CN102040611A

CN102040611A - 一种桑根酮c的提取方法

Info

Publication number: CN102040611A
Application number: CN2010102931654A
Authority: CN
Inventors: 刘东锋; 吴艳波; 杨成东
Original assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2010-09-27
Filing date: 2010-09-27
Publication date: 2011-05-04

Abstract

本发明涉及了一种桑根酮C的提取方法，工艺方法是把桑白皮粉碎小颗粒，pH9-11的碱性水溶液超声提取2-3次，提取调节pH7-8加入大孔树柱脂吸附，乙醇溶液洗脱，洗脱回收乙醇调酸沉淀，沉淀物再丙酮溶解后加硅胶柱分离，丙酮水溶液梯度洗，浓缩结晶，甲醇氯仿溶液重结晶，干燥得产品。本方法操作简单，解决了常规硅胶柱分离不能放大生产的难题，所得产品含量也较高。

Description

一种桑根酮C的提取方法

技术领域：

本发明属于生物技术领域，尤其是涉及一种从桑白皮中提取桑根酮C的方法。

背景技术：

桑白皮为桑科植物桑Morus alba L.的干燥根皮。秋末叶落时至次春发芽前采挖根部，刮去黄棕色粗皮.纵向剖开.剥取根皮，晒干。肺热咳喘。性甘寒性降，主入肺经，能清泻肺火兼泻肺中水气而平喘。治肺热咳喘，全身水肿，面目肌肤浮肿，胀满喘急，小便不利者，此外，还有清肝降压止血之功，可治衄血、咯血及肝阳肝火偏旺之高血压症。

现代医学研究桑白皮中含多种黄酮类衍生物，伞形花内酯，东莨菪素等成分。桑根酮C是桑白皮中有效成分之一，具有明显的降压作用。1983年，日本福富首先用桑白皮提取物对兔进行降血压实验，1995年，日本佐藤等使用原发性高血压大鼠自由摄食混有桑叶的饲料12-18周，亦发现其有降低舒张压的作用。此外桑根酮C有美白作用。

桑根酮C黄酮类物质，溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙醚等低分子有机极性溶剂，不溶于水，难溶于石油醚、氯仿。

目前提取桑根酮C的方法，多为有机溶剂提取，再经硅胶柱层析。如文献“从桑白皮中提取药物成分桑根酮C”采用乙醇浸提，丙酮萃取，苯洗涤，乙醚再萃取，最后经硅胶柱和制备液相分离得到高含量桑根酮C。该工艺虽然得到了高含量产品但是所用试剂毒性较大，对操作人员危害大，工艺也很难大量生产。再如中国专利“桑根酮C的提取精制方法及其应用”，该专利公开的方法为乙醇回流提取，再乙酸乙酯萃取，最后采用硅胶柱和制备色谱分离，得到90％以上的产品。该专利也是很难较大量制备，成本也较高。

发明内容：

本发明要解决技术问题是提供一种操作简单、易于工业化的桑根酮C的提取方法。

本发明的目的是通过以下技术解决方案来实现的：

一种桑根酮C的提取方法，其特征在于包含以下步骤：

1)把桑白皮原料粉碎，加入6-15倍量碱性水溶液超声提取2-3次，提取液减调节pH7-8，加入大孔树脂柱吸附，水洗糖反应阴性，再用5-8倍量60-75％乙醇溶液洗脱，回收乙醇，浓缩液加酸调pH1-4，放置沉淀；

2)沉淀物滤出用5-10倍量丙酮回流，趁热过滤，加入硅胶柱，丙酮水溶液梯度洗脱，收集有效成分，回收丙酮放置结晶；

3)粗结晶物滤出用甲醇饱和溶解，加入20-30％氯仿放置结晶，滤出结晶物干燥得桑根C。

所述步骤1)中的碱性溶液为pH9-11的氢氧化钠或氢氧化钙水溶液，大孔树脂型号可选AB-8、HPD100和HZ818中的一种，所用酸为盐酸或硫酸水溶液。

所述步骤2)中丙酮水溶液梯度洗脱为4-5BV10-30％丙酮溶液→5-7BV50-70％丙酮溶液。

本发明采用碱水溶液超声提取(文献“桑根酮C、D在碱液中的稳定性研究”，实验中也证明了桑根酮C在碱性溶液中是稳定的)减少了非极性物质的的溶出，比有机试剂提取成本低，提取液也无需浓缩，可直接上大孔树脂吸附，降低了能耗，再经过大孔树脂法柱吸附分离除去多糖和色素，得到了总黄酮物质，湿法上硅胶柱，再用不同浓度的丙酮洗脱，操作相对简单，也容易放大生产，解决了硅胶柱处理量小的难题。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式：

具体实施方式：

实施例1：

桑白皮干燥后，粉碎小颗粒，取5kg，加入小型超声提取罐，配置pH9的石灰水溶液，分别量取75kg、50kg和30kg液体，依次加入提取罐超声提取2小时、1小时、1小时，开启功率2kw，合并三次提取液，盐酸调节pH8滤过。取7LAB-8树脂装入树脂柱(径高比1∶15)，依次用酸碱处理，水洗中性后，把提取液加入大孔树脂柱，流速5L/h，吸附结束后，水性糖反应阴性，再取56L60％乙醇洗脱，收集洗脱液减压回收乙醇，浓缩液在调节pH1放置沉淀，过滤得沉淀物50g。把沉淀用500ml丙酮回流溶解，滤过加入硅胶柱(径高比1∶15，硅胶为200-300目中性硅胶，重量1kg)，取5kg10％丙酮溶液洗脱，再取7kg50％丙酮洗脱，收集50％丙酮流分，回收丙酮放置结晶。滤出粗结晶用90％甲醇溶液回流溶解，常温后加入30％氯仿溶液，快速滤过后静置结晶，真空干燥结晶物得到桑根酮C15g，含量91％。

实施例2：

桑白皮干燥后，粉碎小颗粒，取5kg，加入小型超声提取罐，配置pH10的石灰水溶液，分别量取50kg、40kg和30kg液体，依次加入提取罐超声提取1小时、1小时、1小时，开启功率2kw，合并三次提取液，盐酸调节pH7滤过。取6L HPD100树脂装入树脂柱(径高比1∶20)，依次用酸碱处理，水洗中性后，把提取液加入大孔树脂柱，流速8L/h，吸附结束后，水性糖反应阴性，再取30L75％乙醇洗脱，收集洗脱液减压回收乙醇，浓缩液在调节pH4放置沉淀，过滤得沉淀物65g。把沉淀用400ml丙酮回流溶解，滤过加入硅胶柱(径高比1∶15，硅胶为200-300目中性硅胶，重量1kg)，取4kg30％丙酮溶液洗脱，再取5kg70％丙酮洗脱，收集70％丙酮流分，回收丙酮放置结晶。滤出粗结晶用99％甲醇溶液回流溶解，常温后加入20％氯仿溶液，快速滤过后静置结晶，真空干燥结晶物得到18g桑根酮C，含量85％。

实施例3：

桑白皮干燥后，粉碎小颗粒，取10kg，加入小型超声提取罐，配置pH11的石灰水溶液，分别量取100kg、100kg和60kg液体，依次加入提取罐超声提取1小时、1小时、1小时，开启功率4kw，合并三次提取液，硫酸调节pH7滤过。取15L HZ818树脂装入树脂柱(径高比1∶15)，把提取液加入大孔树脂柱，流速15L/h，吸附结束后，水性糖反应阴性，再取90L60％乙醇洗脱，收集洗脱液减压回收乙醇，浓缩液在调节pH3放置沉淀，过滤得沉淀物96g。把沉淀用700ml丙酮回流溶解，滤过加入硅胶柱(径高比1∶15，硅胶为200-300目中性硅胶，重量2kg)，取10kg20％丙酮溶液洗脱，再取15kg50％丙酮洗脱，收集50％丙酮流分，回收丙酮放置结晶。滤出粗结晶用90％甲醇溶液回流溶解，常温后加入30％氯仿溶液，快速滤过后静置结晶，真空干燥结晶物得到桑根酮21gC，含量92％。

实施例4：

桑白皮干燥后，粉碎小颗粒，取20kg，加入中型超声提取罐，配置pH9的氢氧化钠溶液，分别量取150kg、150kg和120kg液体，依次加入提取罐超声提取1小时、1小时、1小时，开启功率5kw，合并三次提取液，硫酸调节pH7滤过。取30L AB-8树脂装入树脂柱(径高比1∶15)，把提取液加入大孔树脂柱，流速30L/h，吸附结束后，水性糖反应阴性，再取180L60％乙醇洗脱，收集洗脱液减压回收乙醇，浓缩液在调节pH2放置沉淀，过滤得沉淀物205g。把沉淀用2000ml丙酮回流溶解，滤过加入硅胶柱(径高比1∶15，硅胶为200-300目中性硅胶，重量4kg)，取20kg20％丙酮溶液洗脱，再取25kg60％丙酮洗脱，收集60％丙酮流分，回收丙酮放置结晶。滤出粗结晶用90％甲醇溶液回流溶解，常温后加入30％氯仿溶液，快速滤过后静置结晶，真空干燥结晶物得到桑根酮45gC，含量89％。

Claims

1.一种桑根酮C的提取方法，其特征在于包含以下步骤：

2.如权利要求1所述桑根酮C的提取方法，其特征在于所述步骤1)中的碱性溶液为pH9-11的氢氧化钠或氢氧化钙水溶液，大孔树脂型号可选AB-8、HPD100和HZ818中的一种，所用酸为盐酸或硫酸水溶液。

3.如权利要求1所述桑根酮C的提取方法，其特征在于所述步骤2)中丙酮水溶液梯度洗脱为4-5BV20-30％丙酮溶液→5-7BV50-70％丙酮溶液。