CN1168499C

CN1168499C - 使粘液的粘度最佳化并且刺激肠功能的药物

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Publication number: CN1168499C
Application number: CNB971952833A
Authority: CN
Inventors: Ъ; 米歇尔·胡亚里曼
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1996-04-05
Filing date: 1997-04-04
Publication date: 2004-09-29
Anticipated expiration: 2017-04-04
Also published as: NZ332107A; PL188157B1; OA10894A; CZ318598A3; WO1997037681A1; EP0891189A1; JP4196225B2; AP1018A; CN1221347A; HUP9902421A3; AP9801357A0; CA2251009A1; BR9708506A; RU2198673C2; NO984632L; CA2251009C; AU2393897A; PL329161A1; FR2747045A1; AU735340B2

Abstract

本发明涉及生物学领域，更具体地涉及治疗化学。本发明主题特别是含有作为活性成分的酶或含有所述酶的酶复合物的药物组合物，所述酶是通过在由法国专利2600340定义的条件下培养弗氏链霉菌获得的，所述药物组合物中蛋白酶以混合物形式或者与生理学可接受的，无毒和惰性赋形剂或载体结合。这些药物组合物可用于预防或治疗退化疾病，特别是与肠功能紊乱相关的疾病。

Description

使粘液的粘度最佳化并且刺激肠功能的药物

本发明涉及生物学领域，更具体地说涉及治疗化学。

本发明涉及基于酶或含有该酶的酶复合物的药物和/或食用组合物，它具有预防和/或治疗疾病的作用。

更具体地说该发明涉及基于酶或含有该酶的酶复合物的药物组合物，该组合物刺激肠功能，因此具有预防和/或治疗与老化相关的退化疾病的作用。

本发明特定地涉及含有作为活性成分的一种或多种酶的药物组合物，所述酶是从通过在以申请人的名义的法国专利2600340定义的条件下培养弗氏链霉菌属获得酶复合物提取的或含于所述酶复合物。

上面提到的专利已经描述了从丝状细菌，弗氏链霉菌属获得的新的蛋白水解的复合物的生产方法以及在畜牧学中的应用；下文中将该复合物用现在的商品名称：PANSTIMASE^_命名。

丝状细菌同时产生至少5种蛋白酶和2种肽酶；这7种酶已经由K.MORIHARA等人(Biochem.Biophys.Acta，1967，139，382)描述。当将他们一起加入到由动物消耗的食物时，这7种酶引起肠粘液的粘度过度降低，并且然后能够导致肠壁溃疡。因此如果这7种酶一起使用时，在畜牧学中有负作用。

在上面提到的专利指明的条件下，获得了仅由3种胞外蛋白酶组成的PANSTIMASE^_，其中一种占优势，而且不包括胞内蛋白酶和肽酶。当加入到动物消耗的食物中时，PANSTIMASE^_导致肠粘液粘度中等降低，并且不可能够损坏肠壁。

对肠粘液的蛋白质具有相对中等的作用的同时，PANSTIMASE^_对用于食物组合物的粗原料蛋白质具有更强的作用，这提高了其消化能力。

除了其对肠道的直接作用以外，PANSTIMASE^_对各种器官具有间接的作用，特别是对胰脏；如在较早的专利中已经指明的，已经证明它导致该器官的酶浓度或酶原浓度增加50-80％。

由于这些有利的作用，现在将PANSTIMASE^_用作为加入到计划用于动物食物的营养补充物以提高其生长或生产能力。因此可以证明它也提高了动物对感染，细菌或病毒的疾病的抗性，并且降低了老化的不利作用。

这些发现表明PANSTIMASE^_可以用于动物和人的治疗或用作为治疗时的活性成分，也就是说，由弗氏链霉菌产生的占优势的胞外蛋白酶或这种占优势的胞外蛋白酶与由弗氏链霉菌产生的至少其他两种胞外蛋白酶之一的混合物具有所述的作用。

与用于动物的产品相比，药物组合物的活性成分需要额外的纯化。在较早的专利指明的条件下，获得了非纯化的PANSTIMAS3E^_，其效价至少相等于2,000A.U./毫克。

本文中将Anson单位(简写为A.U.)定义为当在变性的血红蛋白存在下，在25℃和pH7.5时培育10分钟，从该底物释放1mcg酪氨酸等同物所需要的酶的量，该量是采用分光光度计在280nm处测得不能用三氯醋酸沉淀的过滤物的吸收值。

在较早的专利指明的条件进行各种调整可以获得半纯化的PANSTIMASE^_，其效价至少相等于4,000A.U./毫克。分步沉淀或在柱上通过的常规技术使构成PANSTIMASE^_的3种蛋白酶各个获得分离。优势胞外酶的比活性大于100,000A.U./毫克，并且显著高于其他2种蛋白酶；其分子量是约32kDa，并且其等电点是约7.0。

该优势的蛋白酶仅解释了PANSTIMASE_的主要的生理学特性，特别是由于这样的事实：它仅对两个重要的蛋白质：霍乱毒素和胶原具有特征性的作用。

霍乱毒素是由某些致病的大肠杆菌产生的LT毒素的同系物；它是由有侵袭性的亚单位A和有增强免疫性的亚单位B组成的。在相当于其存在于接受PANSTIMASE_补充的食物的动物肠道的低浓度时，优势的蛋白酶选择性地破坏亚单位A，而不破坏亚单位B，因此，保持了增强免疫系统的能力。

胶原是动物界最丰富的蛋白质：对于哺乳动物，各种类型的胶原占总蛋白的约1/3。已知年幼动物的胶原在热水中的溶解度是高的，而年龄较大的动物，则溶解度是低的。

当用优势的蛋白酶处理年龄较大的动物的胶原时，其在热水中的溶解度增加并且变成相当于年幼的动物。从此可以总结出该蛋白酶引起了胶原的“恢复活力”。

有关动物的大多数结果对应于用未纯化或半纯化的PANSTIMASE^_进行的测试。对于人，可以使用半纯化PANSTIMASE^_或者一种或多种其构成的纯化蛋白酶，就是说优势的胞外蛋白酶或该优势的胞外酶与其他两种胞外蛋白酶之一的混合物，或与一种蛋白酶或多种蛋白酶的混合物，其中蛋白酶的氨基酸序列与那些优势的胞外蛋白酶或与那些如上定义的蛋白酶的混合物具有至少60％同源性。

本发明涉及包括作为活性成分的优势的胞外蛋白酶的药物和/或食用组合物，所述蛋白酶是通过培养弗氏链霉菌产生的，它具有大于100,000A.U./毫克的比活性，分子量介于30-36kDa，优选32kDa，等电点约是7.0，并且能够选择性地破坏霍乱毒素的亚单位A而不破坏亚单位B，在所述组合物中的蛋白酶是混合物形式或与生理学可接受的，无毒性和惰性赋形剂或载体结合。

本发明还涉及含有作为活性成份的如上定义的优势的胞外蛋白酶或该优势的胞外酶，与由弗氏链霉菌培养产生的至少其他两种胞外蛋白酶之一的混合物或与一种蛋白酶或多种蛋白酶的混合物的药物和/或食用组合物，或者，其中一种或多种蛋白酶的氨基酸序列与那些优势的胞外蛋白酶或与那些如上定义的蛋白酶的混合物具有至少60％同源性，在所述组合物中的蛋白酶是混合物形式或与惰性，无毒性，生理学可接受的赋形剂或载体结合。同源性的蛋白酶可以是各种微生物特别是弗氏链霉菌或灰色链霉菌培养物的提取物。

通过口服、肺或生殖器途径可以将5,000到100,000A.U.之间的剂量的活性成份给药。为了该目的，混合或与常规的赋形剂结合形式的活性成份制备成适用于这些类型的给药方式的药剂形式之一。

在药物制备技术中特别将活性成份以常规形式之一存在，例如片剂，包膜的片剂，明胶胶囊，胶囊，粉剂，溶液或悬浮液，干气雾剂，椭圆形栓剂和阴道片剂。

每天给药1-3次，这取决于治疗的需要。对于动物获得的结果都似乎是具有相同的来源：PANSTIMASE^_对肠道的基本作用；该作用具有各种方面，将陆续描述。

本发明的药物组合物的药理学研究

PANSTIMASE在肠内的作用

1.绒毛

对相对年幼的大鼠(约2个月)，在光学显微镜下进行检查发现在对照大鼠和治疗的大鼠绒毛正常发育。

对相对年老的大鼠(约7个月)，这些检查显示对照大鼠的绒毛是萎缩的，而那些治疗过的大鼠从4周断奶后，也如2个月大的大鼠的发育状况。因此发现PANSTIMASE^_引起肠的“活力恢复”，其绒毛较长期保持其起始的发育和快速再生能力。

肠不仅是生理学非活性滤器；也是最大的内分泌腺(B.LEBLANC等人，Rec.Med.Vet.1981，157 629；K.UVNAS-MOBERG，科学，1989，9月24日)。肠是由在整个生命期间再生的小细胞组成，是核酸最丰富的器官：DNA+RNA(G.DURAND等人，Ann.Biol.Anim.Biophys.1966，6，389)；因此它具有蛋白质合成的最大的潜在能力。

对肠组织学切片检查表明PANSTIMASE^_允许该潜能更好地表达，结果是更大量地生产几种生理学活性化合物：消化酶。激素(作用于胰腺，肝脏，和脑)，免疫球蛋白，胞质分裂素，神经递质(例如VIP＝作用于血管的肠道肽)，细胞生长(或生存)因子...。因此，这解释了为什么直接作用于肠的PANSTIMASE^_能够间接作用于器官并且通过上面的化合物影响生理学症状；因此这将可以特定地解释其对胰腺的显著的作用(A.ESTIVAL等人，Communication at the MetabolismConference of Nancy，1979年1月25-26-University of Nancy I)。

肠也是免疫细胞最丰富的器官，免疫细胞在血管和淋巴管中循环，或在PEYER’s斑中收集和增殖。这些免疫细胞是MALT(与淋巴组织结合的粘膜)的成份，MALT被再细分为位于肠中的GALT和位于支气管中的BALT，它与位于皮肤中的SALT类似。GALT和BALT是互相依存的并且有增效的作用以确保粘膜的免疫防御作用并且导致整体产生免疫防御作用。

肠道的组织学切片检查显示PANSTIMASE^_直接刺激GALT；因此可以间接刺激通常的免疫防御作用。因此这将可以解释PANSTIMASE^_增加了动物对传染病的抗病性。

2.微绒毛

对于年幼或年老的大鼠，在电子显微镜下检查显示对照大鼠的微绒毛被该粘滞性的粘液和微量的食物残留物包被；相反地，用PANSTIMASE^_处理的大鼠的微绒毛似乎更清洁，更高和更多。因此PANSTIMASE^_能够增加微绒毛的总扩散面，就是说其吸收能力。

在“体外”，从对照大鼠获取的肠片段用PANSTIMASE^_处理，发现没有损害微绒毛，可以去除包被它们的高粘滞性的粘液；该中等去污作用可以在几分钟内进行。

在“体内”，这种对肠粘膜的清除作用能够使感染病菌和粘膜之间更紧密地接触，这可以诱导能够对付这些病菌的免疫细胞在肠内增殖。

3.分泌细胞和外分泌微腺

在整个肠中分布了各种分泌细胞(粘液，溶菌酶...的产生者)和许多外分泌的微腺，在其中它们排出大量的分泌物(人每天约2,000毫升)。由于粘液微塞的存在抑制或甚至阻止这些分泌物的流动。

肠道的组织学切片检查显示PANSTIMASE^_使这些微塞分解，使这些分泌物重新建立正常的流动性，导致其产生量反应性地增加。

已知唾液分泌物包括细胞生长因子：表皮生长因子(EGF)；同样，肠分泌物可能包括能够作用于肠细胞、淋巴细胞...的生长因子。在PANSTIMASE^_作用下所述因子的产生的增加可以解释存在于治疗过的大鼠肠组织学切片中的绒毛和GALT的最好发育。

4.PEYER’s斑

在整个肠分布的免疫细胞的凝集体PEYER斑在治疗的大鼠中更多：它们从这些大鼠的十二指肠出现，而仅从对照大鼠的空肠出现；它们也具有较高的密度：它们的淋巴细胞更小，更紧密，和更有活性(利用组织学用的试剂使它们更强地着色)。

5.感染病菌不延长附着

PANSTIMASE^_能够阻止感染病菌在粘膜上，特别是肠道粘膜上延长附着。延长附着是由于固定在这些病菌上的附着素和固定在粘膜上的它们的受体之间的化学键形成的结果。

“体外”试验已经证明PANSTIMASE^_与复合蛋白质具有一定的亲和性，能够去除附着素或从它们结合的粘膜上分离受体；结果经常是可以在几十分钟内进行的附着分离。

另外，PANSTIMASE^_能够刺激肠道绒毛的再生，就是说去除由于附着感染病菌而异常的或受影响的老细胞；通过使肠道分泌物的流动加强有助于这种去除作用，在PANSTIMASE^_的作用下分泌物的产生增加。

能够看到虽然PANSTIMASE^_首先允许感染病菌和肠道粘液之间更紧密接触(和诱导能够抵抗这些病菌的免疫细胞在肠道增殖)，然后也能够阻止这些病菌延长附着在粘膜上和穿透到下层组织。

6.蛋白肠毒素的破坏

在10到100A.U./毫克之间的浓度时，并且通过在37℃加热几十分钟，PANSTIMASE^_破坏了多种蛋白毒素，因此能够预防和/或治疗腹泻。在由PANSTIMASE^_破坏的毒素中，有病原大肠杆菌产生的肉毒杆菌、霍乱、LT毒素，由这些大肠杆菌产生的坏死性胞毒因子...。

在相同条件下，内源性的蛋白酶(胰蛋白酶，胰凝乳蛋白酶...)不破坏这些毒素，因此不能预防和/或治疗这些腹泻。

在LT毒素的情况下，PANSTIMASE^_破坏了攻击性的亚单位A，而不破坏免疫刺激性的亚单位B。

7.结论

PANSTIMASE^_在整个肠道内具有基本的作用，它刺激该关键器官的综合功能并且因此刺激整个机体；于是提供了多种多样的治疗应用实例。

本发明药物组合物的治疗应用

PANSTIMASE^_对肠道的基本的作用使其能够用于或组成其的活性成份即优势胞外蛋白酶或优势胞外蛋白酶与至少其它两种胞外蛋白酶之一的混合物，用于预防或治疗疾病。

1.先天性粘液稠厚症和呼吸疾病

先天性粘液稠的特征在于在肠和支气管同样大量地分泌太高粘性的的粘液。所有的粘液具有相同类型的生物化学结构；因此，PANSTIMASE^_能够使肠粘液，支气管粘液或生殖器的粘液的粘性最佳化。

本发明的一种或几种胞外蛋白酶，或其氨基酸序列与本发明的一种或几种胞外蛋白酶的氨基酸序列至少有60％同源性的一种或几种胞外蛋白酶可用于制备适用于治疗先天性粘液稠厚症和与肠、支气管和/或生殖器液粘度最佳化的药物。

本发明的一种或几种胞外蛋白酶，或其氨基酸序列与本发明的一种或几种胞外蛋白酶的氨基酸序列至少有60％同源性的一种或几种胞外蛋白酶可用于制备适用于治疗先天性粘液稠厚症和与肠、支气管和/生殖器粘膜分泌物过多，特别是如果其粘性太高时相关的疾病的药物。

2.吸收和血液循环的改善

由于其对肠壁的中等去污作用，PANSTIMASE^_改善吸收作用。

测定通过口服途径在动物的血液给药的量可以证实对吸收的改善。例如，借助于胃管将没有PANSTIMASE^_的50毫克的四环素(对照组)或与具有400A.U./毫克效价的3毫克PANSTIMASE^_结合的50毫克的四环素(治疗组)给鸡给药；给药之后2小时取2.5毫升的血样，发现血清中四环素的平均浓度是对照组为1.35mcg/毫升，治疗组是1.90mcg/毫升。

通过研究各个器官中固定的药物可以更精确地分析对吸收的改善。例如，将含没有补充PANSTIMASE^_的(对照组)或补充300克/千克效价为400A.U./毫克的PANSTIMASE^_的4克/千克的氧化四环素的药物食品喂养鳟鱼2天。然后将这些鱼杀死并且测定肝脏，肌肉和肾脏中的抗生素。发现PANSTIMASE^_能够显著增加抗生素组织浓度，这很大程度上根据器官而变化：

在肝脏内为+100％，即治疗组为5.75mcg/g，相应的对照组为2.5mcg/g

在肌肉内为+400％，即治疗组为1.75mcg/g，相应的对照组为0.3mcg/g

在肾脏内为+1000％，即治疗组为5.75mcg/g，相应的对照组为0.5mcg/g

在整个生物体中似乎PANSTIMASE^_引起氧化四环素更好地吸收和该抗生素更好地分布，这似乎意味着血液循环的改善。

本发明的一种或多种胞外蛋白酶，或其氨基酸序列与本发明的一种或几种胞外蛋白酶的氨基酸序列至少有60％同源性的一种或几种胞外蛋白酶可用于制备计划用于治疗药物或营养物的吸收障碍和用于治疗血液循环紊乱的药物；特别是，计划用于治疗老年人或病人营养缺乏的药物，所述病人接受了具有影响肠功能副作用的药物。

3.消化道溃疡和肠原性毒素血症

消化道溃疡是由细菌(幽门螺杆菌)附着到胃壁上引起的，一些肠原性毒素血症是由各种感染病菌附着到肠壁上引起的。

PANSTIMASE^_阻止感染病菌与粘膜的延长附着并且破坏了许多肠毒素；因此它具有刺激肠再生并且能够抑制和/或治疗消化道溃疡和肠原性毒素血症。

事实上，对于商品畜牧业，发现PANSTIMASE^_能够减少猪的消化道溃疡症状，和由于肠道毒素血症引起的死亡。

本发明的一种或多种胞外蛋白酶，或其氨基酸序列与本发明的一种或几种胞外蛋白酶的氨基酸序列至少有60％同源性的一种或几种胞外蛋白酶可用于制备计划用于预防和/或治疗感染病菌在粘膜上延长附着的药物，促进肠粘膜或萎缩的绒毛再生的药物，和预防和/或治疗消化道溃疡和肠原性毒素血症的药物。

4.糖尿病，肝功能不良和肠传递紊乱

在较早的专利中，已经指明PANSTIMASE^_刺激胰脏的外分泌功能；事实上，发现所分析的所有酶或酶原在胰脏中的浓度显著增加：对于淀粉酶为+50％，对于胰蛋白酶原和糜蛋白酶原为+70％，对于脂酶为+80％(A.ESTIVAL等人，Communication at the MetabolismConference of Nancy，1979年1月25-26-University of NancyI)。

然后胰脏的组织学切片检查显示胰岛在治疗过的大鼠中更多和具有更好的形状。这些调查显示PANSTIMASE^_首先刺激胰脏的内分泌功能，结果是蛋白质的合成代谢总体改善，导致连续地刺激外分泌功能。

在胰腺中发挥的这种刺激作用也在肝脏中出现，结果是肠道的传递作用很大提高。在集约繁殖中，栓住的妊娠母猪经常便秘；已经发现用PANSTIMASE^_添加到它们的食物中能够使肠传递的损害性失调得到避免。

本发明的一种或多种胞外蛋白酶，或其氨基酸序列与本发明的一种或几种胞外蛋白酶的氨基酸序列至少有60％同源性的一种或几种胞外蛋白酶可用于制备计划用于预防和/或治疗糖尿病，肝功能不良和肠传递紊乱。

5.传染病，免疫机能障碍和疫苗接种

已经有人指明PANSTIMASE^_对GALT具有有利的作用，从而对整个免疫系统具有有利的作用.在3个不同的领域内获得了这种改善。

A.传染病

在集约繁殖中观察到的结果已经证明PANSTIMASE^_经常能够改善动物的健康状况，首先归因于下列事实：它有助于加入到大多数的商品饲料中的抗生素的吸收。但是，然后发现在各种病毒感染的情况中这种改善特别显著，而这些病毒通常对抗生素的作用不敏感。这些发现涉及到猪的流感和AUJESKY’s，鸡的GUMBORO’s疾病和小山羊的深脓疱疱。

对于最后的这种情况，在试验站的试验过程中对于总数120只试验中的个体仔细观察病毒感染情况，对照组不受影响的动物的百分数是34％，治疗组是70％；对照组严重受影响的动物的百分数是28％，而在治疗组没有动物严重受影响。

PANSTIMASE^_能够增加PEYER(沿整个肠道分布的免疫细胞集聚)斑的数量和密度的事实可以解释这种抗病毒作用。

B.免疫机能障碍

在集约繁殖的小猪上看到的其它结果已经证明PANSTIMASE^_缩短了关节炎的持续时间，关节炎是关节连续受伤产生的炎症反应，使在金属格子板上饲养的动物痛苦不安。在受伤愈合之后，在所谓的抑制性免疫细胞的作用下，这些炎症反应逐渐地被克服，所述免疫细胞在肠道中有许多，并且能够迁移到炎症区。PANSTIMASE^_在肠中刺激这些细胞的增殖是可能的，并有助于它们迁移，这将能解释它将关节炎的持续时间缩短约50％的事实。

C.疫苗接种

根据接受了补充PANSTIMASE^_的食物的动物对疫苗接种更好地应答可以解释在集约繁殖中发现的健康状况的改善。在实验室中用幼鼠进行的初步试验已经有效地证实PANSTIMASE^_能够增加疫苗接种的效率，特别是如果它们是口服途径给药的。

本发明的一种或多种胞外蛋白酶，或其氨基酸序列与本发明的一种或几种胞外蛋白酶的氨基酸序列至少有60％同源性的一种或几种胞外蛋白酶可用于制备计划用于预防和/或治疗传染病，免疫机能障碍和用于增加疫苗接种的效率。

6.与老化相关的激素不足和退化疾病

已经发现对于年老的有生殖力的猪，PANSTIMASE^_导致其消瘦产卵界限间隔降低(母猪趋向于增加)并且刺激性热(公猪趋向于降低)。因此PANSTIMASE^_能够补偿激素不足，和由于老化可能产生的其它不利影响。

已经有效地证明PANSTIMASE^_导致年老的有生殖力的雌性大鼠“恢复活力”，并且降低年老的有生殖力的母猪和家禽由于老化产生的不利影响。

A.雌性大鼠的第一次交配通常在将近70天龄时；当在将近140天进行交配时，对照组生殖能力差，而治疗组的情况较好(接受了同样的效价为400A.U./毫克的300毫克/千克的补充PANSTIMASE^_的食物)。

	对照组	对照组	治疗组
	对照组	对照组	治疗组	70天交配	140天交配	140天交配
	受精率	62％	29％	70天交配	140天交配	140天交配	45％
幼鼠围产期死亡率	受精率	62％	29％	18％	35％	18％	45％
幼鼠围产期死亡率	每窝断奶幼鼠的数量	9	6.6	18％	35％	18％	8.1

发现在140天交配的对照雌大鼠获得结果差，但是也在140天交配的治疗组的雌大鼠获得的结果接近于在70天交配的对照雌大鼠获得正常的结果。因此可以说PANSTIMASE^_导致年龄为140天的雌大鼠“恢复活力”。

B.有生殖力母猪从出现“差状态”时就淘汰，所述“差状态”例如如果育种者估计它们不再能够稳定地站立，也不能缓慢地躺下(而是重重地躺下，有撞到新生小猪的危险)。在80头母猪的饲养中，用PANSTIMASE^_之前，在平均4.4生殖周期之后将母猪淘汰；使用PANSTIMASE^_之后6个月，发现在平均5.8生殖周期之后将母猪淘汰。因此可以认为PANSTIMASE^_能够使母猪的生殖期延长约30％，而其“好状态”和性能没有不可接受的改变。

产卵母鸡随着衰老趋向产生外壳较脆的鸡蛋，以致于在产卵结束时破碎的鸡蛋的百分数高于10％。PANSTIMASE^_能够使该百分数降低一半，这表明它对磷酸钙代谢有刺激作用。

本发明的一种或多种胞外蛋白酶，或其氨基酸序列与本发明的一种或几种胞外蛋白酶的氨基酸序列至少有60％同源性的一种或几种胞外蛋白酶可用于制备计划用于预防和/或治疗与老化相关的激素不足和退化疾病，例如关节炎，关节疾病和骨质疏松。

对本发明的药物组合物的耐量进行初步的评估

毒性研究已经证明当以高于通常推荐使用的剂量即1个月20次的剂量给药时，PANSTIMASE^_对小猪没有任何毒性，所述剂量是每千克食物40,000A.U.，当以高于所使用的剂量即以3个月200次的剂量给药时，PANSTIMASE^_对大鼠也没有任何毒性。

结果是，用相对高于现在设想的剂量的使用剂量已经可以对人进行初步的耐量试验；事实上，已经使用了含有750,000A.U.纯化的PANSTIMASE^_的胶囊(即具有15,000A.U./毫克效价的一批50毫克的产品)，将它们对病人给药，每天2-3个胶囊，2或3星期。

选择平均年龄为44岁的24个病人(12个男性，12个女性)，年龄范围25到70岁；这些病人中17人患有广义的消化不良，通过临床调查显示出器官的损伤(实验室测试，X-射线，在某些情况下内窥镜检查)；这些病人中的7人有器官损伤：3人胰腺损伤，2人胃切除(一个溃疡，另一个肿瘤)，2人结肠切除术(一个溃疡出血直肠结肠炎，另一个肿瘤)。治疗开始时，营养缺乏或不缺乏，体重不够的情况下，对24个病人全体研究症状和体重变化的过程。对于便秘或相反的腹泻情况下一些患者表现肠道传递的调节有改善，在营养缺乏的情况下，体重增加。

也在年龄为18岁的先天性粘液稠厚症病人进行了初步的试验，这些病人每天接受了各包括10,000A.U.的PANSTIMASE^_的2个胶囊，共3星期；在肠(粪便少并且粘性低)和支气管(较易于咳痰并且次数少)发现症状的改善。

结论是，可以说PANSTIMASE^_的耐受性好，似乎对于营养缺乏的情况特别有效。

本发明的一种或多种胞外蛋白酶，或其氨基酸序列与本发明的一种或几种胞外蛋白酶的氨基酸序列至少有60％同源性的一种或几种胞外蛋白酶可用于制备用于供给体质弱或营养缺乏的病人的食用组合物。

Claims

1.胞外蛋白酶或蛋白酶用于制备药物组合物的应用，所述药物组合物用于预防和/或治疗肠道疾病、感染病菌与粘膜的延长的附着，用于促进肠道粘膜的绒毛的再生，及用于预防和/或治疗消化道溃疡和肠原性毒血症，同时保证肠、支气管和/或生殖器粘液分泌的调节，其特征在于，作为活性成分，所述胞外蛋白酶包括优势的弗氏链霉菌II型胞外蛋白酶，或者该优势的胞外酶与由弗氏链霉菌产生的至少其他两种胞外蛋白酶之一的混合物，所述蛋白酶为一种或多种蛋白酶，其氨基酸序列与所述优势的胞外蛋白酶或与胞外蛋白酶混合物中的胞外蛋白酶具有至少60％同源性，所述胞外蛋白酶或蛋白酶为混合物形式或与惰性、无毒的生理学可接受的赋形剂或载体结合。

2.权利要求1的蛋白酶的应用，用于制备治疗药物或营养的异常吸收的药物。

3.权利要求1的胞外蛋白酶或蛋白酶的应用，用于制备预防和/或治疗胰腺疾病和肝功能不良的药物。

4.权利要求1的胞外蛋白酶和蛋白酶的应用，用于制备预防和/或治疗传染病和免疫机能障碍，及提高疫苗接种效力的药物。

5.权利要求1的胞外蛋白酶和蛋白酶的应用，用于制备预防和/或治疗与老化相关的激素不足和退行性疾病的药物。

6.权利要求1的胞外蛋白酶和蛋白酶的应用，用于制备用于供给体质弱或营养缺乏的病人的食用组合物。