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CN115804801A - 大叶榄仁萃取物于调理肌肤与抗发炎上的用途 - Google Patents

大叶榄仁萃取物于调理肌肤与抗发炎上的用途 Download PDF

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CN115804801A
CN115804801A CN202211121542.5A CN202211121542A CN115804801A CN 115804801 A CN115804801 A CN 115804801A CN 202211121542 A CN202211121542 A CN 202211121542A CN 115804801 A CN115804801 A CN 115804801A
Authority
CN
China
Prior art keywords
terminalia
extract
skin
eucalyptus
acne
Prior art date
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Pending
Application number
CN202211121542.5A
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English (en)
Inventor
林咏翔
林晓鼐
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Baiyuete Mefu Biotechnology Shanghai Co ltd
Original Assignee
Baiyuete Mefu Biotechnology Shanghai Co ltd
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Publication date
Application filed by Baiyuete Mefu Biotechnology Shanghai Co ltd filed Critical Baiyuete Mefu Biotechnology Shanghai Co ltd
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Abstract

一种大叶榄仁(Terminalia catappa)萃取物于调理肌肤与抗发炎上的用途，其系关于大叶榄仁萃取物用于制备抗痘、抗菌、抗发炎或提升肌肤质感的组合物的用途。

Description

大叶榄仁萃取物于调理肌肤与抗发炎上的用途
技术领域
本发明关于一种大叶榄仁萃取物于调理肌肤与抗发炎上的用途，特别是涉及一种大叶榄仁萃取物用于制备抗痘、抗菌、抗发炎或提升肌肤质感的组合物的用途。
背景技术
自有机及/或天然的饮食概念兴起后，生技公司及食品业者积极投入关于天然植物的相关产品的研发。为使植物相关产品对身体健康帮助有科学验证的基础，植物的活性成分分析及功效评估成为产品开发的重点项目。
大叶榄仁(Terminalia catappa)是一种热带岛屿独有的特殊植物，为一落叶大乔木，株高约为15～25公尺。于秋季或冬季落叶前，大叶榄仁的叶片会转变为黄色、棕色或紫红色。大叶榄仁对于外在环境具有极高耐受性，不仅耐旱、抗风、耐盐性也极强，因此非常适合喜欢生长在高温湿润而光线充足的砂质土壤热带岛屿上。并且，成熟转黄、棕或红的大叶榄仁叶，含有极高量的单宁酸。因此，生技公司及食品业者积极研究大叶榄仁的活性成分分析及功效评估并据以开发成为相关产品。
发明内容
在一些实施例中，一种大叶榄仁(Terminalia catappa)萃取物用于制备抗痘组合物的用途。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物用以减少肌肤发炎所致的痘痘。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物透过改善肌肤紫质来减少痘痘生成。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物透过抑制及/或减少痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)来改善肌肤紫质。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物用以抑制及/或减少肌肤油脂量。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物透过抑制黑色素生成来减少痘疤残留。
在一些实施例中，一种大叶榄仁萃取物用于制备抗菌组合物的用途。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物用以抑制及/或减少痤疮丙酸杆菌。
在一些实施例中，一种大叶榄仁萃取物用于制备抗发炎组合物的用途。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物用以抑制角质细胞发炎。
在一些实施例中，一种大叶榄仁萃取物用于制备提升肌肤质感的组合物的用途。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物用以提升肌肤光泽。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物用以减少肌肤斑点。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物用以减少肌肤泛红。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物用以抑制黑色素生成。
在一些实施例中，前述的大叶榄仁萃取物是以溶剂对大叶榄仁叶进行萃取而得。
在一些实施例中，前述的大叶榄仁叶为大叶榄仁红色叶子。
综上，任一实施例的大叶榄仁萃取物于调理肌肤与抗发炎上的用途是涉及一种大叶榄仁萃取物用于制备抗痘、抗菌、抗发炎或提升肌肤质感的组合物的用途，从而提供在施予个体上时能在此个体上产生抗痘、抗菌、抗发炎或提升肌肤质感的作用的组合物。换言之，前述的组合物具有抗痘、抗菌、抗发炎或提升肌肤质感的功能。在一些实施例中，大叶榄仁萃取物所制得的组合物还具有下列功能中的一种或多种功能：减少肌肤发炎所致的痘痘、透过改善肌肤紫质来减少痘痘生成、抑制及/或减少肌肤油脂量、透过抑制黑色素生成来减少痘疤残留、抑制及/或减少痤疮丙酸杆菌、抑制角质细胞发炎、提升肌肤光泽、减少肌肤斑点、减少肌肤泛红、及抑制黑色素生成。在一些实施例中，大叶榄仁萃取物所制得的组合物能透过抑制及/或减少痤疮丙酸杆菌来改善肌肤紫质。
附图说明
图1是相对IL-8分泌量的细胞实验结果的柱状图。
图2是相对黑色素含量的细胞实验结果的柱状图。
图3是使用前及使用15分钟后的相对肌肤紫质含量的人体实验结果的柱状图。
图4是使用前及使用15分钟后的相对肌肤光泽程度的人体实验结果的柱状图。
图5是使用前及使用8小时后的相对肌肤油脂含量的人体实验结果的柱状图。
图6是第0周及第4周的相对肌肤紫质含量的人体实验结果的柱状图。
图7是第0周及第4周的相对肌肤泛红程度的人体实验结果的柱状图。
图8是第0周及第4周的相对肌肤斑点程度的人体实验结果的柱状图。
具体实施方式
以下将描述本案的部分具体实施态样。在不背离本案精神下，本案尚可以多种不同形式的态样来实践，不应将保护范围限于说明书所具体陈述的条件。
于本文中，在提及含量时所使用的含量单位「％」通常是指重量百分比。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物是以大叶榄仁(Terminalia catappa) 进行萃取程序所得。
在一些实施例中，在萃取程序中，进行萃取的大叶榄仁可为大叶榄仁的植株、根、茎、叶、或花。在一些实施例中，进行萃取的大叶榄仁为黄色的大叶榄仁叶、棕色的大叶榄仁叶或红色的大叶榄仁叶。在一些实施例中，进行萃取的大叶榄仁可为成熟转黄的大叶榄仁叶、成熟转棕的大叶榄仁叶或成熟转红的大叶榄仁叶。举例来说，在萃取程序中，利用溶剂对大叶榄仁红色叶子进行萃取。在一些实施例中，进行萃取的大叶榄仁可为自然掉落的落叶。
在一些实施例中，在萃取程序中，进行萃取的大叶榄仁可为原材料 (如，完整的红色叶子)，或为经物理前处理而分解成碎片、颗粒或粉末等细小尺寸的型态。采用的物理前处理可包括下列至少一种：粗碎、切碎、剪碎、捣碎、及研磨。
在一些实施例中，在萃取程序中，进行萃取的大叶榄仁可为刚拾取并收集的大叶榄仁、干燥后的大叶榄仁或冷冻过的大叶榄仁。举例来说，在萃取程序中，利用溶剂对干燥后的大叶榄仁进行萃取。
在一些实施例中，在萃取程序中，以水于70℃-100℃下萃取大叶榄仁1 小时至3小时以得到初萃取液。举例来说，可将大叶榄仁浸泡在85±5℃水中60分钟，使大叶榄仁中的效性成分溶解至水中而得到初萃取液。
在一些实施例中，在萃取程序中，水与大叶榄仁的重量比为15-30:1。举例来说，水与大叶榄仁的重量比为15:1。在另一些实施例中，水与大叶榄仁的重量比为30:1。
在一些实施例中，在萃取程序中，初萃取液可进一步进行过滤，以去除经水萃取后的大叶榄仁等固体而得到滤液。举例来说，初萃取液可以400目数的滤网进行过滤，以去除固体，并收集滤出的滤液。
在一些实施例中，在萃取程序中，滤液还可进一步进行浓缩以得到浓缩液。在一些实施例中，滤液可在45℃-70℃下进行减压浓缩，以得到浓缩液。举例来说，滤液可在60℃±5℃下进行减压浓缩。在一些实施例中，可通过浓缩液所具有白利糖度值(Degrees Brix；°Bx)来决定进行浓缩的时长，但不限于此。承前例，所得的浓缩液的白利糖度值为3±0.5。换言之，滤液可在60℃±5℃下进行减压浓缩至减压浓缩后的滤液具有3±0.5°Bx，而此时的减压浓缩后的滤液即为浓缩液。在一些实施例中，在萃取程序中，初萃取液亦可先进行浓缩，然后再进行过滤。
在一些实施例中，在萃取程序中，浓缩液可进一步过滤以得到浓缩过滤液。
应能理解的是，可依实际需求以萃取程序所得的初萃取液、滤液、浓缩液或浓缩过滤液作为大叶榄仁萃取物。
在一些实施例中，前述的大叶榄仁萃取物具有抗痘的能力。因此，大叶榄仁萃取物适用于制备抗痘的组合物。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物具有减少肌肤发炎所致的痘痘的能力。换言之，大叶榄仁萃取物施予个体时能减少此个体肌肤发炎所致的痘痘。因此，大叶榄仁萃取物适用于制备减少肌肤发炎所致的痘痘的组合物。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物具有透过改善肌肤紫质来减少痘痘生成的能力。换言之，大叶榄仁萃取物施予个体时能改善此个体肌肤紫质进而减少痘痘生成。因此，大叶榄仁萃取物适用于制备透过改善肌肤紫质来减少痘痘生成的组合物。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物具有透过抑制及/或减少痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)来改善肌肤紫质的能力。换言之，大叶榄仁萃取物施予个体时能抑制及/或减少此个体痤疮丙酸杆菌进而改善肌肤紫质。因此，大叶榄仁萃取物适用于制备透过抑制及/或减少痤疮丙酸杆菌来改善肌肤紫质的组合物。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物具有抑制及/或减少肌肤油脂量的能力。换言之，大叶榄仁萃取物施予个体时能抑制及/或减少此个体肌肤油脂量。因此，大叶榄仁萃取物适用于制备抑制及/或减少肌肤油脂量的组合物。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物具有透过抑制黑色素生成来减少痘疤残留的能力。换言之，大叶榄仁萃取物施予个体时能抑制此个体黑色素生成进而减少痘疤残留。因此，大叶榄仁萃取物适用于制备透过抑制黑色素生成来减少痘疤残留的组合物。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物具有抗菌的能力。因此，大叶榄仁萃取物适用于制备抗菌的组合物。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物具有抑制及/或减少痤疮丙酸杆菌的能力。换言之，大叶榄仁萃取物施予个体时能抑制及/或减少此个体痤疮丙酸杆菌。因此，大叶榄仁萃取物适用于制备抑制及/或减少痤疮丙酸杆菌的组合物。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物具有抗发炎的能力。因此，大叶榄仁萃取物适用于制备抗发炎的组合物。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物具有抑制角质细胞发炎的能力。换言之，大叶榄仁萃取物施予个体时能抑制此个体角质细胞发炎。因此，大叶榄仁萃取物适用于制备抑制角质细胞发炎的组合物。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物具有提升肌肤质感的能力。因此，大叶榄仁萃取物适用于制备提升肌肤质感的组合物。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物具有提升肌肤光泽的能力。换言之，大叶榄仁萃取物施予个体时能提升此个体肌肤光泽。因此，大叶榄仁萃取物适用于制备提升肌肤光泽的组合物。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物具有减少肌肤斑点的能力。换言之，大叶榄仁萃取物施予个体时能减少此个体肌肤斑点。因此，大叶榄仁萃取物适用于制备减少肌肤斑点的组合物。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物具有减少肌肤泛红的能力。换言之，大叶榄仁萃取物施予个体时能减少此个体肌肤泛红。因此，大叶榄仁萃取物适用于制备减少肌肤泛红的组合物。
在一些实施例中，大叶榄仁萃取物具有抑制黑色素生成的能力。换言之，大叶榄仁萃取物施予个体时能抑制此个体黑色素生成。因此，大叶榄仁萃取物适用于制备抑制黑色素生成的组合物。
在一些实施例中，前述的个体可为人。
在一些实施例中，在前述的组合物中，大叶榄仁萃取物的含量为1％。
在一些实施例中，制备得的组合物可为医药组合物、食品组合物、化妆品组合物或保养品组合物。
在一些实施例中，当前述的组合物为医药组合物时，此医药组合物包含有效含量的大叶榄仁萃取物。其中，此医药组合物可利用本领域普通技术人员所详知的技术而被制造成适合于经肠道地、非经肠道地(parenterally)、口服地(orally)、或局部地(topically)投药剂型。
在一些实施例中，经肠道或口服地投药剂型可为，但不限于，锭剂 (tablet)、片剂(troche)、口含锭(lozenge)、丸剂(pill)、胶囊 (capsule)、分散性粉末(dispersiblepowder)或细颗粒(granule)、溶液、悬浮液(suspension)、乳剂(emulsion)、糖浆(syrup)、酏剂 (elixir)、浓浆(slurry)或类似的物。
在一些实施例中，非经肠地道或局部地投药剂型可为，但不限于，注射品(injection)[例如，无菌的水性溶液(sterile aqueous solution)或分散液(dispersion)]、无菌的粉末(sterile powder)、外部制剂(external preparation)或类似的物。
在一些实施例中，注射品的投药方式可为，但不限于，腹膜内注射(intraperitoneal injection)、皮下注射(subcutaneous injection)、表皮内注射(intraepidermal injection)、皮内注射(intradermal injection)、肌肉内注射(intramuscular injection)、静脉内注射(intravenous injection)或病灶内注射(intralesional injection)。
在一些实施例中，含有有效含量的大叶榄仁萃取物的医药组合物可进一步包含被广泛地使用于药物制造技术的医药上可接受的载剂 (pharmaceutically acceptablecarrier)。在一些实施例中，医药上可接受的载剂可为下列载剂中一种或多种：溶剂(solvent)、缓冲液(buffer)、乳化剂(emulsifier)、悬浮剂(suspending agent)、分解剂(decomposer)、崩解剂(disintegrating agent)、分散剂(dispersing agent)、黏结剂(binding agent)、赋形剂(excipient)、安定剂(stabilizing agent)、螯合剂(chelatingagent)、稀释剂(diluent)、胶凝剂(gelling agent)、防腐剂(preservative)、润湿剂(wetting agent)、润滑剂(lubricant)、吸收延迟剂(absorption delaying agent)、脂质体(liposome)以及类似的物。关于选用的载剂的种类与数量是落在本领域普通技术人员的专业素养与例行技术范畴内。其中，作为医药上可接受的载剂的溶剂可为水、生理盐水(normal saline)、磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline，PBS)或含有醇的水性溶液(alcohol containing aqueous solution)。
在一些实施例中，含有有效含量的大叶榄仁萃取物的医药组合物可利用本领域普通技术人员所详知的技术而被制造成适合于局部地施用于皮肤上的外部制剂(externalpreparation)。在一些实施例中，外部制剂包括，但不限于：乳剂(emulsion)、凝胶(gel)、软膏(ointment)、乳霜 (cream)、贴片(patch)、擦剂(liniment)、粉末(powder)、气溶胶(aerosol)、喷雾(spray)、乳液(lotion)、乳浆(serum)、糊剂 (paste)、泡沫(foam)、滴剂(drop)、悬浮液(suspension)、油膏 (salve)以及绷带(bandage)。
在一些实施例中，当前述的医药组合物为外部制剂时，此医药组合物可由有效含量的大叶榄仁萃取物与为本领域普通技术人员所详知的基底 (base)相混合而制成。
在一些实施例中，此基底可包含有一或多种选自于下列的添加剂 (additives)：水、醇(alcohols)、甘醇(glycol)、碳氢化合物 (hydrocarbons)[诸如石油胶(petroleum,jelly)以及白凡士林(white petrolatum)]、蜡(wax)[诸如石蜡(paraffin)以及黄蜡(yellow wax)]、保存剂(preserving agents)、抗氧化剂(antioxidants)、界面活性剂(surfactants)、吸收增强剂(absorption enhancers)、安定剂(stabilizing agents)、胶凝剂(gelling agents)[诸如
Figure BDA0003847286630000081
974P(
Figure BDA0003847286630000082
974P)、微结晶纤维素(microcrystalline cellulose)以及羧基甲基纤维素 (carboxymethylcellulose)]、活性剂(active agents)、保湿剂 (humectants)、气味吸收剂(odor absorbers)、香料(fragrances)、pH 调整剂(pH adjusting agents)、螯合剂(chelating agents)、乳化剂(emulsifiers)、闭塞剂(occlusive agents)、软化剂(emollients)、增稠剂(thickeners)、助溶剂(solubilizing agents)、渗透增强剂(penetration enhancers)、抗刺激剂(anti-irritants)、着色剂(colorants)以及推进剂 (propellants)等。有关这些添加剂的选用与数量是落在本领域普通技术人员的专业素养与例行技术范畴内。
在一些实施例中，当前述的组合物为食品组合物时，此食品组合物包含特定含量的大叶榄仁萃取物。其中，此食品组合物的型态可为粉末、颗粒、溶液、胶体或膏体。
在一些实施例中，含有大叶榄仁萃取物的食品组合物可为食品产品或食品添加物(food additive)。
在一些实施例中，含有大叶榄仁萃取物的食品产品可为饮料 (beverages)、发酵食品(fermented foods)、烘培产品(bakery products)、健康食品(health foods)或膳食补充品(dietary supplements) 等。在一些实施例中，含有大叶榄仁萃取物的食品产品可更包括佐剂。举例来说，佐剂可为麦芽糖糊精(Maltodextrin)、苹果酸、蔗糖素、柠檬酸、水果香料、蜂蜜香料、甜菊糖苷或其组合等。关于选用的载剂的种类与数量是落在本领域普通技术人员的专业素养与例行技术范畴内。
在一些实施例中，含有大叶榄仁萃取物的食品添加物可为调味料、甜味料、香料、pH值调整剂、乳化剂、着色料或稳定剂等。
在一些实施例中，当前述的组合物为化妆品组合物或保养品组合物。换言之，化妆品组合物或保养品组合物包含有效含量的大叶榄仁萃取物。
在一些实施例中，含有大叶榄仁萃取物的化妆品组合物或保养品组合物可为下列任一种型态：化妆水、凝胶、冻膜、泥膜、乳液、乳霜、唇膏、粉底、粉饼、蜜粉、卸妆油、卸妆乳、洗面奶、沐浴乳、洗发精、护发乳、防晒乳、护手霜、指甲油、香水、精华液及面膜。
在一些实施例中，含有大叶榄仁萃取物的化妆品组合物或保养品组合物可视需要更包含外用品可接受成分。在一些实施例中，外用品可接受成分例如可为乳化剂、渗透促进剂、软化剂、溶剂、赋型剂、抗氧化剂、或其组合。
下列范例中若无特别叙明，所进行的实验步骤是在室温(25℃-30℃) 且常压(1atm)下进行。
例一
A.原料：
1.干燥后的大叶榄仁(Terminalia catappa)的红色叶子(产地：中国台湾)，以下简称「大叶榄仁叶」。
2.二次水，又称RO水(逆渗透；Reverse Osmosis)或二次蒸馏水，以下简称「水」。
B.制备流程：
1.将水加热至85±5℃后，投入大叶榄仁叶，并且使大叶榄仁叶于85± 5℃的水中浸泡60分钟，以形成含有固体的初萃取液。于此，投入的大叶榄仁叶与水的重量比为1：15。
2.将冷却至室温(25℃-30℃)的初萃取液以400目数的滤网进行过滤，以去除固体(即萃取后的大叶榄仁叶)，而得到滤液。
3.将浓缩机(型号：Rotavapor R-100；厂牌：BUCHI)温度设定为 60℃±5℃后，利用浓缩机对滤液进行减压浓缩而得到3±0.5°Bx的浓缩液，即为大叶榄仁萃取物。
例二
A.试验流程：
提供例一制得的大叶榄仁萃取物并委托SGS中国台湾检验科技进行检测。此检测流程为接种一定菌量(2.7x105 CFU/mL)的痤疮丙酸杆菌 (Propionibacterium acnes，ATCC编号：6919)后，添加大叶榄仁萃取物并作用30分钟至8小时，并接着检测作用后的痤疮丙酸杆菌量。其中，大叶榄仁萃取物的添加量为1％(v/v)。
B.试验结果：
请参阅表1。相对于痤疮丙酸杆菌的原接种的菌量，添加例1制得的大叶榄仁萃取物并作用30分钟后，降低约25.7％的菌量；而相对于痤疮丙酸杆菌的原接种的菌量，添加例1制得的大叶榄仁萃取物并作用8小时后，降低约96.4％的菌量。换言之，在30分钟的作用时间下，大叶榄仁萃取物具有25.7％的灭菌率；而在8小时的作用时间下，大叶榄仁萃取物具有96.4％的灭菌率。
表1
Figure BDA0003847286630000101
由此可知，大叶榄仁萃取物能降低痤疮丙酸杆菌量。痤疮丙酸杆菌是一种会引起痤疮或粉刺的病原菌。因此，大叶榄仁萃取物能够减少及/或降低痤疮丙酸杆菌，进而降低/抑制痘痘(痤疮)或粉刺的生成。再者，肌肤紫质为痤疮丙酸杆菌代谢物，因而大叶榄仁萃取物还能够透过抑制及/或减少痤疮丙酸杆菌来改善所述肌肤紫质。
例三
A.材料与仪器：
1.细胞株：人类初代皮肤角质细胞(Human primary epidermal keratinocytes)，购自ATCC，细胞编号PCS-200-011，以下简称HPEK-50 细胞。
2.细胞培养基：角质细胞专用的无血清培养基(Keratinocyte-SFM)，购自Gibco，产品编号10724-011。
3.检测套组：ELISA Kit for Interleukin 8(IL8)，购自Cloud-Clone Corp.，产品编号SEA080Hu。
4.检测仪器：酵素免疫分析仪(ELISA reader)，购自BioTek公司 (美国)。
B.试验流程：
1.将HPEK-50细胞以每孔5×104个的密度接种于每孔含500μL的细胞培养基的24孔培养盘中，并在37℃下培养24小时。于此，HPEK-50细胞分为三个试验组别，其分别为：空白组、控制组与实验组。各组进行三重复(意即各组各有三孔)。
2.培养24小时后，将各组更换为500μL的实验培养基，并于37℃下继续培养2小时。其中，空白组及控制组的实验培养基为不含样本的细胞培养基，而实验组的实验培养基为含有0.0625％(v/v)的例一制得的大叶榄仁萃取物的细胞培养基。
3.控制组与实验组的HPEK-50细胞于紫外线辐射箱中于UVB(紫外光，照射能量为300mJ)照射4.99分钟且于37℃下继续培养24小时。空白组的HPEK-50细胞则不施予UVB照射直接于37℃下继续培养24小时。
4.将培养后的各组于每孔中取出120μL的实验培养基，并使用ELISA Kit forInterleukin 8(IL8)测定各组HPEK-50细胞的IL-8分泌量。于此，依照ELISA Kit forInterleukin 8(IL8)所提供的试验流程处理各组取出的实验培养基后，利用酵素免疫分析仪测量每孔450nm的吸光值(OD450值)。
C.试验结果：
所有组别的相对IL-8分泌量系依下列公式计算：相对IL-8分泌量 (％)＝(各组OD450值/空白组OD450值)×100％。
在与控制组比较下，其他各组的相对IL-8分泌量的统计学显著差异是以学生t检验(student t-test)统计分析得到。于图式中，「*」代表在与控制组比较下其p值小于0.05、「**」代表在与控制组比较下其p值小于 0.01，以及「***」代表在与控制组比较下其p值小于0.001。
请参阅图1。空白组未以UVB刺激也未使用样本进行处理，因此空白组的试验结果代表HPEK-50细胞在正常的生理代谢情况下的表现。于此，在设定空白组的相对IL-8分泌量为100％的情况下，控制组的相对IL-8分泌量为117.21％，而实验组的相对IL-8分泌量为73.2％。也就是说，相对于空白组，控制组的HPEK-50细胞经由UVB刺激后，其相对IL-8分泌量显著提升约17.21％；而相对于空白组，实验组的HPEK-50细胞经由UVB刺激以及使用大叶榄仁萃取物进行处理后，其相对IL-8分泌量降低约 26.8％。相对于控制组，空白组的HPEK-50细胞未以UVB刺激也未使用样本进行处理，其相对IL-8分泌量显著降低约17.21％；而相对于控制组，实验组的HPEK-50细胞经由UVB刺激以及使用大叶榄仁萃取物进行处理后，其相对IL-8分泌量显著降低约44.01％。
在许多生物体内，在受到环境刺激因子(例如：UVB)的刺激下，会释放出IL-8，并引发发炎反应，因此透过IL-8的检测，可间接地评估发炎状态。
由实验结果可知，大叶榄仁萃取物能明显地降低HPEK-50细胞经由 UVB刺激后所提升的IL-8分泌量，还降低到远低于HPEK-50细胞在正常的生理代谢情况下所产生的IL-8分泌量。换言之，大叶榄仁萃取物能明显抑制角质细胞分泌IL-8，进而降低角质细胞的发炎状态。
因此，大叶榄仁萃取物能够降低及/或抑制发炎状态，并且能够降低及/ 或抑制角质细胞发炎。大叶榄仁萃取物亦能够降低及/或抑制受外在环境刺激所导致的发炎，进而能够降低/抑制肌肤发炎所致的痘痘(痤疮)。换言之，大叶榄仁萃取物具有抗发炎的作用。
例四
A.材料与仪器：
1.细胞株：小鼠黑色素瘤细胞，购自ATCC，细胞编号6475，以下简称B16F10细胞。
2.细胞培养基：DMEM(Dulbecco’s modified Eagle’s medium，购自 Gibco，产品编号12800017)，添加10％FBS(Fetal Bovine Serum，购自 Gibco，产品编号10437-028)以及1％抗生素(购自Gibco，产品编号 15240-062)。
3.曲酸(Kojic acid)，购自Sigma，产品编号K3125。
4.1N NaOH：以水及NaOH(购自Sigma，产品编号221465)配制而成。
5.胰蛋白酶，购自Thermo，产品编号15400054。
6.酵素免疫分析仪(ELISA reader)，购自BioTek公司(美国)。
B.试验流程：
1.将B16F10细胞以每孔1.5×105个的密度接种于每孔含2mL的细胞培养基的6孔培养盘中，并在37℃下培养24小时。于此，B16F10细胞分为三个试验组别，其分别为：空白组、曲酸组与实验组。各组进行三重复 (意即各组各有三孔)。
2.培养24小时后，将各组更换为2mL实验培养基，并于37℃下继续培养48小时。其中，空白组的实验培养基为不含曲酸或样本的细胞培养基；曲酸组的实验培养基为含有0.125％(v/v)的曲酸的细胞培养基，其中曲酸已被广泛认知为具有降低黑色素生成效果的物质；以及实验组的实验培养基为含有0.125％(v/v)的例一制得的大叶榄仁萃取物的细胞培养基。
3.移除培养后的各组的实验培养基，并以PBS进行润洗2次。
4.于润洗后，添加200μL胰蛋白酶至各孔中反应3分钟。反应后，添加6mL细胞培养基以终止反应。而后收集各孔中的悬浮细胞与细胞培养基至对应的离心试管内。
5.将各离心试管离心使细胞沉淀后，移除各组离心试管内的上清液，再以PBS清洗并悬浮沉淀细胞，然后反复进行2次后，得到以200μL PBS 回溶的细胞悬浮液。
6.将细胞悬浮液以液态氮冷冻10分钟后，置于室温约30分钟至完全解冻。
7.完全解冻后，将离心试管离心。而后移除离心试管内的上清液后，加入120μL 1NNaOH至各离心试管后置于60℃的干浴槽加热60分钟使黑色素溶出，以获得各组的待检测样本。
8.各组取100μL的待检测样本至96孔培养盘，并利用酵素免疫分析仪测量每孔405nm的吸光值(OD405值)。
C.试验结果：
所有组别的相对黑色素含量系依下列公式计算：相对黑色素含量(％) ＝(各组OD405值/空白组OD405值)×100％。
在与空白组比较下，其他各组的相对黑色素含量的统计学显著差异是以学生t检验统计分析得到。于图式中，「*」代表在与空白组比较下其p值小于0.05、「**」代表在与空白组比较下其p值小于0.01，以及「***」代表在与空白组比较下其p值小于0.001。
请参阅图2。空白组未使用曲酸或样本进行处理，因此空白组的试验结果代表B16F10细胞在正常的生理代谢情况下的表现。于此，在设定空白组的相对黑色素含量为100％的情况下，曲酸组的相对黑色素含量为95.85％，而实验组的相对黑色素含量为82.26％。也就是说，相对于空白组，曲酸组的B16F10细胞在添加曲酸后，其相对黑色素含量显著降低约4.15％；而相对于空白组，实验组的B16F10细胞在添加大叶榄仁萃取物后，其相对黑色素含量显著降低约17.74％。相对于曲酸组，实验组的B16F10细胞在添加大叶榄仁萃取物后，其相对黑色素含量降低约13.59％。
肌肤受到紫外线的刺激，因此激活了酪氨酸酶，进而促使黑色素生成，造成皮肤变黑。而当肌肤在发炎的状态下直接接收紫外线让表皮细胞受损，进而激活了酪氨酸酶，促使黑色素生成，让肌肤产生了痘疤。
由实验结果可知，大叶榄仁萃取物能明显地降低B16F10细胞的黑色素含量，且大叶榄仁萃取物的降低黑色素含量的能力甚至优于曲酸。换言之，大叶榄仁萃取物有降低黑色素含量的作用。
因此，大叶榄仁萃取物能够抑制黑色素生成，以及减少已生成的黑色素，进而有益于减少个体的黑色素的量以提升个体皮肤的通透与亮白程度。并且，大叶榄仁萃取物亦有益于透过抑制黑色素生成来减少个体的痘疤生成或痘疤残留。
例五
A.试验流程：
令8位健康的成人受试者于脸部(已清洁)使用(贴敷)大叶榄仁面膜 15分钟后取下，再以指腹稍加按摩以促进吸收。
于此，大叶榄仁面膜含有92.4％水、0.6％馨鲜酮、0.6％己二醇、5％ 1,3-丁二醇、0.2％三仙胶、0.1％增稠剂U21、0.1％三乙醇胺及1％的例一制得的大叶榄仁萃取物。
受试者于使用前(未贴敷大叶榄仁面膜之前)及使用15分钟后进行肌肤检测。肌肤检测为依据不同检测项目，使用对应的仪器及测量方式，纪录脸部肌肤的数值、并拍摄使用前及使用15分钟后的照片。并且，于使用前及使用15分钟后进行检测时，受试者所在的测试区域的温度与湿度为一致，以减少外界的温湿度等因素会对肌肤所造成的影响。
于此，肌肤检测项目有肌肤紫质(skin porphyrin)及肌肤光泽(skinbrightness)。
肌肤紫质系使用购自美国Canfield scientific公司的VISIA高阶数字肤质检测仪(VISIA Complexion Analysis System)对受试者的面部肌肤进行检测。由于痤疮杆菌在生长时会分泌紫质(痤疮杆菌代谢物)，而紫质在紫外线(UV光)照射中会产生荧光反应。此检测仪系透过UV光对面部肌肤进行拍摄，并检测肌肤紫质含量以得到可代表肌肤的紫质含量的一数值(以下称肌肤紫质含量值)。于此，所得到的肌肤紫质含量值越高，说明肌肤紫质含量越高，痤疮杆菌生长越旺盛，越容易产生痤疮或粉刺。然后，再以下列公式计算出相对肌肤紫质含量：相对肌肤紫质含量(％)＝(各组肌肤紫质含量值/使用前肌肤紫质含量值)×100％。
肌肤光泽系使用德国Courage+Khazaka electronic公司的肌肤光泽度检测探头Glossymeter GL200(C+K Multi Probe Adapter System，Germany)对受试者的面部肌肤进行检测。此探头系利用照射到肌肤表面的光的直接反射和散反射进行计算以得到可代表肌肤的光泽程度的一数值(以下称肌肤光泽程度值)。于此，所得到的肌肤光泽程度值越高，说明肌肤光泽程度越高。然后，再以下列公式计算出相对肌肤光泽程度：相对肌肤光泽程度(％)＝ (各组肌肤光泽程度值/使用前肌肤光泽程度值)×100％。
B.试验结果：
使用前与使用15分钟后的检测结果之间的统计学显著差异是以学生t 检验统计分析得到。于图式中，「*」代表在与使用前比较下其p值小于0.05、「**」代表在与使用前比较下其p值小于0.01，以及「***」代表在与使用前比较下其p值小于0.001。
1.「肌肤紫质」的检测结果
参照图3。将8位受试者使用前的肌肤紫质含量值视为100％的相对肌肤紫质含量。受试者在使用大叶榄仁面膜15分钟后(使用15分钟后)，其平均相对肌肤紫质含量为87.5％。换言之，相较于使用前，使用含1％大叶榄仁萃取物的大叶榄仁面膜15分钟后可使此些受试者的相对肌肤紫质含量减少12.5％。肌肤紫质为痤疮杆菌代谢物，并且当痤疮杆菌代谢物的量越多时，越容易长粉刺及/或痤疮。由此可知，大叶榄仁萃取物确实可改善肌肤紫质，进而减少受试者痘痘(痤疮)或粉刺生成。换言之，大叶榄仁萃取物能透过改善肌肤紫质来抑制及/或减少痘痘(痤疮)或粉刺产生。
2.关于「肌肤光泽」的检测结果
参照图4。将8位受试者在使用大叶榄仁面膜前(使用前)的肌肤光泽程度值视为100％的相对肌肤光泽程度。此时，受试者在使用大叶榄仁面膜 15分钟后(使用15分钟后)，其平均相对肌肤光泽程度为108.8％。换言之，相较于使用前，使用含1％大叶榄仁萃取物的大叶榄仁面膜15分钟后可使此些受试者的相对肌肤光泽程度增加8.8％。由此可知，大叶榄仁萃取物确实可增加肌肤光泽，并改善受试者肌肤状况，即大叶榄仁萃取物具有提升肌肤光泽，使个体肌肤通透、明亮，进而提升肌肤质感。
例六
A.试验流程：
令8位健康的成人受试者于左、右脸颊分别使用相同量的安慰剂精华液、大叶榄仁精华液一次，并以指腹稍加按摩以促进吸收。于此，使用安慰剂精华液的那一侧脸颊为控制组，而使用大叶榄仁精华液的那一侧脸颊为实验组。
其中，安慰剂精华液的成分为93.4％水、0.6％馨鲜酮、0.6％己二醇、 5％1,3-丁二醇、0.2％三仙胶、0.1％增稠剂U21及0.1％三乙醇胺。
大叶榄仁精华液的成分为92.4％水、0.6％馨鲜酮、0.6％己二醇、5％ 1,3-丁二醇、0.2％三仙胶、0.1％增稠剂U21、0.1％三乙醇胺及1％的例一制得的大叶榄仁萃取物。
并且，受试者分别于使用前(脸部已清洁)及使用8小时后进行肌肤检测。于此，肌肤检测项目为肌肤油脂(skin oil)。并且，不论是于使用前还是于使用8小时后，在进行检测时，受试者所在的测试区域的温度与湿度为一致，以减少外界的温湿度等因素会对肌肤所造成的影响。
肌肤油脂系使用购自德国Courage+Khazaka electronic公司的肌肤油脂含量检测探头
Figure BDA0003847286630000171
SM815(C+K Multi Probe Adapter System， Germany)在使用前以及使用8小时后对受试者的左脸颊与右脸颊进行检测。此探头系利用亮度计原理，先以探头中的试纸吸取皮肤油脂后，根据试纸透光程度计算出可代表肌肤的油脂含量的一数值(以下称肌肤油脂含量值)。并且，得到的肌肤油脂含量值越高，说明肌肤油脂含量越高。然后，再以下列公式计算出相对肌肤油脂含量：相对肌肤油脂含量(％)＝(各组肌肤油脂含量值/使用前肌肤油脂含量值)×100％。
B.试验结果：
参照图5。将8位受试者在使用前所测得的肌肤油脂含量视为100％的相对肌肤油脂含量。此时，在使用8小时后，实验组(即使用大叶榄仁精华液那一侧的脸颊)的平均相对肌肤油脂含量为64.2％，而控制组(即使用安慰剂精华液那一侧的脸颊)的平均相对肌肤油脂含量为121.9％。换言之，相较于使用前，使用含1％大叶榄仁萃取物的大叶榄仁精华液8小时后可使此些受试者的相对肌肤油脂含量减少35.8％。并且，相较于使用8小时安慰剂精华液，使用含1％大叶榄仁萃取物的大叶榄仁精华液8小时后可使此些受试者的相对肌肤油脂含量减少57.7％。由此可知，大叶榄仁萃取物确实可减少肌肤油脂，并改善受试者肌肤状况，即大叶榄仁萃取物具有抑制及/或减少肌肤油脂量、控油，以改善个体脸部泛油状况，进而达到抗痘的作用。
例七
A.试验流程：
令8位健康的成人受试者每日早晚于左、右脸颊分别使用相同量的安慰剂精华液、大叶榄仁精华液一次，并连续使用4周(即28日)。于此，使用安慰剂精华液的那一侧脸颊为控制组，而使用大叶榄仁精华液的那一侧脸颊为实验组。
其中，安慰剂精华液的成分为93.4％水、0.6％馨鲜酮、0.6％己二醇、5％1,3-丁二醇、0.2％三仙胶、0.1％增稠剂U21及0.1％三乙醇胺。
大叶榄仁精华液的成分为92.4％水、0.6％馨鲜酮、0.6％己二醇、5％ 1,3-丁二醇、0.2％三仙胶、0.1％增稠剂U21、0.1％三乙醇胺及1％的例一制得的大叶榄仁萃取物。
并且，受试者于开始使用前(脸部已清洁但尚未使用精华液时，以下称第0周)及使用28日(于使用最后一次精华液后且脸部已清洁，以下称第 4周)后进行肌肤检测。肌肤检测为依据不同检测项目，使用对应的仪器及测量方式，纪录脸部肌肤的数值、并拍摄使用前及使用后的照片。肌肤检测项目为肌肤紫质(skin porphyrin)、肌肤泛红(skin redness)及肌肤斑点 (skin spot)。并且，不论是第0周还是第4周，在进行检测时，受试者所在的测试区域的温度与湿度为一致，以减少外界的温湿度等因素会对肌肤所造成的影响。
肌肤紫质系使用购自美国Canfield scientific公司的VISIA高阶数字肤质检测仪(VISIA Complexion Analysis System)在第0周与第4周对受试者的左脸颊与右脸颊进行检测。由于痤疮杆菌在生长时会分泌紫质(痤疮杆菌代谢物)，而紫质在紫外线(UV光)照射中会产生荧光反应。此检测仪系透过UV光对面部肌肤进行拍摄，检测肌肤紫质含量以得到可代表肌肤的紫质含量的一数值(以下称肌肤紫质含量值)。并且，肌肤紫质含量值越高，说明肌肤紫质含量越高，痤疮杆菌生长越旺盛，越容易产生痤疮或粉刺。然后，再以下列公式计算出相对肌肤紫质含量：相对肌肤紫质含量(％)＝ (各组肌肤紫质含量值/使用前肌肤紫质含量值)×100％。
肌肤泛红系使用VISIA高阶数字肤质检测仪在第0周与第4周对受试者的左脸颊与右脸颊进行检测。此检测仪系透过RBX偏振光技术对面部肌肤进行拍摄，检测皮肤深层血管或血红素以得到可代表皮肤的泛红状况的一数值(以下称肌肤泛红程度值)。并且，得到的肌肤泛红程度值越高，说明肌肤泛红程度越高。然后，再以下列公式计算出相对肌肤泛红程度：相对肌肤泛红程度(％)＝(各组肌肤泛红程度值/使用前肌肤泛红程度值) ×100％。
肌肤斑点系使用VISIA高阶数字肤质检测仪在第0周与第4周对受试者的左脸颊与右脸颊进行检测。此检测仪系透过可见光(白光)拍摄高分辨率的肌肤图像，并以内建软件根据肉眼可见的色素斑点数量与面积进行分析以得到可代表皮肤的斑点状况的一数值(以下称肌肤斑点程度值)。并且，得到的肌肤斑点程度值越高，说明肌肤斑点程度越高。然后，再以下列公式计算出相对肌肤斑点程度：相对肌肤斑点程度(％)＝(各组肌肤斑点程度值/使用前肌肤斑点程度值)×100％。
B.试验结果：
1.关于「肌肤紫质」的检测结果
参照图6。将8位受试者第0周的肌肤紫质含量值视为100％的相对肌肤紫质含量。此时，在第4周(即持续使用4周后)，实验组(即使用大叶榄仁精华液那一侧的脸颊)的平均相对肌肤紫质含量为93.7％，而控制组 (即使用安慰剂精华液那一侧的脸颊)的平均相对肌肤紫质含量为 115.2％。换言之，相较于使用前，持续使用4周含1％大叶榄仁萃取物的大叶榄仁精华液后可使此些受试者的相对肌肤紫质含量减少6.3％。并且，相较于持续使用4周安慰剂精华液，持续使用4周含1％大叶榄仁萃取物的大叶榄仁精华液后可使此些受试者的相对肌肤紫质含量减少21.5％。由此可知，大叶榄仁萃取物确实可改善肌肤紫质，进而减少受试者痘痘(痤疮)或粉刺生成。
2.关于「肌肤泛红」的检测结果
参照图7。将8位受试者第0周的肌肤泛红程度值视为100％的相对肌肤泛红程度。此时，在第4周(即持续使用4周后)，实验组(即使用大叶榄仁精华液那一侧的脸颊)的平均相对肌肤泛红程度为82.6％，而控制组 (即使用安慰剂精华液那一侧的脸颊)的平均相对肌肤泛红程度为 103.8％。换言之，相较于使用前，持续使用4周含1％大叶榄仁萃取物的大叶榄仁精华液后可使此些受试者的相对肌肤泛红程度减少17.4％。并且，相较于持续使用4周安慰剂精华液，持续使用4周含1％大叶榄仁萃取物的大叶榄仁精华液后可使此些受试者的相对肌肤泛红程度减少21.2％。由此可知，大叶榄仁萃取物确实可减少肌肤泛红，以改善受试者肌肤状况，进而提升肌肤质感。
3.关于「肌肤斑点」的检测结果
参照图8。将8位受试者第0周的肌肤斑点程度值视为100％的相对肌肤斑点程度。此时，在第4周(即持续使用4周后)，实验组(即使用大叶榄仁精华液那一侧的脸颊)的平均相对肌肤斑点程度为96.6％，而控制组 (即使用安慰剂精华液那一侧的脸颊)的平均相对肌肤斑点程度为 104.0％。换言之，相较于使用前，持续使用4周含1％大叶榄仁萃取物的大叶榄仁精华液后可使此些受试者的相对肌肤斑点程度减少3.4％。并且，相较于持续使用4周安慰剂精华液，持续使用4周含1％大叶榄仁萃取物的大叶榄仁精华液后可使此些受试者的相对肌肤斑点程度减少7.4％。由此可知，大叶榄仁萃取物确实可减少肌肤斑点，以并改善受试者肌肤状况，进而提升肌肤质感。
综上，任一实施例的大叶榄仁萃取物于调理肌肤与抗发炎上的用途是涉及一种大叶榄仁萃取物用于制备抗痘、抗菌、抗发炎或提升肌肤质感的组合物的用途，从而提供在施予一个体上时能在此个体上产生抗痘、抗菌、抗发炎或提升肌肤质感的作用的组合物。换言之，前述的组合物具有抗痘、抗菌、抗发炎或提升肌肤质感的功能。在一些实施例中，大叶榄仁萃取物所制得的组合物还具有下列功能中的一种或多种功能：减少肌肤发炎所致的痘痘、透过改善肌肤紫质来减少痘痘生成、抑制及/或减少肌肤油脂量、透过抑制黑色素生成来减少痘疤残留、抑制及/或减少痤疮丙酸杆菌、抑制角质细胞发炎、提升肌肤光泽、减少肌肤斑点、减少肌肤泛红、及抑制黑色素生成。在一些实施例中，大叶榄仁萃取物所制得的组合物能透过抑制及/或减少痤疮丙酸杆菌来改善肌肤紫质。
当然，本发明还可有其它多种实施例，在不背离本发明精神及其实质的情况下，熟悉本领域的技术人员可根据本发明作出各种相应的改变和变形，但这些相应的改变和变形都应属于本发明权利要求的保护范围。

Claims (17)

1.一种大叶榄仁(Terminalia catappa)萃取物用于制备抗痘组合物的用途。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述大叶榄仁萃取物用以减少肌肤发炎所致的痘痘。
3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述大叶榄仁萃取物透过改善肌肤紫质来减少痘痘生成。
4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述大叶榄仁萃取物透过抑制及/或减少痤疮丙酸杆菌来改善所述肌肤紫质。
5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述大叶榄仁萃取物用以抑制及/或减少肌肤油脂量。
6.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述大叶榄仁萃取物透过抑制黑色素生成来减少痘疤残留。
7.一种大叶榄仁(Terminalia catappa)萃取物用于制备抗菌组合物的用途。
8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述大叶榄仁萃取物用以抑制及/或减少痤疮丙酸杆菌。
9.一种大叶榄仁(Terminalia catappa)萃取物用于制备抗发炎组合物的用途。
10.如权利要求9所述的用途，其特征在于，所述大叶榄仁萃取物用以抑制角质细胞发炎。
11.一种大叶榄仁(Terminalia catappa)萃取物用于制备提升肌肤质感的组合物的用途。
12.如权利要求11所述的用途，其特征在于，所述大叶榄仁萃取物用以提升肌肤光泽。
13.如权利要求11所述的用途，其特征在于，所述大叶榄仁萃取物用以减少肌肤斑点。
14.如权利要求11所述的用途，其特征在于，所述大叶榄仁萃取物用以减少肌肤泛红。
15.如权利要求11所述的用途，其特征在于，所述大叶榄仁萃取物用以抑制黑色素生成。
16.如权利要求1、7、9或11所述的用途，其特征在于，所述大叶榄仁萃取物是以溶剂对大叶榄仁叶进行萃取而得。
17.如权利要求16所述的用途，其特征在于，所述大叶榄仁叶为大叶榄仁红色叶子。
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PB01 Publication
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SE01 Entry into force of request for substantive examination
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RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20230317

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