CN118178301A

CN118178301A - 一种经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素a组合物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN118178301A
Application number: CN202410244615.2A
Authority: CN
Inventors: 于飞; 宋更申; 石红燕; 郑红兵
Original assignee: Beijing Youcare Kechuang Pharmaceutical Technology Co ltd
Current assignee: Beijing Youcare Kechuang Pharmaceutical Technology Co ltd
Priority date: 2024-03-05
Filing date: 2024-03-05
Publication date: 2024-06-14

Abstract

本发明属于天然药物的制剂领域，一种包含羟基红花黄色素A组合物的口腔黏膜给药制剂。该羟基红花黄色素A组合物包括羟基红花黄色素A(HSYA)、十二烷基麦芽糖苷(DDM)和硫醇化壳聚糖(CS‑SH/TCS)；其中三者质量比为(18～22份)：(0.2～0.3份)：(8～12份)。本发明提供的羟基红花黄色素A组合物发挥协同作用，使药物的黏膜渗透性良好，生物利用度高。

Description

一种经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素A组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于药物制剂技术领域，具体涉及一种经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素A组合物及其制备方法和应用；尤其涉及一种羟基红花黄色素A(HSYA)舌下片及其制备方法，以及所述舌下片在急性脑卒中患者中的应用。

背景技术

口腔黏膜给药系统是指制剂作用于口腔部位发挥局部治疗或通过口腔黏膜直接吸收进入体循环发挥全身治疗的一种新型给药系统，已被视为常规口服和注射给药的一种有效替代给药途径，特别适用于首过效应明显和口服生物利用度低的药物，对酸、酶敏感的蛋白质、多肽和核酸类药物给药。口腔生理环境温和，pH值近中性且酶活性较低，药物黏膜吸收无肝脏首过代谢，具有给药方便、易于去除、患者依从性高的特点。口腔黏膜的主要给药部位为舌下和颊部，其中舌下黏膜薄且非角质化，渗透性强于颊黏膜是速效药的首选给药部位。药物经口腔黏膜吸收快速，可用于急症治疗。目前国内外已有多个口腔黏膜制剂上市，包括盐酸丁丙诺啡舌下片、盐酸纳洛酮舌下片、枸橼酸芬太尼口腔贴片、复方庆大霉素膜和复方氯己定地塞米松膜等。理想的适于口腔黏膜递送的药物应具备以下理化性质：分子质量<800Da，溶解度>1mg/mL，LogP值(辛醇/水)>2.0，有效剂量<10mg/d，饱和水溶液的pH值为5～9，对黏膜无刺激性。

羟基红花黄色素A(HSYA)为黄色粉末，分子式为C₂₇H₃₂O₁₆，相对分子质量为612.5。分子结构中含有多个羟基，极性大，极易溶于水，溶解于甲醇，微溶于乙醇。脂溶性虽然差，但在25℃时LogP为2.98，表明其已经具有一定的膜通透性。溶解度高、透膜性差，在生物药剂学分类系统(biopharmaceutics classification system，BCS)中属于Ⅲ类。目前仅有注射剂型上市，用于治疗急性缺血性脑卒中患者，给药剂型和给药途径较为单一，严重制约了其临床应用。由于其水溶性强、脂溶性差的特点，胃肠道给药生物利用度极低，急需开发一种给药方便的新型给药途径。

HSYA的吸收属于被动扩散，包括经细胞途径和细胞旁路途径两种方式。增加跨膜吸收主要途径包括①采用吸收促进剂，促进经细胞途径或细胞旁路途径的被动扩散；②与亲脂性物质形成脂质复合物，提高脂溶性以促进吸收。

根据上述特点，本发明提供了一种新的剂型或新的给药方式。HSYA舌下片味道清淡，不含特殊防腐剂且对口腔黏膜几乎无刺激作用，临床给药简单，患者顺应性较高，起效迅速，适合作为治疗急性缺血性脑卒中患者经口腔黏膜给药的药物。

发明内容

本发明主要提供了一种HSYA的新的给药方式，解决了以往剂型存在的生物利用率低，或者使用不方便的缺点，建立了经口腔黏膜给药的HSYA组合物。

本发明提供的HSYA组合物，具体的为羟基红花黄色素A-十二烷基麦芽糖苷-硫醇化壳聚糖的组合物。

本发明提供的HSYA组合物，HSYA为高水溶性物质，吸收过程主要为被动转运，十二烷基麦芽糖苷是一种表面活性剂，通过作用于黏膜，增加黏膜中细胞间隙，从而提高HSYA的被动转运，且对于细胞膜的作用是可逆的。

本发明提供的HSYA组合物，HSYA为高水溶性物质，吸收过程主要为被动转运，硫醇化壳聚糖(CS-SH/TCS)是一种黏膜黏附聚合物，通过作用于黏膜，增加黏膜中细胞间隙，从而提高HSYA的被动转运，并且通过将药物包裹并吸附在吸收部位，增加药物在吸收部位的驻留时间，从而减慢在血液中的代谢，延长作用时间。

本发明提供的组合物中表面活性剂和黏膜吸附聚合物为黏膜吸收促进剂，常见的黏膜吸收促进剂及其作用机制和代表性化合物如下。

文献：吸收促进剂的作用机制及其在鼻腔给药中的研究进展(张婷，李蒙等，《中国医院药学杂志》2022年)报道了各种黏膜吸收促进剂，作用机制和代表性化合物见下表：

文献中环糊精类吸收促进剂适用于缓控释制剂，不满足口腔黏膜给药的质量要求(迅速崩解)，醇类、亚砜类、螯合剂、水杨酸类较适合液体给药途径，可能经舌下吸收，具有一定的副作用。

羟基红花黄色素A具有溶解度高、透膜性差的特点，在生物药剂学分类系统中属于BCSⅢ类。HSYA的吸收属于被动扩散，包括经细胞途径和细胞旁路途径两种方式，经口腔黏膜给药时，增加跨膜吸收主要途径为采用吸收促进剂，促进经细胞途径或细胞旁路途径的被动扩散。

因此通过添加烷基糖苷类、表面活性剂类、胆酸盐类吸收促进剂促进羟基红花黄色素A经细胞途径或细胞旁路途径的被动扩散，并通过添加黏膜黏附聚合物类吸收促进剂增加羟基红花黄色素A在黏膜中的黏附作用，从而延长药物在黏膜中的停留时间。

本公开提供一种经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素A组合物，包括药物活性成分和功能性非活性成分；

所述药物活性成分包括羟基红花黄色素A(HSYA)；

所述功能性非活性成分包括表面活性剂和/或黏膜黏附聚合物。

在一些优选地实施方案中，所述表面活性剂选自以下中的任意一种或多种：十二烷基麦芽糖苷(DDM)、脱氧甘胆酸钠(SDGC)、N-[8-(2-羟基苯甲酰基)氨基]辛酸钠(SNAC)、十二烷基硫酸钠(SDS)、聚山梨酯80(TW80)；

在一些更优选地实施方案中，所述表面活性剂为十二烷基麦芽糖苷(DDM)。

在一些优选地实施方案中，所述黏膜黏附聚合物选自以下中的任意一种或多种：硫醇化壳聚糖(CS-SH/TCS)、氨基葡聚糖(Dextran-NH₂)、聚赖氨酸(PLL)、海藻酸钠(SA，CR8133)；

在一些更优选地实施方案中，所述黏膜黏附聚合物为硫醇化壳聚糖(CS-SH/TCS)。

在一些优选地实施方案中，所述药物活性成分、表面活性剂、黏膜黏附聚合物的质量份为(18～22份)：(0.2～0.3份)：(8～12份)；

在一些更优选地实施方案中，所述药物活性成分、表面活性剂、黏膜黏附聚合物的质量份为20份：0.3份：10份。

在一些优选地实施方案中，所述的一种经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素A组合物，其中，包括羟基红花黄色素A、十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖；按质量份计，三者用量比为，羟基红花黄色素A：十二烷基麦芽糖苷：硫醇化壳聚糖＝(18～22份)：(0.2～0.3份)：(8～12份)。

在一些更优选地实施方案中，所述的一种经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素A组合物，其中，包括羟基红花黄色素A、十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖；按质量份计，三者用量比为，羟基红花黄色素A：十二烷基麦芽糖苷：硫醇化壳聚糖＝20份：0.3份：10份。

本公开还一种包含前述组合物的药物制剂，(羟基红花黄色素A-十二烷基麦芽糖苷-硫醇化壳聚糖)，提高了有效成分羟基红花黄色素A的黏膜渗透性，可制成多种药物制剂，包括片剂、缓释微丸、固体分散体、囊泡、软胶囊、自微乳、半固体胶囊，优选为舌下片剂。

片剂是药物与辅料均匀混合后压制而成的片状或异形片状的固体制剂。片剂以口服普通片为主，也有含片、舌下片、口腔贴片、咀嚼片、分散片、泡腾片、阴道片、速释或缓释或控释片与肠溶片等。

微丸Pellets是直径0.5～1.0mm范围内的球形或类球形固体剂型，也可装入胶囊、压制成片剂，或制成其他制剂；通过加入缓释材料得到缓释微丸，达到缓释的效果。

固体分散体是指将药物以分子、无定型、微晶态等高度分散状态均匀分散在载体中形成的一种以固体形式存在的分散系统。作为一种药物制剂的中间体，固体分散体可以增加药物的溶出度和提高生物利用度、延缓药物释放、增加药物稳定性和液体药物固体化等用途。

软胶囊系指将液体药物直接包封，或将固体药物溶解或分散在适宜的赋形剂中制成溶液、混悬液、乳液或半固体，密封于球形或椭圆形的软质囊材中的胶囊剂。

本公开提供一种的舌下片剂，其包括前述的经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素A组合物，还包括填充剂和/或润滑剂。

填充剂的主要作用是用来填充片剂的重量或体积，从而便于压片。常用的填充剂有淀粉类、糖类、纤维素类和无机盐类等。

在一些优选地实施方案中，所述填充剂选自以下中的任意一种或多种：甘露醇、山梨醇、赤藓糖醇、乳糖、蔗糖；优选为甘露醇。

在一些优选地实施方案中，所述甘露醇的用量为55～75质量份，优选为65质量份。

润滑剂，用于使片剂中的各种成分易于加工，并减少片剂在制剂过程中的粘附和损伤。常见的润滑剂包括二氧化硅、镁硬脂酸等。

在一些优选地实施方案中，所述润滑剂选自以下中的任意一种或多种：硬脂酸镁、山嵛酸甘油酯、二氧化硅、硬脂富马酸钠；优选为硬脂酸镁。

在一些优选地实施方案中，所述的润滑剂用量为0.2～2质量份，优选为0.6质量份。

本公开提供一种舌下片剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)将硫醇化壳聚糖溶解于水中，搅拌溶解；

(2)将羟基红花黄色素A和十二烷基麦芽糖苷溶解于步骤(1)的溶液中，保温搅拌3h；

(3)将步骤(2)溶液进行喷雾干燥制粒，干燥至颗粒水分≤3.0％，得到组合物；

(4)将组合物与甘露醇、硬脂酸镁混合均匀，压片。

在一些优选地实施方案中，所述步骤(1)和/或(2)的搅拌温度为30～40℃。

在一些优选地实施方案中，所述步骤(3)的干燥温度为85～95℃。

在一些优选地实施方案中，所述步骤(3)的喷液速度为10L/h。

在一些优选地实施方案中，所述步骤(3)制得颗粒的粒度过30目筛。

本公开所取得的有益效果至少如下：

一、添加表面活性剂十二烷基麦芽糖苷和黏膜黏附聚合物硫醇化壳聚糖二者发挥协同作用，与HSYA制成组合物能够促进药物通过口腔黏膜的药效发挥，显著提高黏膜渗透性，具体表现为：

i.同时添加表面活性剂和黏膜黏附聚合物(例如实施例1)与羟基红花黄色素A制备组合物，所得组合物的药物渗透量为90％，说明所得组合物大量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性良好，能发挥良好的协同作用；

ii.当同时添加十二烷基麦芽糖苷(DDM)和硫醇化壳聚糖(CS-SH/TCS)、单独添加十二烷基麦芽糖苷、单独添加硫醇化壳聚糖，所得组合物的药物渗透量分别为90％、46％、23％，C(90％)＞A+B(46％+23％)，说明十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对羟基红花黄色素A的黏膜渗透性起协同作用，且协同作用最显著；

iii.单独添加表面活性剂(例如，实施例6的DDM)与HSYA制成组合物，所得组合物的药物渗透量较低，范围为46％，说明所得组合物中只有较少药物能够通过口腔黏膜，所得组合物的黏膜渗透性较同时添加差，但是较HSYA单体(二者均不添加)提高38％，无法发挥协同作用；

iv.单独添加黏膜黏附聚合物(例如，实施例7的CS-SH/TCS)与HSYA制成组合物，所得组合物的药物渗透量较低，范围为23％，说明所得组合物中只有较少药物能够通过口腔黏膜，所得组合物的黏膜渗透性较同时添加差，但是较HSYA单体(二者均不添加)提高15％，无法发挥协同作用；

v.HSYA单体(二者均不添加)的药物渗透量较低，仅为8％，说明HSYA单体中只有及少量药物能够通过口腔黏膜，进一步说明所得组合物的黏膜渗透性较差。

二、组合物中表面活性剂的用量，影响表面活性剂十二烷基麦芽糖苷和黏膜黏附聚合物硫醇化壳聚糖对羟基红花黄色素A的黏膜渗透性的协同作用；具体表现为：

i.当表面活性剂的用量为0.2～0.3质量份(例如实施例4中的十二烷基麦芽糖苷0.2、0.25质量份和实施例1中的0.3质量份)，与硫醇化壳聚糖和HSYA制成组合物，所得组合物中药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，药物渗透量C(72％～90％)＞A+B(46％+23％)说明十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对HSYA的黏膜渗透性的协同作用良好；

ii.十二烷基麦芽糖苷的用量为0.3质量份时，所得组合物的药物渗透量为90％，远大于单独添加DDM的药物渗透量46％，也远大于单独添加

CS-SH/TCS的23％，且药物渗透量C(90％)＞A+B(46％+23％)，说明合用CS-SH/TCS和DDM对提高羟基红花黄色素A的黏膜渗透性具有协同作用，且协同作用最显著；

iii.反之，采用其他的表面活性剂用量，当十二烷基麦芽糖苷的用量为0.1质量份时，所得组合物的药物渗透量分别为38％，远小于用量为0.3质量份时的90％，说明降低十二烷基麦芽糖苷的用量至0.1质量份时，会显著降低组合物的药物渗透量，显著降低CS-SH/TCS和DDM对提高羟基红花黄色素A的黏膜渗透性的协同作用；当十二烷基麦芽糖苷的用量为0.4～0.5质量份时，所得组合物在黏膜上作用2h后，黏膜活性为+，黏膜活性部分或基本失活，说明此时不具有协同作用。

三、组合物中黏膜黏附聚合物的用量，影响表面活性剂十二烷基麦芽糖苷和黏膜黏附聚合物硫醇化壳聚糖对羟基红花黄色素A的黏膜渗透性的协同作用；具体表现为：

i.黏膜黏附聚合物硫醇化壳聚糖的用量为8～12质量份(实施例1为10质量份，实施例5-2和5-3分别为8和12质量份)，所得组合物的药物渗透量分别为82～90％，C(82％～90％)＞A+B(46％+23％)，说明硫醇化壳聚糖的用量为8～12质量份时，CS-SH/TCS和DDM对提高羟基红花黄色素A的黏膜渗透性仍具有较高协同作用；

ii.当黏膜黏附聚合物硫醇化壳聚糖的用量为10质量份时，所得组合物的药物渗透量为90％，远大于单独添加DDM的药物渗透量46％，也远大于单独添加CS-SH/TCS的23％，且C(90％)＞A+B(46％+23％)，说明合用CS-SH/TCS和DDM对提高羟基红花黄色素A的黏膜渗透性具有协同作用，且协同作用显著；

iii.反之，当硫醇化壳聚糖采用其他用量时，例如为5、和20质量份时，所得组合物的药物渗透量为62～68％，远小于用量为10质量份时的90％，说明减少硫醇化壳聚糖的用量至5质量份或增加至15～20质量份时，会显著降低组合物的药物渗透量，显著降低CS-SH/TCS和DDM对提高羟基红花黄色素A的黏膜渗透性的协同作用。

四、改变组合物中表面活性剂的种类，将十二烷基麦芽糖苷改为其他表面活性剂(例如实施例2中的SDGC、SNAC、SDS、TW80)，与CS-SH/TCS和HSYA制备成组合物，影响二者对提高羟基红花黄色素A的黏膜渗透性的协同作用；其中，当表面活性剂为十二烷基麦芽糖苷(DDM)时，二者协同作用最好，所得组合物的黏膜渗透性最优，且黏膜渗透性明显优于其他表面活性剂，具体表现为：

i.当表面活性剂为十二烷基麦芽糖苷(DDM)时，所得组合物的药物渗透量最高，为90％；说明所得组合物中有大量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性良好，进一步说明十二烷基麦芽糖苷和CS-SH/TCS的协同作用最好；

ii.添加其他种类的表面活性剂(例如，实施例2的SDGC、SNAC、SDS、TW80)与HSYA制成组合物，所得组合物的药物渗透量较低，范围为

31～42％，远低于十二烷基麦芽糖苷的90％，进一步说明其他表面活性剂和CS-SH/TCS的协同作用较差或无协同作用。

五、改变组合物中黏膜黏附聚合物的种类，将硫醇化壳聚糖改为其他黏附聚合物(例如实施例3中的Dextran-NH₂、PLL、SA)，与DDM和HSYA制备成组合物，影响二者对提高羟基红花黄色素A的黏膜渗透性的协同作用；其中，当黏膜黏附聚合物为硫醇化壳聚糖时，二者协同作用最好，具有较好的黏膜渗透性，且黏膜渗透性明显优于其他黏膜黏附聚合物，具体表现为：

i.当黏膜黏附聚合物为硫醇化壳聚糖时，所得组合物的药物渗透量最高，为90％；说明所得组合物中有大量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性最优，进一步说明二者协同作用最好；

ii.添加其他黏膜黏附聚合物(例如，实施例3的Dextran-NH₂、PLL、SA)和十二烷基麦芽糖苷与HSYA制成组合物，所得组合物的药物渗透量较低，范围为51～62％，说明所得组合物中只有部分药物能够通过口腔黏膜，所得组合物的黏膜渗透性较差，进一步说明其他黏膜黏附聚合物与十二烷基麦芽糖苷对提高提高羟基红花黄色素A的黏膜渗透性不具有协同作用。

六、填充剂的种类影响，所得舌下片的黏膜渗透性；其中，采用甘露醇(200SD)作为填充剂制备舌下片，所得舌下片质量良好，黏膜渗透性良好，具体表现在：

i.所得舌下片的硬度和脆碎度分别为62N和0.11％，脆碎度远小于1％；崩解时限和溶出度分别为30s和98％，崩解时限远小于5min，溶出度接近100％；药物渗透量较高，为86％，说明所得舌下片中有足够的药物能够被吸收，说明所得舌下片的黏膜渗透性良好；

ii.采用其他常用填充剂(例如实施例9中的乳糖复合物、微晶纤维素复合物、山梨醇、赤藓糖醇)制备舌下片，所得舌下片的黏膜渗透性较差，崩解时限和溶出度的范围分别为2～9min和31～65％，崩解时限较长，溶出度较小，说明所得舌下片不能够迅速崩解并释放药物；药物渗透量较低，范围为21～45％，说明所得舌下片中有少量的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性较差。

七、填充剂的用量影响，所得舌下片的黏膜渗透性；其中，用量为55～75质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片质量良好，黏膜渗透性良好；用量为65质量份时，效果最优；具体表现在：

用量为65质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片质量良好，黏膜渗透性良好，

i.用量为65质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的硬度和脆碎度分别为62N和0.11％，脆碎度远小于1％；崩解时限和溶出度分别为30s和98％，崩解时限远小于5min，溶出度接近100％；药物渗透量最高，为86％，说明所得舌下片中有足够的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性良好；

ii.用量为55～75质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片硬度和脆碎度的范围分别为63～80N和0.11～0.20％，脆碎度小于1％；崩解时限和溶出度的范围分别为30～72s和91～98％，崩解时限远小于5min，溶出度接近100％，说明所得舌下片能够迅速崩解并释放药物；药物渗透量较高，范围为71～86％，说明所得舌下片中有大部分的药物能够被吸收，说明所得舌下片的黏膜渗透性良好；

iii.采用其他填充剂用量(例如50和85质量份)，所得舌下片黏膜渗透性较差仅为21～45％，说明所得舌下片中有少量的药物能够被吸收。

具体实施方式

下面通过实施例来进一步说明本发明。应当理解为：本发明的实施例仅用于说明本发明而给出，而不是对本发明的限制，在本发明技术方案的前提下对本发明的简单改进均属于本发明的保护范围。

实施例1：

1-1、组合物组成：

表1实施例1组成

HSYA：生产商为悦康药业集团股份有限公司，批号为221201，含量98.2％。

DDM：生产商为阿拉丁。

CS-SH/TCS：生产商为Polymer Source。

1-2、组合物制备方法：

将上表中的各组分，按照下述方法制备组合物：

(1)将硫醇化壳聚糖溶解于水中，于30～40℃搅拌溶解；

(2)将羟基红花黄色素A和十二烷基麦芽糖苷溶解于上述溶液中，于30～40℃保温搅拌3h；

(3)将上述溶液采用喷雾干燥设备制粒，干燥温度为85～95℃，喷液速度为为10L/h，并将制得颗粒过30目，即得到组合物。

实施例2：改变表面活性剂的种类

将实施例1中的DDM分别替换成下表中的物质，并按照实施例1中的制备方法进行制备。

表2实施例2组成

SDGC：生产商为阿拉丁。

聚山梨酯80：生产商为阿拉丁。

SNAC：生产商为普利制药。

SDS：生产商为Sigma。

实施例3：改变黏膜黏附聚合物的种类

将实施例1中的CS-SH/TCS分别替换成下表中的物质，并按照实施例1中的制备方法进行制备。

表3实施例3组成

Dextran-NH₂：生产商为阿拉丁。

PLL：生产商为Merck。

SA(CR8133)：生产商为DUPOUNT。

实施例4：改变表面活性剂的用量

将实施例1中的表面活性剂十二烷基麦芽糖苷用量分别替换成下表中的用量，并按照实施例1中的制备方法进行制备。

表4实施例4组成

样品	用量(质量份)
		组合物4-1	0.25
组合物4-2	0.1
		组合物4-3	0.2
组合物4-4	0.4
		组合物4-5	0.5

实施例5：改变黏膜黏附聚合物的用量

将实施例1中的黏膜黏附聚合物硫醇化壳聚糖的用量分别替换成下表中的用量，并按照实施例1中的制备方法进行制备。

表5实施例5组成

样品	用量(质量份)
		组合物5-1	5
组合物5-2	8
		组合物5-3	12
组合物5-4	15
		组合物5-5	20

实施例6：不添加黏膜黏附聚合物

在实施例1的基础上，不添加黏膜黏附聚合物，按照HSYA(用量为20质量份)和下表中组分，并按照实施例1中的制备方法制备组合物。

表6实施例6组成

实施例7：不添加表面活性剂

在实施例1的基础上，不添加表面活性剂，按照HSYA(用量为20质量份)和下表中组分，并按照实施例1中的制备方法制备组合物。

表7实施例7组成

实施例8：舌下片制备

将实施例1中的组合物1和实施例4中的组合物4-3按照以下组分制备舌下片。

8-1、舌下片组成：

表8实施例8组成

甘露醇(200SD)：生产商为Roquette，批号为EP04G。

硬脂酸镁：生产商为安徽山河，批号为20221104。

8-2、制备方法

将组合物与甘露醇、硬脂酸镁混合均匀，压片。

实施例9：舌下片制备-不同填充剂

在实施例8的基础上，将舌下片1-1中的填充剂甘露醇(200SD)更换为下表中的填充剂，并按照实施例8中的制备方法进行制备。

表9实施例9组成

乳糖复合物(40LL)：生产商为DFE，批号为104CMTV。

微晶纤维素复合物(CE)：生产商为DUPONT，批号为MC10476F。

山梨醇(SI 150)：生产商为Merck，批号为MP21005983。

赤藓糖醇：生产商为湖南九典，批号为202210106。

实施例10：舌下片制备-甘露醇用量

在实施例8的基础上，将舌下片1-1中的填充剂甘露醇的用量65质量份更换为下表中的用量，并按照实施例8中的制备方法进行制备。

表10实施例10组成

舌下片	组合物	填充剂	填充剂用量(质量份)
				舌下片3-1	组合物1	甘露醇	55
舌下片3-2	组合物1	甘露醇	75
				舌下片3-3	组合物1	甘露醇	50
舌下片3-4	组合物1	甘露醇	85

对比例1：舌下片制备-单体

在实施例8的基础上，将舌下片1-1的组成中的组合物1替换成羟基红花黄色素A(HSYA单体)，按照下表中的组分，并按照实施例8中的制备方法制备舌下片。

表11对比例1组成

对比例2：舌下片制备-磷脂复合物

按照专利CN109044971A中羟基红花黄色素A磷脂复合物的制备方法制备羟基红花黄色素A磷脂复合物，再采用本发明中实施例8中舌下片1-1的组成和制备工艺制备舌下片。

表12对比例2组成

对比例3：舌下片制备

按照专利CN109044971A中组成和制备工艺，采用红花黄色素制备舌下片。

表13对比例3组成

红花黄色素：自制，批号20231101，含量86.2％(以羟基红花黄色素A计)，制备过程：红花药材(购自新疆维吾尔自治区裕民县恒达种养殖农民专业合作社)经过70℃水浸提取、过滤、浓缩、层析柱纯化、浓缩、冻干，得到红花黄色素粉末。

交联羧甲基纤维素钠：生产商为DUPONT，批号为2174053472。

实验例1：体外渗透性评价(药物渗透量)

体外渗透性研究可以评估口腔黏膜对药物的屏障作用，进而评估药物在口腔黏膜的吸收情况及经口腔黏膜给药的可行性。

药物渗透量是由渗透率决定的，体外模拟实验中，渗透膜的性质以及膜所处的环境条件等多重条件对渗透率产生影响，随着时间的延长，药物逐渐扩散，药物渗透量逐渐增加。

研究中多使用与人颊黏膜性质相似的离体动物组织模型、细胞模型、人工培养的组织模型及仿生屏障模型。离体动物组织模型一般通过外科手术将口腔黏膜连同黏膜下层结缔组织从实验动物口腔分离，再去除结缔组织而获得。猪的颊黏膜与人颊黏膜最为相似，且成本低，是最常用的体外药物渗透动物模型。

A、猪舌下黏膜的获取。

猪舌下黏膜是从动物身上获得的，这些动物在当地的屠宰场被处死，并在1小时内转移到我们的实验室。通过手术用剪刀去除舌下和口腔组织中大部分底层肌肉和结缔组织，得到厚度均一的黏膜(0.8mm±0.1mm)，并裁剪成合适的大小，使用动物黏膜时，实验在动物死亡后9h内完成，防止黏膜失去活性。

B、扩散试验。

Franz-through流通池，其上半部分为供体室，下半部分为接收室，接收室连有蠕动泵，可使接收室中的渗透介质处于不断流动的状态。接收室与供体室之间放置猪舌下黏膜黏膜(有效面积为0.64cm²)，猪舌下黏膜上皮朝向供体室，整个装置利用水夹套维持在37℃。渗透介质为pH7.2缓冲液(Krebs-Ringer HEPES(KRH)，阿拉丁)。实验开始时，供、受体室注入50mL的介质，使猪舌下黏膜浸泡入渗透介质中，平衡0.5h后，移去供体室介质，将组合物或舌下片放于离体组织上，并在其上滴1mL的人工唾液(Greenwood，源叶生物)，以模拟口腔环境。然后在120min末从接收室取样1mL(同时补充等体积等温的接收介质)并测定其中药物(HSYA)的含量，计算药物的累计渗透量。并在试验后测定黏膜的完整性。

实验例2：舌下片质量评价

崩解时限，指某些药物剂型(片剂、丸剂等)，使用药典规定的检测装置，在一定条件下测得的全部崩解并通过筛网所需时间的限度，是衡量药品质量的指标之一。中国药典2020年四部通则0102中给出舌下片的崩解时限为5min，崩解时间越短，越有助于药物在舌下被迅速吸收而不被唾液冲走。

溶出度，用于表征药物从药物制剂中释放的速度和程度，也是衡量药品质量的指标之一。

片剂硬度，是指片剂在压制过程中所受到的压力大小，是衡量片剂质量的重要指标之一。合适的硬度能够保证片剂的完整和药物的有效性，硬度过低，药品在运输使用过程中容易破碎；硬度过高，不利于药品使用过程中的释放和吸收。

脆碎度，反映片剂的抗磨损震动能力，也是片剂质量标准检查的重要项目。脆碎度越低，说明片剂的质量越好。

①测定方法

3-1、崩解时限

取舌下片样品6片，设置温度37℃，控制温度37±1℃，记录样品全部崩解的时间。

3-2、溶出度

取舌下片样品6片，采用中国药典2020年版四部通则0931(第二法，桨法)，以水900mL为溶出介质，设置温度37℃，设定转速50rpm，于5min分别取样测定溶出液，过滤，取续滤液，作为供试品溶液。另取对照品，精密称重，加水配制成50mg/ml的溶液，作为对照品溶液，计算溶出度。

3-3、硬度

取舌下片样品10片，采用片剂硬度测定仪测定每片硬度，并计算平均硬度。

3-4、脆碎度

《中国药典》2020年版四部通则0923片剂脆碎度检查法中规定：

片重为0.65g或以下者取若干片，使其总重约为6.5g；片重大于0.65g者取10片。用吹风机吹去脱落的粉末，精密称重，置圆筒中，转动100次。取出，同法除去粉末，精密称重，减失重量不得过1％，且不得检出断裂、龟裂及粉碎的片。

实验例3：动物体内药动学评价

生物利用度(bioavailability，F)是指药物经血管外途径给药后吸收进入全身血液循环的相对量。

相对生物利用度(relativebioavailability，Frel)是以其他血管外途径给药的制剂为参比制剂获得的药物活性成分吸收进入体循环的相对量，是同一药物不同制剂之间给药后AUC的比值，主要反映某种固定给药途径下，与参比制剂比较，试验制剂的剂型、处方和制备工艺等对体内吸收的影响，集中体现了试验制剂的体内质量。

由血药浓度--时间数据来评定(相对)生物利用度通常涉及三个参数:最大(峰)血浆药物浓度，达到最大血浆药物浓度的时间(达峰时间)和血药浓度-时间曲线下面积。初始时间内，随着药物渗透量的逐渐增加，血浆药物浓度随着吸收分量的增加而提高；但是，当药物消除率与吸收率相等时，随着药物渗透量的继续增加，此时血药浓度保持一定的平衡，并且达到血药浓度高峰。随后，血药浓度保持一定时间内平衡或逐渐降低。

选取体重200g±20g的雄性大鼠(Sprague Dawley)10只，实验前禁食12小时。随机分为2组，其中一组给予实施例8的舌下片1-1，并给予1ml水，使舌下片快速崩解。全程动物需保持麻醉状态，以防吞咽，并将大鼠平躺，分别在0.25、0.5、1、1.5、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、24h，从大鼠的复眼眶取血，测定血液中HSYA的含量，并绘制血药浓度曲线。另一组大鼠给予对比例1中的舌下片5，采用上述同样的方式取血。两组大鼠的实验数据结果如下。

表14药动学参数数据(n＝5)

药动学参数	舌下片1-1	舌下片5
			C_max(μg/L)	8.31±1.5	2.31±1.5
t_max(h)	1.07±0.98	1.51±0.98
			AUC_0-24(h·μg/L)	95.1±38.8	22.5±12.3
t_1/2(h)	7.26±2.95	3.79±2.86
			相对生物利用度	423％	/

结论分析1：表面活性剂-十二烷基麦芽糖苷(DDM)和黏膜黏附聚合物-硫醇化壳聚糖(CS-SH/TCS)二者发挥协同作用

实施例1中添加表面活性剂DDM和黏膜黏附聚合物CS-SH/TCS与HSYA制备HSYA组合物1，在此基础上考察仅添加表面活性剂和黏膜黏附聚合物其中之一，对所得组合物的影响，所得组合物的体外黏膜渗透性结果如下：

1-1、组合物组成的区别

表15

1-2、体外黏膜渗透性

表16

注：A表示单独添加表面活性剂，B表示单独添加黏膜黏附聚合物，C表示同时添加表面活性剂和黏膜黏附聚合物。

1-3、药物渗透量的效果比较

表17

结论：

1)C1、A1、B1与羟基红花黄色素A(HSYA单体)的关系

C1为同时添加十二烷基麦芽糖苷(DDM)和硫醇化壳聚糖(CS-SH/TCS)与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量最高，为90％，说明所得组合物中大量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性良好。

A1为单独添加十二烷基麦芽糖苷与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量较低，为46％，说明所得组合物中部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性一般。

B1为单独添加硫醇化壳聚糖与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量较低，为23％，说明所得组合物中仅少量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差。

羟基红花黄色素A(HSYA单体)的药物渗透量极低，仅为8％，说明HSYA单体中仅极少量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，HSYA单体的黏膜渗透性极差。

综上所述，C1、A1、B1、HSYA单体的药物渗透量从大到小依次为：C1(90％)＞A1(46％)+B1(23％)＞A1(46％)＞B1(23％)＞HSYA单体(8％)，说明十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对HSYA的黏膜渗透性起协同作用，且协同作用显著。

小结：

1、添加表面活性剂DDM或/和添加黏膜黏附聚合物CS-SH/TCS与羟基红花黄色素A制备组合物，能促进组合物的黏膜渗透性，并且其黏膜渗透性较羟基红花黄色素A单体好，具体表现为：

i.单独添加表面活性剂(例如实施例6中的DDM)与羟基红花黄色素A制备组合物，所得组合物药物渗透量为46％，说明所得组合物中部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差；

ii.单独添加黏膜黏附聚合物(例如实施例7中的CS-SH/TCS)与羟基红花黄色素A制备组合物，所得组合物的药物渗透量为23％，说明所得组合物中少量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差；

iii.同时添加表面活性剂DDM和黏膜黏附聚合物CS-SH/TCS(例如实施例1)与羟基红花黄色素A制备组合物，所得组合物的药物渗透量为90％，说明所得组合物中大部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性良好；

iv.羟基红花黄色素A单体的药物渗透量极低，为8％，说明羟基红花黄色素A单体中仅极少量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，羟基红花黄色素A单体的黏膜渗透性极差；

2、同时添加表面活性剂DDM和黏膜黏附聚合物CS-SH/TCS(例如实施例1)与羟基红花黄色素A制备组合物，所得聚合物的黏膜渗透性优于单独添加表面活性剂DDM(实施例6)或单独添加黏膜黏附聚合物CS-SH/TCS(实施例7)的组合物，具体表现为：

i.单独添加表面活性剂DDM所得组合物的药物渗透量分别为46％，明显高于羟基红花黄色素A单体的药物渗透量8％，说明单独添加表面活性剂DDM能够促进羟基红花黄色素A的黏膜渗透性；

ii.单独添加黏膜黏附聚合物CS-SH/TCS所得组合物的药物渗透量分别为

23％，明显高于羟基红花黄色素A单体的药物渗透量8％，说明单独添加黏膜黏附聚合物CS-SH/TCS能够促进羟基红花黄色素A的黏膜渗透性；

iii.同时添加DDM和CS-SH/TCS所得组合物的药物渗透量为90％，远大于单独添加DDM在的药物渗透量46％，也远大于单独添加CS-SH/TCS的23％，说明合用CS-SH/TCS和DDM对提高羟基红花黄色素A的黏膜渗透性具有协同作用，且协同作用显著；

3、同时添加十二烷基麦芽糖苷作为表面活性剂和硫醇化壳聚糖作为黏膜黏附聚合物与羟基红花黄色素A制备组合物(例如实施例1)，所得组合物的黏膜渗透性最好，说明十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对羟基红花黄色素A的黏膜渗透性起到协同作用，且协调作用显著，具体表现在：

i.同时添加十二烷基麦芽糖苷(DDM)和硫醇化壳聚糖(CS-SH/TCS)、单独添加十二烷基麦芽糖苷、单独添加硫醇化壳聚糖，所得组合物的药物渗透量分别为90％、46％、23％，C(90％)＞A+B(46％+23％)，说明十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对羟基红花黄色素A的黏膜渗透性起协同作用，且协同作用显著。

结论分析2：表面活性剂-十二烷基麦芽糖苷(DDM)的用量对协同作用的影响。

实施例1中添加0.3质量份的十二烷基麦芽糖苷(DDM)作为表面活性剂，与硫醇化壳聚糖(CS-SH/TCS)和HSYA制备HSYA组合物1，在此基础上考察添加不同用量的十二烷基麦芽糖苷，对所得组合物的影响，所得组合物的体外黏膜渗透性结果如下：

2-1、组合物组成的区别

表18

2-2、体外黏膜渗透性

表19

结论：

组合物1中十二烷基麦芽糖苷(DDM)的用量为0.3质量份，所得组合物在黏膜上作用2h后，黏膜活性为+++，黏膜活性正常，说明所得组合物对黏膜的作用是可逆的；所得组合物的药物渗透量为90％，说明所得组合物中有大量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所组合物的黏膜渗透性良好。

组合物4-1中十二烷基麦芽糖苷(DDM)的用量为0.25质量份，所得组合物在黏膜上作用2h后，黏膜活性为+++，黏膜活性正常，说明所得组合物对黏膜的作用是可逆的；所得组合物的药物渗透量为80％，说明所得组合物中有大部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较好。

组合物4-2中十二烷基麦芽糖苷(DDM)的用量为0.1质量份，所得组合物在黏膜上作用2h后，黏膜活性为+++，黏膜活性正常，说明所得组合物对黏膜的作用是可逆的；所得组合物的药物渗透量为38％，说明所得组合物中仅有少部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差。

组合物4-3中十二烷基麦芽糖苷(DDM)的用量为0.2质量份，所得组合物在黏膜上作用2h后，黏膜活性为+++，黏膜活性正常，说明所得组合物对黏膜的作用是可逆的；所得组合物的药物渗透量为72％，说明所得组合物中有部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较好。

组合物4-4中十二烷基麦芽糖苷(DDM)的用量为0.4质量份，所得组合物在黏膜上作用2h后，黏膜活性为+，黏膜活性部分失活，说明所得组合物对黏膜的作用仅部分可逆的。

组合物4-5中十二烷基麦芽糖苷(DDM)的用量为0.5质量份，所得组合物在黏膜上作用2h后，黏膜活性为+，黏膜活性基本失活，说明所得组合物对黏膜的作用是不可逆的。

综上所述，在十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖组合物中，不同用量十二烷基麦芽糖苷的组合物，药物渗透量从大到小依次为：0.3质量份(90％)＞0.25质量份(80％)＞0.2质量份(72％)＞0.1质量份(38％)，十二烷基麦芽糖苷用量由0.3质量份减少至0.1质量份，药物渗透量显著降低；十二烷基麦芽糖苷用量由0.3质量份增加至0.5质量份，黏膜活性显著降低；说明十二烷基麦芽糖苷的用量影响十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对HSYA的黏膜渗透性的协同作用，且影响显著。

小结：

1、当表面活性剂的用量为0.2～0.3质量份(例如实施例4中的十二烷基麦芽糖苷0.2、0.25质量份和实施例1中的0.3质量份)，与硫醇化壳聚糖和HSYA制成组合物，所得组合物中药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，且对黏膜的作用是可逆的，所得组合物组合物的黏膜渗透性较好，说明十二烷基麦芽糖苷的用量为0.2～0.3质量份时，十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对HSYA的黏膜渗透性的协同作用较好，具体表现为：

i.所得组合物在黏膜作用2h后，黏膜活性均为+++，黏膜活性正常，说明所得组合物对黏膜的作用是可逆的；

ii.所得组合物中药物渗透量较高，在72％～90％之间；说明所得组合物中有大部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较好，进一步说明十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对HSYA的黏膜渗透性的协同作用较好；

2、当表面活性剂的用量为0.3质量份(例如实施例1十二烷基麦芽糖苷)，与硫醇化壳聚糖和HSYA制成组合物，所得组合物中药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，且对黏膜的作用是可逆的，所得组合物的黏膜渗透性最好，说明十二烷基麦芽糖苷的用量为0.3质量份时，十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对HSYA的黏膜渗透性的协同作用最好。具体表现为：

ii.所得组合物中药物渗透量最高，为90％；说明所得组合物中大量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性最好，进一步说明十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对HSYA的黏膜渗透性的协同作用最好；

3、当表面活性剂的用量为0.4～0.5质量份(例如实施例4中十二烷基麦芽糖苷的0.4、0.5质量份)，与硫醇化壳聚糖和HSYA制成组合物，所得组合物对黏膜的作用是不可逆的，且黏膜已经部分或全部失活，具体表现为：

i.十二烷基麦芽糖苷(DDM)的用量为0.4质量份，所得组合物在黏膜上作用2h后，黏膜活性为++，黏膜活性部分失活，说明所得组合物对黏膜的作用是部分可逆的。

ii.十二烷基麦芽糖苷(DDM)的用量为0.5质量份，所得组合物在黏膜上作用2h后，黏膜活性为+，黏膜活性基本失活，说明所得组合物对黏膜的作用是不可逆的。

结论分析3：黏膜黏附聚合物-硫醇化壳聚糖(CS-SH/TCS)的用量对协同作用的影响。

实施例1中添加10质量份的硫醇化壳聚糖(CS-SH/TCS)作为黏膜黏附聚合物，与十二烷基麦芽糖苷(DDM)和HSYA制备HSYA组合物1，在此基础上考察添加不同用量的硫醇化壳聚糖，对所得组合物的影响，所得组合物的体外黏膜渗透性结果如下：

3-1、组合物组成的区别

表20

3-2、体外黏膜渗透性

表21

结论：

组合物1中硫醇化壳聚糖的用量为10质量份，所得组合物的药物渗透量最高，为90％，说明所得组合物中大量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性良好。

组合物5-1中硫醇化壳聚糖的用量为5质量份，所得组合物的药物渗透量为62％，说明所得组合物中部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差。

组合物5-2中硫醇化壳聚糖的用量为8质量份，所得组合物的药物渗透量为85％，说明所得组合物中大部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较好。

组合物5-3中硫醇化壳聚糖的用量为12质量份，所得组合物的药物渗透量为82％，说明所得组合物中大部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较好。

组合物5-4中硫醇化壳聚糖的用量为15质量份，所得组合物的药物渗透量为68％，说明所得组合物中大部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差。

组合物5-5中硫醇化壳聚糖的用量为20质量份，所得组合物的药物渗透量为65％，说明所得组合物中部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差。

综上所述，在十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖组合物中，不同用量硫醇化壳聚糖的组合物，药物渗透量从大到小依次为：10质量份(90％)＞8质量份(85％)＞12质量份(82％)＞15质量份(68％)＞20质量份(65％)＞5质量份(62％)，说明硫醇化壳聚糖的用量影响十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对HSYA的黏膜渗透性的协同作用，且影响显著。

小结：

1、黏膜黏附聚合物的用量为8～12质量份(实施例1中硫醇化壳聚糖用量为10质量份，实施例5-2和5-3分别为8和12质量份)，与十二烷基麦芽糖苷和HSYA制成组合物，所得组合物的黏膜渗透性良好，黏膜渗透性明显优于其他用量，进一步说明硫醇化壳聚糖的用量为8～12质量份时，十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对HSYA的黏膜渗透性的协同作用较高，具体表现为：

i.所得组合物的药物渗透量较高，为82～90％；说明所得组合物中有大量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性良好，进一步说明十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对HSYA的黏膜渗透性的协同作用较高。

2、黏膜黏附聚合物的用量为10质量份(实施例1硫醇化壳聚糖)，与十二烷基麦芽糖苷和HSYA制成组合物，所得组合物的黏膜渗透性最好，黏膜渗透性明显优于其他用量，进一步说明硫醇化壳聚糖的用量为10质量份时，十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对HSYA的黏膜渗透性的协同作用最高，具体表现为：

i.所得组合物的药物渗透量最高，为90％；说明所得组合物中有大量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性良好，进一步说明十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对HSYA的黏膜渗透性的协同作用最高。

3、反之，采用其他黏膜黏附聚合物的用量(实施例5-1、5-4和5-5)，和十二烷基麦芽糖苷与HSYA制成组合物，所得组合物的药物渗透量范围为62～68％，说明所得组合物中只有部分药物能够通过口腔黏膜，进一步说明所得组合物的黏膜渗透性较差，进一步说明十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对HSYA的黏膜渗透性的协同作用较差。

结论分析4：改变表面活性剂的种类对协同作用的影响

实施例1添加表面活性剂DDM制备HSYA组合物，在此基础上考察采用不同表面活性剂对所得组合物的影响，所得组合物的体外黏膜渗透性结果如下：

4-1、组合物组成的区别

表22

4-2、体外黏膜渗透性

表23

组合物	药物渗透量
		组合物1	90％
组合物2-1	38％
		组合物2-2	42％
组合物2-3	31％
		组合物2-4	37％

结论：

组合物1添加的表面活性剂为DDM制备组合物，所得组合物的药物渗透量较高，为90％，说明所得组合物中有大量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，说明所得组合物黏膜渗透性良好。

组合物2-1～2-4中，添加其他种类的表面活性剂(例如，SDGC、SNAC、SDS、TW80)制备组合物，所得组合物的药物渗透量为31～42％，说明所得组合物中药物仅少量能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差。

综上所述，在表面活性剂-十二烷基麦芽糖苷和黏膜黏附聚合物-硫醇化壳聚糖的组合物(实施例1)中，将表面活性剂为十二烷基麦芽糖苷(DDM)分别替换为SDGC、SNAC、SDS、TW80，所得组合物的药物渗透量由90％分别降低至38％、42％、31％、37％，降低程度显著，说明在组合物中，表面活性剂的种类影响表面活性剂和黏膜黏附聚合物对HSYA的黏膜渗透性的协同作用，且影响显著。

小结：

添加表面活性剂为十二烷基麦芽糖苷(DDM)与黏膜黏附聚合物所得组合物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性良好，且黏膜渗透性明显优于其他表面活性剂，具体表现为：

i.所得组合物的药物渗透量最高，为90％；说明所得组合物中有大量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性良好；

ii.添加其他表面活性剂(例如，实施例2的SDGC、SNAC、SDS、TW80)与HSYA制成组合物，所得组合物的药物渗透量较低，范围为31～42％，说明所得组合物中只有较少药物能够通过口腔黏膜，进一步说明所得组合物的黏膜渗透性较差。

结论分析5：改变黏膜黏附聚合物的种类对协同作用的影响

实施例1添加黏膜黏附聚合物CS-SH/TCS制备HSYA组合物，在此基础上考察添加不同黏膜黏附聚合物对所得组合物的影响，所得组合物的体外黏膜渗透性结果如下：

5-1、组合物组成的区别

表24

5-2、体外黏膜渗透性

表25

组合物	药物渗透量
		组合物1	90％
组合物3-1	62％
		组合物3-2	56％
组合物3-3	51％

结论：

组合物1添加黏膜黏附聚合物(CS-SH/TCS)制备组合物，所得组合物的药物渗透量最高，为90％，说明所得组合物中大量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，说明所得组合物的黏膜渗透性良好。

组合物3-1～3-3添加其他种类的黏膜黏附聚合物(例如，Dextran-NH₂、PLL、CR8133)制备组合物，所得组合物的药物渗透量为51～62％，说明所得组合物中仅有部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，说明所得组合物的黏膜渗透性较差。

小结：

添加硫醇化壳聚糖作为黏膜黏附聚合物和表面活性剂十二烷基麦芽糖苷与HSYA制成组合物，所得组合物中药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，具有较好的黏膜渗透性，且黏膜渗透性明显优于其他黏膜黏附聚合物，具体表现为：

iii.所得组合物的药物渗透量最高，为90％；说明所得组合物中有大量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性良好；

iv.添加其他黏膜黏附聚合物(例如，实施例3的Dextran-NH₂、PLL、SA)和十二烷基麦芽糖苷与HSYA制成组合物，所得组合物的药物渗透量较低，范围为51～62％，说明所得组合物中只有部分药物能够通过口腔黏膜，进一步说明所得组合物的黏膜渗透性较差。

结论分析6：综合探究不同表面活性剂和黏膜黏附聚合物二者是够发挥协同作用

6-1、组合物组成的区别

表26

6-2、体外黏膜渗透性

表27

6-3、药物渗透量的效果比较

表28

结论：

1)C1、A1、B1与羟基红花黄色素A(HSYA单体)的关系

综上所述，C1、A1、B1、HSYA单体的药物渗透量从大到小依次为：C1＞A1+B1＞A1＞B1＞HSYA单体，说明十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对HSYA的黏膜渗透性起协同作用，且协同作用显著。

2)C2、A1、B2与单体的关系

C2为同时添加十二烷基麦芽糖苷和氨基葡聚糖(Dextran-NH₂)与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量为62％，说明所得组合物中大部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较好。

B2为单独添加氨基葡聚糖与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量较低，为21％，说明所得组合物中仅少量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差。

综上所述，C2、A1、B2、HSYA单体的药物渗透量从大到小依次为：A1+B1＞C2＞A1＞B2＞HSYA单体，说明合用十二烷基麦芽糖苷和氨基葡聚糖较单用十二烷基麦芽糖苷或氨基葡聚糖，效果不显著。

3)C3、A1、B3与单体的关系

C3为同时添加十二烷基麦芽糖苷和聚赖氨酸(PLL)与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量为56％，说明所得组合物中部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较好。

A1为单独添加十二烷基麦芽糖苷(DDM)与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量较低，为46％，说明所得组合物中部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性一般。

B3为单独添加聚赖氨酸(PLL)与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量较低，为19％，说明所得组合物中仅少量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差。

综上所述，C3、A1、B3、HSYA单体的药物渗透量从大到小依次为：A1+B3＞C3＞A1＞B3＞HSYA单体，说明合用十二烷基麦芽糖苷和聚赖氨酸较单用十二烷基麦芽糖苷或聚赖氨酸，效果不显著。

4)C4、A1、B4与单体的关系

C4为同时添加十二烷基麦芽糖苷(DDM)和海藻酸钠(SA)与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量为51％，说明所得组合物中部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较好。

B4为单独添加海藻酸钠(SA)与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量较低，为22％，说明所得组合物中仅少量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差。

综上所述，C4、A1、B4、HSYA单体的药物渗透量从大到小依次为：A1+B4＞C4＞A1＞B4＞HSYA单体，说明合用十二烷基麦芽糖苷和海藻酸钠较单用十二烷基麦芽糖苷或海藻酸钠，效果不显著。

5)C5、A2、B1与单体的关系

C5为同时添加脱氧甘胆酸钠(SDGC)和硫醇化壳聚糖(CS-SH/TCS)与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量为38％，说明所得组合物中部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性一般。

A2为单独添加脱氧甘胆酸钠(SDGC)与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量较低，为27％，说明所得组合物中仅少量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差。

B1为单独添加硫醇化壳聚糖(CS-SH/TCS)与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量较低，为23％，说明所得组合物中仅少量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差。

综上所述，C5、A2、B1、HSYA单体的药物渗透量从大到小依次为：A2+B1＞C5＞A2＞B1＞HSYA单体，说明合用SDGC和CS-SH/TCS较单用SDGC或CS-SH/TCS，效果不显著。

6)C6、A3、B1与单体的关系

C6为同时添加N-[8-(2-羟基苯甲酰基)氨基]辛酸钠(SNAC)和硫醇化壳聚糖(CS-SH/TCS)与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量为42％，说明所得组合物中部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性一般。

A3为单独添加N-[8-(2-羟基苯甲酰基)氨基]辛酸钠(SNAC)与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量较低，为25％，说明所得组合物中少量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差。

综上所述，C6、A3、B1、HSYA单体的药物渗透量从大到小依次为：A1+B4＞C6＞A3＞B1＞HSYA单体，说明合用SNAC和CS-SH/TCS较单用SNAC或CS-SH/TCS，效果不显著。

7)C7、A4、B1与单体的关系

C7为同时添加十二烷基硫酸钠(SDS)和硫醇化壳聚糖(CS-SH/TCS)与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量为31％，说明所得组合物中少部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性一般。

A4为单独添加十二烷基硫酸钠(SDS)与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量较低，为28％，说明所得组合物中少量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差。

综上所述，C7、A4、B1、HSYA单体的药物渗透量从大到小依次为：A4+B1＞C7＞A4＞B1＞HSYA单体，说明合用SDS和CS-SH/TCS较单用SDS或CS-SH/TCS，效果不显著。

8)C8、A5、B1与单体的关系

C8为同时添加聚山梨酯80(TW80)和硫醇化壳聚糖(CS-SH/TCS)与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量为37％，说明所得组合物中少部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性一般。

A5为单独添加聚山梨酯80(TW80)与羟基红花黄色素A(HSYA)制备的组合物，所得组合物的药物渗透量较低，为29％，说明所得组合物中少部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差。

羟基红花黄色素A(HSYA单体)的药物渗透量极低，仅为8％，说明HSYA单体中仅少量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，HSYA单体的黏膜渗透性极差。

综上所述，C8、A5、B1、HSYA单体的药物渗透量从大到小依次为：A5+B1＞C8＞A5＞B1＞HSYA单体，说明合用TW80和CS-SH/TCS较单用TW80或CS-SH/TCS，效果不显著。

小结：

1、添加表面活性剂或/和添加黏膜黏附聚合物与羟基红花黄色素A制备组合物，能促进组合物的黏膜渗透性，并且其黏膜渗透性较羟基红花黄色素A单体好，具体表现为：

i.单独添加表面活性剂(例如实施例6中的DDM、TW80、SDS、SDGC、SNAC)与羟基红花黄色素A制备组合物，所得组合物药物渗透量在

25％～46％之间，说明所得组合物中部分或少量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差；

ii.单独添加黏膜黏附聚合物(例如实施例7中的CS-SH/TCS、Dextran-NH2、

PLL、SA)与羟基红花黄色素A制备组合物，所得组合物的药物渗透量在19％～23％之间，说明所得组合物中少量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差；

iii.同时添加表面活性剂和黏膜黏附聚合物(例如实施例1、实施例2和实施例3)与羟基红花黄色素A制备组合物，所得组合物的药物渗透量在

31％～90％之间，说明所得组合物中部分或大部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性良好；

2、同时添加表面活性剂和黏膜黏附聚合物(例如实施例1、实施例2和实施例3)与羟基红花黄色素A制备组合物，所得聚合物的黏膜渗透性优于单独添加表面活性剂(实施例6)或单独添加黏膜黏附聚合物(实施例7)的组合物，具体表现为：

i.单独添加表面活性剂DDM、SDGC、SNAC、SDS、TW80所得组合物的药物渗透量分别为46％、27％、25％、28％、29％，明显高于羟基红花黄色素A单体的药物渗透量8％，说明单独添加表面活性剂DDM、SDGC、

SNAC、SDS、TW80能够促进羟基红花黄色素A的黏膜渗透性；

ii.单独添加黏膜黏附聚合物CS-SH/TCS、Dextran-NH₂、PLL、SA所得组合物的药物渗透量分别为23％、21％、19％、22％，明显高于羟基红花黄色素A单体的药物渗透量8％，说明单独添加黏膜黏附聚合物CS-SH/TCS、

Dextran-NH₂、PLL、SA能够促进羟基红花黄色素A的黏膜渗透性；

iv.同时添加DDM和黏膜黏附聚合物Dextran-NH2、PLL、SA所得组合物的药物渗透量分别为62％、56％、51％，略大于单独添加DDM在的药物渗透量46％，也分别大于单独添加Dextran-NH2、PLL、SA的21％、19％、

22％，说明Dextran-NH2、PLL、SA和DDM的组合与单用DDM或

Dextran-NH2、PLL、SA的药物渗透量相比较，效果不显著；

v.同时添加CS-SH/TCS和表面活性剂SDGC、SNAC、SDS、TW80所得组合物在2h时的药物渗透量分别为38％、42％、31％、37％，大于单独添加CS-SH/TCS的药物渗透量23％，也大于单独添加表面活性剂SDGC、SNAC、SDS、TW80的27％、25％、28％、29％，说明SDGC、SNAC、SDS、TW80和CS-SH/TCS的组合与单用CS-SH/TCS或SDGC、SNAC、

SDS、TW80的药物渗透量相比较，效果不显著。

i.同时添加十二烷基麦芽糖苷(DDM)和硫醇化壳聚糖(CS-SH/TCS)、单独添加十二烷基麦芽糖苷、单独添加硫醇化壳聚糖，所得组合物的药物渗透量分别为90％、46％、23％，C(90％)＞A+B(46％+23％)，说明十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖对羟基红花黄色素A的黏膜渗透性起协同作用，且协同作用显著；

ii.同时添加十二烷基麦芽糖苷(DDM)和其他黏膜黏附聚合物(实施例3)所得组合物的药物渗透量较低，C在51％～62％之间，C＜A+B，且C均明显小于90％，说明其他黏膜黏附聚合物Dextran-NH₂、PLL、SA和DDM的组合与单用DDM或Dextran-NH₂、PLL、SA的药物渗透量相比较，效果不显著；

iii.同时添加硫醇化壳聚糖和其他表面活性剂(实施例2)所得组合物的药物渗透量较低，C在31％～42％之间，C＜A+B，且C均明显小于90％，说明其他表面活性剂SDGC、SNAC、SDS、TW80和CS-SH/TCS的组合与单用CS-SH/TCS或SDGC、SNAC、SDS、TW80的药物渗透量相比较，效果不显著。

结论分析7：是否添加表面活性剂

实施例1添加表面活性剂DDM制备HSYA组合物，在此基础上考察不添加表面活性剂对所得组合物的影响，所得组合物的体外黏膜渗透性结果如下：

7-1、组合物组成的区别

表29

7-2、体外黏膜渗透性

表30

结论：

组合物1添加表面活性剂DDM制备组合物，所得组合物的药物渗透量较高，为90％，说明所得组合物中有大量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，说明所得组合物黏膜渗透性良好。

组合物7-1、组合物7-2、组合物7-3、组合物7-4不添加表面活性剂(即只有HSYA和不同种类的黏膜黏附聚合物)制备组合物，所得组合物的药物渗透量为19％～23％，说明所得组合物中药物仅少量能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差。

HSYA单体的药物渗透量为8％，说明仅有极少量HSYA能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，HSYA单体的黏膜渗透性差。

小结：

添加表面活性剂DDM和黏膜黏附聚合物硫醇化壳聚糖与HSYA制成组合物(组合物1)，所得组合物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性良好，且黏膜渗透性明显优于不加表面活性剂，具体表现为：

ii.不添加表面活性剂，仅添加黏膜黏附聚合物(例如，实施例7的CS-SH/TCS、Dextran-NH₂、PLL、SA)与HSYA制成组合物，所得组合物的药物渗透量较低，范围为19～23％，说明所得组合物中只有较少药物能够通过口腔黏膜，进一步说明所得组合物的黏膜渗透性较差；

iii.不添加表面活性剂，也不添加黏膜黏附聚合物，HSYA单体的药物渗透量较低，为8％，说明HSYA单体中只有及少量药物能够通过口腔黏膜，进一步说明所得组合物的黏膜渗透性较差。

结论分析8：是否添加黏膜黏附聚合物

实施例1添加黏膜黏附聚合物CS-SH/TCS制备HSYA组合物，在此基础上考察不添加黏膜黏附聚合物对所得组合物的影响，所得组合物的体外黏膜渗透性结果如下：

8-1、组合物组成的区别

表31

8-2、体外黏膜渗透性

表32

结论：

组合物1采用表面活性剂硫醇化壳聚糖和黏膜黏附聚合物十二烷基麦芽糖苷制备组合物，所得组合物的药物渗透量最高，为90％，说明所得组合物中大量药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性良好。

组合物6-1～6-5中，不添加黏膜黏附聚合物(即只有HSYA和不同种类的表面活性剂)制备组合物，所得组合物的药物渗透量为25～46％，说明所得组合物中仅有部分药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物的黏膜渗透性较差。

HSYA单体的药物渗透量为8％，说明仅有极少量HSYA能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，HSYA单体的黏膜渗透性较差。

小结：

添加黏膜黏附聚合物和表面活性剂与HSYA制成组合物，所得组合物中药物能够通过口腔黏膜，从而被吸收发挥药效，所得组合物具有良好的黏膜渗透性，且黏膜渗透性明显优于不加黏膜黏附聚合物，具体表现为：

i.不添加黏膜黏附聚合物，仅添加表面活性剂(例如，实施例6的DDM、SDGC、SNAC、SDS、TW80)与HSYA制成组合物，所得组合物的药物渗透量较低，范围为25～46％，说明所得组合物中只有较少药物能够通过口腔黏膜，进一步说明所得组合物的黏膜渗透性较差；

ii.添加硫醇化壳聚糖(黏膜黏附聚合物)和十二烷基麦芽糖苷与HSYA制成组合物(例如实施例1)，所得组合物的药物渗透量(90％)明显高于不加黏膜黏附聚合物的样品(8～46％)，说明所得组合物的黏膜渗透性明显优于不加黏膜黏附聚合物的样品。

iii.不添加黏膜黏附聚合物，也不添加表面活性剂，HSYA单体的药物渗透量较低，为8％，说明HSYA单体中只有及少量药物能够通过口腔黏膜，进一步说明所得组合物的黏膜渗透性较差。

结论分析9：改变填充剂种类

实施例8中舌下片1-1添加甘露醇(200SD)作为填充剂和组合物1制备舌下片，在此基础上考察不同填充剂，对所得舌下片的影响，所得舌下片的质量属性检测结果如下：

9-1、舌下片组成的区别

表33

9-2、样品质量

表34

9-3、体外黏膜渗透性

表35

结论：

1)硬度和脆碎度

舌下片1-1采用甘露醇(200SD)作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的硬度和脆碎度分别为63N和0.11％，脆碎度＜1％，说明所得舌下片的质量良好。

舌下片2-1采用乳糖复合物(40LL)作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的硬度和脆碎度分别为72N和0.15％，脆碎度＜1％，说明说明所得舌下片的质量良好。

舌下片2-2采用微晶纤维素复合物(CE)作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的硬度和脆碎度分别为65N和0.10％，脆碎度＜1％，说明所得舌下片的质量良好。

舌下片2-3采用山梨醇(SI 150)作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的硬度和脆碎度分别为71N和0.28％，脆碎度＜1％，说明所得舌下片的质量良好。

舌下片2-4采用赤藓糖醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的硬度和脆碎度分别为74N和0.25％，脆碎度＜1％，说明所得舌下片的质量良好。

2)溶出度和崩解时限

舌下片1-1采用甘露醇(200SD)作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的崩解时限和溶出度分别为30s和98％，说明所得舌下片能够迅速崩解并释放药物，能够为黏膜吸收提供较高的浓度差，从而可迅速被吸收，进一步说明所得舌下片的质量良好。

舌下片2-1采用乳糖复合物(40LL)作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的崩解时限和溶出度分别为2min和65％，说明所得舌下片能够崩解并释放药物，能够为黏膜吸收提供略高的浓度差，从而可被吸收，进一步说明所得舌下片的质量较舌下片1-1显著降低。

舌下片2-2采用微晶纤维素复合物(CE)作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的崩解时限和溶出度分别为5min和54％，说明所得舌下片崩解并释放药物较慢，进一步说明所得舌下片的质量差，较舌下片1-1显著降低。

舌下片2-3采用山梨醇(SI 150)作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的崩解时限和溶出度分别为8min和45％，崩解时限大于5min，说明所得舌下片不能崩解并释放药物，进一步说明所得舌下片的质量差。

舌下片2-4采用赤藓糖醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的崩解时限和溶出度分别为9min和31％，崩解时限大于5min，说明所得舌下片不能崩解并释放药物，进一步说明所得舌下片的质量差。

3)体外黏膜渗透性

舌下片1-1采用甘露醇(200SD)作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的药物渗透量为86％，说明所得舌下片中有足够的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性良好。

舌下片2-1采用乳糖复合物(40LL)作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的药物渗透量为45％，说明所得舌下片中仅部分的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性较舌下片1-1显著降低。

舌下片2-2采用微晶纤维素复合物(CE)作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的药物渗透量为21％，说明所得舌下片中仅有少量的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性较差，较舌下片1-1显著降低。

舌下片2-3采用山梨醇(SI 150)作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的药物渗透量为39％，说明所得舌下片中仅有少量的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性较差，较舌下片1-1显著降低。

舌下片2-4采用赤藓糖醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的药物渗透量为25％，说明所得舌下片中仅有少量的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性较差，较舌下片1-1显著降低。

小结：

1、采用甘露醇(200SD)作为填充剂制备舌下片，所得舌下片质量良好，黏膜渗透性良好，具体表现在：

i.所得舌下片的硬度和脆碎度分别为62N和0.11％，脆碎度远小于1％，说明所得舌下片质量良好；

ii.所得舌下片的崩解时限和溶出度分别为30s和98％，崩解时限远小于5min，溶出度接近100％，说明所得舌下片能够迅速崩解并释放药物，进一步说明所得舌下片质量良好；

iii.所得舌下片的药物渗透量较高，为86％，说明所得舌下片中有足够的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性良好。

2、采用其他常用填充剂(例如实施例9中的乳糖复合物、微晶纤维素复合物、山梨醇、赤藓糖醇)制备舌下片，所得舌下片的黏膜渗透性较差，具体表现在：

i.所得舌下片的崩解时限和溶出度的范围分别为2～9min和31～65％，崩解时限较长，溶出度较小，说明所得舌下片不能够迅速崩解并释放药物，进一步说明所得舌下片质量较差；

ii.所得舌下片的药物渗透量较低，范围为21～45％，说明所得舌下片中有少量的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性较差。

结论分析10：改变填充剂用量

实施例8中舌下片1-1添加用量为65质量份的甘露醇(200SD)和组合物1制备舌下片，在此基础上考察不同用量的甘露醇(200SD)，对所得舌下片的影响，所得舌下片的质量属性检测结果如下：

10-1、舌下片组成的区别

表36

10-2、样品质量

表37

10-3、体外黏膜渗透性

表38

结论：

1)硬度和脆碎度

舌下片1-1采用用量为65质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的硬度和脆碎度分别为63N和0.11％，脆碎度＜1％，说明所得舌下片的质量良好。

舌下片3-1采用用量为55质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的硬度和脆碎度分别为80N和0.20％，脆碎度＜1％，说明所得舌下片的质量良好。

舌下片3-2采用用量为75质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的硬度和脆碎度分别为68N和0.14％，脆碎度＜1％，说明所得舌下片的质量良好。

舌下片3-3采用用量为85质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的硬度和脆碎度分别为81N和0.41％，脆碎度＜1％，说明所得舌下片的质量良好。

舌下片3-4采用用量为50质量份的甘露醇(200SD)作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的硬度和脆碎度分别为98N和0.14％，脆碎度＜1％，说明所得舌下片的质量良好。

2)溶出度和崩解时限

舌下片1-1采用用量为65质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的崩解时限和溶出度分别为30s和98％，说明所得舌下片能够迅速崩解并释放药物，能够为黏膜吸收提供较高的浓度差，从而可迅速被吸收，进一步说明所得舌下片的质量良好。

舌下片3-1采用用量为55质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的崩解时限和溶出度分别为72s和94％，说明所得舌下片能够崩解并释放药物，能够为黏膜吸收提供高的浓度差，从而可被吸收，进一步说明所得舌下片的质量良好。

舌下片3-2采用用量为75质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的崩解时限和溶出度分别为65s和91％，说明所得舌下片崩解并释放药物较慢，进一步说明所得舌下片的质量较差。

舌下片3-3采用用量为85质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的崩解时限和溶出度分别为2min和88％，崩解时限大于5min，说明所得舌下片不能崩解并释放药物，进一步说明所得舌下片的质量较差。

舌下片3-4采用用量为50质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的崩解时限和溶出度分别为4min和82％，崩解时限大于5min，说明所得舌下片不能崩解并释放药物，进一步说明所得舌下片的质量较差。

3)体外黏膜渗透性

舌下片1-1采用用量为65质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的药物渗透量最高，为86％，说明所得舌下片中有足够的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性良好。

舌下片3-1用量为55质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的药物渗透量较高，为71％，说明所得舌下片中有大部分的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性较好。

舌下片3-2采用用量为75质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的药物渗透量为75％，说明所得舌下片中有大部分的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性较好。

舌下片3-3采用用量为85质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的药物渗透量为62％，说明所得舌下片中仅有部分的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性较差。

舌下片3-4采用用量为50质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片的药物渗透量为52％，说明所得舌下片中仅有部分的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性较差。

小结：

1、采用用量为65质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片质量良好，黏膜渗透性良好，具体表现在：

ii.所得舌下片的崩解时限和溶出度分别为30s和98％，崩解时限远小于

5min，溶出度接近100％，说明所得舌下片能够迅速崩解并释放药物，进一步说明所得舌下片质量良好；

iii.所得舌下片的药物渗透量最高，为86％，说明所得舌下片中有足够的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性良好。

2、采用用量为55～75质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片质量良好，黏膜渗透性较好，具体表现在：

i.所得舌下片的硬度和脆碎度的范围分别为63～80N和0.11～0.20％，脆碎度小于1％，说明所得舌下片质量良好；

ii.所得舌下片的崩解时限和溶出度的范围分别为30～72s和91～98％，崩解时限远小于5min，溶出度接近100％，说明所得舌下片能够迅速崩解并释放药物，进一步说明所得舌下片质量良好；

iii.所得舌下片的药物渗透量较高，范围为71～86％，说明所得舌下片中有大部分的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性较好。

3、采用用量为50和85质量份的甘露醇作为填充剂制备舌下片，所得舌下片质量较好，黏膜渗透性较差，具体表现在：

i.所得舌下片的硬度和脆碎度的范围分别为81～98N和0.14～0.41％，脆碎度小于1％，说明所得舌下片质量良好；

ii.所得舌下片的崩解时限和溶出度的范围分别为2～4min和82～88％，崩解时限小于5min，说明所得舌下片能够崩解并释放药物，进一步说明所得舌下片质量较好；

iii.所得舌下片的药物渗透量较低，范围为21～45％，说明所得舌下片中有少量的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性较差。

结论分析11：本发明组合物与复合物、单体、红花黄色素

本发明组合物与复合物、单体、红花黄色素分别制备舌下片，所得舌下片的体外黏膜渗透性和样品质量结果如下：

11-1、舌下片组成的区别

表39

11-2、样品质量

表40

11-3、体外黏膜渗透性

表41

11-4、动物体内药动学

表42

药动学参数	舌下片1-1	舌下片5
			C_max(μg/L)	8.31±1.5	2.31±1.5
t_max(h)	2.17±0.98	1.51±0.98
			AUC_0-24(μg·h/L)	95.1±38.8	22.5±12.3
t_1/2(h)	7.26±2.95	3.79±2.86
			相对生物利用度	423％	-

结论：

1)硬度和脆碎度：

舌下片1-1采用组合物1制备舌下片，所得舌下片的硬度和脆碎度分别为63N和0.11％，脆碎度＜1％，说明所得舌下片的质量良好。

舌下片1-2采用组合物4-3制备舌下片，所得舌下片的硬度和脆碎度分别为68N和0.09％，脆碎度＜1％，说明所得舌下片的质量良好。

舌下片5采用HSYA单体制备舌下片，所得舌下片的硬度和脆碎度分别为61N和0.31％，脆碎度＜1％，说明所得舌下片的质量良好。

舌下片6采用HSYA-PC(磷脂复合物)制备舌下片，所得舌下片的硬度和脆碎度分别为60N和0.12％，脆碎度＜1％，说明所得舌下片的质量良好。

舌下片7采用红花黄色素制备舌下片，所得舌下片的硬度和脆碎度分别为66N和0.36％，脆碎度＜1％，说明所得舌下片的质量良好。

2)溶出度和崩解时限

舌下片1-1采用组合物1制备舌下片，所得舌下片的崩解时限和溶出度分别为30s和98％，崩解时限＜5min，溶出度接近100％，说明所得舌下片的质量良好。

舌下片1-2采用组合物4-3制备舌下片，所得舌下片的崩解时限和溶出度分别为99％和46s，崩解时限＜5min，溶出度接近100％，说明所得舌下片的质量良好。

舌下片5采用HSYA单体制备舌下片，所得舌下片的崩解时限和溶出度分别为26s和99％，崩解时限＜5min，溶出度接近100％，说明所得舌下片的质量良好。

舌下片6采用HSYA-PC(磷脂复合物)制备舌下片，所得舌下片的崩解时限和溶出度分别为12min和42％，崩解时限大于5min，溶出度远小于100％，说明所得舌下片的质量较差。

舌下片7采用红花黄色素制备舌下片，所得舌下片的崩解时限和溶出度分别为65s和95％，崩解时限＜5min，溶出度接近100％，说明所得舌下片的质量良好。

3)体外黏膜渗透性

舌下片1-1采用组合物1制备舌下片，所得舌下片的药物渗透量最高，为86％，说明所得舌下片中有大量的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性良好。

舌下片1-2采用组合物4-3制备舌下片，所得舌下片的药物渗透量较高，为68％，说明所得舌下片中有大部分药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性良好。

舌下片5采用HSYA单体制备舌下片，所得舌下片的药物渗透量极低，为12％，说明所得舌下片中仅有少量的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性较差。

舌下片6采用HSYA-PC(磷脂复合物)制备舌下片，所得舌下片的药物渗透量低，为23％，说明所得舌下片中仅有少量的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性较差。

舌下片7采用红花黄色素制备舌下片，所得舌下片的药物渗透量低，为15％，说明所得舌下片中仅有少量的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性较差。

4)动物体内药动学：

舌下片1-1采用组合物1制备舌下片，所得舌下片在24h内，HSYA的血药浓度－时间曲线显示，曲线下面积AUC_0-24为95.1±38.8μg·h/L，最大血药浓度为8.31±1.5μg/L，半衰期为7.26±2.95h，说明舌下片中HSYA的吸收好，在吸收部位驻留时间长，进一步说明，HSYA组合物给药的生物利用度高。

舌下片5采用HSYA单体制备舌下片，所得舌下片在24h内，HSYA的血药浓度－时间曲线显示，曲线下面积AUC_0-24仅为22.5±12.3μg·h/L，最大血药浓度为2.31±1.5μg/L，半衰期为3.79±2.86h，说明舌下片中HSYA的吸收差，在吸收部位驻留时间短，进一步说明，HSYA单体给药的生物利用度低。

小结：

1、采用本发明的组合物(例如，实施例1的组合物1和实施例4的组合物4-3)制备舌下片，所得舌下片的质量良好，黏膜渗透性良好，并且生物利用度高；具体表现在：

i.所得舌下片的硬度和脆碎度范围分别为63～68N和0.09～0.11％，脆碎度小于1％，说明所得舌下片质量良好；

ii.所得舌下片的崩解时限和溶出度范围分别为30～46s和98～99％，崩解时限远小于5min，溶出度接近100％，说明所得舌下片能够迅速崩解并释放药物，进一步说明所得舌下片质量良好；

iii.所得舌下片的药物渗透量最高，为68～86％，说明所得舌下片中有大量的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性良好；

iv.采用HSYA单体所得舌下片的生物利用度较低，曲线下面积AUC_0-24为95.1±38.8μg·h/L；采用HSYA组合物所得舌下片的生物利用度明显增高，曲线下面积AUC_0-24为95.1±38.8μg·h/L，相对生物利用度为423％。

2、采用HSYA单体HSYA-PC(磷脂复合物)或红花黄色素制备舌下片，所得舌下片的黏膜渗透性良好较差，具体表现在：

i.采用磷脂复合物所得舌下片的崩解时限和溶出度分别为12min和42％，崩解时限远大于5min，溶出度远小于100％，说明所得舌下片不能够迅速崩解并释放药物，进一步说明所得舌下片质量较差；

ii.所得舌下片的药物渗透量较低，范围为12～23％，说明所得舌下片中仅有少量的药物能够被吸收，进一步说明所得舌下片的黏膜渗透性较差。

Claims

1.一种经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素A组合物，包括药物活性成分和功能性非活性成分；

所述药物活性成分包括羟基红花黄色素A(HSYA)；

2.根据权利要求1所述的一种经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素A组合物，其中，所述表面活性剂选自以下中的任意一种或多种：十二烷基麦芽糖苷(DDM)、脱氧甘胆酸钠(SDGC)、N-[8-(2-羟基苯甲酰基)氨基]辛酸钠(SNAC)、十二烷基硫酸钠(SDS)、聚山梨酯80(TW80)；优选为十二烷基麦芽糖苷(DDM)。

3.根据权利要求1所述的一种经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素A组合物，其中，所述黏膜黏附聚合物选自以下中的任意一种或多种：硫醇化壳聚糖(CS-SH/TCS)、氨基葡聚糖(Dextran-NH₂)、聚赖氨酸(PLL)、海藻酸钠(SA，CR8133)；优选为硫醇化壳聚糖(CS-SH/TCS)。

4.根据权利要求1所述的一种经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素A组合物，其中，所述药物活性成分、表面活性剂、黏膜黏附聚合物的质量份为18～22份：0.2～0.3份：8～12份；

优选地，20份：0.3份：10份。

5.根据权利要求1～4任一项所述的一种经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素A组合物，其中，包括羟基红花黄色素A、十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖；

按质量份计，三者用量比为，羟基红花黄色素A：十二烷基麦芽糖苷：硫醇化壳聚糖＝18～22份：0.2～0.3份：8～12份。

6.根据权利要求1～4任一项所述的一种经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素A组合物，其中，包括羟基红花黄色素A、十二烷基麦芽糖苷和硫醇化壳聚糖；

按质量份计，三者用量比为，羟基红花黄色素A：十二烷基麦芽糖苷：硫醇化壳聚糖＝20份：0.3份：10份。

7.一种包含前述任一项权利要求所述组合物的药物制剂，其包括片剂、缓释微丸、固体分散体、囊泡、软胶囊、自微乳、半固体胶囊，优选为舌下片剂。

8.一种的舌下片剂，其包括权利要求1～6任一项所述的经口腔黏膜给药的羟基红花黄色素A组合物，还包括填充剂和/或润滑剂。

9.根据权利要求8所述舌下片剂，其中，所述填充剂选自以下中的任意一种或多种：甘露醇、山梨醇、赤藓糖醇、乳糖、蔗糖；优选为甘露醇。

10.根据权利要求8或9所述舌下片剂，其中，所述甘露醇的用量为55～75质量份，优选为65质量份。

11.根据权利要求8所述舌下片剂，其中，所述润滑剂选自以下中的任意一种或多种：硬脂酸镁、山嵛酸甘油酯、二氧化硅、硬脂富马酸钠；优选为硬脂酸镁。

12.根据权利要求8或11所述舌下片剂，其中，所述的润滑剂用量为0.2～2质量份，优选为0.6质量份。

13.一种权利要求8～12任一项所述舌下片剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)将硫醇化壳聚糖溶解于水中，搅拌溶解；

(4)将组合物与甘露醇、硬脂酸镁混合均匀，压片。

14.根据权利要求13所述舌下片剂的制备方法，其中，所述步骤(1)和/或(2)的搅拌温度为30～40℃。

15.根据权利要求13所述舌下片剂的制备方法，其中，所述步骤(3)的干燥温度为85～95℃。

16.根据权利要求13所述舌下片剂的制备方法，其中，所述步骤(3)的喷液速度为10L/h。

17.根据权利要求13所述舌下片剂的制备方法，其中，所述步骤(3)制得颗粒的粒度过30目筛。