CN116367824A

CN116367824A - 用于玻璃体内施用的水包油乳剂

Info

Publication number: CN116367824A
Application number: CN202180063609.1A
Authority: CN
Inventors: 马蒂厄·施米特; 菲利浦·达乌拉; 珍-塞巴斯蒂安·加里格
Original assignee: Sangteng Co ltd
Current assignee: Sangteng Co ltd
Priority date: 2020-09-16
Filing date: 2021-09-15
Publication date: 2023-06-30
Also published as: BR112023004851A2; US20230320979A1; EP4213804A1; JP2023542435A; WO2022058325A1

Abstract

本发明涉及用于玻璃体内施用、特别是注射的水包油乳剂，其包含活性成分、油、两种非离子型表面活性剂的混合物和水，该乳剂具有约100nm至约200nm的液滴大小。根据本发明的乳剂避免了施用至玻璃体内后的视觉困扰。根据本发明的乳剂为治疗眼部疾病或病症，如眼后段的眼部疾病或病症，提供了良好的活性成分的治疗活性。

Description

用于玻璃体内施用的水包油乳剂

发明领域

本发明涉及眼科组合物领域，并涉及用于玻璃体内施用的水包油乳剂。特别地，本发明涉及用于玻璃体内注射的半透明乳剂。

发明背景

向眼后段递送治疗剂是个挑战。特别地，由于难以有效地将活性成分如皮质类固醇药物施用至黄斑，无法获得治疗影响视网膜的疾病的方法。由于通过角膜和巩膜的眼部吸收有限，以及由于泪液和眨眼除去了活性成分，局部施用如滴注(滴眼剂等)大多无效。已经考虑过涉及直接施用至玻璃体中的方法，特别是玻璃体内注射，但它们也存在明显的局限性。例如，后段的特定组织难以靶向，或者眼科载剂与玻璃体的相容性不确保治疗的安全性。此外，由于一些活性成分在玻璃体中的半衰期短，往往需要重复注射，这对患者来说是不方便的。玻璃体内施用水溶性差或可水解的活性成分如皮质类固醇的长链酯前药引起更多的困难：亲水剂可以注射至在与玻璃体凝胶非常相似的基于水的载剂中，而亲油剂一般不能在水中溶解。因此需要在玻璃体中引入与之不天然相容的油性成分。

申请人开发了用于治疗影响眼后段的眼科疾病的包含WO2007/138113A1中公开的亲油皮质类固醇前药的可注射乳剂。尽管这些乳剂在此时表现出现有治疗选择特别是在眼部副作用(如眼内压升高)的减少和患者舒适度(减少注射次数)方面的显著进步，但它们并没有完全解决玻璃体内施用的重要问题，即视觉困扰。事实上，作为水包油乳剂分散相的油滴，其折射率与玻璃体凝胶的折射率相差很大，因此在将乳剂注入玻璃体中后，油滴可能在晶状体和视网膜之间形成雾度。根据油滴的组成和大小，这可能导致各种视觉困扰，如模糊或其他视觉障碍。视觉困扰对患者来说是不愉快的，并可能限制患者的依从性，这对眼内注射治疗方法来说已经是重要问题。这个问题对于亲油活性成分尤其关键，因为为了能够将活性成分溶入油中，乳剂必须包含量相对高的不连续相(油)。注射前乳剂中的高油量导致玻璃体中的液滴占据高的体积。在其他情况下，活性成分可能没有完全溶解在油中，使得分散相变得模糊不清(“乳白色”外观)。因此，由于液滴的体积大和/或液滴缺乏半透明性，视觉困扰可能会出现。

因此，仍然需要用于玻璃体内施用的新的眼科载剂，以避免视觉困扰并具有良好的疗效，特别是用于将亲油化合物递送至眼后段。申请人对可注射的眼科载剂进行了深入研究，并发现使用液滴大小的窄范围的水包油乳剂对限制视觉模糊和释放活性成分都有影响。

尽管可以通过使用本领域已知的表面活性剂和油的混合物来调整液滴大小，但申请人意识到，仅作用于液滴大小范围不足以实现对液滴的形成和行为的适当控制，而且也不能完全解决技术问题。申请人出人意料地发现，乳剂必须在有限的组分选择范围内进行专门设计。

根据本发明的第一实施方案，两种非离子型表面活性剂是(i)聚氧乙烯蓖麻油和脱水山梨醇酯的混合物和/或(ii)聚氧乙烯蓖麻油和聚山梨醇酯的混合物；优选聚氧乙烯蓖麻油和脱水山梨醇酯的混合物。根据本发明的第二实施方案，其中活性成分非常亲油，使用甘油三酯油作为乳剂的分散相。

申请人出人意料地发现，本发明的乳剂的这些区别特征实现了玻璃体内施用后透明度的显著增加，从而使得视觉困扰的显著减少甚至消失。本发明的乳剂还提供良好的疗效，并能受控地和持续地将药物从玻璃体递送至眼后部。此外，可以将本发明的乳剂灭菌，其在一段时间内是稳定的。

发明内容

本发明涉及用于玻璃体内施用的水包油乳剂，其包含：约0.01％至约50％重量/重量的油、约0.001％至约10％重量/重量的包含在所述油中的活性成分、约0.001％至约25％重量/重量的包含(i)聚氧乙烯蓖麻油和脱水山梨醇酯和/或(ii)聚氧乙烯蓖麻油和聚山梨醇酯的至少两种非离子型表面活性剂的混合物，和水；其中所述乳剂具有约100nm至约200nm的液滴大小。

根据一个实施方案，水包油乳剂在水中以约0.01的乳剂/水体积比稀释后具有约70％至约100％、优选约75％至约100％、更优选约80％至约100％的透光率。根据一个实施方案，至少两种非离子型表面活性剂的混合物包含聚氧乙烯蓖麻油和脱水山梨醇酯。根据一个实施方案，至少两种非离子型表面活性剂的混合物包含聚氧乙烯35蓖麻油和/或脱水山梨醇单月桂酸酯，优选聚氧乙烯35蓖麻油和脱水山梨醇单月桂酸酯。根据一个实施方案，油选自甘油三酯油；优选地，选自短链甘油三酯、中链甘油三酯和长链甘油三酯；更优选地，所述油是中链甘油三酯。根据一个实施方案，活性成分是亲油活性成分；优选药物的长链酯，更优选药物的C₁₀-C₂₁酯，还更优选药物的C₁₂-C₁₆酯，还更优选药物的C₁₄酯；优选地，药物是类固醇，更优选皮质类固醇。在一个实施方案中，活性成分选自地塞米松癸酸酯、地塞米松月桂酸酯、地塞米松肉豆蔻酸酯、地塞米松棕榈酸酯和地塞米松硬脂酸酯；优选地，选自地塞米松月桂酸酯、地塞米松肉豆蔻酸酯和地塞米松棕榈酸酯；更优选地塞米松棕榈酸酯。根据一个实施方案，水包油乳剂包含中链甘油三酯，选自地塞米松癸酸酯、地塞米松月桂酸酯、地塞米松肉豆蔻酸酯、地塞米松棕榈酸酯和地塞米松硬脂酸酯的活性成分，聚氧乙烯35蓖麻油，脱水山梨醇单月桂酸酯，甘油和水。在一个实施方案中，活性成分包括地塞米松棕榈酸酯。根据一个实施方案，水包油乳剂是阴离子型。根据一个实施方案，水包油乳剂具有约110nm至约175nm、优选约120nm至约150nm的液滴大小。

根据一个实施方案，水包油乳剂用于作为药物使用。在一个实施方案中，水包油乳剂用于治疗眼部疾病或病症；优选眼后段的疾病或病症；更优选选自葡萄膜炎、黄斑水肿如糖尿病黄斑水肿(DME)、黄斑变性如年龄相关性黄斑变性(AMD)、视网膜脱离、眼部肿瘤、细菌感染、真菌感染、病毒感染、多灶性脉络膜炎、糖尿病视网膜病变、增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)、交感神经性眼炎、福格特-小柳-原田(VKH)综合症、组织胞浆菌病、葡萄膜扩散和血管闭塞的疾病。在一个实施方案中，水包油型乳剂在玻璃体内施用，优选玻璃体内注射，其量为约5μL至约250μL、优选约10μL至约100μL、更优选约25μL至约50μL。

本发明还涉及包含根据本发明的水包油乳剂的可植入装置。本发明还涉及包含根据本发明的水包油乳剂的载药注射器。

定义

在本发明中，以下术语具有以下含义：

-“约”在本文中用于表示近似地、粗略地、大约地或在其范围内。数字前的“约”表示所述数字值的加减10％。当术语“约”与数值范围结合使用时，它通过将所述数值上下的边界延伸10％来修饰该范围。

-“活性成分”和“治疗剂”是同义词，其是指用于治疗用途并与健康相关的化合物。特别地，如下文所定义的，活性成分可用于治疗或预防疾病或病症。优选地，活性成分用于治疗眼部疾病或病症。在本公开内容中，活性成分包括前药和药物。

-“烷基”本身或作为另一个取代基的一部分是指式-C_nH_2n+1的烃基，其中n是大于或等于1的数字。烷基可以是直链或带支链的。在本发明中，烷基通常含1个至30个碳原子、优选6个至20个碳原子、更优选8个至18个碳原子、还更优选10个至16个碳原子。

-本文所用的“烯基”是指包含一个或多于一个碳-碳双键的不饱和烃基，其可以是直链或带支链的。烯基可以是直链或带支链的。在本发明中，烯基通常包含1个至30个碳原子、优选6个至20个碳原子、更优选8个至18个碳原子、还更优选10至16个碳原子。烯基可以包含例如一个或两个碳-碳双键。

-“[下限值]和[上限值]之间”等定义了既不包括上限值又不包括下限值的数字范围。

-“皮质类固醇”是指与皮质醇密切相关的多种药物中的任意一种，皮质醇是在肾上腺皮质中自然产生的激素。皮质类固醇的非限制性实例包括倍他米松、布地奈德、可的松、地塞米松、氢化可的松、甲泼尼龙、泼尼松龙、泼尼松和曲安西龙。在本发明中，皮质类固醇可以是天然的或人工的。

-乳剂的“液滴大小”是指分散相的峰值液滴大小或平均液滴大小，优选峰值液滴大小。液滴大小可通过本领域已知的方法测量，例如通过稀释于水中后使用高性能粒度仪(如Zetasizer 2000或Zetasizer NanoS，MalvernInstruments，UK)进行光散射。

-“药物”或“药理活性剂”是指在施用后引起对象、优选人的生理或心理的治疗性变化的物质。优选地，活性成分用于治疗眼部疾病或病症。药物可以以其本身、以其药学上可接受的盐的形式、或以其前药的形式施用于对象。

-根据本领域的一般知识，“乳剂”是指两种或多于两种液体的宏观同质但微观异质的混合物，由于液-液相分离，这些液体通常是不相溶的。在乳剂中，一种液体(“分散相”)以液滴的形式分散在另一种液体(“连续相”)中。乳剂的稳定性通常通过在乳剂中加入至少一种表面活性剂来实现。例如，表面活性剂可以存在于乳剂的液滴表面。

-“亲水亲油平衡”或“HLB”是指表示表面活性剂对乳剂中的分散相和连续相(通常是水相和油相)同时产生的相对吸引作用的参数。表面活性剂根据其分子中亲水和亲油部分之间的平衡被表征。HLB值表示分子的极性，其为1至40的任意值。常用于乳剂中的表面活性剂的HLB值通常为1到20。HLB随着亲水性的增加而增加。

-“玻璃体内施用”是指组合物向眼睛的玻璃体(玻璃状液)内施用。例如，玻璃体内施用可通过玻璃体内注射进行。

-“玻璃体内注射”是指通过注射手段，如注射器，在玻璃体内施用。

-“亲油性”是指化合物在脂肪、油、脂质和非极性溶剂中比在水中更容易溶解的性质。例如，亲油性可以通过log P值进行量化：例如，当化合物的log P值高于5、优选高于6、更优选高于7、还更优选高于8时，可以认为其是亲油的。

-“Log P”定义如下：化合物的分配系数P是所述化合物(作为中性分子)在水中的浓度与它在辛醇中的浓度之比。所述比例的对数被称为“log P”。Log P可以根据已公布的程序测定，例如用合适的液相色谱(HPLC)方法(Caron,J.C.和Shroot,B.,Journal ofPharmaceutical Sciences,1984,pp.1703-1706)测量或用合适的计算机方法如XLogP3方法(Chen,T.et al.,Journal of Chemical Information and Modeling,2007,Vol.47,No.)计算。

-“药物的长链酯”是指包含酯官能团(-COO-)的化学实体，其中碳原子和氧原子中的一个与包含至少7个碳原子的烷基链或烯基链共价结合，并且其中碳原子和氧原子中的另一个与药物的官能团共价结合或成为其一部分。药物的长链酯可作为前药使用。烷基链或烯基链可以是直链或带支链的，并且其通常包含9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个或20个碳原子，优选9个、11个、13个、15个或17个碳原子，更优选11个、13个或15个碳原子。烷基链或烯基链可以是例如烷基链。因此，药物的长链酯比其烷基链或烯基链多包含一个碳原子(即酯官能团的碳)，使得例如“C₁₂-C₁₆酯”的烷基链或烯基链包含11个至15个碳原子。根据本领域内众所周知的合成方法或自然过程，药物的长链酯通常是由药物的醇官能团与脂肪酸的羧酸官能团之间的酯化反应产生的。脂肪酸的非限制性实例有癸酸(10:0)、十二烷酸(月桂酸)(12:0)、十四烷酸(肉豆蔻酸)(14:0)、十六烷酸(棕榈酸)(16:0)和十八烷酸(硬脂酸)(18:0)。

-“微乳”是指根据IUPAC的定义，液滴大小为1nm至100nm、通常为10nm至50nm的乳剂。

-“水包油乳剂”是指其中分散相比连续相明显更亲油的乳剂。典型地，分散相是基于油的和/或连续相是基于水的。

-“眼科物质”或“眼科组合物”是指以施用于对象的眼睛为目的的物质或组合物和/或适合施用于对象的眼睛的物质或组合物。优选地，眼科物质或眼科组合物呈现出药学效果，即适用于治疗眼部疾病或病症。

-“眼科治疗”是指对有需要的对象的眼部疾病或病症的治疗，其包括向对象的眼睛施用眼科物质或眼科组合物的步骤。

-指物质或组合物“药学上可接受的”是指物质或组合物彼此相容和/或对其所施用的对象，优选人，无害。特别地，当其施用于对象，优选人，不会产生有害反应、过敏反应或其他不良反应。对于人施用，组合物应符合监管局，例如美国食品和药物管理局(FDA)或欧洲医药管理局(EMA)，所要求的无菌性、热原性、一般安全性和纯度标准。

-“药学上可接受的赋形剂”是指药学上可接受的赋形剂、载体或载剂。它包括任意和所有溶剂、分散介质、包衣、抗菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。

-“药物组合物”是指包含至少一种活性成分和至少一种药学上可接受的赋形剂的组合物。药物组合物是用于治疗的，且与健康有关。特别地，药物组合物可用于治疗或预防下文定义的疾病或病症。优选地，药物组合物用于治疗眼部疾病或眼部病症。

-眼睛的“后段”或“后腔”是指眼睛的后三分之二，包括前玻璃体膜和它后面的所有光学结构，包括玻璃体、视网膜、视网膜色素上皮(RPE)、脉络膜和视神经。

-“前药”是指在施用后在体内转化(即代谢)为药物(即药理活性物质)的活性成分。典型的前药是药物的酯、醚和酰胺衍生物。

-“[下限值]至[上限值]”和其他类似的描述定义了包括(即包含)上限值和下限值的数字范围。此外，本申请中如此定义的任意范围应被理解为包括明确公开的“[下限值]和[上限值]之间”的相应较窄范围。

-“类固醇”是指通常由肾上腺产生的激素，肾上腺是位于肾脏上方的两个小腺体。类固醇具有以特定的分子结构排列的四个环烷基稠合的环。在本发明中，类固醇可以是天然的或人工的。

-“对象”指温血动物，优选哺乳动物，更优选人。优选地，对象是患者，即等待接受或正在接受医疗护理的对象，或者是/将要成为医疗程序目标的对象。优选地，对象有眼部疾病或眼部病症。

-“半透明”或“半透明度”或“半透明性”是同义词，指的是允许光通过材料而不发生明显的光散射的物理性质，但其中光子在宏观上不一定遵循斯涅尔定律：因为光子可以在存在着折射率的变化的两个界面(如空气/材料)中的任意一个界面或内部(材料内部)散射。相比之下，当光子在宏观上遵循斯涅尔定律时，半透明材料被认为是“透明的”。典型地，半透明材料是由具有不同折射率的组分组成的，而透明材料是由具有统一折射率的组分组成的。半透明性与不透明性相反。本发明特别涉及水包油乳剂、乳剂的连续相或分散相和/或玻璃体凝胶的半透明性或透明性。半透明性或透明性可以通过本领域已知的定性和/或定量方法来测定，例如，通过动物模型的观察、患者问卷调查或浊度测试。

-“治疗”或“缓解”是指治疗性处理和预防性措施；其中目的是预防或减缓(减轻)有需要的对象的目标疾病或病症。需要治疗的对象包括已经患有疾病或病症的对象，以及倾向于患有障碍的对象或需要预防障碍的对象。如果在接受治疗量的物质或组合物后，对象对以下一项或多于一项显示出可观察到的和/或可测量的效果，则成功地“治疗”了该对象的疾病或病症：减少致病细胞数量；减少致病细胞总数的百分比；在一定程度上缓解与具体疾病或病症相关的一项或多于一项症状；降低发病率和死亡率；和/或改善生活质量问题。上述用于评估疾病的成功治疗和改善的参数可通过医生熟悉的常规方法容易地测量。优选地，如上文所定义的，治疗涉及施用活性成分的步骤。在本发明中，疾病或病症是眼部疾病或眼部病症，即影响对象眼睛的病理障碍或病症。

-“浊度”是指由大量的单个颗粒引起的流体的模糊或浑浊，这些颗粒一般是人肉眼看不见的，类似于空气中的烟雾。本发明特别涉及水包油乳剂的浊度和/或玻璃体凝胶的浊度，其中单个颗粒是分散相(油)液滴。浊度可以通过本领域已知的方法测定，例如使用稳定性分析仪(例如Turbiscan Beckman Coulter，US)。浊度可以用％透光率(对于完全半透明的材料最高为100％)或％吸光率(对于完全不透明的材料最高为100％)表示，其中％透光率＝100-％吸光率。

-“Zeta电位”定义如下：本领域中一个众所周知的稳定乳剂的方法是赋予分散相的液滴表面以静电荷，这将导致更多的液滴排斥和更少的液滴凝聚。分散在乳剂中的胶体颗粒由于其离子特性和/或偶极属性而带电。这种电荷在本领域中被称为“zeta电位”，其反映了颗粒之间排斥或吸引的量级。Zeta电位可以通过本领域已知的方法来测量，例如通过Zetameter(如Zetasizer 2000或Zetasizer NanoS，Malvern Instruments，UK)来测量电泳迁移率。电泳迁移率通过Smoluchowsky或Henry方程转换为zeta电位值。

详细描述

水包油乳剂

本发明涉及用于玻璃体内施用的水包油乳剂，其包含油、活性成分、至少两种非离子型表面活性剂的混合物和水。

油包含在乳剂的分散相中，水包含在乳剂的连续相中。根据一个实施方案，油是分散相的主要组分，水是连续相的主要组分。在这个实施方案中，根据本领域常用的术语，可以表示为油“是”分散相，水“是”连续相，尽管分散相和连续相实际上可能包含溶解或悬浮在其中的其他组分，例如活性成分、表面活性剂、添加剂等。

在本发明中，乳剂是通过至少两种非离子型表面活性剂的混合物来稳定的。有利地，至少两种非离子型表面活性剂的混合物也有助于在乳剂中获得适当的液滴大小。

尽管有些物质可能同时符合油、活性成分和/或非离子型表面活性剂的条件，但在本发明的乳剂中，油、活性成分和至少两种非离子型表面活性剂是指四种不同的物质，即在本发明的乳剂中，“油”组分不能同时是“活性成分”组分或“非离子型表面活性剂”组分，等等。换句话说，本发明的乳剂系统地包含除水以外的至少四种不同的物质，其中至少一种物质至少执行油的功能，其中另一种物质至少执行活性成分的功能，另外两种物质至少执行非离子型表面活性剂的功能。换句话说，在本发明的乳剂中，油、活性成分和至少两种非离子型表面活性剂是彼此不同的物质。

根据一个实施方案，活性成分选自：

抗过敏药，如色甘酸钠、安他唑啉、美沙吡林、扑尔敏、奥洛他定、酮替芬、氮卓斯汀、依美斯汀、左卡巴斯汀、特非那定、阿司咪唑、氯雷他定、吡拉明或非尼拉敏；

合成的糖皮质激素、盐皮质激素和源自胆固醇代谢的激素形式，如孕酮、雌激素或雄激素如睾酮DHEA、及其衍生物；

抗炎药，如可的松、氢化可的松、醋酸氢化可的松、地塞米松、地塞米松21-磷酸酯、氟喹诺酮、甲羟松、泼尼松、甲泼尼龙、醋酸泼尼松龙、氟甲松龙、曲安西龙、倍他米松、氯替泼诺、氟米松、莫米松、达那唑、倍氯米松、二氟泼尼酯或曲安奈德；

非甾体抗炎药，如水杨酸酯、吲哚美辛、布洛芬、双氯芬酸、氟比洛芬、2-芳基丙酸、N-芳基邻氨基苯甲酸、昔康、磺酰苯胺、吡唑烷类衍生物、芳基链烷酸、3-苯酰苯基乙酸、及其衍生物、吡罗昔康、或COX2抑制剂如罗非昔布、双氯芬酸、尼美舒利或奈帕芬胺；

抗炎药和前消散因子，如花生四烯酸的生物活性自体活性物质代谢物如脂氧素A4(LXA4)、LXB4、或其差向异构体(即epi-脂氧素、15-epi-LXA4和15-epi-LXB4)；

抗肿瘤药，如卡莫司汀、顺铂、丝裂霉素或氟尿嘧啶；

免疫药物，如疫苗或免疫刺激剂；

胰岛素、降钙素、甲状旁腺激素和肽和下丘脑加压素释放因子；

β肾上腺素能阻滞剂，如马来酸噻吗洛尔、盐酸左布诺洛尔、盐酸倍他洛尔、噻吗洛尔碱、倍他洛尔、阿替洛尔、苯呋洛尔、美替洛尔、佛司可林、卡替洛尔、肾上腺素、地匹福林(也称为二特戊酰肾上腺素)、oxonolol、乙酰唑胺-碱或醋甲唑胺；

细胞因子；白细胞介素；前列腺素类如拉坦前列素、比马前列素或曲伏前列素；抗前列腺素；前列腺素前体；和生长因子，如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子、转化生长因子β、睫状神经营养生长因子、胶质衍生神经营养因子、NGF、EPO或PLGF；

抗血管生成化合物，如VEGF抑制剂、VEGF可溶性受体、VEGF-trap、VEGF-抗体、VEGF-trap或抗VEGF-siRNA；

抗体或抗体片段、寡聚适配体(oligoaptamer)、适配体和基因片段，如寡核苷酸、质粒、核酶、小干扰RNA、核酸片段、肽或反义序列；

免疫调节剂，如天然或合成的环孢素、环磷酰胺(商品名

)、西罗莫司、他克莫司、沙利度胺或他莫昔芬；

促分泌剂，如毛果芸香碱或西维美林(商品名

)；

黏蛋白促分泌剂，如15(S)-HETE或依卡倍特；

抗血栓和血管扩张剂，如rtPA、尿激酶、纤溶酶或一氧化氮供体；

雄激素模仿剂、亚麻籽油补充剂、腺苷A3受体激动剂和角鲨烯；

抗氧化剂，如叶黄素或维生素，特别地维生素A；

碳酸酐酶抑制剂，如布林佐胺、多佐胺、乙酰唑胺、醋甲唑胺或双氯非那胺；

拟交感神经药，如溴莫尼丁、安普乐定、地匹福林或肾上腺素；

拟副交感神经药，如毛果芸香碱；

胆碱酯酶抑制剂，如毒扁豆碱或依可酯；

抗病毒药，如碘苷、三氟胸苷(也称为三氟尿苷)、阿昔洛韦、伐昔洛韦、更昔洛韦、西多福韦或干扰素；

抗生素，如氨基糖苷类、碳头孢烯类、碳青霉烯类、头孢菌素类、糖肽类、青霉素类、多肽类、喹诺酮类、磺胺类、四环素类、金霉素、杆菌肽、新霉素、多黏菌素、短杆菌肽、头孢氨苄、土霉素、氯霉素、卡那霉素、利福平、妥布霉素、庆大霉素、环丙沙星、红霉素、头孢他啶、万古霉素或亚胺培南；

抗真菌药，如多烯抗生素、唑衍生物、咪唑、三唑、烯丙胺类、两性霉素B或咪康唑；

抗菌药，如磺胺类、磺胺嘧啶、磺胺乙酰胺、磺胺甲噻二唑和磺胺异

唑、呋喃西林或丙酸钠；

其衍生物；其前药；及其可接受的盐。

根据一个实施方案，活性成分选自抗炎药类，如类固醇、类固醇衍生物、类固醇前药或类固醇可接受的盐。

根据一个实施方案，活性成分是亲油的。根据一个实施方案，活性成分具有约5至约15、优选约6至约14、更优选约7至约13、还更优选约8至约12的log P值。用XLogP3方法计算的地塞米松棕榈酸酯的log P为9.8(约10)，因此地塞米松棕榈酸酯是高度亲油的。

根据一个实施方案，活性成分是前药。根据一个实施方案，活性成分是药物的长链酯。药物的长链酯是常用的前药。在一个实施方案中，活性成分是C₁₀-C₂₁酯。在一个实施方案中，活性成分是C₁₀-C₁₈酯、优选C₁₂-C₁₆酯、更优选C₁₄酯。酯前药的药物释放是通过视网膜和/或脉络膜中的酶过程进行的。前药包含可被存在于眼部组织中的酶裂解的长链酯官能团。在本发明中，在玻璃体内施用后药物的代谢通常发生在视网膜和/或脉络膜。裂解酶可以是例如酯酶(如假胆碱酯酶或乙酰胆碱酯酶)、氧化还原酶、转移酶、裂解酶、异构酶、连接酶、水解酶、磷酸酶、蛋白酶或肽酶。典型地，药物通过一种或多于一种酯酶的作用从酯前药释放。

根据一个实施方案，活性成分是类固醇的长链酯。类固醇的长链酯是众所周知的类固醇前药。在一个实施方案中，活性成分是类固醇的C₁₀-C₂₁酯。在一个实施方案中，活性成分是类固醇的C₁₀-C₁₈酯，优选类固醇的C₁₂-C₁₆酯，更优选类固醇的C₁₄酯。在一个实施方案中，类固醇是皮质类固醇。在一个实施方案中，皮质类固醇选自阿氯米松、安西奈德、安西法尔、安西非特、倍氯米松(也被称为二丙酸倍氯米松)、倍他米松、氯泼尼松、氯倍他松、氯可托龙、可托多松、皮质醇(也被称为氢化可的松)、环索奈德、地西龙、地索奈德、地夫可特、二氟拉松、二氟孕甾丁酯、去羟米松、地塞米松、二氯松、氟扎可特、氟氯奈德、氟氢可的松、氟米松、氟尼缩松、氟轻松、双羟氟轻松、氟可龙、氟氯洛龙、氟氢缩松(也被称为氟缩酮氢可松)、氟可的松、氟米龙、氟培龙、氟泼尼松龙、氟替卡松、氢可他酯、氯替泼诺、甲羟松、甲基泼尼松、甲泼尼龙、莫美他松、帕拉米松、泼尼松龙、瑞美松龙、曲安西龙、及其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，皮质类固醇选自泼尼松龙、氟米龙、地塞米松、瑞美松龙、甲羟松、及其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，皮质类固醇是地塞米松或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，地塞米松的长链酯选自地塞米松癸酸酯(地塞米松的C₁₀酯)、地塞米松月桂酸酯(地塞米松的C₁₂酯)、地塞米松肉豆蔻酸酯(地塞米松的C₁₄酯)、地塞米松棕榈酸酯(地塞米松的C₁₆酯)和地塞米松硬脂酸酯(地塞米松的C₁₈酯)。在一个实施方案中，地塞米松的亲油长链酯选自地塞米松月桂酸酯、地塞米松肉豆蔻酸酯和地塞米松棕榈酸酯。在一个实施方案中，地塞米松的亲油长链酯是地塞米松棕榈酸酯。

根据一个实施方案，活性成分是组合物中唯一的活性成分。在一个实施方案中，活性成分与至少另一种活性成分组合使用。根据一个实施方案，乳剂包含量为约0.001％至约10％重量/重量、优选约0.01％至约7.5％重量/重量、更优选约0.1％至约5％重量/重量的活性成分。在一个实施方案中，乳剂包含量为约0.1％至约5％重量/重量、优选约0.25％至约2.5％重量/重量、更优选约0.5％至约1％重量/重量的活性成分。“重量/重量”是指“占乳剂总重量的重量”。根据一个优选的实施方案，活性成分包含在油中，因此包含在分散相中。根据另一个实施方案，活性成分包含在水中，因此包含在连续相中。

根据一个实施方案，油包括选自以下的油：甘油三酯油，如短链甘油三酯(C₁-C₅甘油三酯)、中链甘油三酯(C₆-C₁₂甘油三酯)、长链甘油三酯(C₁₃-C₂₁甘油三酯)或超长链甘油三酯(C₂₂或C₂₂以上，典型地C₂₂-C₃₄甘油三酯)；矿物油，如凡士林、液体石蜡、重矿物油或轻矿物油；植物油，如蓖麻油、玉米油、橄榄油、大豆油、芝麻油、棉籽油或甜杏仁油；脂肪酸；肉豆蔻酸异丙醇酯；油性脂肪醇；山梨醇酯和/或山梨醇脂肪酸；油性蔗糖酯；及其混合物。在一个实施方案中，油包括矿物油，优选轻矿物油和重矿物油的混合物。

在一个实施方案中，油包括甘油三酯油类。在本发明中，甘油三酯可以有相同的和不同的脂肪酸链。在一个实施方案中，油包括、基本上组成为或组成为中链甘油三酯(MCT)。中链甘油三酯(MCT)可以从棕榈仁油或椰子油等获得。中链甘油三酯(MCT)的密度为0.93至0.96。

在不受任意理论约束的情况下，申请人认为在配制亲油活性成分如长链酯前药时使用甘油三酯可促进活性成分的溶解、大小受控的液滴的形成、乳剂中或玻璃体中的液滴的稳定、活性成分向眼睛受控的和/或持续的递送、和/或视觉困扰的预防。

根据一个实施方案，组合物包含量为约0.01％至约50％重量/重量、优选约0.1％至约25％重量/重量、更优选约0.5％至约15％重量/重量的油。在一个实施方案中，组合物包含量为约0.5％至约15％重量/重量、优选约0.75％至约10％重量/重量、更优选约1％至约5％重量/重量的油。在一个实施方案中，组合物包含量为约0.01％至约15％重量/重量、优选约0.1％至约5％重量/重量、更优选约0.3％至约3％重量/重量的油。“重量/重量”是指“占乳剂总重量的重量”。

根据一个实施方案，非离子型表面活性剂包括选自以下的表面活性剂：泊洛沙姆，如泊洛沙姆282、泊洛沙姆188、

F-68LF或

F68；聚氧乙烯蓖麻油(聚氧乙基化的蓖麻油)，如Cremophor

或Cremophor

聚氧乙烯烷基醚；聚氧乙烯脂肪酸酯，如

聚乙二醇(15)-羟基硬脂酸酯(商品名

)；聚山梨醇酯，如聚山梨醇酯20(商品名

20)或聚山梨醇酯80(商品名

80)；聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯；聚氧乙烯硬脂酸酯；四丁酚醇；脱水山梨醇酯，如Span^TM 20、Span^TM 40、Span^TM 60、Span^TM65、Span^TM 80或Span^TM 85；维生素E衍生物，如D-α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯(“TPGS”或“维生素E-TPGS”)、及其混合物。在一个实施方案中，非离子型表面活性剂选自聚氧乙烯蓖麻油和脱水山梨醇酯。在一个具体的实施方案中，两种非离子型表面活性剂的混合物包括至少一种聚氧乙烯蓖麻油和至少一种脱水山梨醇酯的混合物。在一个其它实施方案中，聚氧乙烯蓖麻油是聚氧乙烯35蓖麻油(CAS[61791-12-6]或[63393-92-0]；也被称为PEG-35蓖麻油或聚氧乙烯-35蓖麻油或聚乙二醇甘油蓖麻酸酯35)，例如商品Cremophor

(也被称为Kolliphor

)。在一个其它实施方案中，脱水山梨醇酯是脱水山梨醇单月桂酸酯，例如商品Span^TM 20。在一个实施方案中，非离子型表面活性剂选自聚氧乙烯蓖麻油和聚山梨醇酯。在一个具体的实施方案中，两种非离子型表面活性剂的混合物包括至少一种聚氧乙烯蓖麻油和至少一种聚山梨醇酯的混合物。在一个其它实施方案中，聚氧乙烯蓖麻油是聚氧乙烯35蓖麻油(CAS[61791-12-6]或[63393-92-0]；也被称为PEG35蓖麻油或聚氧乙烯-35蓖麻油或聚乙二醇甘油蓖麻酸酯35)，例如商品Cremophor

(也被称为Kolliphor

)。在一个其它实施方案中，聚山梨醇酯是聚山梨醇酯20，例如商品

20。

在不受任意理论约束的情况下，申请人认为在配制活性成分时使用聚氧乙烯蓖麻油和脱水山梨醇酯和/或聚山梨醇酯作为表面活性剂可以促进活性成分的溶解、大小受控的液滴的形成、乳剂中或玻璃体中的液滴的稳定、活性成分向眼睛受控的和/或持续的递送、和/或视觉困扰的预防。

在一个实施方案中，非离子型表面活性剂具有10或大于10、11或大于11、12或大于12、13或大于13、或14或大于14的HLB。这种表面活性剂的实例可包括聚氧乙烯蓖麻油或脱水山梨醇酯。

根据一个实施方案，乳剂还包含阳离子型表面活性剂和/或阴离子型表面活性剂。在一个实施方案中，阴离子型表面活性剂选自阴离子磷脂，如卵磷脂、多库酯钠、乳化蜡BP、月桂基硫酸钠、及其混合物。在一个实施方案中，阳离子型表面活性剂选自季铵化合物，如苯扎氯铵(BAK)、西他氯铵(CKC)、苄索氯铵、西曲溴铵、阳离子脂类、油胺、硬脂胺、DOTAP氯化(N-[1-(2,3-二油酰氧基)丙基]-N,N,N三甲基铵)、DOPE(二油酰基磷脂酰乙醇胺)、聚(乙烯亚胺)(PEI)、聚-L-赖氨酸(PLL)、及其混合物。

根据一个实施方案，乳剂包含量为0.001％至25％重量/重量、优选约0.01％至约15％重量/重量、更优选约0.2％至约10％重量/重量的表面活性剂。在一个实施方案中，乳剂包含量为约0.2％至约10％重量/重量、优选约0.5％至约5％重量/重量、更优选约1％至约3％重量/重量的表面活性剂。前述范围可适用于表面活性剂的总量(阴离子型、阳离子型或非离子型)或非离子型表面活性剂的总量。“重量/重量”是指“占乳剂总重量的重量”。根据一个实施方案，乳剂包含相对重量比为约10/90至约90/10、优选约15/85至约85/15、更优选约25/75至约75/25、还更优选约50/50至约75/25的两种非离子型表面活性剂。在一个实施方案中，乳剂包含相对重量比为约10/90、约15/85、约25/75、约50/50、约75/25、约85/15或约90/10的两种非离子型表面活性剂。在一个实施方案中，乳剂包含相对重量比为约25/75、约50/50或约75/25的两种非离子型表面活性剂。根据一个实施方案，乳剂的油类总量/表面活性剂总量的重量比为约0.1至约5、优选约0.2至约4、更优选约0.5至约3。在一个实施方案中，乳剂的油类总量/表面活性剂总量的重量比为约1至约2.5、优选约1.5至约2、更优选约1.7。

根据一个实施方案，水选自自来水、盐溶液(盐水)、蒸馏水和超纯水。水可以是例如注射用水。

根据一个实施方案，乳剂包含一种或多于一种添加剂，如抗氧化剂、抗菌剂、缓冲剂、螯合剂、渗透剂、pH调节剂、防腐剂、增溶剂、稳定剂、增稠剂、黏度调节剂或着色剂。在一个实施方案中，乳剂包含至少一种选自甘油(丙三醇)、甘露醇、山梨醇、木糖醇、丙二醇、氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钙、及其混合物的渗透剂。在一个实施方案中，渗透剂选自甘油、甘露醇、山梨醇、及其混合物。在一个实施方案中，渗透剂包括甘油。在一个实施方案中，乳剂包含量为0.1％至20％重量/重量、优选约0.25％至约10％重量/重量、更优选约0.5％至约5％重量/重量的渗透剂。“重量/重量”是指“占乳剂总重量的重量”。在一个实施方案中，组合物不含防腐剂，即是“无防腐剂的”。在另一个实施方案中，组合物包含至少一种选自苯甲醇、硼酸、氯己定、季铵盐如苯扎氯铵(BAK)、汞盐、硫柳汞、及其盐类、及其混合物的防腐剂。

在一个实施方案中，乳剂包含中链甘油三酯(MCT)、地塞米松棕榈酸酯、聚氧乙烯35蓖麻油、脱水山梨醇单月桂酸酯、甘油和水。

根据一个实施方案，乳剂不含阿奇霉素。在一个实施方案中，乳剂不含抗生素。根据一个实施方案，乳剂不含拉坦前列素。在一个实施方案中，乳剂不含前列腺素。根据一个实施方案，乳剂不含肉豆蔻酸异丙醇酯。在一个实施方案中，乳剂不含脂肪酯。根据一个实施方案，乳剂不含阳离子型表面活性剂。根据一个实施方案，乳剂不含阴离子型表面活性剂。根据一个实施方案，乳剂不含磷脂，如卵磷脂(例如Epikuron^TM、Ovothin^TM或Lipoid^TM，特别地Lipoid E80)。根据一个实施方案，乳剂不含泊洛沙姆，如

F-68(Lutrol F68)。根据一个实施方案，乳剂不含四丁酚醇。根据一个实施方案，乳剂不含聚山梨醇酯20(商品名

20)。根据一个实施方案，乳剂不含聚山梨醇酯80(商品名

80)。在一个实施方案中，乳剂不含聚山梨醇酯。在本公开内容中，诸如“不含”和“不含任意”的表述具有相同的含义，是指组合物中不存在所述化合物，这种不存在是根据本领域常用的特别是眼科领域常用的纯度标准和分析方法考虑的。

根据一个实施方案，乳剂是阴离子型乳剂，即具有负Zeta电位的乳剂，通常Zeta电位低于或等于-10mV。在乳剂中加入阴离子型表面活性剂(如上文所述)是通过赋予其负电荷而使其成为阴离子型的方式。在一个实施方案中，阴离子型乳剂具有低于或等于约-15mV、优选低于或等于约-20mV、更优选低于或等于约-25mV、还更优选低于或等于约-30mV的zeta电位。根据一个实施方案，乳剂是阳离子型乳剂，即具有正Zeta电位的乳剂，通常Zeta电位高于或等于10mV。在一个实施方案中，阳离子型乳剂具有高于或等于约15mV、优选高于或等于约20mV、更优选高于或等于约25mV、还更优选高于或等于约30mV的zeta电位。在乳剂中加入阳离子型表面活性剂(如上所述)是通过赋予其正电荷而使其成为阳离子型的方式。根据一个实施方案，乳剂是非离子型乳剂，即具有接近零的zeta电位的乳剂，通常zeta电位为10mV至-10mV之间(即不包括10mV和-10mV值)。

根据一个实施方案，乳剂为阴离子型且不含阴离子型表面活性剂。申请人出人意料地发现，使用至少两种非离子型表面活性剂的混合物，有时可能会导致阴离子型乳剂。在不受任意理论限制的情况下，申请人认为在制造工艺中，乳剂可以释放出带负电荷的成分。在一个实施方案中，阴离子型乳剂是由不带负电荷的起始组分制成的，特别地用于制造乳剂的起始材料不包括任意阴离子型表面活性剂。

可优选阴离子型乳剂以用于玻璃体内施用，因为阳离子型乳剂在眼内施用时可能引起炎症。

根据一个实施方案，乳剂具有约50nm至约250nm、优选约100nm至约200nm、更优选约110nm至约175nm的液滴大小。在一个实施方案中，乳剂具有约100nm至约200nm、优选约110nm至约175nm、更优选约120nm至约160nm的液滴大小。在一个实施方案中，乳剂具有约115nm、约120nm、约125nm或约130nm的液滴大小。在一个实施方案中，乳剂具有约145nm、约150nm、约155nm、约160nm、约165nm或约170nm的液滴大小。在一个实施方案中，乳剂不是微乳。在一个实施方案中，乳剂具有大于或等于约75nm、约100nm、约110nm或约120nm液滴大小。在一个实施方案中，乳剂具有小于或等于约225nm、约200nm、约175nm或约160nm的液滴大小。

在不受任意理论约束的情况下，申请人认为在配制活性成分时使用具有不小于约100nm的液滴大小的乳剂，可促进乳剂中或玻璃体中的液滴的稳定、和/或活性成分向眼睛受控的和/或持续的递送。在不受任意理论约束的情况下，申请人认为在配制活性成分时使用具有不大于约200nm的液滴大小的乳剂，可促进乳剂中或玻璃体中的液滴的稳定、活性成分向眼睛受控的和/或持续的递送、和/或视觉困扰的预防。

本发明的乳剂使得玻璃体内施用后玻璃体凝胶呈半透明状。玻璃体内施用后，乳剂的视觉困扰取决于乳剂的浊度，并与乳剂的不透明性有关。因此，用于玻璃体内注射的乳剂应具有最低的浊度(即最低的吸光率或最高的透光率)，换句话说，它们应尽可能地半透明。透光率/吸光率为50％，在本领域内通常被认为是视觉下限。

在玻璃体内施用乳剂后，玻璃体凝胶的半透明性可以通过将一定体积的乳剂(相当于注射体积)稀释在大约4mL(即成年人玻璃体凝胶的平均体积)的水溶液如水、盐水等中来进行体外模拟。玻璃体内注射后，稀释到玻璃体中的比例通常为约1:100(即乳剂/水的体积比约为0.01)至约1:500(即乳剂/水的体积比约为0.002)，优选约1:100。根据一个实施方案，乳剂在水中以约0.005的乳剂/水体积比(相当于例如20μL在4mL中)稀释后具有约50％至约100％、优选约75％至约100％、更优选约80％至约100％、还更优选约85％至约100％的透光率。根据一个实施方案，乳剂在水中以约0.01的乳剂/水体积比(相当于例如10μL在1mL中或40μL在4mL中或80μL在8mL中)稀释后具有约50％至约100％、优选约70％至约100％、更优选约75％至约100％、还更优选约80％至约100％的透光率。根据一个实施方案，乳剂在水中以约0.0125的乳剂/水体积比(相当于例如50μL在4mL中)稀释后具有约50％至约100％、优选约70％至约100％、更优选约75％至约100％、还更优选约80％至约100％的透光率。根据一个实施方案，乳剂在水中以约0.025的乳剂/水体积比(相当于例如100μL在4mL中)稀释后具有约50％至约100％、优选约65％至约100％、更优选约70％至约100％、还更优选约75％至约100％的透光率。

在一个实施方案中，本发明涉及用于玻璃体内施用的水包油乳剂，其包含：约0.01％至约50％重量/重量的甘油三酯油、约0.001％至约10％重量/重量的包含在所述油中的亲油活性成分、约0.001％至约25％重量/重量的至少两种非离子型表面活性剂的混合物，和水；其中所述乳剂具有约100nm至约200nm的液滴大小；和所述乳剂在水中以约0.01的乳剂/水体积比稀释后具有约70％至约100％的透光率。

在玻璃体内施用后的玻璃体凝胶的半透明性也可以通过向模型动物例如兔子的眼睛玻璃体内注射来进行体内模拟。

本发明的乳剂即使在玻璃体内施用前也是有利地高度半透明的。根据一个实施方案，乳剂具有约50％至约100％、优选约60％至约100％、更优选约70％至约100％、还更优选约80％至约100％的透光率。在一个实施方案中，乳剂具有约80％至约100％、优选约85％至约100％、更优选约90％至约100％、还更优选约95％至约100％的透光率。

本发明的乳剂是有利地稳定的，即它们可以在不破坏乳剂稳定性和/或不降解活性成分的情况下储存一段时间。根据一个实施方案，乳剂可以储存3个月、优选6个月、更优选1年。

有利地，根据眼科领域的安全要求，本发明的乳剂可通过本领域已知的方法进行灭菌。特别地，乳剂在灭菌后能保持其结构和/或性质。例如，乳剂可以通过高压灭菌器的蒸气灭菌在大约120℃下在10分钟至30分钟内进行灭菌。

根据一个实施方案，乳剂不是自乳化油。根据一个实施方案，乳剂不包含在自乳化油中。根据一个实施方案，乳剂不是自乳化药物递送系统(SEDDS)。根据一个实施方案，乳剂不包含在自乳化药物递送系统(SEDDS)中。

医疗用途

本发明还涉及用于作为药物使用的如上文所述的根据本发明的乳剂。

本发明还涉及用于治疗眼部疾病或病症的如上文所述的根据本发明的乳剂。根据一个实施方案，眼部疾病或病症是眼后段的疾病或病症，特别地眼睛后部(如视网膜)的疾病或病症。在一个实施方案中，眼部疾病或眼部病症选自葡萄膜炎、黄斑水肿如糖尿病黄斑水肿(DME)、黄斑变性如年龄相关性黄斑变性(AMD或ARMD)、视网膜脱离、眼部肿瘤、细菌感染、真菌感染、病毒感染、多灶性脉络膜炎、糖尿病视网膜病变、增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)、交感神经性眼炎、福格特-小柳-原田(VKH)综合症、组织胞浆菌病、葡萄膜扩散和血管闭塞。在一个实施方案中，眼部疾病或病症是糖尿病黄斑水肿(DME)。在一个实施方案中，眼部疾病或病症是年龄相关性黄斑变性(AMD)。

根据一个实施方案，乳剂是药物组合物。

根据一个实施方案，乳剂的使用包括玻璃体内施用乳剂的步骤。在一个实施方案中，乳剂以约1μL至约500μL、优选约5μL至约250μL、更优选约10μL至约100μL、还更优选约25μL至约50μL的量被玻璃体内施用。在一个实施方案中，乳剂以约20μL、约25μL、约30μL、约35μL、约40μL、约45μL或约50μL的量被玻璃体内施用。在一个实施方案中，乳剂通过可植入装置被玻璃体内施用。在一个实施方案中，乳剂通过注射器被玻璃体内施用。在一个实施方案中，乳剂被玻璃体内注射，即玻璃体内施用是玻璃体内注射。

根据一个实施方案，乳剂不用于局部使用，即对眼睛表面施用，如对角膜施用。根据一个实施方案，乳剂的使用不包括局部施用乳剂的步骤。根据一个实施方案，乳剂不用于治疗干眼症。

有利地，当活性成分是前药且乳剂被玻璃体内施用时，在玻璃体内施用3个月或6个月后，相应的药物不存在于玻璃体内，但在玻璃体内施用后，相应的药物在眼后段的其他部位内(如视网膜或脉络膜)至少存在3个月、优选至少6个月。有利地，当活性成分为前药且乳剂被玻璃体内施用时，在玻璃体内施用后，前药在玻璃体内至少存在3个月、优选至少6个月。

本发明还涉及如上文所述的根据本发明的乳剂在制造用于治疗眼部疾病或病症的药物中的用途。根据一个实施方案，药物通过玻璃体内施用，优选玻璃体内注射。本发明还涉及用于治疗有需要的对象的眼部疾病或病症的方法，其包括向对象施用治疗有效量的如上所述的根据本发明的乳剂的步骤。根据一个实施方案，施用的步骤包括向对象进行玻璃体内施用、优选玻璃体内注射乳剂的步骤。

装置

本发明还涉及包含如上所述的根据本发明的水包油乳剂的可植入装置。根据一个实施方案，可植入装置是可生物降解的。

本发明还涉及包含如上所述的根据本发明的水包油乳剂的用于玻璃体内注射的装置。根据一个实施方案，用于玻璃体内注射的装置是注射器。在一个实施方案中，装置是载药注射器。在一个实施方案中，注射器具有22号至33号针头，优选25号至30号针头。

根据一个实施方案，可植入装置或用于玻璃体内注射的装置包含约1μL至约500μL、优选约5μL至约250μL、更优选约10μL至约100μL的乳剂量。在一个实施方案中，装置包含约20μL、约25μL、约30μL、约35μL、约40μL、约45μL或约50μL的乳剂。

根据一个实施方案，乳剂被包装在玻璃瓶中。根据一个实施方案，乳剂以单位剂量形式被包装。根据另一个实施方案，乳剂被包装在多剂量容器中。

根据一个实施方案，乳剂不是滴眼剂。根据一个实施方案，乳剂不包含在滴眼剂中。根据一个实施方案，乳剂不是滴眼剂的形式。

制造工艺

本发明还涉及制造如上所述的根据本发明的水包油乳剂的工艺。

根据一个实施方案，工艺包括以下步骤：

-将分散(油)相的组分一起搅拌；

-将连续(水)相的组分一起搅拌；

-任选地将两相加热至约50℃至约80℃；

-在油相中加入水相；

-任选地将混合物加热至约60℃至约90℃；

-减少液滴大小，优选在1分钟至10分钟内通过高剪切力混合；

-任选地冷却至约10℃至约30℃；和

-均化，优选在微流化器上进行，从而获得最终的乳剂。

根据另一个实施方案，工艺包括以下步骤：

-将分散(油)相的组分一起搅拌；

-将连续(水)相的组分一起搅拌；

-任选地将两相加热至约50℃至约80℃；

-在油相中加入水相；

-任选地将混合物加热至约60℃至约90℃；

-减少液滴大小，优选在1分钟至10分钟内通过高剪切力混合；

-任选地在冷却约1小时至约3小时。

在一个实施方案中，搅拌是磁力搅拌。

附图说明

图1是示出3种测试剂量的组合物Z31EM588和Z31EM589在眼内注射后6个月玻璃体中地塞米松(DXM)的量的直方图。

图2是示出3种测试剂量的组合物Z31EM588和Z31EM589在眼内注射后6个月视网膜中地塞米松(DXM)的量的直方图。

图3是示出3种测试剂量的组合物Z31EM588和Z31EM589在眼内注射后6个月脉络膜中地塞米松(DXM)的量的直方图。

图4是示出3种测试剂量的组合物Z31EM588和Z31EM589在眼内注射后6个月玻璃体中地塞米松棕榈酸酯(DXP)的量的直方图。

图5是示出3种测试剂量的组合物Z31EM588和Z31EM589在眼内注射后6个月视网膜中地塞米松棕榈酸酯(DXP)的量的直方图。

图6是示出3种测试剂量的组合物Z31EM588和Z31EM589在眼内注射后6个月脉络膜中地塞米松棕榈酸酯(DXP)的量的直方图。

图7是示出没有经过高压灭菌的具有不同油含量(3％、6.5％和10％重量/重量)和不同Cremophor

/Span^TM 20比例的乳剂的液滴大小的图。

图8是示出高压灭菌后的具有不同油含量(3％、6.5％和10％重量/重量)和不同Cremophor

/Span^TM 20比例的乳剂在的液滴大小的图。

实施例

通过以下实施例进一步说明本发明。

实施例1：水包油乳剂

材料和方法

材料：用于制备乳剂的物质是从商业供应商处购买的，使用时无需进一步的提纯。

方法--乳剂Z31EM090、Z31EM588、Z31EM589、Z01EM1515和Z01EM1516的制造：按下文所述制备每一种乳剂200克。在烧杯中称量油相组分；在磁力搅拌(200rpm)和轻微加热(50℃)下溶解油相组分；在磁力搅拌(200rpm)下将油相加热到65℃。同时，在烧杯中称量水相组分；在磁力搅拌(200rpm)和轻微加热(50℃)下溶解水相组分；在磁力搅拌(200rpm)下将水相加热至65℃。然后，在磁力搅拌下(300rpm至400rpm)，在65℃的油相中加入水相；在磁力搅拌下(300rpm至400rpm)，将粗滴乳剂加热到75℃；用Polytron均化器(

PT6100，Kinematica)进行分散：16000rpm下5分钟；用冰浴将乳剂冷却到25℃；连续均化：使用Emulsiflex均化器(

Emulsiflex C3)15000psi 10分钟(用于100mL)或15分钟(用于150mL)；使用冰浴将乳剂冷却到25℃；测量pH并用0.1M的NaOH调节pH至7.0。然后将乳剂分配到玻璃瓶中，并在121℃下用高压灭菌器灭菌20分钟。乳剂Z31EM433和Z31EM434的制造：按下文所述制备每一种乳剂200克。在烧杯中称量油相组分；在磁力搅拌(200rpm)和轻微加热(50℃)下溶解油相组分；在磁力搅拌(200rpm)下将油相加热到65℃。同时，在烧杯中称量水相组分；在磁力搅拌(200rpm)和轻微加热(50℃)下溶解水相组分；在磁力搅拌(200rpm)下将水相加热至65℃。然后，在磁力搅拌下(300rpm至400rpm)，在65℃的油相中加入水相；在搅拌下在2小时内使用冰浴将乳剂冷却至25℃；在室温下储存一夜(12小时)。然后将乳剂分配到玻璃瓶中，并在121℃下用高压灭菌器灭菌20分钟。液滴大小：在1/20的稀释后(50μL乳剂在水中足量1mL)使用Zetasizer NanoS(Malvern Instruments，UK)测量液滴大小。浊度：浊度(透光率％)是对8mL样品在水中进行1/100的稀释后用TurbiscanBeckman Coulter(美国)测量的(80μL样品在8mL水中)。Zeta电位：Zeta电位是用ZetasizerNanoS(Malvern Instruments,UK)在透明的一次性Zeta电池中进行1/250稀释(80μL乳剂在水中足量20mL)后测量的。pH：没有经过任意稀释的情况下，用Seven Multi MettlerToledo XP205DR测量pH。重量摩尔渗透压浓度：重量摩尔渗透压浓度是在没有经过任意稀释的情况下对100μL的样品进行测量的。

结果

具有如表1所示的组成的乳剂已被制备。

表1

表1(续)

表1(续)乳剂的性质详见表2。

表2

表2(续)

表2(续)

因此，根据本发明的组合物包含两种非离子型表面活性剂(包含活性成分的Z31EM588和Z31EM589以及不包含任意活性成分的Z01EM1515和Z01EM1516)，其具有100nm至约200nm的液滴大小，而仅包含一种非离子型表面活性剂的比较乳剂(Z31EM433和Z31EM434)具有远小于100nm的液滴大小。根据本发明的组合物也比比较乳剂更具有半透明性。

在只有一种表面活性剂存在的情况下，包含大量油(14％重量/重量MCT)的比较乳剂Z31EM090具有大于200nm的液滴大小。此外，由于其非常低的半透明性，它不适合用于玻璃体内施用，因为它将导致视觉问题，如模糊(参考下面的实施例2)。

实施例2：浊度实验：玻璃体内注射模型

材料和方法

乳剂的制备如上文实施例1中所述。

浊度法：分别将40μL、80μL、100μL、160μL和200μL的经测试的乳剂稀释在8mL的水中。然后用Turbiscan Beckman Coulter(美国)测量每个样品的浊度(％透光率)。

结果

浊度研究的结果示于表3。

表3

表3(续)

上述结果清楚地证明，根据本发明的组合物(Z31EM588和Z31EM589)在模仿玻璃体内施用的条件下稀释后会导致高半透明性。例如，当本发明的乳剂以0.01的乳剂/水的比(80μL于8mL中)稀释时，这相当于玻璃体内注射40μL的乳剂，透光率高于85％。

包含溶解在甘油三酯油(MCT)中的地塞米松棕榈酸酯的比较乳剂Z31EM433和Z31EM434也呈现出半透明性，适合用于玻璃体内施用，因为它们可能不会引起视觉问题，如模糊。然而，由于其液滴大小小于100nm，它们不提供足够的疗效(参照下面的实施例3)。

相比之下，比较乳剂Z31EM090即使在施用量低至20μL(在4mL中)时也不提供必要的半透明性。因此，它不适合用于玻璃体内施用，因为它将导致视觉困扰。

实施例3：药代动力学(PK)和药效学(PD)检测

材料和方法

乳剂的制备如上文实施例1中所述。

本研究的目的是比较不同的地塞米松棕榈酸酯乳剂对血-视网膜屏障(BRB)破坏的兔子模型中VEGF诱导的血管渗漏的影响，研究时间为6个月。来自HY79b品系的色素兔被随机分为六(6)组(3雄+3雌)。每种乳剂在其中一组进行测试。在第1天，将测试的乳剂通过玻璃体内注射向右眼施用，而左眼保持未经处理。在右眼接受500ng rhVEGF 48小时后，在不同的时间点，视网膜血管通透性表示为使用眼部荧光仪测量的经处理的右眼和未经处理的侧眼的玻璃体室荧光的比。在IVT用药二十四(24)周后，从用Z31EM588和Z31EM589乳剂处理的动物右眼收集视网膜、玻璃体和脉络膜，进行生物分析测定。使用RRLC-MS/MS方法n°N09F0109测定这些眼部结构中地塞米松(DXM)和地塞米松棕榈酸酯(DXP)的含量。

结果

表4列出了3个测试剂量的药效学(PD)数据。雾度强度的尺度是：±非常非常低；+非常低；++：低。

表4

表4(续)

根据本发明的组合物(Z31EM588和Z31EM589)注入玻璃体内时不诱发任意显著的雾度。

此外，根据本发明的组合物(Z31EM588和Z31EM589)的玻璃体内注射导致皮质类固醇药物地塞米松在3个月和6个月的时间点时的有效治疗，这可以通过VEGF诱导的通透性(水肿吸收)的标准化得到证实。即使在较低的剂量下(20μL)，两种乳剂也能提供至少6个月的有效治疗。

按照类似的实验方案，测试了比较乳剂Z31EM433和Z31EM434(如实施例1所述)，结果见表5。

表5

尽管比较乳剂Z31EM433和Z31EM434包含与根据本发明的乳剂相同量的活性成分(0.8％DXP)，并且注入玻璃体的量相似(160μg、240μg和320μg DXP)，但比较乳剂对于超过一个月的时间是无效的。比较乳剂与本发明的不同之处在于它们只包括一种表面活性剂(Cremophor

)，因此其液滴大小小于100nm(60nm)。

根据本发明的组合物(Z31EM588和Z31EM589)的3个测试剂量的药代动力学(PK)数据在图1至图6中显示。地塞米松(DXM)以很低的量存在于在玻璃体中(图1)，而以显著的量存在于视网膜(图2)和脉络膜(图3)中。因此，皮质类固醇药物(地塞米松)被施用于眼睛的后段组织(视网膜、脉络膜)，从而提供治疗活性，而不会在其可诱发有害作用的玻璃体中积累。皮质类固醇前药地塞米松棕榈酸酯(DXP)以显著的量存在于玻璃体(图4)、视网膜(图5)和脉络膜(图6)中。因此，由于地塞米松前药(地塞米松棕榈酸酯)在玻璃体、视网膜和脉络膜中的存在，皮质类固醇药物(地塞米松)得以在一段时间内释放。

上述结果清楚地证明，根据本发明的组合物提供了良好的药物释放时间(药物的受控的和持续的释放)，同时避免了视觉困扰和有害作用。因此，它们对于向眼后段施用活性成分和治疗眼部疾病或病症是有利的。还证明了，为了实现本发明的技术效果，液滴大小是必要特征。

实施例4：油量和表面活性剂的比对乳剂性质的影响

材料和方法

方法——乳剂的制造：按下文所述制备每一种乳剂100克：在烧杯中称量油相组分；在磁力搅拌(200rpm)和轻微加热(50℃)下溶解油相组分；在磁力搅拌(200rpm)下将油相加热到65℃。同时，在烧杯中称量水相组分；在磁力搅拌(200rpm)和轻微加热(50℃)下溶解水相组分；在磁力搅拌(200rpm)下将水相加热至65℃。然后，在磁力搅拌下(300rpm至400rpm)，在65℃的油相中加入水相；在磁力搅拌下(300rpm至400rpm)，将粗滴乳剂加热到75℃；用Polytron均化器(

PT 6100，Kinematica)进行分散：16000rpm下5分钟；用冰浴将乳剂冷却到25℃；连续均化：使用Emulsiflex均化器(

Emulsiflex C3)15000psi 10分钟。然后乳剂被分配如下：两个5mL的透明玻璃瓶装入5mL的乳剂，在121℃下用高压灭菌器灭菌20分钟(FEDEGARI Autoclavi SPA)；其余的乳剂被储存在100mL的透明玻璃瓶中。液滴大小：在水中1/20稀释后(50μL乳剂在950μL水中)，液滴大小通过使用高性能粒子测定仪Zetasizer NanoS(Malvern Instruments，UK)用准弹性光散射进行测量。浊度：对8mL样品在水中进行1/100的稀释后(80μL样品在8mL水中)，每个样品的浊度(％透光率)通过Turbiscan Beckman Coulter(美国)进行测量。

结果

具有如表6所示的组分的乳剂已经制备完毕。

(％重量/重量)	Z31EM576	Z31EM577	Z31EM578	Z31EM579	Z31EM580
						DXP	0.80	0.80	0.80	0.80	0.80
MCT	3.00	3.00	3.00	3.00	300
						CrEL	1.80	1.35	0.90	0.45	-
Span 20	-	0.45	0.90	1.35	1.80
						甘油	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00
水	足量100	足量100	足量100	足量100	足量100

表6

(％重量/重量)	Z31EM566	Z31EM567	Z31EM568	Z31EM569	Z31EM570
						DXP	1.60	1.60	1.60	1.60	1.60
MCT	6.50	6.50	6.50	6.50	6.50
						CrEL	3.90	2.93	1.95	0.98	-
Span 20	-	0.98	1.95	2.93	3.90
						甘油	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00
水	足量100	足量100	足量100	足量100	足量100

表6(续)

(％重量/重量)	Z31EM553	Z31EM554	Z31EM555	Z31EM556	Z31EM557
						DXP	2.40	2.40	2.40	2.40	2.40
MCT	10.00	10.00	10.00	10.00	10.00
						CrEL	6.00	4.50	3.00	1.50	-
Span 20	-	1.50	3.00	4.50	6.00
						甘油	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00
水	足量100	足量100	足量100	足量100	足量100

表6(续)

(％重量/重量)	Z31EM571	Z31EM572	Z31EM573	Z31EM574	Z31EM575
						DXP	0.80	0.80	0.80	0.80	0.80
MCT	3.00	3.00	3.00	3.00	3.00
						CrEL	0.90	0.68	0.45	0.23	-
Tween 20	-	0.23	0.45	0.68	0.90
						甘油	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00
水	足量100	足量100	足量100	足量100	足量100

表6(续)

(％重量/重量)	Z31EM561	Z31EM562	Z31EM563	Z31EM564	Z31EM565
						DXP	1.60	1.60	1.60	1.60	1.60
MCT	6.50	6.50	6.50	6.50	6.50
						CrEL	1.95	1.46	0.98	0.49	-
Tween 20	-	0.49	0.98	1.46	1.95
						甘油	1.000	1.000	1.000	1.000	1.000
水	足量100	足量100	足量100	足量100	足量100

表6(续)

(％重量/重量)	Z31EM492	Z31EM550	Z31EM551	Z31EM552	Z31EM546
						DXP	2.40	2.40	2.40	2.40	2.40
MCT	10.00	10.00	10.00	10.00	10.00
						CrEL	3.0	2.25	1.50	0.75	-
Tween 20	-	0.75	1.50	2.25	3.0
						甘油	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00
水	足量100	足量100	足量100	足量100	足量100

表6(续)

DXP：地塞米松棕榈酸酯；MCT：中链甘油三酯；CrEL：Cremophor

Tween 20：

20；Span 20：Span^TM20。

本研究的目的是评估油相(油和活性成分)的量、混合物中两种表面活性剂的比以及高压灭菌器灭菌对水包油乳剂性质的影响。

测试了两种不同的非离子型表面活性剂的混合物：Cremophor

/SpanTM 20和Cremophor

活性成分(DXP)和油(MCT)之间的比保持不变。表面活性剂的量与油的量成正比，以获得稳定的乳剂。

水包油乳剂的性质见表7。

表7

表7(续)

Surf..：表面活性剂总含量；峰值：液滴大小分布的峰值；Turb.：浊度(％透光率)；NAC：未经高压灭菌；AC：通过高压灭菌器灭菌；PS：相分离(不稳定的乳剂)；NM：未测量。

用CrEL和Span 20的混合物(上面表7的第一部分)得到的油滴大小也显示在图7(未经高压灭菌)和图8(高压灭菌后)。

尽管表面活性剂之间的比影响乳剂的性质，但两种非离子型表面活性剂的混合物(即重量比为75/25至25/75)会导致液滴大小为约100nm至约200nm，符合本发明要求。

同样，使用脱水山梨醇酯(Span 20)或聚山梨醇酯(Tween 20)作为聚氧乙烯蓖麻油(CrEL)的辅助表面活性剂，会导致液滴大小在适宜的工作范围内。然而，使用脱水山梨醇酯作为共表面活性剂是有利的，因为与聚山梨醇酯乳剂相比，其液滴大小明显较低且半透明性通常较高。在使用高油量(10％重量/重量)时，脱水山梨醇酯是特别优选的。

高油含量(10％重量/重量)并不妨碍获得适当的液滴大小，然而较低的油含量是有利的，因为它们会导致更高的半透明性，从而进一步限制视觉困扰的风险。

相比之下，只包含一种非离子型表面活性剂的乳剂通常不提供令人满意的液滴大小或半透明性，特别是在灭菌后。

因此，上述结果清楚地证明，本发明的技术特征始终使乳剂满足向眼部玻璃体内注射活性成分例如类固醇前药(如上文实施例3所述)的要求(液滴大小、半透明性、高压灭菌的稳定性)。

Claims

1.一种用于玻璃体内施用的水包油乳剂，其包含：

-约0.01％至约50％重量/重量的油，

-约0.001％至约10％重量/重量的包含在所述油中的活性成分，

-约0.001％至约25％重量/重量的包含(i)聚氧乙烯蓖麻油和脱水山梨醇酯和/或(ii)聚氧乙烯蓖麻油和聚山梨醇酯的至少两种非离子型表面活性剂的混合物，和

-水；

其中所述乳剂具有约100nm至约200nm的液滴大小。

2.根据权利要求1所述的水包油乳剂，其中所述乳剂在水中以约0.01的乳剂/水的体积比稀释后具有约70％至约100％、优选约75％至约100％、更优选约80％至约100％的透光率。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的水包油乳剂，其中所述至少两种非离子型表面活性剂的混合物包含聚氧乙烯蓖麻油和脱水山梨醇酯。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的水包油乳剂，其中所述至少两种非离子型表面活性剂的混合物包含聚氧乙烯35蓖麻油和/或脱水山梨醇单月桂酸酯，优选聚氧乙烯35蓖麻油和脱水山梨醇单月桂酸酯。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的水包油乳剂，其中所述油选自甘油三酯油；优选选自短链甘油三酯、中链甘油三酯和长链甘油三酯；更优选地，所述油是中链甘油三酯。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的水包油乳剂，其中所述活性成分是亲油活性成分；优选药物的长链酯，更优选药物的C₁₀-C₂₁酯，还更优选药物的C₁₂-C₁₆酯，还更优选药物的C₁₄酯；优选地，药物是类固醇，更优选皮质类固醇。

7.根据权利要求6所述的水包油乳剂，其中所述活性成分选自地塞米松癸酸酯、地塞米松月桂酸酯、地塞米松肉豆蔻酸酯、地塞米松棕榈酸酯和地塞米松硬脂酸酯；优选选自地塞米松月桂酸酯、地塞米松肉豆蔻酸酯和地塞米松棕榈酸酯；更优选地塞米松棕榈酸酯。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的水包油乳剂，其中所述乳剂包含：

-中链甘油三酯，

-选自地塞米松癸酸酯、地塞米松月桂酸酯、地塞米松肉豆蔻酸酯、地塞米松棕榈酸酯和地塞米松硬脂酸酯的活性成分，

-聚氧乙烯35蓖麻油，

-脱水山梨醇单月桂酸酯，

-甘油，和

-水。

9.根据权利要求8所述的水包油乳剂，其中所述活性成分包括地塞米松棕榈酸酯。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的水包油乳剂，其中所述乳剂是阴离子型的。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的水包油乳剂，其中所述乳剂具有约110nm至约175nm、优选约120nm至约150nm的液滴大小。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的水包油乳剂，其用作药物。

13.根据权利要求12所述之用途的水包油乳剂，其用于治疗眼部疾病或病症、优选眼后段的疾病或病症、更优选选自葡萄膜炎、黄斑水肿如糖尿病黄斑水肿(DME)、黄斑变性如年龄相关性黄斑变性(AMD)、视网膜脱离、眼部肿瘤、细菌感染、真菌感染、病毒感染、多灶性脉络膜炎、糖尿病视网膜病变、增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)、交感神经性眼炎、福格特-小柳-原田(VKH)综合症、组织胞浆菌病、葡萄膜扩散和血管闭塞的疾病。

14.根据权利要求13所述之用途的水包油乳剂，其中玻璃体内施用、优选玻璃体内注射约5μL至约250μL、优选约10μL至约100μL、更优选约25μL至约50μL的量的所述乳剂。

15.一种可植入装置和/或载药注射器，其包含根据权利要求1至14中任一项所述的水包油乳剂。