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CN117603842B - 一种复合菌剂及其应用 - Google Patents

一种复合菌剂及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种复合菌剂及其应用，涉及微生物领域。所述复合菌剂包括长双歧杆菌（Bifidobacterium longum）、粪肠球菌（Enterococcus faecalis）、屎肠球菌（Enterococcus faecium）、动物联合乳杆菌（Ligilactobacillus animalis）和韩国酒曲伴生乳杆菌（Companilactobacillus nuruki），其在治疗细菌引起的猫肠道紊乱和炎症性肠病中有着显著的效果。

Description

一种复合菌剂及其应用
技术领域
本发明涉及微生物领域，特别涉及一种复合菌剂及其应用。
背景技术
猫是人类主要的伴侣动物之一，随着人们生活质量的提高，人们对于猫的健康的重视程度也越来越高。
肠道疾病是猫的高发疾病之一，导致肠道疾病其中一个重要原因是肠道稳态失调，而肠道稳态失调通常与肠道微生物菌群失衡和炎症性肠病的发生有关。目前针对细菌引起的猫肠道紊乱以及炎症性肠病的治疗方法主要是给猫服用抗生素类的药物，但是抗生素类的药物除了会杀死肠道内对宿主有害的细菌，同时也会杀死部分有益的细菌，导致在某些情况下服用抗生素的治疗疗程和完全康复期较长。另外，过度或长时间使用抗生素会使同一个体内的细菌对抗生素的耐药性增加，导致后续的治疗效果逐渐变差，但是目前尚未有疗效更好的替代药物。
可见，现有技术还有待改进和提高。
发明内容
鉴于上述现有技术的不足之处，本发明的目的在于提供一种复合菌剂，旨在提高猫肠道紊乱或炎症性肠病的治疗效果。
为了达到上述目的，本发明采取了以下技术方案：
一种复合菌剂，包括长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)、动物联合乳杆菌(Ligilactobacillus animalis)和韩国酒曲伴生乳杆菌(Companilactobacillusnuruki)。
一种如上所述复合菌剂在制备治疗猫肠道紊乱药物中的应用。
一种如上所述复合菌剂在制备治疗猫炎症性肠病药物中的应用。
有益效果：
本发明提供了一种复合菌剂，该复合菌剂包括长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)、动物联合乳杆菌(Ligilactobacillus animalis)和韩国酒曲伴生乳杆菌(Companilactobacillusnuruki)，在5种益生菌的协同作用下，可以有效治疗猫的肠道紊乱和炎症性肠病。
附图说明
图1为粪便评分图。
图2为第30天经药物或复合菌剂处理后各组猫血液中的IgA含量。
图3为第30天经药物或复合菌剂处理后各组猫血液中的IgG含量。
图4为第30天经药物或复合菌剂处理后各组猫血液中的IgM含量。
图5为粪便评分标准。
具体实施方式
本发明提供了复合菌剂及其应用，为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下参照附图并举实施例对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
此处需要说明的是，在以下实验所采用的菌株中，韩国酒曲伴生乳杆菌HHP001(Companilactobacillus nuruki)即保藏编号为GDMCC No：62868的动物联合乳杆菌A-148，于2022年10月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心；
动物联合乳杆菌HHP002(Ligilactobacillus animalis)即保藏编号为GDMCC No：62867的动物联合乳杆菌A-11-15，于2022年10月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心；
粪肠球菌HHP003(Enterococcus faecalis)即保藏编号为GDMCC No：62869的粪肠球菌A-A-2，于2022年10月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心；
长双歧杆菌HHP004(Bifidobacterium longum)即保藏编号为GDMCC No：62866的长双歧杆菌A-1-12，于2023年5月9日保藏于广东省微生物菌种保藏中心；
屎肠球菌HHP005(Enterococcus faecium)即保藏编号为GDMCC No：62870的屎肠球菌M-3，于2022年10月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心。
实施例
1.1动物实验
将猫随机分为5组，每组各有6只猫，各组分别为：
对照组(N组)：不作其他处理；
药物组(A组)：第1-8天进行连续的攻毒处理，攻毒为每天灌喂大肠杆菌菌粉灌装胶囊1次，饲喂量为每千克体重的猫饲喂1×109CFU的菌；第9-30天喂食抗生素阿莫西林克拉维酸钾，每天1次，每次50mg(1片)；
单株益生菌组(1S组)：第1-8天进行连续的攻毒处理，攻毒方式与药物组相同；第9-30天喂食粪肠球菌HHP003，饲喂量为每千克体重的猫饲喂1×109CFU的菌；
三株益生菌组(3S组)：第1-8天进行连续的攻毒处理，攻毒方式与药物组相同；第9-30天喂食粪肠球菌HHP003、长双歧杆菌HHP004和屎肠球菌HHP005，每种菌的饲喂量为每千克体重的猫饲喂1×109CFU的菌；
五株益生菌组(5S组)：第1-8天进行连续的攻毒处理，攻毒方式与药物组相同；第9-30天喂食韩国酒曲伴生乳杆菌HHP001、动物联合乳杆菌HHP002、粪肠球菌HHP003、长双歧杆菌HHP004和屎肠球菌HHP005，每种菌的饲喂量为每千克体重的猫饲喂1×109CFU的菌；
以上的猫分别在第0天，第8天和第30天进行采血，以测定血液中的相关指标；
每天采集猫的粪便并进行评分；粪便的评分标准引用至以下文献：
Evaluation of canned therapeutic diets for the management of catswith naturally occurring chronic diarrhea，Journal of Feline Medicine andSurgery，14(10)669–677，DOI:10.1177/1098612X12446906。
粪便评分标准如图5所示。图5的粪便评分标准中，分数越靠近2分，说明猫的健康状态越好。
1.2粪便的测试结果如下：
请参阅图1，图1为各组猫的粪便评分取平均值后所作的每日变化趋势图。对照组(N组)为没有进行攻毒处理，也没有饲喂益生菌或抗生素，图1中，N组的粪便评分稳定在2.5-3.5之间；
药物组(A组)在进行攻毒处理后，粪便评分在逐渐增加，在结束攻毒处理并饲喂抗生素后，其粪便评分在第10-15天有明显的下降趋势，但是在20-22天出现了反复，说明抗生素的使用有助于短期内修复肠道稳态，但是长时间使用可能会导致病菌具有耐药性；
单株益生菌组(1S组)在进行攻毒处理后，粪便评分也在逐渐增加，且评分的增加幅度明显大于药物组(A组)，反映该组的猫对攻毒处理更为敏感，在结束攻毒处理并饲喂粪肠球菌HHP003后,其粪便评分在10-25天内持续下降，此外，在同一段时间内，单株益生菌组(1S组)的粪便评分下降速度大于药物组(A组)，说明粪肠球菌HHP003对猫肠道紊乱的治疗效果要优于药物组(A组)；
三株益生菌组(3S组)在进行攻毒处理后，粪便评分也在逐渐增加，在结束攻毒处理并饲喂粪肠球菌HHP003、长双歧杆菌HHP004和屎肠球菌HHP005后,其粪便评分变化趋势与单株益生菌组(1S组)相似，说明粪肠球菌HHP003、长双歧杆菌HHP004和屎肠球菌HHP005的联合使用也对猫肠道紊乱的治疗效果要优于药物组(A组)；
五株益生菌组(5S组)在进行攻毒处理后，粪便评分也在逐渐增加，其上升幅度与药物组(A组)相似，在结束攻毒处理并饲喂韩国酒曲伴生乳杆菌HHP001、动物联合乳杆菌HHP002、粪肠球菌HHP003、长双歧杆菌HHP004和屎肠球菌HHP005后,其粪便评分在10-20天内持续快速下降，粪便评分的下降速度明显大于以上三组，并且其最终粪便评分要低于1S组和3S组，说明长双歧杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、动物联合乳杆菌和韩国酒曲伴生乳杆菌这5种菌的联合使用的疗效更佳且疗程更短。
1.3第30天经饲喂药物或益生菌后猫的血液IgA含量
请参阅图2，图2为在第30天时，各组猫的血液中IgA的含量，从图2可以看出，对照组(N组)未经攻毒和饲喂药物或益生菌的处理，其IgA含量处于正常水平；
药物组(A组)的IgA含量很高，且与对照组(N组)有着非常显著的差异，说明药物组(A组)虽然改善了猫肠道紊乱的问题，但是攻毒引起的炎症并没有很好地消除；
单株益生菌组(1S组)和三株益生菌组(3S组)的IgA含量较药物组(A组)低，且与对照组(N组)无显著差异，说明单株益生菌组(1S组)和三株益生菌组(3S组)可以较好地消除攻毒引起的炎症，治疗炎症性肠病，但是含量高于五株益生菌组(5S组)；
五株益生菌组(5S组)的IgA含量较药物组(A组)低，且与对照组(N组)无显著差异，说明韩国酒曲伴生乳杆菌HHP001、动物联合乳杆菌HHP002、粪肠球菌HHP003、长双歧杆菌HHP004和屎肠球菌HHP005的组合也可以起到较好地消除攻毒引起的炎症，治疗炎症性肠病；另外，5S组的IgA含量均低于1S组和3S组，且与N组相当。
1.4第30天经饲喂药物或益生菌后猫的血液IgG含量
请参阅图3，图3为在第30天时，各组猫的血液中IgG的含量，从图3可以看出，对照组(N组)未经攻毒和饲喂药物或益生菌的处理，其IgG含量处于正常水平；
药物组(A组)的IgG含量很高，且与对照组(N组)有着极其显著的差异，说明药物组(A组)的猫的炎症问题依旧很明显，抗生素的使用不能有效消除攻毒引起的炎症问题；
单株益生菌组(1S组)和三株益生菌组(3S组)的IgG含量均较药物组(A组)低，其中，单株益生菌组(1S组)与药物组(A组)无显著差异，三株益生菌组(3S组)与药物组(A组)有显著差异，说明单株益生菌组(1S组)和三株益生菌组(3S组)可以一定程度上地改善攻毒引起的炎症，治疗炎症性肠病；
五株益生菌组(5S组)的IgG含量与药物组(A组)有显著差异，较单株益生菌组(1S组)以及三株益生菌组(3S组)要低，且与对照组(N组)无显著差异，说明相较于前3组的药物或菌剂处理，韩国酒曲伴生乳杆菌HHP001、动物联合乳杆菌HHP002、粪肠球菌HHP003、长双歧杆菌HHP004和屎肠球菌HHP005的组合的消除炎症效果最好。
1.5第30天经饲喂药物或益生菌后猫的血液IgM含量
请参阅图4，图4为在第30天时，各组猫的血液中IgM的含量，从图4可以看出，对照组(N组)未经攻毒和饲喂药物或益生菌的处理，其IgM含量处于正常水平；
药物组(A组)的IgM含量很高，且与对照组(N组)有着极其显著以上的差异，说明药物组(A组)的猫的炎症问题依旧很明显，抗生素的使用不能有效消除攻毒引起的炎症问题；
单株益生菌组(1S组)和三株益生菌组(3S组)的IgM含量较药物组(A组)低，且与药物组(A组)有显著差异，说明单株益生菌组(1S组)和三株益生菌组(3S组)可以改善攻毒引起的炎症，治疗炎症性肠病；
五株益生菌组(5S组)的IgM含量与药物组(A组)相比有着非常显著的差异，且与对照组(N组)无显著差异，说明相较于前3组的药物或菌剂处理，韩国酒曲伴生乳杆菌HHP001、动物联合乳杆菌HHP002、粪肠球菌HHP003、长双歧杆菌HHP004和屎肠球菌HHP005的组合的消除炎症效果最好，并且在第30天时已经让猫的IgM含量恢复到正常水平。
综上所述，抗生素治疗猫肠道紊乱具有一定的效果，但是疗程时间长，效果不明显，并且抗生素不能有效治疗猫的炎症性肠病。1S组、3S组和5S组的菌剂不仅能治疗猫肠道紊乱，而且从猫的粪便评分以及免疫球蛋白指标上反映出，与抗生素(A组)相比，1S组、3S组和5S组的菌剂的治疗效果明显更好。另外，将1S组、3S组和5S组的粪便评分、IgA、IgG和IgM的含量进行综合比较后发现：5S组的治疗效果最好，在治疗猫肠道紊乱中最快地使粪便评分恢复至正常水平，甚至低于N组，说明还能进一步改善肠道的微生态，且血清中的IgA、IgG和IgM含量最低，在30天时已经与对照组(N组)的含量相当，从总体上说明长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)、动物联合乳杆菌(Ligilactobacillus animalis)和韩国酒曲伴生乳杆菌(Companilactobacillus nuruki)的联合作用具有很好的治疗炎症性肠病的效果，具有良好的应用前景和实际价值。
可以理解的是，对本领域普通技术人员来说，可以根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，而所有这些改变或替换都应属于本发明所附的权利要求的保护范围。

Claims (3)

1.一种复合菌剂，其特征在于，由长双歧杆菌（Bifidobacterium longum）、粪肠球菌（Enterococcus faecalis）、屎肠球菌（Enterococcus faecium）、动物联合乳杆菌（Ligilactobacillus animalis）和韩国酒曲伴生乳杆菌（Companilactobacillus nuruki）组成；所述长双歧杆菌的保藏编号为GDMCC NO：62866；所述粪肠球菌的保藏编号为GDMCCNO：62869；所述屎肠球菌的保藏编号为GDMCC NO：62870；所述动物联合乳杆菌的保藏编号为GDMCC NO：62867；所述韩国酒曲伴生乳杆菌的保藏编号为GDMCC NO：62868。
2.一种如权利要求1所述的复合菌剂在制备治疗猫肠道紊乱药物中的应用。
3.一种如权利要求1所述的复合菌剂在制备治疗猫炎症性肠病药物中的应用。
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