CN102600302B - 生物利用度增强型儿茶素口服液的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种生物利用度增强型儿茶素口服液的制备方法，包括如下步骤：1)、在儿茶素EGCG中加入超纯水，均匀混合后，得儿茶素EGCG浓度为25～35mg/mL的儿茶素EGCG水溶液；2)、在儿茶素EGCG水溶液中加入PEG400、作为抗氧化剂的亚硫酸钠、作为矫味剂的蔗糖，得生物利用度增强型儿茶素口服液；PEG400在生物利用度增强型儿茶素口服液的质量浓度为10～30％，亚硫酸钠和蔗糖在生物利用度增强型儿茶素口服液的质量浓度均分别为0.25～0.5％。与传统儿茶素制剂相比，本发明所得的口服液显著提高了儿茶素在机体内的吸收量。
Description
技术领域
儿茶素为茶叶中最主要的天然活性成分，具有多种药理和保健活性。本发明涉及一种能够提高儿茶素生物利用度的口服液的制备方法及其生物利用度的评价。
背景技术
茶多酚(Tea Polyphenols，TP)是茶叶中多酚类及其衍生物的总称，主要有儿茶素、黄酮类、花青素和酚酸等物质组成，其中儿茶素类占茶多酚总量的60％-90％。儿茶素具有很强的生物活性，大量研究均表明儿茶素具有抗氧化清除自由基、抗心血管疾病、抑菌消炎等多种保健和药理作用。但是制约着儿茶素或茶多酚高效利用的关键技术问题一直没有得到有效解决，其关键问题是儿茶素类化合物在机体内的胃肠道生物膜转运率较低，从而导致较低的生物利用度。因此，通过改变儿茶素类保健品的剂型来增强其生物利用度，必将为儿茶素的深入研究与开发奠定坚实的基础。
目前由于经济快速发展、人们生活节奏的加快，加之生活水平的提高、饮食结构的改变，导致的各种心脑血管慢性病逐渐呈现升高的趋势，往往相伴有高血压、高血脂、高血糖等现代“三高”疾病。由于生活和工作压力过大，往往导致内分泌发生紊乱，从而导致机体机能和各种复合疾病进一步发生和加剧，大部分人都处于亚健康状态。加之各种应酬增多、抽烟、酗酒、熬夜、长期处在电脑辐射状态下，使得人们在不知不觉中体内积聚了大量的自由基，同时可能会慢慢滋生各种疾病。因此，开发符合现代人生活方式并能够快速清除体内自由基的新型保健品，具有重要意义和市场前景，而高效、低毒的新型儿茶素类保健品的开发可以满足其需求。
如今由于工农业的快速发展导致的环境污染、气候变化等对人们疾病的影响也已逐渐显现，尤其在我国一些经济相对较发达的地区，由于化工厂、印染厂等高污染企业的大量污染物排放，已经对当地饮用水源产生了严重污染，同时随着水域迁移，使得污染物在土壤中富集，并可能被农作物吸收，进而随食物链在消费者体内富集，最终将会引起人们疾病发生。因此，加强保健、增强体质并有效清除体内的毒素成为现代人抵抗各种慢性疾病的主要手段。自然环境的改变及由此衍生的疾病，必将为保健品市场提供更广阔的空间和市场需求。而儿茶素类化合物具有排除体内有毒、有害物质(如清除重金属、自由基等)的能力，因此儿茶素类保健品具有良好的研发前景。
目前与儿茶素或茶多酚相关的保健品层出不穷，传统保健品剂型有片剂、胶囊，新型保健品剂型有微球、微囊、脂质体、环糊精包合剂及固体分散剂等，其中部分剂型(如茶多酚片剂、茶多酚胶囊等)在临床进行了推广和应用，但临床效果并不十分理想，而且其市场前景也较堪忧。结合本实验室前期研究积累和大量文献报道可知，由于儿茶素类化合物极性较大、水溶性较高，生物膜渗透性较差，加之小肠上皮细胞膜中转运蛋白(p-糖蛋白、多药耐药相关蛋白等)可能对儿茶素发挥“外排”作用，从而使得该类化合物口服后难以通过小肠上皮细胞进入全身血液循环，以致儿茶素类化合物在机体内的生物利用度较低，大部分在肠道中被各种酶或微生物所代谢和降解，或随粪便排泄到体外，从而使得该类化合物难以在体内发挥有效作用。因此，如何提高儿茶素类化合物生物膜转运速率，从而提高其生物利用度和增强儿茶素类化合物在作用靶部位的富集，是解决限制儿茶素大规模应用这一重要“瓶颈”的关键共性问题。目前在提高儿茶素生物膜转运方面的研究主要集中在儿茶素衍生化物的制备和应用上，近来年也有学者开展了儿茶素/茶多酚纳米粒制剂或注射用纳米乳剂的研究，但此类研究主要是针对临床药物的开发进行的有益探索，此类剂型并不适合保健品的开发和临床应用。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种生物利用度增强型儿茶素口服液的制备方法。
为了解决上述技术问题，本发明提供一种生物利用度增强型儿茶素口服液的制备方法，包括如下步骤：
1)、在儿茶素EGCG中加入超纯水，均匀混合后，得儿茶素EGCG浓度为25～35mg/mL的儿茶素EGCG水溶液；
2)、在儿茶素EGCG水溶液中加入PEG(聚乙二醇)400、作为抗氧化剂的亚硫酸钠、作为矫味剂的蔗糖，得生物利用度增强型儿茶素口服液；
PEG400在生物利用度增强型儿茶素口服液的质量浓度为10～30％，亚硫酸钠和蔗糖在生物利用度增强型儿茶素口服液的质量浓度均分别为0.25～0.5％。
作为本发明的生物利用度增强型儿茶素口服液的制备方法的改进：儿茶素EGCG水溶液中儿茶素EGCG浓度为30mg/mL。
作为本发明的生物利用度增强型儿茶素口服液的制备方法的进一步改进：PEG400在生物利用度增强型儿茶素口服液的质量浓度为30％。
本发明是通过筛选辅料，从中筛选出能够提高儿茶素生物利用度的口服吸收促进剂，从而制备出生物利用度增强型儿茶素口服液，然后对该口服液在实验动物体内口服生物利用度进行评价。
本发明利用实验动物整体小肠吸收模型，通过定量检测不同吸收促进剂对儿茶素EGCG在小肠的吸收量，筛选一种能够提高儿茶素生物利用度，并能够与儿茶素以适当比例混合，配成口服液。
在本发明中，实验动物血浆等生物样品中儿茶素EGCG的定量检测方法参照《Simultaneous determination of the major active components of tea polyphenols in rat plasmaby a simple and specific HPLC assay》所建立的分析方法加以操作。
例如为：向0.3mL空白血浆中加入儿茶素EGCG标准品，配制浓度范围为0.1-200mg/L的儿茶素EGCG标准样品，向上述标准样品中加入30μL质量浓度20％的抗坏血酸，混合后加入2mL乙酸乙酯，振荡1min，6000r/min高速离心5min，取出全部上层有机相(位于上层)，离心后所剩的残渣用2mL乙酸乙酯重复萃取一次，合并两次萃取有机相，于45℃水浴中弱氮气流吹干；氮气吹干后的所得物用0.1mL体积浓度20％的乙腈水溶液溶解，超声振荡后，18000r/min高速离心3min，取20μL上清液HPLC进样分析。
上述HPLC具体为：
以日本岛津高效液相色谱，两元高压泵，紫外/可见检测器，大连伊利特Hypersil BDSC18柱(5μm，250mm×4.6mm)，流动相为乙腈∶0.1％(质量比)柠檬酸水溶液＝10∶90(v/v)；柱温30℃，波长280nm；流速为1.0mL·min-1；进样量为20μL。
根据HPLC检测结果，以峰面积(Y)为纵坐标，质量浓度(X)为横坐标，绘制标准曲线，求出曲线方程和相关系数(r)。同时制备含儿茶素EGCG曲线范围内高、中、低浓度血浆样品0.5，5.0，50.0mg/L作为质控样品(QC)，分别按照上述样品处理方法处理后进样分析，每个浓度样品重复5次，以样品中EGCG峰面积与直接溶于流动相下所测峰面积之比，计算高、中、低3种浓度下方法回收率。比较以上样品于日内5次和日间5次测定的峰面积的变化，计算日内精密度和日间精密度。
具体结果如下：所得处理血浆中EGCG在0.1-200mg/L浓度范围内标准曲线为Y＝12037x+560.3(r＝0.9999)，在标准曲线范围内高、中、低浓度儿茶素EGCG回收率均大于85％以上，日内精密度和日间精密度均小于8％，见表1。
表1.血浆中EGCG的回收率和精密度(n＝5)
本发明在对儿茶素小肠吸收增强作用研究的基础上，筛选出良好的儿茶素保健品新配方，从而制备出儿茶素新型保健制品，充分发挥儿茶素的生物活性，服务于临床。
本发明的生物利用度增强型儿茶素口服液的日常口服用量为：50～100ml/人.天。
综上所述，本发明的生物利用度增强型儿茶素口服液制备及评价，采用了RP-HPLC方法分析检测了血浆等生物样品中儿茶素EGCG的准确、定量检测手段，检测限达到微克级，完全能够满足小鼠血样中儿茶素EGCG的检测。在口服液配制中，采用辅料PEG400作为儿茶素在小肠中的吸收促进剂，能够明显促进儿茶素通过小肠上皮进行血液循环，与传统儿茶素制剂相比，显著提高了儿茶素在机体内的吸收量。
附图说明
下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。
图1是儿茶素EGCG的标准色谱图；其中：峰1为EGCG色谱峰；
图2是空白血浆的色谱图；
图3是小鼠服用本发明所述的儿茶素口服液(例如为实施例1)后的血浆色谱图；其中峰1为儿茶素EGCG色谱峰。
图4是小鼠分别服用本发明所述的儿茶素口服液(例如为实施例1)与市售片剂组(对比例4)后的EGCG浓度——时间曲线图；
图5是小鼠服用本发明所述的儿茶素口服液(例如为实施例1)与生理盐水对照组(对比例1)后的EGCG浓度——时间曲线图；
具体实施方式
实施例1、一种生物利用度增强型儿茶素口服液的制备方法，依次进行如下步骤：
1)、在洁净容量瓶中加入儿茶素EGCG和超纯水，均匀混合(超声振动，从而使儿茶素EGCG溶解)后，得儿茶素EGCG浓度为30mg/mL的儿茶素EGCG水溶液；
2)、在儿茶素EGCG水溶液中加入PEG400、作为抗氧化剂的亚硫酸钠、作为矫味剂的蔗糖，得生物利用度增强型儿茶素口服液(以下简称口服液)；
PEG400在口服液的质量浓度为30％，亚硫酸钠在口服液的质量浓度为0.25％，蔗糖在口服液的质量浓度为0.5％。
实施例2、一种生物利用度增强型儿茶素口服液的制备方法，
PEG400在口服液的质量浓度为30％，亚硫酸钠在口服液的质量浓度为0.4％，蔗糖在口服液的质量浓度为0.4％；其余同实施例1。
实施例3、一种生物利用度增强型儿茶素口服液的制备方法，
PEG400在口服液的质量浓度为30％，亚硫酸钠在口服液的质量浓度为0.5％，蔗糖在口服液的质量浓度为0.25％；其余同实施例1。
实施例4、一种生物利用度增强型儿茶素口服液的制备方法，
PEG400在口服液的质量浓度为10％；其余同实施例1。
实施例5、一种生物利用度增强型儿茶素口服液的制备方法，
PEG400在口服液的质量浓度为40％；其余同实施例1。
对比例1、一种儿茶素口服液的制备方法，
用生理盐水取代PEG400，其余同实施例1。即为图5中所述的生理盐水对照。
对比例2、一种儿茶素口服液的制备方法，
将PEG400改成PEG200，其余同实施例1。
对比例3、一种儿茶素口服液的制备方法，
将PEG400改成PEG600，其余同实施例1。
对比例4、市售的茶多酚片剂(主要茶多酚和淀粉组成的，不含PEG400)；将其碾碎后溶于水制成儿茶素溶液。
将上述实施例1～实施例5、对比例1～对比例4进行如下实验：
1)实验动物的选择：
360只SPF级ICR雄性小鼠购于浙江省医学科学院实验动物中心，合格证号SCXK(浙)20080033，体重28±2g，随机分为9组，每组40只，分别作为实施例1至实施例5和对比例1至对比例4的实验。同时每个实验组的40只小鼠又分别分为8组，每组5只小鼠，即5个重复。于实验前适应性养殖一周，口灌前12h禁食、不禁水，按照300mg儿茶素/kg体重给小鼠口灌上述实施例1～实施例5、对比例1～对比例4配制的儿茶素口服液，从而相应的获得实验组1～实验组5以及对照组1～对照组4。
2)反映吸收速度和程度参数的计算：
将上述实验组和对照组，分别口灌儿茶素口服液，分别于口灌后5min、10min、15min、30min、60min、120min、180min和240min眼球取血，每个采血时间点取5只小鼠，然后将所取血浆于肝素化离心管中，6000r/min离心后，取0.3mL血浆于10mL离心管中；按照上述HPLC法进行检测分析：
将所测血浆中儿茶素EGCG峰面积代入上述标准曲线方程(Y＝12037x+560.3(r＝0.9999))中，计算血浆中儿茶素EGCG浓度，利用中国药理学会编制的3P97药物动力学软件计算血浆中儿茶素EGCG浓度一时间曲线下面积(AUC)，得出不同实验组和对比组的儿茶素口服液中的儿茶素EGCG的吸收效果。具体如表2所示。
表2、
| AUC(mg·min/L) | |
| 实验组1 | 9505.56 |
| 实验组2 | 9489.58 |
| 实验组3 | 9469.69 |
| 实验组4 | 5748.21 |
| 实验组5 | 9382.14 |
| 对照组1 | 1683.90 |
| 对照组2 | 7956.75 |
| 对照组3 | 6898.63 |
| 对照组4 | 294.08 |
上述实验说明：PEG400的浓度为10％时，对儿茶素的吸收促进功能较弱。但当PEG400的浓度为40％时，相对于PEG400的浓度为30％而言，对儿茶素的吸收促进功能不升反降。当PEG400被PEG200或者PEG600取代时，对儿茶素的吸收促进功能都导致大大降低。
最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明中PEG400在10％-30％浓度范围内促进吸收的具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。
Claims (3)
1.生物利用度增强型儿茶素口服液的制备方法，其特征是包括如下步骤：
1)、在儿茶素EGCG中加入超纯水，均匀混合后，得儿茶素EGCG浓度为25～35mg/mL的儿茶素EGCG水溶液；
2)、在所述儿茶素EGCG水溶液中加入PEG400、作为抗氧化剂的亚硫酸钠、作为矫味剂的蔗糖，得生物利用度增强型儿茶素口服液；
所述PEG400在生物利用度增强型儿茶素口服液的质量浓度为10～30％，亚硫酸钠和蔗糖在生物利用度增强型儿茶素口服液的质量浓度均分别为0.25～0.5％。
2.根据权利要求1所述的生物利用度增强型儿茶素口服液的制备方法，其特征是：所述儿茶素EGCG水溶液中儿茶素EGCG浓度为30mg/mL。
3.根据权利要求1或2所述的生物利用度增强型儿茶素口服液的制备方法，其特征是：所述PEG400在生物利用度增强型儿茶素口服液的质量浓度为30％。
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| CN101167719A (zh) * | 2007-11-02 | 2008-04-30 | 广东省实验动物监测所 | 表没食子儿茶素没食子酸酯微囊颗粒及其制备工艺 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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