CN102586011B - 一种利用磷脂酶a2进行植物油脂脱胶的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种利用磷脂酶A2进行植物油脂脱胶的方法，包括以下步骤：A、将毛油加热到40~50℃之间；B、加入45%（W/W）的柠檬酸溶液，至终浓度为0.01%~0.02%，搅拌（≥40rpm）或均质10秒钟后保温30分钟；C、加入毛油油重1%~5%的水，搅拌均匀；D、加入毛油油重0.005%~0.015%（W/W）的酶，搅拌反应1-3小时；离心或自然沉降分离脱胶油和胶质沉淀物。方法易行，操作简便，采用磷脂酶A2进行脱胶的同时还能得到价值较高的酶解磷脂，降低了能源消耗，采用此方法直接进行脱胶的可以是含磷量很高的压榨（或浸出）的毛油，也可以是含磷量相对较低的水化脱胶油，适应面更广。
Description
技术领域
本发明属于属油脂加工技术领域，更具体涉及一种植物油脂酶法脱胶物理精炼的方法，适用于大豆油、菜籽油、玉米油、棕榈油、葵花油、稻米油、花生油等植物油脂精炼过程中磷脂胶质的去除。
背景技术
以压榨、浸出、水剂或熔炼得到的未经精炼的动植物油脂称为粗脂肪，俗称毛油。毛油的主要成分是甘油三酯，即中性油(也称中油)。此外还存在数量不等的非甘油三酯的成分，主要有五类，即胶溶性物质、脂溶性物质、水分、机械杂质和微量物质。
在这些非甘油三酯成分中，胶溶性的磷脂和脂溶性的游离脂肪酸含量较大，对油脂的品质的影响也最大。
磷脂以溶胶的形式存在于毛油中不仅影响油脂的稳定性，而且影响油脂精炼和深加工的工艺效果，例如在碱炼过程中会促使乳化，增加操作困难，增大炼耗和辅助剂的耗用量，在脱色工艺中，会增大吸附剂的耗用量，降低脱色效果，未经脱胶的油脂无法进行蒸馏脱酸(物理精炼)和脱臭操作，也无法进行深加工，是在精炼过程中必须从油脂中除去的物质，此工序即油脂脱胶。
油脂脱胶的方法有水化脱胶、酸炼脱胶、吸附脱胶、热凝聚脱胶、化学试剂脱胶等，目前使用较普遍的是水化脱胶和碱炼脱胶，除了这些常规的理化方法之外，1991年Lurgi公司开发了酶法脱胶，开创了一种新的脱胶工艺。
毛油中的游离脂肪酸不仅会产生刺激性气味影响油脂的风味，不饱和脂肪酸对热和氧的稳定性差，促使油的氧化酸败，还会使磷脂、糖脂、蛋白质等胶溶性物质和脂溶性物质以及水在油脂中的溶解度，游离脂肪酸还是油脂、磷脂水解的催化剂，会导致油脂的理化稳定性降低，也是在精炼过程中必须从油脂中除去的物质，此工序即油脂脱酸。
脱酸方法有碱炼脱酸、蒸馏脱酸、溶剂萃取脱酸及酯化脱酸等，其中应用最广泛的是碱炼脱酸和蒸馏脱酸。
一、常用的脱胶脱酸方法：
1、水化脱胶
水化脱胶是利用磷脂等胶溶性物质的亲水性，将一定量的热水或稀碱、食盐、磷酸等电解质水溶液，在搅拌下加进热毛油中，使其中的胶溶性物质吸水凝聚沉降分离的一种脱胶方法，在水化脱胶中，能被凝聚沉降的物质以磷脂为主。水化胶团的稳定程度和絮凝状况决定分离效果和水化油脚的含油量，加水量、油温、水温、操作温度、混合强度、作用时间、电解质的种类和用量、油中胶体分散相均匀分布的程度等都会影响操作效果。
毛油中含有不同类型的磷脂，可分为水化磷脂(HP)和非水化磷脂(NHP)，水化磷脂(HP)与水接触时易形成水合物从水中析出，但它们的水化速率有差别。非水化磷脂(NHP)则不易形成水化胶团析出。在毛油中大约有150ppm的磷是以非水化磷脂(NHP)的形式存在，这些非水化磷脂(NHP)即使经过16次水洗也不能脱除。非水化磷脂的产生与原料的成熟度、贮藏、运输和加工工艺相关。
水化脱胶能出去毛油中的大部分磷脂，但毛油中的非水化磷脂(NHP)无法去除，水化脱胶油中的含磷量与毛油中的非水化磷脂(NHP)的含量有关。
2、碱炼脱胶脱酸
目前广泛采用烧碱(NaOH)进行碱炼，可水解磷脂产生游离脂肪酸，并中和绝大部分的由磷脂水解产生的和毛油中原有的游离脂肪酸，生成的脂肪酸钠盐(钠皂)在油脂中成为絮状物而沉降，钠皂也是一种表面活性物质，吸附和吸收能力较强，可以将相当数量的其他杂质也带入沉降物中，因此，碱炼具有脱酸、脱胶和部分脱色的作用。但烧碱同时也能与油脂发生皂化反应，生成钠皂，引起中性油的损失，降低出油率。
3、蒸馏脱酸
蒸馏脱酸，也称物理精炼，是利用游离脂肪酸和甘油三酯的挥发度不同，在高温高真空度条件下，借助水蒸气蒸馏脱除脂肪酸的工艺过程，蒸馏脱酸通常与脱臭同时进行。物理精炼要求油脂的含磷量小于10ppm。
不同品种的天然油脂的脂肪酸组成中，十八碳脂肪酸都占有较大的比例，以硬脂酸和甘油三硬脂酸酯为例，在240℃，硬脂酸的蒸汽压为2.13kPa，而甘油三硬脂酸酯的蒸汽压只有5.33×10-5kPa，相对挥发度达40,000，因此，用蒸馏的方法很容易将游离脂肪酸从油脂中分离出来。如采用分馏工艺，还可以将脂肪酸和其他物质(如维生素E等)分别捕集，提高油脂加工的综合效益。
二、磷脂、溶血磷脂和脂肪酸
磷脂和游离脂肪酸存在于油脂中会降低油脂的品质，影响油脂的稳定性，在油脂加工中需要从油脂中除去，但磷脂和游离脂肪酸在其他领域有广泛的用途。
从磷脂的结构式中可看出(见图1)：磷脂具有两亲结构，2个脂肪酸链为疏水基，磷酸及胆碱基团为亲水基。因此磷脂是一种具有表面活性的物质。具有一系列界面和胶体性质。
磷脂的另一重要特性是其生理活性，磷脂是一种重要的生命物质，是细胞膜的构成物质之一，起着代谢作用和结构形成作用。磷脂的这种作用与磷脂的两亲结构密切相关。细胞膜的基本骨架是磷脂的双分子膜。磷脂分子以亲水基的极性头在外侧，而疏水基埋在内部。膜中磷脂呈液晶结构，这种结构允许离子传递。
磷脂是一种天然的两性表面活性剂。同时又是一种重要的生命物质。在人体的新陈代谢过程中起着重要的作用，所以在食品、医药、饲料及其它工业部门得到了广泛的应用。
1、磷脂应用于食品工业
磷脂由于具有安全性、乳化性及生理活性等性质而在食品中得到广泛应用。磷脂在一般食品中的应用包括：人造奶油、糖果、小食品、汤料、速溶食品、焙烤食品、仿造日用品、肉/畜/海鲜加工食品及膳食应用。磷脂作为乳化剂，能使油相和水相形成稳定的乳胶体，在特定的工艺条件下，磷脂能使人造奶油形成W/O(油包水)型或O/W(水包油)型两大类产品。磷脂还是重要的乳化剂之一。在起酥油中添加磷脂作为乳化剂，将这种起酥油添加到面团中后，使食品更具有如可塑性、吸水性、乳化分散性等优点。
在面包、饼干和糕点的面团中添加磷脂，利用其乳化性质可改进面团的吸水作用，使面料、水、油脂易于混合均匀，增强起酥性，增大制品的体积，提高营养成分含量，使食品酥脆、美味可口。
各种糖果制品中，加入磷脂有助于糖浆和油脂的快速乳化，可提高润湿效果，使糖果外表光滑而不粘，还降低了原料的黏度，有利于操作，增加食品的均匀度和稳定性，而且又是很好的脱模剂。例如在生产巧克力所用的可可粉、砂糖、奶粉等原料中，适量的添加磷脂可控制黏度，更主要的是 能使产品结晶良好，产品的口溶性及口感性良好，能有效地控制巧克力在储存时或在货架上发生冒霜现象。在粉末或结晶饮料方面添加适量磷脂，可产生乳化和润湿作用。
在冰激淋生产方面，磷脂可作为乳化剂和稳定剂。在豆奶(或豆浆)升温时，磷脂可作为去沫剂防止外溢。磷脂在生产水包油型乳状液饮料时，是良好的乳化剂。
2、磷脂应用于医药工业
磷脂是一种天然的两性表面活性剂，是细胞膜的重要组成成分，在生理代谢过程中，起着非常重要的作用。在医药中的应用主要是利用了其安全性和乳化性及生理活性。由于其安全性和乳化性常作为水不溶性药品的乳化剂和载体，有时也作为治疗某些疾病的辅助治疗药物。
磷脂可作为脂肪乳的乳化剂。静脉注射脂肪乳输液，是一种浓缩的肠外高能量营养液。用卵磷脂为乳化剂，经乳化制成水包油型乳化剂用于人体静脉输液，能完全被人体所吸收，对恢复健康、增强体力有一定作用。
磷脂脂质体是药物载体，可制备抗癌药物的新剂型。由于脂质体的化学组成和人体的细胞膜组成接近，故药物渗透性强。脂质体临床应用在肺癌和胃癌方面疗效显著。
大豆磷脂可提供胆碱和必须的脂肪酸(如亚油酸、亚麻酸)。胆碱可增强肝细胞及肝组织的机能及提高肝组织的再生能力。
磷脂对脂肪的代谢起重要作用，它是脂肪出入细胞的携带者，能帮助脂肪弥散和氧化，促进脂质的代谢。
磷脂有促使神经细胞内部结构生长旺盛的作用。由于磷脂类有增强神经组织的作用，并能调节高级神经活动过程，因此，磷脂可应用于治疗神经衰弱和减轻神经紊乱症状，在健脑方面经临床应用疗效显著。磷脂可以补充脑发育最旺盛时期的必需营养物质，对促进神经细胞生长有很好的作用。
磷脂在人体血浆内起着乳化剂的作用，影响胆固醇及脂肪的运输和沉积，能够使动脉粥样硬化斑块消失。故食用磷脂可降低人体内胆固醇含量。
磷脂有加强细胞的基本结构和促进新表皮细胞生长的作用，故磷脂有增进伤口愈合的作用。以磷脂制备皮肤药物，可用来治疗皮肤病如脚癣、牛皮癣等。
3、磷脂应用于饲料工业
磷脂可以作为畜禽动物及水产养殖饲料的营养添加剂，用于饲料工业。在饲料中添加磷脂，能促进动物的神经组织、内脏、骨髓、脑的发育，使畜禽动物及淡水鱼类增产，可节约蛋氨酸的消耗。在饲料中添加磷脂，可补充动物机体内的能量消耗，提高了饲料的营养价值。在蛋鸡饲料中添加磷脂，对鸡的消化吸收有促进作用，能提高蛋鸡的产蛋量。
4、磷脂应用于皮革工业
磷脂来源于动植物油脂，其分子结构与天然油脂相似，同属甘油酯类，且又具有表面活性剂作用，因此，加脂工序便成为其在皮革生产中的主要应用领域。磷脂不仅具有天然油脂的加脂性能，而且具有明显的填充性。磷脂分子中含有氨基、磷酸根等活性基团，能与皮革纤维结构中的氨基、羧基等活性基团作用，同胶原蛋白形成复合体，产生一定的化学结构，因而具有加脂和填充效果。另外，因为磷脂是脂肪酸的衍生物，具有油脂的特性。因此，在一定条件下，易于皂化、卤化、硫酸化或磺化、氧化等得到各种衍生物，使之更好地应用于皮革加脂当中去。因此，磷脂在皮革中的应用还有很大的潜力。
5、磷脂应用于化妆品工业
随着经济的发展和人民生活水平的提高，人们对化妆品的安全性有着越来越高的要求，磷脂作为一种天然的两性表面活剂，具有一定的乳化性，同时作为细胞膜的重要组成成分，在生理代谢过程中起着非常重要的作用。磷脂具有水包油(O/W)和油包水(W/O)型的乳化性质，同时磷脂对人体细胞的正常活动和新陈代谢起着重要作用，对皮肤有很好的协调和渗透性。在化妆品中适量添加磷脂，对滋润皮肤、防止皮肤干燥有一定作用。磷脂的安全性及其营养功能，是其在化妆品中受到欢迎的主要原因。
6、磷脂在其它行业的应用
在洗涤剂中添加磷脂，可降低溶液的表面张力，增加润湿能力，提高洗涤效果。磷脂添加在涂料中，可作为乳化剂和分散剂，对防止颜料沉淀及稀释分层有一定作用，可以增进粉刷性能，使粉刷面平滑、柔美光亮、涂膜均匀，提高油漆质量。在天然橡胶、合成橡胶、硬橡胶和再生橡胶中添加磷脂，有软化、分散、促进硫化及防止老化功能。磷脂在纺织、印染中可用作乳化剂、渗透剂、扩菜剂、抗氧剂等，也可用于纺织品的洗涤、脱胶、丝光处理、染色等工艺中。磷脂还可以在铸造金属件时作为砂子的粘结剂，在农药方面可作为制剂的乳化分散剂。粉状磷脂用于录音机、彩色胶卷、荧光屏等方面是一种很好的分散剂。
溶血磷脂(Lysophospholipids)也称酶解磷脂，它是由磷脂失去一个脂肪酸基团所形成的磷脂的统称。是一种重要的生命物质。在人体的新陈代谢过程中起着重要的作用。溶血磷脂可以由磷脂酶A1(PLA1)或磷脂酶A2(PLA2)水解磷脂制得(见图2)。天然仅少量存在。一般稍溶于水，也溶于乙醇、甲醇、氯仿。
磷脂酶A1水解磷脂的切去C1位的脂肪酸，但这种结构不稳定，C2位的脂肪酸会自然移位到C1位，形成较稳定的结构。在天然磷脂的稳定结构中，通常C1位是饱和脂肪酸，C2位是不饱和脂肪酸，所以磷脂酶A1水解磷脂时切下C1位的饱和脂肪酸，制得的溶血磷脂C2位连接的通常是不饱和脂肪酸，并且在发生异位反应时只能得到部分这样的C1溶血磷脂，C2位上的脂肪酸转移至C1位有继续被水解的倾向，生成甘油酰磷脂和脂肪酸。
磷脂酶A2水解磷脂的切去C2位的不饱和脂肪酸，不需要进行异位反应，直接得到结构稳定的C1连接饱和脂肪酸的溶血磷脂(见图2)，所以，用磷脂酶A2水解磷脂制备溶血磷脂优于用磷脂酶A1。
从化学结构可以看出溶血磷脂在其分子结构中除保留了普通磷脂的亲水、亲油基团外，又因疏水基团的减少而极大地增加了它的亲水性能，因此，溶血磷脂不仅在一般条件下乳化性能远远优于普通磷脂，在高温、低pH、高离子浓度环境下更具有普通磷脂无法比拟的乳化稳定性，同时还具有广谱抑菌作用，在食品、医药精细化工等诸多行业都可以替代普通磷脂使用，且用量少、效果好。
1、溶血磷脂应用于食品行业
溶血磷脂可以代替普通磷脂作为乳化剂和乳化分散剂使用，添加量少且效果优于普通磷脂，溶血磷脂添加到米面制品中，阻止抗性淀粉的形成。溶血磷脂还具有广谱抗菌性能，应用含溶血磷脂的添加剂作为食品的表面抗菌涂层，可以延长食品的货架期。在食品中添加溶血磷脂可以提高玉米黄素和类胡萝卜素的吸收利用率，在蜂胶中添加溶血磷脂可加工成水溶性蜂胶透明溶液作为保健品食用。
2、溶血磷脂在化妆品行业的应用
溶血磷脂分子的榫型结构有利于其深入细胞膜，改善细胞的通透性，加速皮肤的新陈代谢，使受损的表皮细胞更替加快。对恶劣环境下作业的工人护肤特别有效，能起到调节皮肤呼吸，舒展皮肤皱纹，改善粗糙结构的作用。含溶血磷脂的润肤产品、香波、沐浴露、增白霜乳化体系稳定，对 皮肤无过敏刺激。
3、溶血磷脂在医学上的应用
研究发现，加入毫摩尔数量级的溶血磷脂就可以影响艾滋病病毒HIV-1的糖蛋白外壳与宿主细胞的融合，从而抑制病毒的感染。溶血磷脂与超氧化物歧化酶(SOD)结合使用，可以用于治疗狼疮和肾炎。
溶血磷脂的衍生物如烷基溶血磷脂已经发展成为一类新兴的抗肿瘤药物，它能诱导不同肿瘤细胞系中的凋亡细胞死亡，从而防治肿瘤。
溶血磷脂不仅可以用于护肤，还可用于皮肤病的治疗，含凡士林10％、溶血磷脂0.3％、酪蛋白钠0.3％和其他成分的霜剂对皮肤瘙痒症，特别是因遗传性异位过敏性皮炎而引起的瘙痒非常有效。此外，溶血磷脂的乳化性能在药剂制造方面有许多独到的应用，制药需要生成一些水溶性或微水溶性的亚微细颗粒，可以使用溶血磷脂类物质而获得。
食物磷脂进入人体消化道后，也是按照脂肪的消化途径，在C2位脱去脂肪酸，生成溶血磷脂，然后被吸收入肠壁，通过消化途径摄入溶血磷脂是安全的。从生理上观察，磷脂和溶血磷脂都是体内的正常组分，在细胞膜上也有溶血磷脂，他们各有自己的生理活性，溶血磷脂基本功能之一就是作为二级信使，使细胞的信号放大。研究表明，溶血磷脂是生物体内正常存在的安全物质，溶血磷脂于2008年在中国已经被批准为天然食品添加剂。
脂肪酸是油脂化工的基础原料，以天然脂肪酸为原料衍生的下游产品，广泛应用于纺织、食品、医药、日用化工、石油化工、橡塑、采矿、交通运输、铸造、金属加工、油墨、涂料等各种行业。
月桂酸(十二碳酸)可用于洗涤剂用表面活性剂的制备，如月桂酸钾、月桂酸二乙醇酰胺、十二烷基硫酸钠等，还可用于丙纶油剂和醇酸树脂的合成。
肉豆蔻酸(十四碳酸)可用于生产肉豆寇酸异丙酯，在化妆品和药膏中可用作滋润剂、分散剂、溶剂以及渗透剂等。
棕榈酸(十六碳酸)可作为表面活性剂的亲油基。棕榈酸的钠盐和钾盐可用作乳液聚合时的乳化剂。铝盐和锌盐等用于润滑剂、涂料、油墨中，还可作合成无味氯霉素的中间体。
硬脂酸(十八碳饱和酸)可作天然橡胶、合成橡胶及胶乳硫化活性剂、脱膜剂。硬脂酸盐可用作塑料加工润滑剂和热稳定剂。在医药工业中作为乳、膏、栓剂的基质。在化妆品中作为膏、霜的原料，其皂类和酯类在化妆品中的用途更广泛。在食品工业中硬脂酸酯类是重要的食品添加剂，硬脂酸单甘酯是优良的食品乳化剂。
油酸(十八碳不饱和酸)与氨反应，可制得油酸酰胺，可作为塑料润滑剂，抗静电剂、抗粘剂以及印刷油墨的添加剂；油酸经催化热聚合，可制得二聚酸，用于合成油墨和胶粘剂用聚酰胺树脂。还可用于合成涂料用浅色醇酸树脂。可作为山梨糖醇酐脂肪酸脂类、甘油酯等表面活性剂的亲油基等，也可直接用于选矿。
混合脂肪酸分离工艺有：冷冻压榨法、有机溶剂分离法、表面活性剂分离法、精馏分离法等，精馏分离法是目前使用最广泛的脂肪酸分离技术，可以分离不同碳数的脂肪酸。
三、磷脂酶A2
磷脂酶A2(Phospholipase A2，PLA2)，即磷脂-2-酰基水解酶(EC 3.1.1.4)，是磷脂分解代谢中起重要作用的酶。它催化甘油磷脂C-2位酯键的水解反应，生成溶血磷脂和脂肪酸。
磷脂酶A2最早由Belfanti于1924年用生物化学方法从肝脏组织中分离出来。后来，人们从肾脏、前列腺等其他组织中都分离出此酶。武内忠男于1952年在光镜下用组织化学法证明了磷脂酶 A2的存在。
不同来源的磷脂酶A2分子量差异较大。例如，来源于链霉菌、蛇毒、、蜂毒、胰腺等外分泌型的磷脂酶A2的分子量一般在13KD～18kD，其活性依赖Ca2+离子的存在。存在于犬/人的心肌胞浆内的磷脂酶A2分子量为40kD，而存在于鼠肾及人血小板胞浆内的磷脂酶A2的分子量则达到85kD。
现在已有几十种不同来源的磷脂酶A2的一级结构被阐明，氨基酸顺序已测出。例如，猪的磷脂酶A2，酶原的活力很低，通过胰蛋白酶除去氨基端七肽后能转变成活性形式。
一些来源比较接近的磷脂酶A2，同源性较高，例如江浙蝮蛇毒中的酸性、中性和碱性磷脂酶A2，其同源性高达50％以上，含有14个Cys残基，组成七对二硫键。这几种磷脂酶A2虽然都有将磷脂水解成为溶血磷脂的功能，但在溶血活性、神经毒素活性、抑制血小板聚集等功能方面却有很大不同。
眼镜蛇毒的磷脂酶A2已经分离纯化得到了均一产物，对热稳定，分子量为11,000D，分子内含有一个组氨酸残基和一个色氨酸残基，5-6个二硫键。猪胰的磷脂酶A2与蛇毒磷脂酶A2的同源性也很高，含有12个Cys残基，组成六对二硫键。
来源不同且一级结构上差异很大的磷脂酶A2，却都能水解甘油磷脂上C-2位脂肪酸，行使着相同的功能，分析其蛋白质的一级结构和高级结构，其相同或相似的结构应该是其行使磷脂酶A2催化功能所必需的。
通过对蜜蜂毒腺磷脂酶A2一级和高级结构的研究发现，蜂毒磷脂酶A2不仅在一级结构中半胱氨酸的间距、Ca2+结合区域、与催化活性中心有关的几个氨基酸的位置上与来源于其他生物的磷脂酶A2相似，这些应该是磷脂酶A2的结构特征。
蛇毒磷脂酶A2的研究发现，磷脂酶A2的酶活性与质子传递系统、Ca2+结合环及疏水通道等有关。其中质子传递系统由His-48、Asp-99、Tyr-52和Tyr-73等氨基酸组成；Ca2+结合环由25-35位氨基酸组成；疏水通道由高度保守的疏水性残基Leu-2、Phe-5、Met-8、Ile-9、Tyr-22、Cys-27、Cys-29、Cys-45、Tyr-52、Ala-102、Ala-103和Phe-106等组成。江浙蝮蛇毒酸性磷脂酶A2(APLA2)和尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶A2(A.aAPLA2 II)的这三个因素基本相同(只有个别氨基酸残基不一致)但酶活性差别较大。
有些来源差异大的的磷脂酶A2，尽管分子量接近，但其一级结构的同源性却很低，例如链霉菌与猪胰磷脂酶A2的同源性小于10％，链霉菌磷脂酶A2的一级结构只有4个Cys残基，但却都拥有与蛇毒磷脂酶A2相似的质子传递系统、Ca2+结合环和疏水通道。
现在已有几十种不同来源的磷脂酶A2的一级结构被阐明，大鼠、猪、牛、马、羊、以及人的胰脏磷脂酶A2已被提纯，猪、马和牛的磷脂酶A2酶原的氨基酸顺序已测出。
磷脂酶A2不仅具有重要的生理功能，在代谢过程中能够消化磷脂分子；在激素信号的传递、生物膜的稳衡过程、脂质介体的产生以及发炎过程等方面起着重要的作用。还具有广阔的应用前景。
在科学研究中，磷脂酶A2在脂类代谢中起重要作用，它可以水解磷脂产生脂肪酸，进入其他脂肪酸代谢途径，是许多脂肪酸代谢的一个限速步骤，所以，磷脂酶A2是研究脂类代谢和细胞膜的重要的工具酶之一。
在工业上，磷脂酶A2可以在植物油脂精炼中用于酶法脱胶、生产溶血磷脂和不饱和脂肪酸；利用磷脂酶A2的脂交换功能将DHA/EPA等多不饱和脂肪酸与磷脂结合，制造天然来源稀有的DHA磷脂和EPA磷脂，不仅可以很好地发挥EPA(二十碳五烯酸)和DHA(二十二碳六烯酸)的降血脂、降血糖、抗血栓、抗炎、抑制血小板聚集、健脑、促进大脑发育、防止老年性痴呆及抗心血管疾病等多种保健功能，加之磷脂本身所具有的功能，可使其保健功效大大提高。
在农业上，磷脂酶A2可以用作饲料添加剂，帮助分解饲料中的磷脂物质，使其转化成小分子的物质，以便于动物的吸收利用，显著改善其生长和(或)饲料转化比例。
在医疗上，磷脂酶A2属抗菌消炎抗过敏及解毒酶类。磷脂酶A2作用于神经、肌肉，对代谢、非偶联氧化磷酸化以及呼吸链均有抑制作用。磷脂酶A2在皮肤病(如硬皮症、牛皮癣、湿疹、红斑狼疮等)治疗上有独特的疗效。对肝病、贫血、白细胞过低等也有一定的疗效。
磷脂酶A2的研究在理论上和开发应用上都很有意义。在早期，磷脂酶A2主要从动物胰脏、蛇毒、蜂毒中提取，但从动物性原料中提取PLA2，成本高，产量低。例如从动物内脏中提取磷脂酶A2，工艺复杂产量低，蛇毒或蜂毒则来源稀少，不利于磷脂酶A2的大量生产和利用，因此价格昂贵。
微生物是磷脂酶A2资源的重要来源。天然的真核(如米曲霉、黑曲霉、担子菌、酵母等)及原核(如链霉菌、大肠杆菌和芽孢杆菌等)微生物都能产生磷脂酶A2。但普遍产量很低，达不到工业应用的要求。
来源于微生物的磷脂酶A(A1或A2)相关的报道和专利较多的是真菌的磷脂酶A，如从曲霉属、链孢霉属、木霉属的真菌中克隆磷脂酶A基因，并加以改造，有些是脂肪酶，在一定条件下具有磷脂酶A的活性，专一性不强。
李维琳利用基因工程技术构建了工程菌，使磷脂酶A2的产量大幅提高，达到了工业应用的水平(李维琳，中国发明专利，201110101940.6)。
四、植物油脂的酶法脱胶物理精炼
在食用植物油的精炼中，为了使成品油具有令人满意的风味和质量，要确保成品油脂具有充分的储存稳定性，并且要使下游的加工工序能够方便的进行，含磷脂质(磷脂、卵磷脂)以及其它不希望有的物质都要被除去(称为脱胶)。如果不进行脱胶，油脂在加热到一定温度时就会发黑结焦并产生黑烟。水化脱胶能够除去毛油中的大部分磷脂，但油脂中残留的磷脂较多，碱炼(化学精炼法)把磷脂和部分中性油转化成脂肪酸钠，油脂损耗和能耗较大、且产生的废水和皂角污染环境。
与化学精炼相比，物理精炼具有经济和环保优势，现在虽然化学精炼法仍然占主要地位，但总的趋向是改用物理精炼法。
要使物理精炼方法得到成功，一个重要的先决条件是开始时的脱胶工序必须高度有效，使毛油中所存在的含磷脂质降低到10ppm(计做磷)以下的水平。有多种化学方法能达到这个要求，现采用较多的酸法脱胶物理精炼，但这种方法的脱胶效果有时不理想，这直接影响到脱色工段白土的消耗量和最后成品油的质量。如何提高物理精炼中脱胶效果是限制物理精炼的一个瓶颈问题。酶法脱胶物理精炼则在很大程度上解决了常规物理精炼的不足，该工艺只用一台离心机就可以达到满意的分离效果，精炼过程基本不产生废水，所以酶法脱胶物理精炼是常规物理精炼的一大进步。
植物油脂的酶法脱胶物理精炼，是利用磷脂酶将油脂中的磷脂转化成易于溶解在水中的溶血磷脂，再经过沉降或离心脱胶，然后再通过吸附脱色、蒸馏脱酸脱臭达到精炼的目的。
酶法脱胶的优越性主要表现在以下方面：
1、适应性强，酶法脱胶可广泛应用于各种植物油，如大豆油、菜籽油、玉米油、棉籽油、米糠油、葵花籽油等；
2、节约用水，传统脱胶水洗工序需要10％～15％的水，酶法脱胶免掉了水洗工序；
3、节约固定资产投资，因免去水洗工序，节省一台水洗离心机；
4、不产生皂脚。避免化学精炼过程中皂脚产生，因而可省略处理皂脚的后续工序，排除处理 皂脚带来的环保问题；
5、良好的环保性能，采用酶法脱胶工艺后，不产生皂脚，免去水洗工序，不产生废水，从而避免了处理皂脚及废水所带来的环保问题，据测算，在油脂加工中使用1kg酶，可以减少1,300kg的碳排放；
6、脱胶彻底，酶法脱胶后，油中含磷量更低，有利于后续工序白土对色素的吸附；
7、得率高，由于酶的专一性，不会分解三甘酯产生副产品，因而更安全，得率更高。
8、减少有益物质(如维生素E等)的损失，脱臭馏出物价值更高；
9、从根本上提升副产品磷脂质量，有利于进一步开发具有高附加值的磷脂产品，如粉末磷脂、饲料等。
酶法脱胶技术以其良好的经济效益、卓越的环保优势和简单的生产工艺已成为油脂精炼工艺的发展趋势。
酶法脱胶物理精炼的关键就是酶法脱胶，酶法脱胶的关键就是所使用的磷脂酶。
酶法脱胶最早是由Rohm和Lurgi开发的，当时采用一种从猪胰脏提取的磷脂酶A2，此方法称为“Enzymax”工艺。由于磷脂酶A2的来源有限、价格昂贵等原因，该方法一直未大规模推广。
后来有人发现了可以用于油脂脱胶的微生物来源的磷脂酶A1，但目前使用较广泛的这种磷脂酶A1并不是一种专一性强的磷脂酶，而是一种羧酸酯水解酶(EC3.1.1.3)，既有对磷脂结构又有对甘油三酯结构进行水解的能力，在一定条件下，水解甘油三酯的能力得到控制，使磷脂酶的活力起主导作用，所以这种酶严格控制反应条件，在一个很窄的pH和温度范围内才能表现出磷脂酶的活力，对使用的条件要求较高。
李维琳利用基因工程技术构建的一个高产工程菌，能够生产磷脂酶A2(EC 3.1.1.4)，这种磷脂酶A2是专一性的磷脂酶，只作用于磷脂而不作用于甘油三酯，因此，对使用的控制反应条件要求较为宽松(李维琳，中国发明专利，201110101940.6)。
目前推行的酶法脱胶工艺是：水化脱胶油(一般磷含量≤200ppm)加热至75～85℃，然后加入45％的柠檬酸溶液(0.65kg柠檬酸/吨油)高速混合均质，进行酸处理，然后的油经换热器降至预定温度，再加入水(1％～5％)、NaOH(0.2～0.25kg/吨油)和酶，加酶后的油水体系经高速混合进入反应罐反应2～6小时完成脱胶过程，再经一步离心即可获得脱胶油，脱胶油的含磷量一般低于10ppm，甚至低于5ppm，经吸附脱色后含磷量进一步降低，完全满足物理精炼的要求。
有关酶法脱胶的较新的专利公开说明书主要有：超声波强化生物酶油脂脱胶的方法(中国发明专利，200610019311.8)提到利用超声波辅助酶解，可以缩短酶处理时间。使用磷脂酶A和磷脂酶C的混合酶进行脱胶(中国发明专利，200880009294.7)提供的方法可以将毛油(含磷量约为700ppm)中的含磷量降低至10ppm以下。一种采用混合酶制剂进行菜籽油脱胶的新方法(中国发明专利，200810150449.0)使用0.4％的磷脂酶A2和磷脂酶A1的混合酶，酶解4小时，可以将含磷量降至5ppm，但此专利实施例中未提及使用的毛油的含磷量和磷脂酶A2的来源与活力。磁性固定化磷脂酶A1的制备方法及用磁性磷脂酶A1精炼毛油的方法(中国发明专利，201010538226.9)可以将经水化脱胶的油中的含磷量降至8ppm。
现行的酶法脱胶工艺也存在一些有待改进的地方：如酸处理温度高于酶解温度，需要先把油脂加热75～85℃进行酸处理，再把温度降到酶解反应的最适温度进行酶解反应；在酸处理和酶解过程中所需的混合剪切速率高(一般为10,000rpm)；采用条件要求较苛刻的羧酸酯水解酶(EC3.1.1.3)；毛油在酶法脱胶前需要先进行水化脱胶等。
发明内容
本发明的目的是在于提供了一种利用磷脂酶A2进行植物油脂脱胶的方法，方法易行，操作简便，采用磷脂酶A2进行脱胶的同时还能得到价值较高的酶解磷脂，降低了能源消耗，采用此方法直接进行脱胶的可以是含磷量很高的压榨(或浸出)的毛油，也可以是含磷量相对较低的水化脱胶油，适应面更广。
为了实现上述的目的，本发明采用以下技术措施：
一种利用磷脂酶A2进行植物油脂脱胶的方法，该方法包括以下步骤：
步骤1：将毛油加热到40～50℃之间；
步骤2：加入45％(W/W)的柠檬酸溶液，至终浓度为0.01％～0.02％，搅拌(≥40rpm)均质10秒钟后保温30分钟；
步骤3：加入毛油油重1％～5％的水，搅拌均匀；
步骤4：加入毛油油重0.005％～0.015％(W/W)酶，酶为磷脂酶A2，搅拌反应2小时；
步骤5：离心或自然沉降分离脱胶油和胶质沉淀物(磷脂)。
所述的毛油为大豆油、菜籽油、玉米油、棕榈油、葵花油、稻米油或花生油等植物油。
所有步骤都在同一温度下进行，无需改变温度。
用此方法脱胶的植物油可以是压榨或浸出还未经水化脱胶的毛油，也可以是经过水化脱胶或碱炼的植物油。
所述的酶是磷脂酶A2，即磷脂-2-酰基水解酶(EC 3.1.1.4)。
磷脂酶A2的来源是：从猪胰脏中提取、从蛇毒中提取、从天然的微生物发酵物中提取和从基因工程菌发酵物中提取。
本发明具有以下优点和效果：
1、使用的酶是磷脂酶A2，即磷脂-2-酰基水解酶(EC 3.1.1.4)，是一种底物专一性酶，专一性远远高于键专一性酶，即使不在酶的最适反应条件，仅酶解反应速率有所下降，但不会水解油脂，因此，对设备和工艺的要求较为宽松。采用磷脂酶A2进行脱胶的同时还能得到价值较高的酶解磷脂，一举两得。
2、只需一次加温(或降温)，将温度调至酶解反应所需的温度，所有步骤都在该温度下进行，无需再次改变，即使在酶解过程中温度有所降低，对脱胶的效果影响不大。简化工艺步骤，降低能源消耗。
3、用此方法直接进行脱胶的可以是含磷量较高的压榨(或浸出)的毛油，也可以是含磷量较低的水化脱胶油，一般均可将含磷量降低到≤10ppm，符合物理精炼的要求，即使对含磷量特别高的毛油(≥1600ppm)，用此方法也能将含磷量降到＜15ppm以下，经白土脱色后含磷量能达到≤5ppm，适应面更广。
4、在酸处理和酶解过程中，只需转速为40～200rpm搅拌也可达到较好的效果，无需高速剪切混合；而且形成的胶质既可通过离心分离，也可自然沉降分离，不仅适合设备和自动化水平较高的大型油脂加工厂应用，也适合小型的油脂加工厂。
附图说明
图1为一种磷脂的结构示意图。
甘油-3磷酸碳骨架C1和C2位被脂肪酸酯化，C3位的磷酸基被极性醇(X-OH)酯化。
图2为一种磷脂酶A2的酶促水解磷脂成为溶血磷脂和脂肪酸示意图。
磷脂酶A2的作用下，磷脂C2位的脂肪酸被去除，生成亲水性较强的溶血磷脂和脂肪酸。
具体实施方式
通过具体实施例进一步阐述本发明，应理解的是，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的使用范围。
实施例1：
一种利用磷脂酶A2进行大豆油(含磷量为152ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到40℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.01％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重1％的水和0.005％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为4ppm。
实施例2：
一种利用磷脂酶A2进行大豆油(含磷量为152ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到40℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.015％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重3％的水和0.01％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为4ppm。
实施例3：
一种利用磷脂酶A2进行大豆油(含磷量为152ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到40℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.02％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重5％的水和0.015％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为3ppm。
实施例4：
一种利用磷脂酶A2进行大豆油(含磷量为152ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到45℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.01％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重3％的水和0.015％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为2ppm。
实施例5：
一种利用磷脂酶A2进行大豆油(含磷量为152ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到45℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.015％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重5％的水和0.005％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为1ppm。
实施例6：
一种利用磷脂酶A2进行大豆油(含磷量为152ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到45℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.02％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重1％的水和0.01％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为1ppm。
实施例7：
一种利用磷脂酶A2进行大豆油(含磷量为152ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到50℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.01％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重5％的水和0.01％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为2ppm。
实施例8：
一种利用磷脂酶A2进行大豆油(含磷量为152ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到50℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.015％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重1％的水和0.015％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为1ppm。
实施例9：
一种利用磷脂酶A2进行大豆油(含磷量为152ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到50℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.02％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重3％的水和0.005％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为1ppm。
实施例10：
一种利用磷脂酶A2进行大豆油(含磷量为526ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到40℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.01％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重1％的水和0.005％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为6ppm。
实施例11：
一种利用磷脂酶A2进行大豆油(含磷量为526ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到40℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.015％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重3％的水和0.01％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为4ppm。
实施例12：
一种利用磷脂酶A2进行大豆油(含磷量为526ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到40℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.02％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重5％的水和0.015％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为3ppm。
实施例13：
一种利用磷脂酶A2进行大豆油(含磷量为526ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到45℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.01％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重3％的水和0.015％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为3ppm。
实施例14：
一种利用磷脂酶A2进行大豆油(含磷量为526ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到45℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.015％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重5％的水和0.005％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为5ppm。
实施例15：
一种利用磷脂酶A2进行大豆油(含磷量为526ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到45℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.02％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重1％的水和0.01％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为3ppm。
实施例16：
一种利用磷脂酶A2进行大豆油(含磷量为526ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到50℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.01％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重5％的水和0.01％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为4ppm。
实施例17：
一种利用磷脂酶A2进行大豆油(含磷量为526ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到50℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.015％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重1％的水和0.015％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为4ppm。
实施例18：
一种利用磷脂酶A2进行大豆油(含磷量为526ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到50℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.02％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重3％的水和0.005％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为5ppm。
实施例19：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为189ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到40℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.01％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重1％的水和0.005％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为7ppm。
实施例20：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为189ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到40℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.015％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重3％的水和0.01％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为5ppm。
实施例21：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为189ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到40℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.02％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重5％的水和0.015％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为5ppm。
实施例22：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为189ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到45℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.01％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重3％的水和0.015％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为3ppm。
实施例23：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为189ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到45℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.015％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重5％的水和0.005％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为4ppm。
实施例24：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为189ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到45℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.02％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重1％的水和0.01％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为2ppm。
实施例25：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为189ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到50℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.01％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重5％的水和0.01％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为5ppm。
实施例26：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为189ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到50℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.015％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重1％的水和0.015％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为7ppm。
实施例27：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为189ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到50℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.02％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重3％的水和0.005％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为7ppm。
实施例28：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为728ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到40℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.01％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重1％的水和0.005％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为12ppm。
实施例29：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为728ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到40℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.015％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重3％的水和0.01％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为10ppm。
实施例30：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为728ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到40℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.02％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重5％的水和0.015％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为9ppm。
实施例31：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为728ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到45℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.01％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重3％的水和0.015％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为7ppm。
实施例32：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为728ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到45℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.015％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重5％的水和0.005％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为8ppm。
实施例33：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为728ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到45℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.02％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重1％的水和0.01％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为6ppm。
实施例34：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为728ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到50℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.01％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重5％的水和0.01％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为10ppm。
实施例35：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为728ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到50℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.015％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重1％的水和0.015％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为8ppm。
实施例36：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为728ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到50℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.02％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重3％的水和0.005％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为11ppm。
实施例37：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为1690ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到40℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.01％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重1％的水和0.005％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为24ppm。(用2％白土脱色后，含磷量为6ppm)。
实施例38：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为1690ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到40℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.015％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重3％的水和0.01％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为22ppm。
实施例39：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为1690ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到40℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.02％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重5％的水和0.015％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为17ppm。
实施例40：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为1690ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到45℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.01％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重3％的水和0.015％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为15ppm。
实施例41：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为1690ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到45℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.015％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重5％的水和0.005％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为19ppm。
实施例42：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为1690ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到45℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.02％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重1％的水和0.01％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为13ppm。
实施例43：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为1690ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到50℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.01％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重5％的水和0.01％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为21ppm。
实施例44：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为1690ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到50℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.015％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重1％的水和0.015％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为20ppm。
实施例45：
一种利用磷脂酶A2进行菜籽油(含磷量为1690ppm)脱胶的方法，其步骤是：
A：将大豆水化脱胶油加热到50℃；
B：加入45％的柠檬酸溶液，至终浓度为0.02％，均质(10,000rpm)10秒后保温30分钟；
C：加入毛油油重3％的水和0.005％的磷脂酶A2，200rpm搅拌反应2小时；
D：离心分离脱胶油和胶质沉淀物。
脱胶油中含磷量为21ppm。
Claims (2)
1.一种利用磷脂酶A2进行植物油脂脱胶的方法，包括以下步骤：
步骤1：将毛油加热到40~50℃之间；
步骤2：加入45%W/W的柠檬酸溶液，至终浓度为0.01%~0.02%，搅拌或均质10秒钟后保温30分钟；
步骤3：加入毛油油重1%~5%的水，搅拌均匀；
步骤4：加入毛油油重0.005%~0.015%W/W的酶，搅拌反应2小时；
步骤5：离心或自然沉降分离脱胶油和胶质沉淀物；
所述的毛油为大豆油、菜籽油、玉米油、棕榈油、葵花油、稻米油或花生油。
2.权利要求1所述的一种利用磷脂酶A2进行植物油脂脱胶的方法，其特征在于：所述的酶是磷脂酶A2，为磷脂-2-酰基水解酶：EC 3.1.1.4。
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