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CN102600431A - 活血止痛软膏及其制备方法 - Google Patents

活血止痛软膏及其制备方法 Download PDF

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CN102600431A
CN102600431A CN2012100964633A CN201210096463A CN102600431A CN 102600431 A CN102600431 A CN 102600431A CN 2012100964633 A CN2012100964633 A CN 2012100964633A CN 201210096463 A CN201210096463 A CN 201210096463A CN 102600431 A CN102600431 A CN 102600431A
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CN
China
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volatile oil
ointment
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parts
group
Prior art date
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CN2012100964633A
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Inventor
成羿
王佩
章嫦娟
董学亮
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hangzhou Chinese Medicinal Hospital
Original Assignee
Hangzhou Chinese Medicinal Hospital
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Abstract

本发明涉及医药领域，公开了一种活血止痛软膏及其制备方法。它主要是膏体基质中含有片姜黄、赤芍、制马钱子、白芷和天花粉五味中药成份制剂，其制法是将片姜黄、白芷提取挥发油备用，将赤芍、制马钱子、天花粉与提取挥发油后的片姜黄、白芷药渣水煎醇沉后滤液备用，并将上述提取备用的中药成分加入膏体基质中。本发明将药物制成软膏剂，便于使用和携带，针对骨骼肌急性钝挫伤瘀肿热痛进行合理组方，使用活血、化瘀、清热、凉血止痛类中药，有利于局部活血化瘀，消肿止痛，清热凉血生肌。

Description

活血止痛软膏及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种活血止痛软膏，尤其涉及一种含有中药成分的活血止痛软膏及其制备方法。
背景技术
中医记载中骨骼肌是属于筋的范围，伤筋主要包括现代医学的骨骼肌、筋膜、肌腱、韧带、皮下结缔组织损伤等软组织损伤，急性伤筋包括急性骨骼肌钝挫伤。
中医认为，骨骼肌急性钝挫伤是外来暴力猛烈撞击、重物挫压、不慎跌扑、强力扭转等引起的急性伤筋。受伤后，筋肉或伤、或断，络脉随之受伤，气血互阻，血肿形成引起疼痛和功能障碍。
现代医学认为，细胞核组织遭受不能耐受的有害因子刺激后，可引起细胞和细胞间质发生物质代谢、组织化学、超微结构乃至光镜和肉眼可见的异常变化，称为损伤。引起细胞、组织损伤的原因有：缺氧、化学物质和药物、物理因素、生物因素、免疫反应、营养失调、内分泌因素、遗传因素、衰老、社会-心理-精神及医源性因素。这些原因通过破坏细胞膜、损伤活性氧类物质、损伤细胞浆内高游离钙、引起缺氧、化学性细胞损伤及遗传物质变异等机制造成组织、细胞的损伤。轻度损伤主要引起变性（degeneration），重度是引起坏死，同时引起急性炎症反应，坏死组织和细胞的代谢停止，功能丧失，并出现一系列的形态学特征，为不可逆的改变。
中西医在治疗急性骨骼肌钝挫伤上均是针对其主要病理机制：中医主要是传统的外用膏剂，推拿按摩等方法；西医骨骼肌损伤后传统治疗方法为:休息（rest）、冰敷（ice）、加压(compression)、患肢抬高（elevation），即RICE原则。还有生长因子（GF）、消炎止痛软膏、生长素基因疗法(Smiatic gene therapy)等治疗，但综合治疗效果不理想。
发明内容
本发明针对目前治疗骨骼肌急性钝挫伤药物存在问题，提供一种促进骨骼肌愈合、含有中药成分的活血止痛软膏及其制备方法。
本发明的解决方案主要基于祖国医学对骨骼肌急性钝挫伤的认识和治疗原则，化血破瘀、退肿止痛、凉血清热为主，按照中医理论组方，提取中药的有效成分，溶于膏体制成。
活血止痛软膏，包括膏体基质，膏体基质中含有下述重量配比原料制成的药剂：片姜黄10-50份、赤芍10-50份、制马钱子30-70份、白芷10-50份、天花粉30-70份。
膏体基质中含有下述优选重量配比原料制成的药剂：片姜黄20-40份、赤芍20-40份、制马钱子40-60份、白芷20-40份、天花粉40-60份。
膏体基质中含有下述最佳重量配比原料制成的药剂：片姜黄30份、赤芍30份、制马钱子50份、白芷30份、天花粉50份。
片姜黄破血行气，通经止痛，用于血滞经闭，行经腹痛，胸胁剌痛，风湿痹痛，肩臂疼痛，跌扑损伤。片姜黄呈长圆形或不规则的片状，大小不一，长3～6cm ，宽l～3cm，厚0.1～0.4cm；外皮灰黄色，粗糙皱缩，有时可见环节及须根痕，切面黄白色至棕黄色，有一圈环纹及多数筋脉小点．质脆而坚实；断面灰白色至棕黄色，略粉质；气香特异，味微苦而辛凉。片姜黄根茎含姜黄素类化合物，倍半萜类化合物，姜黄多糖（其主要成分有姜黄酮，芳香-姜黄酮，姜黄烯，大牻牛儿酮，芳-香姜黄烯，桉叶素，松油烯，莪术醇，莪述呋喃烯酮，莪述二酮，α-蒎烯，β-蒎烯，柠檬烯，芳樟醇，丁香烯，龙脑等），还含有菜油甾醇，豆甾醇，β-谷甾醇，胆甾醇，脂肪酸及金属元素钾、钠、镁、钙、锰、铁、铜、锌等，锌/铜=3.7。  
赤芍为芍药科植物芍药(野生种)、川芍药、草芍药及毛叶草芍药等的根。行瘀，止痛，凉血，消肿。治瘀滞经闭，疝瘕积聚，腹痛，胁痛，衄血，血痢，肠风下血，目赤，痈肿。 赤芍根呈圆形，稍弯曲，长5至40厘米，直径0.5至3厘米；表面棕褐色，粗糙，有纵沟及皱纹，并有须根痕及横向皮孔，有的外皮易脱落；质硬而脆，易折断，断面粉白色或粉红色，皮部窄，木部放射状纹理明显，有的有裂隙；气微香，味微苦，酸涩；以条粗长、断面粉白色、粉性大者为佳。有解痉、镇痛、镇静、抗惊厥、抗炎、抗溃疡、抗菌、解热的药理作用。
 制马钱子为马钱科植物云南马钱StrychnospierrianaA.W.ill或马钱Strychnosnux-vomicaL．的干燥成熟种子，其主要成分是士的宁（又名番木鳖碱，是由马钱子中提取的一种生物碱，能选择性兴奋脊髓，增强骨骼肌的紧张度 ）。 未制马钱子只能外用，不能内服，而制马钱子降低了毒性，又利于粉碎。马钱子通络止痛，散结消肿，用于风湿顽痹、麻木瘫痪、跌扑损伤、痈疽肿痛。
白芷含挥发油，香豆素及其衍生物，如当归素、白当归醚、欧前胡乙素、白芷毒素等。还含有挥发油，油中有3-亚甲基-6-环己烯、十一炭烯-4、榄香烯、十六烷酸、壬烯醇等。白芷根呈圆锥形，长10～20cm，直径2～2.5cm。表面灰棕色，有横向突起的皮孔，顶端有凹陷的茎痕。质硬，断面白色，粉性足，皮部密布棕色油点。气芳香，味辛、微苦。性温，味辛。主治：祛风湿，活血排脓，生肌止痛。用于头痛、牙痛、鼻渊、肠风痔漏、赤白带下、痈疽疮疡、皮肤瘙痒。
    天花粉为葫芦科植物栝蒌的根，是一种中药，为清热泻火类药物，其具体功效是清热泻火，生津止渴，排脓消肿。主治：治热病口渴、消渴、黄疸、肺燥咳血、痈肿、痔痿。
上述的活血止痛软膏的制备方法包括以下步骤：
第一步，按重量配比称取各原料，将片姜黄、白芷加水浸泡，用蒸馏法蒸馏收集挥发油，挥发油保存备用；
第二步，将赤芍、制马钱子、天花粉与提取挥发油后的片姜黄、白芷药渣合并，加水煎煮过滤，滤液浓缩醇沉，离心，回收乙醇，滤液备用；
第三步，将加工提取的各备用中药成分，即备用的挥发油和滤液，加入膏体基质中。
    作为优选，所述的片姜黄、白芷加7-9倍重量水浸泡0.4-0.6小时后，用蒸馏法蒸馏7-9小时，收集挥发油，挥发油保存备用；所述的赤芍、制马钱子、天花粉与提取挥发油后的片姜黄、白芷药渣合并，每次加9-11倍重量水煎煮三次，每次0.4-0.6小时，过滤，滤液合并浓缩，加乙醇醇沉，静置24小时以上，离心，上清液回收乙醇后备用。 
    作为优选，所述的片姜黄、白芷加8倍重量水浸泡0.5小时后，用蒸馏法蒸馏8小时，收集挥发油，挥发油保存备用；所述的赤芍、制马钱子、天花粉与提取挥发油后的片姜黄、白芷药渣合并，每次加10倍重量水煎煮三次，每次0.5小时，过滤，滤液合并浓缩，加乙醇醇沉，静置24小时以上，离心，上清液回收乙醇后备用。 
    作为优选，将各备用中药成分按下列步骤加入膏体基质中：
    按重量配比取硬脂酸1份、单硬脂酸甘油酯7.5份、白凡士林10份、羊毛脂1份、固体石蜡4g、十六醇8份、羟苯乙酯0.2份混合于85℃水浴加热溶解，保温备用；
    取重量配比甘油13份、十二烷基硫酸钠2份、亚硫酸氢钠0.3份以及所述的备用滤液，混合，水浴加热至85℃，将水相缓慢加入至备用油相，边加边搅拌，加完后继续保持温度为85℃搅拌5分钟，移至室温继续搅拌至乳化完成，待温度降至20℃-40℃，加入备用挥发油，搅拌均匀，即得。
    本发明的室温为25±5℃。 
本发明主要由片姜黄、赤芍、制马钱子、白芷和天花粉五味药组成。片姜黄：破血行气止痛；赤芍：活血散瘀，凉血清热均为君药；制马钱子：通经络，消结肿，止疼痛；白芷：止痛消肿散结均为臣药；佐以天花粉：清热生津，消肿排脓。诸药合用共奏化血破瘀，退肿止痛，凉血清热，预防瘀血化热的功效。本发明针对骨骼肌急性钝挫伤瘀肿热痛进行合理组方，使用活血、化瘀、清热、凉血止痛类中药，有利于局部活血化瘀，消肿止痛，清热凉血生肌。
附图说明
    图1为各组个时间点内源性IGF-ⅠmRNA经RT-PCR产物电泳图。
    图2为IGF-Ⅱ的mRNA经RT-PCR产物电泳图。
    图3为Ⅱb型MHC电泳图。
    图4为Ⅰ型胶原的mRNA电泳图。
 图5为Ⅲ型胶原的mRNA电泳图。
具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，本发明的范围并不因此局限于下述实施例，而是由本发明的说明书和权利要求书限定。
实施例1
    活血止痛软膏的制备。包括以下步骤：
    第一步，称取下列中药原料： 片姜黄30kg、赤芍30kg、制马钱子50kg、白芷30kg、天花粉50kg；
片姜黄、白芷加8倍量水浸泡0.5小时，用蒸馏法蒸馏8小时，收集挥发油保存备用。
第二步，赤芍、制马钱子、天花粉与提取挥发油后的片姜黄、白芷药渣合并，每次加10倍量水煎煮三次，每次0.5小时，过滤，滤液合并浓缩，加乙醇使含醇量为75％，醇沉，静置24小时以上，离心，上清液回收乙醇后定容至每1ml含生药2g，滤液备用。
第三步，将加工提取的各备用中药成分加入膏体基质中：取硬脂酸1kg、单硬脂酸甘油酯7.5kg、白凡士林10kg、羊毛脂1kg、固体石蜡4kg、十六醇8kg、羟苯乙酯0.2kg混合于85℃水浴加热溶解，保温备用；
    取甘油13kg、十二烷基硫酸钠2kg、亚硫酸氢钠0.3kg以及第二步的备用滤液，水浴加热85℃，将水相缓慢加入至备用油相，边加边搅拌，加完后继续保温搅拌5分钟，移至25℃继续搅拌至乳化完成，待温度降至40℃以下，加入备用挥发油，搅拌均匀制得。
依据本实例制备的产品为淡黄色乳膏，气微香。  
实施例2
    活血止痛软膏的制备。包括以下步骤：
第一步，称取各原料：片姜黄164kg、赤芍164kg、制马钱子492kg、白芷164kg、天花粉492kg；
将片姜黄、白芷加7倍重量水浸泡0.4小时后，用蒸馏法蒸馏7小时，收集挥发油，挥发油保存备用；
第二步，将赤芍、制马钱子、天花粉与提取挥发油后的片姜黄、白芷药渣合并，每次加9倍重量水煎煮三次，每次0.4小时，过滤，滤液合并浓缩，加乙醇醇沉，静置24小时以上，离心，上清液回收乙醇后，备用；
    第三步，将加工提取的各备用中药成分加入膏体基质中：取硬脂酸16.4kg、单硬脂酸甘油酯123kg、白凡士林164kg、羊毛脂16.4kg、固体石蜡65.6kg、十六醇131.2kg、羟苯乙酯3.28kg混合于85℃水浴加热溶解，保温备用；
取甘油3475.16kg、十二烷基硫酸钠32.8kg、亚硫酸氢钠4.92kg以及第二步的备用滤液，混合，水浴加热至85℃，将水相缓慢加入至备用油相，边加边搅拌，加完后继续保持温度为85℃搅拌5分钟，移至23℃继续搅拌至乳化完成，待温度降至20℃，加入备用挥发油，搅拌均匀，即得。
依据本实例制备的产品为淡黄色乳膏，气微香。  
实施例3
    活血止痛软膏的制备。包括以下步骤：
第一步，称取各原料：片姜黄50kg、赤芍50kg、制马钱子70kg、白芷50kg、天花粉70kg；
将片姜黄、白芷加9倍重量水浸泡0.6小时后，用蒸馏法蒸馏9小时，收集挥发油，挥发油保存备用；
第二步，将赤芍、制马钱子、天花粉与提取挥发油后的片姜黄、白芷药渣合并，每次加11倍重量水煎煮三次，每次0.6小时，过滤，滤液合并浓缩，加乙醇醇沉，静置24小时以上，离心，上清液回收乙醇后，备用；
    第三步，将加工提取的各备用中药成分加入膏体基质中：取硬脂酸1kg、单硬脂酸甘油酯7.5kg、白凡士林10kg、羊毛脂1kg、固体石蜡4kg、十六醇8kg、羟苯乙酯0.2kg混合于85℃水浴加热溶解，保温备用；
取甘油13kg、十二烷基硫酸钠2kg、亚硫酸氢钠0.3kg以及第二步的备用滤液，混合，水浴加热至85℃，将水相缓慢加入至备用油相，边加边搅拌，加完后继续保持温度为85℃搅拌5分钟，移至27℃继续搅拌至乳化完成，待温度降至40℃，加入备用挥发油，搅拌均匀，即得。
依据本实例制备的产品为淡黄色乳膏，气微香。  
实施例4
    根据实施例1制作的活血止痛软膏，分别做了早中期对急性钝挫伤骨骼肌组织学观察和内源性胰岛素样生长因子IGF mRNA的影响。活血止痛软膏对兔骨骼肌急性钝挫伤后组织观察及IGF mRNA表达的影响，其实验数据如下：
1.实验材料：
药物：活血止痛软膏、市售青鹏膏批准号Z54020140。
动物：大耳白兔，由浙江中医药大学实验动物中心提供，大耳白兔饲养合格证号为SCXK(浙)2008-0036.
2.实验方法：
取63只大白兔随机分为活血止痛软膏高剂量组、中剂量组、低剂量组、青鹏膏对照组、外伤对照组，每组12只，另取3只做正常对照组。采用“重物自由落体打击法”制作大白兔骨骼肌急性钝挫伤模型。
活血止痛软膏高、中、低剂量组：造模成功4h后在挫伤处涂上定量相应的活血止痛软膏，每天一次；
高、中、低剂量分别是2.08g生药/g软膏；1.04 g生药/g软膏；0.52g生药/g软膏
青鹏膏组：造模成功后4h后在挫伤处涂上定量的青鹏膏；
外伤组：造模成功后只用纱布包扎；正常组：不造模，不处理。
分别在3天、6天、10天、13天处死大白兔，每组每个时间点处死3只兔子，每只兔子在两条后腿腓肠肌取标本，共计6个标本。
3.统计分析：
    高剂量组、中剂量组、低剂量组、青鹏膏对照组、外伤对照组、正常组，采集标本，做HE染色后在光镜下观察，采用统计学分析镜下评分结果。
高剂量组、中剂量组、低剂量组、青鹏膏对照组、外伤对照组、正常组，采集标本，在透射电镜下观察超微结构变化，并进行描述。
高剂量组、中剂量组、低剂量组、外伤对照组、正常组，采集标本，应用RT-PCR技术检测内源性胰岛素样生长因子（IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ）mRNA的表达量，并用统计学分析结果。
4.结果：
（1）光镜组织学观察评分：各个时间点与外伤对照组比较，青鹏膏剂组、活血止痛软膏高、中剂量组（P<0.05）;青鹏膏和活血止痛软膏高剂量组优于活血止痛软膏中剂量组（P<0.05），见表1。
表1 光镜下组织学结果比较（X±S）
组别 n 第3天 第6天 第10天 第13天
正常组 6 _ _ _ _
外伤组 6 3±0 2.83±0.41 2.50±0.55 2.17±0.41
低剂量组 6 2.83±0.41 2.67±0.52 2.33±0.52 2.17±0.41
中剂量组 6 2.50±0.55* 2.17±0.41* 1.83±0.41* 1.33±0.52*
高剂量组 6 2.17±0.41*△ 1.83±0.41*△ 1.33±0.52*△ 0.67±0.52*△▲
青鹏膏组 6 2.17±0.41*△ 1.83±0.41*△ 1.33±0.52*△ 0.67±0.52*△▲
*表示同一时间内与外伤对照组比较P＜0.05；△表示同一时间内与低剂量组比较P＜0.05；▲表示同一时间内与活血止痛软膏中剂量组比较P＜0.05。
（2）电镜超微结构观察结果：青鹏膏组、活血止痛软膏高、中剂量组较低剂量组和外伤组在3天、6天可以更早更多看见激活的肌卫星细胞，在10天和13天青鹏膏组、活血止痛软膏高、中剂量组肌组织趋于正常，活血止痛软膏低剂量组和外伤组有瘢痕形成。
（3）RT-PCR技术检测内源性胰岛素样生长因子（IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ）mRNA的表达量：各个时间点内与外伤对照组比较，活血止痛软膏高、中剂量组（P<0.05）;活血止痛软膏高剂量组优于活血止痛软膏中剂量组（P<0.05）。伤后各组IGF-1和IGF-2含量在3、6、10、13天升高 ，其中第6天达高峰值。
    图1为各组个时间点内源性IGF-ⅠmRNA经RT-PCR产物电泳图，一块胶上插两排梳子，上面一排为目的条带，下面一排为对应的内参，从左到右泳道依次是，1为100bp DNA Ladder Marker，2为正常组，3-6为外伤对照组的3天、6天、10天、13天，7-10为活血止痛软膏剂高剂量组3天、6天、10天、13天，11-14为活血止痛软膏剂中剂量组3天、6天、10天、13天，15-18为活血止痛软膏剂低剂量组3天、6天、10天、13天。
表2 内源性IGF-Ⅰ的mRNA含量（X±S）同一时间点内比较
组别 n 第3天 第6天 第10天 第13天
正常组 6 0.169±0.047 0.169±0.047 0.169±0.047 0.169±0.047
外伤组 6 0.278±0.026☆ 0.411±0.113☆ 0.366±0.111☆ 0.320±0.051☆
低剂量组 6 0.323±0.034☆ 0.425±0.055☆ 0.369±0.048☆ 0.335±0.035☆
中剂量组 6 0.420±0.019☆▲△ 0.547±0.066☆▲△ 0.489±0.056☆▲△ 0.439±0.028☆▲△
高剂量组 6 0.502±0.047☆▲△■ 0.689±0.126☆▲△■ 0.606±0.112☆▲△■ 0.558±0.029☆▲△■
☆表示同一时间内与正常组比较P＜0.05；▲表示同一时间内与外伤对照组比较P＜0.05；△表示同一时间内与低剂量组比较P＜0.05；■表示同一时间内与中剂量组比较P＜0.05。
图2为IGF-Ⅱ的mRNA经RT-PCR产物电泳图，泳道排列同图1。
表3 内源性IGF-Ⅱ的mRNA含量（X±S）
组别 n 第3天 第6天 第10天 第13天
正常组 6 0.131±0.113 0.131±0.113 0.131±0.113 0.131±0.113
外伤组 6 0.380±0.172☆ 0.553±0.133☆ 0.466±0.094☆ 0.401±0.166☆
低剂量组 6 0.412±0.163☆ 0.552±0.119☆ 0.470±0.060☆ 0.410±0.075☆
中剂量组 6 0.632±0.171☆▲△ 0.729±0.192☆▲△ 0.672±0.225☆▲△ 0.608±0.179☆▲△
高剂量组 6 0.755±0.132☆▲△ 0.866±0.160☆▲△ 0.776±0.132☆▲△ 0.687±0.090☆▲△
☆表示同一时间内与正常组比较P＜0.05；▲表示同一时间内与外伤对照组比较P＜0.05；△表示同一时间内与低剂量组比较P＜0.05。
实施例5
    按照实施例2制作的活血止痛软膏，观察对兔骨骼肌急性钝挫伤后内源性IIb型MHC、I型及III型胶原mRNA表达的影响。
1.实验材料：活血止痛软膏、市售青鹏膏批准号Z54020140，和由浙江中医药大学实验动物中心提供的大耳白兔。
2.实验方法：用63只大白兔随机分为活血止痛软膏高剂量组、中剂量组、低剂量组、青鹏膏对照组、外伤对照组，每组12只，另取3只做正常对照组。采用“重物自由落体打击法”制作大白兔骨骼肌急性钝挫伤模型。分别在3天、10天、20天、27天处死大白兔，每组每个时间点处死3只兔子，每只兔子在两条后腿腓肠肌取标本，共计6个标本。
3.结果：
（1）. RT-PCR技术检测内源性IIb型MHC mRNA，第3、10、20天高、中剂量组和青鹏膏组内源性IIb型MHC mRNA表达量高于外伤组、低剂量组（p<0.05）；第10、20天高剂量组对内源性IIb型MHC mRNA表达高于中剂量组（p<0.05）；
图3为Ⅱb型MHC电泳图，一块胶上插两排梳子，上面一排为目的条带，下面一排为对应的内参，从左到右泳道依次是，1为100bp DNA Ladder Marker，2为正常组，3-6为外伤对照组的3天、10天、20天、27天，7-10为活血止痛软膏剂高剂量组3天、10天、20天、27天，11-14为活血止痛软膏剂中剂量组3天、10天、20天、27天，15-18为活血止痛软膏剂低剂量组3天、10天、20天、27天。
表4.Ⅱb型MHC的mRNA含量（                                                
Figure 647329DEST_PATH_IMAGE001
±S）同一时间点内比较
组别 n 3天 10天 20天 27天
正常 6 0.418±0.100 0.418±0.100 0.418±0.100 0.418±0.100
外伤 6 0.600±0.110☆ 0.752±0.140☆ 0.661±0.077☆ 0.618±0.118☆
低剂量 6 0.608±0.118☆ 0.763±0.104☆ 0.639±0.113☆ 0.618±0.110☆
中剂量 6 0.795±0.184☆△○ 0.939±0.108☆△○ 0.834±0.020☆△○ 0.666±0.084☆
高剂量 6 0.812±0.062☆△○ 1.115±0.089☆△○◆ 1.012±0.129☆△○◆ 0.684±0.046☆
青鹏 6 0.803±0.130☆△○ 1.122±0.229☆△○◆ 0.986±0.074☆△○◆ 0.682±0.100☆
☆表示同时间点内与正常组比较P<0.05；△表示同时间点内与外伤组比较P<0.05；○表示同时间点内与低剂量组比较P<0.05；◆表示同时间点内与中剂量组比较P<0.05。
（2）. RT-PCR技术检测内源性I型胶原mRNA的表达量：第3天各组比较没有统计学意义；第10、20天高、中剂量组和青鹏膏组表达量低于外伤组、低剂量组（p<0.05）；第10、20天高剂量组优于中剂量组（p<0.05）。
图4、Ⅰ型胶原的mRNA电泳图，泳道排列顺序同上图3.
表5、Ⅰ型胶原的mRNA含量（ 
Figure 714642DEST_PATH_IMAGE001
±S）同一时间点内比较
组别 n 3天 10天 20天 27天
正常 6 0.421±0.260 0.421±0.260 0.421±0.260 0.421±0.260
外伤 6 0.596±0.260 1.216±0.121☆ 1.092±0.167☆ 0.802±0.138☆
低剂量 6 0.588±0.066 1.273±0.113☆ 1.064±0.175☆ 0.659±0.139☆
中剂量 6 0.448±0.082 0.934±0.185☆△○ 0.854±0.126☆△○ 0.684±0.115☆
高剂量 6 0.403±0.045 0.712±0.089☆△○◆ 0.618±0.064☆△○◆ 0.627±0.116☆
青鹏 6 0.472±0.090 0.702±0.086☆△○◆ 0.621±0.128☆△○◆ 0.630±0.110☆
☆表示同时间点内与正常组比较P<0.05；△表示同时间点内与外伤组比较P<0.05；○表示同时间点内与低剂量组比较P<0.05；◆表示同时间点内与中剂量组比较P<0.05。
RT-PCR技术检测内源性III型胶原mRNA的表达量：第3、10、20天高、中剂量组和青鹏膏组内源性III型胶原mRNA表达低于外伤组、低剂量组（p<0.05）；第3、10、20天高剂量组和青鹏膏组对内源性III型胶原mRNA表达量明显少于中剂量组（p<0.05）。三个检测指标各个时间点青鹏膏组和高剂量组比较没有统计学意义（p>0.05），即作用效果没有差别。
图5、Ⅲ型胶原的mRNA电泳图，泳道排列顺序同图3.
表6、 Ⅲ型胶原的mRNA含量（ 
Figure 466697DEST_PATH_IMAGE001
±S）同一时间点内比较
组别 n 3天 10天 20天 27天
正常 6 0.504±0.099 0.504±0.099 0.504±0.099 0.504±0.099
外伤 6 1.314±0.129☆ 1.439±0.083☆ 1.337±0.102☆ 0.847±0.242☆
低剂量 6 1.299±0.276☆ 1.459±0.161☆ 1.320±0.194☆ 0.847±0.254☆
中剂量 6 0.980±0.261☆△○ 1.166±0.217☆△○ 1.072±0.173☆△○ 0.821±0.229☆
高剂量 6 0.751±0.123☆△○◆ 0.805±0.122☆△○◆ 0.782±0.306☆△○◆ 0.778±0.273☆
青鹏 6 0.749±0.123☆△○◆ 0.830±0.245☆△○◆ 0.794±0.265☆△○◆ 0.782±0.105☆
☆表示同时间点内与正常组比较P<0.05；△表示同时间点内与外伤组比较P<0.05；○表示同时间点内与低剂量组比较P<0.05；◆表示同时间点内与中剂量组比较P<0.05。
    上述实验证明，本发明针对骨骼肌急性钝挫伤瘀肿热痛进行合理组方，使用活血、化瘀、清热、凉血止痛类中药，有利于局部活血化瘀，消肿止痛，清热凉血生肌，能降低进行钝挫伤后光镜组织学评分，能促进肌卫星细胞激活和内源性IGF mRNA上调，可有效的促进骨骼肌急性钝挫伤后IIb型MHC的mRNA表达的提高，同时降低骨骼肌急性钝挫伤后I、 III型胶原mRNA的表达。在响组织学评分、IIb型MHCmRNA，I、 III型胶原的mRNA表达方面与青鹏膏剂效果无明显差异。

Claims (7)

1.活血止痛软膏，包括膏体基质，其特征在于：膏体基质中含有下述重量配比原料制成的药剂：片姜黄10-50份、赤芍10-50份、制马钱子30-70份、白芷10-50份、天花粉30-70份。
2.根据权利要求1所述的活血止痛软膏，其特征在于：膏体基质中含有下述重量配比原料制成的药剂：片姜黄20-40份、赤芍20-40份、制马钱子40-60份、白芷20-40份、天花粉40-60份。
3.根据权利要求2所述的活血止痛软膏，其特征在于：膏体基质中含有下述重量配比原料制成的药剂：片姜黄30份、赤芍30份、制马钱子50份、白芷30份、天花粉50份。
4.根据权利要求1所述的活血止痛软膏的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
第一步，按重量配比称取各原料，将片姜黄、白芷加水浸泡，用蒸馏法蒸馏收集挥发油，挥发油保存备用；
第二步，将赤芍、制马钱子、天花粉与提取挥发油后的片姜黄、白芷药渣合并，加水煎煮过滤，滤液浓缩醇沉，离心，回收乙醇，滤液备用；
第三步，将加工提取的各备用中药成分，即备用的挥发油和滤液，加入膏体基质中。
5.根据权利要求4所述的活血止痛软膏的制备方法，其特征在于：所述的片姜黄、白芷加7-9倍重量水浸泡0.4-0.6小时后，用蒸馏法蒸馏7-9小时，收集挥发油，挥发油保存备用；所述的赤芍、制马钱子、天花粉与提取挥发油后的片姜黄、白芷药渣合并，每次加9-11倍重量水煎煮三次，每次0.4-0.6小时，过滤，滤液合并浓缩，加乙醇醇沉，静置24小时以上，离心，上清液回收乙醇后备用。
6.根据权利要求4所述的活血止痛软膏的制备方法，其特征在于：所述的片姜黄、白芷加8倍重量水浸泡0.5小时后，用蒸馏法蒸馏8小时，收集挥发油，挥发油保存备用；所述的赤芍、制马钱子、天花粉与提取挥发油后的片姜黄、白芷药渣合并，每次加10倍重量水煎煮三次，每次0.5小时，过滤，滤液合并浓缩，加乙醇醇沉，静置24小时以上，离心，上清液回收乙醇后备用。
7.根据权利要求4所述的活血止痛软膏的制备方法，其特征在于：将各备用中药成分按下列步骤加入膏体基质中：
按重量配比取硬脂酸1份、单硬脂酸甘油酯7.5份、白凡士林10份、羊毛脂1份、固体石蜡4g、十六醇8份、羟苯乙酯0.2份混合于85℃水浴加热溶解，保温备用；
取重量配比甘油13份、十二烷基硫酸钠2份、亚硫酸氢钠0.3份以及所述的备用滤液，混合，水浴加热至85℃，将水相缓慢加入至备用油相，边加边搅拌，加完后继续保持温度为85℃搅拌5分钟，移至室温继续搅拌至乳化完成，待温度降至20℃-40℃，加入备用挥发油，搅拌均匀，即得。
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