CN118302192A

CN118302192A - 治疗癌症的方法及其药物组合物

Info

Publication number: CN118302192A
Application number: CN202280066714.5A
Authority: CN
Inventors: 肖洒; 丁沐然; 张勇; 卓识; 麦雅丝; 贾汉·哈利利; 朱海; 朱义
Original assignee: Chengdu Bailidote Biological Pharmaceutical Co ltd; Seattle Immunization Co
Current assignee: Chengdu Bailidote Biological Pharmaceutical Co ltd
Priority date: 2021-10-03
Filing date: 2022-10-03
Publication date: 2024-07-05
Also published as: KR20240082379A; WO2023056485A1; US20240398943A1; IL311698A; EP4408464A4; AU2022357570A1; CA3233721A1; EP4408464A1; JP2024536275A; MX2024003989A

Abstract

一种用于治疗受试者癌症的方法，包含向受试者施用双特异性抗体和治疗剂，该双特异性抗体对EGFR和HER3具有结合特异性，其中治该疗剂包含酪氨酸激酶抑制剂(TKI)、烷化剂、抗代谢物、抗微管剂、细胞毒性抗生素、拓扑异构酶抑制剂、化疗保护剂或其组合。

Description

治疗癌症的方法及其药物组合物

相关申请的交叉引用

根据U.S.C.119(e)，本申请要求于2021年10月3日递交的美国临时申请序列号63/251,664的申请日的权益，其全部公开内容通过引用并入本文。

技术领域

本申请涉及用于治疗癌症的组合疗法。具体而言，本申请涉及一种组合疗法，其包含双特异性抗体和化疗剂，该双特异性抗体特异性结合人EGFR和HER3，化疗剂包括酪氨酸激酶抑制剂。

背景技术

除非本文另有说明，否则本节中描述的材料并非本申请中权利要求的现有技术，并且不因为包含在本节中而被视为现有技术。

人表皮生长因子受体家族含有四种受体酪氨酸激酶(EGFR/HER1、HER2、HER3和HER4)。EGFR因其在基因表达、细胞增殖、粘附、血管生成、凋亡和肿瘤转移中的作用而得到广泛研究。EGFR在超过90％的头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)中过度表达。在非小细胞肺癌(NSCLC)中发现了高水平的EGFR突变。虽然EGFR和HER3在多种肿瘤中经常上调和/或突变，但HER3是EGFR家族中催化受损的成员，其有助于EGFR、HER3和HER2的激酶结构域形成异二聚体复合物。癌症相关HER3突变通过改变二聚化界面的局部相互作用增强了HER3的变构激活剂功能。

在HNSCC患者的病例中，标准护理(诸如术后放疗和同步基于顺铂的化疗)改善了局部区域控制和无病生存期。但总体存活率仍保持为约50％。

开发了几种酪氨酸激酶抑制剂(TKI)作为靶向化疗，以抑制人癌细胞中受体酪氨酸激酶的活性。TKI可用作靶向EGFR信号传导的细胞内激酶结构域的单药疗法。例如，吉非替尼(阿斯利康(AstraZeneca))被批准用于治疗具有EGFR外显子19缺失(外显子19del)或外显子21(L858R)替换突变的NSCLC。无论是作为单药还是与放射治疗组合，TKI治疗的临床获益似乎仅限于10-15％的HNSCC患者。正在HNSCC患者中研究EGFR-TKI靶向化疗和标准化疗的组合(Rebuzzi等人，2019)。这些方法可能有其自身的局限性。例如，由于其非特异性作用机制，化疗组合中的治疗剂量可能具有显著毒性，这成为治疗计划有效性的限制因素。

证明初始疗效的单药靶向化疗(诸如TKI)或靶向免疫抗体疗法不会导致持久的癌症控制(Wu等人，2020)。在靶向免疫疗法的情况下，西妥昔单抗(一种靶向EGFR胞外结构域的单克隆抗体(mAb))已被批准作为HNSCC临床适应症的单一疗法，即在基于铂的疗法、局部/区域晚期HNSCC组合放疗、晚期HNSCC组合化疗、以及复发性局部区域疾病或转移性HNSCC组合基于铂的疗法及氟尿嘧啶之后进展的复发性或转移性HNSCC。然而，在EGFR高度扩增且与人乳头瘤病毒(HPV)状态无关的HNSCC患者中，西妥昔单抗的响应率仅限于约20％。在基于铂的放化疗(CRT)中加入西妥昔单抗并不能改善疗效。此外，在卡铂/紫杉醇化疗或高剂量放疗中加入西妥昔单抗对不可切除的III期非小细胞肺癌(NSCLC)并不能提供生存益处，不可切除的III期非小细胞肺癌是另一种显示高EGFR表达和突变率的癌症亚型。

采用mAb或TKI的靶向EGFR单药疗法的响应率相对较低，患者常常会产生耐药性(Chong等人，2013；Lim等人，2018)。少于5％的HNSCC携带EGFR突变，这可能解释了疗效有限的原因。此外，多种细胞外受体和下游信号通路用作替代，持续激活的致癌信号允许癌症对EGFR抑制剂的单药疗法产生耐药性。

发明内容

以下概述仅是说明性的，并不旨在以任何方式进行限制。除了上述说明性的方面、实施方案和特征之外，通过参考附图和以下详细描述，进一步的方面、实施方案和特征将变得显而易见。

一方面，本申请提供了用于治疗受试者癌症的方法。该方法可以是包括至少一种抗体的组合疗法。在一个实施方案中，该方法包含向受试者施用抗体和治疗剂。

抗体可以是双特异性抗体。在一个实施方案中，抗体对EGFR和HER3具有结合特异性。在一个实施方案中，抗体包含SEQ ID NO：1的3个互补决定区(CDR)、SEQ ID NO：2的3个CDR或SEQ ID NO：4的3个CDR。

在一个实施方案中，抗体包含重链可变区(VH)，其氨基酸序列与SEQ ID NO：1具有至少70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％、99％序列同一性。在一个实施方案中，抗体包含重链scFv结构域，其氨基酸序列与SEQ ID NO：2具有至少98％序列同一性。在一个实施方案中，抗体包含轻链可变区(VL)，其氨基酸序列与SEQ ID NO：4具有至少70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％、99％序列同一性。

在一个实施方案中，抗体具有重链和轻链。在一个实施方案中，重链包含与SEQ IDNO：3具有至少70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％、99％序列同一性的氨基酸序列。在一个实施方案中，轻链包含与SEQ ID NO：5具有至少70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％、99％序列同一性的氨基酸序列。

治疗剂可以是任何癌症治疗剂或此类治疗剂的组合。在一个实施方案中，治疗剂可以是酪氨酸激酶抑制剂(TKI)、烷化剂、抗代谢物、抗微管剂、细胞毒性抗生素、拓扑异构酶抑制剂、化学保护剂或其组合。在一个实施方案中，治疗剂可以是奥希替尼、紫杉醇、多西他赛、伊立替康、卡铂、培美曲塞、顺铂或其组合。

在一个实施方案中，酪氨酸激酶抑制剂(TKI)包含厄洛替尼、吉非替尼、埃克替尼、AZD3759、Sapatinib、阿法替尼、达克替尼、Deratinib、波齐替尼、Tarlox-TKI、奥希替尼、Nazartinib、奥美替尼、Rociletinib、Naquotinib、Lazertinib、EAI045、CLN081、AZ5104、莫博赛替尼、其衍生物或其组合。

在一个实施方案中，治疗癌症的方法使用包括双特异性抗体和奥希替尼的组合治疗。在一个实施方案中，抗体可以通过静脉滴注以例如6mg/kg、9mg/kg、12mg/kg、14mg/kg、16mg/kg或21mg/kg的剂量，至少每周一次(QW)、每两周一次或每隔一周一次(Q2W)、每三周一次(Q3W)或每三周第1天和第8天一次(D1D8Q3W)施用。在一个实施方案中，如果在第一次静脉滴注120分钟±10分钟后第一个剂量期间，输注反应是可耐受的，则随后的输注可以在60至120分钟内完成。在一个实施方案中，抗体和治疗剂可以在同一天使用，并且可以在抗体输注完成后继续治疗剂的输注。在一个实施方案中，奥希替尼以至少约40mg/kg、约80mg/kg、约120mg/kg、约160mg/kg或约180mg/kg的剂量施用。

在一个实施方案中，烷化剂包含二甲磺酸丁酯、环磷酰胺、替莫唑胺、卡铂、顺铂或其组合。

在一个实施方案中，该方法使用包括双特异性抗体和卡铂的组合。在一个实施方案中，卡铂以约100mg/m²至约500mg/m²的剂量施用。在一个实施方案中，卡铂以至少约200mg/m²、约250mg/m²、约300mg/m²、约360mg/m²、约400mg/m²或约AUC 5mg/ml/分钟、约AUC6mg/ml/分钟、约AUC 7mg/ml/分钟的剂量施用。在一个实施方案中，卡铂以约AUC 5mg/ml/分钟的剂量施用。

在一个实施方案中，该方法使用包括双特异性抗体和顺铂的组合。在一个实施方案中，顺铂以约10mg/m²至约180mg/m²的剂量施用。在一个实施方案中，顺铂以至少约15mg/m²、约20mg/m²、约30mg/m²、约50mg/m²、约75mg/m²、约100mg/m²或约120mg/m的剂量施用。在一个实施方案中，顺铂以100mg/m²、Q3W的剂量施用。在一个实施方案中，该方法还包含在初始输注或第一治疗期后确定剂量毒性的步骤。如果剂量毒性太大，剂量可减少至80％。

在一个实施方案中，抗代谢物可以包括6-巯基嘌呤、氟达拉滨、5-氟尿嘧啶、吉西他滨、阿糖胞苷、培美曲塞、甲氨蝶呤、其衍生物或其组合。

在一个实施方案中，该方法使用双特异性抗体和培美曲塞的组合。在一个实施方案中，培美曲塞以约150mg/m²至约800mg/m²的剂量施用。在一个实施方案中，培美曲塞以至少约250mg/m²、约500mg/m²或约750mg/m²的剂量施用。在一个实施方案中，培美曲塞以约500mg/m²的剂量施用。在一个实施方案中，该方法还包含在初始输注或第一治疗期后确定剂量毒性的步骤。如果剂量毒性太大，剂量减少至80％。

在一个实施方案中，本申请使用组合疗法，该组合疗法包括双特异性抗体以及培美曲塞与顺铂的组合。在一个实施方案中，可以通过静脉滴注至少每周一次(QW)施用抗体。在一个实施方案中，培美曲塞和顺铂(AP)的施用可以遵循药物说明书和标准用法，并且可以在抗体完成后立即施用。

在一个实施方案中，抗微管剂包含多西他赛、艾立布林、伊沙匹隆、紫杉醇、长春碱、其衍生物或其组合。

在一个实施方案中，该方法使用包括双特异性抗体和紫杉醇的组合治疗。在一个实施方案中，可以通过静脉滴注每周一次(QW)施用抗体。在一个实施方案中，紫杉醇可以以约20mg/m²至约200mg/m²的剂量施用。在一个实施方案中，紫杉醇以至少约40mg/m²、约80mg/m²、约135mg/m²或约175mg/m²的剂量施用。在一个实施方案中，紫杉醇的剂量可以是80mg/m²QW。

在一个实施方案中，抗体和紫杉醇可以在同一天使用。在一个实施方案中，在抗体输注后，可以预处理紫杉醇并在3小时内注射。在一个实施方案中，该方法可以还包含在初始输注后确定剂量毒性的步骤。如果剂量毒性太大，剂量减少至80％。

在一个实施方案中，本申请提供了一种治疗癌症的方法，其使用组合疗法，该组合疗法包括双特异性抗体以及紫杉醇与顺铂的组合。在一个实施方案中，可以通过静脉滴注至少每周一次(QW)施用抗体。在一个实施方案中，紫杉醇和顺铂(TP)的施用可以遵循药物说明书和标准用法，并且可以在抗体完成后立即施用。

在一个实施方案中，该方法可以使用双特异性抗体和多西他赛的组合。在一个实施方案中，以至少约35mg/m² D1D8D215Q3W的剂量施用多西他赛。在一个实施方案中，该方法还包含在初始输注后确定剂量毒性的步骤。如果剂量毒性太大，剂量减少至80％。

在一个实施方案中，细胞毒性抗生素包含放线菌素、博来霉素、柔红霉素、多柔比星、其衍生物或其组合。

在一个实施方案中，拓扑异构酶抑制剂包含依托泊苷、伊立替康、拓扑替康、其衍生物或其组合。

在一个实施方案中，该方法可以使用双特异性抗体和伊立替康的组合。在一个实施方案中，通过静脉滴注每2周(Q2W)施用抗体。在一个实施方案中，伊立替康可以以约50mg/m²至约250mg/m²的剂量施用。在一个实施方案中，伊立替康可以以至少约80mg/m²、130mg/m²、150mg/m²、180mg/m²、200mg/m²或220mg/m²的剂量施用。在一个实施方案中，伊立替康的剂量可以是180mg/m² Q2W，输注方法可以遵循药物说明书。在一个实施方案中，抗体和伊立替康可以在同一天使用，并且伊立替康可以在抗体输注后注射。

在一个实施方案中，化学保护剂包含甲酰四氢叶酸或其衍生物。

在一个实施方案中，抗体可以与一种或多种治疗癌症的治疗剂组合。在一个实施方案中，抗体可以与标准化疗组合进行组合。在一个实施方案中，根据癌症疗法中的既定剂量、方案或方法来施用治疗剂或治疗剂组合。

抗体和治疗剂可以作为一个治疗期同时或依次施用。

在一个实施方案中，抗体和治疗剂可以在交替治疗期内分别施用于受试者。在一个实施方案中，抗体和治疗剂同时并依次施用。在一个实施方案中，抗体在与治疗剂分开的时间施用。

在一个实施方案中，抗体可以在第一个治疗期中施用，治疗剂可以在第二个治疗期中施用。在一个实施方案中，第一个治疗期的持续时间可以为约7天至约728天。在一个实施方案中，第二个治疗期的持续时间为约1天至约728天。在一个实施方案中，第一个治疗期与第二个治疗期之间的间隔为约7至约21天。

在一个实施方案中，可以每周一次(Q1W)、每两周一次(Q2W)、每三周一次(Q3W)或每三周第1天和第8天一次(D1D8Q3W)施用抗体。

可以以固定剂量、单位为mg/kg的剂量或单位为mg/m2的剂量施用抗体。在一个实施方案中，以约0.1mg/kg至约50mg/kg的剂量施用抗体。在一个实施方案中，以至少约0.3mg/kg、约1.2mg/kg、约3.0mg/kg、约6.0mg/kg、约9.0mg/kg、约12.0mg/kg、约16.0mg/kg、约21.0mg/kg或约28.0mg/kg的剂量施用抗体。

可以按照药物说明书和标准用法或剂量方案施用治疗剂。在一个实施方案中，可以以约6.0mg/kg至约28.0mg/kg的剂量施用治疗剂。

一方面，本申请提供了用于治疗癌症患者的治疗组合物。该治疗组合物可以包括本文公开的抗体和治疗剂的组合。

抗体可以是对EGFR和HER3双特异性具有结合特异性的双特异性抗体。在一个实施方案中，抗体包含SEQ ID NO：1的3个互补决定区(CDR)、SEQ ID NO：2的3个CDR或SEQ IDNO：4的3个CDR。

在一个实施方案中，治疗剂可以是本文公开的任何治疗剂或组合，包括例如奥希替尼、卡铂、顺铂、培美曲塞、紫杉醇、其衍生物或其组合。

在一个实施方案中，抗体和治疗剂两者或其中之一的形式为同时、依次或共同施用的药物制剂。

一方面，本申请还提供了一种试剂盒，其包含第一容器、第二容器和包装插页。第一容器包含至少一个剂量的第一治疗组合物，该第一治疗组合物包含抗体，第二容器包含至少一个剂量的第二治疗组合物，该第二治疗组合物包含治疗剂，并且包装插页包含使用第一治疗组合物和第二治疗组合物治疗癌症患者的说明书。

在一个实施方案中，说明书可以陈述第一治疗组合物和第二治疗组合物旨在用于治疗患有EGFR表达检测呈阳性的癌症的受试者。

癌症可以是实体瘤。在一个实施方案中，癌症是肺腺癌、头/颈鳞状细胞癌、直肠癌、结肠癌、鳞状细胞肺癌、甲状腺癌、膀胱癌、黑色素瘤、宫颈癌、前列腺癌、乳腺癌、子宫/子宫内膜癌、胰腺癌、卵巢癌或乳头状肾癌。

在一个实施方案中，癌症包含EGFR表达检测呈阳性的实体瘤，并且选自肺腺癌、头/颈鳞状细胞癌、直肠癌、结肠癌、鳞状细胞肺癌、甲状腺癌、膀胱癌、黑色素瘤、宫颈癌、前列腺癌、乳腺癌、子宫/子宫内膜癌、胰腺癌、卵巢癌和乳头状肾癌。

在一个实施方案中，癌症是晚期或转移性实体瘤。

附图说明

结合附图，从以下描述和所附权利要求中，本发明的前述及其他特征将变得更加显而易见。应当理解，这些附图仅描绘了根据本发明布置的几个实施方案，因此不应被视为对其范围的限制，将通过使用附图来更具体且详细地描述本发明，其中：

图1示出了当治疗裸鼠中的HCC827-936肿瘤细胞异种移植物时基于代表性双特异性抗体SI-B001和奥希替尼(Osi)的组合疗法的效果，其中肿瘤体积测量为每种治疗(3种剂量方案)和对照组的平均值，并示出了标准误差(1a)；显示了治疗期间的体重曲线(1b)；以及通过流式细胞荧光分选术(FACS)检测EGFR和HER3在HCC827-936细胞来源的肿瘤中的表达(1c)；

图2示出了当治疗裸鼠中的NCI-H1975肿瘤细胞异种移植物时基于SI-B001和奥希替尼(Osi)的组合疗法的效果，其中肿瘤体积测量为每种治疗(3种剂量方案)和对照组的平均值，并示出了标准误差(2a)；显示了治疗期间的体重曲线(2b)；以及通过FACS检测EGFR和HER3在NCI-H1975细胞来源的肿瘤中的表达(2c)；

图3示出了当治疗裸鼠中的Fadu肿瘤细胞异种移植物时基于SI-B001和卡铂紫杉醇(CarboTaxol)(紫杉醇和卡铂)的组合疗法的效果，其中肿瘤体积测量为每次治疗(3种剂量方案)和对照组的平均值，并示出了标准误差(3a)；显示了治疗期间的体重曲线(3b)；以及通过FACS检测EGFR和HER3在Fadu细胞来源的肿瘤中的表达(3c)；

图4显示了当与(4a)单独SI-B001或单独化疗、(4b)西妥昔单抗+化疗、以及(4c)单独SI-B001、单独西妥昔单抗或“西妥昔单抗+化疗”相比时，肿瘤体积的测量值和SI-B001+化疗的肿瘤生长抑制百分比；

图5显示了当治疗裸鼠中的HCC827肿瘤细胞异种移植物时基于SI-B001和顺铂/培美曲塞的组合疗法的效果，其中肿瘤体积测量为每次治疗(3种剂量方案)和对照组的平均值，并示出了标准误差(5a)；显示了治疗期间的体重曲线(5b)；

图6显示了SI-B100、TKI和化疗药物在用于治疗人肿瘤小鼠异种移植物模型的组合疗法中的比较优势，所测量的肿瘤生长率受以下所影响：(6a)单独或组合的西妥昔单抗和奥希替尼；(6b)单独或组合的SI-B001低剂量和奥希替尼；(6c)单独或组合的SI-B001中剂量和奥希替尼；(6d)单独或组合的SI-B001高剂量和奥希替尼；(6e)单独或组合的西妥昔单抗和化疗；(6f)单独或组合的SI-B001低剂量和化疗；(6g)单独或组合的SI-B001中剂量和化疗；以及(6h)单独或组合的SI-B001高剂量和化疗；以及

图7显示了接受以下的患者中肿瘤响应的瀑布图：(7a)SI-B001+AP/TP或多西他赛；(7b)SI-B001+紫杉醇；以及(7c)SI-B001+伊立替康。

具体实施方式

在下面的详细描述中，参考了附图，附图构成本文的一部分。在附图中，除非上下文另有规定，相似的符号通常标识相似的部件。在详细描述、附图和权利要求中描述的说明性实施方案并不意指限制性。在不脱离本文呈现的主题的精神或范围的情况下，可以利用其他实施方案，并且可以进行其他改变。将容易理解的是，如本文总体上所描述以及附图中所示出的，本发明的各个方面可以以多种不同的配置进行排列、替换、组合、分离和设计，本文对所有这些都明确预期。

本发明总体上涉及使用包括抗体和另外的治疗剂的组合疗法来治疗癌症的方法、组合物和试剂盒。

抗EGFR/HER3抗体疗法(SI-B001)

SI-B001是一种双特异性四价抗EGFR/HER3单克隆抗体(在美国专利号10,919,977B2中也称为SI-1X6.4，其全部公开内容通过引用并入本文)。施用后，SI-B001同时结合癌细胞上的EGFR和HER3，从而防止受体磷酸化和致癌信号传导。本质上，SI-B001在单一治疗性抗体中体现了结合EGFR和HER3二者。

基于抗体的免疫疗法通过阻断生长因子与受体的结合并防止细胞表面的同型和异型二聚体信号状态，以及通过促进内化和降解，来抑制癌细胞增殖。另一方面，小分子(诸如酪氨酸激酶抑制剂(TKI))抑制由一个或多个EGFR家族成员的致癌信号诱导的细胞质激酶活性。所有实体瘤细胞本质上都是异源的，也就是说，在同一患者的癌症中，即使EGFR突变和异常表达的状态也可能随时间而变化。将本文公开的抗体与另外的治疗剂组合的组合疗法提供了显著的技术优势，即提高了在肿瘤进展的不同阶段治疗异源肿瘤细胞的功效、降低了复发的发生率或两者兼而有之。在一个实施方案中，SI-B001与TKI的组合通过攻击EGFR致癌信号的垂直途径，将基于抗体的对EGFR家族成员介导的致癌信号的抑制与EGFRTKI对细胞质信号的抑制相结合。

SI-B001组合疗法

在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗有需要的患者的癌症的方法。癌症可以是但不限于实体瘤、软组织肉瘤、鳞状细胞癌、头颈鳞状细胞癌(HNSCC)、非小细胞肺癌(NSCLC)、食管鳞状细胞癌(ESCC)或表达EGFR的癌症。该方法可以包括向患者施用有效量的SI-B001，任选地与一种或多种标准护理治疗、另外的治疗剂或其组合进行组合。

本领域普通技术人员熟知癌症(诸如但不限于HNSCC、NSCLC和ESCC)标准护理治疗，包括手术、放疗、化疗、光动力疗法、靶向疗法或靶向免疫疗法或其组合。在一些实施方案中，标准护理治疗选自使用卡铂(BMS)、顺铂(BMS)、多西他赛(赛诺菲-安万特(Sanofi-Aventis))、伊立替康(辉瑞(Pfizer))、培美曲塞二钠(礼来(Eli Lilly))、双马来酸阿法替尼、阿来替尼(基因泰克(Genentech))、博莱霉素、brigantinib、塞瑞替尼(诺华(Novartis))、克唑替尼(辉瑞)、达拉非尼、盐酸多柔比星、依托泊苷、依维莫司、5-氟尿嘧啶、盐酸吉西他滨、羟基脲、盐酸氮芥、甲氨蝶呤、舒尼替尼、曲美替尼、酒石酸长春瑞滨(皮尔法伯(Pierre Fabre))、盐酸托泊替康、其衍生物或其组合。

在一些实施方案中，另外的治疗剂可以是用于靶向化疗的酪氨酸激酶抑制剂，包括例如厄洛替尼、吉非替尼、埃克替尼、AZD3759、sapatinib、阿法替尼、达克替尼、deratinib、波齐替尼、nazartinib、奥美替尼、rociletinib、naquotinib、lazertinib、EAI045、CLN081、AZ5104、莫博赛替尼或其衍生物。在一些实施方案中，另外的治疗剂是奥希替尼(阿斯利康(AstraZeneca))，一种第三代不可逆EGFR抑制剂，被设计用于靶向突变EGFR和异常表达的EGFR，而不影响野生型EGFR。晚期或转移性NSCLC患者对奥希替尼的耐受性良好。

在一些实施方案中，另外的治疗剂可以是用于靶向免疫治疗的单克隆抗体，包括例如西妥昔单抗(抗EGFR抗体，礼来)、纳武利尤单抗(抗PD1抗体，BMS)、帕博利珠单抗(抗PD1抗体，默克(Merck))、西米普利单抗(抗PD1抗体，再生元(Regeneron))、阿替利珠单抗(抗PD-L1抗体，罗氏(Roche))、度伐利尤单抗(抗PD-L1抗体，阿斯利康)、贝伐珠单抗(抗VEGF抗体，罗氏)或其生物类似物。

在一些实施方案中，SI-B001作为HNSCC、非小细胞肺癌和ESCC的一线单一疗法施用于患者。在其他实施方案中，将SI-B001作为一线治疗与用于HNSCC、非小细胞肺癌和ESCC的标准护理治疗(包括手术、放疗、化疗、光动力治疗或靶向免疫治疗或其组合)组合施用于患者。

在一些实施方案中，将SI-B001作为一线治疗与标准护理化疗或多西他赛(赛诺菲-安万特)组合施用于肺癌患者，包括NSCLC，但不限于复发性和转移性非小细胞肺癌。在其他实施方案中，SI-B001作为一线治疗与标准护理化疗或紫杉醇(BMS；阿博利斯(Abraxis))，包括HNSCC，但不限于复发性和转移性HNSCC。在另一个实施方案中，将SI-B001作为一线治疗与标准护理化疗或伊立替康(辉瑞)组合施用于食道癌患者，包括ESCC，但不限于复发性和转移性ESCC。

在一些实施方案中，当标准护理治疗失败时，如当手术未能移除所有癌性组织或癌症对化疗或免疫疗法部分耐受时，使用二线治疗，其可包括治疗HNSCC、NSCLC和ESCC的众所周知的二线治疗。因此，在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗对一线治疗有抗性的HNSCC、NSCLC和ESCC患者的方法，所述方法包含任选地与二线治疗组合施用SI-B001。

在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗癌症的方法，包含施用SI-B001作为二线治疗。在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗耐药性癌症的方法，包含将SI-B001与用于HNSCC(ClinicalTrials.gov ID:NCT05054439,S206)、NSCLC(ClinicalTrials.govID:NCT05020457,S201)和ESCC(ClinicalTrials.gov ID:NCT05022654,S207，其全部内容通过引用并入本文)的另一种二线治疗或标准护理二线治疗组合施用。在一些实施方案中，二线治疗可以是化疗。例如，SI-B001作为二线治疗方案与标准护理化疗或紫杉醇组合应用于患有HNSCC、NSCLC和ESCC的患者治疗HNSCC、NSCLC和ESCC，包括但不限于复发性、复发性和/或转移性HNSCC、NSCLC和ESCC。在一些实施方案中，二线治疗可以是靶向治疗。例如，将SI-B001施用于患有HNSCC、NSCLC和ESCC的患者，作为二线治疗与标准护理化疗或奥希替尼组合治疗癌症，例如HNSCC、NSCLC和ESCC，包括但不限于复发性、复发性和/或转移性HNSCC、NSCLC和ESCC。

在一些实施方案中，当一线或二线标准护理治疗失败时，如当化疗继续失败且出现缓解时，对患者进行三线治疗。在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗对一线治疗和二线治疗都有抗性的HNSCC(ClinicalTrials.gov ID:NCT05054439,S206)、NSCLC(ClinicalTrials.gov ID:NCT05020457,S201)和ESCC(ClinicalTrials.gov ID:NCT05022654,S207)的方法，这几种病对一线治疗和二线治疗都有抗性，包含施用SI-B001作为三线治疗。在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗HNSCC、NSCLC和ESCC的方法，其对一线治疗和二线治疗都有抗性，包含将SI-B001与用于HNSCC、NSCLC和ESCC的另一种三线治疗或标准护理三线治疗组合施用。

在一些实施方案中，SI-B001作为敏化剂施用，用于治疗有需要的患者的HNSCC、NSCLC和ESCC。不受任何理论的束缚，据信SI-B001提高了HNSCC、NSCLC和ESCC的标准护理、一线、二线或三线治疗的功效。在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗有需要的患者的HNSCC、NSCLC和ESCC的方法，包含在施用一种或多种标准护理、一线、二线或三线治疗之前将SI-B001施用于患者。在一些实施方案中，与未施用SI-B001的治疗相比，施用SI-B001导致更有效地治疗HNSCC、NSCLC和ESCC。在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗有需要的患者的HNSCC、NSCLC和ESCC的方法，包含在施用一种或多种标准护理、一线、二线或三线治疗之后将SI-B001施用于患者。

本领域普通技术人员将理解施用此类另外的治疗剂用于治疗HNSCC、NSCLC和ESCC的量和给药方案。举例来说，适用于治疗HNSCC、NSCLC和ESCC的示例性治疗剂的施用总结于表1中。

术语“药物制剂”是指将不同的化学物质(包括既稳定又可被患者接受的活性药物化合物)组合以产生剂型的最终药物产品的过程。对于口服施用的药物，活性药物化合物被掺入无毒载体、佐剂或溶媒中，该无毒载体、佐剂或溶媒不会破坏与其一起配制的化合物的药理活性。配制的药物化合物与这些其他物质相容，不会直接或间接造成伤害。可用于本发明组合物的药学上可接受的载体、佐剂或溶媒包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(诸如人血清白蛋白)、缓冲物质(诸如磷酸盐)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、盐或电解质(诸如硫酸鱼精蛋白)、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、胶体二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯聚氧丙烯嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。

本发明的组合物可以通过口服、肠胃外、通过吸入喷雾、局部(诸如通过粉末、软膏或滴剂)、直肠、鼻、口腔、阴道内、脑池内或通过植入型药盒施用。如本文所用，术语“肠胃外”包括皮下、静脉内、肌肉内、关节内、滑膜内、胸骨内、鞘内、肝内、病变内和颅内注射或输注技术。优选地，组合物通过口服、腹膜内或静脉内施用。本发明组合物的无菌可注射形式可以是水性或油性悬浮液。可以根据本领域已知的技术使用合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂来配制这些悬浮液。无菌可注射制剂也可以是在无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如在1,3-丁二醇中的溶液。可以使用的可接受的溶媒和溶剂包括水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。此外，无菌不挥发油通常用作溶剂或悬浮介质。

还应当理解，任何患者的具体剂量和治疗方案将取决于多种因素，包括所用具体化合物的活性、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、施用时间、排泄速率、药物组合、治疗医生的判断和所治疗疾病的严重程度。本发明化合物在组合物中的量也取决于组合物中的化合物。

根据本发明的方法，可以施用有效治疗癌症的任何量和任何施用途径来施用化合物和组合物，如本文公开的那些。所需的确切量因受试者而异，取决于受试者的物种、年龄和一般状况、癌症的严重程度、药物、其施用方式等。本发明的化合物和组合物优选以剂量均匀的形式配制，以便于施用于适合待治疗患者的物理上分散的药剂单位。然而，应当理解，本发明的化合物和组合物的总日用量将由主治医学专业人员在专业医学判断的范围内进行决定。任何特定患者或生物体的具体有效剂量水平将取决于多种因素，包括：所治疗的癌症和癌症的严重程度；所用具体化合物的活性；使用的具体组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所用具体化合物的施用时间、施用途径和排泄速率；治疗的持续时间；与所用具体化合物组合或一同使用的药物；以及医学领域众所周知的类似因素。

可注射制剂(诸如无菌可注射水性或油性混悬液)可根据已知技术使用合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂进行配制。无菌可注射制剂也可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液、悬浮液或乳液，例如在1,3-丁二醇中的溶液。可以使用的可接受的溶媒和溶剂为水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。可注射制剂可以被灭菌，例如通过细菌截留过滤器过滤，或通过加入无菌固体组合物形式的灭菌剂，该组合物可以在使用前溶解或分散在无菌水或其他无菌可注射介质中。

本发明的试剂盒特别适用于不同剂型的施用，例如口服和胃肠外，适用于以不同剂量间隔施用药不同的组合物，或适用于相互滴定不同的组合物。为了有助于依从性，试剂盒通常包括施用说明，并可提供记忆辅助工具。

如本文所用，除非上下文不合适，术语“一(a)”、“一个(an)”和“该(the)”被定义为表示“一个或多个”，并且包括复数形式。

如本文所用，术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”可以互换，并且被定义为由肽键连接的氨基酸组成的生物分子。

术语“抗原”、“抗原位点”和“表位”是指能够在生物体中诱导免疫响应的实体或其片段，该生物体特别是动物，更特别是哺乳动物，包括人。该术语包括免疫原及其负责抗原性或抗原决定簇的区域。

术语“抗体”以最广泛的意义使用，具体涵盖单克隆抗体(包括激动剂和拮抗剂抗体)、具有多表位特异性的抗体组合物以及抗体片段(例如，Fab、F(ab′)₂和Fv)，只要它们表现出所需的生物活性。在一些实施方案中，抗体可以是单克隆、多克隆、嵌合、单链、双特异性或双效、人和人源化抗体及其活性片段。结合已知抗原的分子活性片段的实例包括Fab、F(ab′)₂、scFv和Fv片段，包括Fab免疫球蛋白表达文库的产物以及任何上述抗体和片段的表位结合片段。在一些实施方案中，抗体可以包括免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫活性部分，即含有可结合抗原、抗原位点或表位的结合位点的分子。免疫球蛋白可以是免疫球蛋白分子的任何类型(IgG、IgM、IgD、IgE、IgA和IgY)或亚类(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2)或亚类。在一个实施方案中，抗体可以是完整抗体以及来源于完整抗体的任何抗原结合片段。

典型的抗体是指通常包含两条重链(H)和两条轻链(L)的异四聚体蛋白。每条重链由重链可变结构域(缩写为VH)和重链恒定结构域组成。每条轻链由轻链可变结构域(缩写为VL)和轻链恒定结构域组成。任何脊椎动物物种的抗体(免疫球蛋白)的“轻链”都可以根据其恒定区的氨基酸序列分为两种明显不同的类型，称为κ和λ。VH和VL区可以进一步细分为高变互补决定区(CDR)以及被称为框架区(FR)的更保守区域。每个可变结构域(VH或VL)通常由三个CDR和四个FR组成，从氨基末端到羧基末端按以下顺序排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。轻链和重链的可变区内存在与抗原相互作用的结合区。

如本文所用，术语“单克隆抗体”是指从基本上均一的抗体群中获得的抗体，即组成该群的单个抗体是相同的，除了可能存在少量的可能天然发生的突变。单克隆抗体是高度特异性的，针对一个抗原位点作为单克隆单特异性抗体，或针对一个以上抗原位点作为单克隆多特异性抗体。此外，与通常包括针对不同决定簇(表位)的不同抗体的常规(多克隆)抗体制剂相反，每种单克隆抗体针对抗原上的单个决定簇。除了它们的特异性之外，单克隆抗体的优势在于其是由杂交瘤培养物合成的，未被其他免疫球蛋白污染。修饰语“单克隆”表示抗体的特征是从基本上同质的抗体群中获得的，不应理解为需要通过任何方法产生抗体。例如，根据本发明使用的单克隆抗体可以通过Kohler和Milstein,Nature,256:495(1975)首次描述的杂交瘤方法制备，或者可以通过重组DNA方法制备(例如，参见美国专利号4,816,567)。

单克隆抗体可以包括“嵌合”抗体(免疫球蛋白)，其中重链和/或轻链的一部分与来自特定物种或属于特定抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，而链的剩余部分与来自另一物种或属于另一抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，以及此类抗体的片段，只要它们表现出所需的生物活性(美国专利号4,816,567；以及Morrison等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,81:6851-6855[1984])。可以使用各种方法产生单克隆抗体，包括小鼠杂交瘤或噬菌体展示(参见Siegel.Transfus.Clin.Biol.9:15-22(2002)回顾)或直接来自原代B细胞的抗体分子克隆(参见Tiller.New Biotechnol.28:453-7(2011))。在本发明中，通过免疫兔、小鼠或美洲驼的方法结合随后的策略如杂交瘤或展示来产生抗体。已知兔能产生高亲和力、多样性和特异性的抗体(Weber等人.Exp.Mol.Med.49:e305)。除了免疫兔然后进行B细胞培养之外，产生和发现抗体的其他常见策略包括免疫其他动物(例如，小鼠、美洲驼)，然后进行杂交瘤和/或在噬菌体、酵母或哺乳动物细胞上展示；或使用合成可变基因文库展示。这种发现抗体的一般方法类似于Seeber等人.PLOS One.9:e86184(2014)中描述的方法。

术语“抗原结合或表位结合部分或片段”是指能够结合抗原的抗体片段。这些片段可能具有完整抗体的抗原结合功能和其他功能。结合片段的实例包括但不限于：单链Fv片段(scFv)，其由抗体单臂的VL和VH结构域组成，VL和VH结构域通过合成接头连接在单个多肽链中；或Fab片段，其是由VL、恒定轻链(CL)、VH和恒定重链1(CH1)结构域组成的单价片段。抗体片段甚至可以是更小的亚片段，并且可以由小至单个CDR结构域的结构域、来自VL和/或VH结构域的CDR3区组成(例如，参见Beiboer等人,J.Mol.Biol.296:833-49(2000))。使用本领域技术人员已知的常规方法产生抗体片段。可以使用与完整抗体相同的技术来筛选抗体片段的实用性。

可以通过几种已知技术由本发明的抗体获得“抗原或表位结合片段”。例如，纯化的单克隆抗体可以用酶(诸如胃蛋白酶)切割，并进行HPLC凝胶过滤。然后可以收集含有Fab片段的适当级分，并通过膜过滤等进行浓缩。关于分离抗体活性片段的一般技术的进一步描述，参见例如Khaw,B.A.等人.J.Nucl.Med.23:1011-1019(1982)；Rousseaux等人.Methods Enzymology,121:663-69,Academic出版社,1986。

抗体的木瓜蛋白酶消化产生两个相同的抗原结合片段(称为“Fab”片段，每个片段具有一个抗原结合位点)和一个残留的“Fc”片段，“Fc”片段的名称反映了其易于结晶的能力。胃蛋白酶处理产生F(ab′)₂片段，该F(ab′)₂片段具有两个抗原结合位点，仍然能够交联抗原。Fab片段可以含有轻链的恒定区和重链的第一个恒定区(CH1)。Fab′片段与Fab片段的不同之处在于在重链CH1结构域的羧基末端添加了几个残基，包括来自抗体铰链区的一个或多个半胱氨酸。Fab′-SH是本文用于Fab′的名称，其中恒定区的半胱氨酸残基带有游离巯基。F(ab′)₂抗体片段最初作为Fab′片段对产生，Fab′片段之间具有铰链半胱氨酸。其他抗体片段的化学偶联也是已知的。

“Fv”是含有完整抗原识别和结合位点的最小抗体片段。该区域由一个重链和一个轻链可变结构域的二聚体以紧密、非共价的方式组成。正是在这种构型中，每个可变结构域的三个CDR相互作用以确定VH-VL二聚体表面的抗原结合位点。六个互补决定区共同赋予抗体抗原结合特异性。然而，即使单个可变结构域(或仅包含三个抗原特异性CDR的半个Fv)也具有识别和结合抗原的能力，尽管亲和力低于完整的结合位点。

根据其重链恒定区的氨基酸序列，免疫球蛋白可以分为不同类别。免疫球蛋白有五大类：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，其中几种可进一步分为亚类(同种型)，例如IgG-1、IgG-2、IgG-3和IgG-4；IgA-1和IgA-2。对应于不同类别免疫球蛋白的重链恒定区分别称为α、δ、ε、γ和μ。不同类别免疫球蛋白的亚单位结构和三维构型是众所周知的。

“多价”抗体结合一个靶标上的多个位点，这可能导致功能亲和性和亲和力比其单体形式更高，这取决于结合位点的数量。所有抗体都是多价的，例如，IgG是二价的，IgM是十价的。

两个序列之间的“同源性”由序列同一性决定。如果待相互比较的两个序列长度不同，序列同一性优选涉及较短序列的核苷酸残基与较长序列的核苷酸残基相同的百分比。可以使用计算机程序常规确定序列同一性。在给定序列和本发明的上述序列之间的比较中出现的偏差可能由例如添加、缺失、取代、插入或重组所引起。

术语“靶向化疗”是指用于治疗癌症的分子靶向疗法，以及其他医学治疗，诸如药物治疗、激素治疗和细胞毒性化疗。靶向治疗或靶向化疗的第一类药物是伊马替尼(诺华)，一种抗癌酪氨酸激酶抑制剂(TKI)。这类TKI在慢性粒细胞白血病、费城染色体阳性的急性淋巴细胞白血病、某些类型的胃肠道间质瘤、嗜酸性粒细胞增多综合征、慢性嗜酸性粒细胞白血病、系统性肥大细胞增多症、骨髓增生异常综合征和隆突性皮肤纤维肉瘤中具有显著改善的疗效。TKI也用于治疗其他疾病，诸如特发性肺纤维化。

术语“EGFR-TKI”是指抑制EGFR信号通路酪氨酸激酶活性的TKI药物。酪氨酸激酶是通过信号转导级联反应(诸如EGFR家族成员介导的信号传导)激活多种蛋白质的酶。TKI也称为“酪氨酸磷酸化抑制剂”，它不抑制磷酸化丝氨酸或苏氨酸残基的蛋白激酶，并能区分EGFR和胰岛素受体的激酶结构域。通过在蛋白质上添加一个磷酸基团(磷酸化)来激活蛋白质。已开发了三代EGFR-TKI作为治疗携带EGFR突变的癌症的靶向化疗，根据作用机制和临床益处对这些药物进行分类(Sullivan和Planchard,2017)。

术语“Bliss独立性评分”是指在筛选候选药物组合时用于分析药物组合数据的广泛使用的Bliss独立性模型。该方法将观察到的组合响应(Y_O)与预测的组合响应(Y_P)进行比较，基于药物-药物相互作用没有影响的假设而获得预测的组合响应。假设两种药物A和B都抑制肿瘤生长：剂量a的药物A抑制肿瘤生长的比例为Y_a％，剂量b的药物B抑制肿瘤生长的比例为Y_b％。如果两种药物独立起效，可以使用概率论的完全可加性预测组合的抑制百分比Y_ab,P，如下所示：

Y_ab,P＝Y_a+Y_b-Y_a x Y_b

通过参考下面对具体实施方案的详细描述和本文包括的实例，可以更容易地理解本发明。尽管已经参考本发明的某些实施方案的具体细节描述了本发明，但是这些细节不应被视为对本发明范围的限制。实际上，根据前面的描述和附图，除了本文描述的那些之外，本发明的各种修改对于本领域技术人员来说将变得显而易见。此类修改旨在落入所附权利要求的范围内。

实施例

实施例1.人癌症异种移植模型

将人癌细胞异种移植到免疫缺陷小鼠体内是临床前肿瘤学研究和抗癌疗法测试的金标准模型。通常，将人癌细胞系注射到小鼠的皮下。将药物或药物组合施用于一组或多组小鼠，而对照组不接受药物。主要结果参数是药物的生长抑制作用，通常在外部用测径器随时间测量肿瘤大小。肿瘤达到一定大小后，对小鼠实施安乐死。在组织水平或分子水平(例如，DNA、蛋白质)进一步分析药物对肿瘤的作用。用于测试药效的异种移植模型的主要结果参数是治疗组相对于对照组的肿瘤生长。通常，异种移植肿瘤在几周内从100mm³(直径6mm)生长到1000mm³(直径12mm)。肿瘤越大，生长率通常越低，这与2D体外实验中的指数增长相反。肿瘤生长抑制因药物和植入的细胞系而异。治疗效果可以直接作用于肿瘤细胞，或通过微环境间接作用于肿瘤细胞，诸如抑制血管形成，或两者兼而有之。

HNSCC和NSCLC的异种移植模型用于评估SI-B001单一疗法以及与标准护理、化疗和/或基于TKI的靶向治疗组合的安全性和治疗效果。实验动物为Balb/c-nu小鼠，雌性，5～7周龄，体重17～21g。

为了建立HNSCC异种移植模型，将人头颈癌细胞FaDu细胞移植到小鼠体内以建立HNSCC异种移植模型。FaDu是分离自鳞状细胞癌患者下咽肿瘤的细胞系，其表达野生型EGFR(ATCC)。

为了建立NSCLC异种移植模型，使用两种表达的肺癌细胞系。人肺腺癌细胞系HCC827_936是从分离自患者NSCLC组织的HCC827细胞系克隆得到的(ATCC)。HCC827_936细胞表达外显子19del和外显子20ins的EGFR突变。另一种肺癌细胞系NCI-H1975细胞(ATCC)表达EGFR L858R/T790M双突变。

三种人癌细胞系中的每一种都在含有10％胎牛血清的RPMI1640培养基中培养，在指数生长期收集，在PBS中重悬至合适的浓度，并用于小鼠皮下肿瘤植入。

实施例2.HCC827_936模型中的SI-B001和奥希替尼组合疗法

为了评估实验药物SI-B001与奥希替尼(Osi)组合的抗肿瘤疗效和安全性，将5×10⁶个HCC827_936细胞皮下植入40只雌性裸鼠，并将细胞重悬于PBS中(0.1ml/小鼠)。当肿瘤生长至平均体积为约163mm³时，根据肿瘤大小和小鼠体重随机分组以建立HCC827_936异种移植模型。

盐水和SI-B001通过静脉输注每周施用一次。SI-B001以3种不同剂量方案给药，分别为9mg/kg、16mg/kg和28mg/kg。DMSO和奥希替尼每周口服施用一次。奥希替尼以96mg/kg的固定剂量给药(表2)。

肿瘤体积(mm³)V＝1/2×(a×b)²，其中a表示长径，b表示短径。相对肿瘤体积(RTV)，RTV＝Vt/V0，其中V0是在时间0的肿瘤体积，Vt是治疗后在时间t的肿瘤体积。T/C值(％)是治疗肿瘤响应的指标，也是最常用的评估指标。T/C％＝T_RTV/C_RTV×100％，其中T_RTV是治疗组平均RTV，C_RTV是对照组平均RTV。T/C值(％)也可以计算为T/C％＝T_TW/C_TW×100％，其中T_TW是治疗组实验结束时的平均肿瘤重量，C_TW是对照组实验结束时的平均肿瘤重量。相对肿瘤抑制率(肿瘤生长抑制，TGI)是治疗肿瘤响应的指标之一，TGI％＝100％-T/C％。

第31天，溶媒对照组中小鼠的平均肿瘤体积为720.68mm³，第31天，对照奥希替尼单药组的平均肿瘤体积为344.53mm³，TGI(％)为54.89％(p＝0.262)。第31天，SI-B001单药剂量组9/16/28mg/kg/小鼠的平均肿瘤体积分别为789.65mm³、601.42mm³和203.92mm³，TGI(％)分别为-10.71％、24.64％和73.20％(与溶媒对照组相比，p＝0.783、p＝0.654、p＝0.123)。第31天，每个剂量组中的SI-B001和奥希替尼组合(9/16/28+96mg/kg/小鼠)对应的平均肿瘤体积为46.79mm³、7.75mm³、0mm³，TGI％分别为93.74％、99.07％和100.00％(与相应剂量水平的单药SI-B001相比，p＝0.002、p＝0.012、p＝0.268；与单药奥希替尼相比，p＝0.007、p＝0.036、p＝0.044)，抗肿瘤效果优于相应的单药SI-B001和单药奥希替尼。总之，SI-B001与奥希替尼组合的所有剂量组都具有显著更高的抗肿瘤效果(图1a，表3)。抗肿瘤效果优于相应的单药SI-B001和单药奥希替尼，显示出组合疗法的显著协同抗肿瘤效果。肿瘤抑制水平与SI-B001剂量增加呈正相关。

在整个实验中测量小鼠的体重(图1b)。在溶媒组#1中，2只小鼠在D31之前死亡，死亡率为40％。在SI-B001单药低剂量组#3中，1只小鼠在D31之前死亡，死亡率为20％。在SI-B001单药中剂量组#4中，3只小鼠在D31之前死亡，死亡率为60％。在SI-B001单药高剂量组#5中，3只小鼠在D31之前死亡，死亡率为60％。在奥希替尼单药组#2中，3只小鼠在D31之前死亡，死亡率为60％。在组合组#6(SI-B001低剂量)中，没有小鼠在D31之前死亡。另外两个组合组#7和#8，3只小鼠在D31之前死亡，死亡率为60％。就死亡数量而言，各组之间没有明显趋势。当组合SI-B001和奥希替尼时，未显示明显毒性。

为了在实验结束时验证荷瘤小鼠中的肿瘤组织靶标，在小鼠安乐死后取出肿瘤组织，并使用流式细胞荧光分选(FACS)分析来表征肿瘤组织的EGFR和HER3表达(图1c)。

在该实施例中，用于治疗HNSCC的治疗计划是在来源于HCC827_936的异种移植物模型中显示SI-B001与奥希替尼组合在剂量递增中的效果。结果显示，奥希替尼可以实现一定程度的癌症控制，但用这种TKI治疗的小鼠最终会复发。然而，当与检测的3个亚治疗剂量的SI-B001中的2个进行组合时，可以实现持久的控制。当奥希替尼与一定剂量的SI-B001组合时，可以实现疾病稳定，从而可以实现持久控制。到第31天，包括SI-B001在内的所有三种组合在与示例TKI奥希替尼组合时可见肿瘤体积具有显著差异(p<0.05)(表3)。

这些结果表明，当与TKI组合时，SI-B001的组合可以实现显著有利的治疗能力，这为人临床试验提供了支持(表1)。

实施例3.NCI-H1975模型中的SI-B001和奥希替尼组合疗法

为了评估试验药物SI-B001与奥希替尼组合的抗肿瘤疗效和安全性，将5×10⁶个NCI-H1975细胞皮下植入80只雌性裸鼠，并将细胞重悬于PBS中(0.1ml/小鼠)。当肿瘤生长至平均体积为约170mm³时，根据肿瘤大小和小鼠体重随机分组以建立人头颈鳞状细胞癌细胞NCI-H1975异种移植模型。

生理盐水和SI-B001通过静脉输注每周施用一次。SI-B001以3种不同剂量方案给药，分别为9mg/kg、16mg/kg和28mg/kg。每周口服施用一次DMSO和奥希替尼。奥希替尼以96mg/kg的固定剂量给药(表4)。

第25天，溶媒对照组中小鼠的平均肿瘤体积为2316.19mm³，第25天，对照组的平均肿瘤体积为75.02mm³，TGI(％)为95.35％(p＝0.030)。第25天，SI-B001单药剂量组9/16/28mg/kg/小鼠的平均肿瘤体积分别为253.83mm³、173.94mm³和186.08mm³，TGI(％)分别为81.79％、86.85％和84.80％(p＝0.027、p＝0.021、p＝0.021)。第25天，每个剂量组中SI-B001和奥希替尼的组合(9/16/28+96mg/kg/小鼠)对应的平均肿瘤体积为49.36mm³、9.75mm³、8.68mm³，TGI％分别为97.77％、99.41％和99.54％(与相应剂量水平的单药SI-B001相比，p＝0.243、p＝0.409、p＝0.399；与单药奥希替尼相比，p＝0.633、p＝0.096、p＝0.092)，抗肿瘤效果优于相应的单药SI-B001和单药奥希替尼(图2a，表5)。总之，SI-B001与奥希替尼组合的所有剂量组均具有显著更高的抗肿瘤效果。抗肿瘤效果优于相应的单药SI-B001和单药奥希替尼，表明显著的协同抗肿瘤作用。肿瘤抑制水平与SI-B001剂量增加呈正相关。

在整个实验中测量小鼠的体重(图2b)。在溶媒组#1中，1只小鼠在D25之前死亡，死亡率为20％。在每个SI-B001单药组#3、#4和#5中，2只小鼠在D25之前死亡，死亡率为40％。在奥希替尼单药组#2中，没有小鼠在D25之前死亡。在组合组#6、#7、#9中，没有小鼠、1只小鼠和1只小鼠在D25之前死亡。在实验过程中，所有组中所有存活的小鼠在体重减轻方面没有显著差异。就死亡数量而言，各组之间没有明显趋势。当组合SI-B001和奥希替尼时，未显示明显毒性。

为了在实验结束时验证荷瘤小鼠中的肿瘤组织靶标，在小鼠安乐死后取出肿瘤组织，并使用FACS分析来表征肿瘤组织中EGFR和HER3的表达(图2c)。

在该实施例中，SI-B001(EGFR-HER3双特异性抗体)与奥希替尼的组合在组合施用用于治疗肺癌细胞系NCI-H1975(作为Balb/c-nu小鼠中的植入肿瘤异种移植物)时显示出增强的药物活性。在该模型中，奥希替尼和SI-B001作为单药治疗维持病情相对稳定(通过肿瘤体积来测量)。然而，当奥希替尼与所检测的3种治疗剂量的SI-B001中的任何一种进行组合时，到最后可评估的时间点，可以实现显著增强的肿瘤控制(p<0.05)(表5)。这一证据有助于支持临床试验，即SI-B001与奥希替尼组合时可提高患者中SI-B001治疗的治疗能力(表1)。

实施例4.Fadu模型中的SI-B001和卡铂紫杉醇(CarboTaxol)(紫杉醇和卡铂)组合疗法

为了评估实验药物SI-B001与紫杉醇和卡铂组合的抗肿瘤疗效和安全性，将5×10⁶个FaDu细胞皮下植入80只雌性裸鼠，并将细胞重悬于PBS中(0.1ml/小鼠)。当肿瘤生长至平均体积为约230mm³时，根据肿瘤大小和小鼠体重随机分组以建立人头颈鳞状细胞癌细胞FaDu异种移植模型。

生理盐水(溶媒对照)、西妥昔单抗、SI-B001、紫杉醇和卡铂通过静脉输注每周施用一次。SI-B001以3种不同剂量方案6mg/kg、9mg/kg和12mg/kg给药。第0天给予西妥昔单抗10.5mg/kg，随后三个剂量每周6.5mg/kg。紫杉醇和卡铂以固定剂量方案给药，分别为20.6mg/kg和28mg/kg(图3a，表6)。

SI-B001对比化疗对比SI-B001+化疗

SI-B001单药的所有剂量组(6、9、12mg/kg)均具有显著的抗肿瘤作用，TGI分别为96.76％、97.9％和98.8％。对照化疗紫杉醇+卡铂具有良好的抗肿瘤效果，TGI为56.16％；SI-B001+紫杉醇+卡铂的所有剂量组(6、9、12+20.6+28mg/kg)明显比对照化疗组和SI-B001单药组更有效，TGI分别为99.2％、99.23％和99.38％。表明SI-B001+紫杉醇+卡铂的组合在人头颈鳞状细胞FaDu异种移植模型中具有协同抗肿瘤作用(图4a)。

SI-B001+化疗对比西妥昔单抗+化疗

SI-B001单药的所有剂量组(6、9、12mg/kg)均具有显著的抗肿瘤作用，TGI分别为96.76％、97.9％和98.8％。TGI为74.27％的对照西妥昔单抗单药组显著弱于SI-B001单药组。对照组合西妥昔单抗+紫杉醇+卡铂具有良好的抗肿瘤效果，TGI为79.98％，但明显弱于所有SI-B001单药组(96.76％、97.9％和98.8％)和SI-B001化疗组合组(99.2％、99.23％和99.38％)(图4b、图4c)。

实验过程中测量了小鼠的体重。在所有SI-B001单药组中没有小鼠死亡，也没有发现明显的体重减轻(图3b)。表明SI-B001单剂毒性低，安全性好。化疗紫杉醇+卡铂在实验结束前导致4只小鼠死亡，死亡率为80％，其中3只小鼠在死亡前体重严重下降(≥20％)。化疗紫杉醇+卡铂组小鼠的体重波动很大。表明紫杉醇+卡铂的化疗比SI-B001单药毒性更大且安全性更低。在SI-B001和化疗组合、西妥昔单抗和化疗组合中没有小鼠死亡，并且没有发现明显的体重减轻。表明SI-B001+化疗和西妥昔单抗+化疗均具有良好的耐受性和安全性。

为了在实验结束时验证荷瘤小鼠中的肿瘤组织靶标，在小鼠安乐死后取出肿瘤组织，并使用FACS分析来表征肿瘤组织中EGFR和HER3的表达(图3c)。

总之，SI-B001(EGFR-HER3双特异性抗体)与卡铂紫杉醇(紫杉醇和卡铂)的组合在头颈鳞状FaDu细胞系(Balb/c-nu小鼠中作为植入肿瘤异种移植物)的治疗中显示药物活性增加。在该模型中，卡铂紫杉醇(紫杉醇和卡铂)可以延缓肿瘤生长速度，但不能实现任何肿瘤消退的措施。而当与检测的3种治疗剂量的SI-B001中的任一种组合时，可以获得更好的控制效果(图3a)。第17天，当可以评估所有动物的肿瘤体积时，卡铂紫杉醇(紫杉醇和卡铂)和SI-B001的所有三种组合之间的肿瘤体积存在显著差异(p<0.05)(表7)。基于这一证据，当与化疗组合组合进行组合时，SI-B001的组合可以实现治疗能力增加。

实施例5.HCC827模型中的SI-B001和Cis/Pem组合疗法

为了评价实验药物SI-B001与Cis/Pem组合的抗肿瘤疗效和安全性，将5×10⁶个HCC827_936细胞皮下植入40只雌性裸鼠，并将细胞重悬于PBS中(0.1ml/小鼠)。当肿瘤生长至平均体积约163mm³时，根据肿瘤大小和小鼠体重随机分组以建立人头颈鳞状细胞癌细胞HCC827_936异种移植模型。

生理盐水(溶媒对照)、SI-B001、顺铂和培美曲塞通过静脉输注每周施用一次。SI-B001以3种不同剂量方案9mg/kg、16mg/kg和28mg/kg给药。顺铂和培美曲塞与西妥昔单抗或SI-B001组合时以7.72mg/kg和51.48mg/kg给药，单独时以3.86mg/kg和25.74mg/kg给药(图5a；表8)。

溶媒对照组小鼠的平均肿瘤体积在第24天为765.1mm³，对照组Cis/Pem组的平均肿瘤体积在第24天为603.1mm³，TGI(％)为21.2％(p＝0.473)。SI-B001单药剂量组9/16/28mg/kg/小鼠在第24天的平均肿瘤体积分别为682.mm³、588.1mm³和205.7mm³，TGI(％)分别为10.8％、23.1％和73.1％(与溶媒对照组相比，p＝0.562、p＝0.198、p＝0.007)。每个剂量组中SI-B001和Cis/Pem的组合(9/16/28+3.86+25.74mg/kg/周)对应于第24天的平均肿瘤体积为337.7mm³、335.6mm³、241.8mm³，TGI％为55.9％、56.1％和68.4％(与相应剂量水平的单药SI-B001相比，p＝0.032、p＝0.030、p＝0.652；与Cis/Pem相比，p＝0.297、p＝0.321、p＝0.222)，除了高剂量SI-B001之外，其抗肿瘤效果优于相应的单药SI-B001，且优于单独的Cis/Pem。

总之，SI-B001组合Cis/Pem具有总体更高的抗肿瘤效果(图5a，表9)。抗肿瘤效果优于单药SI-B001和单独的Cis/Pem，表现出协同抗肿瘤作用。肿瘤抑制水平与SI-B001剂量增加呈正相关。

为了评估安全性问题，在整个实验中测量了小鼠的体重(图5b)。在溶媒组#1中，1只小鼠在D24之前死亡，死亡率为20％。在SI-B001单药低剂量组#3中，1只小鼠在D24之前死亡，死亡率为20％。在SI-B001单药中剂量组#4中，2只小鼠在D24之前死亡，死亡率为40％。在SI-B001单药高剂量组#5中，2只小鼠在D24之前死亡，死亡率为40％。在Cis/Pem组#2中，3只小鼠在D24之前死亡，死亡率为60％。在组合组#6和#8(SI-B001低剂量和高剂量)中，2只小鼠在D24之前死亡，死亡率为40％。在组合组#7(SI-B001中剂量)中，1只小鼠在D24之前死亡，死亡率为20％。就死亡数量而言，各组之间没有明显趋势。当组合SI-B001和Cis/Pem时，未显示明显毒性。

SI-B001与Cis/Pem的组合在用于治疗来源于肺癌的HCC827细胞系(作为Balb/c-nu小鼠中植入的肿瘤异种移植物)的组合施用时显示出药物活性增加。在该模型中，Cis/Pem可以在早期可评估的时间点延迟肿瘤生长速度，但肿瘤生长最终不受控制。作为单药，SI-B001显示出对肿瘤生长的剂量依赖性控制。当Cis/Pem与亚治疗剂量的SI-B001组合时，可以实现更好的控制。

基于这一证据，当SI-B001与化疗组合进行组合时，SI-B001的组合可以实现治疗能力增加。

实施例6：SI-B001与TKI或化疗药物在组合疗法中的协同作用

根据Bliss定义，如果Bliss独立性评分大于零，则组合治疗具有协同效应。协同作用的Bliss定义应用于HCC827异种移植Balb/c-nu小鼠模型中31天内测量的肿瘤体积数据。在该模型中，用西妥昔单抗、SI-B001低剂量(9mg/kg)、SI-B001中剂量(16mg/kg)、SI-B001高剂量(28mg/kg)、基于铂的双化疗(顺铂和培美曲塞)、第三代TKI(奥希替尼)及其组合来治疗小鼠。西妥昔单抗、化疗和奥希替尼按临床等效剂量给药(表9)。

使用线性混合模型和Demidenko，2019中指定的相同假设来计算每个治疗组的肿瘤增长率。图6a至图6h显示了组合与单个药物的肿瘤生长比较。当西妥昔单抗和SI-B001与奥希替尼组合使用时，均显示出显著的协同作用(表10)。SI-B001与奥希替尼的协同作用随着SI-B001剂量的增加而增加，并且强于西妥昔单抗与奥希替尼的协同作用。SI-B001高剂量与奥希替尼的组合显示出最佳的总体疗效。当西妥昔单抗和SI-B001与化疗组合使用时，除了高剂量SI-B001之外，其他药物均显示出显著的协同作用(表11)。SI-B001中剂量与化疗的组合显示出最佳的总体疗效。

这些结果表明，SI-B001与TKI组合时可以实现更高的治疗能力，这为人临床试验提供了支持(表1)。

实施例7：SI-B001与化疗药物组合用于治疗实体瘤的临床研究

在临床研究中，在NSCLC、HNSCC和ESCCS中对SI-B001与化疗组合进行检测(分别见表1、S201、S206和S207)。

在S201研究中，SI-B001与AP(Cis/Pem，顺铂+培美曲塞)或TP(卡铂紫杉醇，卡铂+紫杉醇)组合用于在一线治疗中仅接受抗PD-1/L1单一疗法的二线NSCLC患者，SI-B001与多西他赛组合用于同时接受基于铂的化疗和抗PD-1/L1治疗的二线/三线NSCLC患者。初步报告显示，在46名入选患者中，91％为男性，中位年龄为62.5岁(范围为33-76岁)。在46名患者中，1名接受SI-B001+AP/TP治疗，45名接受SI-B001+多西他赛治疗，既往治疗线的中位数为2。在46名患者中，27名符合疗效评估条件(至少有1名基线后肿瘤评估)，其中14名仍在接受治疗。总体响应率(ORR)为33.3％(95％可信区间为16.5至54.0)，疾病控制率(DCR)为81.5％(95％可信区间为61.9至93.7)。图7a显示了瀑布图中的肿瘤响应。与单纯化疗相比，SI-B001组合化疗在该适应症中的疗效(Schuette等人，2005)表明了该患者群体的潜在益处。

在S206研究中，SI-B001与紫杉醇组合用于对一线化疗和抗PD-1/L1疗法耐药的2/3线HNSCC患者。初步报告显示，在23名入选患者中，87％为男性，中位年龄为56岁(范围为36-75岁)。所有患者都接受过化疗+免疫治疗的一线治疗。在这23名患者中，9名符合疗效评估条件(至少有1名基线后肿瘤评估)，其中2名仍在接受治疗。总体响应率(ORR)为55.6％(95％可信区间为21.2至86.3)，疾病控制率(DCR)为88.9％(95％可信区间为51.8至99.7)。图7b显示了瀑布图中的肿瘤响应。与西妥昔单抗组合化疗的历史数据相比(Issa等人，2021)，SI-B001+紫杉醇治疗的响应率更好，看似将导致该患者群体获得更多临床益处。

在S207研究中，SI-B001与伊立替康组合用于对一线基于铂的化疗和抗PD-1/L1疗法耐药的二线ESCC患者。初步报告显示，在21名入选患者中，90％为男性，其中位年龄为58岁(范围为48-70岁)。在21名患者中，15名符合疗效评估条件(至少有1名基线后肿瘤评估)，其中6名仍在接受治疗。总体响应率(ORR)为33.3％(95％可信区间为11.8至61.6)，疾病控制率(DCR)为80.0％(95％可信区间为51.9至95.7)。瀑布图显示了肿瘤响应(图7c)。根据初步数据，在经过预治疗的ESCC患者中，SI-B001+伊立替康的疗效可能优于伊立替康单独用药或组合其他化疗药物的回顾性数据(Burkart等人，2007)。

总之，SI-B001与化疗组合在所有三项研究中都具有良好的耐受性。未观察到与治疗相关的死亡。因此，疗效和安全性数据支持SI-B001在这些适应症中的进一步开发。

参考文献：

Robichaux JP,Le X,Vijayan RSK等人.基于结构的分类预测EGFR突变非小细胞肺癌的药物反应(Structure-based classification predicts drug response in EGFR-mutant NSCLC).Nature.2021年9月；597(7878):732-737。

Wu L,Ke L,Zhang Z,Yu J,Meng X.EGFR TKI的发展和管理第三代EGFR TKI奥希替尼耐药性的选择：传统方法和免疫检查点抑制剂(Development of EGFR TKIs andOptions to Manage Resistance of Third-Generation EGFR TKIOsimertinib:Conventional Ways and Immune Checkpoint Inhibitors).Front Oncol.2020年12月18日；10:602762。

Rebuzzi SE,Alfieri R,La Monica S,Minari R,Petronini PG,Tiseo M.EGFR-TKI和化疗组合治疗晚期EGFR突变型NSCLC：文献回顾和未来展望(Combination of EGFR-TKIs and chemotherapy in advanced EGFR mutated NSCLC:Review of the literatureand future perspectives).Crit Rev Oncol Hematol.2020年2月；146:102820。

Demidenko,E.和Miller,T.W.(2019).基于药物独立性Bliss定义的协同作用统计测定(Statistical determination of synergy based on Bliss definition of drugsindependence).PLoS One,14(11),e0224137。

Chong CR,Janne PA.寻求克服癌症对EGFR靶向疗法的耐药性(The quest toovercome resistance to EGFR-targeted therapies in cancer).Nat Med 2013；19:1389-400。

Lim SM,Syn NL,Cho BC等人.非小细胞肺癌对EGFR靶向疗法的获得性耐药：机制和治疗策略(Acquired resistance to EGFR targeted therapy in non-small celllung cancer:Mechanisms and therapeutic strategies).Cancer Treat Rev 2018；65:1-10。

Sullivan,I和Planchard,D.(2017)下一代EGFR酪氨酸激酶抑制剂用于治疗一线以外的EGFR突变型肺癌(Next-generation EGFR tyrosine kinase inhibitors fortreating EGFR-mutant lung cancer beyond first line).Front.Med.3:76。

Schuette,W.,Nagel,S.,Blankenburg,T.等人.(2005).多西他赛每周一次与每三周一次二线化疗治疗晚期非小细胞肺癌的III期研究(Phase III study of second-linechemotherapy for advanced non-small-cell lung cancer with weekly comparedwith 3-weekly docetaxel).Journal of Clinical Oncology,23(33),8389–8395。

Issa,M.,Klamer,B.,Karivedu,V.等人.(2021).使用西妥昔单抗组合每周化疗改善免疫检查点抑制剂治疗进展后复发转移性头颈鳞状细胞癌患者的无进展生存期(Use ofcetuximab added to weekly chemotherapy to improve progression-free survivalin patients with recurrent metastatic head and neck squamous cell carcinomaafter progression on immune checkpoint inhibitors).Journal of ClinicalOncology>期列表>第39卷,第15期增刊。

Burkart,C.,Bokemeyer,C.,Klump,B.等人.(2007).每周伊立替康治疗顺铂难治性食管癌的II期试验(A phase II trial of weekly irinotecan in cisplatin-refractory esophageal cancer).Anticancer research,27(4C),2845–2848。

表格

表1.人癌症的示例性疗法，包括但不限于实体瘤、非小细胞肺癌、HNSCC和ESCC。

人癌症的示例性指征：

²⁰¹局部晚期或转移性EGFR野生型ALK野生型NSCLC患者，其患有疾病进展或对含抗PD-1/L1抗体的一线疗法或含抗PD-1/L1的后线(post-line)疗法不耐受；

²⁰⁶复发性和转移性HNSCC(非鼻咽)患者，其患有疾病进展或对接受/未接受基于铂的化疗的抗PD-1/L1单克隆抗体(既往接受过至多2种全身性疗法)不耐受；以及

²⁰⁷复发性和转移性ESCC患者，其患有疾病进展或对接受/未接受化疗的抗PD-1/L1单克隆抗体不耐受。

表2.实验设计(实施例2)

注：施用体积为每只小鼠10ml/kg。每周评估两次肿瘤体积。

表3.第31天的实验结果(实施例2)

表4.实验设计(实施例3)：

注：施用体积为每只小鼠10ml/kg。每周评估两次肿瘤体积。

表5.第25天的实验结果(实施例3)

表6.实验设计(实施例4)

注：使用体积为每只小鼠10ml/kg。西妥昔单抗剂量“10.5-6.5×3”表示在第0天为10.5mg/kg，随后三个剂量每周6.5mg/kg；Pac是指紫杉醇；以及

Car是指卡铂；每周评估两次肿瘤体积。

表7.在第17天使用t检验比较肿瘤体积(实施例4)

表8.实验设计(实施例5)

组	小鼠数量	处理	剂量(mg/kg/周)	施用	频率
						1	5	溶媒	0	静脉注射	QW
2	5	Cis/Pem	7.72+51.48	静脉注射	QW
						3	5	SI-B001	9	静脉注射	QW
4	5	SI-B001	16	静脉注射	QW
						5	5	SI-B001	28	静脉注射	QW
6	5	SI-B001+Cis+Pem	9+(3.86+25.74)	静脉注射	QW
						7	5	SI-B001+Cis+Pem	16+(3.86+25.74)	静脉注射	QW
8	5	SI-B001+Cis+Pem	28+(3.86+25.74)	静脉注射	QW

注：施用体积为每只小鼠10ml/kg。Pem是指培美曲塞；Cis是指顺铂；每周评估两次肿瘤体积。

表9.第24天的实验结果(实施例5)

表10.西妥昔单抗、SI-B001与奥希替尼组合在HCC827异种移植小鼠模型中的Bliss独立性评分(实施例6)

表11.西妥昔单抗、SI-B001与化疗组合在HCC827异种移植小鼠模型中的Bliss独立性评分(实施例7)

疗法1	疗法2	Bliss评分	P值
				西妥昔单抗	化疗	0.0002	0.053
SI-B001 9mg/kg	化疗	0.026	<0.001
				SI-B001 16mg/kg	化疗	0.052	<0.001
SI-B001 28mg/kg	化疗	-0.008	不适用

序列表

>序列ID号1：SI-B001，具有CDR的SI-1X6.4双特异性抗体重量VH氨基酸序列。

QVQLKQSGPGLVQPSQSLSITCTVSGFSLTNYGVHWVRQSPGKGLEWLGVIWSGGNTDYNTPFTSRLSINKDNSKSQVFFKMNSLQSNDTAIYYCARALTYYDYEFAYWGQGTLVTVSS

>序列ID号2：SI-B001，具有CDR的SI-1x6.4双特异性重链scFv结构域氨基酸序列。

QVQLQESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQAPGKGLEWVANINRDGSASYYVDSVKGRFTISRDDAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDRGVGYFDLWGRGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNFVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSDRPSGVSDRFSGSKSGNTASLIISGLQADDEADYYCSSYGSSSTHVIFGGGTKVTVL

>序列ID号3：SI-B001，SI-1X6.4双特异性抗体重链全长氨基酸序列。

QVQLKQSGPGLVQPSQSLSITCTVSGFSLTNYGVHWVRQSPGKGLEWLGVIWSGGNTDYNTPFTSRLSINKDNSKSQVFFKMNSLQSNDTAIYYCARALTYYDYEFAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSQVQLQESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQAPGKGLEWVANINRDGSASYYVDSVKGRFTISRDDAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDRGVGYFDLWGRGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNFVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSDRPSGVSDRFSGSKSGNTASLIISGLQADDEADYYCSSYGSSSTHVIFGGGTKVTVL

>序列ID号4：SI-B001，具有CDR的SI-1x6.4双特异性抗体轻链VL氨基酸序列。DILLTQSPVILSVSPGERVSFSCRASQSIGTNIHWYQQRTNGSPRLLIKYASESISGIPSRFSGS GSGTDFTLSINSVESEDIADYYCQQNNNWPTTFGAGTKLELK

>序列ID号5：SI-B001，SI-1x6.4双特异性抗体轻链全长氨基酸序列。

DILLTQSPVILSVSPGERVSFSCRASQSIGTNIHWYQQRTNGSPRLLIKYASESISGIPSRFSGSGSGTDFTLSINSVESEDIADYYCQQNNNWPTTFGAGTKLELKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC 。

Claims

1.一种用于治疗受试者癌症的方法，其包含向所述受试者施用双特异性抗体和治疗剂，所述双特异性抗体对EGFR和HER3具有结合特异性，其中所述治疗剂包含酪氨酸激酶抑制剂(TKI)、烷化剂、抗代谢物、抗微管剂、细胞毒性抗生素、拓扑异构酶抑制剂、化疗保护剂或其组合。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述双特异性抗体包含SEQ ID NO：1的3个互补决定区(CDR)、SEQ ID NO：2的3个CDR或SEQ ID NO：4的3个CDR。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述双特异性抗体包含：重链可变区(VH)，其氨基酸序列与SEQ ID NO：1具有至少98％序列同一性；重链scFv结构域，其氨基酸序列与SEQ IDNO：2具有至少98％序列同一性；以及轻链可变区(VL)，其氨基酸序列与SEQ ID NO：4具有至少98％序列同一性。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述双特异性抗体包含重链和轻链，其中所述重链包含与SEQ ID NO：3具有至少98％序列同一性的氨基酸序列，并且所述轻链包含与SEQ IDNO：5具有至少98％序列同一性的氨基酸序列。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述治疗剂包含奥希替尼、紫杉醇、多西他赛、伊立替康、卡铂、培美曲塞、顺铂或其组合。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述双特异性抗体和所述治疗剂作为一个治疗期同时或依次施用。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述双特异性抗体和所述治疗剂在交替治疗期内分别施用于所述受试者。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述双特异性抗体在第一治疗期内施用，所述治疗剂在第二治疗期内施用，其中所述抗体每周施用一次(Q1W)、每两周施用一次(Q2W)、每三周施用一次(Q3W)、或每三周的一周施用一次持续两周(D1D8，Q3W)，并且其中所述抗体以固定剂量、单位为mg/kg的剂量或单位为mg/m²的剂量施用。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述第一治疗期的持续时间为约7天至约728天。

10.根据权利要求8所述的方法，其中所述第二治疗期的持续时间为约1天至约728天。

11.根据权利要求8所述的方法，其中所述第一治疗期与所述第二治疗期之间的间隔为约7至约21天。

12.根据权利要求1所述的方法，其中所述双特异性抗体以至少约0.3mg/kg、约1.2mg/kg、约3.0mg/kg、约6.0mg/kg、约9.0mg/kg、约12.0mg/kg、约14.0mg/kg、约16.0mg/kg、约21.0mg/kg或约28.0mg/kg的剂量施用。

13.根据权利要求1所述的方法，其中所述治疗剂以约6.0mg/Kg至约28.0mg/Kg的剂量施用。

14.根据权利要求1所述的方法，其中所述酪氨酸激酶抑制剂(TKI)包含厄洛替尼、吉非替尼、埃克替尼、AZD3759、Sapatinib、阿法替尼、达克替尼、Deratinib、波齐替尼、Tarlox-TKI、奥希替尼、Nazartinib、奥美替尼、Rociletinib、Naquotinib、Lazertinib、EAI045、CLN081、AZ5104、莫博赛替尼、其衍生物或其组合。

15.根据权利要求1所述的方法，其中所述烷化剂包含二甲磺酸丁酯、环磷酰胺、替莫唑胺、卡铂、顺铂或其组合。

16.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗代谢物包含6-巯基嘌呤、氟达拉滨、5-氟尿嘧啶、吉西他滨、阿糖胞苷、培美曲塞、甲氨蝶呤、其衍生物或其组合。

17.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗微管剂包含多西他赛、艾立布林、伊沙匹隆、紫杉醇、长春碱、其衍生物或其组合。

18.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞毒性抗生素包含放线菌素、博来霉素、柔红霉素、多柔比星、其衍生物或其组合。

19.根据权利要求1所述的方法，其中所述拓扑异构酶抑制剂包含依托泊苷、伊立替康、拓扑替康、其衍生物或其组合。

20.根据权利要求1所述的方法，其中所述化学保护剂包含甲酰四氢叶酸或其衍生物。

21.根据权利要求1所述的方法，其中所述治疗剂包含奥希替尼，并且其中奥希替尼以至少约40mg/kg、约80mg/kg、约120mg/kg或约160mg/kg的剂量施用。

22.根据权利要求1所述的方法，其中所述治疗剂包含卡铂，并且其中卡铂以至少约200mg/m²、约250mg/m²、约300mg/m²、约360mg/m²、约400mg/m²、约AUC 5mg/ml/分钟、约AUC6mg/ml/分钟或约7mg/ml/分钟的剂量施用。

23.根据权利要求1所述的方法，其中所述治疗剂包含顺铂，并且其中顺铂以至少约15mg/m²、约20mg/m²、约30mg/m²、约50mg/m²、约75mg/m²、约100mg/m²或约120mg/m²的剂量施用。

24.根据权利要求1所述的方法，其中所述治疗剂包含培美曲塞，并且其中培美曲塞以至少约250mg/m²、约500mg/m²或约750mg/m²的剂量施用。

25.根据权利要求1所述的方法，其中所述治疗剂包含紫杉醇，并且其中紫杉醇以至少约40mg/m²、约80mg/m²、约135mg/m²或约175mg/m²的剂量施用。

26.根据权利要求1所述的方法，其中所述治疗剂包含多西他赛，并且其中多西他赛以至少约35mg/m² D1D8Q3W的剂量施用。

27.根据权利要求1所述的方法，其中所述双特异性抗体和所述治疗剂同时且依次施用。

28.根据权利要求1所述的方法，其中所述双特异性抗体在与所述治疗剂在分开的时间施用。

29.根据权利要求1所述的方法，其中所述癌症包含EGFR表达检测呈阳性的实体瘤，并且选自肺腺癌、头/颈鳞状细胞癌、直肠癌、结肠癌、鳞状细胞肺癌、甲状腺癌、膀胱癌、黑色素瘤、宫颈癌、前列腺癌、乳腺癌、子宫/子宫内膜癌、胰腺癌、卵巢癌和乳头状肾癌。

30.一种治疗组合物，其包含对EGFR和HER3具有结合特异性的双特异性抗体与治疗剂的组合，其中所述治疗剂包含酪氨酸激酶抑制剂(TKI)、烷化剂、抗代谢剂、抗微管剂、细胞毒性抗生素、拓扑异构酶抑制剂、化疗保护剂或其组合。

31.根据权利要求30所述的治疗组合物，其中所述双特异性抗体包含SEQ ID NO：1的3个互补决定区(CDR)、SEQ ID NO：2的3个CDR或SEQ ID NO：4的3个CDR，并且其中所述治疗剂包含奥希替尼、卡铂、顺铂、培美曲塞、紫杉醇、其衍生物或其组合。

32.根据权利要求30所述的治疗组合物，其中所述双特异性抗体和所述治疗剂的形式为将同时、依次或共同施用的药物制剂。

33.一种试剂盒，其包含第一容器、第二容器和包装插页，

其中所述第一容器包含至少一个剂量的第一治疗组合物，所述第一治疗组合物包含对EGFR和HER3具有结合特异性的双特异性抗体，所述第二容器包含至少一个剂量的第二治疗组合物，所述第二治疗组合物包含治疗剂，并且所述包装插页包含使用所述第一治疗组合物和所述第二治疗组合物治疗癌症受试者的说明书，并且其中所述治疗剂包含酪氨酸激酶抑制剂(TKI)、烷化剂、抗代谢物、抗微管剂、细胞毒性抗生素、拓扑异构酶抑制剂、化学保护剂或其组合。

34.根据权利要求33所述的试剂盒，其中所述说明书陈述所述第一治疗性组合物和所述第二治疗性组合物旨在用于治疗患有EGFR表达检测呈阳性的癌症的受试者。