CN103977187A - 一种治疗阳证疮疡的中药贴片的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗阳证疮疡的中药贴片的制备方法，包括药材的前处理，药材与凡士林、香油的混合等步骤，本发明制备的中药贴片疗效显著且低毒安全。

Description

一种治疗阳证疮疡的中药贴片的制备方法

技术领域

本发明涉及一种治疗阳证疮疡的中药贴片，属中医药技术领域。 

背景技术

中医论治疮疡有阴阳之别，阳证疮疡“属六腑毒胜于外，其发暴而所患浮浅”，常因火热毒邪而发，导致局部营卫不和，经络阻塞，气血凝滞，多以局部红肿热痛为主症。目前，临床上治疗一般采用内服外敷的方法，其副作用较大，且疗效欠理想。 

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种治疗阳证疮疡的中药贴片，其为外用制剂，疗效确切且低毒安全。 

本发明的技术方案如下：一种治疗阳证疮疡的中药贴片，其特征在于，包括质量比为3：9：12的凡士林、香油、药粉；所述药粉由以下重量的药材制备而成：生芙蓉叶800-1200g、连翘800-1200g、生大黄800-1200g、生南星800-1200g、白芷800-1200g、升麻800-1200g、冰片40-60g。 

制备方法如下： 

（1）药物的前处理：处方药物均应为《中国药典》一部相应饮片下的处理方法处理，备用。

（2）生芙蓉叶、连翘、生大黄、生南星、白芷、升麻粉碎过6号筛，备用。 

（3）将冰片加于香油中使其溶解，再加入上述药粉、凡士林及1%～6%的氮酮，充分混合制成棕褐色软膏，备用。 

（4）将软膏摊涂于贴片上，即制备成治疗阳证疮疡的中药贴片。（可根据创面的大小，摊涂成不同的剂量，生药粉含量分别为：1.5g，3g， 6g。） 

本发明中，贴片：山东圣纳医用制品有限公司，鲁食药监械（准）字2006第2640132。

本发明提供的中药贴片制剂是针对阳证疮疡而发明的，其药物组成是生芙蓉叶、连翘、生大黄、生南星、白芷、升麻、冰片，具有清热解毒，凉血活血，散结止痛之功。 

方中生芙蓉叶辛平，凉血解毒，消肿止痛为君药，适用于痈疽肿毒，丹毒，烫伤，跌打损伤等症，可使初起者消肿止痛，或者脓聚毒出，为君药；连翘性苦微寒，清热解毒，消肿散结，有“疮家圣药”之称；生大黄苦寒气味重浊，具有清热解毒，活血祛瘀之效，外用可治疗痈疡肿毒、疔疮、烫伤等外科疮疡；生南星苦辛，辛而能散，决无有守之性，专主经络风痰，能散结消肿止痛，外可治疗瘰疠、痈肿、跃打损伤等；白芷性辛微温，功可祛风止痛，消肿排脓，共为臣药佐君清热解毒消肿；升麻，辛甘微寒取其辛散之性，使雍聚于皮肤的毒邪从皮而解；冰片辛苦，微寒，功能开窍醒神，清热止痛，二者为使药能够引毒透皮而解。 

生芙蓉叶含延胡索酸及芦丁即芸香甙。经预试叶含黄酮甙、酚类、氨基酸、鞣质、还原糖等。现代药理研究表明具有抗炎作用，另外，芙蓉叶水煎剂对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌有较强的抑制作用。 

连翘对多种革兰阳性及阴性细菌均有抑制作用，其浓缩煎剂在体外可抑制伤寒杆菌、副伤寒杆菌、大肠杆菌、痢疾杆菌、白喉杆菌及霍乱弧菌、葡萄球菌、链球菌等。连翘在体外的抑菌作用与金银花大体相似；为银翘散中抗菌的主要成分。研究表明，连翘具有显著的抗炎作用，50%的连翘醇提取物水溶液 20ml/kg 腹腔注射，对大鼠巴豆油性肉芽囊有非常明显的抗渗出作用及降低炎灶微血管壁脆性作用．连翘能促进炎性屏障的形成，300%的连翘注射液30～40g/kg腹腔注射，对大鼠蛋清性脚肿有明显抑制作用；亦能促进对小鼠炎细胞的吞噬作用。 

生大黄含有蒽类衍生物、苷类化合物、鞣质类、有机酸类、挥发油类等。治疗外科疮疡其药理研究表明主要作用表现在抗病原微生物作用，其抗菌有效成分为大黄酸、大黄素、芦荟大黄素等，主要影响叶酸的酶系统；抑制细菌核酸和蛋白质合成；抑制细菌生物氧化酶系统；诱生干扰素。另外还有抗炎、解热作用、抗衰老抗氧化作用。 

生南星苦、辛，温，散结消肿,是外用治疗疮疡肿毒的常用药；现代药理研究表明主要有： 

① 抗炎作用  对组织水肿、炎性渗出及毛细血管通透性增高均有抑制作用,并可通过提高垂体-肾上腺系统功能而间接发挥抗炎作用。

②镇静、镇痛,抗惊厥作用  天南星煎剂有明显的镇静、镇痛作用,并能明显延长戊巴比妥钠对小鼠催眠的作用;天南星的复方三生针镇静、镇痛作用明显,镇痛作用小于吗啡,但作用持久,并对戊巴比妥钠的催眠有协同作用。 

白芷现代药理研究表明白芷在体外对大肠杆菌、宋氏和弗氏痢疾杆菌、变形杆菌、伤寒和副伤寒杆菌、绿脓杆菌、霍乱弧菌、某些革兰阳性细菌及人型结核杆菌等有不同程度的抑制作用；白芷煎剂、醚提取物和水提取物8g（生药）/kg灌胃，对小鼠醋酸扭体反应的抑制率分别为69.6%，52.86%和40.53%；小鼠热板法试验也使痛哿明显提高，白芷煎剂4g（生药）/kg灌胃，对二甲苯所鼓小鼠耳部炎症也有明显抑制作用。 

升麻：现代药理研究表明主要有： 

①抗菌作用：升麻在试管内能抑制结核杆菌的生长。

②抗炎作用：北升麻对大鼠角叉等胶或右旋糖酐所致脚肿胀均有消炎作用，对乳酸或醋酸引起的肝门溃疡，有使其缩小面积的趋势。 

③具升高白细胞，抑制血小板的聚集及释放功能。 

冰片：龙脑冰片含右旋龙脑，又含葎草烯、β-榄香烯、石竹烯等倍半萜，以及齐墩果酸、麦珠子酸、积雪草酸、龙脑香醇、古柯二醇等三萜化合物。艾片含左旋龙脑；机制冰片为消旋混合龙脑。药理作用：冰片中的主要成分龙脑、异龙脑均有耐缺氧的作用；龙脑、异龙脑有镇静作用；冰片局部应用对感觉神经有轻微刺激，有一定的止痛及温和的防腐作用；经肠系膜吸收迅速，给药5分钟即可通过血脑屏障，且在脑蓄积时间长，量也相当高，此为冰片的芳香开窍作用提供了初步试验依据；较高浓度（0．5％）对葡输球菌、链球菌、肺炎双球茵、大肠杆菌及部分致病性皮肤真菌等有抑制作用。 

本发明采用经皮给药，具有可绕过肝脏首过效应及胃肠道干扰，生物利用度高，较易维持稳定的血液浓度，能延长药物作用时间，减少用药频率，降低药物用量，而且给药方便，可随时终止给药等独特的优点。 

药理试验

（一）材料

1．动物

昆明种小白鼠体重16--22g，雌雄各半；

Wistar大白鼠体重120--180g，雌雄各半；

2.药物与试剂                   

本发明高、中、低浓度三种规格，分别为临床用药（临床每人每日用生药量为3.62g）的2倍，1倍，0.5倍，由山东中医药大学中药制剂试验室室提供。

扶他林（双氯芬酸二乙胺乳胶剂）,北京诺华制药有限公司, 国药准字H19990291。 

冰醋酸 济南试剂厂批号:2000731； 

二甲苯 济南化学试剂厂批号:2000527；

试剂：大鼠细胞因子试剂盒，购自上海西唐生物科技有限公司专业生产，批号：20081024。

（二）方法与结果

1.抗炎作用研究

1.1对二甲苯诱发小鼠耳肿胀的影响　

取18-22g雌雄性小鼠50只，随机分为5组，每组10只。设空白组，本发明高、中、低剂量组，扶他林组。试验当日各组小鼠双耳涂相应药物1次，面积3cm2/左右，30min后各组以蒸馏水棉球擦洗去药液，然后用干棉球擦净，给小鼠右耳涂二甲苯0.05ml/只致肿，左耳不涂作对照。2h后将小鼠断颈处死，用8mm直径打孔器在每只动物双耳相同部位打下圆耳片，置于电子分析天平上称重。以左右耳片重之差为肿胀度，以重量差值/左耳重量(%)为肿胀率，并求出肿胀抑制率。

表1  对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响（X±S） 

注：各组与空白组比较，采用t检验。

本发明的高、中、低剂量组，扶他林组与空白组比较有非常显著的差异。这说明本发明三个剂量组与扶他林组都具有抗二甲苯所致小鼠耳廓肿胀作用，其中本发明高剂量组为最佳。 

蛋清诱发大鼠足肿胀的影响　

取Wistar大白鼠50只，雌雄各半，按体重随机分为空白组，本发明高、中、低剂量组，扶他林组，每组10只。试验当日首先用自制容量测定装置测定各组大鼠右足正常体积(ml)，然后给各组大鼠右后足涂相应药物（药量0.5ml·10g-1），涂药后贴片覆盖30min后，于右后足皮下注射100%新鲜鸡蛋清0.lml/只，测定注射后3Omin、lh、2h、4h的右后足体积。致炎前后右后足体积的变化值与初始体积的比值为肿胀率。

表2 本发明对蛋清致炎大鼠足趾肿胀的影响（X±S） 

注：与空白组比较采用t检验 *P＜0.05  **P＜0.01

结果显示：本发明组于致炎后0.5～6h,均有明显的抗大鼠蛋清性足肿胀作用,分别与空白对照组比，P<0.01或P<0.05，见表2。

镇痛作用研究

2.1对热板刺激诱发小鼠疼痛的影响　

将♀小鼠分别置于55±0.5℃的热板上,以舔后足所需时间(s)为痛阈值。先挑选出2次平均痛阈值在5~30s内的小鼠50只,随机等分5组,然后于小鼠四足踝关节至足跖皮肤涂药物0.5ml·10g-1,涂药后贴片覆盖。末次涂药后0.5、1、1.5和2h,同法测定痛阈值(如60s仍无疼痛反应,取出小鼠,以免烫伤,其痛阈值按60s计)。

表3 本发明对雌性小鼠热板法致痛的影响（n=10 X±SD） 

注：与空白组比较，采用t检验，*P＜0.05  **P＜0.01

与扶他林组比较，采用t检验，△P＜0.05  △△P＜0.01

与给药前比较，采用t检验，##P＜0.01

结果显示：在所观察的时相点内,扶他林, 本发明能显著提高小鼠对热板致痛的痛阈值,与空白对照组比,P<0.01或P<0.05, 见表3。

对醋酸诱发小鼠疼痛的影响　

取小鼠50只，分5组，皮肤脱毛, 涂药物0.5ml·10g-1, 涂药后贴片覆盖涂药0.5h后, 0.6%醋酸0.2ml/只致痛。观察并记录20min内小鼠扭体反应的潜伏期和扭体反应次数。

表4 本发明对冰醋酸所致小鼠疼痛的影响（X±SD） 

注：与空白组比较，采用成组t检验，*P＜0.05  **P＜0.01；与扶他林组比较，采用成组t检验，△P＞0.05。

结果显示：扶他林, 本发明对小鼠醋酸性扭体反应的次数均明显的减少,潜伏期显著延长,与对照组比,P<0.01。 

肉芽肿炎性细胞因子的影响

阳证疮疡动物模型的建立：大鼠棉球肉芽试验法　100～150 Wistar大白鼠60只，随机分为5组，每组12只，给药前在无菌条件下于大鼠两侧腹股沟皮下分别植入25 mg消毒干棉球，造成炎性动物模型。造模后分5组（空白组，本发明高、中、低剂量组，扶他林组），每天涂药物0.5ml·10g-1, 涂药后贴片覆盖，第8天处死大鼠并剥离出肉芽组织分别观察8天后处死大鼠并称重，剥离出肉芽肿球，观察肉芽球的颜色，重量及病理切片变化并取出等量肉芽组织，组织匀浆，分离得血清，于-20℃保存待测。测试前将标本置室温复融，混匀后40℃, 3OOOrpm离心5min,取上清液供测试用。以放射免疫分析法检测各组细胞因子并记录其数值，剩余部分于60℃烘干至恒重，计算各鼠每百克体重之肉芽肿重量，作统计分析。

表5  肉芽球的颜色，重量及病理切片变化 

本发明高、中、低剂量组，扶他林组与空白组比较有非常显著的差异，P＜0.05，本发明三个剂量组与扶他林组都具有减轻肉芽肿组织反应作用。

表6 用药后大鼠肉芽组织细胞因子水平的变化（ng/mL，x±s） 

注：各组与空白组比较，采用t检验，P＜0.01。

本发明高、中、低剂量组，扶他林组与空白组比较有非常显著的差异，P＜0.05，说明本发明三个剂量组与扶他林组都具有减少肉芽肿促炎性细胞因子作用，其中本发明大剂量组为最佳，本发明三个剂量组与扶他林组具有增加肉芽肿抑制炎性细胞因子作用，其中本发明大剂量组为最佳。 

体外抑菌试验  

取已灭菌滤纸圆片,浸泡于本发明三种不同浓度提取液中,待干备用。培养基采用M-H琼脂和加入绵羊血5%琼脂,药物敏感试验采用K-B纸片扩散法。即将含有一定量本发明提取液的纸片,平贴于已接种被检菌的M-H琼脂平板上。纸片中的抗菌药物溶解于培养基内,并向四周扩散,抑制细菌生长从而出现抑菌环，观察抑菌环的大小。

表7 抑菌环的情况 

这说明本发明高、中、低剂量三组均有抑制细菌生长作用，高剂量组抑制明显，P＜0.05有统计学意义。

统计学方法

各项数据均以均值±标准差（±S）表示。计量资料采用t检验，计数资料X2采用检验， P＜0.05为差异有显著性。所有资料采用SPSS17.0统计软件处理。

  

毒理研究

（一）皮肤刺激性试验

取家兔8只，给药部位为背部皮肤，药前24h用手术剪刀剪毛后，以8%硫化钠脱毛，面积约7cm×10cm，随机将动物背部脱毛区分为完整皮肤对照区和完整皮肤给药区，每个区域面积为3.5cm×10cm，给药区贴敷受试药物、对照区贴敷基质，药物与皮肤接触24h后用清水轻轻洗去药膏及基质，观察皮肤反应情况，记录去除药物即刻、12h、24h、48h、72h皮肤反应情况，参照表8、表9标准，观察有无红斑、水肿、隆起、焦痂形成等，对每只动物的皮肤反应强度评分，观察药物对皮肤刺激情况。

表8 皮肤反应评分标准 

反应平均值=（红斑形成总分+水肿形成总分）/合计动物数

表9  皮肤刺激强度评价

反应平均值=（红斑形成总分+水肿形成总分）/合计动物数。

动物在去除受试药后即刻及72h内发现未发现皮肤有任何刺激性症状。动物精神状态、活动、呼吸、摄食量、体重、外观、大小便形状及颜色、背毛、肤色等皆未见异常，鼻、眼、口腔亦无异常分泌物。 

取家兔8只，药前24h用手术剪刀剪毛后，以8%硫化钠脱毛，面积约7.5cm×10cm，随机将动物背部脱毛区分为皮肤对照区、皮肤给药区2个区域，每个区域面积为3.5cm×10cm。给药区贴敷受试药物、对照区贴敷基质，每天一次，连续给药10天，停药后继续观察2天。每日密切观察皮肤反应情况，观察有无红斑、水肿、隆起、焦痂形成等，参照标准同急性刺激试验，对每只动物的皮肤反应强度进行评分，试验结果见表10。 

动物用药部位皮肤颜色正常，药后未出现发红，也未见任何其它刺激症状，所有动物精神状态、活动、呼吸、摄食量、体重、外观、大、小便形状及颜色、背毛、肤色等皆未见异常，鼻、眼、口腔亦无异常分泌物。 

表10连续给药对家兔皮肤刺激情况

结论：本发明对家兔完整皮肤无刺激性。

（二）皮肤过敏性试验

1.试验动物分组

第一组为基质组（阴性对照组），第二组为本发明组（药物组），第三组为2，4-二硝基氯苯组（阳性对照药）；豚鼠，雌雄各半，体重240—280g，每组6只，每只动物单笼饲养。

阳性对照药

2，4-二硝基氯苯：中国上海试剂一厂生产，批号：08-08-01,用吐温－80乳化后稀释成1%的致敏浓度和0.1%的激发浓度。

试验方法

给药前18h豚鼠用10%硫化钠在脊柱两侧脱毛，面积约3cm×3cm，第一组、第二组分别贴敷基质、本发明，第三组涂0.5ml1%2．4-二硝基氯苯，并用油纸覆后以双层纱布固定，使药物与皮肤充分接触。第2天后用温水将药膏或药液轻轻洗去，试验第7与第14天以同样方法重复给药，第28天用同样的方法激发给药，2．4-二硝基氯苯为0.1%的激发浓度。6h后将受试药物用清水洗去，并立即观察皮肤过敏反应情况，然后于24h、48h、72h再次观察皮肤过敏反应情况，观察有无红斑、水肿，动物站立情况、是否有哮喘、休克等，按照表11标准进行评价。

表11  致敏率分类标准 

4.试验结果

本发明在激发给药6h、24h、72h皆未见水肿、红斑等过敏性症状，2．4-二硝基氯苯有轻度和中度红斑，无水肿，并有动物出现哮喘、旋转等，致敏率为100%。试验结果（见表12）：

表12 对豚鼠皮肤过敏的影响

结论：本发明对豚鼠皮肤未见皮肤过敏反应。

（三）急性毒性试验

1.组成

本发明：生芙蓉叶、连翘、生大黄、生南星、白芷、生升麻、冰片

本发明基质组(以下简称基质组)：为不含任何药物的本发明基质组成，面积相同。

试验方法

给药前24h用8%硫化钠脱毛，面积约8cm×5cm，选用皮肤未损伤的豚鼠30只，体重280--320g，随机分成基质组、本发明组，共2组，每组10只，雌雄各半。分别在脱毛区贴基质、受试药，每次8cm×5cm，1次/天，并密切观察皮肤反应情况。次日，去除巴布膏，并用清水洗去附着物。所有动物单笼饲养，然后连续观察14天，每天观察豚鼠活动情况、摄食情况、呼吸、精神状态、体重、大、小便情况及背毛、肤色等。

试验结果

给药后所有动物均无异常发现，动物精神状态、活动、呼吸、摄食量、体重、外观、大、小便形状及颜色、被毛、肤色等皆未见异常，鼻、眼、口腔亦无异常分泌物，亦未见动物有死亡。大剂量组及小剂量组给药区部位个别动物皮肤颜色稍微发红，但未见水肿、红斑等刺激性反应，也未见色素沉积。动物体重变化和皮肤变化情况（见表13）。

表13 本发明对完整皮肤刺激的影响 

临床每人每日用生药量为3.62g。大剂量组本发明豚鼠用量（含生药量）为：1.504g生药/kg,给药量相当于临床60kg人每千克体重用量的25倍，说明本品低毒、安全。

结论：豚鼠完整皮肤，未出现明显的毒性反应，对完整皮肤未见明显的刺激性。该剂量约为临床给药量的25倍，说明本品低毒、安全。 

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明。 

实施例1

（1）药物的前处理：生芙蓉叶、连翘、生大黄、生南星、白芷、升麻、冰片，按《中国药典》一部相应饮片下的处理方法处理，备用；

（2）取生芙蓉叶1000g、连翘1000g、生大黄1000g、生南星1000g、白芷1000g、升麻1000g粉碎过6号筛，备用；

（3）将冰片50g加于香油中使其溶解，再加入上述药粉、凡士林及1%～6%的氮酮，充分混合制成棕褐色软膏，备用；所述凡士林、香油、药粉的质量比为3：9：12；

（4）将软膏摊涂于贴片上，即制备成治疗阳证疮疡的中药贴片。（可根据创面的大小，摊涂成不同的剂量，生药粉含量分别为：1.5g，3g， 6g。）

 实施例2

（1）药物的前处理：生芙蓉叶、连翘、生大黄、生南星、白芷、升麻、冰片，按《中国药典》一部相应饮片下的处理方法处理，备用；

（2）取生芙蓉叶800g、连翘1200g、生大黄800g、生南星1200g、白芷800g、升麻1200g粉碎过6号筛，备用；

（3）将冰片60g加于香油中使其溶解，再加入上述药粉、凡士林及1%～6%的氮酮，充分混合制成棕褐色软膏，备用；所述凡士林、香油、药粉的质量比为3：9：12；

（4）将软膏摊涂于贴片上，即制备成治疗阳证疮疡的中药贴片。（可根据创面的大小，摊涂成不同的剂量，生药粉含量分别为：1.5g，3g， 6g。） 

实施例3

（1）药物的前处理：生芙蓉叶、连翘、生大黄、生南星、白芷、升麻、冰片，按《中国药典》一部相应饮片下的处理方法处理，备用；

（2）取生芙蓉叶1200g、连翘800g、生大黄1200g、生南星800g、白芷1200g、升麻800g粉碎过6号筛，备用；

（3）将冰片40g加于香油中使其溶解，再加入上述药粉、凡士林及1%～6%的氮酮，充分混合制成棕褐色软膏，备用；所述凡士林、香油、药粉的质量比为3：9：12；

（4）将软膏摊涂于贴片上，即制备成治疗阳证疮疡的中药贴片。（可根据创面的大小，摊涂成不同的剂量，生药粉含量分别为：1.5g，3g， 6g）。

Claims (1)

1.一种治疗阳证疮疡的中药贴片的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）药物的前处理：生芙蓉叶、连翘、生大黄、生南星、白芷、升麻、冰片，按药典一部相应饮片下的处理方法处理，备用；

（2）取生芙蓉叶800-1200、连翘800-1200、生大黄800-1200、生南星800-1200、白芷800-1200、升麻800-1200粉碎过6号筛，备用；

（3）将冰片40-60份加于香油中使其溶解，再加入上述药粉、凡士林及1%～6%的氮酮，充分混合制成棕褐色软膏，备用；所述凡士林、香油、药粉的质量比为3：9：12；

（4）将软膏摊涂于贴片上，即得。