CN102524058A - 一种粤紫萁组织培养的方法 - Google Patents
一种粤紫萁组织培养的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102524058A CN102524058A CN2010105944853A CN201010594485A CN102524058A CN 102524058 A CN102524058 A CN 102524058A CN 2010105944853 A CN2010105944853 A CN 2010105944853A CN 201010594485 A CN201010594485 A CN 201010594485A CN 102524058 A CN102524058 A CN 102524058A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- osmund
- guangdong
- culture
- tissue culture
- days
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000012136 culture method Methods 0.000 title abstract description 4
- 241000937597 Osmunda mildei Species 0.000 title abstract 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 13
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 11
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 9
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- FAIXYKHYOGVFKA-UHFFFAOYSA-N Kinetin Natural products N=1C=NC=2N=CNC=2C=1N(C)C1=CC=CO1 FAIXYKHYOGVFKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 9
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 9
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 9
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 9
- QANMHLXAZMSUEX-UHFFFAOYSA-N kinetin Chemical compound N=1C=NC=2N=CNC=2C=1NCC1=CC=CO1 QANMHLXAZMSUEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229960001669 kinetin Drugs 0.000 claims description 9
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 9
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 claims description 9
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 9
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 9
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 6
- 238000009395 breeding Methods 0.000 claims description 6
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000032823 cell division Effects 0.000 claims description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 6
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 6
- SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N indole-3-acetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC(=O)O)=CNC2=C1 SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 claims description 6
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 5
- 239000012467 final product Substances 0.000 claims description 3
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 238000007670 refining Methods 0.000 claims description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000012879 subculture medium Substances 0.000 claims description 3
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 claims description 3
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 claims description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 abstract description 6
- 241000233805 Phoenix Species 0.000 abstract description 2
- 210000003746 feather Anatomy 0.000 abstract 1
- 241000218691 Cupressaceae Species 0.000 description 1
- 241000196127 Osmunda Species 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000012090 tissue culture technique Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
本发明属于蕨类植物组织培养技术领域，具体是一种粤紫萁组织培养的方法。它是利用植物细胞全能性的生物技术，合理采取粤紫萁幼嫩茎尖作为外植体，在合理的培养基中培养，可在短期内繁殖出大量的粤紫萁组培苗。本发明优点在于提供了一条全新的粤紫萁组培方法，突破季节限制，可一年四季采取外植体组培。本发明挽救了我国濒危植物粤紫萁，可使更多人观看到有凤凰之羽美称的粤紫萁。
Description
技术领域
本发明属于蕨类植物组织培养技术领域，具体是一种粤紫萁组织培养的方法。
背景技术
粤紫萁为蕨类紫萁科紫萁属植物，香港特有草本植物。植物高约53厘米，极短根状茎深褐色，粗厚而直立，藏于浅层土壤，支根盘根错节。原产地为香港岛柏架山、新界大屿山及大帽山。粤紫萁主要生长于丛林之下，亦曾于2000年在深圳市龙岗南澳笔架山的一条溪流意外地被发现，但为数只有三株。
粤紫萁有凤凰之羽之称，目前国内数量仅以株记，极为稀少珍贵。寻找一种安全的繁殖方法，挽救粤紫萁这一濒危植物已迫在眉睫。
发明内容
本发明的目的在于提供了一种粤紫萁组织培养的方法。通过粤紫萁的茎尖作为外植体进行组培，实现粤紫萁的人工培养。
本发明一种粤紫萁组织培养的方法，包括下列步骤：
1)外植体处理：剪下粤紫萁的幼嫩茎尖，不能伤害粤紫萁本株，在经过消毒杀菌的工作台上用0.1％的汞消毒液消毒10-20分钟，后用无菌水冲洗干净后留用。
2)诱导培养：将消过毒的粤紫萁幼嫩茎尖插入原球茎诱导培养基中，于22-25℃温度下避光培养5-7天后，放置在光照下培养，光强由弱逐渐变强。培养30-40天即可在嫩叶上形成大量原球茎。以1L培养基用量，诱导培养基的配方为：MS(200ML-4000ML)，激动素(0.5Mg-3Mg)，3-吲哚乙酸(0.5Mg-2.5Mg)，萘乙酸(10Mg-50Mg)，磷酸二氢钠(50Mg-1000Mg)，活性炭(1000Mg-2000Mg)，蔗糖20000Mg，琼脂7000Mg。
3)繁殖培养：将第二步操作中的原球茎继续培养30-40天便萌发形成原叶体，然后分切原叶体在继代培养基上培养25-35天，如此循环三代即可得大量所需组培苗。以1L培养基用量，繁殖培养基的配方为：MS(200ML-4000ML)，激动素(0.5Mg-3Mg)，萘乙酸(15Mg-50Mg)，细胞分裂素(0.5Mg-1Mg)，磷酸二氢钠(50Mg-1000Mg)，活性炭(1000Mg-2000Mg)，蔗糖20000Mg，琼脂7000Mg。
4)生根培养：将上一步繁殖培养形成的组培苗转入生根培养基中，30天后形成孢子体，在继续培养一个月，即可形成羽状叶并长出数条根须。以1L培养基用量，繁殖培养基的配方为：MS(300ML-3000ML)，激动素(0.5Mg-4Mg)，萘乙酸(10Mg-50Mg)，细胞分裂素(0.5Mg-1Mg)，磷酸二氢钠(50Mg-2000Mg)，活性炭(1000Mg-2000Mg)，蔗糖30000Mg，琼脂8000Mg。
5)炼苗栽培：将已生根的的组培苗瓶放到大棚中摆置5-7天后，取出组培苗，洗净培养基后移栽到大棚中，控制大棚温度在18-22℃，湿度在80％以上，遮荫并逐渐增加光照和通风，半个月后即可进行常规管理。
本发明是利用植物细胞全能性的生物技术，合理采取粤紫萁幼嫩茎尖作为外植体，在配合比合理的培养基中培养，可在短期内繁殖出大量的粤紫萁组培苗。本发明优点在于提供了一条全新的粤紫萁组培方法，突破季节限制，可一年四季采取外植体组培。
具体实施方式
实施例1
粤紫萁为我国极其稀有的珍贵植物，宜在春季组培，此间适合组培苗炼苗的大棚环境条件容易把握，确保高的成活率。
一种粤紫萁组织培养的方法，依下述步骤对本发明做进一步说明：
1)外植体处理：春季，在不伤害粤紫萁本株的前提下剪下粤紫萁的幼嫩茎尖，在在经过消毒杀菌的工作台上用0.1％的汞消毒液消毒10-15分钟。后用无菌水冲洗干净后留用。
2)诱导培养：将消过毒的粤紫萁幼嫩茎尖插入原球茎诱导培养基中，于23℃温度下避光培养7天后，放置在光照下培养，光强由弱逐渐变强。培养30-40天即可在嫩叶上形成大量原球茎。
所述诱导培养基的配方为：每升诱导培养基包含MS 200ML，激动素0.5Mg，3-吲哚乙酸0.5Mg，萘乙酸10Mg，磷酸二氢钠80Mg，活性炭1000Mg，蔗糖20000Mg，琼脂7000Mg。
3)繁殖培养：将第二步操作中的原球茎继续培养30-40天便萌发形成原叶体，然后分切原叶体在继代培养基上培养25-35天，如此循环三代即可得大量所需组培苗。
所述繁殖培养基的配方为：每升繁殖培养基包含：MS 200ML，激动素0.5Mg，萘乙酸15Mg，细胞分裂素0.5Mg，磷酸二氢钠80Mg，活性炭1000Mg，蔗糖20000Mg，琼脂7000Mg。
4)生根培养：将上一步繁殖培养形成的组培苗转入生根培养基中，30天后形成孢子体，在继续培养一个月，即可形成羽状叶并长出数条根须。
所述生根培养基的配方为：每升生根培养基包含：MS300ML，激动素0.5Mg，萘乙酸15Mg，细胞分裂素0.6Mg，磷酸二氢钠100Mg，活性炭1000Mg，蔗糖30000Mg，琼脂8000Mg。
5)炼苗栽培：将已生根的的组培苗瓶放到大棚中摆置7天后，取出组培苗，洗净培养基后已在到大棚中，控制大棚温度在18-22℃，湿度在80％以上，遮荫并逐渐增加光照和通风，半个月后即可进行常规管理。
Claims (4)
1.一种粤紫萁组织培养的方法，其特征在于该方法包括下列步骤：
1)外植体处理：剪下粤紫萁的幼嫩茎尖，不能伤害粤紫萁本株，在经过消毒杀菌的工作台上用0.1％的汞消毒液消毒10-20分钟，后用无菌水冲洗干净后留用；
2)诱导培养：将消过毒的粤紫萁幼嫩茎尖插入原球茎诱导培养基中，于22-25℃温度下避光培养5-7天后，放置在光照下培养，光强由弱逐渐变强，培养30-40天即可在嫩叶上形成大量原球茎；
3)繁殖培养：将第二步操作中的原球茎继续培养30-40天便萌发形成原叶体，然后分切原叶体在继代培养基上培养25-35天，如此循环三代即可得大量所需组培苗；
4)生根培养：将上一步繁殖培养形成的组培苗转入生根培养基中，30天后形成孢子体，在继续培养一个月，即可形成羽状叶并长出数条根须；
5)炼苗栽培：将已生根的的组培苗瓶放到大棚中摆置5-7天后，取出组培苗，洗净培养基后移栽到大棚中，控制大棚温度在18-22℃，湿度在80％以上，遮荫并逐渐增加光照和通风，半个月后即可进行常规管理。
2.根据权利要求1所述的一种粤紫萁组织培养的方法，其特征在于所述诱导培养基的配方为：每升诱导培养基包含MS 200ML，激动素0.5Mg，3-吲哚乙酸0.5Mg，萘乙酸10Mg，磷酸二氢钠80Mg，活性炭1000Mg，蔗糖20000Mg，琼脂7000Mg。
3.根据权利要求1所述的一种粤紫萁组织培养的方法，其特征在于所述繁殖培养基的配方为：每升繁殖培养基包含：MS 200ML，激动素0.5Mg，萘乙酸15Mg，细胞分裂素0.5Mg，磷酸二氢钠80Mg，活性炭1000Mg，蔗糖20000Mg，琼脂7000Mg。
4.根据权利要求1所述的一种粤紫萁组织培养的方法，其特征在于所述生根培养基的配方为：每升生根培养基包含：MS300ML，激动素0.5Mg，萘乙酸15Mg，细胞分裂素0.6Mg，磷酸二氢钠100Mg，活性炭1000Mg，蔗糖30000Mg，琼脂8000Mg。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2010105944853A CN102524058A (zh) | 2010-12-14 | 2010-12-14 | 一种粤紫萁组织培养的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2010105944853A CN102524058A (zh) | 2010-12-14 | 2010-12-14 | 一种粤紫萁组织培养的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102524058A true CN102524058A (zh) | 2012-07-04 |
Family
ID=46333113
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2010105944853A Pending CN102524058A (zh) | 2010-12-14 | 2010-12-14 | 一种粤紫萁组织培养的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102524058A (zh) |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104322285A (zh) * | 2014-11-03 | 2015-02-04 | 贵州省植物园 | 一种桂皮紫萁的育苗方法 |
| CN104542300A (zh) * | 2015-01-28 | 2015-04-29 | 遵义师范学院 | 紫萁离体培养各阶段的培养基 |
| CN105230483A (zh) * | 2015-09-22 | 2016-01-13 | 南昌大学 | 华南紫萁离体再生体系建立的方法 |
| CN106171999A (zh) * | 2016-07-21 | 2016-12-07 | 深圳市仙湖植物园管理处 | 粤紫萁可育孢子培养及其繁殖方法 |
| CN109601387A (zh) * | 2019-01-25 | 2019-04-12 | 徐州生物工程职业技术学院 | 以幼孢子囊群诱导的ggb途径的华南紫萁组培繁殖方法 |
| CN110786243A (zh) * | 2019-12-03 | 2020-02-14 | 厦门市园林植物园 | 一种笔筒树组织培养的繁殖方法 |
| CN111448989A (zh) * | 2020-05-19 | 2020-07-28 | 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所 | 一种光亮瘤蕨的离体快繁方法 |
-
2010
- 2010-12-14 CN CN2010105944853A patent/CN102524058A/zh active Pending
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104322285A (zh) * | 2014-11-03 | 2015-02-04 | 贵州省植物园 | 一种桂皮紫萁的育苗方法 |
| CN104322285B (zh) * | 2014-11-03 | 2016-04-20 | 贵州省植物园 | 一种桂皮紫萁的育苗方法 |
| CN104542300A (zh) * | 2015-01-28 | 2015-04-29 | 遵义师范学院 | 紫萁离体培养各阶段的培养基 |
| CN104542300B (zh) * | 2015-01-28 | 2016-08-24 | 遵义师范学院 | 紫萁离体培养各阶段的培养基 |
| CN105230483A (zh) * | 2015-09-22 | 2016-01-13 | 南昌大学 | 华南紫萁离体再生体系建立的方法 |
| CN106171999A (zh) * | 2016-07-21 | 2016-12-07 | 深圳市仙湖植物园管理处 | 粤紫萁可育孢子培养及其繁殖方法 |
| CN106171999B (zh) * | 2016-07-21 | 2018-04-20 | 深圳市仙湖植物园管理处 | 粤紫萁可育孢子培养及其繁殖方法 |
| CN109601387A (zh) * | 2019-01-25 | 2019-04-12 | 徐州生物工程职业技术学院 | 以幼孢子囊群诱导的ggb途径的华南紫萁组培繁殖方法 |
| CN109601387B (zh) * | 2019-01-25 | 2021-08-24 | 徐州生物工程职业技术学院 | 以幼孢子囊群诱导的ggb途径的华南紫萁组培繁殖方法 |
| CN110786243A (zh) * | 2019-12-03 | 2020-02-14 | 厦门市园林植物园 | 一种笔筒树组织培养的繁殖方法 |
| CN111448989A (zh) * | 2020-05-19 | 2020-07-28 | 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所 | 一种光亮瘤蕨的离体快繁方法 |
| CN111448989B (zh) * | 2020-05-19 | 2021-07-06 | 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所 | 一种光亮瘤蕨的离体快繁方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103931492B (zh) | 苹果砧木m9的组培快速育苗方法 | |
| CN101965800B (zh) | 一种单座苣苔的组织培养繁殖方法 | |
| CN102524058A (zh) | 一种粤紫萁组织培养的方法 | |
| CN106561456B (zh) | 一种海伦兜兰无菌播种快速繁殖方法 | |
| CN102119655A (zh) | 铁皮石斛自然光快繁育苗方法 | |
| CN103026968A (zh) | 一种铁皮石斛种苗工厂化生产方法 | |
| CN101507415B (zh) | 一种棉毛鹿茸草的离体培养法 | |
| CN104813939A (zh) | 一种荷花再生体系的构建方法 | |
| CN103598101A (zh) | 一种兜唇石斛组培快速繁殖的方法 | |
| CN102217551B (zh) | 一种鼓槌石斛芽尖组织培养快速繁殖方法 | |
| CN103651141B (zh) | 亳菊工厂化试管苗快繁的方法 | |
| CN103371103B (zh) | 一种马缨杜鹃组织培养快速繁殖方法 | |
| CN105145365A (zh) | 一种中华桫椤绿色球状体途径的组培繁殖方法 | |
| CN114027182A (zh) | 一种景天科拟石莲属东云系多肉植物组织培养繁殖方法 | |
| CN105494098A (zh) | 一种快速繁殖金铁锁种苗的方法 | |
| CN102415339A (zh) | 一种红叶石楠的快速繁育方法 | |
| CN104686361A (zh) | 一种葡萄胚性愈伤组织的诱导和培养方法 | |
| CN104488723A (zh) | 一种朝鲜淫羊藿组培快速繁殖方法 | |
| CN109717075A (zh) | 一种通过诱导不定芽获得大花萱草再生植株的方法 | |
| CN104823846B (zh) | 浙江金线兰种苗的快速繁殖方法 | |
| CN101112175B (zh) | 一种龙爪兰的组培快繁方法 | |
| CN102577949B (zh) | 一种茶叶种苗的快速繁殖方法 | |
| CN105028208B (zh) | 一种走马胎愈伤组织诱导及组培苗快繁方法 | |
| CN105900842B (zh) | 一种火力楠组织培养快速繁殖育苗方法 | |
| CN104396756A (zh) | 一种狐尾兰芽尖组织培养快速繁殖方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20120704 |