CN115932146A

CN115932146A - 一种口服紫杉醇处方的筛选方法

Info

Publication number: CN115932146A
Application number: CN202211434789.2A
Authority: CN
Inventors: 钱小红; 王涛
Original assignee: Wuxi Yew Pharmaceutical Co ltd
Current assignee: Wuxi Yew Pharmaceutical Co ltd
Priority date: 2022-11-16
Filing date: 2022-11-16
Publication date: 2023-04-07
Anticipated expiration: 2042-11-16
Also published as: CN115932146B

Abstract

本发明公开了一种口服紫杉醇处方的筛选方法，技术方案包括以下步骤：步骤一、紫杉醇初步理化性质测定包括：(1)、表观溶解度考察；(2)、无定形溶解度考察；(3)、结晶趋势测定；步骤二、初步载体辅料筛选包括(1)平衡溶解度实验；(2)过饱和实验；步骤三、紫杉醇SDDs处方筛选包括：(1)、喷雾干燥；(2)、样品溶解情况初步评估；(3)、样品含量测定；(4)、样品热性能分析；(5)、热重分析；(6)、粉末X射线衍射；(7)、粉末溶出；步骤四、选择紫杉醇SDDs稳定性处方，本发明的优点在于通过平衡溶解度实验、过饱和维持实验和粉末溶出实验进行探索性的尝试，使研究人员对紫杉醇有精确的了解，为口服紫杉醇的研究奠定基础。

Description

一种口服紫杉醇处方的筛选方法

技术领域

本发明涉及紫杉醇药物制备技术领域，尤其涉及一种口服紫杉醇处方的筛选方法。

背景技术

紫杉醇(Paclitaxel，PTX)是一种从红豆杉树皮中分离纯化得到的天然次生代谢产物，属于紫杉烷单体双萜生物碱类化合物，主要适用于卵巢癌、乳腺癌、头颈癌、非小细胞肺癌，对前列腺癌、卡波济肉癌的晚期和胰腺癌等也都有一定疗效。因此紫杉醇是临床公认的抗癌首选化疗药之一，但是由于紫杉醇的高亲脂性，低水溶解度的固有特性，在通常可接受的药物溶剂如聚乙二醇400、乙醇、丙二醇、甘油等中的溶解度也受到限制，也紫杉醇药物发生路上的壁垒。

目前市面上主流的紫杉醇注射液如

(BMS公司)，

(安素泰Faμlding公司)以及

(国产)都是由

(聚乙氧基化蓖麻油)和无水乙醇(1:1，v/v)配制成6mg/ml的紫杉醇的混合物来提高紫杉醇的溶解度，但是聚氧乙基代蓖麻油在体内降解时会释放组胺，会引起较为严重的过敏反应、肾毒性和神经毒性等副作用，临床使用前需进行预脱敏处理，还需要使用无增塑剂的容器或袋子避免药液与聚氯乙烯(PVC)反应生成邻苯二甲酸二乙基乙酯(DEHP)导致沉淀从而引起毒性。所以提高紫杉醇溶解度、降低紫杉醇毒副作用、改善紫杉醇疗效的新制剂越来越引起研究者的重视。近年来，通过对紫杉类药物的不断探索及制剂工艺的不断改进，研发了紫杉醇脂质体、白蛋白结合性紫杉醇及紫杉醇胶束等新注射剂型，在降低过敏反应、减小药物毒副作用。

静脉注射和口服是最常用的两种给药途径，像紫杉醇这类原料药的溶解性非常差，需要添加增剂，增剂可能对身体有害并可能引起刺激和严重的过敏反应。口服紫杉醇由于能减少增剂的使用，具有良好的安全性，有广阔的开发前景。

现在许多尝试用来开发各种口服剂型以增加PTX的口服BA，包括固体分散体，微乳剂/纳米乳剂，胶束/纳米胶束，纳米晶体，脂质体等，其中最广泛使用的技术是固体分散(SD)技术。固体分散体是一种或多种活性成分在惰性载体基质中的固态分散体，通过熔融或溶剂方法制备。综合考虑到紫杉醇的理化特性(230℃下分解，TGA结果)因此熔融(HEM)不是首选，而喷雾干燥(SD)正是一种有效的技术用于制备提高疏水性药物的溶解度和BA的生产方法。但是在进行固体分散技术研发之前，需要研究人员精确地了解系统紫杉醇特性，需要选出最为合适的紫杉醇处方。

发明内容

针对上述现有技术的缺点，本发明的目的是提供一种口服紫杉醇处方的筛选方法，其优点在于通过平衡溶解度实验、过饱和维持实验和粉末溶出实验进行探索性的尝试，使研究人员对紫杉醇的增溶和维持过饱和效果有精确的了解，为后续口服紫杉醇的研究奠定基础。

本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：

一种口服紫杉醇处方的筛选方法，包括以下步骤：

步骤一、紫杉醇初步理化性质测定：

(1)、表观溶解度考察：

首先取紫杉醇置于三支离心管中，分别加入等量的0.05M HCl、50M磷酸盐缓冲液、水溶液；另外称取紫杉醇置于的离心管中，然后加入醇类和水混合溶液，涡旋后超声处理30min使充分分散，最后放入37℃水浴摇床中定点48h后取样，13000转速离心5min后取适量上清液用甲醇稀释，并进行HPLC定量分析；

(2)、无定形溶解度考察：

分别取0.05M HCl和50M磷酸盐缓冲液，分别在两者中加入紫杉醇甲醇溶液，混匀后进行13000转速离心1min后取适量上清液用甲醇稀释10倍并进行HPLC定量分析；

(3)、结晶趋势测定：

取紫杉醇样品平铺于玻璃载玻片上，加热到熔点上10℃，使紫杉醇样品充分熔融，然后快速置于金属板上淬冷，偏光显微镜下观察确定为无定形，滴入50M磷酸盐缓冲液或者0.05M HCl观察有无结晶情况及结晶快慢速度；

步骤二、初步载体辅料筛选：

首先依据步骤一测出的结果，拟定前载体辅料组合，拟定载体辅料和二元表面活性剂辅料组合；

(1)平衡溶解度实验：

称取紫杉醇置于离心管中，之后加入含有预先溶解含有载体辅料组合的聚合物的50M磷酸盐缓冲液，涡旋后超声处理30min让其充分分散，最后放入37℃水浴摇床中定点2、6、12、24、48h取样，13000转速离心5min后取适量上清液用甲醇稀释，并进行HPLC定量分析，重复实验，得到所有载体辅料组合的结果，从结果中选出最优的载体辅料组合，在载体基础上加入活性剂辅料，以同样的条件进行实验；

(2)过饱和实验：

称取紫杉醇甲醇溶液，加入预先溶解载体辅料组合的聚合物的50M磷酸盐缓冲液，产生过饱和溶液，放入37℃水浴摇床中定点5、15、30、60、120、240min及48h，进行3900转速离心5min后取适量上清液并用甲醇稀释1倍进行HPLC定量分析；从结果中选出最优的载体辅料组合，在载体基础上加入活性剂辅料，以同样的条件进行实验；

从平衡溶解度实验和过饱和实验的结果初步选定载体和活性剂的组合；

步骤三、紫杉醇SDDs处方筛选：

(1)、喷雾干燥：

A组分：将紫杉醇原料药溶解在无水乙醇中；

B组分：将筛选出来的载体辅料组合的聚合物溶解在乙醇溶液中；

将A组分和B组分溶液充分混合制成5％(w/w)的溶液，超声混合5min；使用喷雾干燥机制备紫杉醇SDDs粗品，干燥参数：入口温度85℃、出口温度55℃；溶液进料速度：8mL/min；雾化氮气压力0.1MPa；制备后，将紫杉醇SDDs粗品在40℃真空干燥过夜，以去除残留溶剂，然后样品置于4℃下备用；

(2)、样品溶解情况初步评估：

取样品到容量瓶中，逐步加入50M磷酸盐缓冲液，观察粉末的溶解情况；

(3)、样品含量测定：

取样品到容量瓶中，用甲醇溶解并定容，超声混合1min后取适量用甲醇稀释10倍并进行HPLC定量分析；

(4)、样品热性能分析：

取样品到铝盘中，使用差示扫描量热仪对样品进行热性能分析，参数为以10℃/min的加热速率从环境温度加热至235℃，氮气流速为40mL/min；

(5)、热重分析：

取样品到热重分析仪中，样品加热到400℃，得到重量和温度关系图，得到25～200℃之间的重量损失，并分析样品分解温度；

(6)、粉末X射线衍射：

使用X射线衍射仪获得样品的PXRD图，先取0.5mm厚的干燥样品放置在硅样品架中，放置在衍射仪中，完成扫描；

(7)、粉末溶出：

取样品置于离心管中，然后加入50M磷酸盐缓冲液或0.05M HCl，涡旋后超声处理30min让其充分分散，最后放入37℃水浴摇床中定点15、30、60、120、240min及12、48h取样400μL，经13000转速离心5min后，取适量上清液用甲醇稀释，并进行HPLC定量分析；

步骤四、选择紫杉醇SDDs稳定性处方：

根据步骤三得到处方，进行稳定性实验，将样品置于40℃，75％开口及闭口、以及室温闭口条件下保存5天、10天、15天、1个月取样，检查DSC和XRD以评估PTX的结晶度，并用HPLC进行含量测定。

进一步的，在步骤一的(1)表观溶解度考察中，首先取的紫杉醇的用量为10mg，0.05M HCl、50M磷酸盐缓冲液、水溶液分别的取用量为10ml，其中0.05M HCl的PH值为1.5，50M磷酸盐缓冲液的PH值为6.5；另外称取的紫杉醇的用量为80mg，醇类和水混合溶液为甲醇/水(7:3)溶液或者乙醇/水(7:3)溶液，醇类和水混合溶液的取用量为10ml；水浴之后取样量为500μl。

进一步的，在步骤一的(2)无定形溶解度考察中，0.05M HCl和50M磷酸盐缓冲液的用量为1ml，紫杉醇甲醇溶液的用量为20～40μl，浓度为50mg/ml。

进一步的，在步骤一的(3)结晶趋势测定，加热温度为230℃，在230℃下保持1min。

进一步的，在步骤二的(1)平衡溶解度实验中，紫杉醇用量为10mg，50M磷酸盐缓冲液用量为10ml，其PH值为6.5。

进一步的，在步骤二的(2)过饱和实验中，紫杉醇甲醇溶液的浓度为50mg/ml，紫杉醇甲醇溶液的用量为100μl，50M磷酸盐缓冲液的用量为5ml，配置浓度为100μg/mL的过饱和溶液。

进一步的，在步骤三的(1)喷雾干燥中：

A组分：紫杉醇原料药用量为200mg，无水乙醇用量为10ml；

B组分：载体辅料组合的聚合物用量为800mg，乙醇溶液的用量为10ml，乙醇溶液中无水乙醇和水的比例为4：6。

进一步的，在步骤三的(5)热重分析中，升温速率为10℃/min。

进一步的，在步骤三的(6)X射线衍射中，样品在40mA的电流和40kV的张力下进行扫描。

进一步的，在步骤三的(6)X射线衍射中，扫描范围是5-40°，衍射角为2°，步长为0.026°，扫描速度为每秒0.146°。

综上所述，本发明具有以下有益效果：

1.通过初步紫杉醇理化性质研究，对紫杉醇的表观溶解度、无定形溶解度、结晶趋势进行研究，考察紫杉醇(PTX)的各组合溶液中的溶解和过饱和维持情况，与实际ASD粉末溶出或片剂溶出是不能对等的，但能直观筛选出哪种载体辅料具有潜在增溶功能，为改善紫杉醇溶解性提供线索及思路，。

2.通过载体辅料筛选，初步载体辅料筛选：基于开发PTX三元固体分散体口服制剂策略，通过在磷酸盐缓冲液(PBS，pH6.5)条件下的平衡溶解度和过饱和实验进行聚合物载体和表面活性剂组合的辅料筛选，经HPLC、差示扫描量热仪、热重分析、粉末X射线衍射、粉末溶出等分析手段分析，为研究并筛选具有高表观溶解度/溶出速度的紫杉醇处方提供参考依据。

3.通过紫杉醇SDDs处方筛选，基于载体辅料筛选结果，结合对辅料溶解特性的了解及实验，拟定主要载体辅料，通过喷雾干燥手段初步制备样品，同样经HPLC、差示扫描量热仪、热重分析、粉末X射线衍射、粉末溶出等分析手段分析，筛选出最优处方。

附图说明

图1是PTX晶体粉末(PBS检测组)加热前的结晶趋势偏光图。

图2是PTX晶体粉末(PBS检测组)加热熔融并淬冷后的结晶趋势偏光图。

图3是无定形PTX样品中滴入PBS溶液浸泡1h后的结晶趋势偏光图。

图4是PTX晶体粉末(HCL检测组)加热前的结晶趋势偏光图。

图5是PTX晶体粉末(HCL检测组)加热熔融并淬冷后的结晶趋势偏光图。

图6是无定形PTX样品中滴入HCL溶液浸泡1h后的结晶趋势偏光图。

图7是实验组S0～S9的溶解度曲线图。

图8是实验组S6和S8组合和元表明活性剂辅料组合的溶解度曲线图。

图9是实验组S0～S9的过饱和曲线图。

图10是实验组S6和S8组合和元表明活性剂辅料组合的过饱和曲线图。

图11是处方SDD1～SDD6的样品溶解情况图。

图12是SDD3的样品溶解情况图。

图13是处方SDD1～SDD6相应原料的DSC实验结果曲线图。

图14是处方SDD1～SDD6相应原料的TGA实验结果曲线图。

图15是处方SDD1～SDD6样品的DSC实验结果曲线图。

图16是处方SDD1～SDD6样品的TGA实验结果曲线图。

图17是处方SDD1～SDD6样品溶解情况初步评估实验结果图。

图18是处方SDD3样品在100μL PBS(pH6.5)溶液中溶解结果图。

图19是处方SDD1～SDD6在PBS(pH6.5)条件的粉末溶出实验结果图。

图20是处方SDD3和SDD6的外观和溶解情况对比图。

图21是SDD3和SDD6部分出现晶体峰的稳定性样品与PTX原料及SLS辅料XRPD对比图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图和具体实施方式对本发明提出的方案作进一步详细说明。根据下面说明，本发明的优点和特征将更清楚。

实施例：

一种口服紫杉醇处方的筛选方法，包括以下步骤：

紫杉醇的简称为PTX，磷酸盐缓冲液的简称为PBS。

步骤一、紫杉醇初步理化性质测定：

(1)、表观溶解度考察：

各称取10mgPTX置于三只15mL离心管中，分别加入0.05M HCl(pH1.5)、50M磷酸盐缓冲液(PBS，pH6.5)、水溶液各10mL；另各称取80mgPTX置于15mL的离心管中，然后加入10mL甲醇/水(7:3)溶液或者乙醇/水(7:3)溶液10mL，涡旋后超声处理30min使充分分散，最后放入37℃水浴摇床中定点48h后取样500μL，13000转速离心5min后取适量上清液用甲醇稀释1倍(或者其它合适倍数)，并进行HPLC定量分析。

(2)、无定形溶解度考察：

分别在1mL 0.05M HCl(pH1.5)、50M PBS(pH6.5)中加入20～40μL 50mg/mL的PTX甲醇溶液，混匀后进行13000转速离心1min后取适量上清液用甲醇稀释10倍并进行HPLC定量分析。

(3)、结晶趋势：

取少量PTX样品平铺于玻璃载玻片上，加热到熔点上10℃，即约230℃保持1min，使其充分熔融，然后快速置于金属板上淬冷，偏光显微镜下观察确定为无定形，滴入50M PBS(pH6.5)或者0.05M HCl(pH6.5)观察有无结晶情况及结晶快慢速度。

紫杉醇初步理化性质结果汇总：

1、紫杉醇的基础理化信息，详情见表1。

表1

2、PTX在0.05M HCl和50M PBS溶液中的结晶趋势偏光图。

PBS检测组：

A1：如图1所示，加热前的PTX晶体粉末的结晶趋势偏光情况。

A2：如图2所示，PTX晶体粉末进行加热熔融并淬冷后的结晶趋势偏光情况。

A3：如图3所示，在无定形PTX样品中滴入PBS溶液浸泡1h后的结晶趋势偏光情况。

HCl检测组：

B1：如图4所示，加热前的PTX晶体粉末的结晶趋势偏光情况。

B2：如图5所示，PTX晶体粉末进行加热熔融并淬冷后的结晶趋势偏光情况。

B3：如图6所示，在无定形PTX样品中滴入PBS溶液浸泡1h后的结晶趋势偏光情况。

结果分析：

紫杉醇具有复杂的环结构，在其中心有一个庞大的稠合紫杉烷环，周围有几个疏水官能团，屏蔽了许多极性较强的含氧基团，分子量高，缺乏可质子化基团，故其水溶性差；紫杉醇的pKa为11.99表明它是一种难质子化/去质子化的化合物，因此在强酸或强碱中的溶解度不易增加，在制剂设计时，通过改变pH值不会产生额外影响。

溶解度实验结果显示，PTX在3种水溶液中的溶解度均低于1μg/mL，其中在纯水机PBS(pH6.5)中相近约0.3μg/mL，在酸中的溶解度略高，约0.7μg/mL。

应用偏光显微镜观察无定形紫杉醇的结晶趋势，结果显示PTX无定形在水溶液中结晶趋势相对缓慢，1h内未见晶体生成。对比PTX无定形和晶体溶解度测试结果，PTX无定形与晶体的溶解度之比分别为91.9(PBS，pH6.5)，57.3(0.05M HCl，pH1.5)。

步骤二、初步载体辅料筛选：

基于开发PTX三元固体分散体口服制剂的总体策略，参考相关公开文献及专利拟定SDDs处方前载体辅料组合见表2，载体和二元表面活性剂辅料组合见表3，通过在50M PBS(pH6.5)条件下的平衡溶解度和过饱和实验进行聚合物载体和表面活性剂组合的初步辅料筛选，候选聚合物及表面活性剂的结构见表4，即实验组S0～S8。

名称	S0	S1	S2	S3	S4	S5	S6	S7	S8
										PTX	10	10	10	10	10	10	10	10	10
HPMCAS(M)	-	30	30	-	-	60	60	-	-
										PVPVA(64)	-	-	-	30	30	-	-	60	60
TPGS	-	5	-	5	-	150	-	150	-
										Soluplus	-	-	5	-	5	-	150	-	150

表2

注：HPMCAS：羟丙甲纤维素琥珀酸酯、PVPVA：共聚维酮、TPGS：维生素E聚乙二醇琥珀酸酯、Soluplus：聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物。

名称	S6-1	S6-2	S8-1	S8-2
					PTX	10	10	10	10
HPMCAS(M)	60	60	-	-
					PVPVA(64)	-	-	60	60
Soluplus	100	100	100	100
					SLS	50	-	50	-
Tween80	-	50	-	50

表3

注：SLS：十二烷基硫酸钠、Tween80：吐温80。

表4

(1)、平衡溶解度实验：

称取10mgPTX置于15mL离心管中，然后加入含有预先溶解含有各处方量聚合物的PBS(pH6.5)溶液10mL，涡旋后超声处理30min让其充分分散，最后放入37℃水浴摇床中定点2、6、12、24、48h取样400μL，13000转速离心5min后取适量上清液用甲醇稀释1倍(或者其它合适倍数)并进行HPLC定量分析，所有实验n＝3。

根据平衡溶解度实验结果，绘制溶解度曲线图，具体见图7。

结论：从图7可以看出高表面活性剂比例组合的S5-S8对PTX的增溶有较明显的提高，其中以S6和S8含有Soluplus接枝聚合物的组合效果最优。

在S6和S8组合的基础上进行载体和元表明活性剂辅料组合的基础上，重复平衡溶解度实验。

根据平衡溶解度实验结果，绘制溶解度曲线图，具体见图8。

结论：从图8中显示S6-1和S8-1这两组含SLS表面活性剂的组合优于含Tween 80组合。

(2)、过饱和实验：

取含量为50mg/mL的PTX甲醇溶液100μL加入至含有预先溶解含有S0-S8各处方量的PBS(pH6.5)溶液中(5mL)，产生理论浓度为100μg/mL的过饱和溶液，放入37℃水浴摇床中定点5、15、30、60、120、240min及48h，进行3900转速离心5min后取适量上清液并用甲醇稀释1倍进行HPLC定量分析。所有实验n＝3。

根据过饱和的实验结果，绘制过饱和曲线图，具体见图9。

结论：从图9中看出高表面活性剂比例组合的S5～S8对PTX维持过饱和度均有较明显的提高，其中S6和S8含有Soluplus接枝聚合物的组合最优，与平衡溶解度实验结论一致。

在S6和S8组合的基础上进行载体和2元表明活性剂辅料组合，再次进行过饱和实验。

根据过饱和的实验结果，绘制过饱和曲线图，具体见图10。

结论：从图10中显示S6-1和S8-1这两组含SLS表面活性剂的组合优于含Tween 80组合，与平衡溶解度实验结论一致。

实验结果汇总：

不同溶媒中，PTX的溶解度结果详见表5。

表5

结论：综上，平衡溶解度以及过饱和实验只是初步考察PTX在各组合溶液中的溶解和过饱和维持情况，与实际ASD粉末溶出或者片剂溶出是不能对等的，但从实验结果，可知：①、对PTX增溶确实存在很大空间，S8-1与晶型PTX的实验溶解度之比为291.6(37℃时)；②、无论HPMCAS还是PVPVA与TPGS的组合对PTX的增溶和维持过饱和效果均不理想。

步骤三、紫杉醇SDDs处方筛选：

(1)、喷雾干燥：

A组分：将200mg的API药物溶解在10mL无水乙醇中。

B组分：将总量800mg的处方比的聚合物溶解在10mL无水乙醇/水(4:6)中；将A和B溶液充分混合制成5％(w/w)的溶液，超声混合5min。

使用喷雾干燥机Yamato ADL 311s制备紫杉醇ASD，入口温度85℃、出口温度55℃；溶液进料速度：8mL/min；雾化氮气压力0.1MPa；制备后，将紫杉醇SSDs在40℃真空干燥过夜，以去除残留溶剂，然后样品置于4℃下备用。

(2)、SD样品溶解情况初步评估：

称取1mg各处方SD样品到透明液相小瓶中，逐步加入50～100μL PBS(pH6.5)溶液，观察粉末的溶解情况。

(3)、SD样品含量测定：

称取20mg处方样品到10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，超声混合1min后取适量用甲醇稀释10倍并进行HPLC定量分析。

(4)、样品热性能分析：

使用TA DSC Q2000差示扫描量热仪进行样品的热性能分析。称重约1～5mg的样品到Tzero铝盘中，以10℃/min的加热速率从环境温度加热至235℃，氮气流速为40mL/min。

(5)、热重分析：

使用在TGA Discovery Q50热重分析仪，将约1～5mg的样品放在铂金锅中并盖上盖子，加热至400℃(升温速度：10℃/min)。使用Trios软件分析得到重量-温度图，以计算25～200℃之间的重量损失，并分析样品分解温度。

(6)、粉末X射线衍射：

用高分辨率X’pert X射线衍射仪获得样品的PXRD图。将约0.5mm厚的干燥样品放置在硅样品架中，放置在衍射仪中，并在40mA的电流和40kV的张力下进行扫描，扫描范围是5-40°(衍射角为2°)，步长为0.026°，扫描速度为每秒0.146°。

(7)、粉末溶出：

称取10mg SDD样品置于15mL的离心管中，然后加入PBS(pH6.5)或者0.05M HCl(pH1.5)溶液10mL，涡旋后超声处理30min让其充分分散，最后放入37℃水浴摇床中定点15、30、60、120、240min及12、48h取样400μL，经13000转速离心5min后，取适量上清液用甲醇稀释1倍(或其它适合倍数)并进行HPLC定量分析。

(8)、实验结果：

根据步骤二的载体辅料筛选结果，结合对辅料溶解特性的经验了解及简单小试实验，充分考虑到：①、Soluplus接枝聚合物自身为高分子材料在水溶液中溶解速度慢易结团，在ASD处方中不适宜大比例应用；②、HPMCAS在水溶液中溶解速度较PVPVA慢，与Soluplus接枝聚合物组合，增加溶液澄清难度。综上各因素，拟定以常见的PVPVA为主要载体辅料，20％PTX载药量的SDDs处方筛选组合见表6。

处方	SDD1	SDD2	SDD3	SDD4	SDD5	SDD6
							PTX	200	200	200	200	200	200
PVPVA(64)	800	700	700	700	700	-
							HPMCAS	-	-	-	-	-	700
Soluplus	-	100	-	70	-	-
							SLS	-	-	100	30	-	100
TPGS	-	-	-	-	100	-
							Total	1000	1000	1000	1000	1000	1000

表6

喷雾干燥结果：各处方喷雾干燥样品的收率，见表7。

表7

样品溶解结果：处方SDD1～SDD6样品溶解情况，见图11。

只有处方SDD3能在50μL溶液中快速溶解成澄清溶液，其它处方在100μL溶液中难溶，稀释到1.5mL仍然无法完全溶解。

采用同样的方法，进一步确认处方SDD3在PBS(pH6.5)溶液中的溶解限度，结果50mg处方SDD3样品在100μL溶液中通过针头搅拌仍然可以溶解澄清，见图12，只是粘度比较大(溶液稀释后用HPLC定量，浓度为108mg/mL)，其溶解度高达PTX无定形溶解度(29μg/mL)的4000倍，处方SDD3的溶解情况见图12。

热性能分析结果：

1、处方SDD1～SDD6相应原料的DSC实验结果，见图13。

2、处方SDD1～SDD6样品的DSC实验结果，见图15。

热重分析结果：

1、处方SDD1～SDD6相应原料的TGA实验结果，见图14。

2、处方SDD1～SDD6样品的TGA实验结果，见图16。

粉末溶出结果：

开展SDD1～SDD6在PBS(pH6.5)条件的粉末溶出对比实验，结果与上面实验结果一致，SDD3(PTX:PVPVA:SLS＝2:7:1)能达到100％的溶解度，其次是处方SDD6(PTX:HPMCAS:SLS＝2:7:1)，约30％的溶出度，它们能维持过饱和能力均达48h以上，详见图17。

设计对比实验组S9和S10，其成分见表8。

名称	S9	S10
			PTX	10	10
HPMCAS(M)	-	30
			PVPVA(64)	30	-
SLS	5	5

表8

考察其在PBS(pH6.5)溶液对PTX维持过饱和的效果，结果显示S9溶液组合样品的维持过饱和效果不好，与SDD3喷雾干燥样品的溶出结果不一致，而S10溶液组合样品于SDD6喷雾干燥样品的溶出结果较相似，有较好的维持过饱和现象，见图18。

进一步开展SDD3和SDD6在0.05M HCl(pH1.5)条件的粉末溶出对比实验，并与其在PBS(pH6.5)粉末溶出结果进行对比分析，见图19。

结果显示SDD3在酸环境下仅约20％，且12h后维持过饱和效果较SDD6处方差。

综上结果，SDD3和SDD6两处方对PTX的增溶和维持过饱和效果各有其优势，是目前暂时较理想的两种PTX无定形处方。

步骤四，选择紫杉醇SDDs稳定性处方：

本实施例中，依据步骤三筛选结果，暂选定SDD3和SDD6两种处方进行短时间的加速稳定性实验，拟为进一步深入优化处方提供数据参考，稳定性研究方案为：将样品置于40℃，75％开口及闭口、以及室温闭口条件下保存5天、10天、15天、1个月取样，检查DSC和XRD以评估PTX的结晶度，并用HPLC进行含量测定，结果见表9。

表9

处方SDD3和SDD6外观和溶解情况对比情况，见图20。

SDD3和SDD6部分出现晶体峰的稳定性样品与PTX原料及SLS辅料XRPD对比情况，见图21。

以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims

1.一种口服紫杉醇处方的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、紫杉醇初步理化性质测定：

(1)、表观溶解度考察：

(2)、无定形溶解度考察：

(3)、结晶趋势测定：

步骤二、初步载体辅料筛选：

(1)平衡溶解度实验：

(2)过饱和实验：

步骤三、紫杉醇SDDs处方筛选：

(1)、喷雾干燥：

A组分：将紫杉醇原料药溶解在无水乙醇中；

(2)、样品溶解情况初步评估：

(3)、样品含量测定：

(4)、样品热性能分析：

(5)、热重分析：

(6)、粉末X射线衍射：

(7)、粉末溶出：

步骤四、选择紫杉醇SDDs稳定性处方：

2.根据权利要求1所述的一种口服紫杉醇处方的筛选方法，其特征在于：在步骤一的(1)表观溶解度考察中，首先取的紫杉醇的用量为10mg，0.05MHCl、50M磷酸盐缓冲液、水溶液分别的取用量为10ml，其中0.05M HCl的PH值为1.5，50M磷酸盐缓冲液的PH值为6.5；另外称取的紫杉醇的用量为80mg，醇类和水混合溶液为甲醇/水(7:3)溶液或者乙醇/水(7:3)溶液，醇类和水混合溶液的取用量为10ml；水浴之后取样量为500μl。

3.根据权利要求2所述的一种口服紫杉醇处方的筛选方法，其特征在于：在步骤一的(2)无定形溶解度考察中，0.05M HCl和50M磷酸盐缓冲液的用量为1ml，紫杉醇甲醇溶液的用量为20～40μl，浓度为50mg/ml。

4.根据权利要求3所述的一种口服紫杉醇处方的筛选方法，其特征在于：在步骤一的(3)结晶趋势测定，加热温度为230℃，在230℃下保持1min。

5.根据权利要求1所述的一种口服紫杉醇处方的筛选方法，其特征在于：在步骤二的(1)平衡溶解度实验中，紫杉醇用量为10mg，50M磷酸盐缓冲液用量为10ml，其PH值为6.5。

6.根据权利要求5所述的一种口服紫杉醇处方的筛选方法，其特征在于：在步骤二的(2)过饱和实验中，紫杉醇甲醇溶液的浓度为50mg/ml，紫杉醇甲醇溶液的用量为100μl，50M磷酸盐缓冲液的用量为5ml，配置浓度为100μg/mL的过饱和溶液。

7.根据权利要求1所述的一种口服紫杉醇处方的筛选方法，其特征在于：在步骤三的(1)喷雾干燥中：

A组分：紫杉醇原料药用量为200mg，无水乙醇用量为10ml；

8.根据权利要求7所述的一种口服紫杉醇处方的筛选方法，其特征在于：在步骤三的(5)热重分析中，升温速率为10℃/min。

9.根据权利要求8所述的一种口服紫杉醇处方的筛选方法，其特征在于：在步骤三的(6)X射线衍射中，样品在40mA的电流和40kV的张力下进行扫描。

10.根据权利要求9所述的一种口服紫杉醇处方的筛选方法，其特征在于：在步骤三的(6)X射线衍射中，扫描范围是5-40°，衍射角为2°，步长为0.026°，扫描速度为每秒0.146°。