CN118203070B - 制备酒糟生物饲料的发酵方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了制备酒糟生物饲料的发酵方法,属于发酵技术领域,包括以下步骤:将酿酒酵母粉、产朊假丝酵母粉、枯草芽孢杆菌粉、黑曲霉粉和植物乳杆菌粉复合,得到复合微生物菌剂,将酒糟、麸皮、豆粕和所述复合微生物菌剂搅拌混合,得到干料,向干料中加入水,发酵2d,再向其中搅拌加入防腐助剂,恒温搅拌后干燥,得到酒糟生物饲料。经本发明发酵方法制备的酒糟生物饲料中的粗蛋白含量显著提升,粗纤维含量显著降低,有助于改善饲料口感,提高营养物质的生物利用率,降低酒糟中抗营养因子,使蛋白质饲料更安全、更易被动物吸收利用。
Description
技术领域
本发明属于发酵技术领域,具体涉及制备酒糟生物饲料的发酵方法。
背景技术
酒糟中的白酒糟,作为酿造白酒过程中的副产物,源自高粱、大麦、小麦等谷物,是糟渣类资源的代表。然而,当前对待新鲜白酒糟的处理方式多为晾晒堆置,处理方法较为粗放且效率低,这不仅加剧了环境污染,还导致了资源的极大浪费。因此,寻求高效且环保的处理方法并充分利用酒糟资源显得尤为重要。
新鲜白酒糟内含的营养元素及微生物种类繁多,若未得到及时处理或处理方式不妥,极易发生腐败,进而造成环境的二次污染。同时,它富含的蛋白质、维生素、矿物质及氨基酸等营养成分,以及有机酸、酚酸、黄酮类和生物碱等生物活性物质,显示了其在饲料开发上的巨大潜力。将这一资源丰富且营养全面的副产物转化为动物饲料,不仅能有效缓解当前资源紧张的状况,还能从源头上减少环境污染。
但是,直接将新鲜白酒糟用作饲料存在一些技术问题:新鲜白酒糟的高纤维含量、高湿度以及易腐坏的特性可能引发动物的生殖道疾病,进而影响其繁殖能力;同时,新鲜白酒糟中的乙酸、乙醇等有害成分在长期喂养中可能导致动物中毒和腹泻。这些技术问题严重限制新鲜白酒糟在饲料中的应用,导致酒糟资源利用率低下。
因此,为了克服这些技术问题,对新鲜白酒糟进行有效处理显得尤为重要,本发明旨在提供一种制备酒糟生物饲料的发酵方法。
发明内容
本发明提供了制备酒糟生物饲料的发酵方法,旨在解决将新鲜白酒糟用作饲料存在的高纤维含量、高湿度、易腐坏和乙酸含量高的技术问题之一。
本发明的目的可以通过以下技术方案实现:
制备酒糟生物饲料的发酵方法,包括以下步骤:
将酿酒酵母粉、产朊假丝酵母粉、枯草芽孢杆菌粉、黑曲霉粉和植物乳杆菌粉复合,得到复合微生物菌剂,将酒糟、麸皮、豆粕和所述复合微生物菌剂搅拌混合,得到干料,向干料中加入水,调控体系湿度为50%-60%,再在30-37℃下发酵2d,得到发酵体系,向发酵体系中搅拌加入防腐助剂,再置于30-37℃下恒温搅拌1-2h,得到发酵产物,将发酵产物干燥至含水量为10%-15%,干燥处理完毕后,得到酒糟生物饲料;
所述防腐助剂由以下步骤制备:
向体积分数为1%的盐酸溶液中加入改性壳聚糖,搅拌混合10-20min,再利用氢氧化钠调节pH至5.0-5.2,再向其中搅拌加入蒙脱石粉,室温条件下搅拌12h,搅拌完毕后离心,将沉淀干燥至恒重,得到防腐助剂。
进一步地,所述酿酒酵母粉、产朊假丝酵母粉、枯草芽孢杆菌粉、黑曲霉粉和植物乳杆菌粉按照质量比2:2:1:1:1复合。
进一步地,所述酿酒酵母粉、产朊假丝酵母粉、枯草芽孢杆菌粉、黑曲霉粉和植物乳杆菌粉的有效活菌数均≥1.0×108个/g。
进一步地,所述干料按重量份计,包括80份酒糟、20-30份麸皮、15-20份豆粕和0.5-1份复合微生物菌剂。
进一步地,所述防腐助剂的用量为发酵体系质量的2%-5%。
进一步地,所述体积分数为1%的盐酸溶液、改性壳聚糖和蒙脱石粉的用量比为1L:15-18g:100-150g。
进一步地,所述改性壳聚糖由以下步骤制备:
步骤A1、向无水吡啶中搅拌加入生育酚和琥珀酸酐,搅拌48h,得到产物,将产物滴入pH=1-2的盐酸溶液中,盐酸溶液中析出沉淀,形成分层体系,将分层体系置于0℃冷藏24h后再过滤,得到固体组分,固体组分用去离子水洗涤三次,再用乙醇重结晶,过滤,结晶经真空干燥后,得到羧基化生育酚;其中,羧基化生育酚制备过程如下:
步骤A2、将壳聚糖浸泡在异丙醇中,待壳聚糖溶胀,再向其中加入氢氧化钠,在55-60℃下碱化糊化1-2h,再向其中加入氯乙酸,在65-70℃下搅拌反应2-3h,反应完毕后,冷却至室温,再向其中加入冰醋酸调节pH至中性,再经过滤、无水乙醇洗涤和干燥后,得到羧甲基壳聚糖;
步骤A3、向无水二甲基亚砜中搅拌加入羧基化生育酚,搅拌10-20min,再向其中加入N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐,体系降温至0℃,恒温搅拌2-3h,再向其中搅拌加入羧甲基壳聚糖,体系升温至60-65℃,搅拌反应4-5h,冷却至室温,再经过滤、干燥后,得到改性壳聚糖。
进一步地,步骤A1中所述生育酚为α-生育酚。
进一步地,步骤A1中所述无水吡啶、生育酚和琥珀酸酐的用量比为100mL:0.01mol:0.05-0.06mol。
进一步地,步骤A2中所述壳聚糖的脱乙酰度>85%。
进一步地,步骤A2中所述异丙醇、壳聚糖、氢氧化钠和氯乙酸的用量比为200mL:15-18g:22-25g:40-50g。
进一步地,步骤A3所述无水二甲基亚砜、羧基化生育酚、N-羟基琥珀酰亚胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和羧甲基壳聚糖的用量比为200mL:0.01-0.012mol:0.15-0.20mol:0.18-0.20mol:1.8-2.2g。
本发明的有益效果:
本发明提供了一种制备酒糟生物饲料的发酵方法,经本发明发酵方法制备的酒糟生物饲料中的粗蛋白含量显著提升,粗纤维含量显著降低,有助于改善饲料口感,提高营养物质的生物利用率,降低酒糟中抗营养因子,使蛋白质饲料更安全、更易被动物吸收利用。
同时,本发明的发酵方法中利用复合微生物菌剂引导酒糟等的发酵过程,巧妙解决了直接将酒糟用作饲料存在的易腐烂的问题,其中,复合微生物菌剂中包括有益生菌(产朊假丝酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌),益生菌能抑制动物肠道有害菌的繁殖,维持肠道生态平衡,从而促进肠道的发育。
然后,本发明的发酵方法中添加有自制的防腐助剂,防腐助剂的添加主要用于防止发酵后酒糟生物饲料的进一步腐败,本发明制备的防腐助剂为改性壳聚糖-蒙脱石粉复合材料,添加本发明制备的防腐助剂具有以下优点:
(1)防腐:壳聚糖本身具有优异的防腐性能,可以降低饲料的腐坏速率,而蒙脱石粉均具有良好的吸附脱霉作用,能有效地去除饲料中的霉菌毒素,利用壳聚糖对蒙脱石粉进行改性,能够在实现防腐的基础上进一步降低了腐坏饲料对动物的毒性作用;同时,壳聚糖和蒙脱石粉都是天然的、成本相对较低的添加剂,通过改性处理,可以结合两者的优点,以较低的成本实现饲料质量的提升,从而提高养殖效益;最后,由于壳聚糖不易被动物消化酶分解,动物采食后能直达肠道并最后排出体外,利用壳聚糖对蒙脱石粉进行改性,在蒙脱石粉吸附霉菌毒素后,可以实现霉菌毒素高效地从动物体内排除,减低霉菌毒素对动物体造成感染的概率,从而提高最终制备的酒糟生物饲料的安全性。
(2)缓冲:蒙脱石粉的加入能够降低酒糟中的乙酸含量,同时缓冲发酵中产生的酸度,本发明生产的酒糟饲料主要用作反刍动物(牛羊等)的饲料,反刍动物的瘤胃呈中性和弱酸性,本发明利用蒙脱石粉缓冲饲料中的酸度,降低饲料导致动物中毒和腹泻的病症的发生概率,同时,蒙脱石粉本身能够通过吸附肠道内的水分和与肠黏液结合,具有一定的止泻作用。
(3)平衡:蒙脱石粉中含有部分钙,能够在一定程度上平衡最终制备的酒糟生物饲料的钙磷比,同时,蒙脱石粉还含有丰富的微量元素,能够综合提高饲料的营养价值。
(4)降湿:本发明将羧基化生育酚与羧甲基壳聚糖通过酰胺基链接,利用生育酚的疏水结构,降低壳聚糖的吸湿性,从而有助于降低生产的酒糟生物饲料的吸湿性,有助于降低酒糟生物饲料长期堆放时湿度的提升速率,更进一步地,低湿度状态可以降低饲料发生腐败的程度;同时,生育酚具有一定的抗氧化性,能够降低酒糟生物饲料在潮湿条件下发生霉变的概率。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明提供了一种制备酒糟生物饲料的发酵方法,其中,酒糟购自成都市西岭源酒业有限公司的泸州酒糟,所购酒糟是由大米、小麦、高粱酿酒后剩余的残渣,含有丰富的粗蛋白(20.83%-24.15%)和粗脂肪(3.21%-4.58%),同时,含有较高的粗纤维(19.05%-22.41%)和粗灰分(9.11%-10.78%)。此外,由于酒曲发酵过程中微生物大量繁殖和积累,酒糟中氨基酸的构成及种类比较均衡,同时,矿物质含量也比较丰富。
本发明取用上述酒糟进行生物饲料发酵方法的开发与研究,其中,取样的酒糟的粗蛋白的平均含量为22.10%;粗脂肪的平均含量为3.55%;粗纤维的平均含量为20.72%;粗灰分的平均含量为9.43%。
实施例1
制备改性壳聚糖:
步骤A1、向无水吡啶中搅拌加入生育酚(α-生育酚)和琥珀酸酐,搅拌48h,得到产物,将产物滴入pH=1的盐酸溶液中,盐酸溶液中析出沉淀,形成分层体系,将分层体系置于0℃冷藏24h后再过滤,得到固体组分,固体组分用去离子水洗涤三次,再用乙醇重结晶,过滤,结晶经真空干燥后,得到羧基化生育酚;其中,无水吡啶、生育酚和琥珀酸酐的用量比为100mL:0.01mol:0.05mol;
步骤A2、将壳聚糖(脱乙酰度为90%)浸泡在异丙醇中,待壳聚糖溶胀,再向其中加入氢氧化钠,在55℃下碱化糊化1h,再向其中加入氯乙酸,在65℃下搅拌反应2h,反应完毕后,冷却至室温,再向其中加入冰醋酸调节pH至中性,再经过滤、无水乙醇洗涤和干燥后,得到羧甲基壳聚糖;其中,异丙醇、壳聚糖、氢氧化钠和氯乙酸的用量比为200mL:15g:22g:40g;
步骤A3、向无水二甲基亚砜中搅拌加入羧基化生育酚,搅拌10min,再向其中加入N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC),体系降温至0℃,恒温搅拌2h,再向其中搅拌加入羧甲基壳聚糖,体系升温至60℃,搅拌反应4h,冷却至室温,再经过滤、干燥后,得到改性壳聚糖;其中,无水二甲基亚砜、羧基化生育酚、N-羟基琥珀酰亚胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和羧甲基壳聚糖的用量比为200mL:0.01mol:0.15mol:0.18mol:1.8g。
实施例2
制备改性壳聚糖:
步骤A1、向无水吡啶中搅拌加入生育酚(α-生育酚)和琥珀酸酐,搅拌48h,得到产物,将产物滴入pH=1.5的盐酸溶液中,盐酸溶液中析出沉淀,形成分层体系,将分层体系置于0℃冷藏24h后再过滤,得到固体组分,固体组分用去离子水洗涤三次,再用乙醇重结晶,过滤,结晶经真空干燥后,得到羧基化生育酚;其中,无水吡啶、生育酚和琥珀酸酐的用量比为100mL:0.01mol:0.055mol;
步骤A2、将壳聚糖(脱乙酰度为85%)浸泡在异丙醇中,待壳聚糖溶胀,再向其中加入氢氧化钠,在60℃下碱化糊化2h,再向其中加入氯乙酸,在65℃下搅拌反应3h,反应完毕后,冷却至室温,再向其中加入冰醋酸调节pH至中性,再经过滤、无水乙醇洗涤和干燥后,得到羧甲基壳聚糖;其中,异丙醇、壳聚糖、氢氧化钠和氯乙酸的用量比为200mL:17g:24g:45g;
步骤A3、向无水二甲基亚砜中搅拌加入羧基化生育酚,搅拌20min,再向其中加入N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC),体系降温至0℃,恒温搅拌3h,再向其中搅拌加入羧甲基壳聚糖,体系升温至65℃,搅拌反应5h,冷却至室温,再经过滤、干燥后,得到改性壳聚糖;其中,无水二甲基亚砜、羧基化生育酚、N-羟基琥珀酰亚胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和羧甲基壳聚糖的用量比为200mL:0.011mol:0.18mol:0.20mol:2.0g。
实施例3
制备改性壳聚糖:
步骤A1、向无水吡啶中搅拌加入生育酚(α-生育酚)和琥珀酸酐,搅拌48h,得到产物,将产物滴入pH=2的盐酸溶液中,盐酸溶液中析出沉淀,形成分层体系,将分层体系置于0℃冷藏24h后再过滤,得到固体组分,固体组分用去离子水洗涤三次,再用乙醇重结晶,过滤,结晶经真空干燥后,得到羧基化生育酚;其中,无水吡啶、生育酚和琥珀酸酐的用量比为100mL:0.01mol:0.06mol;
步骤A2、将壳聚糖(脱乙酰度为85%)浸泡在异丙醇中,待壳聚糖溶胀,再向其中加入氢氧化钠,在60℃下碱化糊化2h,再向其中加入氯乙酸,在70℃下搅拌反应3h,反应完毕后,冷却至室温,再向其中加入冰醋酸调节pH至中性,再经过滤、无水乙醇洗涤和干燥后,得到羧甲基壳聚糖;其中,异丙醇、壳聚糖、氢氧化钠和氯乙酸的用量比为200mL:18g:25g:50g;
步骤A3、向无水二甲基亚砜中搅拌加入羧基化生育酚,搅拌20min,再向其中加入N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC),体系降温至0℃,恒温搅拌3h,再向其中搅拌加入羧甲基壳聚糖,体系升温至65℃,搅拌反应5h,冷却至室温,再经过滤、干燥后,得到改性壳聚糖;其中,无水二甲基亚砜、羧基化生育酚、N-羟基琥珀酰亚胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和羧甲基壳聚糖的用量比为200mL:0.012mol:0.20mol:0.20mol:2.2g。
实施例4
制备防腐助剂:
向体积分数为1%的盐酸溶液中加入实施例1制备的改性壳聚糖,搅拌混合10min,再利用氢氧化钠调节pH至5.0,再向其中搅拌加入蒙脱石粉(购自四川省三台县大予膨润土矿业有限公司),室温条件下搅拌12h,搅拌完毕后离心,将沉淀干燥至恒重,得到防腐助剂,其中,体积分数为1%的盐酸溶液、实施例1制备的改性壳聚糖和蒙脱石粉的用量比为1L:15g:100g。
实施例5
制备防腐助剂:
向体积分数为1%的盐酸溶液中加入实施例2制备的改性壳聚糖,搅拌混合20min,再利用氢氧化钠调节pH至5.2,再向其中搅拌加入蒙脱石粉(购自四川省三台县大予膨润土矿业有限公司),室温条件下搅拌12h,搅拌完毕后离心,将沉淀干燥至恒重,得到防腐助剂,其中,体积分数为1%的盐酸溶液、实施例2制备的改性壳聚糖和蒙脱石粉的用量比为1L:18g:100g。
实施例6
制备防腐助剂:
向体积分数为1%的盐酸溶液中加入实施例3制备的改性壳聚糖,搅拌混合20min,再利用氢氧化钠调节pH至5.2,再向其中搅拌加入蒙脱石粉(购自四川省三台县大予膨润土矿业有限公司),室温条件下搅拌12h,搅拌完毕后离心,将沉淀干燥至恒重,得到防腐助剂,其中,体积分数为1%的盐酸溶液、实施例3制备的改性壳聚糖和蒙脱石粉的用量比为1L:18g:150g。
实施例7
制备酒糟生物饲料的发酵方法,包括以下步骤:
S1、将酿酒酵母粉、产朊假丝酵母粉、枯草芽孢杆菌粉、黑曲霉粉和植物乳杆菌粉按照质量比2:2:1:1:1复合,复合后得到复合微生物菌剂;其中,酿酒酵母粉、产朊假丝酵母粉、枯草芽孢杆菌粉、黑曲霉粉和植物乳杆菌粉的有效活菌数均为1.0×108个/g;
S2、按重量份计,将80份酒糟、20份麸皮、15份豆粕和0.5份上述制备的复合微生物菌剂搅拌混合,得到干料,向干料中加入水,调控体系湿度为50%,再在30℃条件下发酵2d,得到发酵体系,向发酵体系中搅拌加入实施例4制备的防腐助剂,其中,实施例4制备的防腐助剂的用量为发酵体系质量的2%,再置于30℃条件下恒温搅拌1h,得到发酵产物,将发酵产物进行干燥处理,将发酵产物的含水量控制为15%,干燥处理能同时降低发酵后发酵产物中乙醇含量,干燥处理完毕后,得到酒糟生物饲料。
实施例8
制备酒糟生物饲料的发酵方法,包括以下步骤:
S1、将酿酒酵母粉、产朊假丝酵母粉、枯草芽孢杆菌粉、黑曲霉粉和植物乳杆菌粉按照质量比2:2:1:1:1复合,复合后得到复合微生物菌剂;其中,酿酒酵母粉、产朊假丝酵母粉、枯草芽孢杆菌粉、黑曲霉粉和植物乳杆菌粉的有效活菌数均为2.0×108个/g;
S2、按重量份计,将80份酒糟、25份麸皮、20份豆粕和1份上述制备的复合微生物菌剂搅拌混合,得到干料,向干料中加入水,调控体系湿度为50%,再在35℃条件下发酵2d,得到发酵体系,向发酵体系中搅拌加入实施例5制备的防腐助剂,其中,实施例5制备的防腐助剂的用量为发酵体系质量的5%,再置于35℃条件下恒温搅拌2h,得到发酵产物,将发酵产物进行干燥处理,将发酵产物的含水量控制为12%,干燥处理能同时降低发酵后发酵产物中乙醇含量,干燥处理完毕后,得到酒糟生物饲料。
实施例9
制备酒糟生物饲料的发酵方法,包括以下步骤:
S1、将酿酒酵母粉、产朊假丝酵母粉、枯草芽孢杆菌粉、黑曲霉粉和植物乳杆菌粉按照质量比2:2:1:1:1复合,复合后得到复合微生物菌剂;其中,酿酒酵母粉、产朊假丝酵母粉、枯草芽孢杆菌粉、黑曲霉粉和植物乳杆菌粉的有效活菌数均为1.0×108个/g;
S2、按重量份计,将80份酒糟、30份麸皮、20份豆粕和1份上述制备的复合微生物菌剂搅拌混合,得到干料,向干料中加入水,调控体系湿度为60%,再在37℃条件下发酵2d,得到发酵体系,向发酵体系中搅拌加入实施例6制备的防腐助剂,其中,实施例6制备的防腐助剂的用量为发酵体系质量的4%,再置于37℃条件下恒温搅拌2h,得到发酵产物,将发酵产物进行干燥处理,将发酵产物的含水量控制为10%,干燥处理能同时降低发酵后发酵产物中乙醇含量,干燥处理完毕后,得到酒糟生物饲料。
对比例1
对比例1公开制备酒糟生物饲料的发酵方法,对比例1为实施例8的对照组,首先将实施例5中的原料实施例2制备的改性壳聚糖替换为实施例2中步骤A2制备的羧甲基壳聚糖,其余原料及制备过程与实施例5保持不变,得到防腐助剂D1,然后将实施例8中的实施例5制备的防腐助剂替换为防腐助剂D1,其余原料及发酵过程与实施例8保持不变,最终得到酒糟生物饲料。
对比例2
对比例2公开制备酒糟生物饲料的发酵方法,对比例2为实施例8的对照组,将实施例8中的实施例5制备的防腐助剂替换为蒙脱石粉(购自四川省三台县大予膨润土矿业有限公司),其余原料及发酵过程与实施例8保持不变,最终得到酒糟生物饲料。
对比例3
对比例3公开制备酒糟生物饲料的发酵方法,对比例3为实施例8的对照组,将实施例8中的实施例5制备的防腐助剂替换为实施例2制备的改性壳聚糖,其余原料及发酵过程与实施例8保持不变,最终得到酒糟生物饲料。
对比例4
对比例4为酒糟原料,即购自成都市西岭源酒业有限公司的泸州酒糟。
测试例1
对经实施例7-实施例9和对比例1-对比例4发酵方法制备的酒糟生物饲料进行检测,检测过程如下,检测结果如表1所示:
一、乙酸含量检测:
采用HPLC法检测实施例7-实施例9和对比例1-对比例4发酵方法制备的酒糟生物饲料中的乙酸含量(g/kg);具体地,色谱条件为:反相色谱柱、流动相为0.02mol/L磷酸二氢钾(pH=2.70)和甲醇按照体积比97、流速为1.0 mL/min、柱温25℃、检测波长214nm。
二、防霉性能检测:
将实施例7-实施例9和对比例1-对比例4发酵方法制备的酒糟生物饲料均置于温度35℃、湿度80%的恒温恒湿透气避光条件下放置,每组实施例/对比例分别放置成等量的5堆,共35堆,在第0d、0.5d,1d、2d、4d、7d、10d、15d时对每一堆的酒糟生物饲料进行感官评价检测,评价采用5分制,具体评价标准如下,统计每组实施例/对比例的评分取六堆的平均分;
4-5分:饲料色泽无变化、发酵香气、肉眼观测无霉点和霉块;
3-4分:饲料色泽略变色、发酵香气、肉眼观测有极少霉点,无霉块;
2-3分:饲料色泽略变色、微弱酸臭味,肉眼观测有少量霉点,无霉块;
1-2分:饲料色泽暗沉,较浓霉味,肉眼观测有少量霉点和少量霉块;
0-1分:饲料色泽暗沉,浓烈腐烂霉味,肉眼观测大量霉点和成片霉块。
三、营养成分检测:
将经实施例7-实施例9和对比例1-对比例4发酵方法制备的酒糟生物饲料进行烘干(105℃烘干至恒质量)后进行营养成分检测:
粗蛋白:参照GB5009.5-2016中的凯氏定氮法测定粗蛋白的含量。
粗脂肪:参照GB5009.6-2016中的索氏抽提法测定粗脂肪的含量。
粗纤维:参照GB/T6434-2006中的过滤法测定粗纤维的含量。
粗灰分:参照GB/T6438-2007中的方法测定粗灰分的含量。
表1
由表1可以看出,相对于对比例1-对比例4而言,经本发明实施例7-实施例9的发酵方法生产的酒糟生物饲料具有较低的乙酸含量、优异的防霉性能、高粗蛋白含量和低粗纤维含量的优点。
需要说明的是,在本文中,诸如术语“包括、包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含,从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素,而且还包括没有明确列出的其他要素,或者还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例,对于本领域的普通技术人员而言,可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变形,本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (8)
1.制备酒糟生物饲料的发酵方法,其特征在于,包括以下步骤:
将酿酒酵母粉、产朊假丝酵母粉、枯草芽孢杆菌粉、黑曲霉粉和植物乳杆菌粉复合,得到复合微生物菌剂,将酒糟、麸皮、豆粕和所述复合微生物菌剂搅拌混合,得到干料,向干料中加入水,调控体系湿度为50%-60%,再在30-37℃下发酵2d,得到发酵体系,向发酵体系中搅拌加入防腐助剂,再置于30-37℃下恒温搅拌1-2h,得到发酵产物,将发酵产物干燥至含水量为10%-15%,干燥处理完毕后,得到酒糟生物饲料;
所述防腐助剂由以下步骤制备:
向体积分数为1%的盐酸溶液中加入改性壳聚糖,搅拌混合10-20min,再利用氢氧化钠调节pH至5.0-5.2,再向其中搅拌加入蒙脱石粉,室温条件下搅拌12h,搅拌完毕后离心,将沉淀干燥至恒重,得到防腐助剂;
所述干料按重量份计,包括80份酒糟、20-30份麸皮、15-20份豆粕和0.5-1份复合微生物菌剂;
所述改性壳聚糖由以下步骤制备:
步骤A1、向无水吡啶中搅拌加入生育酚和琥珀酸酐,搅拌48h,得到产物,将产物滴入pH=1-2的盐酸溶液中,盐酸溶液中析出沉淀,形成分层体系,将分层体系置于0℃冷藏24h后再过滤,得到固体组分,固体组分用去离子水洗涤三次,再用乙醇重结晶,过滤,结晶经真空干燥后,得到羧基化生育酚;
步骤A2、将壳聚糖浸泡在异丙醇中,待壳聚糖溶胀,再向其中加入氢氧化钠,在55-60℃下碱化糊化1-2h,再向其中加入氯乙酸,在65-70℃下搅拌反应2-3h,反应完毕后,冷却至室温,再向其中加入冰醋酸调节pH至中性,再经过滤、无水乙醇洗涤和干燥后,得到羧甲基壳聚糖;
步骤A3、向无水二甲基亚砜中搅拌加入羧基化生育酚,搅拌10-20min,再向其中加入N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐,体系降温至0℃,恒温搅拌2-3h,再向其中搅拌加入羧甲基壳聚糖,体系升温至60-65℃,搅拌反应4-5h,冷却至室温,再经过滤、干燥后,得到改性壳聚糖。
2.根据权利要求1所述的制备酒糟生物饲料的发酵方法,其特征在于,所述酿酒酵母粉、产朊假丝酵母粉、枯草芽孢杆菌粉、黑曲霉粉和植物乳杆菌粉按照质量比2:2:1:1:1复合。
3.根据权利要求1所述的制备酒糟生物饲料的发酵方法,其特征在于,所述酿酒酵母粉、产朊假丝酵母粉、枯草芽孢杆菌粉、黑曲霉粉和植物乳杆菌粉的有效活菌数均≥1.0×108个/g。
4.根据权利要求1所述的制备酒糟生物饲料的发酵方法,其特征在于,所述防腐助剂的用量为发酵体系质量的2%-5%。
5.根据权利要求1所述的制备酒糟生物饲料的发酵方法,其特征在于,所述体积分数为1%的盐酸溶液、改性壳聚糖和蒙脱石粉的用量比为1L:15-18g:100-150g。
6.根据权利要求1所述的制备酒糟生物饲料的发酵方法,其特征在于,步骤A1中所述无水吡啶、生育酚和琥珀酸酐的用量比为100mL:0.01mol:0.05-0.06mol。
7.根据权利要求1所述的制备酒糟生物饲料的发酵方法,其特征在于,步骤A2中所述异丙醇、壳聚糖、氢氧化钠和氯乙酸的用量比为200mL:15-18g:22-25g:40-50g。
8.根据权利要求1所述的制备酒糟生物饲料的发酵方法,其特征在于,步骤A3所述无水二甲基亚砜、羧基化生育酚、N-羟基琥珀酰亚胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和羧甲基壳聚糖的用量比为200mL:0.01-0.012mol:0.15-0.20mol:0.18-0.20mol:1.8-2.2g。
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