[go: up one dir, main page]

CN118707006B - 一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法 - Google Patents

一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法 Download PDF

Info

Publication number
CN118707006B
CN118707006B CN202411206274.6A CN202411206274A CN118707006B CN 118707006 B CN118707006 B CN 118707006B CN 202411206274 A CN202411206274 A CN 202411206274A CN 118707006 B CN118707006 B CN 118707006B
Authority
CN
China
Prior art keywords
beeswax
neonicotinoid
eutectic solvent
extraction
detection
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202411206274.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN118707006A (zh
Inventor
母国栋
延莎
陈蕊
苑语哲
薛晓锋
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Apiculture Research
Original Assignee
Institute of Apiculture Research
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute of Apiculture Research filed Critical Institute of Apiculture Research
Priority to CN202411206274.6A priority Critical patent/CN118707006B/zh
Publication of CN118707006A publication Critical patent/CN118707006A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN118707006B publication Critical patent/CN118707006B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
    • G01N30/72—Mass spectrometers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/86—Signal analysis
    • G01N30/8675—Evaluation, i.e. decoding of the signal into analytical information
    • G01N30/8679—Target compound analysis, i.e. whereby a limited number of peaks is analysed
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G01N2030/062—Preparation extracting sample from raw material

Landscapes

  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Library & Information Science (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Abstract

本发明涉及质量检测技术领域，具体涉及一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法。本发明提供的利用低共熔溶剂进行蜂蜡中新烟碱类农药萃取的检测方法，不仅能够实现较高的新烟碱类农药的萃取效率，还能够保证后续液相色谱‑质谱联用检测的高线性相关性以及较好的回收率、准确性和稳定性；而且该方法适用于多种不同的新烟碱类农药，对于常用的新烟碱类农药均具有较好的萃取效果和检测效果，为解决蜂蜡中新烟碱农药残留提取难度大、检测效率低的问题提供了有效的方法，可用于蜂蜡产品的质量控制。

Description

一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法
技术领域
本发明涉及质量检测技术领域，尤其涉及一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法。
背景技术
蜂蜡是一种天然蜡，由蜜蜂的蜡腺分泌，用于筑造巢穴。各种蜂产品，如蜂蜜、蜂花粉和蜂王浆，都储存在蜂巢（蜂蜡）中。蜂蜡具有超疏水性、可塑性和无毒性，是食品和药品中允许添加的成分，在饲料工业、制药工业和食品领域具有广泛的应用。蜂蜡的主要成分包括27%-40%的单酯，11%-28%的碳氢化合物，9%-23%的羟基单酯，7%-16%的二酯，3%-9%的碳氢化合物，1%-18%的游离脂肪酸等，不同种类蜜蜂产生的蜂蜡中上述各成分的比例不同。
在农药暴露的生存压力下，蜜蜂也会将农药带回蜂巢，这些持久性和高度疏水性的农药可以扩散到蜂巢系统中并积聚在蜂蜡中，这不仅会导致其他蜂产品进一步污染，而且会给蜂蜡的使用带来安全风险。
新烟碱类农药（主要为新烟碱类杀虫剂）在蜂巢系统中的存在及其在蜂蜡中的残留已被广泛报道。新烟碱类杀虫剂是一种广谱有效的杀虫剂，在世界范围内应用最广泛，用于控制农业害虫。新烟碱类杀虫剂对害虫的毒性作用是通过影响中枢神经系统发挥的。随着蜂蜡在食品和医药领域的应用日益广泛，新烟碱类杀虫剂通过摄入蜂蜡暴露的问题必须引起重视，监测新烟碱类农药的残留对保证蜂蜡的安全至关重要。然而，与其他检测样品不同，蜂蜡是一种超疏水基质，在室温下为固体，在60℃以上融化，这使得开发合适的测定方法具有挑战性。对于蜂蜡中新烟碱类农药的检测，固相萃取及分散固相萃取的样品预处理方法是可行的，但萃取过程中会消耗大量有机溶剂（例如乙腈），环保性差，而且该萃取过程较为耗时。
发明内容
本发明提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法。
具体地，本发明提供以下技术方案。
第一方面，本发明提供低共熔溶剂在蜂蜡中新烟碱类农药残留检测或蜂蜡中新烟碱类农药萃取中的应用，所述应用包括：以低共熔溶剂作为萃取剂对蜂蜡中的新烟碱类农药进行萃取；所述低共熔溶剂包含氢键受体和氢键供体，所述氢键受体包含脯氨酸（Proline），所述氢键供体包含草酸（Oxalic acid）。
低共熔溶剂（Deep eutectic solvent, DES）是由特定固体物质（如氯化胆碱、有机酸、氨基酸、糖类物质等）分别作为氢键受体和氢键供体组合而成的新型溶剂。目前少有将低共熔溶剂用于蜂蜡中新烟碱农药的萃取中的研究报道。本发明针对蜂蜡这一特殊基质以及被萃取物新烟碱类农药的特点，开发适用于蜂蜡中新烟碱类农药萃取的低共熔溶剂并发现，与其他低共熔溶剂相比，以脯氨酸作为氢键受体，以草酸作为氢键供体的低共熔溶剂特别适用于蜂蜡基质中新烟碱类农药的萃取，能够实现较高的萃取效率，并提高后续液相色谱-质谱联用检测过程中的回收率、准确性和稳定性。此外，本发明还发现，与其他低共熔溶剂仅适用于一种或少数几种新烟碱类农药的萃取不同，本发明所述的低共熔溶剂适用于作为多种不同新烟碱类农药的萃取剂，对于常用的十二种新烟碱类农药（啶虫脒、噻虫胺、环氧虫啶、呋虫胺、氟啶虫酰胺、氟吡呋喃酮、吡虫啉、氯噻啉、烯啶虫胺、氟啶虫胺腈、噻虫啉、噻虫嗪）均具有较好的萃取效果。
优选地，所述低共熔溶剂以脯氨酸作为氢键受体，以草酸作为氢键供体。
优选地，所述低共熔溶剂中，脯氨酸和草酸的摩尔比为（1~3）：1。将脯氨酸和草酸的摩尔比控制在上述范围内更有利于提高蜂蜡基质中新烟碱类农药的萃取效率，并提高液相色谱-质谱联用技术检测过程中的回收率、准确性和稳定性。
优选地，所述低共熔溶剂中，脯氨酸和草酸的摩尔比为（1~2）：1。更优选为（1~1.5）：1。更优选为（1~1.2）：1。
优选地，所述低共熔溶剂还包含水，其中水的质量百分含量为20%~70%。更优选为20%-40%。更优选为25%-35%。将低共熔溶剂的含水量控制在上述范围内更有利于保证蜂蜡基质中新烟碱类农药的萃取效果。
作为本发明的优选方案，所述低共熔溶剂由脯氨酸、草酸和水组成，其中脯氨酸和草酸的摩尔比为（1~3）：1，水的质量百分含量为25%-35%。
优选地，所述萃取中，低共熔溶剂与蜂蜡的用量比为（0.5~1.75）mL：5.0g。更优选为（1~1.25）mL：5.0g。
优选地，所述萃取使用的是融化的蜂蜡。
优选地，所述萃取为涡旋辅助液液萃取。更优选为液液微萃取，使用液液微萃取方法能够以较少的萃取剂用量实现较高的萃取效率。
所述萃取的温度为70-80℃。
所述萃取的时间为12~18分钟。
优选地，在上述萃取结束后分离下层液体得到萃取液。
所述分离下层液体为：于70-80℃静置分层后，分离下层液体。
对于蜂蜡中新烟碱类农药残留检测中的应用，还包括：对萃取得到的萃取液利用液相色谱-质谱联用技术进行新烟碱类农药的定性和/或定量检测。
优选地，将上述萃取液用甲醇-水溶液（优选体积比为1：1）稀释后进行液相色谱-质谱联用技术检测。
优选地，在液相色谱-质谱联用技术检测前，将萃取液或经稀释的萃取液采用常规方法除去杂质后得到均一溶液；除杂方式包括膜过滤、离心等。
其中，所述液相色谱的条件为：采用C18柱，以含0.1％甲酸的水溶液和乙腈分别作为流动相A和流动相B，在0.4-0.5mL/min流速下梯度洗脱，洗脱程序为：0～3.00min，5%～30%流动相B；3.00～8.00min，30%～90%流动相B；8.00～9.00min，90%流动相B；9.00～9.01min，90%～5%流动相B；9.01～12.00min，5%流动相B。
优选地，液相色谱的柱温为28-30℃。
采用上述液相色谱条件能够更好地与上述低共熔溶剂萃取步骤配合作用，有利于保证较好的检测回收率、准确性和重复性。
所述质谱的条件为：离子源：电喷雾离子源；扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应监测；毛细管电压：3.50kV，离子源温度：150℃，脱溶剂气温度：250℃，脱溶剂气流速：800L/h，锥孔气：150L/h。
上述应用中，所述新烟碱类农药包括啶虫脒、噻虫胺、环氧虫啶、呋虫胺、氟啶虫酰胺、氟吡呋喃酮、吡虫啉、氯噻啉、烯啶虫胺、氟啶虫胺腈、噻虫啉、噻虫嗪中的至少一种。
第二方面，本发明提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，所述方法包括：以低共熔溶剂为萃取剂对蜂蜡中的新烟碱类农药进行萃取，将萃取得到的萃取液利用液相色谱-质谱联用技术进行新烟碱类农药的定性和/或定量检测；其中，所述低共熔溶剂包含氢键受体和氢键供体，所述氢键受体包含脯氨酸，所述氢键供体包含草酸。
优选地，所述低共熔溶剂以脯氨酸作为氢键受体，以草酸作为氢键供体。
优选地，所述低共熔溶剂中，脯氨酸和草酸的摩尔比为（1~3）：1。
优选地，所述低共熔溶剂中，脯氨酸和草酸的摩尔比为（1~2）：1。更优选为（1~1.5）：1。更优选为（1~1.2）：1。更优选为1：1。
优选地，所述低共熔溶剂还包含水，其中水的质量百分含量为20%~70%。更优选为20%-40%。更优选为25%-35%。
作为本发明的优选方案，所述低共熔溶剂由脯氨酸、草酸和水组成，其中脯氨酸和草酸的摩尔比为（1~3）：1，水的质量百分含量为25%-35%。
优选地，所述萃取中，低共熔溶剂与蜂蜡的用量比为（0.5~1.75）mL：5.0g。更优选为（1~1.25）mL：5.0g。
优选地，所述萃取使用的是融化的蜂蜡。
优选地，所述萃取为涡旋辅助液液萃取。
所述萃取的温度为70-80℃。
所述萃取的时间为12~18分钟。
优选地，在上述萃取后分离下层液体得到萃取液。
所述分离下层液体为：于70-80℃静置分层后，分离下层液体。
优选地，将上述萃取液用甲醇-水溶液（优选体积比为1：1）稀释后进行液相色谱-质谱联用技术检测。
优选地，在液相色谱-质谱联用技术检测前，将萃取液或经稀释的萃取液采用常规方法除去杂质后得到均一溶液；除杂方式包括膜过滤、离心等。
优选地，所述液相色谱的条件为：采用C18柱，以含0.1％甲酸的水溶液和乙腈分别作为流动相A和流动相B，在0.4-0.5mL/min流速下梯度洗脱，洗脱程序为：0～3.00min，5%～30%流动相B；3.00～8.00min，30%～90%流动相B；8.00～9.00min，90%流动相B；9.00～9.01min，90%～5%流动相B；9.01～12.00min，5%流动相B。
优选地，液相色谱的柱温为28-30℃。
优选地，所述质谱的条件为：离子源：电喷雾离子源；扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应监测；毛细管电压：3.50kV，离子源温度：150℃，脱溶剂气温度：250℃，脱溶剂气流速：800L/h，锥孔气：150L/h。
上述方法中，所述新烟碱类农药包括啶虫脒、噻虫胺、环氧虫啶、呋虫胺、氟啶虫酰胺、氟吡呋喃酮、吡虫啉、氯噻啉、烯啶虫胺、氟啶虫胺腈、噻虫啉、噻虫嗪中的至少一种。
上述方法中，新烟碱类农药残留检测包括检测新烟碱类农药是否存在（定性检测），和/或，对新烟碱类农药的残留量进行定量检测。
上述方法对于所述新烟碱类农药的检出限为0.1～0.5μg/L。
本发明的有益效果至少包括：本发明提供的利用低共熔溶剂进行蜂蜡基质中新烟碱类农药萃取的检测方法，不仅能够实现较高的新烟碱类农药的萃取效率，还能够保证液相色谱-质谱联用检测的高线性相关性以及较好的回收率、准确性和稳定性；而且该方法适用于多种不同的新烟碱类农药，对于常用的十二种新烟碱类农药（啶虫脒、噻虫胺、环氧虫啶、呋虫胺、氟啶虫酰胺、氟吡呋喃酮、吡虫啉、氯噻啉、烯啶虫胺、氟啶虫胺腈、噻虫啉、噻虫嗪）均具有较好的萃取效果和检测效果，为解决蜂蜡中新烟碱农药残留提取难度大、检测效率低的问题提供了有效的方法，可用于蜂蜡产品的质量控制。
附图说明
为了更清楚地说明本发明或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例1中十二种新烟碱类物质（100 ppb）的MRM谱图。
图2为本发明实验例1中低共熔溶剂中脯氨酸和草酸的摩尔比对十二种新烟碱类农药回收率的影响结果，其中，每组柱子从左至右依次为ACE：啶虫脒、CLO：噻虫胺、CYP：环氧虫啶、DIN：呋虫胺、FLO：氟啶虫酰胺、FLU：氟吡呋喃酮、IMI：吡虫啉、IMZ：氯噻啉、NIT：烯啶虫胺、SUL：氟啶虫胺腈、THI：噻虫嗪、THX：噻虫啉。
图3为本发明实验例1中低共熔溶剂的用量对十二种新烟碱类农药回收率的影响结果；其中，每组柱子从左至右依次为ACE：啶虫脒、CLO：噻虫胺、CYP：环氧虫啶、DIN：呋虫胺、FLO：氟啶虫酰胺、FLU：氟吡呋喃酮、IMI：吡虫啉、IMZ：氯噻啉、NIT：烯啶虫胺、SUL：氟啶虫胺腈、THI：噻虫嗪、THX：噻虫啉。
图4为本发明实验例1中萃取时间对十二种新烟碱类农药回收率的影响结果。
图5为本发明实施例1和对比例3-13的低共熔溶剂的颜色和状态；其中，第一行从左至右依次为实施例1、对比例3-7的低共熔溶剂，第二行从左至右依次为对比例8-13的低共熔溶剂。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明中的附图，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本实施例提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其步骤如下：
向融化蜂蜡样品中加入低共熔溶剂作为萃取剂，75℃涡旋辅助萃取，萃取时间为15分钟，萃取结束后，于75℃水浴中静置分层，取下层用甲醇-水溶液（1：1）稀释后，利用液相色谱-质谱联用技术检测新烟碱类农药残留量。其中，低共熔溶剂以脯氨酸作为氢键受体，以草酸作为氢键供体；脯氨酸和草酸的摩尔比为1：1，低共熔溶剂的含水量为30%（质量百分含量）；萃取过程中，低共熔溶剂与蜂蜡的用量比为1.0mL：5.0g。
上述液相色谱的流动相包括流动相A和流动相B：流动相A为含0.1％甲酸的水溶液，流动相B为乙腈。流速为0.4mL/min，柱温为30℃，色谱柱：BEH C18 2.5μm (2.1×50mmColumn XP)。梯度洗脱条件如表1所示。
表1
上述质谱条件为：离子源：电喷雾离子源（ESI+），正离子模式下采用多反应监测（MRM）检测；参数为：毛细管电压设为3.50kV，离子源温度设为150℃，脱溶剂气温度设为250℃，脱溶剂气流速设为800L/h，锥孔气流速设为150L/h。十二种新烟碱类农药标准品的MRM条件及相关参数如表2所示。
表2
图1显示了表2中的十二种新烟碱类物质（100ppb）的MRM谱图。
实施例2
本实施例提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其与实施例1的检测方法的区别仅在于：脯氨酸和草酸的摩尔比为2：1。
实施例3
本实施例提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其与实施例1的检测方法的区别仅在于：脯氨酸和草酸的摩尔比为3：1。
实施例4
本实施例提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其与实施例1的检测方法的区别仅在于：萃取过程中，低共熔溶剂与蜂蜡的用量比分别为0.5mL：5.0g、0.75mL：5.0g、1.25mL：5.0g、1.5mL：5.0g、1.75mL：5.0g。
实施例5
本实施例提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其与实施例1的检测方法的区别仅在于：萃取时间为分别为12min、18min。
对比例1
本对比例提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其与实施例1的检测方法的区别仅在于：将低共熔溶剂替换为摩尔比为1：2的1-甲基脲和山梨糖醇，低共熔溶剂不含水。
对比例2
本对比例提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其与实施例1的检测方法的区别仅在于：将低共熔溶剂替换为摩尔比为1：2的氯化胆碱和乙二醇，低共熔溶剂不含水。
对比例3
本对比例提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其与实施例1的检测方法的区别仅在于：将低共熔溶剂替换为摩尔比为1：1的丙氨酸和草酸，低共熔溶剂的含水量为30%（质量百分含量）。
对比例4
本对比例提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其与实施例1的检测方法的区别仅在于：将低共熔溶剂替换为摩尔比为1：1的脯氨酸和丙二酸，低共熔溶剂的含水量为30%（质量百分含量）。
对比例5
本对比例提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其与实施例1的检测方法的区别仅在于：将低共熔溶剂替换为摩尔比为1：1的脯氨酸和酒石酸，低共熔溶剂的含水量为30%（质量百分含量）。
对比例6
本对比例提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其与实施例1的检测方法的区别仅在于：将低共熔溶剂替换为摩尔比为1：1的脯氨酸和二氯乙酸，低共熔溶剂的含水量为30%（质量百分含量）。
对比例7
本对比例提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其与实施例1的检测方法的区别仅在于：将低共熔溶剂替换为摩尔比为1：1的脯氨酸和柠檬酸，低共熔溶剂的含水量为30%（质量百分含量）。
对比例8
本对比例提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其与实施例1的检测方法的区别仅在于：将低共熔溶剂替换为摩尔比为1：1的四乙基氯化铵和苯甲酸，低共熔溶剂的含水量为30%（质量百分含量）。
对比例9
本对比例提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其与实施例1的检测方法的区别仅在于：将低共熔溶剂替换为摩尔比为1：1的脯氨酸和苹果酸，低共熔溶剂的含水量为30%（质量百分含量）。
对比例10
本对比例提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其与实施例1的检测方法的区别仅在于：将低共熔溶剂替换为摩尔比为1：1的四乙基氯化铵和乙酸，低共熔溶剂的含水量为30%（质量百分含量）。
对比例11
本对比例提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其与实施例1的检测方法的区别仅在于：将低共熔溶剂替换为摩尔比为1：1的丙氨酸和二氯乙酸，低共熔溶剂的含水量为30%（质量百分含量）。
对比例12
本对比例提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其与实施例1的检测方法的区别仅在于：将低共熔溶剂替换为摩尔比为1：1的四乙基氯化铵和乙二醇，低共熔溶剂的含水量为30%（质量百分含量）。
对比例13
本对比例提供一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其与实施例1的检测方法的区别仅在于：将低共熔溶剂替换为摩尔比为1：1的四乙基氯化铵和甘油，低共熔溶剂的含水量为30%（质量百分含量）。
实验例1
对各实施例和对比例的检测方法的回收率进行分析，方法如下：向空白蜂蜡样品中加入确定量（100 ppb）的新烟碱农药混合溶液，通过实际检测结果探究低共熔溶剂中脯氨酸和草酸的摩尔比对十二种新烟碱类农药的回收率的影响，加标回收率加算公式如下：
其中C1代表未处理样品中十二种新烟碱类农药的本底浓度，C2代表十二种新烟碱类农药加标后蜂蜡样品测定浓度，C3代表加入的十二种新烟碱类农药的浓度。
重复试验3次，回收率取3次重复试验的平均值。
实施例1-3的检测方法的回收率分析结果如图2所示。结果表明，脯氨酸与草酸的摩尔比为1：1的回收率最佳，在此基础上增加脯氨酸的摩尔量导致十二种新烟碱类农药的回收率略有降低（3.75%~10.71%）。
对实施例1和实施例4的检测方法的回收率进行分析以探究低共熔溶剂的用量对十二种新烟碱类农药回收率的影响，结果如图3所示。结果显示，在低共熔溶剂与蜂蜡的用量比为（0.5-1.75mL）：5.0g范围内，随着低共熔溶剂的用量增加回收率增大，其中，低共熔溶剂与蜂蜡的用量比为1.0mL：5.0g的回收率最佳。
对实施例1和实施例5的检测方法的回收率进行分析以探究萃取时间对十二种新烟碱类农药回收率的影响，同时设置萃取时间为3min、6min、9min的对照组（对照组的其余检测条件与实施例1相同）。结果如图4所示。结果显示，萃取时间为12-18min的回收率较高，其中萃取15min时回收率最佳。
同时，分析对比例1和2的检测方法的回收率，结果显示（表3），对比例1的检测方法对十二种新烟碱类农药的回收率仅为4.5%~61.0%，对比例2的检测方法对十二种新烟碱类农药的回收率仅为9.4%~66.4%。分析对比例3-13的检测方法的回收率，结果显示（表3），与实施例1的检测方法相比，对比例3-13的检测方法均无法同时保证十二种新烟碱类农药较好的回收率，或存在个别新烟碱类农药回收率低的问题，或存在十二种新烟碱类农药的整体回收率都很低的问题。
表3
注：ACE：啶虫脒、CLO：噻虫胺、CYP：环氧虫啶、DIN：呋虫胺、FLO：氟啶虫酰胺、FLU：氟吡呋喃酮、IMI：吡虫啉、IMZ：氯噻啉、NIT：烯啶虫胺、SUL：氟啶虫胺腈、THI：噻虫嗪、THX：噻虫啉。
实施例1和对比例3-13使用的低共熔溶剂的颜色和状态如图5所示。
实验例2
采用实施例1的蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法对真实蜂蜡样品中的新烟碱类农药残留进行检测，共测定50个蜂蜡样品，其中检出啶虫脒阳性样品3个，吡虫啉阳性样品3个，噻虫啉阳性样品1个，阳性样品中对应新烟碱类农药的残留量检测结果如表5所示。同时分析该检测方法的检出限（LOD）和定量限（LOQ）以及加标回收率（ER）和相对标准偏差（RSD），具体方法和结果如下所述。
在蜂蜡样品中添加0.5～500.0μg/L范围内的目标物新烟碱类农药，对所有分析物的LOD（信噪比为3）和LOQ（信噪比为10）进行计算。经液相色谱-质谱联用检测后，十二种新烟碱类农药的线性方程、检出限、定量限如表4所示。其中，X为十二种新烟碱类农药的检测浓度，Y为十二种新烟碱类农药的定量离子质谱响应强度。
表4
加标回收率（ER）和相对标准偏差（RSD）结果如表5所示。其中，N. D.代表检测结果未达到定量限。
表5
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (6)

1.低共熔溶剂在蜂蜡中新烟碱类农药残留检测或蜂蜡中新烟碱类农药萃取中的应用，其特征在于，所述应用包括：以低共熔溶剂作为萃取剂对蜂蜡中的新烟碱类农药进行萃取；
所述低共熔溶剂包含氢键受体和氢键供体，所述氢键受体包含脯氨酸，所述氢键供体包含草酸；
所述低共熔溶剂中，脯氨酸和草酸的摩尔比为（1~3）：1；
所述低共熔溶剂还包含水，其中水的质量百分含量为20%~70%；
所述新烟碱类农药包括啶虫脒、噻虫胺、环氧虫啶、呋虫胺、氟啶虫酰胺、氟吡呋喃酮、吡虫啉、氯噻啉、烯啶虫胺、氟啶虫胺腈、噻虫啉、噻虫嗪中的至少一种。
2.一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法，其特征在于，所述方法包括：以低共熔溶剂为萃取剂对蜂蜡中的新烟碱类农药进行萃取，将萃取得到的萃取液利用液相色谱-质谱联用技术进行新烟碱类农药的定性和/或定量检测；
所述低共熔溶剂包含氢键受体和氢键供体，所述氢键受体包含脯氨酸，所述氢键供体包含草酸；
所述低共熔溶剂中，脯氨酸和草酸的摩尔比为（1~3）：1；
所述低共熔溶剂还包含水，其中水的质量百分含量为20%~70%；
所述液相色谱以含0.1％甲酸的水溶液和乙腈分别作为流动相A和流动相B；
所述新烟碱类农药包括啶虫脒、噻虫胺、环氧虫啶、呋虫胺、氟啶虫酰胺、氟吡呋喃酮、吡虫啉、氯噻啉、烯啶虫胺、氟啶虫胺腈、噻虫啉、噻虫嗪中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述萃取为涡旋辅助液液萃取；
和/或，所述萃取中，低共熔溶剂与蜂蜡的用量比为（0.5~1.75）mL：5.0g。
4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述萃取的温度为70-80℃；
和/或，所述萃取的时间为12~18分钟；
和/或，在萃取结束后分离下层液体得到萃取液。
5.根据权利要求2~4任一项所述的检测方法，其特征在于，液相色谱的条件为：采用C18柱，在0.4-0.5mL/min流速下梯度洗脱，洗脱程序为：0～3.00min，5%～30%流动相B；3.00～8.00min，30%～90%流动相B；8.00～9.00min，90%流动相B；9.00～9.01min，90%～5%流动相B；9.01～12.00min，5%流动相B。
6.根据权利要求2~4任一项所述的检测方法，其特征在于，质谱的条件为：离子源：电喷雾离子源；扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应监测；毛细管电压：3.50kV，离子源温度：150℃，脱溶剂气温度：250℃，脱溶剂气流速：800L/h，锥孔气：150L/h。
CN202411206274.6A 2024-08-30 2024-08-30 一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法 Active CN118707006B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202411206274.6A CN118707006B (zh) 2024-08-30 2024-08-30 一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202411206274.6A CN118707006B (zh) 2024-08-30 2024-08-30 一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN118707006A CN118707006A (zh) 2024-09-27
CN118707006B true CN118707006B (zh) 2024-11-19

Family

ID=92810192

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202411206274.6A Active CN118707006B (zh) 2024-08-30 2024-08-30 一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN118707006B (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101358953A (zh) * 2008-09-18 2009-02-04 中华人民共和国江苏出入境检验检疫局 蜂产品中多类农兽药残留同时检测的方法
CN105072911A (zh) * 2013-03-28 2015-11-18 先正达参股股份有限公司 控制新烟碱抗性有害生物的方法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106053699B (zh) * 2016-06-30 2018-04-03 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心 一种蜂蜜中新烟碱类杀虫剂的高效检测方法
CN107091896A (zh) * 2017-05-26 2017-08-25 浙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心 固相萃取‑液相色谱‑质谱/质谱法同时测定蜂蜜中烟碱类药物残留量的方法
CN110231423B (zh) * 2019-07-05 2022-04-22 山西农业大学 分散液液微萃取-高效液相色谱测定粮食中拟除虫菊酯类农药的方法
CN116699023A (zh) * 2023-06-07 2023-09-05 扬州大学 一种尿液中残留新烟碱类农药及其代谢物的样品前处理以及检测方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101358953A (zh) * 2008-09-18 2009-02-04 中华人民共和国江苏出入境检验检疫局 蜂产品中多类农兽药残留同时检测的方法
CN105072911A (zh) * 2013-03-28 2015-11-18 先正达参股股份有限公司 控制新烟碱抗性有害生物的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN118707006A (zh) 2024-09-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Shin et al. Simultaneous determination of multi-pesticide residues in fish and shrimp using dispersive-solid phase extraction with liquid chromatography–tandem mass spectrometry
Gbylik-Sikorska et al. Determination of neonicotinoid insecticides and their metabolites in honey bee and honey by liquid chromatography tandem mass spectrometry
Hou et al. Simultaneous determination of ten neonicotinoid insecticides and two metabolites in honey and Royal-jelly by solid− phase extraction and liquid chromatography− tandem mass spectrometry
Nunez et al. LC–MS/MS analysis of organic toxics in food
Blesa et al. Determination of aflatoxins in peanuts by matrix solid-phase dispersion and liquid chromatography
Peres et al. A HPLC with fluorescence detection method for the determination of tetracyclines residues and evaluation of their stability in honey
Sánchez-Hernández et al. Residues of neonicotinoids and their metabolites in honey and pollen from sunflower and maize seed dressing crops
KR102152310B1 (ko) 사료 내 잔류농약, 동물용 의약품 및 곰팡이 독소의 동시분석법
García et al. Multiresidue method for trace pesticide analysis in honeybee wax comb by GC-QqQ-MS
Prata et al. Targeted and non-targeted analysis of pesticides and aflatoxins in baby foods by liquid chromatography coupled to quadrupole Orbitrap mass spectrometry
Giroud et al. Trace-level determination of two neonicotinoid insecticide residues in honey bee royal jelly using ultra-sound assisted salting-out liquid liquid extraction followed by ultra-high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry
Park et al. Advanced analytical method of nereistoxin using mixed-mode cationic exchange solid-phase extraction and GC/MS
Zheng et al. Determination of fenobucarb residues in animal and aquatic food products using liquid chromatography-tandem mass spectrometry coupled with a QuEChERS extraction method
Bogialli et al. Development of a multiresidue method for analyzing herbicide and fungicide residues in bovine milk based on solid-phase extraction and liquid chromatography–tandem mass spectrometry
KR101823020B1 (ko) 글리옥살, 메틸글리옥살 또는 다이아세틸을 포함하는 α-다이카보닐 화합물의 분석방법
Daniel et al. A sensitive multiresidue method for the determination of pesticides in marijuana by liquid chromatography–tandem mass spectrometry
Carbonell-Rozas et al. Sweeping-micellar electrokinetic chromatography with tandem mass spectrometry as an alternative methodology to determine neonicotinoid and boscalid residues in pollen and honeybee samples
CN105842357A (zh) 同时检测粮谷中呋虫胺及其代谢物uf、dn残留量的方法
Hayat et al. Determination of insecticide residues and their adverse effects on blood profile of occupationally exposed individuals
Picó et al. Rapid and sensitive ultra-high-pressure liquid chromatography–quadrupole time-of-flight mass spectrometry for the quantification of amitraz and identification of its degradation products in fruits
CN118707006B (zh) 一种蜂蜡中新烟碱类农药残留的检测方法
Kasiotis et al. Neonicotinoids and their metabolites in human biomonitoring: a review
Wambua et al. Online solid phase extraction high-performance liquid chromatography–Isotope dilution–Tandem mass spectrometry quantification of organophosphate pesticides, synthetic pyrethroids, and selected herbicide metabolites in human urine
Tsimeli et al. Development of a rapid and sensitive method for the simultaneous determination of 1, 2-dibromoethane, 1, 4-dichlorobenzene and naphthalene residues in honey using HS-SPME coupled with GC–MS
Ferrari et al. High precision and selectivity for quantitation of enrofloxacin and ciprofloxacin in five chicken tissues using solid phase extraction and ESI LC-MS/MS for application in monitoring residues

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant