CN102250127A

CN102250127A - 两个氨基酸修饰的四氢咔啉衍生物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN102250127A
Application number: CN2010101770513A
Authority: CN
Inventors: 彭师奇; 赵明; 李春钰
Original assignee: Capital Medical University
Current assignee: Capital Medical University
Priority date: 2010-05-19
Filing date: 2010-05-19
Publication date: 2011-11-23
Anticipated expiration: 2030-05-19
Also published as: CN102250127B

Abstract

本发明公开了两个氨基酸修饰的四氢咔啉衍生物及其制备方法和应用。本发明通过将L-色氨酸甲酯与1，1，3，3-四甲氧基丙烷进行微波反应，再将所得产物进行氨基酸的修饰，得到一系列(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸衍生物及其中间体，并对这些衍生物进行了体外抗血小板聚集活性和体内抗血栓活性的评价。本发明方法简单，所用原料易得、安全、廉价，所得产物具有抗血小板聚集活性和抗血栓活性，预示了(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸作为抗血栓剂的临床应用前景。

Description

两个氨基酸修饰的四氢咔啉衍生物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种抗血栓药物，特别涉及(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸衍生物及其制备方法和应用，属于生物医药领域。

背景技术

血栓性疾病是一种常见的心脑血管病，常表现为心肌梗死、缺血性脑梗死、静脉血栓栓塞。每年每千人中有1～3人发生不同形式的血栓性疾病，严重影响人类健康。目前临床上常用的抗栓和溶栓药物都存在着这样那样的缺点，如出血、胃黏膜损伤、肝损伤等毒副作用，寻找更加安全有效、毒副作用小的抗栓药物是药物研究者的目标之一。

一般认为血栓的形成与多种因素导致的血小板聚集，粘附和释放有关。抗血小板药物是人们研究的热点。(3S)-1，2，3，4-四氢咔啉啉-3-羧酸具有抗血小板活性已被人们所认知，但差的水溶性和脂溶性使得生物利用度很低，所以必须进行结构改造。发明人了解氨基酸修饰的四氢咔啉可改善其水溶性，提高生物利用度。已知，把两个氨基酸修饰的四氢咔啉拼合可获得更好活性的先导化合物。基于以上理论，本发明提出了(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸衍生物及其制备和应用，并对这些衍生物进行体外抗血小板聚集活性和体内抗血栓活性的研究。

发明内容

本发明的目的在于提供一系列(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸衍生物，并对这些衍生物进行体外抗血小板聚集活性和体内抗血栓活性的研究，从而解决现有技术中存在的缺陷。

本发明是通过以下技术方案来解决这些缺陷的：

一种以下结构的化合物

一种以下通式的化合物

其中，AA为L-丙氨酰基、L-缬氨酰基、L-亮氨酰基、L-异亮氨酰基、甘氨酰基、L-苯丙氨酰基、L-酪氨酰基、L-色氨酰基、L-丝氨酰基、L-苏氨酰基、L-赖氨酰基或L-蛋氨酰基。

一种以下通式的化合物

本发明的另一目的在于提供一种制备(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-羧酸甲酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-羧酸甲酯(2)的方法，具体包括如下步骤：

在L-色氨酸甲酯的甲醇/冰醋酸溶液中，加入1，1，3，3-四甲氧基丙烷，进行微波反应，得到(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-羧酸甲酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-羧酸甲酯(2)。

本发明的另一目的在于提供一种制备制备(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-羧酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-羧酸(3)的方法，具体包括如下步骤：

将1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-羧酸甲酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-羧酸甲酯(2)溶于四氢呋喃，冰浴下加入2N NaOH水溶液进行皂化反应，得到(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-羧酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-羧酸(3)。

本发明的另一目的在于提供一种制备(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸苄酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸苄酯(4a-1)的方法，即将氨基酸苄酯引入(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-羧酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-羧酸(3)，具体包括如下步骤：

1)冰浴下，将(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-羧酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-羧酸(3)溶于无水N，N-二甲基甲酰胺(DMF)，加入二环己基羰二亚胺(DCC)和N-羟基苯并三氮唑(HOBt)，得到反应液1；

2)将对甲苯磺酸氨基酸苄酯溶于无水四氢呋喃中，用N-甲基吗啉(NMM)调节pH至7-8，再将所得混合液加入反应液1内，并用NMM调节pH至7-8，撤去冰浴，避光室温先进行偶联反应。

本发明的另一目的在于提供一种制备(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸(5a-1)的方法，包括如下步骤：将(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸苄酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸苄酯(4a-1)溶于四氢呋喃，并加如适量甲醇，在冰浴下用NaOH水溶液调节pH至强碱性，接着在冰浴下进行皂化反应。

本发明的另一目的在于提供(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-羧酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-羧酸(3)作为制备治疗血栓性疾病药物的应用。

本发明的另一目的在于提供(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸(5a-l)作为制备治疗血栓性疾病药物的应用。

本发明方法的合成路线如图1所示。

其中，i-v是每个步骤的反应条件。(i)二氯亚砜/甲醇；(ii)1，1，3，3-四甲氧基丙烷，冰醋酸/甲醇；(iii)NaOH水溶液(2mol/L)，THF；(iv)DCC/HOBt，NMM，DMF，氨基酸苄酯；(v)NaOH水溶液(2mol/L)，THF。

5a中AA为L-丙氨酰基；5b中AA为L-缬氨酰基；5c中AA为L-亮氨酰基；5d中AA为L-异亮氨酰基；5e中AA为甘氨酰基；5f中AA为L-苯丙氨酰基；5g中AA为L-酪氨酰基；5h中AA为L-色氨酰基；5i中AA为L-丝氨酰基；5j中AA为L-苏氨酰基；5k中AA为L-赖氨酰基；5l中AA为L-蛋氨酰基。

本发明通过将L-色氨酸甲酯与1，1，3，3-四甲氧基丙烷进行微波反应，再将所得产物进行氨基酸的修饰，得到一系列(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸衍生物及其中间体，并对这些衍生物进行了体外抗血小板聚集活性和体内抗血栓活性的评价。本发明方法简单，所用原料易得、安全、廉价，所得产物具有抗血小板聚集活性和抗血栓活性。

附图说明

图1为本发明方法的合成路线。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明，应该理解的是，这些实施例仅用于例证的目的，决不限制本发明的保护范围。

实施例1制备L-色氨酸甲酯盐酸盐(1)

50ml无水甲醇在冰浴下滴加3.75ml(50mmol)氯化亚砜，30min内滴加完毕后，分批加入9.20g(42mmol)L-色氨酸，室温搅拌24h，利用TLC(CHCl₃∶MeOH＝2∶3)监测至原料消失终止反应。反应结束后，用水泵抽走未反应完的氯化亚砜SOCl₂和HCl，用乙醚反复研磨得到无色固体，将所得无色固体用甲醇-乙醚重结晶，得到L-色氨酸甲酯盐酸盐为无色固体。收率在85-99％之间。ESI-MS(m/e)219[M+H]⁺，熔点、旋光等物理常数与已报道的数据一致。

实施例2制备(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-羧酸甲酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-羧酸甲酯(2)

微波反应，共六个反应罐，每个反应罐中加入0.2ml(1.2mmol)1，1，3，3-四甲氧基丙烷，10ml冰醋酸活化10分钟。将1.00g(3.92mmol)L-色氨酸甲酯盐酸盐(1)溶于5ml甲醇中，再将所得甲醇溶液加入上述每个反应罐中，微波5分钟后升温到80℃，恒温反应3小时，将反应液倒入表面皿中，吹干溶剂，用甲醇溶解产物转移到茄瓶中，加饱和碳酸氢钠水溶液调节pH 7-8，减压回收溶剂甲醇，残余物中加入50ml二氯甲烷和50ml饱和碳酸氢钠水溶液，分液后水层用二氯甲烷萃取三次，合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩至干，残余物用硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚，5/1)纯化得515mg(14.9％)目标化合物，为无色固体，通过二维氢谱确定其构型。Mp：237-239℃；[α]_D ²⁵＝-72.5(c＝0.65，丙酮/DMF，2∶1v/v)；IR(KBr)：3373，3152，2940，2851，1738，1697，1449，1261，1211，746，590cm^-1；ESI-MS(m/e)473[M+H]⁺；¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.00(s，1H)，10.88(s，1H)，7.40(dd，J＝3.4Hz，J＝7.7Hz，2H)，7.33(dd，J＝4.2Hz，J＝8.0Hz，2H)，7.05(t，J＝7.9Hz，2H)，6.95-6.98(m，2H)，4.40(t，J＝5.6Hz，1H)，4.35(s，1H)，4.01(t，J＝5.8Hz，1H)，3.78-3.81(m，1H)，3.76(s，3H)，3.53(s，3H)，3.35(s，1H)，2.94-3.00(m，3H)，2.71-2.82(m，2H)，2.42-2.47(m，1H)，2.18-2.24(m，1H)；¹³C-NMR(125MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝174.06，173.68，136.68，136.48，136.38，136.18，127.20(2C)，121.09(2C)，118.91，118.78，117.93(2C)，111.52(2C)，106.61，105.86，56.48，52.49，52.30，52.04，51.98，49.06，48.78，25.76，25.05.

实施例3制备(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-羧酸-1-基-甲基]-四氢β- 咔啉-3-羧酸(3)

在100ml茄瓶中加入472mg(1mmol)(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-羧酸甲酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-羧酸甲酯(2)，加2ml四氢呋喃溶解，再加1ml甲醇。冰浴冷却下加入2NNaOH水溶液调PH为14，冰浴下反应2小时。TLC(石油醚∶丙酮＝2∶1)监测原料斑点消失。反应完成后，缓慢加入1N盐酸调节反应液pH至7-8，减压浓缩，残留物用蒸馏水溶解，加1N盐酸调pH值为2，大量无色固体生成，过滤，滤饼用蒸馏水淋洗，得到400mg(90％)目标化合物，为淡粉色固体。Mp：221-223℃；[α]_D ²⁵＝-154.8(c＝0.7，DMF)；IR(KBr)：3294，3059，2941，2853，1713，1626，1450，1396，1331，1271，743cm^-1；ESI-MS(m/e)443[M-H]^-； ¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.46(s，1H)，11.39(s，1H)，7.36-7.49(m，4H)，6.88-7.13(m，4H)，4.94(s，1H)，4.84(s，1H)，4.19(d，J＝5.1Hz，1H)，4.03(t，J＝6.9Hz，1H)，3.19-3.25(m，2H)，2.87-2.99(m，3H)，2.57(s，1H)；¹³C-NMR(125MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝172.99，172.88，136.82，136.73，133.04，132.23，126.67(2C)，121.92，121.87，119.34，119.25，118.44(2C)，111.93(2C)，107.20，106.29，56.98，52.32(2C)，49.52，36.21，24.13，24.04。

实施例4制备(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸苄酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸苄酯(4a-l)

冰浴下，在100ml茄瓶中加入400mg(0.9mmol)(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-羧酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-羧酸(3)，用无水DMF溶解，加入292mg(2.16mmol)HOBt，加入445mg(2.16mmol)DCC。将2.16mmol对甲苯磺酸氨基酸苄酯溶于无水四氢呋喃中，用NMM调PH至7-8，将混合液加入反应瓶内。再用NMM调PH至7-8，撤去冰浴，避光室温反应8小时。利用TLC(CHCl₃∶MeOH＝20∶1)监测原料斑点消失，将反应液倒入表面皿吹干，用乙酸乙酯溶解，过滤，滤液用饱和碳酸氢钠溶液洗三次，再用饱和氯化钠溶液洗三次，酯层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩至干。残余物用甲醇溶解，静置，析出无色固体，滤出固体并用乙醚磨洗，得无色固体。

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-丙氨酸苄酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-丙氨酸苄酯(4a)

产量：471mg(68.3％)。Mp：119-121℃；[α]_D ²⁵＝-121.2(c＝0.5，丙酮)；IR(KBr)：3314，2936，2841，1740，1661，1516，1452，1323，1277，1206，1153，741，698cm^-1； ESI-MS(m/e)767[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.15(s，1H)，10.77(s，1H)，8.45(d，J＝7.2Hz，1H)，8.23(d，J＝7.2Hz，1H)，7.29-7.43(m，14H)，6.93-7.05(m，4H)，5.19(s，2H)，5.12(s，2H)，4.50(t，J＝7.2Hz，1H)，4.30-4.40(m，3H)，3.75(s，1H)，3.64(d，J＝7.2Hz，1H)，2.85-2.97(m，4H)，2.58-2.73(m，2H)，1.39(d，J＝6.4Hz，3H)，1.25(d，J＝6.4Hz，3H)；¹³C-NMR(125MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝173.51，173.28，172.85，172.83，137.62，136.57，136.50(2C)，136.47，136.17，128.90(2C)，128.86(2C)，128.52，128.45，128.28(2C)，128.25，128.20，127.37，127.32，121.00，120.90，118.90，118.66，117.77，117.73，111.67，111.59，107.41，106.41，66.47，66.36，57.02，52.75，51.74，49.08，48.39，48.12，48.07，26.26，24.93，17.42，17.31.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-缬氨酸苄酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-缬氨酸苄酯(4b)

产量：296mg(36.0％)。Mp：110-113℃；[α]_D ²⁵＝-100.1(c＝0.5，丙酮)；IR(KBr)：3300，2965，1738，1657，1516，1454，1267，1194，1146，1009，741，698cm^-1；ESI-MS(m/e)824[M+H]⁺，846[M+Na]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.11(s，1H)，10.77(s，1H)，8.28(d，J＝8.1Hz，1H)，8.00(d，J＝8.1Hz，1H)，7.28-7.45(m，14H)，6.93-7.06(m，4H)，5.09-5.26(m，J＝6.3Hz，J＝18.3Hz，4H)，4.39(t，J＝6.9Hz，2H)，4.37(s，1H)，4.20(t，J＝7.2Hz，1H)，3.82(s，1H)，3.74(d，J＝9Hz，1H)，2.93(t，J＝15.6Hz，4H)，2.58-2.75(m，2H)，2.09-2.18(m，2H)，1.08-1.21(m，2H)，0.94(d，J＝6.6Hz，6H)，0.75(dd，J＝6.6Hz，J＝14.4Hz，6H)；¹³C-NMR(75MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝174.02，173.58，171.88，171.74，137.57，136.53，136.48，136.38，136.33，136.15，128.88(4C)，128.59(2C)，128.52(4C)，127.36，127.32，120.99，120.87，118.86，118.63，117.74，117.70，111.56(2C)，107.51，106.41，66.49，66.40，57.94，57.77，56.99(2C)，52.98，51.25，47.85，30.46(2C)，26.34，25.08，19.52，19.33，18.79，18.65.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-亮氨酸苄酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-亮氨酸苄酯(4c)

产量：888mg(64％)。Mp：110-111℃；[α]_D ²⁵＝-90.38(c＝0.5，丙酮)；IR(KBr)：3300，2957，2934，2872，1740，1659，1516，1454，1325，1275，1190，1155，1009，743，698cm^-1；ESI-MS(m/e)851[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.03(s，1H)，10.78(s，1H)，8.37(d，J＝7.8Hz，1H)，8.16(d，J＝7.8Hz，1H)，7.29-7.43(m， 14H)，6.93-7.05(m，4H)，5.18(s，2H)，5.11(s，2H)，4.52(q，J＝5.0Hz，1H)，4.34-4.39(m，3H)，3.75(s，1H)，3.65(d，J＝3.9Hz，1H)，2.88-2.98(m，4H)，2.55-2.70(m，2H)，1.50-1.70(m，6H)，0.91(t，J＝6.9Hz，6H)，0.82(t，J＝5.7Hz，6H)；¹³C-NMR(75MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝173.83，173.59，172.82，172.71，137.70，136.69，136.49(2C)，136.43，136.15，128.91(2C)，128.85(2C)，128.56，128.47，128.38(2C)，128.29(2C)，127.35，127.29，120.99，120.90，118.87，118.66，117.79，117.71，111.57(2C)，107.33，106.42，66.50，66.37，56.96(2C)，52.76，51.58，50.79(2C)，48.30，26.41，25.19，24.75，24.69，23.25，23.08，21.94，21.84.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-异亮氨酸苄酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-异亮氨酸苄酯(4d)

产量：550mg(53％)。Mp：102-103℃；[α]_D ²⁵＝-84.59(c＝0.55，丙酮)；IR(KBr)：3314，2965，2932，2878，1740，1657，1516，1456，1323，1261，1192，1148，1007，741，698cm^-1；ESI-MS(m/e)851[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.04(s，1H)，10.77(s，1H)，8.31(d，J＝8.1Hz，1H)，8.04(d，J＝7.8Hz，1H)，7.28-7.44(m，14H)，6.93-7.06(m，4H)，5.08-5.26(m，4H)，4.44(t，J＝6.9Hz，1H)，4.26-4.35(m，3H)，3.81(s，1H)，3.72(s，1H)，2.86-2.97(m，4H)，2.57-2.71(m，2H)，2.15(t，J＝7.2Hz，1H)，1.89(s，1H)，1.75(s，1H)，1.42-1.48(m，1H)，1.23-1.34(m，2H)，1.07-1.15(m，1H)，0.74-0.92(m，12H)；¹³C-NMR(75MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝173.91，173.59，171.87，171.71，137.70，137.65，136.60，136.49(2C)，136.32，136.15，128.88(4C)，128.60(2C)，128.54(4C)，127.30(2C)，120.89(2C)，118.85，118.65，117.78(2C)，111.67，111.54，107.47，106.45，66.47，66.38，56.97，56.83，56.64，52.83，51.25，49.07，47.91，36.86(2C)，26.33(2C)，25.28(2C)，15.97，15.85，11.62，11.54.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰甘氨酸苄酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰甘氨酸苄酯(4e)

产量：296mg(33.7％)。Mp：85-86℃；[α]_D ²⁵＝-38.97(c＝0.55，CH₃OH)；IR(KBr)：3300，3049，2932，1744，1665，1526，1454，1194，997，745，698cm^-1；ESI-MS(m/e)739[M+H]⁺；¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.29(s，1H)，11.26(s，1H)，8.86(s，1H)，8.69(s，1H)，7.31-7.46(m，14H)，7.07(t，J＝6.4Hz， 2H)，7.07(dd，J＝6.0Hz，J＝15.0Hz，2H)，5.18(s，2H)，5.14(s，2H)，4.70(s，1H)，4.59(s，1H)，3.93-4.10(m，6H)，3.18(s，2H)，3.05(d，J＝6.3Hz，2H)，2.71-2.82(m，2H)；¹³C-NMR(125MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝173.06，172.73，170.07(2C)，137.66，136.64，136.37(4C)，128.91(2C)，128.88(2C)，128.57，128.51，128.44(2C)，128.39(2C)，127.02，126.86，121.51，121.37，120.36，120.12，118.01(2C)，111.71，111.64，106.44(2C)，66.44，66.32，57.00(2C)，53.49，52.41(2C)，50.67，41.30，41.25，21.98(2C).

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-苯丙氨酸苄酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-苯丙氨酸苄酯(4f)

产量：160mg(29.6％)。Mp：109-110℃；[α]_D ²⁵＝-94.59(c＝0.45，丙酮)；IR(KBr)：3310，3061，3030，2928，2843，1738，1665，1512，1499，1454，1325，1275，1192，1009，741，698cm^-1；ESI-MS(m/e)920[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝10.98(s，1H)，10.75(s，1H)，8.41(d，J＝7.8Hz，1H)，8.22(d，J＝7.5Hz，1H)，7.13-7.36(m，24H)，6.93-7.05(m，4H)，5.15(s，2H)，5.05(d，J＝3.6Hz，2H)，4.69(q，J＝7.8Hz，1H)，4.52(q，J＝7.2Hz，1H)，4.31(s，2H)，3.73-3.74(m，1H)，3.59(s，1H)，2.83-3.19(m，8H)，2.58-2.73(m，2H)，2.41-2.46(m，1H)，2.08-2.14(m，1H)；¹³C-NMR(75MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝173.65，173.40，171.79，171.66，137.58，137.49，136.69，136.50，136.24，136.20，136.18，129.63(2C)，129.59(2C)，128.85(2C)，128.78(2C)，128.76(2C)，128.67(2C)，128.53(2C)，128.44(2C)，128.40(2C)，128.33，127.34，127.28，127.05，126.94，121.01，120.92，118.88，118.68，117.78，117.70，111.61，111.57，107.38，106.38，66.60，66.47，57.01，54.05(2C)，52.85，51.34，49.07，48.11，37.13(2C)，26.30，25.04.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-酪氨酸苄酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-酪氨酸苄酯(4g)

产量：169mg(17.8％)。Mp：137-138℃；[α]_D ²⁵＝-75.20(c＝0.5，DMF)；IR(KBr)：3387，3323，3267，3061，2938，1736，1730，1665，1649，1516，1454，1350，1217，1192，1119，743，696cm^-1；ESI-MS(m/e)952[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.00(s，1H)，10.76(s，1H)，9.25(s，1H)，9.21(s，1H)，8.36(d，J＝7.5Hz，1H)，8.17(d，J＝7.2Hz，1H)，7.23-7.37(m，14H)，6.93-7.06(m，8H)，6.64 (dd，J＝8.4Hz，J＝11.2Hz，4H)，5.14(s，2H)，5.04(s，2H)，4.61(q，J＝7.8Hz，1H)，4.44(q，J＝7.2Hz，1H)，4.33(s，2H)，3.73-3.75(m，1H)，3.55-3.64(m，1H)，2.74-3.05(m，8H)，2.55-2.66(m，2H)，2.45(s，1H)，2.07-2.14(m，1H)；¹³C-NMR(75MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝173.66，173.41，171.95，171.82，156.57，156.49，137.67，136.66，136.47(2C)，136.27，136.19，130.60(2C)，130.56(2C)，128.85(2C)，128.78(2C)，128.52(2C)，128.41(2C)，128.32，127.51，127.44，127.33，127.28，121.00(2C)，118.87，118.69，117.79(2C)，115.58(4C)，111.56(2C)，107.41，106.41，66.52，66.38，56.99，54.44(2C)，52.80，51.36，49.07，48.14，36.46(2C)，26.30，25.17.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-色氨酸苄酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-色氨酸苄酯(4h)

产量：500mg(48.2％)。Mp：142-143℃；[α]_D ²⁵＝-59.58(c＝0.5，丙酮)；IR(KBr)：3397，3319，3281，3057，2926，2843，1732，1661，1510，1456，1341，1211，1188，1009，741，696cm^-1；ESI-MS(m/e)998[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.02(s，1H)，10.92(s，1H)，10.86(s，1H)，10.78(s，1H)，8.45(d，J＝7.2Hz，1H)，8.29(d，J＝7.2Hz，1H)，7.52(q，J＝7.8Hz，2H)，7.12-7.42(m，18H)，6.96-7.09(m，8H)，5.11(s，2H)，4.95-5.06(m，2H)，4.76(dd，J＝7.2Hz，J＝14.1Hz，1H)，4.60(dd，J＝7.2Hz，J＝14.1Hz，1H)，4.33-4.35(m，2H)，3.76-3.81(m，1H)，3.63-3.65(m，1H)，3.05-3.27(m，5H)，2.93(t，J＝12.0Hz，3H)，2.63(t，J＝9.9Hz，2H)；¹³C-NMR(75MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝173.54，173.42，172.19，172.09，136.67，136.63，136.51(2C)，136.27，136.19，128.82(2C)，128.75(2C)，128.47(2C)，128.37(2C)，128.28(2C)，128.19(2C)，127.61(2C)，127.30，127.27，124.36，124.26，121.48，121.44，121.05(2C)，118.96(2C)，118.90，118.72(2C)，118.52，117.78(2C)，111.95，111.90，111.65，111.57，109.74(2C)，107.44，106.41，66.55，66.43，57.06，53.68，53.61，52.70，51.48，48.20，48.00，34.96，33.82，27.60，27.55.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-丝氨酸苄酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-丝氨酸苄酯(4i)

产量：358mg(38.3％)。Mp：179-181℃；[α]_D ²⁵＝-61.90(c＝0.55，丙酮)；IR(KBr)：3298，3059，2934，1742，1657，1518，1454，1287，1204，741，696cm^-1； ESI-MS(m/e)801[M+H]⁺；¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝10.97(s，1H)，10.75(s，1H)，8.38(d，J＝7.6Hz，1H)，8.24(d，J＝7.6Hz，1H)，7.27-7.44(m，14H)，7.05(t，J＝7.7Hz，2H)，6.96(t，J＝8.1Hz，2H)，5.13-5.24(m，6H)，4.58-4.62(m，1H)，4.41-4.47(m，3H)，3.76-3.89(m，4H)，3.70-3.74(m，2H)，2.93-3.01(m，3H)，2.80(s，1H)，2.64-2.70(m，2H)；¹³C-NMR(125MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝173.76，173.66，170.96，170.88，137.71，136.85，136.47(2C)，136.44，136.27，128.88(2C)，128.84(2C)，128.47，128.40，128.20(2C)，128.10(2C)，127.35(2C)，121.05，120.98，118.89，118.74，117.81(2C)，111.67，111.54，107.55，106.64，66.53，66.43，61.78，61.72，57.16，55.12，55.10，52.70，51.38，49.09，48.18，26.18，25.34.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-苏氨酸苄酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-苏氨酸苄酯(4j)

产量：273mg(32.7％)。Mp：178-180℃；[α]_D ²⁵＝-56.34(c＝0.65，丙酮)；IR(KBr)：3379，3291，3061，2930，2849，1738，1647，1526，1456，1281，1190，1152，1117，1007，743，700cm^-1；ESI-MS(m/e)828[M+H]⁺，850[M+Na]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.02(s，1H)，10.91(s，1H)，8.36(d，J＝8.4Hz，1H)，8.16(d，J＝8.1Hz，1H)，7.24-7.44(m，14H)，6.94-7.06(m，4H)，5.10-5.26(m，6H)，4.47-4.49(m，2H)，4.34-4.38(m，2H)，4.17-4.27(m，2H)，3.88(s，1H)，3.78(s，1H)，3.12(s，1H)，3.00(d，J＝15.0Hz，2H)，2.58(s，1H)，2.62-2.72(m，3H)，1.17-1.20(m，3H)，1.09(d，J＝6.3Hz，3H)；¹³C-NMR(75MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝174.08，173.97，171.09，171.00，137.66，136.97，136.48(2C)，136.43，136.25，128.86(2C)，128.83(2C)，128.44(2C)，128.37(2C)，128.25，128.11，127.33(2C)，120.94(2C)，118.80，118.67，117.79(2C)，111.71，111.57，107.42，106.72，67.06，66.91，66.47，66.38，60.23，58.46，58.38，57.29，52.89，51.54，48.38，26.20，25.38，20.77，20.72.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-Boc-赖氨酸苄酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-Boc-赖氨酸苄酯(4k)

产量：243mg(22.3％)。Mp：136-137℃；[α]_D ²⁵＝-67.63(c＝0.65，丙酮)；IR(KBr)：3343，2934，1738，1682，1659，1173，737，698cm^-1；ESI-MS(m/e)1082[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.07(s，1H)，10.78(s，1H)，8.37(d，J＝7.5Hz，1H)，8.15(d，J＝7.5Hz，1H)，7.28-7.44(m，14H)，6.92-7.05(m，4H)， 6.78(t，J＝5.4Hz，1H)，6.72(t，J＝5.4Hz，1H)，5.12-5.19(m，4H)，4.24-4.46(m，4H)，3.77(s，1H)，3.66(s，1H)，2.87-2.97(m，8H)，2.62(q，J＝13.5Hz，2H)，1.56-1.82(m，4H)，1.23-1.36(m，26H)；¹³C-NMR(75MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝173.86，173.60，172.42，172.34，156.02(2C)，137.70，136.60，136.51，136.45，136.42，136.20，128.88(2C)，128.84(2C)，128.53，128.45，128.42，128.36，128.28(2C)，127.36，127.30，120.99，120.88，118.86，118.65，117.76(2C)，111.65，111.55，107.41，106.43，77.81(2C)，66.47(2C)，66.35(2C)，57.02(2C)，52.78，52.46，51.46，49.07，48.19，31.08，30.99，29.59(2C)，28.72(6C)，26.43，25.30，23.22，23.11.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-蛋氨酸苄酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-蛋氨酸苄酯(4l)

产量：500mg(64.7％)。Mp：116-118℃；[α]_D ²⁵＝-85.80(c＝0.55，丙酮)；IR(KBr)：3304，3055，2916，2845，1738，1651，1539，1454，1213，1175，741，698cm^-1；ESI-MS(m/e)888[M+H]⁺；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.08(s，1H)，10.77(s，1H)，8.43(d，J＝7.5Hz，1H)，8.19(d，J＝7.8Hz，1H)，7.29-7.44(m，14H)，6.93-7.06(m，4H)，5.20(s，2H)，5.12(s，2H)，4.63(q，J＝4.5Hz，1H)，4.48(q，J＝5.4Hz，1H)，4.39(s，1H)，4.31(s，1H)，3.77(s，1H)，3.65-3.68(m，1H)，2.87-2.99(m，4H)，2.56-2.73(m，4H)，2.37(t，J＝7.2Hz，2H)，1.84-2.18(m，10H)； ¹³C-NMR(75MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝173.95，173.65，172.12，172.04，137.62，136.59，136.51，136.40，136.37，136.16，128.91(2C)，128.86(2C)，128.59，128.50，128.43(2C)，128.33(2C)，127.35，127.30，121.02，120.90，118.89，118.66，117.73(2C)，111.66(2C)，107.36，106.40，66.65，66.52，57.00(2C)，52.82，51.64，51.45，51.31，48.35，30.96，30.83，30.06，29.96，26.39(2C)，15.01，14.99.

实施例5制备(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸(5a-l)

在50ml茄瓶中加入0.12mmol(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸苄酯-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸苄酯(4a-l)，加2ml四氢呋喃溶解，再加1ml甲醇。冰浴冷却下加入2N NaOH水溶液调PH为14，冰浴下反应两小时。利用TLC(CHCl₃∶MeOH＝3∶1)监测原料斑点消失。反应结束后，缓慢加入1N盐酸调节反应液pH至7-8，减压浓缩，残留物用蒸馏水溶解，溶液放置析出无色固体，过滤，将所得滤饼用蒸馏水淋洗，得到淡粉色固状目标化合物。

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-丙氨酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-丙氨酸(5a)

产量：21mg(68％)。Mp：228-229℃；[α]_D ²⁵＝-91.0(c＝0.50，CH₃OH)；IR(KBr)：3269，3235，2934，2851，1722，1668，1452，1325，1224，1155，745，667cm^-1；ESI-MS(m/e)585[M-H]^-；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.17(s，1H)，11.15(s，1H)，8.62(d，J＝6.9Hz，1H)，8.48(d，J＝6.6Hz，1H)，7.45(d，J＝7.5Hz，2H)，7.37(t，J＝8.1Hz，2H)，7.10(t，J＝7.5Hz，2H)，7.01(t，J＝7.5Hz，2H)，4.78(d，J＝7.2Hz，1H)，4.70(s，1H)，4.37(t，J＝7.5Hz，1H)，4.28(t，J＝7.2Hz，1H)，4.00-4.09(m，2H)，3.11-3.25(m，2H)，2.75-2.91(m，2H)，2.12-2.40(m，2H)，1.40(d，J＝7.2Hz，3H)，1.35(d，J＝7.5Hz，3H)；¹³C-NMR(125MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝174.34，174.24，170.85，170.59，136.75(2C)，136.51(2C)，126.88，126.71，121.87(2C)，119.47，119.24，118.19(2C)，111.89，111.80，106.63，106.13，60.22，56.78，53.59，51.68，50.55，48.41，48.19，24.56，24.24，17.71，17.60.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-缬氨酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-缬氨酸(5b)

产量：71mg(83％)。Mp：188-189℃；[α]_D ²⁵＝-57.9(c＝0.50，CH₃OH)；IR(KBr)：3383，2967，2933，2882，1670，1533，1460，1398，1327，1221，1155，746cm^-1；ESI-MS(m/e)641[M-H]^-；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.19(s，1H)，11.07(s，1H)，8.39(d，J＝7.8Hz，1H)，8.48(d，J＝8.4Hz，1H)，7.31-7.46(m，4H)，7.09(t，J＝6.9Hz，2H)，7.00(t，J＝6.6Hz，2H)，4.71(s，1H)，4.63(s，1H)，4.29(d，J＝5.4Hz，1H)，4.19(d，J＝5.1Hz，1H)，4.00-4.08(m，2H)，3.09-3.20(m，2H)，2.73-2.84(m，3H)，2.34-2.38(m，1H)，2.07-2.19(m，2H)，0.97(d，J＝6.0Hz，6H)，0.90-0.92(m，6H)；¹³C-NMR(125MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝173.20，173.16，171.82，171.71，136.43，136.28，128.49，127.08，126.88，126.80(2C)，121.65，121.59，119.31，119.09，118.08(2C)，111.78，106.97，106.06，67.49，63.27，57.83，57.78，56.75，52.07，49.04，30.89，30.37，19.69，19.53，18.71，18.62.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-亮氨酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-亮氨酸(5c)

产量：67mg(85％)。Mp：226-228℃；[α]_D ²⁵＝-39.2(c＝0.70，CH₃OH)；IR(KBr)：3379，3277，2957，2934，2872，1655，1595，1526，1454，1400，1337，745cm^-1；ESI-MS(m/e)671[M+H]⁺；¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.06(s，1H)，10.91(s，1H)，8.29(s，1H)，8.10(s，1H)，7.42(d，J＝5.5Hz，2H)，7.32-7.38(m，2H)，6.98-7.05(m，4H)，4.47-4.51(m，2H)，4.41(d，J＝5.4Hz，1H)，4.28(d，J＝6.4Hz，1H)，3，87(s，1H)，3.77(d，J＝6.3Hz，1H)，3.09(d，J＝13.6Hz，1H)，3.01(d，J＝13.1Hz，1H)，2.72-2.74(m，2H)，2.61(s，1H)，2.21-2.22(m，1H)，1.52-1.74(m，6H)，0.85-0.93(m，12H)；¹³C-NMR(125MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝174.57(2C)，172.62(2C)，136.60(2C)，136.30(2C)，127.19，127.14，121.25，121.16，119.04，118.83，117.91(2C)，111.68(2C)，107.22，106.38，57.02(2C)，52.56，51.96，50.98，50.90，48.65，25.84(2C)，24.86，24.77，23.38，23.23，22.12，22.03.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-异亮氨酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-异亮氨酸(5d)

产量：44mg(62％)。Mp：202-204℃；[α]_D ²⁵＝-87.5(c＝0.45，CH₃OH)；IR(KBr)：3368，3294，2967，2934，1721，1670，1531，1456，1391，1211，743cm^-1；ESI-MS(m/e)669[M-H]^-；¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.22(s，1H)，11.18(s，1H)，8.58(s，1H)，8.43(s，1H)，7.48(d，J＝5.1Hz，2H)，7.38(q，J＝8.0Hz，2H)，7.02-7.13(m，4H)，4.83(s，1H)，4.73(s，1H)，4.35(d，J＝5.6Hz，1H)，4.27(d，J＝5.4Hz，1H)，4.14(s，2H)，3.25(d，J＝12.9Hz，1H)，3.17(d，J＝13.9Hz，1H)，2.74-2.89(m，4H)，1.89-1.91(m，2H)，1.48-1.53(m，2H)，1.25-1.35(m，2H)，0.83-0.97(m，12H)；¹³C-NMR(125MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝173.03(2C)，171.05(2C)，136.78，136.63，136.51，136.36，128.51，127.10，126.88，126.56，121.98，119.55，119.31，118.22，111.88(2C)，106.69，105.83，57.00，56.91，56.83，56.55，52.51，51.52，49.55，36.86，36.77，25.54，25.33，24.77，24.48，16.14，16.03，11.92(2C).

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰甘氨酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰甘氨酸(5e)

产量：57mg(83.8％)。Mp：85-86℃；[α]_D ²⁵＝-53.8(c＝0.6，CH₃OH)；IR (KBr)：3287，2936，1736，1659，1547，1395，1223，743，665cm^-1；ESI-MS(m/e)557[M-H]^-；¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.17(s，1H)，11.14(s，1H)，8.66(s，1H)，8.47(s，1H)，7.44(d，J＝6.8Hz，2H)，7.37(t，J＝8.1Hz，2H)，7.09(t，J＝7.4Hz，2H)，6.99-7.02(m，2H)，4.77(d，J＝7.4Hz，2H)，4.68-4.70(m，1H)，3.96-4.03(m，2H)，3.92(d，J＝9.8Hz，2H)，3.77-3.84(m，2H)，3.13-3.24(m，2H)，2.94(d，J＝12.1Hz，1H)，2.77-2.84(m，2H)，2.25-2.31(m，1H)；¹³C-NMR(125MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝171.80，171.45，171.40，171.32，136.58，136.34，128.49，126.89，126.81，126.77，126.74，121.79，121.70，119.38，119.14，118.16，111.79，111.70，106.59，106.47，56.83(2C)，53.39，52.00，50.61，41.33，41.23，24.74，24.10.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-苯丙氨酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-苯丙氨酸(5f)

产量：56mg(87.5％)。Mp：202-204℃；[α]_D ²⁵＝-35.3(c＝0.28，CH₃OH：DMF，1∶1，v/v)；IR(KBr)：3269，2932，1728，1667，1524，1450，1391，1329，1225，745，700cm^-1；ESI-MS(m/e)737[M-H]^-；¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.06(s，1H)，10.97(s，1H)，8.46(s，1H)，8.27(s，1H)，7.13-7.41(m，14H)，6.98-7.06(m，4H)，4.44-4.57(m，4H)，3.87(s，1H)，3.76(d，J＝7.8Hz，1H)，3.07-3.17(m，4H)，2.94-3.02(m，3H)，2.60-2.71(m，3H)；¹³C-NMR(75MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝173.16(2C)，171.95(2C)，138.08，137.94，136.66，136.39(2C)，136.23，130.50，129.92，129.66，129.63，128.69(2C)，128.61(2C)，128.41(2C)，126.92(2C)，121.53，121.43，119.24，119.00，117.92(2C)，111.74(2C)，107.00，106.24，56.87(2C)，54.16(2C)，52.27，52.09，48.91，38.17，37.16，25.30，24.62.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-酪氨酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-酪氨酸(5g)

产量：68mg(83％)。Mp：209-211℃；[α]_D ²⁵＝-25.7(c＝0.5，CH₃OH)；IR(KBr)：3379，2934，1724，1674，1516，1450，1229，833，746cm^-1；ESI-MS(m/e)769[M-H]^-；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.10(s，1H)，11.04(s，1H)，9.34(s，1H)，8.54(s，1H)，8.35(s，1H)，7.43(d，J＝7.5Hz，2H)，7.33-7.38(m，2H)，7.00-7.11(m，8H)，6.67(t，J＝8.1Hz，4H)，4.67(s，1H)，4.60(s，1H)，4.39-4.50(m，2H)，3.91-4.18(m，1H)，3.71(s，1H)，3.39(dd，J＝6.6Hz，J＝13.8Hz，1H)， 2.87-3.21(m，6H)，2.71-2.73(m，3H)，2.30(s，1H)；¹³C-NMR(75MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝173.25(2C)，171.57(2C)，156.49(2C)，136.70，136.45，130.60(4C)，128.49(2C)，128.01，127.86，126.78(2C)，121.63(2C)，119.35(2C)，118.04(2C)，115.54(4C)，111.80(2C)，106.92，106.10，67.48，65.37，56.81，54.78，54.62，52.07，49.30，36.45(2C)，25.59，25.12.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-色氨酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-色氨酸(5h)

产量：70mg(85.5％)。Mp：211-212℃；[α]_D ²⁵＝-39.8(c＝0.6，CH₃OH)；IR(KBr)：3401，3304，2933，1663，1521，1425，1340，1227，746cm^-1；ESI-MS(m/e)815[M-H]^-；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝10.95(s，1H)，10.87(s，1H)，10.82(s，2H)，8.28(d，J＝4.8Hz，1H)，8.12(d，J＝6.0Hz，1H)，7.15-7.60(m，10H)，6.94-7.02(m，8H)，4.64(d，J＝5.1Hz，1H)，4.50(s，2H)，4.40(s，2H)，3.82(s，1H)，3.67(d，J＝6.6Hz，1H)，3.36-3.40(m，1H)，3.02-3.29(m，6H)，2.58-2.66(m，2H)； ¹³C-NMR(75MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝173.82，173.77，172.70(2C)，136.56(2C)，136.51(2C)，136.31(2C)，128.49，127.82，127.17，127.08，124.26，124.18，121.32(2C)，121.16(2C)，118.98(2C)，118.81(2C)，118.75(2C)，117.89(2C)，111.84，111.79，111.69，111.62，110.26，110.18，107.39，106.46，65.38，63.35，53.61，53.53，52.60，51.72，48.45，27.61(2C)，25.83，25.18.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-丝氨酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-丝氨酸(5i)

产量：52mg(67.5％)。Mp：233-234℃；[α]_D ²⁵＝-59.7(c＝0.2，DMF：CH₃OH，1∶1，v/v)；IR(KBr)：3287，2932，2853，1661，1620，1541，1454，1394，1331，1287，1229，1057，743，665cm^-1；ESI-MS(m/e)617[M-H]^-；¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.28(s，1H)，11.24(s，1H)，8.65(s，1H)，8.46(d，J＝5.5Hz，1H)，7.43(d，J＝7.6Hz，2H)，7.36(t，J＝7.5Hz，2H)，7.07(t，J＝7.4Hz，2H)，6.99-7.01(m，2H)，4.69(s，1H)，4.62(s，1H)，4.33-4.35(m，1H)，4.23-4.24(m，1H)，3.98-4.06(m，2H)，3.71-3.83(m，6H)，3.16-3.19(m，1H)，3.06-3.09(m，1H)，2.74-2.90(m，4H)；¹³C-NMR(125MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝172.46(2C)，172.31(2C)，136.69(2C)，136.40(2C)，127.00，126.93，121.50，121.37，119.17，118.91， 118.06(2C)，111.78(2C)，106.91，106.44，61.94，61.82，57.18(2C)，55.60，55.52，52.99，52.40，49.82，24.98，24.89.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-苏氨酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-苏氨酸(5j)

产量：72mg(92.3％)。Mp：207-209℃；[α]_D ²⁵＝-36.8(c＝0.65，CH₃OH)；IR(KBr)：3381，2934，1674，1530，1454，1393，1323，1229，1113，746cm^-1；ESI-MS(m/e)645[M-H]^-；¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.09(s，1H)，11.03(s，1H)，8.44(d，J＝6.3Hz，1H)，8.26(d，J＝6.9Hz，1H)，7.46(d，J＝7.7Hz，2H)，7.40(d，J＝8.0Hz，1H)，7.34(t，J＝8.1Hz，1H)，7.10(dd，J＝6.8Hz，J＝8.8Hz，2H)，7.01(t，J＝7.4Hz，2H)，4.73(s，2H)，4.36(dd，J＝2.7Hz，J＝8.4Hz，1H)，4.24-4.28(m，2H)，4.19-4.22(m，3H)，4.14(d，J＝5.8Hz，1H)，4.08(d，J＝8.1Hz，1H)，3.18-3.27(m，3H)，2.77-2.84(m，1H)，1.19(d，J＝6.3Hz，3H)，1.14(d，J＝6.2Hz，3H)；¹³C-NMR(125MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝172.39，172.03，171.87(2C)，136.71(2C)，136.51(2C)，126.88，126.82，121.72(2C)，119.35，119.18，118.13(2C)，111.87，111.82，107.09，106.17，66.89，66.85，58.38，58.34，56.95(2C)，52.11(2C)，49.08，25.25，24.74，21.05，20.99.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-赖氨酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-赖氨酸(5k)

按照制备(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸(5a-l)的操作，由100mg(0.09mmol)化合物(4k)制得72mg(86.7％)(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-Boc-赖氨酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-Boc-赖氨酸，为淡粉色固体。在冰浴下将(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-Boc-赖氨酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-Boc-赖氨酸与2ml氯化氢-乙酸乙酯溶液(4N)混合，上接干燥管，室温搅拌2小时，TLC(CHCl₃∶MeOH＝1∶1)显示原料点消失，停止反应。减压去除乙酸乙酯。残留物用乙酸乙酯溶解并减压去除乙酸乙酯。该操作重复三次。残留物用乙醚溶解并减压去除乙醚。该操作重复三次。得50mg(89.3％)目标化合物，其为淡粉色粉末。Mp：130-131℃；[α]_D ²⁵＝-112.5(c＝0.65，CH₃OH)；IR(KBr)：3223，3057，2940，1722，1676，1557，1452，1391，1229，1157，1040，750 cm^-1；ESI-MS(m/e)699[M-H]^-；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.73(s，1H)，11.55(s，1H)，10.53(d，J＝15.3Hz，1H)，10.21(s，1H)，9.27(s，1H)，9.13(s，1H)，8.19-8.25(m，2H)，7.31-7.54(m，4H)，7.02-7.19(m，4H)，5.54(s，1H)，5.38(s，1H)，4.82(s，1H)，4.59(s，1H)，4.31-4.33(m，2H)，2.99-3.03(m，4H)，2.79(s，4H)，1.46-1.82(m，12H)；¹³C-NMR(75MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝173.27，172.43，136.96(2C)，136.80(2C)，128.90，128.47，127.08，126.88，125.98，122.54，119.78，118.54，118.39，112.07，106.34，105.19，65.89(2C)，63.39(2C)，60.24，56.70(2C)，52.56，48.73，30.46(2C)，26.74(2C)，23.61，22.81(2C)，21.51.

(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-蛋氨酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰-L-蛋氨酸(5l)

产量：52mg(66.7％)。Mp：188-189℃；[α]_D ²⁵＝-103.6(c＝0.4，CH₃OH)；IR(KBr)：3246，3061，2920，2853，1722，1676，1531，1452，1396，1323，1279，1225，746cm^-1；ESI-MS(m/e)705[M-H]^-；¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝11.22(s，1H)，11.20(s，1H)，8.69(d，J＝7.5Hz，1H)，8.54(d，J＝6.9Hz，1H)，7.46(d，J＝7.8Hz，2H)，7.38(t，J＝8.1Hz，1H)，7.11(t，J＝7.2Hz，1H)，6.99-7.05(m，2H)，4.83(s，1H)，4.74(s，1H)，4.50-4.56(m，1H)，4.40-4.47(m，1H)，4.02-4.11(m，1H)，3.17-3.30(m，2H)，2.77-2.91(m，3H)，2.54-2.63(m，3H)，1.92-2.30(m，10H)； ¹³C-NMR(75MHz，DMSO-d₆)：δ/ppm＝173.42(2C)，171.02(2C)，136.78(2C)，136.53(2C)，126.66(2C)，121.84(2C)，119.50，119.25，118.16(2C)，111.90(2C)，106.65，105.96，56.76(2C)，53.08(2C)，51.79，51.58，50.08，31.10(2C)，30.24(2C)，24.72，24.35，15.01(2C).

实施例6体外抗血小板聚集活性评价

猪颈动脉取血，用3.8％枸橼酸钠(V_枸橼酸钠∶V_全血＝1∶9)抗凝。1000g/min离心10分钟得富血小板血浆(PRP)，再以3000g/min离心10分钟，得贫血小板血浆(PPP)。以ADP，PAF，TH，AA为诱导剂诱导血小板聚集。母核(3)、(1R，3S)-1-[1-(1R，3S)-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸-1-基-甲基]-四氢β-咔啉-3-甲酰氨基酸(5a-l)及阳性药Asprin均用生理盐水溶解。每个数据平行测6次。结果如表1、表2所示。

表1数据说明母核(3)以及12个氨基酸修饰的目标化合物(5a-l)均对 PAF(终浓度1×10^-6M)诱导的血小板聚集的有抑制作用，对凝血酶(TH)(终浓度1×10^-5M)诱导的血小板聚集具有明显抑制作用，对花生四烯酸钠(AA)(终浓度4.6×10^-4M)诱导的血小板聚集具有明显抑制作用。通过数据还可以看到本发明经过氨基酸修饰后的目标化合物抑制TH和AA诱导的血小板聚集作用比母核抑制作用增强。

表2数据说明对ADP(终浓度1×10^-6M)诱导的血小板聚集没有抑制作用。

表15a-l对PAF、TH和AA诱导的血小板聚集作用的影响(n＝6)

表23和5a-l对ADP诱导的血小板聚集作用的影响(n＝6)

实施例7体内抗血栓活性评价

实验前将化合物(5a-l)配成3.3nmol/l生理盐水溶液(加入少量的吐温80润湿助溶)，用于体内的剂量为10nmol/kg。将母核(3)配成33nmol/l生理盐水溶液(加入少量的吐温80润湿助溶)，用于体内的剂量为100nmol/kg。阳性药Asprin配成10g/l生理盐水溶液，即55.5mmol/l的浓度，用于体内的剂量为167mmol/kg。空白对照为生理盐水，抗凝剂为肝素钠2.4mg/ml生理盐水溶液。将雄性SD大鼠随机分组，n＝10，化合物(5a-l)、母核(3)、空白、阳性药共分为16组，以(3ml/kg)给大鼠灌胃，30分钟后，用乌拉坦(20g/100ml，7ml/kg)麻醉后，分离右颈动脉和左颈静脉。把一根6cm长的事先精密称重的丝线放在聚乙烯管中，将插管充满肝素钠的生理盐水溶液(50IU/ml)后，一端插入左侧静脉，从一端加入定量肝素钠抗凝，然后插入右侧动脉。血流从右侧动脉流经聚乙烯管流入左侧静脉，15分钟后取出丝线并记录血栓湿重。结果如表3所示。

表35a-l对SD雄性大鼠血栓形成的影响

n＝10，血栓湿重用

表示；a)与生理盐水比，p＜0.01；b)与生理盐水和3血栓湿重比，p＜0.01；c)与生理盐水比，p＜0.01，与3比，p＜0.05。

表4不同剂量5h对SD雄性大鼠血栓形成的影响

n＝10，a)与生理盐水、0.1nmol/kg 5h及0.001nmol/kg 5h比，p＜0.01；b：与生理盐水及0.001nmol/kg 5h比，p＜0.01。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，对本发明而言仅仅是说明性的，而非限制性的。本专业技术人员理解，在本发明权利要求所限定的精神和范围内可对其进行许多改变，修改，甚至等效，但都将落入本发明的保护范围内。