CN117136052A - Cdk抑制剂和其使用方法 - Google Patents

Abstract

本公开涉及新颖化合物和其药物组合物，以及用本公开的化合物和组合物抑制CDK酶活性的方法。本公开还涉及但不限于用本公开的化合物和组合物治疗与CDK信号传导相关的病症的方法。

Description

CDK抑制剂和其使用方法

相关申请的交叉引用

本申请要求2021年2月12日提交的美国临时申请第63/149,095号、2021年3月26日提交的美国临时申请第63/166,638号、2021年5月25日提交的美国临时申请第63/192,627号、2021年9月30日提交的美国临时申请第63/250,473号和2021年12月21日提交的美国临时申请第63/292,337号的权益，所述美国临时申请中的每一者都通过引用整体并入本文。

背景技术

周期蛋白依赖性激酶(CDK)是通过直接结合至周期蛋白受调控的丝氨酸/苏氨酸激酶家族。最初发现的CDK(CDK1、CDK2、CDK4、CDK6)在特定细胞周期阶段期间结合至同源周期蛋白，从而激活其激酶活性并促进细胞周期进程(Malumbres M.Genome Biology 2014)。有关CDK家族成员(CDK7、CDK8、CDK9、CDK12、CDK13)参与其他生物学功能，例如转录控制(Chou J.等人，Cancer Discovery 2020)。

细胞周期在促有丝分裂刺激后起始，所述刺激发出周期蛋白D表达、结合至CDK4/6和激酶活化的信号。活性CDK4/6-周期蛋白D复合物将视网膜母细胞瘤蛋白(RB)(肿瘤抑制因子)单磷酸化，以起始周期蛋白E表达和活性CDK2-周期蛋白E复合物的形成。经活化的CDK2-周期蛋白E将RB过磷酸化，触发DNA复制，其由CDK2-周期蛋白A进一步促进。最后，CDK1-周期蛋白B和CDK1-周期蛋白A协调复制DNA在母细胞内的分离，以完成细胞分裂，并形成两个新的子细胞(Otto,T.和Sicinski，P.Nat Rev Cancer 2017)。

由于持续细胞增殖是癌症的一种标志，因此控制细胞周期进程的途径的改变通常与癌症相关。实际上，CCNE1(编码周期蛋白E1蛋白的基因)是包括卵巢癌、子宫内膜癌、胃癌、宫颈癌、膀胱癌、食道癌、肺癌和乳腺癌在内的多种癌症中最频繁扩增的基因之一(Sanchez-Vega F.等人，Cell 2018；Cerami E.等人，Cancer Discovery 2012)。导致周期蛋白E1蛋白过表达的扩增的CCNE1基因由于增加CDK2-周期蛋白E活性而被认为是那些肿瘤中的致癌驱动因素。值得注意的是，CCNE1扩增或过表达的肿瘤细胞依赖于CDK2活性，并且因此为靶向此遗传限定的患者群体中的CDK2提供理论基础(McDonald E.R.等人，Cell2017；Au-Yeung G.等人，Clin Cancer Research 2016)。此外，经由周期蛋白E1扩增和过表达的CDK2活化是对若干已批准的靶向疗法(例如CDK4/6和HER2调节剂)的常见抵抗机制，并且因此支持CDK2与其他经验证的癌症驱动因素的组合靶向(Turner N.C.等人，J ClinOncology 2019；Herrera-Abreu M.T.等人，Cancer Research 2016；Scaltriti M.等人，PNAS2011)。

多种具有抵抗CDK2和其他CDK的活性的泛CDK抑制剂已显示出临床活性证据，但其还已显示出显著的造血和胃肠毒性，这可能归因于其对CDK1的抑制(Otto,T.和Sicinski,P.,Nat.Review Cancer 2017；Kumar,K.S.等人，Blood 2015；Shapiro G.I.等人，ClinCancer Research 2001)。虽然CDK2活性对于正常细胞功能而言可能不重要，但CDK1活性在所有细胞中，尤其在肠道和造血系统的高度增殖细胞中至关重要(Berthet C.等人，Current Biology 2003；Jayapal S.R.等人，Haematologica 2015；Santamaria D.等人，Nature 2007；Lu S.等人，Tox Sciences 2020)。

发明内容

在一些实施方案中，本公开涵盖认识到需要CDK选择性抑制剂化合物，例如CDK2选择性抑制剂化合物，以及用这些化合物治疗癌症和其他病症的方法。

在一些实施方案中，本公开提供了式I-A化合物：

或其药学上可接受的盐，其中Cy^A、Cy^B、Q、W和Z中的每一者如本文的实施方案以及类别和子类中所定义。

在一些实施方案中，本公开提供了式I化合物：

或其药学上可接受的盐，其中Cy^A、Cy^B、Cy^C、Q和P中的每一者如本文的实施方案以及类别和子类中所定义。

在一些实施方案中，本公开提供了式II、III、IV、V、VI、VII、VIII或IX的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中Cy^A、Cy^B、Cy^C、Q、P、W、X、Y、R^Z、R^B和n中的每一者如本文的实施方案以及类别和子类中所定义。

在一些实施方案中，本公开提供了式X-a、X-b、X-c、XI-a、XI-b、XI-c、XII-a、XII-b、XII-c、XIII-a、XIII-b、XIII-c、XIV-a、XIV-b、XIV-c、XV-a、XV-b、XV-c、XVI-a、XVI-b、XVI-c、XVII-a、XVII-b、XVII-c、XVIII-a、XVIII-b、XVIII-c、XIX-a、XIX-b、XIX-c、XX-a、XX-b、XX-c、XXI-a、XXI-b、XXI-c、XXII-a、XXII-b、XXII-c、XXIII-a、XXIII-b、XXIII-c、XXIV-a、XXIV-b、XXIV-c、XXV-a、XXV-b或XXV-c的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中Cy^A、Cy^C、Q、Z、W、X、Y和R^Z中的每一者如本文的实施方案以及类别和子类中所定义。

在一些实施方案中，本公开提供了式XXVI-a、XXVI-b、XXVI-c、XXVII-a、XXVII-b、XXVII-c、XXVIII-a、XXVIII-b或XXVIII-c的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中Cy^C、X、Y和R^Z中的每一者如本文的实施方案以及类别和子类中所定义。

在一些实施方案中，本公开提供了包含式I化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体、佐剂或稀释剂的药物组合物。在一些实施方案中，本公开提供了包含本公开的化合物(例如式II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X-a、X-b、X-c、XI-a、XI-b、XI-c、XII-a、XII-b、XII-c、XIII-a、XIII-b、XIII-c、XIV-a、XIV-b、XIV-c、XV-a、XV-b、XV-c、XVI-a、XVI-b、XVI-c、XVII-a、XVII-b、XVII-c、XVIII-a、XVIII-b、XVIII-c、XIX-a、XIX-b、XIX-c、XX-a、XX-b、XX-c、XXI-a、XXI-b、XXI-c、XXII-a、XXII-b、XXII-c、XXIII-a、XXIII-b、XXIII-c、XXIV-a、XXIV-b、XXIV-c、XXV-a、XXV-b、XXV-c、XXVI-a、XXVI-b、XXVI-c、XXVII-a、XXVII-b、XXVII-c、XXVIII-a、XXVIII-b或XXVIII-c的化合物)或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体、佐剂或稀释剂的药物组合物。在一些实施方案中，本公开提供了包含本公开的化合物(例如式I-A化合物)或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体、佐剂或稀释剂的药物组合物。

在一些实施方案中，本公开提供了治疗CDK2介导的病症的方法，所述方法包括向有需要的患者施用式I化合物或包含所述化合物的组合物。在一些实施方案中，本公开提供了治疗CDK2介导的病症的方法，所述方法包括向有需要的患者施用本公开的化合物(例如式II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X-a、X-b、X-c、XI-a、XI-b、XI-c、XII-a、XII-b、XII-c、XIII-a、XIII-b、XIII-c、XIV-a、XIV-b、XIV-c、XV-a、XV-b、XV-c、XVI-a、XVI-b、XVI-c、XVII-a、XVII-b、XVII-c、XVIII-a、XVIII-b、XVIII-c、XIX-a、XIX-b、XIX-c、XX-a、XX-b、XX-c、XXI-a、XXI-b、XXI-c、XXII-a、XXII-b、XXII-c、XXIII-a、XXIII-b、XXIII-c、XXIV-a、XXIV-b、XXIV-c、XXV-a、XXV-b、XXV-c、XXVI-a、XXVI-b、XXVI-c、XXVII-a、XXVII-b、XXVII-c、XXVIII-a、XXVIII-b或XXVIII-c的化合物)或包含所述化合物的组合物。在一些实施方案中，本公开提供了治疗CDK2介导的病症的方法，所述方法包括向有需要的患者施用本公开的化合物(例如式I-A化合物)或包含所述化合物的组合物。

在一些实施方案中，本公开提供了用于提供式I化合物或其合成中间体的方法。在一些实施方案中，本公开提供了用于提供本公开的化合物(例如式II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X-a、X-b、X-c、XI-a、XI-b、XI-c、XII-a、XII-b、XII-c、XIII-a、XIII-b、XIII-c、XIV-a、XIV-b、XIV-c、XV-a、XV-b、XV-c、XVI-a、XVI-b、XVI-c、XVII-a、XVII-b、XVII-c、XVIII-a、XVIII-b、XVIII-c、XIX-a、XIX-b、XIX-c、XX-a、XX-b、XX-c、XXI-a、XXI-b、XXI-c、XXII-a、XXII-b、XXII-c、XXIII-a、XXIII-b、XXIII-c、XXIV-a、XXIV-b、XXIV-c、XXV-a、XXV-b、XXV-c、XXVI-a、XXVI-b、XXVI-c、XXVII-a、XXVII-b、XXVII-c、XXVIII-a、XXVIII-b或XXVIII-c的化合物)或其合成中间体的方法。在一些实施方案中，本公开提供了用于提供本公开的化合物(例如式I-A化合物)或其合成中间体的方法。

在一些实施方案中，本公开提供了用于提供包含式I化合物的药物组合物的方法。在一些实施方案中，本公开提供了用于提供包含本公开的化合物(例如式II、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX、X-a、X-b、X-c、XI-a、XI-b、XI-c、XII-a、XII-b、XII-c、XIII-a、XIII-b、XIII-c、XIV-a、XIV-b、XIV-c、XV-a、XV-b、XV-c、XVI-a、XVI-b、XVI-c、XVII-a、XVII-b、XVII-c、XVIII-a、XVIII-b、XVIII-c、XIX-a、XIX-b、XIX-c、XX-a、XX-b、XX-c、XXI-a、XXI-b、XXI-c、XXII-a、XXII-b、XXII-c、XXIII-a、XXIII-b、XXIII-c、XXIV-a、XXIV-b、XXIV-c、XXV-a、XXV-b、XXV-c、XXVI-a、XXVI-b、XXVI-c、XXVII-a、XXVII-b、XXVII-c、XXVIII-a、XXVIII-b或XXVIII-c的化合物)的药物组合物的方法。在一些实施方案中，本公开提供了用于提供包含本公开的化合物(例如式I-A化合物)的药物组合物的方法。

具体实施方式

1.某些实施方案的一般说明

本文所提供的化合物和其药物组合物可用作CDK2的抑制剂。在一些实施方案中，本公开提供了式I-A化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

Q是L¹；

Cy^A是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元亚杂芳基；其中Cy^A除Q和Cy^B之外也被R^A的m个实例取代；

Cy^B是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；亚苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元亚杂芳基；其中Cy^B除Cy^A和Z之外也被R^B的n个实例取代；

Z是氢或L²-R^Z；

R^Z是氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-8脂族基、饱和或部分不饱和3-14元碳环、苯基、具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-10元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元杂芳基环；

W是氢或Cy^C；

Cy^C是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元杂芳基；其中Cy^C除Q之外也被R^C的p个实例取代；

R^A、R^B和R^C的每个实例独立地为R¹或R²，其中R^A被R³的q^A个实例取代，R^B被R³的q^B个实例取代，并且R^C被R³的q^C个实例取代；或

R^A的两个实例、R^B的两个实例、R^C的两个实例、R^A的一个实例和R^L的一个实例、或R^C的一个实例和R^L的一个实例与其间插原子一起形成具有0-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-8元饱和、部分不饱和或芳族环；其中所述环被R³的r个实例取代；

L¹和L²中的每一者独立地为共价键、或C_1-5饱和或不饱和、直链或支链烃链，其中所述链的一个或两个亚甲基单元任选地且独立地被以下基团代替：-CH(R^L)-、-C(R^L)₂-、C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基、5-6元亚杂芳基、-NH-、-N(R^L)-、-NHC(O)-、-N(R^L)C(O)-、-C(O)NH-、-C(O)N(R^L)-、-NHS(O)₂-、-N(R^L)S(O)₂-、-S(O)₂NH-、-S(O)₂N(R^L)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-S-、-S(O)-或-S(O)₂-；其中所述C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基和5-6元亚杂芳基中的每一者任选地被R¹的一个实例或C_1-6脂族基取代；

R^L的每个实例独立地为R¹或R²，并且被R³的t个实例取代；

R¹的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R或-N(R)S(O)₂R；

R²的每个实例独立地为C_1-7脂族基；苯基；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元单环杂芳基环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的8-10元二环杂芳基环；3-7元饱和或部分不饱和碳环；具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和单环杂环；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的7-12元饱和或部分不饱和二环杂环；

R³的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-S(O)₂F、-OS(O)₂F、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R、-N(R)S(O)₂R或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环；

每个R独立地为氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、饱和或部分不饱和3-7元碳环、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环，或：

同一氮上的两个R基团与其间插原子一起形成除所述氮之外还具有0-3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-7元饱和、部分不饱和或杂芳基环；并且

m、n、p、q^A、q^B、q^C、r和t中的每一者独立地为0、1、2、3或4。

在一些实施方案中，本公开提供了式I化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

Q是L¹；

Cy^A是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元亚杂芳基；其中Cy^A除Q和Cy^B之外也被R^A的m个实例取代；

Cy^B是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；亚苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元亚杂芳基；其中Cy^B除Cy^A和P之外也被R^B的n个实例取代；

P是氢或-L²-R^P；

R^P是R；

Cy^C是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元杂芳基；其中Cy^C除Q之外也被R^C的p个实例取代；

R^A、R^B和R^C的每个实例独立地为R¹或R²，其中R^A被R³的q^A个实例取代，R^B被R³的q^B个实例取代，并且R^C被R³的q^C个实例取代；或

R^A的两个实例、R^B的两个实例、R^C的两个实例、R^A的一个实例和R^L的一个实例、或R^C的一个实例和R^L的一个实例与其间插原子一起形成具有0-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-8元饱和、部分不饱和或芳族环；其中所述环被R³的r个实例取代；

L¹和L²中的每一者独立地为共价键、或C_1-5饱和或不饱和、直链或支链烃链，其中所述链的一个或两个亚甲基单元任选地且独立地被以下基团代替：-CH(R^L)-、-C(R^L)₂-、C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基、5-6元亚杂芳基、-NH-、-N(R^L)-、-NHC(O)-、-N(R^L)C(O)-、-C(O)NH-、-C(O)N(R^L)-、-NHS(O)₂-、-N(R^L)S(O)₂-、-S(O)₂NH-、-S(O)₂N(R^L)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-S-、-S(O)-或-S(O)₂-；其中所述C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基和5-6元亚杂芳基中的每一者任选地被R¹的一个实例或C_1-6脂族基取代；

R^L的每个实例独立地为R¹或R²，并且被R³的t个实例取代；

R¹的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R或-N(R)S(O)₂R；

R²的每个实例独立地为C_1-7脂族基；苯基；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元单环杂芳基环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的8-10元二环杂芳基环；3-7元饱和或部分不饱和碳环；具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和单环杂环；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的7-12元饱和或部分不饱和二环杂环；

R³的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-S(O)₂F、-OS(O)₂F、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R、-N(R)S(O)₂R或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环；

每个R独立地为氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、饱和或部分不饱和3-7元碳环、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环，或：

同一氮上的两个R基团与其间插原子一起形成除所述氮之外还具有0-3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-7元饱和、部分不饱和或杂芳基环；

m、n、p、q^A、q^B、q^C、r和t中的每一者独立地为0、1、2、3或4。

在一些实施方案中，本公开提供了式II、III、IV、V、VI、VII、VIII或IX的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

Q是L¹；

Cy^A是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元亚杂芳基；其中Cy^A除Q和Cy^B之外也被R^A的m个实例取代；

Cy^B是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；亚苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元亚杂芳基；其中Cy^B除Cy^A和P或X之外也被R^B的n个实例取代；

X选自O、NR^X和S；

Y选自O、NR^Y和S；

R^X和R^Y的每个实例独立地为R；

R^Z是氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-8脂族基、饱和或部分不饱和3-14元碳环、苯基、具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-10元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元杂芳基环；

P是氢或-L²-R^P；

R^P是R；

W是氢或Cy^C；

Cy^C是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；苯基、或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元杂芳基；其中Cy^C除Q之外也被R^C的p个实例取代；

R^A、R^B和R^C的每个实例独立地为R¹或R²，其中R^A被R³的q^A个实例取代，R^B被R³的q^B个实例取代，并且R^C被R³的q^C个实例取代；或

R^A的两个实例、R^B的两个实例、R^C的两个实例、R^A的一个实例和R^L的一个实例、或R^C的一个实例和R^L的一个实例与其间插原子一起形成具有0-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-8元饱和、部分不饱和或芳族环；其中所述环被R³的r个实例取代；

L¹和L²中的每一者独立地为共价键、或C_1-5饱和或不饱和、直链或支链烃链，其中所述链的一个或两个亚甲基单元任选地且独立地被以下基团代替：-CH(R^L)-、-C(R^L)₂-、C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基、5-6元亚杂芳基、-NH-、-N(R^L)-、-NHC(O)-、-N(R^L)C(O)-、-C(O)NH-、-C(O)N(R^L)-、-NHS(O)₂-、-N(R^L)S(O)₂-、-S(O)₂NH-、-S(O)₂N(R^L)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-S-、-S(O)-或-S(O)₂-；其中所述C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基和5-6元亚杂芳基中的每一者任选地被R¹的一个实例或C_1-6脂族基取代；

R^L的每个实例独立地为R¹或R²，并且被R³的t个实例取代；

R¹的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R或-N(R)S(O)₂R；

R²的每个实例独立地为C_1-7脂族基；苯基；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元单环杂芳基环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的8-10元二环杂芳基环；3-7元饱和或部分不饱和碳环；具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和单环杂环；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的7-12元饱和或部分不饱和二环杂环；

R³的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-S(O)₂F、-OS(O)₂F、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R、-N(R)S(O)₂R或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环；

每个R独立地为氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、饱和或部分不饱和3-7元碳环、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环，或：

同一氮上的两个R基团与其间插原子一起形成除所述氮之外还具有0-3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-7元饱和、部分不饱和或杂芳基环；

m、n、p、q^A、q^B、q^C、r和t中的每一者独立地为0、1、2、3或4。

在一些实施方案中，本公开提供了式X-a、X-b、X-c、XI-a、XI-b、XI-c、XII-a、XII-b、XII-c、XIII-a、XIII-b、XIII-c、XIV-a、XIV-b、XIV-c、XV-a、XV-b、XV-c、XVI-a、XVI-b、XVI-c、XVII-a、XVII-b、XVII-c、XVIII-a、XVIII-b、XVIII-c、XIX-a、XIX-b、XIX-c、XX-a、XX-b、XX-c、XXI-a、XXI-b、XXI-c、XXII-a、XXII-b、XXII-c、XXIII-a、XXIII-b、XXIII-c、XXIV-a、XXIV-b、XXIV-c、XXV-a、XXV-b或XXV-c的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中Cy^A、Cy^C、Q、Z、W、X、Y和R^Z中的每一者如本文的实施方案以及类别和子类中所定义。

在一些实施方案中，本公开提供了式XXVI-a、XXVI-b、XXVI-c、XXVII-a、XXVII-b、XXVII-c、XXVIII-a、XXVIII-b或XXVIII-c的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中Cy^C、X、Y和R^Z中的每一者如本文的实施方案以及类别和子类中所定义。

2.化合物和定义

本文所述化合物包括本文通常阐述的那些，并且通过本文所公开的类别、子类和种类来进一步阐释。除非另有指示，否则如本文所用，以下定义应适用。出于本公开的目的，化学元素是根据元素周期表(CAS版)，Handbook of Chemistry and Physics，第75版来鉴定。此外，有机化学的一般原理阐述于以下文献中：“Organic Chemistry”,ThomasSorrell,University Science Books,Sausalito:1999和“March's Advanced OrganicChemistry”，第5版，Smith,M.B.和March,J.编辑，John Wiley&Sons,New York:2001，所述文献的全部内容特此通过引用并入。化学名称、通用名称和化学结构可互换使用来阐述相同结构。如果使用化学结构和化学名称两者来指代化合物，并且结构与名称之间存在歧义，则以结构为准。

如本文所用的术语“脂族”或“脂族基团”意指完全饱和或含有一个或多个不饱和单元的直链(即，无支链)或支链、被取代或未被取代的烃链，或完全饱和或含有一个或多个不饱和单元的单环烃或二环烃，但其并非芳族(在本文中也称为“碳环”或“脂环族”)，其具有连接至分子其余部分的单一点。除非另外指定，否则脂族基团含有1-6个脂族碳原子。在一些实施方案中，脂族基团含有1-5个脂族碳原子。在其他实施方案中，脂族基团含有1-4个脂族碳原子。在其他实施方案中，脂族基团含有1-3个脂族碳原子，并且在其他实施方案中，脂族基团含有1-2个脂族碳原子。在一些实施方案中，“脂环族”(或“碳环”)是指完全饱和或含有一个或多个不饱和单元的单环C₃-C₆烃，但其并非芳族，其具有连接至分子其余部分的单一点。在某些情况下，碳环可为桥接二环或稠合环，例如邻位稠合碳环、螺稠合碳环等。合适的脂族基团包括但不限于直链或支链、被取代或未被取代的烷基、烯基、炔基和其杂合物，例如(环烷基)烷基、(环烯基)烷基或(环烷基)烯基。

除非另有指示，否则如本文所用的术语“烷基”是指具有直链、支链、单环部分或多环部分或其组合的单价脂族烃基，其中所述基团任选地在所述直链、支链、单环部分或多环部分或其组合的一个或多个碳上在每个碳上被一个或多个取代基取代，其中所述一个或多个取代基独立地为C₁-C₁₀烷基。“烷基”的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、庚基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、降冰片基等。

术语“低级烷基”是指C_1-4直链或支链烷基。示例性低级烷基是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基和叔丁基。

术语“低级卤代烷基”是指被一个或多个卤素原子取代的C_1-4直链或支链烷基。

术语“杂原子”意指氧、硫、氮、磷或硅中的一者或多者(包括氮、硫、磷或硅的任何氧化形式；任何碱性氮的季铵形式；或杂环的可取代氮，例如N(如在3,4-二氢-2H-吡咯基中)、NH(如在吡咯烷基中)或NR⁺(如在N-取代的吡咯烷基中))。

如本文所用的术语“不饱和”意指部分具有一个或多个不饱和单元。

术语“亚烷基”是指二价烷基。“亚烷基链”是聚亚甲基，即-(CH₂)_n-，其中n是正整数，优选地1至6、1至4、1至3、1至2、或2至3。被取代亚烷基链是其中一个或多个亚甲基氢原子被取代基代替的聚亚甲基。适宜取代基包括下文针对被取代脂族基团阐述的那些。

术语“亚烯基”是指二价烯基。被取代亚烯基链是含有至少一个双键的聚亚甲基，其中一个或多个氢原子被取代基代替。合适的取代基包括下文针对被取代脂族基团阐述的那些。

术语“卤素”意指F、Cl、Br或I。

单独使用或作为较大部分的一部分使用的术语“芳基”是指具有总共5至14个环成员的单环或二环环系，其中所述系统中的至少一个环是芳族并且其中所述系统中的每个环含有3至7个环成员。术语“芳基”可与术语“芳基环”互换使用。在本文所述化合物的某些实施方案中，“芳基”是指可带有一个或多个取代基的芳族环系，其包括但不限于苯基、萘基、蒽基等。应当了解，“芳基”基团可包含碳和杂原子环成员。

除非另有定义，否则如本文所用的术语“杂芳基”或“杂芳族”是指含有一个或多个杂原子(例如1至4个杂原子，例如氮、氧和硫)的单环芳族5-6元环，或含有一个或多个杂原子的8-10元多环系统，其中多环系统中的至少一个环是芳族，并且多环系统的连接点是通过芳族环上的环原子。杂芳基环可通过碳或氮连接至毗邻基团。杂芳基环的实例包括但不限于呋喃、噻吩、吡咯、噻唑、噁唑、异噻唑、异噁唑、咪唑、吡唑、三唑、吡啶、嘧啶、吲哚等。例如，除非另有定义，否则如果1,2,3,4-四氢喹啉的连接点是通过苯并环，则其是杂芳基环，例如：

除非另有定义，否则术语“杂环基”或“杂环基团”是指饱和或部分不饱和3-10元单环或7-14元多环系统，包括桥接或稠合环(例如，邻位稠合二环或螺稠合二环)，并且其环系包括1至4个杂原子，例如氮、氧和硫。杂环基环可通过碳或氮连接至毗邻基团。

除非另有定义，否则术语“部分不饱和”在环的情形下是指单环或者多环(例如二环、三环等)环系内的组成环，其中所述组成环含有至少一个除由环本身提供的不饱和度之外的不饱和度，但并非芳族。部分不饱和环的实例包括但不限于3,4-二氢-2H-吡喃、3-吡咯啉、2-噻唑啉等。在部分不饱和环是多环系统的一部分的情况下，多环系统中的其他组成环可为饱和的、部分不饱和的或芳族的，但多环系统的连接点在部分不饱和组成环上。例如，除非另有定义，否则如果1,2,3,4-四氢喹啉的连接点是通过哌啶基，则其为部分不饱和环，例如：

除非另有定义，否则术语“饱和”在环的情形下是指3-10元单环或7-14元多环(例如二环、三环等)环系，其中单环或作为用于多环系统的连接点的组成环不含除环本身提供的不饱和度外的额外不饱和度。单环饱和环的实例包括但不限于氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、环己烷等。在饱和环是多环系统的一部分的情况下，多环系统中的其他组成环可为饱和的、部分不饱和的或芳族的，但多环系统的连接点在饱和组成环上。例如，除非另有定义，否则如果2-氮杂螺[3.4]辛-6-烯的连接点是通过氮杂环丁基环，则其为饱和环，例如：

如本文所用的术语“亚烷基”、“亚芳基”、“亚环烷基”、“亚杂芳基”、“亚杂环烷基”和具有后缀“-亚基”的其他类似术语是指所述后缀修饰的基团的二价键合形式。例如，“亚烷基”是连接其所连接的基团的二价烷基。

如本文所用，术语“桥接二环”是指具有至少一个桥的任何二环系统，即碳环或杂环、饱和或部分不饱和的。如通过IUPAC所定义，“桥”是连接两个桥头的无支链原子链或原子或价键，其中“桥头”是环系统中键合至三个或更多个骨架原子的任何骨架原子(不包括氢)。在一些实施方案中，桥接二环基团具有7-12个环成员和0-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子。此类桥接二环基团是本领域中众所周知的并且包括下文所述的那些基团，其中每个基团在任何可取代的碳或氮原子处连接至分子的其余部分。除非另外指定，否则桥接二环基团任选地被一个或多个如针对脂族基团所述的取代基取代。另外或可替代地，桥接二环基团的任何可取代氮任选地被取代。示例性桥接二环包括：

如本文所述，本文所述的化合物可含有“任选地被取代的”部分。一般而言，术语“被取代”不管之前是否有术语“任选地”，都意指指定部分的一个或多个氢被合适的取代基代替。除非另有指示，否则“任选地被取代”的基团可在所述基团的每个可取代位置处具有合适的取代基，并且在任何给定结构中的超过一个位置可被超过一个选自指定组的取代基取代时，每一位置的取代基可相同或不同。本公开所设想的取代基的组合优选是使得形成稳定或化学上可行的化合物的那些。如本文所用的术语“稳定”是指如下化合物：在经受容许其产生、检测和在某些实施方案中其回收、纯化和用于本文所公开的一个或多个目的的条件时，不会实质性改变。

“任选地被取代的”基团的可取代碳原子上的合适的单价取代基独立地为卤素；-(CH₂)_0-4R^o；-(CH₂)_0-4OR^o；-O(CH₂)_0-4R^o、-O-(CH₂)_0-4C(O)OR^o；-(CH₂)_0-4CH(OR^o)₂；-(CH₂)_{0- 4}SR^o；-(CH₂)_0-4Ph，其可被R^o取代；-(CH₂)_0-4O(CH₂)_0-1Ph，其可被R^o取代；-CH＝CHPh，其可被R^o取代；-(CH₂)_0-4O(CH₂)_0-1-吡啶基，其可被R^o取代；-NO₂；-CN；-N₃；-(CH₂)_0-4N(R^o)₂；-(CH₂)_0-4N(R^o)C(O)R^o；-N(R^o)C(S)R^o；-(CH₂)_0-4N(R^o)C(O)NR^o ₂；-N(R^o)C(S)NR^o ₂；-(CH₂)_0-4N(R^o)C(O)OR^o；-N(R^o)N(R^o)C(O)R^o；-N(R^o)N(R^o)C(O)NR^o ₂；-N(R^o)N(R^o)C(O)OR^o；-(CH₂)_0-4C(O)R^o；-C(S)R^o；-(CH₂)_0-4C(O)OR^o；-(CH₂)_0-4C(O)SR^o；-(CH₂)_0-4C(O)OSiR^o ₃；-(CH₂)_0-4OC(O)R^o；-OC(O)(CH₂)_0-4SR^o；-SC(S)SR^o；-(CH₂)_0-4SC(O)R^o；-(CH₂)_0-4C(O)NR^o ₂；-C(S)NR^o ₂；-C(S)SR^o；-SC(S)SR^o、-(CH₂)_0-4OC(O)NR^o ₂；-C(O)N(OR^o)R^o；-C(O)C(O)R^o；-C(O)CH₂C(O)R^o；-C(NOR^o)R^o；-(CH₂)_0-4SSR^o；-(CH₂)_0-4S(O)₂R^o；-(CH₂)_0-4S(O)₂OR^o；-(CH₂)_0-4OS(O)₂R^o；-S(O)₂NR^o ₂；-(CH₂)_0-4S(O)R^o；-N(R^o)S(O)₂NR^o ₂；-N(R^o)S(O)₂R^o；-N(OR^o)R^o；-C(NH)NR^o ₂；-P(O)(OR^o)R^o；-P(O)R^o ₂；-OP(O)R^o ₂；-OP(O)(OR^o)₂；-SiR^o ₃；-(C_1-4直链或支链亚烷基)O-N(R^o)₂；或-(C_1-4直链或支链亚烷基)C(O)O-N(R^o)₂，其中每个R^o可如下文所定义被取代，并且独立地为氢、C_1-6脂族基、-CH₂Ph、-O(CH₂)_0-1Ph、-CH₂-(5-6元杂芳基环)，或具有0-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的3-6元饱和、部分不饱和或芳基环，或尽管有上述定义，但两个独立出现的R^o与其间插原子一起形成具有0-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的3-12元饱和、部分不饱和或芳基单环或二环，其可如下文所定义被取代。

R^o(或由两个独立出现的R^o与其间插原子一起形成的环)上的合适的单价取代基独立地为卤素、-(CH₂)_0-2R^·、-(卤基R^·)、-(CH₂)_0-2OH、-(CH₂)_0-2OR^·、-(CH₂)_0-2CH(OR^·)₂；-O(卤基R^·)、-CN、-N₃、-(CH₂)_0-2C(O)R^·、-(CH₂)_0-2C(O)OH、-(CH₂)_0-2C(O)OR^·、-(CH₂)_0-2SR^·、-(CH₂)_{0- 2}SH、-(CH₂)_0-2NH₂、-(CH₂)_0-2NHR^·、-(CH₂)_0-2NR^· ₂、-NO₂、-SiR^· ₃、-OSiR^· ₃、-C(O)SR^·、-(C_1-4直链或支链亚烷基)C(O)OR^·或-SSR^·，其中每个R^·未被取代或当前面有“卤基”时仅被一个或多个卤素取代，并且独立地选自C_1-4脂族基、-CH₂Ph、-O(CH₂)_0-1Ph或具有0-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-6元饱和、部分不饱和或芳基环。R^o的饱和碳原子上的合适的二价取代基包括＝O和＝S。

“任选地被取代的”基团的饱和碳原子上的合适的二价取代基包括以下：＝O、＝S、＝NNR^* ₂、＝NNHC(O)R^*、＝NNHC(O)OR^*、＝NNHS(O)₂R^*、＝NR^*、＝NOR^*、-O(C(R^* ₂))_2-3O-或-S(C(R^* ₂))_2-3S-，其中每个独立出现的R^*选自氢、可如下文所定义被取代的C_1-6脂族基或具有0-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的未被取代的5-6元饱和、部分不饱和或芳基环。结合至“任选地被取代的”基团的邻位可取代碳的合适的二价取代基包括：-O(CR^* ₂)_2-3O-，其中每个独立出现的R^*选自氢、可如下文所定义被取代的C_1-6脂族基或具有0-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的未被取代的5-6元饱和、部分不饱和或芳基环。

R^*的脂族基上的合适的取代基包括卤素、-R^·、-(卤基R^·)、-OH、-OR^·、-O(卤基R^·)、-CN、-C(O)OH、-C(O)OR^·、-NH₂、-NHR^·、-NR^· ₂或-NO₂，其中每个R^·未被取代或在前面有“卤基”时仅被一个或多个卤素取代，并且独立地为C_1-4脂族基、-CH₂Ph、-O(CH₂)_0-1Ph或具有0-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-6元饱和、部分不饱和或芳基环。

“任选地被取代的”基团的可取代氮上的合适的取代基包括 或其中每个独立地为氢、可如下文所定义被取代的C_1-6脂族基、未被取代的-OPh或具有0-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的未被取代的5-6元饱和、部分不饱和或芳基环，或尽管有上述定义，但两个独立出现的与其一个或多个间插原子一起形成具有0-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的未被取代的3-12元饱和、部分不饱和或芳基单环或二环。

的脂族基上的合适的取代基独立地为卤素、-R^·、-(卤基R^·)、-OH、-OR^·、-O(卤基R^·)、-CN、-C(O)OH、-C(O)OR^·、-NH₂、-NHR^·、-NR^· ₂或-NO₂，其中每个R^·未被取代或在前面有“卤基”时仅被一个或多个卤素取代，并且独立地为C_1-4脂族基、-CH₂Ph、-O(CH₂)_0-1Ph或具有0-4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5-6元饱和、部分不饱和或芳基环。

如本文所用的术语“异构体”是指具有相同化学式但结构或光学构型不同的化合物。如本文所用的术语“立体异构体”是指并包括具有相同分子式但原子和/或官能团在空间中定位不同的异构分子。本发明化合物的所有立体异构体(例如，由于各种取代基上的不对称碳而可能存在的那些)(包括对映异构体形式和非对映异构体形式)都涵盖在本公开的范围内。因此，除非另有说明，否则本发明化合物的单一立体化学异构体以及对映异构体、非对映异构体和几何(或构象)异构体的混合物在本公开的范围内。

如本文所用的术语“互变异构体”是指以平衡状态存在并且容易从一种异构体形式转化为另一种异构体形式的两种或更多种结构异构体中的一种。应理解，互变异构体涵盖价键互变异构体和质子互变异构体(也称为质子转移互变异构体)。价键互变异构体包括通过重组一些键结电子的相互转化。质子互变异构体包括经由质子迁移的相互转化，例如酮-烯醇和亚胺-烯胺异构化。除非另有说明，否则本文所述化合物的所有互变异构体都在本公开的范围内。

如本文所用的术语“同位素取代”是指原子被其同位素取代。如本文所用的术语“同位素”是指具有与在自然界中占优势的原子的原子序数相同的原子序数但具有与在自然界中占优势的原子的质量数不同的质量数(中子数)的原子。应当理解，具有同位素取代的化合物是指其中至少一个所含原子被其同位素取代的化合物。可被其同位素取代的原子包括但不限于氢、碳和氧。氢原子的同位素的实例包括²H(也表示为D)和³H。碳原子的同位素的实例包括¹³C和¹⁴C。氧原子的同位素的实例包括¹⁸O。除非另有说明，否则本文所述化合物的所有同位素取代都在本公开的范围内。根据本公开，此类化合物可用作例如分析工具、生物测定中的探针或治疗剂。

如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指在合理的医学判断范围内适于与人类和低等动物的组织接触使用而没有过度的毒性、刺激、过敏反应等并且与合理的益处/风险比相称的那些盐。示例性药学上可接受的盐见于例如Berge等人，J.Pharm.Sci.1977,66(1),1；和Gould,P.L.,Int.J.Pharmaceutics 1986,33,201-217(各自特此通过引用整体并入)。

本文所述化合物的药学上可接受的盐包括衍生自合适的无机和有机的酸和碱的那些。药学上可接受的无毒性酸加成盐的实例是氨基与以下形成的盐：无机酸，例如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和过氯酸；或有机酸，例如乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸；或通过使用本领域中所用其他方法(例如离子交换)形成的盐。其他药学上可接受的盐包括己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡萄糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一烷酸盐、戊酸盐等。

衍生自适当碱的盐包括碱金属盐、碱土金属盐、铵盐和N⁺(C_1-4烷基)₄盐。代表性的碱金属或碱土金属盐包括钠、锂、钾、钙、镁等。其他药学上可接受的盐包括(适当时)使用抗衡离子如卤离子、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低级烷基磺酸根和芳基磺酸根形成的无毒性铵、季铵和胺阳离子。

药学上可接受的盐也旨在涵盖半盐，其中化合物:酸的比率分别为2:1。示例性半盐是衍生自包含两个羧酸基团的酸(例如苹果酸、富马酸、马来酸、琥珀酸、酒石酸、戊二酸、草酸、己二酸和柠檬酸)的那些盐。其他示例性半盐是衍生自二质子无机酸(例如硫酸)的那些盐。示例性优选半盐包括但不限于半马来酸盐、半富马酸盐和半琥珀酸盐。

如本文所用，术语“约”在本文中用于指大约、大致、左右或接近。当术语“约”与数值范围结合使用时，其通过将边界扩展至高于和低于所述数值来修饰所述范围。一般而言，术语“约”在本文中用于将数值修饰为高于和低于所述值20％上下(更高或更低)变化。

如本文所用的“有效量”、“足够量”或“治疗有效量”是当根据治疗性给药方案施用于患有或易患疾病、病症和/或疾患的受试者或群体时，足以治疗(例如，实现有益或期望结果，包括临床结果)所述疾病、病症和/或疾患的化合物的量。因此，有效量可能足以例如减少或改善与CDK2信号传导有关的病痛或其一种或多种症状的严重程度和/或持续时间，防止与CDK2信号传导有关的病痛有关的疾患或症状的进展，或增强或以其他方式改进另一疗法的一种或多种预防或治疗作用。有效量还包括避免或基本上减弱不期望副作用的化合物的量。

如本文所用并且如本领域中所充分理解，“治疗”是用于获得有益或期望结果(包括临床结果)的方法。有益或期望临床结果可包括但不限于减轻或改善一种或多种症状或疾患、降低疾病或病痛的程度、疾病或病痛的稳定化(即不恶化)状态、预防疾病或病痛的扩散、延迟或减缓疾病或病痛进展、改善或缓和疾病或病痛状态和缓解(无论是部分还是全部)，无论是可检测的还是不可检测的。“治疗”还可意指与不接受治疗时的预期存活相比延长存活。在一些实施方案中，可在一种或多种症状出现后施用治疗。在其他实施方案中，可在不存在症状的情况下施用治疗。例如，可在症状发作之前(例如，鉴于症状史和/或鉴于遗传或其他易感因素)向易感个体施用治疗。也可在症状已消退后继续治疗，例如以预防或推迟其复发。

短语“有需要”是指对于从与CDK2信号传导活性有关或可通过本公开的化合物和/或组合物缓解的疾患症状性或无症状缓解的需要。

3.示例性实施方案的说明

在一些实施方案中，本公开提供了式I-A化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

Q是L¹；

Cy^A是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元亚杂芳基；其中Cy^A除Q和Cy^B之外也被R^A的m个实例取代；

Cy^B是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；亚苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元亚杂芳基；其中Cy^B除Cy^A和Z之外也被R^B的n个实例取代；

Z是氢或L²-R^Z；

R^Z是氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-8脂族基、饱和或部分不饱和3-14元碳环、苯基、具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-10元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元杂芳基环；

W是氢或Cy^C；

Cy^C是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元杂芳基；其中Cy^C除Q之外也被R^C的p个实例取代；

R^A、R^B和R^C的每个实例独立地为R¹或R²，其中R^A被R³的q^A个实例取代，R^B被R³的q^B个实例取代，并且R^C被R³的q^C个实例取代；或

R^A的两个实例、R^B的两个实例、R^C的两个实例、R^A的一个实例和R^L的一个实例、或R^C的一个实例和R^L的一个实例与其间插原子一起形成具有0-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-8元饱和、部分不饱和或芳族环；其中所述环被R³的r个实例取代；

L¹和L²中的每一者独立地为共价键、或C_1-5饱和或不饱和、直链或支链烃链，其中所述链的一个或两个亚甲基单元任选地且独立地被以下基团代替：-CH(R^L)-、-C(R^L)₂-、C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基、5-6元亚杂芳基、-NH-、-N(R^L)-、-NHC(O)-、-N(R^L)C(O)-、-C(O)NH-、-C(O)N(R^L)-、-NHS(O)₂-、-N(R^L)S(O)₂-、-S(O)₂NH-、-S(O)₂N(R^L)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-S-、-S(O)-或-S(O)₂-；其中所述C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基和5-6元亚杂芳基中的每一者任选地被R¹的一个实例或C_1-6脂族基取代；

R^L的每个实例独立地为R¹或R²，并且被R³的t个实例取代；

R¹的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R或-N(R)S(O)₂R；

R²的每个实例独立地为C_1-7脂族基；苯基；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元单环杂芳基环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的8-10元二环杂芳基环；3-7元饱和或部分不饱和碳环；具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和单环杂环；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的7-12元饱和或部分不饱和二环杂环；

R³的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-S(O)₂F、-OS(O)₂F、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R、-N(R)S(O)₂R或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环；

每个R独立地为氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、饱和或部分不饱和3-7元碳环、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环，或：

同一氮上的两个R基团与其间插原子一起形成除所述氮之外还具有0-3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-7元饱和、部分不饱和或杂芳基环；并且

m、n、p、q^A、q^B、q^C、q^Z、r和t中的每一者独立地为0、1、2、3或4。

如上文所述，在一些实施方案中，本公开提供了式I化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

Q是L¹；

Cy^A是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元亚杂芳基；其中Cy^A除Q和Cy^B之外也被R^A的m个实例取代；

Cy^B是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；亚苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元亚杂芳基；其中Cy^B除Cy^A和P之外也被R^B的n个实例取代；

P是氢或-L²-R^P；

R^P是R；

Cy^C是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元杂芳基；其中Cy^C除Q之外也被R^C的p个实例取代；

R^A、R^B和R^C的每个实例独立地为R¹或R²，其中R^A被R³的q^A个实例取代，R^B被R³的q^B个实例取代，并且R^C被R³的q^C个实例取代；或

R^A的两个实例、R^B的两个实例、R^C的两个实例、R^A的一个实例和R^L的一个实例、或R^C的一个实例和R^L的一个实例与其间插原子一起形成具有0-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-8元饱和、部分不饱和或芳族环；其中所述环被R³的r个实例取代；

L¹和L²中的每一者独立地为共价键、或C_1-5饱和或不饱和、直链或支链烃链，其中所述链的一个或两个亚甲基单元任选地且独立地被以下基团代替：-CH(R^L)-、-C(R^L)₂-、C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基、5-6元亚杂芳基、-NH-、-N(R^L)-、-NHC(O)-、-N(R^L)C(O)-、-C(O)NH-、-C(O)N(R^L)-、-NHS(O)₂-、-N(R^L)S(O)₂-、-S(O)₂NH-、-S(O)₂N(R^L)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-S-、-S(O)-或-S(O)₂-；其中所述C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基和5-6元亚杂芳基中的每一者任选地被R¹的一个实例或C_1-6脂族基取代；

R^L的每个实例独立地为R¹或R²，并且被R³的t个实例取代；

R¹的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R或-N(R)S(O)₂R；

R²的每个实例独立地为C_1-7脂族基；苯基；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元单环杂芳基环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的8-10元二环杂芳基环；3-7元饱和或部分不饱和碳环；具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和单环杂环；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的7-12元饱和或部分不饱和二环杂环；

R³的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-S(O)₂F、-OS(O)₂F、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R、-N(R)S(O)₂R或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环；

每个R独立地为氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、饱和或部分不饱和3-7元碳环、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环，或：

同一氮上的两个R基团与其间插原子一起形成除所述氮之外还具有0-3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-7元饱和、部分不饱和或杂芳基环；

m、n、p、q^A、q^B、q^C、r和t中的每一者独立地为0、1、2、3或4。

如上文所述，在一些实施方案中，本公开提供了式II、III、IV、V、VI或VII的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

Q是L¹；

Cy^A是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元亚杂芳基；其中Cy^A除Q和Cy^B之外也被R^A的m个实例取代；

Cy^B是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；亚苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元亚杂芳基；其中Cy^B除Cy^A和P或X之外也被R^B的n个实例取代；

X选自O、NR^X和S；

Y选自O、NR^Y和S；

R^X和R^Y的每个实例独立地为R；

R^Z是氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-8脂族基、饱和或部分不饱和3-14元碳环、苯基、具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-10元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元杂芳基环；

P是氢或-L²-R^P；

R^P是R；

W是氢或Cy^C；

Cy^C是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；苯基、或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元杂芳基；其中Cy^C除Q之外也被R^C的p个实例取代；

R^A、R^B和R^C的每个实例独立地为R¹或R²，其中R^A被R³的q^A个实例取代，R^B被R³的q^B个实例取代，并且R^C被R³的q^C个实例取代；或

R^A的两个实例、R^B的两个实例、R^C的两个实例、R^A的一个实例和R^L的一个实例、或R^C的一个实例和R^L的一个实例与其间插原子一起形成具有0-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-8元饱和、部分不饱和或芳族环；其中所述环被R³的r个实例取代；

L¹和L²中的每一者独立地为共价键、或C_1-5饱和或不饱和、直链或支链烃链，其中所述链的一个或两个亚甲基单元任选地且独立地被以下基团代替：-CH(R^L)-、-C(R^L)₂-、C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基、5-6元亚杂芳基、-NH-、-N(R^L)-、-NHC(O)-、-N(R^L)C(O)-、-C(O)NH-、-C(O)N(R^L)-、-NHS(O)₂-、-N(R^L)S(O)₂-、-S(O)₂NH-、-S(O)₂N(R^L)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-S-、-S(O)-或-S(O)₂-；其中所述C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基和5-6元亚杂芳基中的每一者任选地被R¹的一个实例或C_1-6脂族基取代；

R^L的每个实例独立地为R¹或R²，并且被R³的t个实例取代；

R¹的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R或-N(R)S(O)₂R；

R²的每个实例独立地为C_1-7脂族基；苯基；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元单环杂芳基环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的8-10元二环杂芳基环；3-7元饱和或部分不饱和碳环；具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和单环杂环；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的7-12元饱和或部分不饱和二环杂环；

R³的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-S(O)₂F、-OS(O)₂F、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R、-N(R)S(O)₂R或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环；

每个R独立地为氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、饱和或部分不饱和3-7元碳环、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环，或：

同一氮上的两个R基团与其间插原子一起形成除所述氮之外还具有0-3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-7元饱和、部分不饱和或杂芳基环；

m、n、p、q^A、q^B、q^C、r和t中的每一者独立地为0、1、2、3或4。

在一些实施方案中，本公开提供了式X-a、X-b、X-c、XI-a、XI-b、XI-c、XII-a、XII-b、XII-c、XIII-a、XIII-b、XIII-c、XIV-a、XIV-b、XIV-c、XV-a、XV-b、XV-c、XVI-a、XVI-b、XVI-c、XVII-a、XVII-b、XVII-c、XVIII-a、XVIII-b、XVIII-c、XIX-a、XIX-b、XIX-c、XX-a、XX-b、XX-c、XXI-a、XXI-b、XXI-c、XXII-a、XXII-b、XXII-c、XXIII-a、XXIII-b、XXIII-c、XXIV-a、XXIV-b、XXIV-c、XXV-a、XXV-b或XXV-c的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中Cy^A、Cy^C、Q、Z、W、X、Y和R^Z中的每一者如本文的实施方案以及类别和子类中所定义。

在式VIII、IX、X-a、X-b、X-c、XII-a、XII-b、XII-c、XIV-a、XIV-b、XIV-c、XVI-a、XVI-b、XVI-c、XIX-a、XIX-b、XIX-c、XXI-a、XXI-b或XXI-c的一些实施方案中，W是Cy^C。

在式X-a、X-b、X-c、XI-a、XI-b、XI-c、XVI-a、XVI-b、XVI-c、XVII-a、XVII-b、XVII-c、XVIII-a、XVIII-b或XVIII-c的一些实施方案中，其中Z是L²-R^Z，其中：

R^Z是氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、饱和或部分不饱和3-7元碳环、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环；并且

L²如本文中的实施方案以及类别和子类中所定义。

在式XII-a、XII-b、XII-c、XIII-a、XIII-b、XIII-c、XIV-a、XIV-b、XIV-c、XV-a、XV-b、XV-c、XIX-a、XIX-b、XIX-c、XX-a、XX-b、XX-c、XXI-a、XXI-b、XXI-c、XXII-a、XXII-b、XXII-c、XXIII-a、XXIII-b、XXIII-c、XXIV-a、XXIV-b、XXIV-c、XXV-a、XXV-b或XXV-c的一些实施方案中，R^Z是氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、饱和或部分不饱和3-7元碳环、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环。

在一些实施方案中，本公开提供了式XXVI-a、XXVI-b、XXVI-c、XXVII-a、XXVII-b、XXVII-c、XXVIII-a、XXVIII-b或XXVIII-c的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中Cy^C、X、Y和R^Z中的每一者如本文的实施方案以及类别和子类中所定义。

如上文大体定义，Cy^A是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元亚杂芳基；其中Cy^A除Q和Cy^B之外也被R^A的m个实例取代。在一些实施方案中，Cy^A是 其中表示与Q的共价键并且表示与Cy^B的共价键。在一些实施方案中，Cy^A是在一些实施方案中，Cy^A是在一些实施方案中，Cy^A是在一些实施方案中，Cy^A是在一些实施方案中，Cy^A是在一些实施方案中，Cy^A是在一些实施方案中，Cy^A是在一些实施方案中，Cy^A是在一些实施方案中，Cy^A是在一些实施方案中，Cy^A是在一些实施方案中，Cy^A是在一些实施方案中，Cy^A是在一些实施方案中，Cy^A是在一些实施方案中，Cy^A选自表1中的化合物中所绘示的基团。

如上文大体定义，Cy^B是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；亚苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元亚杂芳基；其中Cy^B除Cy^A和P之外也被R^B的n个实例取代。在式II、III、IV、V、VI和VII中任一者的一些实施方案中，Cy^B是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；亚苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元亚杂芳基；其中Cy^B除Cy^A和P或X之外也被R^B的n个实例取代。在式I-A的一些实施方案中，Cy^B是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；亚苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元亚杂芳基；其中Cy^B除Cy^A和Z之外也被R^B的n个实例取代。

在一些实施方案中，Cy^B是3-7元饱和或部分不饱和单环碳环。在一些实施方案中，Cy^B是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环。在一些实施方案中，Cy^B是亚苯基。在一些实施方案中，Cy^B是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元亚杂芳基。

在一些实施方案中，Cy^B是3-7元饱和碳环。在一些实施方案中，Cy^B是亚环丙基环。在一些实施方案中，Cy^B亚环丁基环。在一些实施方案中，Cy^B是亚环戊基环。在一些实施方案中，Cy^B是亚环己基环。在一些实施方案中，Cy^B是亚环庚基环。

在一些实施方案中，Cy^B是 其中表示与Cy^A的共价键并且表示与P、X或Z的共价键。在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是

在Cy^B的一些实施方案中，Cy^A和P、X或Z呈反式关系。在Cy^B的一些实施方案中，Cy^A和P、X或Z呈顺式关系。参见例如表1中的化合物中所绘示的Cy^B基团。

在一些实施方案中，Cy^B是5-8元饱和或部分不饱和桥接二环或稠合碳环。在一些实施方案中，Cy^B是5-8元饱和桥接二环或稠合碳环。在一些实施方案中，Cy^B是6-7元饱和桥接二环或稠合碳环。在一些实施方案中，Cy^B是其中表示与Cy^A的共价键并且表示与P、X或Z的共价键。在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是

在一些实施方案中，Cy^B是3-7元部分不饱和碳环。在一些实施方案中，Cy^B是5-6元部分不饱和碳环。在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是

在一些实施方案中，Cy^B是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-7元杂环。在一些实施方案中，Cy^B是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和3-7元单环杂环。在一些实施方案中，Cy^B是具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和4-7元单环杂环。

在一些实施方案中，Cy^B是 其中表示与Cy^A的共价键并且表示与P、X或Z的共价键。

在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是

在一些实施方案中，Cy^B是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元亚杂芳基。在一些实施方案中，Cy^B是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的9元亚杂芳基。在一些实施方案中，Cy^B选自

在一些实施方案中，Cy^B是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和6-10元桥接二环或稠合杂环。在一些实施方案中，Cy^B是具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和6-10元桥接二环或稠合杂环。在一些实施方案中，Cy^B是具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和6-10元桥接二环杂环。在一些实施方案中，Cy^B是具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和7-8元桥接二环杂环。

在一些实施方案中，Cy^B是具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和6-10元螺稠合杂环。在一些实施方案中，Cy^B是具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和6-9元螺稠合杂环。

在一些实施方案中，Cy^B是 其中表示与Cy^A的共价键并且表示与P、X或Z的共价键。在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是在一些实施方案中，Cy^B是

在一些实施方案中，Cy^B选自表1中的化合物中所绘示的基团。

如上文大体定义，P是氢或-L²-R^P，其中L²和R^P中的每一者如在本文中的实施方案以及类别和子类中所定义。在一些实施方案中，P是氢。在一些实施方案中，P是-L²-R^P。在一些实施方案中，P是-OR^P、-NHR^P、-SR^P、-NHC(O)NHR^P、-OC(O)NHR^P和-NHC(O)OR^P。

在一些实施方案中，P是-XC(O)YR^P，其中X、Y和R^P中的每一者如在本文中的实施方案以及类别和子类中所定义。在一些实施方案中，每个P选自表1中的化合物中所绘示的基团。

如上文大体定义，Z是氢或-L²-R^Z，其中L²和R^Z中的每一者如在本文中的实施方案以及类别和子类中所定义。在一些实施方案中，Z是氢。在一些实施方案中，Z是-L²-R^Z。在一些实施方案中，Z是-OR^Z、-NHR^Z、-SR^Z、-NHC(O)NHR^Z、-OC(O)NHR^Z和-NHC(O)OR^Z。在一些实施方案中，每个Z选自表1中的化合物中所绘示的基团。

如上文大体定义，R^P是R，其中R是如本文中的实施方案以及类别和子类中所定义。在一些实施方案中，R^P是氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、饱和或部分不饱和3-7元碳环、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环。在一些实施方案中，R^P是氢。在一些实施方案中，R^P是任选地被取代的C_1-6脂族基。在一些此类实施方案中，R^P是任选地被取代的C_1-4脂族基。在一些实施方案中，R^P是-CH₃、-CH₂CH₃、-CH₂CH₂CH₃、-CH(CH₃)₂或-CH₂CH(CH₃)₂、-C(CH₃)₃、 在一些实施方案中，R^P是任选地被-R^o或-OR^o取代的C_1-6脂族基。在一些实施方案中，R^P是在一些实施方案中，R^P是其中R^o是-OR^o或-N(R^o)₂。在一些实施方案中，R^P是在一些实施方案中，R^P是在一些实施方案中，R^P是

在一些实施方案中，R^P是任选地被取代的饱和或部分不饱和3-7元碳环。在一些实施方案中，R^P是任选地被取代的饱和3元碳环。在一些此类实施方案中，R^P是在一些此类实施方案中，R^o任选地被卤素取代。

在一些实施方案中，R^P是任选地被取代的苯基环。在一些实施方案中，R^P是具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的3-7元饱和或部分不饱和杂环。在一些实施方案中，R^P是具有1个选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的4元饱和杂环。在一些此类实施方案中，R^P是在一些此类实施方案中，R^P是

在一些实施方案中，R^P是具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的5-6元饱和或部分不饱和杂环。在一些实施方案中，R^P是具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的5元饱和或部分不饱和杂环。在一些此类实施方案中，R^P是在一些此类实施方案中，R^P是

在一些实施方案中，R^P是具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的6元饱和或部分不饱和杂环。在一些此类实施方案中，R^P是

在一些实施方案中，R^P是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的5-6元杂芳基环。在一些实施方案中，R^P是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的5元杂芳基环。在一些实施方案中，R^P是具有1-2个氮原子的任选地被取代的6元杂芳基环。在一些实施方案中，R^P选自任选地被取代的异噻唑基、吡啶基或哒嗪基。在一些此类实施方案中，R^P是

在一些实施方案中，R^P选自表1中的化合物中所绘示的基团。

如上文大体定义，R^Z是氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-8脂族基、饱和或部分不饱和3-14元碳环、苯基、具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-10元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元杂芳基环。

在一些实施方案中，R^Z是氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、饱和或部分不饱和3-7元碳环、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环。在一些实施方案中，R^Z是氢。在一些实施方案中，R^Z是任选地被取代的C_1-6脂族基。在一些此类实施方案中，R^Z是任选地被取代的C_1-4脂族基。在一些实施方案中，R^Z是-CH₃、-CH₂CH₃、-CH₂CH₂CH₃、-CH(CH₃)₂或-CH₂CH(CH₃)₂、-C(CH₃)₃、在一些实施方案中，R^Z是任选地被-R^o或-OR^o取代的C_1-6脂族基。在一些实施方案中，R^Z是在一些实施方案中，R^Z是其中R^o是-OR^o或-N(R^o)₂。在一些实施方案中，R^Z是在一些实施方案中，R^Z是在一些实施方案中，R^Z是

在一些实施方案中，R^Z是任选地被取代的饱和或部分不饱和3-7元碳环。在一些实施方案中，R^Z是任选地被取代的饱和3元碳环。在一些此类实施方案中，R^Z是在一些此类实施方案中，R^o任选地被卤素取代。

在一些实施方案中，R^Z是任选地被取代的苯基环。在一些实施方案中，R^Z是具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的3-7元饱和或部分不饱和杂环。在一些实施方案中，R^Z是具有1个选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的4元饱和杂环。在一些此类实施方案中，R^Z是在一些此类实施方案中，R^Z是

在一些实施方案中，R^Z是具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的5-6元饱和或部分不饱和杂环。在一些实施方案中，R^Z是具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的5元饱和或部分不饱和杂环。在一些此类实施方案中，R^Z是在一些此类实施方案中，R^Z是

在一些实施方案中，R^Z是具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的6元饱和或部分不饱和杂环。在一些此类实施方案中，R^Z是

在一些实施方案中，R^Z是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的5-6元杂芳基环。在一些实施方案中，R^Z是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的5元杂芳基环。在一些实施方案中，R^Z是具有1-2个氮原子的任选地被取代的6元杂芳基环。在一些实施方案中，R^Z选自任选地被取代的异噻唑基、吡啶基或哒嗪基。在一些此类实施方案中，R^Z是

在一些实施方案中，R^Z是选自以下的任选地被取代的基团：C_1-8脂族基、饱和或部分不饱和3-14元碳环、苯基、具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-10元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元杂芳基环。

在一些实施方案中，R^Z是任选地被取代的C_1-8脂族基。在一些实施方案中，R^Z是任选地被取代的饱和或部分不饱和3-14元碳环。在一些实施方案中，R^Z是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的3-10元饱和或部分不饱和杂环。在一些实施方案中，R^Z是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的5-14元杂芳基环。在一些实施方案中，R^Z是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的10元杂芳基环。在一些实施方案中，R^Z是具有1-4个氮杂原子的任选地被取代的10元杂芳基环。在一些实施方案中，R^Z是具有3个氮杂原子的任选地被取代的10元杂芳基环。在一些实施方案中，R^Z是吡啶并[3,4-d]哒嗪。

在一些实施方案中，R^Z选自表1中的化合物中所绘示的基团。

如上文大体定义，L²是共价键、或C_1-4二价饱和或不饱和、直链或支链烃链，其中所述链的一个或两个亚甲基单元任选地且独立地被以下基团代替：-CH(R^L)-、-C(R^L)₂-、C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基、5-6元亚杂芳基、-NH-、-N(R^L)-、-NHC(O)-、-N(R^L)C(O)-、-C(O)NH-、-C(O)N(R^L)-、-NHS(O)₂-、-N(R^L)S(O)₂-、-S(O)₂NH-、-S(O)₂N(R^L)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-S-、-S(O)-或-S(O)₂-；其中所述C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基和5-6元亚杂芳基中的每一者任选地被R¹的一个实例或C_1-6脂族基取代。

在一些实施方案中，L²是共价键。在一些实施方案中，L²是C_1-4二价饱和或不饱和、直链或支链烃链，其中所述链的一个或两个亚甲基单元任选地且独立地被以下基团代替：-CH(R^L)-、-C(R^L)₂-、C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基、5-6元亚杂芳基、-NH-、-N(R^L)-、-NHC(O)-、-N(R^L)C(O)-、-C(O)NH-、-C(O)N(R^L)-、-NHS(O)₂-、-N(R^L)S(O)₂-、-S(O)₂NH-、-S(O)₂N(R^L)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-S-、-S(O)-或-S(O)₂-；其中所述C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基和5-6元亚杂芳基中的每一者任选地被R¹的一个实例或C_1-6脂族基取代。在一些实施方案中，L²是-CH₂-。在一些实施方案中，L²是-CH₂O-。

在一些实施方案中，L²是-O-、-NH-、-S-、-NHC(O)NH-、-N(CH₃)C(O)NH-、-OC(O)NH-、-OC(O)N(CH₃)-、-NHC(O)O-、-CH₂C(O)NH-、-CH₂OC(O)NH-、-C(O)NH-和-C(O)O-。在一些实施方案中，L²是-O-、-NH-、-S-、-NHC(O)NH-、-N(CH₃)C(O)NH-、-OC(O)NH-、-OC(O)N(CH₃)-、-NHC(O)O-、-CH₂C(O)NH-、-NHC(O)CH₂-、-CH₂OC(O)NH-、-C(O)NH-、-NHC(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-NHS(O)₂-、-NHS(O)₂NH-和-OC(O)N(ⁱPr)-。在一些实施方案中，L²是-O-。在一些实施方案中，L²是-NH-。在一些实施方案中，L²是-S-。在一些实施方案中，L²是-NHC(O)NH-。在一些实施方案中，L²是-N(CH₃)C(O)NH-。在一些实施方案中，L²是-OC(O)NH-。在一些实施方案中，L²是-NHC(O)O-。在一些实施方案中，L²是-CH₂C(O)NH-。在一些实施方案中，L²是-CH₂OC(O)NH-。在一些实施方案中，L²是-C(O)NH-。在一些实施方案中，L²是-NHC(O)-。在一些实施方案中，L²是-C(O)O-。在一些实施方案中，L²是-OC(O)-。在一些实施方案中，L²是-NHC(O)CH₂-。在一些实施方案中，L²是-NHS(O)₂-。在一些实施方案中，L²是-NHS(O)₂NH-。在一些实施方案中，L²是-OC(O)N(ⁱPr)-。在一些实施方案中，L²是共价键、-CH₂-、-NH-、-O-、-NHC(O)NH-、 其中表示与Cy^B的共价键并且表示与R^P或R^Z的共价键。在一些实施方案中，L²是其中表示与Cy^B的共价键并且表示与R^P或R^Z的共价键。在一些实施方案中，L²是其中表示与Cy^B的共价键并且表示与R^P或R^Z的共价键。

在一些实施方案中，L²是-XC(O)Y-，其中X和Y中的每一者如本文中的实施方案以及类别和子类中所定义。在一些实施方案中，X是-O-。在一些实施方案中，X是-NR^X-。在一些实施方案中，X是-NH-。在一些实施方案中，X是-N(CH₃)-。在一些实施方案中，X是-S-。在一些实施方案中，Y是-O-。在一些实施方案中，Y是-NR^Y-。在一些实施方案中，Y是-NH-。在一些实施方案中，Y是-N(CH₃)-。在一些实施方案中，Y是-S-。

在一些实施方案中，每个L²选自表1中的化合物中所绘示的基团。

如上文大体定义，Q是L¹，其中L¹如本文中的实施方案以及类别和子类中所定义。在一些实施方案中，Q是-NH-、 其中表示与Cy^A的共价键并且表示与Cy^C或W的共价键。在一些实施方案中，Q是-NH-。在一些实施方案中，Q是-O-。在一些实施方案中，Q是在一些实施方案中，Q是在一些实施方案中，Q是在一些实施方案中，Q是-NHC(O)NH-。在一些实施方案中，Q是

在一些实施方案中，Q选自表1中的化合物中所绘示的基团。

如上文大体定义，L¹是共价键、或C_1-4二价饱和或不饱和、直链或支链烃链，其中所述链的一个或两个亚甲基单元任选地且独立地被以下基团代替：-CH(R^L)-、-C(R^L)₂-、C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基、5-6元亚杂芳基、-NH-、-N(R^L)-、-NHC(O)-、-N(R^L)C(O)-、-C(O)NH-、-C(O)N(R^L)-、-NHS(O)₂-、-N(R^L)S(O)₂-、-S(O)₂NH-、-S(O)₂N(R^L)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-S-、-S(O)-或-S(O)₂-；其中所述C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基和5-6元亚杂芳基中的每一者任选地被R¹的一个实例或C_1-6脂族基取代。

在一些实施方案中，L¹是共价键。在一些实施方案中，L¹是C_1-4二价饱和或不饱和、直链或支链烃链，其中所述链的一个或两个亚甲基单元任选地且独立地被以下基团代替：-CH(R^L)-、-C(R^L)₂-、C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基、5-6元亚杂芳基、-NH-、-N(R^L)-、-NHC(O)-、-N(R^L)C(O)-、-C(O)NH-、-C(O)N(R^L)-、-NHS(O)₂-、-N(R^L)S(O)₂-、-S(O)₂NH-、-S(O)₂N(R^L)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-S-、-S(O)-或-S(O)₂-；其中所述C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基和5-6元亚杂芳基中的每一者任选地被R¹的一个实例或C_1-6脂族基取代。

在一些实施方案中，L¹是-NH-、 其中表示与Cy^A的共价键并且表示与Cy^C或W的共价键。在一些实施方案中，L¹是-NH-。在一些实施方案中，L¹是-O-。在一些实施方案中，L¹是在一些实施方案中，L¹是在一些实施方案中，L¹是在一些实施方案中，L¹是在一些实施方案中，L¹是在一些实施方案中，L¹是

在一些实施方案中，L¹选自表1中的化合物中所绘示的基团。

如上文大体定义，R^L的每个实例独立地为R¹或R²，并且被R³的t个实例取代。在一些实施方案中，R^L是R¹。在一些实施方案中，R^L是R²。

如上文大体定义，R^A、R^B和R^C的每个实例独立地为R¹或R²，其中R^A被R³的q^A个实例取代，R^B被R³的q^B个实例取代，并且R^C被R³的q^C个实例取代。在一些实施方案中，R^A是R¹。在一些实施方案中，R^B是R¹。在一些实施方案中，R^C是R¹。在一些实施方案中，R^A是R²。在一些实施方案中，R^B是R²。在一些实施方案中，R^C是R²。

如上文大体定义，R¹的每个实例(例如，R^A的R¹基团、R^B的R¹基团或R^C的R¹基团)独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R或-N(R)S(O)₂R。在一些实施方案中，R¹是氧代基。在一些实施方案中，每个R¹独立地为卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R或-N(R)S(O)₂R。

在一些实施方案中，R¹是卤素、-CN或-NO₂。在一些实施方案中，R¹是-OR、-SR或-NR₂。在一些实施方案中，R¹是-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂或-C(O)N(R)OR。在一些实施方案中，R¹是-S(O)₂R、-S(O)₂N(H)R、-S(O)R、-S(O)N(H)R、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)N(H)R、-C(NH)N(H)R或-C(O)N(H)OR。在一些实施方案中，R¹是-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R或-N(R)S(O)₂R。在一些实施方案中，R¹是-OC(O)R、-OC(O)N(H)R、-N(H)C(O)OR、-N(H)C(O)R、-N(H)C(NH)R、-N(H)C(O)NR₂、-N(H)C(NH)NR₂、-N(H)S(O)₂NR₂、-N(H)S(O)R或-N(H)S(O)₂R。在一些实施方案中，R^A是卤素。在一些实施方案中，R^B是卤素。在一些实施方案中，R^B是-C≡N。在一些实施方案中，R^C是-S(O)₂R。在一些实施方案中，R^C是-S(O)₂CH₃。在一些实施方案中，R^C是-OR。在一些实施方案中，R^C是-OCH₃。在一些实施方案中，R^C是氧代基。在一些实施方案中，R^C是-N(R)C(O)R。在一些此类实施方案中，R^C是-N(H)C(O)R。在一些实施方案中，R^C是-C≡N。

如上文大体定义，R²的每个实例(例如，R^A的R²基团、R^B的R²基团或R^C的R²基团)独立地为C_1-7脂族基；苯基；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元单环杂芳基环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的8-10元二环杂芳基环；3-7元饱和或部分不饱和碳环；具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和单环杂环；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的7-12元饱和或部分不饱和二环杂环。在一些实施方案中，R²是C_1-7脂族基。在一些实施方案中，R²是苯基；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元单环杂芳基环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的8-10元二环杂芳基环；3-7元饱和或部分不饱和碳环；具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和单环杂环；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的7-12元饱和或部分不饱和二环杂环。在一些实施方案中，R²是苯基。在一些实施方案中，R²是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元单环杂芳基环。在一些实施方案中，R²是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的8-10元二环杂芳基环。在一些实施方案中，R²是3-7元饱和或部分不饱和碳环。在一些实施方案中，R²是具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和单环杂环。在一些实施方案中，R²是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的7-12元饱和或部分不饱和二环杂环。

在一些实施方案中，R^A是C_1-7脂族基。在一些此类实施方案中，R^A是-CH₃。在一些实施方案中，R^A是-C(CH₃)₃。

在一些实施方案中，R^B是C_1-7脂族基。在一些此类实施方案中，R^B是-CH₃。在一些实施方案中，R^B是选自-CH₃、-CH₂CH₃、-CH(CH₃)₂、在一些实施方案中，R^B是被R³取代的C_1-7脂族基。在一些实施方案中，R^B是被R³取代的C_1-7脂族基，其中R³是-OR。在一些实施方案中，R^B是被R³取代的C_1-2脂族基，其中R³是-OR。在一些实施方案中，R^B是-CH₂OH。在一些实施方案中，R^B是氧代基。在一些实施方案中，R^B是-OR，其中R是C_1-6脂族基。在一些实施方案中，R^B是-OCH₃。

在一些实施方案中，R^C是C_1-7脂族基。在一些此类实施方案中，R^C是-CH₃或-C(CH₃)₃。在一些实施方案中，R^C是-CH₂C(CH₃)₃。在一些实施方案中，R^C是被R³取代的C_1-7脂族基。在一些实施方案中，R^C是被R³取代的C_1-7脂族基，其中R³是-OR。在一些实施方案中，R^C是被R³取代的C_1-2脂族基，其中R³是-OR。在一些实施方案中，R^C是-CH₂OCH₃。在一些实施方案中，R^C是在一些实施方案中，R^C是-N(H)C(O)CH₃。在一些实施方案中，R^C是-C(O)OR。在一些实施方案中，R^C是-C(O)OR，其中R是C_1-6脂族基。在一些实施方案中，R^C是-C(O)OCH₂CH₃。在一些实施方案中，R^C是被R³取代的C_1-7脂族基，其中R³是卤素。在一些实施方案中，R^C是被R³取代的C_1-7脂族基，其中R³是氟。在一些实施方案中，R^C是-CF₃。在一些实施方案中，R^C是氧代基。在一些实施方案中，R^C是被R³取代的-OR。在一些实施方案中，R^C是被R³取代的-OR，其中R是C_1-6脂族基并且R³是-OR。在一些实施方案中，R^C是-OCH₂CH₂OH。在一些实施方案中，R^C是被R³取代的C_1-7脂族基，其中R³是-OR。在一些实施方案中，R^C是被R³取代的C_1-7脂族基，其中R³是-OR。在一些实施方案中，R^C是被R³取代的C_1-7脂族基，其中R³是-OR并且R是任选地被卤素取代的C_1-6脂族基。

如上文大体定义，R³的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-S(O)₂F、-OS(O)₂F、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R、-N(R)S(O)₂R或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环。在一些实施方案中，R³是氧代基。在一些实施方案中，R³是卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-S(O)₂F、-OS(O)₂F、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R、-N(R)S(O)₂R或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环。在一些实施方案中，R³是卤素、-CN或-NO₂。在一些实施方案中，R³是-OR、-SR或-NR₂。在一些实施方案中，R³是-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-S(O)₂F、-OS(O)₂F、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂或-C(O)N(R)OR。在一些实施方案中，R³是-S(O)₂R、-S(O)₂N(H)R、-S(O)R、-S(O)N(H)R、-S(O)₂F、-OS(O)₂F、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)N(H)R、-C(NH)NR₂或-C(O)N(H)OR。在一些实施方案中，R³是OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R或-N(R)S(O)₂R。在一些实施方案中，R³是-OC(O)R、-OC(O)N(H)R、-N(H)C(O)OR、-N(H)C(O)R、-N(H)C(NH)R、-N(H)C(O)NR₂、-N(H)C(NH)NR₂、-N(H)S(O)₂NR₂、-N(H)S(O)R或-N(H)S(O)₂R。在一些实施方案中，R³是选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环。在一些实施方案中，R³是任选地被取代的C_1-6脂族基。在一些实施方案中，R³是任选地被取代的苯基。在一些实施方案中，R³是具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的3-7元饱和或部分不饱和杂环。在一些实施方案中，R³是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的5-6元杂芳基环。

如上文大体定义，W是氢或Cy^C。在一些实施方案中，W是氢。在一些实施方案中，W是Cy^C。

如上文大体定义，Cy^C是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元杂芳基；其中Cy^C除Q之外也被R^C的p个实例取代。在一些实施方案中，Cy^C是饱和或部分不饱和3-14元碳环。在一些实施方案中，Cy^C是饱和或部分不饱和3-7元单环碳环。在一些实施方案中，Cy^C是环丙基。

在一些实施方案中，Cy^C是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环。在一些实施方案中，Cy^C是苯基。在一些实施方案中，Cy^C是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元杂芳基。

在一些实施方案中，Cy^C是具有1-3个选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环。在一些实施方案中，Cy^C是具有1-3个选自氮、氧和硫的杂原子的5元杂芳基环。在一些实施方案中，Cy^C是具有1-2个选自氮、氧和硫的杂原子的5元杂芳基环。在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是

在一些实施方案中，Cy^C是具有1-3个氮原子的6元杂芳基环。在一些实施方案中，Cy^C是吡啶基。在一些实施方案中，Cy^C是嘧啶基。在一些实施方案中，Cy^C是哒嗪基。在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是

在一些实施方案中，Cy^C是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的9-10元杂芳基。在一些实施方案中，Cy^C是具有1-3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的9-10元杂芳基。在一些实施方案中，Cy^C是具有2-4个氮原子的9-10元杂芳基。在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是在一些实施方案中，Cy^C是

如上文大体定义，每个R独立地为氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、饱和或部分不饱和3-7元碳环、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环，或：同一氮上的两个R基团与其间插原子一起形成除所述氮之外还具有0-3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-7元饱和、部分不饱和或杂芳基环。在一些实施方案中，R是氢。在一些实施方案中，R是选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、饱和或部分不饱和3-7元碳环、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环，或：同一氮上的两个R基团与其间插原子一起形成除所述氮之外还具有0-3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-7元饱和、部分不饱和或杂芳基环。在一些实施方案中，R是任选地被取代的C_1-6脂族基。在一些实施方案中，R是任选地被取代的饱和或部分不饱和3-7元碳环。在一些实施方案中，R是任选地被取代的苯基。在一些实施方案中，R是具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的3-7元饱和或部分不饱和杂环。在一些实施方案中，R是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的任选地被取代的5-6元杂芳基环。

如上文大体定义，m是0、1、2、3或4。在一些实施方案中，m是0。在一些实施方案中，m是1。在一些实施方案中，m是2。在一些实施方案中，m是3。在一些实施方案中，m是4。在一些实施方案中，m是0或1。在一些实施方案中，m是0、1或2。在一些实施方案中，m是0、1、2或3。在一些实施方案中，m是1或2。在一些实施方案中，m是1、2或3。在一些实施方案中，m是1、2、3或4。在一些实施方案中，m是2或3。在一些实施方案中，m是2、3或4。在一些实施方案中，m是3或4。在一些实施方案中，m选自表1中的化合物中所表示的值。

如上文大体定义，n是0、1、2、3或4。在一些实施方案中，n是0。在一些实施方案中，n是1。在一些实施方案中，n是2。在一些实施方案中，n是3。在一些实施方案中，n是4。在一些实施方案中，n是0或1。在一些实施方案中，n是0、1或2。在一些实施方案中，n是0、1、2或3。在一些实施方案中，n是1或2。在一些实施方案中，n是1、2或3。在一些实施方案中，n是1、2、3或4。在一些实施方案中，n是2或3。在一些实施方案中，n是2、3或4。在一些实施方案中，n是3或4。在一些实施方案中，n选自表1中的化合物中所表示的值。

如上文大体定义，p是0、1、2、3或4。在一些实施方案中，p是0。在一些实施方案中，p是1。在一些实施方案中，p是2。在一些实施方案中，p是3。在一些实施方案中，p是4。在一些实施方案中，p是0或1。在一些实施方案中，p是0、1或2。在一些实施方案中，p是0、1、2或3。在一些实施方案中，p是1或2。在一些实施方案中，p是1、2或3。在一些实施方案中，p是1、2、3或4。在一些实施方案中，p是2或3。在一些实施方案中，p是2、3或4。在一些实施方案中，p是3或4。在一些实施方案中，p选自表1中的化合物中所表示的值。

如上文大体定义，q^A是0、1、2、3或4。在一些实施方案中，q^A是0。在一些实施方案中，q^A是1。在一些实施方案中，q^A是2。在一些实施方案中，q^A是3。在一些实施方案中，q^A是4。在一些实施方案中，q^A是0或1。在一些实施方案中，q^A是0、1或2。在一些实施方案中，q^A是0、1、2或3。在一些实施方案中，q^A是1或2。在一些实施方案中，q^A是1、2或3。在一些实施方案中，q^A是1、2、3或4。在一些实施方案中，q^A是2或3。在一些实施方案中，q^A是2、3或4。在一些实施方案中，q^A是3或4。在一些实施方案中，q^A选自表1中的化合物中所表示的值。

如上文大体定义，q^B是0、1、2、3或4。在一些实施方案中，q^B是0。在一些实施方案中，q^B是1。在一些实施方案中，q^B是2。在一些实施方案中，q^B是3。在一些实施方案中，q^B是4。在一些实施方案中，q^B是0或1。在一些实施方案中，q^B是0、1或2。在一些实施方案中，q^B是0、1、2或3。在一些实施方案中，q^B是1或2。在一些实施方案中，q^B是1、2或3。在一些实施方案中，q^B是1、2、3或4。在一些实施方案中，q^B是2或3。在一些实施方案中，q^B是2、3或4。在一些实施方案中，q^B是3或4。在一些实施方案中，q^B选自表1中的化合物中所表示的值。

如上文大体定义，q^C是0、1、2、3或4。在一些实施方案中，q^C是0。在一些实施方案中，q^C是1。在一些实施方案中，q^C是2。在一些实施方案中，q^C是3。在一些实施方案中，q^C是4。在一些实施方案中，q^C是0或1。在一些实施方案中，q^C是0、1或2。在一些实施方案中，q^C是0、1、2或3。在一些实施方案中，q^C是1或2。在一些实施方案中，q^C是1、2或3。在一些实施方案中，q^C是1、2、3或4。在一些实施方案中，q^C是2或3。在一些实施方案中，q^C是2、3或4。在一些实施方案中，q^C是3或4。在一些实施方案中，q^C选自表1中的化合物中所表示的值。

如上文大体定义，r是0、1、2、3或4。在一些实施方案中，r是0。在一些实施方案中，r是1。在一些实施方案中，r是2。在一些实施方案中，r是3。在一些实施方案中，r是4。在一些实施方案中，r是0或1。在一些实施方案中，r是0、1或2。在一些实施方案中，r是0、1、2或3。在一些实施方案中，r是1或2。在一些实施方案中，r是1、2或3。在一些实施方案中，r是1、2、3或4。在一些实施方案中，r是2或3。在一些实施方案中，r是2、3或4。在一些实施方案中，r是3或4。在一些实施方案中，r选自表1中的化合物中所表示的值。

如上文大体定义，t是0、1、2、3或4。在一些实施方案中，t是0。在一些实施方案中，t是1。在一些实施方案中，t是2。在一些实施方案中，t是3。在一些实施方案中，t是4。在一些实施方案中，t是0或1。在一些实施方案中，t是0、1或2。在一些实施方案中，t是0、1、2或3。在一些实施方案中，t是1或2。在一些实施方案中，t是1、2或3。在一些实施方案中，t是1、2、3或4。在一些实施方案中，t是2或3。在一些实施方案中，t是2、3或4。在一些实施方案中，t是3或4。在一些实施方案中，t选自表1中的化合物中所表示的值。

本文所述化合物的实施例包括列于本文表格和范例中的那些、或其药学上可接受的盐、立体异构体或立体异构体的混合物。在一些实施方案中，本公开包含选自下表1中所绘示的那些的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体或立体异构体的混合物。在一些实施方案

中，本公开提供了下表1中所列出的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本公开提供了下表1中所列出的化合物。

表1.代表性化合物与生物活性数据。

在上表1中的化学结构中，当将立构中心用虚线或楔形键绘示并标记为“abs”(或未标记)时，化合物在所述立构中心处基本上是单一异构体(而非等摩尔混合物)，并且绝对立体化学如化学结构中所示。(参见例如实施例5的结构。)当将立构中心用虚线或楔形键绘示并也标记为“or1”或“or2”时，所述化合物在所述立构中心处是单一异构体，但所述立构中心处的绝对立体化学尚未确定。(参见例如实施例27的结构。)当将立构中心用虚线或楔形键绘示并也标记为“and1”或“&1”时，所述化合物在所述立构中心处是两种异构体的混合物：如所绘示的结构，以及所述立构中心具有相反构型的异构体。(参见例如实施例3的结构。)

上表1中所绘示的某些化合物在室温下以跨联芳基键的非互转阻转异构体形式存在于溶液中。当将联芳基键的一个原子标记为“or1”时，这表示所述化合物在室温下作为非互转阻转异构体存在于溶液中，并且所述化合物基本上是单一阻转异构体(而非等摩尔混合物)。

在一些实施方案中，本公开提供了上表1中的化合物，其中将所述化合物表示为具有“A”的生化CDK2 Caliper IC₅₀。在一些实施方案中，本公开提供了上表1中的化合物，其中将所述化合物表示为具有“A”或“B”的生化CDK2 Caliper IC₅₀。在一些实施方案中，本公开提供了上表1中的化合物，其中将所述化合物表示为具有“A”、“B”或“C”的生化CDK2Caliper IC₅₀。

在一些实施方案中，本公开提供了上表1中的化合物，其中将所述化合物表示为具有“A”的Cell nanoBRET IC₅₀。在一些实施方案中，本公开提供了上表1中的化合物，其中将所述化合物表示为具有“A”或“B”的Cell nanoBRET IC₅₀。在一些实施方案中，本公开提供了上表1中的化合物，其中将所述化合物表示为具有“A”、“B”或“C”的Cell nanoBRET IC₅₀。

4.提供本发明化合物的一般方法

本文所述化合物通常可通过本领域技术人员已知的用于类似化合物的合成和/或半合成方法以及通过本文实施例中详细阐述的方法制备或分离。

5.用途、配制和施用

药学上可接受的组合物

根据另一个实施方案，本公开提供了包含本文所述化合物或其药学上可接受的衍生物以及药学上可接受的载体、佐剂或媒介物的组合物。在一些实施方案中，本公开提供了包含本文所述化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。本文所述组合物中化合物的量使得可有效地可测量地抑制生物样品或患者中的CDK2蛋白激酶或其突变体。在某些实施方案中，本文所述组合物中化合物的量使得其可有效地可测量地抑制生物样品或患者中的CDK2蛋白激酶或其突变体。在某些实施方案中，本文所述组合物被配制用于施用于需要此类组合物的患者。在一些实施方案中，本文所述组合物被配制用于向患者口服施用。

如本文所用的术语“受试者”和“患者”意指动物(即，动物界的成员)，优选哺乳动物，并且最佳人类。在一些实施方案中，受试者是人类、小鼠、大鼠、猫、猴、狗、马或猪。在一些实施方案中，受试者是人类。在一些实施方案中，受试者是小鼠、大鼠、猫、猴、狗、马或猪。

术语“药学上可接受的载体、佐剂或媒介物”是指不破坏与其配制的化合物的药理学活性的无毒载体、佐剂或媒介物。可用于本文所述组合物中的药学上可接受的载体、佐剂或媒介物包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(例如人类血清白蛋白)、缓冲物质(例如磷酸盐)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、盐或电解质(例如硫酸鱼精蛋白)、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、胶体二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯基吡咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。

“药学上可接受的衍生物”意指在施用于接受者后能够直接或间接提供本文所述化合物或抑制活性代谢物或其残余物的本文所述化合物的任何无毒盐、酯、酯的盐或其他衍生物。

如本文所用，术语“抑制活性代谢物或其残余物”意指代谢物或其残余物也是CDK2蛋白激酶或其突变体的抑制剂。

本文所述组合物可经口、经肠胃外、通过吸入喷雾、经局部、经直肠、经鼻、经颊、经阴道或经由植入储器施用。如本文所用的术语“肠胃外”包括皮下、静脉内、肌内、关节内、滑液内、胸骨内、鞘内、肝内、病灶内和颅内注射或输注技术。优选地，所述组合物是经口、经腹膜内或经静脉内施用的。

本文所述组合物的无菌可注射形式可为水性或油性悬浮液。可根据本领域中已知的技术，使用合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂来配制这些悬浮液。无菌可注射制剂也可为于无毒性肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射的溶液或悬浮液，例如，呈1,3-丁二醇中的溶液形式。可采用的可接受的媒介物和溶剂包括水、林格氏溶液(Ringer'ssolution)和等渗氯化钠溶液。此外，通常将无菌不挥发油用作溶剂或悬浮介质。

为此目的，可采用任何温和的不挥发油，包括合成的单甘油酯或二甘油酯。脂肪酸(例如油酸和其甘油酯衍生物)可用于制备注射剂，其是天然的药学上可接受的油，例如橄榄油或蓖麻油，尤其呈其聚氧乙基化形式。这些油溶液或悬浮液还可含有长链醇稀释剂或分散剂，例如羧甲基纤维素或通常用于配制药学上可接受的剂型(包括乳液和悬浮液)的类似分散剂。通常用于制备药学上可接受的固体、液体或其他剂型的其他常用表面活性剂(例如Tween、Span和其他乳化剂或生物利用度增强剂)也可用于配制的目的。

本文所述药学上可接受的组合物可以任何口服可接受的剂型经口施用，包括但不限于胶囊、片剂、水性悬浮液或溶液。在用于口服使用的片剂的情况下，常用载体包括乳糖和玉米淀粉。通常还添加润滑剂，例如硬脂酸镁。对于胶囊形式的口服施用，有用稀释剂包括乳糖和干燥的玉米淀粉。当口服使用需要水性悬浮液时，将活性成分与乳化和悬浮剂组合。如果期望，还可添加某些甜味剂、矫味剂或着色剂。

或者，本文所述药学上可接受的组合物可以用于直肠或阴道施用的栓剂形式施用。这些组合物可通过将剂与合适的无刺激性赋形剂混合来制备，所述赋形剂在室温下为固体，但在直肠或阴道温度下为液体，并且因此将在直肠或阴道中融化以释放药物。此类材料包括可可脂、蜂蜡和聚乙二醇。

本文所述的药学上可接受的组合物也可经局部施用，尤其是当治疗靶标包括通过局部施用容易接近的部位或器官(包括眼睛、皮肤或下肠道的疾病)时。容易为这些部位或器官中的每一者制备合适的局部制剂。

可以直肠栓剂制剂形式(参见上文)或以合适的灌肠剂制剂形式实现用于下肠道的局部施加。还可使用局部透皮贴剂。

对于局部应用，可将所提供的药学上可接受的组合物配制成含有悬浮或溶解于一种或多种载体中的活性组分的合适的软膏。用于局部施用本文所述化合物的载体包括但不限于矿物油、液体凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蜡和水。或者，可将所提供的药学上可接受的组合物配制成含有悬浮或溶解于一种或多种药学上可接受的载体中的活性组分的合适的洗剂或乳膏。合适的载体包括但不限于矿物油、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、鲸蜡酯蜡、鲸蜡硬脂醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。

对于眼科用途，可将所提供的药学上可接受的组合物配制成在等渗、经pH调节的无菌盐水中的微粉化悬浮液，或者优选地配制成在等渗、经pH调节的无菌盐水中的溶液，其含有或不含例如苯扎氯铵(benzylalkonium chloride)的防腐剂。或者，对于眼科用途，可将药学上可接受的组合物配制成例如凡士林的软膏。

本文所述药学上可接受的组合物也可通过鼻用气雾剂或吸入施用。此类组合物是根据医药制剂领域中众所周知的技术来制备，并且可采用苯甲醇或其他合适的防腐剂、提高生物利用度的吸收促进剂、氟碳化合物和/或其他常规增溶剂或分散剂制备成于盐水中的溶液。

优选地，将本文所述的药学上可接受的组合物配制用于口服施用。此类制剂可与或不与食物一起施用。在一些实施方案中，本文所述药学上可接受的组合物不与食物一起施用。在其他实施方案中，本文所述药学上可接受的组合物与食物一起施用。

可与载体材料组合以产生呈单一剂型的组合物的本文所述化合物的量将根据所治疗患者、特定施用方式而变化。优选地，所提供的组合物应配制成使得可向接受这些组合物的患者施用剂量在0.01-100mg/kg体重/天之间的抑制剂。

还应理解，用于任何特定患者的具体剂量和治疗方案将取决于多种因素，包括所用具体化合物的活性、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、施用时间、排泄速率、药物组合和治疗医师的判断以及正在治疗的特定疾病的严重程度。本文所述化合物在组合物中的量还将取决于组合物中的特定化合物。

待用于组合物的精确剂量也将取决于施用途径并且应当根据从业人员的判断和每个受试者的情况来决定。在本公开的具体实施方案中，本公开的化合物的用于口服施用的合适的剂量范围通常为约1mg/天至约1000mg/天。在一些实施方案中，口服剂量为约1mg/天至约800mg/天。在一些实施方案中，口服剂量为约1mg/天至约500mg/天。在一些实施方案中，口服剂量为约1mg/天至约250mg/天。在一些实施方案中，口服剂量为约1mg/天至约100mg/天。在一些实施方案中，口服剂量为约5mg/天至约50mg/天。在一些实施方案中，口服剂量为约5mg/天。在一些实施方案中，口服剂量为约10mg/天。在一些实施方案中，口服剂量为约20mg/天。在一些实施方案中，口服剂量为约30mg/天。在一些实施方案中，口服剂量为约40mg/天。在一些实施方案中，口服剂量为约50mg/天。在一些实施方案中，口服剂量为约60mg/天。在一些实施方案中，口服剂量为约70mg/天。在一些实施方案中，口服剂量为约100mg/天。将认识到，本文所列出的任何剂量可构成剂量范围上限或下限，并且可与任何其他剂量组合以构成包含上限和下限的剂量范围。

在一些实施方案中，药学上可接受的组合物含有浓度在以下范围内的所提供的化合物和/或其药学上可接受的盐：约0.01wt％至约90wt％、约0.01wt％至约80wt％、约0.01wt％至约70wt％、约0.01wt％至约60wt％、约0.01wt％至约50wt％、约0.01wt％至约40wt％、约0.01wt％至约30wt％、约0.01wt％至约20wt％、约0.01wt％至约2.0wt％、约0.01wt％至约1wt％、约0.05wt％至约0.5wt％、约1wt％至约30wt％、或约1wt％至约20wt％。可将所述组合物配制成溶液、悬浮液、软膏或胶囊等。药物组合物可制备成水溶液并且可含有额外组分，例如防腐剂、缓冲剂、张力剂、抗氧化剂、稳定剂、粘度调节成分等。

药学上可接受的载体是本领域技术人员众所周知的，并且包括例如佐剂、稀释剂、赋形剂、填充剂、润滑剂和媒介物。在一些实施方案中，载体是稀释剂、佐剂、赋形剂或媒介物。在一些实施方案中，载体是稀释剂、佐剂或赋形剂。在一些实施方案中，载体是稀释剂或佐剂。在一些实施方案中，载体是赋形剂。

药学上可接受的载体的实例可包括例如水或盐水溶液、聚合物(例如聚乙二醇)、碳水化合物和其衍生物、油、脂肪酸或醇。作为药物载体的油的非限制性实例包括石油、动物、植物或合成来源的油，例如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。药物载体也可为盐水、阿拉伯胶、明胶、淀粉糊、滑石、角蛋白、胶体二氧化硅、尿素等。此外，可使用辅助剂、稳定剂、稠化剂、润滑剂和着色剂。合适的药物载体的其他实例阐述于例如以下文献中：Remington's:The Science and Practice of Pharmacy，第22版(Allen,Loyd V.,Jr编辑，Pharmaceutical Press(2012))；Modern Pharmaceutics，第5版(Alexander T.Florence,Juergen Siepmann,CRC Press(2009))；Handbook of Pharmaceutical Excipients，第7版(Rowe,Raymond C.；Sheskey,Paul J.；Cook,Walter G.；Fenton,Marian E.编辑，Pharmaceutical Press(2012))(所述文献中的每一者都特此通过引用整体并入)。

本文所采用的药学上可接受的载体可选自各种有机或无机材料，所述材料用作用于医药制剂的材料并且作为镇痛剂、缓冲剂、粘合剂、崩解剂、稀释剂、乳化剂、赋形剂、增量剂、助流剂、增溶剂、稳定剂、悬浮剂、张力剂、媒介物和增粘剂并入。还可添加药物添加剂，例如抗氧化剂、芳香剂、着色剂、风味改良剂、防腐剂和甜味剂。可接受的药物载体的实例尤其包括羧甲基纤维素、结晶纤维素、甘油、阿拉伯胶(gum arabic)、乳糖、硬脂酸镁、甲基纤维素、粉末、盐水、海藻酸钠、蔗糖、淀粉、滑石和水。在一些实施方案中，术语“药学上可接受的”意指由联邦或州政府的监管机构批准或在美国药典或其他公认的药典中列出用于动物，更特定地用于人类。

表面活性剂(例如洗涤剂)也适用于制剂中。表面活性剂的具体实例包括聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯醇、乙酸乙烯酯和乙烯基吡咯烷酮的共聚物、聚乙二醇、苯甲醇、甘露糖醇、甘油、山梨糖醇或脱水山梨糖醇的聚氧乙烯化酯；卵磷脂或羧甲基纤维素钠；或丙烯酸系衍生物，例如甲基丙烯酸酯和其他；阴离子型表面活性剂，例如碱性硬脂酸盐，特别是硬脂酸钠、硬脂酸钾或硬脂酸铵；硬脂酸钙或硬脂酸三乙醇胺；烷基硫酸盐，特别是月桂基硫酸钠和鲸蜡基硫酸钠；十二烷基苯磺酸钠或二辛基磺基琥珀酸钠；或脂肪酸，特别是衍生自椰子油的那些；阳离子型表面活性剂，例如式N⁺R'R”R”'R””Y^-的水溶性季铵盐，其中R基团是相同或不同的任选地羟基化的烃基并且Y^-是强酸的阴离子，例如卤离子、硫酸根和磺酸根阴离子；鲸蜡基三甲基溴化铵是可使用的阳离子型表面活性剂中的一种，式N⁺R'R”R”'的胺盐，其中R基团是相同或不同的任选地羟基化的烃基；十八烷基胺盐酸盐是可使用的阳离子型表面活性剂中的一种，非离子型表面活性剂，例如任选地脱水山梨糖醇的聚氧乙烯化酯，特别是聚山梨醇酯80，或聚氧乙烯化烷基醚；聚乙二醇硬脂酸酯、蓖麻油的聚氧乙烯化衍生物、聚甘油酯、聚氧乙烯化脂肪醇、聚氧乙烯化脂肪酸或氧化乙烯和氧化丙烯的共聚物，两性表面活性剂，例如甜菜碱的被取代月桂基化合物。

合适的药物载体还可包括赋形剂，例如淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、稻谷、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石、氯化钠、脱脂奶粉、甘油、丙烯、二醇、聚乙二醇300、水、乙醇、聚山梨醇酯20等。必要时，本发明组合物还可含有润湿剂或乳化剂或pH缓冲剂。

片剂和胶囊制剂还可含有一种或多种佐剂、粘合剂、稀释剂、崩解剂、赋形剂、填充剂或润滑剂，其中的每一者都是本领域中已知的。此类的实例包括碳水化合物如乳糖或蔗糖、无水磷酸氢钙、玉米淀粉、甘露糖醇、木糖醇、纤维素或其衍生物、微晶纤维素、明胶、硬脂酸盐、二氧化硅、滑石、羟乙酸淀粉钠、阿拉伯胶、矫味剂、防腐剂、缓冲剂、崩解剂和着色剂。经口施用的组合物可含有一种或多种任选的剂，例如甜味剂如果糖、阿斯巴甜或糖精；矫味剂如薄荷、冬青油或樱桃；着色剂；和防腐剂，以提供药学上可口的制剂。

化合物和药学上可接受的组合物的用途

本文所述的化合物和组合物通常可用于抑制激酶或其突变体。在一些实施方案中，受本文所述化合物和组合物抑制的激酶是周期蛋白依赖性激酶(CDK)。在一些实施方案中，受本文所述化合物和组合物抑制的激酶是CDK1、CDK2、CDK4和CDK6中的一种或多种。在一些实施方案中，受本文所述化合物和组合物抑制的激酶是CDK2。

本公开的化合物或组合物可用于受益于抑制CDK2酶的应用中。例如，本文所述CDK2抑制剂通常可用于治疗增殖性疾病。

已知CDK2是许多癌症类型(包括肺癌、肝癌、结肠癌和乳腺癌)的肿瘤形成和增殖的因素(Opyrchal,Int J Oncol 2014；Shi,PLoS One2015；Lim,Cancer Prev Res 2014)。有证据显示，CDK2在功能上与多种癌细胞的过度增殖关联，并且是用于癌症疗法的潜在治疗靶标(Chohan,Curr Med Chem 2015)。

CDK2在乳房上皮细胞的恶性转化中起作用。阻抑CDK2活性可有效抑制人类乳腺癌细胞的增殖(Ali,Cancer Res 2009)。呈周期蛋白D1/CDK2融合蛋白形式的活性CDK2诱导含有侵袭性组分的肿瘤，所述组分表现出与人类基底样肿瘤和肿瘤源性细胞系共同的多种特征(Corsino,Neoplasia 2008)。在人类乳腺癌细胞系中检测到周期蛋白D1/CDK2复合物(Sweeney,Oncogene 1998)，并且这些复合物的水平与周期蛋白D1过表达的程度密切相关。

已通过筛选原发性、转移性、复发性和良性卵巢肿瘤来研究周期蛋白E和其相关激酶CDK2在卵巢癌中的作用。使用基因扩增，已显示，周期蛋白E在21％的所分析病例中扩增并且CDK2在6.4％的所分析病例中扩增。此外，周期蛋白E RNA在29.5％的所测试卵巢肿瘤中过表达，并且CDK2在6.5％的所测试卵巢肿瘤中过表达。与转移性疾病和复发性疾病相比，周期蛋白E和CDK2主要在原发性卵巢癌中过表达(分别为32％和10％)(Marone,Int JCancer 1998)。

已发现CDK2表达在神经胶质瘤肿瘤中、尤其在多形性神经胶质母细胞瘤(GBM)中显著升高，并且在功能上是GBM细胞增殖和肿瘤形成所需(Wang,Transl Oncol 2016)。CDK2表达经鉴定在GBM肿瘤中显著富集，并且在体外和体内二者都是肿瘤增殖所需。此外，高CDK2表达与GBM患者的不良预后相关。抗放射性是GBM患者的不良临床预后和肿瘤复发的主要因素。发现CDK2是放射治疗后GBM中最上调的激酶编码基因之一。CDK2依赖性抗放射性对于GBM肿瘤形成和治疗性治疗后的复发是不可缺少的(同上)。

已在人类胆管癌组织中观察到升高水平的CDK2表达，其中CDK2的凋亡相关蛋白1依赖性阻抑诱导细胞周期停滞并抑制肿瘤生长(Zheng,Oncol Rep 2016)。

口腔鳞状细胞癌(SCC)中的CDK2过表达可提高pRB磷酸化并容许癌细胞更快地进入S期。在口腔SCC的临床病理学调查中，CDK2表达的发生率在低分化病灶中较高，并且与肿瘤侵袭方式、淋巴结受累和存活相关，表明CDK2表达的变化与口腔癌进展相关(Mihara,JpnJ Cancer Res 2001)。CDK2表达与淋巴结受累、肿瘤分化、肿瘤侵袭方式和较短的存活期显著相关。因此，CDK2的增加表达是口腔癌进展的因素和患者预后的阴性预测标志(同上)。

已发现CDK2在非小细胞肺癌的细胞增殖中起作用(Kawana,Am J Pathol 1998)。还已发现CDK2在前列腺癌的细胞增殖中起作用(Flores,Endocrinology 2010)。

可在体外、体内或细胞系中测定本文所述化合物作为CDK激酶(例如CDK2或其突变体)的抑制剂的活性。体外测定包括确定经活化CDK2或其突变体的磷酸化活性和/或后续功能性后果或ATP酶活性的抑制的测定。替代性体外测定定量抑制剂结合至CDK2的能力。抑制剂结合可通过在结合之前对抑制剂进行放射性标记、分离抑制剂/CDK2复合物并确定所结合放射性标记的量来测量。或者，抑制剂结合可通过运行竞争实验来确定，其中将新抑制剂与结合至已知放射性配体的CDK2一起温育。可用于测定CDK2抑制剂的代表性体外和体内测定包括在本文所述的专利和科学出版物中阐述和公开的那些。用于测定本文所述化合物作为CDK2或其突变体的抑制剂的详细条件陈述于以下实施例中。

病症的治疗

所提供的化合物是CDK2的抑制剂，并且因此可用于治疗一种或多种与CDK2或其突变体的活性相关的病症。因此，在某些实施方案中，本公开提供了治疗受试者的CDK2介导的病症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的本文所述化合物或其药学上可接受的盐、或前述中任一者的药学上可接受的组合物。在某些实施方案中，本公开提供了治疗受试者的CDK2介导的病症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的本文所述化合物或其药学上可接受的组合物。

如本文所用，术语“CDK2介导的”病症、疾病和/或疾患意指已知CDK2或其突变体在其中起作用的任何疾病或其他有害疾患。因此，本公开的另一个实施方案涉及治疗一种或多种已知CDK2或其突变体在其中起作用的疾病或减轻其严重程度。所述CDK2介导的病症包括但不限于增殖性病症(例如癌症)。

在一些实施方案中，本公开提供了用于治疗一种或多种病症的方法，其中所述病症选自增殖性病症和颅缝早闭综合征，所述方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的本公开的化合物或其药学上可接受的盐、或前述中任一者的药学上可接受的组合物。在一些实施方案中，本公开提供了用于治疗一种或多种病症的方法，其中所述病症选自增殖性病症和颅缝早闭综合征，所述方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的本公开的化合物或其药学上可接受的组合物。

在一些实施方案中，所述病症与CDK2信号传导相关。已知CDK2具有多种上游和下游信号传导途径，并且CDK2的抑制可用于治疗与那些途径内异常信号传导相关的病症。在一些实施方案中，所述病症与周期蛋白E、周期蛋白E1或视网膜母细胞瘤蛋白(RB)信号传导相关。

在一些实施方案中，治疗方法包括以下步骤：i)鉴定需要此类治疗的受试者；(ii)提供所公开的化合物或其药学上可接受的盐；以及(iii)以治疗有效量施用所述所提供的化合物以治疗、阻抑和/或预防需要此类治疗的受试者的疾病状态或疾患。

在一些实施方案中，治疗方法包括以下步骤：i)鉴定需要此类治疗的受试者；(ii)提供包含所公开的化合物或其药学上可接受的盐的组合物；以及(iii)以治疗有效量施用所述组合物以治疗、阻抑和/或预防需要此类治疗的受试者的疾病状态或疾患。

本公开的另一方面提供了根据本文定义的化合物或其药学上可接受的盐或前述中任一者的药物组合物，其用于治疗本文所述的病症。本公开的另一方面提供了根据本文定义的化合物或其药学上可接受的盐或前述中任一者的药物组合物的用途，其用于治疗本文所述的病症。类似地，本公开提供了根据本文定义的化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于制备用于治疗本文所述病症的药剂。

增殖性病症

在一些实施方案中，病症是增殖性病症。在一些实施方案中，增殖性病症是癌症。在一些实施方案中，增殖性病症是卵巢癌、乳腺癌、肺癌、结直肠癌或其组合。在一些实施方案中，增殖性病症是白血病。在一些实施方案中，增殖性病症是乳腺癌。在一些实施方案中，增殖性病症是肺癌。在一些实施方案中，增殖性病症是结直肠癌。

在一些实施方案中，增殖性病症是乳腺癌、前列腺癌、肺鳞状细胞癌、甲状腺癌、胃癌、卵巢癌、直肠癌、子宫内膜癌、非小细胞肺癌或膀胱癌。在一些实施方案中，增殖性病症是肝内胆管癌、肝细胞癌、乳腺癌、前列腺癌、肺鳞状细胞癌、甲状腺癌、胃癌或卵巢癌。在一些实施方案中，增殖性病症是胃癌、乳腺癌、三阴性乳腺癌或直肠癌。在一些实施方案中，增殖性病症是子宫内膜癌、非小细胞肺癌、肺鳞状细胞癌、胃癌、乳腺癌或尿路上皮癌。

在一些实施方案中，病症是卵巢癌、子宫内膜癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌、宫颈癌、胃部癌症、肉瘤癌、肝癌、食道癌、喉癌、多发性骨髓瘤、结直肠癌、直肠癌、皮肤癌或胰腺癌。在一些实施方案中，膀胱癌是尿路上皮癌。在一些实施方案中，肝癌是肝细胞癌。在一些实施方案中，肺癌是肺鳞状细胞癌或非小细胞肺癌。在一些实施方案中，喉癌是喉鳞状细胞癌。在一些实施方案中，皮肤癌是黑色素瘤。

在一些实施方案中，增殖性病症与CDK2或周期蛋白E的失调相关。在一些实施方案中，CDK2的失调是CDK2或周期蛋白E的过表达。在一些实施方案中，周期蛋白E的失调是CDK2或周期蛋白E的过表达。在一些实施方案中，增殖性病症与CDK2和周期蛋白E的失调相关。在一些实施方案中，CDK2和周期蛋白E的失调是CDK2和周期蛋白E的过表达。

在一些实施方案中，增殖性病症与CDK2中的一个或多个活化突变相关。在一些实施方案中，CDK2中的活化突变是细胞内激酶结构域和细胞外结构域中的一种或多种的突变。在一些实施方案中，CDK2中的活化突变是细胞内激酶结构域的突变。

施用途径和剂型

根据本文所述的方法，化合物和组合物可使用有效治疗病症(例如增殖性病症或颅缝早闭综合征)或减轻病症(例如增殖性病症或颅缝早闭综合征)的严重程度的任何施用量和任何施用途径来施用。所需确切量将随受试者而变化，这取决于受试者的物种、年龄和一般状况；感染的严重程度、特定剂、其施用模式等。为了便于施用和剂量均匀性，优选将本文所述化合物配制成单位剂型。如本文所用的表述“单位剂型”是指适于待治疗患者的剂的物理离散单位。然而，应当理解，本公开的化合物和组合物的总每日使用量将由主治医师在合理医学判断范围内决定。用于任何特定患者或生物体的具体有效剂量水平将取决于多种因素，包括所治疗的病症和病症的严重程度；所用具体化合物的活性；所用具体组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所用具体化合物的施用时间、施用途径和排泄速率；治疗的持续时间；与所用具体化合物组合或同时使用的药物，以及医学领域中众所周知的类似因素。

本文所述药学上可接受的组合物可经口、经直肠、经肠胃外、经脑池内、经阴道内、经腹膜内、经局部(如通过粉末、软膏或滴剂)、经颊、作为口服或鼻用喷雾剂等施用于人类和其他动物。在某些实施方案中，本文所述化合物可以约0.01mg/kg至约50mg/kg并且优选约1mg/kg至约25mg/kg受试者体重/天的剂量水平经口或经肠胃外施用，每天一次或多次，以获得期望治疗作用。

用于口服施用的液体剂型包括但不限于药学上可接受的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除活性化合物外，液体剂型还可含有本领域中常用的惰性稀释剂，例如水或其他溶剂；增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特别是，棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯和其混合物。除惰性稀释剂外，口服组合物还可包括佐剂，例如润湿剂、乳化和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和芳香剂。

可根据已知技术，使用合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂来配制可注射制剂，例如无菌可注射水性或油性悬浮液。无菌可注射制剂也可为于无毒性肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射的溶液、悬浮液或乳液，例如，呈1,3-丁二醇中的溶液形式。可采用的可接受的媒介物和溶剂包括水、林格氏溶液U.S.P.和等渗氯化钠溶液。此外，通常将无菌不挥发油用作溶剂或悬浮介质。为此目的，可采用任何温和的不挥发油，包括合成的单甘油酯或二甘油酯。此外，将例如油酸的脂肪酸用于制备注射剂。

可注射制剂可例如通过经由细菌截留过滤器过滤或通过纳入呈可在使用前溶解或分散于无菌水或另一无菌可注射介质中的无菌固体组合物形式的灭菌剂来灭菌。

为了延长本文所述化合物的作用，经常期望减缓化合物从皮下或肌内注射中的吸收。这可通过使用具有不良水溶性的结晶或非晶形材料的液体悬浮液来实现。化合物的吸收速率则取决于其溶解速率，所述溶解速率进而可取决于晶体大小和结晶形式。或者，肠胃外施用化合物形式的延迟吸收是通过将化合物溶解或悬浮于油媒介物中来实现。可注射储积形式是通过在生物可降解聚合物(例如聚乳酸-聚乙交酯)中形成化合物的微囊基质来制备。取决于化合物对聚合物的比率和所用特定聚合物的性质，可控制化合物的释放速率。其他生物可降解聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚酸酐。储积可注射制剂也通过将化合物包裹于与身体组织相容的脂质体或微乳液中来制备。

用于直肠或阴道施用的组合物优选是栓剂，其可通过将本文所述化合物与合适的非刺激性赋形剂或载体(例如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡)混合来制备，所述赋形剂或载体在环境温度下为固体，但在体温下为液体，并且因此将在直肠或阴道腔中融化并释放活性化合物。

用于口服施用的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、粉末和颗粒剂。在此类固体剂型中，将活性化合物与至少一种惰性的药学上可接受的赋形剂或载体(例如柠檬酸钠或磷酸二钙)和/或以下物质混合：a)填充剂或增量剂，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸；b)粘合剂，例如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；c)保湿剂，例如甘油；d)崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；e)缓溶剂，例如石蜡；f)吸收加速剂，例如季铵化合物，g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯，h)吸收剂，例如高岭土和膨润土；和i)润滑剂，例如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠和其混合物。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型还可包含缓冲剂。

在使用例如乳糖(lactose或milk sugar)以及高分子量聚乙二醇等赋形剂的软质和硬质填充明胶胶囊中，也可采用类似类型的固体组合物作为填充剂。片剂、糖衣药丸、胶囊、丸剂和颗粒剂的固体剂型可用包衣和壳(例如肠溶包衣和药物配制领域中众所周知的其他包衣)制备。其可任选地含有遮光剂，并且还可具有使其任选地以延迟方式仅(或优先)在肠道的某一部分中释放一种或多种活性成分的组成。可使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。在使用例如乳糖以及高分子量聚乙二醇等赋形剂的软质和硬质填充明胶胶囊中，也可采用类似类型的固体组合物作为填充剂。

活性化合物也可呈具有一种或多种如上文所述赋形剂的微囊化形式。片剂、糖衣药丸、胶囊、丸剂和颗粒剂的固体剂型可用包衣和壳(例如肠溶包衣、释放控制包衣和药物配制领域中众所周知的其他包衣)制备。在此类固体剂型中，可将活性化合物与至少一种惰性稀释剂(例如蔗糖、乳糖或淀粉)混合。此类剂型还可按照通常实践包含除惰性稀释剂之外的额外物质，例如压锭润滑剂和其他压锭助剂，例如硬脂酸镁和微晶纤维素。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型还可包含缓冲剂。其可任选地含有遮光剂，并且还可具有使其任选地以延迟方式仅(或优先)在肠道的某一部分中释放一种或多种活性成分的组成。可使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。

本文所述化合物的局部或透皮施用的剂型包括软膏、糊剂、乳膏、洗剂、凝胶、粉末、溶液、喷雾剂、吸入剂或贴剂。将活性组分在无菌条件下与药学上可接受的载体和任何需要的防腐剂或可能需要的缓冲剂混合。眼用制剂、滴耳剂和滴眼剂也涵盖于本公开的范围内。此外，本公开涵盖使用经皮贴剂，所述经皮贴剂具有将化合物受控递送至身体的额外优点。此类剂型可通过将化合物溶解或分配于适当介质中来制备。还可使用吸收促进剂来增加化合物跨越皮肤的通量。速率可通过提供速率控制膜或通过将化合物分散于聚合物基质或凝胶中来加以控制。

剂量和方案

根据本公开的方法，将本公开的化合物以治疗有效量施用于受试者，例如以减轻或改善受试者的病症的症状。此量容易由本领域技术人员基于已知程序确定，所述程序包括分析在体内建立的滴定曲线以及本文所公开的方法和测定。

在一些实施方案中，所述方法包括施用治疗有效剂量的本公开的化合物。在一些实施方案中，治疗有效剂量为至少约0.0001mg/kg体重、至少约0.001mg/kg体重、至少约0.01mg/kg体重、至少约0.05mg/kg体重、至少约0.1mg/kg体重、至少约0.25mg/kg体重、至少约0.3mg/kg体重、至少约0.5mg/kg体重、至少约0.75mg/kg体重、至少约1mg/kg体重、至少约2mg/kg体重、至少约3mg/kg体重、至少约4mg/kg体重、至少约5mg/kg体重、至少约6mg/kg体重、至少约7mg/kg体重、至少约8mg/kg体重、至少约9mg/kg体重、至少约10mg/kg体重、至少约15mg/kg体重、至少约20mg/kg体重、至少约25mg/kg体重、至少约30mg/kg体重、至少约40mg/kg体重、至少约50mg/kg体重、至少约75mg/kg体重、至少约100mg/kg体重、至少约200mg/kg体重、至少约250mg/kg体重、至少约300mg/kg体重、至少约350mg/kg体重、至少约400mg/kg体重、至少约450mg/kg体重、至少约500mg/kg体重、至少约550mg/kg体重、至少约600mg/kg体重、至少约650mg/kg体重、至少约700mg/kg体重、至少约750mg/kg体重、至少约800mg/kg体重、至少约900mg/kg体重或至少约1000mg/kg体重。将认识到，本文所列出的任何剂量可构成剂量范围上限或下限，并且可与任何其他剂量组合以构成包含上限和下限的剂量范围。

在一些实施方案中，治疗有效剂量在约0.1mg至约10mg/kg体重、约0.1mg至约6mg/kg体重、约0.1mg至约4mg/kg体重或约0.1mg至约2mg/kg体重的范围内。

在一些实施方案中，治疗有效剂量在约1至500mg、约2至150mg、约2至120mg、约2至80mg、约2至40mg、约5至150mg、约5至120mg、约5至80mg、约10至150mg、约10至120mg、约10至80mg、约10至40mg、约20至150mg、约20至120mg、约20至80mg、约20至40mg、约40至150mg、约40至120mg或约40至80mg的范围内。

在一些实施方案中，所述方法包括单次给药或施用(例如，作为单次注射或沉积)。或者，在一些实施方案中，所述方法包括每天一次、每天两次、每天三次或每天四次向有需要的受试者施用，持续约2至约28天、或约7至约10天、或约7至约15天、或更长的时段。在一些实施方案中，所述方法包括长期施用。在其他实施方案中，所述方法包括在数周、数月、数年或数十年过程中的施用。在其他实施方案中，所述方法包括在数周过程中的施用。在其他实施方案中，所述方法包括在数月过程中的施用。在其他实施方案中，所述方法包括在数年过程中的施用。在其他实施方案中，所述方法包括在数十年过程中的施用。

所施用的剂量可根据已知因素而变化，例如活性成分的药效学特征以及其施用方式和途径；活性成分的施用时间；接受者的年龄、性别、健康状况和体重；症状的性质和程度；同时治疗的种类、治疗频率和期望的作用；和排泄速率。这些因素都可容易地确定，并且可由本领域技术人员用来调整或滴定剂量和/或给药方案。

蛋白激酶的抑制·

根据一个实施方案，本公开涉及抑制生物样品中的蛋白激酶活性的方法，所述方法包括使所述生物样品与本文所述化合物或包含所述化合物的组合物接触的步骤。

根据另一个实施方案，本公开涉及抑制生物样品中的CDK2或其突变体的活性的方法，所述方法包括使所述生物样品与本文所述化合物或包含所述化合物的组合物接触的步骤。在某些实施方案中，本公开涉及可逆地抑制生物样品中的CDK2或其突变体的活性的方法，所述方法包括使所述生物样品与本文所述化合物或包含所述化合物的组合物接触的步骤。

在另一个实施方案中，本公开提供了相对于CDK1、CDK4、CDK5、CDK6和CDK9中的一者或多者选择性地抑制CDK2的方法。在一些实施方案中，本文所述化合物对CDK2的选择性是对CDK1、CDK4、CDK5、CDK6和CDK9的超过5倍。在一些实施方案中，本文所述化合物对CDK2的选择性是对CDK1、CDK4、CDK5、CDK6和CDK9的超过10倍。在一些实施方案中，本文所述化合物对CDK2的选择性是对CDK1、CDK4、CDK5、CDK6和CDK9的超过50倍。在一些实施方案中，本文所述化合物对CDK2的选择性是对CDK1、CDK4、CDK5、CDK6和CDK9的超过100倍。在一些实施方案中，本文所述化合物对CDK2的选择性是对CDK1、CDK4、CDK5、CDK6和CDK9的超过200倍。

如本文所用的术语“生物样品”包括但不限于细胞培养物或其提取物；从哺乳动物获得的活检材料或其提取物；以及血液、唾液、尿液、粪便、精液、眼泪或其他体液或其提取物。

生物样品中CDK2(或其突变体)的活性的抑制可用于本领域技术人员已知的多种目的。此类目的的实例包括但不限于输血、器官移植、生物样本储存和生物测定。

本公开的另一个实施方案涉及抑制患者的蛋白激酶活性的方法，所述方法包括向所述患者施用本文所述化合物或包含所述化合物的组合物的步骤。

根据另一个实施方案，本公开涉及抑制患者的CDK2或其突变体的活性的方法，所述方法包括向所述患者施用本文所述化合物或包含所述化合物的组合物的步骤。根据某些实施方案，本公开涉及可逆地抑制患者的一种或多种CDK2或其突变体的活性的方法，所述方法包括向所述患者施用本文所述化合物或包含所述化合物的组合物的步骤。

根据另一个实施方案，本公开提供了用于治疗有需要的患者的由CDK2或其突变体介导的病症的方法，所述方法包括向所述患者施用本文所述化合物或其药学上可接受的组合物的步骤。此类病症详细阐述于本文中。在一些实施方案中，本公开提供了用于治疗有需要的患者的由CDK2或其突变体介导的病症的方法，所述方法包括向所述患者施用本文所述化合物或其药学上可接受的组合物的步骤，其中所述化合物可逆地抑制CDK2或其突变体。

根据另一个实施方案，本公开提供了抑制受试者的CDK2或其突变体的信号传导活性的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的本文所述化合物或其药学上可接受的组合物。在一些实施方案中，本公开提供了抑制受试者的CDK2信号传导活性的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的本文所述化合物或其药学上可接受的组合物。

在一些实施方案中，本公开提供了用于治疗有需要的患者的由CDK2或其突变体介导的病症的方法，所述方法包括向所述患者施用本文所述化合物或其药学上可接受的组合物的步骤，其中所述化合物可逆地抑制CDK2或其突变体。

本文所述化合物也可通过并入催化CDK2破坏的剂中来抑制CDK2功能。例如，可将所述化合物并入蛋白水解靶向嵌合体(PROTAC)中。PROTAC是双功能分子，其中一部分能够接合E3泛素连接酶，并且另一部分具有结合至靶蛋白的能力，所述靶蛋白意在供细胞蛋白质量控制机器降解。将靶蛋白募集至特异性E3连接酶会导致其被标记为破坏(即泛素化)并且随后由蛋白酶体降解。可使用任何E3连接酶。PROTAC的接合E3连接酶的部分经由由可变原子链组成的接头连接至PROTAC的接合靶蛋白的部分。因此，CDK2募集至E3连接酶将导致CDK2蛋白的破坏。可变原子链可包括例如环、杂原子和/或重复聚合物单元。其可为刚性或柔性的。其可使用有机合成领域中的标准技术连接至上述两个部分。

组合疗法

取决于待治疗的特定病症、疾患或疾病，通常施用以治疗所述疾患的额外治疗剂可与本文所述化合物和组合物组合施用。如本文所用，通常经施用以治疗特定疾病或疾患的额外治疗剂称为“适于所治疗的疾病或疾患”。

因此，在某些实施方案中，治疗方法包括将本文所述化合物或组合物与一种或多种额外治疗剂组合施用。在某些其他实施方案中，治疗方法包括施用本文所述化合物或组合物作为唯一治疗剂。

在一些实施方案中，一种或多种额外治疗剂选自抗体、抗体-药物偶联物、激酶抑制剂、免疫调节剂和组蛋白脱乙酰酶抑制剂。在一些实施方案中，一种或多种额外治疗剂选自以下剂或其药学上可接受的盐：BCR-ABL抑制剂：例如伊马替尼(imatinib)、伊尼洛替尼(inilotinib)、尼洛替尼(nilotinib)、达沙替尼(dasatinib)、泊舒替尼(bosutinib)、帕纳替尼(ponatinib)、巴非替尼(bafetinib)、达鲁舍替(danusertib)、塞卡替尼(saracatinib)、PF03814735；ALK抑制剂(参见Dardaei等人，2018,Nat Med.；24(4):512-517)：例如克唑替尼(crizotinib)、NVP-TAE 684、色瑞替尼(ceritinib)、艾乐替尼(alectinib)、布格替尼(brigatinib)、恩曲替尼(entrecinib)、劳拉替尼(lorlatinib)；BRAF抑制剂(参见Prahallad等人，2015,Cell Rep.12,1978-1985)：例如威罗菲尼(vemurafenib)、达拉非尼(dabrafenib)；FGFR抑制剂：例如英菲格拉替尼(infigratinib)、多韦替尼(dovitinib)、厄达替尼(erdafitinib)、BLU-554、AZD 4547；FLT3抑制剂：例如舒尼替尼(sunitinib)、米哚妥林(midostaurin)、坦度替尼(tanutinib)、索拉非尼(sorafenib)、来他替尼(lestaurtinib)、奎扎替尼(quizartinib)和克伦诺尼(crenolanib)；MEK抑制剂(参见Fedele等人，2018,BioRxiv 307876；Torres-Ayuso等人，2018,Cancer Discov.8,1210-1212；和Wong等人，2016,Oncotarget.2016年10月4日；7(40):65676-65695)：例如曲美替尼(trametinib)、考比替尼(cobimetinib)、美替尼(binimetinib)、司美替尼(selumetinib)；ERK抑制剂：例如优立替尼(ulixertinib)、MK-8353、LY-3214996；VEGF受体抑制剂：例如贝伐珠单抗(bevacizumab)、阿西替尼(axitinib)、阿柏西普(aflibercept)、布立尼布(brivanib)、莫特沙尼(motesanib)、帕西瑞肽(pasi reotide)、索拉非尼；酪氨酸激酶抑制剂：例如埃罗替尼(erlotinib)、利尼伐尼(linifanib)、舒尼替尼、帕唑帕尼(pazopanib)；表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂：吉非替尼(gefitnib)、奥希替尼(osimertinib)、西妥昔单抗(cetuximab)、帕尼单抗(panitumumab)；HER2受体抑制剂：例如曲妥珠单抗(trastuzumab)、来那替尼(neratinib)、拉帕替尼(lapatinib)、拉帕替尼；MET抑制剂：例如克唑替尼、卡赞替尼(cabozantinib)；CD20抗体：例如利妥昔单抗(rituximab)、托西莫单抗(tositumomab)、奥法木单抗(ofatumumab)；DNA合成抑制剂：例如卡培他滨(capecita bine)、吉西他滨(gemcitabine)、奈拉滨(nelarabine)、羟基脲；抗肿瘤剂：例如奥沙利铂(oxaliplatin)、顺铂；HER二聚化抑制剂：例如帕妥珠单抗(pertuzumab)；人类粒细胞集落刺激因子(G-CSF)调节剂：例如非格司亭(filgrastim)；免疫调节剂：例如阿夫土珠(afutuzumab)、来那度胺(lenalidomide)、沙利度胺(thalidomide)、泊马度胺(pomalidomide)；CD40抑制剂：例如达西珠单抗(dacetuzumab)；促凋亡受体激动剂(PARA)：例如杜拉乐明(dulanermin)；热休克蛋白(HSP)抑制剂：例如坦螺旋霉素(tanespimycin)(17-烯丙基氨基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-allylamino-17-desmethoxygeldanamycin))；Hedgehog拮抗剂：例如维莫德吉(vismodegib)；蛋白酶体抑制剂：例如硼替佐米(bortezomib)；PI3K抑制剂：例如匹替利司(pictilisib)、达克利司(dactolisib)、布帕利司(buparlisib)、塔塞利司(taselisib)、艾代拉利司(idelalisib)、度维利司(duvelisib)、乌帕利司(umbralisib)；磷脂酶A2抑制剂：例如阿那格雷(anagrelide)；BCL-2抑制剂：例如维奈托克(venetoclax)；芳香酶抑制剂：依西美坦(exemestane)、来曲唑(letrozole)、阿那曲唑(anastro zole)、法洛德(faslodex)、他莫昔芬(tamoxifen)；拓扑异构酶I抑制剂：例如伊立替康(irinotecan)、托泊替康(topotecan)；拓扑异构酶II抑制剂：例如依托泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)；mTOR抑制剂：例如替西罗莫司(temsirolimus)、地磷莫司(ridaforolimus)、依维莫司(everolimus)、西罗莫司(sirolimus)；破骨细胞骨吸收抑制剂：例如唑来膦酸(zoledronicacid)；CD33抗体药物偶联物：例如吉妥单抗(gemtu zumab ozogamicin)；CD22抗体药物偶联物：例如奥英妥珠单抗(inot uzumab ozogamicin)；CD20抗体药物偶联物：例如替伊莫单抗(ibritu momab tiuxetan)；体抑素(Somatostain)类似物：例如奥曲肽(octreotid e)；白细胞介素-11(IL-11)：例如奥普瑞白介素(oprelvekin)；合成红细胞生成素：例如达依泊汀α(darbepoetin alfa)；核因子κB受体活化剂(RANK)抑制剂：例如德尼单抗(denosumab)；促血小板生成素模拟肽：例如罗米司亭(romiplostim)；细胞生长刺激剂：例如帕利夫明(palifermin)；抗胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)抗体：例如芬妥木单抗(figitumumab)；抗CSl抗体：例如埃罗妥珠单抗(elotuzumab)；CD 52抗体：例如阿伦单抗(alemtuzumab)；CTLA-4抑制剂：例如替西木单抗(tremelimumab)、伊匹单抗(ipilimumab)；PD1抑制剂：例如尼沃鲁单抗(nivolumab)、派姆单抗(pembrolizumab)；免疫粘附素；例如匹利珠单抗(pidilizumab)、AMP-224；PDL1抑制剂：例如MSB0010718C；YW243.55.S70、MPDL3280A；MEDI-4736、MSB-0010718C或MDX-1105；LAG-3抑制剂：例如BMS-986016；GITR激动剂；GITR融合蛋白和抗GITR抗体；组蛋白脱乙酰基酶抑制剂(HDI)：例如伏立诺他(voninostat)；抗CTLA4抗体：例如替西木单抗(tremelimumab)、伊匹单抗(ipilimumab)；烷基化剂：例如替莫唑胺(temozolomide)、放线菌素(dactinomycin)、美法仑(melphalan)、六甲蜜胺卡莫司汀(altretamine carmustine)、苯达莫司汀(bendamustine)、白消安(busulfan)、卡铂、洛莫司汀(lomustine)、顺铂、氯芥苯丁酸、环磷酰胺、达卡巴嗪(dacarbazine)、六甲蜜胺(altretamine)、异环磷酰胺、丙卡巴肼(procarbazine)、甲基二(氯乙基)胺(mechlorethamine)、氮芥和双(氯乙基)甲胺(mechloroethamine)、链脲霉素(streptozocin)、噻替派(thiotepa)；生物反应调节剂：例如卡介苗(bacillus calmette-guerin)、地尼白介素(denileukin diftitox)；抗肿瘤抗生素：例如多柔比星(doxorubicin)、博莱霉素(bleomycin)、道诺霉素(daunorubicin)、道诺霉素脂质体、米托蒽醌(mitoxantrone)、泛艾霉素(epirubicin)、伊达比星(idarubicin)、丝裂霉素C(mitomycin C)；抗微管剂：例如雌氮芥；组织蛋白酶K抑制剂：例如奥当卡替(odanacatib)；埃博霉素(Epothilone)类似物：例如伊沙匹隆(ixabepilone)；TpoR激动剂：例如艾曲波帕(eltrombopag)；抗有丝分裂剂：例如多西他赛(docetaxel)；肾上腺类固醇抑制剂：例如氨鲁米特(aminoglutethimide)；抗雄激素：例如尼鲁米特(nilutamide)；雄激素受体抑制剂：例如恩杂鲁胺(enzalutamide)、乙酸阿比特龙(abiraterone acetate)、奥特罗奈(orteronel)、加来特龙(galeterone)、和赛维罗奈(seviteronel)、比卡鲁胺(bicalutamide)、氟他胺(flutamide)；雄激素类：例如氟羟甲基睾酮(fluoxymesterone)；CDK1抑制剂：例如阿伏西地(alvocidib)、帕博西尼(palbociclib)、瑞博西尼(ribociclib)、曲拉西尼(trilaciclib)、阿贝西尼(abemaciclib)；促性腺素释放激素(GnRH)受体激动剂：例如柳培林(leuprolide)或乙酸柳培林(leuprolide acetat e)；紫杉烷抗肿瘤剂：例如卡巴他赛(cabazitaxel)、洛他赛(larotaxel)；5-HTla受体激动剂：例如扎利罗登(xaliproden)；HPV疫苗：例如由GlaxoSmithKline出售的由Merck出售的铁螯合剂：例如地拉罗司(deferasirox)；抗代谢物：例如克拉瑞滨(claribine)、5-氟尿嘧啶、6-硫鸟嘌呤、培美曲塞(pemetrexed)、阿糖胞苷(cyta rabine)、阿糖胞苷脂质体、地西他滨(decitabine)、羟基脲、氟达拉滨(fludarabine)、氟尿苷、克拉屈滨(cladribine)、甲氨蝶呤(methotrexate)、喷司他汀(pentostatin)；双膦酸盐类：例如帕米膦酸盐(pamidronate)；去甲基化剂：例如5-阿扎胞苷(5-azacitidine)、地西他滨；抗肿瘤植物生物碱：例如蛋白结合型太平洋紫杉醇(paclitaxel protein-bound)；长春碱(vinblastine)、长春新碱(vincristine)、长春瑞滨(vinorelbine)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)；类视色素：例如阿利维甲酸(alitretinoin)、维甲酸(tretinoin)、异维甲酸(isotretinoin)、贝沙罗汀(bexarotene)；糖皮质类固醇：例如氢化可的松(hydrocortisone)、地塞米松(dexamethasone)、泼尼松龙(prednisolone)、泼尼松(prednisone)、甲基泼尼松龙(methylpr ednisolone)；细胞激素：例如白细胞介素-2、白细胞介素-11(奥普瑞白介素(oprevelkin))、α干扰素alfa(IFN-α)；雌激素受体下调剂：氟维司群(fulvestrant)；抗雌激素：例如他莫昔芬、托瑞米芬(toremifene)；选择性雌激素受体调节剂(SERM)：例如雷洛昔芬(raloxifene)；黄体化激素释放激素(LHRH)激动剂：例如戈舍瑞林(goserelin)；黄体酮：例如甲地孕酮(megestrol)；细胞毒性剂：三氧化二砷、天冬酰胺酶(也称为L-天冬酰胺酶、伊文氏杆菌属(Erwinia)L-天冬酰胺酶；抗呕吐药：例如NK-1受体拮抗剂(例如卡索匹坦(casopitant))；细胞保护剂：例如氨磷汀(amifostine)、甲酰四氢叶酸；和免疫检查点抑制剂。术语“免疫检查点”是指CD4和CD8 T细胞的细胞表面上的一组分子。免疫检查点分子包括但不限于程序化死亡1(PD-1)、细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA-4)、B7H1、B7H4、OX-40、CD 137、CD40和LAG3。可用作可用于本公开的方法中的免疫检查点抑制剂的免疫治疗剂包括但不限于PD-L1、PD-L2、CTLA4、TIM3、LAG3、VISTA、BTLA、TIGIT、LAIR1、CD 160、2B4和/或TGFRβ的抑制剂。

在一些实施方案中，一种或多种额外治疗剂选自以下剂：抗CDK2抗体；细胞毒性剂；雌激素受体靶向或其他内分泌疗法、免疫检查点抑制剂、其他CDK抑制剂、受体酪氨酸激酶抑制剂、BRAF抑制剂、MEK抑制剂、PI3K抑制剂、SHP2抑制剂和SRC抑制剂。(参见M.Katoh,Nat.Rev.Clin.Oncol.2019,16:105-122；Y.K.Chae等人，Oncotarget 2017,8:16052-16074；L.Formisano等人，Nat.Comm.2019,10:1373-1386；和其中所引用的参考文献。)

通过代码、通用名或商品名来标识的活性化合物的结构可从标准纲要“The MerckIndex”的现行版本或从数据库(例如Patents International(例如IMS WorldPublications))获得。

本文所述化合物也可与已知治疗方法(例如激素或辐射的施用)组合使用。在某些实施方案中，所提供的化合物用作放射增敏剂，尤其是用于治疗对放射疗法表现出不良敏感性的肿瘤。

本文所述化合物可单独施用或与一种或多种其他治疗性化合物组合施用，可能的组合疗法采取以下形式：固定组合，或将本文所述化合物和一种或多种其他治疗性化合物交错施用或彼此独立地给予，或将固定组合和一种或多种其他治疗性化合物组合施用。本文所述化合物可除此之外或另外与化学疗法、放射疗法、免疫疗法、光疗法、手术干预或这些的组合进行组合施用，尤其用于肿瘤疗法。在如上文所述其他治疗策略的情形下，长期疗法与辅助疗法同样可能。其他可能的治疗是维持患者在肿瘤消退后的状态的疗法，或者甚至是化学预防性疗法，例如在处于风险的患者中。

作为多剂量方案的一部分，那些额外剂可与含有所提供化合物的组合物分开施用。或者，那些剂可为与本文所述化合物一起混合在单一组合物中的单一剂型的一部分。如果作为多剂量方案的一部分施用，则两种活性剂可同时、依序或彼此在一段时间内，通常彼此在五小时内施用。

如本文所用，术语“组合(combination)”、“组合(combined)”和相关术语是指根据本公开的治疗剂的同时或依序施用。例如，本文所述化合物可与另一治疗剂同时或依序以单独的单位剂型或在单一单位剂型中一起施用。因此，本公开提供了包含本文所述化合物、额外治疗剂和药学上可接受的载体、佐剂或媒介物的单一单位剂型。

可与载体材料组合以产生单一剂型的本文所述化合物和额外治疗剂二者(在如上文所述包含额外治疗剂的那些组合物中)的量将根据所治疗宿主和特定施用方式而变化。优选地，本文所述组合物应配制成使得可施用剂量在0.01-100mg/kg体重/天之间的本文所述化合物。

在包含额外治疗剂的那些组合物中，所述额外治疗剂和本文所述化合物可协同作用。因此，此类组合物中额外治疗剂的量将小于仅利用所述治疗剂的单一疗法中所需的量。在此类组合物中，可施用剂量在0.01-1,000μg/kg体重/天之间的额外治疗剂。

存在于本文所述组合物中的额外治疗剂的量将不超过通常在包含所述治疗剂作为唯一活性剂的组合物中施用的量。优选地，本文所公开的组合物中的额外治疗剂的量将在包含所述剂作为唯一治疗活性剂的组合物中通常存在的量的约50％至100％范围内。

本文所述化合物或其药物组合物也可并入组合物中，用于涂覆可植入医学装置，例如义肢、人工瓣膜、血管移植物、支架和导管。血管支架例如已用于克服再狭窄(损伤后血管壁的再变窄)。然而，使用支架或其他可植入装置的患者存在凝块形成或血小板活化的风险。可通过用包含激酶抑制剂的药学上可接受的组合物预涂覆装置来防止或减轻这些不期望的作用。本公开还涵盖涂覆有本文所述化合物的可植入装置。

本公开的任何化合物和/或组合物都可提供于包含所述化合物和/或组合物的药盒中。因此，在一些实施方案中，本公开的化合物和/或组合物提供于药盒中。

通过以下非限制性实施例进一步阐述本公开。

实施例

本文提供实施例以促进对本公开的更完全理解。以下实施例用于说明制作和实践本公开主题的示例性模式。然而，本公开的范围不应解释为限于在这些实施例中公开的特定实施方案，所述实施例仅是说明性的。

如以下实施例中所绘示，在某些示例性实施方案中，根据以下一般程序制备化合物。应当了解，尽管一般方法绘示了本文所述某些化合物的合成，但以下一般方法和本领域普通技术人员已知的其他方法可适用于如本文所述的这些化合物中每一者的其他类别和子类以及种类。通过与本文实施例中所述的方法基本上类似的方法和本领域技术人员已知的方法制备本文所述额外化合物。

在下文所述合成方法的说明中，除非另有说明，除非另有指示，否则应理解所有反应条件(例如，反应溶剂、气氛、温度、持续时间和处理程序)都选自用于所述反应的标准条件。在一般方案中，有机合成领域的技术人员应理解，分子的不同部分上存在的官能团应当与所提出的试剂和反应相容。与反应条件不相容的取代基对于本领域技术人员而言将是显而易见的，并且因此指出替代方法(例如，使用保护基团或替代反应)。用于实施例的起始材料是市售的，或者可容易地通过标准方法从已知材料制备。

涵盖至少一些在本文中标识为“中间体”的化合物为本公开的化合物。

实施例1

N-(1-甲基环丙基)-2-((1R,3S)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)乙酰胺

(Z)-3-(2-(叔丁氧基)-2-氧代亚乙基)环戊烷-1-甲酸甲酯

步骤1：在0℃下在氮气气氛下向2-(二乙氧基磷酰基)乙酸叔丁酯(35g,0.14mol)于THF(100mL)中的混合物中滴加LiHMDS(140mL,0.14mol)。将混合物在0℃下搅拌1h，接着添加3-氧代环戊烷-1-甲酸甲酯(10g,70mmol)。将混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物用饱和NH₄Cl(50mL)淬灭，并且将水相用乙酸乙酯(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将所得粗制材料通过硅胶色谱法(20g柱；用PE/EA；8/1洗脱)纯化。在真空中浓缩产生呈无色油状物的(Z)-3-(2-(叔丁氧基)-2-氧代亚乙基)环戊烷-1-甲酸甲酯(4.8g,28％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝241.10；HPLC tR＝1.227min。

3-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)环戊烷-1-甲酸甲酯

步骤2：在25℃下将(Z)-3-(2-(叔丁氧基)-2-氧代亚乙基)环戊烷-1-甲酸甲酯(4.8g,20mmol)和Pd/C(0.43g,4.0mmol)于MeOH(50mL)中的搅拌混合物用H₂处理2h。将混合物通过硅藻土垫过滤。将滤液在真空下浓缩。在真空中浓缩产生呈无色油状物的3-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)环戊烷-1-甲酸甲酯(4.1g,85％)。m/z(ES⁺)[M+Na]⁺＝265.15；HPLCtR＝1.243min。

2-(3-(2-氰基乙酰基)环戊基)乙酸叔丁酯

步骤3：在-78℃下在氮气气氛下向CH₃CN(1.4g,34mmol)和3-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)环戊烷-1-甲酸甲酯(4.1g,17mmol)于THF(40mL)中的混合物中滴加LiHMDS(25mL,25mmol)。将混合物缓慢升温至室温并在室温下再搅拌2h。将反应混合物用H₂O(50mL)淬灭，并且将水相用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。分离呈无色油状物的2-(3-(2-氰基乙酰基)环戊基)乙酸叔丁酯(1.6g,38％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝252.10；HPLC tR＝0.982min。

2-(3-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)环戊基)乙酸叔丁酯

步骤4：在25℃下在氮气气氛下向叔丁基肼(0.88g,9.9mmol)于EtOH(5mL)中的混合物中逐份添加NaOH(0.40g,9.9mmol)。将混合物在25℃下搅拌1h，接着添加2-(3-(2-氰基乙酰基)环戊基)乙酸叔丁酯(2.5g,9.9mmol)。将混合物在50℃下搅拌3h。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释，并用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内0％至100％梯度；检测器，UV 220nm。在真空中浓缩产生呈无色油状物的2-(3-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)环戊基)乙酸叔丁酯(2g,60％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝322.30；HPLC tR＝0.985min.。

2-(3-(1-(叔丁基)-5-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环戊基)乙酸叔丁酯

步骤5：向圆底烧瓶中装入2-(3-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)环戊基)乙酸叔丁酯(2g,6mmol)、2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酸(1g,7mmol)、HATU(4g,9mmol)、DIEA(2g,0.02mol)和DCM(20mL)。将溶液在25℃下搅拌1h。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释，并且将水相用EA(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将所得粗制材料通过硅胶色谱法(用DCM/MeOH＝20/1洗脱)纯化。在真空中浓缩产生呈无色油状物的2-(3-(1-(叔丁基)-5-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环戊基)乙酸叔丁酯(800mg,30％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝445.35；HPLC tR＝1.243min。

2-(3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)乙酸

步骤6：在75℃下将2-(3-(1-(叔丁基)-5-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环戊基)乙酸叔丁酯(844mg,1.90mmol)于FA(8mL)中的搅拌混合物用N₂处理12h。将所得粗制材料通过C18(乙腈/水)纯化。冻干得到呈黄色油状物的2-(3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)乙酸(600mg,95.1％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝333.20；HPLC tR＝0.302min。

N-(1-甲基环丙基)-2-(3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)乙酰胺

步骤7：向可再密封反应小瓶中装入2-(3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)乙酸(600mg,1.81mmol)、1-甲基环丙-1-胺(642mg,9.03mmol)、HOBt(415mg,2.71mmol)、EDC(692mg,3.61mmol)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次。添加DCM(10mL)，并且将混合物在25℃下搅拌1h。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释，并且将水相用EA(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将所得粗制材料通过硅胶色谱法(1g柱；用DCM/MeOH；20/1洗脱)纯化。在真空中浓缩产生呈无色油状物的N-(1-甲基环丙基)-2-(3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)乙酰胺(187mg,26.9％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝386.35；HPLC tR＝0.778min。

N-(1-甲基环丙基)-2-((1R,3S)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)乙酰胺

步骤8：将N-(1-甲基环丙基)-2-(3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)乙酰胺(400mg,1.04mmol)通过手性制备型HPLC(柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：MtBE(0.1％TEA)--HPLC，流动相B：IPA:DCM＝1:1；流量：20mL/min；梯度：19min内40％ B至40％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：11.69；RT2(min)：15.11；样品溶剂：IPA:DCM＝1:1；注入体积：0.3mL；运行次数：10)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的N-(1-甲基环丙基)-2-((1R,3S)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)乙酰胺(44mg,11％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝386.25；HPLC tR＝0.800min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.07(s,1H),10.61(s,1H),7.99(s,1H),6.24(d,J＝14.6Hz,2H),3.83(s,2H),3.02(dq,J＝10.7,8.4Hz,1H),2.20(s,4H),2.10(dt,J＝13.5,7.0Hz,1H),2.06-1.92(m,3H),1.77(dq,J＝14.8,7.7Hz,1H),1.59(dtd,J＝12.5,9.3,6.5Hz,1H),1.31(dtd,J＝12.9,9.1,5.9Hz,1H),1.25(s,3H),1.18(dt,J＝12.3,10.5Hz,1H),0.59-0.52(m,2H),0.52-0.44(m,2H)。

根据实施例1的方法制备的额外化合物绘示于下表2中。

表2.额外示例性化合物

实施例2

(1-甲基环丙基)氨基甲酸rel-(1R,4S)-4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环庚基酯

4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环庚烷-1-甲酸甲酯

步骤1：在0℃下在氮气气氛下向4-羟基环庚烷-1-甲酸甲酯(1g,6mmol)和1H-咪唑(1g,0.02mol)于DMF(10mL)中的混合物中滴加叔丁基氯二苯基硅烷(2g,7mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应混合物用水(20mL)稀释，并且将水相用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗制产物通过硅胶色谱法(用PE/EA(比率：10/1)洗脱)纯化。在真空中浓缩产生呈黄色油状物的4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环庚烷-1-甲酸甲酯(2g,5mmol,80％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝411.20；HPLCtR＝1.527min。

3-(4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环庚基)-3-氧代丙腈

步骤2：在-78℃下在氮气气氛下向4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环庚烷-1-甲酸甲酯(1.8g,4.4mmol)和乙腈(0.36g,8.8mmol)于THF(20mL)中的溶液中滴加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(0.81g,4.8mmol)。将混合物升温至25℃并搅拌1h。将混合物用饱和NH₄Cl淬灭。将反应混合物用水(20mL)稀释，并且将水相用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗制产物通过硅胶色谱法(用PE/EA(比率：30/1)洗脱)纯化。在真空中浓缩产生呈黄色油状物的3-(4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环庚基)-3-氧代丙腈(1.7g,4.1mmol,92％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝420.10；HPLC tR＝1.280min。

1-(叔丁基)-3-(4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环庚基)-1H-吡唑-5-胺

步骤3：向圆底烧瓶中装入叔丁基肼盐酸盐(0.76g,6.1mmol)、氢氧化钠(0.24g,6.1mmol)、EtOH(18mL)和搅拌棒。将溶液在25℃下搅拌1小时。添加3-(4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环庚基)-3-氧代丙腈(1.7g,4.1mmol)，并且将溶液在50℃下搅拌6小时。将混合物用水(20mL)淬灭，并且将水相用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，12min内40％至70％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈黄色油状物的1-(叔丁基)-3-(4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环庚基)-1H-吡唑-5-胺(1.9g,3.9mmol,96％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝490.50；HPLC tR＝1.305min。

N-(1-(叔丁基)-3-(4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环庚基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤4：向圆底烧瓶中装入1-(叔丁基)-3-(4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环庚基)-1H-吡唑-5-胺(1g,2mmol)、2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酸(0.3g,2mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.8g,6mmol)、EA(12mL)和搅拌棒。添加于EA中的T₃P(2g,50％ Wt,3mmol)，并且将溶液在25℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(20mL)稀释，并且将水相用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内80％至100％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈黄色油状物的N-(1-(叔丁基)-3-(4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环庚基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(1.1g,1.8mmol,90％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝613.25；HPLC tR＝1.543min。

N-(1-(叔丁基)-3-(4-羟基环庚基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤5：向圆底烧瓶中装入N-(1-(叔丁基)-3-(4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环庚基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(1.1g,1.8mmol)和搅拌棒。添加1N TBAF的THF溶液(12mL)，并且将溶液在75℃下搅拌16小时。将混合物用水(20mL)淬灭，并用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内20％至70％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈黄色油状物的N-(1-(叔丁基)-3-(4-羟基环庚基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(450mg,1.20mmol,67％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝375.15；HPLC tR＝0.860min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸4-(1-(叔丁基)-5-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环庚基酯

步骤6：向圆底烧瓶中装入N-(1-(叔丁基)-3-(4-羟基环庚基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(790mg,2.11mmol)、1-异氰酸基-1-甲基环丙烷(6.8mL，0.62M于甲苯中，4.22mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(818mg,6.33mmol)、甲苯(10mL)和搅拌棒。将溶液在110℃下搅拌20小时。将混合物在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内20％至60％梯度；检测器，UV220nm，得到呈黄色油状物的(1-甲基环丙基)氨基甲酸4-(1-(叔丁基)-5-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环庚基酯(800mg,1.70mmol,80.4％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝472.15；HPLC tR＝1.098min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环庚基酯

步骤7：向圆底烧瓶中装入(1-甲基环丙基)氨基甲酸4-(1-(叔丁基)-5-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环庚基酯(870mg,1.84mmol)和搅拌棒。添加HCOOH(8mL)，并且将溶液在75℃下搅拌8小时。将混合物在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内20％至70％梯度；检测器，UV 220nm，得到呈黄色非晶形固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环庚基酯(650mg,1.56mmol,84.8％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝416.40；HPLC tR＝0.926min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸rel-(1R,4S)-4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环庚基酯

步骤8：将(1-甲基环丙基)氨基甲酸4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环庚基酯(650mg,1.56mmol)通过手性制备型HPLC(柱：CHIRALPAK IF，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％TEA)--HPLC，流动相B：MeOH:DCM＝1:1；流量：20mL/min；梯度：21min内60％ B至60％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：7.33；RT2(min)：13.51；样品溶剂：MeOH:DCM＝1:1；注入体积：0.3mL；运行次数：9)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸rel-(1R,4S)-4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环庚基酯(31.1mg,74.9μmol,4.78％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝416.35；HPLC tR＝0.909min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.06(s,1H),10.62(s,1H),7.32(s,1H),6.27(s,1H),6.22(s,1H),4.74(s,1H),3.83(s,2H),2.97-2.66(m,1H),2.21(s,3H),1.94(d,J＝7.4Hz,2H),1.77(s,5H),1.58(d,J＝11.2Hz,2H),1.39(s,1H),1.24(s,3H),0.59(s,2H),0.47(s,2H)。

根据实施例2的方法制备的额外化合物绘示于下表3中。

表3.额外示例性化合物

实施例3

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(1R,3S)-3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环戊烷-1-甲酸甲酯

步骤1：向3-羟基环戊烷-1-甲酸甲酯(3.5g,24mmol)和Et₃N(7.4g,10mL,73mmol)于DMF(40mL)中的冰冷溶液中添加TBDPS-Cl(10g,36mmol)，接着将所得混合物在室温下搅拌过夜。将所得混合物用EA(100mL)稀释，并用盐水(3*80mL)洗涤。将有机层经Na₂SO₄干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用0～15％ EA的石油醚溶液洗脱)纯化，得到呈浅色固体的3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环戊烷-1-甲酸甲酯(8.8g,23mmol,95％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝383.15；HPLC tR＝1.425min。

3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-1-甲基环戊烷-1-甲酸甲酯

步骤2：在-78℃下向3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环戊烷-1-甲酸甲酯(8.8g,23mmol)于THF(100mL)中的溶液中添加LDA溶液(13.7mL，2M于THF中，27.6mmol)。将所得混合物在-78℃下搅拌0.5h，接着在-78℃下将MeI(16g,0.12mol)添加至以上混合物中。再搅拌1小时后，使反应混合物升温至室温。将所得混合物用NH₄Cl(饱和水溶液，150mL)淬灭，并用EA(3*150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2*100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用0～15％ EA的石油醚溶液洗脱)纯化，得到呈浅色油状物的3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-1-甲基环戊烷-1-甲酸甲酯(8.5g,21mmol,93％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝397.20；HPLC tR＝1.507min。

3-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-1-甲基环戊基)-3-氧代丙腈

步骤3：向3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-1-甲基环戊烷-1-甲酸甲酯(8.5g21mmol)和MeCN(1.1g,26mmol)于THF(80mL)中的溶液中足够缓慢地滴加LiHMDS(21mL，1M于THF中，21mmol)，以维持内部温度低于-60℃。在-70℃下搅拌1小时后，将反应物用饱和NH₄Cl(100mL)淬灭，并用EA(3*100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2*100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到呈浅色油状物的3-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-1-甲基环戊基)-3-氧代丙腈(8g,0.02mol,90％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝406；HPLC tR＝1.507min。

1-(叔丁基)-3-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-1-甲基环戊基)-1H-吡唑-5-胺

步骤4：在室温下将氢氧化钠(0.2g,5mmol)逐份添加至叔丁基肼盐酸盐(0.8g,6mmol)于EtOH(0.5mL)中的悬浮液中，并在室温下搅拌1小时。在室温下添加3-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-1-甲基环戊基)-3-氧代丙腈(2g,5mmol)于乙醇中的溶液，接着将混合物加热至50℃并搅拌过夜。使反应混合物冷却至室温，过滤，并在真空下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内0％至100％梯度；检测器，UV 220nm，得到呈白色固体的1-(叔丁基)-3-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-1-甲基环戊基)-1H-吡唑-5-胺(0.95g,2.0mmol,40％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝476.40；HPLC tR＝1.287min。

N-(1-(叔丁基)-3-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-1-甲基环戊基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤5：向1-(叔丁基)-3-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-1-甲基环戊基)-1H-吡唑-5-胺(0.95g,2.0mmol)、2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酸(0.34g,2.4mmol)和DIEA(0.77g,6.0mmol)于DCM(10mL)中的冷却混合物中添加2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(3.8g，50％ Wt于乙酸乙酯中的溶液，6.0mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2小时。将反应物用饱和Na₂CO₃水溶液(10mL)淬灭并用DCM(2*10mL)萃取。将有机层用Na₂CO₃(2*10mL)、盐水(30mL)洗涤，并浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内0％至100％梯度；检测器，UV220nm。这产生呈白色固体的N-(1-(叔丁基)-3-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-1-甲基环戊基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(1.05g,1.75mmol,88％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝599.50；HPLC tR＝1.608min。

N-(1-(叔丁基)-3-(3-羟基-1-甲基环戊基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤6：将N-(1-(叔丁基)-3-(3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)-1-甲基环戊基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(1.05g,1.75mmol)和TBAF(15mL，1M于THF中，15mmol)的混合物在75℃下搅拌6小时。将反应混合物冷却至室温，用水(10mL)稀释，并用EA(3*150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2*100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并在真空下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，40min内0％至100％梯度；检测器，UV 220nm，得到呈白色固体的N-(1-(叔丁基)-3-(3-羟基-1-甲基环戊基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(450mg,1.25mmol,71.2％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝361.25；HPLC tR＝0.817min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸3-(1-(叔丁基)-5-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)-3-甲基环戊基酯

步骤7：在室温下在氮气气氛下向N-(1-(叔丁基)-3-(3-羟基-1-甲基环戊基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(450mg,1.25mmol)和1-异氰酸基-1-甲基环丙烷(0.6M于甲苯中)(6mL,4mmol)的搅拌混合物中滴加DIEA(484mg,3.75mmol)。将所得混合物在100℃下在氮气气氛下搅拌16小时。接着使反应混合物冷却至室温并减压浓缩。将残余物通过反相快速色谱法纯化，得到呈浅黄色油状物的(1-甲基环丙基)氨基甲酸3-(1-(叔丁基)-5-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)-3-甲基环戊基酯(480mg,1.05mmol,84.0％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝458.40；HPLC tR＝1.170min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

步骤8：将(1-甲基环丙基)氨基甲酸3-(1-(叔丁基)-5-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)-3-甲基环戊基酯(480mg,1.05mmol)于FA(3mL)中的溶液在70℃下搅拌4小时。将所得混合物浓缩至干燥，并且通过反相快速色谱法纯化，得到呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(360mg,897μmol,85.5％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝402.20；HPLC tR＝0.880min。

顺式-(1-甲基环丙基)氨基甲酸3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯和反式-(1-甲基环丙基)氨基甲酸3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

步骤9：将(1-甲基环丙基)氨基甲酸3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(360mg,897μmol)通过制备型HPLC利用以下条件分离：柱：XBridge Prep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃+0.1％NH₃.H₂O)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内20％ B至42％ B，42％ B；波长：220nm；RT1(min)：6.97/7.93；运行次数：3，得到呈白色固体的顺式-(1-甲基环丙基)氨基甲酸3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(60mg,0.15mmol,17％)和呈白色固体的反式-(1-甲基环丙基)氨基甲酸3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(220mg,548μmol,61.1％)。

顺式：m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝402.35；HPLC tR＝0.854min。

反式：m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝402.40；HPLC tR＝0.894min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(1R,3S)-3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

步骤10：将顺式-(1-甲基环丙基)氨基甲酸3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(100mg,249μmol)通过制备型手性-HPLC利用以下条件纯化：柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％ TEA)--HPLC，流动相B：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：15min内70％ B至70％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：5.33；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；注入体积：0.9mL；运行次数：3。这得到呈白色非晶形固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(1R,3S)-3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(34mg,85μmol,34％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝402.35；HPLC tR＝0.861min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.08(s,1H),10.61(s,1H),7.16(d,J＝103.7Hz,1H),6.26(d,J＝28.0Hz,2H),5.05(s,1H),3.83(s,2H),2.20(s,3H),2.18-2.04(m,2H),1.99(s,1H),1.85(d,J＝14.0Hz,1H),1.69(s,2H),1.23(d,J＝8.9Hz,6H),0.58(s,2H),0.45(s,2H)。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(1R,3R)-3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

将反式-(1-甲基环丙基)氨基甲酸3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(220mg,548μmol)通过制备型手性-HPLC利用以下条件纯化：柱：CHIRALPAK IH，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％ TEA)--HPLC，流动相B：EtOH：DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：8min内30％ B至30％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：5.03；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；注入体积：0.4mL；运行次数：6。这得到呈白色非晶形固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(1R,3R)-3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(81.3mg,203μmol,37.0％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝402.35；HPLC tR＝0.900min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.12(s,1H),10.63(s,1H),7.23(d,J＝88.4Hz,1H),6.26(d,J＝27.4Hz,2H),5.02(d,J＝41.5Hz,1H),3.83(s,2H),2.39-2.25(m,1H),2.21(s,3H),2.10-1.97(m,1H),1.91(d,J＝6.5Hz,1H),1.72(d,J＝44.1Hz,3H),1.35(s,3H),1.24(s,3H),0.61(d,J＝6.1Hz,2H),0.48(d,J＝5.2Hz,2H)。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(1S,3R)-3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

将顺式-(1-甲基环丙基)氨基甲酸3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(100mg,249μmol)通过制备型手性-HPLC利用以下条件纯化：柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％ TEA)--HPLC，流动相B：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：15min内70％ B至70％ B；波长：220/254nm；RT2(min)：10.65；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；注入体积：0.9mL；运行次数：3。这得到呈白色非晶形固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(1S,3R)-3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(34mg,85μmol,34％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝402.35；HPLC tR＝0.865min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.08(s,1H),10.62(s,1H),7.29(s,1H),6.26(d,J＝26.7Hz,2H),5.05(s,1H),3.83(s,2H),2.20(s,3H),2.16-2.03(m,2H),1.98(s,1H),1.86(s,1H),1.73-1.59(m,2H),1.23(d,J＝8.7Hz,6H),0.51(d,J＝49.6Hz,4H)。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(1S,3S)-3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

将反式-(1-甲基环丙基)氨基甲酸3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(220mg,548μmol)通过制备型手性-HPLC利用以下条件纯化：柱：CHIRALPAK IH，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％ TEA)--HPLC，流动相B：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：8min内30％ B至30％ B；波长：220/254nm；RT2(min)：7.26；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；注入体积：0.4mL；运行次数：6。这得到呈白色非晶形固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(1S,3S)-3-甲基-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(86.8mg,216μmol,39.5％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝402.35；HPLC tR＝0.898min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.12(s,1H),10.63(s,1H),7.34(s,1H),6.26(d,J＝27.2Hz,2H),5.02(d,J＝42.9Hz,1H),3.83(s,2H),2.42-2.25(m,1H),2.21(s,3H),2.01(s,1H),1.92(t,J＝9.4Hz,1H),1.72(d,J＝46.0Hz,3H),1.35(s,3H),1.24(s,3H),0.60(s,2H),0.48(s,2H)。

根据实施例3的方法制备的额外化合物绘示于下表4中。

实施例4

3-氟-4-异丙基哒嗪

4-(丙-1-烯-2-基)哒嗪-3(2H)-酮

步骤1：向圆底烧瓶中装入6-氯哒嗪-3(2H)-酮(10g,1Eq,77mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(丙-1-烯-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(23g,1.8Eq,0.14mol)、碳酸钾(32g,3Eq,0.23mol)、二噁烷/H₂O(20mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，添加Pd(dppf)Cl₂(2.8g,0.05Eq,3.8mmol)。将混合物在100℃下搅拌2小时。将溶液浓缩。将所得粗制材料通过快速色谱法(乙腈/水)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的4-(丙-1-烯-2-基)哒嗪-3-醇(4.0g,31％)。

4-异丙基哒嗪-3(2H)-酮

步骤2：向圆底烧瓶中装入4-(丙-1-烯-2-基)哒嗪-3-醇(4g,1eq,0.03mol)、Pd/C(0.5g)、MeOH(20mL)和搅拌棒，接着抽空并用氢气吹扫三次。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物过滤，并且将滤液浓缩，得到呈黄色油状物的4-异丙基哒嗪-3(2H)-酮(3.7g,91％)。

3-氯-4-异丙基哒嗪

步骤3：向圆底烧瓶中装入4-异丙基哒嗪-3-醇(3.7g,1eq,27mmol)、POCl₃(15mL)和搅拌棒，并且将溶液在85℃下搅拌4小时。将反应混合物倒入冰水中。将溶液用EA萃取三次。将有机相合并且浓缩。将所得粗制材料通过快速色谱法(乙腈/水)纯化。冻干得到呈黑色油状物的3-氯-4-异丙基哒嗪(3.8g,24mmol,91％)。

3-氟-4-异丙基哒嗪

步骤4：将3-氯-4-异丙基哒嗪(1.9g,12.1mmol,1eq)、CsF(12.8g,84.7mmol,7eq)和4A分子筛(1g)于DMSO(25mL)中的溶液在100℃下搅拌16h。将溶液过滤。将溶液通过快速色谱法(MeCN/H₂O)纯化，得到呈黑色油状物的3-氟-4-异丙基哒嗪(410mg,24％)。

实施例5

4-环丙基异噻唑-3-醇

3-(苄氧基)异噻唑

步骤1：在0℃下在氮气气氛下向异噻唑-3(2H)-酮(5g,0.05mol)于DMF(50mL)中的混合物中逐份添加碳酸钾(13.66g,0.1mol)和(溴甲基)苯(10.09g,0.06mol)。将混合物在25℃下搅拌4小时。将反应混合物用水(20mL)稀释，并且将水相用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤三次，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗制产物通过硅胶色谱法(10g柱；用PE/EA(比率：30/1)洗脱)纯化。在真空中浓缩产生呈透明油状物的3-(苄氧基)异噻唑(5.5g,29mmol,60％)。

3-(苄氧基)-4-溴异噻唑

步骤2：向圆底烧瓶中装入3-(苄氧基)异噻唑(5.5g,29mmol)、1-溴吡咯烷-2,5-二酮(5.6g,32mmol)、MeCN(60mL)和搅拌棒。将溶液在25℃下搅拌2天。将混合物用水(20mL)淬灭，并且将水相用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗制产物通过硅胶色谱法(15g柱；用PE/EA(比率：50/1)洗脱)纯化。在真空中浓缩产生呈透明油状物的3-(苄氧基)-4-溴异噻唑(6g,0.02mol,80％)。

3-(苄氧基)-4-环丙基异噻唑

步骤3：向可再密封反应小瓶中装入3-(苄氧基)-4-溴异噻唑(200mg,740μmol)、环丙基硼酸(636mg,7.40mmol)、PdCl₂(dppf)(54.2mg,74.0μmol)、Cs₂CO₃(482mg,1.48mmol)、1,4-二噁烷/H₂O(4mL,4/1)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次。将混合物在100℃下搅拌12小时。将混合物用水(20mL)稀释，并且将水相用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，20min内20％至100％梯度；检测器，UV254nm，得到呈褐色油状物的3-(苄氧基)-4-环丙基异噻唑(130mg,562μmol,75.9％)。

4-环丙基异噻唑-3-醇

步骤4：向圆底烧瓶中装入3-(苄氧基)-4-环丙基异噻唑(600mg,2.59mmol)和搅拌棒。添加浓HCl(6mL)，并且将溶液在50℃下搅拌5小时。将混合物在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内0％至30％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈黄色非晶形固体的4-环丙基异噻唑-3-醇(280mg,1.98mmol,76.5％)。

实施例6

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(1R,3S)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-1,2,4-三唑-1-基)环戊基酯和(1-甲基环丙基)氨基甲酸

(1S,3R)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-1,2,4-三唑-1-基)环戊基酯

反式-(1R,3R)-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环戊-1-醇

步骤1：在0℃下在氮气气氛下向环戊烷-1,3-二醇(1g,0.01mol)和咪唑(0.8g,0.01mol)于DMF(50mL)中的混合物中逐份添加TBDPSCl(2g,9mmol)。将混合物在25℃下搅拌12h。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释，并且将水相用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将所得粗制材料通过硅胶色谱法(1g柱；用PE/EA＝4/1洗脱)纯化。在真空中浓缩产生呈白色固体的反式-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环戊-1-醇(262mg,8％)。

m/z(ES⁺)[M+Na]⁺＝364.05；HPLC tR＝1.373min。

反式-甲磺酸(1R,3R)-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环戊基酯

步骤2：在0℃下在氮气气氛下向反式-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环戊-1-醇(120mg,352μmol)和Et₃N(107mg,1.06mmol)于DCM(3mL)中的混合物中滴加MsCl(63.4mg,423μmol)。将混合物在25℃下搅拌1h。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释，并且将水相用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。分离呈无色油状物的粗制产物反式-甲磺酸3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环戊基酯(130mg,88.1％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝419.05；HPLC tR＝1.332min。

1-((1S,3R)-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环戊基)-3-硝基-1H-1,2,4-三唑

步骤3：在25℃下在氮气气氛下向3-硝基-1H-1,2,4-三唑(88mg,0.77mmol)和反式-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环戊-1-醇(0.22g,0.64mmol)于DMF(5mL)中的混合物中逐份添加Cs₂CO₃(0.63g,1.9mmol)。将混合物在80℃下搅拌3h。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释，并且将水相用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将所得粗制材料通过硅胶色谱法(1g柱；用PE/EA＝4/1洗脱)纯化。在真空中浓缩产生呈无色油状物的1-(顺式-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环戊基)-3-硝基-1H-1,2,4-三唑(16mg,5.7％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝437.30；HPLC tR＝1.468min。

1-((1S,3R)-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环戊基)-1H-1,2,4-三唑-3-胺

步骤4：在25℃下将1-(顺式-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环戊基)-3-硝基-1H-1,2,4-三唑(745mg,1.71mmol)和Pd/C(182mg)于THF(1mL)中的搅拌混合物用H₂处理2h。滤出固体。将滤液在真空下浓缩。在真空中浓缩产生呈无色油状物的1-(顺式-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环戊基)-1H-1,2,4-三唑-3-胺(625mg,90.1％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝407.35；HPLC tR＝1.348min。

N-(1-((1S,3R)-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环戊基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤5：在0℃下在氮气气氛下向1-(顺式-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环戊基)-1H-1,2,4-三唑-3-胺(780mg,1.92mmol)、DIEA(744mg,5.75mmol)和2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酸(325mg,2.30mmol)于EA(10mL)中的混合物中滴加T₃P(1.83g,5.75mmol)。将混合物在25℃下搅拌30min。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释，并且将水相用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗制产物通过硅胶色谱法(3g柱；用DCM/MeOH(比率：20/1)洗脱)纯化。在真空中浓缩产生呈微黄色固体的N-(1-(顺式-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环戊基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(900mg,88.6％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝530.04；HPLC tR＝1.436min。

N-(1-((1S,3R)-3-羟基环戊基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤6：向可再密封反应小瓶中装入N-(1-(顺式-3-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环戊基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(460mg,868μmol)、TBAF(454mg,1.74mmol)、THF(5mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在70℃下搅拌2h。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内10％至50％梯度；检测器，UV 254nm。在真空中浓缩产生呈无色油状物的N-(1-((顺式-3-羟基环戊基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(80mg,32％))。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝292.15；HPLC tR＝0.743min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(1R,3S)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-1,2,4-三唑-1-基)环戊基酯

步骤7：向可再密封反应小瓶中装入N-(1-(顺式-3-羟基环戊基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(400mg,1.37mmol)、1-异氰酸基-1-甲基环丙烷(533mg,5.49mmol)、DIEA(710mg,5.49mmol)、甲苯(10mL)和搅拌棒，接着将其抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在110℃下搅拌12h。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释，并且将水相用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将所得粗制材料通过制备型HPLC(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内10％ B至35％ B，35％ B；波长：220nm；RT1(min)：7.32)纯化。冻干得到呈白色固体的顺式-(1-甲基环丙基)氨基甲酸3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-1,2,4-三唑-1-基)环戊基酯(100mg,18.7％)。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(1R,3S)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-1,2,4-三唑-1-基)环戊基酯和(1-甲基环丙基)氨基甲酸(1S,3R)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-1,2,4-三唑-1-基)环戊基酯

步骤8：将顺式-(1-甲基环丙基)氨基甲酸3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-1,2,4-三唑-1-基)环戊基酯(150mg,386μmol)通过手性制备型HPLC(柱：DZ-CHIRALPAK IG-3，4.6*50mm，3.0μm；流动相A：Hex(0.2％ IPAmine):(EtOH:DCM＝1:1)＝60:40；流量：1mL/min；注入体积：5ul mL)纯化。冻干得到呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(1R,3S)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-1,2,4-三唑-1-基)环戊基酯(38.8mg,25.9％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝389.15；HPLC tR＝1.082min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.68(s,1H),8.41(s,1H),7.41(s,1H),6.24(s,1H),4.99(s,1H),4.76-4.68(m,1H),3.87(s,2H),2.60-2.52(m,1H),2.08(d,J＝24.8Hz,3H),2.03-1.89(m,4H),1.81(s,1H),1.23(s,2H),0.59(s,2H),0.47(s,2H)。

将顺式-(1-甲基环丙基)氨基甲酸3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-1,2,4-三唑-1-基)环戊基酯(150mg,386μmol)通过手性制备型HPLC(柱：DZ-CHIRALPAK IG-3，4.6*50mm，3.0μm；流动相A：Hex(0.2％ IPAmine):(EtOH:DCM＝1:1)＝60:40；流量：1mL/min；注入体积：5ul mL)纯化。冻干得到呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(1S,3R)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-1,2,4-三唑-1-基)环戊基酯(35.1mg,90.4μmol,23.4％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝389.15；HPLC tR＝1.082min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.69(s,1H),8.41(s,1H),7.41(s,1H),6.24(s,1H),4.99(s,1H),4.71(q,J＝7.6Hz,1H),3.87(s,2H),2.60-2.52(m,1H),2.21(s,3H),2.11(s,1H),1.95(s,2H),1.80(s,1H),1.23(s,3H),0.59(s,2H),0.47(s,2H)。

实施例7

(1s,4s)-N-异丙基-4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环己烷-1-甲酰胺和(1r,4r)-N-异丙基-4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环己烷-1-甲酰胺

(1s,4s)-4-(异丙基氨基甲酰基)环己烷-1-甲酸甲酯

步骤1：向(1s,4s)-4-(甲氧基羰基)环己烷-1-甲酸(3g,0.02mol)和丙-2-胺(1g,0.02mol)于乙酸乙酯(20mL)中的搅拌溶液中添加DIEA(6g,0.05mol)和T₃P(12g，50％ Wt，于乙酸乙酯中，0.02mmol)。将反应物在室温下搅拌1小时。LCMS显示反应完成。将混合物浓缩并从PE/EA＝1:8中重结晶。这产生呈白色固体的(1s,4s)-4-(异丙基氨基甲酰基)环己烷-1-甲酸甲酯(3.24g,14.3mmol,90％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝228.20；HPLC tR＝0.918min。

(1s,4s)-4-(2-氰基乙酰基)-N-异丙基环己烷-1-甲酰胺

步骤2：在-78℃下在氮气气氛下向(1s,4s)-4-(异丙基氨基甲酰基)环己烷-1-甲酸甲酯(2.2g,9.7mmol)和乙腈(0.60g,15mmol)于THF(20mL)中的溶液中滴加LiHMDS(21mL，1M于THF中，21mmol)。将混合物升温至25℃并搅拌4小时。将混合物用饱和NH₄Cl淬灭。将反应混合物用水(20mL)稀释，并且将水相用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内10％至70％梯度；检测器UV 254nm，得到呈灰白色非晶形固体的(1s,4s)-4-(2-氰基乙酰基)-N-异丙基环己烷-1-甲酰胺(1.75g,7.41mmol,77％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝237.20；HPLC tR＝0.739min。

(1s,4s)-4-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)-N-异丙基环己烷-1-甲酰胺

步骤3：在室温下将氢氧化钠(439mg,11.0mmol)逐份添加至叔丁基肼盐酸盐(1.37g,11.0mmol)于EtOH(14mL)中的悬浮液中，并在室温下搅拌1小时。在室温下添加(1s,4s)-4-(2-氰基乙酰基)-N-异丙基环己烷-1-甲酰胺(1.73g,7.32mmol)于乙醇中的溶液，接着将混合物加热至50℃内部温度并搅拌过夜。将混合物用水(20mL)淬灭，并且将水相用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内10％至60％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈白色非晶形固体的(1s,4s)-4-(3-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)-N-异丙基环己烷-1-甲酰胺(1.3g,4.2mmol,58％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝307.25；HPLC tR＝0.788min。

(1s,4s)-4-(1-(叔丁基)-5-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)-N-异丙基环己烷-1-甲酰胺

步骤4：在0℃下在氮气气氛下向(1s,4s)-4-(3-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)-N-异丙基环己烷-1-甲酰胺(1.4g,4.6mmol)、2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酸(0.97g,6.9mmol)和DIEA(1.8g,2.4mL,14mmol)于EA(15mL)中的混合物中滴加于EA中的膦-t3(4.4g，50％wt，于EA中，6.9mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物用水(20mL)淬灭，并且将水相用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，20min内20％至80％梯度；检测器，UV 220nm，得到呈黄色非晶形固体的(1s,4s)-4-(1-(叔丁基)-3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)-N-异丙基环己烷-1-甲酰胺(1.8g,4.2mmol,92％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝430.45；HPLC tR＝0.955min。

(1s,4s)-N-异丙基-4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环己烷-1-甲酰胺

步骤5：向圆底烧瓶中装入(1s,4s)-4-(1-(叔丁基)-3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)-N-异丙基环己烷-1-甲酰胺(200mg,466μmol)和搅拌棒。添加HCOOH(3mL)，并且将溶液在75℃下搅拌12小时。将混合物在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内10％至60％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈白色非晶形固体的(1s,4s)-N-异丙基-4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环己烷-1-甲酰胺(120mg,321μmol,69.0％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝374.10；HPLC tR＝0.646min。

(1s,4s)-N-异丙基-4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环己烷-1-甲酰胺和(1r,4r)-N-异丙基-4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环己烷-1-甲酰胺

将(1s,4s)-N-异丙基-4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环己烷-1-甲酰胺(120mg,321μmol)通过手性制备型HPLC(柱：CHIRAL ART Amylose-SA，2*25cm，5μm；流动相A：MtBE(0.1％DEA)-HPLC，流动相B：EtOH--HPLC；流量：20mL/min；梯度：21min内50％ B至50％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：5.48；样品溶剂：EtOH--HPLC；注入体积：1mL；运行次数：4)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的(1s,4s)-N-异丙基-4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环己烷-1-甲酰胺(64.3mg,172μmol,53.6％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝374.10；HPLC tR＝0.658min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.05(s,1H),10.63(s,1H),7.48(d,J＝7.8Hz,1H),6.30(s,1H),6.23(s,1H),3.91-3.72(m,3H),2.82(s,1H),2.20(s,4H),1.93(d,J＝15.1Hz,2H),1.65(t,J＝9.0Hz,4H),1.49(q,J＝6.4,4.2Hz,2H),1.01(d,J＝6.6Hz,6H)。

将(1r,4r)-N-异丙基-4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环己烷-1-甲酰胺(120mg,321μmol)通过手性制备型HPLC(柱：CHIRAL ART Amylose-SA，2*25cm，5μm；流动相A：MtBE(0.1％DEA)-HPLC，流动相B：EtOH--HPLC；流量：20mL/min；梯度：21min内50％ B至50％ B；波长：220/254nm；RT2(min)：11.01；样品溶剂：EtOH--HPLC；注入体积：1mL；运行次数：4)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的(1r,4r)-N-异丙基-4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环己烷-1-甲酰胺(19.9mg,53.3μmol,16.6％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝374.15；HPLC tR＝0.647min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.08(s,1H),10.61(s,1H),7.58(d,J＝7.7Hz,1H),6.24(d,J＝11.9Hz,2H),3.90-3.70(m,3H),2.61-2.52(m,1H),2.20(s,3H),2.07(tt,J＝11.7,3.4Hz,1H),1.96(dd,J＝13.2,3.5Hz,2H),1.76(dd,J＝13.5,3.5Hz,2H),1.46(qd,J＝12.7,2.9Hz,2H),1.38-1.22(m,2H),1.03(d,J＝6.6Hz,6H)。

实施例8

异丙基氨基甲酸(1s,4s)-4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环己基酯

(1s,4s)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环己烷-1-甲酸甲酯

步骤1：在0℃下向(1s,4s)-4-羟基环己烷-1-甲酸甲酯(5g,0.03mol)于DMF(25mL)中的搅拌溶液中添加咪唑(6g,0.09mol)和TBDPS-Cl(0.01kg,0.04mol)。将反应物在室温下搅拌过夜。将所得溶液用30ml水稀释，接着用3×40mL乙酸乙酯萃取。将有机层合并，用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法用石油醚纯化，得到呈无色油状物的(1s,4s)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环己烷-1-甲酸甲酯(10.59g,26.70mmol,80％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝397.30；HPLC tR＝1.595min。

3-((1s,4s)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环己基)-3-氧代丙腈

步骤2：向(1s,4s)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环己烷-1-甲酸甲酯(5g,0.01mol)于四氢呋喃(15mL)中的搅拌溶液中添加乙腈(1.0g,25mmol)。在-70℃下于N₂下向混合物中滴加LiHMDS(25mL，1M于THF中的溶液，0.03mol)。将反应物在室温下搅拌1小时。将反应物用饱和氯化铵溶液淬灭，并用3×40mL乙酸乙酯萃取。将有机层合并，用盐水洗涤，干燥并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法用石油醚/乙酸乙酯/(5/1)纯化，得到呈黄色油状物的3-((1s,4s)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环己基)-3-氧代丙腈(4.6g,11mmol,90％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝406.10；HPLC tR＝1.386min。

1-(叔丁基)-3-((1s,4s)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环己基)-1H-吡唑-5-胺

步骤3：将叔丁基肼盐酸盐(2.1g,17mmol)和NaOH(0.67g,17mmol)于乙醇(25mL)中的溶液搅拌1h，接着添加3-((1s,4s)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环己基)-3-氧代丙腈(4.5g,11mmol)。将反应物在50℃下搅拌过夜。滤出固体。将滤液在真空下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的ACN，10min内95％梯度；检测器，UV 220nm，得到呈黄色油状物的1-(叔丁基)-5-((1s,4s)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环己基)-1H-吡唑-3-胺(2.5g,5.3mmol,47％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝476.35；HPLC tR＝1.234min。

N-(1-(叔丁基)-3-((1s,4s)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环己基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤4：向1-(叔丁基)-5-((1s,4s)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环己基)-1H-吡唑-3-胺(1.9g,1eq,4.0mmol)和2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酸(0.85g,1.5eq,6.0mmol)于乙酸乙酯(15mL)中的搅拌溶液中添加DIEA(1.5g,2.1mL,3eq,12mmol)和丙烷膦酸环酐/EA(3.8g,50％wt,6.0mmol)。将反应物在室温下搅拌2小时。LCMS显示反应完成。将混合物浓缩并通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的ACN，10min内95％至100％梯度；检测器，UV 220nm。这产生呈黄色油状物的N-(1-(叔丁基)-5-((1s,4s)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环己基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(2.043g,3.411mmol,85％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝599.55；HPLC tR＝1.596min。

N-(1-(叔丁基)-3-((1s,4s)-4-羟基环己基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤5：向N-(1-(叔丁基)-5-((1s,4s)-4-((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)环己基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(1.9g,3.2mmol)于THF(15mL)中的搅拌溶液中添加1M于THF中的TBAF(19mL)。将反应物在75℃下搅拌18h。将所得混合物用水洗涤并用乙酸乙酯萃取。将有机层合并，干燥并在真空下浓缩。将混合物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的ACN，10min内19％梯度；检测器，UV220nm，得到呈黄色油状物的N-(1-(叔丁基)-5-((1s,4s)-4-羟基环己基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(880mg,2.44mmol,77％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝361.10；HPLC tR＝0.858min。

异丙基氨基甲酸(1s,4s)-4-(1-(叔丁基)-5-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环己基酯

步骤6：向N-(1-(叔丁基)-5-((1s,4s)-4-羟基环己基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(650mg,1.80mmol)于甲苯(6mL)中的搅拌溶液中添加DIEA(699mg,5.41mmol)和2-异氰酸基丙烷(460mg,5.41mmol)。将反应物在85℃下搅拌过夜。将所得混合物浓缩并通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的ACN，10min内19％梯度；检测器，UV 220nm，得到呈黄色油状物的异丙基氨基甲酸(1s,4s)-4-(1-(叔丁基)-3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环己基酯(368mg,826μmol,45.8％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝446.15；HPLC tR＝1.059min。

异丙基氨基甲酸(1s,4s)-4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环己基酯

步骤7：将异丙基氨基甲酸(1s,4s)-4-(1-(叔丁基)-3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环己基酯(350mg,786μmol)溶解于甲酸(6mL)中。将反应物在75℃下搅拌过夜。将混合物浓缩并通过反向快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的ACN，10min内46％梯度；检测器，UV 220nm，得到呈白色固体的异丙基氨基甲酸(1s,4s)-4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环己基酯(210mg,539μmol,68.6％)。将固体通过制备型HPLC(柱：Xselect CSH OBD柱30*150mm，5μm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：7min内30％B至31％ B，31％ B；波长：220nm)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的异丙基氨基甲酸(1s,4s)-4-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环己基酯(139.2mg,357.4μmol,69.6％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝390.15；HPLC tR＝0.726min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.11(s,1H),10.65(s,1H),6.94(d,J＝7.6Hz,1H),6.29(s,1H),6.22(s,1H),4.75(s,1H),3.83(s,2H),3.61-3.55(m,1H),2.67(s,1H),2.20(s,3H),1.78-1.71(m,5H),1.64(t,J＝14.2Hz,3H),1.04(d,J＝6.5Hz,6H)。

实施例9

N-(5-((1S,3R)-3-(4,4-二甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺和N-(5-((1R,3S)-3-(4,4-二甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

(1-(叔丁基)-3-((1R,3R)-3-(4,4-二甲基-2,5-二氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苄酯

步骤1：向(1-(叔丁基)-5-(反式-3-羟基环戊基)-1H-吡唑-3-基)氨基甲酸苄酯(1g,3mmol)、5,5-二甲基咪唑烷-2,4-二酮(0.4g,3mmol)和三苯基膦(1g,4mmol)于THF(10mL)中的冰冷溶液中添加DIAD(0.8g,4mmol)，接着将所得混合物在室温下搅拌2小时。将所得混合物用EA(100mL)稀释，并用盐水(2*80mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥。将有机层在真空下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，40min内0％至100％梯度；检测器，UV 220nm，得到呈白色固体的(1-(叔丁基)-5-(顺式-3-(4,4-二甲基-2,5-二氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)氨基甲酸苄酯(1.03g,2.20mmol,80％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝468.25；HPLC tR＝1.106min。

(1-(叔丁基)-3-((1R,3R)-3-(4,4-二甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苄酯

步骤2：在0℃下向(1-(叔丁基)-5-(顺式-3-(4,4-二甲基-2,5-二氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)氨基甲酸苄酯(100mg,1.07mmol)于甲苯(5mL)中的溶液中足够缓慢地滴加Red-Al溶液(3.09g，70％wt于甲苯中)，以维持低于5℃的内部温度。在室温下再搅拌5小时后，将所得混合物用NH₄Cl(饱和水溶液，150mL)淬灭，并用EA(3*150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2*100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并在真空下浓缩。将此产物与另外5个相同制备的批料(各自以100mg开始)合并，并通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内0％至100％梯度；检测器，UV 220nm，得到呈白色固体的(1-(叔丁基)-5-(顺式-3-(4,4-二甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)氨基甲酸苄酯(250mg,551μmol,51.5％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝454.15；HPLC tR＝1.103min。

1-((1R,3R)-3-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)环戊基)-4,4-二甲基咪唑烷-2-酮

步骤3：在室温(20-25℃)下，将Pd/C(50％,77mg)和(1-(叔丁基)-5-(顺式-3-(4,4-二甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)氨基甲酸苄酯(330mg,728μmol)于2-丙醇(10mL)中的悬浮液脱气并用氢气吹扫(3个循环)，接着在室温下在氢气球下搅拌0.5小时。将悬浮液过滤。将滤液在真空下浓缩并且将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，20min内0％至100％梯度；检测器，UV 220nm，得到呈白色固体的1-(顺式-3-(3-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)-4,4-二甲基咪唑烷-2-酮(180mg,563μmol,77.4％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝320.25；HPLC tR＝1.093min。

N-(1-(叔丁基)-3-((1S,3R)-3-(4,4-二甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤4：在0℃下在氮气气氛下向1-(顺式-3-(3-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)-4,4-二甲基咪唑烷-2-酮(200mg,626μmol)、2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酸(97.2mg,689μmol)和DIEA(243mg,1.88mmol)于EA(5mL)中的混合物中滴加2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(478mg，50％ Wt，于EA中，751μmol)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应物用饱和Na₂CO₃(10mL)淬灭并用DCM(2*10mL)萃取。将有机层用更多Na₂CO₃(2*10mL)和盐水(30mL)洗涤，并浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，20min内20％至80％梯度；检测器，UV220nm，得到呈白色非晶形固体的N-(1-(叔丁基)-5-(顺式-3-(4,4-二甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(230mg,520μmol,83.0％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝443.20；HPLC tR＝0.955min。

N-(5-((1S,3R)-3-(4,4-二甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤5：将N-(1-(叔丁基)-5-(顺式-3-(4,4-二甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(50mg,9.02μmol)于TFA/H₂O(5mL,20:1)中的溶液在90℃下搅拌0.5小时。将所得混合物浓缩至干燥。将此产物与另外5个相同制备的批料(各自以50mg开始)合并，并通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内0％至100％梯度；检测器，UV 220nm.，得到呈白色固体的N-(5-(顺式-3-(4,4-二甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(128mg,331μmol,73.3％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝387.30；HPLC tR＝0.804min。

N-(5-((1S,3R)-3-(4,4-二甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤6：将顺式-N-(5-(3-(4,4-二甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(128mg,331μmol)通过制备型手性-HPLC利用以下条件纯化：柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％ TEA)--HPLC，流动相B：EtOH：DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：18min内90％ B至90％B；波长：220/254nm；RT1(min)：5.46；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；注入体积：2.2mL；运行次数：2，得到呈白色非晶形固体的顺式-N-(5-(-3-(4,4-二甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(50.5mg,131μmol,39.5％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝387.15；HPLC tR＝0.653min。

¹H NMR(400MHz,DMSO)δ1.17(d,J＝2.7Hz,6H),1.63(dt,J＝18.7,11.4,11.4Hz,3H),1.76(d,J＝9.9Hz,1H),1.91-2.13(m,2H),2.20(d,J＝1.4Hz,3H),3.05(d,J＝9.6Hz,3H),3.83(s,2H),4.22(q,J＝8.3,8.3,8.3Hz,1H),5.97-6.51(m,3H),10.65(s,1H),12.14(s,1H)。

N-(5-((1R,3S)-3-(4,4-二甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤7：将顺式-N-(5-(3-(4,4-二甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(128mg,331μmol)通过制备型手性-HPLC利用以下条件纯化：柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％ TEA)--HPLC，流动相B：EtOH：DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：18min内90％ B至90％B；波长：220/254nm；RT2(min)：8.40；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；注入体积：2.2mL；运行次数：2，得到呈白色非晶形固体的N-(5-((1R,3S)-3-(4,4-二甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(48.2mg,125μmol,37.7％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝387.15；HPLC tR＝0.662min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ1.17(d,J＝2.7Hz,6H),1.41-1.68(m,3H),1.76(d,J＝9.7Hz,1H),2.02(dd,J＝18.5,7.6Hz,2H),2.20(s,3H),3.05(d,J＝8.9Hz,3H),3.83(s,2H),4.22(q,J＝8.4,8.3,8.3Hz,1H),6.11-6.58(m,3H),10.65(s,1H),12.14(s,1H)。

实施例10

2-(3-甲基异噁唑-5-基)-N-(5-((1S,3R)-3-((4-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)乙酰胺和2-(3-甲基异噁唑-5-

基)-N-(5-((1R,3S)-3-((4-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)乙酰胺

甲磺酸(1S,3S)-3-(5-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯

步骤1：在0℃下在氮气气氛下向(1-(叔丁基)-5-(反式-3-羟基环戊基)-1H-吡唑-3-基)氨基甲酸苄酯(250mg,699μmol)和Et₃N(84.9mg,839μmol)于DCM(10mL)中的混合物中滴加MsCl(303mg,2.10mmol)。将混合物在25℃下搅拌1h。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释，并且将水相用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩，产生呈黄色油状物的反式-甲磺酸3-(3-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(300mg,98.5％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝436.25；HPLC tR＝1.202min。

3-((1S,3R)-3-((4-溴吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-胺

步骤2：向可再密封反应小瓶中装入反式-甲磺酸3-(3-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(300mg,689μmol)、4-溴吡啶-3-醇(144mg,827μmol)、K₂CO₃(286mg,2.07mmol)、DMF(10mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在80℃下搅拌3h。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释，并且将水相用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过制备型TLC(PE/EA；比率：4/1)纯化，得到呈黄色油状物的5-(顺式-3-((4-溴吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-胺(120mg,45.5％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝379.20；HPLC tR＝0.810min。

N-(3-((1S,3R)-3-((4-溴吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤3：向可再密封反应小瓶中装入于EA(5mL)中的5-(顺式-3-((4-溴吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-胺(256mg,675μmol)、DIEA(349mg,2.70mmol)、2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(114mg,810μmol)，并且在0℃下在氮气气氛下滴加T₃P(644mg,2.02mmol)。将混合物在25℃下搅拌1h。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释，并且将水相用EA(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过制备型TLC(DCM/MeOH；比率：20/1)纯化，得到呈黄色油状物的N-(5-(顺式-3-((4-溴吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(240mg,70.8％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝502.10；HPLC tR＝0.747min。

N-(1-(叔丁基)-3-((1S,3R)-3-((4-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤4：向可再密封反应小瓶中装入N-(5-((1S,3R)-3-((4-溴吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(60mg,0.12mmol)、丙-1-烯-2-基硼酸(12mg,0.14mmol)、Pd(dppf)Cl₂(8.7mg,12μmol)、K₂CO₃(46mg,0.36mmol)、二噁烷/H₂O(1mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在60℃下搅拌1h。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释，并且将水相用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过制备型TLC(DCM/MeOH；比率：20/1)纯化，得到呈橙色油状物的N-(1-(叔丁基)-5-((1S,3R)-3-((4-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(40mg,72％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝464.25；HPLC tR＝1.100min。

2-(3-甲基异噁唑-5-基)-N-(5-((1S,3R)-3-((4-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)乙酰胺

步骤5：向可再密封反应小瓶中装入N-(1-(叔丁基)-5-(顺式-3-((4-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(200mg,431μmol)、FA(5mL)和搅拌棒，接着将其抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在75℃下搅拌12h。将所得粗制材料通过C18快速色谱法(乙腈/水/0.1％甲酸)纯化。在真空中浓缩得到呈无色油状物的2-(3-甲基异噁唑-5-基)-N-(5-(顺式-3-((4-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)乙酰胺(70mg,39.8％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝408.30；HPLC tR＝0.790min。

2-(3-甲基异噁唑-5-基)-N-(5-((1S,3R)-3-((4-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)乙酰胺

将2-(3-甲基异噁唑-5-基)-N-(5-(顺式-3-((4-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)乙酰胺(70mg,0.17mmol)通过手性制备型HPLC(柱：CHIRALPAKIG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％DEA)--HPLC，流动相B：EtOH：DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：32min内50％ B至50％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：15.69；RT2(min)：25.34；样品溶剂：EtOH：DCM＝1:1--HPLC；注入体积：0.8mL；运行次数：4)纯化。冻干得到呈白色固体的2-(3-甲基异噁唑-5-基)-N-(5-((1S,3R)-3-((4-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)乙酰胺(28.9mg,41％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝408.35；HPLC tR＝0.962min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.16(s,1H),10.62(s,1H),8.31(s,1H),8.15(d,J＝4.8Hz,1H),7.17(d,J＝4.8Hz,1H),6.29(s,1H),6.22(s,1H),5.27-5.20(m,2H),5.05(s,1H),3.83(s,2H),3.18-3.07(m,1H),2.66(dt,J＝14.4,7.3Hz,1H),2.20(s,3H),2.10-1.97(m,5H),1.89(d,J＝13.4Hz,1H),1.76(td,J＝14.0,12.3,5.3Hz,2H)。

2-(3-甲基异噁唑-5-基)-N-(5-((1R,3S)-3-((4-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)乙酰胺

将2-(3-甲基异噁唑-5-基)-N-(5-(顺式-3-((4-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)乙酰胺(70mg,0.17mmol)通过手性制备型HPLC(柱：CHIRALPAKIG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％DEA)--HPLC，流动相B：EtOH：DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：32min内50％ B至50％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：15.69；RT2(min)：25.34；样品溶剂：EtOH：DCM＝1:1--HPLC；注入体积：0.8mL；运行次数：4)纯化。冻干得到呈白色固体的2-(3-甲基异噁唑-5-基)-N-(5-((1R,3S)-3-((4-(丙-1-烯-2-基)吡啶-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)乙酰胺(25.9mg,37％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝408.35；HPLC tR＝0.928min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.16(s,1H),10.63(s,1H),8.31(s,1H),8.15(d,J＝4.8Hz,1H),7.17(d,J＝4.8Hz,1H),6.29(s,1H),6.22(s,1H),5.23(qd,J＝2.7,2.0,1.3Hz,2H),5.06(d,J＝4.4Hz,1H),3.83(s,2H),3.13(p,J＝9.2Hz,1H),2.67(tt,J＝14.3,7.3Hz,1H),2.20(s,3H),2.10-1.97(m,5H),1.89(d,J＝13.0Hz,1H),1.85-1.69(m,2H)。

根据实施例9或实施例10的方法制备的额外化合物绘示于下表6中。

实施例11

异丙基氨基甲酸(1R,3S)-3-(3-((2-(甲氧基甲基)噻唑并[5,4-c]吡啶-6-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯和异丙基氨基甲酸(1S,3R)-3-(3-((2-(甲氧基甲基)噻唑并[5,4-c]吡啶-6-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

N-(5-溴-2-氯吡啶-4-基)-2-甲氧基乙酰胺

步骤1：向5-溴-2-氯吡啶-4-胺(5g,1eq,24mmol)于DCM(50mL)中的冰冷溶液中添加TEA(3.6g,1.5eq,36mmol)和2-甲氧基乙酰基氯(3.9g,1.5eq,36mmol)。将混合物在20℃下搅拌16h。在减压下去除溶剂，并且将残余物溶于水(70mL)中并用EtOAc(3×50mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过快速色谱法(流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：7min内45％ B至55％ B)纯化；溶剂蒸发后得到呈浅黄色固体的N-(2,5-二氯吡啶-4-基)-2-甲氧基乙酰胺(1.51g,5.4mmol,22％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝278.85；HPLC tR＝0.997min。

N-(5-溴-2-氯吡啶-4-基)-2-甲氧基乙硫酰胺

步骤2：向N-(5-溴-2-氯吡啶-4-基)-2-甲氧基乙酰胺(1.33g,1eq,4.76mmol)于甲苯(20mL)中的溶液中添加2,4-双(4-甲氧基苯基)-1,3,2,4-二硫杂二磷杂环丁烷2,4-二硫化物(1.44g,0.75eq,3.57mmol)。将混合物在110℃下在N₂下加热4h。将反应混合物过滤以去除滤饼并且将滤液在真空中浓缩。将所得粗制材料通过硅胶色谱法(用混合物石油醚/乙酸乙酯20:1洗脱)纯化，得到呈黄色非晶形固体的2-(1-苯并噻吩-2-基)-N-(1-{5-[(3S)-1-甲基哌啶-3-基]嘧啶-2-基}-1H-吡唑-4-基)乙酰胺(1.1g,4.76mmol,78％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝294.90；HPLC tR＝0.727min。

6-氯-2-(甲氧基甲基)噻唑并[5,4-c]吡啶

步骤3：向N-(5-溴-2-氯吡啶-4-基)-2-甲氧基乙硫酰胺(490mg,1eq,1.66mmol)于NMP(5mL)中的溶液中添加NaH(59.7mg,0.9eq,1.49mmol)。将混合物在160℃下加热1小时。将反应混合物达到室温并倒入冰冷水中，之后用EtOAc(3×40mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。将粗制残余物通过快速色谱法(流动相A：水，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内40B至50B)纯化；溶剂蒸发后得到呈褐色固体的6-氯-2-(甲氧基甲基)噻唑并[5,4-c]吡啶(240mg,1.12mmol,67.4％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝215.00；HPLC tR＝0.594min。

顺式-异丙基氨基甲酸3-(5-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯

步骤4：向(1-(叔丁基)-5-(顺式-3-羟基环戊基)-1H-吡唑-3-基)氨基甲酸苄酯(5g,1eq,0.01mol)于甲苯(20mL)中的溶液中添加2-异氰酸基丙烷(6g,5eq,0.07mol)、DIEA(5g,3eq,0.04mol)。将混合物在85℃下搅拌16小时。将混合物用水稀释，并且将水相用EA(3×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将所得粗制材料通过快速色谱法(流动相A：水/0.1％甲酸，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内40B至50B)纯化；溶剂蒸发后得到呈褐色非晶形固体的顺式-异丙基氨基甲酸3-(3-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(4.2g,8.9mmol,60％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝443.10；HPLC tR＝0.889min。

顺式-异丙基氨基甲酸3-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯

步骤5：顺式-异丙基氨基甲酸3-(3-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(4.2g,1eq,9.5mmol)于MeOH(15mL)中的溶液使氮气鼓泡通过反应混合物3次。接着添加Pd/C(0.50g,0.5eq,4.7mmol)。在使H₂鼓泡通过反应混合物3次后，将混合物与H₂在室温下搅拌2小时。将反应混合物过滤以去除滤饼并且将滤液在真空中浓缩。将所得粗制材料通过快速色谱法(流动相A：水/0.1％甲酸，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：6min内45B至55B)纯化；溶剂蒸发后得到呈褐色非晶形油状物的顺式-异丙基氨基甲酸3-(3-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(2.3g,7.5mmol,79％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝309.15；HPLC tR＝0.691min。

顺式-异丙基氨基甲酸3-(1-(叔丁基)-5-((2-(甲氧基甲基)噻唑并[5,4-c]吡啶-6-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯

步骤6：将6-氯-2-(甲氧基甲基)噻唑并[5,4-c]吡啶(234mg,1.2eq,1.09mmol)、Cs₂CO₃(1.18g,4eq,3.63mmol)和Xphos(86.4mg,0.2eq,182μmol)添加至顺式-异丙基氨基甲酸3-(3-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(280mg,1eq,908μmol)于DME(4mL)中的溶液中。在使氮气鼓泡通过反应混合物5分钟后，添加Pd₂dba₃(166mg,0.2eq,182μmol)。将反应混合物在90℃下在剧烈搅拌下加热3小时。在冷却至室温后，将混合物蒸发并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取，经Na₂SO₄干燥并在真空中蒸发。将粗制残余物通过快速色谱法(流动相A：水，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：6min内45％ B至55％ B)纯化；溶剂蒸发后得到呈褐色油状物的顺式-异丙基氨基甲酸3-(1-(叔丁基)-3-((2-(甲氧基甲基)噻唑并[5,4-c]吡啶-6-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(120mg,247μmol,27.2％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝487.10；HPLC tR＝1.029min。

异丙基氨基甲酸(1R,3S)-3-(3-((2-(甲氧基甲基)噻唑并[5,4-c]吡啶-6-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

步骤7：将顺式-异丙基氨基甲酸3-(1-(叔丁基)-3-((2-(甲氧基甲基)噻唑并[5,4-c]吡啶-6-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(101mg,1Eq,208μmol)于FA(2mL)中的溶液在70℃下加热45min。在冷却至室温后，蒸发混合物。将粗制残余物通过制备型HPLC(柱：Sunfire制备型C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(0.05％ TFA)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：7min内10％ B至45％ B)纯化；溶剂蒸发后得到呈黄色固体的顺式-异丙基氨基甲酸3-(3-((2-(甲氧基甲基)噻唑并[5,4-c]吡啶-6-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(27mg,63μmol,30％)

异丙基氨基甲酸(1R,3S)-3-(3-((2-(甲氧基甲基)噻唑并[5,4-c]吡啶-6-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯和异丙基氨基甲酸(1S,3R)-3-(3-((2-(甲氧基甲基)噻唑并[5,4-c]吡啶-6-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

步骤8：将顺式-异丙基氨基甲酸3-(3-((2-(甲氧基甲基)噻唑并[5,4-c]吡啶-6-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(27mg,1eq,63μmol)通过手性-HPLC(柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％ DEA)--HPLC，流动相B：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：14.5min内80％ B至80％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：9.73；RT2(min)：12.26；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；注入体积：0.9mL)纯化；冻干得到呈浅黄色非晶形固体的异丙基氨基甲酸(1R,3S)-3-(3-((2-(甲氧基甲基)噻唑并[5,4-c]吡啶-6-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(6mg,0.01mmol,40％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝431.15；HPLC tR＝0.731min。

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.77(s,1H),7.77(s,1H),7.28(s,1H),6.02(s,1H),5.24(s,1H),4.86(s,2H),4.70(s,1H),3.83(s,1H),3.60(s,3H),3.22(t,J＝8.3Hz,1H),2.53(s,1H),2.16(d,J＝5.5Hz,1H),1.97(s,2H),1.90(d,J＝10.1Hz,2H),1.28(s,1H),1.18(dd,J＝6.7,2.5Hz,6H)。

冻干得到呈浅黄色非晶形固体的异丙基氨基甲酸(1S,3R)-3-(3-((2-(甲氧基甲基)噻唑并[5,4-c]吡啶-6-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(8.4mg,20μmol,62％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝431.10；HPLC tR＝0.724min。

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.78(s,1H),7.76(s,1H),7.35(s,1H),6.03(s,1H),5.24(s,1H),4.86(s,2H),4.71(s,1H),3.83(s,1H),3.60(s,3H),3.26-3.18(m,1H),2.54(s,1H),2.18-2.12(m,1H),1.96(s,2H),1.90(d,J＝9.5Hz,2H),1.28(s,1H),1.18(dd,J＝6.8,2.9Hz,6H)。

根据实施例11的方法制备的额外化合物绘示于下表7中。

实施例12

异丙基氨基甲酸(1R,3S)-3-(3-(异噻唑-3-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯和异丙基氨基甲酸(1S,3R)-3-(3-(异噻唑-3-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

顺式-异丙基氨基甲酸3-(1-(叔丁基)-5-(异噻唑-3-基氨基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯

步骤1：将3-溴异噻唑(223mg,2eq,1.36mmol)、碳酸铯(887mg,4eq,2.72mmol)和(9,9-二甲基-9H-氧杂蒽-4,5-二基)双(二苯基膦)(39.4mg,0.1eq,68.1μmol)添加至顺式-异丙基氨基甲酸3-(3-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(210mg,1Eq,681μmol)于二噁烷(4mL)中的溶液中。在使氮气鼓泡通过反应混合物5分钟后，添加Pd₂(dba)₃(62.3mg,0.1Eq,68.1μmol)。将反应混合物在110℃下在剧烈搅拌下加热16小时。在冷却至室温后，将混合物蒸发并用乙酸乙酯(3×40mL)萃取，经Na₂SO₄干燥并在真空中蒸发。将粗制残余物通过快速色谱法(流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：6min内45％ B至55％ B)纯化；溶剂蒸发后得到呈浅黄色固体的顺式-异丙基氨基甲酸3-(1-(叔丁基)-3-(异噻唑-3-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(102mg,261μmol,38.3％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝392.50；HPLC tR＝0.854min。

顺式-异丙基氨基甲酸3-(3-(异噻唑-3-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

步骤2：将顺式-异丙基氨基甲酸3-(1-(叔丁基)-3-(异噻唑-3-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(115mg,1Eq,294μmol)于FA(2mL)中的溶液在70℃下加热16h。在冷却至室温后，将混合物蒸发。将残余物通过快速色谱法(流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：55mL/min；梯度：7min内45％ B至55％ B)纯化；溶剂蒸发后得到呈无色非晶形固体的顺式-异丙基氨基甲酸3-(3-(异噻唑-3-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(60mg,0.18mmol,61％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝336.25；HPLC tR＝0.921min。

异丙基氨基甲酸(1R,3S)-3-(3-(异噻唑-3-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯和异丙基氨基甲酸(1S,3R)-3-(3-(异噻唑-3-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

步骤3：将顺式-异丙基氨基甲酸3-(3-(异噻唑-3-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(60mg,1eq,0.18mmol)通过手性-HPLC(柱：CHIRALPAK IE，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％ DEA)--HPLC，流动相B：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：15min内40％B至40％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：8.13；RT2(min)：11.87；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；注入体积：0.6mL)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的异丙基氨基甲酸(1R,3S)-3-(3-(异噻唑-3-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(18.6mg,55.5μmol,62％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝336.05；HPLC tR＝0.676min。

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.49(d,J＝4.7Hz,1H),7.51(s,1H),6.87(d,J＝4.7Hz,1H),6.27(s,1H),5.22(s,1H),4.69(s,1H),3.83(s,1H),3.22(q,J＝8.1Hz,1H),2.50(s,1H),2.14(s,1H),1.93(d,J＝22.8Hz,4H),1.17(t,J＝5.5Hz,6H)。

冻干得到呈白色非晶形固体的异丙基氨基甲酸(1S,3R)-3-(3-(异噻唑-3-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(14.9mg,44.4μmol,50％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝336.05；HPLC tR＝0.675min。

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.49(d,J＝4.8Hz,1H),7.58(s,1H),6.88(d,J＝4.8Hz,1H),6.29(s,1H),5.22(s,1H),4.71(s,1H),3.83(s,1H),3.21(t,J＝8.2Hz,1H),2.50(s,1H),2.15(d,J＝8.6Hz,1H),1.91(s,4H),1.17(t,J＝5.7Hz,6H)。

实施例13

1-异丙基-3-((1R,3S)-3-(3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)脲和1-异丙基-3-((1S,3R)-3-(3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)脲

顺式-(1-(叔丁基)-3-(3-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)环戊基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苄酯

步骤1：在0℃下在氮气气氛下向顺式-(1-(叔丁基)-5-(3-羟基环戊基)-1H-吡唑-3-基)氨基甲酸苄酯(780mg,2.18mmol)、PPh₃(743mg,2.84mmol)和异吲哚啉-1,3-二酮(385mg,2.62mmol)于THF(10mL)中的混合物中滴加DIAD(574mg,2.84mmol)。将混合物在0℃下搅拌1h。接着将混合物在25℃下搅拌12h。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释，并且将水相用EA(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗制产物通过硅胶色谱法(2g柱；用PE/EA(比率：8/1)洗脱)纯化。在真空中浓缩产生呈无色油状物的顺式-(1-(叔丁基)-5-(3-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)氨基甲酸苄酯(1g,90％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝487.35；HPLC tR＝1.285min。

顺式-2-(3-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)环戊基)异吲哚啉-1,3-二酮

步骤2：在25℃下将顺式-(1-(叔丁基)-5-(3-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)氨基甲酸苄酯(1g,2mmol)和Pd/C(0.2g)于THF(10mL)中的搅拌混合物用H₂处理2h。将反应混合物过滤(通过硅藻土垫)，将垫用EA洗涤，并且将滤液在真空中浓缩。在真空中浓缩产生呈无色油状物的顺式-2-(3-(3-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)异吲哚啉-1,3-二酮(670mg,90％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝0.868；HPLC tR＝353.25min。

顺式-2-(3-(1-(叔丁基)-5-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-3-基)环戊基)异吲哚啉-1,3-二酮

步骤3：向可再密封反应小瓶中装入顺式-2-(3-(3-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)异吲哚啉-1,3-二酮(1.5g,4.3mmol)、2-溴嘧啶(0.81g,5.1mmol)、Cs₂CO₃(4.2g,13mmol)、Pd₂(dba)₃(0.39g,0.43mmol)、xantphos(0.49g,0.85mmol)、二噁烷(20mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在110℃下搅拌1h。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释，并且将水相用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗制产物通过硅胶色谱法(10g柱；用PE/EA(比率：2/1)洗脱)纯化。在真空中浓缩产生呈橙色固体的顺式-2-(3-(1-(叔丁基)-3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)异吲哚啉-1,3-二酮(1g,50％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝431.25；HPLC tR＝1.127min。

顺式-N-(3-(3-氨基环戊基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)嘧啶-2-胺

步骤4：向可再密封反应小瓶中装入顺式-2-(3-(1-(叔丁基)-3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)异吲哚啉-1,3-二酮(1g,2mmol)、NH₂NH₂.H₂O/MeOH(3:1)(4mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在50℃下搅拌1h。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，20min内10％至50％梯度；检测器，UV 250nm。在真空中浓缩产生呈无色固体的顺式-N-(5-(3-氨基环戊基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-胺(500mg,70％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝301.30；HPLC tR＝0.718min。

顺式-1-(3-(1-(叔丁基)-5-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-3-基)环戊基)-3-异丙基脲

步骤5：在25℃下在氮气气氛下向顺式-N-(5-(3-氨基环戊基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-胺(560mg,1.86mmol)和DIEA(723mg,5.59mmol)于DCM(5mL)中的混合物中滴加2-异氰酸基丙烷(190mg,2.24mmol)。将混合物在25℃下搅拌2h。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内10％至50％梯度；检测器，UV 220nm。在真空中浓缩产生呈白色固体的顺式-1-(3-(1-(叔丁基)-3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)-3-异丙基脲(360mg,50.1％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝386.40；HPLC tR＝0.902min。

顺式-1-异丙基-3-(3-(3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)脲

步骤6：向可再密封反应小瓶中装入顺式-1-(3-(1-(叔丁基)-3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)-3-异丙基脲(340mg,882μmol)、FA(10mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在75℃下搅拌12h。将反应物在真空下浓缩。将反应混合物倒入10mL MeOH中。收集分离的固体，固体产生呈白色固体的顺式-1-异丙基-3-(3-(3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)脲(220mg,75.7％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝330.30；HPLC tR＝0.735min。

1-异丙基-3-((1R,3S)-3-(3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)脲

步骤7：将顺式-1-异丙基-3-(3-(3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)脲(220mg,668μmol)材料通过手性制备型HPLC(柱：CHIRALPAK IE，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％CH₃COOH)--HPLC，流动相B：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：31min内40％ B至40％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：19.81；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；注入体积：1.2mL；运行次数：14)纯化。冻干产生呈白色固体的1-异丙基-3-((1R,3S)-3-(3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)脲(64mg,0.19mmol,29％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝330.20；HPLC tR＝0.615min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.93(s,1H),9.55(s,1H),8.42(d,J＝4.8Hz,2H),6.76(t,J＝4.8Hz,1H),6.32(s,1H),5.82(d,J＝7.6Hz,1H),5.54(d,J＝7.7Hz,1H),3.96(p,J＝7.4Hz,1H),3.65(dp,J＝7.7,6.4Hz,1H),3.08-2.95(m,1H),2.31(dt,J＝13.6,7.3Hz,1H),1.94(dddd,J＝33.7,15.2,12.3,7.4Hz,2H),1.68(dtd,J＝10.8,8.8,8.2,6.4Hz,1H),1.51-1.32(m,2H),1.02(dd,J＝6.5,1.0Hz,6H)。

1-异丙基-3-((1S,3R)-3-(3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)脲

将顺式-1-异丙基-3-(3-(3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)脲(220mg,668μmol)材料通过手性制备型HPLC(柱：CHIRALPAK IE，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％CH₃COOH)--HPLC，流动相B：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：31min内40％ B至40％ B；波长：220/254nm；RT2(min)：25.25；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；注入体积：1.2mL；运行次数：14)纯化。冻干产生呈白色固体的1-异丙基-3-((1S,3R)-3-(3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)脲(65.7mg,29.9％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝330.15；HPLC tR＝0.615min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.92(s,1H),9.55(s,1H),8.42(d,J＝4.7Hz,2H),6.76(t,J＝4.8Hz,1H),6.32(s,1H),5.82(d,J＝7.5Hz,1H),5.54(d,J＝7.7Hz,1H),3.96(h,J＝7.4Hz,1H),3.72-3.59(m,1H),3.00(h,J＝8.6Hz,1H),2.31(dt,J＝13.4,7.1Hz,1H),2.04-1.83(m,2H),1.68(dtd,J＝10.9,8.8,8.1,6.4Hz,1H),1.51-1.32(m,2H),1.02(dd,J＝6.5,1.0Hz,6H)。

根据实施例13的方法制备的额外化合物绘示于下表8中。

实施例14

N-((1R,3S)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)苯甲酰胺和N-((1S,3R)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)苯甲酰胺

顺式-N-(3-(1-(叔丁基)-5-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环戊基)苯甲酰胺

步骤1：向圆底烧瓶中装入N-(5-(顺式-3-氨基环戊基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(180mg,1Eq,374μmol)、DCM(6mL)、TEA(120mg,3Eq,1.12mmol)和搅拌棒。在0℃下添加苯甲酰氯(63.1mg,1.2Eq,449μmol)，并且将溶液在25℃下搅拌1小时。将所得粗制材料通过TLC(DCM/MeOH＝10:1)纯化。在真空中浓缩产生呈黄色非晶形固体的N-(顺式-3-(1-(叔丁基)-3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)苯甲酰胺(130mg,289μmol,77.3％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝450.15；HPLC tR＝0.942min。

顺式-N-(3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)苯甲酰胺

步骤2：向圆底烧瓶中装入N-(顺式-3-(1-(叔丁基)-3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)苯甲酰胺(130mg,1Eq,289μmol)，添加FA(3mL)，并且将溶液在75℃下搅拌16小时。将所得粗制材料通过快速色谱法(乙腈/水)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的顺式-N-(3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)苯甲酰胺(90mg,0.23mmol,79％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝394.10；HPLC tR＝0.517min。

N-((1R,3S)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)苯甲酰胺和N-((1S,3R)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)苯甲酰胺

步骤3：将N-(顺式-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)苯甲酰胺(90mg,1Eq,0.23mmol)通过手性-HPLC(柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％DEA)--HPLC，流动相B：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：11min内60％ B至60％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：6.97；RT2(min)：8.65；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；注入体积：0.3mL；运行次数：6)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的N-((1R,3S)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)苯甲酰胺(27.5mg,0.070mmol,30.5％)和呈白色非晶形固体的N-((1S,3R)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)苯甲酰胺(29.6mg,0.075mmol,32.9％)。

N-((1R,3S)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)苯甲酰胺：

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝394.15；HPLC tR＝1.128min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)12.13(s,1H),10.64(s,1H),8.42(d,J＝7.6Hz,1H),7.88-7.81(m,2H),7.56-7.48(m,1H),7.48-7.41(m,2H),6.35(s,1H),6.22(s,1H),4.37(q,J＝7.6Hz,1H),3.83(s,2H),3.13-3.02(m,1H),2.39(dd,J＝12.9,7.0Hz,1H),2.20(s,3H),2.02(t,J＝7.9Hz,2H),1.78-1.69(m,2H),1.69-1.61(m,1H)。

N-((1S,3R)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环戊基)苯甲酰胺：

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝394.20；HPLC tR＝1.112min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)12.13(s,1H),10.64(s,1H),8.42(d,J＝7.4Hz,1H),7.87-7.81(m,2H),7.56-7.49(m,1H),7.49-7.41(m,2H),6.35(s,1H),6.22(s,1H),4.42-4.34(m,1H),3.83(s,2H),3.11-3.02(m,1H),2.39(dd,J＝13.1,7.1Hz,2H),2.20(s,3H),2.02(t,J＝8.0Hz,2H),1.81-1.61(m,4H),1.08(t,J＝7.2Hz,1H)。

实施例15

2-(3-甲基异噁唑-5-基)-N-(5-(噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-3-基)乙酰胺

2-(5-溴-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮

步骤1：在室温下在氮气气氛下向5-溴-1H-吡唑-3-胺(2.5g,1eq,15mmol)和异苯并呋喃-1,3-二酮(2.7g,1.2eq,19mmol)于AcOH(25mL)中的溶液中。将反应混合物在125℃下搅拌16h。将混合物冷却至室温。将混合物浓缩并且将残余物用水稀释并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到呈黄色固体的2-(5-溴-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(4.4g,15mmol,98％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝291.85；HPLC tR＝0.773min。

2-(5-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮

步骤2：在室温下在氮气气氛下向2-(5-溴-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(4g,0.01mol)和K₂CO₃(6g,0.04mol)于MeCN(30mL)中的溶液中添加1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(3g,0.02mol)。将反应混合物在80℃下搅拌16h。将混合物冷却至室温，将所得混合物过滤，并且将滤饼用EA(3×250mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(用PE/EA(2/1)洗脱)纯化，得到呈灰白色固体的2-(5-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(5g,0.01mol,90％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝411.95；HPLC tR＝0.939min。

2-(1-(4-甲氧基苄基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮

步骤3：在室温下在氮气气氛下向2-(5-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(5g,0.01mol)和4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-联(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)(6g,0.02mol)于1,4-二噁烷(20mL)中的溶液中添加乙酸钾(4g,0.04mol)和PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(1g,1mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌16h。将混合物冷却至室温。将所得混合物过滤，将滤饼用EA(3×250mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(用PE/EA(1/1)洗脱)纯化，得到呈灰白色固体的2-(1-(4-甲氧基苄基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(2.6g，4.5mmol，40％，80％纯度)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝460.05；HPLC tR＝1.225min。

2-(1-(4-甲氧基苄基)-5-(噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮

步骤4：向2-(1-(4-甲氧基苄基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(600mg,1.31mmol)和7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶(281mg,1.31mmol)溶解于THF(10mL)中的溶液中添加K3PO4(831mg,3.92mmol)和PdXantPhos G3(111mg,131μmol)。将所得混合物在50℃下在N₂气氛下搅拌1.5h。可通过LCMS检测期望产物。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的ACN，20min内0％至100％梯度；检测器，UV 254nm。这产生呈黄色固体的2-(1-(4-甲氧基苄基)-5-(噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(190mg,406μmol,31.1％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝468.00；HPLC tR＝1.052min。

1-(4-甲氧基苄基)-5-(噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-3-胺

步骤5：将2-(1-(4-甲氧基苄基)-5-(噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(190mg,406μmol)的溶液溶解于MeOH(2mL)和N₂H₄.H₂O(6mL)中。将所得混合物在50℃下在氮气气氛下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。可通过LCMS检测期望产物。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱：XBridge制备型OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内30％B至50％ B，检测器，UV 254nm。这产生呈橙色固体的1-(4-甲氧基苄基)-5-(噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-3-胺(100mg,296μmol,72.9％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝338.00；HPLC tR＝0.734min。

N-(1-(4-甲氧基苄基)-5-(噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤6：在室温下向1-(4-甲氧基苄基)-5-(噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-3-胺(100mg,296μmol)、2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酸(62.7mg,445μmol)和DIEA(115mg,889μmol)于DCM(3mL)中的搅拌溶液中滴加T₃P(283mg,889μmol)。将所得混合物在25℃下在氮气气氛下搅拌1小时。将混合物用水稀释并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩。将混合物浓缩，得到呈黄色固体的N-(1-(4-甲氧基苄基)-5-(噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(120mg,261μmol,87.9％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝461.00；HPLC tR＝0.911min。

2-(3-甲基异噁唑-5-基)-N-(5-(噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-3-基)乙酰胺

步骤7：在室温下向小瓶中添加N-(1-(4-甲氧基苄基)-5-(噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(110mg,239μmol)和TFA(2mL)。将所得混合物在80℃下再搅拌1小时。将所得混合物在真空下浓缩。将粗制残余物通过制备型HPLC(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内10％B至35％ B，35％ B；波长：220nm)纯化。这产生呈白色固体的2-(3-甲基异噁唑-5-基)-N-(5-(噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-3-基)乙酰胺(42.6mg,125μmol,52.4％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝341.05；HPLC tR＝0.975min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)13.03(s,1H),10.89(s,1H),9.63(s,1H),9.31(s,1H),8.77(s,1H),7.48(s,1H),6.28(s,1H),3.91(s,2H),2.22(s,3H)。

实施例16

N-(5-(二环[2.2.1]庚-1-基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-胺

二环[2.2.1]庚烷-1-甲酸甲酯

步骤1：在0℃下在氮气气氛下将二氯化亚硫(1.31g,2.2eq,11.0mmol)滴加至二环[2.2.1]庚烷-1-甲酸(700mg,1eq,4.99mmol)于MeOH(16mL)中的溶液中。将混合物在60℃下搅拌3h。在减压下在室温下去除溶剂，获得呈白色固体的二环[2.2.1]庚烷-1-甲酸甲酯(720mg,4.67mmol,93.5％)。粗制产物未经进一步纯化即用于下一步骤。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝155.10；HPLC tR＝1.035min。

3-(二环[2.2.1]庚-1-基)-3-氧代丙腈

步骤2：在-78℃下将LiHMDS(1.17g，7.00mL，1摩尔浓度，1.5eq，7.00mmol)添加至二环[2.2.1]庚烷-1-甲酸甲酯(720mg,1eq,4.67mmol)和乙腈(383mg,2eq,9.34mmol)于THF(16mL)中的溶液中。将反应混合物在-78℃下搅拌1小时。LCMS显示无SM。将反应混合物用饱和NH₄Cl(15mL)淬灭，并且将水相用DCM(60mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩，获得3-(二环[2.2.1]庚-1-基)-3-氧代丙腈(730mg,4.47mmol,95.8％)，其未经进一步纯化即用于下一步骤。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝无质量信号；HPLC tR＝0.976min。

3-(二环[2.2.1]庚-1-基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-胺

步骤3：将叔丁基肼盐酸盐(836mg,1.5eq,6.71mmol)和氢氧化钠(179mg,1eq,4.47mmol)于EtOH(5mL)中搅拌1h。将所述溶液滴加至3-(二环[2.2.1]庚-1-基)-3-氧代丙腈(730mg,1Eq,4.47mmol)于EtOH(8mL)中的溶液中。将溶液在50℃下搅拌2小时。将反应混合物用饱和NH₄Cl(20mL)稀释，并且将水相用DCM(40mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将所得粗制材料通过快速色谱法(乙腈/水/0.1％甲酸)纯化。在真空中浓缩，得到呈褐色固体的5-(二环[2.2.1]庚-1-基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-胺(600mg,2.57mmol,57.5％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝234.10；HPLC tR＝0.824min。

N-(3-(二环[2.2.1]庚-1-基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)嘧啶-2-胺

步骤4：在N₂下将Pd₂(dba)₃(31mg,0.1eq,34μmol)添加至xantphos(40mg,0.2eq,69μmol)、5-(二环[2.2.1]庚-1-基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-胺(80mg,1eq,0.34mmol)和2-氯嘧啶(35mg,0.9Eq,0.31mmol)于1,4-二噁烷(2mL)中的溶液中。将反应混合物在80℃下在N₂气氛下搅拌16小时。反应混合物未经任何后处理即用于下一步骤中。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝312.10；HPLC tR＝1.114min。

N-(5-(二环[2.2.1]庚-1-基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-胺

步骤5：向来自先前步骤的反应混合物中添加甲酸(975mg,60Eq,21.2mmol)并且接着将反应物加热至80℃保持16小时。将反应物浓缩以去除过量甲酸并直接通过快速色谱法(乙腈/水/0.1％甲酸)纯化。在真空中浓缩得到呈红色油状物的粗制产物。将粗制产物进一步通过制备型HPLC利用以下条件纯化：柱：XBridge Shield RP18 O BD柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃+0.1％NH₃.H₂O)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内30％ B至50％ B，50％ B；波长：254nm；RT1(min)：7.32。蒸发溶剂后得到呈白色固体的N-(5-(二环[2.2.1]庚-1-基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2-胺(36.5mg,143μmol,40.5％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝256.15；HPLC tR＝1.361min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.92(s,1H),9.49(s,1H),8.41(d,J＝4.8Hz,2H),6.75(t,J＝4.8Hz,1H),6.38(s,1H),2.37-2.22(m,1H),1.83-1.65(m,4H),1.64-1.47(m,4H),1.41-1.26(m,2H)。

下文阐述根据实施例18的方法制备的额外化合物：

N-(5-(二环[2.2.1]庚-1-基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)12.13(s,1H),10.63(s,1H),6.29(d,J＝2.1Hz,1H),6.22(s,1H),3.83(s,2H),2.30(s,1H),2.20(s,3H),1.77¨C 1.63(m,4H),1.61¨C 1.47(m,4H),1.40¨C 1.28(m,2H)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝301.0。

实施例17

N-(3-((1s,3s)-3-(((4-环丙基异噻唑-3-基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺和N-(5-((1r,3r)-3-(((4-环丙基异噻唑-3-基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

N-(1-(叔丁基)-3-(3-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤1：向圆底烧瓶中装入1-(叔丁基)-5-(3-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-胺(1.98g,1eq,4.29mmol)、EA(10mL)和搅拌棒，添加2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酸(908mg,1.5eq,6.43mmol)、DIEA(1.66g,3eq,12.9mmol)、T₃P(5.45g,50％Wt,2eq,8.58mmol)，并且将溶液在25℃下搅拌2小时。将溶液用水淬灭并且收集有机相。将水相用EA萃取三次。将有机相合并浓缩。将所得粗制材料通过快速色谱法(乙腈/水)纯化。在真空中浓缩，得到呈褐色非晶形固体的N-(1-(叔丁基)-5-(3-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(2.50g,4.27mmol,99.7％)。

N-(1-(叔丁基)-3-(3-(羟基甲基)环丁基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤2：向圆底烧瓶中装入N-(1-(叔丁基)-5-(3-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(2.5g,1eq,4.3mmol)、THF(15mL)和搅拌棒。添加TBAF(2.2g中，8.5mL，1摩尔浓度，2eq，8.5mmol)，并且将溶液在25℃下搅拌2天。将混合物用水稀释，并且将水相用EA萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将所得粗制材料通过快速色谱法(NH₃·H₂O/水)纯化。在真空中浓缩，得到呈褐色非晶形固体的N-(1-(叔丁基)-5-(3-(羟基甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(900mg,2.60mmol,61％)。

N-(1-(叔丁基)-3-(3-(((4-环丙基异噻唑-3-基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤3：向N-(1-(叔丁基)-5-(3-(羟基甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(150mg,1eq,433μmol)于甲苯(5mL)中的溶液中添加4-环丙基异噻唑-3-醇(91.7mg,1.5eq,649μmol)和三苯基膦(170mg,1.5eq,649μmol)。在使氮气鼓泡通过反应混合物1分钟后，在0℃下在氮气气氛下滴加(E)-二氮烯-1,2-二甲酸二-叔丁酯(150mg,1.5Eq,649μmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将所得溶液使用C18快速色谱法利用以下条件(流动相A：水，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：0％ B至100％ B，40min内；254/220nm)纯化。这产生N-(1-(叔丁基)-5-(3-(((4-环丙基异噻唑-3-基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(150mg，0.27mmol，62％，84％纯度)。

N-(3-(3-(((4-环丙基异噻唑-3-基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤4：将N-(1-(叔丁基)-5-(3-(((4-环丙基异噻唑-3-基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(133mg,1eq,283μmol)于FA(3mL)中的溶液在80℃下加热3小时。将溶剂蒸发。将残余物通过制备型HPLC(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内30％ B至55％ B，55％ B；波长：220nm；RT1(min)：7.62)纯化。这产生呈白色非晶形固体的N-(5-(3-(((4-环丙基异噻唑-3-基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(100mg,242μmol,85.4％)。

N-(3-((1s,3s)-3-(((4-环丙基异噻唑-3-基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤5：通过手性-HPLC纯化N-(3-((1s,3s)-3-(((4-环丙基异噻唑-3-基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)0.6-0.73(m,2H),0.86-1(m,2H),1.82(tt,J＝8.4,5.1Hz,1H),2.18(qd,J＝9.5,2.7Hz,2H),2.32(s,3H),2.51-2.63(m,2H),3.49(p,J＝9.0Hz,1H),3.89(s,2H),4.40(d,J＝5.7Hz,2H),6.18(s,1H),6.56(s,1H),7.84(d,J＝0.7Hz,1H),8.82(s,1H)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝414.15。

N-(5-((1r,3r)-3-(((4-环丙基异噻唑-3-基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

通过手性-HPLC纯化N-(3-((1r,3r)-3-(((4-环丙基异噻唑-3-基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺。

实施例18

根据本文所述程序合成表9中所列的额外化合物。

实施例19

(1-甲基环丙基)氨基甲酸rel-(3S,5R)-5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

2-(1-甲基环丙基)乙酸rel-(3R,5R)-5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3S,5R)-5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5S)-5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

4,4-二甲氧基四氢呋喃-2-甲酸甲酯

步骤1：向圆底烧瓶中装入4-氧代四氢呋喃-2-甲酸甲酯(2g,0.01mol)、三甲氧基甲烷(9g,0.08mol)、TsOH(0.05g,0.3mmol)、MeOH(20mL)和搅拌棒。将溶液在24℃下搅拌16小时。通过TLC检测产物。将混合物用饱和NaHCO₃(水溶液)淬灭，接着在真空下浓缩以去除大部分甲醇。将反应混合物用水(50mL)稀释，并且将水相用EA(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩，得到呈黄色油状物的4,4-二甲氧基四氢呋喃-2-甲酸甲酯(1.5g,7.9mmol,60％)。

m/z(ES⁺)：无MS信号。

3-(4,4-二甲氧基四氢呋喃-2-基)-3-氧代丙腈

步骤2：在-78℃下在氮气气氛下向4,4-二甲氧基四氢呋喃-2-甲酸甲酯(1.4g,7.4mmol)和CH₃CN(0.91g,22mmol)于THF(15mL)中的混合物中滴加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(15mL，1M，于THF中，15mmol)。将混合物在-78℃下搅拌1.5小时。通过TLC检测反应混合物。将反应物用NH₄Cl(饱和水溶液，15mL)淬灭，并用EA(3*20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2*10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并在真空下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，20min内0％至100％梯度；检测器，UV220nm，得到呈黄色油状物的3-(4,4-二甲氧基四氢呋喃-2-基)-3-氧代丙腈(970mg,4.87mmol,66.4％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝无信号。

1-(叔丁基)-5-(4,4-二甲氧基四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-胺

步骤3：在室温下将氢氧化钠(1.03g,25.7mmol)逐份添加至叔丁基肼盐酸盐(3.23g,25.8mmol)于EtOH(40mL)中的悬浮液中，并在室温下搅拌1小时。在室温下添加3-(4,4-二甲氧基四氢呋喃-2-基)-3-氧代丙腈(4.25g,21.3mmol)于乙醇中的溶液，接着将混合物加热至50℃内部温度并搅拌过夜。将混合物过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，20min内30％至60％梯度；检测器，UV 254nm。在真空中浓缩产生呈黄色油状物的1-(叔丁基)-5-(4,4-二甲氧基四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-胺(1.2g,4.5mmol,21％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝270.20；HPLC tR＝0.892min。

N-(1-(叔丁基)-5-(4,4-二甲氧基四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤4：在0℃下在氮气气氛下向2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酸(635mg,4.50mmol)、1-(叔丁基)-5-(4,4-二甲氧基四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-胺(1.21g,4.50mmol)和DIEA(1.74g,13.5mmol)于EA(15mL)中的混合物中滴加2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(4.29g，50％ Wt于乙酸乙酯中的溶液，6.75mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应物用饱和Na₂CO₃水溶液(10mL)淬灭并用EA(2*10mL)萃取。将有机层用更多Na₂CO₃水溶液(2*10mL)和盐水(30mL)洗涤，并浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内0％至100％梯度；检测器，UV220nm，得到呈白色固体的N-(1-(叔丁基)-5-(4,4-二甲氧基四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(920mg,52％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝393.25；HPLC tR＝0.945min

N-(1-(叔丁基)-5-(4-氧代四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤5：向圆底烧瓶中装入N-(1-(叔丁基)-5-(4,4-二甲氧基四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(910mg,2.32mmol)和搅拌棒。添加HCl(3mol/L)/THF(10mL)，并且将溶液在24℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(20mL)稀释，并且将水相用DCM(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内10％至50％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈黄色油状物的N-(1-(叔丁基)-5-(4-氧代四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(803mg,2.32mmol,100％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝347.30；HPLC tR＝0.813min。

N-(1-(叔丁基)-5-(4-羟基四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤6：向圆底烧瓶中装入N-(1-(叔丁基)-5-(4-氧代四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(270mg,779μmol)、MeOH(5mL)和搅拌棒。向以上混合物中添加NaBH₄(88.5mg,2.34mmol)。将所得溶液在24℃下搅拌2h。将混合物用水淬灭并在真空下浓缩以去除大部分MeOH。将反应混合物用水(30mL)稀释，并且将水相用DCM(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内10％至40％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈黄色油状物的N-(1-(叔丁基)-5-(4-羟基四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(180mg,517μmol,66.3％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝349.30；HPLC tR＝0.772min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸5-(1-(叔丁基)-3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤7：在室温下在氮气气氛下向N-(1-(叔丁基)-5-(4-羟基四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(160mg,459μmol)和1-异氰酸基-1-甲基环丙烷(0.6M于甲苯中)(2.3mL,1.38mmol)的搅拌混合物中滴加DIEA(178mg,240μL,1.38mmol)。将所得混合物在100℃下在氮气气氛下搅拌2小时。接着使反应混合物冷却至室温并减压浓缩。将残余物通过反相快速色谱法纯化，得到呈浅黄色油状物的(1-甲基环丙基)氨基甲酸5-(1-(叔丁基)-3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(145mg,325μmol,70.9％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝446.30；HPLC tR＝0.952min

(1-甲基环丙基)氨基甲酸5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤8：向圆底烧瓶中装入(1-甲基环丙基)氨基甲酸5-(1-(叔丁基)-3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(170mg,382μmol)和搅拌棒。添加HCOOH(5mL)，并且将溶液在70℃下搅拌3小时并在真空下浓缩，以去除HCOOH。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内10％至50％梯度；检测器，UV 254nm，得到(1-甲基环丙基)氨基甲酸5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(100mg,257μmol,67.3％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝390.15；HPLC tR＝0.887,0.961min。

(顺式)(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3S,5S)-5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯和反式(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3S,5R)-5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤9：将(1-甲基环丙基)氨基甲酸5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(100mg,57μmol)通过制备型HPLC(柱：XB ridge制备型OBDC18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内10％ B至32％ B，32％ B；波长：220nm；RT1(min)：7.55/8.27)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的顺式-(1-甲基环丙基)氨基甲酸5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(50mg,0.13mmol,50％)和呈白色非晶形固体的反式-(1-甲基环丙基)氨基甲酸5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(10mg,26μmol,10％)。

(顺式)m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝390.30；HPLC tR＝0.746min。

(反式)m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝390.30；HPLC tR＝0.780min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸rel-(3S,5R)-5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤10：将化合物顺式-(1-甲基环丙基)氨基甲酸5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(50mg,0.13mmol)通过制备型-手性-HPLC(柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％ DEA)--HPLC，流动相B：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：11.5min内80％ B至80％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：4.02；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；注入体积：1.7mL；运行次数：1)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸rel-(3S,5R)-5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(13mg,33μmol,52％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝390.15；HPLC tR＝0.954min。

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)8.89(s,1H),6.62(s,1H),6.18(s,1H),5.36(s,2H),5.13(s,1H),4.12(d,J＝10.7Hz,1H),3.98(s,1H),3.90(s,2H),2.67(s,1H),2.33(s,3H),2.20(d,J＝14.1Hz,1H),1.34(s,3H),0.74(s,2H),0.60(s,2H)。

2-(1-甲基环丙基)乙酸rel-(3R,5R)-5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

将化合物顺式-(1-甲基环丙基)氨基甲酸5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(50mg,0.13mmol)通过制备型-手性-HPLC(柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％ DEA)--HPLC，流动相B：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：11.5min内80％ B至80％ B；波长：220/254nm；RT2(min)：8.23；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；注入体积：1.7mL；运行次数：1)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的2-(1-甲基环丙基)乙酸rel-(3R,5R)-5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(12.3mg,31.7μmol,49％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝390.20；HPLC tR＝0.961min。

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)9.01(s,1H),6.62(s,1H),6.18(s,1H),5.40(s,1H),5.35(s,1H),5.13(s,1H),4.12(d,J＝10.8Hz,1H),3.97(d,J＝11.0Hz,1H),3.90(s,2H),2.68(s,1H),2.33(s,3H),2.20(d,J＝13.9Hz,1H),1.34(s,3H),0.73(s,2H),0.59(s,2H)。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3S,5R)-5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

将化合物反式-(1-甲基环丙基)氨基甲酸5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(10mg,26μmol)通过制备型-手性-HPLC(柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％ DEA)--HPLC，流动相B：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：13.5min内80％ B至80％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：5.27；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；注入体积：1.65mL；运行次数：1)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3S,5R)-5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(4.2mg,11μmol,80％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝390.15；HPLC tR＝1.016min。

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)8.85(s,1H),6.58(s,1H),6.19(s,1H),5.38(s,1H),5.20(d,J＝12.7Hz,2H),4.12(s,1H),3.99(d,J＝10.6Hz,1H),3.89(s,2H),2.50(s,1H),2.32(s,3H),2.30-2.22(m,1H),1.39(s,3H),0.79(s,2H),0.68-0.63(m,2H)。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5S)-5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

将化合物反式-(1-甲基环丙基)氨基甲酸5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(10mg,26μmol)通过制备型-手性-HPLC(柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％ DEA)--HPLC，流动相B：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：13.5min内80％ B至80％ B；波长：220/254nm；RT2(min)：10.63；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；注入体积：1.65mL；运行次数：1)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5S)-5-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(3.6mg,9.2μmol,70％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝390.15；HPLC tR＝1.012min。

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)8.93(s,1H),6.57(s,1H),6.18(s,1H),5.38(s,1H),5.20(s,2H),4.15(s,1H),3.98(d,J＝10.5Hz,1H),3.91(s,2H),2.50(s,1H),2.32(s,3H),2.28-2.24(m,1H),1.39(s,3H),0.80(s,2H),0.73-0.62(m,2H)。

根据实施例19的方法制备的额外化合物绘示于下表10中。

实施例20

异丙基氨基甲酸rel-(1R,3S)-3-(2-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)噻唑-5-基)环戊基酯和

异丙基氨基甲酸rel-(1R,3S)-3-(2-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)噻唑-5-基)环戊基酯

2-(3-氧代环戊基)丙二酸二甲酯

步骤1：向2-环戊烯-1-酮(25.5mL,305mmol)于无水甲苯(250mL)中的溶液中添加丙二酸二甲酯(140mL,1.22mol)。接着添加1,5,7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯(1.27g,9.14mmol)并且将混合物在室温下在氮气下搅拌20h。将混合物在减压下浓缩至1/2体积。将粗制产物通过短硅胶垫(4cm×4cm)过滤，用AcOEt洗脱若干次。将滤液在减压下浓缩(70-75℃水浴，2h)，得到呈黄色油状物的标题化合物(86g)。

LCMS：对MS不敏感。

¹H NMR(400MHz,DMSO):δ3.67(s；3H)；3.65(s；3H)；3.52(s；1H)；2.65-2.76(m；1H)；2.29(dd；J＝18.10；7.54Hz；1H)；2.15-2.19(m；2H)；1.96-2.05(m；2H)；1.53-1.64(m；1H)。

2-(3-氧代环戊基)乙酸甲酯

步骤2：将3-(二甲基-l3-氧烷基)-3-氧代-2-(3-氧代环戊基)丙酸甲酯(40.0g,187mmol)和十二烷二酸(34.4g,149mmol)的混合物于210℃(金属bille温度)下加热20h。接着将混合物通过使用分馏塔在减压(真空：8-10毫巴，金属bille温度：180-190℃，内部温度：70-100℃，使用蒸馏接收器)下蒸馏，得到呈透明油状物的标题化合物(17.1g,59％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.68(s；3H)；2.55-2.67(m；1H)；2.43-2.51(m；3H)；2.26-2.35(m；1H)；2.14-2.25(m；2H)；1.88(dd；J＝18.23；10.09Hz；1H)；1.51-1.62(m；1H)。

2-(3,3-二甲氧基环戊基)乙酸甲酯

步骤3：将蒙脱石(21.0g,64.0mmol)和原甲酸三甲酯(35.0mL,320mmol)的混合物在室温下搅拌2h。接着历经10分钟缓慢添加2-(3-氧代环戊基)乙酸甲酯(10.0g,64.0mmol)于戊烷(48mL)中的溶液并且将混合物在室温下搅拌20h。接着将混合物经短硅藻土垫过滤并用戊烷冲洗。将滤液在减压下浓缩，得到呈透明油状物的标题化合物(12.7g,98％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.65(s；3H)；3.18(s；6H)；2.30-2.44(m；3H)；2.08(dd；J＝13.22；7.51Hz；1H)；1.84-1.92(m；2H)；1.72-1.80(m；1H)；1.42(dd；J＝13.18；8.58Hz；1H)；1.27-1.37(m；1H)。

2-(3,3-二甲氧基环戊基)乙-1-醇

步骤4：在室温下通过硼氢化锂于THF中的2M溶液(8.90mL,17.8mmol)逐滴处理2-(3,3-二甲氧基环戊基)乙酸甲酯(3.00g,14.8mmol)于THF(15.0mL)中的溶液。接着滴加甲醇(720uL,17.8mmol)并且将混合物在室温下搅拌20h。接着添加饱和NH₄Cl溶液(30mL)并且将混合物用醚(50mL)稀释。接着分离各层并且将有机相用醚(30mL,2X)萃取。接着将合并的有机相用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。将粗制化合物经40g硅胶柱，使用EtOAc于己烷中的混合物梯度(0-50％)使用ELSD检测器纯化，得到呈透明油状物的标题化合物(1.8g,70％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ3.65(q；J＝5.92Hz；2H)；3.19(d；J＝3.99Hz；6H)；2.02-2.13(m；2H)；1.84-1.90(m；2H)；1.72-1.79(m；1H)；1.58-1.65(m；2H)；1.27-1.42(m；3H)。

2-(3,3-二甲氧基环戊基)乙醛

步骤5：向2-(3,3-二甲氧基环戊基)乙-1-醇(800mg,4.59mmol)于CH₂Cl₂(50mL)中的溶液中添加碳酸氢钠(1.54g,18.4mmol)并且将混合物搅拌5分钟。将混合物冷却至0℃并且逐份添加戴斯-马丁过碘烷(2.92g,6.89mmol)。将混合物在0℃下搅拌30分钟，接着去除冰浴并且将混合物在室温下搅拌2h。添加饱和NaHCO₃溶液(30mL)和Na₂S₂O₄(30mL)的混合物并且将混合物搅拌30分钟。接着将混合物于DCM(70mL)中稀释。将水相用DCM(30mL,2X)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到呈油状物的标题化合物(890mg)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ9.75(s；1H)；3.19(s；6H)；2.49(s；3H)；2.06-2.15(m；1H)；1.85-1.94(m；2H)；1.74-1.82(m；1H)；1.30-1.43(m；2H)。

2-氯-2-(3,3-二甲氧基环戊基)乙醛

步骤6：向粗制2-(3,3-二甲氧基环戊基)乙醛(1.00g,5.23mmol)(90％纯度)于CH₂Cl₂(45mL)中的溶液中添加L-(-)-脯氨酰胺(119mg,1.05mmol)，并且将混合物在0℃下搅拌10分钟。在0℃下历经5分钟滴加N-氯代琥珀酰亚胺(698mg,5.23mmol)于CH₂Cl₂(20mL)中的溶液并且接着将混合物在0℃下搅拌1h。接着去除冰浴并且将混合物在室温下搅拌9h。将混合物冷却至0℃并且添加戊烷(40mL)并且将混合物在0℃下搅拌10分钟。接着将混合物经硅藻土过滤，接着在减压下浓缩。将残余物在戊烷(50mL)中稀释并用盐水(10mL,2X)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并减压浓缩，得到呈透明油状物的粗制标题化合物(670mg,62％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ9.45(dd；J＝6.67；2.89Hz；1H)；4.13(td；J＝7.88；2.85Hz；1H)；3.20(s；6H)；2.58-2.64(m；1H)；1.99-2.10(m；1H)；1.75-1.94(m；4H)；1.62-1.69(m；1H)。

5-(3,3-二甲氧基环戊基)噻唑-2-胺

步骤7：对硫脲(494mg,6.48mmol)于二噁烷(10mL)中的悬浮液进行声波处理，接着在室温下添加三乙胺(3.16mL,22.7mmol)，并且将混合物搅拌10分钟。接着添加2-溴-2-(3,3-二甲氧基环戊基)乙醛(670mg,3.24mmol)于二噁烷(17mL)中的溶液并且将混合物快速转移至设定为80℃的预加热的加热浴中并且加热20h。将混合物冷却至室温并减压浓缩。将残余物于醚(70mL)中稀释并用半饱和盐水(10mL,2X)洗涤。接着将水相用醚(30mL,2X)萃取。将合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤，并减压浓缩。将残余物经硅胶柱，使用10％ MeOH于DCM中的混合物梯度纯化，得到呈褐色油状物的标题化合物(200mg,27％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ6.76(s；1H)；4.76(bs；2H)；3.26-3.30(m；1H)；3.22(d；J＝3.47Hz；6H)；2.30(dd；J＝13.18；7.68Hz；1H)；2.06-2.13(m；1H)；1.96-2.02(m；1H)；1.84-1.90(m；1H)；1.69-1.80(m；2H)。ESI-MS(m/z+):229.1[M+H]。

N-(5-(3,3-二甲氧基环戊基)噻唑-2-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤8：在0℃下向5-(3,3-二甲氧基环戊基)噻唑-2-胺(480mg,2.10mmol)于CH₂Cl₂(30mL)中的溶液中添加3-甲基-5-异噁唑乙酸(333mg,2.31mmol)。接着添加N,N-二异丙基乙胺(1.10mL,6.31mmol)，之后添加丙基膦酸酐(3.75mL,6.31mmol)于EtOAc中的50％溶液，并且将混合物缓慢升温至室温(历经4小时)。接着将混合物于DCM(30mL)中稀释，并且添加饱和盐水溶液(10mL)。分离各相，并且将水相用DCM(20mL,2X)萃取。将合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤，并减压浓缩。将残余物经硅胶柱，使用EtOAc于DDM中的混合物梯度(0-60％)纯化，得到呈淡黄色固体的标题化合物(270mg,42％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ10.68(br s；1H)；7.19(s；1H)；6.19(s；1H)；3.97(s；2H)；3.56-3.65(m；1H)；2.73(dd；J＝18.07；7.52Hz；1H)；2.44-2.56(m；2H)；2.28-2.37(m；2H)；2.31(s,3H),2.00-2.10(m；1H)。ESI-MS(m/z+):306.1[M+H]。

N-(5-((1R,3S)-3-羟基环戊基)噻唑-2-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤9：在-65℃下在氮气气氛下向2-(3-甲基异噁唑-5-基)-N-(5-(3-氧代环戊基)噻唑-2-基)乙酰胺(250mg,1Eq,819μmol)于THF(10mL)中的混合物中滴加Li(CH₃CH₂)₃BH(1.64mL，1摩尔浓度，2Eq，1.64mmol)。将混合物在-65℃下搅拌1h。将混合物在-65℃下用NaHCO₃(水溶液)淬灭，接着在-10℃下添加H₂O₂并搅拌1h。将反应混合物用水(15mL)稀释，并且将水相用EA(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。这产生呈黄色非晶形固体的N-(5-(3-羟基环戊基)噻唑-2-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(200mg,651μmol,79.5％)。将所得粗制材料通过制备型HPLC(柱：XBridgeShield RP18 OBD柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3+0.1％NH3.H2O)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内25％ B至50％ B，50％ B；波长：220nm；RT1(min)：7.48；运行次数：0)纯化。冻干得到呈灰白色非晶形固体的N-(5-((顺式)-3-羟基环戊基)噻唑-2-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(150mg,488μmol,75.0％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝308.0；HPLC tR＝0.630min。

(顺式)-碳酸3-(2-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)噻唑-5-基)环戊基酯(4-硝基苯基)酯

步骤10：向圆底烧瓶中装入N-(5-((顺式)-3-羟基环戊基)噻唑-2-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(145mg,1Eq,472μmol)、DCM(6mL)、氯甲酸4-硝基苯基酯(95.1mg,1Eq,472μmol)、Py(112mg,114μL,3Eq,1.42mmol)、DMAP(5.76mg,0.1Eq,47.2μmol)和搅拌棒，并且将溶液在25℃下搅拌16小时。将反应混合物在真空中浓缩，产生呈灰白色非晶形固体的(顺式)-碳酸3-(2-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)噻唑-5-基)环戊基酯(4-硝基苯基)酯(250mg，粗品)，其未经进一步纯化即用于下一步骤中。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝473.0；HPLC tR＝0.978min。

(顺式)-异丙基氨基甲酸3-(2-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)噻唑-5-基)环戊基酯

步骤11：向圆底烧瓶中装入(顺式)-碳酸3-(2-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)噻唑-5-基)环戊基酯(4-硝基苯基)酯(135mg,1Eq,286μmol)、2-MeTHF(5mL)、DIEA(73.9mg,99.5μL,2Eq,571μmol)、丙-2-胺(33.8mg,2Eq,571μmol)和搅拌棒，并且将溶液在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(10mL)稀释，并且将水相用EA(10mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将所得粗制材料通过制备型HPLC(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3+0.1％NH3.H2O)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内25％ B至50％ B，50％ B；波长：220nm；RT1(min)：7.48；运行次数：0)纯化。冻干得到呈灰白色非晶形固体的(顺式)-异丙基氨基甲酸3-(2-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)噻唑-5-基)环戊基酯(80mg,0.20mmol,71％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝393.2；HPLC tR＝0.978min。

异丙基氨基甲酸rel-(1R,3S)-3-(2-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)噻唑-5-基)环戊基酯

步骤12：将所得材料(顺式)-异丙基氨基甲酸3-(2-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)噻唑-5-基)环戊基酯(80mg,0.20mmol)通过手性制备型HPLC(柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％DEA)--HPLC，流动相B：MeOH:DCM＝1:1；流量：20mL/min；梯度：11min内50％ B至50％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：7.17；RT2(min)：8.83；样品溶剂：MeOH:DCM＝1:1；注入体积：0.5mL；运行次数：5)纯化。冻干得到呈灰白色非晶形固体的异丙基氨基甲酸rel-(1R,3S)-3-(2-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)噻唑-5-基)环戊基酯(32mg,82μmol,40％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝393.10；HPLC tR＝0.797min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)12.28(s,1H),7.22(d,J＝1.0Hz,1H),6.96(d,J＝7.9Hz,1H),6.28(s,1H),5.00(s,1H),4.00(s,2H),3.58(h,J＝6.7Hz,1H),3.32-3.22(m,1H),2.50(s,1H),2.21(s,3H),2.05(d,J＝9.9Hz,1H),1.91(s,1H),1.70(dd,J＝20.7,10.5Hz,2H),1.58(s,1H),1.03(d,J＝6.6Hz,6H)。

实施例21

异丙基氨基甲酸((1s,3s)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环丁基)甲酯和

异丙基氨基甲酸((1s,3s)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环丁基)甲酯

3-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)环丁烷-1-甲酸甲酯

步骤1：向圆底烧瓶中装入3-(羟基甲基)环丁烷-1-甲酸甲酯(2.5g,1Eq,17mmol)、咪唑(3.5g,3Eq,52mmol)、DMF(10mL)和搅拌棒。添加次氯酸叔丁基二苯基甲硅烷基酯(12g,2.5Eq,43mmol)，并且将溶液在25℃下搅拌16小时。将混合物用水稀释，并且将水相用EA萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。这产生呈黄色油状物的3-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)环丁烷-1-甲酸甲酯(5g，粗品)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝383.30；HPLC tR＝1.143min。

3-(3-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)环丁基)-3-氧代丙腈

步骤2：向3-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)环丁烷-1-甲酸甲酯(5g,1Eq,0.01mol)于THF(30mL)中的溶液中添加CH₃CN(1g,1mL,2Eq,0.03mol)。接着使氮气鼓泡通过反应混合物2分钟并冷却至-78℃，将LiHMDS(3g,20mL,1.5Eq,0.02mol)滴加至反应物中。将混合物在-78℃下搅拌1h。将混合物蒸发并用乙酸乙酯(3×40ml)萃取，经Na₂SO₄干燥并在真空中蒸发。将粗制残余物通过快速色谱法(流动相A：水，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：7min内60％ B至80％ B)纯化；溶剂蒸发后得到呈黄色油状物的标题化合物3-(3-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)环丁基)-3-氧代丙腈(2.68g,6.84mmol,50％)。

m/z(ES⁺)[M+Na]⁺＝414.10；HPLC tR＝1.425min。

1-(叔丁基)-5-(3-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-胺

步骤3：向圆底烧瓶中装入于EtOH(13mL)中的叔丁基肼盐酸盐(1.28g,1.5Eq,10.3mmol)和NaOH(0.27g,1Eq,6.84mmol)以及搅拌棒。将所得混合物搅拌1-2小时。接着将3-(3-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)环丁基)-3-氧代丙腈(2.68g,1Eq,6.84mmol)用EtOH(5mL)溶解，并且添加以上混合物。将所得溶液在50℃下搅拌2小时。将所得粗制材料通过快速色谱法(乙腈/水/0.1％甲酸)纯化并在真空中浓缩，得到呈褐色油状物的1-(叔丁基)-5-(3-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-胺(1.98g,4.29mmol,62.7％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝462.25；HPLC tR＝1.599min。

N-(1-(叔丁基)-5-(3-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤4：向圆底烧瓶中装入1-(叔丁基)-5-(3-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-胺(1.98g,1Eq,4.29mmol)、DCM(10mL)和搅拌棒，添加2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酸(908mg,1.5Eq,6.43mmol)、DIEA(1.66g,3Eq,12.9mmol)、T₃P(5.45g,50％Wt,2Eq,8.58mmol)。将溶液在25℃下搅拌2小时。将溶液用水淬灭，并且收集有机相。将水相用EA萃取三次。将有机相合并浓缩。将所得粗制材料通过快速色谱法(乙腈/水)纯化并在真空中浓缩，得到呈褐色非晶形固体的N-(1-(叔丁基)-5-(3-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(2.50g,4.27mmol,99.7％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝585.40；HPLC tR＝1.575min。

N-(1-(叔丁基)-5-(3-(羟基甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤5：向圆底烧瓶中装入N-(1-(叔丁基)-5-(3-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(2.5g,1Eq,4.3mmol)、THF(15mL)和搅拌棒。添加TBAF(2.2g中，8.5mL，1摩尔浓度，2Eq，8.5mmol)，并且将溶液在25℃下搅拌2天。将混合物用水稀释，并且将水相用EA萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将所得粗制材料通过快速色谱法(MeCN/于水中的NH3.H2O)纯化并在真空中浓缩，得到呈褐色非晶形固体的N-(1-(叔丁基)-5-(3-(羟基甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(900mg,2.60mmol,61％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝347.20；HPLC tR＝0.800min。

异丙基氨基甲酸(3-(1-(叔丁基)-3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环丁基)甲酯

步骤6：向圆底烧瓶中装入N-(1-(叔丁基)-5-(3-(羟基甲基)环丁基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(450mg,1Eq,1.30mmol)、DIEA(504mg,679μL,3Eq,3.90mmol)、2-异氰酸基丙烷(221mg,2Eq,2.60mmol)、甲苯(15mL)和搅拌棒。将溶液在80℃下搅拌20小时并在真空中浓缩。将所得粗制材料通过快速色谱法(乙腈/水)纯化并在真空中浓缩，产生呈黄色油状物的异丙基氨基甲酸(3-(1-(叔丁基)-3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环丁基)甲酯(320mg,742μmol,57.1％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝432.35；HPLC tR＝0.835min。

异丙基氨基甲酸(3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环丁基)甲酯

步骤7：向圆底烧瓶中装入异丙基氨基甲酸(3-(1-(叔丁基)-3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环丁基)甲酯(320mg,1Eq,742μmol)、FA(15mL)和搅拌棒，并且将溶液在70℃下搅拌16小时。将所得混合物在真空中浓缩，产生呈黄色油状物的异丙基氨基甲酸(3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环丁基)甲酯(330mg，0.66mmol，89％，75％纯度)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝376.05；HPLC tR＝0.775min。

异丙基氨基甲酸((1s,3s)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环丁基)甲酯

步骤8：将异丙基氨基甲酸(3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环丁基)甲酯(250mg,1Eq,666μmol)通过手性制备型HPLC(柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％DEA)--HPLC，流动相B：MeOH:DCM＝1:1；流量：20mL/min；梯度：10min内80％ B至80％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：4.18；RT2(min)：7.47；样品溶剂：MeOH:DCM＝1:1；注入体积：1mL；运行次数：3)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的异丙基氨基甲酸((1s,3s)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环丁基)甲酯(87mg,0.23mmol,70％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝376.25；HPLC tR＝1.168min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)12.14(s,1H),10.64(s,1H),7.05(d,J＝7.9Hz,1H),6.35(s,1H),6.23(s,1H),4.04(d,J＝7.2Hz,2H),3.83(s,2H),3.57(ddt,J＝21.7,15.8,7.4Hz,3H),2.46(s,1H),2.21(s,4H),2.16(d,J＝8.1Hz,3H),1.05(d,J＝6.5Hz,6H)。

冻干得到呈白色非晶形固体的异丙基氨基甲酸((1s,3s)-3-(3-(2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺基)-1H-吡唑-5-基)环丁基)甲酯(33.7mg,89.8μmol,27.0％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝376.20；HPLC tR＝1.128min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)12.14(s,1H),10.64(s,1H),7.05(d,J＝7.9Hz,1H),6.35(s,1H),6.23(s,1H),4.04(d,J＝7.2Hz,2H),3.83(s,2H),3.57(ddt,J＝21.7,15.8,7.4Hz,3H),2.58(s,1H),2.21(s,4H),2.16(d,J＝8.1Hz,3H),1.05(d,J＝6.5Hz,6H)。

实施例22

N-(5-((1R,3r,5S,6r)-6-(二甲基氨基甲酰基)二环[3.1.0]己-3-基)-1H-吡唑-3-基)-3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺

2-(5-溴-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮

步骤1：在室温下在氮气气氛下将5-溴-1H-吡唑-3-胺(2.5g,15mmol)和异苯并呋喃-1,3-二酮(2.7g,19mmol)合并于AcOH(25mL)中。将反应混合物在125℃下搅拌16h。将混合物冷却至室温，用水稀释，并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到呈黄色固体的2-(5-溴-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(4.4g,15mmol,98％)。

m/z(ES+)[M+H]+＝303.20；HPLC tR＝0.962min。

2-(5-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮

步骤2：在室温下在氮气气氛下向2-(5-溴-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(4g,0.01mol)和K₂CO₃(6g,0.04mol)于MeCN(30mL)中的溶液中添加1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(3g,0.02mol)。将反应混合物在80℃下搅拌16h。将混合物冷却至室温。将所得混合物过滤，将滤饼用EA(3×250mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(用PE/EA(2/1)洗脱)纯化，得到呈灰白色固体的2-(5-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(5g,0.01mol,90％)。

m/z(ES+)[M+H]+＝413.95；HPLC tR＝0.939min。

(3-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-5-基)硼酸和2-(1-(4-甲氧基苄基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮

步骤3：在室温下在氮气气氛下向2-(5-溴-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(5g,0.01mol)和4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-联(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)(6g,0.02mol)于1,4-二噁烷(20mL)中的溶液中添加乙酸钾(4g,0.04mol)和PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂加合物(1g,1mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌16h。将混合物冷却至室温。将所得混合物过滤，并且将滤饼用EA(3×250mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(用PE/EA(1/1)洗脱)纯化，得到呈灰白色固体的(3-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-5-基)硼酸和2-(1-(4-甲氧基苄基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮的混合物(2.6g，4.5mmol，40％，80％纯度)。

m/z(ES+)[M+H]⁺＝378.25；HPLC tR＝0.951min(硼酸)

(1S,5S,6R)-3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯

步骤4：在0℃下向(1R,5S,6r)-3-氧代二环[3.1.0]己烷-6-甲酸乙酯(2.5g,15mmol)和2,6-二-叔丁基-4-甲基吡啶(5.5g,27mmol)于DCE(30mL)中的溶液中滴加三氟甲磺酸酐(6.3g,22mmol)。将反应物在70℃下搅拌过夜。将所得混合物冷却至室温并用DCM稀释，用10％柠檬酸、水和盐水洗涤。将有机相在减压下浓缩。将粗制物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的ACN，10min内40％至90％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈褐色油状物的(1S,5S,6R)-3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯(840mg,2.80mmol,19％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝301.10；HPLC tR＝0.954min。

(1S,5S,6R)-3-(5-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯

步骤5：向小瓶中装入于1,4-二噁烷(10mL)中的(1S,5S,6R)-3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯(500mg,1.67mmol)、(3-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-5-基)硼酸(816mg,2.16mmol)、K₃PO₄(1.06g,5.00mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的络合物(136mg,167μmol)。将反应物用N₂吹扫三次，接着在50℃下加热16小时。将粗制物用EtOAc稀释，用10％柠檬酸、水和盐水洗涤。将所得混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(用PE/EA(1:3)洗脱)纯化，得到呈白色固体的(1S,5S,6R)-3-(5-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯(900m g，1.5mmol，89％，80％纯度)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝484.30；HPLC tR＝1.253min。

(1S,5S,6R)-3-(5-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯

步骤6：向圆底烧瓶中装入EtOAc(8mL)和水合肼(1mL)以及搅拌棒。接着在0℃下添加(1S,5S,6R)-3-(5-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯(850mg,1.76mmol)，并且将所得溶液在0-25℃下搅拌1h。将反应混合物用水(20mL)稀释，并且将水相用EA(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将所得反应混合物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内10％至50％梯度；检测器，UV254nm，得到呈白色固体的(1S,5S,6R)-3-(5-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯(530mg,1.50mmol,85.3％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝354.20；HPLC tR＝0.939min。

(1R,3r,5S,6r)-3-(5-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)二环[3.1.0]己烷-6-甲酸乙酯

步骤7：在圆底烧瓶中在氮气气氛下向(1S,5S,6R)-3-(5-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯(450mg,1.27mmol)于EtOAc(10mL)中的溶液中添加Pd(OH)₂/C(89.4mg)。将混合物在室温下在使用氢气球的氢气氛下氢化1小时，通过硅藻土垫过滤，并减压浓缩，得到呈黄色油状物的(1R,3r,5S,6r)-3-(5-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)二环[3.1.0]己烷-6-甲酸乙酯(430mg,1.21mmol,95.1％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝356.25；HPLC tR＝0.882min。

(1R,3r,5S,6r)-3-(1-(4-甲氧基苄基)-5-(3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)二环[3.1.0]己烷-6-甲酸乙酯

步骤8：在0℃下在氮气气氛下向(1R,3r,5S,6r)-3-(5-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-3-基)二环[3.1.0]己烷-6-甲酸乙酯(450mg,1.27mmol)、3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸锂(268mg,1.52mmol)和DIEA(2.45g,19.0mmol)于EtOAc(10mL)中的混合物中滴加T3P(9.67g,50％Wt,15.2mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时并减压浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的ACN，15min内10％至80％梯度；检测器，UV 254nm.，得到呈浅黄色油状物的(1R,3r,5S,6r)-3-(1-(4-甲氧基苄基)-5-(3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)二环[3.1.0]己烷-6-甲酸乙酯(430mg,847μmol,66.9％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝508.35；HPLC tR＝1.129min。

(1R,3r,5S,6r)-3-(1-(4-甲氧基苄基)-5-(3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)二环[3.1.0]己烷-6-甲酸

步骤9：向圆底烧瓶中装入于MeOH(2mL)中的(1R,3r,5S,6r)-3-(1-(4-甲氧基苄基)-5-(3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)二环[3.1.0]己烷-6-甲酸乙酯(275mg,542μmol)和搅拌棒。添加于MeOH:H₂O(8mL)中的LiOH(104mg,4.33mmol)，并且将溶液在25℃下搅拌16小时。将所得混合物在真空中浓缩。用H Cl(水溶液，3M)将残余物酸化至pH～6。将所得混合物通过反向快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的AC N，15min内0％至50％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈浅黄色固体的(1R,3r,5S,6r)-3-(1-(4-甲氧基苄基)-5-(3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)二环[3.1.0]己烷-6-甲酸(240mg,500μmol,92.4％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝480.35；HPLC tR＝0.972min。

N-(3-((1R,3r,5S,6r)-6-(二甲基氨基甲酰基)二环[3.1.0]己-3-基)-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-5-基)-3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺

步骤10：在0℃下在氮气气氛下向(1R,3r,5S,6r)-3-(1-(4-甲氧基苄基)-5-(3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)二环[3.1.0]己烷-6-甲酸(230mg,480μmol)、二甲基胺(1.20mL，2M于THF中，2.40mmol)和N-乙基-N异丙基丙-2-胺(496mg,3.84mmol)于EtOAc(10mL)中的混合物中滴加T3P(916mg,50％Wt,2.88mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时并减压浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的ACN，15min内10％至80％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈浅黄色油状物的N-(3-((1R,3r,5S,6r)-6-(二甲基氨基甲酰基)二环[3.1.0]己-3-基)-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-5-基)-3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(210mg,415μmol,86.4％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝507.40；HPLC tR＝1.002min。

N-(5-((1R,3r,5S,6r)-6-(二甲基氨基甲酰基)二环[3.1.0]己-3-基)-1H-吡唑-3-基)-3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺

步骤11：向圆底烧瓶中装入N-(3-((1R,3r,5S,6r)-6-(二甲基氨基甲酰基)二环[3.1.0]己-3-基)-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-5-基)-3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(200mg,395μmol)和搅拌棒。添加TFA(6mL)，并且将溶液在75℃下搅拌5小时。将混合物在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，18min内10％至100％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈白色非晶形固体的N-(5-((1R,3r,5S,6r)-6-(二甲基氨基甲酰基)二环[3.1.0]己-3-基)-1H-吡唑-3-基)-3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(135.1mg,349.6μmol,88.6％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝387.20；HPLC tR＝9.742min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.55(s,1H),6.91(s,1H),6.68(s,1H),4.53(s,2H),4.15(s,3H),3.52(s,3H),3.44(td,J＝9.5,4.7Hz,1H),3.02(s,3H),2.91(s,3H),2.46(td,J＝9.7,9.2,4.5Hz,2H),2.07(dd,J＝13.9,3.4Hz,2H),2.00-1.93(m,2H),1.65(t,J＝3.1Hz,1H)。

实施例23

N-(5-((1S,3R)-3-((4-异丙基哒嗪-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺和

N-(5-((1R,3S)-3-((4-异丙基哒嗪-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

4-(丙-1-烯-2-基)哒嗪-3-醇

步骤1：向圆底烧瓶中装入6-氯哒嗪-3(2H)-酮(10g,1Eq,77mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(丙-1-烯-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(23g,1.8Eq,0.14mol)、碳酸钾(32g,3Eq,0.23mol)、二噁烷/H2O(20mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次。添加Pd(dppf)Cl2(2.8g,0.05Eq,3.8mmol)。将混合物在100℃下搅拌2小时。将溶液浓缩。将所得粗制材料通过快速色谱法(乙腈/水)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的4-(丙-1-烯-2-基)哒嗪-3-醇(4.0g,31％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝171.05HPLC tR＝0.725min。

4-异丙基哒嗪-3(2H)-酮

步骤2：向圆底烧瓶中装入4-(丙-1-烯-2-基)哒嗪-3-醇(4g,1Eq,0.03mol)、Pd/C(0.5g)、MeOH(20mL)和搅拌棒，接着抽空并用氢气吹扫三次。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物过滤，并且将滤液浓缩，得到呈黄色油状物的4-异丙基哒嗪-3(2H)-酮(3.7g,91％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝139.10；HPLC tR＝0.675min。

3-氯-4-异丙基哒嗪

步骤3：向圆底烧瓶中装入4-异丙基哒嗪-3-醇(3.7g,1Eq,27mmol)、POCl3(15mL)和搅拌棒，并且将溶液在85℃下搅拌4小时。将反应混合物倒入冰水中。将溶液用EA萃取三次。将有机相合并且浓缩。将所得粗制材料通过快速色谱法(乙腈/水)纯化。冻干得到呈黑色油状物的3-氯-4-异丙基哒嗪(3.8g,24mmol,91％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝157.05；HPLC tR＝0.692min。

N-(1-(叔丁基)-5-(顺式-3-((4-异丙基哒嗪-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤5：向可再密封反应小瓶中装入3-氯-4-异丙基哒嗪(205mg,1.5Eq,1.31mmol)、N-(1-(叔丁基)-5-(顺式-3-羟基环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(302mg,1Eq,873μmol)、甲苯(5mL)、t-BuONa(0.25g,3Eq,2.62mmol)、BINAP(163mg,0.3Eq,262μmol)、Pd2(dba)3(79.9mg,0.1Eq,87.3μmol)和搅拌棒，接着将其抽空并用氮气吹扫三次。将混合物在100℃下搅拌1小时。将溶液浓缩。将所得粗制材料通过快速色谱法(乙腈/水)纯化。冻干得到呈黄色非晶形油状物的N-(1-(叔丁基)-5-(顺式-3-((4-异丙基哒嗪-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(183mg,392μmol,44.9％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝467.30；HPLC tR＝1.133min。

N-(5-(顺式-3-((4-异丙基哒嗪-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤6：向圆底烧瓶中装入N-(1-(叔丁基)-5-(顺式-3-((4-异丙基哒嗪-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(183mg,1Eq,392μmol)、FA(5mL)和搅拌棒，并且将溶液在75℃下搅拌3小时。将溶液浓缩。将所得粗制材料通过制备型HPLC(柱：CHIRALPAK IE，2×25cm，5μm；流动相A：Hex(0.5％2M NH₃-MeOH)--HPLC，流动相B：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：11min内60％ B至60％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：7.46；RT2(min)：9.00；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；注入体积：0.55mL；运行次数：4)纯化。在真空中浓缩得到呈黄色非晶形油状物的N-(5-(顺式-3-((4-异丙基哒嗪-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(80mg,0.19mmol,50％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝411.25；HPLC tR＝1.195min。

N-(5-((1S,3R)-3-((4-异丙基哒嗪-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺和N-(5-((1R,3S)-3-((4-异丙基哒嗪-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤7：将N-(5-(顺式-3-((4-异丙基哒嗪-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(80mg,1Eq,0.19mmol)通过手性-HPLC(柱：CHIRALPAK IE，2*25cm,5μm；流动相A：Hex(0.5％2M NH3-MeOH)--HPLC，流动相B：EtOH：DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：11min内60％ B至60％B；波长：220/254nm；RT1(min)：7.46；RT2(min)：9.00；样品溶剂：EtOH：DCM＝1:1--HPLC；注入体积：0.55mL；运行次数：4)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的N-(5-((1S,3R)-3-((4-异丙基哒嗪-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(31.2mg,76.0μmol,39％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝411.15；HPLC tR＝0.655min。

呈白色非晶形固体的N-(5-((1R,3S)-3-((4-异丙基哒嗪-3-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(30.1mg,73.3μmol,38％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝411.15；HPLC tR＝0.663min。

根据实施例22和23的方法制备的额外化合物绘示于下表11中。

实施例24

rel-N-(5-((1R,3S)-3-((5-异丙基-1H-吡唑-4-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

rel-N-(5-((1R,3S)-3-((5-异丙基-1H-吡唑-4-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

4-溴-5-异丙基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑

步骤1：向圆底烧瓶中装入4-溴-5-异丙基-1H-吡唑(3g,1Eq,0.02mol)、4-甲苯磺酸(0.5g,0.2Eq,3mmol)、3,4-二氢-2H-吡喃(2g,1.5Eq,0.02mol)、THF(30mL)和搅拌棒。将溶液在50℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩，并且将所得粗制材料通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，25min内0％至100％梯度；检测器，UV 220nm。在真空中浓缩得到呈白色非晶形固体的4-溴-5-异丙基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑(2.9g,11mmol,70％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝272.95；HPLC tR＝0.722min。

(5-异丙基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)硼酸

步骤2：在-78℃下在氮气气氛下向4-溴-5-异丙基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑(2.1g,7.7mmol)于THF(20mL)中的混合物中滴加n-BuLi(3mL于THF中的2.5M溶液，8mmol)。将混合物在-78℃下搅拌0.5小时。在-78℃下向以上混合物中滴加硼酸三甲酯(1.0g,9.6mmol)。将所得混合物在-78℃下再搅拌2小时。将反应物用NH₄Cl(饱和水溶液，100mL)淬灭，并用EA(3*100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2*100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，25min内0％至100％梯度；检测器，UV 220nm。冻干三天得到呈白色固体的(5-异丙基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)硼酸(620mg,2.60mmol,34％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝239.10；HPLC tR＝0.649min。

5-异丙基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-醇

步骤3：在0℃下向(5-异丙基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)硼酸(620mg,2.60mmol)于THF(8mL)中的搅拌溶液中滴加H₂O₂(4mL，30％，于H₂O中)。使反应物升温至室温并搅拌1小时。将反应物用H₂O(20mL)稀释，并用HCl(2N)酸化，并用DCM(50mL)萃取四次。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的ACN，10min内10％至50％梯度；检测器，UV 254nm.，得到5-异丙基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-醇(500mg,2.38mmol,91.3％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝211.00；HPLC tR＝0.637min。

N-(1-(叔丁基)-3-(顺式-3-((5-异丙基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤4：在0℃下在N₂气氛下向N-(1-(叔丁基)-3-(反式-3-羟基环戊基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(200mg,1Eq,577μmol)、5-异丙基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-醇(121mg,1Eq,577μmol)和三苯基膦(227mg,1.5Eq,866μmol)于具有4A MS的甲苯(4mL)中的搅拌溶液中滴加DTBAD(199mg,1.5Eq,866μmol)。将所得混合物在40℃下在N₂气氛下搅拌4小时。将所得混合物过滤，并且将滤饼用MeCN(5×3mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的ACN，10min内10％至50％梯度；检测器，UV 254nm.，得到呈白色固体的N-(1-(叔丁基)-3-(顺式-3-((5-异丙基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(102mg,189μmol,32.8％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝539.50；HPLC tR＝1.096min。

N-(5-((1S,3R)-3-((5-异丙基-1H-吡唑-4-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤5：将N-(1-(叔丁基)-3-(顺式-3-((5-异丙基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-5-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(165mg,306μmol)于FA(5mL)中的溶液在90℃下搅拌3小时。将所得混合物浓缩至干燥并通过反相快速色谱法纯化，得到呈白色固体的N-(5-((1S,3R)-3-((5-异丙基-1H-吡唑-4-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(55mg,0.14mmol,45％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝399.25；HPLC tR＝0.905min。

rel-N-(5-((1R,3S)-3-((5-异丙基-1H-吡唑-4-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

将N-(5-(顺式-3-((5-异丙基-1H-吡唑-4-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(55mg,0.14mmol)通过制备型手性-HPLC依照以下条件纯化：柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％ DEA)--HPLC，流动相B：MeOH：DCM＝1:1；流量：20mL/min；梯度：12min内70％ B至70％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：6.23；样品溶剂：MeOH：DCM＝1:1；注入体积：0.65mL；运行次数：3。这产生呈白色非晶形固体的rel-N-(5-((1R,3S)-3-((5-异丙基-1H-吡唑-4-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(20mg,50μmol,73％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝399.25；HPLC tR＝1.117min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.25-11.74(m,2H),10.61(s,1H),7.27(s,1H),6.42-6.28(m,1H),6.22(s,1H),4.50(s,1H),3.82(s,2H),3.07(p,J＝8.7Hz,1H),2.91(d,J＝31.8Hz,1H),2.53(s,1H),2.20(s,3H),2.02(d,J＝7.6Hz,1H),1.87(d,J＝8.8Hz,2H),1.82-1.68(m,2H),1.15(dd,J＝7.0,2.7Hz,6H)。

rel-N-(5-((1R,3S)-3-((5-异丙基-1H-吡唑-4-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

将N-(5-(顺式-3-((5-异丙基-1H-吡唑-4-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(55mg,0.14mmol)通过制备型手性-HPLC依照以下条件纯化：柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％ DEA)--HPLC，流动相B：MeOH：DCM＝1:1；流量：20mL/min；梯度：12min内70％ B至70％ B；波长：220/254nm；RT2(min)：9.18；样品溶剂：MeOH：DCM＝1:1；注入体积：0.65mL；运行次数：3。这得到呈白色非晶形固体的rel-N-(5-((1R,3S)-3-((5-异丙基-1H-吡唑-4-基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(20mg,50μmol,73％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝399.25；HPLC tR＝1.121min。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.24-11.78(m,2H),10.61(s,1H),7.24(d,J＝39.1Hz,1H),6.37-6.13(m,2H),4.50(s,1H),3.82(s,2H),3.07(p,J＝8.8Hz,1H),2.87(s,1H),2.53(d,J＝2.0Hz,1H),2.20(s,3H),2.02(d,J＝7.3Hz,1H),1.87(d,J＝9.4Hz,2H),1.81-1.66(m,2H),1.15(dd,J＝7.0,2.7Hz,6H)。

实施例25

异丙基氨基甲酸rel-(1R,3S)-3-(3-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯；和

异丙基氨基甲酸rel-(1R,3S)-3-(3-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

3-(氯甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯

向可再密封反应小瓶中装入3-(羟基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(20g,1Eq,0.12mol)、SOCl₂(150mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次。将混合物在80℃下搅拌1h。将反应混合物倒入碎冰中，并且将水相用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗制产物通过硅胶色谱法(10g柱；用PE/EA(比率：8/1)洗脱)纯化。在真空中浓缩产生呈无色油状物的3-(氯甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(20g,0.11mol,90％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝189.10；HPLC tR＝0.869min。

3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯

向可再密封反应小瓶中装入3-(羟基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(20g,1Eq,0.12mol)、SOCl₂(150mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次。将混合物在80℃下搅拌1h。将反应混合物倒入碎冰中，并且将水相用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将粗制产物通过硅胶色谱法(10g柱；用PE/EA(比率：8/1)洗脱)纯化。在真空中浓缩产生呈无色油状物的3-(氯甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(20g,0.11mol,90％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝189.10；HPLC tR＝0.869min。

3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸

向可再密封反应小瓶中装入于MeOH(30mL)中的3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(12.8g,1Eq,69.5mmol)，向以上溶液中添加于MeOH/H2O(2:1,30mL)中的NaOH(4.17g，52.1L，0.002摩尔浓度，1.5Eq，104mmol)，并且将混合物在50℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩并用EA(20ml)萃取。用HCl(1M)将水相酸化至pH 5。将所得混合物用EA(3×50ml)萃取，经无水Na₂SO₄干燥。在过滤后，将滤液在减压下浓缩。将所得混合物在减压下浓缩，得到呈白色固体的3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸(4.3g,28mmol,40％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝157.10；HPLC tR＝0.140min。

N-(2,2-二甲氧基乙基)-3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺

在25℃下在氮气气氛下向3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸(1.25g,1Eq,8.01mmol)于MeCN(10mL)中的混合物中逐份添加CDI(1.56g,1.2Eq,9.61mmol)。将混合物在60℃下搅拌1-2h并且添加2,2-二甲氧基乙-1-胺(842mg,1Eq,8.01mmol)。将混合物在60℃下搅拌2h。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释，并且将水相用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN。在真空中浓缩产生呈白色固体的N-(2,2-二甲氧基乙基)-3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(1.4g,5.8mmol,72％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝244.20；HPLC tR＝0.644min。

7-羟基-2-(甲氧基甲基)-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮

向可再密封反应小瓶中装入N-(2,2-二甲氧基乙基)-3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(1.4g,1Eq,5.8mmol)，添加HCl(5M)(25mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在25℃下搅拌3h。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10％，在真空中浓缩产生呈白色固体的7-羟基-2-(甲氧基甲基)-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(1g,5mmol,90％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝198.15；HPLC tR＝0.259min。

2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮

向圆底烧瓶中装入7-羟基-2-(甲氧基甲基)-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(1g,1Eq,5mmol)、甲苯(20mL)和搅拌棒，并且在0℃下添加4A-Ms(0.2g,1Eq,5mmol)、DMF(0.04g,0.04mL,0.1Eq,0.5mmol)、SOCl₂(1g,0.7mL,2Eq,0.01mol)。将溶液在80℃下搅拌2小时。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，将所述垫用ACN洗涤，并且将滤液在真空中浓缩。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并浓缩，得到呈黄色非晶形固体的2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(840mg,4.69mmol,90％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝180.05；HPLC tR＝0.399min。

4-氯-2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪

向圆底烧瓶中装入2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(840mg,1Eq,4.69mmol)、POCl₃(15mL)和搅拌棒，并且添加DMF(34.3mg,36.3μL,0.1Eq,469μmol)，并且将溶液在50℃下搅拌16小时。将反应混合物用水淬灭。将所得粗制材料通过快速色谱法(乙腈/水)纯化。在真空中浓缩得到呈褐色非晶形固体的4-氯-2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(600mg,3.04mmol,64.8％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝198.00；HPLC tR＝0.696min。

异丙基氨基甲酸(1S,3R)-3-(1-(叔丁基)-5-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯

将4-氯-2-乙氧基吡唑并[1,5-a]吡嗪(192mg,1Eq,973μmol)和K₂CO₃(403mg,3Eq,2.92mmol)添加至异丙基氨基甲酸(1S,3R)-3-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯(300mg,1Eq,973μmol)于1,4-二噁烷(10mL)中的溶液中。在使氮气鼓泡通过反应混合物2分钟后，添加Pd-PEPPSI-IPentCl 2-甲基吡啶(CAS编号1612891-29-8，81.4mg，0.1Eq，97.3μmol)。将反应混合物在80℃下在剧烈搅拌下加热16小时。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，20min内10％至100％梯度；检测器，UV 220nm，得到呈无色油状物的异丙基氨基甲酸(1S,3R)-3-(1-(叔丁基)-5-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯(60mg,0.13mmol,13％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝470.40；HPLC tR＝0.628min。

异丙基氨基甲酸(1R,3S)-3-(3-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

向异丙基氨基甲酸(1S,3R)-3-(1-(叔丁基)-5-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯(55mg,1Eq,0.12mmol)的溶液中添加FA(5mL)。将所得溶液在80℃下搅拌2h。LC/MS显示反应混合物完成。使混合物冷却至室温。将所得混合物在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内10％至50％梯度；检测器，UV 254nm，获得呈灰白色固体的异丙基氨基甲酸(1R,3S)-3-(3-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(30mg，72μmol，61％，99％纯度)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝414.35；HPLC tR＝0.848min。

异丙基氨基甲酸rel-(1R,3S)-3-(3-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

将顺式-异丙基氨基甲酸3-(3-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(30mg)通过手性分离(HPLC)利用以下条件(柱：CHIRALPAKIG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％DEA)--HPLC，流动相B：MeOH:DCM＝1:1；流量：20mL/min；梯度：20min内30％ B至30％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：10.43；样品溶剂：MeOH:DCM＝1:1；注入体积：2.4mL；运行次数：1)分离，得到呈白色固体的异丙基氨基甲酸rel-(1R,3S)-3-(3-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(8.2mg，20μmol，63％，99.4％纯度)和呈白色固体的异丙基氨基甲酸rel-(1R,3S)-3-(3-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(7.2mg，17μmol，42％，99.4％纯度)。

第一洗脱异构体：

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝414.35；HPLC tR＝0.893min。

¹H NMR(400MHz)12.10(s,1H),9.97(s,1H),8.02(d,J＝4.7Hz,1H),7.38(d,J＝4.8Hz,1H),7.28(s,1H),6.97(d,J＝7.7Hz,1H),6.62(s,1H),5.02(s,1H),4.56(s,2H),3.58(h,J＝6.6Hz,1H),3.33(s,4H),3.09(t,J＝8.9Hz,1H),2.10(m,1H),1.91(tt,J＝9.0,4.7Hz,1H),1.75(d,J＝9.4Hz,2H),1.04(dd,J＝6.7,2.6Hz,6H)。

第二洗脱异构体：

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝414.35；HPLC tR＝0.899min。

¹H NMR(400MHz)12.11(s,1H),9.97(s,1H),8.02(d,J＝4.7Hz,1H),7.38(d,J＝4.8Hz,1H),7.28(s,1H),6.97(d,J＝7.8Hz,1H),6.62(s,1H),5.02(s,1H),4.56(s,2H),3.58(h,J＝6.7Hz,1H),3.33(s,4H),3.13(m,1H),2.10(m,2H),1.91(tt,J＝8.9,4.7Hz,3H),1.04(dd,J＝6.6,2.7Hz,6H)。

实施例26

4-氯-2-(甲氧基甲基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪

3-(氯甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯

步骤1：向可再密封反应小瓶中装入3-(羟基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(20g,1Eq,0.12mol)、SOCl2(150mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次。将混合物在80℃下搅拌1h。将反应混合物倒入碎冰中，并且将水相用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物/粗制产物通过硅胶色谱法(10g柱；用PE/EA(比率：8/1)洗脱)纯化。在真空中浓缩产生呈无色油状物的3-(氯甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(20g,0.11mol,90％)。

3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯

步骤2：在0℃下在氮气气氛下向3-(氯甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(20g,1Eq,0.11mol)于MeOH(200mL)中的混合物中逐份添加于MeOH(15mL)中的NaOMe(6.3g,1.1Eq,0.12mol)。将混合物在0℃下搅拌10min。接着将混合物在50℃下搅拌1h。将反应混合物在真空中浓缩并用H₂O(50mL)稀释，并且将水相用EA(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，20min内10％至50％梯度；检测器，UV 250nm。在真空中浓缩产生呈无色油状物的3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(12.8g，41mmol，39％，59％纯度)。

3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸

步骤3：向可再密封反应小瓶中装入于MeOH(30mL)中的3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(12.8g,1Eq,69.5mmol)。向以上溶液中添加于MeOH/H₂O(2:1,30mL)中的NaOH(4.17g，52.1mL，0.002摩尔浓度，1.5Eq，104mmol)，并且将混合物在50℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空中浓缩并用EA(20ml)萃取。用HCl(1M)将水相酸化至pH 5。将所得混合物用EA(3×50ml])萃取，并且经无水Na₂SO₄干燥。在过滤后，将滤液在减压下浓缩。将所得混合物在减压下浓缩，得到呈白色固体的3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸(4.3g,28mmol,40％)。

N-(2,2-二甲氧基乙基)-3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺

步骤4：在25℃下在氮气气氛下向3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸(1.25g,1Eq,8.01mmol)于MeCN(10mL)中的混合物中逐份添加CDI(1.56g,1.2Eq,9.61mmol)。将混合物在60℃下搅拌1-2h，之后添加2,2-二甲氧基乙-1-胺(842mg,1Eq,8.01mmol)。将混合物在60℃下搅拌2h。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释，并且将水相用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10％。在真空中浓缩产生呈白色固体的N-(2,2-二甲氧基乙基)-3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(1.4g,5.8mmol,72％)。

7-羟基-2-(甲氧基甲基)-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮

步骤5：向可再密封反应小瓶中装入N-(2,2-二甲氧基乙基)-3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(1.4g,1Eq,5.8mmol)，并且添加HCl(5M)(25mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次。将混合物在25℃下搅拌3h。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10％。在真空中浓缩产生呈白色固体的7-羟基-2-(甲氧基甲基)-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(1g,5mmol,90％)。

2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮

步骤6：向圆底烧瓶中装入7-羟基-2-(甲氧基甲基)-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(1g,1Eq,5mmol)、甲苯(20mL)和搅拌棒，并且在0℃下添加4A-Ms(0.2g,1Eq,5mmol)、DMF(0.04g,0.04mL,0.1Eq,0.5mmol)和SOCl₂(1g,0.7mL,2Eq,0.01mol)，并且将溶液在80℃下搅拌2小时。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，将所述垫用ACN洗涤，并且将滤液在真空中浓缩。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并浓缩，得到呈黄色非晶形固体的2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(840mg,4.69mmol,90％)。

4-氯-2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪

步骤7：向圆底烧瓶中装入2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(840mg,1Eq,4.69mmol)、POCl₃(15mL)和搅拌棒，并且添加DMF(34.3mg,36.3μL,0.1Eq,469μmol)。将溶液在50℃下搅拌16小时。将反应混合物用水淬灭。将所得粗制材料通过快速色谱法(乙腈/水)纯化。在真空中浓缩得到呈褐色非晶形固体的4-氯-2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(600mg,3.04mmol,64.8％)。

实施例27

异丙基氨基甲酸rel-(3R,5R)-5-(3-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯和

异丙基氨基甲酸rel-(3R,5R)-5-(3-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

(1-(叔丁基)-3-((2S,4S)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苄酯

步骤1：向圆底烧瓶中装入(1-(叔丁基)-3-((2S,4S)-4-羟基四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苄酯(1000mg,1Eq,2.782mmol)、咪唑(568.2mg,3Eq,8.347mmol)、TBS-Cl(1.048g,2.5Eq,6.955mmol)和搅拌棒。添加DMF(10mL)，并且将溶液在25℃下搅拌5小时。LC/MS显示反应完成。将混合物用水淬灭。将反应混合物用水(30mL)稀释，并且将水相用EA(80mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩，产生呈浅黄色油状物的(1-(叔丁基)-3-((2S,4S)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苄酯(1.2g，2.0mmol，71％，78％纯度)。

1-(叔丁基)-3-((2S,4S)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-胺

步骤2：在25℃下将(1-(叔丁基)-3-((2S,4S)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苄酯(1.2g,1Eq,2.5mmol)和Pd/C(0.11g,0.4Eq,1.0mmol)于THF(10mL)和EA(10mL)中的搅拌混合物用H₂处理2h。LC/MS显示反应完成。将反应混合物过滤，将固体用ACN洗涤，并且将滤液在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内30％至70％梯度；检测器，UV 254nm。在真空中浓缩产生呈黄色油状物的1-(叔丁基)-3-((2S,4S)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-胺(850mg，2.4mmol，96％，97％纯度)。

N-(1-(叔丁基)-3-((2S,4S)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-胺

步骤3：在0℃下向1-(叔丁基)-3-((2S,4S)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-胺(200mg,1Eq,589μmol)于DMF(5mL)中的搅拌溶液中添加4A-Ms和NaH(141mg,60％Wt,6Eq,3.53mmol)。将反应物在0℃下搅拌0.5h。在N₂下向以上反应物中添加于DMF中的4-氯-2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(140mg,1.2Eq,707μmol)。将反应物在室温下搅拌3h。LC/MS确认反应完成。将混合物用NH₄Cl(水溶液)淬灭并用EA(15mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的ACN，15min内60％梯度；检测器，UV 254nm，获得呈浅黄色油状物的N-(1-(叔丁基)-3-((2S,4S)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-胺(210mg，0.39mmol，67％，94％纯度)。

(3S,5S)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-醇

步骤4：向圆底烧瓶中装入N-(1-(叔丁基)-3-((2S,4S)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-胺(210mg,1Eq,419μmol)和搅拌棒。添加FA(4mL)，并且将溶液在25℃下搅拌2h。LC/MS显示反应完成。将所得混合物在真空中浓缩并直接用于下一步骤中。向残余物于MeOH(4mL)和水(1mL)中的搅拌溶液中添加LiOH(100mg,10Eq,4.19mmol)。将反应物在室温下搅拌1h。LC/MS显示反应完成。将所得混合物在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内10％至40％梯度；检测器，UV 254nm。在真空中浓缩，产生呈浅黄色固体的(3S,5S)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-醇(130mg，0.33mmol，79％，98％纯度)。

碳酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(4-硝基苯基)酯

步骤5：在0℃下向(3S,5S)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-醇(125mg,1Eq,323μmol)于DCM(4mL)中的搅拌溶液中添加吡啶(76.8mg,78.5μL,3Eq,970μmol)和DMAP(3.95mg,0.1Eq,32.3μmol)。在N₂下向以上反应物中添加于DCM中的氯甲酸4-硝基苯基酯(97.8mg,1.5Eq,485μmol)。将反应物在室温下搅拌16h。LC/MS显示反应完成。将所得混合物在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的ACN，10min内10％至50％梯度；检测器，UV 254nm，在真空中浓缩，得到呈浅黄色固体的碳酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(4-硝基苯基)酯(64mg，0.11mmol，33％，93％纯度)。

异丙基氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤6：向圆底烧瓶中装入碳酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(4-硝基苯基)酯(60mg,1Eq,0.11mmol)、DIEA(42mg,57μL,3Eq,0.33mmol)、丙-2-胺(9.6mg,1.5Eq,0.16mmol)和搅拌棒。添加2Me-THF(3mL)，并且将溶液在25℃下在氮气气氛下搅拌16h。LC/MS显示反应完成。将所得混合物在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内20％至60％梯度；检测器，UV 254nm，在真空中浓缩，得到呈白色油状物的异丙基氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(42mg，85μmol，78％，95％纯度)。

异丙基氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤7：向圆底烧瓶中装入异丙基氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(40mg,1Eq,85μmol)和搅拌棒。添加FA(2mL)，并且将溶液在80℃下搅拌1h。LC/MS显示反应完成。将混合物冷却至25℃。将所得混合物在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内10％至50％梯度；检测器，UV 254nm，在真空中浓缩产生呈白色固体的异丙基氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(30mg，69μmol，81％，95％纯度)。

异丙基氨基甲酸rel-(3R,5R)-5-(3-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤8：将异丙基氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(30mg,1Eq,72μmol)通过手性分离(HPLC)利用以下条件分离：(柱：DZ-CHIRALPAK IG-3，4.6*50mm，3.0μm；流动相A：Hex(0.2％DEA)：(MeOH：DCM＝1：1)＝60：40；流量：1mL/min；梯度：0％ B至0％ B；注入体积：5μl mL)，得到呈灰白色固体的异丙基氨基甲酸rel-(3R,5R)-5-(3-((2-(甲氧基甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(8.2mg,20μmol,54％,99.2％纯度)。

实施例28

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

(1-(叔丁基)-3-((2R,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苄酯

步骤1：向圆底烧瓶中装入1-(叔丁基)-3-((2R,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-胺(9.56g,28.2mmol)、NaHCO₃(11.8g,141mmol)、MeCN(100mL)和搅拌棒。接着在0℃下添加氯甲酸苄酯(14.4g,84.5mmol)。将溶液在25℃下搅拌16小时。在真空中浓缩。将混合物用水(150mL)稀释，并且将水相用EA(3*150mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤。在真空中浓缩产生呈黄色油状物的(1-(叔丁基)-3-((2R,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苄酯(22g,23mmol,82％,50％纯度)(粗品)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝474.40；HPLC tR＝1.237min。

(1-(叔丁基)-3-((2R,4R)-4-羟基四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苄酯

步骤2：向圆底烧瓶中装入(1-(叔丁基)-3-((2R,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苄酯(22g，50％纯度，28mmol)、于ACN(200mL)中的4-甲苯磺酸(14g,84mmol)和搅拌棒。将溶液在25℃下搅拌2小时。LCMS正常。将所得混合物在真空下浓缩。将混合物中和至约pH 7。将反应混合物用水(100mL)稀释，并且将水相用EA(200mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。使粗制产物从EA(100ml)中重结晶，得到呈白色固体的(1-(叔丁基)-3-((2R,4R)-4-羟基四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苄酯(8.51g,23.7mmol,85％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝360.35；HPLC tR＝0.760min。

(1-(叔丁基)-3-((2R,4R)-4-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苄酯

步骤3：在0℃下向(1-(叔丁基)-3-((2R,4R)-4-羟基四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苄酯(4.45g,12.4mmol)于DCM(40mL)中的搅拌溶液中添加吡啶(2.94g,37.1mmol)和N,N-二甲基吡啶-4-胺(303mg,2.48mmol)。在N₂下向以上反应物中添加氯甲酸4-硝基苯基酯(3.74g,18.6mmol)。将反应物在25℃下搅拌4小时。将所得混合物在真空下浓缩，得到呈浅黄色油状物的粗制(1-(叔丁基)-3-((2R,4R)-4-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苄酯(6.2g，5.9mmol，48％，50％纯度)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝525.30；HPLC tR＝1.020min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤4：向圆底烧瓶中装入(1-(叔丁基)-3-((2R,4R)-4-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苄酯(6.2g,12mmol)、1-甲基环丙-1-胺盐酸盐(2.5g,24mmol)、THF(60mL)、DIEA(6.1g,8.2mL,47mmol)和搅拌棒。将溶液在25℃下在氮气气氛下搅拌3小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内10％至50％梯度；检测器，UV254nm。在真空中浓缩产生呈白色油状物的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(4.6g,10mmol,85％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝457.35；HPLC tR＝0.694min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤5：(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(9.2g,20mmol)于EA/THF＝2:1(90mL)中的溶液使氮气鼓泡通过反应混合物3次。接着添加Pd/C(920mg)。此后使H₂鼓泡通过反应混合物3次。将混合物在室温下用H₂搅拌3小时。将混合物蒸发并且获得呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(6.4g，19mmol，94％，95％纯度)，其未经纯化即直接用于下一步骤。m/z(ES+)[M+H]⁺＝323.35；HPLC tR＝0.528min。

实施例29

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(3-((二氟甲氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

3-((二氟甲氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯

步骤1.在室温下在氮气气氛下向3-(羟基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(1g,5mmol)于MeCN(10mL)中的搅拌溶液中添加CuI(0.2g,1mmol)。将混合物加热至50℃并在50℃下历经8小时时段滴加于MeCN中的2,2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸(1g,8mmol)。将混合物在减压下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内10％至90％梯度；检测器，UV 254nm。在真空中浓缩产生呈白色固体的3-((二氟甲氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(700mg,2.99mmol,60％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝235.00；HPLC tR＝0.836min。

3-((二氟甲氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸

步骤2.在室温下向3-((二氟甲氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(700mg,2.99mmol)于MeOH(10mL)中的搅拌溶液中添加于水(2mL)中的LiOH(107mg,4.48mmol)。将所得混合物在室温下搅拌30min。将反应物用1N HCl调整至pH＝6。将所得混合物用EtOAc(3×10mL)萃取。将有机相在减压下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内10％至90％梯度；检测器，UV 254nm。在真空中浓缩产生呈白色固体的3-((二氟甲氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸(610mg,2.96mmol,99.0％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝207.10；HPLC tR＝0.792min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(3-((二氟甲氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤3.在室温下在氮气气氛下向[2170-88]3-((二氟甲氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸(120mg,582μmol)于EA(3mL)中的搅拌溶液中添加(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(188mg,582μmol)、DIEA(752mg,5.82mmol)、T3P(2.96g，50％ Wt，于EA中，4.66mmol)。将所得混合物在75℃下搅拌16小时。将混合物在减压下浓缩并通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内10％至90％梯度；检测器，UV 254nm，在真空中浓缩产生呈黄色油状物的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(3-((二氟甲氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(130mg,255μmol,43.7％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝511.45；HPLC tR＝0.838min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(3-((二氟甲氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤4.将(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(3-((二氟甲氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(120mg,235μmol)于FA(2mL)中的搅拌溶液在75℃下搅拌40min。将混合物在减压下浓缩。将混合物通过制备型HPLC(依照以下条件：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内20％ B至43％ B，43％ B；波长：220nm；RT1(min)：7.38)纯化，得到呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(3-((二氟甲氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(24.9mg，54.6μmol，23.2％，99.6％纯度)。m/z(ES+)[M+H]⁺＝455.20；HPLC tR＝0.893min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)12.51(s,1H),10.86(s,1H),7.51(s,1H),7.21(s,1H),6.99-6.49(m,2H),5.16(s,1H),4.86(s,3H),4.08(s,3H),3.85(s,2H),2.71(dd,J＝14.0,7.3Hz,1H),1.93(s,1H),1.25(s,3H),0.76-0.37(m,4H)。

实施例30

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-((三氟甲氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

1-甲基-3-((三氟甲氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯

步骤1.在室温下在氮气气氛下向3-(羟基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(5g,0.03mol)于EtOAc(50mL)中的搅拌溶液中添加氟化钾(5g,0.08mol)、三氟甲磺酸银(I)(0.01kg,0.05mol)、Selectfluor(0.01kg,0.04mol)、2-氟吡啶(5g,0.05mol)和三氟甲基三甲基硅烷(8g,0.05mol)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。将所得混合物过滤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内0％至100％梯度；检测器，UV 254nm，在真空中浓缩产生呈白色固体的1-甲基-3-((三氟甲氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(3g,6mmol,20％,50％纯度)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝253.15；HPLC tR＝1.279min。

1-甲基-3-((三氟甲氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酸锂

步骤2.在室温下在氮气气氛下向1-甲基-3-((三氟甲氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(3g,0.01mol)于MeOH(30mL)中的搅拌溶液中添加于水(12mL)中的LiOH(0.4g,0.02mol)。将所得混合物在室温下搅拌0.5小时。将混合物在减压下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内0％至10％梯度；检测器，UV 254nm，在真空中浓缩产生呈白色固体的1-甲基-3-((三氟甲氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酸锂(1.5g,6.7mmol,60％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝225.10；HPLC tR＝1.589min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-((三氟甲氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤3.向1-甲基-3-((三氟甲氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酸锂(180mg,803μmol)和(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(285mg,883μmol)于乙酸乙酯(6mL)中的溶液中添加DIEA(1.04g,8.03mmol)。在0℃下向以上反应物中添加T₃P(4.09g，50％ Wt，于EA中，6.42mmol)。将反应物在75℃下搅拌过夜。将混合物用水淬灭，过滤并用EA(3*20ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，8min内60％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-((三氟甲氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(400mg,757μmol,94.2％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝529.40；HPLC tR＝1.161min

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-((三氟甲氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤4.向(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-((三氟甲氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(595mg,1.13mmol)中添加FA(10mL)。将反应物在75℃下搅拌3h。将混合物浓缩并通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，8min内50％至60％梯度；检测器，UV 254nm。冻干得到呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-((三氟甲氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(384.4mg，809μmol，71.8％，99.4％纯度)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝473.10；HPLC tR＝0.871min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)12.50(s,1H),10.90(s,1H),7.50(s,1H),7.29(s,1H),6.56(s,1H),5.12(s,3H),4.85(s,1H),4.10(s,3H),3.85(s,2H),2.77-2.69(m,1H),1.93(s,1H),1.25(s,3H),0.66 -0.39(m,4H)。

实施例31

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-((2,2,2-三氟乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯化合物771

1-甲基-3-((2,2,2-三氟乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯

步骤1.在0℃下在氮气气氛下向3-(羟基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(500mg,2.71mmol)于THF(20mL)中的搅拌溶液中添加三氟甲磺酸2,2,2-三氟乙酯(1.89g,8.14mmol)、NaH(0.16g,60％ Wt,4.07mmol)。将所得混合物在室温下搅拌3小时。将反应物用水淬灭。将所得混合物用EtOAc(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(1×10mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥。在过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内10％至90％梯度；检测器，UV254nm。在真空中浓缩产生呈黄色油状物的1-甲基-3-((2,2,2-三氟乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(310mg,1.16mmol,42.9％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝267.25；HPLC tR＝0.879min

1-甲基-3-((2,2,2-三氟乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酸酯

步骤2.在室温下在氮气气氛下向1-甲基-3-((2,2,2-三氟乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(300mg,1.13mmol)于MeOH(5mL)中的搅拌溶液中添加于水(2mL)中的LiOH(40.5mg,1.69mmol)。将所得混合物在室温下搅拌40min。将混合物在减压下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内10％至90％梯度；检测器，UV 254nm，在真空中浓缩产生呈白色固体的1-甲基-3-((2,2,2-三氟乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酸锂(200mg,840μmol,74.5％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝239.20；HPLC tR＝0.653min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-((2,2,2-三氟乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤3.在室温下在氮气气氛下向(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(264mg,819μmol)于EA(10mL)中的搅拌溶液中添加1-甲基-3-((2,2,2-三氟乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酸锂(200mg,819μmol)、DIEA(1.06g,8.19mmol)、T₃P(4.17g，50％ Wt于EA中，6.55mmol)。将所得混合物在80℃下搅拌90min。将反应物用水淬灭。将所得混合物用EtOAc(3×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(1×40mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥。在过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内10％至90％梯度；检测器，UV 254nm，在真空中浓缩产生呈黄色油状物的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-((2,2,2-三氟乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(250mg,461μmol,56.2％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝543.35；HPLCtR＝0.878min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-((2,2,2-三氟乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤4.将(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-((2,2,2-三氟乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(245mg,452μmol)于FA(5mL)中的搅拌溶液在80℃下搅拌4小时。将混合物在减压下浓缩。将混合物通过制备型HPLC(依照以下条件：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内25％ B至45％ B，45％ B；波长：254nm；RT1(min)：7.12)纯化，得到呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-((2,2,2-三氟乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(129mg，261μmol，57.7％，98.3％纯度)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝487.20；HPLC tR＝1.399min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)12.47(s,1H),10.86(s,1H),7.52(s,1H),7.17(s,1H),6.52(s,1H),5.16(s,1H),4.84(t,J＝7.4Hz,1H),4.61(s,2H),4.14-4.05(m,5H),3.84(d,J＝4.8Hz,2H),2.70(dt,J＝13.6,7.6Hz,1H),1.94(dd,J＝14.9,6.8Hz,1H),1.25(s,3H),0.61(d,J＝5.2Hz,2H),0.48(q,J＝4.7Hz,2H)。

实施例32

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

1-甲基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-5-甲酸甲酯

步骤1.向圆底烧瓶中装入3-羟基-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸甲酯(400mg,2.56mmol)、1,1,1-三氟-2-碘乙烷(645mg,3.07mmol)、K₂CO₃(1.06g,7.69mmol)和搅拌棒。添加DMF(8mL)，并且将溶液在100℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(20mL)稀释，并且将水相用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤三次，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩，得到呈黄色非晶形固体的1-甲基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-5-甲酸甲酯(390mg，1.4mmol，53％，83％纯度)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝239.00；HPLC tR＝0.875min。

1-甲基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-5-甲酸

步骤2.向圆底烧瓶中装入于THF(4mL)中的1-甲基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-5-甲酸甲酯(380mg,1.60mmol)，以及LiOH(115mg，于4mL H₂O中，4.79mmol)和搅拌棒。将所得溶液在25℃下搅拌1小时。将混合物的pH值调整至6～7。将反应混合物用水(20mL)稀释，并且将水相用EA(20mL)萃取三次，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩，得到呈黄色非晶形固体的1-甲基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-5-甲酸(350mg，1.2mmol，77％，79％纯度)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝225.25；HPLC tR＝0.705min

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤3.在0℃下在氮气气氛下向(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(198mg,613μmol)、1-甲基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-5-甲酸(200mg,705μmol)和DIEA(317mg,2.45mmol)于EA(6mL)中的混合物中滴加T3P(780mg 1M于EA中的溶液，50％ Wt，1.23mmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，20min内0％至100％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈透明非晶形固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(240mg,454μmol,74.1％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝529.10；HPLC tR＝0.931min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤4.向圆底烧瓶中装入(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(235mg,445μmol)和搅拌棒。添加FA(7mL)，并且将溶液在75℃下搅拌4小时。将混合物在真空中浓缩。将所得粗制材料通过制备型HPLC(柱：XBridge Shield RP18OBD柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内28％ B至48％ B，48％ B；波长：254nm；RT1(min)：7.38)纯化。冻干得到呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(183.7mg,388.8μmol,87.5％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝473.05；HPLC tR＝1.018min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)12.53(s,1H),10.82(s,1H),7.50(s,1H),6.62(d,J＝48.9Hz,2H),5.16(s,1H),4.80(q,J＝8.9Hz,3H),3.97(s,3H),3.85(s,2H),2.70(dt,J＝13.1,6.9Hz,1H),1.93(s,1H),1.25(s,3H),0.65-0.37(m,4H)。

实施例33

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤1.将5-氯咪唑并[1,2-c]嘧啶(57.2mg,1.2Eq,372μmol)、K₂CO₃(129mg,3Eq,930μmol)和xantphos(35.9mg,0.2Eq,62.0μmol)添加至(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(100mg,1Eq,310μmol)于1,4-二噁烷(5mL)中的溶液中。在使氮气鼓泡通过反应混合物1分钟后，添加Pd₂(dba)₃(56.8mg,0.2Eq,62.0μmol)。将反应混合物在80℃下在剧烈搅拌下加热16小时。在冷却后，将反应物通过添加15mL水并用乙酸乙酯萃取进行处理，经Na₂SO₄干燥并在真空中蒸发。将粗制残余物通过快速色谱法(流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)、流动相B：ACN；流量：35mL/min；梯度：15min内30％ B至60％ B)纯化；溶剂蒸发后得到呈黄色固体的标题化合物(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(70mg,0.16mmol,51％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝440.40；HPLC tR＝0.592min

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤2.将(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(50mg,1Eq,0.11mmol)于FA(7.5mL)中的溶液平均划分成五份。将五份混合物在100℃下加热1.5小时。可在LCMS中发现产物。将5批合并在一起用于纯化。在冷却后，将反应物在真空中蒸发。将粗制残余物通过制备型HPLC(柱：YMC-Actus Triart C18 ExRS，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：9min内10％ B至35％ B，35％ B；波长：220nm；RT1(min)：7.85，8.65(min))纯化；冻干得到呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(4.3mg,11μmol,9.9％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝384.15；HPLC tR＝0.741min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.51(s,1H),10.16(s,1H),8.37(s,1H),7.65(s,1H),7.57(s,1H),7.52(s,1H),6.98(s,1H),6.70(s,1H),5.18(s,1H),4.87(s,1H),3.86(s,2H),2.72(s,1H),1.97(s,1H),1.25(s,3H),0.61(s,2H),0.48(s,2H)。

实施例34

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

5-(二氟甲基)-N-(2,2-二甲氧基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺

步骤1.在60℃下向5-(二氟甲基)-1H-吡唑-3-甲酸(2g,0.01mol)和CDI(3g,0.02mol)于MeCN(20mL)中的混合物中滴加2,2-二甲氧基乙-1-胺(4g,0.04mol)，持续1.5小时。将混合物在60℃下搅拌16小时。将反应混合物在真空中浓缩。将粗制产物通过硅胶色谱法(6g柱；用PE/EA(比率：1/1)洗脱)纯化。在真空中浓缩产生呈棕褐色粘稠胶状物的5-(二氟甲基)-N-(2,2-二甲氧基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(5g,0.02mol)(粗品)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝250.00；HPLC tR＝0.608min。

2-(二氟甲基)-7-羟基-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮

步骤2.向圆底烧瓶中装入5-(二氟甲基)-N-(2,2-二甲氧基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(5g,0.02mol)、HCl(5M,50mL)和搅拌棒。将溶液在25℃下搅拌3小时。将沉淀固体通过过滤收集并用EA(3*10mL)洗涤，得到呈灰白色非晶形固体的2-(二氟甲基)-7-羟基-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(2.4g,12mmol,60％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝204.15HPLC tR＝0.173min。

2-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮

步骤3.向圆底烧瓶中装入2-(二氟甲基)-7-羟基-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(2.2g,1Eq,11mmol)、多磷酸(20mL)和搅拌棒。将溶液在110℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(20mL)稀释，并且将水相用EA(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内10％至55％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈灰白色非晶形固体的2-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(1g,5mmol,50％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝186.00HPLC tR＝0.600min。

4-氯-2-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪

步骤4.向圆底烧瓶中装入2-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(1g,1Eq,5mmol)、POCl3(10mL)、DMF(0.04g,0.1Eq,0.5mmol)和搅拌棒。将溶液在50℃下搅拌16小时。将反应混合物在真空中浓缩。将反应物倒入冰水中并用饱和NaHCO₃调整PH＝7～8，并且将水相用EA(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内10％至60％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈灰白色非晶形固体的4-氯-2-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(540mg,2.65mmol,50％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝204.15；HPLC tR＝0.603min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤5.向圆底烧瓶中装入4-氯-2-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(95mg,0.47mmol)、DMF(2.5mL)、(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(0.15g,0.47mmol)、Cs₂CO₃(0.45g,1.4mmol)、Pd(dppf)Cl₂(38mg,47μmol)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次。将混合物在60℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(5mL)稀释，并且将水相用EA(15mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内10％至60％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈黄色油状物的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(87mg,0.18mmol,38％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝490.10HPLC tR＝0.808min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤6.向圆底烧瓶中装入(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(82mg,0.17mmol)、FA(2mL)和搅拌棒。将溶液在80℃下搅拌1小时并浓缩。将所得粗制材料通过制备型HPLC(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内23％ B至46％ B，46％ B；波长：254nm；RT1(min)：7.23)纯化。冻干得到呈灰白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(41mg,95μmol,56％)。m/z(ES+)[M+H]+＝434.10；HPLC tR＝0.721min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)12.43(s,1H),10.27(s,1H),8.16(s,1H),7.53(s,3H),7.20(d,J＝54.5Hz,1H),6.81(s,1H),5.17(s,1H),4.86(s,1H),3.86(s,2H),2.72(s,1H),1.95(s,1H),1.25(s,3H),0.61(s,2H),0.48(q,J＝4.9,4.4Hz,2H)。

实施例34

根据本文所述程序合成表12中所列的额外化合物。

实施例35

N-(5-环戊基-4-氟-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

3-环戊基-2-氟-3-氧代丙腈

步骤1.在-78℃下向环戊烷甲酰氯(398mg,365μL,1Eq,3.00mmol)和单氟乙腈(177mg,167μL,1Eq,3.00mmol)于THF(9mL)中的溶液中添加LHMDS(1.00g，6.00mL，1摩尔浓度，2Eq，6.00mmol)。历经2小时将反应物缓慢升温至室温。将反应物用水淬灭，用EtOAc(100mL)稀释。将有机层用10％柠檬酸(50mL)洗涤，之后用盐水(50mL)洗涤。粗制物未经任何进一步纯化即直接用于后续步骤中。

1-(叔丁基)-3-环戊基-4-氟-1H-吡唑-5-胺

步骤2.向叔丁基肼盐酸盐(561mg,1.5Eq,4.50mmol)于EtOH(8mL)中的溶液中添加NaOH(180mg,1.5Eq,4.50mmol)。将反应物在室温下搅拌50min，接着添加3-环戊基-2-氟-3-氧代丙腈(466mg,1Eq,3.00mmol)。接着将反应物在回流下搅拌2天以上。将反应物浓缩并再溶解于DCM(50mL)中。将所得悬浮液过滤并浓缩。接着将粗制残余物通过24g硅胶柱使用EtOAc于庚烷中的混合物梯度(0-40％)纯化，得到呈褐色固体的标题化合物(213.4mg,947.1μmol,31.6％)。LC-MS(ESI⁺)m/z:153.1(M+H)⁺。

N-(1-(叔丁基)-5-环戊基-4-氟-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤3.在℃下向1-(叔丁基)-5-环戊基-4-氟-1H-吡唑-3-胺(62.1mg,1Eq,276μmol)于DCM(1.0mL)中的溶液中添加2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酸(58.3mg,1.5Eq,413μmol)、DIPEA(107mg,144μL,3Eq,827μmol)和丙基膦酸酐(526mg,489μL,50％ Wt,3Eq,827μmol)。将反应物搅拌1小时。将反应物用EtOAc(100mL)稀释并用10％柠檬酸(50mL)洗涤，之后用盐水(50mL)洗涤。接着将粗制残余物通过12g硅胶柱使用EtOAc于庚烷中的混合物梯度(0-100％)纯化，得到标题化合物(44.7mg,276μmol,49.7％)。LC-MS(ESI⁺)m/z:349.40(M+H)⁺。

N-(5-环戊基-4-氟-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤4.将N-(1-(叔丁基)-5-环戊基-4-氟-1H-吡唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺(47.7mg,1Eq,137μmol)于甲酸(1mL)中的溶液在70℃下搅拌。浓缩并通过制备型HPLC(含0.1％ FA的20-50％ ACN的水溶液)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(27.2mg,93.1μmol,68.0％)。LC-MS(ESI⁺)m/z:293.33(M+H)⁺。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ12.31(s,1H),10.06(s,1H),6.22(s,1H),3.84(s,2H),3.00(t,J＝8.4Hz,1H),2.20(s,3H),1.97(br,2H),1.83-1.47(m,6H)。

实施例36

N-(5-环戊基异噻唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

2-(5-溴异噻唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮

步骤1.向小瓶中添加于乙酸(1mL)中的5-溴异噻唑-3-胺(168.2mg,1Eq,939.5μmol)、异苯并呋喃-1,3-二酮(139.2mg,1Eq,939.5μmol)。将反应物在100℃下搅拌过夜。将粗制物浓缩并直接用于下一步骤中。

2-(5-(环戊-1-烯-1-基)异噻唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮

步骤2和3.向小瓶中装入于1,4-二噁烷(4mL)和水(1mL)的混合溶剂中的2-(5-溴异噻唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(290mg,1Eq,0.939mmol)、Pd(dppf)Cl₂(42.8mg,0.07Eq,65.7μmol)、2-(环戊-1-烯-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(273mg,0.28mL,1.5Eq,1.41mmol)和碳酸钾(324mg,2.5Eq,2.35mmol)。将所得反应混合物在80℃下搅拌3小时。将反应物用DCM(50mL)稀释并用10％柠檬酸(25mL)洗涤。将分离的有机层浓缩并再溶解于AcOH(5mL)中。将粗制物在100℃下搅拌3小时。将反应混合物浓缩并通过24g硅胶柱使用EtOAc于庚烷中的混合物梯度(0-60％)纯化，得到标题化合物(51.2mg,173μmol,18.4％)。LC-MS(ESI⁺)m/z:297.22(M+H)⁺。

2-(5-环戊基异噻唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮

步骤4.使2-(5-(环戊-1-烯-1-基)异噻唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(57mg,1Eq,0.19mmol)于乙醇(5mL)和乙酸乙酯(5mL)中的溶液在10巴氢压力下在60℃下以1ml/min流量经受具有Pd(OH)₂滤筒的H-cube持续7小时。将粗制物浓缩，得到标题化合物(14mg,47μmol,24％)。LC-MS(ESI⁺)m/z:299.17(M+H)⁺。

5-环戊基异噻唑-3-胺

步骤5.向2-(5-环戊基异噻唑-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(14mg,1Eq,47μmol)于EtOH(0.5mL)中的溶液中添加肼(4.5mg,4.4μL,3Eq,0.14mmol)。将反应物在60℃下搅拌3小时。过滤并用EtOAc洗涤。将粗制物直接用于下一步骤中。

N-(5-环戊基异噻唑-3-基)-2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酰胺

步骤6.在室温下向小瓶中添加于DCM(1mL)中的5-环戊基异噻唑-3-胺(8.0mg,1Eq,48μmol)、2-(3-甲基异噁唑-5-基)乙酸(13mg,2Eq,95μmol)、2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(0.12g,0.11mL,50％ Wt,4Eq,0.19mmol)和DIPEA(25mg,33μL,4Eq,0.19mmol)。将反应物搅拌1小时。将反应物用EtOAc(10mL)稀释并用10％柠檬酸(5mL)洗涤，之后用盐水(5mL)洗涤。接着将粗制残余物通过4g硅胶柱使用EtOAc于庚烷中的混合物梯度(0-100％)纯化，得到标题化合物(4.0mg,0.01μmol,30％)。LC-MS(ESI⁺)m/z:292.27(M+H)⁺。

实施例37

异丙基氨基甲酸(1R,3S)-3-(3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

(1-(叔丁基)-5-((1S,3R)-3-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)环戊基)-1H-吡唑-3-基)氨基甲酸苄酯

步骤1.在25℃下将N-{1-叔丁基-5-[(1R,3S)-3-羟基环戊基]-1H-吡唑-3-基}氨基甲酸苄酯(500.0mg,1.39mmol)、吡啶(335.0μL,4.17mmol)、氯甲酸4-硝基苯基酯(560.0mg,2.78mmol)和DMAP(16.9mg,139.0μmol)于DCM(20.0mL)中的混合物搅拌12小时。将混合物用柠檬酸水溶液(20mL,10％)、盐水(20mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，得到呈黄色油状物的碳酸(1S,3R)-3-(3-{[(苄氧基)羰基]氨基}-1-叔丁基-1H-吡唑-5-基)环戊基酯4-硝基苯基酯粗制产物(400.0mg，55.0％产率)，将其直接用于下一步骤。LC-MS(ESI⁺)m/z:523.4(M+H)⁺。

异丙基氨基甲酸(1R,3S)-3-(3-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

步骤2.将碳酸(1S,3R)-3-(3-{[(苄氧基)羰基]氨基}-1-叔丁基-1H-吡唑-5-基)环戊基酯4-硝基苯基酯(400.0mg,765.0μmol)、丙-2-胺(135.0mg,2.29mmol)和DIEA(295.0mg,2.29mmol)于THF(5.0mL)中的混合物在60℃下搅拌2小时。将混合物浓缩，得到残余物，将其通过硅胶色谱法(于石油醚中的乙酸乙酯＝0％至30％)纯化，得到呈黄色油状物的N-{1-叔丁基-5-[(1R,3S)-3-{[(丙-2-基)氨基甲酰基]氧基}环戊基]-1H-吡唑-3-基}氨基甲酸苄酯产物(260.0mg，76.9％产率)。LC-MS(ESI⁺)m/z:443.6(M+H)⁺。

异丙基氨基甲酸(1R,3S)-3-(3-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

步骤3.将N-{1-叔丁基-5-[(1R,3S)-3-{[(丙-2-基)氨基甲酰基]氧基}环戊基]-1H-吡唑-3-基}氨基甲酸苄酯(260.0mg,587.0μmol)和Pd/C(50.0mg,10％湿)于EtOAc(4.0mL)中的混合物在20℃下在H₂(15Psi)下搅拌12小时。将混合物过滤并且将滤液浓缩，得到呈黄色油状物的N-(丙-2-基)氨基甲酸(1S,3R)-3-(3-氨基-1-叔丁基-1H-吡唑-5-基)环戊基酯产物(150.0mg，82.8％产率，粗品)，将其直接用于下一步骤。LC-MS(ESI⁺)m/z:309.3(M+H)⁺。

异丙基氨基甲酸(1R,3S)-3-(1-(叔丁基)-3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

步骤4将异丙基氨基甲酸(1S,3R)-3-(3-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(110.0mg,356.6μmol)、2-氯嘧啶(49.0mg,428.0μmol)、XantPhos(41.3mg,71.3μmol)、Pd₂(dba)₃(32.7mg,35.7μmol)和Cs₂CO₃(232.4mg,713.3μmol)于二噁烷(4.0mL)中的混合物在100℃下在N₂保护下搅拌12小时。将混合物用乙酸乙酯(20mL)和H₂O(20mL)稀释。将水层分离并用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶色谱法(于石油醚中的乙酸乙酯＝0％至60％)纯化，得到呈黄色固体的异丙基氨基甲酸(1S,3R)-3-(1-(叔丁基)-3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯产物(80.0mg，58.0％产率)。LC-MS(ESI⁺)m/z:387.3(M+H)⁺。

异丙基氨基甲酸(1R,3S)-3-(3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯

步骤5.将异丙基氨基甲酸(1R,3S)-3-(1-(叔丁基)-3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯(60.0mg,155.0μmol)于TFA(2.0mL)中的混合物在75℃下搅拌4小时。将混合物浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC(NH₃·H₂O)纯化，得到呈白色固体的异丙基氨基甲酸(1R,3S)-3-(3-(嘧啶-2-基氨基)-1H-吡唑-5-基)环戊基酯产物(27.2mg，53.0％产率)。LC-MS(ESI⁺)m/z:331.1(M+H)⁺。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm 11.92(s,1H),9.48(s,1H),8.41(d,J＝3.2Hz,2H),6.95(d,J＝6.8Hz,1H),6.76(s,1H),6.41(s,1H),5.00(s,1H),3.54-3.62(m,1H),3.05(s,1H),2.40-2.49(m,1H),2.01(s,1H),1.83-1.93(m,1H),1.73(d,J＝7.6Hz,2H),1.63(s,1H),1.03(d,J＝6.4Hz,6H)。

根据实施例37的方法制备的额外化合物绘示于下表13中。

表13.额外示例性化合物

实施例38

异丙基氨基甲酸rel-(1R,3S)-3-(5-(2-(甲基(7H-嘌呤-6-基)氨基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯异丙基氨基甲酸rel-(1S,3R)-3-(5-(2-(甲基(7H-嘌呤-6-基)氨基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯

异丙基氨基甲酸rel-(1R,3S)-3-(5-(2-溴乙酰胺基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯

步骤1.向异丙基氨基甲酸rel 3-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯(110mg,1Eq,357μmol)于THF(3mL)中的溶液中添加2-溴乙酰溴(144mg,2Eq,713μmol)和Na₂CO₃(75.6mg,2Eq,713μmol)。将混合物在室温下搅拌2h。LCMS正常。将混合物蒸发，用乙酸乙酯(3×30mL)稀释并且用水洗涤，经Na₂SO₄干燥并在真空中蒸发。将粗制残余物通过快速色谱法(流动相A：水，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：7min内30％ B至45％ B)纯化；溶剂蒸发后得到呈浅黄色油状物的标题化合物异丙基氨基甲酸rel-3-(5-(2-溴乙酰胺基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯(103mg,240μmol,67.3％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝429.00；HPLC tR＝1.131min。

异丙基氨基甲酸rel-(1R,3S)-3-(1-(叔丁基)-5-(2-(甲基(9-(四氢-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基)氨基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯

步骤2.向异丙基氨基甲酸rel-3-(5-(2-溴乙酰胺基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯(103mg,1Eq,240μmol)于DMF(2mL)中的冰冷溶液添加NaH(28.8mg,60％Wt,3Eq,720μmol)。在30min后，添加N-甲基-9-(四氢-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-胺(61.6mg,1.1Eq,264μmol)。将混合物在室温下搅拌3小时。LCMS正常。将混合物通过水(3mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×20ml)萃取，经Na₂SO₄干燥并在真空中蒸发。将粗制残余物通过快速色谱法(流动相A：水，流动相B：ACN；流量：40mL/min；梯度：7min内10％ B至30％ B)纯化；溶剂蒸发后得到呈白色固体的标题化合物异丙基氨基甲酸rel-3-(1-(叔丁基)-5-(2-(甲基(9-(四氢-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基)氨基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯(113mg,194μmol,81.0％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝582.50；HPLC tR＝1.042min。

异丙基氨基甲酸rel-(1R,3S)-3-(5-(2-(甲基(9H-嘌呤-6-基)氨基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯

步骤3.将异丙基氨基甲酸rel-3-(1-(叔丁基)-5-(2-(甲基(9-(四氢-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基)氨基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯(5×10mg,1Eq,86μmol)于FA(5×1mL)中的溶液在80℃下加热1小时。在冷却至室温后，将混合物浓缩并通过制备型HPLC(柱：XBridge制备型OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：7min内18％ B至22％ B)纯化。溶剂蒸发后得到呈浅黄色固体的标题化合物异丙基氨基甲酸rel-3-(5-(2-(甲基(9-(四氢-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基)氨基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯(25mg,48μmol,55％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝442.20；HPLC tR＝0.583min。

异丙基氨基甲酸rel-(1R,3S)-3-(5-(2-(甲基(7H-嘌呤-6-基)氨基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯

异丙基氨基甲酸rel-(1S,3R)-3-(5-(2-(甲基(7H-嘌呤-6-基)氨基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯

步骤4.将异丙基氨基甲酸rel-3-(5-(2-(甲基(9-(四氢-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基)氨基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯(25mg,57μmol)通过手性-HPLC(柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.2％ DEA)--HPLC，流动相B：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：17min内40％ B至40％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：11.49；RT2(min)：14.64)纯化。冻干得到呈白色固体的异丙基氨基甲酸rel-(1R,3S)-3-(5-(2-(甲基(7H-嘌呤-6-基)氨基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯(4.3mg,9.7μmol,34％)。

m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝442.25；HPLC tR＝0.709min。

1H NMR(400MHz,DMSO)δ1.00(dd,J＝6.7,3.9Hz,5H),1.12-1.28(m,3H),1.54-1.69(m,4H),1.82-1.91(m,1H),1.97(d,J＝9.7Hz,1H),2.35(s,1H),3.02(s,3H),3.49-3.58(m,1H),3.72(s,2H),4.49(s,1H),4.97(s,1H),5.11(s,2H),6.25(s,1H),6.91(d,J＝7.9Hz,1H),8.10(s,1H),8.21(s,1H),10.48(s,1H),12.04(s,1H),13.01(s,1H)。

冻干得到呈白色固体的异丙基氨基甲酸rel-(1S,3R)-3-(5-(2-(甲基(7H-嘌呤-6-基)氨基)乙酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环戊基酯(3.8mg,8.6μmol,30％)。

m/z(ES+)[M+H]+＝442.25；HPLC tR＝0.728min。

1H NMR(400MHz,DMSO)δ1.00(dd,J＝6.7,3.8Hz,5H),1.16-1.28(m,4H),1.54(s,1H),1.67(t,J＝11.4Hz,2H),1.82-1.91(m,1H),1.97(d,J＝9.8Hz,1H),2.39(s,1H),3.03(d,J＝9.1Hz,3H),3.54(s,1H),3.76(s,2H),4.49(s,1H),4.97(s,1H),5.12(s,2H),6.25(s,1H),6.91(d,J＝7.7Hz,1H),8.10(s,1H),8.20(s,1H),10.48(s,1H),12.04(s,1H),13.01(s,1H)。

实施例39

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-(2-(三氟甲氧基)乙基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

3-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸锂

步骤1.在室温下在氮气气氛下向3-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸甲酯(500mg,1Eq,2.28mmol)于THF(5mL)中的搅拌溶液中添加于水中的LiOH(104mg，4.34mL，1摩尔浓度，1.9Eq，4.34mmol)。将所得混合物在50℃下搅拌0.5小时。将混合物在减压下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内0％至10％梯度；检测器，UV 254nm，在真空中浓缩产生呈白色固体的3-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸锂(400mg,1.9mmol,60％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝207.07；HPLC tR＝0.992min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-((三氟甲氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤2.向1-甲基-3-((三氟甲氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酸锂(25mg,0.12mmol)和(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(49mg,0.15mmol)于乙酸乙酯(1mL)中的溶液中添加DIEA(160mg,1.2mmol)。在0℃下向以上反应物中添加T₃P(620mg，50％ Wt，于EA中，0.98mmol)。将反应物在75℃下搅拌过夜。将混合物用水淬灭，过滤并用EA(3*20ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，30min内60％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-((三氟甲氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(60mg,120μmol,97％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝509.37；HPLC tR＝1.41min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-3-(1-甲基-3-(2-(三氟甲氧基)乙基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤3.向8mL小瓶中添加NiCl₂二甘醇二甲醚(1.1mg,4.9μmol)、4,4-二-叔丁基-2,2-联吡啶(1.3mg,4.9μmol)、六氟磷酸(4,4'-二-叔丁基-2,2'-联吡啶)双[3,5-二氟-2-(5-三氟甲基-2-吡啶基-kN)苯基-kC]铱(III)(1.1mg,0.98μmol)和(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(3-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1-(叔丁基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(50mg,98μmol)。将反应物加盖并用氮气吹扫3次，接着将固体溶解于1,4-二噁烷(1.00mL)中。向溶液中添加所有1-溴-2-(三氟甲氧基)乙烷(38mg,26μL,0.20mmol)、三(三甲基甲硅烷基)硅烷(24mg,30μL,1Eq,98μmol)和2,6-二甲基吡啶(32mg,34μL,3Eq,0.29mmol)，同时用氮气吹扫。接着将反应物插入Merck光反应器中，在100％光强度下反应150分钟。将反应物通过硅藻土垫过滤，接着浓缩并且再溶解于DMSO中并置于AccQ制备型系统上。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，30min内60％梯度；检测器，UV 254nm，得到(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-3-(1-甲基-3-(2-(三氟甲氧基)乙基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(4mg,7μmol,8％)m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝543.48；HPLC tR＝1.47min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-(2-(三氟甲氧基)乙基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤4.向(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-((三氟甲氧基)甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯残余物(5mg,7μmol)中添加FA(2mL)。将反应物在75℃下搅拌1h。将混合物浓缩并通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，30min内50％至60％梯度；检测器，UV254nm。冻干得到呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-(2-(三氟甲氧基)乙基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(1.3mg，2.7μmol，26％，99.4％纯度)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝487.31；HPLC tR＝1.288min。

根据实施例39的方法制备的额外化合物绘示于下表14中。

表14.额外示例性化合物

实施例40

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-((S*)-1-甲氧基乙基)吡唑并

[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-((R*)-1-甲氧基乙基)吡唑并

[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

4-氯-2-(1-甲氧基乙烯基)吡唑并[1,5-a]吡嗪

步骤1.将4-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸甲酯(1g,1Eq,5mmol)于THF(14mL)中的搅拌溶液冷却至0℃并在N₂下用泰伯试剂(Tebbe's Reagent)(1eq，9.4mL，0.5M，于甲苯中)处理。将反应物在0℃下搅拌30min。在30分钟后，将溶液升温至室温并搅拌1h。在0℃下将混合物用(0.1N)NaOH溶液小心地淬灭。将此混合物用己烷处理并通过经由硅藻土垫过滤去除固体。将固体用己烷洗涤并且将滤液通过第二个硅藻土垫以去除任何新形成的固体。将有机层用Na₂SO₄干燥并减压浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，8min内53％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈白色固体的4-氯-2-(1-甲氧基乙烯基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(460mg,2.19mmol,50％)。

m/z(ES+)[M+H]⁺＝210.20；HPLC tR＝0.887min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(1-甲氧基乙烯基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤2.在N₂下向4-氯-2-(1-甲氧基乙烯基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(100mg,1Eq,477μmol)和(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(154mg,1Eq,477μmol)于DMF(3mL)中的搅拌溶液中添加Cs₂CO₃(466mg,3Eq,1.43mmol)和PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂加合物(77.9mg,0.2Eq,95.4μmol)。将反应物在80℃下搅拌过夜。将混合物用水稀释，并且将水相用EA萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内40％至50％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈无色油状物的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(1-甲氧基乙烯基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(80mg,0.16mmol,34％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝496.20；HPLC tR＝0.824min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(1-甲氧基乙基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤3.在N₂下向(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(1-甲氧基乙烯基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(230mg,1Eq,464μmol)于THF(5mL)和乙酸乙酯(5mL)中的搅拌溶液中添加Pd/C(49.4mg,1Eq,464μmol)。将反应物在室温下在H₂下搅拌1h。将混合物过滤并浓缩，得到呈无色油状物的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(1-甲氧基乙基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(160mg,322μmol,69.3％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝498.25；HPLC tR＝0.746min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-((2-(1-甲氧基乙基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤4.向(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(1-甲氧基乙基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(160mg,1Eq,322μmol)中添加FA(5mL)。将反应物在80℃下搅拌1h。将混合物浓缩并通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，8min内51％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈无色油状物的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-((2-(1-甲氧基乙基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(90mg,0.20mmol,63％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝442.35；HPLC tR＝0.603min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-((S*)-1-甲氧基乙基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-((R*)-1-甲氧基乙基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤5.使(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-((2-(1-甲氧基乙基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(90mg,1Eq,0.20mmol)经受制备型手性-HPLC(柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.5％2M NH3-MeOH)--HPLC，流动相B：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：13min内50％ B至50％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：6.04；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；注入体积：0.8mL；运行次数：3)。冻干得到呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-((S*)-1-甲氧基乙基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(28.9mg，64.7μmol，64％，98.9％纯度)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝442.15；HPLC tR＝1.377min。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)12.36(s,1H),10.00(s,1H),8.05(s,1H),7.53(s,1H),7.41-7.23(m,2H),6.79(s,1H),5.17(s,1H),4.84(s,1H),4.55(q,J＝6.5Hz,1H),3.85(s,2H),3.22(s,3H),2.68(s,1H),1.93(d,J＝15.3Hz,1H),1.47(d,J＝6.5Hz,3H),1.25(s,3H),0.61(s,2H),0.48(q,J＝4.6Hz,2H)。

使(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-((2-(1-甲氧基乙基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(90mg,1Eq,0.20mmol)经受制备型手性-HPLC(柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.5％2M NH3-MeOH)--HPLC，流动相B：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：13min内50％ B至50％B；波长：220/254nm；RT2(min)：9.67；样品溶剂：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；注入体积：0.8mL；运行次数：3)。冻干得到呈白色非晶形固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-((R*)-1-甲氧基乙基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(31.1mg,63.1μmol,62％,89.6％纯度)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝442.15；HPLC tR＝1.377min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)12.36(s,1H),10.18(d,J＝131.9Hz,1H),8.05(s,1H),7.53(s,1H),7.42-7.17(m,2H),6.79(s,1H),5.17(s,1H),4.84(s,1H),4.55(q,J＝6.5Hz,1H),3.85(s,2H),3.22(s,3H),2.71(s,1H),1.96(s,1H),1.47(d,J＝6.5Hz,3H),1.25(s,3H),0.60(d,J＝5.1Hz,2H),0.48(q,J＝4.5Hz,2H)。

实施例41

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5S)-5-(3-((2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

7-氯-5-(甲硫基)-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶

步骤1.向圆底烧瓶中装入6-氯-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺(5g,1Eq,0.03mol)、DMF(20mL)，添加3-氯-1,1,1-三氟丙-2-酮(6g,1.5Eq,0.04mol)，并且将溶液在120℃下搅拌16小时。将残余物在真空中浓缩并通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相(乙腈/水)，45min内0％至100％梯度；检测器，UV 254nm。在真空中浓缩产生呈黄色非晶形固体的7-氯-5-(甲硫基)-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶(3.4g,13mmol,40％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝267.85；HPLC tR＝0.875min。

7-氯-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-醇

步骤2.向圆底烧瓶中装入7-氯-5-(甲硫基)-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶(3.4g,1Eq,13mmol)、MeOH:H₂O＝2:1(20mL)，添加LiOH(1.2g,4Eq,51mmol)，并且将溶液在25℃下搅拌3小时。用1N HCl溶液将反应混合物的pH值调整至7-8。将残余物在真空中浓缩并用水(15mL)稀释，并且将水相用EA(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤。在真空中浓缩产生呈褐色非晶形固体的7-氯-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-醇(2.9g,12mmol,96％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝237.90；HPLC tR＝0.700min。

5,7-二氯-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶

步骤3.向圆底烧瓶中装入7-氯-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-醇(1g,1Eq,4mmol)、POCl₃(15mL)，添加DIEA(3g,4mL,5Eq,0.02mol)，并且将溶液在80℃下搅拌3小时。将溶液在真空中浓缩并用NaHCO₃溶液(0℃)淬灭并且用NaHCO₃将pH值调整至7-8。将水相用EA(40mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤。在真空中浓缩产生呈褐色油状物的5,7-二氯-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶(840mg,3.28mmol,80％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝255.90；HPLC tR＝0.842min。

5-溴-7-氯-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶

步骤4.向圆底烧瓶中装入5,7-二氯-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶(700mg,1Eq,2.73mmol)、ACN(10mL)，添加TMSBr(837mg,2Eq,5.47mmol)，并且将溶液在40℃下搅拌3小时。将粗制产物通过硅胶色谱法(10g柱；用PE/EA(比率：15/1)洗脱)纯化。在真空中浓缩产生呈褐色非晶形固体的5-溴-7-氯-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶(720mg,2.40mmol,87.6％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝299.80；HPLC tR＝0.867min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((7-氯-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤5.向可再密封反应小瓶中装入5-溴-7-氯-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶(550mg,1Eq,1.83mmol)、DMF(5mL)、(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(885mg,1.5Eq,2.75mmol)、碳酸钾(1.01g,4Eq,7.32mmol)，并且添加PdCl₂(dppf)(201mg,0.15Eq,275μmol)。将所得混合物在80℃下在氮气气氛下搅拌2.5小时。将残余物在真空中浓缩并通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相(乙腈/水)，45min内0％至100％梯度；检测器，UV 254nm。冻干得到呈黄色非晶形固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((7-氯-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(295mg，0.33mmol，18％，60％纯度)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝542.05；HPLC tR＝0.900min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5S)-5-(3-((2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤6.向圆底烧瓶中装入(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(三氟甲基)咪唑并[1,2c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(140mg,1Eq,276μmol)，添加FA(6mL)，并且将溶液在100℃下搅拌16小时。将残余物在真空中浓缩并通过制备型HPLC(柱：Xselect CSH C18 OBD柱30*150mm 5μm，n；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内32％ B至44％ B，44％ B；波长：254；220nm；RT1(min)：6.5,7.48(min))纯化。冻干得到呈灰白色非晶形固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(1.9mg,4.2μmol,1.5％,m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝452.15；HPLC tR＝1.178min)和呈白色非晶形固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5S)-5-(3-((2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(2mg,4μmol,2％,m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝452.15；HPLC tR＝1.258min)。

实施例42

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-(三氟甲氧基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(3-(氯二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

3-(溴二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸甲酯

3-(氯二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸甲酯

步骤1.在25℃下在氮气气氛下向3-羟基-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸甲酯(400mg,2.56mmol)、二噁烷(5mL)的混合物中逐份添加NaH(0.18g,7.69mmol)。将混合物在25℃下搅拌30min，接着添加2-溴-2,2-二氟乙酸钠盐(608mg,3.07mmol)。将混合物在25℃下搅拌30h。滤出固体。将滤液在真空下浓缩。添加于二噁烷中的HCl(5mL)，并在真空中浓缩。添加DCM(5mL)和XeF₂(1.31g,7.69mmol)，并且将混合物在25℃下搅拌30min。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释，并且将水相用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤。在真空中浓缩产生呈黄色油状物的3-(溴二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸甲酯和3-(氯二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸甲酯的混合物(180mg,26.8％)。

3-(溴二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸甲酯：m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝224.95；HPLCtR＝0.875min。

3-(氯二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸甲酯：m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝240.90；HPLCtR＝0.875min。

1-甲基-3-(三氟甲氧基)-1H-吡唑-5-甲酸

3-(氯二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸

步骤2.向可再密封反应小瓶中装入1-甲基-3-(三氟甲氧基)-1H-吡唑-5-甲酸甲酯和3-(氯二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸甲酯的混合物(160mg,0.70mmol)、NaOH(0.86mL,0.86mmol)、MeOH(5mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在25℃下搅拌1h。将反应混合物用H₂O(20mL)稀释，并且将水相用EA(20mL)萃取三次，接着用1MHCl调整至pH 1～3，并且将水相用EA(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。在真空中浓缩产生呈无色油状物的1-甲基-3-(三氟甲氧基)-1H-吡唑-5-甲酸和3-(氯二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸的混合物(120mg,80％)。

1-甲基-3-(三氟甲氧基)-1H-吡唑-5-甲酸：m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝210.95；HPLC tR＝0.750min。

3-(氯二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸：m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝226.90；HPLC tR＝0.750min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-(三氟甲氧基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(3-(氯二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤3.在0℃下在氮气气氛下向1-甲基-3-(三氟甲氧基)-1H-吡唑-5-甲酸和3-(氯二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸(109mg,0.50mmol)、DIEA(0.41g,0.55mL,3.1mmol)和(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(0.10g,0.31mmol)于EA(5mL)中的混合物中滴加T₃P(1.60g，50％wt，2.5mmol，于EA中)。将混合物在80℃下搅拌2h。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释，并且将水相用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤。在真空中浓缩产生呈黄色油状物的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-(三氟甲氧基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯和(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(3-(氯二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯的混合物(300mg，粗品)。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-(三氟甲氧基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯：m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝515.15；HPLCtR＝1.158min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(3-(氯二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯：m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝531.10；HPLC tR＝1.178min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-(三氟甲氧基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(3-(氯二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤4.向可再密封反应小瓶中装入(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-(三氟甲氧基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯和(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(3-(氯二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯的混合物(190mg，粗品)、FA(5mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在70℃下搅拌1.5h。将反应物在真空中浓缩。将所得粗制材料通过制备型HPLC(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：7min内25％ B至55％B，55％ B；波长：220nm；RT1(min)：7.27)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-(三氟甲氧基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(38.6mg,22.8％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝459.15；HPLC tR＝1.318min。¹HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.57(s,1H),7.52(s,1H),7.12(s,1H),6.54(s,1H),5.16(s,1H),4.84(t,J＝7.9Hz,1H),4.06(s,3H),3.84(d,J＝4.6Hz,2H),2.70(dt,J＝14.4,7.5Hz,1H),1.93(t,J＝10.3Hz,1H),1.25(s,3H),0.61(d,J＝5.1Hz,2H),0.48(q,J＝4.6Hz,2H)。

向可再密封反应小瓶中装入(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-(三氟甲氧基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯和(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(3-(氯二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯的混合物(190mg，粗品)、FA(5mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在70℃下搅拌1.5h。将反应物在真空中浓缩。将所得粗制材料通过制备型HPLC(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：7min内25％ B至55％ B，55％ B；波长：220nm；RT1(min)：7.27)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(3-(氯二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(50mg，粗品)。将所得粗制材料通过制备型HPLC(柱：XBridge PrepOBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：MeOH--HPLC；流量：60mL/min；梯度：8min内49％ B至67％ B，67％ B；波长：254nm；RT1(min)：7.85)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(3-(氯二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(9.3mg,21％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝475.15；HPLC tR＝0.876min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.57(s,1H),11.03(s,1H),7.51(s,1H),7.17(s,1H),6.56(s,1H),5.16(s,1H),4.85(s,1H),4.07(s,3H),3.85(s,2H),2.70(dt,J＝14.0,7.2Hz,1H),1.93(s,1H),1.25(s,3H),0.62(s,2H),0.48(s,2H)。

根据实施例42的方法制备的额外化合物绘示于下表15中。

表15.额外示例性化合物

实施例43

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-((S*)-2,2,2-三氟-1-甲氧基乙基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-((R*)-2,2,2-三氟-1-甲氧基乙基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

1-甲基-3-(2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-1H-吡唑-5-甲酸甲酯

步骤1.向可再密封反应小瓶中装入3-甲酰基-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸甲酯(500mg,2.97mmol)、三甲基(三氟甲基)硅烷(719mg,5.06mmol)、TBAF(155mg,0.60mmol)、THF(5mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在25℃下搅拌3h。将反应物在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内10％至50％梯度；检测器，UV 254nm。在真空中浓缩产生呈无色油状物的1-甲基-3-(2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-1H-吡唑-5-甲酸甲酯(400mg，粗品)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝239.20；HPLC tR＝0.720min。

1-甲基-3-(2,2,2-三氟-1-甲氧基乙基)-1H-吡唑-5-甲酸甲酯

步骤2.在0℃下在氮气气氛下向1-甲基-3-(2,2,2-三氟-1-羟基乙基)-1H-吡唑-5-甲酸甲酯(390mg,1.64mmol)于DMF(5mL)中的混合物中逐份添加NaH(0.12g,4.91mmol)。将混合物在0℃下搅拌5min，接着添加碘甲烷(697mg,4.91mmol)。将混合物在25℃下搅拌1h。将反应溶液直接用于下一步骤。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝253.00；HPLC tR＝0.788min。

1-甲基-3-(2,2,2-三氟-1-甲氧基乙基)-1H-吡唑-5-甲酸

步骤3.向以上反应溶液中添加NaOH(3.27mL,3.27mmol)并在25℃下搅拌1h。将反应混合物用H₂O(20mL)稀释，并且将水相用EA(30mL)萃取三次，接着用1M HCl调整至pH 1～3，并且将水相用EA(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。在真空中浓缩产生呈无色油状物的1-甲基-3-(2,2,2-三氟-1-甲氧基乙基)-1H-吡唑-5-甲酸(180mg,46.2％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝239.20；HPLC tR＝0.720min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-(2,2,2-三氟-1-甲氧基乙基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤4.在0℃下在氮气气氛下向1-甲基-3-(2,2,2-三氟-1-甲氧基乙基)-1H-吡唑-5-甲酸(160mg,0.67mmol)、DIEA(722mg,5.58mmol)和(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(180mg,0.56mmol)于EA(5mL)中的混合物中滴加T₃P(6.39g,10.00mmol)。将混合物在80℃下搅拌2h。将反应混合物用H₂O(30mL)稀释，并且将水相用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。在真空中浓缩产生呈黄色油状物的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-(2,2,2-三氟-1-甲氧基乙基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(400mg，粗品)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝543.45；HPLC tR＝0.945min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-(2,2,2-三氟-1-甲氧基乙基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤5.向可再密封反应小瓶中装入(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-甲基-3-(2,2,2-三氟-1-甲氧基乙基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(380mg,0.70mmol)、FA(5mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在75℃下搅拌2h。将反应物在真空中浓缩。将所得粗制材料通过制备型HPLC(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内26％ B至44％ B，44％ B；波长：220nm；RT1(min)：7.35)纯化。冻干得到呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-(2,2,2-三氟-1-甲氧基乙基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(190mg,55.8％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝487.30；HPLC tR＝0.820min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-((S*)-2,2,2-三氟-1-甲氧基乙基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-((R*)-2,2,2-三氟-1-甲氧基乙基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤6.将(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-(2,2,2-三氟-1-甲氧基乙基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(189mg,0.39mmol)通过手性制备型HPLC(柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.5％2M NH₃-MeOH)--HPLC，流动相B：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：10min内40％ B至40％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：5.27；RT2(min)：7.46；样品溶剂：EtOH：DCM＝1:1-HPLC；注入体积：0.45mL；运行次数：5)纯化。冻干得到呈非晶形白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-((S*)-2,2,2-三氟-1-甲氧基乙基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(47.5mg,50.3％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝487.20；HPLC tR＝0.948min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.50(s,1H),10.94(s,1H),7.50(s,1H),7.30(s,1H),6.56(s,1H),5.16(s,1H),5.03(q,J＝6.9Hz,1H),4.85(s,1H),4.11(s,3H),3.85(s,2H),3.35(s,3H),2.71(dd,J＝14.3,7.5Hz,1H),1.93(s,1H),1.25(s,3H),0.62(s,2H),0.48(q,J＝5.1,4.7Hz,2H)。

将(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-(2,2,2-三氟-1-甲氧基乙基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(189mg,0.39mmol)通过手性制备型HPLC(柱：CHIRALPAK IG，2*25cm，5μm；流动相A：Hex(0.5％2M NH₃-MeOH)--HPLC，流动相B：EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流量：20mL/min；梯度：10min内40％ B至40％ B；波长：220/254nm；RT1(min)：5.27；RT2(min)：7.46；样品溶剂：EtOH：DCM＝1:1-HPLC；注入体积：0.45mL；运行次数：5)纯化。冻干得到呈非晶形白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-甲基-3-((R*)-2,2,2-三氟-1-甲氧基乙基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(38.6mg,40.8％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝487.20；HPLC tR＝0.948min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.50(s,1H),10.94(s,1H),7.50(s,1H),7.30(s,1H),6.56(s,1H),5.16(s,1H),5.03(q,J＝7.0Hz,1H),4.85(s,1H),4.11(s,3H),3.85(s,2H),3.35(s,3H),2.71(dd,J＝14.4,7.4Hz,1H),1.93(s,1H),1.25(s,3H),0.62(s,2H),0.55(d,J＝13.0Hz,1H),0.48(q,J＝5.1,4.7Hz,2H)。

实施例44

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(3-(甲氧基甲基)-1-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

3-(氯甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯

步骤1.向可再密封反应小瓶中装入3-(羟基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(2.00g,0.01mol)、SOCl₂(20mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在80℃下搅拌2h。将反应物在真空中浓缩。将残余物用水稀释，接着用碳酸氢钠调整至pH 6～7。将水相用EA(100mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤。在真空中浓缩产生呈无色油状物的3-(氯甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(2.20g，粗品)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝189.20；HPLC tR＝0.645min。

3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯

步骤2.在0℃下在氮气气氛下向3-(氯甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(2.20g,12.00mmol)于MeOH(20mL)中的混合物中逐份添加NaOMe(0.82g,15.00mmol)。将混合物在25℃下搅拌12h。将反应物在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内10％至50％梯度；检测器，UV 254nm。在真空中浓缩产生呈无色油状物的3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(1.60g,74％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝185.05；HPLC tR＝0.633min。

3-(甲氧基甲基)-1-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯

步骤3.在25℃下在氮气气氛下向SiO2-OH(34mg,0.42mmol)中滴加ClSO₃H(49mg,0.42mmol)。将混合物在25℃下搅拌2h。向可再密封反应小瓶中装入3-(甲氧基甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(600mg,3.26mmol)、HDMS(10mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在125℃下搅拌2h。滤出固体。将滤液在真空下浓缩。添加DCM(10mL)，接着添加3,3-二甲基-1-(三氟甲基)-1,3-二氢-1l3-苯并[d][1,2]碘氧杂戊环(iodaoxole)(1.40g,4.20mmol)、LiNTf₂(0.15g,0.51mmol)和HNTf₂(0.14g,0.51mmol)，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在40℃下搅拌16h。将反应物在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，10min内10％至50％梯度；检测器，UV 254nm。在真空中浓缩产生呈无色油状物的3-(甲氧基甲基)-1-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(140mg，粗品)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝253.005；HPLC tR＝0.867min。

3-(甲氧基甲基)-1-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-甲酸

步骤4.向可再密封反应小瓶中装入3-(甲氧基甲基)-1-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(180mg,0.21mmol)、NaOH(428μL,428μmol)、MeOH(5mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在25℃下搅拌1h。将反应混合物用H₂O(20mL)稀释，并且将水相用EA(20mL)萃取三次，接着用1M HCl调整至pH 1～3。将水相用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤。在真空中浓缩产生呈无色油状物的3-(甲氧基甲基)-1-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-甲酸(50mg，粗品)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝225.05；HPLC tR＝0.567min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(3-(甲氧基甲基)-1-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤5.在0℃下在氮气气氛下向3-(甲氧基甲基)-1-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-甲酸(119mg,0.53mmol)、DIEA(625mg,4.84mmol)和(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(156mg,0.48mmol)于EA(5mL)中的混合物中滴加T₃P(4.92g，50％wt，3.87mmol，于EA中)。将混合物在80℃下搅拌12h。将反应混合物用H₂O(20mL)稀释，并且将水相用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤。在真空中浓缩产生呈黄色油状物的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(3-(甲氧基甲基)-1-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(200mg,78.2％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝529.10；HPLC tR＝0.850min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(3-(甲氧基甲基)-1-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤6.向可再密封反应小瓶中装入(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(3-(甲氧基甲基)-1-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(250mg,0.47mmol)、FA(5mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在70℃下搅拌3h。将反应物在真空中浓缩。将所得粗制材料通过制备型HPLC(柱：XBridgePrep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：7min内20％ B至45％ B，45％ B；波长：220nm；RT1(min)：7.63)纯化。冻干得到呈灰白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(3-(甲氧基甲基)-1-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(86.8mg,38.8％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝473.15；HPLC tR＝0.903min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.58(s,1H),11.36(s,1H),7.52(s,1H),7.17(s,1H),6.55(s,1H),5.16(s,1H),4.85(s,1H),4.47(s,2H),3.85(s,2H),3.33(s,3H),2.74-2.66(m,1H),1.92(s,1H),1.24(s,3H),0.67-0.43(m,4H)。

实施例45

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-(2-(三氟甲氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

1-(2-(三氟甲氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸甲酯

步骤1.向1H-吡唑-4-甲酸甲酯(110mg,0.87mmol)于DMF(5mL)中的混合物中添加1-溴-2-(三氟甲氧基)乙烷(252mg,1.31mmol)和K₂CO₃(362mg,2.62mmol)。将混合物在50℃下搅拌1小时。将反应混合物用H₂O(15mL)稀释，并且将水相用EA(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤。在真空中浓缩产生呈白色固体的1-(2-(三氟甲氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸甲酯(170mg,81.8％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝238.95；HPLC tR＝0.742min。

1-(2-(三氟甲氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸

步骤2.向可再密封反应小瓶中装入1-(2-(三氟甲氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸甲酯(160mg,0.67mmol)和NaOH(54mg,1.34mmol)、MeOH(4mL)以及搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物用H₂O(15mL)稀释，并且将水相用EA(30mL)萃取三次。用1M HCl将水层的pH值调整至1～3。将水层用3×30mL乙酸乙酯萃取。将有机层合并，用盐水洗涤，干燥。在真空中浓缩产生呈白色固体的1-(2-(三氟甲氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸(100mg,66.4％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝224.95；HPLC tR＝0.458min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-(2-(三氟甲氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤3.在0℃下在氮气气氛下向1-(2-(三氟甲氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸(91mg,0.41mmol)于EA(5mL)中的混合物中添加(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(110mg,0.34mmol)和DIEA(441mg,3.41mmol)，接着滴加T₃P(2.6g，50wt，2.04mmol，于EA中)。将混合物在80℃下搅拌2.5h。将反应混合物用H₂O(15mL)稀释，并且将水相用EA(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤。在真空中浓缩产生呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-(2-(三氟甲氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(150mg,83.2％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝529.15；HPLC tR＝0.783min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-(2-(三氟甲氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤4.向可再密封反应小瓶中装入(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-(1-(2-(三氟甲氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(145mg,0.27mmol)、FA(6mL)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次，并且将混合物在75℃下搅拌1.5小时。将反应物在真空中浓缩。将所得粗制材料通过制备型HPLC(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃+0.1％NH₃.H₂O)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内20％ B至40％ B，40％ B；波长：254nm；RT1(min)：7.57)纯化。冻干得到呈白色非晶形固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-(1-(2-(三氟甲氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(72.1mg,55.6％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝473.35；HPLC tR＝0.687min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.39(s,1H),10.49(s,1H),8.41(s,1H),8.13(s,1H),7.53(s,1H),6.54(s,1H),5.16(s,1H),4.81(s,1H),4.51-4.44(m,4H),3.84(s,2H),2.75(s,1H),1.91(s,1H),1.25(s,3H),0.61(s,2H),0.48(s,2H)。

根据实施例45的方法制备的额外化合物绘示于下表16中。

表16.额外示例性化合物

实施例46

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-((三氟甲氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

4-溴-2-(溴甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪

步骤1.在0℃下在氮气气氛下向(4-氯吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)甲醇(2g,1Eq,0.01mol)于MeCN(20mL)中的搅拌溶液中添加PBr3(4g,2mL,1.5Eq,0.02mol)。将所得混合物在70℃下搅拌1小时。将混合物调整至PH＝7并用EtOAc(3×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(1×40mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥。在过滤后，将滤液在减压下浓缩，得到呈黄色固体的4-溴-2-(溴甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(1.5g,5.2mmol,50％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝290.80；HPLC tR＝0.850min。

4-溴-2-((三氟甲氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪

步骤2.在-30C下在氮气气氛下向氟化银(2.0g,0.34mL,3Eq,15mmol)于MeCN(30mL)中的搅拌溶液中添加三氟甲磺酸三氟甲酯(4.5g,4Eq,21mmol)。将混合物在-30C下搅拌1h。接着添加4-溴-2-(溴甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(1.5g,1Eq,5.2mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌16小时。将所得混合物过滤。将残余物通过硅胶色谱法利用以下条件纯化：于PE中的EtOAc，20min内0％至25％梯度，得到呈黄色油状物的4-溴-2-((三氟甲氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(600mg,2.03mmol,39％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝295.80；HPLC tR＝0.848min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-((三氟甲氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤3.在室温下在氮气气氛下向(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(327mg,1Eq,1.01mmol)于1,4-二噁烷(3mL)中的搅拌溶液中添加4-溴-2-((三氟甲氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪(300mg,1Eq,1.01mmol)、K₂CO₃(420mg,3Eq,3.04mmol)、xantphos(235mg,0.4Eq,405μmol)、Pd₂(dba)₃(186mg,0.2Eq,203μmol)。将所得混合物在60℃下搅拌1小时。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内10％至90％梯度；检测器，UV 254nm。在真空中浓缩产生呈黄色油状物的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-((三氟甲氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(160mg,298μmol,29.4％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝538.15；HPLC tR＝0.888min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-((三氟甲氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤4.向(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-((三氟甲氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(150mg,1Eq,279μmol)中添加FA(3mL)。将反应物在70℃下搅拌1小时。将混合物浓缩并通过制备型HPLC(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：8min内18％ B至40％ B，40％ B；波长：254nm；RT1(min)：6.65)纯化。冻干得到呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-((三氟甲氧基)甲基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(12.5mg,26.0μmol,9.30％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝482.20；HPLC tR＝0.696min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)12.39(s,1H),10.16(s,1H),8.10(s,1H),7.58-7.21(m,3H),6.80(s,1H),5.35(s,2H),5.17(s,1H),4.92(d,J＝49.7Hz,1H),3.86(s,2H),2.73(dd,J＝14.7,7.2Hz,1H),1.96(d,J＝11.2Hz,1H),1.25(s,3H),0.60(d,J＝5.3Hz,2H),0.48(q,J＝4.5Hz,2H)。

根据实施例46的方法制备的额外化合物绘示于下表16中。

表16.额外示例性化合物

实施例47

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3S,5S)-5-(2-(3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)噻唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(2-(3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)噻唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

(5-(1-羟基丁-3-炔-1-基)噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯

步骤1.向配备有出口的干燥三颈瓶(tricol flask)中装入活化锌(1.75g,26.3mmol)并且在氩气下添加无水THF(60.0mL)。在室温下添加80％炔丙基溴于甲苯中的溶液(2.83mL,26.3mmol)。接着将混合物冷却至0-5℃并且缓慢添加氯化钛(IV)于DCM中的1M溶液(438uL,438μmol)。(注意：混合物变得温热并且释放蒸气)。进行缓慢添加以容许蒸气排出烧瓶。一旦添加完成，就移除冰浴并且将混合物搅拌20分钟。接着在室温下历经20分钟滴加(5-甲酰基噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯(2.00g,8.76mmol)于THF(24.0mL)中的溶液并且将混合物搅拌2h。将混合物倒入冰/饱和NH₄Cl溶液(30mL)中并且添加EtOAc(70mL)并且将混合物搅拌5分钟。接着将过量锌通过经硅藻土过滤加以去除并用EtOAC(30mL)冲洗。将有机相用饱和NaHCO₃溶液(20mL)、盐水(10mL,2X)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。添加己烷(20mL)并且将混合物在减压下浓缩。将此过程重复3次。接着添加醚(20mL)并且对混合物进行声波处理，接着在冰箱中静置3-4小时。接着去除黄色液相并且将混合物在减压下浓缩，接着经泵干燥，得到呈淡黄色固体的标题化合物(1.8g,77％)。ESI-MS(m/z+):213.1[M+H]。Rf(50％ EtOAc/己烷)：0.23。¹H NMR(400MHz,CDCl3):δ10.48(br s；1H)；7.29(s；1H)；5.07(q；J＝5.38Hz；1H)；2.76(dd；J＝6.13；2.62Hz；2H)；2.45(d；J＝4.56Hz；1H)；2.14(t；J＝2.58Hz；1H)；1.57(s；9H)。

(5-(4-氧代四氢呋喃-2-基)噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯

步骤2.向干燥小瓶中装入(5-(1-羟基丁-3-炔-1-基)噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1.50g,5.59mmol)并且在氩气下添加DCE(121mL)。接着添加2-溴吡啶1-氧化物(1.95g,11.2mmol)。混合物变得更易溶。一次性添加甲磺酸(33.5mL,6.71mmol)。获得溶液。接着在氩气下一次性添加双(三氟甲磺酰基)亚氨酸三苯基膦金(I)(211mg,280μmol)并且将溶液在室温下搅拌3h。接着将混合物在减压下浓缩。添加EtOAc(70mL)和饱和NaHCO₃溶液(30mL)。分离各相并且将水相用EtOAc(30mL,2X)萃取。将合并的有机相用水(20mL)、盐水(10mL)洗涤，接着经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。将混合物经25g硅胶柱，使用EtOAc于己烷中的混合物梯度(0-60％)纯化。经纯化化合物含有一些杂质，因此将其用醚湿磨。收集固体并且将其置于泵上，得到呈淡黄色固体的标题化合物(760mg,48％)。ESI-MS(m/z+):229.0[M+H-tBu]。Rf：0.32(50％ EtOAc的己烷溶液)。¹H NMR(400MHz,CDCl3):δ10.91(s；1H)；7.29(s；1H)；5.51(t；J＝7.38Hz；1H)；3.98-4.18(m；2H)；2.87-2.93(m；1H)；2.66(dd；J＝17.90；8.06Hz；1H)；1.58(s；9H)。

外消旋(5-((2S,4S)-4-羟基四氢呋喃-2-基)噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯

步骤3.在-65℃下在氩气下向(5-(4-氧代四氢呋喃-2-基)噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯(700mg,2.46mmol)于无水THF(10.0mL)中的溶液中滴加于THF中的1M Super-Hydride溶液(3.69mL,3.69mmol)并且将混合物在-65℃至-70℃下搅拌1h。接着将混合物倒入冰/水/饱和NH₄Cl溶液(20mL)中并用EtOAc(100mL)萃取。接着将有机相用饱和NaHCO₃溶液(20mL)洗涤，接着用盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。将粗制化合物经硅胶柱，使用EtOAC于己烷中的混合物(0-100％)纯化，得到呈白色固体的标题化合物(550mg,78％)。ESI-MS(m/z+):231.1(主峰[M+H-tBu]),287.1[M+H]。Rf：0.65(10％ MeOH的DCM溶液)。¹H NMR(400MHz,CDCl3):δ11.20(br s；1H)；7.26(s；1H)；5.11(t；J＝7.16Hz；1H)；4.57(br s；1H)；3.97-3.99(m；1H)；3.87(dd；J＝9.88；4.36Hz；1H)；2.61-2.68(m；1H)；2.07(dd；J＝13.97；5.66Hz；1H)；1.80-1.82(m；1H)；1.57(s；9H)。

外消旋((5-((2S,4S)-4-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)四氢呋喃-2-基)噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯

步骤4.在0℃下向外消旋(5-((2S,4S)-4-羟基四氢呋喃-2-基)噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯(500mg,1.75mmol)于DCM(6mL)中的搅拌溶液中添加吡啶(414mg,5.24mmol)和DMAP(42.7mg,349μmol)。在N₂下向以上反应物中添加氯甲酸4-硝基苯基酯(528mg,2.62mmol)。将反应物在25℃下搅拌16小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内40％至70％梯度；检测器，UV 254nm。在真空中浓缩产生呈白色油状物的外消旋((5-((2S,4S)-4-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)四氢呋喃-2-基)噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯(750mg，1.5mmol，88％，92％纯度))。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝452.25；HPLC tR＝0.915min。

外消旋(5-((2S,4S)-4-(((1-甲基环丙基)氨基甲酰基)氧基)四氢呋喃-2-基)噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯

步骤5.向圆底烧瓶中装入外消旋(5-((2S,4S)-4-(((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)四氢呋喃-2-基)噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯(750mg,1.66mmol)、DIEA(429mg,3.32mmol)、1-甲基环丙-1-胺盐酸盐(715mg,6.65mmol)、THF(10mL)和搅拌棒。将溶液在25℃下在氮气气氛下搅拌16h。LCMS显示反应完成。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，15min内30％至60％梯度；检测器，UV 254nm。在真空中浓缩产生呈浅黄色油状物的外消旋(5-((2S,4S)-4-(((1-甲基环丙基)氨基甲酰基)氧基)四氢呋喃-2-基)噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯(450mg，1.1mmol，65％，92％纯度)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝384.35；HPLC tR＝0.790min。

外消旋(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3S,5S)-5-(2-氨基噻唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤6.向圆底烧瓶中装入外消旋(5-((2S,4S)-4-(((1-甲基环丙基)氨基甲酰基)氧基)四氢呋喃-2-基)噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯(350mg,913μmol)和搅拌棒。添加TFA(3mL)，并且将溶液在25℃下搅拌15min。将混合物用饱和NaHCO₃溶液中和至pH 7。将反应混合物用水(10mL)稀释，并且将水相用EA(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩，得到呈白色固体的外消旋(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3S,5S)-5-(2-氨基噻唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(250mg,882μmol,96.7％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝284.20；HPLC tR＝0.464min。

外消旋(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3S,5S)-5-(2-(3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)噻唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤7.在0℃下在氮气气氛下向3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸锂(56mg,0.32mmol)、外消旋(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3S,5S)-5-(2-氨基噻唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(75mg,0.26mmol)和DIEA(0.44g,3.4mmol)于EA(3mL)中的混合物中滴加2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(0.84g,50％Wt,1.3mmol)。将混合物在25℃下搅拌3h。将反应混合物用水(7mL)稀释，并且将水相用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过制备型TLC(EA/DCM；比率：15/1)纯化，得到呈白色固体的外消旋(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3S,5S)-5-(2-(3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)噻唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(50mg,0.11mmol,43％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝436.30；HPLC tR＝0.710min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3S,5S)-5-(2-(3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)噻唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(2-(3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)噻唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤8.将外消旋(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3S,5S)-5-(2-(3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)噻唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(50mg,1Eq,0.11mmol)通过手性分离(HPLC)利用以下条件(柱：DZ-CHIRALPAK IG-3，4.6*50mm，3.0μm；流动相A：Hex(0.2％DEA):(EtOH:DCM＝1:1)＝60:40；流量：1mL/min；梯度：0％ B至0％ B；注入体积：5ul mL)分离，得到呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3S,5S)-5-(2-(3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)噻唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(9.5mg，20μmol，34％，90.3％纯度)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝436.25；HPLC tR＝1.255min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)12.62(s,1H),7.56(s,2H),7.28(s,1H),5.17(s,1H),5.04(t,J＝7.4Hz,1H),4.37(s,2H),4.11(s,3H),3.85(m,2H),3.28(s,3H),2.76(dt,J＝14.4,7.5Hz,1H),1.88(d,J＝11.3Hz,1H),1.25(d,J＝6.3Hz,3H),0.63(s,2H),0.49(s,2H)。

将外消旋(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3S,5S)-5-(2-(3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)噻唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(50mg,0.11mmol)通过手性分离(HPLC)利用以下条件(柱：DZ-CHIRALPAK IG-3，4.6*50mm，3.0μm；流动相A：Hex(0.2％ DEA):(EtOH:DCM＝1:1)＝60:40；流量：1mL/min；梯度：0％ B至0％ B；注入体积：5ul mL)分离，得到呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(2-(3-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺基)噻唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(9.3mg，21μmol，18％，97.7％纯度)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝436.20；HPLC tR＝1.250min ¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)12.62(s,1H),7.56(s,2H),7.28(s,1H),5.17(s,1H),5.04(t,J＝7.6Hz,1H),4.36(s,2H),4.10(s,3H),3.85(m,2H),3.27(s,3H),2.75(dt,J＝14.4,7.5Hz,1H),1.89(t,J＝11.0Hz,1H),1.25(d,J＝6.9Hz,3H),0.64(s,2H),0.50(q,J＝4.1Hz,2H)。

实施例48

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-(甲氧基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5S)-5-(3-((2-(甲氧基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

7-氯-5-羟基咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-甲酸乙酯

步骤1.向圆底烧瓶中装入2,6-二氯嘧啶-4-胺(3g,0.02mol)、3-溴-2-氧代丙酸乙酯(9g,0.05mol)和搅拌棒。添加AcOH(32mL)，并且将溶液在120℃下搅拌3小时。将混合物在真空中浓缩。将混合物的pH值调整至6-7。将水相用DCM(50mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(10g柱；用DCM/MEOH(比率：30/1)洗脱)纯化。在真空中浓缩。将沉淀固体通过过滤收集并用EA(20mL)洗涤，得到呈浅粉色固体的7-氯-5-羟基咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-甲酸乙酯(1.09g,4.51mmol,20％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝242.05；HPLC tR＝0.467min。

5-羟基咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-甲酸乙酯

步骤2.在25℃下将7-氯-5-羟基咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-甲酸乙酯(1.09g,4.51mmol)和Pd/C(120mg,1.13mmol)于MeOH(15mL)中的搅拌混合物用H₂处理1小时。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，将所述垫用MeOH(50ml)洗涤，并且将滤液在真空中浓缩，得到呈黄色固体的5-羟基咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-甲酸乙酯(910mg,4.39mmol,97.4％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝208.05；HPLC tR＝0.615min。

2-(羟基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-醇

步骤3.在0℃下在氮气气氛下向5-羟基咪唑并[1,2-c]嘧啶-2-甲酸乙酯(500mg,2.41mmol)于THF(15mL)中的混合物中滴加LAH(3.62mL于THF中的1M溶液，3.62mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将混合物用Na₂SO₄·10H₂O淬灭。将反应混合物过滤，将垫用微热DCM/MeOH＝4/1(100ml)和MeOH/H₂O＝4/1(100ml)洗涤，并且将滤液在真空中浓缩，得到呈褐色固体的2-(羟基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-醇(480mg,2.91mmol，粗品)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝166.05；HPLC tR＝0.233min。

2-(氯甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-醇

步骤4.向圆底烧瓶中装入2-(羟基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-醇(2.7g,16mmol)、SOCl₂(19g,12mL,0.16mol)、DMF(0.01mL)、甲苯(30mL)和搅拌棒。将溶液在110℃下搅拌5小时。将混合物在真空中浓缩，得到呈褐色固体的2-(氯甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-醇(2.1g,11mmol，粗品)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝184.00；HPLC tR＝0.565min。

2-(甲氧基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-醇

步骤5.向圆底烧瓶中装入2-(氯甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-醇(2.1g,11mmol)、甲醇钠(10g,11mL,30％ Wt,57mmol)和搅拌棒。添加MeOH(40mL)，并且将溶液在25℃下搅拌16小时。将混合物在真空中浓缩。用2M HCl将混合物的pH值调整至6-7。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，25min内0％至20％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈白色非晶形固体的2-(甲氧基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-醇(380mg,2.12mmol,19％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝180.05；HPLC tR＝0.432min

5-氯-2-(甲氧基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶

步骤6.向圆底烧瓶中装入2-(甲氧基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-醇(380mg,2.12mmol)、DIEA(5.48g,7.39mL,42.4mmol)、POCl₃(25mL)和搅拌棒。将溶液在100℃下搅拌6小时。将混合物在真空中浓缩。用NaHCO₃将混合物的pH值调整至6-7。将反应混合物用水(20mL)稀释，并且将水相用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，18min内0％至50％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈白色固体的5-氯-2-(甲氧基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶(320mg,1.62mmol,76.4％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝198.00；HPLC tR＝0.656min

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(甲氧基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤7.向可再密封反应小瓶中装入(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(5-氨基-1-(叔丁基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(475mg,1.47mmol)、5-氯-2-(甲氧基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶(320mg,1.62mmol)、xantphos(426mg,736μmol)、Pd₂(dba)₃(270mg,294μmol)、K₂CO₃(610mg,4.42mmol)和搅拌棒，接着抽空并用氮气吹扫三次。添加1,4-二噁烷(8mL)，并且将混合物在80℃下搅拌12小时。将混合物用水(20mL)淬灭，并且将水相用EA(30mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过反相快速色谱法利用以下条件纯化：柱，C18硅胶；流动相，于水中的MeCN，18min内0％至80％梯度；检测器，UV 254nm，得到呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(甲氧基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(260mg,538μmol,36.5％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝484.30；HPLC tR＝0.913min。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-(甲氧基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5S)-5-(3-((2-(甲氧基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯

步骤8.向圆底烧瓶中装入(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(1-(叔丁基)-5-((2-(甲氧基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-3-基)四氢呋喃-3-基酯(300mg,620μmol)和搅拌棒。添加HCOOH(8mL)，并且将溶液在100℃下搅拌5小时。将混合物的pH值调整至6-7。将水相用EA(20mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩。将所得粗制材料通过制备型HPLC(柱：XBridge Shield RP18OBD柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流量：60mL/min；梯度：11min内6％ B至32％ B，12min内32％ B至40％ B，40％ B；波长：220nm；RT1(min)：10.47/11.2)纯化。冻干得到呈白色固体的(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-(甲氧基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(49.2mg,115μmol,18.6％)和(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5S)-5-(3-((2-(甲氧基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯(57.4mg,134μmol,21.6％)。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5R)-5-(3-((2-(甲氧基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯：m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝428.20；HPLC tR＝1.218min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.51(s,1H),10.12(s,1H),8.31(s,1H),7.59(d,J＝37.8Hz,2H),7.08(d,J＝130.3Hz,1H),6.67(d,J＝245.9Hz,1H),5.17(s,1H),4.86(s,1H),4.50(s,2H),3.85(d,J＝5.0Hz,2H),3.35(s,3H),2.69(d,J＝14.6Hz,1H),2.02(d,J＝50.7Hz,1H),1.24(s,3H),0.60(d,J＝5.1Hz,2H),0.52-0.36(m,2H)。

(1-甲基环丙基)氨基甲酸(3R,5S)-5-(3-((2-(甲氧基甲基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)氨基)-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-3-基酯：m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝428.20；HPLC tR＝1.306min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.57(s,1H),10.13(s,1H),8.31(s,1H),8.02-7.14(m,2H),6.92(d,J＝6.4Hz,1H),6.69(d,J＝251.5Hz,1H),5.25(s,1H),5.03(s,1H),4.50(s,2H),4.13(d,J＝15.7Hz,1H),3.74(d,J＝10.3Hz,1H),3.36(s,3H),2.30(d,J＝24.5Hz,2H),1.27(s,3H),0.69-0.59(m,2H),0.51(d,J＝5.3Hz,2H)。

根据实施例48的方法制备的额外化合物绘示于下表17中。

表17.额外示例性化合物

实施例49

在CDK2/周期蛋白E的基于荧光的微流体迁移率变动测定(PerkinElmer)中测试本公开的化合物。

活性野生型CDK2/周期蛋白E复合物购自Eurofins(14-475)。在DMSO中制备化合物储备溶液，并且将其通过3倍稀释连续稀释成11种浓度。将200nL化合物转移至384孔板(Greiner,781201)中的个别孔中，接着添加含有于1x反应缓冲液中的0.13nM CDK2/周期蛋白E和2660uM ATP的15uL 1.3×酶和ATP的溶液，所述反应缓冲液含有10mM Hepes pH 7.5、0.01％ Brij-35、10mM MgCl₂、1mM EGTA、0.05％ BSA和2mM DTT。在CDK2/周期蛋白E复合物和ATP存在下将化合物在室温下温育30分钟。通过添加含有于1x反应缓冲液中的6uM荧光标记底物肽(FL肽18(氨基酸序列5-FAM-QSPKKG，PerkinElmer，760362))的5uL 4x肽溶液来起始催化反应。

最终反应组分为0.1nM CDK2/周期蛋白E、2000μM ATP和1.5μM FL肽18和1％DMSO。将反应物在室温下温育20小时，并用75uL含有0.5M EDTA的终止溶液使其结束。使用LabChip EZ读取器(PerkinElmer)分析样品。

CDK2生化Caliper测定结果呈现于表1中。将具有小于或等于100nM的IC₅₀的化合物表示为“A”；将具有大于100nM但小于或等于250nM的IC₅₀的化合物表示为“B”；将具有大于250nM但小于或等于1μM的IC₅₀的化合物表示为“C”；并且将具有大于1μM但小于或等于100μM的IC₅₀的化合物表示为“D”。

实施例50

也在nanoBRET TE细胞内激酶测定中测试了本文所述的化合物。在DMSO储备溶液中制备测试化合物。将45uL储备溶液转移至384孔板(Greiner,781201)中，并且实施3倍11点稀释。在细胞生长培养基(DMEM+10％ FBS+1％青霉素/链霉素培养基)中稀释表达经nanoLuciferase标记的靶标的293-NB2细胞并且将7.5E4个细胞/mL的40uL细胞溶液接种于单独的384孔细胞培养板中，并且在37℃/5％CO₂/100％湿度下温育过夜。将2uL 20X完全NanoBRET K-10示踪剂(Promega NanoBRET)添加至细胞板的除对照孔外的每个孔中。通过Echo550液体处理器将80nL每个浓度的化合物从化合物板转移至细胞培养板中的对应孔中。将板在37℃/5％ CO₂/100％湿度下温育2小时。将20uL 3X完全Nano-Glo底物和ECDNanoLuc抑制剂(Promega NanoBRET)添加至每个孔中。接着在EnVision读取器(PerkinElmer)上读取化学发光。

Cell nanoBRET测定结果呈现于表1中。将具有小于或等于100nM的IC₅₀的化合物表示为“A”；将具有大于100nM但小于或等于250nM的IC₅₀的化合物表示为“B”；将具有大于250nM但小于或等于1μM的IC₅₀的化合物表示为“C”；并且将具有大于1μM但小于或等于100μM的IC₅₀的化合物表示为“D”。

实施例51

也在细胞增殖选择性测定中测试了本文所述的化合物。从ATCC获得OVCAR3、HCC1569和SKOV3细胞系并且按照供应商的推荐进行培养。从Sigma-Aldrich获得COV318、COV504和COV644细胞系并且按照供应商的推荐进行培养。使用可公开获得的数据库(cBioPortal和DepMap)确定每个细胞系的遗传背景和依赖性。发现针对CCNE1扩增的细胞系(COV318、OVCAR3和HCC1569)依赖于CDK2，而发现对于CCNE1为野生型的细胞系(SKOV3、COV504、COV644)不依赖于CDK2。鉴于CDK1是必需基因，所有六种细胞系都是CDK1依赖性的。通过将细胞在对应培养基中以预定密度(每孔150至1500个细胞范围)接种至384孔板中，接着以1000x g短暂离心，并且将细胞在37℃、5％ CO₂下培养24小时来实施增殖测定。第二天，将化合物连续稀释(11点、3倍稀释方案，最高浓度为20μM)，并且使用Echo 555声学液体处理器(Labcyte)将其直接分配至细胞上。将细胞与化合物在37℃、5％ CO₂下温育120小时。使用CyQUANT直接细胞增殖测定试剂盒(Invitrogen)，依照制造商方案确定每个孔中活细胞的相对数目。在使用FITC滤器组的EnVision 2105多模式读板仪(Perkin Elmer)上读取板。使用Genedata Screener软件进行剂量反应曲线拟合和IC₅₀计算。个别化合物的增殖选择性(即选择性指数)作为其每个CDK2非依赖性细胞系与CDK2依赖性细胞系之间的IC₅₀比率的平均值来推导。

示例性化合物的增殖选择性指数值示于下表18中。如本领域技术人员所了解，增殖选择性指数的量值的小的增加可指示实质性提高的用于治疗CDK2介导的病症的治疗指数。

表18.示例性化合物的增殖选择性指数值

通过引用并入

本文所提及的所有出版物和专利都出于所有目的特此通过引用整体并入，如同每一个别出版物或专利明确地且单独地通过引用并入一般。如果出现冲突，则将以本申请(包括本文任何定义)为准。

等同物

尽管已讨论了本公开的特定实施方案，但上述说明书是说明性的而并非限制性的。在审阅本说明书后，本公开的许多变化对于本领域技术人员而言将变得显而易见。本公开的全部范围应通过参考权利要求连同其等同物的全部范围以及说明书连同此类变化来确定。

除非另有指示，否则用于说明书和权利要求书中的表示成分、反应条件等的量的所有数字都应理解为在所有情况下都由术语“约”修饰。因此，除非指示相反情况，否则本说明书和所附权利要求中所述的数值参数是可根据本公开所寻求获得的期望性质而变化的近似值。

Claims (28)

1.一种式I-A化合物，

或其药学上可接受的盐，其中：

Q是L¹；

Cy^A是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元亚杂芳基；其中Cy^A除Q和Cy^B之外也被R^A的m个实例取代；

Cy^B是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；亚苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元亚杂芳基；其中Cy^B除Cy^A和Z之外也被R^B的n个实例取代；

Z是氢或L²-R^Z；

R^Z是氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-8脂族基、饱和或部分不饱和3-14元碳环、苯基、具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-10元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元杂芳基环；

W是氢或Cy^C；

Cy^C是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元杂芳基；其中Cy^C除Q之外也被R^C的p个实例取代；

R^A、R^B和R^C的每个实例独立地为R¹或R²，其中R^A被R³的q^A个实例取代，R^B被R³的q^B个实例取代，并且R^C被R³的q^C个实例取代；或

R^A的两个实例、R^B的两个实例、R^C的两个实例、R^A的一个实例和R^L的一个实例、或R^C的一个实例和R^L的一个实例与其间插原子一起形成具有0-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-8元饱和、部分不饱和或芳族环；其中所述环被R³的r个实例取代；

L¹和L²中的每一者独立地为共价键、或C_1-5饱和或不饱和、直链或支链烃链，其中所述链的一个或两个亚甲基单元任选地且独立地被以下基团代替：-CH(R^L)-、-C(R^L)₂-、C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基、5-6元亚杂芳基、-NH-、-N(R^L)-、-NHC(O)-、-N(R^L)C(O)-、-C(O)NH-、-C(O)N(R^L)-、-NHS(O)₂-、-N(R^L)S(O)₂-、-S(O)₂NH-、-S(O)₂N(R^L)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-S-、-S(O)-或-S(O)₂-；其中所述C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基和5-6元亚杂芳基中的每一者任选地被R¹的一个实例或C_1-6脂族基取代；

R^L的每个实例独立地为R¹或R²，并且被R³的t个实例取代；

R¹的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R或-N(R)S(O)₂R；

R²的每个实例独立地为C_1-7脂族基；苯基；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元单环杂芳基环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的8-10元二环杂芳基环；3-7元饱和或部分不饱和碳环；具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和单环杂环；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的7-12元饱和或部分不饱和二环杂环；

R³的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-S(O)₂F、-OS(O)₂F、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R、-N(R)S(O)₂R或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环；

每个R独立地为氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、饱和或部分不饱和3-7元碳环、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环，或：

同一氮上的两个R基团与其间插原子一起形成除所述氮之外还具有0-3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-7元饱和、部分不饱和或杂芳基环；并且

m、n、p、q^A、q^B、q^C、q^Z、r和t中的每一者独立地为0、1、2、3或4。

2.如权利要求1所述的化合物，其中W是氢。

3.如权利要求1所述的化合物，其中W是Cy^C。

4.如权利要求1-3中任一项所述的化合物，其中Z选自-OR^Z、-NHR^Z-、-SR^Z、-NHC(O)NHR^Z、-OC(O)NHR^Z和-NHC(O)OR^Z。

5.如权利要求1-4中任一项所述的化合物，其中R^Z是选自C_1-6脂族基和饱和或部分不饱和3-7元碳环的任选地被取代的基团。

6.一种式I化合物，

或其药学上可接受的盐，其中：

Q是L¹；

Cy^A是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元亚杂芳基；其中Cy^A除Q和Cy^B之外也被R^A的m个实例取代；

Cy^B是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；亚苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元亚杂芳基；其中Cy^B除Cy^A和P之外也被R^B的n个实例取代；

P是氢或-L²-R^P；

R^P是R；

Cy^C是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元杂芳基；其中Cy^C除Q之外也被R^C的p个实例取代；

R^A、R^B和R^C的每个实例独立地为R¹或R²，其中R^A被R³的q^A个实例取代，R^B被R³的q^B个实例取代，并且R^C被R³的q^C个实例取代；或

R^A的两个实例、R^B的两个实例、R^C的两个实例、R^A的一个实例和R^L的一个实例、或R^C的一个实例和R^L的一个实例与其间插原子一起形成具有0-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-8元饱和、部分不饱和或芳族环；其中所述环被R³的r个实例取代；

L¹和L²中的每一者独立地为共价键、或C_1-5饱和或不饱和、直链或支链烃链，其中所述链的一个或两个亚甲基单元任选地且独立地被以下基团代替：-CH(R^L)-、-C(R^L)₂-、C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基、5-6元亚杂芳基、-NH-、-N(R^L)-、-NHC(O)-、-N(R^L)C(O)-、-C(O)NH-、-C(O)N(R^L)-、-NHS(O)₂-、-N(R^L)S(O)₂-、-S(O)₂NH-、-S(O)₂N(R^L)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-S-、-S(O)-或-S(O)₂-；其中所述C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基和5-6元亚杂芳基中的每一者任选地被R¹的一个实例或C_1-6脂族基取代；

R^L的每个实例独立地为R¹或R²，并且被R³的t个实例取代；

R¹的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R、-N(R)S(O)₂R；

R²的每个实例独立地为C_1-7脂族基；苯基；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元单环杂芳基环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的8-10元二环杂芳基环；3-7元饱和或部分不饱和碳环；具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和单环杂环；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的7-12元饱和或部分不饱和二环杂环；

R³的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-S(O)₂F、-OS(O)₂F、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R、-N(R)S(O)₂R或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环；

每个R独立地为氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、饱和或部分不饱和3-7元碳环、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环，或：

同一氮上的两个R基团与其间插原子一起形成除所述氮之外还具有0-3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-7元饱和、部分不饱和或杂芳基环；并且

m、n、p、q^A、q^B、q^C、r和t中的每一者独立地为0、1、2、3或4。

7.一种式II、III、IV、V、VI或VII的化合物，

或其药学上可接受的盐，其中：

Q是L¹；

Cy^A是具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元亚杂芳基；其中Cy^A除Q和Cy^B之外也被R^A的m个实例取代；

Cy^B是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；亚苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元亚杂芳基；其中Cy^B除Cy^A和P或X之外也被R^B的n个实例取代；

X选自O、NR^X和S；

Y选自O、NR^Y和S；

R^X和R^Y的每个实例独立地为R；

P是氢或-L²-R^P；

R^P是R；

Cy^C是饱和或部分不饱和3-14元碳环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的饱和或部分不饱和3-14元杂环；苯基；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-14元杂芳基；其中Cy^C除Q之外也被R^C的p个实例取代；

R^A、R^B和R^C的每个实例独立地为R¹或R²，其中R^A被R³的q^A个实例取代，R^B被R³的q^B个实例取代，并且R^C被R³的q^C个实例取代；或

R^A的两个实例、R^B的两个实例、R^C的两个实例、R^A的一个实例和R^L的一个实例、或R^C的一个实例和R^L的一个实例与其间插原子一起形成具有0-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-8元饱和、部分不饱和或芳族环；其中所述环被R³的r个实例取代；

L¹和L²中的每一者独立地为共价键、或C_1-5饱和或不饱和、直链或支链烃链，其中所述链的一个或两个亚甲基单元任选地且独立地被以下基团代替：-CH(R^L)-、-C(R^L)₂-、C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基、5-6元亚杂芳基、-NH-、-N(R^L)-、-NHC(O)-、-N(R^L)C(O)-、-C(O)NH-、-C(O)N(R^L)-、-NHS(O)₂-、-N(R^L)S(O)₂-、-S(O)₂NH-、-S(O)₂N(R^L)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-S-、-S(O)-或-S(O)₂-；其中所述C_3-6亚环烷基、3-6元亚杂环烷基和5-6元亚杂芳基中的每一者任选地被R¹的一个实例或C_1-6脂族基取代；

R^L的每个实例独立地为R¹或R²，并且被R³的t个实例取代；

R¹的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R或-N(R)S(O)₂R；

R²的每个实例独立地为C_1-7脂族基；苯基；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元单环杂芳基环；具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的8-10元二环杂芳基环；3-7元饱和或部分不饱和碳环；具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和单环杂环；或具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的7-12元饱和或部分不饱和二环杂环；

R³的每个实例独立地为氧代基、卤素、-CN、-NO₂、-OR、-SR、-NR₂、-S(O)₂R、-S(O)₂NR₂、-S(O)R、-S(O)NR₂、-S(O)₂F、-OS(O)₂F、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NR₂、-C(NR)NR₂、-C(O)N(R)OR、-OC(O)R、-OC(O)NR₂、-N(R)C(O)OR、-N(R)C(O)R、-N(R)C(NR)R、-N(R)C(O)NR₂、-N(R)C(NR)NR₂、-N(R)S(O)₂NR₂、-N(R)S(O)R、-N(R)S(O)₂R或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环；

每个R独立地为氢或选自以下的任选地被取代的基团：C_1-6脂族基、饱和或部分不饱和3-7元碳环、苯基、具有1-2个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的3-7元饱和或部分不饱和杂环，以及具有1-4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环，或：

同一氮上的两个R基团与其间插原子一起形成除所述氮之外还具有0-3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的4-7元饱和、部分不饱和或杂芳基环；并且

m、n、p、q^A、q^B、q^C、r和t中的每一者独立地为0、1、2、3或4。

8.如权利要求1或2-7中任一项所述的化合物，其中Cy^C是具有1-3个选自氮、氧和硫的杂原子的5-6元杂芳基环。

9.如权利要求1-8中任一项所述的化合物，其中Q是选自-NH-、其中表示与Cy^A的共价键并且表示与W或Cy^C的共价键。

10.如权利要求1-9中任一项所述的化合物，其中Q是-NH-。

11.如权利要求1-10中任一项所述的化合物，其中Cy^A是具有1-4个选自氮、氧和硫的杂原子的亚杂芳基。

12.如权利要求1-11中任一项所述的化合物，其中Cy^A选自：

其中表示与Q的共价键并且表示与Cy^B的共价键。

13.如权利要求1-12中任一项所述的化合物，其中Cy^B是二价3-7元饱和或部分不饱和碳环。

14.如权利要求1-12中任一项所述的化合物，其中Cy^B选自：

其中表示与Cy^A的共价键并且表示与P、X或Z的共价键。

15.如权利要求1-14中任一项所述的化合物，其中R^B选自-CH₃、-CH₂CH₃、-CH(CH₃)₂、

16.如权利要求1-15中任一项所述的化合物，其中n是0、1、2、3或4。

17.如权利要求2-16中任一项所述的化合物，其中P选自-OR^P、-NHR^P-、-SR^P、-NHC(O)NHR^P、-OC(O)NHR^P和-NHC(O)OR^P。

18.如权利要求2-17中任一项所述的化合物，其中R^P是选自C_1-6脂族基和饱和或部分不饱和3-7元碳环的任选地被取代的基团。

19.如权利要求1-18中任一项所述的化合物，其中所述化合物选自表1中所绘示的那些，或其药学上可接受的盐。

20.一种药物组合物，所述药物组合物包含权利要求1-19中任一项所述的化合物和药学上可接受的载体。

21.一种抑制受试者的CDK2信号传导活性的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的权利要求1-19中任一项所述的化合物或权利要求20所述的药物组合物。

22.一种治疗受试者的CDK2介导的病症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的权利要求1-19中任一项所述的化合物或权利要求20所述的药物组合物。

23.一种治疗受试者的病症的方法，其中所述病症是卵巢癌、子宫内膜癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌、宫颈癌、胃部癌症、肉瘤癌、肝癌、食道癌、喉癌、多发性骨髓瘤、结直肠癌、直肠癌、皮肤癌或胰腺癌，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的权利要求1-19中任一项所述的化合物或权利要求20所述的药物组合物。

24.如权利要求23所述的方法，其中所述膀胱癌是尿路上皮癌。

25.如权利要求23所述的方法，其中所述肝癌是肝细胞癌。

26.如权利要求23所述的方法，其中所述肺癌是肺鳞状细胞癌或非小细胞肺癌。

27.如权利要求23所述的方法，其中所述喉癌是喉鳞状细胞癌。

28.如权利要求23所述的方法，其中所述皮肤癌是黑色素瘤。