CN102036997A - 用于治疗变性和炎性疾病的稠合吡嗪化合物 - Google Patents

Abstract

公开了新的[1.2.4]三唑并[1，5-a]吡嗪和咪唑并[1，2-a]吡嗪化合物，其具有下面的式(Ia)或式(Ib)。所述化合物可以制备成药物组合物，并且可以用于预防和治疗哺乳动物(包括人)的多种病症，包括但不限于例如疼痛、炎症和其它病症。

Description

用于治疗变性和炎性疾病的稠合吡嗪化合物

发明领域

本发明涉及一类能够结合丝氨酸/苏氨酸激酶活性位点的稠合吡嗪化合物，该激酶的表达涉及引起细胞外基质(ECM)降解、关节变性和涉及此类降解和/或炎症的疾病的途径。

涉及细胞外基质降解的疾病包括但不限于银屑病关节炎、幼年关节炎、早期关节炎、反应性关节炎、骨关节炎、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、骨质疏松、肌肉骨骼疾病(例如肌腱炎和牙周疾病)、癌症转移、气道疾病(COPD、哮喘)、肾和肝纤维化、心血管疾病(例如动脉粥样硬化和心力衰竭)和神经疾病(例如神经炎和多发性硬化)。涉及原发性关节变性的疾病包括但不限于银屑病关节炎、幼年关节炎、早期关节炎、反应性关节炎、类风湿性关节炎、骨关节炎和强直性脊柱炎。

类风湿性关节炎(RA)是慢性关节变性疾病，其特征在于关节结构的炎症和破坏。当疾病未被检出时，由于关节功能的丧失而引起实质上的残疾和疼痛并且甚至过早死亡。因此，RA治疗的目标不是减慢疾病，而是获得缓解，以便阻止关节破坏。除了疾病结果的严重性，RA的高患病率(全球约0.8％的成人受影响)意味着高的社会经济影响。(对于RA的综述，参考了Smolen和Steiner(2003)；Lee和Weinblatt(2001)；Choy和Panayi(2001)；O’Dell(2004)和Firestein(2003))。

尽管广泛接受的是RA是自身免疫疾病，但是关于引起疾病“起始阶段”的准确机制没有一致意见。已知的是在易感宿主中起始触发剂介导事件的级联，这引起多种细胞类型(B细胞、T细胞、巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞、树突细胞和其它细胞)活化。随之而来的是在关节和关节周围的组织中观察到多种细胞因子的产量增加(例如TNF-α、IL-6、IL-1、IL-15、IL-18和其它细胞因子)。当疾病发展时，细胞活化和细胞因子生成级联变成自身延续性的。在此早期阶段，关节结构的破坏已经非常明显。30％的患者在诊断时具有骨侵蚀的X射线照片证据并且两年后该比例上升至60％。

RA患者关节的组织学分析清楚地证明了涉及RA相关降解过程的机制。该分析显示负责RA相关关节降解的主要效应器是关节翳，其中滑液成纤维细胞(通过产生多种蛋白水解酶)是软骨和骨侵蚀的主要驱动者。关节典型地包含两块邻近的骨，其连接在由滑液和关节囊包围的软骨层上。在晚期RA患者中，关节滑膜大小增加以形成关节翳，这是由于滑液成纤维细胞的增殖和单核细胞(例如T细胞、B细胞、单核细胞、巨噬细胞和嗜中性粒细胞)的浸润引起的。关节翳介导邻近软骨的降解，引起关节腔的狭窄，并且具有侵入邻近的骨和软骨的潜力。由于骨和软骨组织分别主要由胶原I型或II型组成，关节翳的破坏和侵入特征是由溶胶原蛋白酶(主要是基质金属蛋白酶(MMPs))的分泌介导的。位于软骨下面和邻近的骨的侵蚀也是RA过程的一部分，并且主要由骨和关节翳界面的破骨细胞的存在引起。破骨细胞是多核细胞，其粘附骨组织，形成闭合的区室，在其中破骨细胞分泌降解骨组织的蛋白酶(组织蛋白酶K，MMP9)。关节中的破骨细胞群由破骨细胞形成而异常增加，而破骨细胞是由SF和T细胞活化的NFκB配体的受体活化剂(RANKL)的分泌诱导的前体细胞形成的。

多种胶原类型在定义细胞外基质(ECM)的稳定性中具有重要作用。例如胶原I型和胶原II型分别是骨和软骨的主要成分。胶原蛋白通常组成多聚体结构，其被称为胶原原纤维。天然的胶原原纤维对蛋白酶剪切具有很强的抵抗力。已报道仅少数类型的ECM降解蛋白具有降解天然胶原的能力：MMP和组织蛋白酶。在组织蛋白酶中，组织蛋白酶K(其主要在破骨细胞中具有活性)最具特征。在MMP中已知MMP1、MMP2、MMP8、MMP13和MMP14具有溶胶原特性。滑液成纤维细胞(SF)表达的MMP1增加和关节炎疾病的进程之间的相关性已经明确并且是关节侵蚀过程的前兆(Cunnane等人，2001)。因此，在RA的背景中，MMP1代表高度相关的胶原降解蛋白。在体外，用RA病理学相关的细胞因子(例如TNF-α和IL1β)治疗培养的SF将增加这些细胞表达MMP1(Andreakos等人，2003)。因此，监控SF表达的MMP1水平在RA领域是相关读数，因为其指示SF对侵蚀表型的活化，所述的侵蚀表型在体内对软骨降解具有响应。对于RA的治疗，抑制SF表达的MMP1代表有价值的治疗方法。

ECM-降解蛋白质的活性还可以是多种不同于RA的疾病(例如其它涉及关节降解的疾病)的原因或与之相关。这些疾病包括但不限于银屑病关节炎、幼年关节炎、早期关节炎、反应性关节炎、骨关节炎和强直性脊柱炎。可以用本发明确定的化合物治疗并且应用涉及本文描述的MMP表达的靶点的其它疾病是骨质疏松、肌肉骨骼疾病(例如肌腱炎和牙周疾病(Gapski等人，2004))、癌症转移(Coussens等人，2002)、气道疾病(COPD、哮喘)(Suzuki等人，2004)、肺、肾纤维化(Schanstra等人，2002)、与慢性丙型肝炎相关的肝纤维化(Reiff等人，2005)、心血管疾病(例如动脉粥样硬化和心力衰竭(Creemers等人，2001))和神经疾病(例如神经炎和多发性硬化(Rosenberg等人，2002))。患有此类疾病的患者可以从稳定ECM(通过保护其免受降解)中受益。

471个氨基酸的丝氨酸/苏氨酸激酶(鉴定为促分裂原活化蛋白激酶活化蛋白激酶5(MAPKAPK5或PRAK))在广泛的一系列组织中表达。该蛋白包含N-末端的催化域以及C-末端的核定位信号(NLS)和核输出信号(NES)。内源性MAPKAPK5主要存在于细胞质中，但是细胞的应激或细胞因子活化介导其易位至核内(New等人，2003)。该事件取决于MAPKAPK5的磷酸化。Thr182是MAPKAPK5的调节磷酸化位点。尽管p38α激酶能够在过表达环境下磷酸化MAPKAPK5，但是关于内源性MAPKAPK5的试验不支持这种假设(Shi等人，2003)。已经生产出MAPKAPK5敲除小鼠，其是可生存的并且是可繁殖的。这些小鼠的表型完全不同于MAPKAPK2(其是由p38α调节的MAPKAPK5相关激酶)缺陷小鼠的表型(Shi等人，2003)。这表明每种蛋白质的功能是不同的并且没有一种激酶能补偿其它激酶的活性。综合而言，MAPKAPK5和MAPKAPK2代表不同的没有多余作用的靶点。最近，MAPK6(也称为ERK3)被鉴定为MAPKAPK5的生理学相关底物，其定义了新的信号转导途径(Seternes等人，2004)。

发明背景

NSAIDS(非甾体抗炎药)用于减轻与RA有关的疼痛并且改善患者的生活质量。但是这些药物对RA相关的关节破坏没有作用。

发现糖皮质激素降低RA的进程(如X线照片检测的)并且以低剂量应用于治疗部分RA患者(30至60％)。但是严重的副作用与长期应用糖皮质激素有关(皮肤变薄、骨质疏松、白内障、高血压和高脂血症)。

合成的DMARD(减轻疾病的抗风湿药物)(例如甲氨蝶呤、来氟米特、柳氮磺吡啶)主要处理RA的免疫炎性组分。作为主要缺点，这些药物仅具有有限的功效(关节破坏仅被DMARD减缓而没有阻止，因此疾病进程长期持续)。功效的缺乏由这样一个事实表明：平均仅30％的患者用甲氨蝶呤治疗24个月后获得ACR50评分。这意味着根据美国风湿病学院(American College of Rheumatology)，仅30％的患者获得50％的症状改善(O’Dell等人，1996)。另外，DMARD作用的准确机制通常是不清楚的。

生物学DMARD(英夫利昔单抗、依那西普、阿达木单抗、利妥昔单抗、阿巴他塞)是灭活细胞因子(例如TNF-α)或细胞(例如B细胞或T细胞)(其在RA病理生理学中具有重要作用)的治疗性蛋白质(Kremer等人，2003；Edwards等人，2004)。尽管TNF-α阻断剂(英夫利昔单抗、依那西普、阿达木单抗)和甲氨蝶呤组合治疗是目前可应用的最有效的RA治疗，引人注目的是12个月治疗后该治疗仅在50-60％患者的疾病症状中获得50％的改善(ACR50)(St Clair等人，2004)。对于抗TNF-α药物存在一些不良事件警告，这清楚地显示出与此类药物相关的副作用。对于TNF-α阻断剂已经描述了感染风险的增加(结核病)、血液学事件和脱髓鞘障碍(还参见Gomez-Reino等人，2003)。除了严重的副作用，TNF-α阻断剂还具有生物学类治疗剂的一般缺点，它们是不愉快的施用途径(伴随输液部位反应的频繁注射)和高的生产耗费。处于最近开发期的新药靶向于例如IL-6的细胞因子、T细胞共刺激分子和B细胞。这些药物的功效预期与TNF-α阻断剂类似。多种靶向治疗的事实具有相似但有限的功效，这表明对于RA存在多个致病因素。这也指出了对与RA相关的致病事件的理解方面的不足。

由于有限的功效，目前对于RA的治疗是不能令人满意的(对于30％的患者没有足够的治疗)。这就需要另外的策略来获得缓解。缓解是需要的，因为残留的疾病具有进行性关节损伤的风险，并且因此具有进行性残疾的风险。抑制RA疾病的免疫炎性组分(其代表目前RA治疗中所用的药物的主要靶点)不会引起关节降解的阻断(疾病的主要标志)。

US 2005/0009832描述了作为蛋白激酶(包括MAPKAPK5)调节剂的取代的咪唑并[1，2-a]吡嗪-8-基-胺。WO02/056888描述了作为能够调节某些细胞因子表达的TNF调节剂的MAPKAPK5抑制剂。这些现有技术文献没有公开在下文描述的一类化合物的范围内的任何化合物。

发明概述

本发明基于以下发现：引起MMP1表达的途径中的MAPKAPK5功能以及MAPKAPK5活性抑制剂(例如本发明化合物)可用于治疗涉及MMP活性异常高表达的疾病。

本发明化合物通常可以描述为5位被芳基或杂芳基取代并且8位被杂芳基氨基取代的[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪和咪唑并[1，2-a]吡嗪类。

本发明化合物可以显示低毒性、良好的吸收率、良好的半衰期、良好的溶解度、低蛋白亲合力、低药物相互作用和良好的代谢稳定性。在某个特定方面，本发明化合物在药理性质方面表现出了意料之外的有意义的改进，特别是改进的功效和改进的耐受性。

更加具体而言，本发明涉及按照式(Ia)或(Ib)的本发明化合物：

其中

W、W’、Y和Y’各自独立地是CR^2a或N；条件是W、W’、Y和Y’中不超过两个可以同时是N；

X是N或CH；

L是选自单键、-CO-、-SO-、-SO₂-、-N(R^2c)CO-和-N(R^2c)SO₂-；

环P是取代或未取代的：

R¹是H，或者取代或未取代的C₁-C₆烷基；

R^2a各自独立的选自H、取代或未取代的C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、氰基和卤素；

R^2c各自选自H和C₁-C₆烷基；

R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基；m1、m2和m3各自独立地是1或2；且

R³选自取代或未取代的C₁-C₆烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基和取代或未取代的杂芳基。

在一项实施方案中，就式I或式Ib的本发明化合物而言，R¹是H、Me、Et、i-Pr或CF₃。

在一项实施方案中，就式Ia或式Ib的本发明化合物而言，R¹是H。

在另一项实施方案中，就式Ia或式Ib的本发明化合物而言，R³是选自取代或未取代的苯基。

在另一项实施方案中，就式Ia或式Ib的本发明化合物而言，R³是选自取代或未取代的吡啶基。

在另一项实施方案中，就式Ia或式Ib的本发明化合物而言，R³是选自苯基、吲哚基、异吲哚基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、唑基和噻唑基，其各自可以是取代或未取代的。

在一项优选的实施方案中，就式Ia或式Ib的本发明化合物而言，R³是取代或未取代的呋喃基。

在另一方面，本发明提供了药物组合物，该药物组合物包含本发明化合物和药用载体、赋形剂或稀释剂。在本发明的这个方面，药物组合物可以包含一种或多种本文描述的本发明化合物。另外，本文公开的药物组合物和治疗方法中应用的本发明化合物作为制备和应用都是可药用的。

本发明的另一方面涉及本发明化合物在治疗方法、药物组合物以及制备此类组合物中的用途，其用于治疗的疾病包括炎症、胶原降解以及特别是具有异常的基质金属蛋白酶(MMP1)和/或促分裂原活化蛋白激酶活化蛋白激酶5(MAPKAPK5)活性的特征的疾病，其中类风湿性关节炎(RA)是此类疾病的特别实例。本发明还涉及制备本发明化合物的方法。

通过考虑随后详细的描述(其参考以下说明性附图进行)，其它目标和优势对于本领域技术人员将变得很明显。

附图简述

图1.该图显示健康关节和RA患者关节之间显著的组织学差异。

图2.该图显示由涉及类风湿性关节炎病理学的细胞因子引发的滑液成纤维细胞中MMP1的表达增加。

图3.该图显示已知的抗炎化合物对“基于TNF-α触发剂”诱导的由SF表达的MMP1的剂量依赖性的抑制。

图4.该胶显示通过用靶向于MAPKAPK5的Ad-siRNA病毒感染细胞引起SF中MAPKAPK5在蛋白质水平上表达的降低。

图5.该图显示通过用靶向于MAPKAPK5的Ad-siRNA病毒引起的‘复合体触发剂(complex trigger)’诱导的由SF表达的MMP1水平的降低。

图6A，该图显示采用本发明化合物进行的耐受性研究结果，其中所检测的效果是对总体重的效果。

图6B，该图显示相对于对比化合物的耐受性研究结果。

图7，该图显示在注射LPS(细菌脂多糖类)(已知将引发败血症的胆汁郁积)后，使用本发明化合物获得的TNFα释放的抑制百分率。此处的基准是熟知的地塞米松(100％抑制)(DEX)。

发明详述

定义

下列术语具有下文提供的含义并且用于理解本发明的描述和指定范围。

当描述可以包括化合物、包含这种化合物的药物组合物和使用这种化合物和组合物的方法的本发明时，除非另作陈述，否则下列术语(如果存在)具有如下含义。还应理解当本文描述时，下述定义的任意部分可以被各种取代基取代，并且指定相应的定义包括其如下所述范围内的这种取代的部分。除非另作陈述，否则如下所述定义术语“取代的”。进一步应理解术语“基团”和“基”在本文中使用时应被认为可互换。

冠词“一种(a)”和“一种(an)”在本文中使用时意指一种或一种以上(即至少一种)冠词合乎语法的对象。作为实例“类似物”意指一种类似物或一种以上类似物。

‘酰基’或‘烷酰基’意指基团-C(O)R²⁰，其中R²⁰是氢、如本文所定义的C₁-C₈烷基、C₃-C₁₀环烷基、C₃-C₁₀环烷基甲基、4-10元杂环烷基、芳基、芳基烷基、5-10元杂芳基或杂芳基烷基。代表性的实例包括但不限于甲酰基、乙酰基、环己基羰基、环己基甲基羰基、苯甲酰基和苄基羰基。示例性的‘酰基’是-C(O)H、-C(O)-C₁-C₈烷基、-C(O)-(CH₂)_t(C₆-C₁₀芳基)、-C(O)-(CH₂)_t(5-10元杂芳基)、-C(O)-(CH₂)_t(C₃-C₁₀环烷基)和-C(O)-(CH₂)_t(4-10元杂环烷基)，其中t是0-4的整数。

‘取代的酰基’或‘取代的烷酰基’意指基团-C(O)R²¹，其中R²¹独立地是

●被卤素或羟基取代的C₁-C₈烷基；或

●C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、芳基烷基、5-10元杂芳基或杂芳基烷基，它们各自被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。

‘酰基氨基’意指基团-NR²²C(O)R²³，其中R²²是氢、C₁-C₈烷基、C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、芳基烷基、5-10元杂芳基或杂芳基烷基且R²³是氢、如本文所定义的C₁-C₈烷基、C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、芳基烷基、5-10元杂芳基或杂芳基烷基。示例性的‘酰基氨基’包括但不限于甲酰基氨基、乙酰基氨基、环己基羰基氨基、环己基甲基-羰基氨基、苯甲酰基氨基和苄基羰基氨基。示例性的‘酰基氨基’是-NR^21’C(O)-C₁-C₈烷基、-NR^21’C(O)-(CH₂)_t(C₆-C₁₀芳基)、-NR^21’C(O)-(CH₂)_t(5-10元杂芳基)、-NR^21’C(O)-(CH₂)_t(C₃-C₁₀环烷基)和-NR^21’C(O)-(CH₂)_t(4-10元杂环烷基)，其中t是0-4的整数，R^21’各自独立地表示H或C₁-C₈烷基。

‘取代的酰基氨基’意指基团-NR²⁴C(O)R²⁵，其中：

R²⁴独立地是

●H、被卤素或羟基取代的C₁-C₈烷基；或

●C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、芳基烷基、5-10元杂芳基或杂芳基烷基，它们各自被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代；且

R²⁵独立地是

●H、被卤素或羟基取代的C₁-C₈烷基；或

●C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、芳基烷基、5-10元杂芳基或杂芳基烷基，它们各自被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代；

条件是至少一个R²⁴和R²⁵不是H。

‘烷氧基’意指基团-OR²⁶，其中R²⁶是C₁-C₈烷基。具体的烷氧基是甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、异丙氧基、正-丁氧基、叔-丁氧基、仲-丁氧基、正-戊氧基、正-己氧基和1，2-二甲基丁氧基。具体的烷氧基是低级烷氧基，即具有1-6个碳原子。其它具体的烷氧基具有1-4个碳原子。

‘取代的烷氧基’意指被一种或多种本文“取代的”的定义中所述的那些基团取代的烷氧基，且具体地指具有一个或多个取代基的烷氧基，例如1-5个取代基且特别是1-3个取代基，具体地是1个取代基，其选自氨基、取代的氨基、C₆-C₁₀芳基、-O-芳基、羧基、氰基、C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、卤素、5-10元杂芳基、羟基、硝基、硫代烷氧基、硫代-O-芳基、硫氢基、烷基-S(O)-、芳基-S(O)-、烷基-S(O)₂-和芳基-S(O)₂-。示例性的‘取代的烷氧基’是-O-(CH₂)_t(C₆-C₁₀芳基)、-O-(CH₂)_t(5-10元杂芳基)、-O-(CH₂)_t(C₃-C₁₀环烷基)和-O-(CH₂)_t(4-10元杂环烷基)，其中t是0-4的整数且存在的任意芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基自身可以被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。具体的示例性的‘取代的烷氧基’是OCF₃、OCH₂CF₃、OCH₂Ph、OCH₂-环丙基、OCH₂CH₂OH、OCH₂CH₂NMe₂。

‘烷氧羰基’意指基团-C(O)-OR²⁷，其中R²⁷表示如本文所定义的C₁-C₈烷基、C₃-C₁₀环烷基、C₃-C₁₀环烷基烷基、4-10元杂环烷基烷基、芳烷基或5-10元杂芳基烷基。示例性的“烷氧羰基”是C(O)O-C₁-C₈烷基、-C(O)O-(CH₂)_t(C₆-C₁₀芳基)、-C(O)O-(CH₂)_t(5-10元杂芳基)、-C(O)O-(CH₂)_t(C₃-C₁₀环烷基)和-C(O)O-(CH₂)_t(4-10元杂环烷基)，其中t是1-4的整数。

‘取代的烷氧羰基’意指基团-C(O)-OR²⁸，其中R²⁸表示：

●C₁-C₈烷基、C₃-C₁₀环烷基、C₃-C₁₀环烷基烷基或4-10元杂环烷基烷基，它们各自被卤素、取代的或未取代的氨基或羟基取代；

或

●C₆-C₁₀芳烷基或5-10元杂芳基烷基，它们各被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。

‘-O-芳基羰基’意指基团-C(O)-OR²⁹，其中R²⁹表示如本文所定义的C₆-C₁₀芳基。示例性的“-O-芳基羰基”是-C(O)O-(C₆-C₁₀芳基)。

‘取代的-O-芳基羰基’意指基团-C(O)-OR³⁰，其中R³⁰表示C₆-C₁₀芳基，其被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。

‘杂-O-芳基羰基’意指基团-C(O)-OR³¹，其中R³¹表示如本文所定义的5-10元杂芳基。

‘取代的杂-O-芳基羰基’意指基团-C(O)-OR³²，其中R³²表示5-10元杂芳基，其被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。

‘烷基’意指具有1-20个碳原子的直链或支链脂族烃。具体的烷基具有1-12个碳原子。更具体地说是具有1-6个碳原子的低级烷基。其它具体的基团具有1-4个碳原子。示例性的直链基团包括甲基、乙基、正-丙基和正-丁基。支链意指一种或多种低级烷基，例如甲基、乙基、丙基或丁基与线性烷基链连接，示例性的支链基团包括异丙基、异-丁基、叔-丁基和异戊基。

‘取代的烷基’意指如上述定义的被一个或多个本文“取代的”的定义中所述那些基团取代的烷基，且具体地意指具有一个或多个取代基的烷基，例如1-5个取代基且特别是1-3个取代基，具体地是1个取代基，其选自酰基、酰基氨基、酰氧基(-O-酰基或-OC(O)R²⁰)、烷氧基、烷氧羰基、烷氧羰基氨基(-NR”-烷氧羰基或-NH-C(O)-OR²⁷)、氨基、取代的氨基、氨基羰基(氨基甲酰基或酰胺基或-C(O)-NR”₂)、氨基羰基氨基(-NR-C(O)-NR”₂)、氨基羰基氧基(-O-C(O)-NR”₂)、氨基磺酰基、磺酰基氨基、芳基、-O-芳基、叠氮基、羧基、氰基、环烷基、卤素、羟基、杂芳基、硝基、硫氢基、-S-烷基、-S-芳基、-S(O)-烷基、-S(O)-芳基、-S(O)₂-烷基和-S(O)₂-芳基。在一个具体的实施方案中，‘取代的烷基’意指被如下基团取代的C₁-C₈烷基：卤素、氰基、硝基、三氟甲基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR”’SO₂R”、-SO₂NR”R”’、-C(O)R”、-C(O)OR”、-OC(O)R”、-NR”’C(O)R”、-C(O)NR”R”’、-NR”R”’或-(CR”’R””)_mOR”’；其中R”各自独立地选自H、C₁-C₈烷基、-(CH₂)_t(C₆-C₁₀芳基)、-(CH₂)_t(5-10元杂芳基)、-(CH₂)_t(C₃-C₁₀环烷基)和-(CH₂)_t(4-10元杂环烷基)，其中t是0-4的整数，且存在的芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基自身可以被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。R”’和R””各自独立地表示H或C₁-C₈烷基。

‘氨基’意指基团-NH₂。

‘取代的氨基’意指被一个或多个本文“取代的”的定义中所述的那些基团取代的氨基，且具体地意指基团-N(R³³)₂，其中R³³各自独立地选自：

●氢、C₁-C₈烷基、C₆-C₁₀芳基、5-10元杂芳基、4-10元杂环烷基或C₃-C₁₀环烷基；或

●被卤素或羟基取代的C₁-C₈烷基；或

●-(CH₂)_t(C₆-C₁₀芳基)、-(CH₂)_t(5-10元杂芳基)、-(CH₂)_t(C₃-C₁₀环烷基)或-(CH₂)_t(4-10元杂环烷基)，其中t是0-8的整数，它们各自被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代；或

●两个R³³连接成亚烷基。

当两个R³³均是氢时，-N(R³³)₂是氨基。示例性的‘取代的氨基’是-NR^33’-C₁-C₈烷基、-NR^33’-(CH₂)_t(C₆-C₁₀芳基)、-NR^33’-(CH₂)_t(5-10元杂芳基)、-NR^33’-(CH₂)_t(C₃-C₁₀环烷基)和-NR^33’-(CH₂)_t(4-10元杂环烷基)，其中t是0-4的整数，R^33’各自独立地表示H或C₁-C₈烷基；且存在的烷基自身可以被卤素、取代的或未取代的氨基或羟基取代；且存在的芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基自身可以被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。为避免疑虑，术语“取代的氨基”包括基团如下定义的烷基氨基、取代的烷基氨基、烷基芳基氨基、取代的烷基芳基氨基、芳基氨基、取代的芳基氨基、二烷基氨基和取代的二烷基氨基。

‘烷基氨基’意指基团-NHR³⁴，其中R³⁴是C₁-C₈烷基。

‘取代的烷基氨基’意指基团-NHR³⁵，其中R³⁵是C₁-C₈烷基；且烷基被卤素、取代的或未取代的氨基、羟基、C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、5-10元杂芳基、芳烷基或杂芳烷基取代；且存在的芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基自身可以被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。

‘烷基芳基氨基’意指基团-NR³⁶R³⁷，其中R³⁶是C₆-C₁₀芳基且R³⁷是C₁-C₈烷基。

‘取代的烷基芳基氨基’意指基团-NR³⁸R³⁹，其中R³⁸是C₆-C₁₀芳基且R³⁹是C₁-C₈烷基；且烷基被卤素、取代的或未取代的氨基、羟基、C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、5-10元杂芳基、芳烷基或杂芳烷基取代；且存在的芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基自身可以被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、氰基、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。

‘芳基氨基’意指基团-NHR⁴⁰，其中R⁴⁰选自如本文所定义的C₆-C₁₀芳基和5-10元杂芳基。

‘取代的芳基氨基’意指基团-NHR⁴¹，其中R⁴¹独立地选自C₆-C₁₀芳基和5-10元杂芳基；且存在的芳基或杂芳基自身可以被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、氰基、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。

‘二烷基氨基’意指基团-NR⁴²R⁴³，其中R⁴²和R⁴³各自独立地选自C₁-C₈烷基。

‘取代的二烷基氨基’意指基团-NR⁴⁴R⁴⁵，其中R⁴⁴和R⁴⁵各自独立地选自C₁-C₈烷基；且烷基独立地被卤素、羟基、C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、5-10元杂芳基、芳烷基或杂芳烷基取代；且存在的芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基自身可以被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C_1-4卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。

‘二芳基氨基’意指基团-NR⁴⁶R⁴⁷，其中R⁴⁶和R⁴⁷各自独立地选自C₆-C₁₀芳基。

“氨基磺酰基”或“磺酰胺”意指基团-S(O₂)NH₂。

“取代的氨基磺酰基”或“取代的磺酰胺”意指基团例如-S(O₂)N(R⁴⁸)₂，其中R⁴⁸各自独立地选自：

●H、C₁-C₈烷基、C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、芳烷基、5-10元杂芳基和杂芳烷基；或

●被卤素或羟基取代的C₁-C₈烷基；或

●C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、芳烷基、5-10元杂芳基或杂芳烷基，其被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代；条件是至少一个R⁴⁸不是H。

示例性的‘取代的氨基磺酰基’或‘取代的磺酰胺’是-S(O₂)N(R^48’)-C₁-C₈烷基、-S(O₂)N(R^48’)-(CH₂)_t(C₆-C₁₀芳基)、-S(O₂)N(R^48’)-(CH₂)_t(5-10元杂芳基)、-S(O₂)N(R^48’)-(CH₂)_t(C₃-C₁₀环烷基)和-S(O₂)N(R^48’)-(CH₂)_t(4-10元杂环烷基)，其中t是0-4的整数；R^48’各自独立地表示H或C₁-C₈烷基；且存在的芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基自身可以被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。

‘芳烷基’或‘芳基烷基’意指如上述定义的烷基，其被一个或多个如上述定义的芳基取代。具体的芳烷基或芳基烷基是被一个芳基取代的烷基。

‘取代的芳烷基’或‘取代的芳基烷基’意指如上述定义的烷基，其被一个或多个芳基取代；且至少一个存在的任意芳基自身可以被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、氰基、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。

‘芳基’意指通过从母体芳族环系的单一碳原子上除去一个氢原子衍生的一价芳族烃基。具体的芳基意指单环或多环的芳族环结构，其包括5-12个环成员，更通常的是6-10个环成员。如果芳基是单环环系，则它优选包含6个碳原子。典型的芳基包括但不限于衍生自下列的基团：醋蒽烯、苊、醋菲烯(acephenanthrylene)、蒽、薁、苯、草屈、晕苯、荧蒽、芴、并六苯、己芬、己搭烯、不对称引达省、对称引达省、茚满、茚、萘、辛搭省、辛芬、辛搭烯、卵苯、戊-2，4-二烯、戊搭省、并环戊二烯、二苯并菲、二萘嵌苯、非那烯(phenalene)、菲、苉、七曜烯、芘、皮蒽、玉红省、三亚苯和联三萘。具体的芳基包括苯基、萘基、茚基和四氢萘基。

‘取代的芳基’意指被一个或多个本文“取代的”的定义中所述的那些基团取代的芳基，且具体地意指可以任选被一个或多个取代基，例如1-5个取代基，特别是1-3个取代基，具体地是1个取代基取代的芳基。特别地，‘取代的芳基’意指被一个或多个选自如下基团取代的芳基：卤素、C₁-C₈烷基、C₁-C₈卤代烷基、C₁-C₈卤代烷氧基、氰基、羟基、C₁-C₈烷氧基和氨基。

取代的芳基代表性的实例包括如下：

在这些式中，R⁴⁹和R⁵⁰之一可以是氢，且至少一个R⁴⁹和R⁵⁰各自独立地选自C₁-C₈烷基、4-10元杂环烷基、烷酰基、C₁-C₈烷氧基、杂-O-芳基、烷基氨基、芳基氨基、杂芳基氨基、NR⁵¹COR⁵²、NR⁵¹SOR⁵²、NR⁵¹SO₂R⁵²、COO烷基、COO芳基、CONR⁵¹R⁵²、CONR⁵¹OR⁵²、NR⁵¹R⁵²、SO₂NR⁵¹R⁵²、S-烷基、SO烷基、SO₂烷基、S芳基、SO芳基、SO₂芳基；或R⁴⁹和R⁵⁰可以连接成5-8个原子的环(饱和或不饱和)，其任选包含一个或多个选自N、O或S的杂原子。R⁵¹和R⁵²独立地是氢、C₁-C₈烷基、C₁-C₄卤代烷基、C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、取代的芳基、5-10元杂芳基。

‘芳基烷氧基’意指-O-烷基芳基，其中烷基芳基是如本文所定义的。

‘取代的芳基烷氧基’意指-O-烷基芳基，其中烷基芳基是如本文所定义的；且存在的任何芳基自身可以被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、氰基、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C_1-4卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。

‘叠氮基’意指基团-N₃。

‘氨基甲酰基或酰胺基’意指基团-C(O)NH₂。

‘取代的氨基甲酰基或取代的酰胺基’意指基团-C(O)N(R⁵³)₂，其中各自R⁵³独立地是

●H、C₁-C₈烷基、C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、芳烷基、5-10元杂芳基和杂芳烷基；或

●被卤素或羟基取代的C₁-C₈烷基；或

●C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、芳烷基、5-10元杂芳基或杂芳烷基，它们各自被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代；

条件是至少一个R⁵³不是H。

示例性的‘取代的酰胺基/氨基甲酰基’是-C(O)NR^53’-C₁-C₈烷基、-C(O)NR^53’-(CH₂)_t(C₆-C₁₀芳基)、-C(O)N^53’-(CH₂)_t(5-10元杂芳基)、-C(O)NR^53’-(CH₂)_t(C₃-C₁₀环烷基)和-C(O)NR^53’-(CH₂)_t(4-10元杂环烷基)，其中t是0-4的整数，R^53’各自独立地表示H或C₁-C₈烷基，其存在的任何芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基自身可以被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。

‘羧基’意指基团-C(O)OH。

‘环烷基’意指具有3-10个碳原子的环状非芳族烃基。这种环烷基作为实例包括单环结构，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。

‘取代的环烷基’意指如上述定义的被一个或多个本文“取代的”的定义中所述的那些基团取代的环烷基，且具体地意指具有一个或多个取代基，例如1-5个取代基，且特别是1-3个取代基，具体地是1个取代基的环烷基。

‘氰基’意指基团-CN。

‘卤素’意指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)和碘(I)。具体的卤素是氟或氯。

‘杂’在用于描述化合物或存在于化合物上的基团时意指化合物或基团上的一个或多个碳原子已经被氮、氧或硫杂原子替代。杂可以应用于上述任意烃基，例如烷基，例如杂烷基，环烷基，例如杂环烷基，芳基，例如杂芳基，环烯基，例如环杂烯基等，其具有1-5个且特别是1-3个杂原子。

‘杂芳基’意指芳族环结构，其为单环或多环的，包括一个或多个杂原子和5-12个环成员，更通常的是5-10个环成员。杂芳基可以是，例如5元或6元单环或由稠合的5或6元环形成的双环结构，或作为其它实例是两个稠合5元环。环各自可以包含至多4个一般地选自氮、硫和氧的杂原子。一般地，杂芳基环含有至多4个杂原子，更一般地是3个杂原子，更通常的是至多2个、例如单个杂原子。在一个实施方案中，杂芳基环包含至少一个环氮原子。在咪唑或吡啶的情况下，杂芳基环上的氮原子可以是碱性的，或在吲哚或吡咯氮的情况下基本上是非碱性的。一般而言，存在于杂芳基上的碱性氮原子，包括环的任意氨基取代基的数量小于5。5元单环杂芳基的实例包括但不限于吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、呋咱、

唑、

二唑、

三唑、异

唑、噻唑、异噻唑、吡唑、三唑和四唑基。6元单环杂芳基的实例包括但不限于吡啶、吡嗪、哒嗪、嘧啶和三嗪。含有与另一个5元环稠合的5元环的双环杂芳基的具体实例包括但不限于咪唑并噻唑和咪唑并咪唑。含有与另一个5元环稠合的6元环的双环杂芳基的具体实例包括但不限于苯并呋喃、苯并噻吩、苯并咪唑、苯并唑、异苯并

唑、苯并异

唑、苯并噻唑、苯并异噻唑、异苯并呋喃、吲哚、异吲哚、异吲哚酮、吲嗪、二氢吲哚、异二氢吲哚、嘌呤(例如腺嘌呤、鸟嘌呤)、吲唑、吡唑并嘧啶、三唑并嘧啶、苯并间二氧杂环戊烯和吡唑并吡啶基。包含两个稠合的6元环的双环杂芳基的具体实例包括但不限于喹啉、异喹啉、色满、二氢苯并噻喃、色烯、异色烯、色满、异色满、苯并二

烷、喹嗪、苯并

嗪、苯并二嗪、吡啶并吡啶、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、酞嗪、萘啶和蝶啶基。具体杂芳基是衍生自噻吩、吡咯、苯并噻吩、苯并呋喃、吲哚、吡啶、喹啉、咪唑、

唑和吡嗪这样的杂芳基。

具有杂原子的包含取代的有代表性的芳基实例包括如下：

其中W各自选自C(R⁵⁴)₂、NR⁵⁴、O和S；且Y各自选自羰基、NR⁵⁴、O和S；且R⁵⁴独立地是氢、C₁-C₈烷基、C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基和5-10元杂芳基。

代表性的杂芳基的实例包括如下：

其中Y各自选自羰基、N、NR⁵⁵、O和S；且R⁵⁵独立地是氢、C₁-C₈烷基、C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基和5-10元杂芳基。

本文所用的术语‘杂环烷基’意指4-10元稳定的杂环非芳族环和/或包括含有一个或多个独立地选自N、O和S的杂原子的与之稠合的环。稠合杂环系可以包括碳环并且仅需要包括一个杂环。杂环的实例包括但不限于吗啉、哌啶(例如1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基和4-哌啶基)、吡咯烷(例如1-吡咯烷基、2-吡咯烷基和3-吡咯烷基)、吡咯烷酮、吡喃(2H-吡喃或4H-吡喃)、二氢噻吩、二氢吡喃、二氢呋喃、二氢噻唑、四氢呋喃、四氢噻吩、二烷、四氢吡喃(例如4-四氢吡喃基)、咪唑啉、咪唑烷酮、

唑啉、噻唑啉、2-吡唑啉、吡唑烷、哌嗪和N-烷基哌嗪类例如N-甲基哌嗪。其它实例包括硫吗啉及其S-氧化物和S，S-二氧化物(特别是硫吗啉)。其它实例包括氮杂环丁烷、哌啶酮、哌嗪酮和N-烷基哌啶类例如N-甲基哌啶。杂环烷基的具体实例如下列示例性实施例所示：

其中W各自选自CR⁵⁶、C(R⁵⁶)₂、NR⁵⁶、O和S；且Y各自选自NR⁵⁶、O和S；且R⁵⁶独立地是氢、C₁-C₈烷基、C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、5-10元杂芳基。这些杂环烷基环可以任选被一个或多个基团取代，所述基团选自酰基、酰基氨基、酰氧基(-O-酰基或-OC(O)R²⁰)、烷氧基、烷氧羰基、烷氧羰基氨基(-NR”-烷氧羰基或-NH-C(O)-OR²⁷)、氨基、取代的氨基、氨基羰基(酰胺基或-C(O)-NR”₂)、氨基羰基氨基(-NR”-C(O)-NR”₂)、氨基羰基氧基(-O-C(O)-NR”₂)、氨基磺酰基、磺酰基氨基、芳基、-O-芳基、叠氮基、羧基、氰基、环烷基、卤素、羟基、硝基、硫氢基、-S-烷基、-S-芳基、-S(O)-烷基、-S(O)-芳基、-S(O)₂-烷基和-S(O)₂-芳基。取代基包括提供例如内酰胺和脲衍生物的羰基或硫羰基。

‘羟基’意指基团-OH。

‘硝基’意指基团-NO₂。

‘取代的’意指基团，其中一个或多个氢原子各自独立地被相同或不同取代基替代。典型的取代基可以选自：

卤素、-R⁵⁷、-O^-、＝O、-OR⁵⁷、-SR⁵⁷、-S^-、＝S、-NR⁵⁷R⁵⁸、＝NR⁵⁷、-CCl₃、-CF₃、-CN、-OCN、-SCN、-NO、-NO₂、＝N₂、-N₃、-S(O)₂O^-、-S(O)₂OH、-S(O)₂R⁵⁷、-OS(O₂)O^-、-OS(O)₂R⁵⁷、-P(O)(O^-)₂、-P(O)(OR⁵⁷)(O^-)、-OP(O)(OR⁵⁷)(OR⁵⁸)、-C(O)R⁵⁷、-C(S)R⁵⁷、-C(O)OR⁵⁷、-C(O)NR⁵⁷R⁵⁸、-C(O)O^-、-C(S)OR⁵⁷、-NR⁵⁹C(O)NR⁵⁷R⁵⁸、-NR⁵⁹C(S)NR⁵⁷R⁵⁸、-NR⁶⁰C(NR⁵⁹)NR⁵⁷R⁵⁸和-C(NR⁵⁹)NR⁵⁷R⁵⁸；

其中R⁵⁷、R⁵⁸、R⁵⁹和R⁶⁰各自独立地是：

●氢、C₁-C₈烷基、C₆-C₁₀芳基、芳基烷基、C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、5-10元杂芳基、杂芳基烷基；或

●被卤素或羟基取代的C₁-C₈烷基；或

●C₆-C₁₀芳基、5-10元杂芳基、C₆-C₁₀环烷基或4-10元杂环烷基，其被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基所取代。

在一个具体的实施方案中，取代的基团被一个或多个取代基，特别是1-3个取代基，特别是1个取代基取代。

在另一个具体的实施方案中，取代基选自卤素、氰基、硝基、三氟甲基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR”’SO₂R”、-SO₂NR”R”’、-C(O)R”、-C(O)OR”、-OC(O)R”、-NR”’C(O)R”、-C(O)NR” R”’、-NR” R”’、-(CR”’ R”’)_mOR”’，其中，R”各自独立地选自H、C₁-C₈烷基、-(CH₂)_t(C₆-C₁₀芳基)、-(CH₂)_t(5-10元杂芳基)、-(CH₂)_t(C₃-C₁₀环烷基)和-(CH₂)_t(4-10元杂环烷基)，其中t是0-4的整数；且

●存在的任何烷基自身可以被卤素或羟基取代；且

●存在的任何芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基自身可以被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。R”各自独立地表示H或C₁-C₆烷基。

‘取代的硫烷基’意指基团-SR⁶¹，其中R⁶¹选自：

●C₁-C₈烷基、C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、芳烷基、5-10元杂芳基和杂芳烷基；或

●被卤素、取代的或未取代的氨基或羟基取代的C₁-C₈烷基；或

●C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、芳烷基、5-10元杂芳基或杂芳烷基，它们各自被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。

示例性的‘取代的硫烷基’是-S-(C₁-C₈烷基)和-S-(C₃-C₁₀环烷基)、-S-(CH₂)_t(C₆-C₁₀芳基)、-S-(CH₂)_t(5-10元杂芳基)、-S-(CH₂)_t(C₃-C₁₀环烷基)和-S-(CH₂)_t(4-10元杂环烷基)，其中t是0-4的整数且存在的任何芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基自身可以被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。术语‘取代的硫烷基’包括如下定义的基团‘烷基硫烷基’或‘烷硫基’、‘取代的烷硫基’或‘取代的烷基硫烷基’、‘环烷基硫烷基’或‘环烷硫基’、‘取代的环烷基硫烷基’或‘取代的环烷硫基’、‘芳基硫烷基’或‘芳硫基’和‘杂芳基硫烷基’或‘杂芳硫基’。

‘烷硫基’或‘烷基硫烷基’意指基团-SR⁶²，其中R⁶²是C₁-C₈烷基或如本文所定义的基团。代表性的实例包括但不限于甲硫基、乙硫基、丙硫基和丁硫基。

‘取代的烷硫基’或‘取代的烷基硫烷基’意指基团-SR⁶³，其中R⁶³是C₁-C₈烷基，其被卤素、取代的或未取代的氨基或羟基取代。

‘环烷硫基’或‘环烷基硫烷基’意指基团-SR⁶⁴，其中R⁶⁴是C₃-C₁₀环烷基或如本文所定义的基团。代表性的实例包括但不限于环丙硫基、环己硫基和环戊硫基。

‘取代的环烷硫基’或‘取代的环烷基硫烷基’意指基团-SR⁶⁵，其中R⁶⁵是C₃-C₁₀环烷基，其被卤素、取代的或未取代的氨基或羟基取代。

‘芳硫基’或‘芳基硫烷基’意指基团-SR⁶⁶，其中R⁶⁶是如本文所定义的C₆-C₁₀芳基。

‘杂芳硫基’或‘杂芳基硫烷基’意指基团-SR⁶⁷，其中R⁶⁷是如本文所定义的5-10元杂芳基。

‘取代的亚磺酰基’意指基团-S(O)R⁶⁸，其中R⁶⁸选自：

●C₁-C₈烷基、C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、芳烷基、5-10元杂芳基和杂芳烷基；或

●被卤素、取代的或未取代的氨基或羟基取代的C₁-C₈烷基；或

●C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、芳烷基、5-10元杂芳基或杂芳烷基，其被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。

示例性的‘取代的亚磺酰基’是-S(O)-(C₁-C₈烷基)和-S(O)-(C₃-C₁₀环烷基)、-S(O)-(CH₂)_t(C₆-C₁₀芳基)、-S(O)-(CH₂)_t(5-10元杂芳基)、-S(O)-(CH₂)_t(C₃-C₁₀环烷基)和-S(O)-(CH₂)_t(4-10元杂环烷基)，其中t是0-4的整数且存在的任何芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基自身可以被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。术语取代的亚磺酰基包括如本文所定义的基团‘烷基亚磺酰基’、‘取代的烷基亚磺酰基’、‘环烷基亚磺酰基’、‘取代的环烷基亚磺酰基’、‘芳基亚磺酰基’和‘杂芳基亚磺酰基’。

‘烷基亚磺酰基’意指基团-S(O)R⁶⁹，其中R⁶⁹是如本文所定义的C₁-C₈烷基。代表性的实例包括但不限于甲基亚磺酰基、乙基亚磺酰基、丙基亚磺酰基和丁基亚磺酰基。

‘取代的烷基亚磺酰基’意指基团-S(O)R⁷⁰，其中R⁷⁰是如本文所定义的C₁-C₈烷基，其被卤素、取代的或未取代的氨基或羟基取代。

‘环烷基亚磺酰基’意指基团-S(O)R⁷¹，其中R⁷¹是C₃-C₁₀环烷基或如本文所定义的基团。代表性的实例包括但不限于环丙基亚磺酰基、环己基亚磺酰基和环戊基亚磺酰基。

‘取代的环烷基亚磺酰基’意指基团-S(O)R⁷²，其中R⁷²是C₃-C₁₀环烷基，其被卤素、取代的或未取代的氨基或羟基取代。

‘芳基亚磺酰基’意指基团-S(O)R⁷³，其中R⁷³是如本文所定义的C₆-C₁₀芳基。

‘杂芳基亚磺酰基’意指基团-S(O)R⁷⁴，其中R⁷⁴是如本文所定义的5-10元杂芳基。

‘取代的磺酰基’意指基团-S(O)₂R⁷⁵，其中R⁷⁵选自：

●C₁-C₈烷基、C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、芳烷基、5-10元杂芳基和杂芳烷基；或

●被卤素、取代的或未取代的氨基或羟基取代的C₁-C₈烷基；或

●C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、芳烷基、5-10元杂芳基或杂芳烷基，它们各自被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。

示例性的‘取代的磺酰基’是-S(O)₂-(C₁-C₈烷基)和-S(O)₂-(C₃-C₁₀环烷基)、-S(O)₂-(CH₂)_t(C₆-C₁₀芳基)、-S(O)₂-(CH₂)_t(5-10元杂芳基)、-S(O)₂-(CH₂)_t(C₃-C₁₀环烷基)和-S(O)₂-(CH₂)_t(4-10元杂环烷基)，其中t是0-4的整数且存在的任何芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基自身可以被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。术语取代的磺酰基包括基团烷基磺酰基、取代的烷基磺酰基、环烷基磺酰基、取代的环烷基磺酰基、芳基磺酰基和杂芳基磺酰基。

‘烷基磺酰基’意指基团-S(O)₂R⁷⁶，其中R⁷⁶是如本文所定义的C₁-C₈烷基。代表性的实例包括但不限于甲基磺酰基、乙基磺酰基、丙基磺酰基和丁基磺酰基。

‘取代的烷基磺酰基’意指基团-S(O)₂R⁷⁷，其中R⁷⁷是如本文所定义的C₁-C₈烷基，其被卤素、取代的或未取代的氨基或羟基取代。

‘环烷基磺酰基’意指基团-S(O)₂R⁷⁸，其中R⁷⁸是C₃-C₁₀环烷基或如本文所定义的基团。代表性的实例包括但不限于环丙基磺酰基、环己基磺酰基和环戊基磺酰基。

‘取代的环烷基磺酰基’意指基团-S(O)₂R⁷⁹，其中R⁷⁹是C₃-C₁₀环烷基，其被卤素、取代的或未取代的氨基或羟基取代。

‘芳基磺酰基’意指基团-S(O)₂R⁸⁰，其中R⁸⁰是如本文所定义的C₆-C₁₀芳基。

‘杂芳基磺酰基’意指基团-S(O)₂R⁸¹，其中R⁸¹是如本文所定义的5-10元杂芳基。

‘磺基’或‘磺酸’意指基团例如-SO₃H。

‘取代的磺基’或’磺酸酯‘意指基团-S(O)₂OR⁸²，其中R⁸²选自：

●C₁-C₈烷基、C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、芳烷基、5-10元杂芳基和杂芳烷基；或

●被卤素、取代的或未取代的氨基或羟基取代的C₁-C₈烷基；或

●C₃-C₁₀环烷基、4-10元杂环烷基、C₆-C₁₀芳基、芳烷基、5-10元杂芳基或杂芳烷基，它们各自被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。

示例性的‘取代的磺基’或’磺酸酯‘是-S(O)₂-O-(C₁-C₈烷基)和-S(O)₂-O-(C₃-C₁₀环烷基)、-S(O)₂-O-(CH₂)_t(C₆-C₁₀芳基)、-S(O)₂-O-(CH₂)_t(5-10元杂芳基)、-S(O)₂-O-(CH₂)_t(C₃-C₁₀环烷基)和-S(O)₂-O-(CH₂)_t(4-10元杂环烷基)，其中t是0-4的整数且存在的任何芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基自身可以被未取代的C₁-C₄烷基、卤素、未取代的C₁-C₄烷氧基、未取代的C₁-C₄卤代烷基、未取代的C₁-C₄羟基烷基或未取代的C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。

‘硫氢基’意指基团-SH。

有机合成领域普通技术人员可以认识到在稳定的、化学上切实可行的杂环中，无论它是否是芳族的，其上杂原子的最大数量是根据环的大小、不饱和度和杂原子的化合价确定。一般而言，杂环可以具有1-4个杂原子，条件是杂环在化学上切实可行且稳定。

‘可药用的’意指由联邦或州政府管理部门或非美国的国家相应部门批准或可批准的或美国药典或其它一般公认药典中所列应用于动物且更具体地说是人的。

‘可药用盐’意指可药用的并且具有母体化合物所需的药理学活性的本发明化合物的盐。特别地，这种盐是无毒性的，可以是无机或有机酸加成的盐和碱加成的盐。具体而言，这种盐包括：(1)与无机酸形成的酸加成的盐，所述无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或与有机酸形成的酸加成盐，所述有机酸例如乙酸、丙酸、己酸、环戊丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙-二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基双环[2.2.2]-辛-2-烯-1-甲酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等；或(2)当母体化合物上存在的酸性质子被金属离子例如碱金属离子、碱土金属离子或铝离子替代时形成的盐；或与有机碱形成的配位化合物，所述有机碱例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、N-甲基葡糖胺等。仅作为实例，盐还包括钠、钾、钙、镁、铵、四烷基铵等盐；且当化合物包含碱性官能团时，无毒性有机或无机酸的盐例如是盐酸盐、氢溴酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、乙酸盐、马来酸盐、草酸盐等。术语“可药用的阳离子”意指酸性官能团的可接受阳离子抗衡离子。这种阳离子以钠、钾、钙、镁、铵、四烷基铵阳离子等作为例子。

‘可药用的溶媒’意指与本发明化合物一起施用的稀释剂、辅剂、赋形剂或载体。

‘前体药物’意指具有可裂解基团并且通过溶剂解或在生理条件下在体内变成药物活性的本发明化合物的化合物，包括本发明化合物的衍生物。这种实例包括但不限于胆碱酯衍生物等、N-烷基吗啉酯类等。

‘溶剂化物’意指通常通过溶剂解反应与溶剂结合的化合物形式。这种物理结合包括氢键合。常规的溶剂包括水、乙醇、乙酸等。可以将本发明化合物制备成例如晶型并且可以溶剂化或水化。适合的溶剂化物包括可药用的溶剂化物，例如水合物，且还包括化学计算的溶剂化物和非化学计算的溶剂化物。在一些情况中，溶剂化物能够在例如一个或多个溶剂分子被掺入结晶固体的晶格时分离。‘溶剂化物’包括溶液相和可分离的溶剂化物。有代表性的溶剂化物包括水合物、乙醇化物和甲醇化物。

‘个体’包括人。术语‘人’、‘患者’和‘个体’在本文中可互换使用。

‘治疗有效量’意指对个体施用治疗疾病时足以对这种疾病进行治疗的化合物量。“治疗有效量”可以根据化合物、疾病及其严重性和所治疗个体年龄、体重等的不同而改变。

‘预防’意指降低获得或发生疾病或障碍的风险(即导致可能接触病原体的个体的至少一种疾病临床症状不发生，或在疾病发作之前预先处置所述的疾病)。

术语‘预防’涉及‘预防’并且意指措施或方法，其目的在于预防而非治疗或治愈疾病。预防措施的非限制性实例可以包括给予疫苗；对处于因例如固定而导致血栓形成风险的住院患者施用低分子量肝素；和在访问疟疾是地方病或接触疟疾风险高的地理区域前施用抗疟药例如氯喹。

在一个实施方案中，‘治疗’任意疾病或障碍意指改善疾病或障碍(即阻止疾病或减轻其至少一种临床症状表现、程度或严重性)。在另一个实施方案中，‘治疗’意指改善至少一种物理参数，它可能无法被个体辨别。在另一个实施方案中，‘治疗’意指在身体上(例如稳定可辨别的症状)、生理上(例如稳定身体参数)调节疾病或障碍或它们两者。在另一个实施方案中，‘治疗’涉及使疾病进程减缓。

本文所用的术语‘本发明的化合物’和等效表述意指包括如上所述式(e)的化合物，如果上下文有此允许，则该表述包括可药用盐、化合物的溶剂化物和可药用盐的溶剂化物，例如水合物。类似地，如果上下文有此允许，则涉及的中间体，无论它们自身是否是请求保护的，均意指包括其盐和溶剂化物。

当本文涉及范围时，例如但不限于C₁-C₈烷基，引述的范围应被视为代表该范围中每个成员。

本发明化合物的其它衍生物在其酸和酸衍生物形式下均具有活性，而在酸敏感形式中通常提供在哺乳动物生物体中溶解性、组织相容性或延缓释放的优点(参见Bundgard，H.，Design of Prodrugs，pp.7-9，21-24，Elsevier，Amsterdam 1985)。前体药物包括本领域技术人员众所周知的酸衍生物，例如通过使母体酸与适合的醇反应制备的酯类化合物或通过使母体酸化合物与取代的或未取代的胺或酸酐类化合物或混合酸酐类化合物反应制备的酰胺类化合物。简单的脂族或芳族酯类化合物、酰胺类化合物和衍生自本发明化合物侧链上的酸性基团的酸酐类化合物是特别有用的前体药物。在一些情况中，期望制备双酯类前体药物，例如(酰氧基)烷基酯类化合物或((烷氧羰基)氧基)烷基酯类化合物。特别地，这种前体药物是本发明化合物的C₁-C₈烷基、C₂-C₈链烯基、芳基、C₇-C₁₂取代的芳基和C₇-C₁₂芳基烷基酯类化合物。

本文所用的术语‘同位素变体’意指包含非天然比例的构成这种化合物的一种或多种原子上的同位素的化合物。例如，化合物的‘同位素变体’可以包含一种或多种非放射性同位素，例如氘(²H或D)、碳-13(¹³C)、氮-15(¹⁵N)等。可以理解在进行这种同位素取代的化合物中，下列原子如果存在则可以改变，使得例如任意的氢可以是²H/D，任意的碳可以是¹³C，或任意的氮可以是¹⁵N，并且这种原子的存在和位置可以在本领域技术人员范围内确定。同样，本发明可以包括使用放射性同位素制备同位素变体，例如，其中得到的化合物可以用于药物和/或底物组织分布研究。就其易于掺入和易于检测方式而言，放射性同位素氚，即³H和碳-14，即¹⁴C特别用于该目的。此外，可以制备被正电子发射同位素例如¹¹C、¹⁸F、¹⁵O和¹³N取代的化合物，并且可以用于正电子发射体层摄影(PET)研究，以便检验底物受体占据情况。

指定本文提供本发明化合物的所有同位素变体，无论是否是放射性的均包括在本发明范围内。

还应理解具有相同分子式、但性质或其原子键合顺序或其原子空间排列不同的化合物称作‘异构体’。在其原子空间排列上不同的异构体称作‘立体异构体’。

彼此非镜像的立体异构体称作‘非对映异构体’，且彼此不能重叠的镜像称作‘对映异构体’。当化合物具有不对称中心时，例如它与四种不同基团键合，对映异构体对是可能的。对映异构体的特征可以在于其不对称中心的绝对构型并且描述为Cahn和Prelog的R-和S-顺位规则，或以分子沿着偏振光平面旋转的方式描述且命名为右旋或左旋(即分别为(+)或(-)-异构体)。手性化合物可以作为其各对映异构体或混合物存在。包含等比例对映异构体的混合物称作‘外消旋混合物’。

‘互变异构体’意指具体化合物结构可互变形式和在氢原子和电子替代方面可变的化合物。因此，两种结构可以通过π电子和原子(通常是H)运动处于平衡。例如，烯醇类化合物和酮类化合物是互变异构体，因为它们通过用酸或碱处理快速互变。互变异构现象的另一个实例是苯基硝基甲烷的酸-和硝基-形式，它们同样通过用酸或碱处理形成。此类互变异构体酌情包含于本文所公开的本发明化合物之内。

互变异构体形式可以与所关注化合物的最佳化学反应性和生物活性相关。

本发明的化合物可以具有一个或多个不对称中心；这种化合物由此可以作为其各(R)-或(S)-立体异构体或混合物生产。

除非另作陈述，否则本说明书和权利要求中描述或命名的具体化合物包括其各对映异构体和混合物、外消旋物或其它。用于测定立体化学和分离立体异构体的方法是本领域众所周知的。

化合物

本发明是基于以下发现：MAPKAPK5在导致MMP1表达的通路中发挥作用，MAPKAPK5活性的抑制剂如本发明化合物可用于治疗涉及MMP活性的异常高表达的疾病。

本发明化合物可以一般性地描述为[1.2.4]三唑并[1，5-a]吡嗪类和咪唑并[1，2-a]吡嗪类，其在5位被芳基或杂芳基取代，在8位被杂芳基氨基取代。

本发明化合物可以表现出较低的毒性、良好的吸收、良好的半衰期、良好的溶解度、蛋白结合亲和力低、较少的药物-药物间相互作用和良好的代谢稳定性。在特定的方面，本发明化合物显示了令人意外的显著的药理学性质的改善，尤其是改善的效力和改善的耐受性。

更具体而言，本发明涉及式Ia或Ib的本发明化合物：

其中

W、W’、Y和Y’各自独立地是CR^2a或N；条件是W、W’、Y和Y’中的不超过两个可以同时是N；

X是N或CH；

L选自单键、-CO-、-SO-、-SO₂-、-N(R^2c)CO-和-N(R^2c)SO₂-；

环P是取代或未取代的下述结构：

R¹是H，或者取代或未取代的C₁-C₆烷基；

R^2a各自独立的选自H、取代或未取代的C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、氰基和卤素；

R^2c各自选自H和C₁-C₆烷基；

R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基；m1、m2和m3各自独立地是1或2；且

R³选自取代或未取代的C₁-C₆烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基和取代或未取代的杂芳基。

在一项实施方案中，就式Ia或式Ib的本发明化合物而言，R¹是H、Me、Et、i-Pr或CF₃。

在一项实施方案中，就式Ia或式Ib的本发明化合物而言，R¹是H。

在一项实施方案中，就式Ia或式Ib的本发明化合物而言，L是单键、-CO-或-N(R^2c)CO-。

在一个特定的实施方案中，就式Ia或式Ib的本发明化合物而言，L是单键。

在一项实施方案中，就式Ia或式Ib的本发明化合物而言，R¹是Me、Et、n-Pr或i-Pr。

在一项实施方案中，就式Ia或式Ib的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’各自独立地是CR^2a。

在一项实施方案中，就式Ia或式Ib的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’其中一个是N且其余的独立地是CR^2a。

在一项实施方案中，就式Ia或式Ib的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’其中两个是N，且其余的独立地是CR^2a。

在一个特定的实施方案中，就式Ia或式Ib的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’各自独立地是CH。

在一项实施方案中，就式Ia或式Ib的本发明化合物而言，W、W’和Y各自独立地是CH；且Y’是N。

在一项实施方案中，就式Ia或式Ib的本发明化合物而言，W和W’各自独立地是CH；且Y和Y’各自是N。

在一项实施方案中，就式Ia的本发明化合物而言，化合物是式IIa、IIb、IIc或IId：

其中X、L和环P如式Ia所定义；R^2a各自独立地选自H、取代或未取代的C₁-C₆烷基、取代或未取代的C₁-C₆烷氧基、氰基和卤素；且R³独立地选自取代或未取代的芳基和取代或未取代的杂芳基。

在其他实施方案中，就式Ib的本发明化合物而言，化合物是式IIe、IIf或IIg：

其中L和环P如式Ib所定义；R^2a各自独立地选自H、取代或未取代的C₁-C₆烷基、取代或未取代的C₁-C₆烷氧基、氰基和卤素；且R³独立地选自取代或未取代的芳基和取代或未取代的杂芳基。

在一项实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，每个R^2a是H。

在一项实施方案中，就式I-IIg的任何一项的本发明化合物而言，每个R^2a选自Me、Et、Pr、iso-Pr、Cl、F、CN、OMe和CF₃。

在一项实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，L是单键。

在一项实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，L是-CO-或-NHCO-。

在一项实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，环P是取代或未取代的下述结构：

并且其中R^2d和m1如式I所定义。

在一项实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，R^2a是H、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆卤代烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氰基或卤素。

在另一项其他实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，一个R^2a选自Me、Et、Pr、iso-Pr、Cl、F、CN、OMe和CF₃，且其余的是H。

在一项实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’、X、L、环P、R¹、R^2a、R^2c和R^2d各自如上面的图中任一项所述，且R³选自取代或未取代的芳基。

在一项实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’、X、L、环P、R¹、R^2a、R^2c和R^2d各自如上面的图中任一项所述，且R³是苯基，其任选地被卤素、氰基、未取代的C₁-C₆烷氧基或酰胺基取代，所述酰胺基任选地被未取代的C₁-C₆烷基取代。

在其他实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’、X、L、环P、R¹、R^2a、R^2c和R^2d各自如上面的图中任一项所述，且R³是苯基，其任选地被F、Cl、Br、氰基、OMe、OEt、On-Pr、Oi-Pr或酰胺基取代，所述酰胺基任选地被Me、Et、n-Pr或i-Pr取代。

在另一项实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’、X、L、环P、R¹、R^2a、R^2c和R^2d各自如上面的图中任一项所述，且R³选自取代或未取代的杂芳基。

在其他实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’、X、L、环P、R¹、R^2a、R^2c和R^2d各自如上面的图中任一项所述，且R³选自苯基、吡啶基、吲哚基、异吲哚基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、

唑基和噻唑基，所述基团各自可以是未取代的或被羟基、氰基、卤素、或酰胺基取代，所述酰胺基任选地被未取代的C₁-C₆烷基取代。

在另一项其他实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’、X、L、环P、R¹、R^2a、R^2c和R^2d各自如上面的图中任一项所述，且R³选自苯基、吡啶基、吲哚基、异吲哚基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、

唑基和噻唑基，所述基团各自可以是未取代的或被羟基、氰基、F、Cl、Br或酰胺基取代，所述酰胺基任选地被Me、Et、n-Pr、i-Pr取代。

在一项实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’、X、L、环P、R¹、R^2a、R^2c和R^2d各自如上面的图中任一项所述，且R³是

且A¹、A²和A³各自独立地选自S、O、N、NR^3a和CR^3a；R^3a各自独立地是H或取代或未取代的C₁-C₆烷基；且R^3b是CONH₂、CONHMe或CN。

在一项实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’、X、L、环P、R¹、R^2a、R^2c和R^2d各自如上面的图中任一项所述，且R³是

在一项实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’、X、L、环P、R¹、R^2a、R^2c和R^2d各自如上面的图中任一项所述，且R³是

在一项实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’、X、L、环P、R¹、R^2a、R^2c和R^2d各自如上面的图中任一项所述，且R³选自

在一项实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’、X、L、环P、R¹、R^2a、R^2c和R^2d各自如上面的图中任一项所述，且R³是

且其中下标m选自0、1、2、3和4，且R^3d各自独立地是取代或未取代的C₁-C₆烷基或卤素。

在一项实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’、X、L、环P、R¹、R^2a、R^2c和R^2d各自如上面的图中任一项所述，且R³是

且其中下标m选自0、1、2、3和4，且R^3d各自独立地是取代或未取代的C₁-C₆烷基或卤素。

在一项实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’、X、L、环P、R¹、R^2a、R^2c和R^2d各自如上面的图中任一项所述，且R³是

且其中下标m选自0、1、2或3，且R^3d各自独立地是取代或未取代的C₁-C₆烷基或卤素。

在一项实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’、X、L、环P、R¹、R^2a、R^2c、R^2d和R³各自如上面的图中任一项所述；m是1或2；且R^3d各自是Me、Cl或F。

在某些实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’、X、L、环P、R¹、R^2a、R^2c、R^2d和R³各自如上面的图中任一项所述，且R^3a是C₁-C₆烷基。在另一项实施方案中，R^3a是C₁-C₄烷基。

在某些实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，W、W’、Y和Y’、X、L、环P、R¹、R^2a、R^2c、R^2d和R³各自如上面的图中任一项所述，且R^3d是C₁-C₆烷基。在另一项实施方案中，R^3d是C₁-C₄烷基。

在一项实施方案中，C₁-C₆烷基任选地被一个或多个基团(例如1-3个取代基，特别是1个取代基)所取代，所述取代基独立地选自卤素、氰基、硝基、三氟甲基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR¹⁰SO₂R⁹、-SO₂NR⁹R¹⁰、-C(O)R⁹、-C(O)OR⁹、-OC(O)R⁹、-NR¹⁰C(O)R⁹、-C(O)NR⁹R¹⁰、-NR⁹R¹⁰、-(CR¹⁰R¹¹)_mOR¹⁰，其中m是1-5的整数。

在一项实施方案中，R⁹各自独立地选自H、C₁-C₈烷基、-(CH₂)_t(C₆-C₁₀芳基)、-(CH₂)_t(C₅-C₁₀杂芳基)、-(CH₂)_t(C₃-C₁₀环烷基)和-(CH₂)_t(C₅-C₁₀杂环烷基)，其中t是0-4的整数。

在一项实施方案中，R⁹各自如上所述，并且C₁-C₆烷基可以任选地被卤素取代且任选地包含1或2个选自O、S和-N(R¹²)-的杂部分，条件是两个O原子、两个S原子或O和S原子不直接彼此相连。

在一项实施方案中，R⁹各自如上所述，并且任何所述芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基本身可以被C₁-C₄烷基、卤素、C₁-C₄烷氧基、C_1-4卤代烷基、C₁-C₄羟基烷基或C₁-C₄卤代烷氧基或羟基取代。

在一项实施方案中，R⁹各自如上所述，并且R¹⁰和R¹¹各自独立地代表H或C₁-C₆烷基；

在一项实施方案中，R⁹各自如上所述，并且R¹²和R¹³各自独立地代表H或C₁-C₄烷基；

在一项实施方案中，R¹⁰和R¹¹各自独立地代表H或C₁-C₆烷基。

在一项实施方案中，R⁹各自不是H。

在某些实施方案中，就式Ia-IIg的任何一项的本发明化合物而言，R^2a是C₁-C₆烷氧基；且所述烷氧基是-OR⁹；且R⁹如以上实施方案中任一项所述；条件是R⁹不是H。

在一项实施方案中，就式Ia的本发明化合物而言，化合物是式IIIa、IIIb或IIIc：

且X是CH或N；L是单键、-CO-或-NHCO-；环P是

且R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选地被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基。

在其他实施方案中，就式Ib的本发明化合物而言，化合物是式IIId或IIIe：

且X是CH或N；L是单键、-CO-或-NHCO-；环P是

且R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选地被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基。

在一个特定的实施方案中，就式IIIa-IIIe的任意一项的本发明化合物而言，L是单键。

在一项实施方案中，就式Ia的本发明化合物而言，化合物是式IVa、IVb或IVc：

且X是CH或N；L是单键、-CO-或-NHCO-；环P是

且R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选地被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基。

在一项实施方案中，就式Ib的本发明化合物而言，化合物是式IVd或IVe：

且X如权利要求1所述；L是单键、-CO-或-NHCO-；环P是

且R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选地被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基。

在一个特定的实施方案中，就式IVa-IVe的任意一项的本发明化合物而言，L是单键。

在一项实施方案中，就式Ia的本发明化合物而言，化合物是式Va、Vb或Vc：

且X是CH或N；L是单键、-CO-或-NHCO-；环P是

且R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选地被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基。

在一项实施方案中，就式Ib的本发明化合物而言，化合物是式Vd或Ve：

且X是CH或N；L是单键、-CO-或-NHCO-；环P是

且R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选地被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基。

在一个特定的实施方案中，就式Va-Ve的任意一项的本发明化合物而言，L是单键。

在一项实施方案中，就式Ia的本发明化合物而言，化合物是式VIa、VIb或VIc：

且X是CH或N；L是单键、-CO-或-NHCO-；环P是

且R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选地被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基。

在一项实施方案中，就式Ib的本发明化合物而言，化合物是式VId或VIe：

且X是CH或N；L是单键、-CO-或-NHCO-；环P是

且R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选地被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基。

在一个特定的实施方案中，就式VIa-VIe的任意一项的本发明化合物而言，L是单键。

在一项实施方案中，就式Ia-VIe的任意一项的本发明化合物而言，L是单键。

在一项实施方案中，就式Ia-VIe的任意一项的本发明化合物而言，L是-CO-。

在一项实施方案中，就式Ia-VIe的任意一项的本发明化合物而言，L是-NHCO-。

在一项实施方案中，就式Ia-VIe的任意一项的本发明化合物而言，R^2d是H、Me、Et、i-Pr、t-Bu、环丙基甲基或CH₂CF₃。

在一项实施方案中，就式I-VIe的任意一项的本发明化合物而言，R^2d是H、Me、i-Pr、t-Bu、CH₂CONH₂、环丙基甲基或CH₂CF₃。

在一项实施方案中，就式Ia-VIe的任意一项的本发明化合物而言，R^2d是H。

在一项实施方案中，就式Ia-VIe的任意一项的本发明化合物而言，R^2d是i-Pr。

在一项实施方案中，就式Ia-VIe的任意一项的本发明化合物而言，R^2d是t-Bu。

在一项实施方案中，就式Ia-VIe的任意一项的本发明化合物而言，R^2d是环丙基甲基。

在一项实施方案中，就式Ia-VIe的任意一项的本发明化合物而言，环P是

在一项实施方案中，就式Ia-VIe的任意一项的本发明化合物而言，环P是

在一项实施方案中，就式Ia-VIe的任意一项的本发明化合物而言，环P是

在一项实施方案中，就式Ia-VIe的任意一项的本发明化合物而言，X是CH。

在一项实施方案中，就式Ia-VIe的任意一项的本发明化合物而言，X是N。

在一项实施方案中，就式Ia或式Ib的本发明化合物而言，化合物选自表1中列出的化合物。

在一项实施方案中，就式Ia的本发明化合物而言，化合物选自：

5-(8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基)异二氢吲哚-1-酮；

4-(8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基)呋喃-2-甲酰胺；

4-(8-(4-((1S，4R)-5-叔丁基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基)呋喃-2-甲酰胺；

4-(8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基)呋喃-2-甲酰胺；

5-{8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基-氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-1H-吡唑-3-甲酸酰胺；

4-{8-(4-((1S，4S)-5-叔丁基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-苯基-氨基)咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酸酰胺；

4-{8-(6-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酸酰胺；

4-{8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基-氨基)咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基}-1H-吡啶-2-酮；

4-{8-(4-(5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.2]辛烷-2-基)苯基氨基)[1，2，4]-三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酸酰胺；

4-{8-(4-(5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.2]辛烷-2-基)苯基氨基)-咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酸酰胺；

4-{8-(4-(3-异丙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-基)苯基氨基)-咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酸酰胺；

4-{8-(4-(8-异丙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)苯基氨基)[1，2，4]-三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酸酰胺；

4-{8-(4-(3-异丙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-基)苯基氨基)[1，2，4]-三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酸酰胺；

4-{8-(4-(8-异丙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)苯基氨基)-咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酸酰胺；

5-{8-(6-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-1H-吡唑-3-甲酸酰胺；

5-{8-(4-((1S，4S)-5-叔丁基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并-[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；

5-{8-(4-((1S，4S)-5-叔丁基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基-氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-1H-吡唑-3-甲酸酰胺；和

5-{8-(6-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮。

在另一项实施方案中，就式Ib的本发明化合物而言，化合物选自：

4-(8-(3-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基)呋喃-2-甲酰胺；

4-(8-(3-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基)呋喃-2-甲酰胺；

5-(8-(3-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基)异二氢吲哚-1-酮。

在一个方面，根据本文所述的实施方案的任意一项的本发明化合物以游离碱形式存在。

在一个方面，根据本文所述的实施方案的任意一项的本发明化合物是可药用盐。

在一个方面，根据本文所述的实施方案的任意一项的本发明化合物是本发明化合物的溶剂化物。

在一个方面，根据本文所述的实施方案的任意一项的本发明化合物是本发明化合物的可药用盐的溶剂化物。

当每个实施方案所述的基团在上文一般性地分别列出时，本发明化合物包括上式中的几个或每个实施方案以及本文提供的其他式中的变量选自一个或多个对于每个变量分别指定的特定成员或基团的化合物。因此，本发明意图包括在其范围内的这类实施方案的全部组合。

在某些方面，本发明提供上式的本发明化合物的前药和衍生物。前药是本发明化合物的衍生物，其具有代谢可裂解的基团并且通过溶剂解或在生理条件下转化为本发明化合物，后者在体内是有药理学活性的。前药可以在施用于个体时是无活性的，但是在体内转化为本发明活性化合物。本文所用的“可药用前药”指的是用于本发明的化合物的前药，其在常规医学判断的范围内适合用于与患者组织接触，具有与合理的利益/风险比例相称的过分毒性、刺激、过敏反应，并且对于本发明化合物的预期用途是有效的。术语“前药”指的是在体内转化以获得用于本发明的有效化合物或其可药用盐、水合物或溶剂化物的化合物。转化可以通过多种机制来发生，例如通过在血液中水解。含有代谢可裂解基团的化合物具有以下优势：与母体化合物相比，由于代谢可裂解基团的存在，作为提高溶解度和/或吸收速率的结果，其可表现出改善的生物利用度，因此这类化合物用作前药。充分的讨论由下面文献提供：Design of Prodrugs(前药的设计)，H.Bundgaard编，Elsevier(1985)；Methods in Enzymology(酶学中的方法)；K.Widder等人编，Academic Press，42，309-396(1985)；A Textbook of Drug Design and Development(药物设计和开发课本)，Krogsgaard-Larsen和H.Bandgard编，第5章；“Design and Applications of Prodrugs(前药的设计和应用)”113-191(1991)；Advanced Drug Delivery Reviews(高等药物释放综述)，H.Bundgard，8，1-38，(1992)；J.Pharm.Sci.，77，285(1988)；Chem.Pharm.Bull.，N.Nakeya等人，32，692(1984)；Pro-drugs as Novel Delivery Systems(作为新递送系统的前药)，T.Higuchi和V.Stella，14A.C.S.Symposium Series以及Bioreversible Carriers in Drug Design(药物设计中的生物可逆性载体)，E.B.Roche编，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press，1987，将其并入本文作为参考。此类实例包括但不限于胆碱酯衍生物等、N-烷基吗啉酯等。

本发明化合物的其它衍生物在它们的酸和酸衍生物形式中都具有活性，但是酸敏感形式在哺乳动物机体中通常提供了溶解度、组织相容性或缓释的优势(参见Bundgard，H.，Design of Prodrugs(前药的设计)，第7-9页，第21-24页，Elsevier，Amsterdam 1985)。前药包括本领域从业者众所周知的酸衍生物，例如由母体酸与适合的醇反应制备的酯或者由母体酸化合物与取代的或未取代的胺反应制备的酰胺，或者酸酐或混合酸酐。衍生自本发明化合物上的酸性基团的简单的脂族或芳族酯、酰胺和酸酐是优选的前药。在某些情况下，希望制备双酯类型的前药，例如(酰基氧基)烷基酯或((烷氧基羰基)氧基)烷基酯。优选的是本发明化合物的C₁至C₈烷基、C₂-C₈链烯基、芳基、C₇-C₁₂取代的芳基和C₇-C₁₂芳基烷基酯类。

药物组合物

当用作药物时，本发明化合物通常以药物组合物的形式施用。此类组合物可以以制药领域众所周知的方法制备并且包括至少一种活性化合物。

通常，本发明化合物以药用有效量施用。化合物实际施用的量通常将由医师根据有关情况来确定，所述的情况包括所治疗的病症、所选的施用途径、施用的实际化合物、单一患者的年龄、体重和响应、患者症状的严重程度等。

本发明药物组合物可以通过多种途径施用，所述的途径包括口服、直肠、透皮、皮下、静脉内、肌内和鼻内。取决于预期释放途径，本发明化合物优选配制为可注射或口服组合物或者软膏剂、洗剂或贴剂用于透皮施用。

用于口服施用的组合物可以采用散装(bulk)液体溶液剂或混悬剂或散装粉剂的形式。但是更普遍的是组合物以单位剂型存在以便于精确给药。术语“单位剂型”指的是适合作为用于人个体和其它哺乳动物的单位剂量的物理上完全分离的单位，每个单位包含计算产生预期治疗作用的预定量的活性物质以及适合的药用赋形剂。典型的单位剂型包括液体组合物的预填充的、预测量的安瓿或注射器或者在固体组合物的情况中的丸剂、片剂、胶囊剂等。在此类组合物中，呋喃磺酸化合物通常是较小组分(约0.1至约50％重量或优选从约1至约40％重量)，剩余部分是多种介质或载体和有助于形成预期剂型的操作助剂。

适于口服施用的液体形式可以包括适合的含水或不含水的介质以及缓冲剂、混悬剂和分散剂、着色剂、矫味剂等。固体形式可以包括例如任何以下成分或类似性质的化合物：粘合剂，例如微晶纤维素、黄蓍胶或明胶；赋形剂，例如淀粉或乳糖；崩解剂，例如海藻酸、Primogel或玉米淀粉；润滑剂，例如硬脂酸镁；助流剂，例如胶体二氧化硅；甜味剂，例如蔗糖或糖精；或矫味剂，例如薄荷、水杨酸甲酯或橙味调味剂。

可注射组合物通常是基于可注射无菌盐水或磷酸盐缓冲盐水或本领域已知的其它可注射载体。如上述，在此类组合物中的活性化合物通常是较小组分，通常为约0.05至10％重量，剩余部分是可注射载体等。

透皮组合物通常配制为局部软膏剂或乳膏剂，其通常包含量为约0.01至约20％重量、优选约0.1至约20％重量、优选约0.1至约10％重量并且更优选约0.5至约15％重量的活性成分。当配制为软膏剂时，活性成分通常与石蜡或水-可混溶的软膏基质组合。可选择的是，活性成分可以与例如水包油软膏基质配制为乳膏剂。此类透皮制剂是本领域众所周知的并且通常包括另外的成分以增强皮肤穿透的活性成分或制剂的稳定性。所有此类已知的透皮制剂和成分包括在本发明范围内。

本发明化合物还可以通过透皮装置施用。因此，透皮施用可以应用贮器或多孔膜型或是固体基质种类的贴剂来完成。

用于口服可施用、可注射或局部可施用的上述组分仅是代表性的。其它物质和处理技术等在Remington’s Pharmaceutical Sciences，第17版，1985，Mack Publishing Company，Easton，Pennsylvania的第八部分提出，将其并入本文作为参考。

本发明化合物还可以以缓释形式或从缓释药物释放系统施用。代表性的缓释物质的描述可以在Remington’s Pharmaceutical Sciences中查找。

以下制剂实例说明代表性的按照本发明制备的药物组合物。但是本发明不局限于以下药物组合物。

制剂1-片剂

将本发明化合物作为干燥粉末与干燥的明胶粘合剂以约1∶2重量比混合。加入少量硬脂酸镁作为润滑剂。将混合物在压片机中制成240-270mg片剂(每片含80-90mg的活性酰胺化合物)。

制剂2-胶囊剂

将本发明化合物作为干燥粉末与淀粉稀释剂以约1∶1重量比混合。将混合物填充到250mg胶囊中(每个胶囊含125mg的活性酰胺化合物)。

制剂3-液体

将本发明化合物(125mg)与蔗糖(1.75g)和黄原胶(4mg)混合，并将所得混合物混合，通过10号目美国筛，然后与预先制备的微晶纤维素和羧甲基纤维素钠(11∶89，50mg)的水溶液混合。将苯甲酸钠(10mg)、矫味剂和着色剂用水稀释并且在搅拌下加入。然后加入足够的水以制成5mL的总体积。

制剂4-片剂

将本发明化合物作为干燥粉末与干燥的明胶粘合剂以约1∶2重量比混合。加入少量硬脂酸镁作为润滑剂。将混合物在压片机中制成450-900mg片剂(150-300mg的活性酰胺化合物)。

制剂5-注射剂

将本发明化合物溶于或悬浮于缓冲的无菌盐水可注射含水介质中，使浓度约为5mg/mL。

制剂6-局部

将硬脂醇(250g)和白凡士林(250g)在约75℃下熔融，加入溶于水(约370g)的本发明化合物(50g)、对羟基苯甲酸甲酯(0.25g)、对羟基苯甲酸丙酯(0.15g)、十二烷基硫酸钠(10g)和丙二醇(120g)的混合物，将产生的混合物搅拌直至其凝固。

治疗方法

本发明化合物作为治疗剂用于治疗哺乳动物病症，该病症源于或可归因于MMP1和/或MAPKAPK5的异常活性。因此，本发明化合物及其药物组合物作为药物用于预防和/或治疗哺乳动物(包括人)的炎性疾病。因此，正如前面所述的，本发明在其范围内包括并延伸至所述的治疗方法，以及用于这些方法的化合物和用来制备用于这些方法的药物的化合物。

在治疗方法方面，本发明提供了治疗易感或患有与细胞外基质(ECM)降解有关的病症、特别是关节炎并且更特别的是类风湿性关节炎的哺乳动物的方法，该方法包括施用有效量的本发明化合物或其药物组合物。

在另一个治疗方法方面，本发明提供了治疗易感或患有与MMP1异常细胞表达有关的病症的哺乳动物的方法，该方法包括施用治疗有效量的本发明化合物或其药物组合物。

在另一个治疗方法方面，本发明提供了治疗或预防具有异常基质金属蛋白酶活性特征的病症的方法，该方法包括施用治疗有效的基质金属蛋白酶抑制量的本发明化合物或其药物组合物。

在另一个治疗方法方面，本发明提供了治疗易感或患有疾病和障碍的哺乳动物的方法，所述的疾病和障碍由炎症介导或引起炎症，例如类风湿性关节炎和骨关节炎、心肌梗塞、多种自身免疫疾病和障碍、眼色素层炎和动脉粥样硬化；痒/瘙痒，例如银屑病；和肾障碍，该方法包括施用有效治疗病症或预防病症量的本发明化合物或其药物组合物。

本发明还涉及本发明化合物在制备用于治疗或预防通过施用促分裂原活化蛋白激酶活化蛋白激酶5的抑制剂来预防、改善或消除的病症，或具有异常胶原酶活性的病症，或与ECM降解有关的病症或选自涉及炎症的疾病的病症，最优选用于治疗类风湿性关节炎的药物中的用途。

作为本发明的进一步的方面，提供了特别在治疗或预防上述病症和疾病中用作药物的本发明化合物。本文还提供了本发明化合物在制备用于治疗或预防上述病症和疾病之一的药物中的用途。

另一方面，本发明提供了用于预防或治疗哺乳动物的病症的本发明化合物，所述病症与MMP1和/或MAPKAPK5的异常活性在病因上相关或由其引起。具体而言，本发明提供了用于治疗或预防哺乳动物(包括人)的炎性疾病的本发明化合物和/或其药物组合物。

另一方面，本发明提供了用于预防或治疗与细胞外基质(ECM)降解有关的病症的本发明化合物，特别是关节炎，更特别是类风湿性关节炎。

另一方面，本发明提供了用于预防或治疗与MMP1的异常细胞表达有关的病症的本发明化合物。

另一方面，本发明提供了用于预防或治疗特征为基质金属蛋白酶活性异常的病症的本发明化合物。

另一方面，本发明提供了用于预防或治疗由炎症介导或造成炎症的疾病和病症的本发明化合物，例如类风湿性关节炎和骨关节炎、心肌梗塞、多种自身免疫性疾病和病症、眼色素层炎和动脉粥样硬化；痒/瘙痒，例如银屑病；和肾病。

本发明方法的优选方案包括给患有具有细胞外基质降解特征的疾病病症的个体施用有效的基质金属蛋白酶抑制量的本发明化合物足够时间以降低患者细胞外基质降解的异常水平，并且优选终止负责所述降解的自身延续性进程。该方法的特别实施方案包括给患有或易感发生类风湿性关节炎的个体患者施用有效的基质金属蛋白酶抑制量的本发明化合物足够时间以分别降低或预防所述患者关节中胶原和骨降解，并且优选终止负责所述降解的自身延续性进程。

本发明化合物可以显示出较低的毒性、良好的吸收、良好的半衰期、良好的溶解度、蛋白结合亲和力低、较少的药物-药物间相互作用和良好的代谢稳定性。在特定的方面，本发明化合物显示了令人意外的显著的药理学性质的改善，尤其是改善的效力和改善的耐受性。当化合物具有任何一种或多种这类改善时，其可以对它们在本文所述的病症中的用途具有影响。例如，当化合物具有改善的效力时，可以预期所述化合物可按较低的剂量给药，由此减少任何可能的不希望的副作用的发生。类似地，当化合物具有增加的耐受性时，这有可能使所述化合物在较高浓度下给药而不引起不希望的副作用。这些效力或耐受性方面的改变预期可能造成本发明化合物的改善的治疗窗。类似地，在上文所述的其他性质方面的改善也可带来化合物潜在用途上的优点。

注射剂量水平范围为约0.1mg/kg/小时到至少10mg/kg/小时，总时间约1至约120小时并且特别是24至96小时。约0.1mg/kg至约10mg/kg或更多的预装推注剂也可以施用以获得足够的稳态水平。对于40至80kg人类患者，最大总剂量不希望超过约2g/天。

对于预防和/或治疗长期病症，例如炎性和自身免疫病症，治疗方案通常延长历经数月或数年，并且因此对于患者的方便和耐受而言优选口服给药。对于口服给药，每天1至5个并且特别是2至4个并且典型地是3个口服剂量是代表性的方案。应用这些给药模式，每个剂量提供了约0.01至约20mg/kg的本发明化合物，优选剂量是每个提供了约0.1至约10mg/kg并且特别是约1至约5mg/kg。

透皮剂量通常被选择提供与应用注射剂量所获得的血中水平相比类似或更低的血中水平。

当用于预防炎性病症的发作时，本发明化合物以上述剂量水平施用于通常在医师告知和监控下存在发生该病症风险的患者。存在发生特别病症风险的患者通常包括具有该病症家族史的那些患者，或通过遗传试验或筛查被鉴定为特别易于发生该病症的那些患者。

本发明化合物可以作为单独的活性剂施用或者它们可以与其它治疗药物组合施用，所述的其它药物包括证明具有相同或类似治疗活性并且被确定对于此类组合施用是安全和有效的其它化合物。在特定的实施方案中，两种(或多种)活性剂的联合给药可使每一种所用的剂量显著降低，从而减少所观察到的副作用。

在一项实施方案中，本发明化合物与另一种用于治疗和/或预防涉及炎症的疾病的治疗剂联合给药；具体的治疗剂包括但不限于免疫调节剂，例如硫唑嘌呤、皮质类固醇、环磷酰胺、环孢菌素A、FK506、麦考酚酸吗乙酯、OKT-3和ATG。

在一项实施方案中，本发明化合物与另一种用于治疗和/或预防类风湿性关节炎的治疗剂联合给药；具体的治疗剂包括但不限于镇痛药、非甾体类抗炎药(NSAIDS)、甾体、合成的DMARDS(例如但不限于甲氨喋呤、来氟米特、柳氮磺吡啶、金诺芬、金硫苹果酸钠、青霉胺、氯喹、羟基氯喹、硫唑嘌呤和环孢菌素)，以及生物学的DMARDS(例如但不限于英夫利昔单抗、依那西普、阿达木单抗、利妥昔单抗和阿巴他塞)。

联合给药包括向患者递送作为同一治疗方案的一部分的两种或多种治疗剂的任何手段，这对技术人员而言是很明显的。尽管两种或多种活性剂可以在单一制剂中同时给药，但这不是必须的。活性剂可以以不同的制剂和在不同的时间给药。

一般合成方法

本发明的三唑并吡嗪和咪唑并吡嗪化合物可以由易于获得的原料应用下列常规方法和操作来制备。应当理解的是给出了典型的或优选的方法条件(即反应温度、时间、反应物的摩尔比、溶剂、压力等)。除非另外说明，也可以应用其它方法条件。最优的反应条件可以取决于所用的特别反应物或溶剂而不同，但是此类条件可以由本领域技术人员通过常规优化操作确定。

另外，对于本领域技术人员显而易见的是常规保护基是必需的以防止某些官能团参与不希望的反应。用于特别官能团的适合的保护基的选择以及适合用于保护和脱保护的条件是本领域众所周知的。例如，多种保护基以及它们的引入和除去在T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protecting Groups in Organic Synthesis(有机合成中的保护基)，第二版，Wiley，New York，1991及其引用的文献中描述。

以下方法详细地呈现了制备代表性的上文列出的二环杂芳基。本发明化合物可以由已知的或可商购的原料和试剂通过有机合成领域中的技术人员来制备。

除非另外说明，所有试剂是商品级并且无需进一步纯化即可使用。将可商购的无水溶剂用于在惰性气氛下进行的反应。除非另外说明，试剂级溶剂用于所有其它情况。柱色谱法是在硅胶60(35-70μm)上进行的。薄层色谱法是应用预涂层的硅胶F-254板(厚度0.25mm)进行的。¹HNMR谱是在Bruker DPX 400NMR光谱仪(400MHz)上记录的。¹HNMR谱的化学位移(δ)是相对于四甲基硅烷(δ0.00)或适当的残留溶剂峰，即CHCl₃(δ7.27)作为内标以百万分之(ppm)报道的。峰裂数以单峰(s)、双峰(d)、三重峰(t)、四重峰(q)、多重峰(m)和宽峰(br)给出。偶合常数(J)以Hz给出。电喷雾质谱是在Micromass平台LC/MS光谱仪上获得的。所有LCMS分析所用的柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 1.7μm，2.1mm内径×50mm长(Part No.186002350))。制备HPLC：WatersXBridge Prep C18 5μm ODB 19mm内径×100mm长(Part No.186002978)。所有方法应用MeCN/H₂O梯度。H₂O包含0.1％TFA或0.1％NH₃。

实验部分所用缩写的列表

本发明化合物的合成制备

中间体合成：

中间体1a：制备3，6-二溴-吡嗪-2-基胺

一般反应流程：

步骤1：一般反应流程中所述的化合物(B)的合成方法；3，6-二溴-吡嗪-2-甲酸。

将LiOH(655mg，27mmol)加入3，6-二溴-吡嗪-2-甲酸甲酯(A)(J.Med.Chem.1969，12，285-87)(2.7g，9mmol)在THF∶水∶MeOH(18∶4.5∶4.5mL)的溶液中。将反应物在5℃搅拌30分钟，真空浓缩，溶于DCM，并用1N HCl洗涤。将有机相用无水MgSO₄干燥并真空浓缩，得到化合物(B)。¹H NMR(250MHz，CDCl₃)δ(ppm.)8.70(s，1H)。

步骤2：一般反应流程中所述的化合物(C)的合成方法；3，6-二溴-吡嗪-2-基胺.

将二苯基膦酰基叠氮化物(2.59mL，12mmol)和三乙胺(1.67mL，12mmol)加入3，6-二溴-吡嗪-2-甲酸(3.52g，12mmol)在叔丁醇(90mL)的溶液中。将反应物回流加热18小时。将反应物用水猝灭，随后真空浓缩，并溶于DCM中。将有机溶液用水和1N NaOH洗涤，用MgSO₄干燥并真空浓缩。将所得固体经硅胶垫用EtOAc过滤，随后浓缩，并将TFA∶DCM(4∶1，12mL)加入该固体，搅拌30分钟。将该溶液真空浓缩，随后用1N NaOH中和，并用DCM萃取。将有机层用无水MgSO₄干燥并真空浓缩，得到产物。¹H NMR(250MHz，DMSO-d6)δ(ppm)7.25(br s，2H)，7.68(s，1H)；m/z(APCI)254(M+H)⁺；m.p 135-139℃。

中间体1b：制备3-氯-6-溴-吡嗪-2-基-胺

或者3-氯-6-溴吡嗪-2-基-胺可以代替3，6-二溴-吡嗪-2-基胺进行使用，并按照以下流程制备：

步骤1：一般反应流程中所述的化合物(A’)的合成方法；2-氯-3，5-二溴-吡嗪

向搅拌的2-氨基-3，5-二溴吡嗪(3.21g，12.692mmol)在DCM(20mL)的冷却至0℃的溶液中一次加入TiCl₄(2.41g，12.692mmol，1.00当量)，因此获得暗红色浆状物。随后逐滴加入亚硝酸叔丁基酯(2.62g，25.385mmol，2.00当量)，使得该溶液变为亮黄色。随后移去冰浴，并将该反应物放置至室温。加入更多TiCl₄(1.50g，1.2当量)，并将该混合物再搅拌一小时。此时形成了橙色溶液，且LC-MS显示起始原料全部转化为离子化非常微弱的所需产物。向该反应物中加入水(100mL)，形成乳状液。加入DCM(50mL)，并分离DCM层，并将水层再次用DCM(3x50mL)萃取直至DCM层无色。合并DCM层，用盐水洗涤并用无水Na₂SO₄干燥，除去溶剂后得到化合物A’(2.81g，82％)，为橙色油状物，其像这样用于以下步骤。

步骤2：一般反应流程中所述的化合物(B’)的合成方法；3-氯-6-溴吡嗪-2-基胺

将前一步骤所述的化合物A’(9.5g，37.55mmol)悬浮于浓NH₄OH(60mL)中，并将所得混合物在高压釜中加热至80℃，通常过夜。随后将反应容器缓慢冷却至室温，随后再在冰浴中冷却，使所需物质沉淀。将该固体过滤分离，用环己烷洗涤，干燥后得到标题化合物B’(5g)，为83/17的位置异构体混合物。将该混合物随后经柱色谱纯化。M+H+，m/z＝209

中间体2：5，8-二溴-咪唑并[1，2-a]吡嗪

将溴乙醛二乙基缩醛(49mL，326mmol)和48％氢溴酸加热至回流持续1.5小时，随后倒入丙-2-醇(600mL)中，并用NaHCO₃猝灭。过滤后，将3，6-二溴吡嗪-2-基胺(41.34g，163mmol)加入该溶液，并回流加热过夜。冷却该反应物并真空除去溶剂，随后加入NaHCO₃水溶液，并用EtOAc萃取。将有机相用无水MgSO₄干燥，过滤，并真空浓缩，得到褐色固体。¹H NMR(250MHz，CDCl₃)δ(ppm.)7.86(s，1H)，7.93-7.94(d，1H)，7.98-7.99(d，1H)；m/z(APCI)278(M+H)⁺；m.p 132-135℃。

中间体3：5，8-二溴-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪

步骤1：N′-(3，6-二溴-吡嗪-2-基)-N，N-二甲基甲脒(D)

将3，6-二溴-吡嗪-2-基胺(15.37g，60.80mmol)和N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(10.1mL，76.00mmol)的混合物悬浮于乙醇(150mL)中，回流2小时。将该反应混合物真空蒸发，得到标题化合物。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ(ppm)3.20(s，3H)，3.21(s，3H)，7.93(s，1H)，8.48(s，1H).LCMS：Rt 3.81min(99.1％)，m/z(APCI)307(M+H)⁺。

步骤2：N-(3，6-二溴-吡嗪-2-基)-N′-羟基甲脒(E)

向N′-(3，6-二溴-吡嗪-2-基)-N，N-二甲基甲脒(18.6g，60.80mmol)在甲醇(200mL)的溶液中一次加入盐酸羟胺(5.91g，85.12mmol)。将反应物在室温下搅拌16小时。蒸发溶剂并将固体残余物用冷却(冰冷却)的水处理，并经过滤收集。将该沉淀用水和石油醚洗涤两次，并真空干燥得到标题化合物。¹H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)7.82(br s，1H)，8.21(s，1H)，8.34(m，1H)，11.17(br s，1H).LCMS：Rt 3.17min(98.7％)，m/z(APCI)295(M+H)⁺。

步骤3：5，8-二溴-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪(F)

将N-(3，6-二溴-吡嗪-2-基)-N′-羟基甲脒(17.4mg，58.80mmol)用聚磷酸(150g)在50℃下处理1小时，随后在70℃下处理1.75小时。冷却至室温后，将水加入该反应混合物。通过分批少量小心加入固体NaHCO₃将所得混悬液调至pH8。经过滤收集形成的沉淀，用1N NaOH洗涤一次，用水洗涤三次，并真空干燥。将残余物在乙酸乙酯和1N NaOH之间分配，并将有机相用1N NaOH再洗涤一次，并用盐水洗涤一次。将有机相用无水MgSO₄干燥，过滤并蒸发，得到标题化合物(10.15g)，为白色固体。¹H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)8.43(s，1H)，8.92(s，1H)。LCMS：Rt 2.73min(94.2％)，m/z(APCI)277(M+H)⁺。

中间体4：5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2，3-二氢- 异吲哚-1-酮

步骤1：4-溴-2-溴甲基-苯甲酸甲酯

将4-溴-2-甲基-苯甲酸(4.6g，21.39mmol)溶于2M HCl的MeOH溶液中并回流3小时。蒸发溶剂得到4-溴-2-甲基-苯甲酸甲酯(4.24g，86％)。将该中间体(18.51mmol)溶于四氯化碳(100mL)中，并加入N-溴琥珀酰亚胺(5.57g，24.06mmol)。随后加入AIBN(122mg，740μmol)，并向该混合物中通入氮气5分钟。随后将该反应混合物回流四小时。冷却至室温后，将反应混合物过滤，并蒸发滤液。将残余物经快速色谱法纯化(硅胶，2∶1石油醚/乙酸乙酯)，得到标题化合物(3.42g，60％)。

步骤2：5-溴-2，3-二氢-异吲哚-1-酮

在90℃下将4-溴-2-溴甲基-苯甲酸甲酯(0.5g，16.2mmol)用氨的甲醇溶液(10mL，7N NH₃的MeOH溶液)处理5分钟。冷却至室温后，滤出形成的沉淀，并用少量甲醇洗涤，得到标题化合物(224mg，65％)，为无色固体。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm)4.41(s，2H，CH₂)，7.64(d，1H，H_ar)，7.70(d，1H，H_ar)，7.87(s，1H，H_ar)，8.67(bs，1H，NH).LCMS 99.6％，R_t＝2.49min，m/z 212(M+H，AP⁺甲酸)。

步骤3：5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2，3-二氢-异吲哚-1-酮

将5-溴-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(230mg，1.08mmol)、二(频那醇基)二硼(300mg，1.18mmol)、PdCl₂dppf(25mg，31μmol)和KOAc(320mg，3.26mmol)悬浮于二烷(4ml)中，通入氮气5分钟，随后在85℃下加热过夜。真空除去溶剂，并将残余物在乙酸乙酯和水之间分配。将水层用乙酸乙酯萃取三次，并将合并的有机相用盐水洗涤一次，用无水MgSO₄过滤并蒸发。将该固体残余物用己烷研磨，并真空干燥，得到标题化合物(185mg，66％)，为灰色固体。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ(ppm)1.37(s，12H，4xCH₃)，4.45(s，2H，CH₂)，6.38(bs，1H，NH)，7.87(d，1H，H_ar)，7.93(m，2H，H_ar)。

中间体5：4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-呋喃-2-甲 酸酰胺

步骤1：4-溴-呋喃-2-甲酸酰胺

向冷却的(使用冷水浴)4，5-二溴-呋喃-2-甲酸(12.5g，46.32mmol)在NH₄OH(100mL)的溶液中分批少量加入锌粉(活化的、粉末状(用2M HCl、水、MeOH、CH₂Cl₂洗涤)4.54g，65.39mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌10分钟，随后用硅藻土过滤，并用水洗涤。将滤液冷却至-10℃(冰/盐浴)，并用浓HCl缓慢酸化至pH 1。将水层立即用乙酸乙酯(4x)萃取。将有机相用盐水洗涤，用无水MgSO₄干燥，过滤并真空浓缩，得到油状物(4.96g)，其放置后固化，得到白色固体，其不需进一步纯化直接使用。

将该固体(4.93g，25.81mmol)溶于亚硫酰氯(44.2mL)中，并回流1小时。真空除去溶剂后，将残余物溶于二氯甲烷(75mL)，并加入0.5M NH₃在二

烷(52mL)中的溶液。将该反应混合物在室温下搅拌1小时，随后加入33％NH₃水溶液(5mL)，并将该反应物再搅拌2小时。真空除去溶剂，并将残余物用饱和NaHCO₃溶液溶解。将该碱性溶液用乙酸乙酯(3x)萃取，合并的有机层用无水MgSO₄干燥并真空浓缩。经硅胶柱色谱用(50∶49∶1)乙酸乙酯∶石油醚∶乙酸的混合物洗脱纯化，得到标题化合物(1.2g，22％)。

步骤2：4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-呋喃-2-甲酸酰胺

将4-溴-呋喃-2-甲酸酰胺(1.2g，6.32mmol)、二(频那醇基)二硼(1.76g，6.94mmol)、PdCl₂dppf(0.154g，0.189mmol)和KOAc(1.85g，18.94mmol)混悬在二

烷(20mL)中，通入氮气5分钟，然后在85℃加热过夜。真空除去溶剂，将残余物分配在乙酸乙酯和盐水中。水层用乙酸乙酯萃取四次，通过无水MgSO₄过滤并蒸发。固体残余物用己烷研磨并真空干燥，得到标题化合物，为固体状(0.984g，66％)。注意：经¹H-NMR检测，化合物通常为50-60％纯度。

中间体5的另一途径：

将3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-呋喃(5.0g，25.77mmol)溶于无水乙腈中(30mL)。将氯磺酰基异氰酸酯(5.47g，38.65mmol，1.5当量)在无水乙腈(20mL)中的溶液在室温下一次性加入所述呋喃中，产生粉红色溶液，其过夜后变为黄色。将所得溶液用冰浴冷却，加入水(5mL)，造成放热。所得混合物分配在DCM(100mL)和水(30mL)中。水层用DCM(50mL)再萃取三次，接着收集有机层，用盐水(10mL)洗涤，用Na₂SO₄干燥，最后真空除去溶剂。将油状残余物溶解在DCM(3mL)中，超声处理得到结晶固体的混悬液。过滤分离固体，滤饼用很少量的DCM、乙醚洗涤，抽滤干燥，得到3g的标题化合物，为白色粉末。

中间体6：2-乙氧基吡啶基-4-硼酸频那醇酯

将2-乙氧基-4-溴吡啶(2.5g，12.4mmol)、二-频那醇基二硼(3.4g，13.7mmol)和乙酸钾(3.64g，37.20mmol)溶解于1，4-二

烷(40ml)，用氮气除气15分钟。接着加入PdCl₂dppf(3mol％，0.37mmol，0.3g)，并将混合物在封闭容器内于90℃加热16小时。加入水，将混合物用EtOAc萃取。有机物用盐水洗涤，用无水MgSO₄干燥，接着真空浓缩。粗产物通过快速硅胶色谱纯化(石油醚到10％EtOAc的石油醚溶液)得到2-乙氧基吡啶基-4-硼酸频那醇酯，为苍白色油状(2.58g，83％)。

NMR δ¹H(400MHz，DMSO-d6)：8.16(1H，m)；7.15(1H，m)；7.11(1H，s)；4.33(2H，q)；1.38(3H，t)；1.34(12H，s)。

中间体7：4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚-2-基)-苯基胺

步骤1：((1S，4S)-5-(4-硝基-苯基)-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁基酯

将4-氟硝基苯基(4.00g，28.348mmol)、DiPEA(5.89mL，60.667mmol，2.14当量)和(1S，4S)-2-BOC-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷(6.02g，30.333mmol，1.07当量)在乙腈(20mL)中混合。将所得溶液加热至回流过夜，其后全部发生转化。真空除去溶剂，将该固态黄色残余物在环己烷(50mL)中搅拌0.25小时，随后放置，弃去上清，并将该操作重复两次。在第三次，经过滤分离该固体，抽滤下使其干燥，得到标题化合物，为黄色固体(8.8g)。

步骤2：(1S，4S)-2-(4-硝基-苯基)-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚烷

将在前面步骤中所得的固体(8.2g)溶于DCM(12mL)和TFA(12mL)的混合物中。将该反应在室温下继续2小时，此时已发生全部脱保护。真空除去挥发物，并将粗的所得固体不经进一步处理直接使用。

步骤3：(1S，4S)-2-异丙基-5-(4-硝基-苯基)-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚烷

将在前面步骤中所得粗的化合物(6.22g，28.356mmol)溶于乙腈(70mL)中。加入K₂CO₃(19.59g，141.770mmol，5.00当量)，随后加入异丙基碘(9.64g，56.708mmol，2.00当量)，并将所得混悬液在搅拌中加热至回流，持续3小时，此时已发生全部转化。将该反应混合物在DCM(100mL)和水(50mL)之间分配。将有机层用水(50mL)、盐水(25mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥，过滤并真空蒸发，得到标题化合物(9.90g)，为黄色固体。

步骤4：4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚-2-基)-苯基胺

将在前面步骤中所得的化合物(3.30g，9.35mmol)溶于EtOH(107mL)中。将该系统除气并放入氮气中。加入Pd/C 10％(0.50g，5mol％)，随后加入肼的35％水溶液(4.3mL，46.75mmol，5当量)，并将该反应在100℃下进行直至出现全部转化(通常1小时)。随后将该反应物冷却，用硅藻土过滤，并真空蒸发滤液，得到标题化合物(2.07g)，为粉红色油状物。

中间体8：((1S，4S)-5-叔丁基-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚-2-基)-苯基胺

步骤1：(2S，4R)-4-羟基-1-(4-硝基-苯基)-吡咯烷-2-甲酸甲酯

将(2S，4R)-L-脯氨酸甲酯(4.7g，25.878mmol)溶于乙腈(10mL)和DiPEA(13.5mL，77.635，3当量)中。随后将4-氟硝基苯加入该反应混合物，其在50℃加热过夜。真空下除去溶剂后，将该橙色油状残余物在DCM(50mL)和水pH 4(50mL)之间分配。将水层进一步用DCM(4x50mL)萃取，合并的有机层用盐水洗涤，并用无水MgSO₄干燥，得到标题化合物，为橙色油状物。

步骤2：(3R，5S)-5-羟基甲基-1-(4-硝基-苯基)-吡咯烷-3-醇

将在前面步骤中所得的化合物(6.89g，25.878mmol)溶于THF(50mL)中，并向所得溶液中分批加入LiBH₄(51.756mmol，1.13g，2.00当量)产生泡腾。将所得混合物在室温下反应直至已发生全部转化。随后用1M HCl猝灭该反应物至pH 7，并将所得溶液在DCM(100mL)和水(50mL)之间分配。随后用DCM(4x50mL)萃取水层。合并有机层，用盐水洗涤，并用无水Na₂SO₄干燥，得到标题化合物，为黄色油状物(3.2g)，其像这样用于下一步骤。

步骤3：(3R，5S)-3-甲苯磺酰氧基-5-甲苯磺酰氧基甲基-1-(4-硝基-苯基)-吡咯烷

将在前面步骤中所得的二醇(6.2g，25.878mmol)溶于吡啶(31mL)中，并冷却至0℃。随后一次加入甲苯磺酰氯(14.8g，77.734mmol，3当量)，并将该混合物在此温度下搅拌，放入冰箱中待用。

步骤4：(1S，4S)-2-叔丁基-5-(4-硝基-苯基)-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚烷

将在前面步骤中所得的二甲苯磺酰化的物质(1g，1.829mmol)在压力瓶中溶于甲苯(3mL)，并加入叔丁基胺(0.67g，9.147mmol，5当量)，由此得到勃艮第葡萄酒样溶液。将该瓶子密封并加热至110℃过夜，此时已发生起始原料的全部转化。将该粗的混合物冷却至室温，并在DCM(20mL)中稀释，随后用3M HCl(2x10mL)萃取。合并该酸性水层，用DCM(5mL)洗涤，随后通过加入10％NaOH碱化至pH＝12-13。将所得碱性层用DCM(4x20mL)萃取，合并有机层，用盐水洗涤，并用无水Na₂SO₄干燥，除去溶剂并经硅胶色谱用DCM/MeOH 96/4作为洗脱剂纯化后，得到标题化合物，为黄色油状物。

步骤5：4-((1S，4S)-5-叔丁基-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚-2-基)-苯基胺

该化合物可以按照如中间体7的步骤4所述相同的方法制备。

中间体9：4-(5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.2]辛烷-2-基)苯胺

该化合物可以按照如中间体7所述相同的方法制备，使用2，5-二氮杂二环[2.2.2]辛烷二盐酸化物(J.heterocycl.Chem，1974，11，449-451)。

中间体10：4-(8-异丙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)苯胺

该化合物可以按照如中间体7所述相同的方法制备，使用8-(叔丁氧基羰基)-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷(J.Med.Chem.，1998，41，674-681)。

中间体11：4-(8-异丙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)苯胺

步骤1：3-(叔丁氧基羰基)-8-异丙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷

向8-(叔丁氧基羰基)-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷(J.Med.Chem.，1998，41，674-681)(1.54g，7.25mmol)在甲醇(25mL)中的溶液中加入乙酸钠(595.0mg，7.25mmol)、乙酸(415μL，7.25mmol)和丙酮(2.66mL，36.25mmol)。在40℃搅拌反应混合物1小时，接着加入氰基硼氢化钠(912.0mg，14.50mmol)。将反应物在40℃加热18小时。真空浓缩，溶解在DCM中，用NaHCO₃水溶液洗涤。有机相用无水MgSO₄干燥并真空浓缩，得到3-(叔丁氧基羰基)-8-异丙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷(1.51g，82％)。

步骤2：8-异丙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷

该化合物可以按照如中间体7的步骤2所述相同的方法制备。

步骤3：8-异丙基-3-(4-硝基苯基)-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷

该化合物可以按照如中间体7的步骤3所述相同的方法制备。

步骤4：4-(8-异丙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)苯胺

该化合物可以按照如中间体7的步骤4所述相同的方法制备。

中间体12：6-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)吡啶 -3-胺

该化合物可以按照如中间体7所述相同的方法制备，使用2-氯-5-硝基吡啶。

中间体13：3-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基 胺

步骤1：(1S，4S)-2-异丙基-5-(3-硝基苯基)-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷

将BINAP(0.47g，0.75mmol)和三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(0.34g，0.37mmol)在甲苯(120mL)中的溶液在90℃在氮气中加热15分钟。反应混合物冷却到40℃，随后加入1-溴-3-硝基苯(1.89g，9.37mmol)、(1S，4S)-2-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷二盐酸化物(2.0g，9.37mmol)和叔丁醇钠(3.14g，32.74mmol)。将反应物在90℃在氮气中加热18小时。在恢复到室温后，反应物用乙酸乙酯稀释，用硅藻土过滤。减压浓缩滤液。残余物用硅胶快速色谱纯化，用DCM/7N NH₃的甲醇溶液(96/4)的混合物洗脱，得到标题化合物(1.92g，78％)。

步骤2：3-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基胺

将上一步骤得到的化合物(1.92g，7.34mmol)溶于EtOH(50mL)。将系统除气，在氮气下放置。加入在活性炭上的Pd(OH)₂(10％，0.2g)，将所得混悬液在室温下在氢气中搅拌18小时。接着将反应物在硅藻土上过滤，滤液真空蒸发，得到标题化合物(1.89g，98％)，为褐色油状。

中间体14：2-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚-2-基)-嘧啶-5- 基胺

上述类型的中间体可以通过DiMauro等人所述的方法(J.Med.Chem.，2008，51，1681-1694)制备。最初将2-氯-5-硝基嘧啶与(1S，4S)-2-BOC-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷反应，随后采用中间体7的方法得到适合于获得本发明化合物的中间体。

中间体15：(4-氨基-苯基)-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚 -2-基)-甲酮

上述类型的中间体可以通过WO 2007/138072所述的方法制备。最初将4-硝基苯甲酸与(1S，4S)-2-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷反应，随后还原硝基基团得到适合于获得本发明化合物的中间体。

中间体16：(1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚烷-2-甲酸(4-氨 基-苯基)-酰胺

上述类型的中间体可以使用Bioorg.Med Chem Lett，2008；4838-4843所述的方法制备。最初将1-异氰酸基-4-硝基苯与(1S，4S)-2-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷反应，随后还原硝基基团得到适合于获得本发明化合物的中间体。

中间体17：(1R，4R)-2-异丙基-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚烷二氢溴化物

步骤1：(2R，4R)-4-羟基-吡咯烷-2-甲酸乙酯(1)

在0℃下、在氮气中向搅拌的顺式-4-羟基-吡咯烷-2-甲酸(1g，7.6mmol)在纯乙醇(20mL)的溶液中滴加亚硫酰氯(0.67mL，9.15mmol)。接着将反应混合物在氮气下回流约2小时。将混合物冷却到室温，减压除去所有溶剂。过滤白色沉淀，用乙醚(1×25mL)洗涤，得到白色固体的化合物(1)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ1.23(t，3H)，2.12(d，1H)，2.27(t，1H)，3.19(q，2H)，4.20(m，2H)，4.35(s，1H)，4.47(d，1H).质谱(M+1)：m/z160.

步骤2：(2R，4R)-1-(甲苯-4-磺酰基)-4-(甲苯-4-磺酰氧基)-吡咯烷-2-甲酸乙酯(2)

向冷的4-羟基-吡咯烷-2-甲酸乙酯(1)(1.4g，7.1mmol)和三乙胺(0.998mL，7.1mmol)在吡啶(14mL)的溶液中在-5℃下分批加入4-甲苯磺酰氯(3.42g，17.9mmol)。接着将冷溶液在0℃下搅拌1小时，在冰箱中储存过夜。接着将混合物在室温下再搅拌5小时，倒入冰水中(10mL)。将析出的沉淀过滤，用水洗涤(2×5mL)并干燥，得到化合物(2)，为白色固体。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ1.13(t，3H)，2.05(d 1H)，2.16(m，1H)，2.41(d，6H)，4.05(q，2H)，4.47(d，1H)，5.00(s，1H)，7.45(dd，4H)，7.72(d，4H).质谱(M+1)：m/z 468.

步骤3：(2R，4S)-4-乙酰氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-吡咯烷-2-甲酸乙酯(3)

向搅拌的1-(甲苯-4-磺酰基)-4-(甲苯-4-磺酰氧基)-吡咯烷-2-甲酸乙酯(2)(1g，2.14mmol)在无水DMF(25mL)中的溶液中一次性加入乙酸钾(0.314g，3.21mmol)。接着将反应混合物在60℃加热4小时。将水(50mL)加入反应混合物，用乙酸乙酯(2×75mL)萃取，合并的有机层用水(2×50mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并减压浓缩，得到粗化合物。将粗化合物通过硅胶柱色谱(100-200目)纯化，使用15％乙酸乙酯-己烷作为洗脱剂，得到化合物(3)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ1.26(t，3H)，1.68(s，3H)，2.20(m，1H)，2.29(m，1H)，2.41(s，3H)，3.52(d，1H)，3.67(d，1H)，4.22(m，2H)，4.30(t，1H)，5.11(s，1H)，7.33(d，2H)，7.74(d，2H).质谱(M+1)：m/z 356.

步骤4：(3S，5R)-5-羟基甲基-1-(甲苯-4-磺酰基)-吡咯烷-3-醇(4)

向冰冷的4-乙酰氧基-1-(甲苯-4-磺酰基)-吡咯烷-2-甲酸乙酯(3)(0.65g，1.83mmol)在THF(10mL)中的溶液中分批加入LiAlH₄(0.135g，3.66mmol)。接着将反应混合物在室温下搅拌1小时。在完成反应后，将其冷却到0℃，接着通过加入6N HCl(0.65mL)将反应混合物的pH调节到3。浓缩混合物，将残余物用水(8mL)研磨，过滤析出的固体，用冷水洗涤(2×4mL)，减压干燥，得到白色固体的化合物(4)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ1.14(s，1H)，1.82(m，1H)，1.91(m，1H)，2.42(s，3H)3.39(d，1H)，3.55(d，1H)，3.60(m，1H)，3.77(m，1H)，3.85(d，1H)，4.30(s，1H)，7.31(d，2H)，7.76(d，2H).质谱(M+1)：m/z 272.

步骤5：(2R，4S)-1-(4-甲苯基磺酰基)-2-[[(4-甲苯基磺酰基)氧基]-甲基]-4-[(4-甲苯基磺酰基)氧基]-吡咯烷(5)

向冰冷的5-羟基甲基-1-(甲苯-4-磺酰基)-吡咯烷-3-醇(4)(0.45g，1.66mmol)在吡啶(3mL)的溶液中一次性加入4-甲苯基磺酰氯(1.11g，5.81mmol)。温度升至50℃，接着将反应混合物冷却到10℃，在此温度下再保持2小时，接着在室温下过夜。将混合物倒入2N HCl(13mL)中。冷却后，化合物沉淀，过滤分离，用冷水(2×5mL)洗涤，减压干燥得到白色固体的化合物(5)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ2.02(m，2H)，2.42(s，9H)，3.50(d，2H)，3.80(d，1H)4.10(q，1H)，4.30(d，1H)，4.76(t，1H)，7.27(dd，4H)，7.35(d，2H)，7.56(d，2H)，7.62(d，2H)，7.78(d，2H).质谱(M+1)：m/z 538.

步骤6：(1R，4R)-2-异丙基-5-(甲苯-4-磺酰基)-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚烷(6)

将(2R，4S)-1-(4-甲苯基磺酰基)-2-[[(4-甲苯基磺酰基)氧基]-甲基]-4-[(4-甲苯基磺酰基)氧基]吡咯烷(5)(0.5g，0.93mmol)和异丙基胺(0.3mL，0.33mmol)在无水甲苯(3mL)中的混合物加热到110℃持续10小时。接着将混合物冷却到室温；析出固体，通过过滤分离，用甲苯(1×15mL)洗涤。合并的有机层用(Na₂SO₄)干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，其通过硅胶柱色谱(100-200目)纯化，使用1％三乙胺-乙酸乙酯作为洗脱剂，得到白色固体的化合物(6)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ0.72(d，1H)，0.89(t，6H)，1.46(d，1H)，2.32(s，1H)，2.38(s，3H)，2.46(t，1H)，2.85(d，2H)，3.51(s，1H)，4.18(s，1H)，7.44(d，2H)，7.71(d，2H).质谱(M+1)：m/z 295.

步骤7：(1R，4R)-2-异丙基-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚烷二氢溴化物.

在70℃向33％HBr(0.5mL)和乙酸(3mL)的溶液中加入(1R，4R)-2-异丙基-5-(甲苯-4-磺酰基)-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚烷(6)(0.24g，0.000816mol)。接着将混合物在同一温度下搅拌12小时。将混合物冷却到10℃，得到白色沉淀，将其过滤并用二异丙基醚(1×5mL)和乙酸乙酯(1×5mL)洗涤，减压干燥，得到白色固体的中间体17。

¹H-NMR(400MHz，D₂O)：δ1.33(d，3H)，1.39(d，3H)，2.29(d，1H)，2.41(d，1H)，3.57(m，3H)，3.73(s，2H)，4.61(s，1H)，4.75(s，1H).质谱(M+1)：m/z 141.

中间体18：2-氨甲酰基-4-呋喃硼酸

将15g的3-呋喃硼酸频那醇酯(77.3mmol，1.0当量)溶解在120mL乙腈中，一次性加入10.2mL氯磺酰基异氰酸酯(116mmol，1.5当量)。继续搅拌过夜。通过LCMS确定完全转化。缓慢加入30mL H₂O猝灭反应。浓缩溶液，加入100mL IPA。重复该操作，通过加入120mL H₂O和8mL IPA将反应混合物稀释，搅拌2小时。滤出在此过程中形成的沉淀，用30mLH₂O洗涤。干燥后，固体从120mL IPA和6mL H₂O中重结晶。晶体用30mL IPA洗涤并分离，纯度为99+％。

本发明化合物的具体实施例

化合物1：5-{8-[4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚-2-基)-苯基氨基]-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮

该化合物可以按照如化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.81(s，1H)；8.65(m，2H)；8.19(s，1H)；8.07-8.05(m，1H)；7.93)s，1H)；7.82-7.79(m，2H)；7.75-7.73(m，2H)；6.60(m，2H)；4.47(s，2H)；4.25(s，1H)；3.69(s，1H)；3.18(m，1H)；2.99(m，1H)；2.39-2.36(m，2H)；1.80(s，2H)；0.93(d，6H)；m/z：M+H⁺(481.1；100％).

化合物2：4-{8-[4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚-2-基)-苯基氨基]-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酰胺

步骤1：(5-溴-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚-2-基)-苯基]-胺

在氮气中将5，8-二溴-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪(2.26g，8.14mmol)、4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚-2-基)-苯基胺(2.07g，8.95mmol，1.10当量)和DiPEA(4.3mL，24.42mmol，3.00当量)在异丙醇(28mL)中混合。将该反应物加热到85℃直至反应完成(通常5小时)。真空除去溶剂，并将该残余物在60mL磷酸钠缓冲液(pH 7)和200mL DCM之间分配，将有机层用60mL饱和NaCl水溶液洗涤，用无水Na₂SO₄干燥，过滤并真空蒸发，得到标题化合物(3.67g)，为绿-黑色泡沫状固体。

步骤2：4-{8-[4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚-2-基)-苯基氨基]-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酰胺

将在前面步骤中得到的化合物(3.25g，7.59mmol)与4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-呋喃-2-甲酸酰胺(2.70g，11.40mmol，1.50当量)、PdCl₂dppf.DCM(0.310g，0.38mmol，5mol％)、DiPEA(2.65mL，15.20mmol，2.00当量)在1，4-二

烷(51mL)和水(13mL)中混合。将该系统密封，通过真空/N₂清洗，并加热至110℃持续6小时，此时已发生全部转化。将该反应混合物用DCM(60mL)和MeOH(60mL)稀释，并在硅藻土上过滤。蒸发滤液得到泥状褐色残余物。将该残余物用EtOH(50mL)、MeOH(25mL)和DCM(20mL)处理，并蒸发至干，随后在真空下于40℃再放置1小时，尽可能多的除去水分和醇类。将该干燥残余物悬浮于DCM(100mL)中，并超声处理约1小时，将全部固体分散。得到微细固体的混悬液。将其冷却至0℃，在布氏漏斗上过滤，并将该固体用DCM(30mL)洗涤，并真空干燥。

将该残余物用1M KOH(40mL)处理，超声处理直至该固体良好分散，并在垂熔玻璃漏斗上过滤。最后，将该固体溶于DCM(450mL)和MeOH(50mL)中，用饱和NaF(250mL)水溶液、水(500mL)和iPrOH(250mL)的混合物洗涤。将有机层用无水Na₂SO₄干燥，过滤并真空蒸发，得到4-{8-[4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚-2-基)-苯基氨基]-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酸酰胺(2.34g)，为黄-褐色固体。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.76(s，1H)；8.74(s，1H)；8.69(d.1H)；8.13(s，1H)；7.93(broad s，1H)；7.86(d，1H)；7.72(d，2H)；7.54(broad s，1H)；6.59(d，2H)；4.31(d，1H(iPrOH))；4.25(s，1.1H)；3.78(m，1H(iPrOH))；3.69(s，1H)；3.30(H₂O)；3.16(d(d)，1H)；3.00(d(d)，1H)；2.50(DMSO)；2.42-2.37(m，2H)；1.81(s，2H)；1.04(d，7H)(i-PrOH)；0.95(2d，6H)。

化合物3：4-{8-[4-((1S，4S)-5-叔丁基-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚-2-基)-苯基氨基]-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酰胺

该化合物可以按照如上述化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.27(s，1H)，8.72(s，1H)，8.68(d，1H)，8.11(s，1H)，7.91(broad s，1H)，7.84(d，1H)，7.68(d，2H)，7.58(broad s，1H)，6.55(d，2H)，3.40-3.36(m，2H)，2.89-2.80(m，4H)，1.72-1.70(d，1H)，1.63-1.60(d，1H)，0.97(s，9H)；m/z：M+H⁺(473.1；100％)。

化合物4：4-{8-[4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂-二环[2.2.1]庚-2-基)-苯基氨基]-咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酰胺

该化合物可以按照如化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.33(s，1H)，8.45(s，1H)，8.17(s，1H)，7.94(brs，1H)，7.75-7.72(m，3H)，7.62(d，2H)，7.59(brs，1H)，6.58(d，2H)，4.24(s，1H)，3.69(s，1H)，3.32(d，1H)，3.15(d，1H)，2.98(d，1H)，2.43-2.38(m，2H)，1.81(s，2H)，0.98(d，3H)，0.92(d，3H)；m/z：M+H⁺(458；100％)。

化合物5：5-{8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基-氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-1H-吡唑-3-甲酰胺

步骤1：5-(8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯

将5-(三丁基锡基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(109.0mg，0.25mmol)(杂环，1992，813-818)、(5-溴-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚-2-基)-苯基]胺(163.0mg，0.38mmol)和Pd(PPh₃)₂Cl₂(27.0mg，0.04mmol)在THF(3mL)中的混合物回流18小时。恢复室温后，减压除去溶剂。将该残余物经硅胶柱色谱用DCM/7N NH₃的甲醇溶液(97/3)的混合物洗脱纯化，得到标题化合物(35.0mg，28％)。

步骤2：5-{8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]-三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-1H-吡唑-3-甲酰胺

将在前面步骤中得到的化合物(30.0mg，0.06mmol)、氯化铵(200mg)和氢氧化铵(2mL)在甲醇(12mL)中的混合物在85℃下加热18小时。恢复室温后，减压除去溶剂。经硅胶柱色谱用DCM/7N NH₃的甲醇溶液(95/5)的混合物洗脱纯化得到标题化合物(20.0mg，71％)。

NMR ¹H(400MHz，DMSO-d6)：δ14.01(broad s，1H)；9.83(s，1H)；8.73(s，1H)；8.23(s，1H)；8.14(broad s，1H)；7.78-7.75(m，3H)；7.32(broads，1H)；6.64-6.62(m，2H)；4.65(s，1H)；4.35(s，1H)；3.21-3.19(m，1H)；3.04-3.02(m，1H)；2.54(s，1H)；2.45-2.41(m，2H)；1.84-1.82(m，2H)；1.01(2d，6H)；m/z：459(M+H)⁺。

化合物6：4-{8-(4-((1S，4S)-5-叔丁基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-苯基-氨基)咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酰胺

该化合物可以按照如化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.33(s，1H)；8.46(s，1H)；8.11(s，1H)；7.99(broad s，1H)；7.72-7.70(m，3H)；7.62-7.59(m，3H)；6.56-6.54(m，2H)；4.28(s，1H)；4.67(s，1H)；3.91-3.76(m，4H)；1.73(d，1H)；1.65(d，1H)；0.98(s，9H)；m/z：472(M+H)⁺。

化合物7：4-{8-(6-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酰胺

该化合物可以按照如化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6：δ9.94(s，1H)；8.80(s，1H)；8.74(s，1H)；8.58(s，1H)；8.17(s，1H)；8.03-7.99(m，2H)；7.90(s，1H)；7.59(broads，1H)；6.58(d，1H)；4.58(s，1H)；3.76(s，1H)；3.49(d，1H)；3.31-3.29(m，1H)；3.06(d，1H)；2.51-2.48(m，1H)；2.39(d，1H)；1.86-1.83(m，2H)；0.98(2d，6H)；m/z：460(M+H)⁺。

化合物8：4-{8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基-氨基)咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基}-1H-吡啶-2-酮

步骤1：5-(2-乙氧基吡啶-4-基)-N-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基)咪唑并[1，2-a]吡嗪-8-胺

该化合物可以按照如化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

步骤2：4-{8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基-氨基)咪唑并-[1，2-a]-吡嗪-5-基}-1H-吡啶-2-酮

将上一步骤获得的化合物(135.0mg，0.29mmol)和盐酸吡啶(332.0mg，2.90mmol)的混合物加热到120℃持续18小时。在恢复到室温后，将粗产物溶解在甲醇中，干法上样至硅胶。经硅胶柱纯化，用DCM/7N NH₃的甲醇溶液(96/4)的混合物洗脱，得到标题化合物(46.0mg，36％)。

NMR ¹H(400MHz，CDCl₃)：δ12.51(broad s，1H)；8.00(s，1H)；7.82(s，1H)；7.64-7.59(m，4H)；7.50-7.48(m，1H)；6.86(s，1H)；6.60-6.59(m，2H)；6.55-6.53(m，1H)；4.20(s，1H)；3.81(s，1H)；3.49-3.41(m，2H)；3.21-3.18(m，1H)；2.51-2.499m，2H)；2.05-2.03(m，1H)；1.97-1.95(m，1H)；1.07(d，3H)；1.02(d，3H)；m/z：442(M+H)⁺。

化合物9：4-{8-(4-(5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.2]辛烷-2-基)苯基氨基)[1，2，4]-三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酰胺

该化合物按照化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.80(s，1H)；8.78(s，1H)；8.73(s，1H)；8.17(s，1H)；7.98(broad s，1H)；7.89(s，1H)；7.76(d，2H)；7.59(broads，1H)；6.68(d，2H)；3.92-3.91(m，1H)；3.58(d，1H)；3.22-3.19(m，2H)；2.96-2.94(m，2H)；2.71-2.68(m，1H)；1.94-1.76(m，3H)；1.60-1.59(m，1H)；1.04(2d，6H)；m/z：473(M+H)⁺。

化合物10：4-{8-(4-(5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.2]辛烷-2-基)苯基氨基)-咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酰胺

该化合物按照化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.23(s，1H)；8.38(s，1H)；8.02(s，1H)；7.86(broad s，1H)；7.68-7.64(m，3H)；7.55-7.52(m，2H)；7.47(broads，1H)；6.59(m，2H)；3.79(s，1H)；3.48-3.45(m，1H)；3.11-3.08(m，2H)；2.84-2.82(m，2H)；2.59-2.57(m，1H)；1.83-1.74(m，3H)；1.67-1.65(m，1H)；0.94(2d，6H)；m/z：472(M+H)⁺。

化合物11：4-{8-(4-(3-异丙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-基)苯基氨基)-咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酰胺

该化合物按照化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.29(s，1H)；8.38(s，1H)；8.03(s，1H)；7.86(broad s，1H)；7.72(d，2H)；7.69(s，1H)；7.55(s，1H)；7.54(s，1H)；7.47(broad s，1H)；6.73(d，2H)；4.13-4.11(m，2H)；2.47-2.36(m，5H)；1.78-1.73(m，4H)；0.84(2d，6H)；m/z：472(M+H)⁺。

化合物12：4-{8-(4-(8-异丙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)苯基氨基)[1，2，4]-三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酰胺

该化合物按照化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.79(s，1H)；8.69(s，1H)；8.64(s，1H)；8.09(s，1H)；7.93-7.91(broad s，1H)；7.71(s，1H)；7.69(d，2H)；7.53-7.51(broad s，1H)；6.74(d，2H)；4.07-4.04(m，1H)；3.51-5.48(m，2H)；3.10-3.09(m，2H)；2.77-2.75(m，2H)；1.76-1.74(m，2H)；1.59-1.57(m，2H)；0.96(2d，6H)；m/z：473(M+H)⁺。

化合物13：4-{8-(4-(3-异丙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-基)苯基氨基)[1，2，4]-三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酰胺

该化合物按照化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.84(s，1H)；8.76(d，2H)；8.19(s，1H)；7.99(broad s，1H)；7.90(s，1H)；7.79(d，2H)；7.59(broad s，1H)；6.86(d，2H)；4.22-4.25(m，2H)；2.56-2.47(m，5H)；1.89-1.84(m，4H)；0.95(2d，6H)；m/z：473(M+H)⁺。

化合物14：4-{8-(4-(8-异丙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)苯基氨基)-咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酰胺

该化合物按照化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.42(s，1H)；8.47(s，1H)；8.11(s，1H)；7.96(broad s，1H)；7.81-7.79(m，2H)；7.73(s，1H)；7.63-7.61(m，2H)；7.57(broad s，1H)；6.80-6.78(m，2H)；3.55-3.53(m，2H)；3.34-3.31(m，2H)；2.83-2.80(m，2H)；2.53-2.51(m，1H)；1.82-1.81(m，2H)；1.66-1.64(m，2H)；1.04(2d，6H)；m/z：472(M+H)⁺。

化合物15：5-{8-(6-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-1H-吡唑-3-甲酸酰胺

该化合物按照化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ14.04(broad s，1H)；10.06(s，1H)；8.79(s，1H)；8.68(s，1H)；8.22(s，1H)；8.04-8.02(m，2H)；7.74(broads，1H)；7.69(broad s，1H)；6.59-6.57(m，1H)；4.58(s，1H)；3.76(s，1H)；3.49-3.42(m，1H)；3.35-3.31(m，1H)；3.08-3.06(m，1H)；2.49-2.42(m，2H)；1.84-1.83(m，2H)；0.98(d，3H)；0.79(d，3H)；m/z：460(M+H)⁺。

化合物16：5-{8-(4-((1S，4S)-5-叔丁基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并-[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮

该化合物按照化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ8.38(s，1H)；8.09(s，1H)；8.02-7.95(m，2H)；7.84(s，1H)；7.73(s，1H)；7.52(d，2H)；6.62(d，2H)；6.25(broads，1H)；4.56(s，2H)；4.27(s，1H)；3.71(s，1H)；3.50-3.48(m，1H)；3.15-3.10(m，2H)；2.88-2.86(m，1H)；1.83-1.81(m，2H)；1.05(s，9H)；m/z：495(M+H)⁺。

化合物17：5-{8-(4-((1S，4S)-5-叔丁基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基-氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-1H-吡唑-3-甲酸酰胺

该化合物按照化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ13.82(broad s，1H)；9.70(s，1H)；8.66(s，1H)；8.11(s，1H)；7.65(broad s，1H)；7.65-7.62(m，3H)；7.37(broad s，1H)；6.51-6.49(m，2H)；4.24(s，1H)；3.62(s，1H)；3.36-3.35(m，1H)；2.83-2.77(m，3H)；1.64-1.57(m，2H)；0.92(s，9H)；m/z：473(M+H)⁺。

化合物18：5-{8-(6-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮

该化合物按照化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.89(s，1H)；8.61(s，1H)；8.59(broad s，1H)；8.49-8.47(m，1H)；8.11(s，1H)；7.99-7.95(m，2H)；7.85(s，1H)；7.74-7.72(m，1H)；6.49-6.47(m，1H)；4.48(s，1H)；4.41(s，2H)；3.65(s，1H)；3.41-3.39(m，1H)；3.20-3.18(m，1H)；2.97-2.95(m，1H)；2.40-2.38(m，1H)；2.28-2.26(m，1H)；1.74-1.72(m，2H)；0.93(d，3H)；0.86(d，3H)；m/z：482(M+H)⁺。

化合物19：5-(2-乙氧基吡啶-4-基)-N-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-8-胺

该化合物按照化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6：δ8.37(s，1H)；8.28(d，1H)，7.92(s，1H)；7.79(s，1H)；7.61(d，2H)，7.42-7.38(m，2H)，6.63(d，2H)；4.46-4.42(q，2H)，4.22(s，1H)；3.85(s，1H)；3.43-3.40(m，2H)；3.24-3.22(m，1H)；2.55-2.53(m，2H)；2.03-1.99(m，2H)；1.42(t，3H)；1.08(d，3H)；1.04(d，3H)；m/z：471(M+H)⁺。

化合物20：4-(8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基)吡啶-2(1H)-酮

该化合物按照化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

NMR ¹H(400MHz，CDCl₃)：δ12.99(broad s，1H)；8.37(s，1H)；7.95-7.93(m，2H)；7.63(d，2H)；7.49(d，1H)；7.30(s，1H)；6.92(d，1H)；6.63(d，2H)；4.21(s，1H)；3.82(s，1H)；3.42-3.37(m，2H)；3.22-3.19(m，1H)；2.56-2.50(m，2H)；2.06-2.04(m，1H)；1.87-1.76(m，1H)；1.07(d，3H)；1.03(d，3H)；m/z：443(M+H)⁺。

化合物21：5-(8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯

该化合物按照化合物5的步骤1所述的方法制备，使用上述的相应中间体。

NMR ¹H(400MHz，CDCl₃)：δ8.53(s，1H)；8.20(s，1H)；7.79(s，1H)；7.64(d，2H)；7.39(s，1H)；6.62(d，2H)；4.47(q，2H)；4.21(s，1H)；3.81(s，1H)；3.41-3.36(m，2H)；3.20-3.18(m，1H)；2.54-2.49(m，2H)；2.04-2.02(m，1H)；1.96-1.94(m，1H)；1.42(t，3H)；1.07(d，3H)；1.03(d，3H)；m/z：488(M+H)⁺

化合物22：4-{8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基-氨基)咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基}-1H-吡啶-2-酮.

该化合物按照化合物8的步骤1所述的方法制备，使用上述的相应中间体。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.50(s，1H)；8.33(d，1H)；8.07(s，1H)；7.78-7.70(m，2H)；7.57(s，1H)；7.33(d，2H)；7.10(s，1H)；6.62(d，2H)；4.42(q，2H)；4.27(s，1H)，3.68(s，1H)，3.34(s，1H)，3.18-3.16(m，1H)，3.01-2.98(m，1H)，2.42-2.96(m，2H)，1.84(s，2H)，1.41(t，3H)；1.04(d，3H)，0.96(d，3H)；m/z：470(M+H)⁺。

化合物23：3-(8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基)-1，2，4-

二唑-5-甲酰胺

步骤1：8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并-[1，5-a]吡嗪-5-甲腈

在密封试管中装入(5-溴-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-8-基)-[4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚-2-基)苯基胺(化合物2，步骤1)(0.30g，0.70mmol)、亚铁氰化钾(0.13g，0.35mmol)、碳酸钠(0.037g，0.35mmol)、碘化钾(0.058g，0.35mmol)、四氟硼酸铜(II)水合物(0.36g，1.05mmol)、DMA(5mL)和N，N-二甲基乙二胺(340μL，3.15mmol)。将反应混合物在85℃加热18小时。在恢复到室温后，将反应物分配在乙酸乙酯和水中。水相用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机相用水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤并蒸发。残余物通过硅胶柱色谱纯化，用DCM/7N NH₃的甲醇溶液(99/1)的混合物洗脱，得到标题化合物。

步骤2：3-(8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基)-1，2，4-

二唑-5-甲酰胺

将上一步骤获得的化合物(26.0mg，0.07mmol)、DIPEA(12μL，0.07mmol)和盐酸羟胺(5mg，0.07mmol)在乙醇(300μL)中的混合物在85℃加热18小时。在恢复到室温后，蒸发溶剂至干，将残余物溶解在吡啶(400μL)中。将溶液冷却到0℃，加入乙基草酰氯(24μL，0.21mmol)，随后将反应物加热到70℃持续2小时。在恢复到室温后，加入冰水，使之搅拌30分钟。加入DCM(5mL)，萃取水相两次。合并的有机相用MgSO₄干燥，过滤并蒸发。残余物通过硅胶柱色谱纯化，用DCM/7N NH₃的甲醇溶液(99/1到98/2)的混合物洗脱，得到标题化合物。

NMR ¹H(400MHz，CDCl₃)：δ8.57(s，1H)；8.51(s，1H)；8.11(s，1H)；7.64(d，2H)；7.10(s，1H)；6.63(d，2H)；6.08(s，1H)；4.22(s，1H)；3.83(s，1H)；3.42-3.39(m，2H)；3.22-3.19(m，1H)；2.54-2.51(m，2H)；2.04-2.02(m，1H)；1.95-1.90(m，1H)；1.08(d，3H)；1.03(d，3H)；m/z：461(M+H)⁺。

化合物24：4-(8-(3-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基)呋喃-2-甲酰胺

该化合物按照化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

NMR δ¹H(400MHz，DMSO-d⁶)：9.71(s，1H)，8.72(s，1H)，8.65(s，1H)，8.17(s，1H)，7.92(brs，1H)，7.73(s，1H)，7.51(brs，1H)，7.32(d，1H)，7.29(s，1H)，7.08(m，1H)，6.27(d，1H)，4.18(s，1H)，3.62(s，1H)，3.24(d，1H)，3.16(d，1H)，2.98(d，1H)，2.44-2.39(m，2H)，1.76(s，2H)，0.92(d，3H)，0.89(d，3H)；

化合物25：4-(8-(3-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基)呋喃-2-甲酰胺

该化合物按照化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

NMR δ¹H(400MHz，DMSO-d⁶)：9.23(s，1H)，8.42(s，1H)，8.07(s，1H)，7.87(brs，1H)，7.69(s，1H)，7.61(s，1H)，7.58(s，1H)，7.48(brs，1H)，7.38(m，1H)，7.21(s，1H)，7.02(t，1H)，6.21(d，1H)，4.15(s，1H)，3.64(s，1H)，3.32(d，1H)，3.14(d，1H)，2.95(d，1H)，2.36-2.32(m，2H)，1.75(s，2H)，0.92(d，3H)，0.85(d，3H)；

化合物26：5-(8-(3-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基)异二氢吲哚-1-酮

该化合物按照化合物2所述相同的方法制备，使用上述的相应中间体。

NMR δ¹H(400MHz，DMSO-d⁶)：9.87(s，1H)，8.71(m，2H)；8.24(m，1H)，8.12(m，1H)，8.01(m，1H)，7.81(m，1H)，7.43(m，1H)，7.24(m，1H)，7.12(m，1H)，6.37(m，1H)；4.50(s，2H)；4.25(s，1H)；3.74(s，1H)；3.44(m，1H)，3.21(m，1H)；3.03(m，1H)；2.43-2.46(m，2H)；1.85(s，2H)；0.96(d，6H)；

化合物27：4-[8-({4-[(1R，4R)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚-2-基]苯基}氨基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基]-2-呋喃甲酰胺

步骤1：(1R，4R)-2-异丙基-5-(4-硝基苯基)-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷(3)

向(1R，4R)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷二氢溴化物(2)；3.0g；9.9mmol)、4-氯硝基苯(1.7g；11mmol)、二甲基亚砜(6.2mL)和自来水(2.5mL)的混合物中加入固体K₂CO₃(1.7g；mmol；产生气体)。将所得混悬液加热到50℃，随后加入2-MeTHF(0.5mL)和更多的固体K₂CO₃(1.9g；mmol)。将反应温度升至125℃，在该温度下保持反应器内容物过夜。将反应混合物冷却到环境温度，随后加入自来水(25mL)。将水性混合物用乙酸乙酯(3x30mL)萃取，合并的有机萃取物真空浓缩，得到固体残余物，将其重新溶解在热的MTBE(300mL)中。过滤该热溶液以除去残余固体，真空浓缩获得粗产物(2)。通过将粗产物分配在乙酸乙酯(70mL)和稀盐酸溶液(pH 1；250mL)中来纯化，分离各层，水相用乙酸乙酯(2x50和2x100mL)洗涤，合并的有机层用稀盐酸(pH 1；100mL)萃取，合并的水层用10NNaOH水溶液碱化到pH 10，碱性的水层用MTBE(2x200mL)和乙酸乙酯(2x200mL)萃取，用Na₂SO₄干燥，真空浓缩，得到白色固体。该固体在庚烷/MTBE 1∶1v/v(20mL)中重新浆化，过滤所得混悬液，滤饼用庚烷/MTBE 1∶1v/v(20mL)洗涤，风干得到白色固体的(3)。

LC-纯度：99.3面积-％。

步骤2：4-[(1R，4R)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚-2-基]苯胺(4)

将3(1.6g；6.1mmol)在2-MeTHF(25mL)中的溶液在1巴的氢气氛中、在Pd/C催化剂(10％德固赛型E101 NE/W；0.1g)存在下于30℃搅拌3小时。通过一层Dicalite 478滤出催化剂，滤饼用2-MeTHF(2x10mL)洗涤。真空浓缩滤液至体积25mL，所得溶液直接用于下一步骤。

步骤3：5-溴-N-{4-[(1R，4R)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚-2-基]苯基}[1，2，4]三唑并[1，5-a]-吡嗪-8-胺(5)

向步骤2所得的溶液中加入5，8-二溴[1，2，4]三唑并[1，5-a]-吡嗪(1.6g；5.8mmol)和三乙胺(3.4mL)。所得混合物加热回流70小时，随后冷却反应器中的内容物，过滤除去固体。滤饼用2-MeTHF(2x5mL)洗涤，滤液直接用于下一步骤。

步骤4：化合物27 4-[8-({4-[(1R，4R)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚-2-基]苯基}氨基)[1，2，4]三唑并[1，5-a]-吡嗪-5-基]-2-呋喃甲酰胺(6)

向步骤3所得的溶液中加入2-MeTHF(5mL)、自来水(6.5mL)、[5-(氨基羰基)-3-呋喃基]硼酸(1.3g；8.6mmol)和Pd(dppf)₂Cl₂(0.26g；0.3mmol)。所得混合物用真空/氮气清洗循环除气5次，在80℃加热6小时。接着将反应器内容物冷却到环境温度，加入1，2-二氨基-丙烷(2mL)，过滤所得混悬液(缓慢！)，滤饼用2-MeTHF(6x5mL)洗涤，得到粗化合物27，为绿色固体。粗产物在甲醇(15mL)中重新浆化，过滤，滤饼用甲醇(5mL)洗涤。接着将滤饼与水/乙酸(pH 1；约50mL)混合，过滤所得混悬液，直到获得澄清滤液，滤饼用水洗涤，直到清洗液变成无色。合并的滤液和清洗液在50℃真空浓缩以除去水，残余物用2-丙醇(两次)和甲苯(三次)清洗，随后溶于甲醇(70mL)和甲苯(5mL)。向所得混悬液中加入1，2-二氨基丙烷(2mL)和dppe(0.08g；0.2mmol)，随后继续搅拌过夜。纯化的产物通过过滤分离，滤饼用甲醇洗涤，直到清洗液变为浅黄，随后用乙酸乙酯洗涤，在40℃真空干燥，得到黄色固体的化合物27。

LC-纯度98.6面积-％。

LC-MS：m/z＝459(100)[M+H]+。

纯化条件和表征

通常，合成后的所有化合物可以应用反相HPLC纯化，应用Gilson制备HPLC系统(322泵，155紫外/可见检测器，215液体处理机)。Gilson215用作自动进样器和部分收集器。化合物还可以通过硅胶快速色谱法纯化。

化合物通过质谱法表征，应用配有电喷雾源的单相四极仪器。

生物学实施例

实施例1：MAPKAP-K5分析

将MAPKAP-K5反应在闪板形式中进行，应用0.1或0.2μCi ³³P-ATP；0.6μM ATP；1mU MAPKAP-K5；3μM MAPKAP-K5肽底物，在室温下孵育30分钟。

闪板试验：

MAPKAP-K5激酶反应在384孔聚丙烯板(Matrix Technologies)中进行，然后转移到链霉抗生物素涂覆的384孔闪板(Perkin-Elmer)中。在含有2μL试验化合物或标准抑制剂的孔中，用Hydra(Robbins Scientific)加入13μL酶混合物或稀释剂。通过应用Multidrop(Thermo-Labsystems)加入10μL[2.5×]底物混合物来启动反应，在试验中得到下列物质终浓度为：

1mU MAPKAP-K5

3μM MAPKAP-K5肽底物

0.6μM ATP

0.004μCi[³³P]-γ-ATP/μL

1×反应缓冲液

将板在室温下培养30分钟。通过应用Micro-fill(Biotek)在每孔中加入25μL EDTA(50mM)来终止反应。应用Zymark机器人系统将反应转移到链霉抗生物素涂覆的闪板中。将板在室温下培养60分钟。应用Tecan洗板机将所有孔用100μL磷酸盐缓冲盐水洗涤3次。放射性通过在PackardTopCount上闪板(空孔)的闪烁计数来测定。

酶混合物：

酶

50mM Tris HCl(pH 7.5)

0.1mM EGTA

2mM DTT

1mg/mL BSA

反应缓冲液：

50mM Tris HCl(pH 7.5)

0.1mM EGTA

10mM乙酸镁

2mM DTT

实施例2.用于鉴定由活化的原始滑液成纤维细胞表达的MMP1的调节剂的测定法的建立

为了鉴定降低细胞的ECM降解活性的化合物，细胞的ECM降解活性可以诱导以使该活性适合检测并且获得更清楚的读数。在RA背景中，选择的细胞是哺乳动物滑液成纤维细胞并且可以用于诱导ECM降解活性的触发剂是关节炎领域中相关的细胞因子：例如TNF-α、IL1β、IL6、OSM、IL17和MIF1-α。该列表不是全部的，因为RA发病机制中潜在涉及过多的细胞因子(Smolen和Steiner，2003)。为了建立体外的、尽可能接近病理学的复杂性的试验方法，所用的触发剂应该是由关节炎领域中相关的产生细胞因子的细胞与触发剂接触而产生的因子的混合物，例如单核细胞、巨噬细胞、T细胞和B细胞。产生细胞因子的细胞通过产生因子的复合体和无偏的混合物而对接触产生响应。如果在关节翳中也发现所用的产生细胞因子的细胞，并且在类风湿性关节炎患者的滑膜液中发现用于产生该触发剂的细胞因子，那么最终产生的因子混合物将包含关节炎患者关节中存在的部分因子。

“MMP试验”的原理

基质金属蛋白酶(MMP)具有多种生理学作用，例如其它蛋白酶、生长因子的成熟和胞外基质成分的降解。MMP1是MMP家族的成员之一，其能够降解天然胶原(骨和软骨的主要成分)。由滑液成纤维细胞(SF)表达的MMP1的增加用于诊断关节炎疾病的进程并且是关节中侵蚀进程的预兆(Cunnane等人，2001)。SF表达的MMP1可以通过用类风湿性关节炎相关的触发剂活化SF来增强，细胞因子例如TNF-α或IL1β(Andreakos等人，2003)。综上所述，测量由活化的SF产生的MMP1的水平是在RA背景中高度相关的读数，因为该事件反映了SF对侵蚀表型(如在关节翳中所见的)的活化水平。如果降低候选药物靶点在活化的SF中的表达引起由这些细胞表达的MMP1的降低，那么药物靶点被证实涉及MMP1表达的调节并且因此被考虑与用于治疗RA的治疗策略的开发有关。

在以下实施例中，测定法的建立(进一步称为‘MMP试验’)监测由滑液成纤维细胞(SF)对多种活化触发剂响应而产生的MMP1(实施例2.1)。然后，该试验的用途被描述为用于基因产物的确证，该基因产物被认为是开发RA治疗的药物靶点(实施例2.2)。靶点的确证是应用重组腺病毒来进行的，所述的腺病毒进一步被称为敲除病毒或Ad-siRNA，其介导shRNA在细胞中的表达，从而通过基于RNAi(RNA干扰)机制降低靶基因的表达水平(参见WO 03/020931)。然后，表3中描述了调节确证的药物靶点活性的化合物的鉴定。‘MMP试验’在试验调节所鉴定的药物靶点的活性的化合物中的用途在下面进一步描述。

试验实施例

所用的对照病毒：

下面列出了在这些研究中应用的对照病毒。dE1/dE2A腺病毒是通过辅助质粒pWEAd5AflII-rITR.dE2A在PER.E2A包装细胞中的共转染而由这些连接质粒产生的，如WO99/64582中描述。

阴性对照病毒：

Ad5-eGFP_KD：靶序列：GCTGACCCTGAAGTTCATC(SEQ IDNO：1)。应用Sap1位点克隆到载体中并且产生病毒，如WO03/020931中描述的。

Ad5-Luc_v13_KD：靶序列GGTTACCTAAGGGTGTGGC(SEQ IDNO：2)。应用Sap1位点克隆到载体中并且产生病毒，如WO03/020931中描述的。

Ad5-M6PR_v1_KD：靶序列CTCTGAGTGCAGTGAAATC(SEQ IDNO：3)。应用Sap1位点克隆到载体中并且产生病毒，如WO03/020931中描述的。

阳性对照病毒：

Ad5-MMP1_v10_KD：靶序列ACAAGAGCAAGATGTGGAC(SEQID NO：4)。应用Sap1位点克隆到载体中并且产生病毒，如WO03/020931中描述的。

用于靶点确证的病毒：

Ad5-MAPKAPK5_v13_KD：靶序列CGGCACTTTACAGAGAAGC(SEQ ID NO：5)。应用Sap1位点克隆到载体中并且产生病毒，如WO03/020931中描述的。

Ad5-MAPKAPK5_v12_KD：靶序列ATGATGTGTGCCACACACC(SEQ ID NO：6)。应用Sap1位点克隆到载体中并且产生病毒，如WO03/020931中描述的。

实施例2.1：MMP试验的开发

开发用于测量MMP1的384孔形式的ELISA。试验多种一抗和多种ELISA试验方法。开发以下试验方法并且确证测量384孔板中SF上清液的MMP1水平：将白色Lumitrac 600384孔板(Greiner)用2μg/mL抗MMP1抗体MAB1346(Chemicon)涂覆。将抗体在缓冲液40(在1L milliQ水中的1.21g Tris碱(Sigma)、0.58g NaCl(Calbiochem)和5mL10％NaN₃(Sigma)并且调节至pH 8.5)中稀释。在4℃下培养过夜后，将板用PBS(在10L milliQ中的80g NaCl、2g KCl(Sigma)、11.5gNa₂HPO₄.7H₂O和2g KH₂PO₄；pH 7.4)洗涤并且用100μL/孔的酪蛋白缓冲液(在PBS中的2％酪蛋白(VWR International))封闭。第二天，将酪蛋白缓冲液从ELISA板中除去并且用50μL/孔的EC缓冲液(在1L milliQ中的4g酪蛋白、2.13g Na₂HPO₄(Sigma)、2g牛血清白蛋白(Sigma)、0.69g NaH₂PO₄.H₂O(Sigma)、0.5g CHAPS(Roche)、23.3g NaCl、4mL 0.5MEDTA pH 8(Invitrogen)、5mL 10％NaN₃并且调节至pH 7.0)代替。在融化的样品的板中加入0.25mM DTT(Sigma)。除去EC缓冲液后，将20μL的样品转移到ELISA板中。在4℃下培养过夜后，将板用PBS洗涤两次并且用PBST(含0.05％Tween-20(Sigma)的PBS)洗涤一次并且与35μL/孔的生物素化的抗MMP1抗体溶液(R&D)一起培养。将该二抗以浓度5μg/mL在缓冲液C(在2L milliQ中的0.82g NaH₂PO₄.H₂O、4.82g Na₂HPO₄、46.6g NaCl、20g牛血清白蛋白和4mL 0.5M EDTA pH 8并且调节至pH 7.0)中稀释。在室温下培养2小时后，将板如上述洗涤并且与50μL/孔的链霉抗生物素-HRP偶联物(Biosource)一起培养。将链霉抗生物素-HRP偶联物以浓度0.25μg/mL在缓冲液C中稀释。45分钟后，将板如上述洗涤并且与50μL/孔的BM Chem ELISA底物(Roche)一起孵育5分钟。在Luminoscan Ascent Luminometer(Labsystems)上读数，积分时间是200毫秒或用Envision读数器(Perkin Elmer)。

图2中以白色棒显示了用RA领域中相关的细胞因子(TNF-α、IL1β和OSM)或它们的组合处理的SF表达的MMP1增加。对于该试验，将SF接种在96孔板中，3,000个细胞/孔。24小时后，将培养基换为添加1％FBS的M199培养基。培养基更换一天后，在培养基中加入细胞因子或它们的组合，所加的每种细胞因子的终浓度是25ng/mL。加入细胞因子72小时后，将上清液收集并且如以上给出的试验方法中描述的进行MMP1ELISA。与该试验平行，应用相同的试验方法，在M199培养基+1％FBS中用相同的细胞因子或细胞因子组合处理的THP1细胞(在M199+1％FBS中2倍稀释)的上清液触发SF。图2中以灰色棒显示了对于这些样品的MMP1水平。用TNF-α处理的THP1细胞的上清液触发的SF表达的MMP1的诱导作用强于(＞4.5倍诱导作用)单独用重组TNF-α触发的SF表达的MMP1的诱导作用(3倍诱导作用)，并且几乎等于5倍于3种纯化的细胞因子(TNF-α、IL1βb、OSM)的混合物获得的诱导作用。该结果表明TNF-α-诱导的THP1细胞的上清液除了包含TNF-α之外还包含另外的活化关于MMP1表达的SF的促炎因子。由于TNF-α在RA发病机制中的作用得到确证(TNF-α-阻断剂(例如英夫利昔单抗和依那西普)在治疗RA患者中显示出某些功效)并且THP-1细胞是RA患者关节中存在的单核细胞/巨噬细胞的代表，通过将THP-1细胞与TNF-α接触而制备的基于TNF-α的触发剂混合物将包含RA患者关节中存在的因子并且因此与RA相关。该基于TNF-α的复合体触发剂(进一步称为‘复合体触发剂’)将进一步用作“MMP试验”的主要成分。

应用地塞米松(有效的抗炎药，还能在啮齿类中大大降低胶原诱导的关节炎)显示“复合体触发剂”对SF活化的抑制(Yang等人，2004)(图3)。地塞米松显示了剂量依赖性地降低由复合体触发剂活化的SF产生的MMP1的量。将SF以密度3000个细胞/孔接种在96孔板中。接种24小时后，将增加浓度的地塞米松加入到细胞中。培养过夜后，将每孔的培养基更新为用TNF-α(在M199+0.5％FBS中50％稀释)处理的THP-1细胞的上清液并且如前一天那样加入相同浓度的地塞米松。处理48小时后，将上清液收集并且进行上述MMP1 ELISA。地塞米松的加入显著地降低了SF表达的MMP1，IC₅₀值约1nM(参见图3)。这些数据显示由活化的SF表达的MMP1可以通过加入生理学相关的抑制剂来降低，并且代表“MMP试验”的原理证明。

实施例2.2：MAPKAPK5调节SF“复合体触发剂”-诱导的MMP1表达

(A)Ad-siRNA病毒对敲除MAPKAPK5表达的功能

根据WO03/020931描述的方法来产生介导靶向MAPKAPK5和eGFP的siRNA表达的重组腺病毒。在重组腺病毒中应用的靶序列是：CGGCACTTTACAGAGAAGC(SEQ ID NO：5)和ATGATGTGTGCCACACACC(SEQ ID NO：6)。在重组腺病毒中所用的eGFP mRNA内的靶序列是：GCTGACCCTGAAGTTCATC(SEQ ID NO：1)。用Sap1位点将这些序列克隆到连接质粒中。dE1/dE2A腺病毒是通过辅助质粒pWEAd5AflII-rITR.dE2A在PER.E2A包装细胞中的共转染由这些连接质粒产生的，如WO99/64582描述的。

靶向MAPKAPK5的腺病毒的功能性试验如下。将这些腺病毒按如下方法用于感染在培养皿中培养的原代人SF。第一天，按每个培养皿500,000个SF接种。一天后，用Ad5-MAPKAPK5-v13_KD(1.6E9VP/mL)或Ad5-eGFP-v5_KD(1.3E10VP/mL)以MOI为4000(基于由Q-rt-PCR确定的病毒滴度(每mL病毒颗粒数))感染细胞。第七天，根据标准方法应用胰蛋白酶EDTA溶液将细胞从培养皿中分离。然后通过加入添加10％FBS的DMEM生长培养基将胰蛋白酶灭活。然后通过离心步骤(1000rpm，5分钟)将细胞收集。将沉淀物在100μL的新制RIPA缓冲液(50mM TrispH7.5、150mM NaCl、1％脱氧胆酸盐、1％Triton X100、0.1％SDS)中裂解。然后将样品超声10秒。然后如供应商描述的应用BCA试剂盒(Pierce，Cat N°23227)，应用BSA作为标准测定样品的蛋白浓度。在30μg稀释在19.5μL RIPA缓冲液中的细胞裂解物中加入3.5μL还原剂(NuPage还原剂N°10，Invitrogen NP0004)和7.5μL样品缓冲液(NuPage LDS样品缓冲液，Invitrogen NP0007)。然后将30μL样品煮沸5分钟并且上样至10％聚丙烯酰胺凝胶(Invitrogen NP0301)。为了估计蛋白质敲除的水平，将15μg、7.5μg和3.75μgAd5-eGFP-v5_KD感染细胞的裂解物也上样至凝胶。然后将凝胶在1×MOPS/SDS NuPage运行缓冲液(Invitrogen NP001)中以100V运行2小时。将10μL Seablue Plus预染的标准品(Invitrogen LC5925)用于估计凝胶上蛋白的大小。然后通过湿法印迹将胶上的蛋白质转移到PVDF膜(Invitrogen LC2002)上，其应用通过将100mL Nupage转移缓冲液20*(NP0006-1)、400mL甲醇和1500mL Milli Q水混合而制备的转移缓冲液。在转移前，将膜首先浸泡在甲醇和转移缓冲液中。转移在100V下进行90分钟。然后通过将膜浸泡在配制在PBST(添加0.1％Tween 20(Sigma，P1379)的PBS)中的封闭缓冲液(2％封闭粉末(Amersham，RPN 2109))中30分钟而封闭。封闭后，应用在封闭缓冲液中稀释250倍的抗MAPKAPK5的鼠单克隆抗体(BD Biosciences，Cat N°612080)进行免疫检测。用该一抗培养过夜后，将膜用PBST洗涤3次并且用在封闭缓冲液中稀释50000倍的二抗((多克隆山羊抗鼠Ig，HRP偶联的(DAKO P0447))孵育1小时。然后将印迹在PBST中洗涤3次并且在Kodakimager上根据厂商说明书用ECL advance(RPN2109，Amersham)进行检测。蛋白质印迹显示，与用Ad5-eGFP-v5_KD阴性对照病毒感染的细胞相比，Ad5-MAPKAPK5-v13_KD感染的细胞中MAPKAPK5的表达水平更低。与稀释的Ad5-eGFP-v5_KD感染的样品比较，估计表达降低2倍。通过‘剥离操作’(将膜在PBST中煮沸5分钟)除去MAPKAPK5抗体后，将等量上样的30μg样品通过β-肌动蛋白的免疫检测来说明。β-肌动蛋白的免疫检测是根据MAPKAPK5检测中描述的方法进行的，但是应用抗β-肌动蛋白的山羊多克隆抗体(Santa Cruz，Cat N°SC-1615)(其以1000倍稀释作为一抗)和兔抗山羊抗体(其以50000倍稀释作为二抗)。图4给出了该试验的结果。综上所述，该试验证明Ad-siRNA产生的降低原代人SF中MAPKAPK5表达水平的功能性。

(B)MAPKAPK5敲除Ad-siRNA降低SF-诱导的MMP1表达

Ad5-MAPKAPK5-v13_KD病毒在‘MMP试验’中的功效试验如下。第一天，将SF(传代数9至10)以每孔3000个细胞的密度接种在具有完全滑液生长培养基(Cell Applications)的96孔板中。一天后，将细胞用递增量(3、6、9、12或15μL)的下列病毒感染：Ad5-eGFP-v5_KD、Ad5-MAPKAPK5-v12_KD、Ad5-MAPKAPK5-v13_KD、Ad5-MMP1-v10_KD。病毒载量是通过加入中性病毒Ad5-Luc-v13_KD来校正以使得细胞中最终病毒体积是每孔15μL。该校正保证所观察到的作用不是来自用于细胞的病毒载量。然后在活化步骤之前将细胞培养5天。该步骤包括每孔中用添加25μL的‘复合体触发剂’的75μL M199培养基代替生长培养基。活化步骤48小时后，将上清液收集并且如实施例1中描述的进行MMP1 ELISA。试验结果在图5中显示。试验的质量通过靶向MMP1自身的Ad-siRNA病毒的功效来证实。该阳性对照病毒大大降低了SF表达的MMP1，而阴性对照病毒(为靶向荧光素酶的表达而设计)不影响MMP1表达水平。用于验证MAPKAPK5靶点的两种病毒(Ad5-MAPKAPK5-v12_KD和Ad5-MAPKAPK5-v13)也导致复合体触发剂诱导的原代人SF表达的MMP1显著降低。由该试验可以得出以下结论：MAPKAPK5代表有价值的药物靶点，其显示了调节SF中MMP1表达。类似的是，希望通过小分子化合物抑制MAPKAPK5酶活性，降低‘MMP试验’中‘复合体细胞因子’诱导的MMP1表达。也希望通过小分子化合物抑制MAPKAPK5酶活性，降低与RA有关的关节的降解。

(C)体外‘MMP试验’检验抑制MAPKAPK5的化合物

根据下面试验方法在‘MMP试验’中检验在生物化学试验中(即无细胞，应用纯化的酶)抑制MAPKAPK5活性的化合物。

将化合物储备母液(所有的在100％DMSO中，浓度为10mM)以10倍稀释在水中(蒸馏水，GIBCO，无DNA酶和RNA酶)以获得在10％DMSO中的1mM中间工作储备液。将该中间工作储备液进一步以3倍(或10倍)稀释在10％DMSO中以分别获得在10％DMSO中的333μM(或100μM)的中间工作储备液。然后将1mM和333μM(或100μM)中间工作储备液进一步以10倍稀释在1.1％DMSO中以获得在2％DMSO中的100μM和33.3μM(或10μM)浓度的10×工作储备液。然后将10×工作储备液以10倍稀释在添加1％FBS的M199培养基中以获得最终‘1×化合物制备液’，其包含10μM和3.33μM(或1μM)的化合物和0.2％DMSO。这些是在细胞上试验化合物的最终条件。与此平行，将10×工作储备液以10倍稀释在‘复合体触发剂’(即如实施例1中描述产生的TNF-α处理的THP1的上清液)中，将其以2倍稀释在添加1％FBS的M199中以产生‘在50％复合体触发剂中的1×化合物制备液’。

第1天，将RASF以3000个细胞/孔的密度接种在具有完全滑液生长培养基(Cell Applications)的96孔板(平底，组织培养基处理的，Greiner)中。第5天，将化合物按如下方法加入到培养的细胞中。将培养基从细胞中完全除去并且用75μL的‘1×化合物制备液’代替，所述的‘1×化合物制备液’包含在添加1％FBS和0.2％DMSO的M199培养基中浓度为10μM或3.33μM(或1μM)的化合物。培养2小时后(使化合物平衡并且进入细胞中)，将25μL的‘在50％复合体触发剂中的1×化合物制备液’加入到孔中，其在‘1×化合物制备液’上面，这些孔中包含相应浓度的相应化合物。在该方法中，将8倍稀释的复合体触发剂最终应用到细胞中。然后培养48小时，然后将20μL的细胞上清液如上述进行MMP1 ELISA，获得原始数据(RLU：相对发光单位)。以下对照包括在试验中。最高的信号对照，其中细胞由复合体触发剂活化，但是仅加入0.2％DMSO介质(并且因此无化合物)。该对照说明可以在试验中获得的MMP1的最高水平。最小的信号对照也包括在这些试验中。其中细胞没有被触发。然后在第5天将细胞的培养基换为100μL添加1％FBS的M199培养基。该对照恢复到由RASF产生的基础MMP1水平。然后基于ELISA返回的RLU数据计算由化合物获得的MMP1表达的抑制百分数，应用以下公式：

[[(最高MMP1水平-最低MMP1水平)-(化合物X在浓度Y下的MMP1水平-最低MMP1水平)]/(最高MMP1水平-最低MMP1水平)]×100。

化合物的毒性评价如下。第1天，将SF以每孔3000个细胞的密度接种在具有100μL完全滑液生长培养基的白色、组织培养基处理的96孔板中。在本实施例中如上述进一步进行化合物处理、将化合物加入到细胞中以及活化细胞，用于测定MMP1水平。培养48小时后，将培养基从孔中除去，并且用50μL添加1％FBS的新制M199培养基代替。然后将50μL的底物(Promega Celltiter Glow细胞活力试剂盒)加入到孔中。培养10分钟后，测定发光信号。与最高对照孔相比发光信号降低超过50％被认为反映出显著的毒性。在‘MMP试验’中试验的化合物没有观察到毒性。

应当理解的是，多种因素(例如不同化合物的不同细胞渗透能力)可以引起体外生物化学和细胞MMP试验之间化合物活性的差异。

实施例3：用于评价化合物对人PBMC释放的细胞因子的作用的试验

人外周血单核细胞(PBMC)是由健康志愿者血制备的“血沉棕黄层”分离的，分离基本上根据

(1984)的方法。简而言之，将血沉棕黄层用1×PBS(Gibco)以1∶1稀释并且将30mL小心地置于在50mL Falcon管中的20mL Lymphoprep^TM(Lucron Bioproducts)上面。离心(35分钟，400g，18℃)后，将单核细胞从白色界间收集并且通过重悬浮和离心(10分钟，200g)用1×PBS洗涤三次。将分离的PBMC最后重悬浮在添加10％热灭活的FBS(Hyclone)的RPMI 1640(Cat.No.21875，Gibco)中。

对于本试验，将PBMC以2.5E6个细胞/mL以160μL接种在96孔板(Nunc)中。将逐级稀释的试验化合物首先制备在DMSO(Sigma)中，然后在含有1％热灭活的FBS的M199培养基(Gibco)中稀释50倍。将化合物在试验板中进一步1/10稀释以获得最终DMSO浓度为0.2％。将细胞与化合物在37℃、5％CO₂下预培养1小时。然后，将细胞用LPS(大肠杆菌血清型026:B6，Cat.No.L2654，Sigma)(以体积20μL加入至终浓度为1μg/mL)刺激并且将细胞进一步培养24小时。将板离心并且将上清液收集并且在-80℃下贮存直到ELISA中适当的稀释的分析。

开发以下384孔化学发光ELISA试验方法以测量上清液中的TNFα水平：将白色Lumitrac 600 384孔板(Greiner)用(40μL/孔)抗TNFα捕获抗体(Cat.No.551220，BD Pharmingen)涂覆，该抗体在1×PBS(Gibco)中稀释至1μg/mL。在4℃下培养过夜后，将板用1×PBS(在10L milliQ中的80gNaCl、2g KCl(Sigma)、11.5g Na₂HPO₄.7H₂O和2g KH₂PO₄；pH 7.4)洗涤并且用100μL/孔缓冲液B(包含1％BSA(Sigma)、5％蔗糖(Sigma)和0.05％NaN₃(Sigma)的1×PBS)封闭。在室温下培养4小时后，将封闭缓冲液除去并且将板用PBST(含有0.05％Tween-20(Sigma)的1×PBS)洗涤一次。然后，将40μL样品转移到ELISA板中并且将板在4℃下培养。第二天，将板洗涤3次(用PBST洗涤两次并且用PBS洗涤一次)并且加入35μL/孔生物素化的抗TNFα抗体(Cat.No.554511，BD Pharmingen)，该抗体首先在缓冲液D(含有1％BSA的1×PBS)中稀释为浓度250ng/mL。在室温下培养2小时后，将板如上述洗涤并且加入35μL/孔的在缓冲液D中1/2000稀释的链霉抗生物素-HRP偶联物(Cat.No.SNN2004，Biosource)。45分钟后，将板如上述洗涤并且与50μL/孔BM化学发光ELISA底物POD(Roche)一起培养5分钟。读数是在Luminoscan Ascent Luminometer(Labsystems)上进行的，积分时间为100毫秒，给出原始数据(RLU：相对发光单位)。以下对照包括在试验中，最高的信号对照，其中细胞由LPS活化，但是仅加入0.2％DMSO介质(并且因此无化合物)。该对照说明可以在试验中获得的TNFα的最高水平。最小的信号对照也包括在这些试验中。其中细胞没有被触发。该对照恢复到由PBMC产生的基础TNFα水平。然后基于ELISA返回的RLU数据计算由化合物获得的TNFα释放抑制百分数(PIN)，应用以下公式：100-[((化合物X在浓度Y下的TNFα水平-最低TNFα水平)/(最高TNFα水平-最低TNFα水平))×100]。其中化合物在8个浓度(1/3逐级稀释)下试验，EC₅₀值可以由化合物在每个试验浓度下获得的PIN数据的平均值的曲线拟合来计算。

为了检验化合物对由LPS刺激的PBMC培养物引起的IL1和IL6释放的影响，适当稀释的上清液可以应用上述相同的ELISA试验方法来测量。与IL1和IL6 ELISA匹配的抗体(全部购自R&D Systems)可以应用如下：抗IL1捕获抗体(Cat.No.MAB601)以0.5μg/mL应用，生物素化的抗IL1检测抗体(Cat.No.BAF201)以50ng/mL应用；抗IL6捕获抗体(Cat.No.MAB206)以1μg/mL应用，生物素化的抗IL6检测抗体(Cat.No.BAF206)以50ng/mL应用。

实施例4：MMP13试验

MMP13 ELISA的实验方法在4.1部分描述，随后化合物对于IL-1/OSM-驱动的MMP13在SW1353软骨肉瘤细胞系中表达的释放实验在4.2部分描述。

4.1 MMP13 ELISA实验方法

建立了用于测定MMP13的384孔板形式的ELISA。测试多种一抗和各种ELISA方法。建立了以下方法，并在384孔板中的细胞培养物上清液中验证测定了MMP13的水平。

黑色maxisorb 384孔板(Nunc 460518)用35μl缓冲溶液涂覆，所述溶液含有1.5μg/mL抗-MMP13抗体MAB511(R&D systems)。该抗体在碳酸盐-碳酸氢盐涂覆缓冲液(1.59g Na₂CO₃(Sigma S-7795)和2.93gNaHCO3(Sigma S-5761)在1L MilliQ水中，调节至pH 9.6)中稀释。在4℃孵育过夜后，将各孔用100μL PBST(80g NaCl，2g KCl(Sigma)，11.5gNa₂HPO₄.7H₂O和2g KH₂PO₄，在10L milliQ水中；pH 7.4+0.05％Tween-20(Sigma))清洗两次，用100μL/孔封闭缓冲液(在PBS中的5％脱脂奶粉)封闭。在4℃孵育过夜后，将各孔用100μL PBST清洗两次。弃去PBST，将35μL样品转移至ELISA板。在室温孵育4小时后，板子用PBST清洗两次，在37℃用35μL/孔1.5mM APMA溶液孵育1小时(10mMAPMA储备液在一天前制备(35.18mg APMA(Sigma A-9563)在10mL0.1M NaOH中(Merck 1.06469.1000)，并储存在4℃。在使用前，将10mMAPMA储备液在1X APMA缓冲液中稀释到1.5mM(10X APMA缓冲液：500mM Tris(Roche 708976)，50mM CaCl₂(Sigma C-5080)，500μMZnCl₂(Sigma Z-0173)，1.5M NaCl(Calbiochem 567441)，0.5％Brij35(Sigma 430AG-6)，并调节到pH 7.0)。在APMA活化MMP13后，将板子用100μL PBST/孔再清洗两次，将35μL底物溶液加入各孔。底物溶液制备如下：OmniMMP荧光底物(Biomol P-126)储备液(2mM，在DMSO中，储存在-20℃)在1X OmniMMP缓冲液(10X OmniMMP缓冲液：500mMHepes(Sigma H4034)，100mM CaCl₂(Sigma C5080)，0.5％Brij35(Sigma430AG-6；调节至pH 7.0)中稀释到终浓度0.01mM。在37℃孵育过夜后，样品中活性的MMP13裂解了底物并释放荧光。在EnVision(Perkin Elmer)上进行读数，使用320nm激发/405nm发射的滤片。

4.2评价化合物对SW1353细胞中的细胞因子驱动的MMP13表达的作用

人软骨肉瘤细胞系SW1353得自ATCC，在添加了10％热灭活FBS和1x青霉素/链霉素(Invitrogen)的DMEM中，在潮湿的5％CO₂培养箱中在37℃培养。将细胞的等分试样冷冻和在液氮中冷藏。从冷藏的等分试样开始，细胞通过亚培养以1/5-1/8的比例每周两次经胰蛋白酶消化进行进一步培养。

从化合物的储备母液开始(所有化合物在100％DMSO中10mM浓度)，在96孔板中在100％DMSO中制备3倍系列稀释液。接着，板子用添加了1％热灭活FBS的M199培养基再稀释50倍，得到中间工作储备液。

在第1天，将SW1353细胞以15000细胞/孔的密度接种在96孔板(平底，组织培养基处理过，Greiner)的120μL生长培养基中。第二天，从中间工作储备液中取15μL化合物加入。在孵育60分钟使化合物平衡和进入细胞后，将细胞用IL-1β和OSM的混合物刺激，即，加入体积为15μL以得到终浓度为1ng/ml IL-1β和25ng/ml OSM。为此，将IL-1(10μg/ml)和OSM(25μg/ml)储备液(均来自PeproTech)分别在添加了1％FBS的M199培养基中稀释到10ng/ml和250ng/ml。在孵育48小时后，收集细胞上清液，进行适当稀释后在如上所述的MMP13 ELISA中得到原始数据(RFU：相对荧光单位)。在实验中包括以下对照：最大信号对照，其中细胞由IL1-β/OSM细胞因子混合物激活，但仅加入0.2％DMSO溶媒(因此不含化合物)。该对照表示在该实验中可以达到的最大MMP13水平。最小信号对照，其中包含的细胞仅接受0.2％DMSO溶媒，无触发剂。该对照反映SW1353细胞产生的基础MMP13水平。接着，基于ELISA得到的RFU数据计算化合物达到的MMP13表达水平的抑制百分比，采用以下公式：[[(最大MMP13水平-最小MMP13水平)-(化合物X在浓度Y的MMP13水平-最小MMP13水平)]/(最大MMP13水平-最小MMP13水平)]x100。根据抑制百分比相对于Log(摩尔浓度)绘图并拟合曲线，可以计算具体化合物的IC₅₀值。

以下化合物按照上述合成方法制备或可按上述方法制备。对于下面的表1，可以使用实施例1所述的MAPKAPK5试验方法测定每种化合物的活性，其表示如下：

++++化合物显示MAPKAPK5 IC₅₀ 0.01-100nM

+++化合物显示MAPKAPK5 IC₅₀ 101-500nM

++化合物显示MAPKAPK5 IC₅₀ 501-1000nM

+化合物显示MAPKAPK5 IC₅₀＞1000nM

表1

MMP1数据

§§化合物显示MMP1 IC₅₀ 1-1000nM

§化合物显示MMP1 IC₅₀＞1000nM

实施例号	MMP1 IC50nM
		1	§
2	§§
		3	§
4	§
		5	§§
实施例号	MMP1 IC50nM
		6	§

7	N/A
		8	§§
9	§§
		10	§
11	§
		12	§
13	N/A
		14	§
15	§
		16	§
17	§
		18	§
19	§
		20	§
21	§
		22	§
23	§
		24	§
25	§
		26	§

MMP13数据

^***化合物显示MMP13 IC₅₀ 1-500nM

^**化合物显示MMP13 IC₅₀ 501-1000nM

^*化合物显示MMP13 IC₅₀＞1000nM

表3

实施例号	MMP13 IC50nM
		1	*
2	***
		3	***
4	*
		5	*
6	*
		7	***
8	***
		9	*
10	N/A
		11	*
12	*
		13	*
14	N/A
		15	*
16	*
		17	**
18	*
		19	*
20	*
		21	*
22	*

23	*
		24	*
25	*
		26	*

体内研究

实施例5：化合物的耐受性

设计该方法是为了评估本发明化合物在健康DBA/1J小鼠中的耐受性，以确定“治疗窗”，其定义为有效剂量(小鼠治疗性抗原诱导的关节炎模型)和中毒剂量之间的剂量范围。

5.1动物

使用DBA/1J裸鼠(CERJ(法国))，这批小鼠为10-11周龄，体重为约20g。

5.2化合物制备

化合物按照以下给药方案制备：100mg/kg/d，口服，游离碱，按照0.1mL/10g小鼠(相当于10mg/1mL)的标准注射体积。对于溶液制剂，将化合物溶于0.5％甲基纤维素和1％DMSO中，一周一次。

5.3实验组

基于体重随机分组并治疗直至两周。每组包括5只小鼠，每只小鼠每天以200μL的给药体积接受100mg/kg的实验化合物、100mg/kg/d的对比化合物(化合物A)或者溶媒。

化合物A-

5.4动物监测(临床体征和体重)

通过每天观察和每周记录三次体重的体重减轻来检测潜在的药物毒性。全部统计学分析使用Student氏t检验进行。

为了评估该治疗的普遍耐受性，在此项研究的全过程持续跟踪总体重图6A显示化合物1和化合物2对总体重的影响，图6B显示对比化合物A的影响(见下文结构)。数据显示桥连的化合物比非桥连的化合物耐受性好。特别是与溶媒相比，以100mg/kg/d使用化合物1或2治疗的动物体重没有统计学显著差异。

实施例6：CIA模型

在实验开始时将完全弗氏佐剂/胶原II(CFA/Coll II，牛)注射(1mg/mL，每个动物100μL)到尾巴中(皮内)。在CFA/Coll II注射后21天，将不完全弗氏佐剂/胶原II(IFA/Coll II)以同样的水平注射到尾巴中(1mg/mL，每个动物100μL)。

接着将动物按照评分随机分组，分配到治疗组中，确保在不同的组中评分分布相等。

用测试化合物(1mg/kg/d、3mg/kg/d或30mg/kg/d)、阳性对照(Enbrel，10mg/kg/每周三次，腹膜内)或溶媒(甲基纤维素，1％DMSO)处理，开始于IFA/Coll II-强化后第8天(即，实验的第28天)。

动物每日用测试化合物、阳性对照或溶媒给药14天。每日对动物的临床症状进行评分，评分对每个爪进行报告。在治疗期间监测动物体重。通过X-射线成像来分析骨保护。

所选择的本发明化合物在3或30mg/kd/d有效。

实施例7：败血性休克模型

注射脂多糖(LPS)来诱导可溶性肿瘤坏死因子(TNF-α)向外周的快速释放。该模型用于分析体内TNF释放的保护性阻断剂。

每组6只BALB/cJ雌性小鼠(20g)在预定剂量下口服处理一次。30分钟后，腹膜内注射LPS(15μg/kg；大肠杆菌血清型0111:B4)。90分钟后，将小鼠处死并收集血液。循环中的TNFα水平使用可商购的ELISA试剂盒测定。使用地塞米松(5μg/kg)作为参照抗炎化合物。所选择的本发明化合物在口服3、10和20mg/kg下有效。

实施例8：小鼠胶原抗体诱导的关节炎(CAIA)模型(也称为小鼠单克隆抗体(MAB)模型)

每组8只BALB/cJ雌性小鼠(20g)在预定剂量下口服给药一次。在同一天，以每只小鼠2mg静脉内注射四种单克隆抗体的合剂(MDBiosciences；ref.CIA-MAB-50)。三天后，腹膜内给予LPS(50μg/小鼠；大肠杆菌血清型55:B5)。用测试化合物、阳性对照(Enbrel，10mg/kg/每周三次，腹膜内；或地塞米松，1mg/kg，每天，口服)或溶媒(甲基纤维素，1％DMSO)处理，开始于注射抗体的当天。动物每日用测试化合物、阳性对照或溶媒给药最多10天。对动物的临床症状进行评分，评分对每个爪进行报告。在治疗期间监测动物体重。

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本领域技术人员应当理解，以上描述是示例性和说明性的，用于解释本发明及其优选的实施方案。通过常规试验，技术人员能够了解在不背离本发明的精神的情况下可以进行明显的修改和变化。因此，本发明意欲不仅由以上描述所限定，还包括以下的权利要求和它们的等效物。

由以上描述可知，本发明组合物和方法中的多种修饰和改变对于本领域技术人员是可以理解的。所附权利要求的范围内的所有此类修饰都意欲包括在其中。

应当理解的是，多种因素(例如不同化合物的不同细胞渗透能力)可以引起体外生物化学和细胞试验之间化合物活性的差异。

将在本说明书中引用的所有出版物(包括但不限于专利和专利申请)并入本文作为参考，犹如将每个单独的出版物特别地并且单独地说明并入本文作为参考等同于将全部并入本文作为参考。

在本申请中给出和描述的至少一些本发明化合物的化学名可以通过使用商购的化学命名软件程序而自动产生，并且还未独立地验证过。执行该功能的代表性程序包括Open Eye Software公司出售的Lexichem命名工具和MDL公司出售的Autonom软件工具。在所示化学名和所绘的结构之间有差异的情况中，以所绘的结构为准。

本文所显示的化学结构是使用ChemDraw和ISIS

/DRAW制备的。结构中的碳、氧或氮原子上的任何开放的化合价在本文中表示存在氢原子。当结构中存在手性中心但未显示手性中心具体的立体化学时，与该手性结构有关的两种对映异构体都包括在该结构中。

Claims (64)

1.式Ia的化合物：

其中

W、W’、Y和Y’各自独立地是CR^2a或N；条件是W、W’、Y和Y’中不超过两个可以同时是N；

X是N或CH；

L是选自单键、-CO-、-SO-、-SO₂-、-N(R^2c)CO-和-N(R^2c)SO₂-；

环P是取代或未取代的：

R¹是H，或者取代或未取代的C₁-C₆烷基；

R^2a各自独立的选自H、取代或未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆卤代烷基、取代或未取代的C₁-C₆烷氧基、氰基和卤素；

R^2c各自独立地选自H和C₁-C₆烷基；

R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基；m1、m2和m3各自独立地是1或2；且

R³选自取代或未取代的芳基和取代或未取代的杂芳基；

或者其可药用盐；或者该化合物的溶剂化物或可药用盐；及其立体异构体、同位素变体和互变异构体。

2.式Ib的化合物：

其中

W、W’、Y和Y’各自独立地是CR^2a或N；条件是W、W’、Y和Y’中不超过两个可以同时是N；

X是N或CH；

L是选自单键、-CO-、-SO-、-SO₂-、-N(R^2c)CO-和-N(R^2c)SO₂-；

环P是取代或未取代的：

R¹是H，或者取代或未取代的C₁-C₆烷基；

R^2a各自独立的选自H、取代或未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆卤代烷基、取代或未取代的C₁-C₆烷氧基、氰基和卤素；

R^2c各自独立地选自H和C₁-C₆烷基；

R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基；m1、m2和m3各自独立地是1或2；

R³选自取代或未取代的芳基和取代或未取代的杂芳基；以及

或者其可药用盐；或者该化合物的溶剂化物或可药用盐。

3.权利要求1或2所述的化合物或可药用盐，其中L是单键、-CO-或-N(R^2c)CO-。

4.权利要求1-3中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R¹是Me、Et、n-Pr或i-Pr。

5.权利要求1-3中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R¹是H。

6.权利要求1中所述的化合物或可药用盐，其中所述化合物是式IIa、IIb、IIc或IId：

其中L和环P如权利要求1中所述；R^2a各自独立地选自H、取代或未取代的C₁-C₆烷基、取代或未取代的C₁-C₆烷氧基、氰基和卤素；且R³独立地选自取代或未取代的芳基和取代或未取代的杂芳基。

7.权利要求2中所述的化合物或可药用盐，其中所述化合物是式IIe、IIf或IIg：

其中L和环P如权利要求1所述；R^2a各自独立地选自H、取代或未取代的C₁-C₆烷基、取代或未取代的C₁-C₆烷氧基、氰基和卤素；且R³独立地选自取代或未取代的芳基和取代或未取代的杂芳基。

8.权利要求1-7中任一项所述的化合物或可药用盐，其中环P是取代或未取代的下述结构：

且其中R^2d和m1如权利要求1中所述。

9.权利要求1-8中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R^2a是H、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆卤代烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氰基或卤素。

10.权利要求9中所述的化合物或可药用盐，其中R^2a是Me、Et、Pr、异丙基、Cl、F、CN、OMe或CF₃。

11.权利要求1-8中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R^2a是H。

12.权利要求1-11中任一项所述的化合物或可药用盐，其中其中R³选自取代或未取代的芳基。

13.权利要求1-11中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R³是苯基，其任选地被卤素、氰基、未取代的C₁-C₆烷氧基或酰胺基取代，所述酰胺基任选地被未取代的C₁-C₆烷基取代。

14.权利要求1-11中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R³是苯基，其任选地被F、Cl、Br、氰基、OMe、OEt、O-n-Pr、O-i-Pr或酰胺基取代，所述酰胺基任选地被Me、Et、n-Pr或i-Pr取代。

15.权利要求1-11中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R³选自取代或未取代的杂芳基。

16.权利要求1-11中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R³选自苯基、吡啶基、吲哚基、异吲哚基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、

唑基和噻唑基，所述基团各自可以是未取代的或被羟基、氰基、卤素或酰胺基取代，所述酰胺基任选地被未取代的C₁-C₆烷基取代。

17.权利要求1-11中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R³选自苯基、吡啶基、吲哚基、异吲哚基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、

唑基和噻唑基，所述基团各自可以是未取代的或被羟基、氰基、F、Cl、Br或酰胺基取代，所述酰胺基任选地被Me、Et、n-Pr、i-Pr取代。

18.权利要求1-11中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R³是

且A¹、A²和A³各自独立地选自S、O、N、NR^3a和CR^3a；R^3a各自独立地是H或取代或未取代的C₁-C₆烷基；且R^3b是CONH₂、CONHMe或CN。

19.权利要求1-11中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R³是

20.权利要求1-11中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R³是

21.权利要求1-11中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R³是

22.权利要求1-11中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R³是

且其中下标m选自0、1、2、3和4，且R^3d各自独立地是取代或未取代的C₁-C₆烷基或卤素。

23.权利要求1-11中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R³是

且其中下标m选自0、1、2、3和4，且R^3d各自独立地是取代或未取代的C₁-C₆烷基或卤素。

24.权利要求1-11中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R³是

且其中下标m选自0、1、2或3，且R^3d各自独立地是取代或未取代的C₁-C₆烷基或卤素。

25.权利要求22-24中任一项所述的化合物或可药用盐，其中m是1或2；R^3d各自独立地是Me、Cl或F。

26.权利要求22-24中任一项所述的化合物或可药用盐，其中m是0。

27.权利要求1中所述的化合物或可药用盐，其中化合物是式IIIa、IIIb或IIIc：

且X如权利要求1中所述；L是单键、-CO-或-NHCO-；环P是

且R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选地被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基。

28.权利要求2中所述的化合物或可药用盐，其中化合物是式IIId或IIIe：

且X如权利要求1中所述；L是单键、-CO-或-NHCO-；环P是

且R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选地被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基。

29.权利要求1中所述的化合物或可药用盐，其中化合物是式IVa、IVb或IVc：

且X如权利要求1中所述；L是单键、-CO-或-NHCO-；环P是

且R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选地被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基。

30.权利要求2中所述的化合物或可药用盐，其中化合物是式IVd或IVe：

且X如权利要求1所述；L是单键、-CO-或-NHCO-；环P是

且R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选地被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基。

31.权利要求1中所述的化合物或可药用盐，其中化合物是式Va、Vb或Vc：

且X如权利要求1中所述；L是单键、-CO-或-NHCO-；环P是

且R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选地被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基。

32.权利要求2中所述的化合物或可药用盐，其中化合物是Vd或Ve：

且X如权利要求1中所述；L是单键、-CO-或-NHCO-；环P是

且R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选地被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基。

33.权利要求1中所述的化合物或可药用盐，其中化合物是VIa、VIb或VIc：

且X如权利要求1中所述；L是单键、-CO-或-NHCO-；环P是

且R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选地被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基。

34.权利要求2中所述的化合物或可药用盐，其中化合物是式VId或VIe：

且X如权利要求1中所述；L是单键、-CO-或-NHCO-；环P是

且R^2d是H、C₃-C₈环烷基或任选地被卤素、酰胺基或C₃-C₈环烷基取代的C₁-C₆烷基。

35.权利要求1-34中任一项所述的化合物或可药用盐，其中L是单键。

36.权利要求1-34中任一项所述的化合物或可药用盐，其中L是-CO-。

37.权利要求1-34中任一项所述的化合物或可药用盐，其中L是-NHCO-。

38.权利要求1-37中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R^2d是H、Me、i-Pr、t-Bu、CH₂CONH₂、环丙基甲基或CH₂CF₃。

39.权利要求1-37中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R^2d是H。

40.权利要求1-37中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R^2d是i-Pr。

41.权利要求1-37中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R^2d是t-Bu。

42.权利要求1-37中任一项所述的化合物或可药用盐，其中R^2d是环丙基甲基。

43.权利要求1-34中任一项所述的化合物或可药用盐，其中L是单键；且环P是

44.权利要求1-34中任一项所述的化合物或可药用盐，其中L是单键；且环P是

45.权利要求1-34中任一项所述的化合物或可药用盐，其中L是单键；且环P是

46.权利要求1-45中任一项所述的化合物或可药用盐，其中X是CH。

47.权利要求1-45中任一项所述的化合物或可药用盐，其中X是N。

48.权利要求1中所述的化合物或可药用盐，其中化合物选自：

5-(8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基)异二氢吲哚-1-酮；

4-(8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基)呋喃-2-甲酰胺；

4-(8-(4-((1S，4R)-5-叔丁基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基)呋喃-2-甲酰胺；

4-(8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基)呋喃-2-甲酰胺；

5-{8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基-氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-1H-吡唑-3-甲酸酰胺；

4-{8-(4-((1S，4S)-5-叔丁基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-苯基-氨基)咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酸酰胺；

4-{8-(6-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酸酰胺；

4-{8-(4-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基-氨基)咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基}-1H-吡啶-2-酮；

4-{8-(4-(5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.2]辛烷-2-基)苯基氨基)[1，2，4]-三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酸酰胺；

4-{8-(4-(5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.2]辛烷-2-基)苯基氨基)-咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酸酰胺；

4-{8-(4-(3-异丙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-基)苯基氨基)-咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酸酰胺；

4-{8-(4-(8-异丙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)苯基氨基)[1，2，4]-三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酸酰胺；

4-{8-(4-(3-异丙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-基)苯基氨基)[1，2，4]-三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酸酰胺；

4-{8-(4-(8-异丙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)苯基氨基)-咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基}-呋喃-2-甲酸酰胺；

5-{8-(6-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-1H-吡唑-3-甲酸酰胺；

5-{8-(4-((1S，4S)-5-叔丁基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并-[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；

5-{8-(4-((1S，4S)-5-叔丁基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基-氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-1H-吡唑-3-甲酸酰胺；和

5-{8-(6-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)吡啶-3-基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基}-2，3-二氢-异吲哚-1-酮；

或者该化合物的溶剂化物或可药用盐，及其立体异构体、同位素变体和互变异构体。

49.权利要求2中所述的化合物或可药用盐，其中化合物选自：

4-(8-(3-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基)呋喃-2-甲酰胺；

4-(8-(3-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)咪唑并[1，2-a]吡嗪-5-基)呋喃-2-甲酰胺；

5-(8-(3-((1S，4S)-5-异丙基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)苯基氨基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-5-基)异二氢吲哚-1-酮；

或者该化合物的溶剂化物或可药用盐，及其立体异构体、同位素变体和互变异构体。

50.药物组合物，其包含可药用载体和药用有效量的权利要求1-49中任一项所述的化合物或可药用盐。

51.权利要求50中所述的药物组合物，其中载体是胃肠外载体。

52.权利要求50中所述的药物组合物，其中载体是口服载体。

53.权利要求50中所述的药物组合物，其中载体是局部载体。

54.权利要求1-49中任一项所述的化合物或可药用盐在制备用于治疗或预防特征为ECM降解的病症的药物中的用途。

55.权利要求1-49中任一项所述的化合物或可药用盐在制备用于治疗或预防选自涉及炎症的疾病的病症的药物中的用途。

56.权利要求50中所述的化合物或可药用盐的用途，其中所述疾病是类风湿性关节炎。

57.权利要求1-50中任一项所述的化合物或可药用盐在制备用于治疗或预防通过施用促分裂原活化蛋白激酶活化蛋白激酶5的抑制剂来预防、改善或消除的病症的药物中的用途。

58.治疗特征为基质金属蛋白酶活性异常的病症的方法，其包括施用治疗有效量的抑制基质金属蛋白酶的权利要求1-50中任一项所述的化合物或可药用盐。

59.治疗选自与细胞外基质降解有关的疾病的病症的方法，其包括施用治疗有效的基质金属蛋白酶抑制量的权利要求1-50中任一项所述的化合物或可药用盐。

60.治疗选自与MMP1的异常细胞表达有关的疾病的病症的方法，其包括施用治疗有效的基质金属蛋白酶抑制量的权利要求1-50中任一项所述的化合物或可药用盐。

61.治疗或预防炎性疾病的方法，其包括向有需要的个体施用治疗有效量的权利要求1-50中任一项所述的化合物或可药用盐。

62.治疗或预防类风湿性关节炎的方法，其包括向有需要的个体施用治疗有效量的权利要求1-50中任一项所述的化合物或可药用盐。

63.权利要求1-50中任一项所述的化合物或可药用盐，其用于治疗或预防通过施用促分裂原活化蛋白激酶活化蛋白激酶5的抑制剂来预防、改善或消除的病症。

64.权利要求63所述的化合物，其中的病症选自与细胞外基质降解有关的疾病、与MMP1的异常细胞表达有关的疾病和炎性疾病。

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