CN115703737B - 一类羟基吡啶酮类化合物及其作为克服细菌生物膜耐药的抗生素增敏剂的应用 - Google Patents
一类羟基吡啶酮类化合物及其作为克服细菌生物膜耐药的抗生素增敏剂的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115703737B CN115703737B CN202110901353.9A CN202110901353A CN115703737B CN 115703737 B CN115703737 B CN 115703737B CN 202110901353 A CN202110901353 A CN 202110901353A CN 115703737 B CN115703737 B CN 115703737B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- compound
- reaction
- solvent
- refers
- reacted
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- GGOZGYRTNQBSSA-UHFFFAOYSA-N pyridine-2,3-diol Chemical class OC1=CC=CN=C1O GGOZGYRTNQBSSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 31
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 title abstract description 24
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 title abstract description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 101
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 claims abstract description 28
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims abstract description 24
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 claims abstract description 24
- -1 hydroxypyridone compound Chemical class 0.000 claims description 179
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 120
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 86
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 73
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical group OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 72
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 37
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-dimethylformamide Substances CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 21
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 15
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 14
- BUDQDWGNQVEFAC-UHFFFAOYSA-N Dihydropyran Chemical compound C1COC=CC1 BUDQDWGNQVEFAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- MITGKKFYIJJQGL-UHFFFAOYSA-N 9-(4-chlorobenzoyl)-6-methylsulfonyl-2,3-dihydro-1H-carbazol-4-one Chemical compound ClC1=CC=C(C(=O)N2C3=CC=C(C=C3C=3C(CCCC2=3)=O)S(=O)(=O)C)C=C1 MITGKKFYIJJQGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N ciprofloxacin Chemical compound C12=CC(N3CCNCC3)=C(F)C=C2C(=O)C(C(=O)O)=CN1C1CC1 MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 10
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 9
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- MXMOTZIXVICDSD-UHFFFAOYSA-N anisoyl chloride Chemical compound COC1=CC=C(C(Cl)=O)C=C1 MXMOTZIXVICDSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N (1s,2s,3s,5r)-1-(carboxymethyl)-3,5-bis[(4-phenoxyphenyl)methyl-propylcarbamoyl]cyclopentane-1,2-dicarboxylic acid Chemical compound O=C([C@@H]1[C@@H]([C@](CC(O)=O)([C@H](C(=O)N(CCC)CC=2C=CC(OC=3C=CC=CC=3)=CC=2)C1)C(O)=O)C(O)=O)N(CCC)CC(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N 0.000 claims description 8
- UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 1-[6-[2-[3-[3-[3-[2-[2-[3-[[2-[2-[[(2r)-1-[[2-[[(2r)-1-[3-[2-[2-[3-[[2-(2-amino-2-oxoethoxy)acetyl]amino]propoxy]ethoxy]ethoxy]propylamino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-3-[(2r)-2,3-di(hexadecanoyloxy)propyl]sulfanyl-1-oxopropan-2-yl Chemical compound O=C1C(SCCC(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(=O)N[C@@H](CSC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CO)C(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(N)=O)CC(=O)N1CCNC(=O)CCCCCN\1C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2CC/1=C/C=C/C=C/C1=[N+](CC)C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C1 UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 0.000 claims description 8
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229940126543 compound 14 Drugs 0.000 claims description 8
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 7
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N (2s)-2,6-diaminohexanoic acid;(2s)-2-hydroxybutanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N 0.000 claims description 6
- TZKBVRDEOITLRB-UHFFFAOYSA-N 4-methyl-n-[4-[(4-methylpiperazin-1-yl)methyl]-3-(trifluoromethyl)phenyl]-3-[2-(1h-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl)ethynyl]benzamide Chemical compound C1CN(C)CCN1CC(C(=C1)C(F)(F)F)=CC=C1NC(=O)C1=CC=C(C)C(C#CC=2C=C3C=NNC3=NC=2)=C1 TZKBVRDEOITLRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 108010078777 Colistin Proteins 0.000 claims description 6
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- HPKJGHVHQWJOOT-ZJOUEHCJSA-N N-[(2S)-3-cyclohexyl-1-oxo-1-({(2S)-1-oxo-3-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]propan-2-yl}amino)propan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide Chemical compound C1C(CCCC1)C[C@H](NC(=O)C=1NC2=CC=CC=C2C=1)C(=O)N[C@@H](C[C@H]1C(=O)NCC1)C=O HPKJGHVHQWJOOT-ZJOUEHCJSA-N 0.000 claims description 6
- 150000001263 acyl chlorides Chemical class 0.000 claims description 6
- 229960003346 colistin Drugs 0.000 claims description 6
- FAMRKDQNMBBFBR-BQYQJAHWSA-N diethyl azodicarboxylate Substances CCOC(=O)\N=N\C(=O)OCC FAMRKDQNMBBFBR-BQYQJAHWSA-N 0.000 claims description 6
- YWGHUJQYGPDNKT-UHFFFAOYSA-N hexanoyl chloride Chemical compound CCCCCC(Cl)=O YWGHUJQYGPDNKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N hydrazine monohydrate Substances O.NN IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- JORAUNFTUVJTNG-BSTBCYLQSA-N n-[(2s)-4-amino-1-[[(2s,3r)-1-[[(2s)-4-amino-1-oxo-1-[[(3s,6s,9s,12s,15r,18s,21s)-6,9,18-tris(2-aminoethyl)-3-[(1r)-1-hydroxyethyl]-12,15-bis(2-methylpropyl)-2,5,8,11,14,17,20-heptaoxo-1,4,7,10,13,16,19-heptazacyclotricos-21-yl]amino]butan-2-yl]amino]-3-h Chemical compound CC(C)CCCCC(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)CN[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]1CCNC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCN)NC1=O.CCC(C)CCCCC(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)CN[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]1CCNC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCN)NC1=O JORAUNFTUVJTNG-BSTBCYLQSA-N 0.000 claims description 6
- XKJCHHZQLQNZHY-UHFFFAOYSA-N phthalimide Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NC(=O)C2=C1 XKJCHHZQLQNZHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- XDJYMJULXQKGMM-UHFFFAOYSA-N polymyxin E1 Natural products CCC(C)CCCCC(=O)NC(CCN)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)NC(CCN)C(=O)NC1CCNC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CCN)NC1=O XDJYMJULXQKGMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- KNIWPHSUTGNZST-UHFFFAOYSA-N polymyxin E2 Natural products CC(C)CCCCC(=O)NC(CCN)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)NC(CCN)C(=O)NC1CCNC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CCN)NC1=O KNIWPHSUTGNZST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- DTJVECUKADWGMO-UHFFFAOYSA-N 4-methoxybenzenesulfonyl chloride Chemical compound COC1=CC=C(S(Cl)(=O)=O)C=C1 DTJVECUKADWGMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 claims description 5
- 229960003405 ciprofloxacin Drugs 0.000 claims description 5
- 239000012043 crude product Substances 0.000 claims description 5
- FAMRKDQNMBBFBR-UHFFFAOYSA-N ethyl n-ethoxycarbonyliminocarbamate Chemical compound CCOC(=O)N=NC(=O)OCC FAMRKDQNMBBFBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 5
- BEJNERDRQOWKJM-UHFFFAOYSA-N kojic acid Chemical compound OCC1=CC(=O)C(O)=CO1 BEJNERDRQOWKJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229960004705 kojic acid Drugs 0.000 claims description 5
- WZNJWVWKTVETCG-UHFFFAOYSA-N kojic acid Natural products OC(=O)C(N)CN1C=CC(=O)C(O)=C1 WZNJWVWKTVETCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229960000707 tobramycin Drugs 0.000 claims description 5
- NLVFBUXFDBBNBW-PBSUHMDJSA-N tobramycin Chemical compound N[C@@H]1C[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N NLVFBUXFDBBNBW-PBSUHMDJSA-N 0.000 claims description 5
- RUQIUASLAXJZIE-UHFFFAOYSA-N 3-methoxybenzoyl chloride Chemical compound COC1=CC=CC(C(Cl)=O)=C1 RUQIUASLAXJZIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 241001240958 Pseudomonas aeruginosa PAO1 Species 0.000 claims description 4
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 4
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- YBBRCQOCSYXUOC-UHFFFAOYSA-N sulfuryl dichloride Chemical compound ClS(Cl)(=O)=O YBBRCQOCSYXUOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- YPXQSGWOGQPLQO-UHFFFAOYSA-N 5-nitro-1,3-dihydrobenzimidazole-2-thione Chemical group [O-][N+](=O)C1=CC=C2N=C(S)NC2=C1 YPXQSGWOGQPLQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- VGCXGMAHQTYDJK-UHFFFAOYSA-N Chloroacetyl chloride Chemical compound ClCC(Cl)=O VGCXGMAHQTYDJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000002647 aminoglycoside antibiotic agent Substances 0.000 claims description 3
- KCXMKQUNVWSEMD-UHFFFAOYSA-N benzyl chloride Chemical compound ClCC1=CC=CC=C1 KCXMKQUNVWSEMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229940073608 benzyl chloride Drugs 0.000 claims description 3
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 claims description 3
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 3
- LISFMEBWQUVKPJ-UHFFFAOYSA-N quinolin-2-ol Chemical compound C1=CC=C2NC(=O)C=CC2=C1 LISFMEBWQUVKPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- TZSZZENYCISATO-WIOPSUGQSA-N rodatristat Chemical compound CCOC(=O)[C@@H]1CC2(CN1)CCN(CC2)c1cc(O[C@H](c2ccc(Cl)cc2-c2ccccc2)C(F)(F)F)nc(N)n1 TZSZZENYCISATO-WIOPSUGQSA-N 0.000 claims description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 3
- FAQYAMRNWDIXMY-UHFFFAOYSA-N trichloroborane Chemical compound ClB(Cl)Cl FAQYAMRNWDIXMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- RZNHSEZOLFEFGB-UHFFFAOYSA-N 2-methoxybenzoyl chloride Chemical compound COC1=CC=CC=C1C(Cl)=O RZNHSEZOLFEFGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- LFETXMWECUPHJA-UHFFFAOYSA-N methanamine;hydrate Chemical compound O.NC LFETXMWECUPHJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 23
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 13
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 abstract description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 7
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 5
- 229940121657 clinical drug Drugs 0.000 abstract description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 abstract 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 abstract 1
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 54
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 54
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 32
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 32
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 29
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 27
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 22
- TWYYFYNJOJGNFP-CUXYNZQBSA-N (2s,4r,5s,6s)-2-[(4s,5r)-4-acetyloxy-5-methyl-3-methylidene-6-phenylhexyl]-2-carbamoyl-4-[[(e,4s,6s)-4,6-dimethyloct-2-enoyl]oxymethyl]-5-hydroxy-1,3-dioxane-4,5,6-tricarboxylic acid Chemical compound O1[C@H](C(O)=O)[C@](C(O)=O)(O)[C@](COC(=O)/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)CC)(C(O)=O)O[C@]1(C(N)=O)CCC(=C)[C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)CC1=CC=CC=C1 TWYYFYNJOJGNFP-CUXYNZQBSA-N 0.000 description 18
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 18
- WGABOZPQOOZAOI-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[[(3,5-dimethoxy-4-methylbenzoyl)-(3-phenylpropyl)amino]methyl]phenyl]acetic acid Chemical compound COC1=C(C)C(OC)=CC(C(=O)N(CCCC=2C=CC=CC=2)CC=2C=CC(CC(O)=O)=CC=2)=C1 WGABOZPQOOZAOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 229940126212 compound 17a Drugs 0.000 description 17
- 241000252212 Danio rerio Species 0.000 description 15
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 13
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- MSSQOQPKGAMUSY-LEAFIULHSA-N 2-[1-[2-[(4r,6s)-8-chloro-6-(2,3-dimethoxyphenyl)-4,6-dihydropyrrolo[1,2-a][4,1]benzoxazepin-4-yl]acetyl]piperidin-4-yl]acetic acid Chemical compound COC1=CC=CC([C@@H]2C3=CC(Cl)=CC=C3N3C=CC=C3[C@@H](CC(=O)N3CCC(CC(O)=O)CC3)O2)=C1OC MSSQOQPKGAMUSY-LEAFIULHSA-N 0.000 description 10
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229940125876 compound 15a Drugs 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 9
- KSQVGVMZECCPAT-AEFFLSMTSA-N [(1R)-4-phenyl-1-[[(2R)-2-(pyrazine-2-carbonylamino)pentanoyl]amino]butyl]boronic acid Chemical compound B([C@H](CCCC1=CC=CC=C1)NC(=O)[C@@H](CCC)NC(=O)C2=NC=CN=C2)(O)O KSQVGVMZECCPAT-AEFFLSMTSA-N 0.000 description 8
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 8
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 7
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 7
- CODBZFJPKJDNDT-UHFFFAOYSA-N 2-[[5-[3-(dimethylamino)propyl]-2-methylpyridin-3-yl]amino]-9-(trifluoromethyl)-5,7-dihydropyrimido[5,4-d][1]benzazepine-6-thione Chemical compound CN(C)CCCC1=CN=C(C)C(NC=2N=C3C4=CC=C(C=C4NC(=S)CC3=CN=2)C(F)(F)F)=C1 CODBZFJPKJDNDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- SIOJFYRPBYGHOO-UHFFFAOYSA-N 2-(4-fluorophenyl)acetyl chloride Chemical compound FC1=CC=C(CC(Cl)=O)C=C1 SIOJFYRPBYGHOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- CEIUIHOQDSVZJQ-UHFFFAOYSA-N 2-heptyl-3-hydroxy-4-quinolone Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)=C(CCCCCCC)NC2=C1 CEIUIHOQDSVZJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- OXZYBOLWRXENKT-UHFFFAOYSA-N 4-(trifluoromethyl)benzoyl chloride Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=C(C(Cl)=O)C=C1 OXZYBOLWRXENKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 5
- FULZLIGZKMKICU-UHFFFAOYSA-N N-phenylthiourea Chemical compound NC(=S)NC1=CC=CC=C1 FULZLIGZKMKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000003214 anti-biofilm Effects 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 5
- 230000018612 quorum sensing Effects 0.000 description 5
- SHAHPWSYJFYMRX-GDLCADMTSA-N (2S)-2-(4-{[(1R,2S)-2-hydroxycyclopentyl]methyl}phenyl)propanoic acid Chemical compound C1=CC([C@@H](C(O)=O)C)=CC=C1C[C@@H]1[C@@H](O)CCC1 SHAHPWSYJFYMRX-GDLCADMTSA-N 0.000 description 4
- DPRJPRMZJGWLHY-HNGSOEQISA-N (e,3r,5s)-7-[5-(4-fluorophenyl)-3-propan-2-yl-1-pyrazin-2-ylpyrazol-4-yl]-3,5-dihydroxyhept-6-enoic acid Chemical compound OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)/C=C/C=1C(C(C)C)=NN(C=2N=CC=NC=2)C=1C1=CC=C(F)C=C1 DPRJPRMZJGWLHY-HNGSOEQISA-N 0.000 description 4
- KUZSBKJSGSKPJH-VXGBXAGGSA-N 5-[(9R)-6-[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]-11-oxa-1,3,5-triazatricyclo[7.4.0.02,7]trideca-2,4,6-trien-4-yl]pyrazin-2-amine Chemical compound C[C@@H]1COCCN1c1nc(nc2N3CCOC[C@H]3Cc12)-c1cnc(N)cn1 KUZSBKJSGSKPJH-VXGBXAGGSA-N 0.000 description 4
- SUNLLUSKJGSSGI-UHFFFAOYSA-N CCCCN(C(C)=CC1=O)C(CO)=C1OCC1=CC=CC=C1 Chemical compound CCCCN(C(C)=CC1=O)C(CO)=C1OCC1=CC=CC=C1 SUNLLUSKJGSSGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000032770 biofilm formation Effects 0.000 description 4
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 4
- AEULIVPVIDOLIN-UHFFFAOYSA-N cep-11981 Chemical compound C1=C2C3=C4CNC(=O)C4=C4C5=CN(C)N=C5CCC4=C3N(CC(C)C)C2=CC=C1NC1=NC=CC=N1 AEULIVPVIDOLIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 4
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 4
- IGVKWAAPMVVTFX-BUHFOSPRSA-N (e)-octadec-5-en-7,9-diynoic acid Chemical compound CCCCCCCCC#CC#C\C=C\CCCC(O)=O IGVKWAAPMVVTFX-BUHFOSPRSA-N 0.000 description 3
- QTBWCSQGBMPECM-UHFFFAOYSA-N 3-[4-[4-[2-[3-[(dimethylamino)methyl]phenyl]-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-4-yl]-1-ethyl-3-pyrazolyl]phenyl]-1,1-dimethylurea Chemical compound N=1N(CC)C=C(C=2C=3C=C(NC=3N=CC=2)C=2C=C(CN(C)C)C=CC=2)C=1C1=CC=C(NC(=O)N(C)C)C=C1 QTBWCSQGBMPECM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 3
- YTNPODNYABOCAF-UHFFFAOYSA-N CCCCCN(C(C)=CC1=O)C(CO)=C1OCC1=CC=CC=C1 Chemical compound CCCCCN(C(C)=CC1=O)C(CO)=C1OCC1=CC=CC=C1 YTNPODNYABOCAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101100391174 Dictyostelium discoideum forC gene Proteins 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 229960004099 azithromycin Drugs 0.000 description 3
- MQTOSJVFKKJCRP-BICOPXKESA-N azithromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)N(C)C[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 MQTOSJVFKKJCRP-BICOPXKESA-N 0.000 description 3
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 239000005416 organic matter Substances 0.000 description 3
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 3
- 229940072040 tricaine Drugs 0.000 description 3
- FQZJYWMRQDKBQN-UHFFFAOYSA-N tricaine methanesulfonate Chemical compound CS([O-])(=O)=O.CCOC(=O)C1=CC=CC([NH3+])=C1 FQZJYWMRQDKBQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YHMYGUUIMTVXNW-UHFFFAOYSA-N 1,3-dihydrobenzimidazole-2-thione Chemical compound C1=CC=C2NC(S)=NC2=C1 YHMYGUUIMTVXNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OXFSTTJBVAAALW-UHFFFAOYSA-N 1,3-dihydroimidazole-2-thione Chemical compound SC1=NC=CN1 OXFSTTJBVAAALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UAWVMPOAIVZWFQ-UHFFFAOYSA-N 1-(chloromethyl)-2-methoxybenzene Chemical compound COC1=CC=CC=C1CCl UAWVMPOAIVZWFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JJKFHPCWCOXSPU-UHFFFAOYSA-N 2-sulfanylidene-1,3-dihydrobenzimidazole-5-carbonitrile Chemical compound N#CC1=CC=C2NC(S)=NC2=C1 JJKFHPCWCOXSPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OCVLSHAVSIYKLI-UHFFFAOYSA-N 3h-1,3-thiazole-2-thione Chemical compound SC1=NC=CS1 OCVLSHAVSIYKLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BOBIZYYFYLLRAH-UHFFFAOYSA-N 5-chloro-3h-1,3-benzoxazole-2-thione Chemical compound ClC1=CC=C2OC(S)=NC2=C1 BOBIZYYFYLLRAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SSWZUOXLFTXIEZ-UHFFFAOYSA-N 5-methyl-3h-1,3-benzoxazole-2-thione Chemical compound CC1=CC=C2OC(=S)NC2=C1 SSWZUOXLFTXIEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XDZVUKOOUHIRKY-UHFFFAOYSA-N 6-fluoro-3h-1,3-benzothiazole-2-thione Chemical compound FC1=CC=C2NC(=S)SC2=C1 XDZVUKOOUHIRKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KECHYAFVYLLNCH-UHFFFAOYSA-N 6-methyl-3h-1,3-benzothiazole-2-thione Chemical compound CC1=CC=C2N=C(S)SC2=C1 KECHYAFVYLLNCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QPOZGXKWWKLJDK-UHFFFAOYSA-N 6-nitro-3h-1,3-benzothiazole-2-thione Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C2NC(=S)SC2=C1 QPOZGXKWWKLJDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940123949 Bacterial biofilm inhibitor Drugs 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N Ethylamine Chemical compound CCN QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 208000037581 Persistent Infection Diseases 0.000 description 2
- 208000032536 Pseudomonas Infections Diseases 0.000 description 2
- 101100074223 Pseudomonas aeruginosa (strain ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1) lasR gene Proteins 0.000 description 2
- 101100524676 Pseudomonas aeruginosa (strain ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1) rhlR gene Proteins 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 2
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 2
- 229940124350 antibacterial drug Drugs 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 2
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 2
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 2
- UCVODTZQZHMTPN-UHFFFAOYSA-N heptanoyl chloride Chemical compound CCCCCCC(Cl)=O UCVODTZQZHMTPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M methylene blue Chemical compound [Cl-].C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 2
- VVWRJUBEIPHGQF-MDZDMXLPSA-N propan-2-yl (ne)-n-propan-2-yloxycarbonyliminocarbamate Chemical compound CC(C)OC(=O)\N=N\C(=O)OC(C)C VVWRJUBEIPHGQF-MDZDMXLPSA-N 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- PCHSDJRKGJKOAG-ZDUSSCGKSA-N (2S)-N-[(2,4-dichlorophenyl)methyl]-5-oxo-1-thiophen-2-ylpyrrolidine-2-carboxamide Chemical compound Clc1ccc(CNC(=O)[C@@H]2CCC(=O)N2c2cccs2)c(Cl)c1 PCHSDJRKGJKOAG-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- ZXGVFUKWWWNTTQ-VSGBNLITSA-N (3r,5r)-7-[4-[[3-(2-amino-2-oxoethyl)phenyl]sulfamoyl]-2,3-bis(4-fluorophenyl)-5-propan-2-ylpyrrol-1-yl]-3,5-dihydroxyheptanoic acid Chemical compound OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CCN1C(C(C)C)=C(S(=O)(=O)NC=2C=C(CC(N)=O)C=CC=2)C(C=2C=CC(F)=CC=2)=C1C1=CC=C(F)C=C1 ZXGVFUKWWWNTTQ-VSGBNLITSA-N 0.000 description 1
- APJSHECCIRQQDV-ZRDIBKRKSA-N (e)-3-[4-hydroxy-3-(5,5,8,8-tetramethyl-3-pentoxy-6,7-dihydronaphthalen-2-yl)phenyl]prop-2-enoic acid Chemical compound CCCCCOC1=CC(C(CCC2(C)C)(C)C)=C2C=C1C1=CC(\C=C\C(O)=O)=CC=C1O APJSHECCIRQQDV-ZRDIBKRKSA-N 0.000 description 1
- RYWCQJDEHXJHRI-XJMXIVSISA-N 2-[3-[5-[6-[3-[3-(carboxymethyl)phenyl]-4-[(2r,3s,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyphenyl]hexyl]-2-[(2r,3s,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyphenyl]phenyl]acetic acid Chemical compound O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC(C(=C1)C=2C=C(CC(O)=O)C=CC=2)=CC=C1CCCCCCC(C=C1C=2C=C(CC(O)=O)C=CC=2)=CC=C1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 RYWCQJDEHXJHRI-XJMXIVSISA-N 0.000 description 1
- NVVPMZUGELHVMH-UHFFFAOYSA-N 3-ethyl-4-[4-[4-(1-methylpyrazol-4-yl)imidazol-1-yl]-3-propan-2-ylpyrazolo[3,4-b]pyridin-1-yl]benzamide Chemical compound CCC1=CC(C(N)=O)=CC=C1N1C2=NC=CC(N3C=C(N=C3)C3=CN(C)N=C3)=C2C(C(C)C)=N1 NVVPMZUGELHVMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVDGUTHABMXVMI-UHFFFAOYSA-N 3-nitro-4-(propylamino)benzoic acid Chemical compound CCCNC1=CC=C(C(O)=O)C=C1[N+]([O-])=O OVDGUTHABMXVMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XVMSFILGAMDHEY-UHFFFAOYSA-N 6-(4-aminophenyl)sulfonylpyridin-3-amine Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=N1 XVMSFILGAMDHEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- VWVKUNOPTJGDOB-BDHVOXNPSA-N Anhydrous tofogliflozin Chemical compound C1=CC(CC)=CC=C1CC1=CC=C(CO[C@@]23[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)C2=C1 VWVKUNOPTJGDOB-BDHVOXNPSA-N 0.000 description 1
- NZSQBRZWARZNQH-ZWOACCQCSA-N C1(CC1)NC(=O)O[C@H]1C(C2CC[C@]3([C@@]4(CC[C@@]5(C(C4CCC3[C@]2(CC1)C)[C@@H](CC5)[C@H](C)O)C(=O)O)C)C)(C)C Chemical compound C1(CC1)NC(=O)O[C@H]1C(C2CC[C@]3([C@@]4(CC[C@@]5(C(C4CCC3[C@]2(CC1)C)[C@@H](CC5)[C@H](C)O)C(=O)O)C)C)(C)C NZSQBRZWARZNQH-ZWOACCQCSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- TZYWCYJVHRLUCT-VABKMULXSA-N N-benzyloxycarbonyl-L-leucyl-L-leucyl-L-leucinal Chemical compound CC(C)C[C@@H](C=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 TZYWCYJVHRLUCT-VABKMULXSA-N 0.000 description 1
- TZCCKCLHNUSAMQ-DUGSHLAESA-N NC(=O)C[C@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(=N)N)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(=N)N)NC(=O)[C@H](Cc2ccc(F)cc2)NC(=O)[C@H](Cc3c[nH]c4ccccc34)NC(=O)Cc5cccs5)C(=O)N Chemical compound NC(=O)C[C@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(=N)N)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(=N)N)NC(=O)[C@H](Cc2ccc(F)cc2)NC(=O)[C@H](Cc3c[nH]c4ccccc34)NC(=O)Cc5cccs5)C(=O)N TZCCKCLHNUSAMQ-DUGSHLAESA-N 0.000 description 1
- 229940123361 Quorum sensing inhibitor Drugs 0.000 description 1
- NELWQUQCCZMRPB-UBPLGANQSA-N [(2r,3r,4r,5r)-4-acetyloxy-5-(4-amino-5-ethenyl-2-oxopyrimidin-1-yl)-2-methyloxolan-3-yl] acetate Chemical compound CC(=O)O[C@@H]1[C@H](OC(C)=O)[C@@H](C)O[C@H]1N1C(=O)N=C(N)C(C=C)=C1 NELWQUQCCZMRPB-UBPLGANQSA-N 0.000 description 1
- QABUURICQJOWID-MRXNPFEDSA-N [5-chloro-6-[(6-methylpyridin-3-yl)amino]pyridin-3-yl]-[(2r)-2-ethylpiperidin-1-yl]methanone Chemical compound CC[C@@H]1CCCCN1C(=O)C(C=C1Cl)=CN=C1NC1=CC=C(C)N=C1 QABUURICQJOWID-MRXNPFEDSA-N 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004202 aminomethyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000003444 anaesthetic effect Effects 0.000 description 1
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical group COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 125000006615 aromatic heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002029 aromatic hydrocarbon group Chemical group 0.000 description 1
- 150000004945 aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- PKFDLKSEZWEFGL-MHARETSRSA-N c-di-GMP Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@@H](O)[C@H](N4C5=C(C(NC(N)=N5)=O)N=C4)O[C@@H]3COP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=C(NC2=O)N)=C2N=C1 PKFDLKSEZWEFGL-MHARETSRSA-N 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 150000002611 lead compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- MUJNAWXXOJRNGK-UHFFFAOYSA-N n-[3-(6-methyl-1,2,3,4-tetrahydrocarbazol-9-yl)propyl]cyclohexanamine Chemical compound C1=2CCCCC=2C2=CC(C)=CC=C2N1CCCNC1CCCCC1 MUJNAWXXOJRNGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- VVWRJUBEIPHGQF-UHFFFAOYSA-N propan-2-yl n-propan-2-yloxycarbonyliminocarbamate Chemical compound CC(C)OC(=O)N=NC(=O)OC(C)C VVWRJUBEIPHGQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- DVWOYOSIEJRHKW-UIRZNSHLSA-M sodium (2S)-2-[[(2S)-2-[[(4,4-difluorocyclohexyl)-phenylmethoxy]carbonylamino]-4-methylpentanoyl]amino]-1-hydroxy-3-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]propane-1-sulfonate Chemical compound FC1(CCC(CC1)C(OC(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(S(=O)(=O)[O-])O)C[C@H]1C(NCC1)=O)CC(C)C)C1=CC=CC=C1)F.[Na+] DVWOYOSIEJRHKW-UIRZNSHLSA-M 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940083608 sodium hydroxide Drugs 0.000 description 1
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000005477 standard model Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical group 0.000 description 1
- FIQMHBFVRAXMOP-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphane oxide Chemical compound C=1C=CC=CC=1P(C=1C=CC=CC=1)(=O)C1=CC=CC=C1 FIQMHBFVRAXMOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007923 virulence factor Effects 0.000 description 1
- 239000000304 virulence factor Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明属于医药领域，公开了一类羟基吡啶酮类化合物及其作为克服细菌生物膜耐药的抗生素增敏剂的应用。所述的羟基吡啶酮结构衍生物如式I所示，本发明以羟基吡啶酮为母核，在N‑1位，C‑2位，C‑6位引入疏水碳链，不同位点取代芳香环，含巯基的杂环结构，设计合成了一系列羟基吡啶酮类化合物，所得化合物大都具有优秀的抗细菌生物膜活性。与临床治疗铜绿假单胞菌常用抗生素联用后，增强了抗生素对耐药菌的敏感性，提升了抗生素对不同临床耐药菌株的抗菌能力。
Description
技术领域
本发明属于医药领域，特别涉及一类羟基吡啶酮类化合物及其制备方法以及其作为克服细菌生物膜耐药的抗生素的增敏剂的应用。
背景技术
全世界每年因细菌感染死亡的人数大约有1600万，而其中70％以上的难愈性慢性感染与细菌形成生物膜导致的耐药有关(Biotechnol.Adv.,2013,31:224-245)。生物膜是微生物分泌至胞外的多聚基质粘附于介质表面形成的用于将其自身包裹于内的膜样结构。当细菌形成生物膜时，膜内细菌由于受到生物膜的屏蔽作用不易被宿主免疫系统清除降低抗生素的抑菌效能，导致抗菌药物的耐受性显著上升。因此，抑制细菌生物膜形成，降低细菌耐药性，提升抗生素的抑菌效能，有望缓解细菌耐药及难愈性慢性感染问题。
细菌生物膜形成主要受细菌群体感应系统(quorum sensing，QS)，GacS信号转导系统，以及3’,5’-环二鸟苷(c-di-GMP)调控系统这三大系统调控(BioMed Res.Int.,2015,1:759348)。其中细菌群体感应系统是依赖信号分子的一种细菌间相互交的通讯机制，主要包括相互关联的las、rhl、及PQS三大系统，其中las及rhl系统以N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)为信号分子，PQS系统以2-庚基-3-羟基-4(1H)-喹诺酮(PQS)为信号分子。三大系统均通过相应的信号分子与相应的转录因子(lasR、rhlR及pqsR)结合形成复合物调控靶基因的表达，引起一系列基因表达水平的改变，从而实现细菌群体行为的调节，如毒力因子分泌、细菌运动能力调控、形成生物膜等。由于细菌群体感应系统的研究最为完善，目前基于细菌生物膜形成调控系统的生物膜抑制剂的研发主要集中于细菌群体感应系统(SAJBiotechnol.,2014,1(1):1-9)，包括利用信号分子AHLs及PQS类似物竞争性地抑制相应转录因子(lasR、rhlR及pqsR)的激活作用，利用信号分子降解酶水解信号分子等策略。遗憾的是，目前尚无细菌群体感应抑制剂成功应用于临床，所以，开发新型针对细菌生物膜耐药的抗生素增敏剂非常必要和具有临床意义。
发明内容
为了克服上述现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种羟基吡啶酮类化合物，该化合物通过抑制细菌生物膜的形成，从而克服细菌对于抗生素的耐药性，具有作为新型抗菌剂药物的潜力。
本发明另一目的在于提供上述羟基吡啶酮类化合物的制备方法。
本发明再一目的在于提供上述羟基吡啶酮类化合物作为克服细菌生物膜耐药的抗生素增敏剂的应用。
本发明的目的通过下述方案实现：
一类羟基吡啶酮类衍生物，具有如式I所示的化学结构：
其中，R1为甲基、乙基、丙基、丁基、戊基的一种；R2为H,或者氨基甲基(-CH2NH-)、酰胺基甲基(-CH2NHCO-)、磺酰胺基甲基(-CH2NHSO2-)中的一种与5-6碳原子直链烷基、取代芳烃基、杂环芳烃巯基结构中的一种相连的基团；R3为甲基，或者5-6个碳原子直链烷烃酰胺基甲基、取代芳烃酰胺基甲基中的一种。
优选的，所述的羟基吡啶酮类衍生物，具有如下所示的化学结构：
一种上述羟基吡啶酮衍生物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1.1)将曲酸、氯化苄、氢氧化钠在溶剂中进行反应，反应结束后得到的反应液经纯化即得化合物1；
(1.2)将化合物1、甲胺置于溶剂中反应，得到的反应液经纯化所得到化合物2；
(1.3)将化合物2、三苯基膦、DEAD(偶氮二甲酸二乙酯)及邻苯二甲酰亚胺置于溶剂中反应，得到的反应液经纯化所得到化合物3；
(1.4)化合物3与水合肼在溶剂中加热回流反应，得到的反应液经纯化得到化合物4；
(1.5)化合物4与酰氯(R4COCl)、吡啶在溶剂中反应，得到的反应液经纯化所得的化合物为化合物5a-5d；
(1.6)化合物5a-5d与Pd/C在溶剂中，氢气氛围下进行反应，所得的反应液经纯化后得到化合物6a-6d；
此时的合成路线为：
步骤(1.1)所述的反应在溶剂中80℃回流反应24h；步骤(1.1)中所述的溶剂优选为甲醇；步骤(1.1)所述的纯化方法是指反应液减压浓缩后，加入水洗，析出固体，过滤得到产物1；
步骤(1.2)中所述的反应是指在室温反应24h；步骤(1.2)中所述的溶剂优选为甲醇；步骤(1.2)所述的纯化方法是指反应液减压浓缩后，加入溶剂(乙酸乙酯)洗，析出固体，过滤得到产物2；
步骤(1.3)中所述的溶剂为无水四氢呋喃；步骤(1.3)中所述的反应是指首先在0℃投料后，室温反应24h；步骤(1.3)所述的纯化方法是指反应液减压浓缩后，以二氯甲烷萃取，萃取得到的有机物经柱层析方法纯化得到化合物3；
步骤(1.4)中所述的反应是指在溶剂中78℃回流反应3-4h；步骤(1.4)中所述的溶剂优选为乙醇；步骤(1.4)所述的纯化方法是指反应液减压浓缩后，溶于水中，10M氢氧化钠溶液调节pH为12-13，以溶剂萃取，萃取得到的有机物经柱层析方法纯化得到化合物4；
步骤(1.5)中所述的酰氯R4COCl优选为己酰氯、对三氟甲基苯甲酰氯、对甲氧基苯甲酰氯、2-(4-氟苯基)乙酰氯中的一种；
步骤(1.5)中所述的反应是指在溶剂中室温反应6h后纯化得到化合物5a-5d；步骤(1.5)中所述的溶剂优选为无水DMF(N,N-二甲基甲酰胺)。
步骤(1.6)中所述的反应是指在溶剂中室温反应12h；步骤(1.6)中所述的溶剂优选为甲醇；步骤(1.6)所述的纯化方法是指反应液用硅藻土抽滤，减压浓缩，得到固体用溶剂重结晶得到化合物6a-6d；
(2.1)将曲酸置于氯化亚砜中反应，粗产物继续与锌粉、浓盐酸进行反应，得到的反应液纯化即得化合物7；
(2.2)将化合物7与甲醛在碱性条件下反应，将所得反应液纯化即得化合物8；
(2.3)将化合物8与氯化苄、氢氧化钠水溶液在溶剂中进行反应，反应结束后得到的反应液经纯化即得化合物9；
(2.4)将化合物9与3,4-二氢吡喃和对甲苯磺酸反应得到中间体，之后与甲胺置于溶剂中反应，纯化后得化合物10a；
(2.5)将化合物10a、三苯基膦、DIAD(偶氮二甲酸二乙酯)及邻苯二甲酰亚胺置于溶剂中反应，得到化合物11a；
(2.6)化合物11a与水合肼在溶剂中加热回流反应，得到化合物12a；
(2.7)将化合物12a与氯乙酰氯、三乙胺在溶剂中反应，得化合物13；
(2.8)将化合物13与三氯化硼置于溶剂中反应，得化合物14；
(2.9)将化合物14与以及氢氧化钾在溶剂中反应，得到化合物15a-15j，其中对应的为化合物2-巯基苯并咪唑、5-硝基-2-巯基苯并咪唑、5-氰基-2-巯基苯并咪唑、2-巯基-5-甲基苯并恶唑、5-氯-2-巯基苯并恶唑、2-巯基-6-甲基苯并噻唑、6-氟-2-巯基苯并噻唑、2-巯基-6-硝基苯并噻唑、2-巯基咪唑或2-巯基噻唑。
此时的合成路线为：
步骤(2.1)中所述的将曲酸置于氯化亚砜中反应是指在室温反应2h；所述的继续与锌粉、浓盐酸进行反应是指在70-80℃反应5h；重结晶得到产物7；
步骤(2.2)中所述反应是指在室温反应过夜；步骤(2.2)所述的纯化方法是指缓慢加入浓盐酸调pH＝1，析出大量固体，过滤得到产物7；
步骤(2.3)中所述的反应是指在溶剂中80℃回流反应过夜，得到产物9；所述的溶剂优选为甲醇；
步骤(2.4)中所述的化合物9、3,4-二氢吡喃和对甲苯磺酸反应是指在溶剂中常温反应3h；所述的之后与甲胺置于溶剂中反应是指在乙醇中75℃反应12h，再与2mol/L稀盐酸在乙醇中回流反应4h，得到产物10a；
步骤(2.5)中所述的反应是指在无水四氢呋喃0℃投料后，室温反应24h，得化合物11a；
步骤(2.6)中所述的反应是指在溶剂乙醇中78℃回流反应3-4h，得到化合物12a；
步骤(2.7)中所述的反应是指在溶剂中室温反应3h，得到化合物13；所述的溶剂优选为无水DMF(N,N-二甲基甲酰胺)；
步骤(2.8)中所述的反应是指在溶剂中室温反应3h，得到化合物14；所述的溶剂优选为无水DCM(二氯甲烷)；
步骤(2.9)中所述的反应是指在溶剂中55℃反应过夜，得到化合物15a-15j；所述的溶剂优选为甲醇。
(3.1)将化合物9与3,4-二氢吡喃和对甲苯磺酸反应得到中间体，之后与R1NH2(R1为甲基、乙基、丙基、丁基、戊基的一种)置于溶剂中反应，纯化后得化合物10b-10e；
(3.2)将化合物10b-10e、三苯基膦、DIAD(偶氮二甲酸二乙酯)及邻苯二甲酰亚胺置于溶剂中反应，得到化合物11b-11e；
(3.3)化合物11b-11e与水合肼在溶剂中加热回流反应，得到化合物12b-12e；
(3.4)化合物12b-12e、酰氯(R5COCl)或磺酰氯(R5SO2Cl)、吡啶在无水DMF(N,N-二甲基甲酰胺)中反应，得到的反应液经纯化得化合物16a-16r；
(3.5)化合物16a-16r与Pd/C在溶剂中，氢气氛围下进行反应，所得的反应液经纯化后得到化合物17a-17r；
此时的合成路线为：
步骤(3.1)中所述的化合物9与3,4-二氢吡喃和对甲苯磺酸反应是指在溶剂中常温反应3h；所述的之后与R1NH2在溶剂中反应是指在乙醇中75℃反应12h，再与2mol/L稀盐酸在乙醇中回流反应4h，得到产物10b-10e；
步骤(3.2)中所述的反应是指在溶剂无水四氢呋喃0℃投料后，室温反应24h，得化合物11b-11e；
步骤(3.3)中所述的反应是指在溶剂中78℃回流反应3-4h，得到化合物12b-12e；
步骤(3.4)中所述的酰氯为庚酰氯、己酰氯、对甲氧基苯甲酰氯、对三氟甲基苯甲酰氯、对甲氧基苯甲酰氯、间甲氧基苯甲酰氯、邻甲氧基苯甲酰氯、2-(4-氟苯基)乙酰氯中的一种；步骤(3.4)中所述的磺酰氯为对甲氧基苯磺酰氯。
步骤(3.4)中所述的反应是指在无水DMF中室温反应6h；步骤(3.1)所述的纯化方法是指反应液加入水中，以二氯甲烷萃取，萃取得到的有机物经柱层析方法纯化得到化合物16a-16r；
步骤(3.5)中所述的反应是指在溶剂甲醇中，氢气氛围下，室温反应12h；步骤(3.2)所述的纯化方法是指反应液用硅藻土抽滤，减压浓缩，得到固体用甲醇重结晶得到化合物17a-17r。
上述的羟基吡啶酮类化合物与临床常用治疗铜绿假单胞菌感染抗生素联用后均提升了抗生素对不同临床耐药菌株敏感性及抗菌能力，本发明的羟基吡啶酮类化合物主要是通过抑制细菌生物膜的形成，可用于制备细菌生物膜抑制剂，尤其是在制备铜绿假单胞菌抑制剂的增敏剂中的应用。
所述的铜绿假单胞菌抑制剂可以为喹诺酮类抗生素(环丙沙星)、氨基糖苷类抗生素(妥布霉素)和粘菌素中的至少一种；
所述的铜绿假单胞菌为铜绿假单胞菌PAO1，铜绿假单胞菌1121，铜绿假单胞菌1167，铜绿假单胞菌FB，铜绿假单胞菌1129中的一种。
前述的羟基吡啶酮类化合物铜绿假单胞菌抑制剂在浓度仅为20μM时与上述抗生素联用后可提升上述临床分离铜绿假单胞菌耐药菌株的敏感性。
所述的药物组合物中的羟基吡啶酮类化合物还可以为羟基吡啶酮类化合物的药用盐或者溶剂化物。公知的，化合物的溶剂化形式与盐通常并不影响化合物自身的生物学活性。
所述的药物组合物可含有一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。
本发明相对于现有技术，具有如下的优点及有益效果：
(1)本发明以羟基吡啶酮为先导化合物，对羟基吡啶酮N-1位，C-2位，C-6位进行修饰和改造，设计合成了一系列羟基吡啶酮类化合物，并应用于细菌生物膜抑制剂的开发中，其中17k，N-1位丁基取代、C-2位为对甲氧基苯环取代时，生物膜抑制活性优于阳性对照化合物阿奇霉素，是高效的新型生物膜抑制剂。
(2)羟基吡啶酮类化合物中优秀生物膜抑制活性的15b,17e,17f,17i,17j,17k,17l,17m,17o,17r(MIC>512μM)化合物在浓度为20μM时与临床常用抗生素(环丙沙星、、妥布霉素、粘菌素)联用时抑制铜绿假单胞菌标准菌株PAO1和临床分离的铜绿假单胞菌耐药菌株(1121，1167，FB，1129)，增强了抗生素对耐药菌的敏感性，提升了抗生素对不同临床耐药菌株的抗菌能力。
附图说明
图1不同浓度化合物对斑马鱼感染模型的实验结果图。
具体实施方式
下面结合实施例和附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例中所用试剂如无特殊说明均可从市场常规购得。
实施例1:N-((5-(苄氧基)-1-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)己酰胺(5a)的制备
以中间体化合物4(具体制备参考“J.Med.Chem.2004,47(25),6349-6362.”)(350mg,1.4mmol)置于25mL干燥的双口瓶中，氮气保护下加入8mL无水DMF,0℃下滴加己酰氯(0.3mL,2.1mmol)，然后加无水吡啶(0.6mL,7.0mmol)，室温反应6小时。反应完毕加入8mL水淬灭反应。二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，柱层析纯化，洗脱剂为二氯甲烷/甲醇＝30/1，得5a为白色油状液体277mg，产率：57.9％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.35(t,J＝4.4Hz,1H),7.41–7.32(m,5H),6.95(s,1H),6.29(s,1H),5.07(s,2H),4.31(d,J＝5.4Hz,2H),3.55(s,3H),2.43–2.24(m,2H),1.66(p,J＝7.4Hz,2H),1.36–1.28(m,4H),0.88(t,J＝6.7Hz,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ14.0,22.4,25.3,31.6,36.1,40.0,41.0,72.0,117.6,127.8,128.4,128.7,129.6,136.3,146.5,147.6,172.6,173.9.
实施例2:N-((5-(苄氧基)-1-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺(5b)的制备
以中间体化合物4(400mg,1.6mmol)和对三氟甲基苯甲酰氯(0.4mL,2.4mmol)原料，合成方法同化合物5a，得5b为淡黄色油状液体264mg，产率：39.4％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.63(s,1H),8.31(d,J＝7.8Hz,2H),7.62(d,J＝7.9Hz,2H),7.23(s,5H),6.99(s,1H),6.25(s,1H),4.90(s,2H),4.51(d,J＝4.2Hz,2H),3.59(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ29.7,41.2,71.9,100.0,118.4,125.2(q,3JC-F＝3.5Hz),127.7,128.4,128.5,128.6,132.9(q,2JC-F＝32.9Hz),135.6,145.9,147.8,165.9,172.3.
实施例3:N-((5-(苄氧基)-1-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-甲氧基苯甲酰胺(5c)的制备
以中间体化合物4(300mg,1.2mmol)和对甲氧基苯甲酰氯(0.4mL,1.8mmol)原料，合成方法同化合物5a，得5c为白色油状液体454mg，产率：99.9％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.04(s,1H),8.15(d,J＝8.8Hz,2H),7.26(s,5H),6.94(s,1H),6.89(d,J＝8.8Hz,2H),6.31(s,1H),4.95(s,2H),4.50(d,J＝5.0Hz,2H),3.82(s,3H),3.56(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ29.7,41.1,55.3,72.0,113.6,118.3,125.7,127.8,128.3,128.6,129.7,136.1,162.3.
实施例4:N-((5-(苄氧基)-1-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-2-(4-氟苯基)乙酰胺(5d)的制备
以中间体化合物4(300mg,1.2mmol)和2-(4-氟苯基)乙酰氯(0.3mL,1.8mmol)原料，合成方法同化合物5a，得5d为白色油状液体264mg，产率：57.5％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.82(s,1H),7.40–7.29(m,7H),7.01–6.91(m,3H),6.31(s,1H),5.05(s,2H),4.28(d,J＝5.3Hz,2H),3.59(s,2H),3.52(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ40.1,41.2,42.0,72.0,115.2(d,2JC-F＝21.4Hz),115.4,127.8,128.5,128.7,129.4,130.8(d,3JC-F＝7.9Hz),131.2(d,4JC-F＝3.1Hz),136.0,146.6,160.7(d,1JC-F＝245.7Hz),171.5.
实施例5:N-((5-羟基-1-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)己酰胺(6a)的制备
将中间体化合物5a(277mg,0.81mmol)置于单口反应瓶中,用10mL甲醇溶解，加入27mg Pd/C(l0％钯碳)，抽真空，充氢气置换三次，室温反应12h。反应完毕，反应液用硅藻土过滤，收集滤液减压浓缩得到固体，固体用甲醇重结晶，得6a为白色固体182mg，产率：88.9％，纯度：98.69％，熔点：182.4-183.4℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.34(t,J＝5.6Hz,1H),7.42(s,1H),6.09(s,1H),4.21(d,J＝5.7Hz,2H),3.59(s,3H),2.17(t,J＝7.4Hz,2H),1.53(p,J＝7.4Hz,2H),1.36–1.15(m,4H),0.86(t,J＝7.0Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ14.3,22.3,25.4,31.4,35.6,39.2,112.3,124.8,145.8,147.2,170.8,172.8.HRMS(ESI):calcd for C13H20N2O3[M+H]+＝253.1547,found[M+H]+＝253.1549.
实施例6:N-((5-羟基-1-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺(6b)的制备
以中间体化合物5b，合成方法同化合物6a，得6b为白色固体152mg，产率：73.8％，纯度：99.40％，熔点：269.6-270.5℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.28(t,J＝5.3Hz,1H),8.12(d,J＝8.1Hz,2H),7.89(d,J＝8.3Hz,2H),7.46(s,1H),6.16(s,1H),4.46(d,J＝5.5Hz,2H),3.67(s,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ39.4,40.1,112.5,123.0,125.0,125.9(q,3JC-F＝3.8Hz),128.8,131.7,132.0(q,2JC-F＝31.9Hz),137.9,145.3,147.3,165.8,170.8.HRMS(ESI):calcd for C15H13F3N2O3[M+H]+＝327.0951,found[M+H]+＝327.0950.
实施例7:N-((5-羟基-1-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-甲氧基苯甲酰胺(6c)的制备
以中间体化合物5c，合成方法同化合物6a，得6c为白色固体226mg，产率：65.8％，纯度：99.05％，熔点：270.4-272.0℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.88(s,1H),7.90(d,J＝8.7Hz,2H),7.44(s,1H),7.03(d,J＝8.8Hz,2H),6.12(s,1H),4.40(d,J＝5.4Hz,2H),3.82(s,3H),3.66(s,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ40.3,55.8,112.3,114.1,124.8,126.4,129.7,145.9,147.3,162.3,166.3,170.8.HRMS(ESI):calcd for C15H16N2O4[M+H]+＝289.1183,found[M+H]+＝289.1191.
实施例8:2-(4-氟苯基)-N-((5-羟基-1-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)乙酰胺(6d)的制备
以中间体化合物5d，合成方法同化合物6a，得6d为白色固体207mg，产率：78.9％，纯度：98.62％，熔点：204.4-204.9℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.60(t,J＝5.3Hz,1H),7.42(s,1H),7.31(dd,J＝5.7,8.5Hz,2H),7.13(t,J＝8.9Hz,2H),6.11(s,1H),4.23(d,J＝5.6Hz,2H),3.55(s,3H),3.52(s,2H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ39.5,41.6,112.5,115.3(d,2JC-F＝21.3Hz),124.9,131.3,131.4(d,3JC-F＝8.1Hz),132.7(d,4JC-F＝3.1Hz),145.5,147.3,160.3,161.5(d,1JC-F＝243.1Hz),162.7,170.8.HRMS(ESI):calcd for C15H15FN2O3[M+H]+＝291.1139,found[M+H]+＝291.1127.
实施例9:1,6-二甲基-2-氯乙酰胺基甲基-3-苄氧基-4-吡啶酮(13)的制备
将中间体化合物12a(具体合成方法参考“J.Med.Chem.2004,47(25),6349-6362.”)(3g，11.6mmol)置于含有磁力搅拌子的100mL干燥的双口瓶，氮气保护下，加入30mL无水DMF，0℃下滴加氯乙酰氯(1.05mL，13.94mmol)，然后逐滴加入无水三乙胺(1.93mL,13.94mmol)，室温反应3小时，TLC监测反应结束后，大量白色粉末析出，抽滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤三遍，收集滤饼，得化合物13为白色固体(3.67g,Yield＝94.50％)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37(d,J＝10.1Hz,1H),7.33–7.26(m,4H),7.26–7.25(m,1H),6.32(s,1H),5.18(s,2H),4.41(d,J＝5.7Hz,2H),3.99(d,J＝4.7Hz,2H),3.46(s,3H),2.24(s,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ173.04,166.42,147.52,146.26,140.12,137.03,128.92,128.59,128.40,118.74,73.16,42.36,36.37,35.34,20.97.
实施例10:1,6-二甲基-2-氯乙酰胺基甲基-3-羟基-4-吡啶酮(14)的制备
将化合物13(3.5g，0.01mol)置于含有磁力搅拌子的100mL干燥的双口瓶中，氮气保护下，加入30mL无水二氯甲烷，0℃下缓慢滴加三氯化硼的二氯甲烷溶液(30mL,0.03mol,1mol/L)，自然升温至室温，搅拌3h。TLC监测反应结束，加入甲醇淬灭反应，将反应液减压浓缩得粗产物，粗产物用纯甲醇重结晶，得化合物14为白色固体(1.4g,Yield＝57.20％)；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.01(s,1H),7.31(s,1H),4.66(d,J＝5.2Hz,1H),4.13(s,2H),3.88(s,3H),2.57(s,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ166.98,160.00,148.86,143.38,139.70,113.16,42.77,35.39,21.08.
实施例11:1,6-二甲基-2-((2-苯并咪唑基)-硫代乙酰胺基甲基)-3-羟基-4-吡啶酮(15a)的制备
将化合物2-巯基苯并咪唑(96.13mg，0.67mmol)和氢氧化钾(52.18mg，0.93mmol)置于含有磁力搅拌子的25mL干燥的双口瓶中，氮气保护下，加入3mL无水甲醇，待其溶解后，加入中间体化合物14(150mg，0.61mmol)，55℃搅拌6h。TLC监测反应结束后，固体析出，自然冷却至室温，过滤，得滤渣，粗产物用甲醇重结晶，得化合物15a为白色固体163mg，产率：74.50％，纯度：96.36％，熔点：264.3-265.6℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.02(s,1H),7.44-7.42(m,2H),7.17-7.14(m,1H),7.12(s,1H),4.63(d,J＝5.4Hz,2H),4.10(s,2H),3.74(s,3H),2.45(s,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ168.21,161.29,150.11,148.45,143.73,138.46,122.30,113.06,38.91,35.25,35.14,20.94.HRMS(ESI)m/z calcd forC17H18N4O3S[M+H]+359.1172,found 359.1164.
实施例12:1,6-二甲基-2-((5-硝基-2-苯并咪唑基)-硫代乙酰胺基甲基)-3-羟基-4-吡啶酮(15b)的制备
以中间体14(150mg，0.61mmol)和5-硝基-2-巯基苯并咪唑(130.98mg，0.67mmol)为原料，制备方法同化合物15a，得化合物15b为褐色固体140mg，产率：56.90％，纯度：95.13％，熔点：235.3-236.7℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73(s,1H),8.25(d,J＝2.1Hz,1H),8.06(dd,J＝8.8,2.2Hz,1H),7.58(d,J＝8.8Hz,1H),6.14(s,1H),4.48(d,J＝4.8Hz,2H),4.13(s,2H),3.43(s,3H),2.24(s,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ169.34,167.49,146.69,146.13,142.58,129.53,119.41,118.00,112.96,105.19,36.15,35.13,35.06,20.72.HRMS(ESI)m/z calcd for C17H17N5O5S[M+H]+404.1023,found 404.1030.
实施例13:1,6-二甲基-2-((5-氰基-2-苯并咪唑基)-硫代乙酰胺基甲基)-3-羟基-4-吡啶酮(15c)的制备
以中间体14(100mg，0.41mmol)和5-氰基-2-巯基苯并咪唑(92.86mg，0.53mmol)为原料，制备方法同化合物15a，得化合物15c为白色固体115mg，产率：73.10％，纯度：97.65％，熔点：266.8-267.7℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.72(t,J＝4.9Hz,1H),7.91(s,1H),7.53(dt,J＝8.3,4.9Hz,2H),6.13(s,1H),4.47(d,J＝5.0Hz,2H),4.10(s,2H),3.42(s,3H),2.24(s,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ169.84,167.52,146.53,146.29,128.83,125.76,120.47,112.89,103.75,35.92,35.08,35.03,20.71.HRMS(ESI)m/z calcd forC18H17N5O3S[M+H]+384.1125,found 384.1122.
实施例14:1,6-二甲基-2-((5-甲基-2-苯并恶唑基)-硫代乙酰胺基甲基)-3-羟基-4-吡啶酮(15d)的制备
以中间体14(100mg，0.41mmol)和2-巯基-5-甲基苯并恶唑(98mg，0.53mmol)为原料，制备方法同化合物15a，得化合物15d为白色固体98mg，产率：64.00％，纯度：95.12％，熔点：246.4-247.8℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.27(s,1H),7.21(d,J＝8.1Hz,1H),7.10(s,1H),6.81(d,J＝7.6Hz,1H),6.15(s,1H),4.67(s,2H),3.57(s,3H),2.33(s,3H),2.30(s,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ169.99,162.53,146.83,146.75,146.30,143.49,133.23,128.37,121.50,116.54,112.93,108.58,38.33,36.13,21.56,20.74.HRMS(ESI)m/z calcdfor C18H19N3O4S[M+H]+374.1169,found 374.1173.
实施例15:1,6-二甲基-2-((5-氯-2-苯并恶唑基)-硫代乙酰胺基甲基)-3-羟基-4-吡啶酮(15e)的制备
以中间体14(100mg，0.41mmol)和5-氯-2-巯基苯并恶唑(98.94mg，0.53mmol)为原料，制备方法同化合物15a，得化合物15e为白色固体80mg，产率：49.50％，纯度：95.44％，熔点：217.3-219.7℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.77(s,1H),7.68(dd,J＝10.0,5.1Hz,2H),7.36(dd,J＝8.6,1.7Hz,1H),6.14(s,1H),4.49(d,J＝4.6Hz,2H),4.17(s,2H),3.46(s,3H),2.27(s,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ169.87(s),166.57(s),166.46(s),150.54(s),146.57(s),146.34(s),142.96(s),129.42(s),128.70(s),124.73(s),118.38(s),112.93(s),111.96(s),35.95(s),35.80(s),35.15(s),20.75(s).HRMS(ESI)m/z calcdfor C17H16ClN3O4S[M+H]+394.0623,found 394.0625.
实施例16:1,6-二甲基-2-((6-甲基-2-苯并噻唑基)-硫代乙酰胺基甲基)-3-羟基-4-吡啶酮(15f)的制备
以中间体14(100mg，0.41mmol)和2-巯基-6-甲基苯并噻唑(96.62mg，0.53mmol)为原料，制备方法同化合物15a，得化合物15f为白色固体93mg，产率：58.20％，纯度：95.15％，熔点：253.1-254.7℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.74(t,J＝5.0Hz,1H),7.79(s,1H),7.64(d,J＝8.3Hz,1H),7.26(d,J＝8.3Hz,1H),6.14(s,1H),4.49(d,J＝5.0Hz,2H),4.14(s,2H),3.42(s,3H),2.40(s,3H),2.23(s,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ169.85,167.02,165.16,151.14,146.54,146.33,135.36,134.67,128.81,128.18,121.91,121.03,112.93,36.77,35.95,35.0,21.40,20.72.HRMS(ESI)m/z calcd for C18H19N3O3S2[M+H]+390.0941,found390.0940.
实施例17:1,6-二甲基-2-((6-氟-2-苯并噻唑基)-硫代乙酰胺基甲基)-3-羟基-4-吡啶酮(15g)的制备
以中间体14(100mg，0.41mmol)和6-氟-2-巯基苯并噻唑(113.92mg，0.62mmol)为原料，制备方法同化合物15a，得化合物15g为白色固体88mg，产率：54.60％，纯度：95.34％，熔点：241.4-243.2℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73(t,J＝4.8Hz,1H),7.95(dd,J＝8.7,2.6Hz,1H),7.77(dd,J＝8.9,4.9Hz,1H),7.32(td,J＝9.0,2.7Hz,1H),6.13(s,1H),4.49(d,J＝5.0Hz,2H),4.15(s,2H),3.44(s,3H),2.24(s,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ169.87,166.94,159.60(d,1JC-F＝241Hz),146.44(d,2JC-F＝25Hz),136.49(d,4JC-F＝12Hz),128.72,122.52(d,5JC-F＝9Hz),115.10,114.94,112.89,108.95(d,3JC-F＝17Hz),36.85,35.95,35.13,20.73.HRMS(ESI)m/z calcd for C17H16FN3O3S2[M+H]+394.0690,found394.0692.
实施例18:1,6-二甲基-2-((6-硝基-2-苯并噻唑基)-硫代乙酰胺基甲基)-3-羟基-4-吡啶酮(15h)的制备
以中间体14(100mg，0.41mmol)和2-巯基-6-硝基苯并噻唑(194.2mg，0.62mmol)为原料，制备方法同化合物15a，得化合物15h为黄色固体121mg，产率：70.20％，纯度：95.07％，熔点：235.9-237.4℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.07(d,J＝2.3Hz,1H),8.82(t,J＝4.6Hz,1H),8.27(dd,J＝9.0,2.3Hz,1H),7.91(d,J＝9.0Hz,1H),6.24(s,1H),4.51(d,J＝4.8Hz,2H),4.25(s,2H),3.51(s,3H),2.29(s,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ174.80,168.99,166.70,156.84,146.79,146.07,144.04,143.78,135.9,129.76,123.46,122.46,121.51,119.32,118.27,113.37,112.99,37.02,36.32,35.22,20.80.HRMS(ESI)m/z calcdfor C17H16N4O5S2[M+H]+421.0635,found 421.0632.
实施例19:1,6-二甲基-2-((2-咪唑基)-硫代乙酰胺基甲基)-3-羟基-4-吡啶酮(15i)的制备
以中间体14(100mg，0.41mmol)和2-巯基咪唑(61.58mg，0.62mmol)为原料，制备方法同化合物15a，得化合物15i为粉色固体96mg，产率：75.90％，纯度：95.13％，熔点：251.7-253.9℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.59(s,1H),7.01(s,2H),6.12(s,1H),4.44(d,J＝3.8Hz,2H),3.72(s,2H),3.41(s,3H),2.27(s,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ169.83,168.46,146.57,146.23,138.85,128.85,112.87,36.91,35.94,34.87,20.75.HRMS(ESI)m/z calcd for C13H16N4O3S[M+H]+309.1016,found 309.1007.
实施例20:1,6-二甲基-2-((2-噻唑基)-硫代乙酰胺基甲基)-3-羟基-4-吡啶酮(15j)的制备
以中间体14(100mg，0.41mmol)和2-巯基噻唑(72.07mg，0.62mmol)为原料，制备方法同化合物15a，得化合物15j为白色固体93mg，产率：69.70％，纯度：95.99％，熔点：217.3-219.4℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.64(t,J＝4.9Hz,1H),7.67(dd,J＝17.5,3.4Hz,2H),6.13(s,1H),4.46(d,J＝5.0Hz,2H),3.99(s,2H),3.44(s,3H),2.28(s,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ169.82,167.23,163.67,146.58,146.29,143.12,128.77,121.06,112.90,37.46,35.95,35.02,20.77.HRMS(ESI)m/z calcd for C13H15N3O3S2[M+H]+326.0628,found 326.0628.
实施例21:3-(苄氧基)-1-乙基-2-(羟甲基)-6-甲基吡啶-4(1H)-酮(10b)的制备
将化合物9(J.Med.Chem.2004,47(25),6349-6362.具体合成方法已有报道)(6.00g,24mmol)置于250mL双口瓶中，加入100mL无水二氯甲烷溶解，随后加入对甲苯磺酸(172mg,1mmol)，缓慢滴加3,4-二氢-2H-吡喃(4.50mL,1mmol)，室温反应3小时。反应完毕，加入5％碳酸钠溶液淬灭反应，二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到黄色液体。黄色液体溶于40mL乙醇中，加入20mL乙胺，封管75℃反应12h。反应完毕，反应液减压浓缩，得到棕色液体。棕色液体溶于50mL乙醇中，加入19mL 2M盐酸，回流反应4小时。反应完毕，旋干乙醇，加入40mL水，用40mL乙醚洗涤，保留水层，水层用10M氢氧化钠溶液，调节pH＝13，用二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到固体用二氯甲烷重结晶，得到棕色晶体2.40g。产率：36.1％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.50–7.27(m,5H),6.17(s,1H),5.47(t,J＝5.3Hz,1H),5.03(s,2H),4.50(d,J＝5.3Hz,2H),4.10(q,J＝7.1Hz,2H),2.34(s,3H),1.24(t,J＝7.1Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ15.9,19.6,43.0,54.0,73.1,118.5,128.2,128.6,128.8,138.2,142.9,145.5,147.5,172.8.
实施例22:3-(苄氧基)-2-(羟甲基)-6-甲基-1-丙基吡啶-4(1H)-酮(10c)的制备
以中间体化合物9，合成方法同化合物10b，得10c为棕色晶体2.34g，产率：32.0％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.46–7.28(m,5H),6.16(s,1H),5.47(t,J＝5.3Hz,1H),5.03(s,2H),4.49(d,J＝5.2Hz,2H),4.03–3.88(m,2H),3.34(s,3H),2.33(s,3H),1.62(dq,J＝7.4,14.9Hz,2H),0.89(t,J＝7.4Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ11.3,19.7,23.9,49.4,54.1,73.1,118.4,128.2,128.6,128.8,138.2,143.0,145.3,147.6,172.8.
实施例23:3-(苄氧基)-1-丁基-2-(羟甲基)-6-甲基吡啶-4(1H)-酮(10d)的制备
以中间体化合物9，合成方法同化合物10b，得10d为棕色晶体2.10g，产率：28.8％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.46–7.29(m,5H),6.16(s,1H),5.48(t,J＝5.2Hz,1H),5.03(s,2H),4.49(d,J＝4.7Hz,2H),4.11–3.94(m,2H),2.33(s,3H),1.58(p,J＝8.2Hz,2H),1.32(h,J＝7.3Hz,2H),0.92(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ13.9,19.9,32.5,47.7,54.1,73.1,118.5,128.2,128.6,128.8,138.2,143.0,145.4,147.6,172.8.
实施例24:3-(苄氧基)-2-(羟甲基)-6-甲基-1-戊基吡啶-4(1H)-酮(10e)的制备
以中间体化合物9，合成方法同化合物10b，得10e为白色固体1.20g，产率：15.8％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.47–7.29(m,5H),6.17(s,1H),5.52(s,1H),5.03(s,2H),4.49(s,2H),4.05–3.95(m,2H),2.33(s,3H),1.60(p,J＝7.3Hz,2H),1.31(td,J＝5.5,13.7,14.5Hz,4H),0.88(t,J＝6.9Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ14.3,19.7,22.1,28.8,30.2,47.9,54.1,73.1,118.5,128.2,128.6,128.8,138.1,143.0,145.3,147.6,172.8.
实施例25:2-((3-(苄氧基)-1-乙基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)异吲哚-1,3-二酮(11b)的制备
将化合物10b(2.40g,9mmol)，邻苯二甲酰亚胺(2.77g,11mmol)，三苯基氧膦(1.56g,11mmol)置于干燥的250mL的双口瓶中，氮气保护下，加入40mL无水四氢呋喃中。0℃下搅拌30分钟后，缓慢滴加偶氮二甲酸二异丙酯(1.67mL,11mmol)，滴加完后缓慢升至室温，搅拌24h。反应完毕，减压浓缩，旋干四氢呋喃，残余液体加入50mL水后，100mL二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，柱层析纯化，洗脱剂为二氯甲烷/甲醇＝15/1，得到黄色固体4.51g，产率：81.8％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.84(s,4H),7.34(dd,J＝1.7,7.6Hz,2H),7.26(dd,J＝3.6,9.0Hz,3H),6.21(s,1H),5.13(s,2H),4.85(s,2H),4.09(q,J＝7.0Hz,2H),3.35(s,3H),2.35(s,3H),1.16(t,J＝7.1Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ15.7,19.9,34.7,43.8,71.4,100.0,118.9,123.6,128.1,128.4,128.8,131.9,135.0,138.0,146.7,147.2,167.8,172.2.
实施例26:2-((3-(苄氧基)-6-甲基-4-氧代-1-丙基-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)异吲哚-1,3-二酮(11c)的制备
以中间体化合物10c，合成方法同化合物11b，得11c为黄色固体3.41g，产率：99.6％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.84(d,J＝1.7Hz,4H),7.35(d,J＝7.5Hz,2H),7.30–7.19(m,3H),6.20(s,1H),5.15(s,2H),4.82(s,2H),4.08–3.80(m,2H),3.36(s,3H),2.34(s,3H),1.62–1.47(m,2H),0.84(t,J＝7.2Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ10.9,20.1,23.8,34.8,49.9,71.4,118.9,123.6,128.1,128.4,128.9,131.9,135.0,137.9,138.0,146.6,147.3,167.9,172.3.
实施例27:2-((3-(苄氧基)-1-丁基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)异吲哚-1,3-二酮(11d)的制备
以中间体化合物10d，合成方法同化合物11b，得11d为黄色固体4.04g，产率：95.2％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.84(s,4H),7.39–7.33(m,2H),7.31–7.22(m,3H),6.21(s,1H),5.16(s,2H),4.83(s,2H),4.09–3.84(m,2H),2.34(s,3H),1.47(p,J＝8.1Hz,2H),1.25(h,J＝7.3Hz,2H),0.80(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ13.9,19.6,20.1,32.5,34.7,48.5,71.4,118.9,123.6,128.1,128.4,131.9,135.1,138.0,146.7,147.3,167.9,172.3.
实施例28:2-((3-(苄氧基)-6-甲基-4-氧代-1-戊基-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)异吲哚-1,3-二酮(11e)的制备
以中间体化合物10e，合成方法同化合物11b，得11e为黄色固体2.02g，产率：94.2％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.77(dd,J＝3.0,5.6Hz,2H),7.70(dd,J＝3.0,5.6Hz,2H),7.47(dd,J＝1.5,7.8Hz,2H),7.30–7.19(m,3H),6.35(s,1H),5.39(s,2H),4.67(s,2H),4.09–3.94(m,2H),2.33(s,3H),1.56–1.41(m,2H),1.33–1.17(m,4H),0.94–0.81(m,3H).13CNMR(100MHz,CDCl3)δ13.8,20.5,22.3,28.5,30.7,34.4,48.7,72.1,119.7,123.4,127.9,128.0,129.6,131.8,134.2,137.1,137.2,145.9,146.8,167.6,173.3.
实施例29:2-(氨基甲基)-3-(苄氧基)-1-乙基-6-甲基吡啶-4(1H)-酮(12b)的制备
将化合物11b(4.51g,11mmol)溶于26mL乙醇中，加入8.6mL 5.5％水合肼，加热回流4小时，反应后减压浓缩，残渣加入25mL水中，10M NaOH调节溶液pH＝12，二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，柱层析纯化，洗脱剂为二氯甲烷/甲醇＝20/1，得到白色固体2.11g，产率：70.7％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.48–7.28(m,5H),6.16(s,1H),5.08(s,2H),4.09(q,J＝7.1Hz,2H),3.68(s,2H),2.32(s,3H),1.20(t,J＝7.1Hz,3H).13CNMR(100MHz,DMSO-d6)δ16.0,19.7,36.5,42.7,72.5,118.4,128.3,128.7,128.9,138.3,144.6,145.0,147.1,172.7.
实施例30:2-(氨基甲基)-3-(苄氧基)-6-甲基-1-丙基吡啶-4(1H)-酮(12c)的制备
以中间体化合物11c，合成方法同化合物12a，得12c为黄色固体2.80g，产率：57.8％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.45–7.28(m,5H),6.15(s,1H),5.09(s,2H),4.01–3.91(m,2H),3.67(s,2H),2.31(s,3H),1.58(dq,J＝7.4,14.9Hz,2H),0.88(t,J＝7.4Hz,3H).13CNMR(100MHz,DMSO-d6)δ11.2,19.9,24.0,36.7,49.1,72.5,118.3,128.3,128.7,129.0,138.2,144.8,147.3,172.7.
实施例31:2-(氨基甲基)-3-(苄氧基)-1-丁基-6-甲基吡啶-4(1H)-酮(12d)的制备
以中间体化合物11d，合成方法同化合物12a，得12d为黄色固体1.84g，产率：65.5％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.45–7.28(m,5H),6.14(s,1H),5.09(s,2H),4.07–3.90(m,2H),3.66(s,2H),2.32(s,3H),1.55(dt,J＝8.4,15.8Hz,2H),1.32(h,J＝7.3Hz,2H),0.91(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ13.9,19.8,19.9,32.6,36.7,47.4,72.5,118.3,128.3,128.7,129.0,138.2,144.8,147.2,172.6.
实施例32:2-(氨基甲基)-3-(苄氧基)-6-甲基-1-戊基吡啶-4(1H)-酮(12e)的制备
以中间体化合物11e，合成方法同化合物12a，得12e为黄色固体2.15g，产率：98.6％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.30–7.15(m,5H),6.22(s,1H),5.16(s,2H),3.90–3.80(m,2H),3.57(s,2H),2.19(s,3H),1.45(p,J＝7.5Hz,2H),1.21(pd,J＝4.3,5.3,7.9Hz,4H),0.79(t,J＝6.9Hz,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ13.8,20.1,22.1,28.6,30.5,36.7,47.9,72.7,119.0,128.1,128.3,129.3,137.4,143.3,144.8,146.3,173.4.
实施例33:N-((3-(苄氧基)-1-乙基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)庚酰胺(16a)的制备
以中间体化合物12b(400mg,1.5mmol)置于25mL干燥的双口瓶中，氮气保护下加入8mL无水DMF,0℃下滴加庚酰氯(0.3mL,2.3mmol)，然后加无水吡啶(0.6mL,7.0mmol)，室温反应6小时。反应完毕加入8mL水淬灭反应。二氯甲烷萃取三次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，柱层析纯化，洗脱剂为二氯甲烷/甲醇＝30/1，得16a为白色油状液体455mg，产率：57.9％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.30(s,5H),6.27(s,2H),5.18(s,2H),4.28(d,J＝5.8Hz,2H),4.02–3.80(m,2H),2.26(s,3H),2.10–1.90(m,2H),1.49(q,J＝7.1Hz,3H),1.31–1.11(m,9H),0.83(t,J＝6.7Hz,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ14.1,15.7,20.1,22.5,25.4,29.0,31.5,34.2,36.0,43.6,72.8,119.3,128.4,128.5,129.2,137.2,140.6,146.1,146.5,173.2.
实施例34:N-((3-(苄氧基)-1-乙基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)己酰胺(16b)的制备
以中间体化合物12b(400mg,1.5mmol)和己酰氯(0.4mL,2.3mmol)原料，合成方法同化合物16a，得16b为淡黄色油状液体333mg，产率：60.0％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.34(s,5H),6.32(s,1H),5.24(s,2H),4.30(d,J＝5.8Hz,2H),3.96(d,J＝5.6Hz,2H),2.37–2.13(m,3H),2.01(t,J＝7.5Hz,2H),1.52(p,J＝7.6Hz,2H),1.24(dq,J＝6.2,6.6,14.2Hz,7H),0.87(d,J＝11.6Hz,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ13.9,15.7,20.0,22.4,25.1,31.4,34.2,36.1,43.6,72.8,119.4,128.6,129.3,137.3,140.6,146.3,173.2.
实施例35:N-((3-(苄基氧基)-1-乙基-6-甲基-4-氧基-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-甲氧基苯甲酰胺(16c)的制备
以中间体化合物12b(400mg,1.5mmol)和对甲氧基苯甲酰氯(0.3mL,2.3mmol)原料，合成方法同化合物16a，得16c为淡黄色油状液体601mg，产率：93.3％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.68(dd,J＝6.9,8.7Hz,2H),7.47–7.19(m,5H),6.88(d,J＝7.9Hz,2H),6.35(t,J＝6.8Hz,1H),5.30(d,J＝6.6Hz,2H),4.54(d,J＝5.3Hz,2H),4.07(d,J＝7.0Hz,2H),3.84(s,3H),2.30(s,3H),1.27(t,J＝6.9Hz,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ15.8,20.1,35.0,43.7,55.4,73.1,113.6,119.5,125.7,128.5,129.2,137.3,140.4,146.3,162.4,166.8,173.1.
实施例36:N-((3-(苄氧基)-6-甲基-4-氧代-1-丙基-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺(16d)的制备
以中间体化合物12c(300mg,1.3mmol)和对三氟甲基苯甲酰氯(0.3mL,2.0mmol)原料，合成方法同化合物16a，得16d为淡黄色油状液体420mg，产率：70.0％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.02(s,1H),8.07(d,J＝8.1Hz,2H),7.84(d,J＝8.3Hz,2H),7.47–7.23(m,5H),6.24(s,1H),5.14(s,2H),4.57(d,J＝4.6Hz,2H),3.86–3.74(m,2H),2.34(s,3H),1.59(dq,J＝7.0,14.6Hz,2H),0.83(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO)δ11.1,19.9,23.9,35.5,49.8,72.6,118.7,125.7(q,3JC-F＝3.7Hz),128.3,128.6,128.9,138.1,139.8,146.6,147.7,165.7,172.5.
实施例37:N-((3-(苄氧基)-6-甲基-4-氧代-1-丙基-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-甲氧基苯甲酰胺(16e)的制备
以中间体化合物12c(350mg,1.3mmol)和对甲氧基苯甲酰氯(0.3mL,2.0mmol)原料，合成方法同化合物16a，得16e为淡黄色油状液体311mg，产率：56.9％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.66(d,J＝8.7Hz,2H),7.33(dd,J＝7.9,21.0Hz,5H),6.88(d,J＝8.7Hz,2H),6.69(s,1H),6.38(s,1H),5.31(s,2H),4.52(d,J＝5.6Hz,2H),3.97–3.87(m,2H),3.85(d,J＝6.0Hz,3H),2.30(s,3H),1.71–1.48(m,2H),0.95(t,J＝7.4Hz,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ10.8,20.3,24.3,35.1,50.1,55.4,73.1,113.7,119.4,125.7,128.4,128.6,129.1,137.2,140.8,146.2,146.6,162.4,166.7,173.0.
实施例38:N-((3-(苄氧基)-6-甲基-4-氧代-1-丙基-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-3-甲氧基苯甲酰胺(16f)的制备
以中间体化合物12c(350mg,1.2mmol)和间甲氧基苯甲酰氯(0.3mL,1.8mmol)原料，合成方法同化合物16a，得16f为白色油状液体377mg，产率：74.7％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.41–7.17(m,8H),7.03(d,J＝8.6Hz,1H),6.32(s,1H),5.39–5.20(m,2H),4.53(d,J＝5.8Hz,2H),3.83(s,3H),2.29(d,J＝3.2Hz,3H),1.62(h,J＝7.3Hz,2H),0.96(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ10.8,20.2,24.3,35.2,50.0,55.5,73.0,112.5,118.1,119.4,128.4,128.5,129.0,129.4,134.9,137.2,140.3,146.4,159.7,167.1,173.1.
实施例39:N-((3-(苄氧基)-6-甲基-4-氧代-1-丙基-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-2-甲氧基苯甲酰胺(16g)的制备
以中间体化合物12c(350mg,1.2mmol)和邻甲氧基苯甲酰氯(0.3mL,1.8mmol)原料，合成方法同化合物16a，得16g为白色油状液体377mg，产率：74.7％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.41(s,1H),8.10(d,J＝9.4Hz,1H),7.37(ddt,J＝6.7,13.2,46.5Hz,5H),7.02(t,J＝7.5Hz,1H),6.88(d,J＝8.3Hz,1H),6.36(s,1H),5.37(s,2H),4.56(s,2H),4.09(s,2H),3.66(s,3H),2.31(s,3H),1.83–1.56(m,2H),0.99(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO)δ6.1,15.6,19.7,30.5,45.4,51.0,68.3,106.6,115.0,115.9,116.3,123.4,123.7,124.1,127.3,128.5,132.8,136.4,141.2,141.9,152.8,160.4,168.6.
实施例40:N-((3-(苄氧基)-6-甲基-4-氧代-1-丙基-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-2-(4-氟苯基)乙酰胺(16h)的制备
以中间体化合物12c(350mg,1.3mmol)和2-(4-氟苯基)乙酰氯(0.3mL,2.0mmol)原料，合成方法同化合物16a，得16h为淡黄色油状液体413mg，产率：75.4％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36–7.26(m,5H),7.23(dd,J＝5.4,8.5Hz,2H),6.96(d,J＝17.3Hz,2H),6.28(s,1H),5.18(s,2H),4.32(d,J＝5.7Hz,2H),3.86–3.72(m,2H),3.46(s,2H),2.25(s,3H),1.54(dt,J＝7.5,16.1Hz,2H),0.89(t,J＝7.4Hz,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ10.7,20.2,24.2,34.8,42.1,50.0,72.9,115.3(d,2JC-F＝21.5Hz),119.3,128.3,128.5,128.9,130.7(d,3JC-F＝7.8Hz),137.3,140.5,146.5,160.7(d,1JC-F＝246.3Hz),170.8,173.1.
实施例41:N-((3-(苄氧基)-1-丁基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)己酰胺(16i)的制备
以中间体化合物12d(350mg,1.2mmol)和己酰氯(0.3mL,1.8mmol)原料，合成方法同化合物16a，得16i为淡黄色油状液体385mg，产率：80.0％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.35(s,5H),6.33(s,1H),5.27(s,2H),4.27(s,2H),4.00–3.74(m,2H),2.29(s,3H),2.04–1.93(m,2H),1.51(dq,J＝7.0,7.5,14.4Hz,4H),1.41–1.17(m,6H),0.90(dt,J＝7.2,18.2Hz,6H).13C NMR(75MHz,CDCl3)δ13.7,13.9,19.7,20.2,22.3,25.2,31.4,33.0,34.4,36.2,48.4,72.8,119.5,128.4,128.6,129.4,137.4,140.7,146.0,146.3,173.0,173.1.
实施例42:N-((3-(苄氧基)-1-丁基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺(16j)的制备
以中间体化合物12d(350mg,1.2mmol)和对三氟甲基苯甲酰氯(0.3mL,1.8mmol)原料，合成方法同化合物16a，得16j为淡黄色油状液体391mg，产率：69.2％1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.52(s,1H),8.10(d,J＝7.2Hz,2H),7.64(d,J＝7.4Hz,2H),7.24(d,J＝6.9Hz,5H),6.17(s,1H),5.07(s,2H),4.58(s,2H),4.04–3.70(m,2H),2.24(s,3H),1.57(s,2H),1.33(d,J＝7.3Hz,2H),0.89(t,J＝7.2Hz,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ13.6,19.8,20.0,32.9,35.5,48.7,73.1,119.1,125.3(q,3JC-F＝3.8Hz),128.0,128.2,128.3,128.4,137.0,140.3,146.7,166.1,173.0.
实施例43:N-((3-(苄氧基)-1-丁基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-甲氧基苯甲酰胺(16k)的制备
以中间体化合物12d(350mg,1.2mmol)和对甲氧基苯甲酰氯(0.3mL,1.8mmol)原料，合成方法同化合物16a，得16k为淡黄色油状液体313mg，产率：60.0％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.66(d,J＝8.8Hz,2H),7.42–7.23(m,5H),6.88(d,J＝8.8Hz,2H),6.68(s,1H),6.35(s,1H),5.31(s,2H),4.52(d,J＝5.7Hz,2H),4.01–3.91(m,2H),3.84(s,3H),2.30(s,3H),1.56(p,J＝7.7,8.4Hz,2H),1.38(dt,J＝7.3,15.0Hz,2H),0.92(t,J＝7.3Hz,3H).13CNMR(75MHz,CDCl3)δ13.7,19.8,20.2,33.1,35.2,48.6,55.4,73.1,113.6,119.4,125.7,128.4,128.6,129.1,129.1,137.2,140.7,146.3,146.5,162.4,166.7,173.0.
实施例44:N-((3-(苄氧基)-1-丁基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-3-甲氧基苯甲酰胺(16l)的制备
以中间体化合物12d(350mg,1.2mmol)和间甲氧基苯甲酰氯(0.3mL,1.8mmol)原料，合成方法同化合物16a，得16l为白色油状液体385mg，产率：88.6％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.44(s,1H),7.35–7.22(m,7H),7.02(dt,J＝2.0,7.4Hz,1H),6.27(s,1H),5.23(s,2H),4.54(d,J＝5.6Hz,2H),3.97–3.87(m,2H),3.82(s,3H),2.25(s,3H),1.55(p,J＝7.9,8.5Hz,2H),1.36(dt,J＝7.4,15.0Hz,2H),0.90(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ13.7,19.8,20.2,33.0,35.3,48.6,55.5,73.0,112.4,118.1,119.4,128.3,128.5,129.0,129.4,134.9,137.2,140.3,146.4,159.7,167.1,173.1.
实施例45:N-((3-(苄氧基)-1-丁基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-2-甲氧基苯甲酰胺(16m)的制备
以中间体化合物12d(350mg,1.2mmol)和邻甲氧基苯甲酰氯(0.3mL,1.8mmol)原料，合成方法同化合物16a，得16m为白色油状液体374mg，产率：71.7％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.42(t,J＝5.9Hz,1H),8.12(dd,J＝1.8,7.8Hz,1H),7.53–7.22(m,6H),7.04(t,J＝7.4Hz,1H),6.90(d,J＝8.3Hz,1H),6.39(s,1H),5.40(s,2H),4.58(d,J＝5.6Hz,2H),4.15(s,2H),3.68(s,3H),2.33(s,3H),1.60(p,J＝7.7,8.2Hz,2H),1.44(h,J＝7.3Hz,2H),0.97(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ13.8,19.8,20.4,33.3,35.3,48.7,55.8,73.0,111.3,119.8,120.6,121.1,128.1,128.4,128.8,132.0,133.2,137.6,141.1,145.9,146.7,157.6,165.2,173.3.
实施例46:N-((3-(苄氧基)-1-丁基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-2-(4-氟苯基)乙酰胺(16n)的制备
以中间体化合物12d(350mg,1.3mmol)和2-(4-氟苯基)乙酰氯(0.3mL,1.8mmol)原料，合成方法同化合物16a，得16n为淡黄色油状液体413mg，产率：75.4％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.37–7.26(m,5H),7.26–7.18(m,2H),6.96(t,J＝8.7Hz,2H),6.88(s,1H),6.28(s,1H),5.18(s,2H),4.31(d,J＝5.7Hz,2H),3.90–3.74(m,2H),3.45(s,2H),2.25(s,3H),1.49(p,J＝8.3,9.0Hz,2H),1.39–1.27(m,2H),0.91(t,J＝7.2Hz,3H).13C NMR(75MHz,CDCl3)δ13.6,19.7,20.2,33.0,34.9,42.1,48.5,73.0,115.3(d,2JC-F＝21.5Hz),119.4,128.3,128.5,128.9,128.9,130.7(d,3JC-F＝8.9Hz),137.3,140.6,146.5,160.7(d,1JC-F＝246.3Hz),170.8,173.0.
实施例47:N-((3-(苄氧基)-6-甲基-4-氧代-1-戊基-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-甲氧基苯甲酰胺(16o)的制备
以中间体化合物12d(350mg,1.3mmol)和对甲氧基苯甲酰氯(0.3mL,1.8mmol)原料，合成方法同化合物16a，得16o为淡黄色油状液体320mg，产率：54.9％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.67(d,J＝8.7Hz,2H),7.31(ddd,J＝7.0,17.4,24.9Hz,5H),6.88(d,J＝8.8Hz,2H),6.33(s,1H),5.30(s,2H),4.52(d,J＝5.7Hz,2H),4.02–3.89(m,2H),3.84(s,3H),2.29(s,3H),1.62–1.50(m,2H),1.38–1.23(m,4H),0.87(t,J＝6.7Hz,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ13.9,20.3,22.3,28.6,30.8,35.2,48.7,55.4,73.0,113.6,119.5,125.7,128.4,128.5,129.1,129.2,137.3,140.6,146.3,162.4,166.7,173.1.
实施例48:N-((3-(苄氧基)-1-乙基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-甲氧基苯磺酰胺(16p)的制备
以中间体化合物12b(300mg,1.1mmol)和对甲氧基苯磺酰氯(372mg,1.7mmol)原料，合成方法同化合物16a，得16p为白色油状液体221mg，产率：43.3％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.77(d,J＝8.8Hz,2H),7.36(t,J＝7.3Hz,1H),7.31–7.21(m,3H),7.06(dd,J＝8.0,23.3Hz,4H),6.33(s,1H),5.15(s,2H),4.03(q,J＝7.0Hz,2H),3.94(s,3H),3.85(d,J＝6.8Hz,2H),2.30(s,3H),1.32–1.23(m,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ15.6,20.0,38.5,43.1,55.7,72.7,114.3,119.5,128.6,129.4,130.5,136.8,137.8,146.9,163.2.
实施例49:N-((3-(苄氧基)-6-甲基-4-氧代-1-丙基-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-甲氧基苯磺酰胺(16q)的制备
以中间体化合物12c(350mg,1.2mmol)和对甲氧基苯磺酰氯(372mg,1.7mmol)原料，合成方法同化合物16a，得16q为白色油状液体275mg，产率：60.2％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.81–7.70(m,2H),7.37(t,J＝7.4Hz,1H),7.31–7.23(m,2H),7.14–6.98(m,4H),6.40(s,1H),5.18(s,2H),3.94(s,3H),3.92–3.82(m,4H),2.32(s,3H),1.60(q,J＝7.7Hz,2H),0.98(t,J＝7.4Hz,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ10.7,20.2,24.1,38.6,49.6,55.7,72.8,114.3,128.6,128.6,129.3,129.4,130.5,136.8,150.4,163.1.
实施例50:N-((3-(苄氧基)-1-丁基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-甲氧基苯磺酰胺(16r)的制备
以中间体化合物12d(350mg,1.2mmol)和对甲氧基苯磺酰氯(372mg,1.8mmol)原料，合成方法同化合物16a，得16r为白色油状液体305mg，产率：66.8％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.81(d,J＝8.9Hz,2H),7.35–7.22(m,4H),7.04(dd,J＝8.0,24.1Hz,4H),6.27(s,1H),5.09(s,2H),3.92(s,5H),3.85(s,2H),2.25(s,3H),1.57–1.34(m,4H),0.96(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ13.7,19.7,20.1,32.8,38.6,47.9,55.7,72.7,114.2,119.3,128.5,129.2,129.4,130.7,136.9,137.9,146.9,163.0,172.9.
实施例51:N-((1-乙基-3-羟基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)庚酰胺(17a)的制备
将中间体化合物16a(455mg,0.81mmol)置于单口反应瓶中,用10mL甲醇溶解，加入45.5mg Pd/C(l0％钯碳)，抽真空，充氢气置换三次，室温反应12h。反应完毕，反应液用硅藻土过滤，收集滤液减压浓缩得到固体，固体用甲醇重结晶，得17a为白色固体249mg，产率：70.6％，纯度：99.82％，熔点：145.3-146.0℃。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.29(s,1H),4.63(s,2H),4.24(s,2H),2.37(s,3H),2.21(t,J＝7.6Hz,2H),1.77–1.47(m,2H),1.27(s,9H),0.86(t,J＝5.9Hz,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ14.1,15.9,20.3,22.5,25.5,28.9,31.5,34.5,36.4,43.8,114.5,130.2,144.5,146.9,169.7,173.5.HRMS(ESI):calcd for C16H26N2O3[M+H]+＝295.2016,found[M+H]+＝295.2016.
实施例52:N-((1-乙基-3-羟基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)己酰胺(17b)的制备
以中间体化合物16b，合成方法同化合物17a，得17b为白色固体90mg，产率：52.6％，纯度：99.89％，熔点：151.5-152.1℃。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.20(s,1H),6.13(s,1H),4.40(d,J＝5.1Hz,2H),3.95(q,J＝7.0Hz,2H),2.34(s,3H),2.10(t,J＝7.4Hz,2H),1.49(p,J＝7.4Hz,2H),1.23(dt,J＝6.8,14.0Hz,7H),0.85(t,J＝7.0Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ14.3,15.8,19.9,22.3,25.3,31.4,34.1,35.4,43.1,113.5,128.7,145.6,146.6,169.9,172.8.HRMS(ESI):calcd for C15H24N2O3[M+H]+＝281.1860,found[M+H]+＝281.1868.
实施例53:N-((1-乙基-3-羟基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-甲氧基苯甲酰胺(17c)的制备
以中间体化合物16c，合成方法同化合物17a，得17c为白色固体321mg，产率：72.5％，纯度：96.92％，熔点：231.7-232.6℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.65(s,1H),7.89(d,J＝8.2Hz,2H),6.97(d,J＝8.2Hz,2H),6.14(s,1H),4.62(d,J＝4.4Hz,2H),4.01(q,J＝6.8Hz,2H),3.80(s,3H),2.35(s,3H),1.22(t,J＝6.9Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ15.9,19.9,35.1,43.3,55.8,113.4,113.9,126.5,128.4,129.8,145.7,146.8,162.2,166.3,169.9.HRMS(ESI):calcd for C17H20N2O4[M+H]+＝317.1496,found[M+H]+＝317.1494.
实施例54:N-((3-羟基-6-甲基-4-氧代-1-丙基-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺(17d)的制备
以中间体化合物16d，合成方法同化合物17a，得17d为白色固体284mg，产率：84.6％，纯度：96.18％，熔点：256.4-257.5℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.06(s,1H),8.10(d,J＝8.1Hz,2H),7.83(d,J＝8.3Hz,2H),6.15(s,1H),4.67(d,J＝4.8Hz,2H),3.97–3.77(m,2H),2.35(s,3H),1.64(dq,J＝7.3,14.9Hz,2H),0.87(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ11.2,20.0,23.9,35.3,49.6,113.4,125.7(q,3JC-F＝3.8Hz),128.0,128.9,138.1,145.9,146.9,165.7,169.9.HRMS(ESI):calcd for C18H19F3N2O3[M+H]+＝369.1421,found[M+H]+＝369.1416.
实施例55:N-((3-羟基-6-甲基-4-氧代-1-丙基-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-甲氧基苯甲酰胺(17e)的制备
以中间体化合物16e，合成方法同化合物17a，得17e为白色固体284mg，产率：84.6％，纯度：97.28％，熔点：246.6-246.9℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.67(t,J＝4.7Hz,1H),7.90(d,J＝8.9Hz,2H),6.97(d,J＝8.9Hz,2H),6.14(s,1H),4.64(d,J＝4.8Hz,2H),3.90–3.83(m,2H),3.80(s,3H),2.34(s,3H),1.62(dq,J＝7.2,14.9Hz,2H),0.85(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ11.2,20.0,24.0,35.0,49.6,55.8,113.4,113.9,126.5,128.6,129.8,145.8,146.7,162.1,166.3,169.9.HRMS(ESI):calcd for C18H22N2O4[M+H]+＝331.1652,found[M+H]+＝331.1649.
实施例56:N-((3-羟基-6-甲基-4-氧代-1-丙基-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-3-甲氧基苯甲酰胺(17f)的制备
以中间体化合物16f，合成方法同化合物17a，得17f为白色固体190mg，产率：64.5％，纯度：99.89％，熔点：208.1-209.2℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.84(t,J＝4.8Hz,1H),7.54–7.44(m,2H),7.36(t,J＝7.9Hz,1H),7.09(dd,J＝1.9,8.2Hz,1H),6.14(s,1H),4.65(d,J＝4.9Hz,2H),3.91–3.83(m,2H),3.79(s,3H),2.34(s,3H),1.63(dq,J＝7.3,15.0Hz,2H),0.86(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ11.2,20.0,23.9,35.1,49.6,55.8,112.9,113.4,117.8,120.3,128.4,129.8,135.6,145.9,146.8,159.6,166.5,169.9.HRMS(ESI):calcd for C18H22N2O4[M+H]+＝331.1652,found[M+H]+＝331.1654.
实施例57:N-((3-羟基-6-甲基-4-氧代-1-丙基-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-2-甲氧基苯甲酰胺(17g)的制备
以中间体化合物16g，合成方法同化合物17a，得17g为白色固体211mg，产率：71.8％，纯度：98.89％，熔点：200.9-202.2℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(t,J＝5.5Hz,1H),7.81(dd,J＝1.8,7.7Hz,1H),7.48(ddd,J＝1.8,7.4,9.1Hz,1H),7.13(d,J＝8.3Hz,1H),7.04(t,J＝7.1Hz,1H),6.13(s,1H),4.65(d,J＝5.6Hz,2H),4.08–3.96(m,2H),3.88(s,3H),2.34(s,3H),1.66(dq,J＝7.3,14.9Hz,2H),0.94(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ11.2,20.2,23.9,35.0,49.6,56.5,112.6,113.8,121.1,122.5,129.6,131.0,133.1,145.6,146.7,157.5,165.2,169.8.HRMS(ESI):calcd for C18H22N2O4[M+H]+＝331.1652,found[M+H]+＝331.1650.
实施例58:2-(4-氟苯基)-N-((3-羟基-6-甲基-4-氧代-1-丙基-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)乙酰胺(17h)的制备
以中间体化合物16h，合成方法同化合物17a，得17h为白色固体274mg，产率：84.1％，纯度：99.84％，熔点：200.5-201.2℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.52(s,1H),7.29(dd,J＝5.6,8.7Hz,2H),7.12(t,J＝8.9Hz,2H),6.13(s,1H),4.41(d,J＝5.1Hz,2H),3.82–3.71(m,2H),3.45(s,2H),2.32(s,3H),1.55(dq,J＝7.4,15.0Hz,2H),0.80(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ11.1,20.0,23.9,34.4,41.4,49.4,113.5,115.2(d,2JC-F＝21.2Hz),128.7,131.2(d,3JC-F＝8.1Hz),132.8(d,4JC-F＝3.0Hz),145.8,146.7,160.3(d,1JC-F＝242.8Hz),169.9,170.6.HRMS(ESI):calcd for C18H21FN2O3[M+H]+＝333.1609,found[M+H]+＝333.1606.
实施例59:N-((1-丁基-3-羟基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)己酰胺(17i)的制备
以中间体化合物16i，合成方法同化合物17a，得17i为白色固体242mg，产率：81.9％，纯度：99.56％，熔点：214.7-215.8℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.17(t,J＝4.9Hz,1H),6.12(s,1H),4.39(s,2H),3.90–3.73(m,2H),2.33(s,3H),2.10(t,J＝7.4Hz,2H),1.53(ddt,J＝7.4,14.6,29.6Hz,4H),1.41–1.15(m,6H),0.92(t,J＝7.3Hz,3H),0.85(t,J＝7.0Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ13.9,14.3,19.8,20.0,22.3,25.3,31.4,32.6,34.1,35.4,47.8,113.4,128.7,145.8,146.6,169.9,172.8.HRMS(ESI):calcd forC17H28N2O3[M+H]+＝309.2173,found[M+H]+＝309.2171.
实施例60:N-((1-丁基-3-羟基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺(17j)的制备
以中间体化合物16j，合成方法同化合物17a，得17j为白色固体233mg，产率：73.5％，纯度：99.80％，熔点：252.1-253.1℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.07(s,1H),8.10(d,J＝8.1Hz,2H),7.84(d,J＝8.3Hz,2H),6.15(s,1H),4.68(d,J＝4.7Hz,2H),4.04–3.72(m,2H),2.35(s,3H),1.59(p,J＝8.6Hz,2H),1.29(h,J＝7.4Hz,2H),0.83(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ13.8,19.8,32.6,35.3,48.1,113.4,123.0,125.6(q,3JC-F＝3.6Hz),125.7,128.0,128.9,131.6(q,2JC-F＝32.2Hz),138.0,145.9,146.9,165.7,169.9.HRMS(ESI):calcd for C19H21F3N2O3[M+H]+＝383.1577,found[M+H]+＝383.1571.
实施例61:N-((1-丁基-3-羟基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-甲氧基苯甲酰胺(17k)的制备
以中间体化合物16k，合成方法同化合物17a，得17k为白色固体240mg，产率：76.8％，纯度：96.01％，熔点：254.6-253.8℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.66(t,J＝4.5Hz,1H),7.90(d,J＝8.8Hz,2H),6.97(d,J＝8.8Hz,2H),6.14(s,1H),4.64(d,J＝4.7Hz,2H),3.97–3.85(m,2H),3.80(s,3H),2.34(s,3H),1.57(p,J＝8.3,8.8Hz,2H),1.28(dt,J＝7.4,14.8Hz,2H),0.81(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ13.8,19.8,20.0,32.6,35.0,48.0,55.8,113.4,113.8,126.4,128.5,129.8,145.8,146.8,162.1,166.2,169.9.HRMS(ESI):calcd for C19H24N2O4[M+H]+＝345.1809,found[M+H]+＝345.1805.
实施例62:N-((1-丁基-3-羟基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-3-甲氧基苯甲酰胺(17l)的制备
以中间体化合物16l，合成方法同化合物17a，得17l为白色固体257mg，产率：84.8％，纯度：98.27％，熔点：213.0-214.3℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.84(t,J＝4.7Hz,1H),7.53–7.45(m,2H),7.36(t,J＝7.9Hz,1H),7.09(dd,J＝2.9,7.8Hz,1H),6.14(s,1H),4.65(d,J＝4.8Hz,2H),3.96–3.83(m,2H),3.79(s,3H),2.34(s,3H),1.65–1.47(m,2H),1.28(h,J＝7.4Hz,2H),0.82(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ13.8,19.8,20.0,32.6,35.2,48.1,55.8,112.9,113.4,117.8,120.3,128.3,129.8,135.6,145.8,146.8,159.6,166.5,169.9.HRMS(ESI):calcd for C19H24N2O4[M+H]+＝345.1809,found[M+H]+＝345.1805.
实施例63:N-((1-丁基-3-羟基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-2-甲氧基苯甲酰胺(17m)的制备
以中间体化合物16m，合成方法同化合物17a，得17m为白色固体257mg，产率：84.8％，纯度：98.03％，熔点：185.6-187.4℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68(s,1H),7.82(dd,J＝1.8,7.7Hz,1H),7.52–7.45(m,1H),7.13(d,J＝8.2Hz,1H),7.04(t,J＝7.8Hz,1H),6.14(s,1H),4.66(d,J＝5.6Hz,2H),4.14–3.99(m,2H),3.88(s,3H),2.34(s,3H),1.61(p,J＝8.5Hz,2H),1.37(h,J＝7.3Hz,2H),0.92(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ13.9,19.8,20.1,32.5,35.0,48.1,56.5,112.6,113.9,121.1,122.4,129.6,131.0,133.1,145.5,146.7,157.5,165.2,169.8.HRMS(ESI):calcd for C19H24N2O4[M+H]+＝345.1809,found[M+H]+＝345.1805.
实施例64:N-((1-丁基-3-羟基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-2-(4-氟苯基)乙酰胺(17n)的制备
以中间体化合物16n，合成方法同化合物17a，得17n为白色固体285mg，产率：84.8％，纯度：99.03％，熔点：191.7-192.7℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.50(s,1H),7.34–7.24(m,2H),7.17–7.07(m,2H),6.13(s,1H),4.39(s,2H),3.94–3.73(m,2H),3.45(s,2H),2.33(s,3H),1.53(p,J＝7.6,8.1Hz,2H),1.26(h,J＝7.4Hz,2H),0.86(t,J＝7.3Hz,3H).13CNMR(100MHz,DMSO-d6)δ13.8,19.7,20.0,32.5,34.4,41.4,47.8,113.5,115.2(d,2JC-F＝21.2Hz),128.6,131.3(d,3JC-F＝8.1Hz),132.8(d,4JC-F＝3.0Hz),145.8,146.7,160.3(d,1JC-F＝242.9Hz),169.9,170.6.HRMS(ESI):calcd for C19H23FN2O3[M+H]+＝347.1765,found[M+H]+＝347.1762.
实施例65:N-((3-羟基-6-甲基-4-氧代-1-戊基-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-甲氧基苯甲酰胺(17o)的制备
以中间体化合物16o，合成方法同化合物17a，得17o为白色固体183mg，产率：72.9％，纯度：95.26％，熔点：182.3-183.6℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.67(s,1H),7.90(d,J＝8.8Hz,2H),6.97(d,J＝8.8Hz,2H),6.14(s,1H),4.64(d,J＝4.6Hz,2H),3.80(s,3H),2.34(s,3H),1.58(s,2H),1.21(s,4H),0.78(t,J＝6.8Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ14.3,20.0,22.1,28.7,30.4,35.0,48.2,55.8,113.4,113.8,126.4,128.5,129.8,145.8,146.8,162.1,166.2,169.9.HRMS(ESI):calcd for C20H26N2O4[M+H]+＝359.1965,found[M+H]+＝359.1955.
实施例66:N-((1-乙基-3-羟基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-甲氧基苯磺酰胺(17p)的制备
以中间体化合物16p，合成方法同化合物17a，得17p为白色固体131mg，产率：77.6％，纯度：99.87％，熔点：222.1-223.1℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.80(d,J＝8.8Hz,2H),7.15(d,J＝8.8Hz,2H),6.10(s,1H),4.05(s,4H),3.86(s,3H),2.33(s,3H),1.21(t,J＝6.5Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ15.7,19.8,38.0,42.7,56.1,113.5,114.9,126.3,129.4,131.6,146.0,146.6,162.8,169.8.HRMS(ESI):calcd for C16H20N2O5S[M+H]+＝353.1166,found[M+H]+＝353.1162.
实施例67:N-((3-羟基-6-甲基-4-氧代-1-丙基-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-甲氧基苯磺酰胺(17q)的制备
以中间体化合物16q，合成方法同化合物17a，得17q为白色固体173mg，产率：78.6％，纯度：95.17％，熔点：184.4-185.9℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.80(d,J＝8.9Hz,2H),7.15(d,J＝8.9Hz,2H),6.09(s,1H),4.02(s,2H),3.95–3.88(m,2H),3.86(s,3H),2.32(s,3H),1.61(dq,J＝7.2,14.9Hz,2H),0.88(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ11.0,19.9,23.7,38.1,49.0,56.1,113.4,114.9,126.3,129.4,131.6,146.2,146.6,162.8,169.8.HRMS(ESI):calcd for C17H22N2O5S[M+H]+＝367.1322,found[M+H]+＝367.1320.
实施例68:N-((1-丁基-3-羟基-6-甲基-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-基)甲基)-4-甲氧基苯磺酰胺(17r)的制备
以中间体化合物16r，合成方法同化合物17a，得17r为白色固体225mg，产率：73.8％，纯度：96.59％，熔点：167.3-168.9℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.80(d,J＝8.8Hz,2H),7.15(d,J＝8.9Hz,2H),6.09(s,1H),4.02(s,2H),3.98–3.90(m,2H),3.86(s,3H),2.32(s,3H),1.56(p,J＝8.6Hz,2H),1.28(dt,J＝9.1,18.1Hz,2H),0.91(t,J＝7.3Hz,3H).13CNMR(100MHz,DMSO-d6)δ13.9,19.7,19.9,32.4,38.1,47.5,56.1,113.4,114.9,126.3,129.4,131.6,146.1,146.6,162.8,169.8.HRMS(ESI):calcd for C18H24N2O5S[M+H]+＝381.1479,found[M+H]+＝381.1474.
实施例69:化合物的抗生物膜活性测定
实验方法：先用细胞级的DMSO配制化合物母液(100mM)，再用ABTGC培养基((B培养基(0.1％MgCl2,0.1％CaCl2,0.1％FeCl3)中添加10％A10,0.2％葡萄糖，0.2％BD酪蛋白氨基酸))将待测母液化合物稀释到一定浓度备用；取过夜培养的细菌，并测定过夜细菌的OD600，将细菌稀释OD600为0.05后加入到96孔板中，设置加药组、Blank组(只加培养基)、Control组(只加细菌以及阳性对照组)，96孔板周边用200μL的液体培养基封边以防挥发导致的边缘效应，每组数据设置6个复孔；种好的细菌板，采用保鲜膜的方式将96孔板包好，防止培养液挥发，放置于37℃培养箱中静置培养24小时；取出96孔板，每孔用移液枪将菌液吸出；每孔用150μL的PBS清洗洗涤3次，再晾干；晾干后的96孔板，每孔加入150μL甲醇室温固定30min；吸走甲醇，晾干，每孔加入150μL的0.1％结晶紫染色15min；吸出结晶紫，用200μL的PBS缓冲溶液洗涤，直至没有紫色为止；晾干后，每孔加入150μL 33％冰醋酸溶解结晶紫，并放置于微量摇床上震荡摇匀后测OD570；利用Spss数据分析软件对数据进行分析，并计算其抗生物膜活性。实验结果：抗生物膜活性结果见表1。
表1实施例制备的羟基吡啶酮衍生物和阳性对照阿奇霉素的抗生物膜抑制活性
从表1中发现了10个具有生物膜抑制活性的15b,17e,17f,17i,17j,17k,17l,17m,17o,17r衍生物，其中17k呈现最优的生物膜抑制活性(IC50＝4.53μM)，且抗生物膜活性优于阳性对照阿奇霉素。
实施例70:细菌最小抑菌浓度(MIC)实验检测
实验方法：首先用细胞级的DMSO配制化合物母液(100mM)，再用ABTGC培养基(B培养基(0.1％MgCl2,0.1％CaCl2,0.1％FeCl3)中添加10％A10,0.2％葡萄糖，0.2％BD酪蛋白氨基酸.)将待测母液化合物稀释到一定浓度备用；取过夜培养的细菌，并测定过夜细菌的OD600，将细菌稀释OD600为0.05后加入到96孔板中，设置加药组、Blank组(只加培养基)、Control组(只加细菌以及阳性对照组)，每组数据设置6个复孔，放置于37℃培养箱中静置培养24小时，将96孔板从培养箱中取出，用酶标仪测定每孔细菌的OD600，检测化合物的杀菌能力。
实验结果：为了进一步探讨该系列衍生物与抗生素联用是否具有协同作用，我们首先检测了该系列衍生物的MIC，具体如表1所示，从表1中发现该系列衍生物的MIC均>512μM，验证了该系列衍生物在低于512μM时没有杀菌能力。
实施例71:抗生素联用MIC检测
实验方法：首先以细胞级的DMSO配制化合物母液(100mM)，再用ABTGC培养基(B培养基(0.1％MgCl2,0.1％CaCl2,0.1％FeCl3)中添加10％A10,0.2％葡萄糖，0.2％BD酪蛋白氨基酸.)将待测母液化合物稀释到40μM备用；取过夜培养的细菌，并测定过夜细菌的OD600，将细菌稀释OD600为0.05后加入到96孔板中，其中含药物的细菌培养液为100μL(浓度为40μM)，已经稀释的细菌100μL，同时设置Blank组(只加培养基)、Control组(只加细菌)以及实验组(不同的抗生素浓度)，每组数据设置6个复孔，放置于37℃培养箱中静置培养24小时；将96孔板从培养箱中取出，用酶标仪测定每孔细菌的OD600，检测化合物的杀菌能力。
实验结果：为了进一步验证该系列衍生物与抗生素联用可以提升抗生素的敏感性，我们以生物膜抑制活性最优的10个化合物15b,17e,17f,17i,17j,17k,17l,17m,17o,17r与临床治疗铜绿假单胞菌常用抗生素以及铜绿假单胞菌标准模式菌株PAO1(ATCC15692)、暨南大学附属医院临床分离的铜绿假单胞菌耐药菌株(1121，1167，FB，1129)(铜绿假单胞菌1121、铜绿假单胞菌1167、铜绿假单胞菌FB、铜绿假单胞菌1129均在文献“Liu J,Hou J S,Li Y B,et al.Novel 2-Substituted3-Hydroxy-1,6-dimethylpyridin-4(1H)-ones as Dual-Acting Biofilm Inhibitors of Pseudomonas aeruginosa[J].Journalof Medicinal Chemistry,2020,(63)：10921-10945.”中公开)联用，所有实验结果如表2所示，该系列衍生物15b,17e,17f,17i,17j,17k,17l,17m,17o,17r在浓度为20μM与临床常用的铜绿假单胞感染类抗菌剂喹诺酮类抗生素(环丙沙星)、氨基糖苷类抗生素(妥布霉素)和粘菌素等联合用药，增强抗生素对于耐药菌的敏感性，提升了抗生素对不同临床耐药菌株的抗菌能力。
表2实施例制备的羟基吡啶酮衍生物15b,17e,17f,17i,17j,17k,17l,17m,17o,17r(20μM)与抗生素环丙沙星、妥布霉素和粘菌素联用的MIC
/：仅加抗生素的对照
实施例72:斑马鱼细菌感染模型检测
实验方法：
美蓝液(1g/mL)：称取10.0g，溶解于10mL斑马鱼饲养净水系统水；斑马鱼胚胎培养水(egg water)：斑马鱼饲养净水系统水100mL添加1mL美蓝液(1g/mL)混合，配制斑马鱼胚胎培养水(egg water)；苯基硫脲(PTU)(3％)：称取0.30g，溶解于10mL斑马鱼饲养净水系统水。使用浓度为0.003％，用斑马鱼胚胎培养水稀释；三卡因(10mg/mL)：称取1.0g，溶解于10mL斑马鱼饲养净水系统水。使用浓度为0.1mg/mL，用斑马鱼胚胎培养水稀释。使用AB野生型斑马鱼进行实验，并在水温为28℃条件下斑马鱼培养。细菌培养物在37℃振荡(200rpm)下生长24小时。铜绿假单胞菌培养物生长到OD600＝1.2后，将细菌稀释至接种密度为OD600＝0.1，加入不同浓度的苗头化合物17k(10μM和20μM)与细菌培养物在37℃振荡(200rpm)生长24小时。第二天，细菌以3000rpm的速度离心10分钟，并以所需的浓度重新悬浮在鱼水中。将3天龄(dpf)的胚胎斑马鱼，首先浸泡在含40μg/mL三卡因的PTU胚胎培养液中。5min后胚胎鱼进入麻醉状态。此时将鱼移至载玻片上摆好，用无菌锋利的手术刀片在鱼尾部切断鱼尾。断尾的幼鱼迅速放回无三卡因的PTU胚胎液中清洗3次(目的是除去麻醉残液)并继续在PTU胚胎液中培养。将20个受伤胚胎立即浸入含有细菌悬浮液(鱼水作为对照)的培养皿中，然后将其分配到6孔板(Corning/Costar，NY，美国)中。记录不同培养时间的生存率并在LEICA荧光显微镜下观察并拍照。
实验结果：化合物17k对斑马鱼细菌感染模型实验结果如图1所示，化合物17k在浓度为20μM时有效提升了斑马鱼的存活率，进一步验证了17k具有进一步成药性的优势。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一类羟基吡啶酮衍生物，其特征在于具有如下所示的化学结构：
2.一种根据权利要求1所述的羟基吡啶酮衍生物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
(2.1)将曲酸置于氯化亚砜中在室温下反应，粗产物继续与锌粉、37％HCl进行反应，得到的反应液纯化即得化合物7；
(2.2)将化合物7与甲醛在碱性条件下反应，将所得反应液纯化即得化合物8；其中碱性是指在NaOH存在条件下；
(2.3)将化合物8与氯化苄、氢氧化钠水溶液在溶剂中进行反应，反应结束后得到的反应液经纯化即得化合物9；
(2.4)将化合物9与3,4-二氢吡喃和对甲苯磺酸反应得到中间体，之后与甲胺一水合物置于溶剂中反应，纯化后得化合物10a；步骤(2.4)中所述的化合物9、3,4-二氢吡喃和对甲苯磺酸反应是指在干燥的DCM中室温反应；所述的之后与甲胺一水合物置于溶剂中反应是指在乙醇中75℃反应，再与2M HCl反应，得到化合物10a；
(2.5)将化合物10a、三苯基膦、偶氮二甲酸二乙酯及邻苯二甲酰亚胺置于溶剂中反应，得到化合物11a；
(2.6)化合物11a与水合肼在溶剂中加热回流反应，得到化合物12a；
(2.7)将化合物12a与氯乙酰氯、三乙胺在溶剂中反应，得化合物13；
(2.8)将化合物13与三氯化硼置于溶剂DCM中反应，得化合物14；
(2.9)将化合物14与以及氢氧化钾在溶剂中反应，得到化合物15b，其中对应的为5-硝基-2-巯基苯并咪唑；
此时的合成路线为：
(3.1)将化合物9与3,4-二氢吡喃和对甲苯磺酸反应得到中间体，之后与R1NH2·H2O置于溶剂中反应，纯化后得化合物10c-10e；R1为丙基、丁基、戊基的一种；步骤(3.1)中所述的化合物9与3,4-二氢吡喃和对甲苯磺酸反应是指在干燥的DCM中室温反应；所述的之后与R1NH2·H2O在溶剂中反应是指在乙醇中75℃反应，再与2M HCl反应，得到化合物10c-10e；
(3.2)将化合物10c-10e、三苯基膦、偶氮二甲酸二乙酯及邻苯二甲酰亚胺置于溶剂中反应，得到化合物11c-11e；
(3.3)化合物11c-11e与水合肼在溶剂中加热回流反应，得到化合物12c-12e；
(3.4)化合物12c-12e、酰氯R5COCl或磺酰氯R5SO2Cl、吡啶在无水DMF中反应，得到的反应液经纯化得化合物16e、16f、16i、16k、16l、16m、16o、16r，所述的酰氯R5COCl为己酰氯、对甲氧基苯甲酰氯、间甲氧基苯甲酰氯、邻甲氧基苯甲酰氯；所述的磺酰氯R5SO2Cl为对甲氧基苯磺酰氯；
(3.5)化合物16e、16f、16i、16k、16l、16m、16o、16r分别与Pd/C在溶剂中，氢气氛围下进行反应，所得的反应液经纯化后得到化合物17e、17f、17i、17k、17l、17m、17o、17r；
此时的合成路线为：
3.根据权利要求2所述的羟基吡啶酮衍生物的制备方法，其特征在于：
步骤(2.1)中所述的将曲酸置于氯化亚砜中在室温下反应是指在室温反应2h；所述的继续与锌粉、37％HCl进行反应是指在70-80℃反应5h；
步骤(2.2)中所述反应是指在室温反应过夜；
步骤(2.3)中所述的反应是指在溶剂中80℃回流反应过夜，得到化合物9；所述的溶剂为甲醇；
步骤(2.4)中所述的化合物9、3,4-二氢吡喃和对甲苯磺酸反应是指在干燥的DCM中室温反应3h；所述的之后与甲胺一水合物置于溶剂中反应是指在乙醇中75℃反应12h，再与2MHCl在乙醇中回流反应4h，得到化合物10a；
步骤(2.5)中所述的反应是指在无水四氢呋喃0℃投料后，室温反应24h，得化合物11a；
步骤(2.6)中所述的反应是指在溶剂乙醇中78℃回流反应3-4h，得到化合物12a；
步骤(2.7)中所述的反应是指在溶剂中室温反应3h，得到化合物13；所述的溶剂为无水DMF；
步骤(2.8)中所述的反应是指在溶剂中室温反应3h，得到化合物14；所述的溶剂为无水DCM；
步骤(2.9)中所述的反应是指在溶剂中55℃反应过夜，得到化合物15b；所述的溶剂为甲醇。
4.根据权利要求2所述的羟基吡啶酮衍生物的制备方法，其特征在于：
步骤(3.1)中所述的化合物9与3,4-二氢吡喃和对甲苯磺酸反应是指在干燥DCM中室温反应3h；所述的之后与R1NH2·H2O在溶剂中反应是指在乙醇中75℃反应12h，再与2M HCl在乙醇中回流反应4h，得到产物10c-10e；
步骤(3.2)中所述的反应是指在溶剂无水四氢呋喃0℃投料后，室温反应24h，得化合物11c-11e；
步骤(3.3)中所述的反应是指在溶剂中78℃回流反应3-4h，得到化合物12c-12e；
步骤(3.4)中所述的反应是指在无水DMF中室温反应6h；
步骤(3.5)中所述的反应是指在溶剂甲醇中，氢气氛围下，室温反应12h。
5.根据权利要求1所述的羟基吡啶酮衍生物在制备铜绿假单胞菌抑制剂的增敏剂中的应用。
6.根据权利要求5所述的羟基吡啶酮衍生物在制备铜绿假单胞菌抑制剂的增敏剂中的应用，其特征在于：
所述的铜绿假单胞菌抑制剂为喹诺酮类抗生素、氨基糖苷类抗生素和粘菌素中的至少一种。
7.根据权利要求5所述的羟基吡啶酮衍生物在制备铜绿假单胞菌抑制剂的增敏剂中的应用，其特征在于：
所述的铜绿假单胞菌抑制剂为环丙沙星、妥布霉素和粘菌素中的至少一种。
8.根据权利要求5所述的羟基吡啶酮衍生物在制备铜绿假单胞菌抑制剂的增敏剂中的应用，其特征在于：
所述的铜绿假单胞菌为铜绿假单胞菌PAO1。
9.根据权利要求5所述的羟基吡啶酮衍生物在制备铜绿假单胞菌抑制剂的增敏剂中的应用，其特征在于：
所述的羟基吡啶酮衍生物的浓度大于等于20μM。
10.根据权利要求5所述的羟基吡啶酮衍生物在制备铜绿假单胞菌抑制剂的增敏剂中的应用，其特征在于：
所述的羟基吡啶酮类化合物还可以为羟基吡啶酮类化合物的药用盐。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110901353.9A CN115703737B (zh) | 2021-08-06 | 2021-08-06 | 一类羟基吡啶酮类化合物及其作为克服细菌生物膜耐药的抗生素增敏剂的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110901353.9A CN115703737B (zh) | 2021-08-06 | 2021-08-06 | 一类羟基吡啶酮类化合物及其作为克服细菌生物膜耐药的抗生素增敏剂的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115703737A CN115703737A (zh) | 2023-02-17 |
| CN115703737B true CN115703737B (zh) | 2024-09-24 |
Family
ID=85179025
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110901353.9A Active CN115703737B (zh) | 2021-08-06 | 2021-08-06 | 一类羟基吡啶酮类化合物及其作为克服细菌生物膜耐药的抗生素增敏剂的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115703737B (zh) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108191746A (zh) * | 2018-02-02 | 2018-06-22 | 暨南大学 | 一种新型羟基吡啶酮类化合物及其制备方法与应用 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3177593A1 (en) * | 2014-08-06 | 2017-06-14 | Novartis AG | Quinolone derivatives as antibacterials |
| CN104327020B (zh) * | 2014-10-15 | 2016-10-05 | 暨南大学 | 用于抗感染的呋喃酮类衍生物及其制备方法和用途 |
| CN106467541B (zh) * | 2015-08-18 | 2019-04-05 | 暨南大学 | 取代喹诺酮类衍生物或其药学上可接受的盐或立体异构体及其药用组合物和应用 |
| CN107089978A (zh) * | 2016-02-17 | 2017-08-25 | 复旦大学 | 噻唑烷酮衍生物及其制备方法和用途 |
| CN109912532B (zh) * | 2019-03-05 | 2020-09-04 | 暨南大学 | 苯并噻唑类化合物及其在制备细菌生物膜抑制剂中的应用 |
-
2021
- 2021-08-06 CN CN202110901353.9A patent/CN115703737B/zh active Active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108191746A (zh) * | 2018-02-02 | 2018-06-22 | 暨南大学 | 一种新型羟基吡啶酮类化合物及其制备方法与应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Jun Liu et al..Novel 2‑Substituted 3‑Hydroxy-1,6-dimethylpyridin-4(1H)‑ones as Dual-Acting Biofilm Inhibitors of Pseudomonas aeruginosa.《J. Med. Chem.》.2020,第63卷第10921-10945页. * |
| 铜绿假单胞菌的群体感应系统及其抑制剂研究进展;高雅婷等;《中国抗生素杂志》;20181130;第43卷(第11期);第1338-1343页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115703737A (zh) | 2023-02-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| WO2007142323A1 (ja) | 側鎖にスピロ環構造を有する新規インダゾール誘導体 | |
| CA2395846C (en) | Diazepan derivatives or salts thereof | |
| CN101851211B (zh) | 一种哌嗪酰胺类化合物 | |
| JP5204232B2 (ja) | Ｆｘｒアゴニストとして使用されるベンゾイミダゾール誘導体 | |
| JP2014525443A (ja) | キヌレニン−３−モノオキシゲナーゼインヒビター、医薬組成物、およびこれらの使用方法 | |
| CN113845476B (zh) | 一种喹诺酮衍生物及其制备方法和用途 | |
| CN107459476B (zh) | 反吲哚啉环丙胺类化合物及其制备方法、药物组合物和用途 | |
| WO2023143386A1 (zh) | 作为钾通道调节剂的芳环并杂环类化合物及其制备和应用 | |
| WO2021114314A1 (en) | Novel heterocyclic derivatives with cardiomyocyte proliferation activity for treatment of heart diseases | |
| WO2024188107A1 (zh) | 含噻唑结构的吲哚啉类化合物及其制备方法和应用 | |
| DE4342024A1 (de) | Kombinationspräparate, enthaltend ein Chinoxalin und ein Nukleosid | |
| WO2007036131A1 (en) | Carzole sulphamide derivatives and their preparation method | |
| CN115703737B (zh) | 一类羟基吡啶酮类化合物及其作为克服细菌生物膜耐药的抗生素增敏剂的应用 | |
| CN104592114B (zh) | 取代喹啉类组蛋白去乙酰化酶抑制剂及制备方法和应用 | |
| JP2000508299A (ja) | 抗ウイルス作用を有する置換キノリン誘導体 | |
| CN115707698A (zh) | 5,7-二氯-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酰胺类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN107531598B (zh) | 用于治疗纤维化和纤维化相关病症的组合物 | |
| JPH0673012A (ja) | ４−イミノキノリン、その製法およびその使用 | |
| CN105820163B (zh) | 取代的1,3-杂唑类化合物、其制备方法、包含其的药物组合物及用途 | |
| CN102391260B (zh) | 3-甲酮-6-取代-苯并呋喃类化合物及其制备方法和用途 | |
| CN101429183A (zh) | 具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的2H-1-苯并吡喃-2-酮类化合物及其组合物与制备方法 | |
| CN112679409B (zh) | 一种4-吲哚-取代硫半脲衍生物及其制备方法和应用 | |
| CN114478403A (zh) | 一种含芳香胍基类化合物及其制备方法与应用 | |
| CN114502161B (zh) | 具有心肌细胞增殖活性的杂环衍生物在治疗心脏病中的用途 | |
| CN108715589A (zh) | 一种用作caspase-3激活剂的香豆素类衍生物及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |