CN102453001B

CN102453001B - 硫代吗啉类化合物及其制备方法和用途

Info

Publication number: CN102453001B
Application number: CN201010515933.6A
Authority: CN
Inventors: 黄海洪; 申竹芳; 韩蓓; 环奕; 尹大力; 林紫云; 李鹏; 吴琪; 胡晨曦; 刘景龙; 朱平
Original assignee: Institute of Materia Medica of CAMS and PUMC
Current assignee: Institute of Materia Medica of CAMS and PUMC
Priority date: 2010-10-22
Filing date: 2010-10-22
Publication date: 2016-06-01
Anticipated expiration: 2030-10-22
Also published as: CN102453001A

Abstract

本发明涉及硫代吗啉类化合物及其制备方法和用途。具体地说，本发明涉及式(I)的化合物，或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物，其中各符号如说明书所述。本发明还涉及包含本发明化合物的药物组合物，本发明化合物在制备用于治疗和/或预防与DPP-IV活性过高或者与DPP-IV过度表达有关的疾病或病症的方法的药物中的用途，以及使用本发明化合物治疗相关疾病的方法。本发明化合物具有有效的抑制DPP-IV的活性。

Description

硫代吗啉类化合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明属于医药技术领域。涉及通式(1)所示的硫代吗啉类化合物，及其药学上可接受的盐及其异构体，这类化合物的制备，含有它们的药物组合物以及这类化合物在预防和/或治疗糖尿病，非胰岛素依赖性的糖尿病中的应用，尤其是在抑制DPP-IV酶方面的用途。

背景技术

2型糖尿病是一类慢性综合性疾病，占糖尿病患者总数的90％以上。在美国，2型糖尿病的发病率为7％，占用的医疗经费为10％，在我国，2型糖尿病的发病率已由15年前的0.67％上升到近年来的3.21％，患者总数超过四千万。据世界卫生组织报道，到2030年，全球将有3亿糖尿病患者。[钱桐荪.口服降糖药的合理应用及进展.世界临床药物，2004，25，4：229-233]。糖尿病已成为继心血管病和癌症之后威胁人类健康的第3号杀手[张来银.糖尿病的治疗药物研究进展.现代中西医结合杂志.2007，16，5：404-705]。糖尿病特点是胰岛素分泌或作用失调，致使脂肪、碳水化合物以及蛋白质代谢紊乱，造成慢性血糖过高。目前临床上使用的抗糖尿病药物，如胰岛素、磺酰脲类、α-葡萄糖苷酶抑制剂、双胍类和噻唑烷二酮类胰岛素增敏剂(PPαRγ机制)等[王林.二肽基肽酶IV抑制剂P32/98.国外医学药学分册.2002，29，3：173-174]均有其不足之处。近年来研发的二肽基肽酶-IV(dipeptidylpeptidaseIV，DPP-IV)抑制剂，能有效促进胰岛素分泌，在降低血糖的同时具有保护β细胞功能的作用，且不会引起血糖降低和体重增加等副作用，并因其作用靶点明确，已成为治疗2型糖尿病药物的研发热点之一。

目前发现，DPP-IV是一种在多种哺乳动物的组织中广泛表达的多功能II型跨膜糖基化蛋白，它是一种T细胞活化抗原CD26，也是一种腺苷脱氨酶结合蛋白。它的作用底物包括在T2DM免疫应答信号传导过程中起重要作用的两种肠降血糖素：胰高血糖素样肽1的片断(GLP-1)和抑胃肽(GIP)，这两种物质在用餐后被胃粘膜分泌以调节血糖浓度，而体内的DPP-IV又可将其水解，从而导致二者失去胰岛素诱导活性，由此可见，抑制DPP-IV的活性就可以延长二者的半衰期，从而刺激葡萄糖依赖的胰岛素分泌，葡萄糖耐受水平也将相应得以改善。

目前诸多研究者都致力于DPP-IV抑制剂的抗糖尿病药物研究，有不少药物已经进入II期、III期临床试验。

然而，根据文献报道，已合成的药物分子本身存在体内稳定性和毒性问题，能够在体内环境中发生环合反应而失活，同时DPP-IV抑制剂的受体家族具有多样性和同源性，为了减少选择性差带来的副作用，作用于单一的蛋白受体-DPP-IV也成为研发难点，从而导致上市药物极少。

因此，本领域仍然需要有新颖的DPP-IV抑制剂以满足临床治疗的需求。

发明内容

本发明的目的是提供具有新颖结构的DPP-IV抑制剂。本发明人惊奇地发现，以α-氨基酸为结构母核，对其进行结构修饰改造，提供了一类新颖的安全有效的DPP-IV抑制剂例如抗糖尿病的化合物。本发明基于以上发现而得以完成。

发明概述

为此，本发明第一方面提供式(I)的化合物，或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物，

其中：

X为S或者SO₂；

R₁选自氢、C_1-6烷基、芳基-C_1-6烷基-，其中所述的烷基和芳基任选被1-4个(例如1-3个、1-2个、1个、2个、或3个)选自以下的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基、C_1-6烷基硫基-、氨基甲酰基；

R₂选自氢、C_1-6烷基、C_3-8环烷基、芳基、芳基-C_1-6烷基-、C_6-12桥环烷基(例如金刚烷基)、含有3-8个(例如3-7个、3-6个、3-5个、或3-4个)碳原子和1-3个(例如1-2个、1个、2个、或3个)选自氮、氧、硫的杂原子的杂环烷基，其中所述的烷基、环烷基、芳基、C_6-12桥环烷基和杂环烷基任选被1-4个(例如1-3个、1-2个、1个、2个、或3个)选自以下的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基、C_1-6烷基硫基-、氨基甲酰基；

R₃选自氢、C_1-6烷基、C_3-8环烷基、芳基、芳基-C_1-6烷基-、C_6-12桥环烷基(例如金刚烷基)、含有3-8个(例如3-7个、3-6个、3-5个、或3-4个)碳原子和1-3个(例如1-2个、1个、2个、或3个)选自氮、氧、硫的杂原子的杂环烷基，其中所述的烷基、环烷基、芳基、C_6-12桥环烷基和杂环烷基任选被1-4个(例如1-3个、1-2个、1个、2个、或3个)选自以下的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基、C_1-6烷基硫基-、氨基甲酰基；

或者

R₁和R₂与分别连接至此二者的碳和氮原子一起形成4-12元(例如5-10元)的含氮单环或双环杂环，所述杂环任选被1-3个(例如1-2个、1个或2个)选自下列的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基，或

R₁和R₃与分别与此二者连接的碳和氮原子一起形成4-12元(例如5-10元)的含氮单环或双环杂环，所述杂环任选被1-3个(例如1-2个、1个或2个)选自下列的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基，或

R₂和R₃与它们所连接的氮原子一起形成4-10元(例如5-8元)的含氮杂环，其中所述杂环任选还含有1-2个(例如1或2个)选自氮、氧、硫的杂原子，并且所述杂环任选被1-3个(例如1-2个、1个或2个)选自下列的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基。

根据本发明第一方面任一项的化合物，其中X为S。

根据本发明第一方面任一项的化合物，其中X为SO₂，即-S(O₂)-。

根据本发明第一方面任一项的化合物，其中R₁选自氢、C_1-6烷基、芳基-C_1-6烷基-，其中所述的烷基和芳基任选被1-4个(例如1-3个、1-2个、1个、2个、或3个)选自以下的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、氰基、C_1-6烷基、C_1-6烷基硫基-、氨基甲酰基。

根据本发明第一方面任一项的化合物，其中R₂选自氢、C_1-6烷基、C_3-8环烷基、芳基、芳基-C_1-6烷基-、C_6-12桥环烷基(例如金刚烷基)、含有3-8个(例如3-7个、3-6个、3-5个、或3-4个)碳原子和1-3个(例如1-2个、1个、2个、或3个)选自氮、氧、硫的杂原子的杂环烷基，其中所述的烷基、环烷基、芳基、C_6-12桥环烷基和杂环烷基任选被1-4个(例如1-3个、1-2个、1个、2个、或3个)选自以下的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基、C_1-6烷基硫基-、氨基甲酰基。

根据本发明第一方面任一项的化合物，其中R₃选自氢、C_1-6烷基、C_3-8环烷基、芳基、芳基-C_1-6烷基-、C_6-12桥环烷基(例如金刚烷基)、含有3-8个(例如3-7个、3-6个、3-5个、或3-4个)碳原子和1-3个(例如1-2个、1个、2个、或3个)选自氮、氧、硫的杂原子的杂环烷基，其中所述的烷基、环烷基、芳基、C_6-12桥环烷基和杂环烷基任选被1-4个(例如1-3个、1-2个、1个、2个、或3个)选自以下的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基、C_1-6烷基硫基-、氨基甲酰基。

根据本发明第一方面任一项的化合物，其中R₁和R₂与分别连接至此二者的碳和氮原子一起形成4-12元(例如5-10元)的含氮单环或双环杂环，所述杂环任选被1-3个(例如1-2个、1个或2个)选自下列的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基。

根据本发明第一方面任一项的化合物，其中R₁和R₃与分别与此二者连接的碳和氮原子一起形成4-12元(例如5-10元)的含氮单环或双环杂环，所述杂环任选被1-3个(例如1-2个、1个或2个)选自下列的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基。

根据本发明第一方面任一项的化合物，其中R2和R3与它们所连接的氮原子一起形成4-10元(例如5-8元)的含氮杂环，其中所述杂环任选还含有1-2个(例如1或2个)选自氮、氧、硫的杂原子，并且所述杂环任选被1-3个(例如1-2个、1个或2个)选自下列的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基。

根据本发明第一方面任一项的化合物，其条件是不包括以下化合物：

根据本发明第一方面任一项的化合物，其为式(Ia)所示的化合物，或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物，

其中，

或者

根据本发明第一方面任一项的化合物，其为式(Ia)所示的化合物，或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物，其中

R₂选自氢原子、C_1-4烷基、C_5-6环烷基、苯基、苄基、4-硝基苄基、苯基、苯乙基、α-甲基苄基、羟基丙基、氨基丙基、4-羟基环己基、4-哌啶基、3-羟基金刚烷基、2，2-二甲基3-羟基丙基等；

R₃为氢原子；

或者

R₂和R₃与它们连接的氮原子共同构成含氮杂环，如吗啉基、2，6-二甲基吗啉基、N-甲基哌嗪等等含氮杂环。

根据本发明第一方面任一项的化合物，其为式(Ib)所示的化合物，或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物，

(Ib)

或者

根据本发明第一方面任一项的化合物，其为式(Ib)所示的化合物，或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物，其中

R₂选自氢原子、环戊基、苯基、苯乙基、α-甲基苄基等；

R₃为氢原子；

或者

R₂和R₃与它们连接的氮原子共同构成含氮杂环，如吗啉、2，6-二甲基吗啉基、N-甲基哌嗪等等含氮杂环。

根据本发明第一方面任一项的化合物，其为式(Ic)所示的化合物，或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物，

其中，

R₁选自氢、C_1-6烷基、芳基-C_1-6烷基-，其中所述的烷基和芳基任选被1-4个(例

如1-3个、1-2个、1个、2个、或3个)选自以下的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、氰基、C_1-6烷基、C_1-6烷基硫基-、氨基甲酰基。

根据本发明第一方面任一项的化合物，其为式(Ic)所示的化合物，或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物，其中R₁为C_1-4烷基、环己基、苄基、2-羟基丙基、甲硫乙基、氨乙酰基、氨丙酰基等。

根据本发明第一方面任一项的化合物，其为式(Id)所示的化合物，或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物，

R₁选自氢、C_1-6烷基、芳基-C_1-6烷基-，其中所述的烷基和芳基任选被1-4个(例如1-3个、1-2个、1个、2个、或3个)选自以下的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、氰基、C_1-6烷基、C_1-6烷基硫基-、氨基甲酰基；

或者

R₁和R₂与分别连接至此二者的碳和氮原子一起形成4-12元(例如5-10元)的含氮单环或双环杂环，所述杂环任选被1-3个(例如1-2个、1个或2个)选自下列的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基。

根据本发明第一方面任一项的化合物，其为式(Id)所示的化合物，或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物，其中

R₁选自甲基、异丙基、异丁基、苄基等；

R₂选自C_1-4烷基、环己基、苄基、4-硝基苄基、羟基丙基、氨基丙基、4-羟基环己基、4-哌啶基、3-羟基金刚烷基、2，2-二甲基3-羟基丙基等；

或者

R₁和R₂与分别连接至此二者的碳和氮原子一起形成吡咯烷、异喹啉环、异吲哚环等。

根据本发明第一方面任一项的化合物，其为式(I)的化合物，或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物，

X为S或者SO₂；

当R₁为氢原子时，R₂或者R₃相同或不同并分别独立地选自氢原子、烷基、环烷基、芳香环烷基等；或者R₂和R₃与它们连接的氮原子共同构成含氮杂环，如吗啉，N-甲基哌嗪等等含氮杂环；

当R₃为氢原子时，R₁或者R₂相同或不同并分别独立地选自氢原子、烷基、环烷基、氨酰烷基、芳香基烷基等；或者R₁和R₂与R₂连接的N原子共同形成吡咯烷、异喹啉环等。

根据本发明第一方面任一项的化合物，其为实施例制备的本发明目标化合物(以结构式表示的或以系统命名描述的)，或其游离碱、药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物。

根据本发明第一方面任一项的化合物，其为选自下列的化合物：

4-(2-氨基乙酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-(2-氨基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-(2-氨基-3-甲基丁酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-(2-氨基-3-甲基戊酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-(2-氨基-3，3-二甲基丁酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-(2-氨基-3苯基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐

4-(4-甲硫基-2-氨基丁酰基)硫代吗啉盐酸盐

(2S，3R)-4-(3-羟基-2-氨基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-(2，4-二氨基-4-氧代丁酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-(2，5-二氨基-5-氧代丁酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-[(吡咯烷-2-基)-甲酰基]硫代吗啉盐酸盐

4-[(1，2，3，4-四氢异喹啉-3-基)-甲酰基]硫代吗啉盐酸盐

4-(2-丁氨基乙酰基)硫代吗啉

4-(2-环己氨基乙酰基)硫代吗啉

4-(2-苄氨基乙酰基)硫代吗啉

4-[2-(4-硝基苄氨基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐

4-[2-(3-氨基丙氨基)-乙酰基]硫代吗啉二盐酸盐

4-[2-(3-羟基丙氨基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐

4-[2-(3-羟基-2，2-二甲基丙氨基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐

4-[2-(4-羟基环己氨基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐

4-[2-(哌啶-4-基-氨基)-乙酰基]硫代吗啉二盐酸盐

(S)-4-(2-丁氨基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-(2-环己氨基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-(2-苄氨基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-[2-(4-硝基苄氨基)-丙酰基]硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-[2-(3-氨基丙氨基)-丙酰基]硫代吗啉二盐酸盐

(S)-4-[2-(3-羟基丙氨基)-丙酰基]硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-[2-(3-羟基-2，2-二甲基丙氨基)-丙酰基]硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-[2-(哌啶-4-基氨基)-丙酰基]硫代吗啉二盐酸盐

(S)-4-[2-(4-羟基环己氨基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-(2-丁氨基-3-甲基丁酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-(2-环己氨基-3-甲基丁酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-(2-苄氨基-3-甲基丁酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-[2-(4-硝基苄基氨基)-3-甲基丁酰基]硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-[2-(3-氨基丙氨基)-3-甲基丁酰基]硫代吗啉二盐酸盐

(S)-4-[2-(3-羟基丙氨基)-3-甲基丁酰基]硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-[2-(3-羟基-2，2-二甲基丙氨基)-3-甲基丁酰基]硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-[2-(哌啶-4-基-氨基)-3-甲基丁酰基]硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-[2-(4-羟基环己氨基)-3-甲基丁酰基]硫代吗啉盐酸盐

4-[(2S)-丁氨基-(3R)-甲基戊酰基]硫代吗啉盐酸盐

4-[(2S)-环己氨基-(3R)-甲基戊酰基]硫代吗啉盐酸盐

4-[(2S)-苄氨基-(3R)-甲基戊酰基]硫代吗啉盐酸盐

4-[(2S)-(4-硝基苄基氨基)-(3R)-甲基戊酰基]硫代吗啉

4-[(2S)-(3-氨基丙氨基)-(3R)-甲基戊酰基]硫代吗啉二盐酸盐

4-[(2S)-(3-羟基丙氨基)-(3R)-甲基戊酰基]硫代吗啉盐酸盐

4-[(2S)-(3-羟基-2，2-二甲基丙氨基)-(3R)-甲基戊酰基]硫代吗啉盐酸盐

4-[(2S)-(哌啶-4-基-氨基)-(3R)-甲基戊酰基]硫代吗啉二盐酸盐

4-[(2S)-(4-羟基氨基)-(3R)-甲基戊酰基]硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-(2-丁氨基-3-苯基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-(2-环己氨基-3-苯基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-(2-苄氨基-3-苯基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-[2-(4-硝基苄基氨基)-3-苯基丙酰基]硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-[2-(3-氨基丙氨基)-3-苯基丙酰基]硫代吗啉二盐酸盐

(S)-4-[2-(3-羟基丙氨基)-3-苯基丙酰基]硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-[2-(3-羟基-2，2-二甲基丙氨基)-3-苯基丙酰基]硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-[2-(哌啶-4-基-丙氨基)-3-苯基丙酰基]硫代吗啉二盐酸盐

(S)-4-[2-(4-羟基丙氨基)-3-苯基丙酰基]硫代吗啉盐酸盐

4-(2-吗啉基-乙酰基)硫代吗啉

4-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐

4-[2-(2，6-二甲基吗啉基)-乙酰基]硫代吗啉

4-(2-环戊氨基乙酰基)硫代吗啉盐酸盐

4-(2-苯胺基乙酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-4-[2-(1-甲基苄氨基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐

4-(2-苯乙氨基乙酰基)硫代吗啉盐酸盐

4-[2-(3-羟基金刚烷胺基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐

1，1-二氧代-4-(2-吗啉基乙酰基)硫代吗啉

1，1-二氧代-4-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐

1，1-二氧代-4-(2-环戊氨基乙酰基)硫代吗啉盐酸盐

1，1-二氧代-4-(2-苯乙氨基乙酰基)硫代吗啉盐酸盐

(S)-1，1-二氧代-4-[2-(1-甲基苄氨基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐

或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物。

本发明第二方面提供了制备本发明第一方面任一项所述化合物的方法，其包括以下步骤：

(i)在-10℃至10℃(例如-10℃至5℃、-10℃至2℃、-5℃至2℃、或-5℃至0℃)的温度下，在有机溶剂(例如四氢呋喃和/或二氯甲烷)中，使式1所示化合物与式2所示酰卤化合物反应1-2小时，得到式3所示化合物

(ii)在0℃至30℃(例如5℃至30℃、10℃至30℃、15℃至30℃、或20℃至30℃)的温度下，在碱(例如有机碱如三乙胺或无机碱如碳酸钾)存在下，在有机溶剂(例如四氢呋喃和/或二氯甲烷)中，使步骤(i)所得式3所示化合物与式NHR₂R₃表示的胺类化合物进行亲核取代反应4-12小时，得到以下式(I)所示化合物：

和任选的，

(iii)对所得的式(I)化合物进行形成盐、溶剂合物、形成酯、形成前体药物、异构体分离等操作，

其中，Y是卤素，X、R₁、R₂、R₃的定义如本发明第一方面任一项所述。

本发明第二方面还提供了制备本发明第一方面任一项所述化合物的方法，其包括以下步骤：

(i)在-10℃至40℃(例如-10℃至35℃、-5℃至30℃、-5℃至25℃、或0℃至25℃)的温度下，在碱(例如无机碱如氢氧化钠或有机碱如三乙胺)存在下，在溶剂(例如水、二氧六环、或其混合物)中，使式4所示化合物与(BOC)₂O反应2-12小时，得到式5所示化合物

(ii)在-10℃至40℃(例如0℃至35℃、5℃至30℃、10℃至30℃、或20℃至25℃)的温度下，在1-2当量的缩合剂(例如EDC、HOBt或其混合物)和碱(例如三乙胺)存在下，在有机溶剂(例如二氯甲烷)中，使式1所示化合物与步骤(i)所得式5所示化合物反应2-4小时，得到式6所示化合物

(iii)在10℃至40℃(例如10℃至35℃、15℃至30℃、20℃至30℃、或20℃至25℃)的温度下，在盐酸乙酸乙酯溶液中，使步骤(ii)所得式6所示化合物脱除BOC保护基，得到式7所示本发明化合物和任选的

(iv)在-10℃至40℃(例如-10℃至35℃、-5℃至35℃、-5℃至30℃、或0℃至30℃)的温度下，使式7所示化合物与包含R₂或R₃基团的醛或酮反应2～6小时，得到以下式8所示的另一本发明化合物：

以及任选的，

(v)对所得式8化合物进行形成盐、溶剂合物、形成酯、形成前体药物、异构体分离等操作，

其中，X、R₁、R₂、R₃的定义如本发明第一方面任一项所述。

本发明第三方面提供了一种药物组合物，其包含治疗和/或预防有效量的本发明第一方面任一项所述化合物或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物，以及任选的一种或多种药学可接受的载体或赋形剂。

本发明第四方面提供了本发明第一方面任一项所述化合物或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物或者本发明第三方面任一项所述药物组合物在制备用于治疗和/或预防与DPP-IV活性过高或者与DPP-IV过度表达有关的疾病或病症的药物中的用途。在一个实施方案中，所述与DPP-IV活性过高或者与DPP-IV过度表达有关的疾病或病症是选自下列的疾病或病症：糖尿病、高血糖症、非胰岛素依赖性糖尿病、II型糖尿病等等。

本发明第四方面还提供了本发明第一方面任一项所述化合物或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物或者本发明第三方面任一项所述药物组合物在制备用于治疗和/或预防糖尿病、高血糖症、非胰岛素依赖性糖尿病、II型糖尿病等等的药物中的用途。

本发明第四方面还提供了本发明第一方面任一项所述化合物或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物或者本发明第三方面任一项所述药物组合物在制备作为DPP-IV抑制剂的药物中的用途。

本发明第四方面还提供了本发明第一方面任一项所述化合物或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物或者本发明第三方面任一项所述药物组合物在制备作为治疗和/或预防糖尿病、高血糖症、非胰岛素依赖性糖尿病、II型糖尿病等等的药物中的用途。

本发明第五方面提供了一种在有需要的受试者中治疗和/或预防与DPP-IV活性过高或者与DPP-IV过度表达有关的疾病或病症的方法，该方法包括给有需要的受试者施用治疗和/或预防有效量的本发明第一方面任一项所述化合物或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物或者本发明第三方面任一项所述药物组合物。根据本发明第五方面任一项的方法，其中所述的与DPP-IV活性过高或者与DPP-IV过度表达有关的疾病或病症选自糖尿病、高血糖症、非胰岛素依赖性糖尿病、II型糖尿病等等。

本发明第五方面还提供了一种在有需要的受试者中治疗和/或预防糖尿病、高血糖症、非胰岛素依赖性糖尿病、II型糖尿病的方法，该方法包括给有需要的受试者施用治疗和/或预防有效量的本发明第一方面任一项所述化合物或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物或者本发明第三方面任一项所述药物组合物。

本发明第六方面提供了用于治疗和/或预防与DPP-IV活性过高或者与DPP-IV过度表达有关的疾病或病症的本发明第一方面任一项所述化合物或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物。根据本发明第六方面的化合物，其中所述的与DPP-IV活性过高或者与DPP-IV过度表达有关的疾病或病症选自：糖尿病、高血糖症、非胰岛素依赖性糖尿病、II型糖尿病等等。

本发明第六方面还提供了用于治疗和/或预防糖尿病、高血糖症、非胰岛素依赖性糖尿病、II型糖尿病等等的本发明第一方面任一项所述化合物或其药学可接受的盐、游离碱、溶剂合物、酯、前药、立体异构体、几何异构体、外消旋物。

本发明任一方面或该任一方面的任一项所具有的特征同样适用于其它任一方面或该其它任一方面的任一项，只要它们不会相互矛盾，当然在相互之间适用时，必要的话可对相应特征作适当修饰。在本发明中，例如，提及“本发明第一方面任一项”时，该“任一项”是指本发明第一方面的任一子方面，在其它方面以类似方式提及时，亦具有类似含义。

发明详述：

下面对本发明的各个方面和特点作进一步的描述。

本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。下面是本发明所用多种术语的定义，这些定义适用于本申请整个说明书中所用的术语，除非在具体情况中另作说明。

如用于本文的，短语“X为S或者SO₂”，其是指例如式I所示化合物的含氮杂环中，其中的X可以是硫原子；或者可以是被两个氧代取代的硫原子，即-X-的含义为-S(O₂)-。

在本发明上下文中，例如在通式化合物或具体化合物中所描绘的，某个原子团可以连接若干个氢原子，使该原子团可以满足化学价的要求，尽管相应原子团上的氢原子可以在结构式中不给予绘出。例如在下式其中的相关原子团例如氨基，应连接有两个氢原子，从而使该氨基满足化学价的要求，即上式与式表示的化合物等同，当然也等同于式表示的化合物。

术语“烷氧基”是指烷基-O-，其中的烷基如本发明所述。

如本文所述的，术语“卤”、“卤素”、“卤素原子”、“卤代”等表示氟、氯、溴或碘，特别是表示氟、氯或溴。

如本文所述的，术语“烷基”是指具有指定数目碳原子数的烷基，其为直链或支链的烷基，并且其可包括其子基团，例如提及时“C_1-6烷基”时，其还可以包括C_1-5烷基、C_1-4烷基、C_2-6烷基、C_2-4烷基等表示的子范围的基团，以及具体基团例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基。

如本文所述的，术语“芳基”在本文中单独或在组合中定义为单环或双环芳族基团，其任选含有作为环原子的杂原子，即时可称为杂芳基。芳基的实例包括但不限于苯基、萘基、喹啉基、异喹啉基、四氢异喹啉基等。在一个实施方案中，所述的芳基是苯基、喹啉基、异喹啉基、四氢异喹啉基。类似地，术语“芳氧基-”是指一个芳基，其通过氧与化合物的其它部分连接。

如本文所述的，术语“芳基-C_1-6烷基-”是指芳基基团，其通过C_1-6烷基与化合物的其它部分连接。

如本文所述的，术语“氨基甲酰基”是指H₂N-CO-。

如本文所述的，术语“环烷基”是指具有指定数目环碳原子数的环状烷基，并且其可包括其子基团，例如提及时“C_3-8环烷基”时，其还可以包括C_3-7环烷基、C_3-6环烷基、C_3-5环烷基、C_4-7环烷基等表示的子范围的基团，以及具体基团例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等。

如本文所述的，术语“桥环烷基”是指具有指定数目环碳原子数的桥接的环状烷基，并且其可包括其子基团，例如提及时“C_6-12桥环烷基”时，其还可以包括C_6-11桥环烷基、C_6-10桥环烷基、C_7-10桥环烷基等表示的子范围的基团，以及具体基团例如金刚烷基等。

如本文所述的，短语“R₁和R₂与分别连接至此二者的碳和氮原子一起形成4-12元的含氮单环或双环杂环”，例如本发明以下式(I)化合物所描绘述的：是指其中的基团部分中的R₁和R₂以及＊位碳和＊＊位氮四者之间形成具有指定环原子数目的含氮的单环或双环状杂环。

如本文所述的，术语“有效量”是指可在受试者中实现治疗和/或预防本发明所述疾病或病症的剂量。

如本文所述的，术语“药物组合物”，其还可以是指“组合物”，其可用于在受试者特别是哺乳动物中实现治疗和/或预防本发明所述疾病或病症。

如本文所述的，术语“受试者”可以指患者或者其它接受本发明式I化合物或其药物组合物以治疗和/或预防本发明所述疾病或病症的动物，特别是哺乳动物，例如人、狗、猴、牛、马等。

如本文所述的，术语“疾病和/或病症”是指所述受试者的一种身体状态，该身体状态与本发明所述疾病和/或病症有关。例如，本发明所述疾病和/或病症既可以指一种身体状态，例如呈较高血糖的身体状态，也可以指一种疾病状态，例如表现为高血糖症、糖尿病等疾病状态。在本文中对于身体状态和疾病状态不作区分，或者二者可以相互指代，例如“高血糖”与“高血糖症”可以互换使用。

如本文所述的，如未特别指明，“％”是指重量/重量的百分比，特别是在描述固体物质的情况下。当然，在描述液体物质时，该“％”可以指重量/体积的百分比(对于固体溶于液体的情形)，或者可以指体积/体积百分比(对于液体溶于液体的情形)。

如本文所述的，术语“药学可接受的”例如在描述“药学可接受的盐”时，表示该盐其不但是受试者生理学上可接受，而且还可指在药学上有使用价值的合成物质，例如在为进行手性拆分时所形成的作为中间体的盐，虽然这种中间体的盐并不能直接给予受试者，但该盐可在为获得本发明终产物中起作用。

在一个实施方案中，本发明化合物或其盐例如盐酸盐可以从下列的两种反应途径制备：

流程1：

步骤1：将硫代吗啉或者氧化硫代吗啉溶解在无水惰性溶剂四氢呋喃或者二氯甲烷中，慢速滴加氯乙酰氯(或者也可以是溴乙酰溴)，反应温度优选-5-0℃。

步骤2：将上步产物与1-2当量的胺类化合物进行亲核取代反应，反应一般在惰性溶剂中如二氯甲烷或者四氢呋喃中进行，反应温度优选0-30℃，首选20-25℃。

最终，根据需要获得的本发明的化合物是游离形式或者其药学上可接受的盐。

流程2：

第一步骤：是在碱性条件(如氢氧化钠或三乙胺存在时)下，对天然或已知原料通过常规方法合成的氨基酸的氨基进行保护，通常是用BOC进行保护。通常可以在水和二氧六环的混合溶剂条件下进行反应，反应温度优选-5-30℃，首选0-25℃。

第二步骤：是在1-2当量的缩合剂(EDC、HOBt)存在下，与1-2当量优选1.2当量硫代吗啉进行缩合反应，反应一般是在惰性有机溶剂如二氯甲烷中进行，反应温度优选0-30℃，首选20-25℃。

第三步骤：是在盐酸乙酸乙酯溶液中脱除BOC保护，反应温度优选20-25℃。该步反应得到的一系列化合物Ic包括在本专利保护范围内。上述反应步骤中涉及的化合物，如无特殊说明都是通过已知的化合物为原料通过常规的反应方法得到原料。

第四步骤：当R₂为C_1-4烷基、环己基、苄基、4-硝基苄基时，是在冰醋酸催化下、Ia的游离碱形式与醛或酮发生氨化还原反应，反应一般是在四氢呋喃中进行，加入4A分子筛做干燥剂，反应温度优选0-30℃；

当R₂为氨基丙基、4-羟基环己基、4-哌啶基、3-羟基金刚烷基、2，2-二甲基3-羟基丙基等时，式Ic的盐酸盐形式在碱性条件下(如氢氧化钠)进行，反应一般是在甲醇中进行，加入4A分子筛做干燥剂，反应温度优选0-30℃；

当R₂为羟丙基时，是在碱性条件下(如碳酸钠、碳酸钾)与Ic的盐酸盐形式发生取代反应，反应一般在乙醇中进行，反应温度优选80-100℃。

在一个实施方案中，本发明提供了制备本发明化合物的方法，其包括以下步骤：

(i)在5℃至40℃(例如10℃至35℃、10℃至30℃、或15℃至25℃)的温度下，在溶剂(例如二氧六环)中，在碱性条件下(例如在碱金属氢氧化物如氢氧化钾、氢氧化钠或氧化铝存在下)，使式所示化合物与二碳酸二叔丁酯(即(BOC)₂O)反应1-40小时(例如5-30小时、或14-25小时)，得到式所示化合物；

(ii)在5℃至40℃(例如10℃至35℃、10℃至30℃、或15℃至25℃)的温度下，在溶剂(例如二氯甲烷、四氢呋喃或其混合物)中，在碱性条件下(例如在有机碱如三乙胺存在下)，使式所示化合物与硫代吗啉反应1-40小时(例如5-30小时、或14-25小时)，得到式所示化合物；

(iii)在5℃至40℃(例如10℃至35℃、10℃至30℃、或15℃至25℃)的温度下，在溶剂(例如乙酸乙酯)中，在酸性条件下(例如在无机酸如盐酸存在下)，使式所示化合物处理0.5-2小时(例如0.5-1.5小时、或0.5小时)，脱除保护基，得到式所示化合物，即为本发明化合物；和任选的

(iv)在5℃至40℃(例如10℃至35℃、10℃至30℃、或15℃至25℃)的温度下，在溶剂(例如甲醇，例如无水甲醇)中，在酸性条件下(例如在有机酸如冰乙酸存在下)，使式所示化合物与包含R₂基团的醛或酮反应0.5-2小时(例如0.5-1.5小时、或0.5小时)，得到式所示的另一本发明化合物，

其中各式中的各符号如本发明第一方面任一项所述。

(i)在5℃至40℃(例如10℃至35℃、10℃至30℃、或15℃至25℃)的温度下，在溶剂(例如冰乙酸)中，在酸性条件下(例如在有机酸如冰乙酸存在下)，在氧化剂(例如双氧水)存在下，使式所示化合物处理1-40小时(例如10-30小时、或14-25小时)，得到式所示化合物；

(ii)在-10℃至10℃(例如-10℃至5℃、-10℃至2℃、-5℃至2℃、或-5℃至0℃)的温度下，在有机溶剂(例如四氢呋喃和/或二氯甲烷)中，使式所示化合物与氯乙酰氯反应，得到式所示化合物；

(iii)在5℃至40℃(例如10℃至35℃、10℃至30℃、或15℃至25℃)的温度下，在溶剂(例如四氢呋喃和/或二氯甲烷)中，在碱性条件下(例如在碱金属的碳酸盐如碳酸钾或碳酸钠存在下)，使式所示化合物与式NHR₂R₃表示的化合物反应1-40小时(例如10-30小时、或14-25小时)，得到式所示的本发明化合物，

其中各式中的各符号如本发明第一方面任一项所述。

在制备本发明化合物方法的一个实施方案中，可以通过以下示例性的制备路线1-8进行：

制备路线1.BOC-氨基酸的制备

起始原料：各种天然L-氨基酸。

反应条件：反应优选在碱性条件下进行，优选的碱是碱金属的氢氧化物或氧化铝，优选的碱金属的氢氧化物是氢氧化钾、氢氧化钠。

反应溶剂：1，4-二氧六环作为溶剂，根据不同氨基酸衍生物的溶解性和所使用的碱选择性的加入其他溶剂，水。溶剂的量根据反应物的溶解性适当调节。

温度：反应温度优选是5-40℃，更优选是10-30℃，最优选是15-25℃。

时间：反应的时间是1-40小时，优选是5-30小时，更优选是14-25小时。

反应的进程可以使用薄层色谱(TLC)或高效液相(HPLC)监控，反应完全后，用酸酸化至中性，优选的酸是有机酸，更优选的是柠檬酸。产物用有机溶剂提取或过滤获得，再选择性的进行洗涤、干燥、纯化达到使其纯度满足下步反应的要求。

制备路线2.酰胺的制备

起始原料：各种BOC保护的L-氨基酸。

反应条件：反应优选在碱性条件下进行，优选的碱是有机碱，优选的有机碱的氢氧化物是三乙胺。

反应溶剂：二氯甲烷或者四氢呋喃作为溶剂，根据不同氨基酸衍生物的溶解性和所使用的碱选择性的加入。溶剂的量根据反应物的溶解性适当调节。

反应的进程可以使用薄层色谱(TLC)或高效液相(HPLC)监控，反应完全后，将反应液中固体滤除。产物用有机溶剂提取或过滤获得，再选择性的进行洗涤、干燥、纯化达到使其纯度满足下步反应的要求。

制备路线3.化合物1b的制备

起始原料：各种取代的BOC保护的L-氨基酸酰胺。

反应条件：反应优选在酸性条件下进行，优选的酸是无机酸，优选的无机酸的盐酸。

反应溶剂：乙酸乙酯作为溶剂，根据不同氨基酸衍生物的溶解性和所使用的碱选择性的加入。溶剂的量根据反应物的溶解性适当调节。

时间：反应的时间是0.5-2小时，优选是0.5-1.5小时，更优选是0.5小时。

反应的进程可以使用薄层色谱(TLC)或高效液相(HPLC)监控，反应完全后，将所得固体滤出，再选择性的进行洗涤、干燥、纯化达到使其纯度满足下步反应的要求。

制备路线4.化合物1c的制备

起始原料：各种取代的L-氨基酸酰胺。

当起始原料为游离氨基化合物时，优选反应条件A：反应优选在酸性条件下进行，优选的酸是有机酸，优选的有机酸是冰醋酸。

其中，R1为氢、甲基、异丙基和苄基等；R2为C_4-5烷基、环己基、苄基、4-硝基苄基等。

反应溶剂：无水甲醇作为溶剂，根据不同氨基酸酰胺的溶解性和所使用的碱选择性的加入。溶剂的量根据反应物的溶解性适当调节。

当起始原料为盐酸盐形式时，优选反应条件B：反应优选在碱性条件下进行，优选的碱是碱金属的氢氧化物或氧化铝，优选的碱金属的氢氧化物是氢氧化钾、氢氧化钠。优选的还原剂是碱金属的硼氢化物或三乙酰氧基硼氢化物，优选的还原剂是三乙酰氧基硼氢化钠。优选的干燥剂是4A分子筛。当R₂为羟丙基时，反应优选在碱性条件下进行，优选的碱是无机碱，优选的无机碱是碳酸钾。

其中，R1为氢、甲基、异丙基和苄基等；R2为氨基氨基、氨基环烷基、羟基烷基、羟基环烷基等。

温度：反应温度优选是50-100℃，更优选是60-100℃，最优选是78℃。

制备路线5.氯乙酰化硫代吗啉的制备

起始原料：硫代吗啉。

反应条件：反应优选在碱性条件下进行，优选的碱是碱金属的碳酸盐，优选的碱金属的碳酸盐是碳酸钾或碳酸钠。优选的酰化剂是氯乙酰氯或溴乙酰溴。

反应溶剂：无水二氯甲烷或四氢呋喃作为溶剂，根据不同氨基酸酰胺的溶解性和所使用的碱选择性的加入。溶剂的量根据反应物的溶解性适当调节。

温度：反应温度优选是-10-40℃，更优选是-5-25℃，最优选是-5-0℃。

制备路线6.化合物1a的制备

起始原料：氯乙酰化的硫代吗啉。

反应条件：反应优选在碱性条件下进行，优选的碱是碱金属的碳酸盐，优选的碱金属的碳酸盐是碳酸钾或碳酸钠。

时间：反应的时间是1-40小时，优选是10-30小时，更优选是14-25小时。

制备路线7.氯乙酰化的氧化硫代吗啉的制备

A：起始原料：硫代吗啉。

反应条件：反应优选在酸性条件下进行，优选的酸是有机酸，优选的有机酸是冰醋酸，同时过量的冰醋酸也可以做溶剂。氧化剂优选双氧水。

反应溶剂：过量的冰醋酸作为溶剂，根据不同氨基酸酰胺的溶解性和所使用的碱选择性的加入。溶剂的量根据反应物的溶解性适当调节。

B：按照6制备。

制备路线8.氧化硫代吗啉类化合物制备

起始原料：氯乙酰化的氧化硫代吗啉。

本发明还包括用于检测所涉及化合物药理活性的方法，或者本发明还提供一种药理活性方法，用该方法检测本发明化合物的药理活性特别是对DPP-IV酶的活性。具体地说，采用毕赤酵母表达的人源DPP-IV酶经初步提纯后进行化合物筛选，酶对底物反应结果用吸光值检测，化合物对酶的抑制水平反应为底物反应的减低，该筛选体系反应灵敏、特异，重复性好，自方法建立后已用于数百个化合物筛选，可确保筛选方法的可靠。本发明经体外酶水平活性考察证明，本发明化合物对DPP-IV酶具有较高的抑制活性。

本发明的某些化合物可以以不同的异构体(例如对映异构体和非对映异构体)形式存在。本发明考虑了所有这种异构体的纯化形式和混合形式，包括外消旋混合物。烯醇形式也包括在内。

本发明的化合物可以以非溶剂合物和溶剂合物的形式存在，包括水合形式，例如半水合物。一般来说，对于本发明的目的，与药物可接受的溶剂如水、乙醇等的溶剂合物形式与非溶剂合物形式相当。

本发明的某些化合物还可形成药物可接受的盐，例如酸加成盐。例如，氮原子可与酸成盐。用于成盐的合适酸的实例是盐酸、硫酸、磷酸、乙酸、柠檬酸、草酸、丙二酸、水杨酸、苹果酸、富马酸、琥珀酸、抗坏血酸、马来酸、甲磺酸和本领域技术人员公知的其他矿物酸和羧酸。这些盐是通过以常规方式使游离碱形式与足量的所需酸相接触而产生盐来制备的。用合适的稀碱水溶液如氢氧化钾、碳酸钾、氨水和碳酸氢钠的稀水溶液处理所得的盐，可使游离碱形式再生。各游离碱形式与它们各自的盐形式在某些物理性质(如在极性溶剂中的溶解度)上稍有不同，但对于本发明目的，各酸式盐与它们各自的游离碱形式相当。(参见例如S.M.Berge，etal.，“PharmaceuticalSalts，”J.Pharm.Sci.，66：1-19(1977)，其通过引用并入本文。

本发明的化合物可以以衍生自无机酸或有机酸的药物可接受盐的形式使用。词语“药物可接受的盐”指在可靠的医学判断范围内，适合用于与人类和低等动物的组织接触而不出现过度的毒性、刺激、过敏反应等，且与合理的效果/风险比相称的盐。药物可接受的盐是本领域公知的。例如，S.M.Berge等在J.PharmaceuticalSciences，1977，66：1(参照以下)中对药物可接受的盐进行了详细描述。所述盐可通过使本发明化合物的游离碱官能度与合适的有机酸反应，在本发明化合物的最终分离和纯化过程中原位制备或者单独制备。代表性的酸加成盐包括但不限于乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、柠檬酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、二葡糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐(异硫代硫酸盐)、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、磷酸盐、谷氨酸盐、碳酸氢盐、对甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。同样，碱性含氮基团可用以下物质季铵化：低级烷基卤化物如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二烷基酯如硫酸二甲酯、二乙酯、二丁酯和二戊酯；长链卤化物如癸基、十二烷基、十四烷基和十八烷基的氯化物、溴化物和碘化物；芳基烷基卤化物如苄基溴和苯乙基溴及其他。因此得到可溶于或分散于水或油的产品。可用来形成药物可接受的酸加成盐的酸实例包括无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸，以及有机酸如草酸、马来酸、琥珀酸和柠檬酸。

碱加成盐可通过使本发明化合物的含羧酸部分与合适的碱反应，在本发明化合物的最终分离和纯化过程中原位制备，所述的碱例如药物可接受的金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐和碳酸氢盐，或者氨或有机伯胺、仲胺或叔胺。

药物可接受的盐包括但不限于基于碱金属或碱土金属的阳离子如锂、钠、钾、钙、镁和铝盐等，以及无毒的季铵和胺阳离子，包括铵、四甲基铵、四乙基铵、甲基铵、二甲基铵、三甲基铵、三乙基铵、二乙基铵和乙基铵等。可用于形成碱加成盐的其他代表性有机胺包括乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌啶、哌嗪等。

可改变本发明药物组合物中各活性成分的实际剂量水平，以便所得的活性化合物量能有效针对具体患者、组合物和给药方式得到所需的治疗反应。剂量水平须根据具体化合物的活性、给药途径、所治疗病况的严重程度以及待治疗患者的病况和既往病史来选定。但是，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。

本发明涉及以本发明化合物作为活性成份的药物组合物。该药物组合物可根据本领域公知的方法制备。可通过将本发明化合物与一种或多种药学上可接受的固体或液体赋形剂和/或辅剂结合，制成适于人或动物使用的任何剂型。本发明化合物在其药物组合物中的含量通常为0.1-95重量％。

当用于上述治疗或其他治疗时，治疗有效量的一种本发明化合物可以以纯形式应用，或者以药物可接受的盐、酯或前药形式(在存在这些形式的情况下)应用。或者，所述化合物可以以含有该目的化合物与一种或多种药物可接受赋形剂的药物组合物给药。词语“治疗有效量”的本发明化合物指以适用于任何医学治疗的合理效果/风险比治疗障碍的足够量的化合物。但应认识到，本发明化合物和组合物的总日用量须由主诊医师在可靠的医学判断范围内作出决定。对于任何具体的患者，具体的治疗有效剂量水平须根据多种因素而定，所述因素包括所治疗的障碍和该障碍的严重程度；所采用的具体化合物的活性；所采用的具体组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所采用的具体化合物的给药时间、给药途径和排泄率；治疗持续时间；与所采用的具体化合物组合使用或同时使用的药物；及医疗领域公知的类似因素。例如，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。

给予人或哺乳动物的本发明化合物总日剂量可在约0.0001至约1000mg/kg/天(例如约0.001至约100mg/kg/天、约0.001至约10mg/kg/天、约0.01至约10mg/kg/天、或约0.1至约10mg/kg/天)的范围内。对于口服给药的目的，更优选剂量可在约0.001至约50mg/kg/天(例如约0.001至约40mg/kg/天、约0.001至约30mg/kg/天、约0.01至约20mg/kg/天、或约0.1至约10mg/kg/天)的范围；对于注射用药，其剂量可参考上述口服剂量，必要时可以作适当调整。如果需要，有效的日剂量可出于给药目的分成多剂量；因此，单剂量组合物可含有这种数量或其分剂量，以构成日剂量。

本发明还提供包含与一种或多种无毒药物可接受载体配制在一起的本发明化合物的药物组合物。所述药物组合物可特别专门配制成以固体或液体形式供口服给药、供胃肠外注射或供直肠给药。

本发明的药物组合物可通过口服、直肠、胃肠外、池内、阴道内、腹膜内、局部(如通过散剂、软膏剂或滴剂)、口颊给予人类和其他哺乳动物，或者作为口腔喷雾剂或鼻腔喷雾剂给予。本文所用术语“胃肠外”指包括静脉内、肌肉内、腹膜内、胸骨内、皮下和关节内注射和输液的给药方式。

适合于胃肠外注射的组合物可包括生理上可接受的无菌含水或非水溶液剂、分散剂、混悬剂或乳剂，及供重构成无菌可注射溶液剂或分散剂的无菌散剂。合适的含水或非水载体、稀释剂、溶剂或媒介物的实例包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇、甘油等)、植物油(如橄榄油)、可注射有机酯如油酸乙酯及它们的合适混合物。

这些组合物也可含有辅料，如防腐剂、湿润剂、乳化剂和分散剂。通过各种抗细菌剂和抗真菌剂，例如尼泊金酯类、三氯叔丁醇、苯酚、山梨酸等，可确保防止微生物的作用。还期望包括等渗剂，例如糖类、氯化钠等。通过使用能延迟吸收的物质，例如单硬脂酸铝和明胶，可达到可注射药物形式的延长吸收。

可注射制剂可例如通过用滤菌器过滤或通过掺入无菌固体组合物形式的灭菌剂来灭菌，所述固体组合物可在临用前溶解或分散于无菌水或其他无菌可注射介质。

供口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在此类固体剂型中，活性化合物可与至少一种惰性的药物可接受赋形剂或载体如柠檬酸钠或磷酸二钙和/或以下物质混合：a)填充剂或增量剂如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸；b)粘合剂如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯树胶；c)保湿剂如甘油；d)崩解剂如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；e)溶液阻滞剂如石蜡；f)吸收加速剂如季铵化合物；g)湿润剂如鲸蜡醇和甘油单硬脂酸酯；h)吸附剂如高岭土和膨润土以及i)润滑剂如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠和它们的混合物。在胶囊剂、片剂和丸剂的情况下，所述剂型中也可包含缓冲剂。

供口服给药的液体剂型包括药物可接受的乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。液体剂型除含有活性化合物外还可含有本领域常用的惰性稀释剂，例如水或其他溶剂，增溶剂和乳化剂例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油类(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯及它们的混合物。

本文所用的术语“药物可接受的前药”代表本发明化合物的前药，其在可靠的医学判断范围内适合用于与人类和低等动物的组织接触而不出现过度的毒性、刺激、过敏反应等，与合理的效果/风险比相称且对其预定用途有效，在可能的情况下还代表本发明化合物的两性离子形式。本发明的前药可例如通过在血液中水解而在体内快速转化成上式的母体化合物。充分讨论提供于T.HiguchiandV.Stella，Pro-drugsasNovelDeliverySystems，V.14oftheA.C.S.SymposiumSeries以及EdwardB.Roche，ed.，BioreversibleCarriersinDrugDesign，AmericanPharmaceuticalAssociationandPergamonPress(1987)，其通过引用并入本文。

具体实施方式

通过下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述，然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。

对于以下全部实施例，可以使用本领域技术人员已知的标准操作和纯化方法。除非另有说明，所有温度以℃(摄氏度)表示。化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或质谱(MS)来确定的。m.p.是以℃给出的熔点，温度未加校正。

制备实施例部分

实施例1

4-(2-氨基乙酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物1

步骤1：N-叔丁氧羰基甘氨酸

将甘氨酸(1.5g，20mmol)用20ml的2M的NaOH溶解，0℃时加入(BOC)₂O(5.24g，24mmol)，后升至室温反应，4小时后反应完全，将反应液用浓盐酸调节pH值＝2-3，用乙酸乙酯萃取(50ml＊3)，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，得到白色固体2.1g，收率：60％。

步骤2：4-[2-(N-叔丁氧羰基氨基)-乙酰基]硫代吗啉

将N-叔丁氧羰基甘氨酸(0.18g，1mmol)用二氯甲烷10ml溶解，加入EDC(0.23g，1.2mmol)，搅拌均匀后，加入硫代吗啉(0.12g，1.2mmol)，室温搅拌。3小时后反应完全，将反应液过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，得油状物0.11g，收率：42.3％。

化合物1：4-(2-氨基乙酰基)硫代吗啉盐酸盐

将4-[2-(N-叔丁氧羰基氨基)-乙酰基]硫代吗啉(0.11g，0.43mmol)用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，室温搅拌4个小时，反应液由澄清到逐渐有白色固体析出，得到的白色固体用正己烷溶剂洗涤。得到白色固体58mg，收率：71％。m.p.＞250℃。

HR-ESI-MSC₆H₁₂N₂OS，计算值160.0670，实测值[M+H]⁺161.1376.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：8.20(3H，NH₂+HCl)，3.85(2H，s，CH ₂)，3.74和3.60-3.67(4H，dt，J＝43.2Hz，J＝4.8Hz，CH ₂NCH ₂)，2.64和2.55＝2.60(4H，dt，J＝8.7Hz，J＝4.8Hz，CH ₂SCH ₂).

下列化合物按照盐酸盐实施例1的方法制备。

实施例2

(S)-4-(2-氨基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物2

步骤1：N-叔丁氧羰基-L-丙氨酸

将L-丙氨酸(1.78g，20mmol)用20ml的2M的NaOH溶解，0℃时加入(BOC)₂O(5.24g，24mmol)，后升至室温反应，6小时后反应完全，将反应液用浓盐酸调节pH值＝2-3，用乙酸乙酯萃取(50ml＊3)，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，得到白色固体3.0g，收率：79％。

步骤2：(S)-4-[2-(N-叔丁氧羰基氨基)-丙酰基]硫代吗啉

将N-叔丁氧羰基-L-丙氨酸(0.19g，1mmol)用二氯甲烷10ml溶解，加入EDC(0.23g，1.2mmol)，搅拌均匀后，加入硫代吗啉(0.12g，1.2mmol)，室温搅拌。3小时后反应完全，将反应液过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1)，得油状物0.22g，收率：80％。

化合物2：(S)-4-(2-氨基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐

将(S)-4-[2-(N-叔丁氧羰基氨基)-丙酰基]硫代吗啉(0.20g，0.73mmol)用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，室温搅拌4个小时，反应液由澄清到逐渐有白色固体析出，得到的白色固体用正己烷溶剂洗涤。得到白色固体122mg，收率：79％。m.p.＞250℃。

HR-ESI-MSC₇H₁₄N₂OS，计算值174.0827，实测值[M+H]⁺175.0931.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：8.15(3H，NH₂和HCl)，4.32(1H，q，J＝6.6Hz，CHNH₂)，3.92-3.55(4H，m，CH ₂NCH ₂)，2.70-2.56(4H，m，CH ₂SCH ₂)，1.29(3H，d，J＝6.9Hz，CH ₃).

实施例3

(S)-4-(2-氨基-3-甲基丁酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物3

步骤1：N-叔丁氧羰基-L-缬氨酸

将L-缬氨酸(2.34g，20mmol)用20ml的2M的NaOH溶解，0℃时加入(BOC)₂O(5.24g，24mmol)，后升至室温反应，8小时后反应完全，将反应液调节pH值＝2-3，用乙酸乙酯萃取(50ml＊3)，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，得到油状物4.5g，收率：100％。

步骤2：(S)-4-[2-(N-叔丁氧羰基氨基)-3-甲基丁酰基]硫代吗啉

将N-叔丁氧羰基-L-缬氨酸(4.3g，20mmol)用50ml二氯甲烷溶解，加入EDC(4.58g，24mmol)，搅拌均匀后，加入硫代吗啉(2.47g，24mmol)，室温搅拌。反应完全后，直接过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)，得油状物5.0g，收率：83％。

化合物3：(S)-4-(2-氨基-3-甲基丁酰基)硫代吗啉盐酸盐

将(S)-4-[2-(N-叔丁氧羰基氨基)-3-甲基丁酰基]硫代吗啉(4.8g，16mmol)用20ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，室温搅拌4个小时，反应液由澄清到逐渐有白色固体析出，得到的白色固体用正己烷洗涤，得到白色固体，收率：，m.p.：70-72℃。

HR-ESI-MSC₉H₁₈N₂OS，计算值202.1140，实测值[M+H]⁺203.1244.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：8.26(3H，NH₂和HCl)，4.22(1H，s，CHCH(CH₃)₂)，4.07-2.69(8H，m，NCH ₂ CH ₂SCH ₂ CH ₂)，1.22(1H，m，CH(CH₃)₂)，0.95(3H，d，J＝6.3Hz，CH ₃)，0.90(3H，d，J＝6.9Hz，CH ₃).

实施例4

(S)-4-(2-氨基-3-甲基戊酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物4

步骤1：N-叔丁氧羰基-L-异亮氨酸

将L-亮氨酸(2.62g，20mmol)用20ml的2M的NaOH溶解，0℃时加入(BOC)₂O(5.24g，24mmol)，后升至室温反应，6小时后反应完全，将反应液用浓盐酸调节pH值＝2-3，用乙酸乙酯萃取(50ml＊3)，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，得到白色固体4.0g，收率：87％。

步骤2：(S)-4-[2-(N-叔丁氧羰基)氨基-3-甲基戊酰基]硫代吗啉

将N-叔丁氧羰基-L-异亮氨酸(0.23g，1mmol)用二氯甲烷10ml溶解，加入EDC(0.23g，1.2mmol)，搅拌均匀后，加入硫代吗啉(0.12g，1.2mmol)，室温搅拌。5小时后反应完全，将反应液过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1)，得油状物0.24g，收率：76％。

化合物4：(S)-4-(2-氨基-3-甲基戊酰基)硫代吗啉盐酸盐

将(S)-4-[2-(N-叔丁氧羰基)氨基-3-甲基戊酰基]硫代吗啉(0.22g，0.70mmol)用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，室温搅拌4个小时，反应液由澄清到逐渐有白色固体析出，得到的白色固体用正己烷溶剂洗涤。得到白色固体148mg，收率：84％。m.p.214-216℃。

HR-ESI-MSC₁₀H₂₀N₂OS，计算值216.1296，实测值[M+H]⁺217.1376.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：8.15(3H，NH₂)，4.25(1H，d，J＝4.5Hz，CHNH₂)，4.07-3.47(4H，m，CH ₂NCH ₂)，2.79-2.55(4H，m，CH ₂SCH ₂)，1.73(1H，m，CH ₂CH)，1.42(1H，m，CH ₂CH)，1.09(1H，m，(CH₃)₂ CHCH₂)，0.93(3H，d，J＝6.9Hz，NH₂CHCH₂(CH ₃)₂)，0.84(3H，t，J＝6.9Hz，NH₂CHCH₂(CH ₃)₂).

实施例5

(S)-4-(2-氨基-3，3-二甲基丁酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物5

步骤1：(S)-N-叔丁氧羰基-2-叔丁基甘氨酸

将L-叔丁基甘氨酸(1.0g，7.6mmol)用20ml的2M的NaOH溶解，0℃时加入(BOC)₂O(1.83g，8.4mmol)，后升至室温反应，8小时后反应完全，将反应液调节pH值＝2-3，用乙酸乙酯萃取(50ml＊3)，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，得到油状物2.0g，收率：100％。

步骤2：(S)-4-[2-(N-叔丁氧羰基氨基)-3，3-二甲基丁酰基]硫代吗啉

将(2S)-(N-叔丁氧羰基)氨基-3，3-二甲基丁酸(1.0g，4.3mmol)用50ml二氯甲烷溶解，加入EDC(1.0g，5.2mmol)，搅拌均匀后，加入硫代吗啉(0.54g，5.2mmol)，室温搅拌。反应完全后，直接过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)，得油状物1.0g，收率：74％。

化合物5：(S)-4-(2-氨基-3，3-二甲基丁酰基)硫代吗啉盐酸盐

将(S)-4-[2-(N-叔丁氧羰基氨基)-3，3-二甲基-丁酰基]硫代吗啉(0.9g，2.8mmol)用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，室温搅拌4个小时，反应液由澄清到逐渐有白色固体析出，得到的白色固体用正己烷洗涤，得到白色固体0.7g，收率：85％。m.p.：226-227℃。

HR-ESI-MSC₁₀H₂₀N₂OS，计算值216.1296，实测值[M+H]⁺217.1376.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：8.26(3H，s，HCl+NH₂)，4.28(1H，m，NH₂ CH)，4.23-2.44(8H，m，CH ₂ CH ₂SCH ₂ CH ₂N)，0.96(9H，s，CH(CH₃)₃).

实施例6

(S)-4-(2-氨基-3苯基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物6

步骤1：N-叔丁氧羰基-L-苯丙氨酸

将L-苯丙氨酸(1.65g，10mmol)用10ml的2M的NaOH溶解，0℃时加入(BOC)₂O(2.62g，12mmol)，后升至室温反应，8小时后反应完全，将反应液用浓盐酸调节pH值＝2-3，用乙酸乙酯萃取(50ml＊3)，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，得到油状物2.5g，收率：94％。

步骤2：(S)-4-[2-(N-叔丁氧羰基氨基)-3苯基丙酰基]硫代吗啉

将N-叔丁氧羰基-L-苯丙氨酸(0.27g，1.0mmol)用10ml二氯甲烷溶解，加入EDC(0.23g，1.2mmol)，搅拌均匀后，加入硫代吗啉(0.12g，1.2mmol)，室温搅拌。反应完全后，直接过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1)，得油状物240mg，收率：69％。

化合物6：(S)-4-(2-氨基-3苯基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐

将(S)-4-[2-(N-叔丁氧羰基氨基)-3苯基丙酰基]硫代吗啉(0.2g，0.57mmol)用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，室温搅拌3个小时，反应液由澄清到逐渐有白色固体析出，得到的白色固体用正己烷溶剂洗涤。得到白色固体131mg，收率：79％。m.p.：165-168℃。

HR-ESI-MSC₁₃H₁₈N₂OS，计算值250.1140，实测值[M+H]⁺251.1383.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：8.33(3H，NH₂+HCl)，7.37-7.21(5H，m，Ph)，4.61(1H，t，J＝7.5Hz，CHCH₂)，3.72-2.87(8H，m，NCH ₂ CH ₂SCH ₂ CH ₂)，3.05(1H，dd，J＝8.7Hz，J＝13.5Hz，PHCH ₂)，2.91(1H，dd，J＝5.1Hz，J＝13.2Hz，PHCH ₂).

实施例7

4-(4-甲硫基-2-氨基丁酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物7

步骤1：N-叔丁氧羰基蛋氨酸

将蛋氨酸(2.98g，20mmol)用20ml的2M的NaOH溶解，0℃时加入(BOC)₂O(5.24g，24mmol)，后升至室温反应，6小时后反应完全，将反应液用浓盐酸调节pH值＝2-3，用乙酸乙酯萃取(50ml＊3)，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，得到白色固体4.2g，收率：84％。

步骤2：4-[4-甲硫基-2-(N-叔丁氧羰基氨基)-丁酰基]硫代吗啉

将N-叔丁氧羰基蛋氨酸(0.25g，1mmol)用二氯甲烷10ml溶解，加入EDC(0.23g，1.2mmol)，搅拌均匀后，加入硫代吗啉(0.12g，1.2mmol)，室温搅拌。5小时后反应完全，将反应液过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1)，得油状物0.16g，收率：48％。

化合物7：4-(4-甲硫基-2-氨基丁酰基)硫代吗啉盐酸盐

将4-[4-甲硫基-2-(N-叔丁氧羰基氨基)-丁酰基]硫代吗啉(0.15g，0.45mmol)用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，室温搅拌4个小时，反应液由澄清到逐渐有白色固体析出，得到的白色固体用正己烷溶剂洗涤。得到白色固体110mg，收率：91％。m.p.158-160℃。

HR-ESI-MSC₉H₁₈N₂OS₂，计算值234.0861，实测值[M+H]⁺235.0942.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：8.23(3H，s，NH₂+HCl)，4.38(1H，s，NHCH)，3.89-3.61(4H，m，CH ₂NCH ₂)，2.71-2.56(4H，m，CH ₂ SCH ₂)，2.05(3H，s，CH ₃S)，1.43(9H，s，BOC)，2.48-1.87(4H，m，CH₃SCH ₂ CH ₂).

实施例8

(2S，3R)-4-(3-羟基-2-氨基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物8

步骤1：N-叔丁氧羰基-L-苏氨酸

将L-苏氨酸(2.96g，25mmol)用DMF∶H₂O(1∶6)做溶剂溶解，加入三乙胺(2.54g，25mmol)，(BOC)₂O(6.5g，30mmol)，室温搅拌，反应过夜，将反应液用1N盐酸调节pH值＝2-3，用乙酸乙酯萃取(100ml＊3)，合并有机层，用水洗(100ml＊2)，饱和食盐水洗(100ml＊1)，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，得到油状物4.2g，收率：77％。

步骤2：(2S，3R)-4-[3-羟基-2-(N-叔丁氧羰基氨基)-丙酰基]硫代吗啉

将N-叔丁氧羰基L-苏氨酸(3.3g，15mmol)用10ml二氯甲烷溶解，加入EDC(3.45g，18mmol)，搅拌均匀后，加入硫代吗啉(1.85g，18mmol)，室温搅拌。反应完全后，将反应液中固体滤除，过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1)，得白色固体1.0g，收率：22％。

化合物8：(2S，3R)-4-(3-羟基-2-氨基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐

将(2S，3R)-4-[3-羟基-2-(N-叔丁氧羰基氨基)-丙酰基]硫代吗啉(0.9g，26mmol)用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，室温搅拌4个小时，反应液由澄清到逐渐有白色固体析出，得到的白色固体用正己烷洗，得到白色固体257mg，收率：33％。m.p.：185-187℃。

HR-ESI-MSC₈H₁₆N₂O₂S，计算值204.0932，实测值[M+H]⁺205.1107.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：8.17(3H，s，HCl+NH₂)，5.56(1H，s，OH)，4.25(1H，s，NH₂ CHCO)，3.73-2.59(8H，m，CH ₂ CH ₂SCH ₂ CH ₂N)，3.91(1H，m，OHCH)，1.13(3H，d，J-6.6Hz，CH ₃CHOH).

实施例9

(S)-4-(2，4-二氨基-4-氧代丁酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物9

步骤1：N-叔丁氧羰基-L-天冬氨酸

将L-天冬酰胺(3.96g，30mmol)用1，4-二氧六环∶水(40ml∶40ml)混合溶剂溶解，0℃时加入(BOC)₂O(19.5g，90mmol)和碳酸氢钠(7.5g，90mmol)，后升至室温反应，8小时后反应完全，将反应液蒸至近干，用6N盐酸调节pH＝2-3，用乙酸乙酯萃取(100ml＊3)，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，得到白色固体7g，收率：100％。

步骤2：(S)-4-[4-氨基-2-(N-叔丁氧羰基氨基)-4-氧代丁酰基]硫代吗啉

将N-叔丁氧羰基-L-天冬氨酸(4.6g，20mmol)用100ml二氯甲烷溶解，加入EDC(4.6g，24mmol)，搅拌均匀后，加入硫代吗啉(2.48g，24mmol)，室温搅拌。反应完全后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝5∶3)，得油状物1.5g，收率：24％。

化合物9：(S)-4-(2，4-二氨基-4-氧代丁酰基)硫代吗啉盐酸盐

将(S)-4-[4-氨基-2-(N-叔丁氧羰基氨基)-4-氧代丁酰基]硫代吗啉(1.4g，5mmol)用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，室温搅拌4个小时，反应液由澄清到逐渐有白色固体析出，得到的白色固体用正己烷溶剂洗，得白色固体0.5g，收率：64％。m.p.：113-114℃。

HR-ESI-MSC₈H₁₅N₃O₂S，计算值217.0885，实测值[M+H]⁺218.1107.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：9.21(3H，s，HCl+NH₂)，4.90(1H，m，CHNH₂)，4.52-3.55(8H，m，CH ₂ CH ₂SCH ₂ CH ₂N)，3.22-2.68(4H，m，CH ₂CH).

实施例10

(S)-4-(2，5-二氨基-5-氧代丁酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物10

步骤1：N-叔丁氧羰基-L-谷氨酰胺

将L-谷氨酰胺(4.4g，20mmol)用1，4-二氧六环∶水(40ml∶40ml)混合溶剂溶解，0℃时加入(BOC)₂O(6.5g，30mmol)和50ml1N氢氧化钠溶液，后升至室温反应，放置过夜，将反应液用硫酸氢钾调节pH值＝2-3，用乙酸乙酯萃取(100ml＊3)，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，得到油状物6.0g，收率：100％。

步骤2：(S)-4-[5-氨基-2-(N-叔丁氧羰基氨基)-5-氧代丁酰基]硫代吗啉

将N-叔丁氧羰基-L-谷氨酰胺(2.4g，10mmol)用100ml二氯甲烷溶解，加入EDC(2.3g，12mmol)，搅拌均匀后，加入硫代吗啉(1.2g，12mmol)，室温搅拌。反应完全后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)，得产物2.0g，收率：60％。

化合物10：(S)-4-(2，5-二氨基-5-氧代丁酰基)硫代吗啉盐酸盐

将(S)-4-[5-氨基-2-(N-叔丁氧羰基氨基)-5-氧代丁酰基]硫代吗啉(0.3g，1mmol)用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，室温搅拌4个小时，反应液由澄清到逐渐有白色固体析出，得到的白色固体用正己烷溶剂洗涤，得到白色固体0.2g，收率：77％。m.p.：90-92℃。

HR-ESI-MSC₉H₁₇N₃O₂S，计算值231.1041，实测值[M+H]⁺218.1107.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：8.28(3H，s，NH₂ ⁺HCl)7.46(1H，s，NH ₂CO)，6.93(1H，s，NH ₂CO)，4.34NHCH)，4.03-3.60(4H，m，N(CH ₂ CH ₂)₂)，2.74-2.56(4H，m，S(CH ₂ CH ₂)₂)，2.34-1.82(4H，m，CH ₂ CH ₂NH).

实施例11

(S)-4-[(吡咯烷-2-基)-甲酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物11

步骤1：N-叔丁氧羰基-L-脯氨酸

将L-脯氨酸(2.30g，20mmol)用20ml的2M的NaOH溶解，0℃时加入(BOC)₂O(5.24g，24mmol)，后升至室温反应，8小时后反应完全，将反应液用浓盐酸调节pH值＝2-3，用乙酸乙酯萃取(50ml＊3)，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，得到油状物4.0g，收率：93％。

步骤2：(S)-4-[(N-叔丁氧羰基-吡咯烷-2-基)-甲酰基]硫代吗啉

将N-叔丁氧羰基-L-脯氨酸(0.22g，1mmol)用10ml二氯甲烷溶解，加入EDC(0.23g，1.2mmol)，搅拌均匀后，加入硫代吗啉(0.12g，1.2mmol)，室温搅拌。反应完全后，将反应液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝100∶1)，得油状物160mg，收率：53％。

化合物11：(S)-4-[(吡咯烷-2-基)-甲酰基]硫代吗啉盐酸盐

将(S)-4-[(N-叔丁氧羰基-吡咯烷-2-基)-甲酰基]硫代吗啉(0.15g，0.5mmol)用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，室温搅拌2个小时，反应液由澄清到逐渐有白色固体析出，得到的白色固体用正己烷溶剂洗涤。得到白色固体74mg，收率：60％。m.p.：245-247℃。

HR-ESI-MSC₉H₁₆N₂OS，计算值200.0983，实测值[M+H]⁺201.1123.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：10.12(1H，HCl)，8.43(1H，s，NH)，4.57(1H，t，J＝7.8Hz，CHNH)，3.91-3.76(4H，m，CH ₂NCH ₂)，2.78-2.64(4H，m，CH ₂SCH ₂)，3.81-1.61(6H，m，NCH ₂ CH ₂ CH ₂).

实施例12

4-[(1，2，3，4-四氢异喹啉-3-基)-甲酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物12

步骤1：N-叔丁氧羰基-(1，2，3，4-四氢异喹啉)-2-羧酸

将(1，2，3，4)-四氢异喹啉-2-羧酸盐酸盐(0.43g，2mmol)用1，4-二氧六环∶水(5ml∶5ml)溶解，加入碳酸钠(0.42g，4.0mmol)，0℃时加入(BOC)₂O(0.52g，2.4mmol)，后升至室温反应，搅拌过夜，将反应液减压浓缩至干，加水溶解，用1NHCl调节pH＝1-2，用乙酸乙酯萃取(50ml＊3)，有机层用1NHCl洗，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，得到油状物0.4g，收率：72％。

步骤2：4-[2-(N-叔丁氧羰基-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-基)-甲酰基]硫代吗啉

将N-叔丁氧羰基-(1，2，3，4-四氢异喹啉)-2-羧酸(0.28g，1mmol)用10ml二氯甲烷溶解，加入EDC(0.23g，1.2mmol)，搅拌均匀后，加入硫代吗啉(0.12g，1.2mmol)，室温搅拌。反应完全后，直接过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，得油状物170mg，收率：47％。

化合物12：4-[(1，2，3，4-四氢异喹啉-3-基)-甲酰基]硫代吗啉盐酸盐

将4-[2-(N-叔丁氧羰基-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-基)-甲酰基]硫代吗啉(0.17g，0.47mmol)用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，室温搅拌4个小时，反应液由澄清到逐渐有白色固体析出，得到的白色固体用正己烷溶剂洗涤。得到白色固体100mg，收率：71％。m.p.：＞250℃。

HR-ESI-MSC₁₄H₁₈N₂OS，计算值262.1140，实测值[M+H]⁺263.1199.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：7.16-7.08(4H，m，PH)，5.29(1H，s，N(BOC)CH)，4.89(1H，d，J＝16.8Hz，NCHCH ₂)，4.44(1H，d，J＝16.2Hz，NCHCH ₂)，4.42-4.04(4H，m，CH ₂SCH ₂)，3.07(2H，s，NCH ₂PH)，2.62(4H，m，CH ₂NCH ₂)，1.57(9H，s，BOC).

实施例13

4-(2-丁氨基乙酰基)硫代吗啉化合物13

将化合物1(0.22g，1mmol)用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物1(0.17g，1mmol)加入正丁醛(90ul，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝20∶1)，得到白色固体100mg收率：47％。m.p.：71-72℃。

HR-ESI-MSC₁₀H₂₀N₂OS，计算值216.1297，实测值[M+H]⁺217.2323.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：6.16(3H，s，NH₂+HCl)，3.90(2H，t，J＝4.8Hz，CH ₂NCH₂)，3.66(2H，t，J＝4.8Hz，CH₂NCH ₂)，3.55(2H，s，NHCH ₂CO)，2.69(2H，t，J＝7.5Hz，NHCH ₂CH₂CH₂CH₃)，2.63(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.00(3H，s，CH₃COOH)，1.59-1.51(2H，m，NHCH₂ CH ₂CH₂CH₃)，1.41-1.33(2H，m，NHCH₂CH₂ CH ₂CH₃)，0.92(3H，t，J＝7.2Hz，NHCH₂CH₂CH₂ CH ₃).

实施例14

4-(2-环己氨基乙酰基)硫代吗啉化合物14

将化合物1用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物1(0.22g，1mmol)加入环己酮(0.11ml，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝20∶1)，得到白色固体93mg，收率：38％。m.p.：78-79℃。

HR-ESI-MSC₁₂H₂₂N₂OS，计算值242.1453，实测值[M+H]⁺243.2895.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：8.27(3H，s，NH₂+HCl)，3.89(2H，t，J＝4.8Hz，CH ₂NCH₂)，3.69(2H，s，NHCH ₂CO)，3.66(2H，t，J＝4.8Hz，CH₂NCH ₂)，2.64(5H，m，CH ₂SCH ₂+CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂ CH)，2.00(3H，s，CH₃COOH)，1.93-1.62(4H，m，CH ₂CH₂CH₂CH₂ CH ₂CH)，1.32-1.19(5H，m，CH₂ CH ₂ CH ₂ CH ₂CH₂CH).

实施例15

4-(2-苄氨基乙酰基)硫代吗啉化合物15

将化合物1用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物1(0.22g，1mmol)加入苯甲醛(0.11ml，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝25∶1)，得到白色固体100mg，收率：41％。m.p.86-87℃。

HR-ESI-MSC₁₃H₁₈N₂OS，计算值250.1140，实测值[M+H]⁺251.1200.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：7.42-7.25(5H，m，Ph)，4.11(1H，s，NH)，3.96(2H，m，CH ₂NCH₂)，3.87(2H，s，PHCH ₂)，3.59(2H，m，CH₂NCH ₂)，3.55(2H，s，NHCH ₂CO)，2.59(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.00(3H，s，CH₃COOH).

实施例16

4-[2-(4-硝基苄氨基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物16

将化合物1用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物1(0.10g，0.5mmol)加入4-硝基苯甲醛(0.075g，0.5mmol)和冰醋酸(0.1ml，2mmol)的10ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.32g，1.5mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝25∶1)，得到黄色油状物100mg，将其溶于3ml盐酸乙酸乙酯溶液中，室温搅拌，得到黄色固体90mg，收率：60％。m.p.189-190℃。

HR-ESI-MSC₁₈H₁₃N₃O₃S，计算值296.1069，实测值[M+H]⁺297.1129.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：9.62(2H，s，NH+HCl)，8.29(2H，d，J＝8.4Hz，Ar-3，5)，7.81(2H，d，J＝8.4Hz，Ar-2，6)，4.23(2H，m，NHCH ₂CO)，4.09(2H，m，NHCH ₂PH)，3.75-3.58(4H，m，CH ₂NCH ₂)，2.65-2.56(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.00(3H，s，CH₃COOH).

实施例17

4-[2-(3-氨基丙氨基)-乙酰基]硫代吗啉二盐酸盐化合物17

将化合物1(0.15g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入N-CBZ-丙醛(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到油状物100mg，将其用6N盐酸溶液回流1小时，脱除CBZ保护基，将反应液蒸干，得白色固体50mg，收率：46％。m.p.121-124℃。

HR-ESI-MSC₉H₁₉N₃OS，计算值217.1249，实测值[M+H]⁺218.1322.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：4.06(2H，m，NHCH₂CO)，3.74-3.58(2H，m，NH₂ CH ₂)，3.43-2.98(4H，m，CH ₂NCH ₂)，2.87(2H，m，NHCH ₂)，2.83(4H，m，CH ₂SCH ₂)，1.96(2H，m，NH₂CH₂ CH ₂CH₂).

实施例18

4-[2-(3-羟基丙氨基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物18

将化合物1(0.15g，0.5mmol)和无水碳酸钾(0.04g，1mmol)用无水乙醇溶解，室温搅拌均匀，升温至回流，从恒压漏斗滴入3-溴丙醇(0.1g，0.5mmol)，回流18小时，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶2∶1d氨水)，得到油状物40mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯溶液中，室温搅拌，得到白色固体39mg，收率：37％，m.p.129-130℃。

HR-ESI-MSC₉H₁₈N₂O₂S，计算值218.1089，实测值[M+H]⁺219.1164.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：3.89(1H，m，NH)，3.44(1H，m，OH)，3.83-3.75(4H，m，CH ₂NCH ₂)，2.01(4H，m，CH ₂SCH ₂)，3.81-2.85(2H，dt，J₁＝6.0Hz，J₂＝27.0Hz，OHCH ₂)，2.62(2H，m，NHCH ₂CO)，1.77-1.72(2H，m，NHCH ₂)，1.26-1.21(2H，m，CH₂ CH ₂CH₂).

实施例19

4-[2-(3-羟基-2，2-二甲基丙氨基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物19

将化合物1(0.10g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入2，2-二甲基-3-羟基丙醛(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到油状物80mg，将其用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，有白色固体析出，滤出，得到白色固体55mg，收率：45％。m.p.166-167℃。

HR-ESI-MSC₁₁H₂₂N₂O₂S，计算值246.1202，实测值[M+H]⁺247.2248.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：5.30(3H，s，NH₂+HCl)，3.90(2H，t，J＝4.8Hz，CH ₂NCH₂)，3.65(2H，t，J＝4.8Hz，CH₂NCH ₂)，3.58(2H，s，NHCH ₂CO)，3.50(2H，d，J＝6.9Hz，CH ₂OH)，2.67(2H，m，HOCH₂CH(CH₃)₂ CH ₂NH)，2.63(4H，m，CH ₂SCH ₂)，0.97(6H，s，HOCH₂CH(CH ₃)₂CH₂NH).

实施例20

4-[2-(4-羟基环己氨基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物20

将化合物1(0.15g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入4-羟基环己酮(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到油状物100mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯溶液中，室温搅拌，得到白色固体65mg，收率：54％。

HR-ESI-MSC₁₂H₂₂N₂O₂S，计算值258.1402，实测值[M+H]⁺259.1727.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：4.32(4H，m，NH，OH，NHCH ₂CO)，3.95-3.60(4H，m，CH ₂NCH ₂)，3.48(1H，m，NHCH)，3.69(1H，m，OHCH)，2.81-2.78(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.03(3H，s，CH ₃COOH)，1.84-1.25(8H，m，CH ₂ CH ₂CHCH ₂ CH ₂CH).

实施例21

4-[2-(哌啶-4-基-氨基)-乙酰基]硫代吗啉二盐酸盐化合物21

将化合物1(0.15g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入1-BOC哌啶酮(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到油状物90mg，将其用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，脱除BOC保护基，有白色固体析出，滤出，得到白色固体70mg，收率：57％。m.p.243-245℃。

HR-ESI-MSC₁₁H₂₁N₃OS，计算值243.1405，实测值[M+H]⁺244.3694.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：9.60-9.02(4H，s，NH和HCl)，4.09(2H，m，NHCH ₂CO)，3.77-3.59(4H，m，CH ₂NCH ₂)，3.37-3.33(2H，m，CH ₂NHCH₂)，3.14(1H，m，CH₂NHCH)，2.95-2.83(2H，m，CH ₂NHCH₂)，2.69-2.59(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.23(2H，m，CH ₂CH₂NH)，1.88(2H，m，CH ₂CH₂NH).

实施例22

(S)-4-(2-丁氨基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物22

将化合物2(0.22g，1mmol)用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物2(0.17g，1mmol)加入正丁醛(90ul，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)，得到油状物100mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯，室温搅拌，将白色固体滤出，得到白色固体120mg，收率：52％。m.p.：217-219℃。

HR-ESI-MSC₁₁H₂₂N₂OS，计算值230.1453，实测值[M+H]⁺231.1554.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：5.44(1H，s，CHNH)，4.01(1H，m，NH)，3.87-2.60(8H，m，NCH ₂ CH ₂SCH ₂ CH ₂)，2.60-2.48(2H，m，CH ₂NH)，2.00(3H，s，CH₃COOH)，1.67-1.30(4H，m，CH₃ CH ₂ CH ₂)，1.26(3H，d，J＝7.2Hz，CHCH ₃)，0.92(3H，t，J＝7.5Hz，CH ₃CH₂CH₂CH₂).

实施例23

(S)-4-(2-环己氨基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物23

将化合物2用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物2(0.17g，1mmol)加入环己基(0.10ml，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)，得到油状物200mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯，室温搅拌，将白色固体滤出，得到白色固体177mg，收率：78％。m.p.：＞250℃。

HR-ESI-MSC₁₃H₂₄N₂OS，计算值256.1609，实测值[M+H]⁺257.2613.

¹H-NMR(300MHz，CDCl3)，δ：3.98(1H，s，CHNH)，3.91-2.64(8H，m，NCH ₂ CH ₂SCH ₂ CH ₂)，2.42(1H，s，NH)，1.25(3H，d，J＝6.6Hz，CHCH₃)，1.84-1.17(10H，m，CH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₂)，1.63(1H，m，NHCH(CH₂CH₂)CH₂).

实施例24

(S)-4-(2-苄氨基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物24

将化合物2用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物2(0.17g，1mmol)加入苯甲醛(0.11ml，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1-1∶1)，得到油状物250mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯，室温搅拌，将白色固体滤出，得到白色固体40mg，收率：14％。m.p.：220-221℃。

HR-ESI-MSC₁₄H₂0N₂OS，计算值264.1296，实测值[M+H]⁺265.1833.

¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)，δ：7.41(5H，m，Ar)，4.36(1H，q，J＝7.2Hz，CHCH₃)，4.08(2H，s，NHCH ₂Ar)，3.89-3.64(4H，m，CH ₂NCH ₂)，2.56(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.00(3H，s，CH₃COOH)，1.42(3H，d，J＝6.9Hz，CHCH ₃).

实施例25

(S)-4-[2-(4-硝基苄氨基)-丙酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物25

将化合物2用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物2(0.17g，1mmol)加入4-硝基苯甲醛(0.15mg，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1-1∶1)，得到油状物250mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯，室温搅拌，将白色固体滤出，得到白色固体177mg，收率：78％。m.p.：220-221℃。

HR-ESI-MSC₁₄H₂₀N₃O₃S，计算值310.1225，实测值[M+H]⁺310.1215.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：8.17(2H，d，J＝8.7Hz，PhH-2，H-6)，7.53(2H，d，J＝8.4Hz，PhH-3，H-5)，4.08(1H，m，NH)，3.55(1H，q，J＝6.9Hz，CHNH)，2.54(2H，dd，J₁＝6.9Hz，J₂＝13.5Hz，PHCH ₂)，3.99-2.05(8H，m，CH ₂ CH ₂NCH ₂ CH ₂S)，1.25(3H，d，J＝7.2Hz，CHCH ₃).

实施例26

(S)-4-[2-(3-氨基丙氨基)-丙酰基]硫代吗啉二盐酸盐化合物26

将化合物2(0.15g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入N-CBZ-丙醛(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到油状物100mg，将其用6N盐酸溶液回流1小时，脱除CBZ保护基，将反应液蒸干，得白色固体得到白色固体70mg，收率：60％。m.p.158-160℃。

HR-ESI-MSC₁₀H₂₁N₃OS，计算值231.1405，实测值[M+H]⁺232.1523.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：8.34(3H，m，NH)，4.42(1H，m，NH)，3.90(1H，m，NHCHCO)，3.98-3.77(4H，m，CH ₂NCH ₂)，2.57-2.01(4H，m，CH ₂SCH ₂)，3.57-2.14(4H，m，NH₂ CH ₂CH₂ CH ₂NH)，2.48-1.45(4H，m，CH₂CH₂CH₂CH₂)，1.16-0.71(12H，m)，1.29(3H，d，J＝6.9Hz，CH₃).

实施例27

(S)-4-[2-(3-羟基丙氨基)-丙酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物27

将化合物2(0.15g，0.5mmol)和无水碳酸钾(0.04g，1mmol)用无水乙醇溶解，室温搅拌均匀，升温至回流，从恒压漏斗滴入3-溴丙醇(0.1g，0.5mmol)，回流18小时，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶2∶1d氨水)，得到油状物80mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯溶液中，室温搅拌，得到白色固体70mg，收率：60％。m.p.211-212℃。

HR-ESI-MSC₁₀H₂0N₂OS，计算值232.1245，实测值[M+H]⁺233.1335.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：3.89-3.75(8H，m，CH ₂NCH ₂，OHCH ₂)，2.63(4H，m，CH ₂SCH ₂)，1.25(3H，m，CH₃)，1.86-1.70(4H，m，NHCH ₂，CH₂ CH ₂CH₂).

实施例28

(S)-4-[2-(3-羟基-2，2-二甲基丙氨基)-丙酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物28

将化合物2(0.11g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入2，2-二甲基-3-羟基丙醛(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到油状物100mg，将其用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，有白色固体析出，滤出，得到白色固体65mg，收率：49％。m.p.195-197℃。

HR-ESI-MSC₁₂H₂₄N₂OS，计算值260.1558，实测值[M+H]⁺261.2215.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：7.89(3H，s，NH₂+HCl)，4.62(1H，m，NHCHCO)，3.99-2.63(8H，m，SCH ₂ CH ₂NCH ₂ CH ₂)，3.58(2H，s，NHCH ₂CO)，3.99(2H，m，CH ₂OH)，3.31(2H，m，HOCH₂CH(CH₃)₂ CH ₂NH)，1.73(3H，m，CHCH ₃)，1.08(6H，s，HOCH₂CH(CH ₃)₂CH₂NH).

实施例29

(S)-4-[2-(哌啶-4-基-氨基)-丙酰基]硫代吗啉二盐酸盐化合物29

将化合物2(0.12g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入1-BOC哌啶酮(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到油状物40mg，将其用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，脱除BOC保护基，有白色固体析出，滤出得到白色固体30mg，收率：23％。m.p.86-88℃。

HR-ESI-MSC₁₂H₂₃N₃OS，计算值257.1562，实测值[M+H]⁺258.2285.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：5.72(1H，m，NH)，4.02(1H，m，NHCH)，3.87-3.80(4H，m，CH ₂NCH ₂)，3.47-3.38(1H，m，OHCH)，3.40(1H，m，NHCHCO)，2.63(4H，m，CH ₂SCH ₂)，1.43-1.29(5H，m，CH ₂ CHCH ₂)，1.26(3H，d，CH₃).

实施例30

(S)-4-[2-(4-羟基环己氨基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物30

将化合物2(0.15g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入4-羟基环己酮(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到白色固体150mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯溶液中，室温搅拌，得到白色固体40mg，收率：38％。m.p.229-230℃。

HR-ESI-MSC₁₃H₂₄N₂O₂S，计算值272.1558，实测值[M+H]⁺273.1760.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：4.32(4H，m，NH，OH，NHCH ₂CO)，3.95-3.60(4H，m，CH ₂NCH ₂)，3.48(1H，m，NHCH)，3.69(1H，m，OHCH)，2.81-2.78(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.03(3H，s，CH ₃COOH)，1.84-1.25(8H，m，CH ₂ CH ₂CHCH ₂ CH ₂CH)，1.28-1.22(3H，d，J＝7.2Hz，CH₃).

实施例31

(S)-4-(2-丁氨基-3-甲基丁酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物31

将化合物3用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物3(0.20g，1mmol)加入正丁醛(0.09ml，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)，得到油状物60mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯，室温搅拌，将白色固体滤出，得到白色固体100mg，收率：40％。m.p.：175-176℃。

HR-ESI-MSC₁₃H₂₆N₂OS，计算值258.1766，实测值[M+H]⁺259.1830.

¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)，δ：4.38(1H，m，CHNH)，4.11-3.65(4H，m，CH ₂NCH ₂)，2.86(2H，m，NHCH ₂)，2.65-2.58(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.17(1H，s，NH)，1.65(2H，m，NHCH₂ CH ₂)，1.39-1.34(2H，m，NHCH₂CH₂ CH ₂)，1.08-0.92(9H，m，CH ₃).

实施例32

(S)-4-(2-环己氨基-3-甲基丁酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物32

将化合物3用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物3(0.22g，1mmol)加入环己酮(0.11ml，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)，得到油状物60mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯，室温搅拌，将白色固体滤出，得到白色固体180mg，收率：65％。m.p.：175-176℃。

HR-ESI-MSC₁₅H₂₈N₂OS，计算值284.1922，实测值[M+H]⁺285.2011

¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)，δ：4.37(1H，d，J＝3.9Hz，CHNH)，4.03-3.52(4H，m，CH ₂NCH ₂)，2.85(1H，m，NHCH(CH₂)₅)，2.68-2.57(4H，m，CH ₂SCH ₂)，1.67(1H，m，CH(CH₃)₂)，1.94(1H，m，NHCHCH)，2.14-1.28(10H，m，CHCH₂CH₂CH₂CH₂CH₂)，1.04(3H，d，J＝7.2Hz，CH ₃)，0.97(3H，d，J＝6.9Hz，CH ₃).

实施例33

(S)-4-(2-苄氨基-3-甲基丁酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物33

将化合物3用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物3(0.22g，1mmol)加入苯甲醛(0.11ml，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)，得到油状物60mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯，室温搅拌，将白色固体滤出，得到白色固体33mg，收率：10％。m.p.：202-204℃。

HR-ESI-MSC₁₆H₂₄N₂O₂S，计算值292.1609，实测值[M+H]⁺293.1689.

¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)，δ：7.41(5H，m，Ar)，4.20-4.16(2H，m，NHCH ₂Ar)，3.95-3.89(1H，m，NHCH)，3.62-3.47(4H，m，CH ₂NCH ₂)，2.52-2.42(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.12(1H，m，NH)，1.22(1H，m，CH(CH₃)₂)，1.01(3H，d，J＝6.9Hz，CH ₃)，0.96(3H，d，J＝7.2Hz，CH ₃).

实施例34

(S)-4-[2-(4-硝基苄基氨基)-3-甲基丁酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物34

将化合物3用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物3(0.22g，1mmol)加入对硝基苯甲醛(0.15g，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)，得到油状物60mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯，室温搅拌，将白色固体滤出，得到白色固体130mg，收率：38％。m.p.：186-188℃。

HR-ESI-MSC₁₆H₂₄N₃O₃S，计算值338.1538，实测值[M+H]⁺338.1519.

¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)，δ：8.29(2H，d，J＝8.7Hz，ArH_2，6)，7.67(2H，d，J＝9.0Hz，ArH_3，5)，4.70-4.65(1H，m，NHCH)，3.27-3.24(2H，m，NHCH ₂Ar)，3.93-3.68(4H，m，CH ₂NCH ₂)，2.70-2.65(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.21(1H，s，NH)，1.37(1H，m，CH(CH₃)₂)，1.18(3H，d，J＝7.5Hz，CH ₃)，1.14(3H，d，J＝6.9Hz，CH ₃).

实施例35

(S)-4-[2-(3-氨基丙氨基)-3-甲基丁酰基]硫代吗啉二盐酸盐化合物35

将化合物3(0.15g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入N-CBZ-丙醛(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到油状物100mg，将其用6N盐酸溶液回流1小时，脱除CBZ保护基，将反应液蒸干，得白色固体得到白色固体30mg，收率：28％。m.p.192-194℃。

HR-ESI-MSC₁₂H₂₅N₃OS，计算值259.1718，实测值[M+H]⁺260.1793.

实施例36

(S)-4-[2-(3-羟基丙氨基)-3-甲基丁酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物36

将化合物3(0.15g，0.5mmol)和无水碳酸钾(0.04g，1mmol)用无水乙醇溶解，室温搅拌均匀，升温至回流，从恒压漏斗滴入3-溴丙醇(0.1g，0.5mmol)，回流18小时，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶2∶1d氨水)，得到油状物40mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯溶液中，室温搅拌，得到白色固体40mg，收率：0.31％，m.p.188-190℃。

HR-ESI-MSC₁₂H₂₄N₂O₂S，计算值260.1558，实测值[M+H]⁺261.1742.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：4.14(1H，m，OH)，3.84-3.76(4H，m，CH ₂NCH ₂)，3.76-3.72(2H，m，OHCH ₂)，3.30(1H，m，NH)，2.80(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.97-2.42(2H，m，NHCH ₂)，1.82-1.68(3H，m，NHCHCH+OHCH₂ CH ₂)，0.99-0.88(6H，m，CH ₃).

实施例37

(S)-4-[2-(3-羟基-2，2-二甲基丙氨基)-3-甲基丁酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物37

将化合物3(0.12g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入2，2-二甲基-3-羟基丙醛(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到油状物50mg，将其用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，有白色固体析出，滤出，得到类白色固体33mg，收率：23％。m.p.164-166℃。

HR-ESI-MSC₁₄H₂₈N₂O₂S，计算值288.1871，实测值[M+H]⁺289.1905.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：10.02(3H，s，NH₂+HCl)，4.67(1H，m，NHCHCO)，4.28-2.47(8H，m，SCH ₂ CH ₂NCH ₂ CH ₂)，3.21(2H，m，PHCH ₂)，2.94(2H，m，CH ₂OH)，2.47(2H，m，HOCH₂CH(CH₃)₂ CH ₂NH)，1.53-0.89(12H，m，HOCH₂CH(CH ₃)₂CH₂NH)+CH ₃CHCH ₃).

实施例38

(S)-4-[2-(哌啶-4-基-氨基)-3-甲基丁酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物38

将化合物3(0.15g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入1-BOC哌啶酮(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到油状物70mg，将其用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，脱除BOC保护基，有白色固体析出，滤出得到白色固体70mg，收率：36％。m.p.181-182℃。

HR-ESI-MSC₁₄H₂₇N₃OS，计算值285.1875，实测值[M+H]⁺286.1957.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：5.14(1H，m，NH)，4.09(1H，m，NHCH)，3.36(4H，m，CH ₂NCH ₂)，3.87(2H，m，NHCH ₂)，3.10(2H，m，NHCHCO)，2.87(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.22-1.47(5H，m，CH ₂CHCH ₂)，1.22-0.96(6H，d，CH₃).

实施例39

(S)-4-[2-(4-羟基环己氨基)-3-甲基丁酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物39

将化合物3(0.15g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入4-羟基环己酮(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到油状物100mg，其溶于2ml盐酸乙酸乙酯溶液中，室温搅拌，得到白色固体40mg，收率：26％。

HR-ESI-MSC₁₅H₂₈N₂O₂S，计算值300.1871，实测值[M+H]⁺301.1958.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：4.06(1H，m，NHCH)，3.84-3.69(4H，m，CH ₂NCH ₂)，2.70-2.61(4H，m，CH ₂SCH ₂)，1.94-1.19(11H，m，CH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₂ CH+CHCH)，1.01-0.87(6H，m，CH ₃).

实施例40

4-[(2S)-丁氨基-(3R)-甲基戊酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物40

将化合物4用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物4(0.22g，1mmol)加入正丁醛(90ul，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1)，得到油状物60mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯，室温搅拌，将白色固体滤出，得到白色固体57mg，收率：21％。m.p.：214-215℃。

HR-ESI-MSC₁₄H₂₈N₂OS，计算值272.1922，实测值[M+H]⁺273.2323.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：4.17(1H，s，NH)，4.01(1H，d，J＝5.1Hz，CHNH)，4.17-2.61(8H，m，NCH ₂ CH ₂SCH ₂ CH ₂)，2.55-2.38(2H，m，CH ₂NH)，2.00(3H，s，CH₃COOH)，1.10-0.78(9H，m，CH ₃CH₂CH₂+CH ₃CHCH₂ CH ₃)，1.12(1H，m，CHCHCH₂)，1.64-1.27(6H，m，CH ₂ CH ₂+CHCHCH ₂).

实施例41

4-[(2S)-环己氨基-(3R)-甲基戊酰基]硫代吗啉化合物41

将化合物4用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物4(0.22g，1mmol)加入环己酮(0.10ml，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)，得到白色固体165mg，收率：55％。m.p.：59-60℃。

HR-ESI-MSC₁₆H₃₀N₂OS，计算值298.2079，实测值[M+H]⁺299.2157.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：4.37(1H，m，CHNH)，4.16-4.13(4H，m，CH ₂NCH ₂)，3.44(1H，m，NHCH(CH ₂)₅)，2.71-2.21(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.06(1H，m，NHCH)，2.00(3H，s，CH₃COOH)，1.67(1H，m，CH(CH₃)₂)，1.94(1H，m，NHCHCH)，1-52-1.11(10H，m，CHCH₂CH₂CH₂CH₂CH₂)，1.63-1.58(3H，m，CH(CH₃)CH ₂CH₃)，0.76-0.65(6H，m，CH(CH ₃)CH₂ CH ₃).

实施例42

4-[(2S)-苄氨基-(3R)-甲基戊酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物42

将化合物4用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物4(0.22g，1mmol)加入苯甲醛(0.11g，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)，得到油状物60mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯，室温搅拌，将白色固体滤出，得到白色固体105mg，收率：50％。m.p.：186-188℃。

HR-ESI-MSC₁₇H₂₆N₂OS，计算值306.1766，实测值[M+H]⁺307.2498.

¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)，δ：7.41-7.23(5H，m，Ar)，4.78-4.57(1H，m，NHCH)，3.11-3.03(2H，m，NHCH ₂Ar)，3.95-3.23(4H，m，CH ₂NCH ₂)，2.45-2.24(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.00(3H，s，CH₃COOH)，1.83(1H，m，CHCH₃)，1.50-1.08(1H，s，NH)，1.50-1.08(2H，m，CH ₂CH₃)，0.90(3H，d，J＝7.2Hz，CHCH ₃)，0.78(3H，d，J＝6.6Hz，CH₂ CH ₃).

实施例43

4-[(2S)-(4-硝基苄基氨基)-(3R)-甲基戊酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物43

将化合物4用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物4(0.22g，1mmol)加入4-硝基苯甲醛(0.15g，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)，得到油状物60mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯，室温搅拌，将白色固体滤出，得到白色固体105mg，收率：30％。m.p.：186-188℃。

HR-ESI-MSC₁₇H₂₆N₃O₃S，计算值352.1695，实测值[M+H]⁺352.1751.

¹H-NMR(300MHz，CD₃OD)，δ：8.2(2H，d，J＝8.7Hz，ArH_2，6)，7.77(2H，d，J＝9.0Hz，ArH_3，5)，4.43(1H，m，NHCH)，4.25-4.21(2H，m，NHCH ₂Ar)，3.98-3.60(4H，m，CH ₂NCH ₂)，2.55(4H，m，CH ₂SCH ₂)，1.92(1H，m，CHCH₃)，1.56(1H，s，NH)，1.16-1.04(2H，m，CH ₂CH₃)，1.02-0.92(6H，m，CH ₃).

实施例44

4-[(2S)-(3-氨基丙氨基)-(3R)-甲基戊酰基]硫代吗啉二盐酸盐化合物44

将化合物4(0.15g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入N-CBZ-丙醛(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到油状物80mg，将其用6N盐酸溶液回流1小时，脱除CBZ保护基，将反应液蒸干，得白色固体55mg，收率：40％。m.p.171-172℃。

HR-ESI-MSC₁₃H₂₇N₃OS，计算值273.1875，实测值[M+H]⁺274.1947.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：8.16(3H，m，NH+HCl)，5.37(1H，m，NH)，3.60(1H，m，NHCHCO)，4.47-3.61(4H，m，CH ₂NCH ₂)，3.03-2.91(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.14(1H，m，NHCH)，2.48-1.45(4H，m，NCH ₂CH₂ CH ₂N)，1.16-0.71(11H，m，NHCHCH ₂CH₂N+CH₃CHCH₂CH₃).

实施例45

4-[(2S)-(3-羟基丙氨基)-(3R)-甲基戊酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物45

将化合物4(0.15g，0.5mmol)和无水碳酸钾(0.04g，1mmol)用无水乙醇溶解，室温搅拌均匀，升温至回流，从恒压漏斗滴入3-溴丙醇(0.1g，0.5mmol)，回流18小时，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶2∶1d氨水)，得到油状物40mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯溶液中，室温搅拌，得到白色固体39mg，收率：27％。m.p.：166-168℃。

HR-ESI-MSC₁₃H₂₆N₂O₂S，计算值274.1715，实测值[M+H]⁺275.1837.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：4.14(1H，m，CHCO)，3.86-3.62(6H，m，OHCH ₂，CH ₂NCH ₂)，3.60(1H，m，NH)，2.95(1H，m，OH)，2.74-2.62(6H，m，NHCH ₂，CH ₂SCH ₂)，1.80-1.56(3H，m，CH₂ CH ₂CH₂，CHCH)，1.57-1.16(2H，m，CHCH ₂)，1.00(3H，d，J＝6.9Hz，CHCH ₃)，0.89(3H，t，J＝7.2Hz，CH₂ CH ₃).

实施例46

4-[(2S)-(3-羟基-2，2-二甲基丙氨基)-(3R)-甲基戊酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物46

将化合物4(0.13g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入2，2-二甲基-3-羟基丙醛(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到油状物89mg，将其用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，有白色固体析出，得到白色固体70mg，收率：48％。m.p.156-158℃。

HR-ESI-MSC₁₅H₃₀N₂O₂S，计算值302.2028，实测值[M+H]⁺303.2703.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：8.44(3H，s，NH₂+HCl)，4.50(1H，m，NHCHCO)，3.63-2.55(8H，m，SCH ₂ CH ₂NCH ₂ CH ₂)，4.00(2H，m，CH ₂OH)，3.11(2H，m，HOCH₂CH(CH₃)₂ CH ₂NH)，1.62(2H，m，CHCH ₂CH₃)，1.08(6H，s，HOCH₂CH(CH ₃)₂CH₂NH)，0.99(6H，m，CH ₃CHCH₂ CH ₃).

实施例47

4-[(2S)-(哌啶-4-基-氨基)-(3R)-甲基戊酰基]硫代吗啉二盐酸盐化合物47

将化合物4(0.15g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入1-BOC哌啶酮(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到油状物100mg，将其用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，脱除BOC保护基，得到油状物100mg，收率：67％。m.p.：188-190℃。

HR-ESI-MSC₁₅H₂₉N₃OS，计算值299.2031，实测值[M+H]⁺300.2804.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：3.70(1H，m，CHCO)，3.35-3.13(4H，m，CH ₂NCH ₂)，2.91-2.59(4H，m，CH ₂NHCH ₂)，2.20-2.02(4H，m，CH ₂SCH ₂)，1.90-1.18(5H，m，CH₂CHCH₂)，0.96(3H，d，J＝6.6Hz，CH₃)，0.87(3H，t，J＝7.2Hz，CH₃).

实施例48

4-[(2S)-(4-羟基氨基)-(3R)-甲基戊酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物48

将化合物4(0.15g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入4-羟基环己酮(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)，得到油状物100mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯溶液中，室温搅拌，得到白色固体70mg，收率：52％。

HR-ESI-MSC₁₆H₃₀N₂O₂S，计算值314.2028，实测值[M+H]⁺315.2666.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：4.08(1H，m，NH)，3.81-3.74(4H，m，CH ₂NCH ₂)，3.74-3.67(2H，m，NHCH，OHCH)，)，3.40(1H，m，NHCHCO)，2.63-2.62(4H，m，CH ₂SCH ₂)，0.97-0.85(6H，m，CH₃)，1.87-1.23(10H，m，CHCH₂CH₂CHCH₂CH₂).

实施例49

(S)-4-(2-丁氨基-3-苯基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物49

将化合物6用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物6(0.22g，1mmol)加入正丁醛(90ul，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)，得到油状物60mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯，室温搅拌，将白色固体滤出，得到白色固体50mg，收率：17％。m.p.：233-235℃。

HR-ESI-MSC₁₇H₂₆N₂OS，计算值306.1766，实测值[M+H]⁺307.1804.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：9.62(1H，s，NH)，8.99(1H，s，HCl)，7.38-7.19(5H，m，Ar)，4.70(1H，s，CHNH)，3.62-2.73(8H，m，CH ₂ CH ₂NCH ₂ CH ₂S)，2.32-2.29(2H，m，PHCH ₂)，2.91-2.73(2H，m，NHCH ₂)，2.00(3H，s，CH₃COOH)，1.35-1.28(2H，m，NHCH₂ CH ₂)，1.64-1.49(2H，m，NHCH₂CH₂ CH ₂)，0.82(3H，t，J＝6.9Hz，CH ₃).

实施例50

(S)-4-(2-环己氨基-3-苯基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物50

将化合物6用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物6(0.22g，1mmol)加入环己酮(0.11ml，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)，得到油状物60mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯，室温搅拌，将白色固体滤出，得到白色固体103mg，收率：31％。m.p.：164-166℃。

HR-ESI-MSC₁₉H₂₈N₂OS，计算值332.1922，实测值[M+H]⁺333.1989.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：9.34(1H，s，NH)，8.88(1H，s，HCl)，7.35-7.20(5H，m，Ar)，4.73(1H，s，CHNH)，3.63-2.84(8H，m，CH ₂ CH ₂NCH ₂ CH ₂S)，2.00(3H，s，CH₃COOH)，1.97-1.78(2H，m，PHCH ₂)，1.35-1.28(11H，m，CHCH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₂).

实施例51

(S)-4-(2-苄氨基-3-苯基丙酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物51

将化合物6用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物6(0.22g，1mmol)加入苯甲醛(0.11ml，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)，得到油状物60mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯，室温搅拌，将白色固体滤出，得到白色固体163mg，收率：48％。m.p.195-197℃。

HR-ESI-MSC₂₀H₂₄N₂OS，计算值340.1609，实测值[M+H]⁺341.1720.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：9.93(1H，s，NH)，9.34(1H，s，HCl)，7.49-7.18(10H，m，Ar)，4.71(1H，s，CHNH)，4.14-2.87(8H，m，CH ₂ CH ₂NCH ₂ CH ₂S)，2.43-1.38(2H，m，PHCH ₂)，2.30-2.18(2H，m，NHCH ₂).

实施例52

(S)-4-[2-(4-硝基苄基氨基)-3-苯基丙酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物52

将化合物6用饱和碳酸氢钠水溶液进行游离，后将游离形式的化合物6(0.22g，1mmol)加入对硝基苯甲醛(0.15g，1mmol)和冰醋酸(0.2ml，4mmol)的20ml四氢呋喃溶液中，室温搅拌，待原料全部转变为中间体后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.64g，3mmol)，2小时后，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)，得到油状物60mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯，室温搅拌，将白色固体滤出，得到白色固体96mg，收率：20％。m.p.：185-187℃。

HR-ESI-MSC₂₀H₂₄N₃O₃S，计算值386.1538，实测值[M+H]⁺386.1669.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：10.18(1H，s，NH)，9.58(1H，s，HCl)，8.30(2H，dd，J₁＝8.7Hz，J₂＝153.6Hz，PHNO₂H_2，6)，7.79(2H，dd，J₁＝8.7Hz，J₂＝153.6Hz，PHNO₂H_3，5)，7.39-7.19(5H，m，Ph)，4.78(1H，m，CHNH)，4.29-4.21(2H，m，NHCH₂)，3.62-3.60(2H，s，CH ₂Ph).

实施例53

(S)-4-[2-(3-氨基丙氨基)-3-苯基丙酰基]硫代吗啉二盐酸盐化合物53

将化合物6(0.15g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入N-CBZ-丙醛(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到油状物100mg，将其用6N盐酸溶液回流1小时，脱除CBZ保护基，将反应液蒸干，得白色固体80mg，收率：52％。m.p.181-183℃。

HR-ESI-MSC₁₂H₂₄N₃OS，计算值308.1558，实测值[M+H]⁺309.1704.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：8.19(3H，s，NH₂+HCl)，7.39-7.21(5H，m，Ph)，4.76(1H，m，NHCHCO)，3.63(2H，m，CH ₂NCH₂)，3.40(2H，s，PhCH ₂)，3.05(2H，m，CH₂NCH ₂)，3.55(2H，s，NHCH ₂CO)，2.89(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.50(2H，m，NHCH ₂CH₂CH₂NH₂)，2.34(2H，m，NHCH₂CH₂ CH ₂NH₂)，2.02(2H，m，NHCH₂ CH ₂CH₂NH₂).

实施例54

(S)-4-[2-(3-羟基丙氨基)-3-苯基丙酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物54

将化合物6(0.15g，0.5mmol)和无水碳酸钾(0.04g，1mmol)用无水乙醇溶解，室温搅拌均匀，升温至回流，从恒压漏斗滴入3-溴丙醇(0.1g，0.5mmol)，回流18小时，反应完全，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶2∶1d氨水)，得到油状物60mg，收率：39％。m.p.130-131℃。

HR-ESI-MSC₁₆H₂₄N₂O₂S计算值308.1558，实测值[M+H]⁺309.1704.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：7.34-7.18(5H，m，Ph)，4.04(1H，m，CHCO)，3.87-3.67(4H，m，CH ₂NCH ₂)，3.58-3.37(2H，m，OHCH ₂)，2.57-2.42(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.30-1.83(2H，m，NHCH ₂)，1.98(2H，s，PHCH ₂)，1.76-1.63(2H，CH₂ CH ₂CH₂)

实施例55

(S)-4-[2-(3-羟基-2，2-二甲基丙氨基)-3-苯基丙酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物55

将化合物6(0.15g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入2，2-二甲基-3-羟基丙醛(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到白色固体150mg，将其用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，有白色固体析出，滤出，得到白色固体85mg，收率：50％。m.p.208-210℃。

HR-ESI-MSC₁₈H₂₈N₂O₂S，计算值336.1871，实测值[M+H]⁺337.2196.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：10.61(3H，s，NH₂+HCl)，7.32-7.26(5H，m，Ph)，4.74(1H，m，NHCHCO)，3.82-2.47(8H，m，SCH ₂ CH ₂NCH ₂ CH ₂)，3.82(2H，m，PHCH ₂)，3.54(2H，m，CH ₂OH)，3.10(2H，m，HOCH₂CH(CH₃)₂ CH ₂NH)，1.62(2H，m，CHCH ₂CH₃)，1.08(6H，s，HOCH₂CH(CH ₃)₂CH₂NH)，0.92(6H，m，CH ₃CHCH₂ CH ₃).

实施例56

(S)-4-[2-(哌啶-4-基-丙氨基)-3-苯基丙酰基]硫代吗啉二盐酸盐化合物56

将化合物6(0.15g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入1-BOC哌啶酮(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到油状物100mg，将其用2ml盐酸乙酸乙酯溶液溶解，脱除BOC保护基，有白色固体析出，滤出得到白色固体100mg，收率：56％。m.p.194-195℃。

HR-ESI-MSC₁₈H₂₇N₃OS，计算值333.1875，实测值[M+H]⁺334.3357.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：7.34-7.19(5H，m，Ph)，4.78(1H，m，NH)，3.60(1H，m，NHCHCO)，3.46-3.29(4H，m，CH ₂NCH ₂)，3.13-3.02(2H，s，PHCH ₂)，3.03-2.91(4H，m，CH ₂SCH ₂+NHCHCH ₂ CH ₂)，2.14(1H，m，NHCH)，2.48-1.45(4H，m，CH₂CH₂CH₂CH₂).

实施例57

(S)-4-[2-(4-羟基丙氨基)-3-苯基丙酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物57

将化合物6(0.15g，0.5mmol)和氢氧化钠(0.04g，1mmol)用无水甲醇溶解，室温搅拌10分钟，加入4A分子筛，十分钟后，加入4-羟基环己酮(0.1g，0.5mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，1.5mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液过减压柱(硅胶H，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)得到油状物150mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯溶液中，室温搅拌，得到白色固体70mg，收率：40％。m.p.175-177℃。

HR-ESI-MSC₁₉H₂₈N₂O₂S，计算值348.1871，实测值[M+H]⁺349.2030.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：7.34-7.19(5H，m，Ph)，4.08(1H，m，NHCHCO)，3.84-3.68(2H，m，CH ₂NCH₂)，3.58-3.35(2H，m，CH₂NCH ₂)，3.49(2H，s，PHCH ₂)，3.01-2.87(1H，m，NHCH)，2.68-2.43(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.57(1H，mCHOH)，1.76-1，25(8H，m，CH₂CH₂CH₂CH₂).

实施例58

4-(2-吗啉基乙酰基)硫代吗啉化合物58

步骤1：1-氯乙酰基硫代吗啉

将硫代吗啉(2.06g，20mmol)用约20ml无水二氯甲烷溶解，加入碳酸钠(2.12g，20mmol)，外用冰盐浴降温至-5℃，从恒压漏斗滴入氯乙酰氯(2.4ml，30mmol)，温度升高，滴毕，撤去冰浴，升至室温搅拌。3小时后，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，得黄色油状物800mg，收率89％。

化合物58：4-(2-吗啉基-乙酰基)硫代吗啉乙酮

将氯乙酰基硫代吗啉(0.17g，2mmol)，无水碳酸钾(0.553g，4mmol)，溶于四氢呋喃中，外用冰浴降温至5℃，从恒压漏斗滴入58A(0.18g，1mmol)，温度略有升高，溶液变淡黄色，室温搅拌，10分钟后，加入碘化钾(0.17g，1mmol)，室温搅拌，待反应完全后，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，得到白色固体118mg，收率51％。m.p.94-96℃。

HR-ESI-MSC₁₀H₁₈N₂O₂S，计算值230.1089，实测值[M+H]⁺211.1191.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：3.88-3.82(4H，t，J＝4.8Hz，SCH₂ CH ₂NCH ₂)，3.72-3.70(4H，t，J＝4.8Hz，CH ₂OCH ₂)，2.67-2.58(4H，t，，J＝4.8Hz，OCH₂ CH ₂NCH ₂)，2.52-2.49(4H，t，J＝4.8Hz，CH ₂SCH ₂)，3.17(2H，s，CH ₂).

以下实施例参考实施例58的合成方法进行合成。

实施例59

4-[2-(4-甲基哌啶-1-基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物59

将N-甲基哌嗪(0.20g，2mmol)，无水碳酸钾(0.55g，4mmol)，溶于四氢呋喃中，外用冰浴降温至5℃，从恒压漏斗滴入氯乙酰基硫代吗啉(0.18g，1mmol)，温度略有升高，溶液变淡黄色，室温搅拌，10分钟后，加入碘化钾(0.17g，1mmol)，室温搅拌，待反应完全后，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过常压柱(硅胶200-300目，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)，得到油状物80mg，收率33％。将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯溶液中成盐，得黄色固体100mg，收率：20％。m.p.50-53℃。

HR-ESI-MSC₁₁H₂₁N₃OS，计算值243.1405，实测值[M+H]⁺244.1493.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：3.87-3.81(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.67-2.58(12H，m，CH ₂ CH ₂NCH ₂ CH ₂N)，2.31(3H，s，CH ₃)，3.17(2H，s，CH ₂).

实施例60

4-[2-(2，6-二甲基吗啉基)-乙酰基]硫代吗啉化合物60

将2，6-二甲基吗啉(0.23g，2mmol)，无水碳酸钾(0.55g，4mmol)，溶于四氢呋喃中，外用冰浴降温至5℃，从恒压漏斗滴入氯乙酰基硫代吗啉(0.18g，1mmol)，温度略有升高，溶液变淡黄色，室温搅拌，10分钟后，加入碘化钾(0.17g，1mmol)，室温搅拌，待反应完全后，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过常压柱(硅胶200-300目，二氯甲烷∶甲醇＝100∶1)，得到油状物180mg，收率：51％。m.p.40-42℃。

HR-ESI-MSC₁₂H₂₂N₂O₂S，计算值258.1402，实测值[M+H]⁺259.1819.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：3.87-3.80(4H，m，SCH₂ CH ₂NCH ₂)，3.70-3.65(2H，m，CH₃ CH)，3.14(2H，s，COCH ₂)，2.69(2H，dd，J＝21.6Hz，J＝10.5Hz，NCH ₂CH(CH₃))，1.86(2H，dd，J＝21.3Hz，J＝10.8Hz，NCH ₂CH(CH3))，2.65-2.58(4H，m，CH ₂SCH ₂)，1.15(6H，d，J＝63.0Hz，NCH₂CH(CH ₃)).

实施例61

4-(2-环戊氨基乙酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物61

将环戊胺(2ml，20mmol)中滴入氯乙酰基硫代吗啉(0.18g，1mmol)，温度略有升高，溶液变淡黄色，室温搅拌，待反应完全后，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过常压柱(硅胶200-300目，二氯甲烷∶甲醇＝100∶1)，得到油状物，加入1ml盐酸乙酸乙酯溶液室温搅拌，得到白色固体25mg，收率10％。m.p.197-200℃。

HR-ESI-MSC₁₁H₂₀N₂OS，计算值228.1296，实测值[M+H]⁺229.1400.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：3.89(2H，t，J＝4.8Hz，CH₂SCH ₂)，3.48(2H，t，J＝4.8Hz，CH ₂SCH₂)，3.43(2H，s，CH ₂CO)，3.06(1H，m，NH)，2.62(4H，t，J＝4.5z，CH ₂NCH ₂)，1.85-1.38(8H，m，CH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₂)，2.20(1H，m，NHCH)，

实施例62

4-(2-苯胺基乙酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物62

将氯乙酰基硫代吗啉(0.2g，1mmol)和无水碳酸钾(0.553g，4mmol)溶于10ml四氢呋喃中，加入苯胺(0.08g，1mmol)室温搅拌过夜，滤除固体，滤液过常压柱(硅胶200-300目，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)，加入2ml盐酸乙酸乙酯溶液室温搅拌，得到白色固体得到白色固体80mg，收率：收率：62％，m.p.158-161℃。

HR-ESI-MSC₁₂H₁₆N₂OS，计算值236.0983，实测值[M+H]⁺237.1035.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：7.19(2H，t，J＝8.1Hz，PHH-2，H-4)，6.91(2H，d，J＝8.1Hz，PHH-1，H-5)，6.80(1H，t，J＝7.2Hz，PHH-3)，3.89(4H，m，CH₂SO₂ CH ₂)，4.14(2H，s，CH ₂CO)，3.29(2H，m，CH ₂NCH₂)，3.11(2H，m，CH₂NCH ₂).

实施例63

(S)-4-[2-(1-甲基苄氨基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物63

将α-甲基苄胺(0.24g，2mmol)，无水碳酸钾(0.42g，3mmol)，溶于四氢呋喃中，外用冰浴降温至5℃，从恒压漏斗滴入氯乙酰基硫代吗啉(0.18g，1mmol)，温度略有升高，溶液变淡黄色，室温搅拌，10分钟后，加入碘化钾(0.17g，1mmol)，室温搅拌，待反应完全后，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过常压柱(硅胶200-300目，二氯甲烷∶甲醇＝100∶1)，得到油状物溶于2ml盐酸乙酸乙酯中得到白色固体270mg，收率：50％。m.p.106-108℃。

HR-ESI-MSC₁₄H₂₀N₂OS，计算值264.1296，实测值[M+H]⁺265.1324.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：7.33-7.24(5H，m，Ph)，3.89-3.49(4H，m，CH ₂NCH ₂)，3.24(2H，s，COCH ₂)，3.80(1H，q，J＝6.3Hz)，2.60-2.49(4H，m，CH ₂SCH ₂)，1.39(3H，d，J＝6.6Hz，CH ₃).

实施例64

4-(2-苯乙氨基乙酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物64

将苯乙胺(0.24g，2mmol)，无水碳酸钾(0.55g，4mmol)，溶于四氢呋喃中，外用冰浴降温至5℃，从恒压漏斗滴入氯乙酰基硫代吗啉(0.18g，1mmol)，温度略有升高，溶液变淡黄色，室温搅拌，10分钟后，加入碘化钾(0.17g，1mmol)，室温搅拌，待反应完全后，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过常压柱(硅胶200-300目，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)，得到油状物溶于2ml盐酸乙酸乙酯中得到白色固体170mg，收率：32％。m.p.229-233℃。

HR-ESI-MSC₁₄H₂₀N₂OS，计算值264.1296，实测值[M+H]⁺265.1852.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：7.33-7.19(5H，m，Ph)，3.86(2H，t，J＝4.2Hz，NCH ₂)，3.63(2H，t，J＝4.8Hz，NCH ₂)，3.53(2H，s，COCH ₂)，3.11(1H，s，NH)2.62-2.59(4H，m，J＝6.0Hz，CH ₂SCH ₂)，2.98-2.91(4H，m，NCH ₂ CH ₂Ph).

实施例65

4-[2-(3-羟基金刚烷胺基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物65

将氯乙酰基硫代吗啉(0.2g，1mmol)和无水碳酸钾(0.553g，4mmol)溶于10ml四氢呋喃中，加入3-羟基金刚烷胺(0.16g，1mmol)室温搅拌过夜，滤除固体，滤液过常压柱(硅胶200-300目，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)，得到黄色固体50mg，收率：收率：32％，m.p.169-170℃。

HR-ESI-MSC₁₆H₂₆N₂O₂S，计算值310.1715，实测值[M+H]⁺311.1997.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：3.88(2H，m，CH ₂N)，3.68(2H，m，CH ₂N)，4.37(2H，s，CH ₂CO)，2.63-2.61(4H，m，CH ₂SCH ₂)，2.27(2H，m，CH)，1.66-1.52(12H，m，CH₂).

实施例66

1，1-二氧代-4-(2-吗啉基-乙酰基)硫代吗啉化合物66

步骤1：氧化硫代吗啉

将硫代吗啉(0.36g，3.5mmol)用5ml盐酸乙酸乙酯溶解，有大量白色固体析出，滤出，烘干，得白色固体400mg。将其用冰醋酸4ml溶解，外用冰盐浴降温至0℃，加入双氧水1.4ml，室温搅拌，将白色固体滤出。

步骤2：氯乙酰基-氧化硫代吗啉

将氧化硫代吗啉(0.41g，3mmol)用无水二氯甲烷10ml溶解，外用冰盐浴降温至0℃，从恒压漏斗滴入氯乙酰氯(2.8ml，3.6mmol)，室温搅拌2小时后，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过减压柱(硅胶H，石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，得到白色固体0.64g。

化合物66：1，1-二氧代-4-(2-吗啉基-乙酰基)硫代吗啉

将氯乙酰基-氧化硫代吗啉(0.20g，2mmol)，无水碳酸钾(0.55g，1mmol)，溶于四氢呋喃中，外用冰浴降温至5℃，从恒压漏斗滴入66B(0.21g，1mmol)，温度略有升高，溶液变淡黄色，室温搅拌，10分钟后，加入碘化钾(0.16g，1mmol)，室温搅拌，待反应完全后，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，得到白色固体200mg，收率：66％。m.p.188-190℃。

HR-ESI-MSC₁₀H₁₈N₂O₄S，计算值262.0987，实测值[M+H]⁺263.1051.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：4.09(4H，t，J＝4.8Hz，SO₂CH₂ CH ₂NCH ₂)，3.71(4H，t，J＝4.2Hz，CH ₂OCH ₂)，3.24(2H，s，CH ₂CO)，3.02(4H，m，CH ₂SO₂ CH ₂)，2.51(4H，m，吗啉上CH ₂NCH ₂).

实施例67

1，1-二氧代-4-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物67

将N-甲基哌嗪(0.20g，2mmol)，无水碳酸钾(0.55g，4.0mmol)，溶于四氢呋喃中，外用冰浴降温至5℃，从恒压漏斗滴入氯乙酰基-氧化硫代吗啉(0.21g，1mmol)，温度略有升高，溶液变淡黄色，室温搅拌，10分钟后，加入碘化钾(0.16g，1mmol)，室温搅拌，待反应完全后，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过常压柱(硅胶200-300目，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)，得到白色固体140mg，收率：50％。m.p.125-126℃。

HR-ESI-MSC₁₁H₂₁N₃O₃S，计算值275.1304，实测值[M+H]⁺276.1365.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：4.08(4H，m，CH ₂NCH ₂)，3.24(2H，s，CH ₂CO)，3.10(4H，m，SO₂CH₂ CH ₂NCH ₂)，2.53(4H，m，CH ₂SO₂ CH ₂)，2.46(3H，s，NCH ₃)，2.30-1.77(4H，m，CH ₂(NCH₃)CH ₂).

实施例68

1，1-二氧代-4-(2-环戊氨基-乙酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物68

将环戊胺(0.18g，2mmol)，无水碳酸钾(0.55g，4mmol)，溶于四氢呋喃中，外用冰浴降温至5℃，从恒压漏斗滴入氯乙酰基-氧化硫代吗啉(0.21g，1mmol)，温度略有升高，溶液变淡黄色，室温搅拌，10分钟后，加入碘化钾(0.16g，1mmol)，室温搅拌，待反应完全后，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过常压柱(硅胶200-300目，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)，得到油状物220mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯中，室温搅拌，得到白色固体140mg，收率：48％。m.p.173-174℃。

HR-ESI-MSC₁₁H₂₀N₂O₃S，计算值260.1195，实测值[M+H]⁺261.1946.

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)，δ：4.10(2H，m，CH ₂NCH₂)，3.95(2H，m，CH₂NCH ₂)，3.63(2H，s，CH ₂CO)，3.17(2H，m，CH₂SO₂ CH ₂)，3.08(2H，m，CH ₂SO₂CH₂)，2.71(2H，s，NH和CHNH)，1.85-1.29(8H，m，CH ₂ CH ₂ CH ₂ CH ₂).

实施例69

1，1-二氧代-4-(2-苯乙氨基乙酰基)硫代吗啉盐酸盐化合物69

将苯乙胺(0.24g，2mmol)，无水碳酸钾(0.55g，4.0mmol)，溶于四氢呋喃中，外用冰浴降温至5℃，从恒压漏斗滴入氯乙酰基-氧化硫代吗啉(0.21g，1mmol)，温度略有升高，溶液变淡黄色，室温搅拌，10分钟后，加入碘化钾(0.16g，1mmol)，室温搅拌，待反应完全后，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过常压柱(硅胶200-300目，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)，得到油状物200mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯中，室温搅拌，得到白色固体180mg，收率：58％。m.p.222-224℃。

HR-ESI-MSC₁₄H₂₀N₂O₃S，计算值296.1195，实测值[M+H]⁺297.1258.

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：9.23(2H，s，NH+HCl)，7.36-7.23(5H，m，PH)，4.19(2H，s，CH ₂CO)，3.91-3.78(4H，m，SO₂CH₂ CH ₂NCH ₂)，3.36(4H，m，CH ₂SO₂ CH ₂)，3.02(2H，m，CH ₂PH)，2.99(2H，m，NCH ₂CH₂Ph).

实施例70

(S)-1，1-二氧代-4-[2-(1-甲基苄氨基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐化合物70

将α-甲基苄胺(0.24g，2mmol)，无水碳酸钾(0.55g，4.0mmol)，溶于四氢呋喃中，外用冰浴降温至5℃，从恒压漏斗滴入氯乙酰基-氧化硫代吗啉(0.21g，1mmol)，温度略有升高，溶液变淡黄色，室温搅拌，10分钟后，加入碘化钾(0.16g，1.0mmol)，室温搅拌，待反应完全后，将反应液中固体滤除，滤液减压浓缩至干，过常压柱(硅胶200-300目，二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)，得到油状物200mg，将其溶于2ml盐酸乙酸乙酯中，室温搅拌，得到白色固体190mg，收率：60％。m.p.＞250℃。

HR-ESI-MSC₁₄H₂₀N₂O₃S，计算值296.1195，实测值[M+H]⁺297.1250

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)，δ：9.55(1H，s，HCl)，9.20(1H，s，NH)，7.55-7.33(5H，m，Ph)，4.32(1H，q，J＝5.7Hz，CHCH₃)，4.03-3.10(8H，m，CH ₂NCH ₂ CH ₂SO₂ CH ₂)，3.70(2H，s，CH ₂CO)，1.61(3H，d，J＝6.9Hz，CH ₃CH).

试验例部分

试验例1、DPP-IV抑制剂离体筛选方法

试剂：

1.反应底物：Gly-Pro-p-nitroanilidehydrochloride(Sigma，G0513)，用2XHEPES(pH＝7.05)溶解成100X储存液，分装成100ul每管，-20度避光保存(标记为“S”)，每次使用时用2XHEPES(pH＝7.05)稀释100倍，现用现配。

2.酶工作液：rhDPP-IV纯化蛋白储存液，-20度保存。

3.样品：根据溶解条件，一般用DMSO溶解为10^-2M保存，反应时候用去离子水稀释成所需浓度(如10^-4M)。

4.2XHEPES(pH＝7.05)缓冲液：每100ml水中含NaCl1.6g，KCl0.074g，Na₂HPO₄.2H₂O0.027g，Glucose0.2g，HEPES1g，调pH为7.05，4度保存。

5.阳性对照药：化合物(S)-3-(2-氨基-2-环己基乙酰基)四氢噻唑储存液10^-2M，4度保存。

检测方法

用96孔板，冰上操作。

1加样：每孔依次加入15ul样品稀释液，60ul底物工作液，25ulrhDPP-IV酶液，

需要设阴性对照(用水代替样品)，阳性对照(化合物(S)-3-(2-氨基-2-环己基乙酰基)四氢噻唑，10^-5M)，每个样品浓度10^-5M，设平行组2-3组，震荡5S后立即酶标仪读数(OD405nm)，为OD0min。

2孵育：1步骤后将96孔板在37度恒温孵育1小时，再次读数(酶标仪读数OD405nm)为OD60min。

3.计算抑制率，依如下公式：

一般认为阳性对照(S)-3-(2-氨基-2-环己基乙酰基)四氢噻唑在10^-5M时候抑制率为90-100％可认为本次实验反应可靠，样品抑制率与阳性对照相比，大于40％认为有效。

阳性化合物IC ₅₀ 的计算：

1.对于初次筛选10^-5M有活性的化合物实施例3以及实施例5(抑制活性大于70％)，设置不同的浓度梯度，例如10^-9，10^-8，10^-7，10^-6，10^-5M进行DPP-IV抑制实验。

2.将化合物的反应浓度及抑制率绘制浓度-反应曲线，统计学处理得到的拟合公式，Y为抑制率，X为化合物浓度，当Y为50％，即达到50％抑制率活性时对应的化合物浓度即为该化合物的半数有效抑制浓度(IC₅₀)，试验结果见表1。

表1本发明部分化合物的酶水平活性测定结果

化合物编号抑制率(％)IC₅₀化合物编号抑制率(％)

实施例234.29实施例1141.79

实施例374.64实施例3036.20

实施例466.476.93×10^-6实施例3936.22

实施例574.423.40×10^-6实施例4648.90

实施例665.71实施例5746.40

实施例752.50实施例6142.10

实施例1065.90。

Claims

1.式(I)的化合物，或其药学可接受的盐、游离碱，

其中：

X为S或者SO₂；

R₁和R₂与分别连接至此二者的碳和氮原子一起形成4-12元的含氮单环或双环杂环，所述杂环任选被1-3个选自下列的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基，R₃为氢，或

R₁和R₃与分别与此二者连接的碳和氮原子一起形成4-12元的含氮单环或双环杂环，所述杂环任选被1-3个选自下列的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基，R₂为氢，或

R₂和R₃与它们所连接的氮原子一起形成4-10元的含氮杂环，其中所述杂环任选还含有1-2个选自氮、氧、硫的杂原子，并且所述杂环任选被1-3个选自下列的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基，R₁为氢。

2.根据权利1的化合物，其特征在于以下(1)至(8)任一项：

(1)X为S；

(2)X为SO₂，即-S(O₂)-；

(6)R₁和R₂与分别连接至此二者的碳和氮原子一起形成4-12元的含氮单环或双环杂环，所述杂环任选被1-3个选自下列的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基，R₃为氢；

(7)R₁和R₃与分别与此二者连接的碳和氮原子一起形成4-12元的含氮单环或双环杂环，所述杂环任选被1-3个选自下列的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基，R₂为氢；

(8)R₂和R₃与它们所连接的氮原子一起形成4-10元的含氮杂环，其中所述杂环任选还含有1-2个选自氮、氧、硫的杂原子，并且所述杂环任选被1-3个选自下列的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基，R₁为氢。

3.根据权利要求1至2任一项的化合物，其为式(Ia)所示的化合物，或其药学可接受的盐、游离碱，

其中，

R₂和R₃与它们所连接的氮原子一起形成4-10元的含氮杂环，其中所述杂环任选还含有1-2个选自氮、氧、硫的杂原子，并且所述杂环任选被1-3个选自下列的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基。

4.根据权利要求1至2任一项的化合物，其为式(Ib)所示的化合物，或其药学可接受的盐、游离碱，

5.根据权利要求1至2任一项的化合物，其为式(Id)所示的化合物，或其药学可接受的盐、游离碱，

R₁和R₂与分别连接至此二者的碳和氮原子一起形成4-12元的含氮单环或双环杂环，所述杂环任选被1-3个选自下列的基团取代：羟基、卤素、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基。

6.根据权利1至2任一项的化合物，其为选自下列的化合物：

(S)-4-[(吡咯烷-2-基)-甲酰基]硫代吗啉盐酸盐

4-[(1，2，3，4-四氢异喹啉-3-基)-甲酰基]硫代吗啉盐酸盐

4-(2-吗啉基-乙酰基)硫代吗啉

4-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐

4-[2-(2，6-二甲基吗啉基)-乙酰基]硫代吗啉

1，1-二氧代-4-(2-吗啉基乙酰基)硫代吗啉

1，1-二氧代-4-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-乙酰基]硫代吗啉盐酸盐或其药学可接受的盐、游离碱。

7.制备权利要求1至6任一项所述化合物的方法，其包括以下步骤：

(i)在-10℃至10℃的温度下，在有机溶剂中，使式1所示化合物与式2所示酰卤化合物反应1-2小时，得到式3所示化合物

(ii)在0℃至30℃的温度下，在碱存在下，在有机溶剂中，使步骤(i)所得式3所示化合物与式NHR₂R₃表示的胺类化合物进行亲核取代反应4-12小时，得到以下式(I)所示化合物：

和任选的，

(iii)对所得的式(I)化合物进行形成盐操作，

其中，Y是卤素，X、R₁、R₂、R₃的定义如权利要求1至6任一项所述。

8.制备权利要求1至6任一项所述化合物的方法，其包括以下步骤：

(i)在-10℃至40℃的温度下，在碱存在下，使式4所示化合物与(BOC)₂O反应2-12小时，得到式5所示化合物

(ii)在-10℃至40℃的温度下，在1-2当量的缩合剂和碱存在下，在有机溶剂中，使式1所示化合物与步骤(i)所得式5所示化合物反应2-4小时，得到式6所示化合物

(iii)在10℃至40℃的温度下，在盐酸乙酸乙酯溶液中，使步骤(ii)所得式6所示化合物脱除BOC保护基，得到式7所示化合物和任选的

(iv)在-10℃至40℃的温度下，使式7所示化合物与包含R₂或R₃基团的醛或酮反应2-6小时，得到以下式8所示的另一本发明化合物：

以及任选的，

(v)对所得式8化合物进行形成盐操作，

其中，X、R₁、R₂、R₃的定义如权利要求1至6任一项所述。

9.一种药物组合物，其包含治疗和/或预防有效量的权利要求1至6任一项所述化合物或其药学可接受的盐、游离碱，以及任选的一种或多种药学可接受的载体或赋形剂。

10.权利要求1至6任一项所述化合物或其药学可接受的盐、游离碱或者权利要求9所述药物组合物在制备用于治疗和/或预防与DPP-IV活性过高或者与DPP-IV过度表达有关的疾病或病症的方法的药物中的用途。

11.根据权利要求10的用途，其中所述与DPP-IV活性过高或者与DPP-IV过度表达有关的疾病或病症是选自下列的疾病或病症：糖尿病、高血糖症。

12.根据权利要求11的用途，其特征在于，所述的糖尿病为II型糖尿病。