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CN118804915A - Btk抑制剂 - Google Patents

Btk抑制剂 Download PDF

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CN118804915A
CN118804915A CN202280084096.7A CN202280084096A CN118804915A CN 118804915 A CN118804915 A CN 118804915A CN 202280084096 A CN202280084096 A CN 202280084096A CN 118804915 A CN118804915 A CN 118804915A
Authority
CN
China
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methyl
alkyl
membered monocyclic
pharmaceutically acceptable
acceptable salt
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202280084096.7A
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English (en)
Inventor
B·T·霍普金斯
B·马
J·舒尔茨
M·内瓦莱嫩
T·陈
R·普林斯
H·G·范德韦尔
I·马克斯
S·斯西亚博拉
Z·尤萨夫
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bojian Massachusetts Co ltd
Original Assignee
Bojian Massachusetts Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
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Publication date
Application filed by Bojian Massachusetts Co ltd filed Critical Bojian Massachusetts Co ltd
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Pending legal-status Critical Current

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Abstract

本文提供了式(I)化合物：

Description

BTK抑制剂
相关申请
本申请根据美国专利法35第119条(e)款要求2021年11月10日提交的美国临时申请号63/277,879的提交日的权益，所述申请的全部内容以引用方式并入本文。
技术领域
提供了某些抑制布鲁顿酪氨酸激酶(Bruton’s tyrosine kinase，Btk)的剂，以及制造和使用此类剂的方法。
背景技术
蛋白激酶是一个由超过500种蛋白质组成的大型多基因家族，其在肿瘤学、神经学和免疫学方面在多种人类疾病的发展和治疗中发挥关键作用。
Tec激酶是非受体酪氨酸激酶，其由五种成员(Tec(在肝细胞癌中表达的酪氨酸激酶)、Btk(布鲁顿酪氨酸激酶)、Itk(白细胞介素2(IL-2)诱导型T细胞激酶；也称为Emt或Tsk)、Rlk(静息淋巴细胞激酶；也称为Txk)和Bmx(X染色体上的骨髓酪氨酸激酶基因；也称为Etk))组成，并且主要在造血细胞中表达，尽管在内皮细胞和肝细胞中也检测到了Bmx和Tec的表达。Tec激酶(Itk、Rlk和Tec)在T细胞中表达，并且都在T细胞受体(TCR)下游被激活。Btk是B细胞受体(BCR)信号传导的下游介质，其参与调节B细胞激活、增殖和分化。更具体地，Btk含有结合磷脂酰肌醇(3,4,5)-三磷酸(PIP3)的PH结构域。PIP3结合诱导Btk磷酸化磷脂酶C(PLCy)，进而水解PIP2以产生两种第二信使，即肌醇三磷酸(IP3)和甘油二酯(DAG)，它们会激活蛋白激酶PKC，然后诱导另外的B细胞信号传导。使Btk酶活性丧失的突变会导致XLA综合征(X连锁无丙种球蛋白血症(X-linked agammaglobulinemia))，这是一种原发性免疫缺陷。鉴于Tec激酶在B细胞和T细胞信号传导中发挥的关键作用，Tec激酶是自身免疫性病症的感兴趣的靶标。
鉴于Btk在B细胞信号传导中发挥重要作用，本领域非常需要有效的Btk抑制剂。
发明内容
本公开的一个方面是式(I)化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
X0是N，X1是C，X2是N，X4是N并且X5是CH；X0是CR0，X1是C，X2是N，X4是N并且X5是CH；X0是CR0，X1是N，X2是C，X4是N并且X5是CH；X0是CR0，X1是N，X2是C，X4是CH并且X5是CH；X0是CR0，X1是C，X2是N，X4是CH并且X5是CH；或X0是CH，X1是N，X2是C，X4是CH并且X5是N；
X3是H、-OR5、-N(R5)2、5至6元杂芳基或4至7元单环杂环基，其中所述5至6元杂芳基和所述4至7元单环杂环基任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6个)R50取代；
R0是H、卤基、甲基、卤甲基、环丙基或CN；
环A是苯基、5或6元杂芳基或5至10元单环或双环杂环基；
R1选自-N(R1a)2、-OR1a、苯基、3至7元单环碳环基、3至7元单环杂环基、5至6元杂芳基、7至10元双环碳环基、7至10元双环杂环基和8至10元双环杂芳基，其中R1表示的苯基、3至7元单环碳环基、3至7元单环杂环基、5至6元杂芳基、7至10元双环碳环基和7至10元双环杂环基各自任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6)R10取代；
R1a每次出现时独立地选自H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、苯基、3至7元碳环基环、3至7元单环杂环基和5至6元杂芳基，其中R1a表示的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、苯基、3至7元碳环基环、3至7元单环杂环基和5至6元杂芳基各自任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6个)R10取代；
R10每次出现时独立地选自卤素、-OR10a、-S(O)2R10a、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基；其中R10表示的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基各自任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6个)R15取代；
R10a是任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6个)卤素取代的C1-6烷基；
R15每次出现时独立地选自卤素、C1-6烷基、C1-6卤烷基、-CN和-OR15a；
R15a是C1-6烷基；
R2是H、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；
或R1和R2与它们的居间原子一起形成环D，所述环D选自3至7元单环杂环基、7至10元双环杂环基和8至10元双环杂芳基，其中环D任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6个)R100取代；
R100每次出现时独立地选自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基、4至6元单环杂环基和卤素；其中R100表示的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基各自任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6个)R150取代；
R150每次出现时独立地选自卤素、-OR150a、3至7元碳环基环和4至7元单环杂环基；
R150a是H或C1-6烷基；
R3选自H、卤素、-C(O)N(R3a)2、-C(O)OR3a、-C(O)R3a、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基，其中R3表示的C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基各自任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6个)选自卤素和羟基的取代基取代；
R3a每次出现时独立地选自H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、苯基、3至7元碳环基环、3至7元单环杂环基或5至6元杂芳基，其中C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、苯基、3至7元碳环基环、3至7元单环杂环基和5至6元杂芳基任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6个)R30取代；
或者同一氮上的两个R3a基团与它们的居间原子一起形成选自3至7元单环杂环基和5至6元杂芳基的环，其中所述环任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6个)R30取代；
R30每次出现时独立地选自卤素、-OR30a、-N(R30a)2、-C(O)N(R30a)、-C(O)2R30a、氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基；
R30a是H或C1-6烷基；
R4每次出现时独立地选自H、卤素、-NO2、-CN、-OR4a、-SR4a、-N(R4a)2、-C(O)R4a、-C(O)OR4a、-S(O)R4a、-S(O)2R4a、-C(O)N(R4a)2、-SO2N(R4a)2、-OC(O)R4a、-N(R4a)C(O)R4a、-N(R4a)C(O)OR4a、-N(R4a)SO2R4a、-OC(O)N(R4a)2、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基，其中C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基各自任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6个)R40取代；
R4a是H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、苯基、3至8元碳环基环、3至7元单环杂环基和5至6元杂芳基，其中R4a表示的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、苯基、3至8元碳环基环、3至7元单环杂环基和5至6元杂芳基各自任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6个)R40取代；
或者同一氮上的两个R4a基团与它们的居间原子一起形成选自3至7元单环杂环基和5至6元杂芳基的环，其中所述环任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6个)R40取代；
R40每次出现时独立地选自卤素、-OR40a、-N(R40a)2、
-C(O)N(R40a)2、-C(O)2R40a、氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基；其中R40表示的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基各自任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6个)R45取代；
R40a是H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基；其中C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基各自任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6个)R45取代；
R45每次出现时独立地选自C1-6烷基、卤素和-OR45a；
R45a是H或C1-6烷基；
或者R3和R4与它们的居间原子一起形成环E，其中环E选自4至7元单环碳环基和4至7元单环杂环基，其中环E任选地被R300取代；
R300每次出现时独立地选自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基、4至6元单环杂环基、卤素、-C(O)R300a、-OR300a和-S(O)2R300a；其中R300表示的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基各自任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6个)R350取代；
R300a选自H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基；其中R300a表示的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基各自任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6个)R350取代；
R350每次出现时独立地选自C1-6烷基、卤素、
-CN、-C(O)R350a、-C(O)N(R350a)2、-N(R350a)2和-OR350a；
R350a每次出现时独立地是H或任选地被一至三个卤素取代的C1-6烷基；
R5是任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6个)独立地选自卤基、C1-6烷氧基和C1-6卤代烷氧基的取代基取代的C1-6烷基；
R50每次出现时独立地选自卤素、-OR50a、-N(R50a)2、-C(O)N(R50a)、-C(O)2R50a、氧代、C1-6烷基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基，其中R50表示的所述C1-6烷基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基各自任选地被一个或多个独立地选自C1-6烷基、CN、卤基和C1-6烷氧基的取代基取代；
R50a是H或C1-6烷基；
n是0、1、2、3或4。
在第二方面，本公开提供了一种药物组合物，其包含至少一种本文所述的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的赋形剂。
在第三方面，本公开提供了治疗受试者的响应于Btk抑制的病症的方法。所述方法包括向受试者施用有效量的至少一种本文所述的化合物或其药学上可接受的盐。本公开还包括本文所述的至少一种化合物或其药学上可接受的盐用于制造用于治疗响应于Btk抑制的病症的药物的用途。还提供了一种本文所述的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗响应于Btk抑制的病症。
其他特征或优势将根据以下
若干实施方案的详细描述，以及还根据所附的权利要求显而易见。
具体实施方式
如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐可具有作为Btk调节剂的活性。特别地，如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐可以是Btk抑制剂。
I.定义
术语“一个(a)”和“一个(an)”并不表示数量限制，而是表示存在至少一个所引用的项目。除非本文另外指明，否则值范围的引用仅旨在充当个别地提及落入所述范围内的每个单独值的速记方法，并且如同本文个别引用地那样将每个单独值并入本说明书中。所有范围的端点都包括在所述范围内并且可独立组合。本文所述的所有方法都可以合适的顺序进行，除非本文另外指出或与上下文明显矛盾。除非另有要求，否则实例或示例性语言(例如，“诸如”)的使用仅旨在更好地说明本发明，而不对本发明的范围施加限制。
添加到化学名称末尾的后缀“基”表示命名的部分在此点处与分子键合。添加到化学名称末尾的后缀“亚基”表示命名的部分在此两点处与分子键合。实例包括亚氮杂环丁烷基、亚吡咯烷基、亚哌啶基、亚氮杂环庚烷基或亚氧氮杂环庚烷基(oxazapanylene)，这表示氮杂环丁烷、吡咯烷、哌啶、氮杂环庚烷或氧氮杂环庚烷在两点处与化合物的其余部分键合。
如本文所用，术语“烷基”是指完全饱和的支链或非支链烃部分。在一些实施方案中，烷基包含1至20个碳原子、1至10个碳原子、1至8个碳原子、1至6个碳原子或1至4个碳原子。在一些实施方案中，烷基包含6至20个碳原子。烷基的代表性实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基或正己基。
“烯基”是指可以是直链或支链的并且具有至少一个碳-碳双键的不饱和烃基团。在一些实施方案中，烯基基团具有2至20个碳原子、2至10个碳原子或2至6个碳原子。烯基基团可含有1、2或3个或更多个碳-碳双键。烯基基团的实例包括乙烯基、正丙烯基、异丙烯基、正丁-2-烯基、正己-3-烯基等。
“炔基”是指可以是直链或支链的并且具有至少一个碳-碳三键的不饱和烃基团。在一些实施方案中，炔基基团具有2至20个碳原子、2至10个碳原子，或2至6个碳原子可以是优选的。炔基基团可含有1、2或3个或更多个碳-碳三键。炔基基团的实例包括乙烯基、正丙炔基、正丁-2-炔基、正己-3-炔基等。
如本文所用，术语“烷氧基”是指通过氧桥附接的完全饱和的支链或非支链烷基部分(即，--O--C1-4烷基，其中C1-4烷基如本文所定义)。烷氧基的代表性实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、2-丙氧基、丁氧基、叔丁氧基等。在一些实施方案中，烷氧基基团具有约1-4个碳，更优选地约1-2个碳。
如本文所用，术语“芳基”定义为包括具有完全缀合的π电子系统的全碳单环或稠环多环(即，共用相邻碳原子对的环)基团。芳基基团在环中可具有6、8、9或10个碳原子。在一些实施方案中，芳基基团在环中可具有6或10个碳原子。例如，如本文所用，术语“(C6-C10)芳基”是指含有6至10个碳原子的芳香族基团，诸如苯基、萘基、四氢萘基、蒽基、茚满基等。环中具有6个碳原子的芳基基团可任选地被1至5个合适的取代基取代。
在一些实施方案中，基团中碳原子的数量在本文中由前缀“Cx-xx”或“Cx-Cxx”指定，其中x和xx是整数。例如，“C1-4烷基”是具有1至4个碳原子的烷基基团。
如本文所用，术语“碳环基”、“碳环(carbocycle)”或“碳环(carbocyclic ring)”是指饱和或部分不饱和的单环或双环(例如，稠合、桥接或螺环系统)环系统，其具有4至12个环成员，所有环成员均为碳。术语“碳环基”涵盖环烷基和环烯基。
在一个实施方案中，碳环基是3至7元单环碳环基。示例性3至7元单环碳环基包括但不限于：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基、环丁二烯基、环戊二烯基、环己二烯基、环庚二烯基、苯基和环庚三烯基。
在一个实施方案中，碳环基是7至10元双环碳环基。示例性7至10元双环碳环基包括但不限于双环[2.1.1]己基、双环[2.2.1]庚基、双环[2.2.1]庚烯基、6,6-二甲基双环[3.1.1]庚基、2,6,6-三甲基双环[3.1.1]庚基、螺[3.3]庚基、螺[2.5]辛基、螺[2.2]戊基、螺[3.3]庚基、双环[3.3.0]辛基、双环[2.2.2]辛基、双环[3.3.1]壬基、双环[3.3.2]癸基、十氢萘基、萘基和茚满基。
稠合双环碳环基具有与3至7元非芳香族碳环基稠合的4至7元碳环基。实例包括十氢萘、八氢-1H-茚、八氢戊二烯(octahydropentalene)、十氢薁(decahydroazulene)、十氢-1H-轮烯、双环[4.2.0]辛烷、双环[3.2.0]庚烷等。
桥接双环碳环基包含一个非芳香族5至7元碳环基，其与一个5至7元非芳香族碳环基共用三个环原子。桥接双环碳环的实例包括双环[2.2.1]庚烷基、双环[3.2.1]辛烷基和双环[3.3.1]壬烷基。
“环烷基”是指3-7个碳原子的完全饱和的单环烃基团，包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环戊基；并且“环烯基”是指3-7个碳原子的不饱和非芳香族单环烃基团，包括环戊烯基、环己烯基、环戊烯基。术语“环烷基”包括3-7个碳原子、3-6个碳原子或5-7个碳原子的完全饱和的单环或双环或螺烃基团。在一些实施方案中，环烷基是3至6元单环环烷基。
术语“卤素”或“卤代(halo)”可以是氟、氯、溴或碘。
术语“卤代烷基”或“卤基取代的烷基”是指具有至少一个卤素取代的烷基。
“卤代烷氧基”是通过氧原子与另一部分连接的卤代烷基基团，例如像但不限于-OCHCF2或-OCF3。
“杂芳基”是指芳香族5至6元单环环系统，其具有独立地选自O、N和S的1至4个杂原子，并且其中N可被氧化(例如，N(O))或季铵化，并且S可任选地被氧化成亚砜和砜。5元至6元单环杂芳基的实例包括但不限于吡咯基、呋喃基、苯硫基(或噻吩基)、咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、呋呫基(furazanyl)、噁二唑基、噻二唑基、二噻唑基、三唑基、四唑基、吡啶基、吡喃基、硫吡喃基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、噁嗪基、噻嗪基、二噁英基、二噻基(dithiinyl)、氧杂环己基(oxathianyl)、三嗪基、四嗪基等。在一个实施方案中，杂芳基是5元杂芳基。5元杂芳基的实例包括但不限于吡唑基、噁唑基、异噁唑基、1,2,3-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,3-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基和四唑基。
“杂环基”是指具有3至12个环成员的饱和或部分不饱和单环或二环(例如，稠合、桥接或螺环系统)环系统，至少一个环成员是杂原子，且最多4个(例如，1、2、3或4个)环成员可以是杂原子，其中杂原子独立地选自O、S和N，并且其中C可被氧化(例如，C(O))，N可被氧化(例如，N(O))或季铵化，并且S可任选地被氧化成亚砜和砜。在一些实施方案中，杂环基是4至6元或3至7元单环杂环基。在一些实施方案中，杂环基是7至10元双环杂环基，其可以是稠合、桥接或螺双环杂环基。在一些实施方案中，双环杂环基可包括与杂芳环稠合的非芳香族杂环。
单环杂环基的实例包括但不限于氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、四氢呋喃基、硫戊环基(thiolanyl)、咪唑烷基、吡唑烷基、噁唑烷基、异噁唑烷基、噻唑烷基、异噻唑烷基、二氧杂环戊烷基(dioxolanyl)、二硫戊环基、噁硫烷基、哌啶基、四氢吡喃基、硫化环戊烷基(thianyl)、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、二噁烷基、二硫化环戊烷基、三噁烷基、三硫化环戊烷基、氮杂环庚烷基(azepanyl)、氧杂环庚烷基(oxepanyl)、硫杂环庚烷基(thiepanyl)、二氢呋喃基、咪唑啉基和二氢吡喃基。
“稠环系统”具有8至12个成员(环原子)并且两个环共用两个相邻的环原子。稠合双环杂环基具有与4至7元杂环基或3至7元碳环基稠合的4至7元杂环基。稠合双环杂环基也可具有与5至6元杂芳基稠合的4至7元杂环基。实例包括环戊吡咯烷基、环戊哌啶基、环戊氮杂环庚烷基、环己吡咯烷基、环己哌啶基、环己氮杂环庚烷基、环庚吡咯烷基、环庚哌啶基、环庚氮杂环庚烷基、吡咯并吡咯烷基、吡咯并哌啶基、吡咯并氮杂环庚烷基、呋喃并吡咯烷基、呋喃并哌啶基、呋喃并氮杂环庚烷基、吡喃并吡咯烷基、吡喃并哌啶基、吡喃并氮杂环庚烷基、二氢吡咯并[3,4-d]噻唑基等。
“桥接双环系统”(本文中也称为“桥接双环”或“桥接环系统”)具有7至10个成员(环原子)和两个共用三个相邻环原子的环。桥接双环杂环基包括与5至7元杂环基或5至7元碳环基共用三个环原子的5至7元杂环基。含氮桥接双环的实例包括氮杂双环[2.2.1]庚基、氮杂双环[3.2.1]辛基、氮杂双环[3.3.1]壬基、二氮杂双环[2.2.1]庚基、二氮杂双环[3.2.1]辛基和二氮杂双环[3.3.1]壬基。含氧桥接双环的实例包括氧代双环[2.2.1]庚基、氧代双环[3.2.1]辛基、氧代双环[3.3.1]壬基、氧杂氮杂双环[2.2.1]庚基、氧杂氮杂双环[3.2.1]辛基和氧杂氮杂双环[3.3.1]壬基。
“螺环系统”(本文也称为“螺环”)具有8至12个成员(环原子)和两个共用一个环原子的环。螺双环杂环基包括与4至7元杂环基或4至7元非芳香族碳环基共用一个原子的4至7元杂环基。8至12个含氮螺环系统的实例包括3,4-氮杂双环辛基，4,4-氮杂双环壬基、3,5-氮杂双环壬基、3,6-氮杂双环癸基、4,5-氮杂双环癸基、3,7-氮杂双环十一烷基、4,6-氮杂双环十一烷基和5,5-氮杂双环十一烷基。8-12含氧螺环系统的实例包括3,4-氧代双环辛基、4,4-氧代双环壬基、3,5-氧代双环壬基、3,6-氧代双环癸基、4,5-氧代双环癸基、3,7-氧代双环十一烷基、4,6-氧代双环十一烷基和5,5-氧代双环十一烷基。
术语“氧代”是指双基＝O。
在本文所提供的化合物具有足够碱性或酸性以形成稳定的无毒酸或碱盐的情况下，以药学上可接受的盐形式制备和施用化合物可能是适当的。药学上可接受的盐的实例是与形成生理学上可接受的阴离子的酸形成的有机酸加成盐，例如甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、丙二酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、苯甲酸盐、抗坏血酸盐、α-酮戊二酸盐或α-甘油磷酸盐。也可以形成无机盐，包括盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、碳酸氢盐和碳酸盐。
药学上可接受的盐可使用本领域中熟知的标准程序获得，例如通过使充足碱性化合物(诸如胺)与提供生理可接受的阴离子的合适的酸反应。也可制备羧酸的碱金属(例如，钠、钾或锂)或碱土金属(例如钙)盐。
可以由无机和有机碱来制备药学上可接受的碱加成盐。来自无机碱的盐可包括但不限于钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐或镁盐。来源于有机碱的盐可包括但不限于伯胺、仲胺或叔胺的盐，该胺如烷基胺、二烷基胺、三烷基胺、取代的烷基胺、二(取代的烷基)胺、三(取代的烷基)胺、烯基胺、二烯基胺、三烯基胺、取代的烯基胺、二(取代的烯基)胺、三(取代的烯基)胺、环烷基胺、二(环烷基)胺、三(环烷基)胺、取代的环烷基胺、二取代的环烷基胺、三取代的环烷基胺、环烯基胺、二(环烯基)胺、三(环烯基)胺、取代的环烯基胺、二取代的环烯基胺、三取代的环烯基胺、芳基胺、二芳基胺、三芳基胺、杂芳基胺、二杂芳基胺、三杂芳基胺、杂环烷基胺、二杂环烷基胺、三杂环烷基胺或混合的二胺和三胺，其中该胺上的取代基中的至少两个取代基可以是不同的，并且可以是烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、环烷基、取代的环烷基、环烯基、取代的环烯基、芳基、杂芳基或杂环烷基等。还包括其中两个或三个取代基与氨基氮一起形成杂环烷基或杂芳基的胺。胺的非限制性实例可包括异丙胺、三甲胺、二乙胺、三(异丙基)胺、三(正丙基)胺、乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、三甲胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、海巴明(hydrabamine)、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、N-烷基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、吗啉或N-乙基哌啶等。其他羧酸衍生物，例如甲酸酰胺(包括甲酰胺、低级烷基甲酰胺或二烷基甲酰胺等)可以是有用的。
如本文所述，化合物或其药学上可接受的盐可在分子中含有一个或多个不对称中心。根据本公开，不指定立体化学的任何结构应理解为包括纯或基本上纯的形式的所有各种立体异构体(例如，非对映异构体和对映异构体)以及其混合物(诸如外消旋混合物或对映异构体富集的混合物)。如何制备此类光学活性形式是本领域中熟知的(例如，通过重结晶技术拆分外消旋形式、由具有光学活性的起始物质合成、通过手性合成，或使用手性固定相的色谱分离)。
当通过名称或结构描绘化合物的特定立体异构体时，所述化合物的立体化学纯度为至少20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％、97％、99％、99.5％或99.9％。“立体化学纯度”意指所需立体异构体相对于所有立体异构体的合并重量的重量百分比。
当通过名称或结构描绘化合物的特定对映异构体时，该化合物的立体化学纯度为至少20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％、97％、99％、99.5％或99.9％。“立体化学纯度”意指所需对映异构体相对于所有立体异构体的合并重量的重量百分比。
当所公开化合物的立体化学由结构命名或描绘并且所命名或描绘的结构涵盖多于一种立体异构体(例如，如在非对映异构体对中)时，应理解为包括一种所涵盖立体异构体或所涵盖立体异构体的任何混合物。要进一步理解的是，所命名或描绘的立体异构体的立体异构纯度为至少20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％、97％、99％、99.5％或99.9％。立体异构纯度指所述名称或结构涵盖的所需立体异构体相对于所有立体异构体的合并重量的重量百分比。
当通过结构命名或描绘所公开的化合物而不指明立体化学，并且所述化合物具有一个手性中心时，要理解的是，所述名称或结构涵盖化合物的呈纯的或基本上纯的形式的一种对映异构体以及其混合物(诸如化合物的外消旋混合物，和一种对映异构体相对于其对应的光学异构体富集的混合物)。
当通过结构命名或描绘所公开的化合物而不指明立体化学，且例如所述化合物具有至少两个手性中心时，要理解的是，所述名称或结构涵盖呈纯的或基本上纯的形式的一种立体异构体以及其混合物(诸如立体异构体的混合物，以及其中一种或多种立体异构体相对于其他立体异构体富集的立体异构体的混合物)。
所公开化合物可以互变异构体形式和混合物存在，并且设想单独的个别互变异构体。此外，一些化合物可表现出多态性。
在一个实施方案中，本发明提供了本文公开的氘代化合物，其中被氢占据的任何位置或多个位置可包括高于氘的天然丰度的氘的富集。例如，一个或多个氢原子被氘替代，氘的丰度比氘的天然丰度大至少3340倍，氘的天然丰度为0.015％(即，并入至少50.1％的氘)、至少3500倍(在每个指定的氘原子处并入52.5％的氘)、至少4000倍(60％氘并入)、至少4500倍(67.5％氘并入)、至少5000倍(75％氘)、至少5500倍(82.5％氘并入)、至少6000倍(90％氘并入)、至少6333.3倍(95％氘并入)、至少6466.7倍(97％氘并入)、至少6600倍(99％氘并入)或至少6633.3倍(99.5％氘并入)。在一个实施方案中，氢以其天然丰度存在于所有位置。如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐可以互变异构形式和混合物存在，并且设想单独的个别互变异构体。
II.本公开的化合物
在第一个实施方案中，本发明的化合物由式(I)或其药学上可接受的盐表示，其中变量如上所述。
在本公开的第二个实施方案中，对于式(I)化合物或其药学上可接受的盐，X3是-OR5、-N(R5)2、5至6元杂芳基或4至7元单环杂环基，其中5至6元杂芳基和4至7元单环杂环基任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3或1、2、3、4、5或6个)R50取代，并且其余变量如第一个实施方案中所述。
在本公开的第三个实施方案中，对于式(I)化合物或其药学上可接受的盐，R0是H；并且其余变量如第一个或第二个实施方案中所述。
在本公开的第四个实施方案中，对于式(I)化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物由下式表示：
或其药学上可接受的盐；并且其余变量如第一个或第二个实施方案中所述。
在本公开的第五个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，X3是-OR5、-N(R5)2、5元杂芳基或4至6元单环杂环基，其中5元杂芳基和4至6元单环杂环基任选地被一至三个R50取代；并且R5是任选地被C1-6烷氧基取代的C1-6烷基；并且其余变量如第一个、第二个、第三个或第四个实施方案中所述。
在本公开的第六个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，X3选自苯基、氮杂环丁烷、吗啉、噁二唑、哌嗪、吡唑、四唑，各自任选地被一个或两个R50取代；并且其余变量如第一个、第二个、第三个、第四个或第五个实施方案中所述。
在本公开的第七个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，X3选自：
并且m使0、1或2；并且其余变量如第一个、第二个、第三个、第四个或第五个实施方案中所述。
在本公开的第八个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，X3选自-O-CH2-CH2-OCH3、-N(CH3)2、
其中―表示与环B的键；并且其余变量如第一个、第二个、第三个、第四个或第五个实施方案中所述。
在本公开的第九个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R50每次出现时独立地是C1-6烷基或4至6元单环杂环基，其中R50表示的C1-6烷基任选地被卤基或CN取代；并且其余变量如第一个、第二个、第三个、第四个、第五个、第六个、第七个或第八个实施方案中所述。
在本公开的第十个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R50每次出现时独立地选自-CH3、-CH2-CN和并且其余变量如第九个实施方案中所述。
在本公开的第十一个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R50是-CH3；并且其余变量如第九个实施方案中所述。
在本公开的第十二个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，环A是苯基、5或6元杂芳基或5至10元单环或双环杂环基，其每一个任选地被一至三个R4取代；并且其余变量如第一个、第二个、第三个、第四个、第五个、第六个、第七个、第八个、第九个、第十个或第十一个实施方案中所述。
在本公开的第十三个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，环A选自3-氮杂双环[3.2.1]辛烷、氮杂环庚烷、苯基、哌啶、吡啶和吡咯烷，其每一个任选地被一至三个R4取代；并且其余变量如第十二个实施方案中所述。
在本公开的第十四个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，A选自：
其中―表示与环B的键，并且―*表示与的键；并且其余变量如第十二个实施方案中所述。
在本公开的第十五个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，n是0、1、2；并且其余变量如第一个、第二个、第三个、第四个、第五个、第六个、第七个、第八个、第九个、第十个、第十一个、第十二个、第十三个或第十四个实施方案中所述。
在本公开的第十六个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，环A选自：
其中―表示与环B的键，并且―*表示与的键；并且其余变量如第十二个实施方案中所述。
在本公开的第十七个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R4选自卤素、C1-6烷基和C1-6卤代烷基；并且其余变量如第一个、第二个、第三个、第四个、第五个、第六个、第七个、第八个、第九个、第十个、第十一个、第十二个、第十三个、第十四个、第十五个或第十六个实施方案中所述。
在本公开的第十八个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R4选自Cl、F、-CH3和-CHF2；并且其余变量如第十七个实施方案中所述。
在本公开的第十九个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R1是任选地被一个或两个R10取代的5元杂芳基；并且其余变量如第一个、第二个、第三个、第四个、第五个、第六个、第七个、第八个、第九个、第十个、第十一个、第十二个、第十三个、第十四个、第十五个、第十六个、第十七个或第十八个实施方案中所述。
在本公开的第二十个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R1选自噁唑、噁二唑、吡唑、四唑和三唑，其每一个任选地被一个或两个R10取代；并且其余变量如第十九个实施方案中所述。
在本公开的第二十一个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R1选自：
并且其余变量如第十九个实施方案中所述。
在本公开的第二十二个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R10每次出现时独立地选自C1-6烷基和C3-6环烷基，其每一个任选地被一至三个R15取代；并且其余变量如第一个、第二个、第三个、第四个、第五个、第六个、第七个、第八个、第九个、第十个、第十一个、第十二个、第十三个、第十四个、第十五个、第十六个、第十七个、第十八个、第十九个、第二十个或第二十一个实施方案中所述。
在本发明的第二十三个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R10每次出现时独立地选自C1-4烷基和环丙基，其每一个任选地被一个或三个R15取代；并且其余变量如第二十二个实施方案中所述。
在本公开的第二十四个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R15每次出现时独立地选自卤素、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；并且其余变量如第一个、第二个、第三个、第四个、第五个、第六个、第七个、第八个、第九个、第十个、第十一个、第十二个、第十三个、第十四个、第十五个、第十六个、第十七个、第十八个、第十九个、第二十个、第二十一个、第二十二个或第二十三个实施方案中所述。
在本公开的第二十五个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R15每次出现时独立地选自F、-CH3和-CH2F；并且其余变量如第二十四个实施方案中所述。
在本公开的第二十六个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R10每次出现时独立地选自-C(CH3)3、-C(CH3)2-CH2F、并且其余变量如第一个、第二个、第三个、第四个、第五个、第六个、第七个、第八个、第九个、第十个、第十一个、第十二个、第十三个、第十四个、第十五个、第十六个、第十七个、第十八个、第十九个、第二十个或第二十一个实施方案中所述。
在本公开的第二十七个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R2是H；并且其余变量如第一个、第二个、第三个、第四个、第五个、第六个、第七个、第八个、第九个、第十个、第十一个、第十二个、第十三个、第十四个、第十五个、第十六个、第十七个、第十八个、第十九个、第二十个、第二十一个、第二十二个、第二十三个、第二十四个、第二十五个或第二十六个实施方案中所述。
在本公开的第二十八个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R1和R2与它们的居间原子一起形成选自5至7元单环杂环基和7至10元双环杂环基的环D，其中环D任选地被一个或多个(例如，1至6、1至3，或1、2、3、4、5或6个)R100取代；并且其余变量如第一个、第二个、第三个、第四个、第五个、第六个、第七个、第八个、第九个、第十个、第十一个、第十二个、第十三个、第十四个、第十五个、第十六个、第十七个或第十八个实施方案中所述。
在本公开的第二十九个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，环D选自哌嗪酮和二氢吡咯并[3,4-d]噻唑酮，其中环D任选地被一个或两个R100取代；并且其余变量如第二十八个实施方案中所述。
在本公开的第三十个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，环D选自：
其中―表示与-C(R3)-环A的键；并且其余变量如第二十八个实施方案中所述。
在本公开的第三十一个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R100每次出现时独立地选自C1-6烷基和4至6元单环杂环基，其每一个任选地被一个或两个R150取代；并且R150每次出现时独立地选自C3-6环烷基和4至6元单环杂环基；并且其余变量如第一个、第二个、第三个、第四个、第五个、第六个、第七个、第八个、第九个、第十个、第十一个、第十二个、第十三个、第十四个、第十五个、第十六个、第十七个、第十八个、第十九个、第二十个、第二十一个、第二十二个、第二十三个、第二十四个、第二十五个、第二十六个、第二十七个、第二十八个、第二十九个或第三十个实施方案中所述。
在本公开的第三十二个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R100每次出现时独立地选自C1-6烷基和氧杂环丁基，其中R100表示的C1-6烷基任选地被R150取代；并且R150每次出现时独立地选自环丁基和氧杂环丁基；并且其余变量如第三十一个实施方案中所述。
在本公开的第三十三个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R100每次出现时独立地选自-CH3、-CH2-CH2-CH3、-CH(CH3)2、-C(CH3)3、-CH2-CH(CH3)2、-CH2-C(CH3)3、并且其余变量如第三十一个实施方案中所述。
在本公开的第三十四个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物或其药学上可接受的盐，R3选自H和C1-6烷基；并且其余变量如第一个、第二个、第三个、第四个、第五个、第六个、第七个、第八个、第九个、第十个、第十一个、第十二个、第十三个、第十四个、第十五个、第十六个、第十七个、第十八个、第十九个、第二十个、第二十一个、第二十二个、第二十三个、第二十四个、第二十五个、第二十六个、第二十七个、第二十八个、第二十九个、第三十个、第三十一个、第三十二个或第三十三个实施方案中所述。
在本公开的第三十五个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)化合物或其药学上可接受的盐，R3是H或-CH3；并且其余变量如第三十四个实施方案中所述。
在本公开的第三十六个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)化合物或其药学上可接受的盐，R3和R4与它们的居间原子一起形成环E，其中环E选自4至7元单环碳环和4至7元单环杂环，其中环E任选地被R300取代；并且其余变量如第一个、第二个、第三个、第四个、第五个、第六个、第七个、第八个、第九个、第十个、第十一个、第十二个、第十三个、第十四个、第十五个、第十六个、第十七个、第十八个、第十九个、第二十个、第二十一个、第二十二个、第二十三个、第二十四个、第二十五个、第二十六个、第二十七个、第二十八个、第二十九个、第三十个、第三十一个、第三十二个或第三十三个实施方案中所述。
在本公开的第三十七个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)化合物或其药学上可接受的盐，环E是任选地被R300取代的5至7元单环杂环；并且其余变量如第三十六个实施方案中所述。
在本公开的第三十八个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)化合物或其药学上可接受的盐，环E由以下结构式表示：
其中―表示与环A的稠合点，并且―*表示与-N(R2)-C(O)-R1的键；并且其余变量如第三十六个实施方案中所述。
在本公开的第三十九个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)化合物或其药学上可接受的盐，R300每次出现时独立地选自C1-6烷基和4至6元单环杂环基，其中R300表示的C1-6烷基和4至6元单环杂环基各自任选地被一至三个R350取代；并且R350每次出现时独立地是卤素；并且其余变量如第一个、第二个、第三个、第四个、第五个、第六个、第七个、第八个、第九个、第十个、第十一个、第十二个、第十三个、第十四个、第十五个、第十六个、第十七个、第十八个、第十九个、第二十个、第二十一个、第二十二个、第二十三个、第二十四个、第二十五个、第二十六个、第二十七个、第二十八个、第二十九个、第三十个、第三十一个、第三十二个、第三十三个、第三十四个、第三十五个、第三十六个、第三十七或第三十八个实施方案中所述。
在本公开的第四十个实施方案中，对于式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)化合物或其药学上可接受的盐，R300每次出现时独立地选自-CH2-CF3和并且其余变量如第三十九个实施方案中所述。
在本公开的第四十一个实施方案中，化合物由下式表示：
或其药学上可接受的盐，其中：R1是任选地被R10取代的5元杂芳基；R10是任选地被C1-3烷基取代的C1-4烷基、C1-4卤代烷基或C3-6环烷基；X3是5元杂芳基或6元单环饱和杂环基，其每一个任选地被R50取代；R50是C1-3烷基或C1-3卤代烷基；环A是苯基、6元杂芳基或6元单环饱和杂环基；R4每次出现时独立地选自卤素、C1-3烷基和C1-3卤代烷基；并且n是0、1或2。
在本公开的第四十二个实施方案中，对于式(IIA)或(IIIA)化合物或其药学上可接受的盐，R1选自噁二唑、三唑和四唑，其每一个任选地被R10取代；X3是吡唑或哌嗪，其每一个任选地被R50取代；并且环A是苯基、吡啶或哌啶；并且其余变量如第四十一个实施方案中所述。
在本公开的第四十三个实施方案中，对于式(IIA)或(IIIA)化合物或其药学上可接受的盐：
R1选自：
X3选自：
并且
环A选自：
其中―表示与环B的键，并且―*表示与的键；并且其余变量如第四十一个实施方案中所述。
在本公开的第四十四个实施方案中，对于式(IIA)或(IIIA)化合物或其药学上可接受的盐，环A选自：
其中―表示与环B的键，并且―*表示与的键；并且其余变量如第四十三个实施方案中所述。
在本公开的第四十五个实施方案中，对于式(IIA)或(IIIA)化合物或其药学上可接受的盐，R10是-C(CH3)3或R4每次出现时独立地选自F、-CH3和-CHF2；并且R50是-CH3；并且其余变量如第四十一个、第四十二个、第四十三个或第四十四个实施方案中所述。
本发明还包括范例中公开的化合物(例如，实施例1-174的化合物)的中性形式和药学上可接受的盐。
III.药物组合物和使用方法
另一实施方案是一种药物组合物，所述药物组合物包含至少一种本文所述化合物或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载剂。
本文所述的化合物或其药学上可接受的盐可用于降低Btk的活性或以另外的方式影响Btk的性质和/或行为，例如稳定性、磷酸化、激酶活性、与其他蛋白质的相互作用等。
在一些实施方案中，本发明提供了降低Btk酶活性的方法。在一些实施方案中，此类方法包括使Btk与有效量的Btk抑制剂接触。因此，本发明还提供了通过使Btk与本发明的Btk抑制剂接触来抑制Btk酶活性的方法。
本发明的一个实施方案包括治疗受试者的响应于Btk抑制的病症的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的至少一种本文所述的化合物或其药学上可接受的盐。
在一个实施方案中，本发明提供了治疗有需要的受试者的自身免疫性病症、炎性病症和癌症的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的至少一种本文所述的化合物或其药学上可接受的盐。
术语“自身免疫性病症”包括涉及针对天然抗原的不适当免疫反应的疾病或病症，诸如急性播散性脑脊髓炎(ADEM)、阿狄森氏病(Addison's disease)、斑秃、抗磷脂抗体综合征(APS)、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝炎、大疱性类天疱疮(BP)、乳糜泻、皮肌炎、1型糖尿病、古德帕斯彻氏综合征(Goodpasture's syndrome)、格雷夫斯病(Graves'disease)、格林-巴利综合征(Guillain-Barre syndrome)(GBS)、桥本氏病(Hashimoto'sdisease)、特发性血小板减少性紫癜、红斑狼疮、混合结缔组织病、多发性硬化症、重症肌无力、寻常型天疱疮、恶性贫血、多发性肌炎、原发性胆汁性肝硬化、舍格伦综合征(Sjogren'ssyndrome)、颞动脉炎和韦格纳肉芽肿病(Wegener'sgranulomatosis)。术语“炎性病症”包括涉及急性或慢性炎症的疾病或病症，诸如过敏、哮喘、前列腺炎、肾小球肾炎、盆腔炎症性疾病(PID)、炎性肠病(IBD，例如克罗恩氏病(Crohn's disease)、溃疡性结肠炎)、再灌注损伤、类风湿性关节炎、移植排斥和血管炎。在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗类风湿性关节炎或狼疮的方法。在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗多发性硬化症的方法。
术语“癌症”包括涉及异常细胞生长和/或增殖的疾病或病症，诸如胶质瘤、甲状腺癌、乳腺癌、肺癌(例如小细胞肺癌、非小细胞肺癌)、胃癌、胃肠道间质肿瘤、胰腺癌、胆管癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌、肾细胞癌、淋巴瘤(例如，间变性大细胞淋巴瘤)、白血病(例如急性髓性白血病、T细胞白血病、慢性淋巴细胞性白血病)、多发性骨髓瘤、恶性间皮瘤、恶性黑色素瘤和结肠癌(例如微卫星高度不稳定结直肠癌)。在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗白血病或淋巴瘤的方法。
如本文所用，术语“受试者”和“患者”可互换使用，并且意指需要治疗的哺乳动物，例如人、伴侣动物(例如，狗、猫等)、农场动物(例如，牛、猪、马、绵羊、山羊等)和实验动物(例如，大鼠、小鼠、豚鼠等)。通常，受试者是需要治疗的人。
如本文所用，术语“治疗(treating/treatment)”是指获得所需的药理学和/或生理学效果。所述效果可以是治疗性的，其包括部分或基本上实现以下结果中的一者或多者：部分或完全减少疾病、病症或综合征的程度；减轻或改善与病症相关的临床症状或指标；或者延迟、抑制或降低疾病、病症或综合征进展的可能性。
对受试者施用的本文提供的化合物或其药学上可接受的盐的有效剂量可以是10μg-500mg。
对哺乳动物施用本文所述的化合物或其药学上可接受的盐包括任何合适的递送方法。对哺乳动物施用本文所述的化合物或其药学上可接受的盐包括对所述哺乳动物外用、肠内、肠胃外、透皮、经粘膜、经由吸入、脑池内、硬膜外、阴道内、静脉内、肌肉内、皮下、皮内或玻璃体内施用本文所述的化合物或其药学上可接受的盐。对哺乳动物施用本文所述的化合物或其药学上可接受的盐还包括对哺乳动物外用、肠内、肠胃外、透皮、经粘膜、经由吸入、脑池内、硬膜外、阴道内、静脉内、肌肉内、皮下、皮内或玻璃体内施用在哺乳动物的身体内或身体的表面上代谢成本文所述的化合物或其药学上可接受的盐的化合物。
因此，如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐可以与药学上可接受的媒介物如惰性稀释剂或可同化的食用载体组合而全身性施用，例如口服施用。它们可以被包封在硬壳或软壳明胶胶囊中，可以被压制成片剂，或者可以直接与患者饮食的食物掺合在一起。对于口服治疗施用，如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐可以与一种或多种赋形剂组合，并且可以可摄取的片剂、颊片、锭剂、胶囊、酏剂、悬浮液、糖浆或糯米纸囊剂(wafers)等形式使用。此类组合物和制备剂应含有至少约0.1％的活性化合物。组合物和制备剂的百分比当然是可以变化的，并且可以方便地在给定单位剂型重量的约2％至约60％之间。活性化合物在此类治疗有用的组合物中的量可为使得将获得有效的剂量水平。
片剂、锭剂、丸剂、胶囊等可包括以下：粘结剂，如黄芪胶、阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶；赋形剂，如磷酸二钙；崩解剂，如玉米淀粉、马铃薯淀粉、海藻酸等；润滑剂，如硬脂酸镁；或甜味剂，如蔗糖、果糖、乳糖或阿斯巴甜或调味剂。
该活性化合物也可以通过输注或注射静脉内或腹膜内施用。该活性化合物或其盐的溶液可以在任选地与无毒表面活性剂混合的水中制备。
用于注射或输注的示例性药物剂型可包括包含活性成分的无菌水溶液或分散体或无菌粉末，其适于临时制备无菌可注射或可输注的溶液或分散体。在所有情况下，最终的剂型在制造和储存条件下应该是无菌、流体和稳定的。
无菌可注射溶液可通过如下方式制备：将所需量的活性化合物与上文列举的各种其他成分(根据需要)一起掺合在适当溶剂中，然后进行过滤灭菌。在用于制备无菌可注射溶液的无菌粉末的情况下，优选的制备方法可以是真空干燥和冷冻干燥技术，其可以产生活性成分加上在先前无菌过滤的溶液中存在的任何另外的期望成分的粉末。
示例性固体载剂可包括细碎的固体，诸如滑石粉、粘土、微晶纤维素、二氧化硅、氧化铝等。有用的液体载剂包括如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐可任选地借助于无毒表面活性剂以有效水平溶解或分散于其中的水、醇或二醇或水-醇/二醇共混物。
如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐的有用剂量可通过比较它们在动物模型中的体外活性和体内活性来确定。将小鼠及其他动物中的有效剂量外推至人的方法是本领域已知的；例如参见美国专利号4,938,949，其通过引用整体并入。
用于治疗所需的如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐的量不仅可以随所选择的特定盐而变化，而且还可以随施用途径、所治疗的疾患的性质以及患者的年龄和状况而变化，并且最终可由主治医生或临床医生决定。然而，一般来说，剂量可以在每天约0.1至约10mg/kg体重的范围内。
可以方便地以单位剂型施用如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐；例如，每单位剂型含有0.01至10mg或0.05至1mg的活性成分。在一些实施方案中，5mg/kg或更少的剂量可以是合适的。
期望剂量可以方便地以单次剂量或按适当间隔施用的分次剂量提供。
所公开的方法可包括试剂盒，所述试剂盒包括如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐和说明材料，所述说明材料可描述向细胞或受试者施用如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐或包含如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐的组合物。这应被解读为包括本领域技术人员已知的试剂盒的其他实施方案，诸如包含用于在向细胞或受试者施用如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐或组合物之前溶解或悬浮如本文所述的化合物或其药学上可接受的盐或组合物的(诸如无菌)溶剂的试剂盒。在一些实施方案中，受试者可以是人。
通过以下实施例说明本发明，所述实施例不旨在进行限制。
IV.范例
A.缩写和首字母缩略词
本文使用的缩写和首字母缩略词包括以下：
ABPR：自动背压调节器；
Ac2O：乙酸酐；
ACN：乙腈；
Aq.：水性；
Ar：氩气；
Bn：苄基；
Boc：叔丁氧羰基；
Boc2O：二碳酸二叔丁酯(di-tert-butyl decarbonate)；
BPin：频哪醇硼(pinacolatoboron)；
(BPin)2或B2pin2：双(频哪醇)二硼，即，4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2′-双-1,3,2-二杂氧戊硼烷；
br：宽峰；
t-BuOH：叔丁醇；
n-BuLi：正丁基锂；
℃：摄氏度；
CHCl3：氯仿；
CDCl3：氘代氯仿；
CDI：1,1'-羰基二咪唑
CO2：二氧化碳；
Cs2CO3：碳酸铯；
CsF：氟化铯；
CuI：碘化亚铜；
δ：化学位移；
d：二重峰；
dd：意指双二重峰；
ddd：双双二重峰(doubledoublet of doublets)；
DCM：二氯甲烷；
DIEA或DIPEA：N-乙基二异丙胺或N,N-二异丙基乙胺；
DEA：二乙胺；
deg：度；
DIAD：偶氮二甲酸二异丙酯；
DABCO：1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷
DABAL-Me3：三甲基铝和DABCO的加合物
DME：1,2-二甲氧基乙烷；
DMF：N,N-二甲基甲酰胺；
DMSO：二甲基亚砜；
DMSO-d6：六氘代二甲基亚砜；
DPPA：二苯基磷酰叠氮化物；
Et：乙基；
Et2O：乙醚；
EtOH：乙醇；
EtOAc：乙酸乙酯；
Eq.：当量；
g：克；
h：小时；
HATU：O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸酯；
HBr：溴化氢；
HCl：盐酸；
HCO2H：甲酸；
Hept：庚烷；
HFIP：六氟异丙醇；
1H NMR：质子核磁共振；
H2O：水；
H2SO4：硫酸；
HMPA：六甲基磷酰胺；
HPLC：高压液相色谱法；
Hz：赫兹；
IPA或iPrOH：异丙醇；
J：耦合常数；
K2CO3：碳酸钾；
kg：千克；
KHMDS：六甲基二硅氮烷钾(potassium hexamethldisilazide)；
KOAc：乙酸钾；
KOH：氢氧化钾；
KOt-Bu：叔丁醇钾
K3PO4：磷酸三钾；
K4Fe(CN)6·3H2O：亚铁氰化钾(Ⅱ)三水合物；
L：升；
LCMS：液相色谱质谱；
LG：离去基团；
m：多重峰；
M：摩尔；
MBPR：手动背压调节器；
Me：甲基；
MeB(OH)2：甲基硼酸；
MeCN：乙腈；
MeOH：甲醇；
MeOH-d4：氘代甲醇；
mg：毫克；
MgSO4：硫酸镁；
MHz：兆赫兹；
min：分钟；
mL：毫升；
mmol：毫摩尔；
MMPNO：甲基吗啉N-氧化物；
mol：摩尔；
MS m/z：质谱峰；
N2：氮气；
NaOt-Bu：叔丁醇钠；
NaH：氢化钠；
NaHCO3：碳酸氢钠；
NaHMDS：六甲基二甲硅烷基重氮钠(sodium hexamethyldisilylazide)；
NaIO4：高碘酸钠；
NaOH：氢氧化钠；
Na2S2O3：硫代硫酸钠；
Na2SO4：硫酸钠；
NEt3：三乙胺；
NFSI：N-氟苯磺酰亚胺；
NH3：氨；
NH4Cl：氯化铵；
NH4OH：氢氧化铵；
NH4OAc：乙酸铵；
NIS：N-碘代琥珀酰亚胺；
OsO4：四氧化锇；
P(cy)3：三环己基膦；
Pd2(dba)3：三(二亚苄基丙酮)二钯(0)；
Pd(dppf)Cl2：[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)；
Pd(dppf)Cl2.DCM：[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)，与二氯甲烷复合
Pd(dtbpf)Cl2：[1,1'-双(二叔丁基膦)二茂铁]二氯化钯(II)；
Pd(t-Bu3P)2：双(三叔丁基膦)钯(0)；
PE：石油醚；
PEPPSI-IPr或Pd-PEPPSI-IPr：[1,3-双(2,6-二异丙基苯基)咪唑-2-亚基](3-氯吡啶基)二氯化钯(II)
PG：保护基团；
Ph：苯基；
POCl3：磷酰氯；
Pyr：吡啶；
q：四重峰；
Rf：滞留因子；
rt：保留时间；
RT：室温；
Rh(OAc)2二聚体：醋酸铑(II)二聚体；
RuPhos：2-二环己基膦-2',6'-二异丙氧基联苯；
s：单峰；
sat.：饱和的；
SCX：强阳离子交换；
SFC：超临界流体色谱法；
SiO2：二氧化硅；
Si-SPE：二氧化硅固相萃取；
SPE：固相萃取；
t：三重峰；
td：三二重峰；
t-BuONa：叔丁醇钠；
TEA：三乙胺；
TFA：三氟乙酸
Tf2O：三氟甲烷磺酸酐；
THF：四氢呋喃；
TLC：薄层色谱法；
T3P：丙烷膦酸酐；
μL：微升；
μmol：微摩尔；
μW：微波；
v/v：体积/体积；
XPhos：2-二环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯；
Xphos G3：(2-二环己基膦-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯基)]甲磺酸钯(II)；
tBuXPhos Pd G3：[(2-二叔丁基膦-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)-2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]甲磺酸钯(II)；
B.一般合成方案
根据第一种方法，其中A环是苯基或5或6元杂芳基，式(I)化合物可由式(II')、(III')、(IV')和(V')化合物制备，如方案1中所示。
方案1
PG是合适的N保护基团，通常是氨基甲酸酯，且更合适地是氨基甲酸叔丁酯。LG是离去基团，通常是卤化物、甲磺酸盐或三氟甲磺酸盐，且更合适地是Br、Cl或三氟甲磺酸盐。
式(IV')化合物可通过方法步骤a)(即，钯催化的交叉偶联反应，诸如Suzuki反应)由式(II')和(III')化合物制备。典型的交叉偶联反应条件包括含有合适膦配体的钯催化剂、在无机碱的存在下、在RT至反应的回流温度之间在合适的水性溶剂中。优选的条件包括，在tBuXPhos PdG3、Pd(t-Bu3P)2、Pd(dppf)Cl2或RuPhos与Pd2(dba)3的组合以及合适的碱诸如在合适的溶剂(诸如二噁烷水溶液)中的Na2CO3、K2CO3、Cs2CO3、K3PO4或KF的存在下，在40℃至100℃之间，式(II')和(III')化合物发生反应。
式(V')化合物可根据方法步骤b)由式(IV')化合物在酸性条件下脱去N保护基来制备。优选的条件包括，在合适的溶剂诸如MeOH、二噁烷、EtOAc或DCM中，在RT至50℃之间，式(IV')化合物与HCl或TFA发生反应。
式(I)化合物可根据方法步骤c)由式(V')胺和R1CO2H在合适的偶联剂和有机碱存在下在合适的极性非质子溶剂中形成酰胺键来制备。优选的条件包括在偶联剂HATU或CDI存在下，在有机碱诸如TEA或DIPEA存在下，在溶剂诸如DMF、EtOAc、二噁烷或MeCN中，在RT至反应的回流温度之间，酸R1CO2H与式(V')胺发生反应。
或者，式(I)化合物可根据方法步骤d)，在DABAL-Me3存在下通过式(V')胺与R1CO2(C1-C4烷基)反应形成酰胺键来制备，这根据Novak等人(Tet.Lett.2006,47,5767)描述的方法。优选的条件包括在DABAL-Me3存在下，在合适的溶剂诸如THF或二噁烷中，在RT至45℃之间，酯R1CO2(C1-C4烷基)与式(V')胺发生反应。
根据第二种方法，其中A环是苯基或5或6元杂芳基，式(IV’)化合物可由式(II’)、(VI')和(VII')化合物制备，如方案2中所示。
方案2
Hal是卤素，优选地是Cl或Br，并且W是硼酸或硼酸酯。
式(VII')化合物可根据方法步骤(a)(即，Suzuki反应)由式(II')和(VI')化合物获得，如先前方案1中所述。
当X3是5至6元杂芳基时，式(IV)化合物可根据方法步骤(a)(即，Suzuki反应)由式(VII')化合物和X3-W获得，如先前方案1中所述。
当X3是-N(R5)2或N连接的4至7元单环杂环基时，式(IV')化合物可通过方法步骤d)(即，Buchwald-Hartwig交叉偶联反应)获得。典型条件包括，在合适的无机碱、合适的钯催化剂存在下，在合适的膦配体存在下，在合适的溶剂中在升高的温度下，X3H与式(VII')化合物发生反应。优选的条件包括，在RuPhos与Pd2(dba)3组合存在下，在合适的碱诸如在合适的溶剂(诸如二氧六环或甲苯)中的K2CO3、K3PO4或Cs2CO3的存在下，在70℃至110℃之间，将式(VII')化合物与X3H发生反应。
根据第三种方法，其中A环通过N原子与B环连接，式(IV')化合物可由式(III')和(VIII')化合物制备，如方案3中所示。
方案3
式(IV')化合物可根据方法步骤e)胺化反应来制备。典型条件包括任选地在有机或无机碱(诸如在IPA或DMF中的DIPEA或Cs2CO3)的存在下，在RT下，式(VIII')胺与式(III')化合物发生反应。
根据第四种方法，式(I)化合物可由式(II')、(VI')、(X')、(XI')和(XII')化合物制备，如方案4中所示。
方案4
式(II')化合物可根据方法步骤(f)，由式(XI')化合物在合适的无机碱(诸如K2CO3或KOAc)和合适的催化剂(诸如Pd(dppf)Cl2)存在下，在合适的非极性溶剂中在RT至升高的温度之间，通过用合适的硼酸酯(诸如(BPin)2)处理形成硼酸酯来制备。优选的条件包括，在Pd(dppf)Cl2的存在下，在KOAc存在下，在二噁烷中在RT至90℃之间，用(BPin)2处理式(II')化合物。
式(X')化合物可按照方法步骤b)脱保护反应由式(II')化合物来制备，如先前方案1中所述。
式(XI')化合物可根据方法步骤c)由式(X')化合物和R1CO2H制备，或根据方法步骤d)由R1CO2(C1-C4)烷基制备，如先前方案1中所述。
式(XII')化合物可根据方法步骤a)由式(XI')和(VI')化合物制备，如先前方案1中所述。
式(I)化合物可根据前述方法步骤a)或e)由式(XII')化合物和X3H制备。
根据第五种方法，式(XI')化合物可由式(XII')化合物制备，如方案5中所示。
方案5
式(XI')化合物可根据方法步骤f)由式(XII')化合物获得，如先前方案4中所述。
根据第六种方法，其中A环通过N原子与B环连接，式(XI')化合物可由式(XII')化合物制备，如方案6中所示。
方案6
式(XV')化合物可根据方法步骤c)由式(X')化合物和R1CO2H制备，或根据方法步骤d)由R1CO2(C1-C4)烷基制备，如先前方案1中所述。
式(XVI')化合物可根据方法步骤b)由式(XVI')化合物获得，如先前方案1中所述。
式(I)化合物可根据方法步骤(e)由式(III')和(XVI')化合物获得，如先前方案3中所述。
可通过标准化学转化(例如像通过还原胺化对杂原子(诸如N)进行烷基化，或者在有机或无机碱的存在下在合适的溶剂(诸如MeCN)中进行烷基化，使用本领域技术人员熟知的方法)将式(I)化合物转化为式(I)替代化合物。
式(II')、(III')、(VI')、(VIII')、(XI')、(XIII')和(XIV')化合物是市售的，其可通过类似于文献中已知的方法或以下实验部分中描述的方法制备。
本领域技术人员应理解，可能需要利用合适的保护基策略来制备式(I)化合物。典型的保护基可包括氨基甲酸酯，并且优选包括用于保护胺的Boc。
还应当理解，可能需要或期望以不同于方案中描述的顺序进行转化，或者修改一种或多种转化，以提供本发明的所需化合物。
C.实验
制备型HPLC条件
在下述实施例中，使用了以下制备型HPLC方法。
C.1[1,5-a]吡嗪的制备
实施例1：1-(叔丁基)-N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-吡唑-3-甲酰胺
1. 1-(2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑-3,5-二甲酸二乙酯的合成。
将1H-吡唑-3,5-二甲酸二乙酯(69.6g,328mmol)和Cs2CO3(126g,388mmol)添加到2-溴-1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)乙烷-1-酮(60.6g,298mmol)在DMF(900mL)中的溶液中，并将反应物在RT下搅拌过夜。将反应混合物用水稀释并用DCM萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并真空浓缩。将粗产物悬浮在庚烷:EtOAc 1:1(50-100mL)中并过滤。将固体用EtOAc和庚烷洗涤以得到产物(68.5g)，为白色固体。将母液浓缩并通过柱色谱法(庚烷:EtOAc梯度0至100％)纯化以得到另外的产物(9.7g)以提供78.2g(产率78％)的1-(2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑-3,5-二甲酸二乙酯，为白色固体。LCMS m/z＝335.2[M+H]+
2. 4-羟基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸乙酯的合成。
将1-(2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑-3,5-二甲酸二乙酯(15.0g,44.9mmol)和NH4OAc(10.4g,135mmol)在EtOH(150mL)中的混合物在Berghoff反应器中在130℃下加热24h。将所得悬浮液过滤，用水洗涤固体并干燥以得到4-羟基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸乙酯(11.8g,92％)，为白色固体。此反应分批进行，总共78.2g的起始物质以提供共66.6g的产物(产率92％)。LCMS mz＝288.3[M+H]+
3. 4-羟基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸的合成。
将4-羟基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸乙酯(66.6g,232mmol)悬浮在MeOH(1.2L)中，添加1M NaOH(696mL,696mmol)，并将反应物在RT下搅拌过夜。将混合物用浓HCl酸化至pH为2并过滤。将固体用MeOH洗涤，转移到圆底烧瓶中并与MeCN共沸。将固体分成两部分并重复水解。将4-羟基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸甲酯(46.0g,116mmol)悬浮在MeOH(1.2L)中，并添加1M NaOH(348mL,348mmol)和水(10mL)，并将反应物在RT下搅拌过夜。将混合物用浓HCl中和，过滤，并将固体用MeCN、二噁烷洗涤并在真空下干燥以得到4-羟基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸(71.0g，粗品)，其中含有大量盐。然后用第二部分重复所述反应以提供另外的60g的粗产物。LCMS m/z＝258.0[M+H]+
4. 6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-醇的合成。
将加热至50℃的预热的环丁砜(0.24kg,2.0mol)装入三颈烧瓶中。分批添加4-羟基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸(41.8g,68mmol)和几滴浓硫酸，并将反应混合物在350℃(外部)下加热4h。将反应物冷却至RT，用DCM稀释，并通过短硅胶塞过滤来纯化，用3L庚烷(fr1)、6L庚烷:EtOAc 1:1(fr2-3)、6L EtOAc(fr4-5)、4L DCM(fr6)、6L DCM:MeOH 9:1(fr7-8)洗脱。从fr7中分离出产物(含有副产物)(2.88g，产率20％)，为棕色固体。LCMS m/z＝214.1[M+H]+。
5. 4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪的合成。
将6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-醇(2.88g,13.4mmol)悬浮在POCl3(19.9mL,214mmol)中，并将反应物在80℃下加热过夜。将混合物用MeCN稀释并浓缩，将残余物悬浮在DCM中，并将混合物用饱和NaHCO3和盐水洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩。将粗产物通过柱色谱法(DCM:EtOAc/TEA(5％)；梯度0至25％)纯化以得到4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(1.35g，产率43％)，为黄色固体。LCMS m/z＝234.0[M+H]+。
6.(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(300mg,900μmol)、4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(210mg,900μmol)、K2CO3(373mg,2.70mmol)和Pd(dppf)Cl2·DCM(74mg,90μmol)的混合物溶于二噁烷(7.2mL)和水(1.8mL)中，并使N2鼓泡通过混合物5min。将反应物在N2下加热至100℃，并在100℃下搅拌3h。将冷却的反应物浓缩并直接加载到硅胶柱上。将粗物质通过柱色谱法(梯度：0-75％[3:1EtOAc/EtOH]:庚烷)纯化以得到(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(264mg，产率73％)，为白色固体。LCMS m/z＝405.0[M+H]+。
7.(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐的合成
向(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(264mg,653μmol)在EtOAc(1mL)中的溶液中添加在EtOAc中的1M HCl(6.53mL,6.53mmol)，并将反应物在环境温度下搅拌3天。将反应混合物浓缩至干以得到(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐，其无需进一步纯化即可使用(246mg，粗品)。LCMS m/z＝305.0[M+H]+
8. 1-(叔丁基)-N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-吡唑-3-甲酰胺的合成
在冰水冷却浴中向1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-甲酸(21mg,123μmol)在THF(2mL)中的溶液中添加TEA(33mg,329μmol)和HATU(63mg,164μmol)。将混合物在0℃下搅拌10min，然后添加(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(25mg,82μmol)。将反应混合物升温至23℃并搅拌24h。将反应物用水(5mL)淬灭，然后用EtOAc(3x5mL)萃取。将有机相合并，用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。将粗物质通过反相HPLC(方法A，5-60％梯度)纯化以得到1-(叔丁基)-N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-吡唑-3-甲酰胺，为米色固体(14.6mg，产率39％)。LCMS m/z＝455.1[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.12(s,1H),8.66(t,J＝6.4Hz,1H),8.33(s,1H),8.18(d,J＝2.4Hz,1H),8.15-8.08(m,3H),7.92(d,J＝2.4Hz,1H),7.54(d,J＝8.5Hz,2H),7.22-7.13(m,1H),6.66(d,J＝2.4Hz,1H),4.55(d,J＝6.7Hz,2H),3.95-3.83(m,3H),1.57(s,9H)。
实施例2：1-(叔丁基)-N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-吡唑-4-甲酰胺的合成
按照与实施例1，步骤8描述的方法类似的方法，由(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例1，步骤7)和1-(叔丁基)-1H-吡唑-4-甲酸获得1-(叔丁基)-N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-吡唑-4-甲酰胺，为米色固体(15.7mg，产率42％)。将粗物质通过反相HPLC(方法A，5-55％梯度)纯化。LCMS m/z＝455.1[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.13(s,1H),8.67(t,J＝5.8Hz,1H),8.34-8.32(m,2H),8.18(d,J＝2.4Hz,1H),8.13-8.10(m,3H),7.92(s,1H),7.52(d,J＝8.5Hz,2H),7.15(d,J＝1.8Hz,1H),4.54(d,J＝6.1Hz,2H),3.90(s,3H),1.53(s,9H)。
实施例3：2-(叔丁基)-N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-2H-四唑-5-甲酰胺的合成
按照与实施例1，步骤8的方法类似的方法，由(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例1，步骤7)和2-(叔丁基)-2H-四唑-5-甲酸获得2-(叔丁基)-N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-2H-四唑-5-甲酰胺，为米色固体(17.7mg，产率47％)。将粗物质通过反相HPLC(方法A，5-55％梯度)纯化。LCMS m/z＝457.1[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.67(t,J＝6.1Hz,1H),9.13(s,1H),8.33(s,1H),8.18(d,J＝2.5Hz,1H),8.14-8.10(m,3H),7.56(d,J＝7.9Hz,2H),7.16(d,J＝2.6Hz,1H),4.60(d,J＝6.1Hz,2H),3.90(s,3H),1.74(s,9H)。
实施例4：1-(叔丁基)-N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺的合成
按照与实施例1，步骤8的程序类似的程序，由(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例1，步骤7)和1-(叔丁基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸获得1-(叔丁基)-N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺，为米色固体(18.2mg，产率49％)。将粗物质通过反相HPLC(方法A，5-55％梯度)纯化。LCMS m/z＝456.1[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.18(t,J＝6.0Hz,1H),9.12(s,1H),8.71(s,1H),8.33(s,1H),8.19-8.18(m,1H),8.12-8.09(m,3H),7.54(d,J＝8.5Hz,2H),7.15(d,J＝2.7Hz,1H),4.57(d,J＝6.1Hz,2H),3.90(s,3H),1.64(s,9H)。
实施例5：N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的合成
按照与实施例1，步骤8的程序类似的程序，由(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例1，步骤7)和5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸钾获得N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺，为黄色固体(13.2mg，产率35％)。将粗物质通过反相HPLC(方法A，5-60％梯度)纯化。LCMS m/z＝455.0[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.54(t,J＝6.1Hz,1H),9.13(s,1H),8.34(s,1H),8.19(d,J＝2.7Hz,1H),8.13-8.11(m,3H),7.54(d,J＝8.5Hz,2H),7.16(d,J＝1.8Hz,1H),4.56(d,J＝6.1Hz,2H),3.90(s,3H),1.54(s,3H),1.41-1.37(m,2H),1.18-1.16(m,2H)。
实施例6. 5-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,3,4-噁二唑-2-甲酰胺
1.(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将(2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(200mg,569.4μmol)、4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5，133.06mg,569.4μmol)、K2CO3(236.11mg,1.71mmol)和Pd(dppf)Cl2(20.83mg,28.5μmol)的混合物溶解在二噁烷(4.56mL)和水(1.14mL)中，并使N2鼓泡通过混合物5min。将反应物在N2气氛下加热至100℃并在100℃下搅拌过夜。将冷却的反应物浓缩并通过硅胶柱色谱法(梯度洗脱0-100％ EtOAc:庚烷)纯化以得到(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(218mg，产率90.6％)，为浅黄色固体。LCMS m/z＝432.2[M+H]+。
2.(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐的制备
将(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(218mg,516.0μmol)溶解在MeOH(5.16mL)中，添加HCl溶液(1.25M于MeOH中,4.13mL,5.17mmol)，并将反应物在50℃下搅拌过夜。将反应物在真空下浓缩并干燥以得到(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(208mg，粗品)，为黄色固体。LCMS m/z＝323.1[M+H]+。
3. 5-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,3,4-噁二唑-2-甲酰胺的制备
制备(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(320mg)、DCM(8mL)和DIPEA(1.5mL)的储备溶液。将储备溶液(1.2mL)添加到含有5-叔丁基-1,3,4-噁二唑-2-甲酸钾(25mg,121.4μmol)的小瓶中，然后冷却至0℃。添加HATU(52毫克)，并将反应物在RT下搅拌过夜。将反应混合物用DCM(2mL)和水(2mL)稀释，摇晃小瓶并分离各层。将水层用DCM(2mL)萃取并将合并的有机萃取物进行蒸发。将残余物通过制备型HPLC(方法B1，5-60％梯度)纯化以得到5-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,3,4-噁二唑-2-甲酰胺。LCMS m/z＝475.1[M+H]+。1H NMR(DMSO-d6)δ:9.91(t,J＝6.1Hz,1H),9.18(d,J＝1.2Hz,1H),8.37(s,1H),8.21(d,J＝2.4Hz,1H),8.13(s,1H),7.98(s,1H),7.88-7.97(m,1H),7.62(s,1H),7.21(d,J＝2.4Hz,1H),4.62(d,J＝6.1Hz,2H),3.91(s,3H),1.40(s,9H)。
实施例7. 2-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-2H-四唑-5-甲酰胺
按照与实施例6，步骤3中描述的程序类似的程序，由2-叔丁基四唑-5-甲酸和(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例6，步骤2)获得2-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-2H-四唑-5-甲酰胺。将粗产物通过制备型HPLC(方法B1，5-60％梯度)纯化。LCMSm/z＝475.1[M+H]+1H NMR(DMSO-d6)δ:9.66(t,J＝6.1Hz,1H),9.18(d,J＝1.2Hz,1H),8.37(s,1H),8.25-8.20(m,1H),8.13(s,1H),7.99(dd,J＝7.9,1.8Hz,1H),7.94(dd,J＝11.0,1.8Hz,1H),7.64-7.55(m,1H),7.25-7.19(m,1H),4.65(d,J＝6.1Hz,2H),3.91(s,3H),1.74(s,9H)。
实施例8.N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
使用与用于实施例6，步骤3的方法类似的方法，由(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例6，步骤2)和5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸钾获得N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺。将粗物质通过制备型HPLC(方法B1，梯度5-60％)纯化。LCMS m/z＝473.0[M+H]+。1H NMR(DMSO-d6)δ:9.54(t,J＝5.8Hz,1H),9.18(s,1H),8.37(s,1H),8.21(d,J＝2.4Hz,1H),8.13(s,1H),8.00(dd,J＝7.9,1.8Hz,1H),7.94(dd,J＝11.0,1.2Hz,1H),7.57(t,J＝7.9Hz,1H),7.22(d,J＝2.4Hz,1H),4.60(d,J＝6.1Hz,2H),3.91(s,3H),1.55(s,3H),1.44-1.32(m,2H),1.25-1.08(m,2H)。
实施例9至13
按照与实施例6，步骤3中描述的程序类似的程序，由(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例6，步骤2)和适当的甲酸制备下表中的化合物。
实施例14. 5-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,3,4-噁二唑-2-甲酰胺
1.(2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
向(4-溴-2-甲基苄基)氨基甲酸叔丁酯(80g,266.50mmol)和(BPin)2(81.21g,319.80mmol)在二噁烷(1L)中的溶液中添加KOAc(78.46g,799.5mmol)和Pd(dppf)Cl2(9.75g,13.32mmol)，并将混合物在N2气氛下在90℃下搅拌16h。将反应混合物用H2O(600mL)稀释并用EtOAc(3x 500mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥并过滤。将滤液真空浓缩，并将残余物通过硅胶柱色谱法(PE/EtOAc＝20/1)纯化以得到(2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(85g，产率91.9％)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:7.69-7.58(m,2H),7.30-7.26(m,1H),4.72(br s,1H),4.36(d,J＝4.8Hz,2H),2.35(s,3H),1.48(m,9H),1.38(s,12H)。
2.(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5，500mg,2.14mmol)、(2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(900mg,2.59mmol)、K2CO3(700mg,5.06mmol)和Pd(dppf)Cl2(30mg,41.0μmol)的混合物在N2下脱气，然后添加二噁烷(10mL)和水(2mL)，并将反应物在90℃下在密封容器中搅拌20min。使反应物停止加热，使其冷却至RT，然后用水(10mL)和EtOAc(10mL)稀释。使各相分离，将水层用EtOAc(2x 10mL)萃取，合并有机层并蒸发至干。将粗物质在硅胶上纯化(50％至100％EtOAc于庚烷中)以得到(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯，为浅黄色固体(830mg，产率92.7％)。LCMS m/z＝419.3[M+H]+
3. 2-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(5-(哌嗪-1-基)嘧啶-4-基)苄基)-2H-四唑-5-甲酰胺二盐酸盐的制备
将(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(830mg,1.98mmol)在1.25M甲醇HCl(16mL)中的溶液在RT下搅拌16h。将混合物加热至剧烈回流1h，然后真空浓缩以得到2-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(5-(哌嗪-1-基)嘧啶-4-基)苄基)-2H-四唑-5-甲酰胺二盐酸盐，为浅黄色固体。LCMS m/z＝319.2[M+H]+
4. 5-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,3,4-噁二唑-2-甲酰胺的制备
底物储备溶液-向8mL小瓶中添加2-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(5-(哌嗪-1-基)嘧啶-4-基)苄基)-2H-四唑-5-甲酰胺二盐酸盐(175mg)和在DMF(2.5mL)中的DIPEA(250μL)，并将混合物搅拌10min。
向含有5-叔丁基-1,3,4-噁二唑-2-甲酸钾(20mg,96.03μmol)的小瓶中添加600μL的底物储备溶液，然后添加(125.0mg,196.43μmol,纯度50％)，并将反应物在RT下搅拌2h。通过添加饱和NaHCO3(3mL)淬灭反应，并用EtOAc(3mL)萃取。将所得水性浆液进一步用EtOAc(3x 3mL)萃取，并将合并的有机层浓缩至干。将残余物用DMSO(2mL)稀释并通过0.2um注射器过滤器。将产物通过制备型HPLC(方法B1，5-60％梯度)分离。LCMS m/z＝471.2[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.85(t,J＝6.10Hz,1H)9.13(s,1H)8.34(s,1H)8.19(d,J＝2.44Hz,1H)8.12(s,1H)7.95(s,2H)7.50(s,1H)7.15(d,J＝2.44Hz,1H)4.56(d,J＝6.10Hz,2H)3.92(s,3H)2.49(s,3H)1.41(s,9H)。
实施例15. 2-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-2H-四唑-5-甲酰胺
按照实施例14，步骤4中所用的方法，由2-叔丁基-2H-1,2,3,4-四唑-5-甲酸和2-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(5-(哌嗪-1-基)嘧啶-4-基)苄基)-2H-四唑-5-甲酰胺二盐酸盐(实施例14，步骤3)制备2-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-2H-四唑-5-甲酰胺。LCMS m/z＝471.3[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.58(s,1H)9.13(s,1H)8.34(s,1H)8.19(d,J＝2.44Hz,1H)8.12(s,1H)7.95(s,2H)7.51-7.43(m,1H)7.18-7.12(m,1H)4.59(d,J＝6.10Hz,2H)3.91(s,3H)2.50-2.48(s,3H)1.75(s,9H)。
实施例16. 1-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
按照实施例14，步骤4中所用的方法，由1-叔丁基三唑-4-甲酸和2-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(5-(哌嗪-1-基)嘧啶-4-基)苄基)-2H-四唑-5-甲酰胺二盐酸盐(实施例14，步骤3)制备1-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺。LCMS m/z＝470.2[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.12(s,1H)9.07(s,1H)8.73(s,1H)8.34(s,1H)8.18(d,J＝2.44Hz,1H)8.12(s,1H)7.94(s,2H)7.50-7.40(m,1H)7.16(d,J＝2.44Hz,1H)4.55(d,J＝6.10Hz,2H)3.91(s,3H)2.49-2.47(m,3H)1.65(s,9H)。
实施例17. 1-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-吡唑-4-甲酰胺
按照实施例14，步骤4中所用的方法，由1-叔丁基吡唑-4-甲酸和2-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(5-(哌嗪-1-基)嘧啶-4-基)苄基)-2H-四唑-5-甲酰胺二盐酸盐(实施例14，步骤3)制备1-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-吡唑-4-甲酰胺。LCMS m/z＝469.3[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm9.13(d,J＝1.22Hz,1H)8.58-8.47(m,2H)8.35(d,J＝5.49Hz,2H)8.19(d,J＝2.44Hz,1H)8.12(s,1H)7.94(s,4H)7.45(d,J＝8.55Hz,1H)7.15(d,J＝2.44Hz,1H)4.51(d,J＝5.49Hz,2H)3.92(s,3H)2.47(s,3H)1.59-1.48(m,9H)。
实施例18. 1-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-吡唑-3-甲酰胺
按照实施例14，步骤4中所用的方法，由1-叔丁基吡唑-3-甲酸和2-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(5-(哌嗪-1-基)嘧啶-4-基)苄基)-2H-四唑-5-甲酰胺二盐酸盐(实施例14，步骤3)制备1-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-吡唑-3-甲酰胺。LCMS m/z＝469.3[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm9.12(d,J＝1.22Hz,1H)8.54(t,J＝6.10Hz,1H)8.34(s,1H)8.18(d,J＝2.44Hz,1H)8.12(s,1H)8.01-7.86(m,2H)7.49-7.40(m,1H)7.16(s,1H)6.72-6.62(m,1H)4.53(d,J＝6.10Hz,2H)3.91(s,3H)2.48(s,3H)1.58(s,9H)。
实施例19：3-(叔丁基)-N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酰胺的合成
向(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例1，步骤7，30mg,99μmol)和3-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸乙酯(29mg,148μmol)在THF(1.5mL)中的溶液中添加DABAL-Me3(38mg,148μmol)，并将反应物加热至45℃并在此温度下搅拌18h。将反应混合物冷却至环境温度并用水(1mL)、1M HCl溶液(1mL)和EtOAc(5mL)稀释。分离各层，并用另外部分的EtOAc萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。将粗物质通过反相HPLC(方法A，5-65％梯度)纯化以得到3-(叔丁基)-N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酰胺，为米色固体(4.7mg，产率10％)。LCMS m/z＝457.0[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.98(t,J＝6.2Hz,1H),9.13(s,1H),8.34(s,1H),8.19(d,J＝2.4Hz,1H),8.14-8.11(m,3H),7.57(d,J＝7.9Hz,2H),7.16(s,1H),4.58(d,J＝6.1Hz,2H),3.90(s,3H),1.37(s,9H)。
实施例20：5-(1-(氟甲基)环丙基)-N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的合成
按照与实施例19的方法类似的方法，由(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例1，步骤7)和5-(1-(氟甲基)环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸乙酯获得5-(1-(氟甲基)环丙基)-N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(29.6mg，产率47％)。将粗物质通过反相HPLC(方法C，5-55％梯度)纯化。LCMS m/z＝473.1[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.60(t,J＝6.4Hz,1H),9.13(s,1H),8.34(s,1H),8.19(d,J＝2.4Hz,1H),8.16-8.08(m,3H),7.54(d,J＝7.9Hz,2H),7.20-7.13(m,1H),4.83(s,1H),4.73(s,1H),4.57(d,J＝6.1Hz,2H),3.90(s,3H),1.60-1.52(m,2H),1.51-1.44(m,2H)。
实施例21：2-(叔丁基)-N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-2H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺的合成
按照与实施例19的方法类似的方法，由(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例1，步骤7)和2-(叔丁基)-2H-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯(Journal of Medicinal Chemistry(2018),61(8),3370-3388)获得2-(叔丁基)-N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-2H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(23.8mg，产率39％)。将粗物质通过反相HPLC(方法C，5-60％梯度)纯化。LCMS m/z＝456.2[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.13(s,1H),9.05(t,J＝6.1Hz,1H),8.33(s,1H),8.18(d,J＝2.4Hz,1H),8.16(s,1H),8.14-8.10(m,3H),7.55(d,J＝7.9Hz,2H),7.19-7.14(m,1H),4.57(d,J＝6.1Hz,2H),3.90(s,3H),1.69-1.62(m,9H)。
实施例22：5-(1-氟-2-甲基丙烷-2-基)-N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.(E)-2-氨基-2-(羟基亚氨基)乙酸乙酯的合成
向氰基甲酸乙酯(10g,101mmol)在EtOH(75mL)和H2O(25mL)中的溶液中添加Na2CO3(10.7g,101mmol)和盐酸羟胺(7.0g,101mmol)，并将反应混合物在25℃下搅拌12h。将混合物倒入EtOAc(100mL)中，过滤，并将滤液真空浓缩。将残余物重新溶解在EtOAc(100mL)中，过滤，并将滤液真空浓缩以得到(E)-2-氨基-2-(羟基亚氨基)乙酸乙酯，为黄色固体(10g，粗品)，其无需进一步纯化即可继续使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.37-4.32(m,2H),1.38-1.30(m,3H)。
2.(E)-2-(3-羟基-2,2-二甲基丙酰胺基)-2-(羟基亚氨基)乙酸乙酯的合成
将(E)-2-氨基-2-(羟基亚氨基)乙酸乙酯(500mg,3.8mmol)、3-羟基-2,2-二甲基丙酸(447mg,3.8mmol)、HATU(2.9g,7.6mmol)和DIPEA(977mg,7.6mmol)在DCM(10mL)中的混合物在25℃下搅拌1h。添加另外体积的DCM(30mL)并将有机相用H2O(10mL x 3)洗涤。将有机相干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗产物经硅胶柱色谱法(PE/EtOAc，5:1至0:1)纯化以得到(E)-2-(3-羟基-2,2-二甲基丙酰胺基)-2-(羟基亚氨基)乙酸乙酯，为白色固体(500mg，产率：57％)。LCMS m/z＝233.1[M+H]+。
3. 5-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸乙酯的合成
将(E)-2-(3-羟基-2,2-二甲基丙酰胺基)-2-(羟基亚氨基)乙酸乙酯(500mg,2.2mmol)在吡啶(10mL)中的溶液加热至80℃并在此温度下搅拌12h。将反应混合物真空浓缩，并将残余物通过硅胶柱色谱法(PE/EtOAc，10:1至1:1)纯化以得到5-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸乙酯，为无色油状物(250mg，产率：54％)。LCMS m/z＝215.1[M+H]+。
4. 5-(2-甲基-1-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸乙酯的合成
在0℃下向5-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸乙酯(430mg,2.0mmol)和DIPEA(390mg,3.0mmol)在DCM(10mL)中的溶液中添加Tf2O(566mg,2.0当量)，并将反应混合物在25℃下搅拌2h。添加另外体积的DCM(40mL)并将有机相用H2O(20mL x 3)洗涤。将有机相干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗产物通过硅胶柱色谱法(PE/EtOAc，10:1至1:1)纯化以得到5-(2-甲基-1-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸乙酯，为无色油状物(600mg，产率：86％)。LCMS m/z＝347.1[M+H]+。
5. 5-(1-氟-2-甲基丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸乙酯的合成
将5-(2-甲基-1-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸乙酯(600mg,1.7mmol)和四丁基二氟化铵(536mg,1.9mmol)在THF(30mL)中的溶液加热至40℃并在此温度下搅拌12h。将反应混合物冷却至环境温度并真空浓缩。将粗产物通过硅胶柱色谱法(PE/EtOAc，10:1至3:1)纯化以得到5-(1-氟-2-甲基丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸乙酯，为无色油状物(330mg，产率：88％)。LCMS m/z＝217.1[M+H]+。
6. 5-(1-氟-2-甲基丙烷-2-基)-N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的合成
按照与实施例19的方法类似的方法，由5-(1-氟-2-甲基丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸乙酯和(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例1，步骤7)获得5-(1-氟-2-甲基丙烷-2-基)-N-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(37.6mg，产率60％)。将粗物质通过反相HPLC(方法C，梯度5-55％)纯化。LCMS m/z＝475.2[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ＝9.65(t,J＝6.1Hz,1H),9.13(d,J＝1.2Hz,1H),8.34(s,1H),8.19(d,J＝2.4Hz,1H),8.16-8.08(m,3H),7.55(d,J＝8.5Hz,2H),7.19-7.13(m,1H),4.68(s,1H),4.63-4.53(m,4H),3.90(s,3H),1.45(d,J＝1.2Hz,9H)
实施例23. 5-(叔丁基)-N-(4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.(4-(6-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(350mg,1.05mmol)、4,6-二氯吡唑并[1,5-a]吡嗪(200mg,1.06mmol)、K3PO4(2.0M,824.4uL)和二噁烷(5.0mL)的混合物在RT下搅拌并通过鼓入N2脱气10min。添加Pd(t-Bu3P)2(15mg,29.35μmol)，密封小瓶，并将反应物在40℃下搅拌72h。将反应物用水(10mL)稀释并用EtOAc(3x 10mL)萃取。将合并的有机层浓缩至干并通过硅胶柱色谱法(庚烷至EtOAc)纯化以得到(4-(6-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯，为浅黄色固体(290mg，产率76.3％)。LCMS m/z＝359.1[M+H]+。
2.(4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
向含有(4-(6-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(160mg,445.9μmol)的小瓶中添加Pd2(dba)3(20mg,21.8μmol)、Cs2CO3(450mg,1.38mmol)和RuPhos(20mg,42.9μmol)，密封小瓶并在N2下脱气。添加二噁烷(5.04mL)和吗啉(65mg,746.1μmol)，并将反应物在100℃下搅拌4h。将冷却的反应物用水(10mL)稀释，用EtOAc(3x 10mL)萃取，并将合并的有机层浓缩至干以得到亮橙色固体。将其通过硅胶色谱法(庚烷至EtOAc)纯化以得到(4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯，为浅黄色固体(150mg，产率82.2％)。LCMS m/z＝410.2[M+H]+
3.(4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐的制备
将(4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(150mg,366.3μmol)和4M HCl(500uL)在二噁烷(5.00mL)中的溶液在50℃下搅拌16h。将反应混合物真空浓缩并与MeOH共沸以得到(4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐，为黄褐色固体(148mg，粗品)。LCMS m/z＝310.1[M+H]+
4. 5-(叔丁基)-N-(4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
向小瓶中添加在二噁烷(500uL)中的(4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺盐酸盐(20mg,57.8μmol)、DABAL-Me3(15mg,58.5μmol)和5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-甲酸乙酯(20mg,100.9μmol)，密封小瓶并在120℃下搅拌10min。向冷却的混合物中添加(250mg)，然后添加水(0.5mL)和EtOH(2mL)并将混合物搅拌15min。将浆液离心并倒出母液。将剩余固体用EtOH(2x 5mL)萃取，重复离心并收集母液。将合并的母液浓缩至干以得到亮黄色固体。将其通过制备型HPLC(方法C2，5-60％梯度)纯化以提供5-(叔丁基)-N-(4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺。LCMS m/z＝462.2[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm9.59(br t,J＝6.10Hz,1H)8.16(s,1H)8.11-7.98(m,2H)7.53(d,J＝8.55Hz,1H)7.12-7.02(m,1H)4.65-4.45(m,2H)3.87-3.70(m,3H)1.44(s,9H)。
实施例24：3-(叔丁基)-N-(4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酰胺
按照实施例23，步骤4中所用的方法，由5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-2-甲酸酯和(4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺盐酸盐(实施例23，步骤3)制备3-(叔丁基)-N-(4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酰胺。LCMS m/z＝462.2[M+H]+。1H NMR(DMSO-d6)δ:10.04-9.92(m,1H),8.16(s,1H),8.11-8.04(m,2H),8.03(d,J＝2.4Hz,1H),7.53(d,J＝8.55Hz,2H),7.12-7.02(m,1H),4.65-4.45(m,2H),3.87-3.70(m,4H),1.44(s,9H)。
实施例25.2-(叔丁基)-N-(4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-2H-四唑-5-甲酰胺
底物储备溶液-向含有(4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例23，步骤3，105 mg,0.339 mmol)的小瓶中添加DMF(5 mL)，然后添加DIPEA(130mg)并搅拌混合物。
将(纯度50％)添加到2-(叔丁基)-2H-四唑-5-甲酸(80μmol)和底物储备溶液(1 mL)的混合物中，并将反应物在50℃下搅拌3 h。使反应物冷却至RT，用水(6 mL)稀释并静置过夜。将小瓶离心，倒出母液并丢弃。使固体在水(5 mL)中浆化，涡旋，离心，倒出母液并丢弃。将粗物质溶解在DMSO(2.2 mL)中并通过制备型HPLC(方法C2，梯度5-60％)纯化以得到2-(叔丁基)-N-(4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-2H-四唑-5-甲酰胺。LCMS m/z＝462.2[M+H]+。1HNMR(500 MHz,DMSO-d6)δppm 9.66(t,J＝6.41 Hz,1 H)8.15(d,J＝1.22 Hz,1 H)8.06(d,J＝7.94 Hz,1 H)8.03(d,J＝2.44 Hz,1 H)7.54(d,J＝8.55 Hz,1 H)7.10-7.00(m,1 H)4.59(d,J＝6.10 Hz,2 H),3.86-3.72(m,4 H)1.74(s,9 H)。
实施例26至29
按照实施例25中描述的方法，由(4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例23，步骤3)和适当的甲酸制备下表中的化合物。
实施例30. 4-异丁基-1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮
1. 4-(4-溴-2-甲基苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
在0℃下将PBr3(0.95mL,10mmol)滴加到(4-溴-2-甲基苯基)甲醇(1.3g,6.7mmol)在DCM(50mL)中的溶液中，将反应物在RT下搅拌1h，然后用冰水(50mL)淬灭。用50％ NaOH水溶液将pH调节至7.0，并将混合物用EtOAc(100mL x 2)萃取。将合并的有机层用水(50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩以得到4-溴-1-(溴甲基)-2-甲基苯(1.56g，产率：89％)，为白色固体，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。
在冰浴中向3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.2g,6.0mmol)在THF(200mL)中的溶液中添加NaH(320mg,8.1mmol)，并将混合物在0℃下搅拌1h。在10min的时间段内滴加4-溴-1-(溴甲基)-2-甲基苯(1.42g,5.4mmol)在THF(5mL)中的溶液，去除冰浴并将混合物在RT下搅拌2h。将混合物用冰水(50mL)稀释，并用EtOAc(100mL x 2)萃取。将合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱纯化(PE/EtOAc＝5:1)以得到4-(4-溴-2-甲基苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.6g，产率：77％)，为白色固体。LCMSm/z＝327.0[M+H]+。
2. 4-(2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
将4-(4-溴-2-甲基苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(500mg,1.30mmol)、(BPin)2(330.12mg,1.30mmol)、Pd(dppf)Cl2(95.12mg,130μmol)和KOAc(382.75mg,3.90mmol)在二噁烷(8.0mL)中的混合物脱气，并加热至95℃，持续16h。冷却至RT后，将粗品通过过滤并浓缩滤液。将残余物在硅胶上进行色谱分离(庚烷/EtOAc0-100％)以得到4-(2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(598mg，粗品)。LCMS m/z＝375.3[M+H]+。
3. 4-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
将4-(2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(238mg,553.05μmol)、4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5,129.23mg,553.05μmol)、Pd(dppf)Cl2(40.47mg,55.30μmol)和K2CO3(229.31mg,1.66mmol)在二噁烷(3.0mL)和水(1.0mL)中的混合物脱气，并加热至95℃，持续16h。将冷却的混合物通过过滤并真空浓缩。将残余物在硅胶上进行色谱分离(庚烷/EtOAc 0-100％)以得到4-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(136mg，产率49％)。LCMS m/z＝502.3[M+H]+。
4. 1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮盐酸盐的制备
将HCl(4M,203.36uL)添加到4-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(136mg,271.14μmol)在MeOH(2.0mL)中的溶液中，并将反应物在RT下搅拌16h。将反应混合物减压蒸发以得到1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮盐酸盐(114mg，粗品)，其无需进一步纯化即可使用。LCMS m/z＝402.3[M+H]+
5. 4-异丁基-1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮的制备
将NaBH(OAc)3(62.09mg,292.94μmol)添加到1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮盐酸盐(58.80mg,146.47μmol)、异丁醛(25.23mg,351.53μmol)和AcOH(8.80mg,146.47μmol)在DCM(2.0mL)中的溶液中，并将反应物在RT下搅拌16h。将混合物用MeOH淬灭并真空浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化以得到4-异丁基-1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮(53mg，产率75％)。LCMS m/z＝458.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ:8.84-8.75(m,1H),8.24-8.17(m,1H),8.13-8.04(m,2H),8.00-7.88(m,2H),7.51-7.41(m,1H),7.09-7.02(m,1H),4.85(br s,2H),4.13-4.05(m,2H),4.01-3.92(m,3H),3.70-3.57(m,4H),3.18-3.08(m,2H),2.54-2.45(m,3H),2.29-2.14(m,1H),1.08(d,J＝6.78Hz,6H)。
实施例31. 1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-4-新戊基哌嗪-2-酮
按照实施例30，步骤5中描述的方法，由1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮盐酸盐(实施例30，步骤4)和新戊醛(pivaldehyde)获得1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-4-新戊基哌嗪-2-酮(25.1mg，产率40％)。LCMS m/z＝472.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ:8.87-8.79(m,1H),8.26-8.19(m,1H),8.12-8.06(m,2H),8.01-7.91(m,2H),7.50-7.41(m,1H),7.10-7.02(m,1H),4.85-4.80(m,2H),4.10-4.03(m,2H),4.00-3.94(m,3H),3.67-3.53(m,4H),3.14-3.04(m,2H),2.53-2.46(m,3H),1.14(s,9H).
实施例32. 1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-4-(氧杂环丁烷-3-基甲基)哌嗪-2-酮
按照实施例30，步骤5中描述的方法，由1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮盐酸盐(实施例30，步骤4)和氧杂环丁烷-3-甲醛获得1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-4-(氧杂环丁烷-3-基甲基)哌嗪-2-酮(19.2mg，产率52％)。LCMS m/z＝472.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ:8.84-8.78(m,1H),8.23-8.19(m,1H),8.12-8.05(m,2H),8.00-7.91(m,2H),7.48-7.39(m,1H),7.08-7.03(m,1H),4.96-4.91(m,1H),4.83(br s,2H),4.55-4.49(m,2H),4.14-4.09(m,1H),4.00-3.98(m,5H),3.74(dd,J＝4.6,10.7Hz,1H),3.64-3.44(m,6H),2.47(br s,3H)。
实施例33. 1-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-4-新戊基哌嗪-2-酮
1. 4-(4-溴苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
在0℃下将NaH(57.60mg,2.40mmol)添加到3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(400mg,2.0mmol)在THF(4.0mL)中的溶液中，将混合物搅拌1h，添加1-溴-4-(氯甲基)苯(410.96mg,2.0mmol)，并将反应物在RT下搅拌2h。将反应物用NaHCO3水溶液淬灭，用EtOAc萃取，将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩。将残余物在硅胶上进行色谱分离(庚烷/EtOAc 0-100％)以得到4-(4-溴苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(54.50mg，产率7.4％)。
2. 4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
将4-((4-溴苯基)甲基)-3-氧代-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(54.30mg,147.05μmol)、(BPin)2(37.34mg,147.05μmol)、KOAc(43.29mg,441.15μmol)和Pd(dppf)Cl2.DCM(12.01mg,14.71μmol)在二噁烷(2.0mL)中的混合物脱气，并在95℃下加热16h。将冷却的混合物通过过滤并将滤液浓缩。将残余物在硅胶上进行色谱分离(庚烷/EtOAc 0-100％)以得到4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(53.30mg，产率87.1％)。
3. 4-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
按照与实施例30，步骤3中使用的方法类似的方法，由4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯和4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5)获得4-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(31.3mg，产率50.1％)。LCMS m/z＝488.4[M+H]+
4. 1-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮盐酸盐的制备
按照实施例30，步骤4中所用的方法，由4-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯获得粗制的1-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮盐酸盐。LCMS m/z＝388.3[M+H]+。
5. 1-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-4-新戊基哌嗪-2-酮的制备
按照与用于实施例30，步骤5的方法类似的方法，由1-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮盐酸盐和新戊醛获得1-(4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-4-新戊基哌嗪-2-酮(14mg，纯度95％)。LCMSm/z＝458.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.58(s,1H),8.11-8.04(m,3H),8.02-7.93(m,2H),7.50-7.40(m,2H),7.00-6.92(m,1H),4.83 -4.73(m,2H),4.07-3.99(m,3H),3.94-3.86(m,2H),3.60-3.53(m,2H),3.39-3.32(m,2H),2.85-2.78(m,2H),1.12(s,9H)。
实施例34. 1-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-4-异丁基哌嗪-2-酮
1.4-(4-溴-2-氟苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
按照与实施例33，步骤1中使用的方法类似的方法，由4-溴-1-(氯甲基)-2-氟苯和3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯获得4-(4-溴-2-氟苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(420mg，产率20.7％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.31-7.27(m,2H),7.26-7.22(m,1H),4.63(s,2H),4.14-4.12(m,2H),3.65-3.60(m,2H),3.36-3.31(m,2H),1.47(s,9H)。
2.4-(2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
按照与实施例33，步骤2中使用的方法类似的方法，由4-(4-溴-2-氟苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯获得4-(2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(235mg粗品)。
3. 4-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
按照与实施例30，步骤3中使用的方法类似的方法，由4-(2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯和4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5)获得4-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(54mg，产率19.7％)。LCMSm/z＝506.3[M+H]+。
4. 1-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮盐酸盐的制备
按照实施例30，步骤4中所用的方法，由4-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯获得粗制的1-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮盐酸盐。LCMS m/z＝406.3[M+H]+
5. 1-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-4-异丁基哌嗪-2-酮的制备
按照与用于实施例30，步骤5的方法类似的方法，由1-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮盐酸盐和异丁醛获得1-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-4-异丁基哌嗪-2-酮(4mg，纯度95％)。LCMS m/z＝462.3[M+H]+1H NMR(400MHz,CDCl3,d):8.61-8.53(m,1H),8.09-8.03(m,1H),8.00-7.94(m,2H),7.90-7.86(m,1H),7.85-7.79(m,1H),7.58-7.51(m,1H),6.99-6.94(m,1H),4.80-4.70(m,2H),4.00(s,3H),3.41-3.33(m,2H),3.24-3.18(m,2H),2.70-2.62(m,2H),2.20-2.13(m,2H),1.87-1.73(m,1H),0.92(d,J＝6.5Hz,6H)。
实施例35. 1-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-4-新戊基哌嗪-2-酮
按照与用于实施例30，步骤5的方法类似的方法，由1-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮盐酸盐(实施例34，步骤4)和新戊醛获得1-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-4-新戊基哌嗪-2-酮(15mg)。LCMS m/z＝476.4[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3,d):8.62-8.57(m,1H),8.11-8.05(m,1H),8.03-7.96(m,2H),7.93-7.79(m,2H),7.63-7.49(m,1H),7.04-6.92(m,1H),4.88-4.75(m,2H),4.03(s,3H),3.93-3.86(m,2H),3.72-3.64(m,2H),3.45-3.36(m,2H),2.88-2.79(m,2H),1.12(s,9H)。
实施例36:4-异丁基-3-甲基-1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮
1. 4-((4-溴-2-甲基-苯基)甲基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
将4-溴-1-(氯甲基)-2-甲基-苯(1.02g,4.67mmol)、2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.00g,4.67mmol)和叔丁醇钠(1.35g,14.0mmol)在二噁烷(5.0mL)中的混合物在95℃下加热过夜。将冷却的混合物用EtOAc稀释，用水洗涤并经Na2SO4干燥。将浓缩的残余物在硅胶上进行色谱分离(庚烷/EtOAc 0-100％)以得到4-((4-溴-2-甲基-苯基)甲基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.37g，产率70％)。LCMS m/z＝297.0[M+H]+
2. 2-甲基-4-(2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
按照与实施例30，步骤2中使用的方法类似的方法，由4-((4-溴-2-甲基-苯基)甲基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸叔丁酯获得2-甲基-4-(2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.41g，产率92％)。
3. 2-甲基-4-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
按照与实施例30，步骤3中描述的方法类似的方法，由4-((4-溴-2-甲基-苯基)甲基)-2-甲基-3-氧代-哌嗪-1-甲酸叔丁酯和4-氯-6-(1-甲基吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5)获得2-甲基-4-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(198.3mg，产率43％)。LCMS m/z＝516.3[M+H]+
4. 3-甲基-1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮盐酸盐的制备
按照实施例30，步骤4中描述的程序，由2-甲基-4-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯获得粗制的3-甲基-1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮盐酸盐。LCMS m/z＝416.2[M+H]+
5. 4-异丁基-3-甲基-1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮的制备
按照与实施例30，步骤5中使用的方法类似的方法，由3-甲基-1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮盐酸盐和异丁醛获得4-异丁基-3-甲基-1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮(39.5mg，产率30％)。LCMS m/z＝472.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.60(s,1H),8.09-8.05(m,1H),8.04(s,1H),8.00(s,1H),7.93-7.86(m,2H),7.32(d,J＝7.8Hz,1H),6.99-6.95(m,1H),4.89(d,J＝15.1Hz,1H),4.70(d,J＝15.1Hz,1H),4.08(br s,1H),4.03(s,3H),3.72-3.39(m,4H),3.11(dd,J＝8.4,12.9Hz,1H),2.94(dd,J＝5.5,13.1Hz,1H),2.43(s,3H),2.23-2.10(m,1H),1.79(d,J＝7.3Hz,3H),1.12(d,J＝6.5Hz,3H),1.10-1.07(m,3H)。
实施例37：3-甲基-1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-2-酮
按照与用于实施例30，步骤5的方法类似的方法，由3-甲基-1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)哌嗪-2-酮盐酸盐(实施例36，步骤5)和氧杂环丁-3-酮获得3-甲基-1-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-2-酮(67.4mg，产率46％)。LCMS m/z＝472.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.64(d,J＝1.0Hz,1H),8.10-8.08(m,1H),8.08-8.07(m,1H),8.03-8.01(m,1H),7.92-7.87(m,2H),7.31(d,J＝7.8Hz,1H),7.00(dd,J＝1.0,2.5Hz,1H),4.93-4.68(m,6H),4.31-4.22(m,1H),4.05(s,3H),3.77(q,J＝7.2Hz,1H),3.50-3.43(m,2H),3.40-3.30(m,1H),3.16-3.04(m,1H),2.43(s,3H),1.53(d,J＝7.0Hz,3H)。
实施例38. 2-(叔丁基)-5-(2-甲基-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)-4,5-二氢-6H-吡咯并[3,4-d]噻唑-6-酮
1. 4-(((4-溴-2-甲基苄基)氨基)甲基)-2-(叔丁基)噻唑-5-甲酸的制备
在0℃下向4-溴-2-甲基苄胺盐酸盐(1.68g,6.82mmol)在DMF(15mL)中的溶液中添加在DMF(10mL)中的DIPEA(3.0mL,22.8mmol)和4-(溴甲基)-2-(叔丁基)噻唑-5-甲酸酯(1.39g,4.54mmol)。使反应物升温至RT并搅拌12h。将混合物用水(40mL)稀释并用EtOAc(100mL x 2)萃取。将有机相用水(60mL x 2)洗涤，干燥并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(EtOAc/PE＝1/4)纯化以得到4-(((4-溴-2-甲基苄基)氨基)甲基)-2-(叔丁基)噻唑-5-甲酸，为黄色油状物(850mg,44％)。LCMS m/z＝425.1[M+H]+
2. 5-((4-溴-2-甲基-苯基)甲基)-2-叔丁基-4H-吡咯并[3,4-d]噻唑-6-酮的制备
向4-(((4-溴-2-甲基苄基)氨基)甲基)-2-(叔丁基)噻唑-5-甲酸(850mg,2.0mmol)在MeOH(10mL)和H2O(5mL)中的溶液中添加NaOH(320mg,8.0mmol)，并将反应混合物在RT下搅拌16h。除去MeOH后，将残余物用水(10mL)稀释并用HCl(1N)将pH调节至5-6。将混合物用EtOAc(50mL x 3)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并减压浓缩以得到5-((4-溴-2-甲基-苯基)甲基)-2-叔丁基-4H-吡咯并[3,4-d]噻唑-6-酮，为黄色固体(760mg，产率：96％)，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。LCMS m/z＝379.1[M+H]+。
3. 2-叔丁基-5-((2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苯基)甲基])-4H-吡咯并[3,4-d]噻唑-6-酮的制备
按照与用于实施例30，步骤2的方法类似的方法，由5-((4-溴-2-甲基-苯基)甲基)-2-叔丁基-4H-吡咯并[3,4-d]噻唑-6-酮获得2-叔丁基-5-((2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苯基)甲基])-4H-吡咯并[3,4-d]噻唑-6-酮(24.1mg，产率88％)。LCMS m/z＝427.3[M+H]+
4. 2-叔丁基-5-((2-甲基-4-[7-(1-甲基吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基]苯基)甲基)-4H-吡咯并[3,4-d]噻唑-6-酮的制备
将2-叔丁基-5-((2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苯基)甲基])-4H-吡咯并[3,4-d]噻唑-6-酮(24.0mg,56.29μmol)、5-氯-7-(1-甲基吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶(实施例1，步骤5，13.15mg,56.29μmol)、Pd(dppf)Cl2(4.12mg,5.63μmol)和K2CO3(23.34mg,168.87μmol)在二噁烷(2.0mL)和水(199.98uL)中的混合物脱气，并在95℃下加热16h。将冷却的混合物用EtOAc稀释，通过过滤，并将滤液真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(DCM/MeOH 0-30％)纯化以得到2-叔丁基-5-((2-甲基-4-[7-(1-甲基吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基]苯基)甲基)-4H-吡咯并[3,4-d]噻唑-6-酮(20.0mg，产率68％)。LCMS m/z＝498.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δ:8.24-6.63(m,8H),4.47-4.36(m,2H),4.01-3.75(m,5H),2.45(s,3H),1.54-1.41(m,9H)。
实施例39：1-叔丁基-N-[(5R)-8-[6-(1-甲基吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-(氧杂环丁烷-3-基)-1,3,4,5-四氢-2-苯并氮杂卓-5-基]三唑-4-甲酰胺
1.(R)-5-(1-(叔丁基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺基)-8-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[c]氮杂卓-2-甲酸叔丁酯的合成
将(R)-5-(1-(叔丁基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[c]氮杂卓-2-甲酸叔丁酯(WO2018/191577，实施例23，步骤2，500mg,926.8μmol)、4-氯-6-(1-甲基吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5，259.9mg,1.11mmol)、K2CO3(384.29mg,2.78mmol)和Pd(dppf)Cl2(33.91mg,46.34μmol)的混合物溶解在二噁烷(4.94mL)和水(1.24mL)中。使N2鼓泡通过混合物5min，并将反应物加热至100℃过夜。将冷却的反应物用EtOAc和水稀释，分离各层，将有机层用盐水洗涤并真空浓缩。所述物质以粗品形式(假设产率为100％)用于下一步骤。LCMS m/z＝611.0[M+H)]+。
2.(R)-1-(叔丁基)-N-(8-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-5-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺盐酸盐的合成
向(R)-5-(1-(叔丁基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺基)-8-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-1,3,4,5-四氢-2H-苯并[c]氮杂卓-2-甲酸叔丁酯(488mg,0.80mmol)在二噁烷(7.99mL)中的溶液中添加HCl(4M,1.20mL)，并将反应物在RT下搅拌过夜。将所得固体滤出，用EtOAc洗涤并风干以得到(R)-1-(叔丁基)-N-(8-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-5-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺盐酸盐(110mg，产率25.2％)，为橙色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.41(br d,J＝7.94Hz,1H),9.16(s,1H),8.82(s,1H),8.36(s,1H),8.30-8.18(m,2H),8.14(s,1H),7.53(br d,J＝7.94Hz,1H),7.31(br d,J＝2.44Hz,1H),5.65(t,J＝1.00Hz,1H),4.74-4.54(m,2H),4.43-4.18(m,2H),3.91(s,3H),2.38-2.14(m,2H),1.67(s,9H)。
3. 1-叔丁基-N-[(5R)-8-[6-(1-甲基吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-(氧杂环丁烷-3-基)-1,3,4,5-四氢-2-苯并氮杂卓-5-基]三唑-4-甲酰胺的合成
向(R)-1-(叔丁基)-N-(8-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-5-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺盐酸盐(55mg,96.95μmol)在MeOH(1.94mL)中的溶液中添加氧杂环丁烷-3-酮(34.9mg,485μmol)和NaCNBH3(18.3mg,291μmol)，并将反应混合物在RT下搅拌过夜。将物质浓缩并通过反相纯化(方法B2，5-45％梯度)纯化以得到(R)-1-(叔丁基)-N-(8-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-(氧杂环丁烷-3-基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-5-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(26.4mg，产率45.7％)，为淡黄色固体。LCMS m/z＝567.0[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.49(s,1H),9.19(s,1H),8.81(s,1H),8.34(s,1H),8.30-8.18(m,2H),8.14(s,1H),7.56(d,J＝1.00Hz,1H),7.21(br d,J＝1.83Hz,1H),5.71(s,1H),5.01-4.45(m,8H),3.92(s,2H),3.54(s,1H),2.43-2.25(m,2H),1.68(s,9H)
实施例40：(R)-1-(叔丁基)-N-(8-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-5-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
1.(R)-1-(叔丁基)-N-(8-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-5-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺的合成
向(R)-1-(叔丁基)-N-(8-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-5-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺盐酸盐(实施例39，步骤2，55.0mg,101μmol)在MeCN(1.01mL)中的溶液中添加2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸盐(46.7mg,201μmol)和K2CO3(41.7mg,302μmol)，并将反应混合物在N2下在80℃下搅拌过夜。将所述物质通过过滤，浓缩，并通过反相HPLC(方法B2，5-45％梯度)纯化以得到(R)-1-(叔丁基)-N-(8-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-5-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺16.9mg(产率27.8％)，为棕色固体。LCMS m/z＝593.0[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.14(s,1H),9.09(br d,J＝7.94Hz,1H),8.77(s,1H),8.33(s,1H),8.20(d,J＝2.44Hz,1H),8.12(s,1H),8.03(dd,J＝7.94,1.83Hz,1H),7.96(d,J＝1.83Hz,1H),7.46(br d,J＝8.55Hz,1H),7.17(dd,J＝2.44,1.22Hz,1H),5.51(t,J＝1.00Hz,1H),4.35(br d,J＝15.26Hz,2H),4.10(br d,J＝15.26Hz,2H),3.91(s,3H),3.26-3.21(m,2H),2.20-2.12(m,2H),1.67(s,9H)
实施例41. 5-(叔丁基)-N-((4-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺：
1.((4-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将N-((4-甲基-4-哌啶基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(296.83mg,1.30mmol)和Cs2CO3(521.31mg,1.60mmol)先后添加到4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5，233.66mg,1.00mmol)在DMF(3.0mL)中的溶液中，并将反应物在RT下搅拌过夜。将反应物用水(10mL)稀释并用EtOAc(2x 10mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并蒸发至干。将残余物质通过硅胶柱色谱法(1:1庚烷:EtOAc)纯化以得到((4-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(430mg，产率90％)，为深棕色胶状物。LCMS m/z＝426.1[M+H]+。
2.(4-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺的制备
向((4-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(429.79mg,1.01mmol)在DCM(3.0mL)中的溶液中添加TFA(2.30g,20.20mmol)，并将反应物在RT下搅拌过夜。将混合物用MeOH稀释并在5g SCX柱上纯化，其中产物用2M NH3-MeOH洗脱以得到(4-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺(260mg，产率71.2％)，为米色固体。LCMS m/z＝326.1[M+H]+。
3. 5-(叔丁基)-N-((4-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
将DIPEA(24mg,185μmol)添加到(4-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺(40.0mg,122.92μmol)和5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-甲酸(23mg,135.2μmol)在DMF(1mL)中的混合物中，并将混合物在RT下搅拌5min。添加(120mg,185μmol,纯度50％)并将反应物在RT下搅拌过夜。将混合物用EtOAc(3mL)和水(3mL)稀释并将混合物剧烈搅拌。弃去水相，将剩余的有机相经Na2SO4干燥并过滤。将滤液蒸发，将残余物质重新溶解于DMSO中并通过制备型HPLC(方法A，5-60％梯度)纯化产物。LCMS mz＝478.1[M+H]+。1H NMR(DMSO-d6)δ:8.96-8.87(m,1H),8.44(s,1H),8.14(s,1H),7.94(s,1H),7.93(d,J＝2.4Hz,1H),6.97-6.88(m,1H),4.08-3.98(m,2H),3.87(s,3H),3.69-3.59(m,2H),3.31-3.25(m,2H),1.66-1.57(m,2H),1.49-1.35(m,11H),1.02(s,3H)。
实施例42. 5-(叔丁基)-N-((3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡咯烷-3-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.((3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡咯烷-3-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备
按照与实施例41，步骤1中描述的方法类似的方法，由4-氯-6-(1-甲基吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5)和N-((3-甲基吡咯烷-3-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯获得((3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡咯烷-3-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，产率65.6％)，为深棕色胶状物。LCMS m/z＝412.1[M+H]+。
2.(3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡咯烷-3-基)甲胺的制备
按照与实施例41，步骤2中描述的方法类似的方法，由((3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡咯烷-3-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯获得(3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡咯烷-3-基)甲胺(210mg，产率83.2％)，为淡黄色固体。LCMS m/z＝312.1[M+H]+。
3. 5-(叔丁基)-N-((3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡咯烷-3-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
按照实施例41，步骤3中所用的方法，由(3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡咯烷-3-基)甲胺和5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-甲酸获得5-(叔丁基)-N-((3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡咯烷-3-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺。LCMS m/z＝464.0[M+H]+。1H NMR(DMSO-d6)δ:9.11(t,J＝6.4Hz,1H),8.29(s,1H),8.10(s,1H),7.92(s,1H),7.89(d,J＝2.4Hz,1H),7.04-6.92(m,1H),3.86(s,5H),3.64-3.39(m,2H),2.09-1.92(m,1H),1.84-1.67(m,1H),1.41(s,9H),1.13(s,3H)。
实施例43至51
按照与用于实施例41，步骤3的方法类似的方法，由(4-甲基-1-(6-(1-甲基吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基])-4-哌啶基)甲胺(实施例41，步骤2)或(3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡咯烷-3-基)甲胺(实施例42，步骤2)和适当的甲酸制备下表中的化合物。
实施例52：5-(叔丁基)-N-(6-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1. 2-(5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯的制备
将2-氨基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯(160.0mg,706.96μmol)和(674.83mg,1.06mmol,纯度50％)先后添加到5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸锂(373.49mg,2.12mmol)在DMF(1.0mL)中的溶液中，并将反应物升温至50℃并搅拌过夜。将混合物用水(3mL)稀释并将产物用EtOAc(2x 3mL)萃取。将合并的有机相用盐水(2mL)洗涤，经Na2SO4干燥并过滤。将滤液蒸发至干，并将此物质在的5gSPE柱上纯化，用庚烷:EtOAc洗脱，以得到2-(5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯，为白色固体。LCMS m/z＝313.1[M-tBu+H]+
2. 5-(叔丁基)-N-(6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺三氟乙酸盐的制备
向2-(5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯(180.0mg,475.61μmol)在DCM(3.0mL)中的溶液中添加TFA(1.08g,9.51mmol)，并将反应物在RT下搅拌过夜。将混合物用MeOH(5.0mL)稀释并在5g SCX柱上纯化。用TEA/MeOH(1mL/25mL)洗脱所需化合物以得到5-(叔丁基)-N-(6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺三氟乙酸盐(90.0mg)，为无色胶状物。LCMS m/z＝279.1[M+H]+。
3. 5-(叔丁基)-N-(6-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
将N-(6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(42.89mg,154.07μmol)和Cs2CO3(62.75mg,192.58μmol)先后添加到4-氯-6-(1-甲基吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5，30.0mg,128.39μmol)在DMF(2.0mL)中的溶液中，并将反应物在RT下搅拌过夜。将反应物用水(10mL)稀释并用EtOAc(2x 15mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并蒸发至干。将残余物质重新溶解在DMSO中，并将产物通过制备型HPLC(方法A，5-60％梯度)纯化以得到5-(叔丁基)-N-(6-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺。LCMS m/z＝476.1[M+H]+。1H NMR(DMSO-d6)δ:9.21(dd,J＝19.2,7.6Hz,2H),8.29(s,1H),8.18-8.06(m,1H),7.98-7.91(m,1H),7.89(d,J＝1.8Hz,1H),7.04(s,1H),6.96(d,J＝2.4Hz,1H),4.63-4.44(m,1H),3.87(d,J＝1.8Hz,8H),2.33(br s,6H),2.11(s,2H),2.06-1.98(m,1H),1.43(d,J＝1.8Hz,9H)。
实施例53和54. 5-(叔丁基)-N-((2r,4s)-6-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺和5-(叔丁基)-N-((2s,4r)-6-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
[任意指定的立体化学]
通过使用LUX Cellulose-4LC 30x250mm,3um柱的SFC分离5-(叔丁基)-N-(6-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺，在CO2中用45％ MeOH(具有0.1％ DEA)洗脱(流速：100mL/min，ABPR120bar，MBPR 40psi，柱温40℃)以得到
峰1：5-(叔丁基)-N-((2r,4s)-6-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺。LCMS m/z＝476.1[M+H]+。1H NMR(CDCl3)δ:8.00(s,1H),7.85(s,3H),7.22-7.10(m,1H),6.79-6.72(m,1H),4.72(brd,J＝8.0Hz,1H),4.02-3.96(m,5H),3.93(t,J＝6.9Hz,2H),2.69-2.56(m,2H),2.19(br d,J＝3.5Hz,3H),2.15-2.06(m,3H),1.48(s,10H),1.21-1.09(m,1H)和
峰2：5-(叔丁基)-N-((2s,4r)-6-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺。LCMS m/z＝476.1[M+H]+。1H NMR(CDCl3)δ:7.98(d,J＝0.8Hz,1H),7.86(d,J＝0.8Hz,1H),7.82(d,J＝2.5Hz,1H),7.80(s,1H),7.22-7.10(m,1H),6.75(dd,J＝2.4,0.9Hz,1H),4.78-4.63(m,1H),3.96(s,5H),3.90-3.83(m,2H),2.61-2.52(m,2H),2.28-2.20(m,2H),2.17(s,2H),1.48(s,9H),1.30-1.18(m,1H)。
实施例55. 5-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(1-(氧杂环丁烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.(2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苯基)甲胺二盐酸盐的合成
将(2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(WO 2015089327 A1,35.7g,103mmol)在DCM中的溶液用TFA(85mL,1110mmol)处理，并将反应物在RT下搅拌2h。将混合物真空浓缩，并将残余物与甲苯共沸。将残余物悬浮在饱和NaHCO3溶液中，用EtOAc(2x 100mL)萃取混合物并将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并过滤。添加在二噁烷(30mL)中的4M HCl，将溶液真空浓缩并将残余物在Et2O(500mL)中搅拌。过滤所得悬浮液并干燥固体以得到标题化合物，为灰白色固体，23.5g，84％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:8.56(br s,3H),7.49-7.52(m,2H),7.41(dd,1H),4.01-4.04(m,2H),2.34(s,3H),1.27(s,12H)。
2. 5-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的合成
向(2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苯基)甲胺二盐酸盐(34g,0.12mol)和5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸(29.2g,0.15mol)在无水DMF(500mL)中的悬浮液中添加DIPEA(62mL,0.36mol)。将所得混合物冷却至0℃，添加(50％于DMF中,90mL,0.15mol)，并使反应物升温至RT并搅拌2h。将反应混合物在水(300mL)和EtOAc(300mL)之间分配并分离各层。将水相用EtOAc(3x100mL)萃取，用水(3x50mL)、饱和NaHCO3水溶液(50mL)和盐水(50mL)洗涤合并的有机萃取物。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩以得到米色油状物。将其通过用庚烷/EtOAc(100/0至70/30)洗脱的硅胶柱色谱法纯化以得到标题化合物，为浓稠的浅黄色油状物，其静置后缓慢固化(29.0g，60％)。
3. 5-(叔丁基)-N-(4-(6-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
将5-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(350mg,876.56μmol)、4,6-二氯吡唑并[1,5-a]吡嗪(329.60mg,1.75mmol)、Pd(t-Bu3P)2(22.40mg,43.83μmol)和K3PO4(558.20mg,2.63mmol,1.32mL)在二噁烷(4.40mL)和水(1.10mL)中的混合物用N2曝气5min，并在RT下搅拌18h。将混合物用EtOAc和水稀释，分离各层并将有机相用盐水洗涤。将合并的水层用EtOAc萃取，将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(0-100％ EtOAc于庚烷中)纯化以得到5-(叔丁基)-N-(4-(6-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(245mg，产率65.8％)。LCMS m/z＝425.0[M+H]+。
4. 5-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(1-(氧杂环丁烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
向5-(叔丁基)-N-(4-(6-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(50mg,117.68μmol)和1-(氧杂环丁烷-3-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)吡唑(35.32mg,141.22μmol)在二噁烷(2.10mL)中的溶液中添加K3PO4水溶液(2M,470.72uL)，并将所得混合物用N2曝气5min。添加tBuXPhos Pd G3(18.70mg,23.54μmol)，并将混合物加热至60℃，持续17h，冷却至RT，用EtOAc稀释并用水和盐水洗涤。将有机层经干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过制备型HPLC(方法C2，5-60％梯度)纯化。将产物进一步通过制备型TLC(97:3DCM:MeOH)纯化以得到5-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(1-(氧杂环丁烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(2mg，产率3.32％)，为白色固体。LCMS m/z＝513.2[M+H]+1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 8.58(s,1H),8.24(s,1H),8.08-8.04(m,2H),7.97-7.90(m,2H),7.52(d,J＝7.9Hz,1H),7.18(br s,1H),6.97(dd,J＝2.4,1.2Hz,1H),5.60-5.51(m,1H),5.17-5.10(m,4H),4.78(d,J＝6.1Hz,2H),2.53(s,3H),1.50-1.46(m,9H)。
C.2咪唑并[1,2-c]嘧啶的制备
实施例56：1-(叔丁基)-N-(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)-1H-吡唑-3-甲酰胺
1. 7-氯-5-(甲硫基)咪唑并[1,2-c]嘧啶的合成
将2-氯乙醛(220g,0.18L,1.28mol)添加到6-氯-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺(150g,854mmol)在二噁烷(300mL)中的溶液中，并将反应物在100℃下搅拌5h，然后冷却至RT过夜。将悬浮液冷却至0℃并滤出固体以得到7-氯-5-(甲硫基)咪唑并[1,2-c]嘧啶，为黄色固体(151g，产率75％)。LCMS m/z＝200.1[M+H]+
2. 7-氯咪唑并[1,2-c]嘧啶-5(6H)-酮的合成
将7-氯-5-(甲硫基)咪唑并[1,2-c]嘧啶(52.2g,221mmol)悬浮在MeOH(200mL)中，并缓慢添加KOH(55.9g,996mmol)在水(520mL)中的溶液。将反应物加热回流3h，然后冷却至RT过夜。将混合物用1M HCl酸化至pH 6并过滤所得悬浮液。将固体用MeOH洗涤，然后与MeCN共沸以提供7-氯咪唑并[1,2-c]嘧啶-5(6H)-酮，为白色固体(28.6g，产率76％)。LCMS m/z＝170.1[M+H]+
3. 7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5(6H)-酮的合成
将7-氯咪唑并[1,2-c]嘧啶-5(6H)-酮(40g,236mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(73.6g,354mmol)和XPhos(11.2g,24mmol)溶解在IPA(1.8L)中，并添加2MK3PO4水溶液(150g,0.35L,708mmol)。将混合物用N2吹扫15min，然后添加Pd2(dba)3(10.8g,12mmol)，并将混合物回流过夜。添加另外的Pd2(dba)3(5g)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(25g)，并将混合物再回流24h。将反应混合物过滤以去除钯残余物，蒸发有机溶剂，并将残余物在水和庚烷:EtOAc的1:1混合物之间分配。白色固体沉淀在有机层和水层中，并将固体滤出。将固体用水、EtOAc和MeCN洗涤并真空干燥以得到产物(32.8g)。分离滤液各层并将水层在冰浴中冷却。在搅拌下将溶液用浓HCl处理至pH 6并收集所得细小沉淀，用H2O和Et2O洗涤并在真空下干燥以得到进一步的产物(9.0g)。共获得41.8g的7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5(6H)-酮，为黄色固体(产率82％)。LCMS m/z＝215.0[M+H]+
4. 5-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶的合成
将POCl3(89.3g,54.1mL,583mmol)在5min内滴加到冰冷却的7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5(6H)-酮(41.8g,194mmol)和DIPEA(126g,971mmol)在干燥DCM(300mL)中的溶液中，并使反应物升温至RT。将混合物用DCM(150mL)稀释，然后在RT下搅拌24h。将悬浮液用己烷稀释，并通过过滤收集固体(66.0g)。将收集的固体悬浮在DCM:DIPEA(5:1，500mL)中，搅拌30min，然后添加饱和NaHCO3水溶液，并将混合物搅拌1h。将混合物通过过滤，分离各层，并将水层用DCM(3x)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以提供5-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶，为黄色固体(22.5g，产率50％)。LCMS m/z＝234.0[M+H]+。
5.(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的合成
按照与实施例1，步骤6中描述的程序类似的程序，由5-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶和(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯获得(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯，为白色固体，380mg，产率63％。LCMS m/z＝405.1[M+H]+
6.(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苯基)甲胺二盐酸盐的合成
按照与实施例1，步骤7中描述的程序类似的程序，由(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯获得(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苯基)甲胺二盐酸盐，为粗品374mg。LCMS m/z＝305.0[M+H]+
7. 1-(叔丁基)-N-(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)-1H-吡唑-3-甲酰胺的合成
按照与实施例1，步骤8中描述的程序类似的程序，由(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苯基)甲胺二盐酸盐和1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-甲酸获得1-(叔丁基)-N-(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(26.2mg，产率58％)。将粗物质通过反相HPLC(方法A，5-55％梯度)纯化。LCMS m/z＝455.2[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.70(t,J＝6.4Hz,1H),8.33(s,1H),8.10(s,1H),7.97-7.92(m,4H),7.83(s,1H),7.63(s,1H),7.57(d,J＝7.9Hz,2H),6.67-6.65(m,1H),4.56(d,J＝6.1Hz,2H),3.88(s,3H),1.57(s,9H)。
实施例57至61
按照与用于实施例1，步骤8的方法类似的方法，由(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例56，步骤6)和适当的甲酸制备下表中的化合物。
实施例62：5-(2,3-顺式-二甲基环丙基)-N-(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1. 2,3-顺式-二甲基环丙烷-1-甲酸乙酯的合成
在0℃下，在4h内向(Z)-丁-2-烯(22.5g,401mmol)和Rh(OAc)2二聚体(2.35g,5.3mmol)在DCM(1.5L)中的溶液中添加2-重氮乙酸乙酯(130g,1140mmol)。将混合物在20℃下搅拌16h。将反应混合物通过硅胶垫过滤并真空浓缩以得到2,3-顺式-二甲基环丙烷-1-甲酸乙酯，为黄色油状物(60g，粗品)，其无需进一步纯化即可继续使用。
2. 2,3-顺式-二甲基环丙烷-1-甲酸的合成
在RT下将2,3-顺式-二甲基环丙烷-1-甲酸乙酯(60g,422mmol)在MeOH(400mL)中的溶液添加到在H2O(200mL)中的KOH(90g,1.6mol)中。反应完成后，通过真空蒸馏去除溶剂并添加DCM(700mL)。分离水层并用4M HCl水溶液酸化直至pH＝1。将酸性水相用EtOAc(3x20mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩以得到2,3-顺式-二甲基环丙烷-1-甲酸(36.1g，2步产率：75％)，其无需进一步纯化即可继续使用。
3. 5-(2,3-顺式-二甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸乙酯的合成
向草酰氯(28.2mL,328mmol)在DCM(500mL)中的溶液中添加2,3-顺式-二甲基环丙烷-1-甲酸(30g,263mmol)，并将反应混合物在环境温度下搅拌1h。通过蒸馏去除过量的草酰氯以得到粗制的2,3-顺式-二甲基环丙烷-1-碳酰氯。在-15℃下向(E)-2-氨基-2-(羟基亚氨基)乙酸乙酯(34.7g,263mmol)和DIPEA(67.8g,526mmol)在DCM(500mL)中的溶液中滴加粗制的2,3-顺式-二甲基环丙烷-1-碳酰氯。将所得溶液升温至环境温度的同时进行搅拌，并且继续搅拌16h。添加水(800mL)并分离各层。用DCM(300mL x 3)萃取水相并将合并的有机相干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。向残余物中添加吡啶(400mL)并将混合物加热至110℃并搅拌16h。将反应混合物冷却至环境温度并真空浓缩。将粗产物通过硅胶柱色谱法(EtOAc/己烷，1％至10％)纯化以得到5-(2,3-顺式-二甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸乙酯，为黄色油状物(9g，产率：16％)。
4. 5-(2,3-顺式-二甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸钾的合成
将5-(2,3-顺式-二甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸乙酯(6g,28.5mmol)在MeOH(40mL)中的溶液添加到溶解在H2O(20mL)中的KOH(1.75g,31.2mmol)的溶液中。当反应完成时，通过真空蒸馏去除溶剂并添加DCM(70mL)。分离水层并真空浓缩以得到5-(2,3-顺式-二甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸钾，为白色固体(5.21g，产率82％)。LCMS m/z＝183.0[M+H]+
5. 5-(-2,3-顺式-二甲基环丙基)-N-(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的合成
使用与用于实施例1，步骤8的方法类似的方法，由5-(2,3-顺式-二甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸钾和(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例56，步骤6)获得5-(-2,3-顺式-二甲基环丙基)-N-(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(13.1mg，产率28％)。LCMS m/z＝469.1[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.70-9.52(m,1H),8.34(s,1H),8.19-8.07(m,1H),8.05-7.92(m,3H),7.89-7.81(m,1H),7.64(br d,J＝1.2Hz,1H),7.62-7.50(m,2H),4.67-4.45(m,2H),3.96-3.84(m,3H),1.90(t,J＝4.6Hz,1H),1.80-1.63(m,2H),1.23-1.13(m,6H)。
实施例63：3-(1-(氟甲基)环丙基)-N-(4-(7-(1(氟甲基)环丙基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酰胺
1.(E)-1-(氟甲基)-N'-羟基环丙烷-1-甲脒(carboximidamide)的合成
向1-(氟甲基)环丙烷-1-甲腈(850mg,8.5mmol)在EtOH(15mL)和H2O(1mL)中的溶液中添加Na2CO3(1.8g,17mmol)和盐酸羟胺(1.2g,17mmol)，将反应物在80℃下加热并在此温度下搅拌4h。将反应混合物冷却至环境温度，倒入H2O(50mL)中并用EtOAc(150mL)萃取。将有机相干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗产物通过硅胶柱色谱法纯化以得到(E)-1-(氟甲基)-N'-羟基环丙烷-1-甲脒，为白色固体(1g，产率90％)，其无需进一步纯化即可继续使用。
2. 3-(1-(氟甲基)环丙基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸乙酯的合成
将(E)-1-(氟甲基)-N'-羟基环丙烷-1-甲脒(5.2g,39mmol)在吡啶(20mL)中的溶液冷却至0℃。滴加氯氧代乙酸乙酯(5.3mL,47mmol)，在添加完成后，将反应混合物在80℃下加热并在此温度下搅拌2h。将反应混合物倒入冰水(100mL)中，并将水相用DCM(30mL x3)萃取。将有机相用HCl溶液(30mL,1M)洗涤，然后用盐水(30mL)洗涤。将有机相进行干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩以得到3-(1-(氟甲基)环丙基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸乙酯(6.1g，产率85％)，其无需进一步纯化即可继续使用。
3. 3-(1-(氟甲基)环丙基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸钾的合成
按照实施例64，步骤4中描述的方法，由3-(1-(氟甲基)环丙基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸乙酯获得3-(1-(氟甲基)环丙基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸钾(4g，3步产率78％)。LCMSm/z＝187.0[M+H]+
4. 3-(1-(氟甲基)环丙基)-N-(4-(7-(1(氟甲基)环丙基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酰胺的合成
按照与用于实施例1，步骤8的方法类似的方法，由3-(1-(氟甲基)环丙基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸钾和(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例56，步骤6)获得3-(1-(氟甲基)环丙基)-N-(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酰胺(7.9mg，产率17％)。LCMS m/z＝473.1[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.98(t,J＝6.1Hz,1H),8.33(s,1H),8.10(s,1H),8.00-7.94(m,2H),7.94-7.91(m,1H),7.84(s,1H),7.64(d,J＝1.2Hz,1H),7.59(d,J＝8.5Hz,2H),4.78(s,1H),4.69(s,1H),4.59(d,J＝6.7Hz,2H),3.89(s,3H),1.37-1.28(m,4H)。
实施例64：3-(叔丁基)-N-(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酰胺的合成
向(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例56，步骤6，37mg,98μmol)和3-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸乙酯(29mg,148μmol)在THF(1.5mL)中的溶液中添加DABAL-Me3(38mg,148μmol)，并将反应物加热至45℃并在此温度下搅拌18h。将反应混合物冷却至环境温度并用水(1mL)、1M HCl溶液(1mL)和EtOAc(5mL)稀释。分离各层，并用另外部分的EtOAc萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将粗物质通过反相HPLC(方法A，5-55％梯度)纯化以得到3-(叔丁基)-N-(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酰胺(5.6mg，产率12％)。LCMS m/z＝457.2[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:10.00(br t,J＝6.1Hz,1H),8.35(s,1H),8.12(s,1H),8.02-7.95(m,3H),7.86(s,1H),7.69(s,1H),7.60(d,J＝7.9Hz,2H),4.60(d,J＝6.1Hz,2H),3.89(s,3H),1.41-1.34(m,9H)。
C.3吡唑并[1,5-a]吡啶的制备
实施例65：N-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1. 6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-4-醇的合成
在130℃下将6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶(300mg,1.32mmol)在HBr水溶液(267mg,1.32mmol,纯度40％,10mL)中的溶液搅拌12h。将反应混合物冷却至环境温度，并添加饱和Na2CO3水溶液以调节pH至8。将淬灭的反应混合物在真空下浓缩以得到粗物质，将其通过硅胶柱色谱法(PE/EtOAc＝7:3)纯化以得到6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-4-醇，为棕色固体(150mg，产率51％)。LCMS m/z＝212.9,214.9[M+H]+。
2. 6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸盐的合成
向6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-4-醇(100mg,0.47mmol)在DCM(10mL)中的溶液中添加TEA(143mg,1.41mmol)，并将反应混合物在冰水冷却浴中冷却至0℃。添加三氟甲磺酸酐(265mg,0.94mmol)并将反应物在0℃下搅拌30min。将反应混合物浓缩，并将粗物质通过制备型TLC(PE/EtOAc＝10:1)纯化以得到6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸盐，为透明油状物(150mg，产率84％)。LCMS m/z＝344.9,346.9[M+H]+。
3.(4-(6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2-甲基苄基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将(2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(208mg,0.60mmol)、6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(207mg,0.60mmol)、K2CO3(249mg,1.80mmol)和Pd(dppf)Cl2·DCM(49mg,60μmol)的混合物溶解在二噁烷(4.8mL)和水(1.2mL)中，并将N2鼓泡通过混合物5min。将反应混合物在N2气氛下加热至100℃，持续1h。将反应物冷却至环境温度并通过过滤。将滤液浓缩并将粗物质通过硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷，2％至100％)纯化以得到(4-(6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2-甲基苄基)氨基甲酸叔丁酯，为透明油状物(160mg，产率64％)。LCMS m/z＝416.0,418.0.[M+H]+。
4.(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将(4-(6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2-甲基苄基)氨基甲酸叔丁酯(75mg,0.18mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(56mg,0.27mmol)、K2CO3(75mg,0.54mmol)和Pd(dppf)Cl2·DCM(15mg,18μmol)的混合物溶解在二噁烷(1.4mL)和水(0.4mL)中，并将N2鼓泡通过混合物5min。将反应混合物在N2气氛下加热至100℃并搅拌1h。将反应混合物冷却至环境温度并通过过滤。将滤液浓缩并将粗物质通过硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷，2％至100％)纯化以得到(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯，为透明油状物(44mg，产率59％)。LCMS m/z＝418.1[M+H]+
5.(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐的合成
向(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(44mg,0.11mmol)在最少的EtOAc中的溶液中添加HCl溶液(1M于EtOAc中，1mL)，并将反应物在环境温度下搅拌3天。将反应混合物浓缩以得到(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(40mg，粗品)，其无需进一步纯化即可继续使用。LCMS m/z＝318.0[M+H]+
6.N-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的合成
按照与实施例5中使用的方法类似的方法，由(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐和5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸钾)获得N-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺，为白色固体(11.3mg，产率47％)。将粗产物通过制备型HPLC(方法C1，5-65％梯度)纯化。LCMS m/z＝468.2[M+H]+。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.42(t,J＝6.1Hz,1H),8.99(s,1H),8.32(s,1H),8.06(s,1H),8.01(d,J＝2.4Hz,1H),7.61-7.50(m,3H),7.39(d,J＝7.9Hz,1H),6.67(dd,J＝2.4Hz,1.2Hz,1H),4.51(d,J＝6.1Hz,2H),3.88(s,3H),2.43(s,3H),1.55(s,3H),1.42-1.36(m,2H),1.20-1.12(m,2H)。
实施例66：1-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺的合成
按照与实施例4中描述的方法类似的方法，由(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例65，步骤6)和1-(叔丁基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸)获得1-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺，为粉红色固体(10.7mg，产率45％)。将粗物质通过反相HPLC(方法A，5-60％梯度)纯化。LCMS m/z＝469.3[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.01(t,J＝6.1Hz,1H),8.99-8.97(m,1H),8.71(s,1H),8.32(s,1H),8.05(s,1H),8.01(d,J＝2.4Hz,1H),7.60-7.54(m,2H),7.51(d,J＝1.2Hz,1H),7.39(d,J＝7.9Hz,1H),6.70-6.64(m,1H),4.52(d,J＝6.1Hz,2H),3.88(s,3H),2.44(s,3H),1.64(s,9H)。
实施例67：N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.(4-(6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2-氟苄基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将(2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(211mg,0.60mmol)、6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(207mg,0.60mmol)、K2CO3(249mg,1.80mmol)和Pd(dppf)Cl2·DCM(49mg,60μmol)的混合物溶解在二噁烷(4.8mL)和水(1.2mL)中，并将N2鼓泡通过混合物5min。将反应混合物在N2气氛下加热至100℃并搅拌1h。将反应混合物冷却至环境温度并通过过滤。将滤液浓缩并将粗物质通过硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷，2％至100％)纯化以得到(4-(6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2-氟苄基)氨基甲酸叔丁酯，为白色固体(151mg，产率60％)。LCMS m/z＝419.9,421.9[M+H]+
2.(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将(4-(6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-2-氟苄基)氨基甲酸叔丁酯(151mg,0.36mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(112mg,0.54mmol)、K2CO3(149mg,1.1mmol)和Pd(dppf)Cl2·DCM(29mg,36μmol)的混合物溶解在二噁烷(2.9mL)和水(0.7mL)中，并将N2鼓泡通过混合物5min。将反应物在N2气氛下加热至100℃并搅拌1h。将反应混合物冷却至环境温度并通过过滤。将滤液浓缩并将粗物质通过硅胶柱色谱法(EtOAc/庚烷，2％至100％)纯化以得到(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯，为灰白色固体(115mg，产率76％)。LCMS m/z＝422.1[M+H]+
3.(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐的合成
向(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(115mg,0.27mmol)在最少的EtOAc中的溶液中添加HCl溶液(1M于EtOAc中，2.7mL)。将反应混合物在环境温度下搅拌3天。将反应混合物浓缩以得到(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(115mg，粗品)，其无需进一步纯化即可继续使用。LCMS m/z＝322.0[M+H]+
4.N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的合成
按照与用于实施例1，步骤8的方法类似的方法，由(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐和5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸钾)获得N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺，为白色固体(8.3mg，产率25％)。将粗物质通过制备型HPLC(方法A，5-60％梯度)纯化。LCMS m/z＝472.4[M+H]+。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.51(t,J＝6.1Hz,1H),9.03(s,1H),8.34(s,1H),8.07(s,1H),8.04(d,J＝2.4Hz,1H),7.67-7.58(m,3H),7.52(t,J＝7.9Hz,1H),6.71(d,J＝2.4Hz,1H),4.57(d,J＝6.1Hz,2H),3.88(s,3H),1.54(s,3H),1.46-1.35(m,2H),1.22-1.12(m,2H)。
实施例68：5-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的合成
按照与实施例67，步骤4中使用的方法类似的方法，由(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例67，步骤3)和5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸锂获得5-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺，为白色固体(7.3mg，产率22％)。将粗物质通过制备型HPLC(方法A，梯度5-65％)纯化。LCMS m/z＝474.4[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.56(t,J＝6.1Hz,1H),9.03(s,1H),8.34(s,1H),8.07(s,1H),8.04(d,J＝1.8Hz,1H),7.70-7.60(m,3H),7.53(t,J＝7.9Hz,1H),6.76-6.67(m,1H),4.58(d,J＝6.1Hz,2H),3.88(s,3H),1.43(s,9H)。
实施例69：1-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺的合成
按照与用于实施例1，步骤8的方法类似的方法，由(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例67，步骤3)和1-(叔丁基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸获得1-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺，为白色固体(3.5mg，产率10％)。将粗物质通过制备型HPLC(方法A，5-60％梯度)纯化。LCMS m/z＝473.5[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.12(t,J＝6.1Hz,1H),9.03(s,1H),8.72(s,1H),8.37-8.30(m,1H),8.07(s,1H),8.03(d,J＝2.4Hz,1H),7.63-7.59(m,3H),7.54-7.47(m,1H),6.71(d,J＝2.4Hz,1H),4.58(d,J＝6.1Hz,2H),3.88(s,3H),1.64(s,9H)。
实施例70：1-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)-1H-吡唑-3-甲酰胺的合成
按照与实施例1，步骤8中描述的方法类似的方法，由(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例67，步骤3)和1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-甲酸获得1-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)-1H-吡唑-3-甲酰胺，为白色固体(17.9mg，产率53％)。LCMS m/z＝472.5[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.07-8.98(m,1H),8.61(t,J＝6.1Hz,1H),8.33(s,1H),8.07(s,1H),8.03(d,J＝2.4Hz,1H),7.93(d,J＝2.4Hz,1H),7.68-7.57(m,3H),7.56-7.47(m,1H),6.75-6.70(m,1H),6.66(d,J＝2.4Hz,1H),4.56(d,J＝6.1Hz,2H),3.88(s,3H),1.57(s,9H)。
实施例71：3-(1-氟-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酰胺
1. 3-羟基-2,2-二甲基丙腈的合成
在15℃(冰水浴)下，在1h内向2-氰基-2-甲基丙酸甲酯(100g,786mmol)在THF(800mL)和水(2L)中的溶液中缓慢添加NaBH4(89.3g,2.36mol)，并将混合物在20℃下搅拌4h。通过缓慢添加HCl水溶液(6M)至pH<7来淬灭反应。将混合物用EtOAc(3x)萃取并将有机层用2N NaOH和盐水洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩以得到无色油状物(48g)。添加庚烷并再次浓缩混合物以去除挥发物。获得粗制的3-羟基-2,2-二甲基丙腈，为无色油状物(47g，产率60％)，并且其无需进一步纯化即可继续使用。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:3.56(s,2H),2.51(br s,1H),1.31(s,6H)。
2.(E)-N',3-二羟基-2,2-二甲基丙脒的合成
在25℃下向3-羟基-2,2-二甲基丙腈(51.0g,515mmol)在EtOH(800mL)中的溶液中添加羟胺(50％重量于水中,120mL,2.06mol)，并将反应物在70℃下搅拌过夜。将混合物冷却并在真空下浓缩，并与甲苯(2x)和THF(1x)共沸去除水。将白色固体在Et2O中研磨，过滤，并再次在真空下干燥以得到(E)-N',3-二羟基-2,2-二甲基丙脒，为白色固体(62.5g，产率91％)，其无需进一步纯化即可继续使用。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:8.85(s,1H),5.20(s,2H),4.54(br s,1H),3.31(s,2H),1.03(s,6H)。
3. 3-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸乙酯的合成
将2-氯-2-氧代-乙酸乙酯(53.0mL,473mmol)添加到用冰水浴冷却的(E)-N',3-二羟基-2,2-二甲基丙脒(62.5g,473mmol)在吡啶(1L)中的溶液中。1h后，将反应混合物加热至80℃并在此温度下搅拌16h。将混合物在真空下浓缩以去除吡啶。将残余物溶解在EtOAc(400mL)和水(300mL)中并用EtOAc(3x 300mL)萃取。将合并的有机相用水(100mL)和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(用DCM/EtOAc，10/1至1/1洗脱)纯化以得到3-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸乙酯与20mol％的3-羟基-2,2-二甲基丙腈的混合物。在90℃下通过Kugelrohr蒸馏去除大部分3-羟基-2,2-二甲基丙腈以得到3-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸乙酯，为无色油状物(22.5g，产率22％)，其无需进一步纯化即可继续使用。
4. 3-(2-甲基-1-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸乙酯的合成
在0℃下向3-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸乙酯(22.2g,104mmol)和DIPEA(35.4mL,207.3mmol)在DCM(600mL)中的溶液中添加三氟甲磺酸酐(21mL,124mmol)，并将混合物在RT下搅拌过夜。添加另外的DCM(200mL)，然后添加水(100mL)。分离各相，并将有机相用水(100mL)洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(庚烷/EtOAc＝5/1至3/1)纯化以得到3-(2-甲基-1-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸乙酯，为橙色油状物(27.5g，产率76％)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ:4.71(s,2H),4.53(q,J＝7.3Hz,2H),1.56(s,6H),1.43(t,J＝7.4Hz,3H)。
5. 3-(1-氟-2-甲基丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸乙酯的合成
将3-(2-甲基-1-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸乙酯(27.5g,79.4mmol)和四丁基二氟氢铵(50％于MeCN中,89.0g,159mmol)在THF(700mL)中的溶液在40℃下搅拌48h。将混合物在真空下浓缩。将残余物溶解在EtOAc(700mL)中，用水(3x 100mL)洗涤。将有机相经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(用庚烷/EtOAc＝5/1至3/1洗脱)纯化以得到3-(1-氟-2-甲基丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸乙酯，为无色油状物(11.3g，产率65％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:4.63(s,1H),4.54(q,J＝7.4Hz,2H),4.46(s,1H),1.56-1.38(m,9H)。
6. 3-(1-氟-2-甲基丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸的合成
向3-(1-氟-2-甲基丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸乙酯(9.70g,44.9mmol)在MeOH(90mL)中的冷溶液中添加LiOH.H2O(3.76g,89.7mmol)在水(15mL)中的溶液，并将所得混合物在RT下搅拌2h。在真空下去除MeOH并将水性残余物(用冰浴冷却)用浓HCl酸化直至pH＝2-3。将混合物在真空下浓缩以得到白色固体。将残余物通过与甲苯(3x10mL)共蒸发进行干燥。将获得的白色固体悬浮在5％在DCM中的MeOH(100mL)中，过滤混合物，并将滤饼用相同混合物(3x10mL)洗涤。将滤液合并，经无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩以得到3-(1-氟-2-甲基丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸，为白色固体(7.0g，粗品)，其无需进一步纯化即可继续使用。LCMS m/z＝189.0[M+H]+
7. 3-(1-氟-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酰胺的合成
按照与用于实施例1，步骤8的方法类似的方法，由(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例67，步骤3)和3-(1-氟-2-甲基丙烷-2-基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸获得3-(1-氟-2-甲基丙烷-2-基)-N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酰胺，为白色固体(4.5mg，产率13％)。将粗物质通过反相HPLC(方法A，5-65％梯度)纯化。LCMS m/z＝492.4[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.98(t,J＝5.8Hz,1H),9.04(s,1H),8.34(s,1H),8.07(s,1H),8.04(d,J＝1.8Hz,1H),7.69-7.52(m,4H),6.75-6.67(m,1H),4.62(s,1H),4.60(d,J＝6.1Hz,2H),4.53(s,1H),3.88(s,3H),1.38(d,J＝1.8Hz,6H)。
C.4[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪的制备
实施例72：2-(叔丁基)-N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)哌啶-4-基)甲基)-2H-四唑-5-甲酰胺
1.((1-(6-溴-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将N-(4-哌啶基甲基)氨基甲酸叔丁酯(500mg,2.33mmol)、6,8-二溴-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪(647.52mg,2.33mmol)和DIPEA(602.26mg,4.66mmol)在IPA(10mL)中的悬浮液在RT下搅拌2h。15min后，大量白色固体形成，因此添加另外的IPA(10mL)进行搅拌。过滤混合物，将固体用IPA洗涤并干燥以得到((1-(6-溴-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(864mg，产率90.2％)，为白色固体。1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm:8.20(s,1H),7.99(s,1H),5.66-5.30(br s,2H),4.64(br s,1H),3.20-3.01(m,4H),1.95-1.80(m,3H),1.46(s,9H),1.39-1.24(m,2H)。
2.((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将((1-(6-溴-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(150mg,364.7μmol)、(1-甲基吡唑-4-基)硼酸(91.85mg,729.4μmol)和Cs2CO3(356.48mg,1.09mmol)在干燥二噁烷(3.0mL)中的混合物用N2曝气5min。添加RuPhos(34.04mg,72.94μmol)和Pd2(dba)3(33.40mg,36.47μmol)，并将所得混合物在100℃下加热17h。将冷却的混合物通过的垫过滤，用EtOAc洗涤并且将滤液真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(0-100％庚烷于EtOAc中)纯化以得到((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(116mg，产率77.1％)，为橙色固体。LCMSm/z＝413.2[M+H]+
3.(1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)哌啶-4-基)甲胺盐酸盐的合成
将((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(115mg,278.79μmol)在MeOH(1.0mL)中的悬浮液用在二噁烷中的4M HCl(975.77uL)处理，并将反应物在RT下搅拌2h。将混合物浓缩至干以得到(1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐，为白色固体。LCMS m/z＝313.2[M+H]+
4. 2-(叔丁基)-N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)哌啶-4-基)甲基)-2H-四唑-5-甲酰胺的合成
将(218.91mg,344.01μmol,纯度50％)添加到2-叔丁基四唑-5-甲酸(43.90mg,258.01μmol)、(1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)哌啶-4-基)甲胺盐酸盐(60mg,172μmol)和DIPEA(111.15mg,860.02μmol)在干燥DMF(2.0mL)中的溶液中，并将反应物在RT下搅拌2天。添加额外的DIPEA(111.15mg,860.02μmol)和(218.91mg,344.01μmol,232.89uL,纯度50％)并继续搅拌2h。用饱和NaHCO3溶液淬灭反应，并用EtOAc萃取。将有机层用盐水(3x)洗涤并将合并的水层用EtOAc萃取。将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将粗品通过制备型HPLC(方法C2，5-60％梯度)纯化以得到2-(叔丁基)-N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)哌啶-4-基)甲基)-2H-四唑-5-甲酰胺(68.40mg，产率81.3％)，为橙色固体。LCMS m/z＝465.2[M+H]+1HNMR(500MHz,CDCl3)δppm:8.25-8.21(m,1H),8.11-8.08(m,1H),7.87(s,1H),7.84(s,1H),7.34-7.29(m,1H),5.51(br d,J＝13.4Hz,2H),4.00-3.96(m,3H),3.49(t,J＝6.7Hz,2H),3.19-3.11(m,2H),2.14-2.03(m,1H),2.03-1.94(m,2H),1.83-1.81(m,9H),1.52-1.42(m,2H)。
实施例73：5-(叔丁基)-N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
向(1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐(实施例72，步骤3，95.0mg,272.34μmol)和5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-甲酸锂(96.47mg,544.68μmol)在干燥DMF(2.0mL)中的悬浮液中添加DIPEA(176mg,1.36mmol)，随后添加(259.96mg,817.02μmol)，并将反应物在RT下搅拌17h。将反应物用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3、水和盐水(2x)洗涤。将合并的水层用EtOAc再次萃取，将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过制备型HPLC(方法C2，5-60％梯度)纯化以得到5-(叔丁基)-N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(79.9mg，产率60％)，为灰白色固体。LCMS m/z＝465.3[M+H]+1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm:8.24(s,1H),8.09(s,1H),7.92(s,1H),7.84(s,1H),7.12(br t,J＝6.1Hz,1H),5.48(br d,J＝13.4Hz,2H),3.97-4.03(m,3H),3.44(t,J＝6.4Hz,2H),3.18-3.08(m,2H),2.13-2.02(m,1H),1.96(br d,J＝12.8Hz,2H),1.48(s,9H),1.47-1.39(m,2H)。
实施例74：1-(叔丁基)-N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
按照实施例72，步骤4中描述的方法，由(1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐(实施例72，步骤3)和1-叔丁基三唑-4-甲酸获得1-(叔丁基)-N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡嗪-8-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(55.7mg，产率62.9％)，为灰白色固体。LCMS m/z＝464.3[M+H]+1H NMR(500MHz,CDCl3)δppm 8.24(s,1H),8.17-8.13(m,1H),8.09(s,1H),7.90-7.85(m,1H),7.84(s,1H),7.35-7.30(m,1H),5.61-5.43(m,2H),3.99(s,3H),3.44(t,J＝6.4Hz,2H),3.19-3.10(m,2H),2.09-2.02(m,1H),2.02-1.95(m,2H),1.74-1.70(m,1H),1.52-1.40(m,2H)。
C.5[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶的制备
实施例75：1-(叔丁基)-N-(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-5-基)苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
1. 5-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶的合成
将7-溴-5-氯-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶(112mg,0.48mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(100mg,0.48mmol)、K2CO3(199mg,1.4mmol)和Pd(dppf)Cl2·DCM(39mg,48μmol)的混合物溶解在二噁烷(3.8mL)和水(1mL)中，并将N2鼓泡通过混合物5min。将反应混合物在N2气氛下加热至100℃并在此温度下搅拌1h。将反应混合物冷却至环境温度并通过过滤。将滤液浓缩，并将粗物质通过硅胶柱色谱法(3:1EtOAc/EtOH:庚烷，2％至100％)纯化以得到5-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶，为灰白色固体(84mg，产率75％)。1H NMR(500MHz,MeOH-d4)δ:9.27(s,1H),8.25(s,1H),8.06(s,1H),7.87(s,1H),7.54-7.50(m,1H),3.96(s,3H)。
2.(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-5-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(120mg,0.36mmol)、5-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶(84mg,0.36mmol)、K2CO3(149mg,1.1mmol)和Pd(dppf)Cl2·DCM(29mg,36μmol)的混合物溶解在二噁烷(2.9mL)和水(0.7mL)中，并将N2鼓泡通过混合物5min。将反应混合物在N2气氛下加热至100℃并搅拌2h。将反应混合物冷却至环境温度并通过过滤。将滤液浓缩，并将粗物质通过硅胶柱色谱法([3:1EtOAc/EtOH]/庚烷，2％至100％)纯化以得到(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-5-基)苄基]氨基甲酸叔丁酯，为棕色固体(129mg，产率89％)。LCMS m/z＝405.1[M+H]+
3.(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-5-基)苯基)甲胺二盐酸盐的合成
向(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-5-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(125mg,309μmol)在EtOAc(1mL)中的溶液中添加HCl溶液(1M于EtOAc中，3.09mL)，并将反应物在环境温度下搅拌3天。将反应混合物浓缩，并且粗物质无需进一步纯化即可继续使用(94mg，粗品)。LCMS m/z＝305[M+H]+
4. 1-(叔丁基)-N-(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-5-基)苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺的合成
在冰水冷却浴中向1-(叔丁基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸(13mg,75μmol)在THF(2mL)中的溶液中添加TEA(20mg,201μmol)和HATU(38mg,101μmol)。将反应混合物在0℃下搅拌10min，然后添加(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-5-基)苯基)甲胺二盐酸盐(19mg,50μmol)。将反应混合物升温至23℃并搅拌24h。添加水(5mL)以淬灭反应，然后添加EtOAc(5mL)并分离各层。将水相用EtOAc(2x 5mL)萃取。将有机相合并，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将粗物质通过反相HPLC(方法C1，5-45％梯度)纯化以得到1-(叔丁基)-N-(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-5-基)苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺，为白色固体(14.7mg，产率51％)。LCMS m/z＝456.2[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.29-9.16(m,2H),8.71(s,1H),8.52(s,1H),8.22(s,1H),8.02(s,1H),7.85-7.76(m,2H),7.57(d,J＝8.5Hz,2H),7.41(s,1H),4.58(d,J＝6.7Hz,2H),3.89(s,3H),1.68-1.61(m,9H)。
实施例76：N-(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-5-基)苄基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
按照实施例75，步骤4中所用的方法，由5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸钾和(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-5-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例75，步骤3)获得N-(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-5-基)苄基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(13.8mg，产率48％)，为白色固体。LCMS m/z＝455.2[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.57(t,J＝6.1Hz,1H),9.18(s,1H),8.51(s,1H),8.22(s,1H),8.02(s,1H),7.82(d,J＝8.5Hz,2H),7.57(d,J＝8.5Hz,2H),7.39(s,1H),4.56(d,J＝6.7Hz,2H),3.95-3.84(m,3H),1.59-1.51(m,3H),1.44-1.34(m,2H),1.23-1.13(m,2H)。
实施例77：1-(叔丁基)-N-(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-5-基)苄基)-1H-吡唑-4-甲酰胺
按照实施例75，步骤4中所用的方法，由1-(叔丁基)-1H-吡唑-4-甲酸和(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-5-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例75，步骤3)获得1-(叔丁基)-N-(4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-5-基)苄基)-1H-吡唑-4-甲酰胺，为白色固体(19.6mg，产率68％)。LCMS m/z＝455.2[M+H]+。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.18(s,1H),8.72(t,J＝6.1Hz,1H),8.52(s,1H),8.32(s,1H),8.23(s,1H),8.02(s,1H),7.92(s,1H),7.81(d,J＝8.5Hz,2H),7.55(d,J＝7.9Hz,2H),7.40(s,1H),4.54(d,J＝6.1Hz,2H),3.89(s,3H),1.59-1.49(m,9H)。
实施例78：5-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
将5-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(步骤1，实施例55，100mg,250.4μmol)、5-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶(步骤4，实施例56，58.52mg,250.4μmol)、K2CO3(103.84mg,751.3μmol)和Pd(dppf)Cl2(9.16mg,12.5μmol)的混合物溶解在二噁烷(2.0mL)和水(0.5mL)中，并将N2鼓泡通过混合物5min。将反应混合物在N2下加热至100℃并在100℃下搅拌过夜。将冷却的反应物浓缩，溶解在MeOH中，并通过0.45μM注射器过滤器过滤。将滤液浓缩并通过HPLC(方法C3，5-75％)纯化以得到5-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(70mg，产率56.4％)。LCMS m/z＝471.3[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.54(t,J＝6.10Hz,1H)8.33(s,1H)8.10(s,1H)7.93-7.90(m,1H)7.83(s,1H)7.82-7.78(m,2H),7.64-7.61(m,1H)7.48(d,J＝8.55Hz,1H)4.56(d,J＝6.10Hz,2H)3.89(s,3H)2.46(s,3H)1.44(s,9H)。
实施例79：5-(叔丁基)-N-(3-氟-2-甲基-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.(4-溴-3-氟-2-甲基苯基)甲胺盐酸盐的制备
向4-溴-3-氟-2-甲基苄腈(62.2g,290mmol)在THF(150mL)中的溶液中添加BH3.THF(49.9g,581mmol)，并将溶液在70℃下搅拌过夜。在0℃下通过小心地添加MeOH来淬灭反应，浓缩混合物，将残余物溶解在DCM(1L)中并缓慢添加36％ HCl水溶液(20mL)。将混合物搅拌30min，滤出所得固体，用DCM和TBME洗涤并在真空下干燥以得到(4-溴-3-氟-2-甲基苯基)甲胺盐酸盐(58.6g，79％)，为灰色固体。LCMS m/z＝218.2[M+H]+。
2.(4-溴-3-氟-2-甲基苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
向4-溴-3-氟-2-甲基苯基)甲胺盐酸盐(63.0g,247mmol)在DCM(450mL)中的悬浮液中添加TEA(75.1g,742mmol)和(Boc)2O(64.8g,297mmol)，并将反应物在rt下搅拌过夜。将混合物用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩。将粗产物原样用于下一步。
3.(3-氟-2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将(4-溴-3-氟-2-甲基苄基)氨基甲酸叔丁酯(47.4g,149mmol)、双(频哪醇)二硼(45.4g,179mmol)和KOAc(29.3g,298mmol)在二噁烷(600mL)中的溶液在N2下在rt下搅拌10min。添加PdCl2(dppf)·DCM(12.2g,14.9mmol)并将反应混合物在90℃下搅拌16h。将混合物通过过滤，将滤液用EtOAc稀释，然后用水、饱和NaHCO3和盐水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩。将粗产物通过柱色谱法(庚烷:EtOAc梯度0至30％EtOAc)纯化以得到不纯产物。将固体与己烷一起研磨，滤出固体并干燥以得到(3-氟-2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(42.3g，78％)。
4.(3-氟-2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苯基)甲胺盐酸盐的制备
将(3-氟-2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(30.0g,82.1mmol)悬浮在二噁烷中的4M HCl(62mL,246mmol)中，并将混合物在rt下搅拌1h。将混合物真空浓缩并与甲苯(5x50mL)共沸以得到(3-氟-2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苯基)甲胺盐酸盐(25.8g，粗品)，为浅粉色固体。
5.(3-氟-2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苯基)甲胺的制备
将DIPEA(45mL,257mmol)添加到(3-氟-2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苯基)甲胺盐酸盐(25.8g,85.6mmol)和5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸(21.8g,128mmol)在无水DMF(500mL)中的悬浮液中，并将混合物冷却至0℃。添加(64.7mL,111mmol)，并将所得混合物升温至rt并搅拌2h。将反应用水(300mL)淬灭并添加EtOAc(300mL)。分离各层并将水层用EtOAc(3x 100mL)萃取。将合并的有机层用水(3x50mL)、NaHCO3的饱和水溶液(50mL)和盐水(50mL)洗涤，然后经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩以得到米色油状物。将其通过硅胶柱色谱法(庚烷:EtOAc，0-20％梯度)纯化两次以得到(3-氟-2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苯基)甲胺，为浓稠的浅黄色油状物，其静置后缓慢固化(11.2g，31％)。
6. 5-(叔丁基)-N-(3-氟-2-甲基-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
将5-(叔丁基)-N-(3-氟-2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(75.0mg,179.74μmol)、5-氯-7-(1-甲基吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶(42.00mg,179.74μmol)、K2CO3(74.5mg,539.2μmol)和Pd(dppf)Cl2(6.58mg,8.99μmol)的混合物溶解在二噁烷(1.44mL)和水(0.36mL)中，并将N2鼓泡通过混合物5min。将反应混合物在N2气氛下加热至100℃并在100℃下搅拌3h。将反应物浓缩并通过柱色谱法(梯度洗脱0-100％[3:1EtOAc:EtOH]:庚烷)纯化以得到5-(叔丁基)-N-(3-氟-2-甲基-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(88mg，产率99.2％)，为浅黄色固体。LCMS m/z＝489.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 9.58(t,J＝5.77Hz,1H)8.31(s,1H)8.08(s,1H)7.91(s,1H)7.66-7.60(m,2H)7.57(br s,1H)7.35(d,J＝8.03Hz,1H)4.59(d,J＝6.02Hz,2H)3.87(s,3H)2.35(d,J＝2.01Hz,3H)1.44(s,9H)。
实施例80：5-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
按照实施例79，步骤6中描述的程序，由5-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(实施例55，步骤1)和4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5)获得5-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺，为白色固体(74mg，产率82.1％)。LCMS m/z＝471.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 9.50(t,J＝5.90Hz,1H)9.12(d,J＝1.00Hz,1H)8.34(s,1H)8.18(d,J＝2.51Hz,1H)8.11(d,J＝0.75Hz,1H)7.95(d,J＝5.02Hz,2H)7.45(d,J＝8.53Hz,1H)7.15(dd,J＝2.51,1.00Hz,1H)4.55(d,J＝6.27Hz,2H)3.91(s,3H)2.48(s,3H)1.44(s,9H)。
实施例81：5-(叔丁基)-N-(3-氟-2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
按照实施例79，步骤6中描述的程序，由5-(叔丁基)-N-(3-氟-2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(实施例79，步骤5)和4-氯-6-(1-甲基吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5)获得5-(叔丁基)-N-(3-氟-2-甲基-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺，为浅黄色固体(81mg，产率90.4％)。LCMS m/z＝489.2[M+H]+1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 9.55(t,J＝6.15Hz,1H)9.19(d,J＝1.00Hz,1H)8.27(s,1H)8.14(d,J＝2.26Hz,1H)8.07(d,J＝0.75Hz,1H)7.59(t,J＝7.53Hz,1H)7.30(d,J＝8.03Hz,1H)6.75(t,J＝2.13Hz,1H)4.58(d,J＝5.77Hz,2H)3.88(s,3H)2.35(d,J＝2.01Hz,3H)1.44(s,9H)。
实施例82：5-(叔丁基)-N-(2-氯-4-(吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.(2-氯-4-(吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
在20℃下向(2-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(359.1mg,0.977mmol)在二噁烷(30mL)和H2O(5mL)中的溶液中添加4-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪(150mg,0.977mmol)和K2CO3(270mg,1.95mmol)。添加Pd(dppf)Cl2(71.5mg,97.7μmol)并将反应物在N2下在90℃下搅拌3h。将混合物过滤并在真空下浓缩以得到粗品，将其通过硅胶色谱柱(PE/EtOAc＝3/1)纯化以得到(2-氯-4-(吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(200mg，产率57.1％)，为黄色固体。
2.(2-氯-4-(吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐的制备
将(2-氯-4-(吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(200mg,0.557mmol)在4M HCl/EtOAc(20mL)中的溶液在20℃下搅拌1h。将混合物在真空下浓缩以得到(2-氯-4-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基-苯基)甲胺二盐酸盐(150mg)，为白色固体，其无需进一步纯化即可直接用于下一步骤。
3. 5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-碳酰氯的制备
在15℃下向5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-甲酸(200mg,1.18mmol)在DCM(10mL)和DMF(0.2mL)中的溶液中添加亚硫酰氯(559.3mg,4.70mmol)，并将反应物在15℃下搅拌0.5h。将混合物过滤并在真空下浓缩以得到5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-碳酰氯(200mg，粗品)，为白色固体。
4. 5-(叔丁基)-N-(2-氯-4-(吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
在20℃下向(2-氯-4-(吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(140mg,474.3μmol)在DCM(30mL)中的溶液中添加DIPEA(122.6mg,948.6μmol)。添加5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-碳酰氯(实施例82步骤3,134.2mg,711.5μmol)，并将反应混合物在20℃下搅拌1h。将混合物倒入水(50mL)中并用DCM(50mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。将粗产物通过制备型HPLC(方法D，48-68％梯度)纯化以得到5-(叔丁基)-N-(2-氯-4-(吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(88.9mg，产率45.6％)，为白色固体。LCMS m/z＝411.0[M+H]+1HNMR:(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.63-9.59(m,1H),9.47(m,1H),8.26(s,1H),8.09-8.03(m,3H),7.57-7.54(m,1H),7.21(s,1H),4.62(d,J＝6.0Hz,2H),1.44(s,9H)。
实施例83.5-(叔丁基)-N-(3-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.(3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将KOAc(8.13g,82.86mmol)和Pd(dppf)Cl2 DCM(2.26g,2.76mmol)添加到(4-溴-3-氟苄基)氨基甲酸叔丁酯(8.40g,27.6mmol)和(BPin)2(14.03g,55.2mmol)在二噁烷(150mL)中的溶液中，并将反应物在N2下在90℃下搅拌12h。将混合物浓缩至干以得到粗产物，将其通过硅胶柱色谱法(PE/EtOAc＝20/1)纯化以得到(3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(9.00g，产率83.5％)，为白色固体。LCMS m/z＝296.0[M-CH4+H]+。
2.(3-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将K2CO3(472.7mg,3.42mmol)和Pd(dppf)Cl2·DCM(93.1mg,114μmol)添加到(3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(400mg,1.14mmol)和4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5，266.1mg,1.14mmol)在二噁烷(30mL)和水(3mL)中的溶液中，并将混合物在90℃下在N2下搅拌5h。将混合物浓缩至干，并将粗产物通过柱色谱法(PE/EtOAc＝1:4)纯化以得到(3-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，产率74.8％)，为棕色固体。
3.(3-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐的制备
将(3-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(400mg,946.9μmol)在HCl/EtOAc(4M,20mL)中的溶液在20℃下搅拌1h。将混合物在真空下浓缩以得到(3-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(340mg，产率90.1％)，为黄色固体。其不经纯化即用于下一步骤。
4. 5-(叔丁基)-N-(3-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
向(3-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(80mg,223μmol)在DCM(50mL)中的溶液中添加DIPEA(86.45mg,668.9μmol)。添加5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-碳酰氯(实施例82，步骤3,63.08mg,334.5μmol)，并将混合物在20℃下搅拌1h。将混合物在真空下浓缩，并将粗品通过制备型HPLC(方法D，43-63％梯度)纯化以得到5-(叔丁基)-N-(3-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(30mg，产率28.4％)，为棕色固体。LCMS m/z＝475.1[M+H]+1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.63(t,J＝5.0Hz,1H),9.20(s,1H),8.28(s,1H),8.15(s,1H),8.07(s,1H),7.78(t,J＝5.0Hz,1H),7.37(t,J＝5.0Hz,2H),6.77(s,1H),4.57(d,J＝5.0Hz,2H),3.88(s,3H),1.43(s,9H)。
实施例84.5-(叔丁基)-N-(2,5-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.(2,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
按照实施例83，步骤1中描述的程序，由(4-溴-2,5-二氟苄基)氨基甲酸叔丁酯和(BPin)2获得(2,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(8.0g，产率89.5％)，为白色固体。LCMS m/z＝314.0[M-CH4+H]+
2.(2,5-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将K2CO3(47.32mg,0.342mmol)和Pd(dppf)Cl2(12.53mg,17.12μmol)添加到(2,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(82.17mg,0.223mmol)和4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5，40.0mg,0.172mmol)在二噁烷(8mL)和水(1mL)中的溶液中，并将混合物在90℃下在N2下搅拌2h。将混合物过滤并浓缩至干，并将粗产物通过柱色谱法(PE/EtOAc＝1:0至1/2)纯化以得到(2,5-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(40mg，产率53.1％)，为白色固体。LCMS m/z＝441.1[M+H]+
3.(2,5-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐的制备
将(2,5-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(650mg,1.48mmol)在HCl/EtOAc(4M,15mL)和DCM(10mL)中的溶液在20℃下搅拌1h。将混合物在真空下浓缩以得到(2,5-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(555mg)，为白色固体。其不经纯化即用于下一步骤。LCMS m/z＝341.0[M+H]+
4. 5-(叔丁基)-N-(2,5-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
向(2,5-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(80mg,235.1μmol)在DCM(50mL)中的溶液中添加DIPEA(151.9mg,1.18mmol)。添加5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-碳酰氯(实施例82，步骤3，88.67mg,470.1μmol)，并将混合物在20℃下搅拌1h。将混合物在真空下浓缩并将粗品通过制备型HPLC(方法E，40-70％梯度)纯化以得到5-(叔丁基)-N-(2,5-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(29mg，产率25.1％)，为白色固体。LCMS m/z＝493.0[M+H]+1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.55(t,J＝6.0Hz,1H),9.20(s,1H),8.27(s,1H),8.14(d,J＝2.4Hz,1H),8.05(s,1H),7.67-7.62(m,1H),7.43-7.38(m,1H),6.79(s,1H),4.57(d,J＝6.0Hz,2H),3.86(s,3H),1.41(s,9H)
实施例85：5-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.(2-甲基-4-(吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
在20℃下向(2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(步骤1，实施例14，226.1mg,651.2μmol)在二噁烷(20mL)和H2O(2mL)中的溶液中添加4-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪(100mg,651.2μmol)和K2CO3(180mg,1.30mmol)。添加Pd(dppf)Cl2(47.65mg,65.1μmol)并将反应物在N2下在90℃下搅拌3h。将冷却的混合物过滤并在真空下浓缩。将粗产物通过硅胶柱色谱法(PE/EtOAc＝4/1)纯化以得到(2-甲基-4-(吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，产率68.1％)，为黄色固体。LCMS m/z＝339.0[M+H]+
2.(2-甲基-4-(吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐的制备
将(2-甲基-4-(吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(150mg,443.3μmol)在HCl/EtOAc(20mL)中的溶液在20℃下搅拌1h。将混合物在真空下浓缩以得到(2-甲基-4-(吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(110mg，粗品)为白色固体，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。LCMS m/z＝239.0[M+H]+
3. 5-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
向(2-甲基-4-(吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(100mg,364μmol)在DCM(30mL)中的溶液中添加DIPEA(94.1mg,727.9μmol)和HATU(276.8mg,0.728mmol)。添加5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-碳酰氯(103mg,546μmol)，并将反应物在20℃下搅拌1h。将混合物倒入水(50mL)中并用DCM(50mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩以得到粗品，其通过制备型HPLC(方法D，45-65％梯度)纯化以得到5-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(55.7mg，产率39.2％)，为白色固体。LCMS m/z＝391.1[M+H]+。1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ＝9.53-9.49(m,1H),8.78(d,J＝4.4Hz,1H),8.24(d,J＝2.4Hz,1H),8.00(d,J＝4.4Hz,1H),7.88-7.86(m,2H),7.45-7.42(m,1H),7.19(d,J＝1.6Hz,1H),4.54(d,J＝6.0Hz,2H),2.45(s,3H),1.43(s,9H)。
实施例86.5-(叔丁基)-N-(2-(二氟甲基)-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.(2-(二氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
向(4-溴-2-(二氟甲基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(4.20g,12.49mmol)在二噁烷(120mL)中的溶液中添加(BPin)2(3.33g,13.11mmol)、KOAc(3.68g,37.47mmol)和Pd(dppf)Cl2(9.14g,12.49mmol)，并将反应物在85℃下搅拌16h。将混合物浓缩至干以得到残余物，将其通过硅胶色谱法(PE:EtOAc，100:0至85:5)纯化以得到(2-(二氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(4.30g，产率62.9％)，为透明半固体。
2.(2-(二氟甲基)-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
按照实施例83，步骤2中描述的程序，由(2-(二氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯和4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5)获得(2-(二氟甲基)-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯，为黄色固体(800mg，产率74％)。LCMS m/z＝455.1[M+H]+
3.(2-(二氟甲基)-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐的制备
按照实施例85，步骤2中描述的程序，由(2-(二氟甲基)-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯获得(2-(二氟甲基)-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐，为黄色固体，700mg粗品。LCMS m/z＝355.0[M+H]+
4. 5-(叔丁基)-N-(2-(二氟甲基)-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
按照与实施例85，步骤3中描述的程序类似的程序，由(2-(二氟甲基)-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐和5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸获得5-(叔丁基)-N-(2-(二氟甲基)-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺，为黄色固体(50.2mg，产率43％)。LCMS m/z＝507.1[M+H]+1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.64-9.60(m,1H),9.15(s,1H),8.31-8.26(m,3H),8.19(s,1H),8.09(s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),7.14-7.13(m,1H),7.12(s,1H),4.71(d,J＝6.0Hz,2H),3.88(s,3H),1.41(s,9H)。
实施例87.2-(叔丁基)-N-(2,3-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-2H-四唑-5-甲酰胺
1.(2,3-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
按照实施例83，步骤2中描述的程序，由(2,3-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯和4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5)获得(2,3-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯，为黄色固体(100mg，产率27.9％)。LCMS m/z＝441.1[M+H]+。
2.(2,3-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐的制备
向(2,3-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(100mg,227μmol)在DCM(2mL)中的溶液中添加HCl/EtOAc(15mL,4M)，并将反应物在25℃下搅拌1h。将混合物浓缩以得到(2,3-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(80mg，粗品)，为黄色固体。LCMS m/z＝341.0[M+H]+
3. 2-(叔丁基)-N-(2,3-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-2H-四唑-5-甲酰胺的制备
向(2,3-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(80mg,235.1μmol)在DCM(30mL)中的溶液中添加DIPEA(60.76mg,470.1μmol)、2-(叔丁基)-2H-四唑-5-甲酸(80mg,470.14μmol)和HATU(179.24mg,470.1μmol)，并将反应物在25℃下搅拌1h。将混合物用水(30mL)稀释，并用DCM(15mL x 3)萃取。将合并的有机层在真空下浓缩，并将残余物通过制备型HPLC(方法D，42-62％梯度)纯化以得到2-(叔丁基)-N-(2,3-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-2H-四唑-5-甲酰胺(37mg，产率32％)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.71(t,J＝6.0Hz,1H),9.24(d,J＝0.5Hz,1H),8.28(s,1H),8.18(d,J＝2.5Hz,1H),8.08(s,1H),7.62(t,J＝6.5Hz,1H),7.40(t,J＝7.0Hz,1H),6.87(s,1H),4.67(d,J＝6.0Hz,2H),3.88(s,3H),1.74(s,9H)。
实施例88.5-(叔丁基)-N-(2,3-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
在20℃下向(2,3-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例87，步骤2，80mg,212.3μmol)在DCM(30mL)中的溶液中添加DIPEA(54.88mg,424.6μmol)。添加5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸(72.26mg,424.64μmol)和HATU(97.13mg,254.78μmol)，并将反应物在20℃下搅拌1h。将混合物倒入水(50mL)中并用DCM(50mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。将粗产物通过制备型HPLC(方法D，53-73％梯度)纯化以得到5-(叔丁基)-N-(2,3-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(43.8mg，产率41.9％)，为黄色固体。LCMS m/z＝493.1[M+H]+1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.66-9.62(m,1H),9.24(s,1H),8.29(s,1H),8.18(s,1H),8.08(s,1H),7.65-7.61(m,1H),7.41-7.31(m,1H),6.87(s,1H),4.64(d,J＝6.0Hz,2H),3.89(s,3H),1.43(s,9H)。
实施例89至107
按照与实施例88中描述的程序类似的程序，由下面列出的适当的甲酸和胺制备下表中的化合物。
胺1：(2,3-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例87，步骤2)
胺2：(2,5-二氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例84，步骤3)
胺3：(2-(二氟甲基)-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例86，步骤3)
实施例108. 3-(叔丁基)-N-(3-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酰胺
向(3-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例83，步骤3，80mg,223μmol)在DCM(50mL)中的溶液中添加DIPEA(86.45mg,669μmol)、3-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸(56.91mg,334.5μmol)和HATU(85mg,223μmol)，并将混合物在20℃下搅拌2h。将混合物在真空下浓缩，并将粗品通过制备型HPLC(方法D，55-75％梯度)纯化以得到3-(叔丁基)-N-(3-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酰胺(41.8mg，产率39.5％)，为黄色固体。LCMSm/z＝475.1[M+H]+1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.97(t,J＝4.0Hz,1H),9.21(s,1H),8.28(s,1H),8.15(s,1H),8.07(s,1H),7.78(t,J＝8.0Hz,1H),7.44-7.38(m,2H),6.77(s,1H),4.58(d,J＝4.0Hz,2H),3.88(s,3H),1.37(s,9H)。
实施例109至114
按照与实施例108中描述的程序类似的程序，由(3-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例83，步骤3)和适当的杂环甲酸制备下表中的化合物。
实施例115：2-(叔丁基)-N-((5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡啶-2-基)甲基)-2H-四唑-5-甲酰胺
1.((5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡啶-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备
按照实施例79，步骤6中描述的程序，由((5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯和4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5)获得((5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡啶-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(85mg，产率77％)，为浅黄色固体。LCMS m/z＝406.2[M+H]+
2.(5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡啶-2-基)甲胺盐酸盐的制备
将((5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡啶-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(85mg,209.6μmol)溶解在MeOH(2.10mL)中，添加HCl溶液(1.25M于MeOH中，1.68mL)，并将反应物在50℃下搅拌过夜。将反应物浓缩并真空干燥以得到(5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡啶-2-基)甲胺盐酸盐(75mg，粗品)，为黄色固体。LCMS m/z＝306.1[M+H]+
3.2-(叔丁基)-N-((5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡啶-2-基)甲基)-2H-四唑-5-甲酰胺的制备
向小瓶中装入(5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡啶-2-基)甲胺盐酸盐(35mg,102.4μmol)、2-(叔丁基)-2H-四唑-5-甲酸(20.91mg,122.9μmol)和DCM(1.02mL)，然后装入DIPEA(132.34mg,1.02mmol)，并将溶液冷却至0℃。一次性添加HATU(46.85mg,122.9μmol)并将反应物在rt下搅拌过夜。将反应物浓缩并通过柱色谱法(梯度洗脱0-100％[3:1EtOAc:EtOH]:庚烷)纯化以得到2-(叔丁基)-N-((5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡啶-2-基)甲基)-2H-四唑-5-甲酰胺(40mg，产率84.5％)，为黄色固体。LCMS m/z＝458.2[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.66(t,J＝6.10Hz,1H)9.27(d,J＝2.44Hz,1H)9.19(s,1H)8.52(dd,J＝7.94,2.44Hz,1H)8.37(s,1H)8.22(d,J＝2.44Hz,1H)8.13(s,1H)7.58(d,J＝7.94Hz,1H)7.24(dd,J＝2.44,1.22Hz,1H)4.73(d,J＝6.10Hz,2H)3.90(s,3H)1.75(s,9H)。
实施例116：5-(叔丁基)-N-((5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡啶-2-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
按照实施例115，步骤3中描述的方法，由(5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡啶-2-基)甲胺盐酸盐和5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-甲酸获得5-(叔丁基)-N-((5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)吡啶-2-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺，为黄色固体(45mg，产率74.3％)。LCMS m/z＝458.2[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.58(t,J＝6.10Hz,1H)9.27(d,J＝1.83Hz,1H)9.20(s,1H)8.52(dd,J＝8.24,2.14Hz,1H)8.37(s,1H)8.22(d,J＝2.44Hz,1H)8.13(s,1H)7.57(d,J＝7.94Hz,1H)7.27 -7.20(m,1H)4.70(d,J＝6.10Hz,2H)3.91(s,3H)1.45(s,9H)。
实施例117：5-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
将DABAL-Me3(47.71mg,186.1μmol)添加到(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例6，步骤2，40.0mg,124.1μmol)和5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-甲酸乙酯(36.90mg,186.14μmol)在THF(1.24mL)中的混合物中，并将反应物在45℃下加热过夜。将混合物用MeOH稀释(形成浓稠的凝胶)并过滤。将滤液浓缩并通过柱色谱法(梯度洗脱0-75％[EtOAc:EtOH]:庚烷)纯化以得到5-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(36.0mg，产率58.1％)，为浅黄色固体。LCMS m/z＝475.2[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.59(t,J＝6.10Hz,1H)9.18(d,J＝1.22Hz,1H)8.37(s,1H)8.21(d,J＝2.44Hz,1H)8.13(s,1H)8.00(dd,J＝7.94,1.83Hz,1H)7.94(dd,J＝11.29,1.53Hz,1H)7.58(t,J＝7.94Hz,1H)7.22(d,J＝1.83Hz,1H)4.61(d,J＝6.10Hz,2H)3.91(s,3H)1.44(s,9H)。
实施例118：3-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酰胺
1.(4-(6-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-氟苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将(2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(500mg,1.42mmol)、4,6-二氯吡唑并[1,5-a]吡嗪(267.65mg,1.42mmol)和K3PO4(2.0M,1.14mL)的混合物溶解在二噁烷(4.73mL)中，并将N2鼓泡通过混合物5min。添加Pd(t-Bu3P)2(36.38mg,71.18μmol)，并将反应混合物在rt下搅拌2h。将反应物浓缩并通过柱色谱法(梯度洗脱0-100％ EtOAc:庚烷)纯化以得到(4-(6-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-氟苄基)氨基甲酸叔丁酯(460mg，产率86％)，为白色油状固体。LCMS m/z＝377.1[M+H]+
2.(2-氟-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
按照与实施例23，步骤2中描述的程序类似的程序，由(4-(6-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-氟苄基)氨基甲酸叔丁酯和1-甲基哌嗪获得(2-氟-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯，为黄色固体(139mg，产率79.3％)。将粗产物通过柱色谱法(梯度洗脱0-100％[3:1EtOAc:EtOH]:庚烷，具有1％ TEA改性剂)纯化。LCMS m/z＝441.2[M+H]+
3.(2-氟-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐的制备
按照实施例23，步骤3中描述的程序，由(2-氟-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯获得(2-氟-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐，为黄色固体，122mg粗品。LCMS m/z＝341.1[M+H]+
4.3-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酰胺的制备
将DABAL-Me3(33.9mg,132.2μmol)添加到(2-氟-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(30mg,88.1μmol)和3-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酸乙酯(132.2μmol)在THF(0.88mL)中的混合物中，并将反应物在45℃下加热过夜。将混合物用NaHCO3溶液和DCM稀释，并分离各层。将水层用DCM萃取，并将合并的有机滤液用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。将物质通过HPLC方法(C3，5-55％)纯化以得到3-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-5-甲酰胺三氟乙酸盐(8.30mg，产率15.5％)，为黄色固体。LCMS m/z＝493.2[M+H]+。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.97(br t,J＝6.1Hz,1H),9.65(s,1H),8.42(s,1H),8.09(d,J＝2.4Hz,1H),7.95(br dd,J＝7.9,1.2Hz,1H),7.87(br dd,J＝11.0,1.8Hz,1H),7.61(brt,J＝7.9Hz,1H),7.14(br d,J＝2.4Hz,1H),4.60(br d,J＝6.1Hz,2H),4.31(br d,J＝12.8Hz,2H),3.54(br d,J＝11.0Hz,2H),3.24-3.06(m,2H),2.86(br s,3H),1.37(s,9H)。
实施例119：5-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,3,4-噁二唑-2-甲酰胺
1.(2-氟-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
按照实施例23，步骤2中描述的程序，由(4-(6-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-氟苄基)氨基甲酸叔丁酯(实施例118，步骤1)和吗啉获得(2-氟-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯，为橙色固体(163mg，产率75.6％)。LCMS m/z＝428.2[M+H]+
2.(2-氟-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐的制备
按照实施例23，步骤3中描述的程序，由(2-氟-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯获得(2-氟-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐，为红色固体，177mg。LCMS m/z＝328.1[M+H]+
3.5-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,3,4-噁二唑-2-甲酰胺的制备
将DIPEA(74.0mg,572.7μmol)添加到(2-氟-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(30mg,67.5μmol)、5-叔丁基-1,3,4-噁二唑-2-甲酸钾(16.94mg,80.9μmol)和DCM(0.7mL)的混合物中，并将溶液冷却至0℃。添加HATU(30.86mg,80.9μmol)并将反应物在rt下搅拌过夜。将反应物用水稀释并通过相分离器。将水层用DCM萃取，并将合并的有机层浓缩。将粗产物通过HPLC(方法A2，5-60％)纯化并冻干以得到5-(叔丁基)-N-(2-氟-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,3,4-噁二唑-2-甲酰胺(0.3mg，产率0.8％)，为黄色固体。LCMS m/z＝479.2[M+H]+。
实施例120：1-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
1.(4-(6-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
按照实施例118，步骤1中描述的程序，由(2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯和4,6-二氯吡唑并[1,5-a]吡嗪获得(4-(6-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基苄基)氨基甲酸叔丁酯，为浅黄色固体(913mg，产率85％)。LCMS m/z＝373.1[M+H]+
2.(2-甲基-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
按照实施例119，步骤1中描述的程序，由(4-(6-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基苄基)氨基甲酸叔丁酯和吗啉获得(2-甲基-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯，为黄色固体。LCMS m/z＝424.3[M+H]+
3.(2-甲基-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐的制备
按照实施例119，步骤2中描述的程序，由(2-甲基-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯获得(2-甲基-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐，为黄色固体。LCMS m/z＝324.2[M+H]+
4.1-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐的制备
向小瓶中装入(2-甲基-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(40mg,100.9μmol)、1-叔丁基三唑-4-甲酸(20.49mg,121.1μmol)和DCM(1.01mL)，然后装入DIPEA(110.75mg,856.9μmol)，并将溶液冷却至0℃。添加HATU(46.17mg,121.1μmol)并将反应物在rt下搅拌过夜。将反应物直接加载到硅胶柱上，并通过柱色谱法(梯度洗脱0-100％ EtOAc:庚烷)纯化以得到深橙色薄膜产物。将所述物质通过HPLC(方法C3，10-95％)再次纯化以得到1-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐(16mg，产率26.4％)，为黄色固体。LCMS m/z＝475.2[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.04(t,J＝6.10Hz,1H)8.71(s,1H)8.13(s,1H)8.01(d,J＝3.05Hz,1H)7.89-7.83(m,2H)7.41(d,J＝8.55Hz,1H)7.03(d,J＝2.44Hz,1H)4.52(d,J＝6.10Hz,2H)3.81 -3.74(m,4H)3.38-3.35(m,4H)2.45(s,3H)1.64(s,9H)
实施例121：1-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
1.(2-甲基-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
按照实施例119，步骤1中描述的程序，由(4-(6-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基苄基)氨基甲酸叔丁酯(实施例120，步骤1)和1-甲基哌嗪获得(2-甲基-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯，为橙色固体(232mg，产率66.1％)。将粗产物通过柱色谱法(梯度洗脱0-100％[3:1EtOAc:EtOH]:庚烷，具有1％ TEA改性剂)纯化。LCMS m/z＝437.3[M+H]+
2.(2-甲基-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺盐酸盐的制备
按照实施例119，步骤2中描述的程序，由(2-甲基-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯获得(2-甲基-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺盐酸盐，为黄色固体，226mg粗品。LCMS/z＝337.2[M+H]+
3.1-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐的制备
将DIPEA(163.1mg,1.26mmol)添加到(2-甲基-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺盐酸盐(50mg,148.6μmol)和1-叔丁基三唑-4-甲酸(30.17mg,178.3μmol)在DCM(1.49mL)中的溶液中，然后将溶液冷却至0℃。一次性添加HATU(68mg,178.3μmol)并将反应物在rt下搅拌过夜。将反应物用水稀释并通过相分离器。用DCM萃取水层，将合并的有机层真空浓缩，并将残余物通过HPLC(方法C3，5-50％)纯化以得到1-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐(52mg，产率54.7％)。LCMS m/z＝488.3[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.06(br t,J＝6.1Hz,1H),8.74-8.68(m,1H),8.35(s,1H),8.05(br d,J＝2.4Hz,1H),7.91-7.81(m,2H),7.42(br d,J＝7.9Hz,1H),7.12-7.02(m,1H),4.53(br d,J＝6.1Hz,2H),4.30(br d,J＝13.4Hz,2H),3.54(br d,J＝11.6Hz,2H),3.20(br d,J＝11.6Hz,1H),3.15-3.05(m,2H),2.86(br d,J＝3.7Hz,3H),2.46(s,3H),1.68-1.26(m,9H)。
实施例122：1-(叔丁基)-N-(4-(6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
1.(4-(6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将甲苯(7.24mL)添加到(4-(6-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基苄基)氨基甲酸叔丁酯(实施例120，步骤1，270mg,724.2μmol)、Pd2(dba)3(66.31mg,72.4μmol)、Cs2CO3(589.9mg,1.81mmol)和tBuBrettPhos(70.20mg,144.8μmol)的混合物中，并用N2向溶液中鼓泡5分钟。添加2-甲氧基乙醇(165.30mg,2.17mmol)，并将反应物在100℃下搅拌过夜。将冷却的反应物浓缩并将残余物通过硅胶柱色谱法(梯度洗脱0-100％ EtOAc:庚烷)纯化以得到(4-(6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基苄基)氨基甲酸叔丁酯(155mg，产率51.9％)，为黄色固体。LCMS m/z＝413.2[M+H]+。
2.(4-(6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基苯基)甲胺二盐酸盐的制备
按照实施例23，步骤3中描述的方法，由(4-(6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基苄基)氨基甲酸叔丁酯获得(4-(6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基苯基)甲胺二盐酸盐，为黄色固体。LCMS m/z＝313.1[M+H]+
3.1-(叔丁基)-N-(4-(6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
按照与实施例120，步骤4中描述的程序类似的程序，由(4-(6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基苯基)甲胺二盐酸盐和1-叔丁基三唑-4-甲酸获得1-(叔丁基)-N-(4-(6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基苄基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺，为灰白色固体(19mg，产率31.2％)。LCMS m/z＝464.2[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.06(t,J＝6.10Hz,1H)8.72(s,1H)8.42(d,J＝1.22Hz,1H)8.10(d,J＝2.44Hz,1H)7.92-7.84(m,2H)7.43(d,J＝8.55Hz,1H),7.15(d,J＝1.83Hz,1H)4.53(d,J＝6.10Hz,2H)4.45-4.37(m,2H)3.74-3.67(m,2H)3.32(s,3H)2.46(s,3H)1.64(s,9H)。
实施例123：2-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-2H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
将DABAL-Me3(47.56mg,185.5μmol)添加到(2-甲基-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例120，步骤3，49.02mg,123.7μmol)和2-(叔丁基)-2H-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯(实施例37a，US10377719-B2，36.6mg,185.5μmol)在THF(1.24mL)中的混合物中，并将反应物在45℃下加热过夜。将反应物用饱和NaHCO3溶液小心地淬灭并用DCM稀释。使混合物通过相分离器，并将水层用DCM萃取。将合并的有机层浓缩并通过柱色谱法(12g柱，梯度洗脱0-100％ EtOAc:庚烷)纯化以得到深橙色薄膜。将所述物质通过反向HPLC(方法A2，10-95％)再次纯化然后冻干以得到2-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-2H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(1.30mg，产率2.2％)，为黄色固体。LCMS m/z＝475.2[M+H]+1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.91(t,J＝5.80Hz,1H)8.17(s,1H)8.13(s,1H)8.01(d,J＝2.44Hz,1H)7.92-7.83(m,2H)7.42(d,J＝7.94Hz,1H)7.04(dd,J＝2.44,1.22Hz,1H)4.53(d,J＝6.10Hz,2H)3.82-3.74(m,4H)3.38-3.35(m,4H)2.45(s,3H)1.65(s,9H)。
实施例124：2-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-2H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
按照实施例118，步骤4中描述的程序，由(2-甲基-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例121，步骤2)和2-(叔丁基)-2H-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯(实施例37a，US10377719-B2)获得2-(叔丁基)-N-(2-甲基-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-2H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐，49mg，产率60.9％。LCMS m/z＝488.3[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.93(br t,J＝6.1Hz,1H),8.35(s,1H),8.17(s,1H),8.06(br d,J＝2.4Hz,1H),7.91-7.82(m,2H),7.43(br d,J＝7.9Hz,1H),7.08(d,J＝2.4Hz,1H),4.53(br d,J＝6.1Hz,2H),4.30(br d,J＝13.4Hz,2H),3.54(br d,J＝11.6Hz,2H),3.36(br d,J＝3.7Hz,2H),3.25-3.05(m,3H),2.87(br d,J＝3.7Hz,2H),2.46(s,3H),1.68-1.35(m,9H)
实施例125至133
按照与实施例119，步骤3中描述的程序类似的程序，由适当的甲酸和胺(如下所列)制备下表中的化合物。
胺4：(2-氟-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例119，步骤2)
胺5：(2-甲基-4-(6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例120，步骤3)
胺6：(2-氟-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例118，步骤3)
胺7：(2-甲基-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺二盐酸盐(实施例121，步骤2)
胺8：(4-(6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基苯基)甲胺二盐酸盐(实施例122，步骤2)
A-通过HPLC(方法C3，5-45％)纯化
实施例134：N-(4-(6-(氮杂环丁烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.(4-(6-(氮杂环丁烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将(4-(6-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(实施例23，步骤1，200mg,557.4μmol)、RuPhos Pd G3(69.93mg,83.6μmol)、氮杂环丁烷盐酸盐(208.59mg,2.23mmol)和NaOtBu(267.82mg,2.79mmol)在甲苯(4mL)中的混合物在N2下在95℃下搅拌8h。将冷却的混合物真空浓缩，并将粗品通过用(PE/EtOAc＝1/0至2/1)洗脱的硅胶柱色谱法纯化以得到(4-(6-(氮杂环丁烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(160mg，产率75.7％)，为黄色固体。LCMS m/z＝380.1[M+H]+
2.(4-(6-(氮杂环丁烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺三氟乙酸盐的制备
向(4-(6-(氮杂环丁烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(140mg,368.96μmol)在DCM(12mL)中的溶液中滴加TFA(4mL)，并将混合物在30℃下搅拌1h。将混合物真空浓缩以得到(4-(6-(氮杂环丁烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺三氟乙酸盐(100mg，粗品)，为黄色固体，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。LCMS m/z＝280.0[M+H]+
3.N-(4-(6-(氮杂环丁烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
向(4-(6-(氮杂环丁烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苯基)甲胺三氟乙酸盐(80.0mg,286.4μmol)在DCM(50mL)中的溶液中添加DIPEA(111.04mg,859.2μmol)，然后添加5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-碳酰氯(实施例82，步骤3，108.03mg,572.8μmol)，并将混合物在20℃下搅拌1h。将混合物真空浓缩，并将粗品通过制备型HPLC(方法E，42-72％梯度)纯化以得到N-(4-(6-(氮杂环丁烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(27.10mg，产率21.9％)，为黄色固体。LCMS m/z＝432.1[M+H]+1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.57-9.56(m,1H),8.01-7.98(m,2H),7.95(d,J＝2.8Hz,1H),7.85(s,1H),7.50(d,J＝8.8Hz,2H),6.99-6.98(m,1H),4.53(d,J＝6.0Hz,2H),3.92(t,J＝7.2Hz,4H),2.36-2.33(m,2H),1.42(s,9H)。
实施例135：5-(叔丁基)-N-(4-(6-(二甲基氨基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.(4-(6-(二甲基氨基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯的制备
按照与实施例134，步骤1中描述的程序类似的程序，由甲胺和(4-(6-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(实施例23，步骤1)获得(4-(6-(二甲基氨基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(60mg，25.0％)。LCMS m/z＝368.1[M+H]+
2.4-(4-(氨基甲基)苯基)-N,N-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-6-胺二盐酸盐的制备
将HCl/EtOAc(10.0mL)添加到(4-(6-(二甲基氨基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(60.0mg,163.3μmol)中，并将反应混合物在30℃下搅拌2h。将混合物真空浓缩以得到4-(4-(氨基甲基)苯基)-N,N-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-6-胺二盐酸盐(40mg，粗品)，为灰色固体，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。LCMS m/z＝268.0[M+H]+
3.N-(4-(6-(氮杂环丁烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
将5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-碳酰氯(实施例82，步骤3，37.25mg,197.5μmol)添加到4-(4-(氨基甲基)苯基)-N,N-二甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-6-胺二盐酸盐(40mg,131.7μmol)和DIPEA(68.07mg,526.7μmol)在DCM(45mL)中的溶液中，并将反应物在30℃下搅拌3h。将混合物真空浓缩并将残余物倒入水(120mL)中。用DCM(70mL x 3)萃取水相，将合并的有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩。将粗产物通过制备型HPLC(方法D，55-75％梯度)纯化以得到N-(4-(6-(氮杂环丁烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)苄基)-5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(30.0mg，产率47.8％)，为苍白色固体。LCMS m/z＝420.1[M+H]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.57-9.56(m,1H),8.01-7.98(m,2H),7.95(d,J＝2.8Hz,1H),7.85(s,1H),7.50(d,J＝8.8Hz,2H),6.99-6.98(m,1H),4.53(d,J＝6.0Hz,2H),3.92(t,J＝7.2Hz,4H),2.36-2.33(m,2H),1.42(s,9H)。
实施例136：5-(叔丁基)-N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将N-(4-哌啶基甲基)氨基甲酸叔丁酯(110.06mg,513.6μmol)、4-氯-6-(1-
甲基吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(60.0mg,256.8μmol)和Cs2CO3(167.33mg,513.56μmol)的混合物溶解在DMSO(0.856mL)中，并将反应物在rt下搅拌过夜。将反应物浓缩并通过柱色谱法(12g柱，梯度洗脱0-75％[3:1EtOAc:EtOH]:庚烷)纯化以得到((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，产率94.6％)，为浅棕色固体。LCMS m/z＝412.3[M+H]+
2.(1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐的制备
将((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(82mg,199.3μmol)溶解在MeOH(1.99mL)中，添加HCl溶液(1.25M于MeOH中，1.59mL)，并将反应物在50℃下搅拌过夜。将反应物浓缩并真空干燥以得到(1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐(93mg，粗品)，为红色固体。LCMS m/z＝312.2[M+H]+
3.5-(叔丁基)-N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
按照实施例115，步骤3中描述的程序，由5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸钾和(1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐获得5-(叔丁基)-N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺，为白色固体，20mg，产率44.8％。LCMS m/z＝464.3[M+H]+1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.00(t,J＝5.80Hz,1H)8.45(s,1H)8.14(s,1H)7.98-7.88(m,2H)6.92(d,J＝2.44Hz,1H)4.54(br d,J＝13.43Hz,2H)3.87(s,3H)3.21(t,J＝6.41Hz,2H)3.07(br t,J＝11.90Hz,2H)1.99-1.90(m,1H)1.80(br d,J＝10.99Hz,2H)1.42(s,9H)1.36-1.24(m,2H)。
实施例137.N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.(E)-2-(羟基亚氨基)-2-(1-甲基环丙烷-1-甲酰胺基)乙酸乙酯的制备
向(E)-2-氨基-2-(羟基亚氨基)乙酸乙酯(2.5g,18.92mmol)在DCM/DMF(体积/体积20/1,210mL)中的溶液中添加1-甲基环丙烷甲酸(2.08g,20.81mmol)、HATU(7.94g,20.81mmol)和DIPEA(7.34g,56.76mmol)，并将反应物在25℃下搅拌1h。将混合物倒入水(300mL)中，用DCM(100mL x 5)萃取，并将合并的有机层减压蒸发以得到(E)-2-(羟基亚氨基)-2-(1-甲基环丙烷-1-甲酰胺基)乙酸乙酯，为黄色油状物，其直接用于下一步骤。
2.5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸乙酯的制备
将(E)-2-(羟基亚氨基)-2-(1-甲基环丙烷-1-甲酰胺基)乙酸乙酯(5.30g,17.15mmol)在吡啶(100mL)中的溶液在100℃下搅拌17h。将反应溶液真空浓缩，将残余物倒入HCl溶液(1.0M,200mL)中并用DCM(100mL x 3)萃取。将合并的有机层浓缩以得到粗品，将其通过柱色谱法(PE/EtOAc＝30/1至10/1)纯化以得到5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸乙酯(1.40g，产率39.7％)，为无色油状物。
3.5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸的制备
向5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸乙酯(1.00g,4.86mmol)在MeOH/H2O(体积/体积＝10/1，44mL)中的溶液中添加NaOH(213.84mg,5.35mmol)，并将混合物在25℃下搅拌2h。将混合物用2M HCl酸化至pH＝6-7，然后真空浓缩。将粗产物冷冻干燥以得到5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸(740mg，粗品)，为白色固体，其直接用于下一步骤。
4.5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-碳酰氯的制备
向5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸(100mg,594.7μmol)在DCM(30mL)中的溶液中添加DMF(1.0mL)。滴加SOCl2(353.8mg,2.97mmol)，并将混合物在25℃下搅拌1h。将混合物浓缩以得到5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-碳酰氯(120mg，粗品)，其直接用于下一步骤。
5.N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
向(1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐(实施例136，步骤2，80mg,230μmol)在DCM(50mL)中的混合物中添加DIPEA(89.17mg,690μmol)，然后添加5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-碳酰氯(85.83mg,460μmol)，并将反应物在20℃下搅拌1h。将反应物真空浓缩，并将粗产物通过制备型HPLC(方法E，35-65％梯度)纯化以得到N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(48.0mg，产率45.2％)，为白色固体。LCMS m/z＝462.2[M+H]+1HNMR:(400MHz,DMSO-d6)δ:8.91(t,J＝6.0Hz,1H),8.41(d,J＝0.8Hz,1H),8.10(s,1H),7.94-7.87(m,2H),6.91-6.84(m,1H),4.50(d,J＝13.2Hz,2H),3.83(s,3H),3.16(t,J＝6.4Hz,2H),3.03(t,J＝12.0Hz,2H),1.96-1.82(m,1H),1.76(d,J＝10.8Hz,2H),1.50(s,3H),1.36-1.31(m,2H),1.30-1.19(m,2H),1.15-1.10(m,2H)。
实施例138：1-(叔丁基)-N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
向(1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐(实施例136，步骤2，80.0mg,230μmol)在DCM(50mL)中的混合物中添加DIPEA(89.17mg,690μmol)、1-叔丁基三唑-4-甲酸(77.82mg,460μmol)和HATU(96.45mg,253μmol)，并将反应物在20℃下搅拌1h。将反应物真空浓缩，并将粗品通过制备型HPLC纯化以得到1-(叔丁基)-N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(47.3mg，产率44.5％)，为白色固体。LCMS m/z＝463.1[M+H]+1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ:8.61(s,1H),8.51(t,J＝6.0Hz,1H),8.41(s,1H),8.10(s,1H),7.93-7.88(m,2H),6.87(d,J＝1.6Hz,1H),4.50(d,J＝13.2Hz,2H),3.83(s,3H),3.17(t,J＝6.4Hz,2H),3.03(t,J＝11.6Hz,2H),1.93-1.90(m,1H),1.77(d,J＝12.4Hz,2H),1.59(s,9H),1.34-1.18(m,2H)。
实施例139：N-((2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.2-甲基-4-((对甲苯磺酰氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的制备
向4-(羟基甲基)-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.50g,15.26mmol)和TEA(7.72g,76.3mmol)在DCM(150mL)中的溶液中缓慢添加TsCl(5.82g,30.52mmol)，然后添加DMAP(372.86mg,3.05mmol)，并将反应混合物在20℃下搅拌12h。将反应混合物真空浓缩，并将粗品通过柱色谱法(PE/EtOAc＝4/1)纯化以得到2-甲基-4-((对甲苯磺酰氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.0g，粗品)，为透明油状物。LCMS m/z＝384.0[M+H]+
2.4-((1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)甲基)-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的制备
向2-甲基-4-((对甲苯磺酰氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.0g,13.04mmol)和异吲哚啉-1,3-二酮(3.84g,26.08mmol)在DMF(100mL)中的溶液中添加K2CO3(3.60g,26.08mmol)，并将反应混合物在90℃下搅拌12h。将混合物在真空下浓缩以去除THF，将粗品倒入饱和K2CO3(100mL)中并用EtOAc(100mL x 2)萃取。将合并的有机层用水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。将粗品通过硅胶柱色谱法(PE/EtOAc＝4/1)纯化以得到4-((1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)甲基)-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.0g，粗品)，为白色固体。LCMS m/z＝359.1[M+H]+。
3.2-((2-甲基哌啶-4-基)甲基)异吲哚啉-1,3-二酮三氟乙酸盐的制备
向4-((1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)甲基)-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.00g,2.79mmol)在DCM(20mL)中的溶液中添加TFA(7.45g,65.34mmol)，并将混合物在20℃下搅拌2h。将混合物在真空下浓缩以得到2-((2-甲基哌啶-4-基)甲基)异吲哚啉-1,3-二酮三氟乙酸盐(700mg，粗品)，为透明油状物，其无需进一步纯化即可使用。LCMS m/z＝259.0[M+H]+
4.2-((2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)异吲哚啉-1,3-二酮的制备
向2-((2-甲基哌啶-4-基)甲基)异吲哚啉-1,3-二酮三氟乙酸盐(250.0mg,967.8μmol)在NMP(2mL)中的溶液中添加DIPEA(375.25mg,2.90mmol)，然后添加4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5，226.14mg,967.8μmol)，并将反应物在微波辐射下在180℃下搅拌2h。将混合物倒入H2O(100mL)中并用EtOAc(100mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。将粗产物通过硅胶柱色谱法(PE/EtOAc＝1/9)纯化以得到2-((2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)异吲哚啉-1,3-二酮(260mg，产率53.1％)，为棕色油状物。
5.(2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐的制备
向2-((2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)异吲哚啉-1,3-二酮(260mg,570.8μmol)在EtOH(20mL)中的溶液中添加NH2NH2.H2O(1.00g,19.98mmol)，并将反应物在50℃下搅拌5h。将混合物在真空下浓缩以得到(2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺(180mg，粗品)，为棕色固体。
向此化合物(180mg,553.15μmol)和TEA(167.92mg,1.66mmol)在DCM(30mL)中的溶液中添加叔丁氧羰基碳酸叔丁酯(241.45mg,1.11mmol)，并将反应混合物在20℃下搅拌3h。将反应混合物在真空下浓缩，并将粗品通过柱色谱法(PE/EtOAc＝1/4)纯化以得到((2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(130mg，产率55.2％)，为棕色固体。
将此固体(130mg,305.5μmol)在HCl/EtOAc(4M，10.0mL)中的溶液在20℃下搅拌1h。将混合物在真空下浓缩以得到2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐(120mg，粗品)，为棕色固体。LCMS m/z＝326.1[M+H]+
6.N-((2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
按照实施例108中描述的程序，由(2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐和5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸(实施例137，步骤3)获得N-((2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺，为黄色固体(46mg，产率65％)。
LCMS m/z＝476.1[M+H]+1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ:8.95-8.89(m,1H),8.45-8.42(m,1H),8.12(s,1H),7.94(s,2H),6.90-6.84(m,1H),4.99-4.20(m,2H),3.86(s,3H),3.57-3.14(m,3H),2.14-1.66(m,3H),1.52(d,J＝4.0Hz,3H),1.41-1.32(m,5H),1.26-1.13(m,4H)。
实施例140、141、142和143.1-(叔丁基)-N-(((2S,4R)-2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺、1-(叔丁基)-N-(((2R,4R)-2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺、1-(叔丁基)-N-(((2S,4S)-2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺和1-(叔丁基)-N-(((2R,4S)-2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
[任意指定的立体化学]
向(2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐(实施例139，步骤5，150mg,414.5μmol)在DCM(100mL)中的溶液中添加DIPEA(160.71mg,1.24mmol)、1-(叔丁基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸(105.18mg,621.8μmol)和HATU(158.04mg,414.51μmol)，并将反应物在20℃下搅拌2h。将混合物在真空下浓缩以得到棕色粗品，其通过制备型HPLC(方法D，38-58％梯度)纯化以得到1-(叔丁基)-N-((2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(150mg，粗品)，为黄色固体。LCMS m/z＝477.2[M+H]+
通过SFC(色谱柱：DAICEL CHIRALPAK AD(250mm x 30mm,10μm)，0.1％ NH3.H2OEtOH，流速(mL/min)：80，柱温：35℃)进一步纯化此固体以得到：
1-(叔丁基)-N-(((2S,4R)-2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(任意指定的立体化学)(26mg，产率17.3％)，为白色固体，LCMS m/z＝477.1[M+H]+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.64(s,1H),8.54(t,J＝6.0Hz,1H),8.41(s,1H),8.12(s,1H),7.92(d,J＝4.0Hz,2H),6.87(s,1H),4.98(t,J＝6.0Hz,1H),4.44(d,J＝14.0Hz,1H),3.86(s,3H),3.21-3.16(m,3H),2.15(s,1H),1.84-1.67(m,2H),1.63(s,9H),1.49-1.41(m,1H),1.27-1.24(m,4H)。
1-(叔丁基)-N-(((2R,4R)-2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(任意指定的立体化学)(18.50mg，产率12.3％)，为白色固体，LCMS m/z＝477.1[M+H]+1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.62(s,1H),8.52(t,J＝6.0Hz,1H),8.44(s,1H),8.11(s,1H),7.93-7.92(m,2H),6.83(s,1H),4.24-4.20(m,1H),3.93-3.89(m,4H),3.56-3.49(m,1H),3.29-3.18(m,2H),1.98-1.77(m,3H),1.61(s,9H),1.41-1.31(m,5H)
1-(叔丁基)-N-(((2S,4S)-2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(任意指定的立体化学)(21mg，产率14％)，为白色固体，LCMS m/z＝477.1[M+H]+1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.62(s,1H),8.53(t,J＝6.0Hz,1H),8.45(s,1H),8.11(s,1H),7.94-7.92(m,2H),6.83(s,1H),4.25-4.20(m,1H),3.93-3.89(m,1H),3.86(s,3H),3.56-3.49(m,1H),3.27-3.18(m,2H),1.98-1.89(m,2H),1.83-1.77(m,1H),1.61(s,9H),1.41-1.35(m,2H),1.34-1.31(m,3H)。
以及1-(叔丁基)-N-((2-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(任意指定的立体化学)(17.0mg，产率11.3％)，为白色固体。LCMS m/z＝477.1[M+H]+1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.65(s,1H),8.54(t,J＝6.0Hz,1H),8.41(s,1H),8.12(s,1H),7.94-7.92(m,2H),6.88(s,1H),4.98(t,J＝6.0Hz,1H),4.45(d,J＝14.0Hz,1H),3.86(s,3H),3.21-3.16(m,3H),2.15(s,1H),1.84-1.67(m,2H),1.63(s,9H),1.47-1.41(m,1H),1.27-1.24(m,4H)。
实施例144：5-(叔丁基)-N-((3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.((3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备
按照实施例136，步骤1中描述的程序，由((3-甲基哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯和4-氯-6-(1-甲基吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5)获得((3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯。LCMS m/z＝426.2[M+H]+
2.(3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐的制备
按照实施例115，步骤2中描述的程序，由((3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯获得(3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐，为白色固体。LCMS m/z＝326.2[M+H]+
3.5-(叔丁基)-N-((3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
按照实施例136，步骤3中描述的程序，由(3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐和5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-甲酸钾获得5-(叔丁基)-N-((3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺，为白色固体，11mg，产率13％。LCMS m/z＝478.2[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.01-8.95(m,1H)8.91(t,J＝6.41Hz,1H)8.44(s,1H)8.17-8.11(m,1H)7.96-7.90(m,2H)6.91(d,J＝1.83Hz,1H)4.57-4.44(m,1H)4.23-4.26(m,1H)3.87(s,3H)3.50(dt,J＝13.73,4.43Hz,1H)3.30-3.23(m,1H)3.22-3.14(m,1H)3.13-3.01(m,1H)2.85-2.76(m,1H)2.42(br s,1H)2.17-1.99(m,1H)1.81(br d,J＝10.38Hz,1H)1.67-1.47(m,3H)1.44-1.40(m,10H)1.40-1.30(m,1H)1.28-1.17(m,1H)1.05(d,J＝6.10Hz,2H)0.94(dd,J＝9.16,6.71Hz,2H)。
实施例145、146、147和148：N-(((3S,4R)-3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺、N-(((3S,4S)-3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺、N-(((3R,4R)-3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺和N-(((3R,4S)-3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
[任意指定的立体化学]
将DIPEA(143.08mg,1.11mmol)添加到(3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐(实施例144，步骤2，126mg,221.4μmol)和5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸钾(91.78mg,442.8μmol)在DMF(2.21mL)中的溶液中。添加(422.7mg,664.3μmol,纯度50％)并将反应物在rt下搅拌过夜。添加另外的等量5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸钾、DIPEA和并将反应物在rt下搅拌过夜。将反应物用水稀释，用EtOAc(2x)萃取，将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将物质通过柱色谱法(梯度洗脱0-75％[3:1EtOAc:EtOH]:庚烷)纯化以得到透明薄膜。将其通过SFC进一步纯化：CHIRALPAK AD-H30x250mm,5um方法：在CO2中的40％(1:1)MeOH:DCM，具有0.1％DEA(流速：100mL/min，ABPR 120bar，MBPR 40psi，柱温40℃)。将化合物通过柱色谱法(4g柱，梯度洗脱0-100％[3:1EtOAc:EtOH]:庚烷)再次纯化以得到产物，为透明薄膜。
峰1，N-(((3S,4R)-3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(4.0mg，产率3.8％，纯度99％)。LCMS m/z＝476.3[M+H]+。1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δppm 8.86(br t,J＝5.9Hz,1H),8.44(s,1H),8.13(s,1H),7.96-7.92(m,2H),6.91(d,J＝2.2Hz,1H),4.53(br d,J＝13.2Hz,2H),4.40(br d,J＝11.0Hz,2H),3.87(s,3H),3.48(dt,J＝12.8,5.0Hz,2H),3.19-3.12(m,2H),3.06(td,J＝12.8,2.2Hz,2H),2.79(br dd,J＝13.2,11.0Hz,2H),1.80(brdd,J＝13.6,3.3Hz,2H),1.63-1.55(m,2H),1.52(s,3H),1.37-1.34(m,2H),1.16-1.12(m,2H),1.05(d,J＝5.9Hz,2H)
峰2，N-(((3S,4S)-3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(2.0mg，产率1.9％，纯度99％)LCMS m/z＝476.3[M+H]+1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δppm 8.93(br t,J＝5.9Hz,1H),8.44(s,1H),8.14(s,1H),7.99-7.90(m,2H),6.91(br d,J＝2.2Hz,1H),4.47(br d,J＝12.5Hz,2H),4.31(br d,J＝11.7Hz,2H),3.87(s,2H),3.25-3.21(m,2H),3.12-3.05(m,2H),2.10(br s,1H),2.04-1.96(m,1H),1.60-1.56(m,2H),1.54(s,3H),1.41-1.35(m,2H),1.17(br d,J＝2.2Hz,1H),0.92(br d,J＝6.6Hz,3H)
峰3，N-(((3R,4R)-3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(3.0mg，产率2.8％，纯度99％)LCMS m/z＝476.3[M+H]+1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δppm 8.93(br t,J＝5.9Hz,1H),8.43(s,1H),8.14(s,1H),7.97-7.92(m,2H),6.91(d,J＝1.5Hz,1H),4.47(br d,J＝13.9Hz,2H),4.31(br d,J＝11.7Hz,2H),3.87(s,3H),3.25-3.20(m,3H),3.12-3.06(m,2H),2.14-2.07(m,2H),2.04-1.99(m,1H),1.58(br dd,J＝9.5,4.4Hz,2H),1.54(s,3H),1.40-1.35(m,3H),1.20-1.13(m,4H),0.92(d,J＝7.3Hz,4H)
峰4，N-(((3R,4S)-3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(6.0mg，产率5.6％，纯度99％)LCMS m/z＝476.3[M+H]+1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δppm 8.86(br t,J＝5.9Hz,1H),8.44(s,1H),8.13(s,1H),7.97-7.92(m,2H),6.91(d,J＝2.2Hz,1H),4.53(br d,J＝13.9Hz,2H),4.45-4.36(m,2H),3.87(s,3H),3.48(dt,J＝13.2,4.8Hz,1H),3.19-3.12(m,2H),3.10-3.01(m,2H),2.79(br dd,J＝13.2,10.3Hz,2H),1.80(br dd,J＝13.2,2.9Hz,2H),1.63-1.56(m,2H),1.52(s,4H),1.38-1.34(m,2H),1.34-1.28(m,1H),1.17-1.13(m,2H),1.05(d,J＝6.6Hz,3H)
实施例149.N-((3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.3-甲基-4-((5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的制备
向4-(氨基甲基)-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，438μmol)在DCM(20mL)中的溶液中添加DIPEA(113.20mg,875.9μmol)和5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-碳酰氯(实施例137，步骤4，163.45mg,875.9μmol)，并将反应物在20℃下搅拌1h。将混合物倒入水(50mL)中并用DCM(50mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。将粗品通过硅胶柱色谱法(PE/EtOAc＝1/1)纯化以得到3-甲基-4-((5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(120mg，产率72.4％)，为黄色固体。LCMS m/z＝401.1[M+Na]+
2.5-(1-甲基环丙基)-N-((3-甲基哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
将3-甲基-4-((5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(120mg,317.1μmol)在HCl/EtOAc(20mL)中的溶液在20℃下搅拌1h。将混合物在真空下浓缩以得到5-(1-甲基环丙基)-N-((3-甲基哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺盐酸盐(60mg，粗品)，为黄色固体，其无需进一步纯化即可使用。LCMS m/z＝279.0[M+H]+
3.N-((3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
在20℃下向5-(1-甲基环丙基)-N-((3-甲基哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺盐酸盐(50mg,158.8μmol)在IPA(10mL)中的溶液中添加DIPEA(61.58mg,476.5μmol)。添加4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5，74.22mg,317.7μmol)，并将混合物在90℃下搅拌48h。将反应物在真空下浓缩，将混合物倒入水(20mL)中并用DCM(20mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。将粗品通过制备型HPLC(方法E，38-65％梯度)纯化以得到N-((3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(9.10mg，产率12.1％)，为白色固体。LCMS m/z＝476.1[M+H]+ 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.95-8.90(m,1H),8.43(s,1H),8.14(s,1H),7.95-7.93(m,2H),6.91(s,1H),4.49-4.29(m,2H),3.87(s,3H),3.28-3.21(m,4H),2.11-2.00(m,2H),1.58-1.51(m,5H),1.39-1.36(m,2H),1.18-1.16(m,2H),0.92(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例150和151.1-(叔丁基)-N-(((3S,4S)-3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺和1-(叔丁基)-N-(((3R,4R)-3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
1.顺式-2-((3-甲基哌啶-4-基)甲基)异吲哚啉-1,3-二酮三氟乙酸盐的制备
将顺式-2-((3-甲基哌啶-4-基)甲基)异吲哚啉-1,3-二酮(800mg,2.23mmol)在TFA(10mL)和DCM(40mL)中的溶液在20℃下搅拌1h。将混合物在真空下浓缩以得到顺式-2-((3-甲基哌啶-4-基)甲基)异吲哚啉-1,3-二酮三氟乙酸盐(600mg，粗品)，为黄色固体，其无需进一步纯化即可使用。LCMS m/z＝259.0[M+H]+
2.顺式-(4-((1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)甲基)-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的制备
向顺式-2-((3-甲基哌啶-4-基)甲基)异吲哚啉-1,3-二酮三氟乙酸盐(600mg,1.62mmol)在i-PrOH(20mL)中的溶液中添加4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5，300mg,1.28mmol)和DIPEA(497.8mg,3.85mmol)，并将反应物在90℃下搅拌48h。将混合物过滤并在真空下浓缩。将粗产物通过硅胶柱色谱法(PE/EtOAc＝1/1至0/1)纯化以得到顺式-(4-((1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)甲基)-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(330mg，产率56.6％)，为黄色固体。LCMS m/z＝456.1[M+H]+
3.顺式-2-((3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)异吲哚啉-1,3-二酮的制备
向顺式-(4-((1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)甲基)-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(330mg,724.5μmol)在MeOH(20mL)中的溶液中添加NH2NH2.H2O(300mg,纯度85％)，并将反应物在20℃下搅拌2h。将混合物在真空下浓缩以得到顺式-2-((3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)异吲哚啉-1,3-二酮(230mg，粗品)，为黄色固体，其无需进一步纯化即可直接使用。LCMS m/z＝326.1[M+H]+
4.1-(叔丁基)-N-(((3S,4S)-3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺和1-(叔丁基)-N-(((3R,4R)-3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺的制备
[任意指定的立体化学]
在20℃下向顺式-2-((3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)异吲哚啉-1,3-二酮(190mg,433.4μmol)在DCM(50mL)中的溶液中添加DIPEA(112.02mg,866.7μmol)。添加2-(叔丁基)-2H-1,2,3-三唑-4-甲酸(109.97mg,650.0μmol)和HATU(247.82mg,650.0μmol)，并将反应物在20℃下搅拌1h。将混合物倒入水(50mL)中并用DCM(50mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。将粗产物通过制备型HPLC(方法E，33-63％梯度)纯化以得到顺式-(3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺(180mg，产率85.4％)，为黄色固体。LCMS m/z＝477.1[M+H]+
将此化合物(180mg,377.7μmol)通过SFC(色谱柱：Phenomenex-Cellulose-2(250mm x 30mm,5μm)，0.1％ NH3.H2O、EtOH作为流动相(55-55％)，流速(mL/min)：70)纯化以得到：
峰1，1-(叔丁基)-N-(((3S,4S)-3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(任意指定的立体化学)(66.6mg，产率37.0％)，为白色固体。LCMS m/z＝477.2[M+H]+1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.64(s,1H),8.54-8.50(m,1H),8.42(s,1H),8.14-8.12(m,1H),7.95-7.92(m,2H),6.90(d,J＝1.6Hz,1H),4.50-4.30(m,2H),3.87(s,3H),3.27-3.24(m,3H),3.24-3.09(m,1H),2.12-2.01(m,2H),1.63(s,9H),1.62-1.60(m,2H),0.93(d,J＝7.2Hz,3H)。
以及峰2，1-(叔丁基)-N-(((3R,4R)-3-甲基-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(任意指定的立体化学)(54.0mg，产率30％)，为白色固体。LCMS m/z＝477.1[M+H]+1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.64(s,1H),8.54-8.50(m,1H),8.42(s,1H),8.14-8.12(m,1H),7.95-7.92(m,2H),6.90(d,J＝1.6Hz,1H),4.50-4.30(m,2H),3.87(s,3H),3.27-3.24(m,3H),3.09-3.24(m,1H),2.12-2.01(m,2H),1.63(s,9H),1.62-1.60(m,2H),0.93(d,J＝7.2Hz,3H)。
实施例152：1-(叔丁基)-N-((3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
1.(((3S,4R)-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸苄酯的制备
将(((3S,4R)-3-氟哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸苄酯盐酸盐(500mg,1.65mmol)、4-氯-6-(1-甲基吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5，367.5mg,1.57mmol)和DIPEA(813.06mg,6.29mmol)的混合物溶解在DMF(3.30mL)中，并将反应物在90℃下搅拌过夜。将反应物用水稀释并用EtOAc(2x)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将物质用EtOAc研磨并通过的垫过滤，并且收集固体。将滤液浓缩并通过硅胶柱色谱法(0-100％ EtOAc:庚烷)纯化以提供(((3S,4R)-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸苄酯(662.0mg，产率91％)，为黄褐色固体。LCMS m/z＝464.2[M+H]+
2.((3S,4R)-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺的制备
向小瓶中装入(((3S,4R)-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸苄酯(653.6mg,1.41mmol)、钯(300.1mg,141μmol)和MeOH(7.05mL)，用H2吹扫并回填三次，然后在H2气氛下搅拌4h。将反应物通过垫过滤，用MeOH洗涤并浓缩以得到((3S,4R)-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺(441mg，产率95％)，为浅黄色固体。LCMS m/z＝330.2[M+H]+
3. 1-(叔丁基)-N-(((3S,4R)-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺的制备
将DIPEA(147.14mg,1.14mmol)添加到((3S,4R)-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺(75mg,227.7μmol)和1-(叔丁基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸(57.79mg,341.6μmol)在DMF(2.28mL)中的溶液中。添加(434.71mg,683.1μmol,纯度50％)并将反应物在rt下搅拌过夜。将反应物用水和DCM稀释并通过相分离器。将水层用DCM萃取并将合并的有机层浓缩。将残余物通过HPLC(方法A2，5-70％)纯化。将含有产物的级分浓缩，溶解在MeCN(1mL)和水(1mL)中，并将所得物质在干冰/丙酮浴中冷冻并冻干以得到1-(叔丁基)-N-(((3S,4R)-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(56mg，产率50.7％)，为白色固体。LCMS m/z＝481.3[M+H]+1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.67(s,1H),8.61(t,J＝5.9Hz,1H),8.46(d,J＝0.8Hz,1H),8.15(s,1H),7.97-7.92(m,2H),6.92(dd,J＝2.5,0.8Hz,1H),4.96(br s,1H),4.88-4.76(m,2H),4.67(br d,J＝12.0Hz,1H),3.44-3.35(m,1H),3.30-3.23(m,1H),3.11-2.98(m,1H),2.29-2.10(m,1H),1.76-1.67(m,2H),1.64(s,9H)。
实施例153：2-(叔丁基)-N-(((3S,4R)-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)噁唑-4-甲酰胺
按照实施例152，步骤3中描述的程序，由((3S,4R)-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺(实施例152，步骤2)和2-叔丁基噁唑-4-甲酸获得2-(叔丁基)-N-(((3S,4R)-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)噁唑-4-甲酰胺，为白色固体，44mg，产率39.8％。LCMS m/z＝481.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.49(s,1H),8.46(d,J＝0.8Hz,1H),8.20(brt,J＝6.0Hz,1H),8.15(s,1H),7.99-7.91(m,2H),6.92(d,J＝2.5Hz,1H),4.94(br s,1H),4.88-4.76(m,2H),4.66(br d,J＝11.8Hz,1H),3.87(s,3H),3.44-3.33(m,2H),3.30-3.20(m,2H),3.04(br s,1H),2.27-2.08(m,2H),1.69(br s,2H),1.36(s,9H)。
实施例154：N-(((3S,4R)-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
按照实施例152，步骤3中描述的程序，由((3S,4R)-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺(实施例152，步骤2)和5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸(实施例137，步骤3)获得N-(((3S,4R)-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺，为白色固体，29mg，产率26.3％。LCMS m/z＝480.2[M+H]+1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.96-9.04(m,1H),8.47(s,1H),8.15(s,1H),7.97-7.92(m,2H),6.92(d,J＝2.5Hz,1H),4.94(br s,1H),4.87-4.76(m,2H),4.67(br d,J＝15.1Hz,1H),3.87(s,3H),3.42-3.34(m,1H),3.26(s,1H),3.05(s,1H),2.27-2.08(m,2H),1.70(br s,2H),1.54(s,3H),1.42-1.34(m,2H),1.21-1.11(m,2H)。
实施例155和156：5-(叔丁基)-N-(((3S,4R)-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺和5-(叔丁基)-N-(((3R,4S)-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.顺式-4-((5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺基)甲基)-3-氟哌啶-1-甲酸叔丁酯的制备
将DIPEA(833.6mg,6.45mmol)添加到顺式-4-(氨基甲基)-3-氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯(499.42mg,2.15mmol)和5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-甲酸钾(539.89mg,2.58mmol)在DCM(21.5mL)中的溶液中，然后将溶液冷却至0℃。一次性添加HATU(983.60mg,2.58mmol)并将反应物在rt下搅拌过夜。将反应物浓缩并通过柱色谱法(40g柱，梯度洗脱0-100％ EtOAc:庚烷)纯化以得到顺式-4-((5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺基)甲基)-3-氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(405mg，产率49％)，为白色固体。LCMS m/z＝407.2[M+H]+
2. 5-(叔丁基)-N-((顺式-3-氟哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺盐酸盐的制备
将5-(叔丁基)-N-((顺式-3-氟哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺盐酸盐(403.7mg,1.05mmol)溶解在MeOH(10.5mL)和1.25M HCl溶液(MeOH中,8.40mL)中，并将反应物在50℃下搅拌过夜。将反应物浓缩，并将残余物真空干燥以得到5-(叔丁基)-N-((顺式-3-氟哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺盐酸盐(346mg，粗品)，为白色固体。LCMSm/z＝285.1[M+H]+
3. 5-(叔丁基)-N-((顺式-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
将5-(叔丁基)-N-((顺式-3-氟哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(50mg,155.9μmol)、4-氯-6-(1-甲基吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5，36.42mg,155.9μmol)和DIPEA(80.58mg,623.5μmol)的混合物溶解在DMF(311.7uL)中，并将反应物在80℃下搅拌过夜。将反应物浓缩并将残余物通过HPLC(方法A2，5-60％)纯化以得到5-(叔丁基)-N-((顺式-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(36mg，产率48.0％)，为米色固体。LCMS m/z＝482.2[M+H]+
4.5-(叔丁基)-N-((顺式-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的分离
[任意指定的立体化学]
将5-(叔丁基)-N-((顺式-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(34mg)通过SFC(CHIRALPAK AD-H30x250mm,5um方法：在CO2中的45％IPA，具有0.1％ DEA(流速：100mL/min，ABPR 120bar，MBPR 60psi，柱温40℃))纯化以提供：
峰1，5-(叔丁基)-N-(((3S,4R)-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(5.0mg，纯度98％)。LCMS m/z＝482.3[M+H]+1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δppm 9.12-9.03(m,1H)8.48(s,1H)8.15(s,1H)7.96(d,J＝3.67Hz,2H)6.93(d,J＝2.20Hz,1H)4.93(br s,1H)4.87-4.77(m,2H)4.67(br d,J＝11.74Hz,1H)3.87(s,3H)3.05(s,1H)1.71(br s,2H)1.43(s,9H)1.23(s,3H)0.85(s,1H)
以及峰2，5-(叔丁基)-N-(((3R,4S)-3-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(4.0mg，纯度98％)。LCMSm/z＝482.3[M+H]+1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δppm 9.13-9.05(m,1H)8.48(s,1H)8.16(s,1H)7.99-7.93(m,2H)6.93(d,J＝1.47Hz,1H)4.93(br s,1H),4.87-4.78(m,2H)4.67(br d,J＝13.21Hz,1H)3.87(s,3H)3.04(br d,J＝14.67Hz,1H)1.71(br s,2H)1.43(s,9H)1.23(s,3H)。
实施例157：5-(叔丁基)-N-((3,3-二氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.4-((5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺基)甲基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯的制备
按照制备155和156，步骤1中描述的程序，由4-(氨基甲基)-3,3-二氟-哌啶-1-甲酸叔丁酯和5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-甲酸钾获得4-((5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺基)甲基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯，为白色固体(558mg，产率54.6％)。LCMS m/z＝452.2[M+Na]+
2.5-(叔丁基)-N-((3,3-二氟哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺盐酸盐的制备
将4-((5-(叔丁基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺基)甲基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(559.39mg,1.39mmol)溶解在MeOH(13.90mL)中，添加HCl溶液(1.25M于MeOH中，11.12mL)，并将反应物在50℃下搅拌过夜。将反应物浓缩并真空干燥以得到粗制的5-叔丁基-N-[(3,3-二氟-4-哌啶基)甲基]-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺盐酸盐(476mg，粗品)，为白色固体。LCMS m/z＝303.1[M+H]+
3. 5-(叔丁基)-N-((3,3-二氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
将5-(叔丁基)-N-((3,3-二氟哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺盐酸盐(50mg)、4-氯-6-(1-甲基吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5，38.64mg,165.4μmol)和DIPEA(85.50mg,661.6μmol)的混合物溶解在DMF(330.78uL)中，并将反应物在80℃下搅拌过夜，在100℃下再搅拌24h。将反应物用DMSO稀释，通过注射器过滤器并通过HPLC(方法C3，5-60％)纯化以得到5-(叔丁基)-N-((3,3-二氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(30mg，产率36.3％)，为白色固体。LCMS m/z＝500.2[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.07(br t,J＝6.1Hz,1H),8.56(s,1H),8.19(s,1H),8.00-7.96(m,1H),7.00(d,J＝2.4Hz,1H),4.73-4.63(m,2H),4.51(br d,J＝13.4Hz,2H),3.88(s,2H),3.69-3.61(m,2H),3.57(br d,J＝14.0Hz,1H),3.48(br s,1H),3.33(ddd,J＝13.4,9.2,6.7Hz,1H),3.21(br t,J＝11.6Hz,2H),1.99(br d,J＝14.0Hz,2H),1.74-1.61(m,2H),1.43(s,7H)
实施例158和159：(S)-5-(叔丁基)-N-((3,3-二氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺和(R)-5-(叔丁基)-N-((3,3-二氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
[任意指定的立体化学]
将5-(叔丁基)-N-((3,3-二氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(实例157，29mg)通过手性SFC(LUXCellulose-4LC 30x250mm,3um)(方法：在CO2中的45％ MeOH，具有0.1％ DEA(流速：100mL/min，ABPR 120bar，MBPR 40psi，柱温40℃))纯化以提供：
峰1，(S)-5-(叔丁基)-N-((3,3-二氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(10mg，产率34.5％)LCMS m/z＝500.2[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.11-9.05(m,1H),8.56(s,1H),8.19(s,1H),7.99(d,J＝2.4Hz,1H),7.98(s,1H),7.00(br d,J＝2.4Hz,1H),4.66(br d,J＝14.7Hz,2H),4.51(br d,J＝13.4Hz,2H),3.88(s,3H),3.70-3.61(m,2H),3.26-3.19(m,1H),2.01-1.97(m,1H),1.74 -1.66(m,1H),1.43(s,9H)
以及峰2，(R)-5-(叔丁基)-N-((3,3-二氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(10mg，产率34.5％)。LCMSm/z＝500.2[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.11-9.04(m,1H),8.56(s,1H),8.19(s,1H),7.99(d,J＝2.4Hz,1H),7.98(s,1H),7.00(br d,J＝2.4Hz,1H),4.67(br s,2H),4.51(br d,J＝13.4Hz,2H),3.69-3.60(m,2H),3.57(br d,J＝14.0Hz,1H),3.24-3.17(m,1H),2.03-1.95(m,1H),1.73-1.65(m,1H),1.43(s,9H)
实施例160：5-(叔丁基)-N-((4-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.((4-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将((4-氟哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(238.59mg,1.03mmol)、4-氯-6-(1-甲基吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5，200mg,855.9μmol)和DIPEA(442.49mg,3.42mmol)的混合物溶解在DMF(1.71mL)中，并将反应物在100℃下搅拌过夜。将反应物用水稀释并用EtOAc萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将物质通过柱色谱法(0-75％[3:1EtOAc:EtOH]:庚烷)纯化以得到((4-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(439mg，不纯)，为灰白色固体。LCMS m/z＝430.3[M+H]+
2.(4-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐的制备
按照实施例119，步骤2中描述的程序，由((4-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯获得(4-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐，为黄色固体。LCMS m/z＝330.3[M+H]+
3.5-(叔丁基)-N-((4-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺三氟乙酸盐的制备
将DIPEA(128.50mg,994.3μmol)添加到(4-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐(100mg,198.9μmol)和5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-甲酸钾(62.42mg,298.3μmol)在DMF(1.99mL)中的溶液中，添加(596.6μmol,355.13uL,纯度50％)，并将反应物在rt下搅拌过夜。将反应物用水和DCM稀释并通过相分离器。将水层用DCM萃取并将合并的有机层浓缩。将反应物溶解在最少的DMSO中并通过反相HPLC(梯度洗脱5-70％MeCN:H2O，具有0.1％ TFA改性剂)纯化，将产物溶解在MeCN(1mL)和水(1mL)中，并将所得物质在干冰/丙酮浴中冷冻并冻干以得到5-(叔丁基)-N-((4-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺三氟乙酸盐(47mg，产率38.9％)，为浅黄色固体。LCMS m/z＝482.3[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.07(t,J＝6.41Hz,1H)8.49(s,1H)8.16(s,1H)7.99-7.92(m,2H)6.98(d,J＝2.44Hz,1H)4.37(br d,J＝13.43Hz,2H)3.87(s,3H)3.62-3.51(m,2H)3.45-3.35(m,2H)1.96-1.79(m,4H)1.42(s,9H)。
实施例161：N-((4-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺三氟乙酸盐
按照实施例160，步骤3中描述的程序，由(4-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐(实施例160，步骤2)和5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸(实施例137，步骤3)获得N-((4-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-5-(1-甲基环丙基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺三氟乙酸盐，为浅黄色固体，48mg，产率40.3％。LCMS m/z＝480.2[M+H]+1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.01(t,J＝6.10Hz,1H)8.49(s,1H)8.16(s,1H)7.99-7.93(m,2H)6.97(d,J＝2.44Hz,1H)4.37(br d,J＝12.82Hz,2H)3.87(s,3H)3.60-3.50(m,2H)3.45-3.35(m,2H)1.94-1.78(m,4H)1.53(s,3H)1.40-1.35(m,2H)1.19-1.13(m,2H)。
实施例162：1-(叔丁基)-N-((4-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐
按照实施例160，步骤3中描述的程序，由(4-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲胺二盐酸盐(实施例160，步骤2)和1-叔丁基三唑-4-甲酸获得1-(叔丁基)-N-((4-氟-1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺三氟乙酸盐，为浅黄色固体，51mg，产率43.1％。LCMS m/z＝481.3[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.71(s,1H)8.52(t,J＝6.41Hz,1H)8.48(s,1H)8.16(s,1H)7.98-7.93(m,2H)6.97(d,J＝2.44Hz,1H)4.37(br d,J＝12.82Hz,2H)3.87(s,3H)3.62-3.52(m,2H)3.47-3.36(m,2H)1.94-1.79(m,4H)1.63(s,9H)。
实施例163.1-(叔丁基)-N-(1-(1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
1.4-(1-(1-(叔丁基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的制备
向4-(1-氨基乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(600mg,2.63mmol)在DCM(50mL)中的溶液中添加DIPEA(1.02g,7.89mmol)、1-(叔丁基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸(666.85mg,3.95mmol)，然后添加HATU(1.50g,3.95mmol)，并将反应混合物在20℃下搅拌4h。将混合物倒入水(200mL)中并用EtOAc(100mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥并真空浓缩。将粗产物通过用(PE/EtOAc＝1/0至1/1)洗脱的硅胶柱色谱法纯化以得到4-(1-(1-(叔丁基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(900mg，产率90.1％)，为白色固体。LCMS m/z＝380.2[M+H]+
2.1-(叔丁基)-N-(1-(哌啶-4-基)乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺盐酸盐的制备
将4-(1-(1-(叔丁基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(900mg,2.37mmol)在HCl/EtOAc(10mL,4M)中的溶液在20℃下搅拌1h。将混合物真空浓缩以得到1-(叔丁基)-N-(1-(哌啶-4-基)乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺盐酸盐(800mg，粗品)，为白色固体，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。LCMS m/z＝280.1[M+H]+
3.1-(叔丁基)-N-(1-(1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺的制备
向4-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤X，150mg,642μmol)和1-(叔丁基)-N-(1-(哌啶-4-基)乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(358.70mg,1.28mmol)在IPA(50mL)中的溶液中添加DIPEA(331.87mg,2.57mmol)，并将反应混合物在90℃下搅拌32h。将混合物真空浓缩以得到粗产物，其通过制备型HPLC(方法D，33-53％梯度)纯化以得到1-(叔丁基)-N-(1-(1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(108.4mg，产率35.4％)，为白色固体。LCMS m/z＝477.2[M+H]+1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.69(s,1H),8.47(s,1H),8.31(d,J＝9.0Hz,1H),8.21(s,1H),8.00-7.98(m,2H),7.05-7.04(m,1H),4.57(t,J＝11.0Hz,2H),3.95-3.88(m,4H),3.17-3.07(m,2H),1.90-1.80(m,3H),1.63(s,9H),1.40-1.32(m,2H),1.17(d,J＝6.5Hz,3H)。
实施例164和165：5-(叔丁基)-N-(((1R,5S,8s)-3-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺和5-(叔丁基)-N-(((1R,5S,8r)-3-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.(((1R,5S,8r)-3-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备
按照实施例160，步骤1中描述的程序，由4-氯-6-(1-甲基吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5)和N-(3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基甲基)氨基甲酸叔丁酯盐酸盐获得(((1R,5S,8r)-3-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯，为白色固体(445mg，产率95％)。LCMS m/z＝438.3[M+H]+
2.((1R,5S,8r)-3-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基)甲胺盐酸盐的制备
按照实施例119，步骤2中描述的程序，由(((1R,5S,8r)-3-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯获得((1R,5S,8r)-3-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基)甲胺盐酸盐，为浅黄色固体。LCMS m/z＝338.2[M+H]+
3.5-(叔丁基)-N-(((1R，5S，8s)-3-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺和5-(叔丁基)-N-(((1R，5S，8r)-3-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺的制备
[任意指定的立体化学]
将DIPEA(638.4μL,3.66mmol)添加到((1R,5S,8r)-3-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基)甲胺盐酸盐(300mg,731.1μmol)和5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-甲酸钾(229.49mg,1.10mmol)在DMF(3.66mL)中的混合物中。添加(2.19mmol,1.31mL,纯度50％)并将反应物在rt下搅拌过夜。将反应物用水和DCM稀释并通过相分离器。将水层用DCM萃取并将合并的有机层浓缩。将粗品通过柱色谱法(梯度洗脱0-75％[3:1EtOAc:EtOH]:庚烷)纯化以得到外消旋物质。进一步通过SFC(LUX Cellulose-4LC 30x250mm,5um方法：在CO2中的45％ EtOH，具有0.1％ DEA(流速：100mL/min，ABPR 120bar，MBPR 40psi，柱温40℃)纯化以得到峰1，5-(叔丁基)-N-(((1R,5S,8s)-3-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺(51mg)，LCMS m/z＝490.0[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.12(br t,J＝5.80Hz,1H)8.39(s,1H)8.13(s,1H)7.94(s,1H)7.90(d,J＝2.44Hz,1H)6.99(d,J＝1.83Hz,1H)4.18(br d,J＝10.38Hz,2H)3.86(s,3H)3.69-3.59(m,4H)2.84-2.75(m,1H)2.28(br s,2H)2.10-2.01(m,1H)1.83-1.74(m,2H)1.67-1.59(m,2H)1.43(s,9H)
以及峰2，5-(叔丁基)-N-(((1R,5S,8r)-3-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺，71mg。LCMS m/z＝490.0[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 9.09(t,J＝6.10Hz,1H)8.40(s,1H)8.13(s,1H)7.93(s,1H)7.90(d,J＝2.44Hz,1H)6.96(d,J＝2.44Hz,1H)4.42(dd,J＝12.82,3.05Hz,2H)3.86(s,3H)3.21-3.13(m,4H)2.25(br s,2H)2.09(t,J＝7.94Hz,1H)1.89-1.81(m,2H)1.57-1.49(m,2H)1.13(t,J＝7.02Hz,1H)。
实施例166：5-(叔丁基)-N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氮杂环庚烷-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺
1.((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氮杂环庚烷-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备
按照实施例160，步骤1中描述的程序，由(氮杂环庚烷-4-基甲基)氨基甲酸叔丁酯和4-氯-6-(1-甲基吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5)获得((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氮杂环庚烷-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯，为灰白色固体(167mg，产率91.7％)。LCMS mz＝426.3[M+H]+
2.(1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氮杂环庚烷-4-基)甲胺二盐酸盐的制备
按照实施例23，步骤3中描述的程序，由((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氮杂环庚烷-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯获得(1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氮杂环庚烷-4-基)甲胺二盐酸盐，为黄色固体，179mg粗品。
3.5-(叔丁基)-N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氮杂环庚烷-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺三氟乙酸盐的制备
按照实施例160，步骤3中描述的程序，由(1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氮杂环庚烷-4-基)甲胺盐酸盐和5-叔丁基-1,2,4-噁二唑-3-甲酸获得5-(叔丁基)-N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氮杂环庚烷-4-基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酰胺三氟乙酸盐，为浅黄色固体(61mg，产率41.4％)。LCMSm/z＝478.3[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.94(t,J＝5.80Hz,1H)8.33(s,1H)8.10(s,1H)7.95-7.88(m,2H)6.90(d,J＝1.83Hz,1H)4.12-3.96(m,2H)3.86(s,3H)3.84-3.72(m,2H)3.14(t,J＝6.71Hz,2H)2.09-1.98(m,2H)1.74(br d,J＝9.16Hz,3H)1.55-1.45(m,1H)1.41(s,9H)1.24-1.12(m,1H)。
实施例167：1-(叔丁基)-N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氮杂环庚烷-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
按照实施例160，步骤3中描述的程序，由(1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氮杂环庚烷-4-基)甲胺盐酸盐(实施例166，步骤3)和1-叔丁基三唑-4-甲酸获得1-(叔丁基)-N-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氮杂环庚烷-4-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺，为黄色固体(70mg，产率46.7％)。LCMS m/z＝477.3[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.61(s,1H)8.51(t,J＝5.80Hz,1H)8.32(s,1H)8.10(s,1H)7.92(s,1H)7.90(d,J＝2.44Hz,1H)6.90(d,J＝1.83Hz,1H)4.11-3.96(m,2H)3.86(s,3H)3.84-3.72(m,2H)3.13(t,J＝6.71Hz,2H)2.08-1.99(m,2H)1.82-1.71(m,3H)1.55 -1.44(m,1H)1.22-1.11(m,1H)1.01-0.82(m,1H)
实施例168.4-异丁基-1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-2-酮
1. 4-((1-((苄氧基)羰基)哌啶-4-基)甲基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
向4-((2-氧代哌嗪-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸苄酯(3.00g,9.05mmol)在IPA(30mL)中的溶液中添加DIPEA(2.34g,18.10mmol)和(Boc)2O(2.37g,10.86mmol)，并将反应物在25℃下搅拌1h。在真空下去除溶剂，并将残余物通过硅胶柱色谱法(PE至PE:EtOAc＝1:1)纯化以得到4-((1-((苄氧基)羰基)哌啶-4-基)甲基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.20g，产率30.7％)，为无色油状物。
2.3-氧代-4-(哌啶-4-基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
向4-((1-((苄基氧基)羰基)哌啶-4-基)甲基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(800mg,1.85mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中添加Pd/C(500mg)，并将反应物在15psi和30℃下氢化12h。过滤悬浮液，并将滤液真空浓缩以得到3-氧代-4-(哌啶-4-基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(350mg，粗品)，为苍白色固体，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。
3.4-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
向3-氧代-4-(4-哌啶基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300mg,1.01mmol)在丁醇(10mL)中的溶液中添加4-氯-6-(1-甲基吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(实施例1，步骤5，236.0mg,1.01mmol)和DIPEA(352.8μL,2.02mmol)，并将反应物在110℃下搅拌10h。在真空下去除溶剂，并将残余物通过硅胶柱色谱法(PE至DCM:MeOH＝10:1)纯化以得到4-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(200mg，产率40.0％)，为白色固体。
4.1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-2-酮盐酸盐的制备
向4-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁酯(80mg,161.8μmol)在DCM(2.0mL)中的溶液中添加HCl/EtOAc(20.0mL)，并将反应物在25℃下搅拌1h。将混合物过滤以得到1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-2-酮盐酸盐(60mg，粗品)，为白色固体。LCMS m/z＝395.1[M+H]+
5.4-异丁基-1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-2-酮的制备
在20℃下向1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-2-酮盐酸盐(80mg,185.7μmol)在MeOH(10mL)中的溶液中添加DIPEA(71.98mg,557μmol)。添加异丁醛(20.08mg,278.5μmol)和NaBH3CN(46.66mg,742.6μmol)，并将反应物在20℃下搅拌10h。将混合物倒入水(50mL)中并用DCM(50mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将粗品通过制备型HPLC(方法D，11-31％梯度)纯化以得到4-异丁基-1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-2-酮(32.7mg，产率35.2％)，为黄色固体。LCMS m/z＝451.4[M+H]+1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:11.41(s,1H),8.49-8.39(m,1H),8.20-8.14(m,1H),8.00-7.94(m,2H),6.98-6.93(m,1H),4.52(s,2H),3.98(s,2H),3.86(s,3H),3.74(s,2H),3.46(s,1H),3.11-2.98(s,5H),2.49(s,2H),1.93-1.83(m,4H),1.29(s,2H),1.00(s,6H)。
实施例169：4-(环丁基甲基)-1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-2-酮
按照与实施例168中描述的方法类似的方法，由1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-2-酮盐酸盐(实施例168，步骤4)和环丁烷甲醛获得4-(环丁基甲基)-1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-2-酮，为白色固体(44.8mg，产率42.5％)。将粗产物通过制备型HPLC(方法G，35-65％梯度)纯化。LCMS m/z＝485.2[M+H]+1H NMR:(500MHz,DMSO-d6)δ＝8.44(s,1H),8.14(s,1H),7.96-7.92(m,2H),6.91(d,J＝2.0Hz,1H),4.52(d,J＝13.5Hz,2H),3.87(s,3H),3.30-3.26(m,2H),3.21(d,J＝7.5Hz,2H),3.06(t,J＝12.0Hz,2H),2.95(s,2H),2.59(t,J＝5.5Hz,2H),2.52(d,J＝1.5Hz,1H),2.38(d,J＝7.0Hz,2H),2.05-1.98(m,3H),1.89-1.82(m,1H),1.81-1.75(m,1H),1.72-1.61(m,4H),1.30-1.22(m,2H)。
实施例170：1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-4-丙基哌嗪-2-酮盐酸盐
向1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-2-酮盐酸盐(实施例168，步骤4，80mg,202.8μmol)在MeOH(5.0mL)中的溶液中添加丙醛(47.11mg,811.2μmol)和NaCNBH3(50.98mg,811.2μmol)，并将反应物在25℃下搅拌10h。将混合物真空浓缩并将粗品通过HPLC(方法D，10-30％)纯化以得到1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-4-丙基哌嗪-2-酮(114.3mg，产率43.8％)，为白色固体。LCMS m/z＝437.2[M+H]+。1H NMR:(500MHz,DMSO-d6)δ＝11.5(br s,1H),8.49(s,1H),8.15(s,1H),7.98-7.96(m,2H),6.93(s,1H),4.55-4.52(m,2H),3.88(s,3H),3.82-3.80(m,2H),3.52-3.45(m,3H),3.15-3.08(m,5H),2.49-2.48(m,2H),2.06-2.04(m,1H),1.85-1.75(m,4H),1.31-1.29(m,2H),0.93(t,3H)。
实施例171：4-甲基-1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-2-酮
按照与实施例170中描述的程序类似的程序，由1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-2-酮盐酸盐(实施例168，步骤4)和甲醛获得4-甲基-1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-2-酮，为白色固体(43.7mg，产率52.8％)。将粗产物通过HPLC(方法D，23-32％梯度)纯化。LCMS m/z＝409.3[M+H]+1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ＝11.70(s,1H),8.45(s,1H),8.14(s,1H),7.96-7.94(m,2H),6.92(d,J＝2.0Hz,1H),4.52(d,J＝13.5Hz,2H),3.87(s,3H),3.80(s,3H),3.50(d,J＝12.0Hz,2H),3.40(d,J＝7.5Hz,2H),3.20(d,J＝6.0Hz,1H),3.08(d,J＝7.0Hz,2H),2.82(s,3H),2.06-2.03(m,1H),1.86-1.77(m,2H),1.32-1.23(m,2H)。
实施例172：1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-4-新戊基哌嗪-2-酮
按照与实施例170中描述的程序类似的程序，由1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-2-酮盐酸盐(实施例168，步骤4)和2,2-二甲基丙醛获得1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)-4-新戊基哌嗪-2-酮，为白色固体，21.2mg，产率22.5％。LCMS m/z＝465.2[M+H]+。1HNMR:(500MHz,DMSO-d6)δ＝8.35(s,1H),8.08(s,1H),7.90-7.89(m,2H),6.86(s,1H),4.52-4.50(m,2H),3.89(s,3H),3.34-3.29(m,5H),3.20-3.15(m,2H),2.67-2.65(m,2H),2.40-2.37(m,2H),2.20-2.10(m,1H),1.79-1.76(m,2H),1.65-1.63(m,1H),1.38(s,9H)。
实施例173：4-异丙基-1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-2-酮
向1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-2-酮盐酸盐(实施例168，步骤4，60mg，粗品)在MeCN(15mL)中的溶液中添加K2CO3(63.07mg,456.31μmol)和2-碘丙烷(51.71mg,304.2μmol)，并将反应物在90℃下搅拌10h。在真空下去除溶剂并将残余物通过制备型HPLC(方法D，10-30％梯度)纯化以得到4-异丙基-1-((1-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-2-酮(15.5mg，产率23.3％)，为白色固体。LCMS m/z＝437.1[M+H]+1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.45(s,1H),8.14(s,1H),7.97-7.92(m,2H),6.91(s,1H),4.52(d,J＝13.2Hz,2H),3.87(s,3H),3.86-3.62(m,4H),3.55-3.43(m,3H),3.30(d,J＝11.2Hz,1H),3.20-3.02(m,3H),2.05(s,1H),1.93-1.81(m,2H),1.30(dd,J＝2.4,6.0Hz,8H)。
C.6体外测定
体外BTK激酶测定：Btk-PolyGAT-LS测定
BTK体外测定的目的是通过测量IC50来确定化合物针对BTK的效力。在活性BTK酶(Upstate 14-552)、ATP和抑制剂存在下监测荧光素标记的polyGAT肽(InvitrogenPV3611)的磷酸化量后测量化合物抑制。BTK激酶反应在黑色96孔板(costar 3694)中进行。对于典型的测定，将ATP/肽主混合物(最终浓度；ATP 10μM、polyGAT 100nM)在激酶缓冲液(10mM Tris-HCl pH 7.5、10mM MgCl2、200μΜNa3PO4、5mM DTT、0.01％ Triton X-100和0.2mg/ml酪蛋白)中的24pL等分试样添加到每个孔。接下来，添加1pL的100％ DMSO溶剂中的4倍、40X化合物滴定物，然后添加15uL的1X激酶缓冲液中的BTK酶混合物(最终浓度为0.25nM)。将测定孵育30分钟，然后用28pL的50mM EDTA溶液停止。将激酶反应的等分试样(5uL)转移到低容量白色384孔板(Coming 3674)中，并添加5pL的2X检测缓冲液(Invitrogen PV3574，具有4nM Tb-PY20抗体，Invitrogen PV3552)。将板盖上并在室温下孵育45分钟。在Molecular Devices M5(332nm激发；488nm发射；518nm荧光素发射)上测量时间分辨荧光(TRF)。IC50值是使用四参数拟合计算的，其中100％酶活性由DMSO对照确定，并且0％活性由EDTA对照确定。
表1示出了本发明选定的示例性化合物在体外Btk激酶测定中的活性，其中每个化合物编号与实施例1-173中的实施例编号相对应。表示IC50大于1μM且等于或小于10μM。表示IC50大于10nM且等于或小于1μM(10nM<IC50≤1μM)。表示IC50大于1nM且等于或小于10nM(1nM<IC50≤10nM)。表示IC50小于1nM。
表1
nt：未测试
体外全血CD69测定
将来自健康捐献者的人肝素化静脉血等分分装到96孔板中，并“加标”式I化合物在DMSO中的系列稀释液或不含药物的DMSO。所有孔中的DMSO最终浓度是0.1％。将板在37℃下孵育30min。用0.1μg/mL小鼠抗人IgD-右旋糖酐(1A62)或20μg/mL多克隆兔F(ab’)2抗人IgD刺激含有药物的样品。将磷酸盐缓冲盐水(PBS)添加到阴性对照未刺激样品中，并将板在37℃下孵育过夜(18至22h)。将细胞用荧光染料缀合的抗CD19和抗CD69抗体染色。使用裂解/固定溶液通过低渗裂解去除红细胞并固定剩余细胞，然后通过流式细胞术进行分析。对CD19+B细胞进行门控并分析其CD69表达。将表达CD69的B细胞百分比与药物浓度的log10作图，并生成最佳拟合曲线(可变Hill斜率)以获得IC50值。
表2示出了本发明选定的示例性化合物在体外全血CD69测定中的活性，其中每个化合物编号与本文实施例1-173中列出的实施例编号相对应。表示IC50大于10μM。表示IC50大于1μM且等于或小于10μM(1μM<IC50≤10μM)。表示IC50小于1μM。
表2
nt：未测试。

Claims (52)

1.一种由式(I)表示的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
X0是N，X1是C，X2是N，X4是N并且X5是CH；X0是CR0，X1是C，X2是N，X4是N并且X5是CH；X0是CR0，X1是N，X2是C，X4是N并且X5是CH；X0是CR0，X1是N，X2是C，X4是CH并且X5是CH；X0是CR0，X1是C，X2是N，X4是CH并且X5是CH；或X0是CH，X1是N，X2是C，X4是CH并且X5是N；
X3是H、-OR5、-N(R5)2、5至6元杂芳基或4至7元单环杂环基，其中所述5至6元杂芳基和所述4至7元单环杂环基任选地被一个或多个R50取代；
R0是H、卤基、甲基、卤甲基、环丙基或CN；
环A是苯基、5或6元杂芳基或5至10元单环或双环杂环基；
R1选自-N(R1a)2、-OR1a、苯基、3至7元单环碳环基、3至7元单环杂环基、5至6元杂芳基、7至10元双环碳环基、7至10元双环杂环基和8至10元双环杂芳基，其中R1表示的所述苯基、3至7元单环碳环基、3至7元单环杂环基、5至6元杂芳基、7至10元双环碳环基和7至10元双环杂环基各自任选地被一个或多个R10取代；
R1a每次出现时独立地选自H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、苯基、3至7元碳环基环、3至7元单环杂环基和5至6元杂芳基，其中R1a表示的所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、苯基、3至7元碳环基环、3至7元单环杂环基和5至6元杂芳基各自任选地被一个或多个R10取代；
R10每次出现时独立地选自卤素、-OR10a、-S(O)2R10a、-CN、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基；其中R10表示的所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基各自任选地被一个或多个R15取代；
R10a是任选地被一个或多个卤素取代的C1-6烷基；
R15每次出现时独立地选自卤素、C1-6烷基、C1-6卤烷基、-CN和-OR15a；
R15a是C1-6烷基；
R2是H、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基；
或者R1和R2与它们的居间原子一起形成环D，所述环D选自3至7元单环杂环基、7至10元双环杂环基和8至10元双环杂芳基，其中环D任选地被一个或多个R100取代；
R100每次出现时独立地选自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基、4至6元单环杂环基和卤素；其中R100表示的所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基各自任选地被一个或多个R150取代；
R150每次出现时独立地选自卤素、-OR150a、3至7元碳环基环和4至7元单环杂环基；
R150a是H或C1-6烷基；
R3选自H、卤素、-C(O)N(R3a)2、-C(O)OR3a、-C(O)R3a、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基，其中R3表示的所述C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基各自任选地被一个或多个选自卤素和羟基的取代基取代；
R3a每次出现时独立地选自H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、苯基、3至7元碳环基环、3至7元单环杂环基或5至6元杂芳基，其中C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、苯基、3至7元碳环基环、3至7元单环杂环基和5至6元杂芳基任选地被一个或多个R30取代；
或者同一氮上的两个R3a基团与它们的居间原子一起形成选自3至7元单环杂环基和5至6元杂芳基的环，其中所述环任选地被一个或多个R30取代；
R30每次出现时独立地选自卤素、-OR30a、-N(R30a)2、-C(O)N(R30a)、-C(O)2R30a、氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基；
R30a是H或C1-6烷基；
R4每次出现时独立地选自H、卤素、-NO2、-CN、-OR4a、-SR4a、-N(R4a)2、-C(O)R4a、-C(O)OR4a、-S(O)R4a、-S(O)2R4a、-C(O)N(R4a)2、-SO2N(R4a)2、-OC(O)R4a、-N(R4a)C(O)R4a、-N(R4a)C(O)OR4a、-N(R4a)SO2R4a、-OC(O)N(R4a)2、C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基，其中所述C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基各自任选地被一个或多个R40取代；
R4a是H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、苯基、3至8元碳环基环、3至7元单环杂环基和5至6元杂芳基，其中R4a表示的所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、苯基、3至8元碳环基环、3至7元单环杂环基和5至6元杂芳基各自任选地被一个或多个R40取代；
或者同一氮上的两个R4a基团与它们的居间原子一起形成选自3至7元单环杂环基和5至6元杂芳基的环，其中所述环任选地被一个或多个R40取代；
R40每次出现时独立地选自卤素、-OR40a、-N(R40a)2、-C(O)N(R40a)2、-C(O)2R40a、氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基；其中R40表示的所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基各自任选地被一个或多个R45取代；
R40a是H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基；其中所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基各自任选地被一个或多个R45取代；
R45每次出现时独立地选自C1-6烷基、卤素和-OR45a；
R45a是H或C1-6烷基；
或者R3和R4与它们的居间原子一起形成环E，其中环E选自4至7元单环碳环和4至7元单环杂环，其中环E任选地被R300取代；
R300每次出现时独立地选自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基、4至6元单环杂环基、卤素、-C(O)R300a、-OR300a和-S(O)2R300a；其中R300表示的所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基各自任选地被一个或多个R350取代；
R300a选自H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基；其中R300a表示的所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基各自任选地被一个或多个R350取代；
R350每次出现时独立地选自C1-6烷基、卤素、-CN、-C(O)R350a、-C(O)N(R350a)2、-N(R350a)2和-OR350a；
R350a每次出现时独立地是H或任选地被一至三个卤素取代的C1-6烷基；
R5是任选地被一个或多个独立地选自卤基、C1-6烷氧基和C1-6卤代烷氧基的取代基取代的C1-6烷基；
R50每次出现时独立地选自卤素、-OR50a、-N(R50a)2、-C(O)N(R50a)、-C(O)2R50a、氧代、C1-6烷基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基，其中R50表示的所述C1-6烷基、3至7元单环碳环基和4至6元单环杂环基各自任选地被一个或多个独立地选自C1-6烷基、CN、卤基和C1-6烷氧基的取代基取代；
R50a是H或C1-6烷基；
n是0、1、2、3或4。
2.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中X3是-OR5、-N(R5)2、5至6元杂芳基或4至7元单环杂环基，其中所述5至6元杂芳基和所述4至7元单环杂环基任选地被一个或多个R50取代。
3.如权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R0是H。
4.如权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物由下式表示：
或其药学上可接受的盐。
5.如权利要求1-4中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
X3是-OR5、-N(R5)2、5元杂芳基或4至6元单环杂环基，其中所述5元杂芳基和所述4至6元单环杂环基任选地被一至三个R50取代；并且
R5是任选地被C1-6烷氧基取代的C1-6烷基。
6.如权利要求1-5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中X3选自苯基、氮杂环丁烷、吗啉、噁二唑、哌嗪、吡唑、四唑，各自任选地被一个或两个R50取代。
7.如权利要求6所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中X3选自：
其中m是0、1或2。
8.如权利要求1-5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中X3选自-O-CH2-CH2-OCH3、-N(CH3)2、
其中―表示与环B的键。
9.如权利要求1-8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R50每次出现时独立地是C1-6烷基或4至6元单环杂环基，其中R50表示的所述C1-6烷基任选地被卤基或CN取代。
10.如权利要求9所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R50每次出现时独立地选自-CH3、-CH2-CN和
11.如权利要求9所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R50是-CH3。
12.如权利要求1-11中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中环A是苯基、5或6元杂芳基或5至10元单环或双环杂环基，其每一个任选地被一至三个R4取代。
13.如权利要求12所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中环A选自3-氮杂双环[3.2.1]辛烷、氮杂环庚烷、苯基、哌啶、吡啶和吡咯烷，其每一个任选地被一至三个R4取代。
14.如权利要求12所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中环A选自：
其中―表示与环B的键，并且―*表示与的键。
15.如权利要求1-14中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中n是0、1、2。
16.如权利要求12所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中环A选自：
其中―表示与环B的键，并且―*表示与的键。
17.如权利要求1-16中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R4选自卤素、C1-6烷基和C1-6卤代烷基。
18.如权利要求17所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R4选自Cl、F、-CH3和-CHF2。
19.如权利要求1-18中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1是任选地被一个或两个R10取代的5元杂芳基。
20.如权利要求19所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1选自噁唑、噁二唑、吡唑、四唑和三唑，其每一个任选地被一个或两个R10取代。
21.如权利要求19所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1选自：
22.如权利要求1-21中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R10每次出现时独立地选自C1-6烷基和C3-6环烷基，其每一个任选地被一至三个R15取代。
23.如权利要求22所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R10每次出现时独立地选自C1-4烷基和环丙基，其每一个任选地被一或三个R15取代。
24.如权利要求1-23中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R15每次出现时独立地选自卤素、C1-4烷基和C1-4卤代烷基。
25.如权利要求24所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R15每次出现时独立地选自F、-CH3和-CH2F。
26.如权利要求1-21中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R10每次出现时独立地选自-C(CH3)3、-C(CH3)2-CH2F、
27.如权利要求1-26中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R2是H。
28.如权利要求1-18中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1和R2与它们的居间原子一起形成选自5至7元单环杂环基和7至10元双环杂环基的环D，其中环D任选地被一个或多个R100取代。
29.如权利要求28所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中环D选自哌嗪酮和二氢吡咯并[3,4-d]噻唑酮，其中环D任选地被一个或两个R100取代。
30.如权利要求28所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中环D选自：
其中―表示与-C(R3)-环A的键。
31.如权利要求1-30中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R100每次出现时独立地选自C1-6烷基和4至6元单环杂环基，其每一个任选地被一个或两个R150取代；并且
R150每次出现时独立地选自C3-6环烷基和4至6元单环杂环基。
32.如权利要求31所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R100每次出现时独立地选自C1-6烷基和氧杂环丁烷基，其中R100表示的所述C1-6烷基任选地被R150取代；并且
R150每次出现时独立地选自环丁基和氧杂环丁烷基。
33.如权利要求31所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R100每次出现时独立地选自-CH3、-CH2-CH2-CH3、-CH(CH3)2、-C(CH3)3、-CH2-CH(CH3)2、-CH2-C(CH3)3、
34.如权利要求1-33中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3选自H和C1-6烷基。
35.如权利要求34所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3是H或-CH3。
36.如权利要求1-16和18-33中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3和R4与它们的居间原子一起形成环E，其中环E选自4至7元单环碳环和4至7元单环杂环，其中环E任选地被R300取代。
37.如权利要求36所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中环E是任选地被R300取代的5至7元单环杂环。
38.如权利要求36所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中环E由以下结构式表示：
其中―表示与环A的稠合点，并且―*表示与-N(R2)-C(O)-R1的键。
39.如权利要求1-38中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R300每次出现时独立地选自C1-6烷基和4至6元单环杂环基，其中R300表示的所述C1-6烷基和4至6元单环杂环基各自任选地被一至三个R350取代；并且
R350每次出现时独立地是卤素。
40.如权利要求39所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R300每次出现时独立地选自-CH2-CF3和
41.如权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物由下式表示：
或其药学上可接受的盐，其中：
R1是任选地被R10取代的5元杂芳基；
R10是任选地被C1-3烷基取代的C1-4烷基、C1-4卤代烷基或C3-6环烷基；
X3是5元杂芳基或6元单环饱和杂环基，其每一个任选地被R50取代；
R50是C1-3烷基或C1-3卤代烷基；
环A是苯基、6元杂芳基或6元单环饱和杂环基；
R4每次出现时独立地选自卤素、C1-3烷基和C1-3卤代烷基；并且
n是0、1或2。
42.如权利要求41所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：R1选自噁二唑、三唑和四唑，其每一个任选地被R10取代；
X3是吡唑或哌嗪，其每一个任选地被R50取代；并且
环A是苯基、吡啶或哌啶。
43.如权利要求41所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R1选自：
X3选自：
并且
环A选自：
其中―表示与环B的键，并且―*表示与的键。
44.如权利要求43所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中环A选自：
其中―表示与环B的键，并且―*表示与的键。
45.如权利要求41-44中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R10是-C(CH3)3或
R4每次出现时独立地选自F、-CH3和-CHF2；并且
R50是-CH3。
46.一种药物组合物，其包含如权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂。
47.一种治疗受试者的响应于布鲁顿酪氨酸激酶的抑制的病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求46所述的药物组合物。
48.如权利要求47所述的方法，其中所述病症是自身免疫性病症。
49.如权利要求48所述的方法，其中所述自身免疫性病症是类风湿性关节炎。
50.如权利要求48所述的方法，其中所述自身免疫性病症是系统性红斑狼疮。
51.如权利要求47所述的方法，其中所述病症是特应性皮炎。
52.如权利要求51所述的方法，其中所述病症是白血病或淋巴瘤。
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