CN102384906B - 血红蛋白检测板及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种血红蛋白检测板及其制备方法和应用，其特征在于包括样本预处理区和固相试剂反应区，其中在样本预处理区的若干个样本预处理装置中，将全血中血细胞溶解破碎，溶出血红蛋白并传送至已预先固化好反应试剂的固相试剂反应区，完成化学反应，得检测结果；本发明亦公开了这种血红蛋白检测板的制备方法。本发明可以一次检测多人血红蛋白浓度，反应迅速，准确度和精密度高；重复性好，完全满足医院和流动采血车上大规模快速检验的需求。
Description
技术领域
本发明涉及一种同时快速检测多人血红蛋白的装置，属于医疗设备技术领域，特别涉及一种血红蛋白检测板及其制备方法和应用。
背景技术
血红蛋白是人体内负责运载氧的一种蛋白质，作为血液中完成氧气和二氧化碳气体交换的重要物质，是维持生命活动的基本条件。血红蛋白检测是临床上诊断贫血程度的最重要指标，同时也是辅助诊断其他类型血液病的重要指标。目前，临床上检测血红蛋白的原理一般基于氰化高铁血红蛋白法(HiCN法)、叠氮高铁血红蛋白法(HiN3法)或十二烷基硫酸钠血红蛋白法(SLS-Hb法)，其中氰化高铁血红蛋白法是ICSH推荐参考方法。基于上述原理而设计的血液分析仪及配套试剂是临床上应用较广的血红蛋白检测方法。
干式化学检测技术是近年来发展起来的一项新型检验技术。干式化学检测技术以其独特的性能正在为临床实验室所接受，成为临床生化检验常规和急诊检测工作的新生力量。与传统方法相比，具有操作简单、速度快、污染少、结果稳定准确等诸多优点。干式化学检测的方式，通常是将参与反应的各化学试剂按比例配成溶液，加于固相反应载体之上，经干燥后可用于临床检测。检测过程中，干式化学检测方法中应用的化学试剂溶解速度快、局部浓度高、反应速度快，同时，可保证一些试剂在固体干物料状态下保持长期稳定。
目前，干式化学快速检测技术，在临床检测领域尚属于新兴技术，在国内外应用尚不十分广泛，其主要原因除了技术上存在一定难度之外，其检测方式上只能实现单人单项目检测，虽然检测结构比较稳定，但检测效率偏低，这也是阻碍干式化学检测技术进一步发展和全面普及的重要原因。
发明内容
本发明提供一种血红蛋白检测板及其制备方法和应用，解决了多样本同时检测血红蛋白浓度的问题，检测结果稳定、检测效率高，外观精巧，方便易用。
本发明是通过以下的技术方案实现的：
一种血红蛋白检测板，包括样本预处理装置和固相试剂反应载体，所述样本预处理装置为若干个，开设在承载基板上，其内部固定已点样化学试剂的样本载体，所述固相试剂反应载体固定在承载盖板上，所述承载基板和承载盖板通过连接装置固定安装。
所述样本预处理装置为槽式容器，本体内嵌在所述承载基板上。
所述样本载体是一种吸水纸材料的样本载体。
所述承载基板是由聚乙烯、聚氯乙烯、聚丙烯和有机玻璃中的一种材料制成。除上述优选材料之外，其他硬度高的疏水高分子材料也可以用于承载基板的制备。
上述的样本预处理装置和其加装固定的样本载体组成了样本预处理区，将采集的全血置入样本预处理装置后，与已经固化溶胞剂的样本载体产生作用，将血细胞溶解破碎，溶出血红蛋白。
所述承载盖板上设置若干与所述样本预处理装置位置相对应的窗口。
所述固相试剂反应载体是一种高分子膜，根据检测项目需要可选择不同材料的市售的高分子膜材料，如不同孔径的硝酸纤维素膜、聚酯膜等。
所述每一个窗口粘贴覆盖一个固相试剂反应载体。这样固相试剂反应载体的膜结构彼此分开，互相独立，可用于一人份或多人份血液血红蛋白的检测。
所述连接装置是一个弹性垫，弹性垫具有一定的厚度和弹性，两边有粘合剂，将载体基板和载体盖板进行非密封连接。
承载盖板和固相试剂反应载体组成了固相试剂反应区，将需要检测的各种化学反应试剂预先固定在固相试剂反应载体上。
样本载体和固相试剂反应载体在特定仪器控制下相接触，在样本预处理区溶出的血红蛋白传送至固相试剂反应区，在固相试剂反应区内与固相试剂反应载体上的化学试剂进行反应，经干片式快速检测仪，通过光源及光学传感器，检测固相试剂反应载体膜上的颜色变化进而计算出被测物的浓度。检测过程中，检测仪对光电信号进行采集、分析及数据处理。血红蛋白检测板上化学反应过程在检测仪恒温控制下自动进行，具有反应速度快、重复性好、准确度、精密度高等优点。
本发明还提供这种血红蛋白检测板的制备方法，是通过以下的步骤实现的：
(1)切割固定：按照互相配合的规格加工制作承载基板和承载盖板，在承载基板上开设样本预处理装置凹槽，在承载盖板上开设窗口。切割对应尺寸的固相试剂反应载体、样本载体，将样本载体固定在样本预处理装置上，将固相试剂反应载体采用300～500℃热合方式粘贴覆盖在承载盖板的窗口上；
(2)点样：将检测血红蛋白浓度所需要的反应试剂，定量点样于固相试剂反应载体和样本载体上；
(3)烘干干燥：将点样后的固相试剂反应载体和样本载体在30～60℃烘箱中干燥30～120min；
(4)组装：将承载盖板和承载基板通过连接装置进行非密封连接。
其中固相试剂反应载体上点样固化有促进血红蛋白转化成高铁血红蛋白的亚硝酸盐、能够使高铁血红蛋白转化为叠氮高铁血红蛋白的叠氮化钠，并且采用无机酸调节pH在6～7。
本发明的有益效果为：血红蛋白检测板应用于临床上快速定量检测人全血标本的血红蛋白浓度。由于本发明产品具有反应迅速、准确度、精密度高、多样本同时检测等特点，故实际应用中可满足常规诊断、急诊、血源筛查等多方面要求。
本发明涉及产品血红蛋白检测板的设计开发及技术路线科学、合理，自动化程度高，性能稳定，功能齐全，外观精巧，方便易用。检测结果准确度高，重复性好，检测速度快，完全可以满足各级医院及流动采血车上大规模快速检验的需要。
附图说明
图1是单人份血红蛋白检测板的结构示意图
图2是四人份血红蛋白检测板的结构示意图
图3是四人份血红蛋白检测板承载盖板与其上的窗口示意图
具体实施方式
以下结合附图和实施例，对本发明做进一步说明。
实施例1
单人份血红蛋白检测板
血红蛋白检测板的检测方法基于叠氮高铁血红蛋白检测的方法来实现血红蛋白的定量测定，该法检测结果稳定、精确度高，是国际公认的血红蛋白检测方法之一。
血红蛋白检测板包括样本预处理区和固相试剂反应区。其中全血在样本预处理区经溶胞剂裂解血细胞溶出血红蛋白，扩散后传送到固相试剂反应区，固相试剂反应区的固相反应载体膜上预先固化着反应试剂。反应试剂与其中的血红蛋白发生反应，最终在载体膜上产生明显颜色变化，根据被测物Hb浓度的不同，呈现出不同程度的颜色变化，再由干片式快速检测仪利用反射光度法比色原理进行定量检测，通过对反应终点的颜色变化测定出标本中Hb浓度。化学反应式如下：
Hb+NaNO2→Hi
Hi+NaN3→HiN3
主要组成成份：每片血红蛋白检测板固相试剂反应载体及样本载体上含有下列物质：
血红蛋白检测板的制备：(如图1)
①切割固定：将固相反应载体膜1、样本垫4、加样槽3按规格切割，加工制作尺寸配合的承载基板和承载盖板，在本实施例中为硬质基板5和塑料条架2。将样本垫4加装固定于加样槽3；将固相反应载体膜1在500℃热合覆盖在塑料条架2上。
②点样：按检测血红蛋白所需试剂配方，配制反应工作液I，定量1.5-2.5μl/片点样于固相反应载体膜上；反应工作液II，定量15-18μl/片点样于样本垫上。
③干燥：将点样后的固相反应载体膜1及样本垫4在40℃烘箱中干燥90分钟。
④组装：将塑料条架2与硬质基板5通过弹性垫6的上下两层黏合剂固定在一起。加装干燥剂、除氧剂，密封于铝箔袋中，2-8℃冰箱中储存、备用。
临床检测：
取15-20μl指尖末梢血，加于血红蛋白检测板的加样槽内，并将检测板放于配套使用的干片式快速检测仪内，3分钟内检测仪自动显示结果。
实施例2
四人份血红蛋白检测板
检测原理同上。
主要组成成份
血红蛋白检测板的每个窗口上的固相试剂反应载体及对应的样本垫上含有下列物质：
每片血红蛋白检测板有4个窗口，即试剂总量为：
血红蛋白检测板的制备：(如图2)
①切割固定：将固相反应载体膜1、样本垫4、加样槽3按规格切割，加工制作尺寸配合的承载基板和承载盖板，在本实施例中为硬质基板5和塑料条架2。将样本垫4加装于加样槽3；将固相反应载体膜1在500℃热合覆盖在塑料条架2上。
②点样：按检测血红蛋白所需试剂配方，配制反应工作液I，定量1.5-2.5μl/片点样于固相反应载体膜上；反应工作液II，定量15-18μl/片点样于样本垫上。
③干燥：将点样后的固相反应载体膜1及样本垫4在40℃烘箱中干燥120分钟。
④组装：将塑料条架2与硬质基板5通过弹性垫6的上下两层黏合剂固定在一起。加装干燥剂、除氧剂，密封于铝箔袋中，2-8℃冰箱中储存、备用。
临床检测：
取15-20μl指尖末梢血，加于血红蛋白检测板的加样槽内，并将检测板放于配套使用的干片式快速检测仪内，3分钟内检测仪自动显示结果。
如图3，是四人份血红蛋白检测板承载盖板与其上的窗口示意图，在上述实施例中，固相反应载体膜1均是固定安装在塑料条架2的窗口7上。
Claims (8)
1.一种血红蛋白检测板，包括样本预处理装置和固相试剂反应载体，其特征在于所述样本预处理装置为若干个，开设在承载基板上，其内固定已点样化学试剂的样本载体，所述固相试剂反应载体安装在承载盖板上，所述承载基板和承载盖板通过连接装置固定安装；所述固相试剂反应载体上点样固化有促进血红蛋白转化成高铁血红蛋白的亚硝酸盐、使所述高铁血红蛋白转化为叠氮高铁血红蛋白的叠氮化钠。
2.如权利要求1所述的血红蛋白检测板，其特征在于所述样本预处理装置为槽式容器，本体内嵌在所述承载基板上。
3.如权利要求1所述的血红蛋白检测板，其特征在于所述样本载体是一种吸水纸材料的样本载体。
4.如权利要求1所述的血红蛋白检测板，其特征在于所述承载基板是由聚乙烯、聚氯乙烯、聚丙烯和有机玻璃中的一种材料制成的承载基板。
5.如权利要求1所述的血红蛋白检测板，其特征在于所述承载盖板上设置若干与所述样本预处理装置位置相对应的窗口。
6.如权利要求1所述的血红蛋白检测板，其特征在于所述每一个窗口粘贴覆盖一个固相试剂反应载体。
7.如权利要求1所述的血红蛋白检测板，其特征在于所述连接装置是一个弹性垫，将载体基板和载体盖板进行非密封连接。
8.一种血红蛋白检测板的制备方法，其特征在于是通过以下的步骤实现的：
(1)切割固定：按照互相配合的规格加工制作承载基板和承载盖板，在承载基板上开设样本预处理装置凹槽，在承载盖板上开设窗口，切割对应尺寸的固相试剂反应载体、样本载体，将样本载体固定在样本预处理装置上，将固相试剂反应载体采用300～500℃热合方式粘贴覆盖在承载盖板的窗口上；
(2)点样：将检测血红蛋白浓度所需要的反应试剂，定量点样于固相试剂反应载体和样本载体上；
(3)干燥：将点样后的固相试剂反应载体和样本载体在30～60℃烘箱中干燥30～120min；
(4)组装：将承载盖板和承载基板通过连接装置进行非密封连接。
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