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CN103889236A - 利用精油对耐药菌株作杀真菌和/或杀细菌处理的方法 - Google Patents

利用精油对耐药菌株作杀真菌和/或杀细菌处理的方法 Download PDF

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CN103889236A CN201180073931.9A CN201180073931A CN103889236A CN 103889236 A CN103889236 A CN 103889236A CN 201180073931 A CN201180073931 A CN 201180073931A CN 103889236 A CN103889236 A CN 103889236A
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Abstract

本发明涉及利用一种或多种精油对植物或粮食作杀真菌和/或杀细菌处理的方法，从而能够处理合成杀真菌剂和/或杀细菌剂的耐药菌株。

Description

利用精油对耐药菌株作杀真菌和/或杀细菌处理的方法
本发明涉及一种处理植物或粮食(foodstuff)，尤其是水果和/或蔬菜的方法。事实上，植物具有抵抗真菌和细菌侵袭的能力是非常重要的，而真菌和细菌的侵袭会降低所产植物或粮食的产量和质量，在极端的情况下，还会导致所感染植物的死亡。而当把水果和蔬菜投放到市场的时候，为了保证能够尽快销售，保持其口味并维持诱人的外观也是很重要的。然而，在收获水果和蔬菜之后，它们常储存较长的时间才投放到市场。很可能造成水果和蔬菜的外观和口味改变的情况主要是在收获之前和/或之后，真菌和细菌在其表面繁殖。而在水果和蔬菜的储存和处理中，当表皮出现微小的切口或划伤时，所造成的变劣和损坏甚至更快发生。
为了预防这些变劣和损坏，常用杀真菌剂和/或杀细菌剂处理水果和/或蔬菜。
然而，真菌和细菌对常用的合成杀真菌剂和/或杀细菌剂产生耐药性。
因此，已知几种真菌，例如青霉菌已经对如苯并咪唑类产生了耐药性。
对杀真菌剂/杀细菌剂耐药性的产生是一些菌株自然耐药或因例如DNA突变而变得耐药，然后又通过应用杀真菌剂/杀细菌剂而将这些菌株筛选出来。因此，随着耐药菌株的逐渐形成，使(耐药)群体变得更丰沛。
因此，需要寻找针对这些真菌和/或细菌耐药菌株的替代治疗方法。
精油的杀真菌和/或杀细菌活性已经为人所知。因此，本专利申请FR9815305描述了精油中所含各种萜类的杀真菌和/或杀细菌活性。
本发明意外地发现了，精油对耐受合成杀真菌剂和/或杀细菌剂的真菌和/或细菌菌株具有特定的活性。
因此，本发明涉及对一种或多种植物致病性真菌和/或细菌菌株作杀真菌和/或杀细菌处理的方法，且所述的菌株耐受一种或多种合成杀真菌剂和/或杀细菌剂，所述方法包括对所述菌株感染的植物或粮食施用含有一种或多种精油和/或其中所含的一种或多种萜类活性成分的组合物。
所述的植物和粮食尤其指的是幼小植物及其收获物，特别是收获之前和之后的水果和蔬菜。
术语“精油”指的是从植物-蔬菜的原材料获得、通常为气味芳香且具有复杂成分的任何产品，尤其是通过蒸气蒸馏、干馏或通过适当的非加热机械加工获得的。
精油大多通过不会导致组分显著变化的物理加工方法自水相分离。其制备可根据本领域技术人员已知的方法实施。
关于精油，人们会特别提起丁香油、肉桂油、百里香油、牛至油或薄荷油；关于这些精油中所含有的萜类活性成分，人们会提起丁子香酚、异丁香酚、肉桂醛、百里香酚、香芹酚和香芹酮。
在一特定的方面，所述的组合物含有百里香酚、香芹酚和丁子香酚的混合物。
应理解，所述的萜类活性成分可自精油分离或通过合成或半合成制备。
术语“耐药菌株”是指对杀真菌剂和/或杀细菌剂不大敏感或不敏感的真菌和/或细菌；例如，这些菌株在使用杀真菌剂和/或杀细菌剂后，仅能够破坏60%或更少的所述菌株。耐药性可以是自然形成的或由基因突变造成。
合成的杀真菌剂和/或杀细菌剂指的是并非衍生自天然产物(如植物)的药物；因此，该表述排除所述精油中含有的萜类活性成分。可产生耐药性的合成杀真菌剂和/或杀细菌剂如下所述：
杀真菌剂的例子有，苯并咪唑类，例如噻苯咪唑(Thiabendazole)，或其前药例如托布津；苯胺嘧啶类(anillopyrimidines)，例如嘧霉胺；咪唑类，例如抑霉唑；苯胺类，例如甲霜灵；氮杂环类，例如咯菌腈。
杀真菌剂/杀细菌剂的例子有，苯酚；季铵类，例如烷基二甲基苄基氯化铵或过乙酸。
对一种或多种合成杀真菌剂和/或杀细菌剂耐药的植物致病性真菌的例子可以具体列出的有：青霉菌属(Penicillium)、葡萄孢属(Botrytis)、链核盘菌属(Monilinia)、盘长孢属(Gloeosporium)、疫霉属(Phytophtora)、镰孢属(Fusarium)、链格孢属(Alternaria)、地丝菌属(Geotrichum)、黑星菌属(Venturia)、根霉菌属(Rhizopus)、茎点霉属(Phoma)、长蠕孢属(Helminthosporium)；更具体地，为青霉菌属下的多个种(Penicillium spp)，其中包括指状青霉(Penicillium digitatum)、扩展青霉(Penicillium expansum)、或意大利青霉(Penicillium italicum)；葡萄孢菌属下的多个种(Botrytis spp)，其中包括葡萄孢菌(Botrytis cinerea)；链核盘菌属下的多个种(Monilinia spp)，其中包括桃褐腐病菌(Monilinia fructicola)、褐腐病菌(Monilinia fructigena)或核果链核盘菌(Monilinia laxa)；盘长孢属下的多个种(Gloeosporium spp)，其中包括白盘长孢菌(Gloeosporium album)、果生盘长孢(Gloeosporium fructigenum)或宿根盘长孢(Gloeosporium perennans)；疫霉属下的多个种(Phytophtora spp)；镰孢属下的多个种(Fusarium spp)，或甚至是互隔交链孢霉(Alternaria alternata)；白地霉(Geotrichum candidum)；黑星菌霉(Venturiainequalis)；微黑根霉菌(Rhizopus nigricans)；马铃薯坏疽病菌(Phoma exigua)或长蠕孢菌(Helminthosporium)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)。
对一种或多种合成杀真菌剂和/或杀细菌剂耐受的植物致病性细菌的例子可以具体列出的有：丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)、大肠杆菌(Escherichiacoli)、梨火疫病原细菌(Erwinia amylovora)或胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwiniacarotovora)。
更具体地，青霉菌属下多个种的菌株对抑霉唑耐药；指状青霉和扩展青霉中有菌株对嘧霉胺耐药；丁香假单胞菌中有菌株对季铵类耐药；葡萄孢菌中有菌株对苯并咪唑类耐药；桃褐腐病菌中有菌株对嘧霉胺耐药。
不限于任何理论的束缚，本发明意外地发现，对敏感菌株具有适度杀真菌和/或杀细菌活性的精油对耐药菌株变得非常有活性。精油可能具有多位点活性，从而不会导致耐药菌株的产生。因此，将其与合成药物联用可能藉此避免遗传选择所导致的耐药菌株产生。
优选将精油和/或其含有的萜类活性成分与一种或多种杀真菌剂和/或杀细菌剂联用。这样的联用不仅能同时治疗敏感菌种和耐药菌株，还出乎意料地发现该联用增强了对耐药菌株的活性。
优选地，将一种或多种所述的精油和一种或多种所述的杀真菌剂和/或杀细菌剂以0.3-3的比例施用(一种或多种精油部分/一种或多种杀真菌剂和/或一种或多种杀细菌剂部分)。
通常，一种或多种所述的杀真菌剂和/或杀细菌剂是菌株对其耐受的，尤其是以上提及的那些。
在联用的优选组合中，尤其包括以下例子：
-抑霉唑和百里香和/或百里香精油，
-香芹酚和/或牛至油以及噻苯咪唑，
-嘧霉胺和丁子香酚/或丁香油，
-烷基二甲基苄基氯化铵和肉桂油。
在优选的实施例中，一种或多种所述的杀真菌剂和/或杀细菌剂与一种或多种精油和/或其中含有的一种或多种萜类活性成分同时施用，例如，在同一组合物中或借助不同的组合物分开施用。
可以在收获之前或之后应用本发明的组合物。
通常，本发明的组合物是可乳化浓缩物的形式，其可于施用前分散在水中。更具体地，所述的可乳化浓缩物尤其包含一种或多种精油和/或其含有的一种或多种萜类活性成分以及卵磷脂和/或衍生物。可乳化浓缩物还可以含有一种或多种乳化剂。通常，可乳化浓缩物尤其可由一种或多种精油和/或其含有的一种或多种萜类活性成分、卵磷脂和/或其衍生物以及一种或多种可能的乳化剂组成。
本发明的术语“卵磷脂和/或其衍生物”指的是一种或多种选自以下衍生物的化合物：磷脂酰胆碱和/或其衍生物，例如磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇、磷脂酰-乙醇胺和/或磷脂酸，和/或其中具有两种脂肪酸的混合物，例如二硬脂-(distearyl)、二棕榈酰基-和/或二油酰基-磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇、磷脂酰乙醇胺和/或磷脂酸，和/或它们的混合物。
优选地，术语“卵磷脂和/或其衍生物”衍生自天然来源，例如来自蛋黄或大豆。
卵磷脂/精油或萜类物质的比例较佳地为0.3到3/1之间(按重量计)。
术语乳化剂指的是离子型和非离子型乳化成分，例如乙氧基脂肪酸、乙氧基脂肪醇、吐温80等类型的非离子型表面活性剂。这些乳化剂本身是已知的。本发明的术语“乳化剂”指的是常用于该目的任何物质，例如乙氧基脂肪醇、乙氧基脂肪酸、乙氧基烷基酚或任何其它非离子型产品。
本发明中优选使用的乳化剂为阴离子型或非离子型表面活性剂。
本发明可用的非离子型表面活性剂的例子具体有脂肪醇，优选C8-C22的脂肪醇与C2-C3烷烃氧化物的缩合产物。C2-C3烷烃氧化物可以是环氧乙烷、环氧丙烷或环氧乙烷和环氧丙烷的任何比例的混合物。这些表面活性剂的例子是月桂醇(或十二烷醇)和30摩尔环氧乙烷的缩合产物。
非离子型乳化剂包括蔗糖酯、乙氧基失水山梨醇油酸酯、乙氧基脂肪酸、卵磷脂、酯化脂肪酸，例如甘油油酸酯及它们的混合物。
然而，本发明不限于使用这些具体的乳化剂。
在本发明的组合物中，非离子型乳化剂通常为1-350g/L，较佳地为200-300g/L。
在本发明的组合物中，阴离子型乳化剂通常为1-300g/L，较佳地为100-200g/L。
在本发明的组合物中，精油为50-350g/L。
在本发明的组合物中，萜类物质为20-250g/L。
在本发明的组合物中，杀真菌剂和/或杀细菌剂为0-300g/L。
具体地说，本发明的优选组合物包含：
-0-250g/L的嘧霉胺，
-20-200g/L的丁子香酚，
-20-200g/L的卵磷脂，
其还可包含其它赋形剂，例如增溶剂，如有机酸以及用于掩盖组合物气味的赋形剂，例如薄荷油。
所述的可乳化浓缩物可分散在水中，从而获得所述可乳化浓缩物的稀释液。本发明组合物在水中可以稀释到0.5-2%。
上下文中以g/L提到的组合物，均应理解为在稀释前的浓度。
通常，在本发明的方法中，可以借助喷洒、浸渍、浸没植物和/或粮食(如水果和/或蔬菜)来施用本发明组合物。较佳地，可采用将水果和/或蔬菜浸渍或浸没于分散在水中的所述可乳化浓缩物中进行施用。
根据本发明的另一实施例，可将本发明组合物分散在蜡中以便涂覆水果和/或蔬菜。
经由浸渍或浸没的施用方法尤其适用于收获后的施用。
通常，稀释后的组合物的施用量应能使得杀真菌剂和/或杀细菌剂以本领域技术人员已知的常规剂量或较低剂量进行施用。
最后，本发明还涉及所述的精油的用途，用于选择性处理耐受一种或多种杀真菌剂和/或杀细菌剂的植物性致病细菌和/或真菌的一种或多种菌株。
应理解，本发明上下文中所讨论的实施例之间可以是独立的或组合的。
附图说明
图1显示了本发明组合物对嘧霉胺耐药的扩展青霉菌株的作用。
图2显示了本发明组合物对嘧霉胺敏感的指状青霉菌株的作用。
实施例
实施例1：本发明组合物的例子
可乳化浓缩物(以g/L表示)
非离子型乳化剂 240
阴离子型乳化剂 180
精油 160
嘧霉胺 190
卵磷脂 60
单丙二醇 200
实施例2：单用精油或与合成杀真菌剂联用对耐药或敏感菌株的杀真菌活性。
下表显示了多种杀真菌剂和/或杀细菌剂组合物
Figure BDA0000485671040000071
用多种真菌或细菌菌株测试以上组合物，如图1和2所示。除非另行指出，图1和2列出的剂量为ppm计的活性成分；ml/l所指的是组合物C的量。在图1中(用嘎啦果(“Gala”apples)进行测试)，含有嘧霉胺、丁子香酚和薄荷油的组合物B表现出90-100%的有效性，而单用相同剂量的嘧霉胺至多为60%的有效性。我们还看到，单独用丁香油(组合物C)的有效性未超过80%。实际上，观察到杀真菌剂和精油/萜类物质之间存在着协同效应。
在图2中(用柠檬进行测试)，观察了进行含有嘧霉胺和精油/萜类物质的组合物(组合物B)对嘧霉胺敏感的指状青霉菌株的作用。此外，可以清楚地看到，单用精油/萜类物质(组合物C)对易感菌株并不有效，其最大的有效性约为40%。
实施例3：精油对植物致病性微生物的体外有效性评价。
研究目的：
本研究的目的在于测定与市售的合成杀真菌剂和杀细菌剂产品相比，精油对植物致病性真菌中的青霉菌属、葡萄孢属、桃褐腐病菌以及细菌中的丁香假单胞菌的有效性。
根据通用指南(ISO6887:2003;ISO7218:2007;ISO7954:1987)，对于细菌，通过计数25℃±1℃培养的菌落(检测菌落形成单位(CFU))，对于真菌，通过测定生长圈抑制情况，来检测精油样品对这些植物致病性微生物的有效性。
样品测试：
Figure BDA0000485671040000072
Figure BDA0000485671040000081
测试结果描述：
Figure BDA0000485671040000082
Figure BDA0000485671040000083
Figure BDA0000485671040000091
Figure BDA0000485671040000092
Figure BDA0000485671040000093
Figure BDA0000485671040000101
方法描述：
Figure BDA0000485671040000102
分析：
将样品加入人工培养基，并在琼脂溶液凝固之前轻轻地混合。
抗真菌有效性：
将少量真菌孢子置于培养皿中马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)的中央，于25℃±1℃(培养)5/6天。在孵育结束阶段，我们测定了晕圈的抑制情况，并与未处理PDA培养皿(对照)相比。
抗细菌有效性：
制备植物致病性微生物的孢子混悬液，向假单胞菌琼脂的培养皿中加入适量的感兴趣稀释液(100微升)，并用无菌“L”型刮棒在琼脂表面刮开。
将培养皿在25℃﹢1℃下孵育24小时。在孵育结束后检测菌落形成单位(CFU/ml产物)。
结果评估：
结果以疾病发病率的百分比以及测试产物的有效性百分比表示。
青霉菌属
样品
· 抑霉唑
· 百里香酚
· 抑霉唑+百里香酚
Figure BDA0000485671040000111
青霉菌属-抑霉唑耐药的菌株
样品：
· 抑霉唑
· 百里香酚
· 抑霉唑+百里香酚
·
Figure BDA0000485671040000112
Figure BDA0000485671040000121
葡萄孢属-噻苯咪唑耐药菌株
样品：
· 涕必灵SC500
· 香芹酚
· Tecto SC500+香芹酚
Figure BDA0000485671040000122
桃褐腐病菌
样品：
· Xedathane20
· Bioxeda
· Xedathane20+Bioxeda
Figure BDA0000485671040000123
桃褐腐病菌-嘧霉胺耐药菌株
样品：
· Xedathane20
· Bioxeda
· Xedathane20+Bioxeda
Figure BDA0000485671040000131
丁香假单胞菌-季铵类化合物耐药菌株
样品：
· Major C100
· 肉桂油
· Major C100+肉桂油
Figure BDA0000485671040000132
结论：
植物精油表现出抗真菌、抗植物致病性细菌的广谱活性，现总结如下：
青霉菌属：
未处理的培养皿中100%均有真菌。百里香酚表现出中等活性(100-1000ml/hl的剂量下有效性为20%-70%)，然而，百里香酚和抑霉唑联用在所有测试剂量均实现了全面控制。
青霉菌属-抑霉唑耐药的菌株。
未处理的培养皿中100%均有真菌。百里香酚表现出强活性(100-1000ml/hl的剂量下有效性为70%-90%)。100+1,000ml/hl剂量下，抑霉唑和百里香酚联用能够实现全面的控制。
葡萄孢属-噻苯咪唑耐药菌株
未处理的培养皿中100%均有真菌。
噻苯咪唑在100ml/hl时未显现出有效性，然而香芹酚则在所有测试剂量能全面控制该菌株。噻苯咪唑和香芹酚联用时也一样。
桃褐腐病菌
未处理的培养皿中100%均有真菌。
丁香油在所有测试剂量下能中等控制真菌，然而丁香油与嘧霉胺的联用则在所有测试剂量能全面控制真菌。
桃褐腐病菌，嘧霉胺耐药菌株
嘧霉胺仅具有45%的有效性，而丁香油在所有测试剂量下的有效性为70-80%。将丁香油和嘧霉胺联用则可在所测试剂量下达到几乎全面的控制。
丁香假单胞菌，季铵类化合物耐药菌株
未处理的培养皿中100%均有该细菌存在。
所测试的季铵类仅显示出25%的有效性，而肉桂油在1000ml/hl的剂量下却具有高达80%的有效性。
将季铵类与肉桂油联用在测试的所有肉桂油剂量下达到全面控制，而且是不到季铵类化合物对照剂量一半的剂量(100ml/hl对250ml/hl)。
权利要求书(按照条约第19条的修改)
1.对一种或多种植物致病性真菌和/或细菌菌株作杀真菌和/或杀细菌处理的方法，所述的菌株耐受一种或多种合成杀真菌剂和/或杀细菌剂，所述的方法包括对受所述菌株感染的植物或粮食施用含有丁香油作为精油和/或丁子香酚作为其所含有的萜类活性成分的组合物。
2.如权利要求1所述的方法，还包括，施用一种或多种杀真菌剂和/或杀细菌剂。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的一种或多种杀真菌剂和/或杀细菌剂是所述菌株耐受的杀真菌剂和/或杀细菌剂。
4.如权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述的一种或多种杀真菌剂和/或杀细菌剂与所述的丁子香油和/或丁子香酚同时施用或单独施用。
5.如权利要求2、3、4任一所述的方法，其特征在于，所述的丁子香油和所述一种或多种杀真菌剂和/或杀细菌剂的施用比例(丁子香油部分/一种或多种杀真菌剂和/或杀细菌剂部分)为0.3-3。
6.如以上任一权利要求所述的方法，其特征在于，所述耐受一种或多种合成杀真菌剂和/或杀细菌剂的一种或多种植物致病性真菌和/或细菌菌株是选自以下的耐药菌株：青霉菌属(Penicillium)、假单胞菌属(Pseudomonas)、葡萄孢菌属(Botrytis)、链核盘菌属(Monilinia)、盘长孢菌属(Gloeosporium)、疫霉菌属(Phytophtora)、镰孢属(Fusarium)、链格孢菌属(Alternaria)、地丝菌属(Geotrichum)、黑星菌属(Venturia)、根霉菌属(Rhizopus)、茎点霉菌属(Phoma)、长蠕孢菌属(Helminthosporium)、假单胞菌属(Pseudomonas)、埃希氏杆菌属(Escherichia)、或欧文氏菌属(Erwinia)。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述耐受一种或多种合成杀真菌剂和/或杀细菌剂的一种或多种植物致病性真菌和/或细菌菌株是选自以下耐药菌株：青霉菌属下的多个种，其中有指状青霉(Penicillium digitatum)、扩展青霉(Penicillium expansum)、或意大利青霉(Penicillium italicum);葡萄孢菌属下的多个种(Botrytis spp)，其中有葡萄孢菌(Botrytis cinerea),链核盘菌属下多个种(Monilinia spp)，其中有桃褐腐病菌(Monilinia fructicola),褐腐病菌(Moniliniafructigena)或核果链核盘菌(Monilinia laxa);盘长孢属下的多个种(Gloeosporium spp)，其中包括白盘长孢菌(Gloeosporium album),果生盘长孢(Gloeosporium fructigenum)或宿根盘长孢(Gloeosporium perennans);疫霉属下的多个种(Phytophtora spp);镰孢属下的多个种(Fusarium spp)，或甚至是互隔交链孢霉(Alternaria alternata);白地霉(Geotrichum candidum);黑星菌霉(Venturia inequalis);微黑根霉菌(Rhizopus nigricans);马铃薯坏疽病菌(Phomaexigua)、长蠕孢菌(Helminthosporium)立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)；丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)；大肠杆菌(Escherichia coli)；梨火疫病原细菌(Erwinia amylovora)或胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora)。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述耐受一种或多种合成杀真菌剂和/或杀细菌剂的一种或多种植物致病性真菌和/或细菌菌株为选自以下耐药菌株：青霉菌属、指状青霉菌、扩展青霉菌、丁香假单胞菌、葡萄孢军属、葡萄孢菌、桃褐腐病菌。
9.如以上任一权利要求所述的方法，其特征在于所述一种或多种菌株耐受的一种或多种合成杀真菌剂和/或杀细菌剂选自：苯并咪唑类，如噻苯咪唑或其前药，例如托布津；酚类；苯胺嘧啶类，如嘧霉胺；季铵类，如烷基二甲基苄基氯化铵；咪唑类，如抑霉唑；苯基酰胺类，如甲霜灵(metaxalyl)；氮杂环类，如咯菌腈(fludioxonyl)；过乙酸。
10.如以上任一权利要求所述的方法，其特征在于，所述的施用在收获之前或之后进行。
11.如以上任一权利要求所述的方法，其特征在于，所述组合物的施用是借助喷洒、浸渍、和/或浸没进行。
12.如以上任一权利要求所述的方法，其特征在于，所述组合物含有卵磷脂。
13.如以上任一权利要求所述的方法，其特征在于，所述组合物还额外含有一种或多种乳化剂。
14.如权利要求12或13中任一所述的方法，其特征在于，所述组合物是可乳化浓缩物的形式，且所述的方法还包括在施用前将所述浓缩物分散于水中的预备步骤。
15.如权利要求14所述的方法，其特征在于，在施用前，可将所述浓缩物在水中稀释到0.5-2%。
16.如以上任一权利要求所述的方法，其特征在于，在稀释前，所述的组合物含有50-350g/L的丁子香油以及20-250g/L的丁子香酚，在最终稀释前。
17.一种精油的用途，用于选择性处理耐受一种杀真菌剂和/或杀细菌剂的一种或多种植物性致病细菌和/或真菌菌株。

Claims (19)

1.对一种或多种植物致病性真菌和/或细菌菌株作杀真菌和/或杀细菌处理的方法，所述的菌株耐受一种或多种合成杀真菌剂和/或杀细菌剂，所述的方法包括对受所述菌株感染的植物或粮食施用含有一种或多种精油和/或其所含有的一种或多种萜类活性成分的组合物。
2.如权利要求1所述的方法，还包括，施用一种或多种杀真菌剂和/或杀细菌剂。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的一种或多种杀真菌剂和/或杀细菌剂是所述菌株耐受的杀真菌剂和/或杀细菌剂。
4.如权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述的一种或多种杀真菌剂和/或杀细菌剂与所述的一种或多种精油和/或其所含的一种或多种萜类活性成分同时施用或单独施用。
5.如权利要求2、3、4任一所述的方法，其特征在于，所述的一种或多种精油和所述一种或多种杀真菌剂和/或杀细菌剂的施用比例(一种或多种精油部分/一种或多种杀真菌剂和/或杀细菌剂部分)为0.3-3。
6.如以上任一权利要求所述的方法，其特征在于，所述耐受一种或多种合成杀真菌剂和/或杀细菌剂的一种或多种植物致病性真菌和/或细菌菌株是选自以下的耐药菌株：青霉菌属(Penicillium)、假单胞菌属(Pseudomonas)、葡萄孢菌属(Botrytis)、链核盘菌属(Monilinia)、盘长孢菌属(Gloeosporium)、疫霉菌属(Phytophtora)、镰孢属(Fusarium)、链格孢菌属(Alternaria)、地丝菌属(Geotrichum)、黑星菌属(Venturia)、根霉菌属(Rhizopus)、茎点霉菌属(Phoma)、长蠕孢菌属(Helminthosporium)、假单胞菌属(Pseudomonas)、埃希氏杆菌属(Escherichia)、或欧文氏菌属(Erwinia)。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述耐受一种或多种合成杀真菌剂和/或杀细菌剂的一种或多种植物致病性真菌和/或细菌菌株是选自以下耐药菌株：青霉菌属下的多个种，其中有指状青霉(Penicillium digitatum)、扩展青霉(Penicillium expansum)、或意大利青霉(Penicillium italicum);葡萄孢菌属下的多个种(Botrytis spp)，其中有葡萄孢菌(Botrytis cinerea),链核盘菌属下多个种(Monilinia spp)，其中有桃褐腐病菌(Monilinia fructicola),褐腐病菌(Moniliniafructigena)或核果链核盘菌(Monilinia laxa);盘长孢属下的多个种(Gloeosporium spp)，其中包括白盘长孢菌(Gloeosporium album),果生盘长孢(Gloeosporium fructigenum)或宿根盘长孢(Gloeosporium perennans);疫霉属下的多个种(Phytophtora spp);镰孢属下的多个种(Fusarium spp)，或甚至是互隔交链孢霉(Alternaria alternata);白地霉(Geotrichum candidum);黑星菌霉(Venturia inequalis);微黑根霉菌(Rhizopus nigricans);马铃薯坏疽病菌(Phomaexigua)、长蠕孢菌(Helminthosporium)立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)；丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)；大肠杆菌(Escherichia coli)；梨火疫病原细菌(Erwinia amylovora)或胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora)。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述耐受一种或多种合成杀真菌剂和/或杀细菌剂的一种或多种植物致病性真菌和/或细菌菌株为选自以下耐药菌株：青霉菌属、指状青霉菌、扩展青霉菌、丁香假单胞菌、葡萄孢军属、葡萄孢菌、桃褐腐病菌。
9.如以上任一权利要求所述的方法，其特征在于，所述的一种或多种精油和/或其所含有的一种或多种萜类活性成分选自：丁香油、薄荷油、肉桂油、百里香油、牛至油、丁子香酚、香芹酮、肉桂醛、百里香酚、香芹酚及其混合物。
10.如以上任一权利要求所述的方法，其特征在于，所述的组合物含有百里香酚、香芹酚和丁子香酚的混合物。
11.如以上任一权利要求所述的方法，其特征在于，所述一种或多种菌株耐受的一种或多种合成杀真菌剂和/或杀细菌剂选自：苯并咪唑类，如噻苯咪唑或其前药，例如托布津；酚类；苯胺嘧啶类，如嘧霉胺；季铵类，如烷基二甲基苄基氯化铵；咪唑类，如抑霉唑；苯基酰胺类，如甲霜灵(metaxalyl)；氮杂环类，如咯菌腈(fludioxonyl)；过乙酸。
12.如以上任一权利要求所述的方法，其特征在于，所述的施用在收获之前或之后进行。
13.如以上任一权利要求所述的方法，其特征在于，所述组合物的施用是借助喷洒、浸渍、和/或浸没进行。
14.如以上任一权利要求所述的方法，其特征在于，所述组合物含有卵磷脂。
15.如以上任一权利要求所述的方法，其特征在于，所述组合物还额外含有一种或多种乳化剂。
16.如权利要求14或15中任一所述的方法，其特征在于，所述组合物是可乳化浓缩物的形式，且所述的方法还包括在施用前将所述浓缩物分散于水中的预备步骤。
17.如权利要求16所述的方法，其特征在于，在施用前，可将所述浓缩物在水中稀释到0.5-2%。
18.如以上任一权利要求所述的方法，其特征在于，在稀释前，所述的组合物含有50-350g/L的精油以及20-250g/L的萜类物质，在最终稀释前。
19.一种精油的用途，用于选择性处理耐受一种杀真菌剂和/或杀细菌剂的一种或多种植物性致病细菌和/或真菌菌株。
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