CN118005728B - 一种抗光老化多肽及其应用 - Google Patents
一种抗光老化多肽及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN118005728B CN118005728B CN202410204837.1A CN202410204837A CN118005728B CN 118005728 B CN118005728 B CN 118005728B CN 202410204837 A CN202410204837 A CN 202410204837A CN 118005728 B CN118005728 B CN 118005728B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- polypeptide
- photoaging
- tyr
- ser
- trp
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 60
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 58
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 title claims abstract description 57
- 206010051246 Photodermatosis Diseases 0.000 title claims abstract description 45
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims abstract description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 5
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 22
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 abstract description 14
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 abstract description 14
- 239000012634 fragment Substances 0.000 abstract description 6
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 abstract description 4
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 abstract description 4
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 abstract description 4
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000012598 cell culture matrix Substances 0.000 abstract description 3
- 210000001339 epidermal cell Anatomy 0.000 abstract description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 3
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 abstract description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 abstract 1
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 9
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 9
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 9
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 8
- 230000008845 photoaging Effects 0.000 description 7
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 7
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 5
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 description 5
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 125000004213 tert-butoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(O*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000009759 skin aging Effects 0.000 description 3
- JAUKCFULLJFBFN-VWLOTQADSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-[4-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]phenyl]propanoic acid Chemical compound C1=CC(OC(C)(C)C)=CC=C1C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 JAUKCFULLJFBFN-VWLOTQADSA-N 0.000 description 2
- WSGCRSMLXFHGRM-DEVHWETNSA-N (2s)-2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s,3r)-2-[[(2s,3r)-2-[[(2s)-6-amino-2-(hexadecanoylamino)hexanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WSGCRSMLXFHGRM-DEVHWETNSA-N 0.000 description 2
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 2
- -1 superoxide anions Chemical class 0.000 description 2
- REITVGIIZHFVGU-IBGZPJMESA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](COC(C)(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 REITVGIIZHFVGU-IBGZPJMESA-N 0.000 description 1
- ADOHASQZJSJZBT-SANMLTNESA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-[1-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]indol-3-yl]propanoic acid Chemical compound C12=CC=CC=C2N(C(=O)OC(C)(C)C)C=C1C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 ADOHASQZJSJZBT-SANMLTNESA-N 0.000 description 1
- BUBGAUHBELNDEW-SFHVURJKSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-4-methylsulfanylbutanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 BUBGAUHBELNDEW-SFHVURJKSA-N 0.000 description 1
- QWXZOFZKSQXPDC-NSHDSACASA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 QWXZOFZKSQXPDC-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- LZOLWEQBVPVDPR-VLIAUNLRSA-N (2s,3r)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]butanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H]([C@H](OC(C)(C)C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 LZOLWEQBVPVDPR-VLIAUNLRSA-N 0.000 description 1
- XXMFJKNOJSDQBM-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-trifluoroacetic acid;hydrate Chemical compound [OH3+].[O-]C(=O)C(F)(F)F XXMFJKNOJSDQBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxybenzothiazole Chemical compound C1=CC=C2SC(O)=NC2=C1 YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JDDWRLPTKIOUOF-UHFFFAOYSA-N 9h-fluoren-9-ylmethyl n-[[4-[2-[bis(4-methylphenyl)methylamino]-2-oxoethoxy]phenyl]-(2,4-dimethoxyphenyl)methyl]carbamate Chemical compound COC1=CC(OC)=CC=C1C(C=1C=CC(OCC(=O)NC(C=2C=CC(C)=CC=2)C=2C=CC(C)=CC=2)=CC=1)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 JDDWRLPTKIOUOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000723347 Cinnamomum Species 0.000 description 1
- 208000003351 Melanosis Diseases 0.000 description 1
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000012641 Pigmentation disease Diseases 0.000 description 1
- 206010040954 Skin wrinkling Diseases 0.000 description 1
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 235000017803 cinnamon Nutrition 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 230000037319 collagen production Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 239000000686 essence Substances 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 230000022244 formylation Effects 0.000 description 1
- 238000006170 formylation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 1
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 description 1
- 125000001312 palmitoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 125000000864 peroxy group Chemical group O(O*)* 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 1
- 230000003334 potential effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000007665 sagging Methods 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000009758 senescence Effects 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 230000036548 skin texture Effects 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 1
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/16—Emollients or protectives, e.g. against radiation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/18—Antioxidants, e.g. antiradicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
- A61Q17/04—Topical preparations for affording protection against sunlight or other radiation; Topical sun tanning preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/004—Aftersun preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
- A61K2800/52—Stabilizers
- A61K2800/522—Antioxidants; Radical scavengers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Birds (AREA)
- Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本发明属于生物医药技术领域，具体公开了一种抗光老化多肽，所述抗光老化多肽具有‑Tyr‑Trp‑Leu‑Ser‑Thr‑特征片段；该特征片段位于多肽序列的氨基端、羧基端或多肽肽序中间任一位置；其中，‑Tyr‑Trp‑Leu‑Ser‑Thr‑特征片段的氨基酸组成各自独立地选自其对应的D型氨基酸，或相应的N‑甲基化氨基酸。本发明通过细胞实验发现，所述多肽能显著抑制光诱导的HaCaT人永生化表皮细胞的活性氧释放，表明本发明的化学合成多肽具有潜在的抗光老化功效；同时所述多肽具有细胞毒性弱，抗氧化的作用，在护肤品、化妆品和细胞培养基质中具有广阔的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，尤其涉及一种抗光老化多肽及其应用。
背景技术
根据中国香精香料化妆品工业协会发布数据表明，目前女性最关心、最热门的项目服务依次是：抗衰老保养、祛斑与增白。其中，抗衰老提及率达72.2％，从抗衰老消费人群的基本属性上可以看到，目前以女性消费群体为主，占比高达72％。随着抗衰理念逐步年轻化，抗衰消费者年龄结构向两端延伸，对抗不同等级衰老症状的需求将持续增长。皮肤衰老是指皮肤组织在内外环境的不断作用下细胞结构和功能发生退化，出现皮肤质地改变(如弹性、张力等)、色素改变、血管萎缩或增生的生理现象，通常分为内源性老化(自然老化)和外源性老化(光老化等)。
阳光对皮肤的影响是深远的，被认为占外源性皮肤老化的90％。周期性和持续暴露于紫外线(UV)辐射是导致皮肤老化的经典和关键因素，称为光老化。光老化的特征是皱纹、炎症、色素沉着、下垂和干燥。虽然UVB仅占总紫外线辐射的一小部分，但它在损伤皮肤表皮和真皮方面最活跃。一些研究报告了UVB照射会增加细胞内活性氧(ROS)，例如超氧阴离子，羟基自由基和过氧化氢。ROS刺激各种信号通路并启动生物过程，包括细胞死亡、细胞衰老和炎症。目前有不少肽分子已被发现具有很好的抗氧化活性，但具有抗光老化多肽仍很少。
发明内容
有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种抗光老化多肽，能显著抑制光诱导的HaCaT人永生化表皮细胞的活性氧释放，具有潜在的抗氧化和促进胶原蛋白再生的功效。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：提供了一种抗光老化多肽，其特征在于：所述抗光老化多肽具有-Tyr-Trp-Leu-Ser-Thr-特征片段，该特征片段位于多肽序列的氨基端、羧基端或多肽肽序中间任一位置；其中，-Tyr-Trp-Leu-Ser-Thr-特征片段的氨基酸组成各自独立地选自其对应的D型氨基酸，或相应的N-甲基化氨基酸。
进一步地，所述抗光老化多肽氨基端的氨基修饰有乙酰化、甲酰化或甲磺酰化形成的酰胺键。
进一步地，所述抗光老化多肽羧基端的修饰方式为氨基酸的羧基端酰胺化或酯化。
进一步地，所述抗光老化多肽包括Tyr-Ser-Tyr-Trp-Leu-Ser-Thr-Pro-Glu-Met氨基酸序列。
进一步地，所述抗光老化多肽包括Ser-Tyr-Trp-Leu-Ser-Thr-Pro-Glu氨基酸序列。
进一步地，所述抗光老化多肽包括Asn-Asp-Tyr-Ser-Tyr-Trp-Leu-Ser-Thr-Pro氨基酸序列。
进一步地，一种抗光老化多肽在制备具有抗光老化作用的药物和/或化妆品中的应用；
和/或一种抗光老化多肽在制备用于防氧化损伤疾病的药物和/或化妆品中的应用；
和/或一种抗光老化多肽在制备抗紫外辐射、抗氧化和/或抗衰老的药物和/或化妆品中的应用。
在本发明提供的一些具体的实施方案中，将市售的多肽与Tyr-Trp-Leu-Ser-Tyr-Pro-Glu-Met-Ala-Met-NH2在抗光老化试验中均进行了HaCaT细胞UVB辐射处理，结果发现市售多肽的ROS释放显著高于未处理组别，而应用H-Tyr-Trp-Leu-Ser-Tyr-Pro-Glu-Met-Ala-Met-NH2处理后发现其具有显著抑制ROS释放活性。
进一步地，一种抗光老化多肽在制备用于细胞修复和/或促进细胞胶原生成的药物、化妆品或细胞培养基质中的应用。
在本发明提供的一些具体的实施方案中，将所述多肽添加到细胞培养基中，测定多肽处理后被UVB辐射细胞的ROS释放量，结果表明所述多肽均表现出显著抑制ROS释放的能力，表明所述多肽具有潜在抗光老化的作用。
进一步地，一种抗光老化多肽在制备用于皮肤光老化损伤的组织再生和修复的产品中的应用。
在本发明提供的一些具体的实施方案中，通过对多肽分子库的实体筛选测试，获取具有高抗光老化活性的多肽，通过光老化细胞模型的复测，筛选出具有高活性的抗光老化多肽如序列：H-Tyr-Trp-Leu-Ser-Tyr-Pro-Glu-Met-Ala-Met-NH2。
具体的，本发明中所述氧化包括并不限于活性氧(ROS)，包括超氧化物(O2·-)、羟基(HO·)、过氧(ROO·)、烷氧基(RO·)和一氧化氮(NO·)。
进一步地，本发明中所述的多肽是指由氨基酸通过肽键相连构成的一类化合物，是不限制氨基酸数目的产物。
本发明中所述的抗光老化多肽为合成多肽，可按照本领域技术人员通用的化学合成方法进行合成即可。
进一步地，本发明采用固相合成的方法制备上述的抗光老化多肽。
进一步地，在本发明提供的一些具体的实施例中，根据抗光老化多肽的氨基酸序列，使用多肽合成仪合成。
本发明公开提供的一种抗光老化多肽及其应用，具有如下有益效果：
(1)本发明通过细胞实验发现，所述抗光老化多肽均能显著抑制光诱导的HaCaT人永生化表皮细胞的活性氧释放，表明本发明的化学合成多肽具有潜在的抗氧化和促进胶原蛋白再生的功效；同时所述多肽具有细胞毒性弱，抗光老化的作用，在护肤品、化妆品和细胞培养基质中具有广阔的应用前景。
(2)本发明提供的多肽可以抑制受到UVB辐射的细胞中ROS的释放，从而减少细胞损伤，并且该多肽为合成多肽，具有稳定性好，细胞毒性弱，易制备等优点，在制备具有抗光老化功效的护肤品中具有广阔的应用前景。
附图说明
图1为本发明实施例2中得到的分子5的质谱和高效液相色谱图；
图2为本发明实施例3中得到的分子6的质谱和高效液相色谱图；
图3为本发明实施例4中抗光老化实验结果图；
图4为本发明实施例5中细胞毒性实验结果图；
图5为本发明实施例6中抗光老化凋亡实验结果图。
具体实施方式
本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。下面通过具体实施例，对本发明的技术方案作进一步的具体说明。
本发明中，若非特指，所采用的原料和设备等均可从市场购得或是本领域常用的。下述实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域的常规方法。
实施例1：
在本发明提供的一些具体的实施方案中，所述抗光老化多肽具有如分子1～分子22中任一项所示的氨基酸序列：
实施例2：合成分子5(Tyr-Trp-Leu-Ser-Thr-Pro-Glu-Met-Ala-Met-NH2)
步骤一：合成H-Tyr(tBu)-Trp(Boc)-Leu-Ser(tBu)-Thr(tBu)-Pro-Glu(OtBu)-Met-Ala-Met-MBHA树脂5
脱Fmoc保护基团：将Rink Amide MBHA Resin(0.68mmol/g，1.47g)用DCM(20mL)在多肽合成管中25℃±5℃条件下溶胀15分钟，排干溶剂，加入哌啶/DMF(体积比1/4，20mL)，25℃±5℃下反应5分钟，抽干，再次加入哌啶/DMF(体积比1/4，20mL)25℃±5℃下反应10分钟。反应完成排干反应液，并用DMF(20mL)洗涤6次，排干等待下一步反应。
偶联氨基酸：将HOBT(271mg，2mmol)、HBTU(762mg，2mmol)和DIEA(516mg，4mmol)分别加入Fmoc-Met-OH(740mg，2mmol)的DMF(20mL)溶液中，冰浴下活化反应10分钟；活化完成后将活化液加入上述制备的树脂中，室温条件下反应1小时；排干反应液，用DMF(20mL)洗涤树脂6次，得到Fmoc-Met-树脂5。
重复以上操作逐个依次偶联氨基酸Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Met-OH、Fmoc-Glu(OtBu)
-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH得到Fmoc-Tyr(tBu)-Trp(Boc)-Leu-Ser(tBu)-Thr(tBu)-Pro-Glu(OtBu)-Met-Ala-Met-MBHA树脂5。
脱Fmoc保护基：向上述制备的树脂中加入哌啶/DMF(体积比1/4，20mL)，25℃±5℃下反应5分钟，抽干，再次加入哌啶/DMF(体积比1/4，20mL)25℃±5℃下反应5分钟。反应完成排干反应液，并用DMF(20mL)洗涤6次，再用DCM(20mL)和MeOH(20mL)交替洗涤2次，最后用MeOH(5mL)洗涤两次；将得到的树脂在真空干燥箱中30℃下干燥3h，得到H-Tyr(tBu)-Trp(Boc)-Leu-Ser(tBu)-Thr(tBu)-Pro-Glu(OtBu)-Met-Ala-Met-MBHA树脂5(2.8g)。
步骤二：合成H-Tyr-Trp-Leu-Ser-Thr-Pro-Glu-Met-Ala-Met-NH2(分子5)
将上述制备的H-Tyr(tBu)-Trp(Boc)-Leu-Ser(tBu)-Thr(tBu)-Pro-Glu(OtBu)-Met-Ala-Met-MBHA树脂5(2.8g)和TFA:TIS:H2O(体积比95:2.5:2.5，28mL)混合溶液分别加入100mL反应瓶中，25℃±5℃条件下反应3h；反应结束后过滤，并用10mL的TFA洗涤三次，合并溶液并浓缩到5mL左右；将浓缩液滴加入50mL的甲基叔丁基醚中，在冰浴下沉降30分钟，离心，并用甲基叔丁基醚(30mL)洗涤3次，将固体放入真空干燥箱中干燥过夜，得到白色固体1.1g，直接通过Pre-HPLC纯化得到纯化液，浓缩并冻干，得到白色固体104.7mg，纯度98.6％。
利用高效液相色谱对实施例1中得到的分子5进行分析，得到其HPLC谱图如图1所示，色谱条件如下：
仪器型号为Agilent 1200，色谱桂为Sepax HP-C18,4.6*50mm*3um
flow:1ml/min,buffer A:0.1％TFA-H2O,buffer B:ACN,B％:5％(4min)→90％→(5min)90％→(5.01)5％→7min→5％。
利用质谱对实施例1中得到的分子5进行分析，得到MS(ESI):m/z(M+2H+)/2＝614.5、M+H+＝1227.6、M+Na+＝1249.8、(M+Na++H+)/2＝625.5；
实施例3：合成分子6(Tyr-Trp-Leu-Ser-Thr-Pro-Glu-met-Pro-Ala-NH2)
通过实施例2方法合成分子6，得到白色固体104.7mg，纯度98.7％。
利用质谱对分子6进行分析，得到(M+2H+)/2＝597.3，M+H+＝1193.8，(M+Na++H+)/2＝608.4，(M+2Na+)/2＝619.3。
碳端末端为酰胺的化合物(如分子1～分子22)的制备方法均与实施例2制备方法一致。
实施例4：抗光老化功效测试
取对数生长HaCaT细胞接种到黑边透明底的96孔板中，达到每孔3×104个细胞，在完全培养基(4.5ml FBS(Sigma-F8318)+45ml MEM基础培养基(gibco-C11095500BT)+0.5ml青霉素-链霉素溶液(Biosharp-BL505A))环境下置于37℃、5％CO2浓度的二氧化碳培养箱中培养24h。弃去旧培养基，每孔加入100μL的PBS，将板移至UVB设备下方辐照105mJ后，Control组(即空白未处理)，模型组(UVB辐射组)弃去液体更换空白基础培养基，待辐射完成后其他孔加入含梯度浓度分子5、6的基础培养基(MEM基础培养基(gibco-C11095500BT))培养24h，分子5的浓度从3.12μM到200μM稀释6个浓度，分子6的浓度从0.78μM到100μM稀释8个浓度，阳性参照药为棕榈酰五肽-4。预先配置1:1000稀释DCFH-DA，弃去液体，装载探针后，将96孔板放入培养箱中，孵育40min；PBS清洗4次，每次3min(振荡仪中低速振荡)；换上新PBS后用酶标仪检测495nm处信号值，。结果如图所示，在测试浓度下，多肽分子5、6显著抑制UVB诱导的ROS释放(P<0.01)，表明所述多肽具有与棕榈酰五肽-4相当的抗光老化功效。
实施例5：细胞毒性测试
取对数生长HaCaT细胞接种到黑边透明底的96孔板中，达到每孔3×104个细胞，在完全培养基(4.5ml FBS(Sigma-F8318)+45ml MEM基础培养基(gibco-C11095500BT)+0.5ml青霉素-链霉素溶液(Biosharp-BL505A))环境下置于37℃、5％CO2浓度的二氧化碳培养箱中培养24h。弃去旧培养基，每孔加入100μL的PBS，Control组(即空白未处理)，其他孔加入含化学合成多肽分子5、6的基础培养基(MEM基础培养基(gibco-C11095500BT))，多肽分子5剂量从0.32μM到200μM稀释5个浓度，分子6的剂量从0.012μM到1mM稀释8个浓度，培养24h。取出待检测的96孔板，室温平衡10min；每孔加入100μL的celltiter溶液，振荡器振荡2min，振荡完成后静置10min；用酶标仪检测，得到细胞活性测试结果如图所示，多肽分子5、6在200μM下对细胞活力无影响，证明其在实施例3中的抑制ROS结果并非由细胞毒性导致，表明多肽分子5、6的安全性较高。
实施例6：光老化凋亡实验
取对数生长HaCaT细胞接种到黑边透明底的孔板中，达到每孔3×104个细胞，在完全培养基(4.5ml FBS(Sigma-F8318)+45ml MEM基础培养基(gibco-C11095500BT)+0.5ml青霉素-链霉素溶液(Biosharp-BL505A))环境下置于37℃、5％CO2浓度的二氧化碳培养箱中培养24h。弃去旧培养基，每孔加入100μL的PBS，将板移至UVB设备下方辐照105mJ后，Control组(即空白未处理)，模型组(UVB辐射组)弃去液体更换空白基础培养基，待辐射后其他孔加入含多肽分子5、6的基础培养基(MEM基础培养基(gibco-C11095500BT))，分子5的剂量0.064μM到200μM稀释6个浓度，分子6的剂量从3μM到200μM稀释7个浓度，培养24h。取出待检测的96孔板，室温平衡10min；每孔加入100μL的celltiter溶液，振荡器振荡2min，振荡完成后静置10min；用酶标仪检测，得到细胞活性测试结果。如图所示，UVB诱导会产生细胞凋亡，但多肽分子5、6在测试浓度下无加剧凋亡作用，证明其在实施例3中的抑制ROS结果并非由细胞凋亡导致，同时佐证实施例4中多肽分子5、6安全性较高的结论。
通过以上实施例数据得出，多肽分子5、6具有可比拟棕榈酰五肽的抗氧化作用、还兼具低毒、对损伤细胞无诱导凋亡的效果。此类分子可用于细胞抗光老化的药品或化妆品、细胞修复的药品或化妆品(护肤品)或细胞培养基质、药品或化妆品(护肤品)或细胞培养基质和皮肤光老化损伤的组织再生和修复方面的产品中的应用。
本领域技术人员应该理解，尽管参照上述实施例对本发明进行了具体的描述，但是本发明并不限于这些具体的实施例。基于本发明所教导的方法和技术方案，在不背离本发明的精神的前提下，本领域技术人员能够进行适当的修改或改进，由此所得的等价实施方案都在本发明的保护范围内。
Claims (2)
1.一种抗光老化多肽，其特征在于：所述抗光老化多肽的氨基酸序列为H-Tyr-Trp-Leu-Ser-Thr-Pro-Glu-Met-Ala-Met-NH2；
H-Tyr-Trp-Leu-Ser-Thr-Pro-Glu-D-Met-Pro-Ala-NH2中的任意一个。
2.一种如权利要求1所述的抗光老化多肽在制备具有抗光老化作用的药物和/或化妆品中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202410204837.1A CN118005728B (zh) | 2024-02-26 | 2024-02-26 | 一种抗光老化多肽及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202410204837.1A CN118005728B (zh) | 2024-02-26 | 2024-02-26 | 一种抗光老化多肽及其应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN118005728A CN118005728A (zh) | 2024-05-10 |
| CN118005728B true CN118005728B (zh) | 2025-04-15 |
Family
ID=90950036
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202410204837.1A Active CN118005728B (zh) | 2024-02-26 | 2024-02-26 | 一种抗光老化多肽及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN118005728B (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113332422A (zh) * | 2013-08-13 | 2021-09-03 | 西北大学 | 肽缀合颗粒 |
| CN117720619A (zh) * | 2023-05-16 | 2024-03-19 | 杭州禾泰健宇生物科技有限公司 | 一种多肽、抗光老化多肽及其应用 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2046819B1 (en) * | 2006-07-21 | 2015-03-18 | Novozymes, Inc. | Methods of increasing secretion of polypeptides having biological activity |
| WO2008153429A2 (en) * | 2007-06-11 | 2008-12-18 | Uniwersytet Jagiellonski | A protease from staphylococcus aureus, particularly spia or spib, peptides it recognises and their use |
| CN117247427B (zh) * | 2023-05-16 | 2024-08-23 | 杭州禾泰健宇生物科技有限公司 | 一种肽类化合物、组合物及其应用 |
-
2024
- 2024-02-26 CN CN202410204837.1A patent/CN118005728B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113332422A (zh) * | 2013-08-13 | 2021-09-03 | 西北大学 | 肽缀合颗粒 |
| CN117720619A (zh) * | 2023-05-16 | 2024-03-19 | 杭州禾泰健宇生物科技有限公司 | 一种多肽、抗光老化多肽及其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN118005728A (zh) | 2024-05-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5878761B2 (ja) | 皮膚、粘膜、および／または頭皮の治療および／またはケアに用いられるペプチド、ならびに、美容または医薬組成物におけるその使用 | |
| CN104968360B (zh) | 用于治疗和/或护理皮肤、毛发和/或粘膜的化合物以及它们的化妆美容或药物组合物 | |
| AU2008327932B2 (en) | Compositions for reducing oxidative stress and uses thereof | |
| CN114790228B (zh) | 一种抗皮肤衰老环六肽类化合物及其制备方法 | |
| KR101744594B1 (ko) | 항노화, 항산화, 또는 항염 효능을 갖는 누에고치 유래의 펩타이드 또는 펩타이드 유도체를 함유하는 피부외용제 및 화장료 조성물 | |
| CN117327150B (zh) | 肽及其组合物和用途 | |
| CN117247427A (zh) | 一种肽类化合物、组合物及其应用 | |
| KR102506219B1 (ko) | 화장품에 사용하기 위한 펩타이드 및 조성물 | |
| KR101573745B1 (ko) | 콜라겐 합성 촉진 펩타이드, 이의 제조방법, 및, 이를 함유하는 조성물 | |
| KR101763933B1 (ko) | 페놀릭산 유도체 및 이를 포함하는 화장품 조성물 | |
| KR20120017827A (ko) | 니코티노일 펩타이드 유도체 및 그를 포함하는 화장료 조성물 | |
| CN118005728B (zh) | 一种抗光老化多肽及其应用 | |
| CN112300249B (zh) | 一种乌发生发肽及其制备方法和应用 | |
| CN118126127A (zh) | 一种修复环肽及其制备方法与应用 | |
| CN117720619B (zh) | 一种多肽、抗光老化多肽及其应用 | |
| KR20180108974A (ko) | 피부 노화 방지 및 피부 주름 예방용 펜타펩타이드와 펜타펩타이드 다이머의 제조방법과 이를 포함하는 화장료 조성물 | |
| EP2420511A1 (en) | Peptide having activity of transforming growth factor and production method therefor | |
| CN118146299B (zh) | 环肽及其组合物和用途 | |
| KR101410897B1 (ko) | 리포산-ｐｅｇ-펩티드 유도체, 이의 제조방법, 및 이를 포함하는 미백 또는 주름개선용 화장료 조성물 | |
| CN118063547A (zh) | 环八肽及其组合物和用途 | |
| KR102660375B1 (ko) | PGC-1α 유래 펩타이드 유도체 및 그를 포함하는 화장료 조성물 | |
| CN114230633A (zh) | 具有修复氧化应激损伤的多肽及其制备方法与应用 | |
| CN120441656B (zh) | 一种活性多肽及其组合物和用途 | |
| CN118206619B (zh) | 环九肽及其组合物和用途 | |
| CN112876535B (zh) | 生物活性多肽及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |