CN102077085A

CN102077085A - 利用毛细管电泳法的分析装置

Info

Publication number: CN102077085A
Application number: CN2009801246129A
Authority: CN
Inventors: 杉山幸司; 东五十川行雄; 中山雄介
Original assignee: Arkray Inc
Current assignee: Arkray Inc
Priority date: 2008-07-22
Filing date: 2009-07-17
Publication date: 2011-05-25
Also published as: WO2010010858A1; JP2014145775A; US20100181199A1; EP2315015A4; US8252163B2; JPWO2010010858A1; EP2315015A1

Abstract

提供一种通过毛细管电泳法来分析血蛋白的毛细管电泳分析装置，其装置整体小型化，操作简便，制造成本低廉且能够以高精度进行分析。本发明的毛细管电泳分析装置是用于通过毛细管电泳法来分析血蛋白的毛细管电泳分析装置，其具有电泳芯片、电压施加单元及吸光度测定单元，前述电泳芯片包括基板、多个液槽及毛细管流路，前述电压施加单元包括电极，在前述基板上形成有前述多个液槽，前述多个液槽通过前述毛细管流路而连通，前述毛细管流路包括试样分析用毛细管流路。

Description

利用毛细管电泳法的分析装置

技术领域

本发明涉及通过毛细管电泳法来分析血蛋白的毛细管电泳分析装置。

背景技术

血蛋白中，有其浓度等根据疾病而变动的蛋白质，因而其作为疾病诊断的指标而被利用。例如，GOT(谷草转氨酶)是肝炎等的指标，血清淀粉酶是胰腺炎等的指标，白蛋白/球蛋白比是肾硬化等的指标。这些血蛋白例如使用醋酸纤维素膜电泳法等来进行分析。另外，作为血蛋白的血红蛋白(Hb)包括血红蛋白A(HbA)、血红蛋白F(HbF)、血红蛋白S(HbS)、它们的糖化物即糖化血红蛋白等。其中，血红蛋白S(HbS)是β链的第6位的谷氨酸被缬氨酸置换而成的异常血红蛋白，是镰刀形红细胞贫血症的诊断指标。前述糖化血红蛋白是与血液中的葡萄糖反应而成的血红蛋白，作为糖尿病的诊断或治疗的指标而被利用。前述糖化血红蛋白包括血红蛋白A1a(HbA1a)、血红蛋白A1b(HbA1b)、血红蛋白A1c(HbA1c)、GHbLys等。前述血红蛋白A1c是β链N末端的缬氨酸经糖化的糖化血红蛋白。前述血红蛋白A1c是反映过去几个月的血糖状态的指标，是定期健康诊断的检查项目。这样，血蛋白是各种疾病的重要指标。因此，要求开发一种在临床检查等中也能够利用的、运行成本低、小型化的血蛋白的分析装置。

血液中的血红蛋白的测定方法包括例如免疫法、酶法、亲和色谱法、HPLC法、毛细管电泳法等。前述免疫法及前述酶法由于能够应用于自动分析装置，因此具有能够处理大量待测物的优点，但缺乏测定精度。前述亲和色谱法在分离原理上，对于β链N末端的糖化缬氨酸的特异性低，Hb分子中的糖化赖氨酸会包含在测定值内。因此，前述亲和色谱法对于血红蛋白A1c的测定精度低。另外，前述HPLC法作为血红蛋白的测定方法而被广泛使用(例如专利文献1等)，但需要大型且昂贵的专用装置，难以实现装置的小型化及低成本化。另一方面，从利用于群体检查等的理由出发，血红蛋白的分析装置要求小型化。但是，如前所述，HPLC法难以响应该要求。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本专利第3429709号公报

发明内容

发明要解决的问题

因此，本发明的目的在于提供一种通过毛细管电泳法来分析血蛋白的毛细管电泳分析装置，该装置整体小型化，操作简便，制造成本低廉且能够以高精度进行分析。

用于解决问题的方案

为了达到前述目的，本发明的毛细管电泳分析装置是用于通过毛细管电泳法来分析血蛋白的毛细管电泳分析装置，

其具有电泳芯片、电压施加单元及吸光度测定单元，

前述电泳芯片包括基板、多个液槽及毛细管流路，

在前述基板上形成有前述多个液槽，

前述多个液槽通过前述毛细管流路而连通，

前述毛细管流路包括试样分析用毛细管流路，

前述电压施加单元包括电极，

在前述试样分析用毛细管流路中填充电泳液，

向填充有前述电泳液的前述试样分析用毛细管流路中导入含有作为分析对象的前述血蛋白的试样，

对前述电极施加电压，使前述试样进行电泳，

通过前述吸光度测定单元来测定电泳动的前述试样中的前述血蛋白的吸光度。

发明的效果

本发明的毛细管电泳分析装置其装置整体能够小型化，操作简便，制造成本低廉且能够以高精度分析血蛋白。本发明的毛细管电泳分析装置尤其适合于微型全分析系统(μTAS)。

附图说明

图1的(A)是表示本发明的毛细管电泳分析装置中所含的电泳芯片的一个例子的平面图。图1的(B)是从图1的(A)所示的电泳芯片的I-I方向观察的截面图。

图2是表示本发明的毛细管电泳分析装置的一个例子的示意图。

图3的(A)是表示本发明的毛细管电泳分析装置中所含的电泳芯片的其他例子的平面图。图3的(B)是从图3的(A)所示的电泳芯片的I-I方向观察的截面图。图3的(C)是从图3的(A)所示的电泳芯片的II-II方向观察的截面图。

图4的(A)是表示本发明的毛细管电泳分析装置中所含的电泳芯片的另一其他例子的平面图。图4的(B)是图4的(A)所示的电泳芯片的立体图。

图5是表示本发明的毛细管电泳分析装置的其他例子的示意图。

附图标记说明

1、100毛细管电泳分析装置

2、200 电泳芯片

3a 上基板

3b 下基板

4a、4b、4c、4d、4e 液槽

5x 试样分析用毛细管流路

5y 试样导入用毛细管流路

6a、6b、6c、6d 电极

7a、7b、7c、7d、7e、7f、7g 电线

8 狭缝

9 控制部

11 光源

12 滤光器

13 聚光透镜

14 检测器

20 电泳芯片移动单元(机构)

21 驱动部

22 载物台

30 定量分注器

31 稀释液

32 电泳液

41 试样导入部

42 试样导入流路

43、53a、53b 分支部

44、54 溢流流路

45、55、57、59、63排出口

46 试样计量流路

47 节流孔

51 试剂槽

52a、52b 试剂导入流路

56 试剂计量流路

58 稀释槽

61 电极配置部

62 流量测量流路

70 连接器

80 泳动开始点

90 检测点

具体实施方式

本发明的毛细管电泳分析装置的前述试样分析用毛细管流路中，与流路方向垂直的方向的截面形状为圆形或矩形，优选的是，

为圆形时，其直径在25μm～100μm的范围，

为矩形时，其宽度在25μm～100μm的范围，其深度在25μm～100μm的范围。

本发明的毛细管电泳分析装置中，前述电压施加单元优选为能够调节并施加前述电压的电压施加单元。

本发明的毛细管电泳分析装置中，前述吸光度测定单元的分光方式优选为前分光方式。

本发明的毛细管电泳分析装置中，前述吸光度的测定波长优选在260nm～300nm或380nm～450nm的范围，更优选在400nm～430nm的范围。

本发明的毛细管电泳分析装置中，优选还具有定量分注单元及搅拌单元中的至少一者。

本发明的毛细管电泳分析装置优选还具有送液单元，并通过前述送液单元向前述毛细管流路中导入前述电泳液及前述试样中的至少一者。

本发明的毛细管电泳分析装置优选还具有杂散光除去单元。

本发明的毛细管电泳分析装置优选还具有位置调整单元，且通过前述位置调整单元来调整前述电泳芯片的位置及前述吸光度测定单元的位置中的至少一者。

本发明的毛细管电泳分析装置优选还具有异物除去单元，且通过前述异物除去单元能够除去前述试样中的异物。

本发明的毛细管电泳分析装置中，前述异物除去单元优选为预滤器。

本发明的毛细管电泳分析装置优选还具有排气单元，前述试样分析用毛细管流路上具有被前述吸光度测定单元照射特定波长的光的检测点，前述排气单元配置于前述试样被导入或被收容的液槽与前述检测点之间。

本发明的毛细管电泳分析装置优选还具有前述电泳液。

本发明的毛细管电泳分析装置优选还具有稀释液。

本发明的毛细管电泳分析装置中，作为测定项目的前述血蛋白优选为血红蛋白。

本发明的毛细管电泳分析装置中，前述血红蛋白优选为选自由正常血红蛋白、糖化血红蛋白、修饰血红蛋白、突变型血红蛋白及胎儿血红蛋白所组成的组中的至少一种。

本发明的毛细管电泳分析装置中，前述血红蛋白优选为选自由血红蛋白A1c、血红蛋白F、血红蛋白A2、血红蛋白S及血红蛋白C所组成的组中的至少一种。

本发明的毛细管电泳分析装置优选测定前述血红蛋白的浓度。本发明的毛细管电泳分析装置中，前述血红蛋白优选为血红蛋白A1c。

本发明的毛细管电泳分析装置中，前述试样优选为对血液进行溶血处理而得到的试样，前述血蛋白优选为血红蛋白。

本发明的毛细管电泳分析装置中，前述溶血处理优选为选自由表面活性剂处理、渗透压变化处理及超声波处理所组成的组中的至少一种。

接着，对本发明进行详细说明。

本发明的毛细管电泳分析装置只要如前所述具有以下所示的电泳芯片、电压施加单元及吸光度测定单元即可，其他构成没有特别限制。前述毛细管电泳分析装置例如如后所述也可进一步包括定量分注单元、搅拌单元、送液单元、杂散光除去单元、位置调整单元、异物除去单元、排气单元等。

前述毛细管电泳分析装置的大小没有特别限制，例如可列举出：整体的最大宽度在10～100cm的范围，最大深度在10～100cm的范围，最大高度在5～100cm的范围。前述毛细管电泳分析装置的各单元的大小也没有特别限制。

<电泳芯片>

本发明的前述电泳芯片如前所述包括基板、多个液槽及毛细管流路。

前述毛细管电泳分析装置中的前述电泳芯片的大小没有特别限制，例如，其最大长度在10mm～100mm的范围，最大宽度在10mm～60mm的范围，最大厚度在0.3mm～5mm的范围。另外，前述电泳芯片的最大长度是指前述电泳芯片的长度方向的最长部的长度，前述电泳芯片的最大宽度是指前述电泳芯片的短边方向的最长部的长度，前述电泳芯片的最大厚度是指与前述电泳芯片的前述长度方向及前述短边方向这两个方向垂直的方向(厚度方向)的最长部的长度。

本发明的前述电泳芯片只要包括基板、多个液槽、毛细管流路即可，其他构成没有特别限制。前述电泳芯片例如可以为具备采血机构的电泳芯片、或与刺血针一体化的电泳芯片。

前述电泳芯片例如可以具有1块基板，也可以具有2块以上的基板。为后者的情况下，例如可列举出包括上基板和下基板、两者层叠的形态。作为前述基板的材质，没有特别限制，例如可列举出玻璃、聚合物材料等。作为前述玻璃材料，没有特别限制，例如可列举出合成石英玻璃、熔融二氧化硅、硼硅酸盐玻璃等。作为前述聚合物材料，没有特别限制，例如可列举出聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)等丙烯酸系树脂、环烯烃聚合物(COP)、聚碳酸酯(PC)、聚二甲基硅氧烷(PDMS)、聚苯乙烯(PS)、聚乳酸(PLA)、聚乙烯(PE)、聚四氟乙烯(PTFE)、聚醚醚酮(PEEK)等。

前述电泳芯片中，前述液槽只要形成于前述基板即可，其形态没有特别限定。作为前述液槽的形态，例如可列举出设置于前述基板的凹部、或设置于前述基板内的空隙部。为前者的情况下，例如通过在前述基板的厚度方向形成凹部则能够形成前述液槽。另外，如前所述，具有上基板和下基板时，例如只要将设置有贯通孔的一个基板层叠于另一基板上即可。通过将前述具有贯通孔的一个基板层叠于前述另一基板上，能够将前述贯通孔一方的开口部密封，在由前述两基板构成的层叠体上形成作为液槽的凹部。另一方面，为后者的情况下，例如只要在至少一个基板上形成凹部，并按照该形成面与另一基板面向的方式将两基板层叠即可。通过该层叠，一个基板的前述凹部的开口部被另一基板密封，在该层叠体内部形成作为液槽的空隙。

前述液槽的形状没有特别限定，例如可列举出圆柱状、四棱柱状、四棱锥状、圆锥状等。前述基板中的各液槽的形状可以全部相同，也可以不同，没有特别限制。另外，前述各液槽的容积没有特别限定，例如分别在1mm³～1000mm³的范围，优选在10mm³～100mm³的范围。前述各液槽的容积可以全部相同，也可以不同，没有特别限制。

另外，本发明中，前述液槽意味着例如能够导入或收容液体的部分，实际上不是必须导入或收容液体。前述电泳芯片中，例如前述液槽的数目没有限制。另外，规定的液槽例如可以兼作2种以上的液槽。作为前述液槽，例如可列举出能够导入或收容试剂的试剂用液槽、能够导入或收容前述试样的试样用液槽、能够导入或收容排液的排液用液槽、将前述试样和试剂混合的混合用液槽等。前述电泳芯片具备前述采血机构或刺血针时，前述试样用液槽例如可以与前述采血机构或刺血针连通。这种情况下，能够从前述采血机构或刺血针向前述试剂用液槽导入前述试样。

本发明中，能够导入或收容到前述电泳芯片内的液体没有特别限制，例如可列举出试样、试剂，作为前述试剂，没有特别限制，例如可列举出电泳液、分析试剂、稀释液、洗涤液等。

前述电泳芯片中，前述毛细管流路例如只要按照将前述液槽间连通的方式形成即可，其形态没有特别限定。前述毛细管流路例如可以形成于基板上，也可以是埋设于基板内的毛细管。为前者的情况下，例如在基板表面形成作为流路的槽，将前述槽的上部用密封件等覆盖，从而能够形成毛细管流路。另外，可以在一个基板上形成槽，并按照该形成面与另一基板面向的方式将前述一个基板与另一基板层叠。

前述毛细管流路的截面形状没有特别限制，例如可列举出圆形、椭圆形、矩形、多角形等。前述毛细管流路的直径没有特别限定，例如在1μm～1000μm的范围，优选在10μm～200μm的范围。另外，与前述毛细管流路方向垂直的方向的截面形状为圆形时，前述毛细管流路的直径是指圆的直径。另外，与前述毛细管流路方向垂直的方向的截面形状不是圆形时，前述毛细管流路的直径是指相当于例如前述毛细管流路的最大截面积的圆的直径、连接前述截面外周上的2点的长度中最长的长度等。

与前述毛细管流路方向垂直的方向的截面形状为矩形时，例如其宽度在1μm～1000μm的范围，其深度在1μm～1000μm的范围，优选其宽度在10μm～200μm的范围，其深度在10μm～200μm的范围。

另外，前述毛细管流路的流路的长度没有特别限定，例如在0.5cm～15cm的范围，优选在1cm～5cm的范围。

如前所述，前述毛细管流路包括试样分析用毛细管流路。本发明中，向填充有电泳液的前述试样分析用毛细管流路中导入试样。并且，进一步使前述所导入的试样进行电泳。前述电泳可通过下述的电压施加单元、例如通过使前述试样分析用毛细管流路的两端产生电位差来进行。另外，可以预先在前述试样分析用毛细管流路内填充电泳液，也可以在使用时填充。

前述试样分析用毛细管流路中，与毛细管流路方向垂直的方向的截面形状为圆形时，其直径没有特别限定，例如在10μm～200μm的范围，优选在25μm～100μm的范围。前述试样分析用毛细管流路中，与流路方向垂直的方向的截面形状为矩形时，例如其宽度在10μm～200μm的范围，其深度在10μm～200μm的范围，优选的是，其宽度在25μm～100μm的范围，其深度在25μm～100μm的范围。通过将前述试样分析用毛细管流路设定在规定的范围内，本发明的毛细管电泳分析装置能够进行更高精度的分析。另外，本发明中，前述试样分析用毛细管流路的长度没有特别限定，例如在0.5cm～15cm的范围，优选在1cm～5cm的范围。

如前所述，前述毛细管流路例如可以利用基板来形成，也可以通过毛细管的埋入而形成于基板内。为前者时，毛细管流路的材质例如为基板的材质，为后者时，毛细管流路的材质例如为所埋入的毛细管的材质。作为前述毛细管流路的材质，没有特别限定，例如，与前述同样地可列举出合成石英玻璃、熔融二氧化硅、硼硅酸盐玻璃等玻璃材料、聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)、环烯烃聚合物(COP)、聚碳酸酯(PC)、聚二甲基硅氧烷(PDMS)、聚苯乙烯(PS)、聚乳酸(PLA)、聚乙烯(PE)、聚四氟乙烯(PTFE)、聚醚醚酮(PEEK)等聚合物材料等。

前述试样分析用毛细管流路的材质例如可列举出前述的材质等，用相同光路长度及相同波长的光照射填充有电泳液等的流路和未填充的流路时，优选前者的流路的透射率显示出后者的流路的透射率的50％以上的材质。作为显示这种透射率的材质，没有特别限制，例如可列举出聚苯乙烯(PS)、聚醚醚酮(PEEK)、丙烯酸系树脂、聚碳酸酯(PC)、聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)等聚合物材料等。

例如为了抑制前述试样中的生物体来源成分的吸附，可以对前述毛细管流路的内壁进行表面处理。作为前述表面处理，没有特别限制，例如可列举出磷酸处理、UV处理、碱处理、无机纳米颗粒涂覆处理、接枝共聚合处理、电晕放电处理等亲水性处理、斥水处理等，也可并用这些处理。

前述玻璃制的毛细管流路的内壁通常为具有阴性电荷的状态。前述玻璃制的毛细管流路的内壁例如可被阳性覆盖，没有特别限制。另外，前述聚合物制的毛细管流路的内壁例如根据前述聚合物内的极性基团的有无、种类而呈具有阳性或阴性电荷的状态，或为无电荷(无极性)的状态。前述不具有极性基团的聚合物没有特别限制，例如，可通过导入极性基团而成为具有电荷的状态。前述毛细管例如可使用市售品的毛细管。

<电压施加单元>

本发明的毛细管电泳分析装置如前所述具有包含电极的电压施加单元。利用前述电压施加单元，例如使前述试样分析用毛细管流路的两端产生电位差，从而能够使试样进行电泳。

本发明的毛细管电泳分析装置优选包含多个电极作为前述电压施加单元。前述毛细管电泳分析装置中，前述电极的配置部位没有特别限制，例如可配置于前述电泳芯片内，具体而言，可配置于前述液槽中。这种情况下，例如，可在前述电泳芯片的前述基板的侧面设置与前述液槽连通的贯通孔，由该贯通孔向前述液槽内插入并配置电极。另外，作为前述电极，例如可使用环状的电极，并将其配置于前述液槽的设有贯通孔的壁面，另外，也可使用圆盘状的电极，并将其配置于前述液槽的底面。

作为前述电极的材质，没有特别限定，例如可列举出不锈钢(SUS)、铂(Pt)、金(Au)等。

前述电压施加单元没有特别限定，除前述电极以外，例如也可包含电线、电压器等。

前述电压施加单元没有特别限制，例如，如前所述优选能够调节在前述电极间所施加的电压。通过这种电压调节，能够根据目的而适当设定电压，因此能够进一步提高本发明的毛细管电泳分析装置的分析精度。另外，通过前述电压调节，从而本发明的毛细管电泳分析装置能够使用相同电极而施加不同的电压。因此，前述电压施加单元例如优选具有电压调节单元，作为前述电压调节单元，例如可列举出可变电压器。

作为施加前述电压的情形，没有特别限定，例如可列举出气泡检测、电泳等情形。另外，前述气泡检测是指，检测例如在将电泳液等溶液填充到毛细管流路中时前述流路内产生的气泡。另外，前述电泳例如是导入到前述试样分析用毛细管流路中的试样的电泳。前述气泡检测用的施加电压没有特别限定，例如在0.1kV～1kV的范围。前述电泳用的施加电压没有特别限制，例如在0.5kV～20kV的范围。

<吸光度测定单元>

如前所述，本发明的毛细管电泳分析装置具有吸光度测定单元，所述吸光度测定单元用于测定电泳动的试样中的血蛋白的吸光度。

前述血蛋白的吸光度没有特别限制，例如可对前述试样分析用毛细管流路的检测点照射特定波长的光，检测透射光，由其透射强度计算得到。前述吸光度测定单元没有特别限定，例如可由光源、滤光器、聚光透镜、检测器等构成。作为前述光源，没有特别限定，例如可列举出发光二极管(LED)、半导体激光二极管(LD)等。作为前述滤光器，没有特别限定，例如可列举出金属干涉滤光片、全电介质干涉滤光片等。作为前述聚光透镜，没有特别限定，例如可列举出两凸透镜等。前述检测器没有特别限定，例如可列举出光电二极管、光电晶体管、光电IC、光电倍增管(Photomultiplier Tube)等。

前述吸光度测定单元的分光方式没有特别限制，例如可列举出前分光方式、后分光方式，如前所述优选前分光方式。通常，前述前分光方式是指由前述光源发出的光在照射到检测点之前预先分光成特定波长的光的方式。为该前分光方式时，本发明的毛细管电泳分析装置中，前述特定波长的光照射到前述试样分析用的毛细管流路的检测点。

本发明的毛细管电泳分析装置中，作为前述特定波长、即前述吸光度的测定波长，如前所述，例如在260nm～300nm或380nm～450nm的范围，优选在400nm～430nm的范围。

<定量分注单元>

如前所述，本发明的毛细管电泳分析装置例如优选还具有定量分注单元。由此，例如能够自动定量分注试样及试剂等，因此能够更简便地进行测定。

前述定量分注单元没有特别限定，例如可配备于前述电泳芯片内，也可配备于前述电泳芯片外。

为前者时，作为前述定量分注单元，例如可列举出计量流路等。前述计量流路没有特别限制，例如为前述电泳芯片的毛细管流路的一部分，能够贮存或滞留一定量的试样或电泳液等试剂。作为前述计量流路，没有特别限制，例如可列举出试样的计量流路、电泳液的计量流路等。另外，为后者时，作为前述定量分注单元，没有特别限定，例如可列举出具有抽吸排出功能的定量分注器等。

<搅拌单元>

如前所述，本发明的毛细管电泳分析装置例如优选还具有搅拌单元。由此，例如能够将试样及试剂等溶液自动混合，因此能够更简便地进行测定。

作为前述搅拌单元，没有特别限定，例如可列举出搅拌子等。作为前述搅拌子，没有特别限定，例如可列举出将强磁性体的表面利用聚四氟乙烯等密封了的小片等。通过将前述搅拌子例如配置在用于混合试样和试剂的混合用液槽等中，使前述液槽的底面等具备磁力搅拌器等电磁式搅拌机，从而能够搅拌前述液槽中的溶液等。另外，例如前述定量分注器也可兼作前述定量分注单元和前述搅拌单元。这种情况下，利用前述定量分注器，例如抽吸及排出试样及电泳液的混合液，从而能够搅拌前述两种液体。

<送液单元>

如前所述，本发明的毛细管电泳分析装置例如优选还具有向前述毛细管流路中导入溶液的送液单元。由此，能够将前述溶液自动填充或导入到电泳芯片中，因此能够更简便地进行测定。通过前述送液单元，例如能够向前述毛细管流路中导入电泳液、分析试剂、稀释液、洗涤液等试剂或试样。作为前述送液单元，没有特别限定，例如可列举出抽吸单元(机构)、排出单元(机构)、电压施加单元(机构)等。

前述抽吸单元(减压单元)没有特别限定，例如可具备减压泵及排出口部等，例如可在前述毛细管流路的一端配置前述排出口，将前述减压泵与前述排出口部连接。并且，利用前述减压泵，介由前述排出口，将前述流路内减压，从而能够由前述毛细管流路的另一端侧向前述毛细管流路内抽吸导入前述溶液。

前述排出单元(加压单元)没有特别限定，例如具备加压泵及排出口部等，例如可在前述毛细管流路的一端配置前述排出口，将前述加压泵与前述排出口部连接。并且，利用前述加压泵，介由前述排出口，向流路内排出空气，将前述流路内加压，从而能够由前述毛细管流路的一端侧排出空气，并向前述毛细管流路内导入前述溶液。

另外，前述电压施加单元例如可由电极、电线、电源等构成，也可以是前述的电压施加单元。通过前述电压施加单元，对毛细管流路的两端施加电压，利用所产生的电渗流，从而能够向前述毛细管流路内导入试样等溶液。

<杂散光除去单元>

如前所述，本发明的毛细管电泳分析装置例如优选还具有杂散光除去单元。这样，通过具有前述杂散光除去单元，例如进一步提高吸光度测定的精度，因此能够以更高精度进行测定。

本发明中，前述杂散光是指不利于前述透射光的检测的光。作为前述杂散光除去单元，没有特别限定，例如可列举出配置在前述光源与前述试样分析用毛细管流路之间的、小孔、狭缝、针孔等。前述小孔、狭缝及针孔的孔的形状没有特别限定，例如可列举出圆形、矩形等。前述小孔、狭缝及针孔的孔的形状为圆形时，其孔径没有特别限定，例如可与前述毛细管流路的内径程度相同。另外，前述小孔、狭缝及针孔的孔的形状为矩形时，其孔的短边方向的长度没有特别限定，例如可与前述毛细管流路的内径程度相同。

<位置调整单元>

如前所述，本发明的毛细管电泳分析装置例如优选还具有位置调整单元。本发明的毛细管电泳分析装置中，前述位置调整单元是指，例如为使前述特定波长的光的光束准确地入射到前述试样分析用毛细管流路的检测点，而调整前述试样分析用毛细管流路及前述光束中的至少一者位置的单元。利用前述位置调整单元，例如能够调整前述试样分析用毛细管流路及前述光束中的至少一者的位置，进一步提高本发明的毛细管电泳分析装置的分析精度。

前述位置调整单元没有特别限制，例如能够将前述位置调整至前述试样分析用毛细管流路的径向及与前述流路平行的方向中的至少一个方向，优选能够调整至前述径向及前述平行方向这两个方向。作为前述位置调整单元，没有特别限定，例如可列举出光源移动单元(机构)、电泳芯片移动单元(机构)等。

前述光源移动单元(机构)的位置调整方法例如如下所述。首先，利用前述光源移动单元(机构)，边使光源等移动至前述试样分析用毛细管流路的前述径向或前述平行方向，边使光束照射到前述试样分析用毛细管流路，并检测前述试样分析用毛细管流路中产生的散射光。前述光束照射到前述试样分析用毛细管流路壁时，前述散射光以峰值的形式被检测到。因此，通过使前述光源等位于2个峰的中间位置，从而能够调整为使得前述光束入射到前述试样分析用毛细管流路的中央部的前述检测点。

另外，例如除了使前述电泳芯片移动来代替使前述光源等移动以外，前述电泳芯片移动单元(机构)与前述光源移动单元(机构)同样地能够检测前述散射光，并调整前述试样分析用毛细管流路中的入射光。本发明的毛细管电泳分析装置中，前述位置调整单元例如可只配置前述移动单元(机构)中的一个，也可配置2个以上。

<异物除去单元>

如前所述，本发明的毛细管电泳分析装置例如优选还具有异物除去单元。本发明的毛细管电泳分析装置中，前述异物除去单元是指例如能够除去前述试样中的异物的单元。前述异物除去单元例如可配置于：前述微芯片内导入或收容前述试样的液槽与前述试样分析用毛细管流路之间，也可以以前述微芯片外的、导入或收容前述试样的机构与前述微芯片之间形成的机构的形式配置。通过这样配置前述异物除去单元，例如能够在导入到前述试样分析用毛细管流路前除去试样等中所含的异物。其结果是，例如能够抑制前述异物所导致的分析精度的降低。作为前述异物除去单元，没有特别限制，例如可列举出预滤器等。作为前述预滤器所使用的过滤器的材质，没有特别限制，例如可列举出金属、聚醚醚酮(PEEK)、聚乙烯(PE)、丙烯酸系树脂、尼龙(注册商标)、棉、羊毛等。例如为了抑制前述血蛋白等的吸附，前述材质可进行表面处理。前述预滤器可包括一种前述材质的过滤器，也可包括二种以上。作为前述异物，没有特别限制，例如可列举出经溶血处理的血液试样中的细胞膜、蛋白质、脂质等。

<排气单元>

如前所述，本发明的毛细管电泳分析装置优选还具有排气单元。本发明的毛细管电泳分析装置中，前述排气单元是指，例如用于排出前述毛细管流路内的空气(气泡)的单元。前述排气单元如前所述优选配置于导入或收容前述试样的液槽与前述试样分析用毛细管流路上的、被用于测定前述吸光度的特定波长的光照射的点即前述检测点之间。通过这样配置前述排气单元，例如能够除去前述试样分析用毛细管流路内的空气。其结果是，例如能够抑制前述空气(气泡)所导致的分析精度的降低。作为前述排气单元，没有特别限制，例如可列举出为了排出前述空气(气泡)而能够开闭流路的构造等。作为前述能够开闭的构造，没有特别限制，例如可采用阀门式、阀式、槽中有槽(Channelin Channel)式等现有公知的构造。

<电泳液>

如前所述，本发明的毛细管电泳分析装置例如优选还具有电泳液。前述电泳液例如可填充于电泳芯片内的液槽、毛细管流路等中，也可以配备于电泳芯片外。作为前述电泳液，没有特别限制，例如可列举出缓冲液等。作为前述缓冲液，没有特别限制，例如可列举出MES、ADA、ACES、BES、MOPS、TES、HEPES等。前述缓冲液没有特别限制，例如可含有酸或弱碱。作为前述酸，没有特别限制，例如可列举出马来酸、酒石酸、琥珀酸、富马酸、邻苯二甲酸、丙二酸、苹果酸等。作为前述弱碱，没有特别限制，例如可列举出精氨酸、赖氨酸、组氨酸、三羟甲基氨基甲烷(Tris)等。

<稀释液>

如前所述，本发明的毛细管电泳分析装置例如优选还具有稀释试样的稀释液。前述稀释液例如可填充于前述电泳芯片内的液槽等中，也可配备于电泳芯片外。作为前述稀释液，没有特别限制，例如可列举出蒸馏水、前述的缓冲液等，优选为缓冲液。

<试样>

本发明中，作为含有前述血蛋白的试样，例如可列举出血液试样、将血液试样进行溶血处理而得到的试样等。作为前述血液试样，没有特别限制，例如可列举出全血、血浆、血清等，优选为全血。作为前述溶血处理，例如可列举出表面活性剂处理、渗透压变化处理、超声波处理、冷冻解冻处理、加压处理等，优选为表面活性剂处理、渗透压变化处理、超声波处理。

前述表面活性剂处理没有特别限制，例如可利用添加有表面活性剂的稀释液将前述血液试样溶血。作为前述表面活性剂，例如可列举出皂苷、聚氧乙烯系表面活性剂(例如Triton X-100(ナカライテスク公司))等。作为前述稀释液，没有特别限制，例如可列举出蒸馏水、前述的缓冲液等。前述渗透压变化处理没有特别限制，例如可利用调整至低渗透压的溶液将前述血液试样溶血。作为前述溶液，没有特别限定，例如可列举出蒸馏水、调整至低渗透压的稀释液等，优选为蒸馏水。作为前述稀释液，没有特别限定，例如可列举出前述的缓冲液等。前述超声波处理没有特别限制，例如可使用公知的超声波处理装置，其处理条件没有特别限制。

另外，本发明中，前述血蛋白是指血液中所含的蛋白质。作为前述血蛋白，没有特别限定，例如可列举出血红蛋白(Hb)、白蛋白(A1b)、球蛋白(α1、α2、β、γ球蛋白)、纤维蛋白原、C反应性蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、谷草转氨酶(GOT)、丙氨酸转氨酶(GPT)、肌酸激酶(CPK)、淀粉酶(Amy)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、果糖胺(FRA)、抗链球菌溶血素O(ASO)等，优选为血红蛋白。

作为前述血红蛋白，没有特别限定，例如可列举出正常血红蛋白(HbA0)、糖化血红蛋白、修饰血红蛋白、基因突变型血红蛋白、胎儿血红蛋白(HbF)等。作为前述糖化血红蛋白，例如可列举出血红蛋白A1a(HbA1a)、血红蛋白A1b(HbA1b)、血红蛋白A1c(HbA1c)、GHbLys等。作为前述血红蛋白A1c，例如可列举出稳定型HbA1c、不稳定型HbA1c等。作为前述修饰血红蛋白，例如可列举出氨甲酰化Hb、乙酰化Hb等。作为前述突变型血红蛋白，例如可列举出血红蛋白S(HbS)、血红蛋白C(HbC)、血红蛋白M(HbM)、血红蛋白H(HbH)等。作为前述血红蛋白，如前所述，例如优选前述血红蛋白A1c(HbA1c)、血红蛋白F(HbF)、血红蛋白A2(HbA2)、血红蛋白S(HbS)、血红蛋白C(HbC)，更优选为血红蛋白A1c(HbA1c)。

本发明的毛细管电泳分析装置中，作为测定项目，没有特别限制，例如前述的血蛋白中优选前述血红蛋白，更优选为血红蛋白A1c(HbA1c)。前述测定项目例如可为1个项目，也可组合2个项目以上，没有特别限制。

本发明的毛细管电泳分析装置例如可基于所测定的前述血蛋白的吸光度进而计算出血蛋白的浓度、比率，分析项目可为前述血蛋白的浓度、比率。作为前述比率或浓度，没有特别限制，例如可列举出血红蛋白浓度、白蛋白浓度、球蛋白浓度、各种血红蛋白的比率、白蛋白/糖化白蛋白比率、白蛋白/球蛋白比率、白蛋白/肌酐比率等，优选为血红蛋白浓度及血红蛋白比率。作为前述血红蛋白浓度，没有特别限制，例如可列举出前述的各种血红蛋白的浓度，优选为血红蛋白A1c浓度、血红蛋白F浓度、血红蛋白A2浓度、血红蛋白S浓度及血红蛋白C浓度，更优选为血红蛋白A1c浓度。作为前述血红蛋白比率，没有特别限制，例如可列举出前述的各种血红蛋白的比率，优选为血红蛋白A1c比率、血红蛋白F比率、血红蛋白A2比率、血红蛋白S比率及血红蛋白C比率，更优选为血红蛋白A1c比率。

实施例

接着，举出例子对本发明的毛细管电泳分析装置进行说明。但是，本发明并不限定于下述的例子。

(实施例1)

图1示出了本例的毛细管电泳分析装置中所用的电泳芯片。图1的(A)是前述电泳芯片的平面图，图1的(B)是从图1的(A)所示的电泳芯片的I-I方向观察的截面图。两图是为了便于理解的概略图，各构成要素的大小、比率等并不限定于此，可不相同。如两图所示，前述电泳芯片2具有下基板3b和上基板3a，前述上基板3a层叠在前述下基板3b上而构成。前述上基板3a中形成有3个贯通孔。通过在前述下基板3b上层叠前述上基板3a，前述上基板3a的3个贯通孔的底部被前述下基板3b密封，由此，在前述电泳芯片2中形成3个凹部。它们分别成为液槽4a、4b及4e。前述下基板3b中形成有I字状的槽。通过按照形成该槽的面与前述上基板3a面向的方式将前述上基板3a层叠在前述下基板3b上，从而前述下基板3b的I字状的槽的上部被前述上基板3a密封，在前述电泳芯片2中形成流路。其成为试样分析用毛细管流路5x。并且，前述液槽4a及前述液槽4b通过前述试样分析用毛细管流路5x而连通。另一方面，前述液槽4e不与前述试样分析用毛细管流路5x连通，作为单独的液槽进行配置。前述试样分析用毛细管流路5x的前述液槽4a侧的端部成为泳动开始点80。另外，前述液槽4a与前述液槽4b之间的前述试样分析用毛细管流路5x上的一点成为检测点90。

另外，前述电泳芯片2为立方体状，但本发明并不限定于本例。本发明的毛细管电泳分析装置中，前述电泳芯片2只要不给后述的试样分析造成障碍，可以是任意形状。另外，前述电泳芯片2由2块基板(上基板3a及下基板3b)构成，但本发明并不限定于此。本发明的毛细管电泳分析装置中，前述电泳芯片例如也可由1块基板构成。

前述电泳芯片2中，前述上基板3a的长度及宽度成为前述电泳芯片整体的最大长度及最大宽度。因此，前述上基板3a的长度及宽度与前述电泳芯片整体的最大长度及最大宽度同样即可。前述电泳芯片2中，前述上基板3a的厚度例如可根据前述液槽4a、4b及4e的容积而适当设定，例如在0.1mm～3mm的范围，优选在1mm～2mm的范围。

前述电泳芯片2中，前述下基板3b的长度及宽度例如与前述上基板3a的长度及宽度同样。前述下基板3b的厚度没有特别限定，例如在0.1mm～3mm的范围，优选在0.1mm～1mm的范围。

前述上基板3a及前述下基板3b的材质只要不给前述吸光度的测定造成障碍，则没有特别限制。作为前述上基板3a及前述下基板3b的材质，例如可列举出前述的材料等。

前述试样分析用毛细管流路5x的宽度及深度没有特别限制，例如其宽度在25μm～100μm的范围，其深度在25μm～100μm的范围。

前述液槽4a、前述液槽4b及前述液槽4e的容积例如与前述相同。图1中，前述液槽4a、4b及4e的形状为圆柱状，但本发明并不限定于此。本发明中，前述液槽4a、4b及4e的形状如前所述可为任意的形状。

前述电泳芯片2的最大厚度为前述上基板3a及前述下基板3b的厚度的总计。前述上基板3a及前述下基板3b的各自的厚度如前所述。

图2示出了本例的毛细管电泳分析装置。该图是为了便于理解的概略图，各构成要素的大小、比率等并不限定于此，可以不同。如该图所示，该毛细管电泳分析装置1具有前述的电泳芯片2、电极6a及6b、电线7a～f、狭缝8、控制部9、光源11、滤光器12、聚光透镜13、检测器14、电泳芯片移动单元(机构)20、定量分注器30、稀释液31、以及电泳液32。前述电泳芯片移动单元(机构)20包括驱动部21及载物台22。前述电泳芯片2配置于前述载物台22上。前述电极6a及6b分别配置于前述电泳芯片2的液槽4a及4b内。前述检测器14、前述定量分注器30、前述电极6a及6b、前述电泳芯片移动单元(机构)20、前述光源11分别通过前述电线7a～f与前述控制部9相连接。前述控制部9控制向通过前述电线7a～f而连接的前述各构成构件的电力供给等。

前述毛细管电泳分析装置1中，前述载物台22通过与其一端连接的前述驱动部21而能够在水平的双轴方向(X-Y方向)移动。另外，前述X方向与前述Y方向在前述水平面上彼此垂直交叉。由此，能够调整前述电泳芯片2的位置。前述电泳芯片2的位置利用前述电泳芯片移动单元(机构)20得到调整，因此能够使特定波长的光的光束准确地入射到前述检测点90。另外，前述定量分注器30能够分别定量前述稀释液31及前述电泳液32，并分注入前述电泳芯片2的液槽4a或液槽4e。通过在前述电极6a及6b间施加电压，能够将导入到前述试样分析用毛细管流路5x中的试样进行电泳。并且，从前述光源11照射的光通过滤光器12分光成特定波长的光，通过聚光透镜13会聚，且光量增加，通过前述狭缝8除去杂散光，从而照射到前述电泳芯片2的试样分析用毛细管流路5x上的检测点90的试样。前述检测器14检测照射到前述检测点90的光的透射光。通过由前述检测的透射光测定吸光度，从而能够分析前述试样中所含的作为分析对象的血蛋白。

本例的毛细管电泳分析装置1的电泳芯片2的制造方法没有特别限定，例如适当使用以往公知的方法即可。

接着，对使用了本例的毛细管电泳分析装置1的、前述血蛋白的分析方法进行说明。

首先，准备前述电泳液32。作为前述电泳液32，没有特别限定，例如可列举出向含有100mmol/L的富马酸和精氨酸的水溶液中以0.8重量％的比例添加硫酸软骨素C并将pH调节至4.8的水溶液等。接着，将前述电泳芯片2安装到前述载物台22上，并配置于前述毛细管电泳分析装置1中。然后，通过前述定量分注器30将一定量的前述电泳液32注入到前述液槽4a中。进而，将减压泵(未图示)与前述液槽4b连接进行减压，向前述试样分析用毛细管流路5x中填充前述电泳液32。

接着，利用前述定量分注器30向前述液槽4e中注入前述稀释液31。进而，向前述液槽4e中注入人的全血作为试样，通过吸移(pipetting)进行搅拌，调制前述试样与前述稀释液31的混合液。另外，作为前述稀释液31，例如可列举出蒸馏水等。接着，将前述混合液注入到前述液槽4a中。然后，对分别配置于前述液槽4a及4b内的前述电极6a及6b施加电压，使前述试样分析用毛细管流路5x的两端产生电位差。由此，使前述试样从前述泳动开始点80移动到前述液槽4b侧。前述电压没有特别限定，例如在0.5kV～20kV的范围。

接着，将与前述同样地经分光及聚光、进而除去了杂散光的光(波长415nm)照射到前述检测点90。然后，利用前述检测器14检测前述检测点90的透射光，测定前述试样中的前述血蛋白的吸光度。制作表示所得前述吸光度的大小及分析时间(从泳动开始至检测为止的时间)的对应的泳动图谱。

(实施例2)

图3示出了本例的毛细管电泳分析装置中使用的电泳芯片。该图中，与图1相同的部分附上相同的标记。图3的(A)是前述的电泳芯片的平面图，图3的(B)是从图3的(A)所示的电泳芯片的I-I方向观察的截面图，图3的(C)是从图3的(A)所示的电泳芯片的II-II方向观察的截面图。前述3图是为了便于理解的概略图，各构成要素的大小、比率等并不限定于此，可以不同。

如前述图3所示，前述电泳芯片2在下基板3b上层叠上基板3a而构成。前述上基板3a形成有多个(本例中4个)贯通孔。形成于前述上基板3a的4个贯通孔的底部被前述下基板3b密封，从而形成4个液槽4a～4d。前述下基板3b上形成有十字状的槽。形成于前述下基板3b上的十字状的槽的上部被前述上基板3a密封，从而形成试样分析用毛细管流路5x及试样导入用毛细管流路5y。前述液槽4a与前述液槽4b通过前述试样分析用毛细管流路5x而连通。前述液槽4c与前述液槽4d通过前述试样导入用毛细管流路5y而连通。前述试样分析用毛细管流路5x与前述试样导入用毛细管流路5y交叉。前述试样分析用毛细管流路5x与前述试样导入用毛细管流路5y通过前述交叉部分而连通。前述交叉部分成为泳动开始点80。另外，前述液槽4a与前述液槽4b之间的前述试样分析用毛细管流路5x上的一点成为检测点90。

前述电泳芯片2中，前述试样分析用毛细管流路5x与前述试样导入用毛细管流路5y的最大长度不同，但本发明并不限定于此。本发明的毛细管电泳分析装置中，前述电泳芯片2的前述试样分析用毛细管流路5x与前述试样导入用毛细管流路5y的最大长度可以相同。

前述电泳芯片2除了形成有前述液槽4c及前述液槽4d和前述试样导入用毛细管流路5y、没有形成前述液槽4e这一点以外，与图1所示的电泳芯片构成相同。前述试样导入用毛细管流路5y的宽度及深度与前述试样分析用毛细管流路5x的宽度及深度相同。另外，前述液槽4c及前述液槽4d的容积及形状与图1所示的电泳芯片的液槽相同。

本例的毛细管电泳分析装置1中，电泳芯片2为图3所示的电泳芯片，从而代替图1所示的电泳芯片，除了电极6c及电极6d(未图示)配置于前述电泳芯片2的液槽4c及4d内以外，与图2所示的毛细管电泳分析装置相同。

首先，将前述电泳芯片2安装于前述载物台22，并配置于前述毛细管电泳分析装置1中。接着，与实施例1同样地通过前述定量分注器30向前述液槽4a中注入前述电泳液32。接着，与实施例1同样地将减压泵(未图示)与前述液槽4b连接进行减压，向前述试样分析用毛细管流路5x中填充前述电泳液32。然后，通过前述定量分注器30向前述液槽4c中注入前述电泳液32。进而，将减压泵(未图示)与前述液槽4d连接进行减压，向前述试样导入用毛细管流路5y中填充前述电泳液32。

接着，通过前述定量分注器30向前述液槽4c中注入前述稀释液31后，进而注入人的全血作为试样，通过吸移进行搅拌。接着，对前述电极6c及6d施加电压，使前述试样导入用毛细管流路5y的两端产生电位差。由此，使前述试样移动至前述试样分析用毛细管流路5x与前述试样导入用毛细管流路5y的交叉部分。在前述电极6c与前述电极6d间施加的电压没有特别限定，例如在0.5kV～20kV的范围。

接着，对前述电极6a及6b施加电压，使前述试样分析用毛细管流路5x的两端产生电位差。由此，使前述试样从前述泳动开始点80移动至前述液槽4b侧。前述电压没有特别限定，例如在0.5kV～20kV的范围。

接着，将与实施例1同样地经分光及聚光、进而除去了杂散光的光(波长415nm)照射到检测点90。然后，通过前述检测器14检测前述检测点90的透射光，测定前述试样中的血蛋白的吸光度。制作表示所得前述吸光度的大小及泳动时间的对应的泳动图谱。

(实施例3)

图4示出了本例的毛细管电泳分析装置中使用的电泳芯片。该图中，与图1及图3相同的部分附上相同的标记。图4的(A)是前述电泳芯片的平面图，图4的(B)是前述电泳芯片的立体图。两图是为了便于理解的概略图，各构成要素的大小、比率等并不限定于此，可以不同。如两图所示，前述电泳芯片200具有下基板3b、上基板3a和连接器70，在前述下基板3b上层叠前述上基板3a而成的层叠体的一个侧面配置连接器70。前述下基板3b形成有布线图案(未图示)。

前述上基板3a形成有6个贯通孔。前述6个贯通孔的底部通过前述下基板3b而密封，从而形成6个液槽。前述6个液槽分别为试样导入部(试样用液槽)41、排出口45、排出口55、排出口57、排出口59及排出口63。另外，前述上基板3a的底面形成有大小3个凹部。前述3个凹部中的2个凹部的开口面被前述下基板3b密封，从而形成2个液槽。前述2个液槽分别为试剂槽51及稀释槽58。前述试剂槽51中封入有电泳液。前述稀释槽58配置有与前述布线图案中的布线连接的电极6a，并封入有搅拌子(未图示)。前述3个凹部中的剩余1个凹部的开口面被前述下基板3b密封而形成的电极配置部61中，配置有与前述布线图案中的布线连接的电极6b。进而，前述上基板3a的底面形成多个槽。前述多个槽的开口面被前述下基板3b密封，从而形成将前述6个液槽及前述3个凹部连通的流路。将前述稀释槽58及前述电极配置部61连通的毛细管流路为试样分析用毛细管流路5x。前述试样分析用毛细管流路5x的前述稀释槽58侧的端部成为泳动开始点80。另外，前述试样分析用毛细管流路5x上的一点成为检测点90。关于除前述试样分析用毛细管流路5x以外的流路的详细内容，下面进行叙述。

前述试样导入部41依次经由试样导入流路42、分支部43及溢流流路44连通至前述排出口45。另外，前述试样导入部41从前述分支部43经由试样计量流路46还连通至前述稀释槽58。前述试样导入部41的开口部是用于将含有作为分析对象的血蛋白的试样导入电泳芯片的试样导入口。并且，前述试样计量流路46的前述稀释槽58侧的端部形成有流路截面积窄的节流孔47。

前述电泳芯片200例如如下所述能够计量并导入前述试样。首先，向前述试样导入部41中导入试样后，通过与前述排出口45连接的减压泵等(未图示)将与前述排出口45连通的流路内减压，从前述试样导入部41抽吸试样。通过前述抽吸，超过前述分支部43及前述节流孔47间的前述试样计量流路46的容积的前述试样流出到溢流流路44。接着，关闭前述排出口45，利用与前述试样导入部41连接的加压泵等(未图示)排出空气，将与前述试样导入部41连通的流路内加压。由此，将与前述试样计量流路46的容积相当的试样导入到前述稀释槽58。因此，前述导入量例如能够设定为前述试样计量流路46的容积、并计量导入。

前述试剂槽51依次经由试剂导入流路52a、分支部53a、溢流流路54连通至前述排出口55。另外，前述试剂槽51从前述分支部53a经由试剂计量流路56、分支部53b、试剂导入流路52b还连通至前述稀释槽58。在前述分支部53b处分支的流路的末端形成有前述排出口57。并且，通过前述试样分析用毛细管流路5x的前述稀释槽58侧端部而分支的流路的末端形成有排出口59。进而，在前述电极配置部61与前述排出口63之间形成有流量测量流路62。

前述电泳芯片200例如如下所述，能够向前述试样分析用毛细管流路5x中填充前述电泳液，进而计量前述电泳液，并导入到前述稀释槽58中。首先，使前述试样导入部41、排出口45、55、57及59为关闭状态，并通过与前述排出口63连接的减压泵等(未图示)而抽吸空气，将与前述排出口63连通的流路及液槽内减压。由此，向前述试剂导入流路52a及52b、前述试剂计量流路56、前述稀释槽58、前述试样分析用毛细管流路5x、前述电极配置部61以及前述流量测量流路62中填充被封入到前述试剂槽51中的电泳液。接着，关闭前述试剂槽51，打开前述排出口59，通过与前述排出口57连接的减压泵等(未图示)而抽吸空气，将与前述排出口57连通的流路及液槽内减压。由此，除去前述试剂导入流路52b及前述稀释槽58内的电泳液。进而，关闭前述排出口57，打开前述排出口55，通过与前述排出口59连接的减压泵等(未图示)而抽吸空气，将与前述排出口59连通的流路及液槽内减压。由此，将与前述试剂计量流路56的容积相当的电泳液导入到前述稀释槽58中。因此，前述导入量例如能够设定为前述试剂计量流路56的容积、并计量导入。进而，如前所述，将前述试样导入到前述稀释槽58。然后，利用磁力搅拌器(未图示)使前述稀释槽58内的前述搅拌子(未图示)旋转，从而能够将前述试样与前述电泳液混合。另外，本例中，前述电泳液也可以添加表面活性剂，以能够进行溶血处理。

前述电泳芯片200中，前述上基板3a的长度及宽度例如在10mm～200mm的范围，优选在20mm～100mm的范围。另外，前述上基板3a的厚度例如在0.1mm～10mm的范围，优选在1mm～5mm的范围。

前述电泳芯片200中，前述下基板3b的长度及宽度与前述上基板3a的长度及宽度相同。前述下基板3b的厚度例如在0.1mm～10mm的范围。

前述电泳芯片200中，前述上基板3a及前述下基板3b的材质只要不阻碍前述吸光度的测定，则没有特别限制。作为前述上基板3a及前述下基板3b的材质，例如可列举出前述的材料等。另外，前述下基板3b通过层叠由前述材质形成的多个基板而构成。前述多个基板间形成有由铜箔等构成的布线图案。

前述电泳芯片200中，关于前述试样导入部41的直径及深度，例如直径在0.1mm～10mm的范围，深度在0.1mm～10mm的范围，优选的是，直径在1mm～5mm的范围，深度在1mm～5mm的范围。

前述电泳芯片200中，关于前述试剂槽51的直径及深度，例如直径在0.5mm～50mm的范围，深度在0.1mm～10mm的范围，优选的是，直径在1mm～20mm的范围，深度在1mm～5mm的范围。

前述电泳芯片200中，关于前述稀释槽58的直径及深度，例如直径在0.5mm～50mm的范围，深度在0.1mm～10mm的范围，优选的是，直径在1mm～10mm的范围，深度在1mm～5mm的范围。

前述电泳芯片200中，关于前述排出口45、55、57、59及63的直径及深度，直径在0.1mm～10mm的范围，深度在0.1mm～10mm的范围，优选的是，直径在1mm～5mm的范围，深度在1mm～5mm的范围。

前述电泳芯片200中，前述试样导入部41、前述试剂槽51、前述稀释槽58以及前述排出口45、55、57、59及63的液槽的形状为圆柱状，但本发明并不限定于此。本发明中，各液槽的形状例如除前述圆柱状以外，可列举出四棱柱状、四棱锥状、圆锥状等。前述各液槽的形状可以全部相同，也可以不同，没有特别限制。

前述电泳芯片200中，前述试样分析用毛细管流路5x的宽度及深度与图1所示的电泳芯片2相同。

前述电泳芯片200中，关于前述试剂计量流路56的流路的宽度及深度，在截面积最大的部分中，例如宽度在0.1mm～10mm的范围，深度在0.1mm～10mm的范围。

前述电泳芯片200中，关于前述节流孔47的宽度及深度，例如宽度在1μm～200μm的范围，深度在1μm～200μm的范围，优选的是，宽度为10μm～100μm，深度为10μm～100μm。

前述电泳芯片200中，关于除前述试样分析用毛细管流路5x、前述试剂计量流路56及前述节流孔47以外的毛细管流路的宽度及深度，例如宽度在10μm～1000μm的范围，深度在10μm～1000μm的范围，优选的是，宽度为50μm～500μm，深度为50μm～500μm。

前述电泳芯片200中，前述电泳芯片200整体的最大厚度为前述上基板3a及前述下基板3b的厚度的总计。前述上基板3a及前述下基板3b的厚度如前所述。

前述电泳芯片200的制造方法没有特别限定，例如适当使用以往公知的方法即可。

图5示出了本例的毛细管电泳分析装置100。该图中，与图2相同的部分附上相同的标记。如该图所示，本例的毛细管电泳分析装置100中，电泳芯片为图4所示的电泳芯片200，从而代替图1所示的电泳芯片，不具有定量分注器30、稀释液31、电线7b～d，前述电泳芯片200内具有前述电泳液，具有前述连接器70的连接部(未图示)及电线7g，除此之外，与图2所示的电泳分析装置相同。该图中未表示出，前述电泳芯片200介由前述连接器70安装于前述载物台22，并搭载于前述毛细管电泳分析装置100。另外，前述连接器70通过前述电线7g与前述控制部9连接。前述控制部9控制向前述连接器70的电力供给等。

接着，对使用了本例的毛细管电泳分析装置100的血蛋白的分析方法进行说明。

首先，将前述电泳芯片200介由前述连接器70安装于前述毛细管电泳分析装置100中。接着，如前所述，将前述电泳液填充到前述试样分析用毛细管流路5x中。然后，如前所述，计量前述电泳液，并导入到前述稀释槽58中。另外，作为前述试样，如前所述从前述试样导入部41导入人全血。进而，如前所述，计量与前述试样计量流路46的容量相当的量的人全血，导入到前述稀释槽58中。将所导入的前述试样及前述电泳液在前述稀释槽58中混合，通过前述磁力搅拌器(未图示)使前述搅拌子(未图示)旋转而进行搅拌。

接着，对前述电极6a及前述电极6b施加电压，使前述试样分析用毛细管流路5x的两端产生电位差。由此，使前述试样从前述泳动开始点80移动至前述电极6b侧。前述电压的施加通过利用前述布线图案内的前述布线7g从前述连接器70向前述电极6a及前述电极6b供给电力来实施。前述电压没有特别限定，例如在0.5kV～20kV的范围。

接着，将与实施例1同样地经分光及聚光、进而除去了杂散光的光(波长415nm)照射到前述检测点90。进而，通过前述检测器14检测前述检测点90的透射光，测定电泳动的前述试样中的血蛋白的吸光度，制作表示所得前述吸光度的大小及分析时间的对应的泳动图谱。

产业上的可利用性

本发明的毛细管电泳分析装置的装置整体小型化，操作简便，制造成本低廉，能够以高精度分析血蛋白。本发明的毛细管电泳分析装置尤其适合于微型全分析系统(μTAS)。本发明能够应用于临床检查、生物化学检查、医学研究等分析血蛋白的所有领域中，其用途没有限定，能够应用于广泛的领域中。

Claims

1.一种毛细管电泳分析装置，该毛细管电泳分析装置用于通过毛细管电泳法来分析血蛋白，

其具有电泳芯片、电压施加单元及吸光度测定单元，

所述电泳芯片包括基板、多个液槽及毛细管流路，

在所述基板上形成有所述多个液槽，

所述多个液槽通过所述毛细管流路而连通，

所述毛细管流路包括试样分析用毛细管流路，

所述电压施加单元包括电极，

在所述试样分析用毛细管流路中填充电泳液，

向填充有所述电泳液的所述试样分析用毛细管流路中导入含有作为分析对象的所述血蛋白的试样，

对所述电极施加电压，使所述试样进行电泳，

通过所述吸光度测定单元来测定电泳动的所述试样中的所述血蛋白的吸光度。

2.根据权利要求1所述的毛细管电泳分析装置，在所述试样分析用毛细管流路中，与流路方向垂直的方向的截面形状为圆形或矩形，

为圆形时，其直径在25μm～100μm的范围，

3.根据权利要求1所述的毛细管电泳分析装置，所述电压施加单元是能够调节并施加所述电压的电压施加单元。

4.根据权利要求1所述的毛细管电泳分析装置，所述吸光度测定单元的分光方式为前分光方式。

5.根据权利要求1所述的毛细管电泳分析装置，所述吸光度的测定波长在260nm～300nm或380nm～450nm的范围。

6.根据权利要求5所述的毛细管电泳分析装置，所述吸光度的测定波长在400nm～430nm的范围。

7.根据权利要求1所述的毛细管电泳分析装置，其还具有定量分注单元及搅拌单元中的至少一者。

8.根据权利要求1所述的毛细管电泳分析装置，其还具有送液单元，

通过所述送液单元向所述毛细管流路中导入所述电泳液及所述试样中的至少一者。

9.根据权利要求1所述的毛细管电泳分析装置，其还具有杂散光除去单元。

10.根据权利要求1所述的毛细管电泳分析装置，其还具有位置调整单元，

通过所述位置调整单元来调整所述电泳芯片的位置及所述吸光度测定单元的位置中的至少一者。

11.根据权利要求1所述的毛细管电泳分析装置，其还具有异物除去单元，

通过所述异物除去单元能够除去所述试样中的异物。

12.根据权利要求11所述的毛细管电泳分析装置，所述异物除去单元为预滤器。

13.根据权利要求1所述的毛细管电泳分析装置，其还具有排气单元，

所述试样分析用毛细管流路上具有被所述吸光度测定单元照射特定波长的光的检测点，

所述排气单元配置于所述试样被导入或被收容的液槽与所述检测点之间。

14.根据权利要求1所述的毛细管电泳分析装置，其还具有所述电泳液。

15.根据权利要求1所述的毛细管电泳分析装置，其还具有稀释液。

16.根据权利要求1所述的毛细管电泳分析装置，作为测定项目的所述血蛋白为血红蛋白。

17.根据权利要求16所述的毛细管电泳分析装置，所述血红蛋白为选自由正常血红蛋白、糖化血红蛋白、修饰血红蛋白、突变型血红蛋白及胎儿血红蛋白所组成的组中的至少一种。

18.根据权利要求16所述的毛细管电泳分析装置，所述血红蛋白为选自由血红蛋白A1c、血红蛋白F、血红蛋白A2、血红蛋白S及血红蛋白C所组成的组中的至少一种。

19.根据权利要求16所述的毛细管电泳分析装置，其测定所述血红蛋白的浓度。

20.根据权利要求19所述的毛细管电泳分析装置，所述血红蛋白为血红蛋白A1c。

21.根据权利要求1所述的毛细管电泳分析装置，所述试样为对血液进行溶血处理而得到的试样，

所述血蛋白为血红蛋白。

22.根据权利要求21所述的毛细管电泳分析装置，所述溶血处理为选自由表面活性剂处理、渗透压变化处理及超声波处理所组成的组中的至少一种。