CN103976908B - 一种富含植物多肽的植物提取物组合物及其在化妆品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种富含植物多肽的复方植物提取物组合物及其在化妆品应用。所述的高含量的植物多肽分别为植物多肽生长因子和脱水素，复配以高山玫瑰杜鹃花提取物、朱槿花提取物、芍药花提取物、牡丹花提取物，能促进面部皮肤血液循环，活化衰老的表皮细胞，饱满面部肌肤，修复细纹，同时还可以缓解皮肤缺水，改善皮肤红肿症状，提亮肤色，润肤美容。所述复方植物提取物组合物包含0.1～5重量％的植物生长因子，0.1～5重量％的脱水素，0.1～3重量％的高山玫瑰杜鹃花提取物、0.1～5重量％芍药花提取物和0.1～5重量％牡丹花提取物。此植物提取物可进一步制备成水剂、乳剂、凝胶剂、膏霜等形态，用于抗衰修护系列产品的开发利用。
Description
技术领域
本发明属于中药药物制剂和植物护肤品领域。本发明公开了一种以富含植物多肽为特征的植物提取物、其配方组成及应用。所述的高含量的植物多肽分别为植物多肽生长因子和脱水素，复配以高山玫瑰杜鹃花提取物、朱槿花提取物、芍药花提取物、牡丹花提取物。此植物提取物可进一步制备成水剂、乳剂、凝胶剂、膏霜等形态，用于抗衰修护系列产品的开发利用。
背景技术
随着日化工艺的不断发展，天然化妆品因具有高效、安全、无刺激等特性备受青睐。市场需求日益增大。天然化妆品主要活性成分来源于植物提取物，随着研究的深入，人们发现在众多活性成分中植物多肽的作用举足轻重。
植物多肽生长因子PSK和脱水素在植物界广泛存在，前者为小分子五肽，主要分为PSK-α、PSK-β。具有很强的促进细胞分裂的生物活性，延缓细胞衰老，促进创伤组织修复。后者分子量为9～200KDa之间。具有很强的亲水性和热稳定性，同时也具有抗氧化作用和金属离子结合作用。植物多肽分子量小。能够快速地穿透皮肤，到达皮肤深处发挥作用。可以通过载体直接穿透皮肤而被吸收，在被吸收的过程中具有速度快、耗能低的特点；多肽被吸收后在促进细胞增殖的过程中，可以消除以氨基酸残基(FAA)形式吸收时氨基酸之间的相互竞争，从而促进蛋白质的快速合成。更为重要的是从植物中提取的蛋白成分，与人体细胞生长因子非常相似，肌肤往往会将多肽错误判断为人体自身细胞生长因子，从而自发地加快细胞的增殖，促进整个新陈代谢。另外，多肽成分均含有大量的亲水基团，为高保湿性的物质。本发明除以上所述两种植物多肽为主要活性成分外，还复配以高山玫瑰杜鹃花提取物、朱槿花提取物、芍药花提取物、牡丹花提取物等多种具有抗菌消炎、祛痘抗衰的植物提取物。使该组合物的抗衰、锁水和修复的功效得到进一步提升，作用效果更加全面。
发明内容
本发明公开了一种富含植物多肽的植物提取物组合物及其应用。具体涉及一种富含植物多肽为特征的复方植物提取物、其配方组成、及应用。所述的高含量的植物多肽分别为植物多肽生长因子和脱水素，复配以高山玫瑰杜鹃花提取物、朱槿花提取物、芍药花提取物、牡丹花提取物，能促进面部皮肤血液循环，活化衰老的表皮细胞，饱满面部肌肤，修复细纹，同时还可以缓解皮肤缺水，改善皮肤红肿症状，提亮肤色，润肤美容。此植物提取物可进一步制备成水剂、乳剂、凝胶剂、膏霜等形态，用于抗衰修护系列产品的开发利用。
本发明提供下述技术方案：
1.一种富含植物多肽的植物提取物组合物，其包含0.1～5重量％的植物生长因子，0.1～5重量％的脱水素，0.1～3重量％的高山玫瑰杜鹃花提取物、0.1～5重量％芍药花提取物和0.1～5重量％牡丹花提取物。
2.第1项所述的富含植物多肽的复方植物提取物组合物，其中所述的植物生长因子选自植物多肽生长因子PSK-α、PSK-β或硫化酪氨酸的糖肽PSY1。
3.第1项所述的富含植物多肽的复方植物提取物组合物，其中所述的脱水素来自于高山玫瑰杜鹃花提取物，其氨基酸序列为SEQIDNO：1。
4.第2项所述的富含植物多肽的复方植物提取物组合物，其中所述植物生长因子为PSK-α，含量为0.5重量％，脱水素含量为0.5重量％，高山玫瑰杜鹃花提取物含量为2重量％，芍药花提取物含量为2重量％，牡丹花提取物含量为2重量％。
5.第2项所述的富含植物多肽的复方植物提取物组合物，其中所述植物生长因子为PSK-α，含量为1重量％，脱水素含量为1重量％，高山玫瑰杜鹃花提取物含量为2重量％，芍药花提取物含量为2重量％，牡丹花提取物含量为2重量％。
6.第1项所述的富含植物生长因子的复方植物提取物组合物，其中所述的高山玫瑰杜鹃花提取物、芍药花提取物、牡丹花提取物均为各植物的花经超临界提取或水蒸气蒸馏而成的产物。
7.第1-6项中任一项所述的复方植物提取物组合物在制备抗衰修护系列化妆品的应用。
8.一种抗衰修护系列化妆品，其包含有效量的第1-6项任一项的复方植物提取物组合物。
在本发明的第一个方面，提供了一种富含植物多肽的植物提取物组合物，其包含0.1～5重量％的植物生长因子，0.1～5重量％的脱水素，0.1～3重量％的高山玫瑰杜鹃花提取物、0.1～5重量％芍药花提取物、和0.1～5重量％牡丹花提取物。
其中所述的植物生长因子选自植物多肽生长因子PSK-α、PSK-β、硫化酪氨酸的糖肽PSY1，优选PSK-α。
其中所述的PSK-α氨基酸序列为：Tyr(SO3H)-Ile-Tyr(SO3H)-Thr-Glu；
其中所述的PSK-β氨基酸序列为：Tyr(SO3H)-Ile-Tyr(SO3H)-Thr；
其中所述的PSY1氨基酸序列为：Asp-Tyr(SO3H)-Gly-Asp-Pro-Ser-Ala-Asn-Pro-Lys-His-Asp-Pro-Gly-Val-(L-Ara3-)Hyp-Hyp-Ser。
上述序列中Tyr(SO3H)表示磺基化酪氨酸；(L-Ara3-)Hyp表示左旋阿拉伯吡喃糖羟脯氨酸。这些植物多肽生长因子可以通过化学合成技术合成。
其中所述的脱水素来自于高山玫瑰杜鹃花提取物，其氨基酸序列为：MetSerHisTyrGlnAsnGlnGlnLysLysGlyLeuValGluLysIleLysGluLysIleProGlyValGlyHisLysGlnGlyHisThrThrSerThrThrAlaProGlyAsnTyrGlyGlyGlnHisHisHisGlnLysGluGlyLeuThrGluLysIleLysGluAsnIleProGlyValGlyHisGlnGlnGlyHisThrThrSerThrThrAlaProGlyAsnTyrGlyGlyGlnHisHisTyrGlnLysLysGlyValMetGluLysIleLysGluLysIleProGlyLeuHis(SEQIDNO：1)。
其中所述的高山玫瑰杜鹃花提取物、芍药花提取物、牡丹花提取物可采用目前可得的植物提取的各种提取方式获得，优选为各植物的花经超临界提取或水蒸气蒸馏而成的产物。
本发明所述的富含植物多肽的植物提取物组合可进一步制备成水剂、乳剂、膏霜和凝胶剂用于制备系列化妆品。
附图说明
从下面结合附图的详细描述中，本发明的上述特征和优点将更明显，其中：
图1：植物多肽生长因子PSK-α促进3T3细胞增殖实验。实验24h后，供试物组(B)与空白对照组(A)比，在100μg/mL的样品浓度作用下，细胞明显增多，增殖明显。
图2：植物多肽乳膏抗KM小鼠光老化实验。小鼠随机分为正常组、模型组、供试组和维生素c阳性药对照组，除正常组之外，对其余组的小鼠背部剃毛暴露的3×3cm面积的皮肤用300WOSRAM紫外线固化灯泡照射，光源距离小鼠背部的照射距离为35cm，每天一次，单次照射时间为5min，持续照射15d，形成小鼠光老化模型。在供试组小鼠背部皮肤上应用本发明实施例2制备的植物多肽凝胶(0.5g/kg体重)，阳性药对照组小鼠背部皮肤上涂抹维生素c乳膏(1g/kg体重)，正常组和模型组涂抹等量生理盐水，每天于照射后涂抹，每天1次。实验进行8周后，观察小鼠皮肤状况。(1)为正常组，没有皱纹或松弛，有正常皮肤纹理；(2)为模型组，皱纹严重，皮肤呈现严重衰老现象；(3)为供试组，皮肤存在少量浅皱纹，与模型组比较已经明显恢复；(4)为维生素c阳性对照组，与模型组比较皮肤恢复良好，局部皱纹不明显。
图3：植物多肽乳膏抗KM小鼠光老化实验。形成小鼠光老化模型，在供试组小鼠背部皮肤上应用本发明实施例2制备的植物多肽凝胶(0.5g/kg体重)，阳性药对照组小鼠背部皮肤上涂抹维生素c乳膏1g/kg体重，正常组和模型组涂抹等量生理盐水。每天于照射后涂抹，每天1次。涂抹进行8周后，小鼠皮肤病理切片经苏木精-伊红(HE)染色，在显微镜下观察(100×)。(1)为正常组，小鼠表皮组织结构完整，细胞分层清晰，皮肤厚度正常，具有明显的表皮突及真皮乳头，真皮层可见波浪状纤维组织，排列有序，分布均匀，疏密有致，细胞成分及数量适中；(2)为模型组，模型组小鼠的表皮组织变厚，结构不甚完整，分层不清，纤维组织因发生变性、破坏可见真皮组织排列紊乱，分布不均，或稀疏；(3)跟模型组比较，皮肤受损程度较轻，表皮组织结构完整，细胞分层清晰，皮肤厚度较薄，具有表皮突及真皮乳头；真皮层可见波浪状纤维组织，排列有序，分布均匀，疏密有致，细胞成分及数量适中；(4)为维生素c阳性对照组，比较接近正常组织。表皮组织结构完整，细胞分层清晰，皮肤厚度正常，具有明显的表皮突及真皮乳头；真皮层可见波浪状纤维组织，排列有序，分布均匀，疏密有致。
具体实施方式
下面参照具体的实施例进一步描述本发明，但是本领域技术人员应该理解，本发明并不限于这些具体的实施例。
本领域技术人员应该理解，如无特别说明，下述实施例中所用的试剂均为市售分析纯级别的试剂。
实施例1：植物多肽乳液制备
各成分按照重量百分比如下(重量％)：
按照处方量将霍霍巴油(购自英国禾大化工公司)、单硬酯酸甘油酯(购自英国禾大化工公司)、司盘80(购自英国禾大化工公司)，混合均匀，加热至75℃使其充分溶解，形成油相。将泊洛沙姆(购自巴斯夫股份公司)、丙二醇(购自英国禾大化工公司)、丙三醇(购自英国禾大化工公司)与适量蒸馏水混合均匀，加热至75℃使其充分溶解，形成水相。在75℃时将水相加入油相搅拌5～15min，使其混合均匀，待其冷却至室温时加入上表所示量的PSK-α、脱水素(两者均由北京赛百盛生物技术有限公司合成)、高山玫瑰杜鹃花提取物、芍药花提取物、牡丹花提取物、玫瑰香精(上述各种植物提取物和玫瑰香精均购自英国禾大化工公司)、尼泊金乙酯(购自上海嘉辰化工有限公司)以及溶胀完全的卡波姆(购自英国禾大化工公司)溶液，混合均匀后补充蒸馏水至全量即得。
实施例2：植物多肽外用凝胶的制备
各组分的重量百分比如下(重量％)：
将PSK-α、脱水素、高山玫瑰杜鹃花提取物、芍药花提取物和牡丹花提取物用少量蒸馏水溶解，按处方量加入卡波姆、甘油、乙二胺四乙酸二钠，搅拌溶解，加入三乙醇胺调节pH值到6-7，加入蒸馏水至全量，搅拌均匀，即得。
实施例3：植物多肽生长因子PSK-α促进3T3细胞增殖实验
将处于对数生长期的3T3细胞(3T3细胞购自武汉大学中国典型培养物保藏中心，目录号：GDC030)用含10％FBS(FBS购自杭州四季青生物工程材料有限公司)的DMEM培养基(DMEM培养基购自美国Gibco公司)常规培养至80％～90％汇合，用0.25％胰酶消化，以1×105个/mL的细胞数目接种于96孔板，培养24h后，换无血清DMEM培养基培养，24h后将培养基吸出后分别加入浓度为100、50、25、12.5、6.25μg/mL的植物多肽生长因子PSK-α(由北京赛百盛生物技术有限公司合成)，每个浓度设3个复孔，空白组为六个复孔。给药后放入培养箱继续培养24h，加入10μlMTT(噻唑蓝，0.5mg/ml)，培养箱中孵育4h后，吸出孔中溶液并加入150μlDMSO，振荡后于570nm波长下检测吸光度OD值。增殖率％＝(给药组OD值/空白对照组OD值-1)×100％。结果见表1。
表1.3T3细胞增殖率(％)(n＝3，)
表1的结果显示，本发明的植物多肽生长因子PSK-α具有促进3T3细胞增殖增殖的作用，且具有浓度依赖性。表明本发明的植物多肽生长因子PSK-α具有促进细胞增殖、代谢，抑制细胞老化的作用。
实施例4：植物多肽抗皮肤光老化实验
昆明小鼠(购自广东省医学实验动物中心，6周龄，体重20±0.2g)在自然光暗周期的条件下饲养，自由进水进食。随机分为正常组、模型组、供试组和维生素c阳性药对照组，实验开始时先用剃刀脱毛，暴露背部面积为3×3cm，隔天剃毛一次。除正常组之外其余组用300WOSRAM紫外线固化灯泡照射，光源距离小鼠背部的照射距离为35cm，每天一次，单次照射时间为5min，持续照射15d后各组每天于照射后分别进行涂抹给药，每天一次。供试组涂抹实施例2制备的植物多肽凝胶(0.5g/kg体重)，阳性药对照组涂抹维生素c乳膏(1g/kg体重)，正常组和模型组则涂抹等量生理盐水。给药周期为8周。8周后对小鼠进行以下操作。
1、皮肤观察：观察并拍摄小鼠皮肤情况，结果见图2。
2、病理切片制备和观察：给药8周后将小鼠处死，取小鼠皮肤组织标本1.0×1.0cm2，经过4％多聚甲醛固定后，苏木精-伊红(HE)染色。并在显微镜下观察。结果见图3。
3、皮肤组织胶原含量检测：取小鼠脱毛背部皮肤组织0.5g左右，经预冷生理盐水漂洗，除去皮下脂肪和其它结缔组织，滤纸拭干，称重，加入0.9％预冷的生理盐水作为匀浆介质，按皮肤组织重量∶介质容量＝1∶9(w/v)比例取介质溶媒。制成10％的匀浆留作检测I型胶原(COLI)，III型胶原(COLIII)含量。
表2皮肤组织生化指标(n＝8，)
*与模型组对比p＜0.05。
实验结果显示：图2的照片表明，(1)为正常组，没有皱纹或松弛，有正常皮肤纹理；(2)为模型组，皱纹严重，皮肤呈现严重衰老现象；(3)为供试组，皮肤存在少量浅皱纹，与模型组比较已经明显恢复；(4)为维生素c阳性对照组，与模型组比较皮肤恢复良好，局部皱纹不明显。经过长期紫外线照射小鼠皮肤弹性下降，与正常组其余各组比较皱纹明显增加，衰老加剧。但是经过供试组样品和阳性药作用后的皮肤具有显著改善。这能够证明供试组样品(即实施例2制备的植物多肽凝胶)具有祛皱抗衰的功能。
图3的显微镜下观察的小鼠皮肤组织切片结果表明，(1)为正常组，小鼠表皮组织结构完整，细胞分层清晰，皮肤厚度正常，具有明显的表皮突及真皮乳头，真皮层可见波浪状纤维组织，排列有序，分布均匀，疏密有致，细胞成分及数量适中；(2)为模型组，模型组小鼠的表皮组织变厚，结构不甚完整，分层不清，纤维组织因发生变性、破坏可见真皮组织排列紊乱，分布不均，或稀疏；(3)跟模型组比较，皮肤受损程度较轻，表皮组织结构完整，细胞分层清晰，皮肤厚度较薄，具有表皮突及真皮乳头；真皮层可见波浪状纤维组织，排列有序，分布均匀，疏密有致，细胞成分及数量适中；(4)为维生素c阳性对照组，比较接近正常组织。表皮组织结构完整，细胞分层清晰，皮肤厚度正常，具有明显的表皮突及真皮乳头；真皮层可见波浪状纤维组织，排列有序，分布均匀，疏密有致。这能够证明供试组样品(即实施例2制备的植物多肽凝胶)具有抑制由于紫外线照射所造成的皮肤皮肤表皮增厚以及真皮结构的完整，减缓皮肤的衰老速度。
表2的数据表明，与模型组相比，正常组、给药组与阳性对照组的I型胶原(COLI)、III型胶原(COLIII)的含量显著增加(p＜0.05)。实验结果表明：在紫外光照射过程中，皮肤中的I型及III型胶原含量逐渐减少，从而导致皮肤水分流失，皮肤弹性下降、松弛、皱纹产生等皮肤衰老情况出现。因此供试组样品具有抑制胶原流失的作用，从而减少皱纹的产生，增加皮肤弹性，延缓皮肤衰老。
应该理解，尽管参考其示例性的实施方案，已经对本发明进行具体地显示和描述，但是本领域的普通技术人员应该理解，在不背离由后附的权利要求所定义的本发明的精神和范围的条件下，可以在其中进行各种形式和细节的变化，可以进行各种实施方案的任意组合。
Claims (7)
1.一种富含植物多肽的植物提取物组合物，其包含0.1～5重量％的植物生长因子、0.1～5重量％的脱水素、0.1～3重量％的高山玫瑰杜鹃花提取物、0.1～5重量％芍药花提取物和0.1～5重量％牡丹花提取物，
其中所述植物生长因子选自植物多肽生长因子PSK-α或PSK-β。
2.根据权利要求1所述的富含植物多肽的植物提取物组合物，其中所述的脱水素的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示。
3.根据权利要求2所述的富含植物多肽的植物提取物组合物，其中所述植物生长因子为PSK-α，含量为0.5重量％，脱水素含量为0.5重量％，高山玫瑰杜鹃花提取物含量为2重量％，芍药花提取物含量为2重量％，牡丹花提取物含量为2重量％。
4.根据权利要求2所述的富含植物多肽的植物提取物组合物，其中所述植物生长因子为PSK-α，含量为1重量％，脱水素含量为1重量％，高山玫瑰杜鹃花提取物含量为2重量％，芍药花提取物含量为2重量％，牡丹花提取物含量为2重量％。
5.根据权利要求1所述的富含植物多肽的植物提取物组合物，其中所述的高山玫瑰杜鹃花提取物、芍药花提取物、牡丹花提取物均为各植物的花经超临界提取或水蒸气蒸馏而成的产物。
6.权利要求1-5中任一项所述的植物提取物组合物在制备抗衰修护系列化妆品中的应用。
7.一种抗衰修护系列化妆品，其包含有效量的权利要求1-5中任一项的植物提取物组合物。
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