的方法生产：

-加入约一半的所述规定量的盐酸；

-加入晶种量的如权利要求1至4中任一项所定义的N-(5-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)吡啶-2-基)-1-丙基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-3-甲酰胺盐酸盐的形式A，以促进形式A的形成和沉淀；

-在30min至5h内加入另一半的所述规定量的盐酸；

-搅拌30min至2h、优选30min至1h的规定时间；

8.一种制造根据权利要求1至7中任一项所定义的化合物的方法，所述方法包括以下步骤：

-加入约一半的所述规定量的盐酸；

-在30min至5h内加入另一半的所述规定量的盐酸；

-搅拌30min至2h、优选30min至1h的规定时间；

9.一种药物组合物，其包含至少一种根据权利要求1-7中任一项所述的化合物，以及至少一种药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。

10.根据权利要求9所述的药物组合物，其还包括至少一种其他药学活性成分。

11.根据权利要求1-7中任一项所述的化合物或根据权利要求9-10中任一项所述的药物组合物，用于治疗选自过度增生性疾病、炎症性疾病和神经退行性疾病中的疾病。

12.根据权利要求11所述的用途的化合物或药物组合物，其中所述过度增生性疾病为癌症，优选为选自腺癌、听神经瘤、急性淋巴细胞白血病、急性髓系白血病、肾上腺皮质癌、艾滋病相关癌症、艾滋病相关淋巴瘤、肛门癌、阑尾癌、星形细胞瘤、非典型畸胎样/横纹肌样瘤、壶腹癌、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、骨肉瘤和骨恶性纤维组织细胞瘤、脑干胶质瘤、脑肿瘤、中枢神经系统非典型畸胎样/横纹肌样瘤、颅咽管瘤、室管膜母细胞瘤、室管膜瘤、髓母细胞瘤、髓上皮瘤、中等分化程度的松果体实质肿瘤、幕上原始神经外胚层肿瘤和松果体母细胞瘤、脑和脊髓肿瘤、乳腺癌、脐尿管肿瘤、伯基特淋巴瘤、类癌瘤、脉络膜黑色素瘤、胃肠道癌、中枢神经系统淋巴瘤、宫颈癌、子宫体癌、脊索瘤、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓系白血病、慢性骨髓增生性疾病、结肠癌、结直肠癌、皮肤T细胞淋巴瘤、硬纤维瘤、蕈样肉芽肿、子宫内膜癌、食管癌、嗅神经母细胞瘤、尤文氏肉瘤肿瘤家族、颅外生殖细胞肿瘤、性腺外生殖细胞肿瘤、肝外胆管癌、耳肿瘤、眼内黑色素瘤、视网膜母细胞瘤、胆囊癌、胃癌、胃肠道类癌肿瘤、胃肠道间质肿瘤、胃肠道间质细胞瘤、妇科肿瘤、卵巢生殖细胞肿瘤、妊娠滋养细胞肿瘤、胶质瘤、胆囊癌、毛细胞白血病、头颈癌、心脏癌、肝细胞癌、组织细胞增生症、下咽癌、血液系统肿瘤、胰岛细胞瘤(内分泌胰腺瘤)、肾细胞癌、肾癌、朗格汉斯细胞组织细胞增生症、喉癌、白血病、唇和口腔癌、肝癌、肺癌、非小细胞肺癌、小肠肿瘤、小细胞肺癌、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、原发性中枢神经系统淋巴瘤、巨球蛋白血症、骨和骨肉瘤的恶性纤维组织细胞瘤、黑色素瘤、梅克尔细胞癌、间皮瘤、隐匿原发灶的转移性鳞状细胞颈癌、脊髓瘤、多发性内分泌肿瘤综合征、骨髓增生异常综合征、骨髓增生异常/骨髓增生性肿瘤、髓系白血病、多发性骨髓瘤、骨髓增生性疾病、鼻腔和鼻窦癌、鼻咽癌、神经母细胞瘤、口腔癌、口咽癌、骨肉瘤和骨恶性纤维组织细胞瘤、卵巢癌、卵巢上皮癌、卵巢低恶性潜能肿瘤、少突胶质瘤、浆细胞瘤、胰腺癌、乳头状瘤病、甲状旁腺癌、阴茎癌、咽癌、垂体瘤、浆细胞肿瘤/多发性骨髓瘤、胸膜肺母细胞瘤、前列腺癌、直肠癌、肾细胞癌、移行细胞癌、呼吸道癌、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、肉瘤、皮肤睾丸癌、尤文氏肉瘤、卡波西肉瘤、子宫肉瘤、非黑色素瘤皮肤癌、黑色素瘤皮肤癌、皮肤癌、小肠癌、软组织肉瘤、鳞状细胞癌、鳞状细胞颈癌、胃癌、软组织肿瘤、睾丸癌、喉癌、胸腺瘤和胸腺癌、甲状腺癌、肾盂和输尿管移行细胞癌、滋养细胞肿瘤、睾丸癌、妊娠期癌症、泌尿系统肿瘤、输尿管和肾盂癌、尿道癌、尿路上皮癌、子宫癌、阴道癌、外阴癌、华氏巨球蛋白血症和肾母细胞瘤、导致体内潜在腔隙的积液、胸腔积液、心包积液、腹腔积液又称腹水(肿)、巨细胞瘤(GCT)、骨GCT、色素沉着的绒毛结节性滑膜炎(PVNS)、腱鞘巨细胞瘤(TGCT)、腱鞘的TGCT(TGCT-TS)中的癌症。

13.根据权利要求11所述的用途的化合物或药物组合物，其中所述炎症性疾病为选自骨关节炎、炎症性肠综合征、移植排斥反应、系统性红斑狼疮、溃疡性结肠炎、克罗恩病、慢性阻塞性肺疾病、肺气肿、川崎病、噬血细胞综合征(巨噬细胞活化综合征)、多中心网状组织细胞增生症、动脉粥样硬化、原发性进展型多发性硬化症、I型糖尿病、II型糖尿病、胰岛素抵抗、高血糖、肥胖、脂解、嗜酸性粒细胞增多症、骨质疏松症、骨折风险增加、派杰氏病、高钙血症、感染介导的骨溶解(例如骨髓炎)、假体周围或磨损碎片介导的骨溶解、子宫内膜异位症、炎症性疼痛、慢性疼痛和骨痛中的疾病。

14.根据权利要求11所述的用途的化合物或药物组合物，其中所述神经退行性疾病为选自宾斯旺格型痴呆、前脑畸形、小头畸形、脑瘫、先天性脑积水、腹水、进行性核上性麻痹、青光眼、威尔逊病、阿尔茨海默病及其他痴呆症、帕金森病(PD)及与PD相关的疾病、多发性脑梗死性痴呆、额颞叶痴呆、假性痴呆、朊蛋白病、运动神经元疾病、亨廷顿病、脊髓小脑性共济失调和脊髓性肌萎缩中的疾病。

15.根据权利要求11-14中任一项所述的用途的化合物或药物组合物，其中所述用途是与另一种药学活性药物或疗法，特别是放射疗法、化学治疗剂、靶向药物和免疫检查点抑制剂药物联合使用。

16.一种治疗选自过度增生性疾病、炎症性疾病和/或神经退行性疾病中的疾病的方法，所述方法包括向有需要的患者施用根据权利要求1-7中任一项的化合物或根据权利要求9-10中任一项的药物组合物。