CN117958077A - 一株北方寒地羊肚菌wz-23及其子实体的栽培方法 - Google Patents
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Abstract
一株北方寒地羊肚菌WZ‑23及其子实体的栽培方法，本发明涉及一株北方寒地羊肚菌WZ‑23及其子实体的栽培方法。本发明的目的是为了解决现有羊肚菌在低温条件下产量较低的问题，本发明一株北方寒地羊肚菌WZ‑23为三地羊肚菌Morchella eohespera WZ‑23，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是中国武汉市武汉大学，保藏日期是2023年12月5日，保藏编号为CCTCC NO:M 20232465。本发明筛选的菌株解决了北方寒地地区一直以来因主栽品种为南方品种出现的产量和性状不稳定现象。本发明应用于食用菌领域。
Description
技术领域
本发明涉及一株北方寒地羊肚菌WZ-23及其子实体的栽培方法。
背景技术
羊肚菌(Morchella esculenta(L.)Pers.)，隶属于真菌的子囊菌亚门盘菌目羊肚菌科羊肚菌属，是世界公认的珍稀食药用菌。羊肚菌喜低温高湿环境，在世界各地均有分布，我国主要产地在云南、广东、福建等地。羊肚菌味道鲜美，口感独特，富含蛋白质和多种人体必需氨基酸，脂肪含量低，是一种高档食材。同时，羊肚菌也具有重要的药用价值，我国古代中医著作《本草纲目》中就有“味甘寒，性平，无毒，益肠胃，化痰理气”的记载。羊肚菌中富含的硒和多种生物活性物质，能够抑制肿瘤细胞的生长和扩散，具有抗肿瘤和增强免疫力的作用。如今，随着人们对羊肚菌功效了解的加深，羊肚菌已作为一种高端补品，在市场上广受欢迎。
羊肚菌野生资源稀少，全国多地均有种植。目前，我国羊肚菌种植所用菌种多是由南方野生羊肚菌驯化而来的六妹羊肚菌和梯棱羊肚菌菌株。但这两种南方主栽品种在气温较低的北方，尤其是黑龙江等寒地地区，常会出现产量和性状不稳定的现象，即使生长比较好的幼菇，也常会出现死菇和畸形菇，严重制约了羊肚菌产业在北方寒地的发展。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有羊肚菌在低温条件下产量较低的问题，提供一株北方寒地羊肚菌WZ-23及其子实体的栽培方法。
本发明一株北方寒地羊肚菌WZ-23为三地羊肚菌(Morchella eohespera)WZ-23，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是中国武汉市武汉大学，保藏日期是2023年12月5日，保藏编号为CCTCC NO:M 20232465。
本发明于纬度：47.754610，经度：132.643900的黑龙江省同江市采集得到北方寒地羊肚菌野生菌株BF2020，经多孢分离、菌丝纯化后得到WZ-23菌株。
WZ-23的形态学鉴定：子实体健壮期，高4～10cm，宽3～6cm；菌盖呈黑色，圆顶，卵形至椭圆形、近球型形，表面有羊肚纹状脉络，脉络明显，横纵棱交叉形成明显凹坑，菌盖底部与菌柄相衔接，交界处凹陷明显；柄短，中空，圆柱形，白色，表面光滑。柄基部膨大，上有不规则凹槽。子囊为八孢子子囊。搜集整理羊肚菌属种类的相关资料，发现本发明菌株WZ-23形态特征与三地羊肚菌形态特征一致，初步将WZ-23鉴定为三地羊肚菌。
对WZ-23菌株的DNA进行提取，利用ITS1与ITS4为引物进行扩增，(ITS1：5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’；ITS4：5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’)，PCR扩增后的结果通过琼脂凝胶电泳进行检测，PCR产物用AxyPrep DNA凝胶回收试剂盒进行回收，由南京派森诺基因科技有限公司进行测序，用NCBI BLAST工具将得到DNA序列信息与NCBI核酸数据库中的数据进行比对，发现WZ-23的ITS序列与三地羊肚菌ITS序列的相似度高达99.86％，说明本发明WZ-23菌株在分类上很可能属于羊肚菌属三地羊肚菌。在比对结果中选择相似度高的序列进行下载，利用MEGA 11.0软件建立起系统发育树，结合BLAST与系统发育树结果将其鉴定为三地羊肚菌，最终命名为Morchella eohespera WZ-23。
本发明的北方寒地羊肚菌WZ-23子实体的栽培方法按以下步骤进行：
一、母种制备：将母种培养基装入试管中，然后灭菌，再凝成斜面备用；无菌环境下降将羊肚菌WZ-23菌块接种到斜面试管中，培养温度为16～18℃，制得WZ-23母种；
二、原种生产：在无菌条件下将WZ-23母种接种到原种培养基上，进行培养，培养温度为18～20℃，相对湿度≤40％，避光管理，制得WZ-23原种；
三、栽培种生产：在无菌条件下将WZ-23原种接种到栽培种培养基上，进行培养，培养温度为18～20℃，相对湿度≤40％，避光管理，制得WZ-23栽培种；
四、整地做畦：播种前清除大棚地面杂草，畦床宽100～120cm，高15～20cm，间距25～30cm，表面平整；
五、播种与覆土：播种前土壤湿度调节至25～30％，播种栽培种，播种后喷雾状水，覆膜；
六、发菌管理：调控棚内温度10～18℃，空间相对湿度65～70％，暗光培养；
七、营养包的摆放：当畦床表面出现白色菌丝体时，摆放营养包，摆放密度为5～6袋/m2，覆膜；
八、催菇管理：大棚栽培，播种后45～60d，喷水，越冬结束后，去除畦床上的地膜，移除营养袋，喷水；
九、出菇管理：棚内温度控制在10～18℃，地温控制在8～16℃；空气相对湿度85～95％，畦床土壤湿度25～30％；每天光照时长4～6h；
十、采收。
本发明的有益效果：
1、本发明WZ-23有很好的低温适应性，适应寒地栽培。WZ-23菌丝体的适宜培养温度为16～18℃，低于一般羊肚菌菌丝体20～25℃的适宜培养温度。在12℃的寒地栽培温度下，WZ-23生长情况明显优于目前普遍栽培的六妹品种，生长速度更快、菌丝浓密程度更高、菌落边缘更为整齐明显。因此，WZ-23与目前普遍栽培的羊肚菌品种相比有更好的低温适应性，适合在北方寒地进行种植，能够解决北方寒地地区因主栽品种为南方品种，地域之间存在差异、水土不服造成的羊肚菌出菇时产量和性状不稳定的问题。据测定，WZ-23亩产量达到175～200kg，亩产效益可达到5～10万元。
2、本发明WZ-23可在北方寒地大面积推广栽培。解决了北方寒地地区一直以来因主栽品种为南方品种出现的产量和性状不稳定现象，将进一步推动北方寒地地区羊肚菌种植产业化、规模化发展。同时可弥补因南方5～6月份升温无法出菇造成的鲜羊肚菌市场的空缺，为菇农带来更高收益，助力乡村振兴。
3、本发明选育出适合北方寒地种植的抗寒羊肚菌，丰富了羊肚菌的种质资源。
附图说明
图1为WZ-23子实体照片；
图2为对WZ-23的ITS序列进行PCR扩增后琼脂凝胶电泳后结果；
图3为WZ-23系统发育树图；
图4为WZ-23菌丝体生长情况图；
图5为WZ-23与六妹羊肚菌12℃培养条件下生长情况对比图。
具体实施方式
具体实施方式一：本实施方式一株北方寒地羊肚菌WZ-23为三地羊肚菌(Morchella eohespera)WZ-23，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是中国武汉市武汉大学，保藏日期是2023年12月5日，保藏编号为CCTCC NO:M 20232465。
本实施方式于纬度：47.754610，经度：132.643900的黑龙江省同江市采集得到北方寒地羊肚菌野生菌株BF2020，经多孢分离、菌丝纯化后得到WZ-23菌株。
具体实施方式二：菌株WZ-23的分类鉴定：
1、WZ-23的形态学鉴定
子实体健壮期，高4～10cm，宽3～6cm；如图1所示，菌盖呈黑色，圆顶，卵形至椭圆形、近球型形，表面有羊肚纹状脉络，脉络明显，横纵棱交叉形成明显凹坑，菌盖底部与菌柄相衔接，交界处凹陷明显；柄短，中空，圆柱形，白色，表面光滑。柄基部膨大，上有不规则凹槽。子囊为八孢子子囊。发现本发明菌株WZ-23形态特征与三地羊肚菌形态特征一致，初步将WZ-23鉴定为三地羊肚菌。
2、WZ-23的分子生物学鉴定
ITS测序过程如下：
提取WZ-23DNA，利用ITS1与ITS4为引物进行扩增，ITS1与ITS4序列如下：
ITS1
5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’；
ITS4
5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’。
PCR反应体系：总体积50.0uL：基因组DNA(20ng/uL)1.0uL，10×Buffer(含2.5mMMg2+)5.0uL，Taq聚合酶(5u/uL)1.0uL，dNTP(10mM)1.0uL，ITS1引物(10uM)1.5uL，ITS4引物(10uM)1.5uL，ddH2O 39.0uL。
PCR反应条件：预变性95℃5min；变性95℃30s；退火58℃30s；延伸72℃1min；终延伸72℃7min；循环数35。
PCR扩增后的结果通过琼脂凝胶电泳进行检测，结果如图2所示。PCR产物用AxyPrep DNA凝胶回收试剂盒进行回收，由南京派森诺基因科技有限公司进行测序，得到该DNA片段的核苷酸序列(ITS序列)，序列信息如SEQ ID No.1所示，其序列为712bp的DNA片段。用NCBI BLAST工具将得到DNA序列信息与NCBI核酸数据库中的数据进行比对，发现WZ-23的ITS序列与三地羊肚菌ITS序列的相似度高达99.86％，说明本发明WZ-23菌株在分类上很可能属于羊肚菌属三地羊肚菌。在比对结果中选择相似度高的序列进行下载。利用MEGA11.0软件建立起系统发育树(图3)，发现本发明菌株WZ-23与三地羊肚菌可形成稳定的分支，可信度达98％，且BLAST对比结果显示菌株WZ-23与任何已知的三地羊肚菌菌株不同。因此，通过BLAST对比结果结合系统发育树，鉴定本发明菌株WZ-23为一株新的三地羊肚菌菌株，最终命名为Morchella eohespera WZ-23。
具体实施方式三、Morchella eohespera WZ-23子实体的栽培方法按以下步骤进行：
1、母种制备
母种培养基配方为：去皮马铃薯200g、葡萄糖(蔗糖)20g、琼脂15～20g、蒸馏水1000mL。配制方法为：将去皮马铃薯切成小块，在水中加热15～20min，煮沸后纱布过滤，获得马铃薯提取液。再加入葡萄糖20g、琼脂15～20g，定容至1000mL，获得母种培养基。将培养基分装入试管中，培养基量约占试管的3/1。将试管用牛皮纸扎紧，放入高压蒸汽灭菌锅121℃灭菌30min，灭菌完成后立即置于试管架下层，凝成斜面备用。然后在无菌环境下用灭菌过的接种铲将WZ-23菌块接种到斜面试管中，培养温度为16～18℃，7～10d即可长满试管，制得WZ-23母种。
2、原种生产
原种培养基配方为：小麦73％，木屑20％，稻壳5％，石灰1％，石膏1％或小麦40％，木屑38％，麦麸15％，腐殖土5％，石灰1％，石膏1％。按原种培养基配方比例将稻壳、玉米芯、腐殖土提前预湿；小麦可先用水浸泡24～48h，或用水蒸煮麦粒至无白芯时捞出控水，与木屑拌匀，加入配方中其他原料，搅拌均匀，含水量60～65％，pH 7.0～7.5。进行装袋，采用规格为550～1000mL的菌种瓶或(12～14cm)×(24～28cm)×(0.004～0.006cm)的聚乙烯袋或聚丙烯袋。当天拌好的料当天装完，装好的瓶或袋要做到上紧下松，料面平整，打接种孔。瓶口可用封口膜封口，袋口用无棉盖体封口。高压灭菌，温度达到121～125℃，保持2～3h，停火后再焖0.5～1.5h。待温度降至28℃以下时，在无菌条件下挖取步骤1中所得的母种接种到原种培养基上，进行培养。培养室要求洁净、避光，温度应控制在18～20℃，相对湿度控制在40％以下，全程避光管理，保持室内空气新鲜，制得WZ-23原种。
3、栽培种生产
栽培种培养基配方为：小麦73％，木屑20％，稻壳5％，石灰1％，石膏1％或小麦40％，木屑38％，麦麸15％，腐殖土5％，石灰1％，石膏1％。按培养基配方比例将稻壳、玉米芯、腐殖土提前预湿；小麦可先用水浸泡24～48h，或用水蒸煮麦粒至无白芯时捞出控水，与木屑拌匀，加入配方中其他原料，搅拌均匀，含水量60～65％，pH 7.0～7.5。进行装袋，采用16cm×(35～37cm)×(0.004～0.006cm)的聚乙烯袋或聚丙烯袋。当天拌好的料当天装完，装好的瓶或袋要做到上紧下松，料面平整，打接种孔。瓶口可用封口膜封口，袋口用无棉盖体封口。高压灭菌，温度达到121～125℃，保持2～3h，停火后再焖0.5～1.5h。待温度降至28℃以下时，将WZ-23原种接种到栽培种培养基上培养。培养温度控制在18～20℃，相对湿度控制在40％以下，全程避光管理，保持室内空气新鲜，制得WZ-23栽培种。
4、整地做畦
播种前清除大棚地面杂草，每667m2土地均匀撒生石灰75～100kg，土壤旋耕25～30cm，暴晒不低于7d，土壤浇1～3次透水，适时做畦。畦床宽100～120cm，高15～20cm，间距25～30cm，长度依棚室长度而定，表面平整。
5、播种与覆土
播种前土壤湿度调节至25～30％，将WZ-23栽培种采用撒播和条播两种方式进行播种，每667m2菌种用量180～200kg，覆土厚度2～3cm。播种后喷雾状水，浇透水，覆盖黑色地膜，用土压住地膜。
6、发菌管理
调控棚内温度10～18℃，空间相对湿度65～70％，暗光培养，保持棚内空气新鲜。
7、营养包的摆放
当畦床表面出现白色菌丝体(菌霜)时，即可摆放营养包。在营养包一侧开2条纵口，长度10cm，开口间隔2.5～3.0cm，将开口一侧向下轻压与畦床表面充分接触，呈“品”字形排列，摆放密度为5～6袋/m2，覆盖黑色地膜，用土压住。
8、催菇管理
大棚栽培，播种后45～60d，畦床表面菌霜开始消退，菌丝体上有水珠出现时，喷一次透水。棚内保持散射光，越冬结束后，棚内土层融化深度15～20cm，土层下10cm处温度达到8℃左右时，去除畦床上的黑色地膜，移除营养袋，喷一次透水。
9、出菇管理
棚内温度控制在10～18℃，地温控制在8～16℃之间；空气相对湿度85～95％，畦床土壤湿度25～30％；每天光照时长4～6h，散射光，保持良好通风，空气新鲜。
10、采收
子实体顶部开始变色，蜂窝状子囊果部分已展开，及时采收。
本实施方式栽培的子实体应用在食品、保健品、饮品、药品中。
具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式三不同的是：母种培养基配方为：去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂15～20g、蒸馏水1000mL。其他与具体实施方式三相同。
具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式三或四不同的是：原种培养基配方按质量分数为：小麦73％、木屑20％、稻壳5％、石灰1％、石膏1％。其他与具体实施方式三或四相同。
具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式三至五之一不同的是：原种培养基配方按质量分数为：小麦40％、木屑38％、麦麸15％、腐殖土5％、石灰1％、石膏1％。其他与具体实施方式三至五之一相同。
具体实施方式七：本实施方式与具体实施方式三至六之一不同的是：栽培种培养基配方为：小麦73％、木屑20％、稻壳5％、石灰1％、石膏1％。其他与具体实施方式三至六之一相同。
具体实施方式八：本实施方式与具体实施方式三至七之一不同的是：栽培种培养基配方为：小麦40％，木屑38％、麦麸15％、腐殖土5％、石灰1％、石膏1％。其他与具体实施方式三至七之一相同。
具体实施方式九：本实施方式与具体实施方式三至八之一不同的是：步骤五中每667m2土壤的栽培种用量180～200kg，覆土厚度2～3cm。其他与具体实施方式三至八之一相同。
对本实施方式的羊肚菌Morchella eohespera WZ-23的低温适应性进行验证：
试验1、WZ-23生长速度测定实验：
将WZ-23菌块在无菌环境下接种于PDA平板中心位置，设置6个重复，置于17℃条件下培养。图4为WZ-23菌丝体生长情况图；每隔24h使用十字交叉法对于菌丝生长情况进行测量和记录，每个平板重复测量三次，直到菌丝长满平板为止，对WZ-23生长速度进行测定。实验结果如表1所示：
表1WZ-23生长速度测定数据
试验2、12℃下WZ-23与六妹羊肚菌低温适应性对比实验
在无菌环境下分别将WZ-23、六妹菌块接种于PDA平板中央位置，置于12℃条件下培养，每个样品设置6个重复，每隔24h使用十字交叉法对于菌丝生长情况进行测量和记录，每个平板重复测量三次，直到菌丝长满平板为止，并对菌丝浓密程度和菌落边缘的整齐程度进行观察和记录。结果如图5和表2所示：
表2 12℃下WZ-23与六妹羊肚菌低温适应性差异情况
由表2中数据可得，在12℃的低温培养条件下WZ-23的生长速度快于六妹羊肚菌，菌丝浓密程度更高，菌落边缘更为整齐。由此可以得出，WZ-23比六妹羊肚菌在12℃的低温栽培环境下生长情况更好，低温适应性更强。
Claims (8)
1.一株北方寒地羊肚菌WZ-23，其特征在于它为三地羊肚菌(Morchella eohespera)WZ-23，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是中国武汉市武汉大学，保藏日期是2023年12月5日，保藏编号为CCTCC NO:M 20232465。
2.如权利要求1所述北方寒地羊肚菌WZ-23的子实体的栽培方法，其特征在于所述栽培方法按以下步骤进行：
一、母种制备：将母种培养基分装入试管中，然后灭菌，再凝成斜面备用；无菌环境下将羊肚菌WZ-23菌块接种到斜面试管中，培养温度为16～18℃，制得WZ-23母种；
二、原种生产：在无菌条件下将WZ-23母种接种到原种培养基上，进行培养，培养温度为18～20℃，相对湿度≤40％，避光管理，制得WZ-23原种；
三、栽培种生产：在无菌条件下将WZ-23原种接种到栽培种培养基上，进行培养，培养温度为18～20℃，相对湿度≤40％，避光管理，制得WZ-23栽培种；
四、整地做畦：播种前清除大棚地面杂草，畦床宽100～120cm，高15～20cm，间距25～30cm，表面平整；
五、播种与覆土：播种前土壤湿度调节至25～30％，播种栽培种，播种后喷水，覆膜；
六、发菌管理：调控棚室内温度10～18℃，空间相对湿度65～70％，暗光培养；
七、营养包的摆放：当畦床表面出现白色菌丝体时，摆放营养包，摆放密度为5～6袋/m2，覆膜；
八、催菇管理：大棚栽培，播种后45～60d，喷水，越冬结束后，去除畦床上的地膜，移除营养袋，喷水；
九、出菇管理：棚内温度控制在10～18℃，地温控制在8～16℃；空气相对湿度85～95％，畦床土壤湿度25～30％；每天光照时长4～6h；
十、采收。
3.根据权利要求2所述的栽培方法，其特征在于母种培养基配方为：去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂15～20g、蒸馏水1000mL。
4.根据权利要求2所述的栽培方法，其特征在于原种培养基配方按质量分数为：小麦73％、木屑20％、稻壳5％、石灰1％、石膏1％。
5.根据权利要求2所述的栽培方法，其特征在于原种培养基配方按质量分数为：小麦40％、木屑38％、麦麸15％、腐殖土5％、石灰1％、石膏1％。
6.根据权利要求2所述的栽培方法，其特征在于栽培种培养基配方为：小麦73％、木屑20％、稻壳5％、石灰1％、石膏1％。
7.根据权利要求2所述的栽培方法，其特征在于栽培种培养基配方为：小麦40％，木屑38％、麦麸15％、腐殖土5％、石灰1％、石膏1％。
8.根据权利要求2所述的栽培方法，其特征在于步骤五中每667m2土壤的栽培种用量180～200kg，覆土厚度2～3cm。
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN119193338A (zh) * | 2024-09-25 | 2024-12-27 | 重庆美哉菌业有限公司 | 一株六妹羊肚菌菌株美哉8号及其应用 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20150140145A (ko) * | 2014-06-05 | 2015-12-15 | 전라북도 | 곰보버섯 균사체 대량 생산을 위한 인공배양방법 |
| CN107151698A (zh) * | 2017-04-01 | 2017-09-12 | 中国科学院昆明植物研究所 | 鉴定黑色羊肚菌类群中十一个种的交配型方法 |
| CN108782009A (zh) * | 2018-06-27 | 2018-11-13 | 延安新天然农业科技发展有限公司 | 一种羊肚菌增产方法 |
| CN110073898A (zh) * | 2019-06-03 | 2019-08-02 | 沈阳恒生生物科技发展有限公司 | 一种梯棱羊肚菌菌种工厂化生产及北方设施化栽培技术 |
| CN113330985A (zh) * | 2021-07-02 | 2021-09-03 | 任宝国 | 东北地区羊肚菌人工栽培方法 |
-
2023
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Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20150140145A (ko) * | 2014-06-05 | 2015-12-15 | 전라북도 | 곰보버섯 균사체 대량 생산을 위한 인공배양방법 |
| CN107151698A (zh) * | 2017-04-01 | 2017-09-12 | 中国科学院昆明植物研究所 | 鉴定黑色羊肚菌类群中十一个种的交配型方法 |
| CN108782009A (zh) * | 2018-06-27 | 2018-11-13 | 延安新天然农业科技发展有限公司 | 一种羊肚菌增产方法 |
| CN110073898A (zh) * | 2019-06-03 | 2019-08-02 | 沈阳恒生生物科技发展有限公司 | 一种梯棱羊肚菌菌种工厂化生产及北方设施化栽培技术 |
| CN113330985A (zh) * | 2021-07-02 | 2021-09-03 | 任宝国 | 东北地区羊肚菌人工栽培方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 万春艳;: "羊肚菌的药用研究近况", 中国林副特产, no. 04, 15 August 2008 (2008-08-15) * |
| 张介驰: "《寒地羊肚菌》", 31 October 2022, 黑龙江科学技术出版社, pages: 299 - 301 * |
| 徐敏;葛会敏;刘通;岳芳;: "修文六妹羊肚菌大田栽培技术要点", 农技服务, no. 04, 20 April 2020 (2020-04-20) * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN119193338A (zh) * | 2024-09-25 | 2024-12-27 | 重庆美哉菌业有限公司 | 一株六妹羊肚菌菌株美哉8号及其应用 |
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