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CN116474186A - 一种通用型组合血小板及其制备方法和应用 - Google Patents

一种通用型组合血小板及其制备方法和应用 Download PDF

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CN116474186A CN202310441226.4A CN202310441226A CN116474186A CN 116474186 A CN116474186 A CN 116474186A CN 202310441226 A CN202310441226 A CN 202310441226A CN 116474186 A CN116474186 A CN 116474186A
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漆宇
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徐弘�
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Abstract

本发明提供一种通用型组合血小板及其制备方法和应用，单采血小板采集当天采用CS 137γ射线辐照后于水平振荡保存；采用无菌接驳机将单采血小板与一个血液专用转移空袋连接，离心血小板；取出血小板袋及转移袋，使用分浆夹分离血小板袋中上清血浆入转移袋，热合血袋导管得到单采浓缩血小板；将部分新鲜冰冻血浆缓慢转移入浓缩单采血小板袋中，振摇使血小板解聚并悬浮于血浆中；将剩余的新鲜冰冻血浆全部转移至血小板袋汇总；成品血小板存于血小板袋中，静置，热合血袋导管制得通用型组合血小板。本发明解决ABO非同型血小板输注相关ABO抗原抗体不良反应的问题。还可以解决患者需要输注血小板，但库存仅有ABO不同型血小板的供需矛盾。

Description

一种通用型组合血小板及其制备方法和应用
技术领域
本发明提供一种通用型组合血小板及其制备方法和应用，属于血液制品技术领域。
背景技术
血小板输注是预防和治疗血液病导致血小板减少、功能缺陷的主要措施。尽管我国2017年的血小板供应量已达到161.4万单位，且全世界每年的血小板输注量已超过1 000万U，但全球范围内医疗资源集中的地区血小板的供需矛盾仍较突出。
《全血和成分血使用》(WS/T 623-2018)中明确，血小板按照ABO同型原则输注，出现危及生命且无同型血小板时，可考虑输注次侧相容性血小板。受血小板资源匮乏、供需矛盾、保存期短、血型偏型及临床紧急输注的不确定性的限制，以及医疗救治技术的发展和ABO非同型异基因造血干细胞移植的增多，血小板ABO不相容性输注引起国内外学者的广泛关注，并在一些国家和地区常规应用于临床，一些研究和专家共识推荐在ABO非同型血小板输注时首选次侧不相合的血小板输注。
针对血小板ABO不相容输注潜在的溶血反应和输注无效风险，美国血库和血液治疗协会AABB中明确了针对不相容血小板输注引起急性溶血反应的预防方法，包括：减少血小板中不相容血浆的容量。英国和意大利的指南中也明确：O型血小板输注给A、B或AB型的患者时，需确保该血小板重悬于血小板添加液(Platelet additive solution，PAS)中或血浆中抗A、抗B低效价。
截止目前，关于血小板非同型输注安全性和疗效的研究结果还存在争议，争议的要点在于ABO血型不相容的血浆输注给患者带来的溶血反应的风险，和ABO血型不相容的血小板输注导致的输注无效。
按照《献血者健康检查要求(GB18467-2011)》筛选符合捐献单采血小板的献血者，其中要求捐献者血小板计数需≥150×109/L。使用血细胞分离机和一次性单采血小板耗材在全封闭的条件下采集捐献者全血，通过体外抗凝并经血液成分分离机离心分离提取其中的血小板成分于血小板收集袋，同时收集一定量的血浆于血浆收集袋，其余血液成分回输到捐献者体内。通过以上操作多次循环收集到符合《全血及成分血质量要求(GB18469-2012)》中一定治疗量的血小板浓缩物和单采血浆。采集完毕后，将该血小板浓缩物悬浮于从对应献血者采集的血浆并保存于血小板专用保存袋中，制备得到待检单采血小板成品。待检成品于专用血小板振荡仪在22℃±2℃，水平振摇保存，经血液相关检测合格后放行入合格单采血小板库，即可应用于临床输注。采集时间由于捐献者血小板计数和血流量等差异不等，一般为1h左右，加上捐献前检查及捐献后休息观察时间，完成整个流程至少需要2h。单采血小板自采集时间起算，最多可以保存5天。
《全血和成分血使用(WS/T 623-2018)》中明确，血小板按照ABO同型原则输注，出现危及生命且无同型血小板时，可考虑输注次侧相容性血小板。
该技术目前仅能采集并提供A、B、O、AB四种血型的单采血小板：采集的单采血小板按照ABO血型同型的原则输注，患者需要输注但库存没有相同血型的血小板时，可以实施非同型输注。ABO非同型输注时，不相容的血浆抗体可与相应红细胞抗原结合引起溶血反应，血小板表面不相合的抗原可与相应抗体结合引起血小板输注无效或降低输注疗效。
另外，在国内还没有自主知识产权的血小板保存液，同时尚未引进国外的技术，即国内没有可用的商品化血小板保存液。
发明内容
在我国还没有血小板专用保存液的情况下，为缓解血小板供需矛盾，充分利用现有的血小板资源，同时解决ABO不同型血小板输注时抗原抗体匹配的问题。本发明提出了一种全新的通用型组合血小板的概念，研发了相应的制备工艺，并总结了应用范围。该通用型组合血小板可实现供受者ABO血型主次侧均相容，一方面提高患者血小板输注的可及性，另一方面也保障了血小板输注的安全性和有效性。
具体的技术方案为：
一种通用型组合血小板的制备方法，包括以下步骤：
S1.单采血小板采集当天采用CS 137γ射线辐照，辐照后于血小板恒温振荡保存箱22±2℃，水平振荡保存。
S2.从血小板恒温振荡保存箱中取出保存期内的单采血小板。从合格血浆储存冰箱取出一袋200mL新鲜冰冻血浆，于专用血液恒温解冻箱中解冻。
S3.用止流夹夹闭单采血小板的血袋导管，采用无菌接驳机将单采血小板与一个血液专用转移空袋连接。配平后，使用血液成分制备专用大容量低温离心机，1199g离心血小板10min。取出血小板袋及转移袋，使用分浆夹分离血小板袋中上清血浆入转移袋，热合血袋导管得到单采浓缩血小板，观察血小板聚集情况。
S4.使用无菌接驳机将制得的单采浓缩血小板袋与S2中解冻的新鲜冰冻血浆袋连接，将新鲜冰冻血浆10～20mL缓慢转移入浓缩单采血小板袋中，振摇使血小板解聚并悬浮于血浆中。将剩余的新鲜冰冻血浆全部转移至血小板袋汇总，转移时轻轻混匀。
S5.转移完毕后，在新鲜冰冻血浆袋与血小板袋中来回倒入两次，成品血小板存于血小板袋中，静置30min后留取混匀的血小板悬液1～3mL在新鲜冰冻血浆袋中用于质量检测，热合血袋导管制得通用型组合血小板。
S6.将制备的合成型血小板放入血小板恒温振荡保存箱暂存，立即通知临床取血输注。
所述的单采血小板为与患者ABO血型主侧相容的单采血小板；新鲜冰冻血浆为与患者ABO血型次侧相容的新鲜冰冻血浆。
所述的单采血小板为O型单采血小板；新鲜冰冻血浆为AB型新鲜冰冻血浆。
按照表1的ABO非同型组合血小板输注供受者血型匹配原则：
表1ABO非同型组合血小板输注供受者血型匹配原则
本发明制备方法所得的一种通用型组合血小板，作为输注血小板的材料。
附图说明
图1是实施例1的流程图；
图2是实施例2的流程图。
具体实施方式
结合实施例说明本发明的具体技术方案。
实施例1：
如图1所示的流程：
S1.单采血小板采集当天采用CS 137γ射线辐照，辐照后于血小板恒温振荡保存箱22±2℃，水平振荡保存。
S2.从血小板恒温振荡保存箱中取出保存期内与患者ABO血型主侧相容的单采血小板。从合格血浆储存冰箱取出一袋与患者ABO血型次侧相容的200mL新鲜冰冻血浆，于专用血液恒温解冻箱中解冻。
S3.用止流夹夹闭单采血小板的血袋导管，采用无菌接驳机将单采血小板与一个血液专用转移空袋连接。配平后，使用血液成分制备专用大容量低温离心机，1199g离心血小板10min。取出血小板袋及转移袋，使用分浆夹分离血小板袋中上清血浆入转移袋，热合血袋导管得到单采浓缩血小板，观察血小板聚集情况。
S4.使用无菌接驳机将制得的单采浓缩血小板袋与S2中解冻的新鲜冰冻血浆袋连接，将新鲜冰冻血浆10～20mL缓慢转移入浓缩单采血小板袋中，振摇使血小板解聚并悬浮于血浆中。将剩余的ABO血浆全部转移至血小板袋汇总，转移时轻轻混匀。
S5.转移完毕后，在血浆袋与血小板袋中来回倒入两次，成品血小板存于血小板袋中，静置30min后留取混匀的血小板悬液1～3mL在血浆袋中用于质量检测，热合血袋导管制得组合血小板。
S6.将制备的合成型血小板放入血小板恒温振荡保存箱暂存，立即通知临床取血输注。
该组合血小板由与患者ABO主侧相容的浓缩血小板和ABO次侧相容的新鲜冰冻血浆组成，实现供受者ABO血型主次侧均相容。并且解决ABO非同型血小板输注相关ABO抗原抗体不良反应的问题。还可以解决患者需要输注血小板，但库存仅有ABO不同型血小板的供需矛盾。
实施例2
如图2所示的流程：
S1.单采血小板采集当天采用CS 137γ射线辐照，辐照后于血小板恒温振荡保存箱22±2℃，水平振荡保存。
S2.从血小板恒温振荡保存箱中取出保存期内的O型单采血小板。从合格血浆储存冰箱取出一袋AB型200mL新鲜冰冻血浆，于专用血液恒温解冻箱中解冻。
S3.用止流夹夹闭单采血小板的血袋导管，采用无菌接驳机将O型单采血小板与一个血液专用转移空袋连接。配平后，使用血液成分制备专用大容量低温离心机，1199g离心血小板10min。取出血小板袋及转移袋，使用分浆夹分离血小板袋中上清血浆入转移袋，热合血袋导管得到单采浓缩血小板，观察血小板聚集情况。
S4.使用无菌接驳机将制得的O型单采浓缩血小板袋与S2中解冻的AB型新鲜冰冻血浆袋连接，将AB型新鲜冰冻血浆10～20mL缓慢转移入O型浓缩单采血小板袋中，振摇使血小板解聚并悬浮于血浆中。将剩余的AB血浆全部转移至血小板袋汇总，转移时轻轻混匀。
S5.转移完毕后，在AB血浆袋与血小板袋中来回倒入两次，成品血小板存于血小板袋中，静置30min后留取混匀的血小板悬液1～3mL在AB血浆袋中用于质量检测，热合血袋导管制得通用型组合血小板。
S6.将制备的合成型血小板放入血小板恒温振荡保存箱暂存，立即通知临床取血输注。
通用型组合血小板由O型浓缩血小板和AB型新鲜冰冻血浆组成，不含ABO抗原和抗体。可以输注给任何ABO血型的患者，而不会发生ABO血型抗原抗体引发的不良反应。可以解决非A、B、AB型患者需要输注血小板，但库存仅有O型血小板的供需矛盾。还可以解决ABO非同型造血干细胞移植后患者血型转换期血小板输注对血型选择困难的问题。

Claims (10)

1.一种通用型组合血小板的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.单采血小板采集当天采用CS 137γ射线辐照，辐照后于血小板恒温振荡保存箱，水平振荡保存；
S2.从血小板恒温振荡保存箱中取出保存期内的单采血小板；从合格血浆储存冰箱取出一袋200mL新鲜冰冻血浆，于专用血液恒温解冻箱中解冻；
S3.用止流夹夹闭单采血小板的血袋导管，采用无菌接驳机将单采血小板与一个血液专用转移空袋连接；配平后，使用血液成分制备专用大容量低温离心机离心；取出血小板袋及转移袋，使用分浆夹分离血小板袋中上清血浆入转移袋，热合血袋导管得到单采浓缩血小板，观察血小板聚集情况；
S4.使用无菌接驳机将制得的单采浓缩血小板袋与S2中解冻的新鲜冰冻血浆袋连接，将新鲜冰冻血浆部分缓慢转移入浓缩单采血小板袋中，振摇使血小板解聚并悬浮于血浆中；将剩余的新鲜冰冻血浆全部转移至血小板袋汇总，转移时轻轻混匀；
S5.转移完毕后，在新鲜冰冻血浆袋与血小板袋中来回倒入两次，成品血小板存于血小板袋中，静置后留取混匀的血小板悬液在新鲜冰冻血浆袋中用于质量检测，热合血袋导管制得通用型组合血小板；
S6.将制备的合成型血小板放入血小板恒温振荡保存箱暂存。
2.根据权利要求1所述的一种通用型组合血小板的制备方法，其特征在于，所述的单采血小板为与患者ABO血型主侧相容的单采血小板；新鲜冰冻血浆为与患者ABO血型次侧相容的新鲜冰冻血浆。
3.根据权利要求1所述的一种通用型组合血小板的制备方法，其特征在于，所述的单采血小板为O型单采血小板；新鲜冰冻血浆为AB型新鲜冰冻血浆。
4.根据权利要求1所述的一种通用型组合血小板的制备方法，其特征在于，步骤S1血小板恒温振荡保存箱条件为22±2℃。
5.根据权利要求1所述的一种通用型组合血小板的制备方法，其特征在于，步骤S2中新鲜冰冻血浆为200mL。
6.根据权利要求1所述的一种通用型组合血小板的制备方法，其特征在于，步骤S3中，使用血液成分制备专用大容量低温离心机，1199g离心血小板10min。
7.根据权利要求1所述的一种通用型组合血小板的制备方法，其特征在于，步骤S4中，将新鲜冰冻血浆10～20mL缓慢转移入浓缩单采血小板袋中，振摇使血小板解聚并悬浮于血浆中。
8.根据权利要求1所述的一种通用型组合血小板的制备方法，其特征在于，步骤S5中静置30min。
9.一种通用型组合血小板，其特征在于，根据权利要求1到3任一项所述的制备方法所得。
10.根据权利要求9所述的一种通用型组合血小板的应用，其特征在于，作为输注血小板的材料。
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