CN115803006A

CN115803006A - 用于治疗口咽真菌感染的粘膜粘附片剂

Info

Publication number: CN115803006A
Application number: CN202180035163.1A
Authority: CN
Inventors: 多米尼克·科斯坦蒂尼; 皮埃尔·阿塔利; 让·瑟伦
Original assignee: Viktas Pharmaceuticals
Current assignee: Viktas Pharmaceuticals
Priority date: 2020-05-12
Filing date: 2021-05-11
Publication date: 2023-03-14
Also published as: BR112022022948A2; EP4149426A1; WO2021229170A1; ES3036600T3; EP4149426C0; FR3110079A1; JP2023526337A; MX2022014120A; EP4149426B1

Abstract

本发明涉及一种缓释型口腔粘膜粘附片剂，其包含25mg至150mg、优选35mg至135mg作为活性成分的咪康唑与作为赋形剂的乳蛋白浓缩物和羟丙甲纤维素(HPMC)的组合，其特征在于该片剂具有大于20N的硬度以及大于100g的粘附性。本发明还涉及所述片剂用于口咽念珠菌病治疗、特别是生物膜治疗的用途。

Description

用于治疗口咽真菌感染的粘膜粘附片剂

技术领域

本发明涉及治疗剂领域，更具体地涉及旨在治疗口咽感染如口咽念珠菌病的粘膜粘附组合物。

背景技术

念珠菌病是一种由念珠菌属的酵母引起的真菌病(也称为霉菌病)。念珠菌属的酵母是腐生的，即，它们形成共生菌群的一部分。然而，在某些条件下，它们会转变成能够粘附和定植到粘膜的致病性丝状体形式。有大约23种念珠菌对人类具有致病性，特别是白色念珠菌(Candida albicans)，它是导致口咽霉菌病的主要病原体。可能涉及其它念珠菌，如热带念珠菌(C.tropicalis)、光滑念珠菌(C.glabrata)、乳酒念珠菌(C.kefyr)、季也蒙念珠菌(C.guilliermondii)、克柔念珠菌(C.krusei)、葡萄牙念珠菌(C.lusitaniae)和近平滑念珠菌(C.parapsilosis)。

目前，有数种局部药物用于治疗口咽念珠菌病。这些药物的形式有凝胶如

(咪康唑)、可饮用混悬液或漱口水如

(两性霉素B)或

(制霉菌素)，以及牙龈施用片剂如

(咪康唑)。

然而，药物抗真菌治疗在治愈口咽念珠菌病方面有时不够有效，复发时需要患者使用其它类别的药物以防全身感染。可饮用制剂或凝胶的高糖含量与感染部位处过度波动或短暂的局部浓度合起来导致出现了耐药性，并促进了口咽念珠菌病复发。

某些口咽念珠菌病对抗真菌药物具有原发性或继发性耐药性。耐药性可能与多种机制有关，主要是靶标酶以及参与抗真菌剂外排的某些泵蛋白的突变或过度表达。多种机制往往共存，而且不同抗真菌剂之间的交叉耐药性并不罕见。除了这些耐药性机制以外，近年来还报告了酵母形成生物膜的能力，生物膜保护它们免受宿主免疫系统或抗真菌药物等外界因素的影响。

生物膜是由被胞外多糖基质包围的酵母、菌丝和假菌丝的密集网络构成的复杂三维结构。

生物膜口咽念珠菌病，特别是口颊念珠菌病，具有多因素病因。若干个因素促成生物膜口咽念珠菌病的发展，如佩戴医疗器材、年龄、生理性或医源性唾液减少、口腔创伤、大量摄入抗生素或皮质类固醇、某些全身性疾病如糖尿病和癌症，以及免疫功能受损的受试者，例如罹患HIV或接受过放疗或化疗的受试者。

关于医疗器材，若干研究已经证明它们构成了有利于念珠菌生物膜形成的表面。因此，牙科假体、假牙、正畸系统和其它牙科医疗器材可能是口腔念珠菌病的来源。这种情况的原因是念珠菌很容易粘附到这些医疗器材的表面，这有助于形成能够定植到邻近粘膜、然后定植到整个口腔和舌头的生物膜。这种感染可能导致急性念珠菌性口腔炎(例如念珠菌相关性义齿口腔炎(CaD))，其特征是口腔粘膜炎症、慢性红斑和/或水肿，这使得进食特别痛苦，并可能导致脆弱个体的严重全身并发症。

若干项体外研究已经证明，相对于浮游形式，念珠菌生物膜对抗真菌剂具有更大的耐药性。对于不同类别的抗真菌剂，例如多烯类抗真菌剂如两性霉素B或唑类抗真菌剂如氟康唑、伊曲康唑、咪康唑和伏立康唑，已观察到这种耐药性。这些研究与临床经验一致，表明生物膜口咽念珠菌病对抗真菌治疗反应不佳，复发频繁，全身播散风险高(Gebremedhin等人,Journal of Physiology and Pharmacology,2014,65,4,593-600)。

因此，目前需要新策略来管控生物膜口咽感染。

发明内容

根据第一方面，本发明的一个目标是一种持续释放型口颊粘膜粘附片剂，所述持续释放型口颊粘膜粘附片剂包含25至150mg、优选35至135mg作为活性成分的咪康唑与作为赋形剂的乳蛋白浓缩物和羟丙甲纤维素(HPMC)的组合，特征在于它具有大于100g、优选150g至500g的粘附度，以及大于20N、优选25至40N的硬度。在某些实施方案中，根据本发明的片剂的“硬度/粘附性比”小于0.4，优选为0.04至0.4。粘附性(即，片剂对牙龈粘膜的生物粘附力)和硬度用常规方法测定，如下文所说明。

在某些实施方方式中，粘膜粘附片剂的特征在于：

-它通过制粒工艺、优选通过湿法制粒获得，

-它包含一次颗粒，所述一次颗粒包含咪康唑、乳蛋白浓缩物和一些HPMC，剩余的HPMC处在所述一次颗粒的外相中并且占所述片剂中存在的HPMC的总重量的45重量％至55重量％。

所述片剂还可以在外相中包含表面活性剂，优选十二基硫酸盐。

根据本发明的片剂还可以包含崩解剂，如存在于所述一次颗粒中的玉米淀粉，以及包含一种或多种润滑剂，如存在于所述外相中的滑石和硬脂酸镁。

所述粘膜粘附片剂优选地具有以下体外释放曲线：

-在4小时内释放所述片剂中存在的咪康唑的20％至45％，

-在8小时内释放所述片剂中存在的咪康唑的60％至85％，

-在24小时内释放所述片剂中存在的咪康唑的至少85％，通过优选地如美国药典(USP)第711章定义的溶出试验，在以下条件下测定体外溶出曲线：

-篮式溶出装置：USP溶出设备1

-溶出介质：0.5％的在纯化水中的SDS，pH调至6.5±0.5

-溶出体积：1000mL

-温度：37±0.5℃

-转速：60rpm。

在某些实施方案中，根据本发明的粘膜粘附片剂的特征在于在它施用到所述受试者的牙龈后24小时产生的唾液咪康唑浓度(C_24h)为至少100μg/mL，优选为至少140μg/mL。根据某些实施方案，根据本发明的片剂包含50mg咪康唑并具有以下药代动力学特性：平均唾液Cmax为300至500μg/ml，平均唾液Tmax为约13至15小时，平均唾液AUC∞为2000至3000μg/mL。

在其它实施方案中，根据本发明的片剂的特征在于所述乳蛋白浓缩物呈雾化粉末的形式，其蛋白质含量为至少85重量％，优选至少87重量％，钙含量为至少1重量％，优选约2.2重量％，和/或所述HPMC在20℃水中的表观粘度为11 000至22 000cP。此外，根据本发明的粘膜粘附片剂可以包含：

-35％至50％的咪康唑，

-10％至25％、优选15％至20％的HPMC，

-15％至30％、优选20％至26％的乳蛋白浓缩物，

-5％至15％、优选6％至10％的崩解剂，优选玉米淀粉，

-0％至3％的乳糖，优选0.1％至0.8％的乳糖，

-2％至8％的表面活性剂，优选3％至6％十二烷基硫酸钠，

-1％至3％的润滑剂，优选1.5％至2.5％的硬脂酸镁和滑石，

所述百分比是相对于所述片剂的总重量按重量计来表示。

通常，所述片剂中的咪康唑的量是50mg或100mg。

根据本发明的片剂可以通过湿法制粒工艺获得，所述湿法制粒工艺包括以下步骤：

a)将咪康唑与乳蛋白浓缩物、一些HPMC和崩解剂混合，

b)通过加入包含乳糖的水对步骤a)的混合物进行湿法制粒，

c)干燥并校准步骤b)获得的颗粒，

d)将剩余的HPMC、表面活性剂和润滑剂加入至步骤c)获得的颗粒，以及

e)将步骤d)的混合物压缩成型，以获得片剂。

通常，在步骤a)中，相对于最终片剂中存在的HPMC的总重量，加入45重量％至55重量％、优选50重量％的HPMC。进行步骤e)以使所述片剂的硬度为至少20N，优选为20N至60N，例如25N至50N。在一个具体实施方案中，根据本发明的片剂旨在用于罹患或易患生物膜口咽感染的受试者。

根据本发明的另一个目标是如上文所定义的片剂在治疗和预防受试者的生物膜口咽感染方面的用途。

所述感染可以是口腔念珠菌病，优选与选自白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、乳酒念珠菌、季也蒙念珠菌、克柔念珠菌、葡萄牙念珠菌和近平滑念珠菌的一种或多种念珠菌相关。在某些实施方案中，所治疗的受试者具有一个或多个风险因素，所述风险因素选自高龄(优选75岁以上)、糖尿病、癌症、生理性或医源性咽部念珠菌病、免疫抑制、营养不良、抽烟、过度使用口腔杀菌剂、佩戴口腔医疗器材和医学治疗如皮质类固醇疗法(特别是通过吸入疗法)、抗生素、免疫抑制剂、放疗(特别是颈部和头部放疗)和化疗。

在一个具体实施方案中，根据本发明的片剂用于治疗和预防生物膜口咽感染，所述受试者佩戴口腔医疗器材，所述口腔医疗器材优选地选自假牙、固定的或可拆卸的牙科假体、和正畸器械。所述生物膜口咽感染可能特别是与佩戴牙科医疗器材有关的念珠菌性口腔炎。

本发明的目标还有一种治疗受试者的生物膜口咽感染的方法，所述方法包括口腔施用如上文所定义的粘膜粘附片剂。本发明的另一个主题是咪康唑用于制备供治疗生物膜口咽感染用的药物的用途，所述药物呈如上文所定义的粘膜粘附片剂的形式。

最后，本发明的目标是一种通过湿法制粒制造根据本发明的咪康唑粘膜粘附片剂的方法，所述方法包括以下步骤：

a)将咪康唑与一些HPMC、乳蛋白浓缩物和崩解剂混合，

b)通过加入包含乳糖的水对步骤a)的混合物进行湿法制粒，

c)干燥并校准步骤b)获得的颗粒，

e)将步骤d)的混合物压缩成型，以获得片剂，

其中在步骤a)中，加入占最终片剂中存在的HPMC的总重量的45重量％至55重量％，优选50重量％的HPMC，

其中进行步骤e)以使所述片剂的硬度为至少20N，优选为20N至60N，例如25N至50N。

附图说明

图1示出了根据本发明的片剂(形式B)和参考片剂(形式A)的体外溶出曲线。

图2示出了根据本发明的片剂(形式B)与参考片剂(形式A)的平均唾液浓度随时间的演化。

图3示出了在高压缩力和较低压缩力下获得的片剂在T 24小时的外相与内相之间HPMC分布对咪康唑的体外释放量的影响。

具体实施方式

Gebremedhin等人(见上文)在体外测试了咪康唑对各种念珠菌的生物膜模型的抗真菌活性。Gebremedhin等人观察到咪康唑对这些生物膜的抗真菌活性。然而，作者证明了，在所有被测试物种中，即白色念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌和近平滑念珠菌中，约100μg/ml的咪康唑浓度是使生物膜代谢活性降低至少50％的必要条件。

根据这一发现，申请人分析认为，有必要长期使唾液浓度达到大于100μg/ml，才有望治疗生物膜口腔念珠菌病。

国际专利申请WO 03/009800描述了一种咪康唑粘膜粘附片剂，所述咪康唑粘膜粘附片剂特别包含作为赋形剂的乳蛋白、羟丙甲纤维素(HPMC)和十二烷基硫酸钠(SDS)。所述片剂通过将咪康唑与HPMC和乳蛋白混合的湿法制粒工艺获得。将如此获得的混合物与含有乳糖的水溶液一起制粒，以便获得一次颗粒，向其中加入SDS和其它赋形剂(润滑剂)。混合后，通过压缩获得片剂。HPMC主要存在于内相中(即，在一次颗粒中)。国际专利申请WO 03/009800没有提供关于所获得的片剂的硬度或生物粘附性的任何说明，但描述了这些片剂的唾液Cmax为15.07μg/ml，唾液tmax为7小时，唾液AUC 0-12h为约43μgl.h/ml。显然，专利申请WO 03/009800所述的片剂不可能建立有效治疗生物膜口腔念珠菌病所需的100μg/ml的长期唾液浓度。

因此，申请人试图修改国际专利申请WO 03/009800中描述的药物形式，以便以稳定又快速的方式获得至少100μg咪康唑/ml患者唾液的唾液浓度，同时协调简单的剂量给药方案，即每天一次施用这种药物形式。

令人惊讶地，申请人已经证明可以通过增加该片剂的硬度来改善咪康唑的释放曲线。

这样的结果完全出乎意料，因为本领域技术人员预期硬度的增加会改变片剂的完整性，阻止或延迟唾液渗透，并因此阻止或延迟活性成分的溶出，而且还阻碍其粘附到患者的粘膜。本领域技术人员还能预期片剂硬度的增加将阻止活性成分的局部快速释放和/或有利于活性成分的实质性全身释放，由于相关副作用之故，这是特别不理想的。换言之，本领域技术人员还预期硬度的增加将会通过降低活性成分的初始释放速率以及由于片剂在口腔中不完全崩解而防止其随时间续释放，从而显著改变活性成分的释放曲线。

然而，令人惊讶地，申请人已经证明，硬度大于20N的片剂，相对于组成相似但硬度为约17N的对照片剂，具有改进的体外溶出曲线。

令人惊讶地，申请人还证明了，这种体外差异通过片剂粘附持续时间更长(24小时对比参考片剂的15小时)和显著改变的药代动力学曲线在人体内反映出来。根据本发明的包含50mg剂量的咪康唑的粘膜粘附片剂允许咪康唑持续释放，特征在于唾液Cmax为2630μg.h/ml，Tmax为14小时，AUC为2630μg/mL。特别地，24小时时唾液咪康唑浓度为约150μg/ml，这远远高于Gebremedhin等人测定的浓度，对所有被测念珠菌菌株的代谢活性产生至少50％抑制。这些药代动力学特性明显优于针对对照片剂和专利申请WO 03/009800所述的片剂所观测的药代动力学特性。

换言之，根据本发明的持续释放粘膜粘附片剂可以在24小时内持续产生大于100μg/ml的唾液浓度，这是在参考片剂或其它常用药物形式如咪康唑基凝胶和漱口水的情况下没有观测到的。

申请人还观测到，“硬度/粘附性”比是获得咪康唑释放曲线改善的重要参数。优选地，根据本发明的片剂的“硬度/粘附性”比大于0.04且小于0.4。

最后，申请人已经证明，通过如专利申请WO 03/009800所述的湿法制粒来制备根据本发明的片剂是有利的，但通过分级加入HPMC，使得约一半的HPMC存在于一次颗粒中，其余部分存在于外相中。这样的分级处理使得可以获得具有最佳硬度和生物粘附性的片剂。此外，这种分级处理使制造工艺更稳健，从而改善了片剂的可压缩性，并将压缩步骤对体外溶出试验中释放的咪康唑的总比例的影响降至最小。

不希望受任何理论束缚，申请人认为，根据本发明的粘膜粘附片剂可以建立极高的和长期的唾液抗真菌剂浓度，这将具有治疗口咽念珠菌病、特别是生物膜念珠菌病或对常规治疗有耐药性的念珠菌病的主要临床优势。

因此，与通常的市售药物形式不同，通过使得能够在其施用期间(24小时)内产生显著大于100μg/ml的唾液咪康唑浓度，根据本发明的咪康唑粘膜粘附片剂特别适于治疗和预防生物膜口咽感染。

因此，本发明的一个目标是一种持续释放粘膜粘附片剂，特征在于它包含25mg至150mg作为活性成分的咪康唑、作为赋形剂的乳蛋白浓缩物和羟丙甲纤维素，并且它的硬度大于20N。优选地，根据本发明的片剂具有大于100g的粘附性和大于0.04的“硬度/粘附性”比。

根据本发明的片剂优选地通过制粒获得，并包含含有咪康唑、乳蛋白和一些HPMC的一次颗粒，外相包含剩余的HPMC，一次颗粒中存在的HPMC占所述片剂中存在的HPMC的总重量的45重量％至55重量％。

根据本发明的片剂特别适用于罹患或易患生物膜口咽感染的受试者。

本发明的目标还有所述片剂用于治疗或预防生物膜口咽感染，特别是生物膜口腔念珠菌病的用途。

根据本发明的另一个目标是一种在受试者中治疗生物膜口咽感染、特别是生物膜口腔念珠菌病的方法，所述方法包括向患者的牙龈施用根据本发明的粘膜粘附片剂，所述施用在24小时后可重复，优选在至少7天的时间段内进行。

1.根据本发明的持续释放粘膜粘附片剂：

如上文所指出，本发明的一个目标是一种持续释放咪康唑粘膜粘附片剂。

术语“粘膜粘附片剂”是指能够长时间(即，若干小时)粘附到粘膜的片剂。在本发明的上下文中，粘膜是指口腔粘膜，优选牙龈。根据本发明的粘膜粘附片剂能够在至少18小时的时间段、优选至少20小时、甚至更优选至少24小时的时间段内粘附到牙龈表面。

因此，根据本发明的片剂的给药途径是粘膜途径，更准确地说是颊龈粘膜。

术语“持续释放”是指药物形式允许活性成分以受控方式在长时间段内、即在若干小时内释放。

术语“咪康唑”是指具有CAS号22916-47-8的化合物，所述化合物具有以下化学式：

包括其外消旋混合物、对映异构体和药学上可接受的盐。

优选的药学上可接受的盐是硝酸咪康唑。

咪康唑以25mg至150mg的量存在于根据本发明的片剂中。优选地，咪康唑以50mg或100mg的量存在于根据本发明的片剂中。

如上文所述，根据本发明的粘膜粘附片剂的特征在于硬度为至少20N，优选为20至50N或25至40N。

在本发明的上下文中，优选地根据欧洲药典第2.9.8节(欧洲药典10.0，第337页，章节：片剂的抗压碎性(Resistance to crushing of tablets))测定所述片剂的硬度(也称为“抗压碎性”)。

根据本发明的粘膜粘附片剂的特征还在于粘附性大于100g，优选大于150g，例如在150g至600g、150g至500g、200g至550g或300g至500g的范围内。

在本发明的上下文中，粘附性(本文也称为生物粘附性、粘附强度或生物粘附)对应于片剂与给定表面(通常是不锈钢)的粘附强度。这种粘附强度可以根据常规方法使用稠度测定仪来测定。

通常，使用氰基丙烯酸酯类粘合剂将片剂的顶表面粘合到稠度测定仪的一次性探针上。然后将所述片剂与不锈钢支架在装有纯化水的结晶器中接触指定时间。然后，以设定的速度抬起稠度测定仪的杠杆臂，并测量将所述片剂拉离所需要的力，由此获得粘附强度。优选地，根据实施例中给出的方案来测定粘附强度。

在另一个实施方案中，根据本发明的粘膜粘附片剂的特征在于“硬度/粘附性”比大于0.04，硬度以牛顿(N)表示，粘附性以加速度单位(g)表示，所述硬度和粘附性根据上述方法测定。

在一个具体实施方案中，“硬度/粘附性”比在0.04至0.4的范围内，例如在0.04至0.1的范围内。

根据某些实施方案，根据本发明的持续释放型粘膜粘附片剂的特征在于以下体外释放曲线：

-所述片剂中不超过45％的咪康唑在4小时内释放，

-所述片剂中不超过85％的咪康唑在8小时内释放，

-所述片剂中至少85％的咪康唑在24小时内释放。

在某些其它实施方案中，根据本发明的持续释放型粘膜粘附片剂的特征在于以下体外释放曲线：

-所述片剂中20％至45％的咪康唑在4小时内释放，

-所述片剂中60％至85％的咪康唑在8小时内释放，并且

-所述片剂中至少85％的咪康唑在24小时内释放。

体外溶出曲线可通过溶出试验测定，优选按照美国药典(USP)第711章的规定，在以下条件下测定：

-篮式溶出装置：USP溶出设备1

-溶出介质：0.5％的在纯化水中的SDS，pH调至6.5±0.5

-溶出体积：1000mL

-温度：37±0.5℃

-转速：60rpm(每分钟转数)。

通过HPLC分析与UV检测(220nm吸光度)监测咪康唑向介质中的释放。

在额外或替代的实施方案中，根据本发明的粘膜粘附片剂的特征在于它在24小时提供至少100μg/ml，优选至少110、120、130或140μg/ml的平均唾液咪康唑浓度(C_24h)。通常，包含50mg剂量咪康唑的片剂的平均C_24h为约150μg/ml，包含100mg剂量咪康唑的片剂的平均C_24h为约425μg/ml。

在某些实施方案中，根据本发明的粘膜粘附片剂包含50mg咪康唑，特征在于平均唾液Cmax为300至500μg/ml(例如约350μg/mL)，平均唾液Tmax为约13至15小时(例如约14小时)，以及平均唾液AUC_inf为2000至3000μg.h/mL(例如约2600μg.h/mL)。

在其它实施方案中，根据本发明的粘膜粘附片剂包含100mg咪康唑，特征在于平均唾液Cmax为500至700μg/ml(例如约600μg/mL)，平均唾液Tmax为约15.5至17.5小时(例如约16小时)，平均唾液AUC_inf为4300至5500μg.h/mL(例如约4800μg.h/mL)。

上述药代动力学参数是从一组至少18岁的健康受试者获得的平均值。选择该组中包括的受试者的数量，以使所获得的结果具有统计学意义。

各受试者接受一片根据本发明的片剂(含有50mg或100mg咪康唑)，放置在上牙龈上，优选在门牙上方。对于各受试者，在24小时内以规律的时间间隔(通常每小时)获取唾液样品，以便测定咪康唑。对于各个体，可以按照常规方式从给出咪康唑唾液浓度随时间变化的曲线中确定各药代动力学参数。可以通过应用众所周知的统计方法，从个体的原始数据确定C_24h、Cmax、Tmax和AUC_inf的平均值。

如本文所用，C_24h表示将片剂施用到受试者的牙龈后24小时的唾液咪康唑浓度，Cmax表示施用片剂后所达到的最大唾液咪康唑浓度，Tmax表示达到Cmax的时间，AUC_inf表示绘出咪康唑浓度随时间外推至无穷大的曲线下面积。

如上文所指出，该持续释放粘膜粘附片剂的特征在于存在作为赋形剂的乳蛋白浓缩物和HPMC。本发明人已经证明，使用乳蛋白浓缩物与羟丙甲纤维素的组合作为赋形剂，对片剂的粘附性和活性成分释放曲线具有重大影响。

乳蛋白浓缩物充当生物粘附剂，从而确保片剂与牙龈粘膜的粘附性。

它优选是获自牛乳的蛋白浓缩物。换言之，它是至少部分纯化的牛乳蛋白的提取物，即具有至少80％的蛋白质含量。乳蛋白包括酪蛋白、白蛋白和球蛋白。酪蛋白是根据本发明的浓缩物中的主要蛋白。

这种蛋白浓缩物呈粉末形式，通常是通过通常包括脱脂步骤、巴氏杀菌步骤、渗滤或超滤步骤和喷雾干燥步骤的方法获自牛乳。优选地，乳蛋白浓缩物的蛋白质含量相对于所述浓缩物的总干重为至少85重量％，优选为至少86重量％或至少87重量％。所述乳蛋白浓缩物还包含相对于所述浓缩物的总重量为至少0.5重量％，优选至少1.0重量％或1.5重量％，例如1.5重量％至3.0重量％的钙含量。例如，钙含量可以在每100g乳蛋白浓缩物2.0g至2.5g的范围内。

不希望受任何理论束缚，本发明人认为钙离子的存在有助于本发明的蛋白浓缩物的生物粘附性能。

相对于片剂的总重量，乳蛋白浓缩物的含量通常为15重量％至30重量％，优选18重量％至28重量％，例如20重量％至26重量％。

羟丙甲纤维素(HPMC)既充当粘合剂，又充当亲水性基质，参与控制片剂的溶胀和活性成分的控制释放，并增强乳蛋白浓缩物的效果。可以使用通常以2％存在于20℃水中时表观粘度在10 000至25 000mPa.s，例如11 000至22 000cPs范围内的HPMC。

相对于片剂的总重量，HPMC的含量通常为10重量％至25重量％，优选15重量％至20重量％。

根据本发明的片剂可以包含其它赋形剂。

优选地，该片剂还包含表面活性剂。

表面活性剂可以用作润湿剂并促进活性成分溶出。表面活性剂包括但不限于西甲硅油、三乙醇胺、聚山梨醇酯衍生物如吐温20(

20)或吐温40(

40)、泊洛沙姆、脂肪醇如月桂醇或鲸蜡醇、或烷基硫酸盐如十二烷基硫酸盐(也称为月桂基硫酸盐)盐。表面活性剂优选为月桂基硫酸钠(也称为十二烷基硫酸钠或SDS)。相对于片剂的总重量，其含量通常为2重量％至8重量％。

优选地，根据本发明的片剂通过制粒工艺，特别是湿法制粒工艺获得。

通常，且如下文所详述，制粒工艺包括制备一次颗粒的步骤，在后续步骤中加入其他赋形剂。然后压缩所获得的混合物以获得片剂。在后续步骤中加入的赋形剂存在于外相中，因此存在于一次颗粒的外部。

因此，在一个具体实施方案中，根据本发明的片剂通过制粒获得，并包括含有咪康唑、乳蛋白浓缩物和一些HPMC的一次颗粒，HPMC的剩余部分处在外相中，并且相对于片剂中存在的HPMC的总重量，占45重量％至55重量％，优选46重量％至54重量％，例如47重量％至53重量％、48重量％至52重量％或甚至约50重量％。

优选地，所述片剂包含表面活性剂如SDS，所述表面活性剂处在外相中。

根据本发明的片剂还可以包含崩解剂和润滑剂。

崩解剂可用于改善片剂的溶胀和/或活性成分的释放。例如，它可以选自交联聚乙烯吡咯烷酮(交联聚维酮)、交联羧甲纤维素(如交联羧甲纤维素钠)或非交联羧甲纤维素、淀粉及其混合物。崩解剂优选为淀粉，例如玉米淀粉。相对于片剂的总重量，崩解剂的含量通常为5重量％至15重量％。当通过制粒来制备根据本发明的片剂时，崩解剂优选存在于一次颗粒中。

润滑剂可以是一种或多种化合物，其能够防止与制备干燥草药形式有关的问题，如填充和/或压缩过程中发生在机器上的粘滞和/或卡滞问题。优选的润滑剂是脂肪酸或脂肪酸衍生物如硬脂酸钙、单硬脂酸甘油酯、棕榈酰硬脂酸甘油酯、硬脂酸镁、硬脂酸锌或硬脂酸、聚二醇特别是聚乙二醇、苯甲酸钠或滑石。根据本发明的优选润滑剂是硬脂酸盐及其混合物。合适的润滑剂是例如硬脂酸镁、滑石及其混合物。当通过制粒来制备根据本发明的片剂时，相对于片剂的总重量，润滑剂的含量通常为1重量％至3重量％，并且优选处在外相中。

任选地，根据本发明的片剂包含选自稀释剂、调味剂、唾液分泌剂及其组合的一种或多种赋形剂。

例如，根据本发明的片剂包含0.1重量％至3重量％的稀释剂或粘合剂，所述稀释剂或粘合剂优选地选自单糖和多元醇，如甘露醇、乳糖、木糖或半乳糖，优选乳糖。

在某些实施方案中，根据本发明的片剂包含乳糖，所述乳糖在制粒工艺中用作粘合剂。

在某些实施方案中，根据本发明的粘膜粘附片剂包含：

-35％至50％的咪康唑，

-10％至25％、优选15％至20％的HPMC，

-15％至30％、优选20％至26％的乳蛋白浓缩物，

-5％至15％、优选6％至10％的崩解剂，优选玉米淀粉，

-0％至3％的乳糖，优选0.1％至0.8％的乳糖单水合物，

-2％至8％的表面活性剂，优选3％至6％十二烷基硫酸钠，

-1％至3％的润滑剂，优选1.5％至2.5％的硬脂酸镁和滑石，所述百分比是相对于所述片剂的总重量按重量计来表示。

每片咪康唑的剂量是25mg至150mg咪康唑，优选35mg至135mg咪康唑，或40mg至110mg咪康唑，例如50mg或100mg咪康唑。

在某些实施方案中，根据本发明的片剂可以通过制粒工艺、优选湿法制粒来制造。优选地，(i)润滑剂(例如滑石和硬脂酸镁)存在于外相中，(ii)咪康唑、崩解剂、乳蛋白浓缩物和乳糖存在于一次颗粒中，以及(iii)HPMC以45/55至55/45范围内、优选约1/1的质量比分布于一次颗粒和外相之间。

在一个具体实施方案中，通过包含以下步骤的方法制造根据本发明的片剂：

a)将咪康唑与一些HPMC、乳蛋白浓缩物和崩解剂混合，

b)通过加入任选地包含稀释剂(优选乳糖)的水对步骤a)的混合物进行湿法制粒，

c)干燥并校准步骤b)获得的颗粒，

e)将步骤d)的混合物压缩成型，以获得片剂。

制粒步骤可以在任何类型的制粒机，例如剪切造粒机中进行。

优选进行步骤c)，以便在颗粒中获得3重量％至9重量％、优选5％至7％的水含量。干燥可以在40℃至60℃的温度下进行，例如在移动床式干燥器中。

可以在步骤d)和e)之间引入额外的干燥步骤，以便将片剂的最终水含量控制在低于8％的值。

步骤e)通过常规技术并以获得最终硬度为至少20N(优选20N至50N或25N至40N)的片剂的方式进行。通常，这个步骤可以通过施加10kN至20kN的压缩力的旋转压片机来进行。

不希望受任何理论束缚，发明人认为在步骤a)和d)中部分加入HPMC有助于改善活性成分的物理化学性质和控制释放性质。它还改善了制造工艺的稳健性。通常，在步骤a)中加入所述片剂中存在的HPMC的最终量的45％至55％(例如46％至54％、47％至53％、48％至52％、49％至51％)，优选约50％，其余部分则在步骤d)中加入。

所述方法可以包括额外的步骤，如筛分和/或干燥各种原料或将最终片剂包装在合适的包装中。

不言而喻，如上所述获得片剂的方法也构成了本发明的目标的一部分。

2.根据本发明的治疗用途和方法：

根据本发明的咪康唑粘膜粘附片剂旨在用于罹患或易患生物膜口咽感染的受试者。

本发明的一个目标也是上述粘膜粘附片剂在治疗或预防生物膜口咽感染中的用途。

如本文所用，术语“治疗”涵盖对目标受试者的疾病的任何治疗，以：在无症状期间降低疾病或病症复发的发生率和/或风险；减轻或减少与疾病有关的症状或病症；防止所述疾病或其任何相关症状或所述病症在患病或易感疾病的受试者中发生；终止、减缓或延迟疾病或其相关症状或病症之一的发展；降低疾病(例如症状)发作的频率和/或强度；以及减轻疾病或相关症状或病症，即，使所述疾病或相关症状或病症完全或部分消退。

如本文所用，术语“预防”是指旨在预防、减缓或延迟疾病或其相关症状或病症的发作的预防性治疗。

为了本发明的目的，口咽感染涉及影响口咽，特别是口腔和咽喉的一处或多处粘膜的感染。这些感染可能涉及任何类型的微生物，特别是酵母菌或细菌。当观察到口咽表面上(例如牙龈、腭或舌头上)生长有由致病性微生物群落构成的三维结构，周围有保护性和粘附性多糖胞外基质时，使用术语“生物膜感染”。

在一个优选实施方案中，口咽感染是念珠菌病，优选口颊念珠菌病。术语“念珠菌病”是指由属于念珠菌属的一个或多个物种引起的感染。在某些实施方案中，口咽感染涉及选自白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、乳酒念珠菌、季也蒙念珠菌、克柔念珠菌、葡萄牙念珠菌和近平滑念珠菌的至少一种念珠菌。

罹患或易患生物膜口咽感染的受试者可以是任何年龄的男性或女性。

在一个具体实施方案中，所述受试者是有高危受试者，即，存在一种或多种促成生物膜感染的因素的受试者。

在一个具体实施方案中，罹患或易患生物膜口咽感染的受试者选自婴儿、老年受试者(优选至少75岁)、糖尿病受试者、特别是已经接受过放疗(特别是头部和颈部的放疗)或化疗的患癌受试者、罹患生理性或医源性咽部念珠菌病的受试者、接受皮质类固醇治疗(特别是通过吸入的方式)的受试者、接受抗生素治疗的受试者、过度使用抗细菌漱口水的受试者、免疫功能受损的受试者(例如罹患HIV或正在接受免疫抑制治疗的受试者)、吸烟者、罹患营养不良或进食障碍的受试者以及佩戴口腔医疗器材的受试者。

在本发明的上下文中，术语“口腔医疗器材”是指可以放置在口中的任何医疗器材，特别是固定的牙科假体，例如带有枢轴如桥的牙冠或植入物；可拆卸的牙科假体，特别是带有枢轴的夹式牙科假体；假牙和正畸器械，如矫正器、基于支架或基于支柱的器具、或带腭板的器具。

在某些实施方案中，所述受试者佩戴牙科医疗器材。

例如，生物膜口咽感染可能是念珠菌性口腔炎，特别是与佩戴假牙或义齿相关的念珠菌性口腔炎。口腔炎还可能与鹅口疮有关，特别是在脸颊内侧和舌头上。它还可能是慢性红斑念珠菌病或亲吻性念珠菌病病变。

在根据本发明的治疗用途和治疗中，将粘膜粘附片剂置于牙龈上，例如上颚的门牙或犬牙上方。片剂大约每24小时更换一次。施用剂量(50或100mg咪康唑片剂)和治疗持续时间取决于患者的特点，特别是年龄、体重、口咽感染的严重程度、一般健康状况和合并症。治疗持续时间为至少一周，一般是7至14天。取决于受试者的疾患和疾病的进展，必要时可以延长或重复此治疗。

本发明的其它方面和优点将在阅读以下实施例后显现，所述实施例应当被视为说明性的而非限制性的。

实施例

实施例1

根据本发明的片剂和参考片剂

制造了具有以下组成的根据本发明的50mg或100mg咪康唑片剂：

-43.5％咪康唑，

-17.8％ HPMC，

-23.9％乳蛋白浓缩物，蛋白质含量为87重量％，钙含量为2.2重量％，

-8.0％玉米淀粉，

-0.3％乳糖，

-4.5％十二烷基硫酸钠，

-1.15％硬脂酸镁和0.9％滑石，

所述百分比是相对于所述片剂的总重量按重量计来表示。

使用以下方法制造这些片剂：

a)将咪康唑与50％的HPMC、乳蛋白浓缩物和玉米淀粉混合，

b)通过在高剪切湿法制粒机中随搅拌加入乳糖在纯化水中的溶液，对步骤a)的混合物进行湿法制粒，

c)在移动床式干燥器中在约50℃的温度下干燥，并对步骤b)获得的颗粒进行校准，

d)将剩余的HPMC、SDS和润滑剂加入至步骤c)获得的颗粒，以及

e)使用压缩力为10至20kN的旋转压片机对步骤d)的混合物进行压缩成型。

如此获得的片剂的硬度在25N和40N之间，粘附性在150g和500g之间。

参考片剂的组成在定性和定量上与根据本发明的片剂的组成相似，并对应于专利申请WO 03/009800所述的片剂。这些片剂是根据与根据本发明的片剂类似的方法制造，但只在步骤a)中加入HPMC，并且在步骤e)中使用不同的乳蛋白浓缩物。调整步骤e)的压缩力，使得参考片剂的硬度为约18N。这些片剂的粘附性在20和30g之间。

根据欧洲药典第2.9.8节(10.0版)测定片剂的硬度。

根据以下方法，使用稠度测定仪来测定粘附强度：

所用设备：

-稠度测定仪：此装置由试验台、电源插座和连接到用于进行数据采集的计算机的控制键盘；

-一次性扁平尼龙探针，其中心凹槽拧到上部稠度测定仪设备的活动部分上(8.1mm直径，1mm深)；

-由直径4cm的结晶器组成的下部，其底座由与片剂形状相似的不锈钢试管组成。

所用试剂：

-纯化水：结晶器的介质。

-氰基丙烯酸酯粘合剂(例如“Superglue 3”或等效物)，用于将片剂粘到扁平探针上

程序：

结晶器装有10ml脱矿质水。用一滴氰基丙烯酸酯粘合剂将片剂通过扁平侧连接到尼龙探针的中心。将扁平尼龙探针拧到稠度测定仪的活动部分上。将探针压在不锈钢试管的表面上。90秒后提拉探针(施加力：1100g，提拉速度：0.2mm/s)。从该批次随机取30个片剂重复试验。

对于单个片剂进行的每一次测量，计算粘附强度并以克表示(1g是9.81×10^-3N)。粘附性试验的结果是30个单独粘附强度值的平均值。

体外溶出曲线

通过美国药典(USP)第711章规定的溶出试验，在以下条件下测定各批次片剂的体外溶出曲线：

-样品数量：6

-篮式溶出装置：USP溶出设备1

-溶出介质：0.5％的在纯化水中的SDS，pH调至6.5±0.5

-溶出体积：1000mL

-温度：37±0.5℃

-转速：60rpm(每分钟转速)。

图1示出了所获得的溶出曲线。根据本发明的片剂(形式B)示出了比参考片剂更持久的咪康唑释放。

药代动力学评估

在两个不同的时间进行的两个独立的药代动力学临床研究(研究1和研究2)中对两批片剂(根据本发明的批次和参考批次)进行了评估。这些是对18至35岁健康受试者(男性和女性)进行的药代动力学研究。这些研究的目的是确定每天一次施用50mg或100mg粘膜粘附片剂后唾液咪康唑的药代动力学。在24小时时间段内评估咪康唑的唾液和血浆药代动力学。

对于各受试者，将根据本发明的片剂或参考片剂放置在口颊区域(门牙正上方的上牙龈)，直到其侵蚀或脱落。评估的参数有：唾液样品和血浆样品中的咪康唑浓度、生物粘附片剂侵蚀或脱落所需的时间、基于不良事件报告和局部(口颊)检查的耐受性评估。通过在施用药物前和给药后0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、14和24小时采集唾液样品来评估唾液中的咪康唑浓度。在给药前和给药后0.5、1、4、6、8、12和24小时收集血浆样品。试验的定量下限是0.1ng/ml。

下面的表1整理了所获得的主要结果：

应当指出，专利申请WO 2003/9800描述了50mg参考片剂的唾液Cmax是15μg/ml，Tmax是7小时，唾液AUC_0-12h是43μg.h/mL。

患者对所述片剂的耐受性良好。

根据本发明的片剂提供了更高且持续时间更长的唾液咪康唑浓度，这将使得可以提高治疗功效，特别是在治疗生物膜念珠菌病时。同时，观察到血浆浓度较低，表明全身吸收较低，因此副作用发生率较低。

图2示出了根据本发明的片剂(形式B)的平均唾液浓度随时间的变化对比参考片剂(形式A)获得的结果。可看出，与参考片剂相比，根据本发明的片剂能够建立稳定、更高、更持久的唾液浓度。令人惊讶地，根据本发明的片剂的高硬度改善了咪康唑的体内药代动力学。

实施例2

研究了HPMC在外相和内相间分布的影响。根据与实施例1相同的方法来制备片剂，其中内相/外相HPMC分布如下：0/100、25/75、50/50、75/25和100/0。在高压缩力(+力)下获得第一系列片剂。在较低压缩力(-力)下获得第二系列片剂。对于各HPMC分布，在以下体外溶出试验中比较T_24h的咪康唑释放量：

片剂(50mg咪康唑)在非沉降条件下的体外溶出(HPLC测定)

-pH 6.8磷酸盐缓冲介质：20ml，在封闭瓶中，不振荡，浓度37％。

-总持续时间24小时

-在1小时、2小时、3小时、4小时、6小时、8小时和24小时获取样品

-在各时间点，取全部介质(不倒置瓶子)用于测定，并加入20ml介质。

对于指定HPMC分布，比较在+力下获得的片剂和在-力下获得的片剂的T_24h平均咪康唑释放量。

结果如图3所示。图3显示，当HPMC在外相和内相间均匀分布时，压缩力对咪康唑释放量的影响最小。然后观察到用+力压缩获得的片剂对比用-力压缩获得的片剂之间有9％的变化。另一方面，当HPMC在内相和外相间不均匀分布时，注意到释放量有非常显著的变化。

HPMC在内相和外相间均匀分布使压缩力对咪康唑释放的影响最小，因此提高了制造工艺的稳定性。

Claims

1.一种持续释放型口颊粘膜粘附片剂，其包含25mg至150mg、优选35mg至135mg作为活性成分的咪康唑与作为赋形剂的乳蛋白浓缩物和羟丙甲纤维素(HPMC)的组合，特征在于其具有大于20N的硬度和大于100g的粘附性。

2.根据权利要求1所述的粘膜粘附片剂，特征在于“硬度/粘附性”比大于0.04。

3.根据权利要求1或2所述的粘膜粘附片剂，特征在于其硬度为25N至40N，粘附性为150g至500g，以及“硬度/粘附性”比为0.04至0.4。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的粘膜粘附片剂，特征在于：

-所述片剂通过制粒工艺、优选通过湿法制粒获得，

-所述片剂包含一次颗粒，所述一次颗粒包含咪康唑、乳蛋白浓缩物和一些HPMC，剩余的HPMC处在所述一次颗粒的外相中并且占所述片剂中存在的HPMC的总重量的45重量％至55重量％。

5.根据权利要求4所述的粘膜粘附片剂，特征在于所述片剂在外相中包含表面活性剂，优选十二烷基硫酸盐。

6.根据权利要求4或5所述的粘膜粘附片剂，特征在于其还包含崩解剂，如存在于所述一次颗粒中的玉米淀粉，以及包含一种或多种润滑剂，如存在于所述外相中的滑石和硬脂酸镁。

7.根据前述权利要求中任一项所述的粘膜粘附片剂，特征在于：

-乳蛋白浓缩物为雾化粉末的形式，并具有至少85重量％、优选至少87重量％的蛋白质含量，以及至少1重量％、优选约2.2重量％的钙含量，和/或

-HPMC具有在20℃的水中为11 000cPs至22 000cPs的表观粘度。

8.根据前述权利要求中任一项所述的粘膜粘附片剂，特征在于其具有以下体外释放曲线：

-所述片剂中20％至45％的咪康唑在4小时内释放，

-所述片剂中60％至85％的咪康唑在8小时内释放，

-所述片剂中至少85％的咪康唑在24小时内释放，

体外溶出曲线通过溶出试验测定，优选按照美国药典(USP)第711章规定的溶出试验在以下条件下测定：

-篮式溶出装置：USP溶出设备1

-溶出介质：0.5％的在纯化水中的SDS，pH调至6.5±0.5

-溶出体积：1000mL

-温度：37±0.5℃

-转速：60rpm。

9.根据前述权利要求中任一项所述的粘膜粘附片剂，特征在于在其被施用到受试者的牙龈后24小时产生至少100μg/mL、优选至少140μg/mL的唾液咪康唑浓度(C_24h)。

10.根据前述权利要求中任一项所述的粘膜粘附片剂，特征在于其包含50mg咪康唑并具有以下的药代动力学特性：300μg/ml至500μg/ml的平均唾液Cmax，约13小时至15小时的平均唾液Tmax，2000小时至3000小时的平均唾液AUC_inf。

11.根据前述权利要求中任一项所述的粘膜粘附片剂，特征在于其包含：

-35％至50％的咪康唑，

-10％至25％、优选15％至20％的HPMC，

-15％至30％、优选20％至26％的乳蛋白浓缩物，

-5％至15％、优选6％至10％的崩解剂，优选玉米淀粉，

-0％至3％的乳糖，优选0.1％至0.8％的乳糖，

-2％至8％的表面活性剂，优选3％至6％的十二烷基硫酸钠，

-1％至3％的润滑剂，优选1.5％至2.5％的硬脂酸镁和滑石，

所述百分比是相对于所述片剂的总重量按重量计来表示。

12.根据前述权利要求中任一项所述的片剂，特征在于所述片剂中的咪康唑的量是50mg或100mg。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的片剂，特征在于其通过湿法制粒工艺获得，所述湿法制粒工艺包括以下步骤：

a)将咪康唑与一些HPMC、乳蛋白浓缩物和崩解剂混合，

b)通过加入包含乳糖的水对步骤a)的混合物进行湿法制粒，

c)干燥并校准步骤b)获得的颗粒，

e)将步骤d)的混合物压缩成型，以获得片剂，

其中在步骤a)中，加入占最终片剂中存在的HPMC的总重量的45重量％至55重量％、优选50重量％的HPMC。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的片剂，特征在于其旨在用于罹患或易患生物膜口咽感染的受试者。

15.根据前述权利要求中任一项所述的口颊粘膜粘附片剂，其用于治疗和预防受试者的生物膜口咽感染。

16.根据权利要求12所述的粘膜粘附片剂，用于治疗和预防生物膜口咽感染，所述感染是口腔念珠菌病，所述口腔念珠菌病优选地与选自以下的一种或多种念珠菌有关：白色念珠菌(C.albicans)、热带念珠菌(C.tropicalis)、光滑念珠菌(C.glabrata)、乳酒念珠菌(C.kefyr)、季也蒙念珠菌(C.guilliermondii)、克柔念珠菌(C.krusei)、葡萄牙念珠菌(C.lusitaniae)和近平滑念珠菌(C.parapsilosis)。

17.根据权利要求1至13中任一项所述的粘膜粘附片剂，用于在佩戴口腔牙科医疗器材的受试者中治疗和预防生物膜口咽感染，所述口腔牙科医疗器材优选地选自假牙、固定的或可拆卸的牙科假体、和正畸器械。

18.根据权利要求1至13中任一项所述的粘膜粘附片剂，用于治疗和预防生物膜口咽感染，其中所述生物膜口咽感染是与佩戴牙科医疗器材有关的念珠菌性口腔炎。

19.根据权利要求15所述的粘膜粘附片剂，用于治疗和预防生物膜口咽感染，所述受试者存在一个或多个风险因素，所述风险因素选自：高龄、优选75岁以上，糖尿病，癌症，生理性或医源性咽部念珠菌病，免疫抑制，营养不良，抽烟，过度使用口腔杀菌剂，佩戴口腔医疗器材，以及医学治疗如皮质类固醇疗法、特别是通过吸入的皮质类固醇疗法，抗生素，免疫抑制剂，放疗、特别是颈部和头部放疗，和化疗。

20.一种治疗受试者的生物膜口咽感染的方法，所述方法包括口颊施用根据权利要求1至13中任一项所述的粘膜粘附片剂。

21.咪康唑在制备用于治疗生物膜口咽感染的药物中的用途，所述药物为根据权利要求1至13中任一项所述的粘膜粘附片剂的形式。

22.一种通过湿法制粒制造咪康唑粘膜粘附片剂的方法，所述方法包括以下步骤：

a)将咪康唑与一些HPMC、乳蛋白浓缩物和崩解剂混合，

b)通过加入包含乳糖的水对步骤a)的混合物进行湿法制粒，

c)干燥并校准步骤b)获得的颗粒，

e)将步骤d)的混合物压缩成型，以获得片剂，

其中在步骤a)中，加入占最终片剂中存在的HPMC的总重量的45重量％至55重量％、优选50重量％的HPMC，