CN102648006A - 灭活水蛭提取物不希望的污染的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供利用电磁辐射灭活水蛭提取物中病毒和/或细菌的方法。

Description

灭活水蛭提取物不希望的污染的方法

本发明涉及利用电磁辐射来灭活病毒和/或细菌领域。本发明提供灭活水蛭提取物(Blutegelextrakt)中病毒和/或细菌的方法。

水蛭(Blutgel)自古便被用于医学治疗。早在古希腊和特别在中世纪时，水蛭大的血液吸收量就被用于从身体中医用取血（放血）。

19世纪初，具有抗凝血作用的水蛭提取物在市场中出现。1955年一种被称为水蛭素（Hirudin）的多肽首次从水蛭中提取出来。水蛭素结合在凝血酶的纤维蛋白原结合位点，并通过末梢（Ausl?ufer）来抑制活性中心，从而阻止凝血酶的作用。

下面的出版物给出了水蛭提取物和水蛭素的历史综述：No-wak, G. & Schr?r, K. (2007): Hirudin – the long and stony way from an anticoagulant peptide in the saliva of medicinal leech to a recombinant drug and beyond. A historical piece: Thromb. Haemost. 第98卷，116–119页。

为获取有治疗作用的水蛭物质，将冷冻的水蛭（比如欧洲医蛭(Hirudo medicinalis)、侧纹医蛭（Hirudo verbana）及其相关物种）或者其组成部分机械粉碎并均质化。以多级提取和纯化工艺可以获得活性成分，所述活性成分比如可以用在用于治疗静脉机能不全和急性痔疮的软膏。

由于水蛭提取物是来自于天然原材料源的产品，因此确保避免不希望的污染物如细菌或者病毒尤为重要。在实施病毒安全计划时，明确规定使用互补的，即作用机理互为补充的技术（见例如Guideline Q5A，International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use (ICH))（Q5A准则- 人用药物注册技术要求国际协调会议(ICH)））。借此应确保覆盖广谱病毒。

已确立的用于灭活细菌以及大包膜病毒的方法为酸处理、用有机溶剂处理、用洗涤剂处理和巴氏杀菌，这些方法可以单独使用或者优选组合使用。

对于小的无包膜的病毒，例如细小病毒，上述方法却是无效的。

一种贫化小型无包膜病毒的方法是纳滤法。这里利用尺寸排阻法进行分离：滤膜可靠地截留尺寸在给定的保留率之内的病毒。

但是纳滤法存在一个问题，即那些小的无包膜的病毒可能具有和希望的治疗物质相仿的尺寸。因此，不可能可靠地过滤掉病原体，而不过滤掉蛋白质。结果是增加的不可接受的产品损失，而这导致了不再经济的方法。

在一些研究中表明，在钠滤水蛭提取物时，单位膜面积所能达到的流率极低。同时，在很短的处理时间后，就出现过滤器表面的堵塞。这种堵塞是不可逆的。该过滤器不能通过常规的方法（比如反冲洗）再恢复到有效状态。由于纳滤效率非常低下，而同时滤膜单元的成本又高，因此在制药生产中，对于经济应用而言不考虑利用纳滤工艺贫化水蛭提取物的病毒。

另一个灭活病毒的方法是利用紫外线照射（UV-照射）。这种方法特别的挑战在于均匀照射有待处理的介质。目的是可靠而基本上杀死微生物和/或病毒，同时基本保留敏感的活性成分。尤其来自于天然原料源的产品具有复杂、多样的组成。一般情况下，产品的不同成分对紫外线照射显示出不同的稳定性。这使得在灭活病毒和保持产品质量之间难于找到折衷。

产品保护的一个重要准则是缩短产品在辐照区的产品时间。由于所需的平均处理时间由最快通过辐照区的颗粒来决定，因此为缩短处理时间，就要求产品流内有尽可能一致的停留时间分布。使用用于对流体介质进行紫外线照射的反应器时，将出现这样的问题，随着距辐射源的距离增加，有待处理的介质中的辐射强度呈指数性下降。因此，距离辐照源比较远的微生物和病毒比较慢地或者根本不再被杀死。

而随着介质的光吸收量的增加而明显增强的效果，按照迄今的现有技术，导致使用非常大的辐照表面，比如例如在薄层反应器中所见。而这种现有的薄层反应器只能困难地转为工业规模，因为在扩大规模时，只能通过按生产量成比例扩大直径来实现保持恒定的薄层厚度，在工业规模中这导致不再可操作的大型反应器。

另外一个不利影响由液体膜的不适宜的停留时间行为造成，由于大多情况下紫外辐照射入反应介质的穿透深度很浅，所述液体膜必需非常薄而且因此层流流动，在层流流动情况下在横切于主要流向没有交换。靠近壁的层，由于线性降低直至到壁为零的流速剖面，其停留时间远远长于距离壁远的层。为了在快速流动的、距管壁较远的流体层也能实现用于杀灭所需的最小辐射剂量，必须提高膜的平均停留时间。但是这样做又导致辐射负荷提高，从而导致产品更大的损害。

在文献 (EP 1 339 643A1, EP 1 337 280A1)中描述了在螺旋状流动通道中特别有利的停留时间行为。产品流过螺旋状的流体通道。由于这种螺旋式的流动导向，在通道中产生被称为“迪恩涡(Dean-Wirbeln)”的二次流(Sekund?rstr?mung)，这个二次流确保了彻底并同时温和的彻底混合。通过这种涡流的高效混合实现了狭窄的停留时间分布和辐射剂量分布。这样就可以有针对性地引入足以灭活病毒的有效辐射剂量，而无须对产品造成强烈的负荷。这种所谓的剂量方案和模块的大小无关，因此把实验室的生产规模扩大至生产规模是可行的。

在所谓的螺旋模块中的紫外线照射原则上如此设计，以使得一次性穿流过螺旋模块。分别根据待处理液体的浊度，可以在一定的范围改变所述螺旋模块中的流率。这个范围由模块中必需的二次流的形成和压降得出。若即使是最小的可能流率和因此最长的停留时间仍不能足以达到希望的病毒灭活，原则上可以考虑多个模块串联运行。但是，在此情况下，相应的数量受到跨以串联布置的多个模块的压降和模块的压力稳定性的限制。

在水蛭提取物的情况中，液体吸收性如此之高（光密度在254 nm 时大于 50cm^-1），以至于紫外线辐射的穿透深度只局限于水蛭提取物的表面和表面以下几个微米深。通过单一的螺旋模块不能保证有效灭活病毒，同时保持产品的完整。多个研究已予证明。多个模块串联运行的潜在可能性出于实用的理由也被排除。对于足够的灭活而言，需要超过4个串联的模块。由于随之而来的压降，在设备的抗压性有限的情况下这在实际中无法实现。

此外，尤其在水蛭提取物中复杂的活性成分混合的情况下存在在辐照区内形成覆膜的危险，所述覆膜的形成会减弱甚至完全阻止射线射入待辐照介质。

还必须担心的是，在水蛭提取物情况下紫外线辐照不是有效的病毒灭活方法。所述问题还在于，如果被照射的介质具有的光密度很高，则覆膜的形成很难被识别。在这种情况下，很难利用光敏器件来测量辐射强度，以确定覆膜的形成。这存在如下危险，即被照射的介质未获得足量的照射，因此无法赋予足够的产品安全。

从现有技术出发，本发明的目的在于提供一种灭活水蛭提取物中病毒和/或细菌、特别是小型无包膜病毒的方法。所寻找的方法相对于那些传统的方法，如酸处理、溶剂处理、洗涤剂处理、巴氏杀菌和/或纳滤，应导致更高的产品产率，并同时还应保证经济运行和高的产品质量。此外，所寻找的方法还应该提供识别覆膜形成的可能性，以能够确保足够的产品安全。

令人惊奇地发现，灭活水蛭提取物中的病毒和细菌是可以有效并经济的实现，即让水蛭提取物在搅拌容器和辐照装置设备之间循环输送，在所述辐照装置中水蛭提取物被曝露于紫外光辐射。

因此，本发明提供灭活流体水蛭提取物中病毒和/或细菌的方法，其特征在于，所述提取物在搅拌容器和辐照装置设备之间循环输送，在所述辐照装置中所述提取物被曝露于电磁辐射。

所述流体水蛭提取物优选为实施例1提及的方法获得的提取物。

灭活被理解为这样的过程，所述过程导致病毒和/或细菌的不希望的性能被减少或者消除。所述灭活通过引入电磁辐射进行。这样的辐射优选用紫外光进行，众所周知，紫外光适合使病毒和/或细菌如此发生改变：使其不再对人类、动物、植物和/或环境造成伤害。

紫外光是波长范围在100nm至400nm的电磁辐射。对于灭活病毒而言优选使用100nm至280nm范围的所谓UV-C-射线，特别优选的范围是200nm至280nm。

根据本发明让水蛭提取物在搅拌容器和辐照装置之间循环输送。所述辐照装置由一个或者多个优选并联的螺旋模块组成，所述螺旋模块在下文进一步详述。

出人意料的是，通过这种循环操作方式足以灭活水蛭提取物中的细菌和病毒，而对水蛭提取物中包含的蛋白质没有显著的伤害。出人意料地，通过使用搅拌反应器导致的扩大的停留时间分布（相对于一次性流过一个或者多个串联的螺旋模块）和由于循环处理方式延长的在各个模块中的照射时间对水蛭提取物中含有的蛋白质没有造成有害作用。此外，尽管在各个螺旋膜件中相对长的处理时间，但出人意料的是，没有出现明显的覆膜或者团聚的形成。

令人惊奇地发现，在根据本发明的方法中，病毒和细菌甚至在具有大于70的光密度的水蛭提取物中，仍然能通过紫外线辐照被灭活。优选使用的水蛭提取物的光密度的范围为10-72，特别优选30-65的范围，最特别优选40-60的范围。

光密度OD（也被称作吸光度），是射入介质的射线的强度I ₀ 与射出介质的射线的强度I比值的以10为底的对数：

OD = lg (I ₀ /I)

光密度和使用的射线的波长有关。本文中给出的光密度为波长254nm处的。

根据本发明，水蛭提取物循环输送。用泵唧送的体积流量与总体积的比例在0.5至80 1/h的范围，优选在1至60 1/h的范围，最优选3至45 1/h的范围。

在进行根据本发明的方法时，将提取物的温度保持在2℃至25℃的范围, 优选4℃至 20℃的范围, 特别优选 8℃至15℃的范围。

在一个优选的实施方案中，以循环操作方式照射批次之前和/或之后，用透明介质进行一次或者多次循环，并且对在辐照区域内射入或者透过透明介质的射线强度进行测量。

因为水蛭提取物的光密度太高，就不能够在提取物的辐照期间测量在辐照区域内进入水蛭提取物或者透过水蛭提取物的射线强度。但是存在这样的危险，在辐照的过程中在辐照模块的内壁上形成覆膜。覆膜形成的结果是减少射入提取物的辐射强度。因此就无法保证把病毒和/或细菌完全灭活。因此，在水蛭提取物辐照之前和/或之后，输送透明介质通过设备，并测量进入介质或者透过介质的辐射强度。如果在水蛭提取物辐照之前或者之后的辐射强度相同或者几乎相同，那么就可以排除覆膜的形成，可以进行下一批的水蛭提取物的辐照。如果记录到辐射强度明显的下降，那么可以考虑到，在辐照模块的内壁上有覆膜的形成，应该在下一批次之前进行清除。或者也可以考虑调高辐射的强度和/或增加循环次数，来相应地弥补降低的辐射强度。

透明介质是指对于所使用的辐射的波长范围而言光密度小于10的介质（优选在254nm测量）。

透明介质优选使用水或者含水缓冲溶液。作为缓冲溶液适合的是比如磷酸盐缓冲的盐溶液（PBS），或者其他有机/无机缓冲系统。

除了避免覆膜形成之外，还必须要避免由辐射引发的液体中的产品和次要成分或两者的团聚的形成。在按照本发明实施方案中，尽管水蛭提取物以循环操作方式进行处理，但是令人惊奇地未观察到任何团聚形成。

根据本发明的方法在这样的装置中进行，所述装置包括至少一个搅拌容器、辐照装置和水蛭提取物的输送器件。

搅拌容器是可以存放水蛭提取物的容器，并且包括用来彻底混合容器中水蛭提取物的器件。作为彻底混合的器件，通常使用搅拌器诸如叶片搅拌器。所述容器可以由玻璃、不锈钢或者塑料构成。

输送器件的作用是把流体介质从搅拌容器中经辐照装置再输送回搅拌容器中。作为输送装置适合的是比如泵。

用于实施根据本发明的方法的装置的特征是，将搅拌容器、辐照装置以及输送器件如此相互连接，以便能够将水蛭提取物从搅拌容器输送经过辐照装置并再返回到所述搅拌容器中。

所述辐照装置包括一个或者多个优选并联的螺旋模块。

螺旋模块是这样的装置，这个装置提供至少一个电磁辐射源和绕轴螺旋延伸的通道。这种螺旋模块的实例见于出版物WO 2002/038502A1中图 5、6、7、8、9或者10。这种螺旋延伸的通道优选如此设置，使得其绕电磁辐射源延伸。也可以考虑，围绕通道周围设置其他的电磁辐射源。

如果流体介质流过这种螺旋延伸的通道，则强烈的、在整个通道长度上盛行的均匀的横向混合垂直于产品流动主方向作用在介质上。尽管按照本发明的方法盛行着层流特征，但是通过这种横向混合导致停留时间分布变窄。此外，距离辐射源较远的流体层（其特别在介质吸收强烈的情况下未得到或者很少得到电磁辐射）通过这种横向混合被确保与距离辐射源近的被辐射到的层进行强烈地交换。这和狭窄的停留时间分布导致所有流体单元都获得均匀、一致的辐射时间长度和辐射强度，这通过流动速度和辐射源的强度可适配于各种需要。这样可以确保，有效减少介质中的微生物和/或病毒。在太强的辐射会导致损伤的介质中，将有效地避免这样的危险，即通过不利的宽的停留时间分布导致过强的辐射负荷和由此有时导致伤害。

可以考虑在一个螺旋模块中多个通道相邻地布置，并且围绕一个共同的轴螺旋延伸。通道可以具有方形、圆形、椭圆形或者半圆形的横断面轮廓。其他形状横断面轮廓也是可考虑的。优选地，所述管道具有至少有一面是展平(abgeflacht)的横断面轮廓。电磁射线优选从此展平的面进入通道中。这些通道的实例在WO 2002/038502A1中的图5、6、7、8、9或10中显示。通道的横截面剖面优选D-型（也就是说半圆形或者半椭圆形）、菱形或者矩形。

作为电磁辐射源适宜的是每种发射出适合灭活病毒和/或细菌的波长的辐射源。优选使用UV-C-射线源，例如水银灯，其表现出在254nm波长处的辐射最大值。也可以考虑使用多个电磁辐射源。

在一个特别优选的实施方案中，所述螺旋模块包括空心圆柱，螺旋软管力锁合或形状锁合（kraft- oder formschlüssig）地施加到所述空心圆柱上。在空心圆柱里放进不直接和产品接触的电磁辐射源。这种螺旋模块例如在申请WO 02/38502A1、WO 02/38191A1、WO 07/096057A1、EP 1 464 342A1和DE 10 2009 009 108.4中予以描述。

例如在WO 07/096057A2中描述了一种螺旋模块，这种螺旋模块的特征是，螺旋软管经由内支撑管形状锁合地施加。因而在所述支撑管和所述螺旋软管之间形成了通道，这个通道围绕着支撑管从螺旋软管的一端螺旋式延伸到螺旋软管的另一端。螺旋软管优选如按照申请DE 10 2009 009 108.4.中描述的，力锁合地施加到空心圆柱上。这样能有效地避免相邻通道匝之间的横向流动。否则，横向流动将导致不希望出现的停留时间分布的变宽。

这种螺旋模块的优选如此构造：至少被辐射到的部件被设计为一次性零件。

搅拌容器和具有一个或者多个螺旋模块的辐照装置之间的体积比为1到1000的范围，优选在5到500的范围，特别优选10至200的范围。由此能够遵循操作时间，该操作时间能够很好地嵌入操作过程中，也即例如一个班次(Schicht)中。

用于实施根据本发明的方法的装置优选配备一个或多个传感器，例如用来测量辐射（如紫外线传感器）、压力、容器填充状态、温度以及体积流量。此外，所述装置优选配备监测螺旋模块正确安装位置的传感器，以及检测有可能发生的泄漏的泄漏传感器。在一个优选的实施方案中也配备安全装置。这些装置可以是例如，防止操作人员受到意外辐射（比如具有门式监察器的外壳）的措施、用于泄漏情况的收集槽以及针对设备移动部件的保护装置。

整个装置优选通过过程控制系统来进行控制和调节。尤其对温度、流率、辐射以及处理时间进行监控。

这个装置的部件优选设计有CIP（CIP=原位清洗）能力，以确保用于药物用途的灭菌。

下面将基于实施例对本发明作详细地说明，但是本发明并不局限于此。

图中显示：

图1：制备粗制水蛭提取物的方法的示意图

图2：制备冻干水蛭提取物的方法的示意图

图3：用于进行根据本发明的方法的装置的实施方案的示意图

图4：辐照模块示意图

图5：辐照模块-顶部示意图

图6：在其中形成迪恩涡的流体流过的螺旋通道示意图

图7：介质中水蛭素和病毒的灭活作为辐射剂量的函数的图解。

实施例1： 制备水蛭提取物的方法

第一工艺阶段（粗提物的制备）

生产水蛭提取物的第一工艺阶段，即粗提物的生产在图1中示意性示出。

把深度冷冻的水蛭解冻，分共70-80kg的两份在所谓的“切割机”中粉碎。粉碎后，悬浮液用加温的纯化水进行稀释，并转移至萃取容器中，在所述萃取容器中通过添加纯化水调节体积。加入食盐和丙酮至第一提取阶段，同时继续搅拌悬浮液并调节温度。第一提取阶段之后，通过离心操作，将悬浮液分离为含生物质相和液相。将液相暂时存储。将固相加入调温纯化的水中并以增加的食盐和丙酮浓度重新提取（第二提取阶段）。然后再次离心并最后升高的食盐和丙酮浓度的情况下进行第三提取阶段。接着弃去含生物质的固相。在用深度冷却的丙酮进行蛋白质沉淀之前，将所述液相纯化、过滤并通过添加三氯乙酸（TCA）将PH值调至4-5，优选4.5（(±0.1）。沉淀蛋白质沉淀物，然后与丙酮上清液分离。将沉淀物用丙酮和水的混合液（80%v/v）清洗三次。在清洗过程中，沉淀物沉淀出来。随后在每种情况中分离丙酮上清液。清洗后的沉淀物通过过滤收集并用丙酮清洗。接着用氮气冲洗把过剩的丙酮排出，取出滤饼。潮湿的滤饼可任选地深度冷冻暂时存储。滤饼在真空干燥箱中干燥，以清除剩余的丙酮。含有水蛭粗制提取物的干燥滤饼在进一步加工之前深度冷冻暂时存储。

第二工艺阶段（水蛭提取物的制备（冻干））

图2示意性示出了制备水蛭提取物的第二工艺阶段—制备冷冻干燥的水蛭提取物。

将多种含水蛭提取物的干燥的滤饼合并在一起，在纯化水中溶解。把生成的蛋白质溶液冷冻并暂时存放于深冻冰箱。然后溶液再次解冻并加入纯化水。把稀释后的蛋白质溶液加热，并在恒定温度下巴氏消毒规定的时间。然后把蛋白质溶液冷却至室温，并用稀盐酸或碳酸钠调整至7-8的中性pH，优选7.5(±0.1)。经过PH调整后的溶液进行离心处理，且合并上清液并冷却暂时存储。分离的沉淀物通过加入纯化水清洗并重新离心处理。

然后将上清液合并、均化并过滤。如果必要，可以通过加入纯化水来适当调节光密度OD（254nm）。已证实至多72的光密度是适宜的。然后用波长为254nm的紫外线以合适的辐射剂量进行辐照。已证实合适的辐射剂量值为50—1000 J/m²，优选100-600 J/m²，特别优选250-350J/m²。然后，经过紫外辐照的蛋白质溶液经过滤和浓缩（超滤），以调整其活度。最后，将调整后的本体溶液再次过滤、灌装于瓶中，然后冻干。将冻干的水蛭提取物暂时存储用于进一步处理。

实施例2： 用于灭活具有大于50的高光密度的流体介质中不希望的污染物的装置

用于实施根据本发明方法的装置于图3中示意性示出。

此装置主要由容器10，比如，带有搅拌器40的搅拌容器和一个或者多个辐射模块（20, 21）构成。引导介质15经过容器10的软管连接或者管道连接穿过辐射模块20、21，然后重新返回到容器10中。这优选用泵30进行。辐射模块可以是串联或并联的或者结合串联和并联。

辐射模块优选使用根据前面所述定义的螺旋模块，包括围绕棒状辐射源的螺旋状辐射室，所述辐射源尤其发射254nm的波长。

所述辐射源优选是汞蒸气灯。辐射室至少在朝向辐射源的一侧用对波长254nm的射线呈透过性的材料制成，优选由石英玻璃制成。通过以螺旋形输送的流产生二次流，即所谓的迪恩涡200（见图6），这种二次流在层流区也产生经济、有效的液体的横向混合。以这样的方式使液体的所有部分在流过模块的过程中在靠近壁的层被辐照。另外，通过这种导流方式起到收窄停留时间的作用。

螺旋模块的一个优选实施方案显示于图4。

在这种优选的实施方案中，所述螺旋模块具有特氟隆软管90的螺旋模块，所述软管具有螺旋形的凹槽和由此具有刻出的螺旋。在此特氟隆软管中力锁合地引入石英管100。通过这种结构使得每一个螺旋95相互分开，并形成了螺旋管道系统。在石英管的内部100 引入紫外灯80。此位置可以使通过螺旋流动的溶液在其流过反应器的整个路径中最大程度受辐照。

液体进料优选经下部入口进行，并可以这样无泡导入不同溶液。辐照模块的上端和下端各有一个用于液体输入或输出的反应器头部（见图5）。通过装入的开口110可以借助于紫外线传感器来检测值辐射源的性能。

图4中符号表示：

D = 螺旋的平均直径

b = 半椭圆形的流动管道的宽度

L = 特氟隆软管的长度

a = 螺旋的平均高度

i = 两个螺旋之间的距离

R_QR = 石英管外半径。

实施例3： 用于在实施例2的装置中处理得自实施例1的水蛭提取物的方法

把根据实施例1的方法得到的水蛭提取物用根据实施例2的具有辐照模块的装置辐照。为此提供230ml体积的提取物，其中加入了少量（>10%）的病毒原液（小鼠细小病毒)。光密度为53.3。提取物通过蠕动泵以10L/h 的速度被泵过24 ml 的辐照模块，在那里用254nm的紫外线辐照，再返回到储存容器中（循环运行）。在0、10、20以及30分钟后，从储存容器中取出样品。其相应的辐射剂量分别为0、97、198和303J/m²。采用标准分析对每个样品的病毒活性和水蛭素活性成分的活性进行测定。

结果图示于图7中。图7示出了水蛭素以及加入的病毒的灭活作为辐射剂量的函数。该结果表明了明确的病毒的灭活效果，同时对活性成分低的损害。然而因为活性成分的损害是绝对存在的，因此，为避免不必要的损失，必须在预先规定的最小病毒灭活情况下选择尽可能精确的辐射。

附图标记

10   搅拌容器

15   介质（水蛭提取物）

20   螺旋模块

21   螺旋模块

30   输送器件（比如，泵）

40   搅拌器

50   冷却套管

80   辐射源

90   特氟隆软管

95   螺旋

100  石英玻璃管

110  用于安装传感器的可关闭的开口

120  入口/出口

150  入口

160  出口

Claims (13)

1.用于灭活水蛭提取物中病毒和/或细菌的方法，其特征在于，所述水蛭提取物在搅拌容器和辐照装置之间循环输送，在所述辐照装置中用电磁辐射辐照所述介质。

2.根据权利要求1的方法，其特征在于，所述辐照用100nm—280nm范围，优选200nm—280nm范围的紫外光进行。

3.根据权利要求1或2之一的方法，其特征在于，所述水蛭提取物在波长254nm具有至多72范围的光密度，优选30-65范围，特别优选40—60范围的光密度。

4.根据权利要求1-3之一的方法，其特征在于，用泵唧送的体积流量与总体积的比例为0.5至80 1/h的范围，优选为1至60 1/h的范围，特别优选为3至45 1/h的范围。

5.根据权利要求1-4之一的方法，其特征在于，将所述水蛭提取物的温度保持在2-25℃的范围，优选4-20℃的范围，特别优选8-15℃的范围。

6.根据权利要求1-5之一的方法，其特征在于，在水蛭提取物辐照之前和/或之后，将透明介质输送通过所述装置，并测量进入所述介质中或者透过所述介质的辐照强度。

7.根据权利要求1-6之一的方法，其特征在于，所述搅拌容器和所述辐照装置之间的体积比为1到1000的范围，优选5到500的范围，特别优选10至200的范围。

8.根据权利要求1-7之一的方法，其特征在于，所述辐照装置通过一个或多个、优选并联的螺旋模块构成，其中所述螺旋模块是提供至少一个电磁辐射源和至少一个绕轴螺旋延伸的通道的装置。

9.根据权利要求8的方法，其特征在于，将所述螺旋延伸的通道如此布置，使其环绕电磁辐射源延伸。

10.根据权利要求8或9的方法，其特征在于，所述通道具有在至少一面上是展平的横断面轮廓，并且电磁辐射优选通过此展平的面进入所述通道中。

11.根据权利要求8-10之一的方法，其特征在于，所述通道的横断面轮廓是D-型、菱形、或长方形。

12.根据权利要求8-11之一的方法，其特征在于，所述螺旋模块包括空心圆柱，在所述空心圆柱上力锁合或形状锁合地施加螺旋软管，并且在所述空心圆柱之中引入电磁辐射源。

13.根据权利要求8-12之一的方法，其特征在于，如此设置所述螺旋模块：使得至少被辐射到的部件设计为一次性零件。

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