CN102301958B - 一种半枫荷离体组织培养方法 - Google Patents
一种半枫荷离体组织培养方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102301958B CN102301958B CN 201110211490 CN201110211490A CN102301958B CN 102301958 B CN102301958 B CN 102301958B CN 201110211490 CN201110211490 CN 201110211490 CN 201110211490 A CN201110211490 A CN 201110211490A CN 102301958 B CN102301958 B CN 102301958B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bud
- root
- culture
- medium
- improvement
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 241000407905 Semiliquidambar cathayensis Species 0.000 title claims abstract description 14
- 238000012258 culturing Methods 0.000 title claims abstract description 10
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 title claims abstract description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 25
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 18
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 10
- 238000007654 immersion Methods 0.000 claims description 10
- 239000003415 peat Substances 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 9
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 6
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000006870 ms-medium Substances 0.000 claims description 6
- 241000195940 Bryophyta Species 0.000 claims description 5
- 239000005802 Mancozeb Substances 0.000 claims description 5
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 5
- 229960002523 mercuric chloride Drugs 0.000 claims description 5
- LWJROJCJINYWOX-UHFFFAOYSA-L mercury dichloride Chemical compound Cl[Hg]Cl LWJROJCJINYWOX-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 5
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000010451 perlite Substances 0.000 claims description 5
- 239000012286 potassium permanganate Substances 0.000 claims description 5
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims description 5
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 claims description 5
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 5
- 241000206575 Chondrus crispus Species 0.000 claims description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000470 constituent Substances 0.000 claims description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 4
- 244000299452 Gouania lupuloides Species 0.000 claims description 3
- 235000000292 Gouania lupuloides Nutrition 0.000 claims description 3
- 230000009514 concussion Effects 0.000 claims description 3
- 241000894007 species Species 0.000 abstract description 5
- 230000006698 induction Effects 0.000 abstract description 4
- 230000000249 desinfective effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 abstract 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 11
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 6
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 4
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N pyridoxine Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 241000190047 Altingia Species 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 241000142952 Hamamelidaceae Species 0.000 description 2
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 2
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 2
- 238000004161 plant tissue culture Methods 0.000 description 2
- RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N pyridoxal hydrochloride Natural products CC1=NC=C(CO)C(C=O)=C1O RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 2
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000012549 training Methods 0.000 description 2
- 235000019158 vitamin B6 Nutrition 0.000 description 2
- 239000011726 vitamin B6 Substances 0.000 description 2
- 229940011671 vitamin b6 Drugs 0.000 description 2
- 206010019468 Hemiplegia Diseases 0.000 description 1
- 241000208682 Liquidambar Species 0.000 description 1
- 235000006550 Liquidambar Nutrition 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000000763 evoking effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 244000037666 field crops Species 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 201000003068 rheumatic fever Diseases 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008736 traumatic injury Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
本发明涉及一种半枫荷离体组织培养方法，其步骤包括：以半枫荷当年生枝条为外植体；对外植体进行消毒处理获得无菌材料；通过芽诱导培养成不定芽；再经过增殖培养，生根培养以及组培苗的驯化移栽，建立起半枫荷完整的快繁体系。利用此方法可简单、高效的培育出大量的半枫荷组培苗，从而有效的保护和繁殖该物种，满足市场对半枫荷的需求，同时解除半枫荷的濒危状态，为今后更进一步保护和利用该物种奠定良好的基础。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物组织培养方法，尤其是涉及一种半枫荷组织培养方法。
背景技术
半枫荷Altingia chingii Mete是金缕梅科常绿乔木，国家二级保护植物。中国特有种，具有枫香属Liguidambar和蕈树属Altingia两属间的综合性状，对研究金缕梅科系统发育有科学价值。木材材质优良，旋刨性良好，可作旋刨制品。同时树皮有舒筋活血、祛风除湿等功效 民间用于治疗风湿性关节炎、慢性腰腿痛、半身不遂、跌打损伤等症，疗效显著。因天然林分受人为干扰严重及自然繁殖困难，分布范围越来越窄，致使野生资源极为稀少。
植物的组织培养指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。不同植物在离体培养过程中对的基本培养基类型、激素配比、培养条件等要求不同。目前利用植物组织培养技术在开展植物种质资源保护和生产经济苗木等方面上的技术以日趋完善。现有技术均是以半枫荷叶片为外植体诱导愈伤，通过愈伤增殖，再诱导愈伤分化成芽，且未诱导出不定根。
发明内容
本发明要解决的技术问题是：提供一种简单的、诱导率高，成活率高的半枫荷的完整的组织培养方法。
为解决上述问题，本发明提供的技术方案即为一种半枫荷离体组织培养方法，其具体步骤为：
取材：取半枫荷的当年生枝条为外植体；于合适时间取优良母株当年生枝条为外植体；所述合适时间优选为连续晴天一周后，于中午12~14点取材；
无菌材料的建立：对外植体进行消毒处理获得无菌材料；具体为将外植体用洗洁精清洗并浸泡，再用流水冲洗, 置于操作台上，剪成带1-2个节间的茎段，75%乙醇处理，再用0.1%升汞浸泡处理，期间不断震荡，无菌水清洗；
芽诱导培养：将无菌材料接种于芽诱导培养基上，芽诱导培养条件下诱导培养出不定芽；所述所述芽诱导培养基为改良MS+6-BA1.5~2.5mg/L +NAA0.2~0.4mg/L，所述芽诱导培养条件为光照时间8~12 h，光照强度3000 ~5000lx，温度25~27℃；
增殖培养：将诱导培养出的不定芽转接至芽增殖培养基中培养出新的不定芽；所述芽增殖培养基为改良MS+6-BA0.4~0.8mg/L +NAA0.05~0.15mg/L；
生根培养：将新长出的2－3cm的不定芽转接至生根培养基中，使长出2－3cm的的根；所述生根培养基为1/2改良MS+IBA0.4~0.8mg/L +NAA0.1~0.3mg/L；
其中改良MS培养基是将MS培养基中NH4NO3 含量调整为340~660 mg/L、KNO3含量调整为1318~1722 mg/L，卡拉胶6.7 g/L，蔗糖30g/L，pH值5.8-6.0；1/2改良MS即将改良MS中大量元素减半，其余组分含量不变。
移栽：将生根苗先移栽至大棚进行炼苗，再经过处理后移栽入田间。具体为炼苗后将生根苗取出，洗净根部培养基，0.1%代森锰锌浸泡处理，阴干，待植株枝干上的水分阴干后，移栽入事先已用0.1%高锰酸钾消毒的基质中，其中的基质优选为泥炭土：草炭：珍珠岩为9：6：1。
本发明提供一种具体的半枫荷离体组织培养方法，为：
取材：连续晴天一周后，于中午12~2点取材，以优良母株当年生枝条为外植体；
无菌材料的建立：将外植体用洗洁精清洗并浸泡10min，后用流水冲洗30min, 置于操作台上，剪成带1-2个节间的茎段，75%乙醇处理25 s，0.1%升汞浸泡处理10 min，期间不断震荡，无菌水清洗6遍，获得无菌材料；
芽诱导培养：将无菌材料接种于芽诱导培养基上，光照时间8~12 h，光照强度3000 ~5000lx，温度25~27℃，14天后，可诱导出2~3cm的不定芽；
增殖培养：将诱导出的不定芽转接至芽增殖培养基中，约7天后可见不定芽与培养基接触的地方冒出新的芽点，其中的芽增殖培养基为改良MS+6-BA0.4~0.8mg/L +NAA0.01~0.15mg/L；
生根培养：将新长出的2－3cm的不定芽转接至生根培养基中，使长出2－3cm的根；将2~3cm长的不定芽转接至生根培养基中，5d后可见其茎段末端切口处冒出白色根原基，14天后长成2~3cm的根，其中的生根培养基为1/2改良MS+IBA0.4~0.8mg/L +NAA0.1~0.3mg/L，
其中改良MS培养基是将MS培养基中NH4NO3 含量调整为340~660 mg/L、KNO3含量调整为1318~1722 mg/L，卡拉胶6.7 g/L，蔗糖30g/L，pH值5.8-6.0；1/2改良MS即将改良MS中大量元素减半，其余组分含量不变。
移栽：将生根苗先移栽至大棚进行炼苗，7天后将其从瓶中小心取出，洗净根部培养基，用0.1%代森锰锌浸泡处理2~3 min，阴干，待植株枝干上的水分阴干的差不多时，移栽入事先已用0.1%高锰酸钾消毒的基质中，移栽后做好田间温湿度管理，其中的基质优选为泥炭土：草炭：珍珠岩为9：6：1。
本技术完整的技术路线为：以茎段为外植体，直接诱导不定丛芽（避免现有技术中用愈伤分化丛芽易出现变异的情况），再通过不定丛芽的增殖、生根培养，以及组培苗的驯化移栽，从而建立起半枫荷完整的快繁体系。
本发明公开的是一种新的半枫荷快繁体系，首次完成半枫荷整个组培育苗的流程，建立起其快繁体系。
本发明的诱导率是用茎段诱导不定芽的诱导率，达到70%，且通过不定丛芽的增殖，其增殖系数高达5.62。本发明的生根率和成活率均较高，分别达到了98.7%和94.2%。利用此方法可简单、高效的培育出大量的半枫荷组培苗，从而有效的保护和繁殖该物种，满足市场对半枫荷的需求，同时解除半枫荷的濒危状态，为今后更进一步保护和利用该物种奠定良好的基础。
附图说明
图1和图2，为半枫荷不定芽的诱导结果图；
图3和图4，为半枫荷不定芽的增殖结果图；
图5和图6，为半枫荷不定芽的生根结果图；
图7和图8，为半枫荷生根苗的移栽图。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件（例如参考J.萨姆布鲁克等著，黄培堂等译的《分子克隆实验指南》，第三版，科学出版社）或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例：半枫荷的组织培养
1、半枫荷的取材到诱导出芽
连续晴天一个礼拜后，于中午12~14点取材，以江西全南县天龙山优良母株种子繁殖起来的植株的当年生枝条为外植体，用洗洁精清洗并浸泡10min，后用流水冲洗30min, 置于操作台上，剪成带1-2个节间的茎段，75%乙醇处理25 s，0.1%升汞浸泡处理10 min，期间不断震荡，无菌水清洗6遍，接种于芽诱导培养基上，光照时间8~12 h，光照强度3000 ~5000lx，温度25~27℃，14d后，可诱导出2~3cm的腋芽，见附图1和2。诱导率为70%；
芽诱导培养基成分为：改良MS（配方见表1）+6-BA1.5~2.5mg/L +NAA0.2~0.4mg/L；
2、半枫荷组织培养的芽增殖与生根
将诱导出的不定丛芽转接至芽增殖培养基中，约7d后可见不定芽与培养基接触的地方冒出新的芽点，4周后统计其增殖系数为5.62%，叶片颜色正常，瓶苗生长状况良好，见附图3和4。将2~3cm长的不定芽转接至生根培养基中，光照时间8~12h，光照强度3000~5000 lx，温度25~27℃。5d后可见其茎段末端切口处冒出白色根原基，14d后长成2~3cm的根，见附图5和6。生根率98.7%；
芽增殖培养基成分为改良MS+6-BA0.4~0.8mg/L +NAA0.05~0.15mg/L）
生根培养基成分为1/2改良MS（配方见表2）+IBA0.4~0.8mg/L +NAA0.1~0.3mg/L）
3、半枫荷组织培养方法中的移栽至大田
将生根瓶苗转至移栽大棚进行炼苗，见附图7和8。7d后将其从瓶中小心取出，洗净根部培养基，用0.1%代森锰锌浸泡处理2~3 min，阴干，待植株枝干上的水分阴干的差不多时，移栽入事先已用0.1%高锰酸钾消毒的基质中(泥炭土：草炭：珍珠岩为9：6：1），移栽后做好田间温湿度管理，成活率可达94.2%。
本发明中的半枫荷取自于江西全南县天龙山优良母株种子，不限于此，其它地方来源的半枫荷也能达到该发明目的；
表1 改良MS
| 药品名称 | 用量（mg/L） |
| NH4NO3 | 340-660 |
| KNO3 | 1318-1722 |
| MgSO4·7H2O | 370 |
| KH2PO4 | 170 |
| CaCl2·2H2O | 440 |
| MnSO4·4H2O | 22.3 |
| ZnSO4·7H2O | 8.6 |
| H3BO3 | 6.2 |
| KI | 0.83 |
| Na2MoO4·2H2O | 0.25 |
| CuSO4·5H2O | 0.025 |
| CoCl2·6H2O | 0.025 |
| FeSO4·7H2O | 27.8 |
| Na2-EDTA·2H2O | 37.3 |
| 甘氨酸 | 2.0 |
| 盐酸硫胺素(维生素B1) | 0.1 |
| 盐酸吡哆醇(维生素B6) | 0.5 |
| ⅣB烟酸 | 0.5 |
| 肌醇 | 100 |
封口后按照常规方法灭菌；
表2 1/2改良MS
| 药品 | 用量（mg/L） |
| NH4NO3 | 170-330 |
| KNO3 | 659-861 |
| MgSO4·7H2O | 185 |
| KH2PO4 | 85 |
| CaCl2·2H2O | 220 |
| MnSO4·4H2O | 22.3 |
| ZnSO4·7H2O | 8.6 |
| H3BO3 | 6.2 |
| KI | 0.83 |
| Na2MoO4·2H2O | 0.25 |
| CuSO4·5H2O | 0.025 |
| CoCl2·6H2O | 0.025 |
| FeSO4·7H2O | 27.8 |
| Na2-EDTA·2H2O | 37.3 |
| 甘氨酸 | 2.0 |
| 盐酸硫胺素(维生素B1) | 0.1 |
| 盐酸吡哆醇(维生素B6) | 0.5 |
| ⅣB烟酸 | 0.5 |
| 肌醇 | 100 |
封口后按照常规方法灭菌。
Claims (4)
1.一种半枫荷离体组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
取材：取半枫荷的当年生枝条为外植体；
无菌材料的建立：对外植体进行消毒处理获得无菌材料；
芽诱导培养：将无菌材料接种于芽诱导培养基上，芽诱导培养条件下诱导培养出不定芽；
增殖培养：将诱导培养出的不定芽转接至芽增殖培养基中培养出新的不定芽；
生根培养：将新长出的2－3cm的不定芽转接至生根培养基中，使长出2－3cm的根；
移栽：将生根苗先移栽至大棚进行炼苗，再经过处理后移栽入田间；
所述取材为，合适时间取优良母株当年生枝条为外植体；所述合适时间为晴天一周后，于中午12~14点；
所述无菌材料的建立为：将外植体用洗洁精清洗并浸泡，再用流水冲洗, 置于操作台上，剪成带1-2个节间的茎段，75%乙醇处理，再用0.1%升汞浸泡处理，期间不断震荡，无菌水清洗；
所述芽诱导培养基为改良MS+6-BA1.5~2.5mg/L +NAA0.2~0.4mg/L，所述芽诱导培养条件为光照时间8 ~12 h，光照强度3000~5000 lx，温度25~27℃；
所述芽增殖培养基为改良MS+6-BA0.4~0.8mg/L +NAA0.01~0.15mg/L；
所述生根培养基为1/2改良MS+IBA0.4~0.8mg/L +NAA0.1~0.3mg/L；
所述改良MS培养基是将MS中NH4NO3含量调整为340~660 mg/L、KNO3含量调整为1318~1722 mg/L，培养基添加卡拉胶6.7 g/L，蔗糖30g/L，pH值5.8-6.0；
所述1/2改良MS为将改良MS中大量元素减半，其余组分含量不变；
所述移栽中，炼苗后将生根苗取出，洗净根部培养基，0.1%代森猛锌浸泡处理，阴干，待植株枝干上的水分阴干后，移栽入事先已用0.1%高锰酸钾消毒的基质中。
2.权利要求1所述的半枫荷离体组织培养方法，其特征在于，所述基质为泥炭土：草炭：珍珠岩为9：6：1。
3.一种半枫荷离体组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
取材：连续晴天一周后，于中午12~14点取材，以优良母株当年生枝条为外植体；
无菌材料的建立：将外植体用洗洁精清洗并浸泡10min，后用流水冲洗30min, 置于操作台上，剪成带1-2个节间的茎段，75%乙醇处理25 s，0.1%升汞浸泡处理10 min，期间不断震荡，无菌水清洗6遍，获得无菌材料；
芽诱导培养：将无菌材料接种于芽诱导培养基上，光照时间8－12 h，光照强度3000~5000 lx，温度25~27℃，14天后，可诱导出2~3cm的不定芽；所述芽诱导培养基为改良MS+6-BA1.5~2.5mg/L +NAA0.2~0.4mg/L；
增殖培养：将诱导出的不定芽转接至芽增殖培养基中，约7天后可见不定芽与培养基接触的地方冒出新的芽点，其中芽增殖培养基为改良MS+6-BA0.4~0.8mg/L +NAA0.01~0.15mg/L；
所述改良MS培养基是将MS中NH4NO3含量调整为340~660mg/L、KNO3含量调整为1318~1722 mg/L，培养基添加卡拉胶6.7 g/L，蔗糖30g/L，pH值5.8-6.0；
生根培养：将新长出的2－3cm的不定芽转接至生根培养基中，使长出2－3cm的根；将2~3cm长的不定芽转接至生根培养基中，5d后可见其茎段末端切口处冒出白色根原基，14天后长成2~3cm的根，其中生根培养基为1/2改良MS+IBA0.4－0.8mg/L +NAA0.1~0.3mg/L，所述1/2改良MS为将改良MS中大量元素减半，其余组分含量不变；
移栽：将生根苗先移栽至大棚进行炼苗，7天后将其从瓶中小心取出，洗净根部培养基，用0.1%代森锰锌浸泡处理2~3 min，阴干，待植株枝干上的水分阴干得差不多时，移栽入事先已用0.1%高锰酸钾消毒的基质中，移栽后做好田间温湿度管理。
4.权利要求3所述的半枫荷离体组织培养方法，其特征在于，所述基质为泥炭土：草炭：珍珠岩为9：6：1。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110211490 CN102301958B (zh) | 2011-07-27 | 2011-07-27 | 一种半枫荷离体组织培养方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110211490 CN102301958B (zh) | 2011-07-27 | 2011-07-27 | 一种半枫荷离体组织培养方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102301958A CN102301958A (zh) | 2012-01-04 |
| CN102301958B true CN102301958B (zh) | 2013-05-08 |
Family
ID=45375963
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201110211490 Expired - Fee Related CN102301958B (zh) | 2011-07-27 | 2011-07-27 | 一种半枫荷离体组织培养方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102301958B (zh) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102726295A (zh) * | 2012-06-30 | 2012-10-17 | 江苏汤氏园林有限公司 | 一种元宝枫的组织培养方法 |
| CN104206186B (zh) * | 2014-08-25 | 2016-05-04 | 从江神瑶保健品有限公司 | 一种枫荷桂的嫁接方法 |
| CN106171986B (zh) * | 2016-07-12 | 2018-03-30 | 玉林师范学院 | 一种半枫荷种子萌发途径的组培快繁方法 |
| CN107494264B (zh) * | 2017-08-31 | 2020-01-14 | 地缘（厦门）生物科技有限公司 | 一种半枫荷组培苗瓶外生根的方法 |
| CN119256986B (zh) * | 2024-11-25 | 2025-11-25 | 康珠森科组培实验室(贵州)有限公司 | 一种半枫荷的组织培养方法 |
-
2011
- 2011-07-27 CN CN 201110211490 patent/CN102301958B/zh not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102301958A (zh) | 2012-01-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102405842B (zh) | 一种开放式培养甘蔗脱毒种苗的方法 | |
| CN103493677B (zh) | 一种芍药嫩茎扦插繁殖的方法 | |
| CN103250645B (zh) | 艾纳香的快速繁殖与移栽方法 | |
| CN101258836B (zh) | 窿缘桉组织培养快速繁殖方法 | |
| CN102845313A (zh) | 狗枣猕猴桃的离体快速繁殖方法 | |
| CN109258460A (zh) | 微茎尖培养结合热处理获得增城蜜菊脱毒苗的培育方法 | |
| CN102301958B (zh) | 一种半枫荷离体组织培养方法 | |
| CN103858637B (zh) | 一种发财树回收再生培育方法 | |
| CN106417011A (zh) | 野生白芨组织培养快速繁殖方法 | |
| CN103688865A (zh) | 诱导培养基、及提高蝴蝶兰花梗成活率的方法 | |
| CN103348920A (zh) | 一种奇楠沉香优质种苗快速繁殖方法 | |
| CN105594593A (zh) | 三叶青侧枝诱导的种苗培育方法 | |
| CN104542281A (zh) | 地中海荚蒾的组培繁殖方法 | |
| CN105941154A (zh) | 一种冬枣优质种苗综合繁育方法 | |
| CN102613089A (zh) | 一种二十年生木荷大树高效离体繁殖方法 | |
| CN106973796A (zh) | 一种毛叶山桐子的组织培养育苗方法 | |
| CN103718969A (zh) | 一种诗琳通含笑离体培养再生植株方法 | |
| CN106613079A (zh) | 一种半夏种茎生产方法 | |
| CN104871970A (zh) | 一种珙桐的组培快繁方法 | |
| CN106489737B (zh) | 一种大花月季组织培养的培养基及方法 | |
| CN107711514A (zh) | 一种旱地木槿紫色花系优良单株组培快繁方法 | |
| KR101439618B1 (ko) | 상록성 진달래의 조직배양에 의한 대량 증식방법 | |
| CN103535279B (zh) | 一种龙爪柳未生根组培苗的生根方法 | |
| CN107667865B (zh) | 一种岷江蓝雪花继代快繁方法 | |
| CN107410033B (zh) | 民族香料植物麻根的快速繁殖方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20201231 Address after: 224434 No.8 West 2nd Road, Wutan Industrial Park, Funing County, Yancheng City, Jiangsu Province (k) Patentee after: Yancheng ouyaju Wood Industry Co.,Ltd. Address before: Room 128, Institute of Subtropical Botany, 800 Jiahe Road, Huli District, Xiamen City, Fujian Province, 361000 Patentee before: Geo (Xiamen) Biotechnology Co.,Ltd. |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20130508 |