CN102036980A - 作为IKK-β丝氨酸苏氨酸蛋白激酶抑制剂的取代噻吩羧酰胺 - Google Patents

Abstract

式(IA)或(IB)的化合物是IKK抑制剂，可用于治疗自身免疫疾病和炎性疾病：

式中，R₇是H或任选取代的(C₁-C₆)烷基；和A是5-13个环原子的任选取代芳基或杂芳基；Z是R₁C(R₂)(R₃)NH-Y-L¹-X¹-(CH₂)_z-的基团，其中R₁是羧酸基(-COOH)，或可被一种或多种胞内羧酸酯酶水解成羧酸基的酯基；且R₂和R₃独立表示天然或非天然α氨基酸的侧链，但R₂和R₃都不是氢，或者R₂和R₃与它们所结合的碳原子一起形成C₃-C₇环烷基环，z、Y、L¹和X¹如权利要求所定义。

Description

作为IKK-β丝氨酸苏氨酸蛋白激酶抑制剂的取代噻吩羧酰胺

本发明涉及以分子中存在α，α-二取代的甘氨酸酯基序为特征的噻吩羧酰胺，涉及含有它们的组合物，涉及它们的制备方法，并涉及它们在治疗自身免疫疾病和炎性疾病的IKK抑制剂类药物中的应用，所述疾病包括慢性阻塞性肺病、哮喘、类风湿性关节炎、银屑病、炎性肠病、克罗恩病、溃疡性回肠炎、多发性硬化症、糖尿病、特应性皮炎、移植物抗宿主病、系统性红斑狼疮。所述化合物还可用于治疗增生性疾病状态，如癌症。

发明背景

许多促炎性基因的表达受转录激活因子核因子-kB(NF-kB)调节。这些转录因子自从被发现以来就被怀疑在慢性和急性炎性疾病中发挥重要作用。现在看来，NF-kB的异常调节也可能是自身免疫疾病和不同类型癌症的基础。

取决于NF-kB活化的基因的例子包括：细胞因子肿瘤坏死因子TNF-α，白介素(IL)-6、IL-8和IL-1β；黏着分子E-选择蛋白，胞间黏着分子(ICAM)-1和血管细胞黏着分子(VCAM)-1；以及酶类一氧化氮合酶(NOS)和环加氧酶(COX)-2。NF-kB通常与IkB抑制蛋白家族成员形成无活性复合物存在于未刺激细胞的胞质内。然而，在细胞激活之后，IkB被IkB激酶(IKK)磷酸化并随后发生降解。游离NF-kB然后易位到细胞核并在那里介导促炎性基因表达。

有三类经典IkB：IkBα、IkBβ和IkBε；它们都要求两个关键丝氨酸残基被磷酸化之后才能被降解。IKK-α和IKK-β这两种主要的酶似乎负责IkB的磷酸化。发现这些酶中任何一种的显性失活(DN)形式(此时关键激酶结构域残基的突变造成ATP无法结合)能抑制TNF-α、IL-1β和LPS激活NF-kB。重要的是，发现IKK-βDN是比IKK-αDN更有效的抑制剂(Zandi，E Cell，1997，91，243)。此外，产生IKK-α和IKK-β缺乏小鼠确定促炎性刺激物激活NF-kB需要有IKK-β并强调了生化数据提示的IKK-β的显著作用。明确证实IKK-α不是这些刺激物激活NF-kB所必需的(Tanaka，M.；Immunity 1999，10，421)。因此，对IKK-β的抑制代表了调节免疫功能，并因此开发出治疗自身免疫疾病的药物的潜在有吸引力靶点。

发明内容

本发明提供了一类噻吩羧酰胺，它是IKK同种型尤其是IKK-β的有力和选择性抑制剂。因此，该化合物可用于药物，所述药物例如用于治疗各种增生性疾病状态，如与IKK活性过高相关的症状以及受NF-kB级联调节的疾病。此外，本发明的化合物可用于治疗中风、骨质疏松症、类风湿性关节炎和其他炎性疾病。所述化合物以分子中存在能被胞内羧酸酯酶水解的α，α-二取代的甘氨酸酯基序为特征。具有亲脂性α，α-二取代的甘氨酸酯基序的本发明化合物跨细胞膜并可被胞内羧酸酯酶水解成酸。极性水解产物由于无法方便地跨越细胞膜而在胞内累积。因此，该化合物的IKK抑制活性在细胞内被延长和增强。本发明的化合物涉及国际专利申请号WO 2004063186中披露的IKK抑制剂，但不同之处在于，本发明的化合物具有上述α，α-二取代的甘氨酸酯基序。

本发明的化合物还涉及我们的待批国际专利申请PCT/GB2007/004114中披露的那些。后述化合物具有α-单取代的甘氨酸酯基序，该基序使得化合物能够穿过细胞膜进入细胞，并在此处被胞内羧酸酯酶水解成相应的酸。然而，该公布未暗示α，α-二取代的甘氨酸酯偶联物也可被胞内羧酸酯酶水解。事实上，之前似乎未研究过胞内羧基酯酶，尤其是hCE-1、hCE-2和hCE-3，水解α，α-二取代的甘氨酸酯的能力。

我们的国际专利申请WO 2006/117567中披露了将α-单取代的甘氨酸酯基序与胞内酶或受体的调节物相偶联将有利于羧酸水解产物的胞内累积的一般概念。然而，该公布未暗示α，α-二取代的甘氨酸酯偶联物也可被胞内羧酸酯酶水解。如上所述，之前似乎未研究过胞内羧基酯酶，尤其是hCE-1、hCE-2和hCE-3，水解α，α-二取代的甘氨酸酯的能力。

发明详述

根据本发明，提供了一种式(IA)或(IB)的化合物或其盐：

式中：

R₇是H或任选取代的(C₁-C₆)烷基；和

A是5-13个原子的任选取代芳基或杂芳基环或环系统；

Z是式R₁C(R₂)(R₃)NH-Y-L¹-X¹-(CH₂)_z-的基团，其中：

z是0或1；

Y是键、-C(＝O)-、-S(＝O)₂-、-C(＝O)NR₇-、-C(＝S)-NR₇、-C(＝NH)NR₇或-S(＝O)₂NR₇-，其中R₇是氢或任选取代的C₁-C₆烷基；

L¹是式-(Alk¹)_m(Q)_n(Alk²)_p-的二价基团，其中

m、n和p独立为0或1，

Q是：(i)具有5-13个环成员的任选取代的二价单环或双环碳环或杂环基团，或(ii)，当m和p都是0时是式-X²-Q¹-或-Q¹-X²-的二价基团，其中X²是-O-、S-或NR^A-，其中R^A是氢或任选取代的C₁-C₃烷基，Q¹是具有5-13个环成员的任选取代的二价单环或双环碳环或杂环基团，

Alk¹和Alk²独立代表任选取代的二价C₃-C₇环烷基，或任选取代的直链或支链的C₁-C₆亚烷基、C₂-C₆亚烯基(alkenylene)或C₂-C₆亚炔基(alkynylene)，所述基团可任选含有或终止于醚(-O-)、硫醚(-S-)或氨基(-NR^A-)连接基团，其中R^A是氢或任选取代的C₁-C₃烷基；以及

X¹代表键；-C(＝O)；或-S(＝O)₂-；-NR₄C(＝O)-、-C(＝O)NR₄-、-NR₄C(＝O)NR₅-、-NR₄S(＝O)₂-或-S(＝O)₂NR₄-，其中R₄和R₅独立为氢或任选取代的C₁-C₆烷基。

R₁是羧酸基(-COOH)，或可被一种或多种胞内羧酸酯酶水解成羧酸基的酯基；以及

R₂和R₃独立表示天然或非天然α氨基酸的侧链，但R₂和R₃都不是氢，或者R₂和R₃与它们所结合的碳原子一起形成C₃-C₇环烷基环。

上述式(IA)或(IB)的化合物可制备成它的盐，尤其是药学上可接受的盐，N-氧化物、水合物和溶剂合物的形式。对本文所述化合物的任何定义、或提及“本发明的化合物”、“本发明所涉及的化合物”、“式(IA)或(IB)的化合物”等时，包括该化合物的盐、N-氧化物、水合物和溶剂合物。

在另一个广义方面，本发明提供了如上文定义的式(IA)或(IB)的化合物或其N-氧化物、盐、水合物或溶剂合物在制备用于抑制IKK尤其是IKK-β活性以及由NF-kB级联调节的疾病的组合物中的应用。

本发明涉及的化合物可用于在体外或体内抑制IKK尤其是IKK-β活性。

含有本发明化合物以及一种或多种药学上可接受的载体和赋形剂的药物组合物也是本发明的一部分。

在本发明的一个方面，本发明的化合物可用于制备组合物以治疗肿瘤性/增生性疾病、自身免疫疾病，尤其是上述那些IKK尤其是IKK-β活性发挥作用的疾病。

另一方面，本发明提供了一种治疗上述疾病类型的方法，所述方法包括给予患有这种疾病的对象有效量的如上文定义的式(IA)或(IB)的化合物。

术语

文中，术语“(C_a-C_b)烷基”，其中a和b是整数，表示含有a-b个碳原子的直链和支链烷基。因此，例如当a是1而b是6时，该术语包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和正己基。

文中，术语“二价(C_a-C_b)亚烷基”，其中a和b是整数，表示含有a-b个碳原子和两个不饱和化学价的饱和烃链。

文中，术语“(C_a-C_b)烯基”，其中a和b是整数，表示含有a-b个碳原子并具有合适E或Z立体化学的至少一个双键的直链和支链烯基部分。该术语包括，例如，乙烯基、烯丙基、1-和2-丁烯基和2-甲基-2-丙烯基。

文中，术语“二价(C_a-C_b)亚烯基”表示含有a-b个碳原子、至少一个双键和两个不饱和化学价的烃链。

文中，术语″(C_a-C_b)炔基″，其中a和b是整数，表示含有a-b个碳原子且还含有一个三键的直链和支链烃基。该术语可包括，例如，乙炔基、1-丙炔基、1-和2-丁炔基、2-甲基-2-丙炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、4-戊炔基、2-己炔基、3-己炔基、4-己炔基和5-己炔基。

文中，术语″二价(C_a-C_b)亚炔基″，其中a和b是整数，表示含有a-b个碳原子和至少一个三键的二价烃链。

文中，术语″碳环″指含有最多达16个环原子且所有环原子均为碳原子的单环、二环或三环基团，并包括芳基和环烷基。

文中，术语″环烷基″指含有3-8个碳原子的单环的饱和碳环基团，该术语包括，例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。

文中，非限制性术语″芳基″指单环、二环或三环的碳环芳香基团，并包括含有两个通过共价键直接相连的单环碳环芳香环的基团。这种基团的例子有苯基、联苯基和萘基。

文中，非限制性术语″杂芳基″指含有一个或多个选自S、N或O的杂原子的单环、二环或三环芳香基团，并包括含有通过共价键直接相连的两个此类单环或者一个此类单环和一个单环芳基环的基团。这种基团的例子有噻吩基、苯并噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、吡咯基、咪唑基、苯并咪唑基、噻唑基、苯并噻唑基、异噻唑基、苯并异噻唑基、吡唑基、唑基、苯并唑基、异

唑基、苯并异

唑基、异噻唑基、三唑基、苯并三唑基、噻二唑基、

二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、吲哚基和吲唑基。

文中，非限制性术语″杂环基″或″杂环″包括上面定义的″杂芳基″，其非芳香含义包括含有一个或多个选自S、N或O的杂原子的单环、二环或三环非芳香基团，并包括由含有一个或多个这种杂原子的单环非芳香基团构成的基团，所述单环非芳香基团共价连接到另一个此类基团或连接到单环碳环基团。这种基团的例子有吡咯基、呋喃基、噻吩基、哌啶基、咪唑基、

唑基、异

唑基、噻唑基、噻二唑基、吡唑基、吡啶基、吡咯烷基、嘧啶基、吗啉基、哌嗪基、吲哚基、吗啉基、苯并呋喃基、吡喃基、异

唑基、苯并咪唑基、亚甲二氧基苯基、亚乙二氧基苯基、马来酰亚胺基(maleimido)和琥珀酰亚胺基。

“二价亚苯基、亚吡啶基(pyridinylene)、亚嘧啶基(pyrimidinylene)或亚吡嗪基(pyrazinylene)”是有两个不饱和价的苯环、吡啶环、嘧啶环或吡嗪环，包括1，3-亚苯基、1，4-亚苯基，和以下这些：

除非当其出现时文中另有说明，术语″取代的″用于本文所述的任何部分时表示被最多4个相容的取代基取代，各取代基可以独立为，例如，(C₁-C₆)烷基，(C₁-C₆)烷氧基，羟基，羟基(C₁-C₆)烷基，巯基，巯基(C₁-C₆)烷基，(C₁-C₆)烷硫基，苯基，卤素(包括氟、溴和氯)，三氟甲基，三氟甲氧基，硝基，腈(-CN)，氧代，-COOH，-COOR^A，-COR^A，-SO₂R^A，-CONH₂，-SO₂NH₂，-CONHR^A，-SO₂NHR^A，-CONR^AR^B，-SO₂NR^AR^B，-NH₂，-NHR^A，-NR^AR^B，-OCONH₂，-OCONHR^A，-OCONR^AR^B，-NHCOR^A，-NHCOOR^A，-NR^BCOOR^A，-NHSO₂OR^A，-NR^BSO₂OH，-NR^BSO₂OR^A，-NHCONH₂，-NR^ACONH₂，-NHCONHR^B，-NR^ACONHR^B，-NHCONR^AR^B或-NR^ACONR^AR^B，其中，R^A和R^B独立为(C₁-C₆)烷基，(C₃-C₆)环烷基，苯基或含有5或6个环原子的单环杂芳基，或者当R^A和R^B连接到相同氮原子时形成环状氨基(例如吗啉代，哌啶基，哌嗪基或四氢吡咯基)。“任选的取代基”可以是上述取代基之一。

术语“天然或非天然α-氨基酸的侧链”表示式NH₂-CH(R^Y)-COOH所示天然或非天然氨基酸的R^Y基团。

天然α氨基酸的侧链的例子包括丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、谷氨酸、组氨酸、5-羟赖氨酸、4-羟脯氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸、α-氨基己二酸、α-氨基-正丁酸、3，4-二羟基苯丙氨酸、高丝氨酸、α-甲基丝氨酸、鸟氨酸、2-哌啶酸和甲状腺素的侧链。

在其特征性侧链中含有功能性取代基如氨基、羧基、羟基、巯基、胍基、咪唑基或吲哚基的天然α-氨基酸包括精氨酸、赖氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、色氨酸、组氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸和半胱氨酸。在本发明的化合物中，当R₂或R₃是上述侧链之一时，则所述功能性取代基可任选被保护。

术语“保护的”当用于天然α-氨基酸侧链中的功能性取代基时表示这种取代基的基本上无功能的衍生物。例如，羧基可被酯化(例如酯化为C₁-C₆烷基酯)，氨基可被转化成酰胺(例如作为NHCOC₁-C₆烷基酰胺)或氨基甲酸酯(例如作为NHC(＝O)OC₁-C₆烷基或NHC(＝O)OCH₂Ph氨基甲酸酯)，羟基可被转化成醚(例如OC₁-C₆烷基或O(C₁-C₆烷基)苯基醚)或酯(例如OC(＝O)C₁-C₆烷基酯)，硫醇基团可被转化成硫醚(例如叔丁基或苄基硫醚)或硫代酸酯(thioester)(例如SC(＝O)C₁-C₆烷基硫代酸酯)。

非天然α氨基酸的侧链的例子包括下文在讨论用于本发明化合物的合适R₂和R₃基团时提到的那些。

文中，术语“盐”包括碱加成盐、酸加成盐和季盐(quaternary salt)。酸性的本发明的化合物可与碱、有机碱形成盐，包括药学上可接受的盐，所述碱例如碱金属的氢氧化物如氢氧化钠和氢氧化钾；碱土金属的氢氧化物如氢氧化钙、氢氧化钡和氢氧化镁；所述有机碱例如N-甲基-D-葡糖胺、胆碱三(羟甲基)氨基-甲烷、L-精氨酸、L-赖氨酸、N-乙基哌啶、二苄基胺等。那些碱性的化合物(IA)或(IB)可与无机酸和有机酸形成盐，包括药学上可接受的盐，所述无机酸例如氢卤酸如盐酸或氢溴酸、硫酸、硝酸或磷酸等，所述有机酸例如乙酸、酒石酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、苹果酸、水杨酸、柠檬酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、苯甲酸、苯磺酸、谷氨酸、乳酸和扁桃酸等。有关合适的盐的回顾可见Stahl和Wermuth编写的《药用盐手册：特性、选择和应用》(Handbook of  Pharmaceutical Salts：Properties，Selection，and Use)(德国万海姆市WVCH公司(Wiley-VCH，Weinheim，Germany)，2002)。

预计本发明的化合物可以水合物或溶剂合物的形式回收，或者在某些结构中可采取N-氧化物的形式，以及预计具有非水合、非溶剂化或非N-氧化形式的活性的形式。术语‘溶剂合物’在文中用来描述包含本发明化合物和化学计量量的一种或多种药学上可接受的溶剂分子如乙醇的分子复合物。当所述溶剂是水时采用术语‘水合物’。

由于存在不对称碳原子，含有一个或多个实际的或潜在的手性中心的本发明化合物可存在对映异构体或者多种在各手性中心上具有R或S立体化学的非对映异构体。本发明包括所有这些对映异构体和非对映异构体和它们的混合物。

如上所述，本发明的酯被胞内酯酶转化成羧酸。所述酯和羧酸都可具有IKK-β激酶抑制活性。因此，本发明的化合物不仅包括酯，还包括相应的羧酸水解产物。

现在将更加详细地讨论本发明化合物中的可变取代基和基团：

取代基R ₇

R₇是H或任选取代的(C₁-C₆)烷基，如甲基、乙基或者正丙基或异丙基。目前优选R₇是氢。

环或环系统A

环A是5-13个原子的任选取代二价芳基或杂芳基，例如二价亚苯基、亚吡啶基(pyridinylene)、亚嘧啶基(pyrimidinylene)或亚吡嗪基(pyrazinylene)。目前优选1，3-亚苯基。

基团-Y-L ¹ -X ¹ -[CH ₂ ] _z -

该基团(或键)来自于选择用来连接氨基酸酯基序R₁R₂R₃CNH-与环系统A的特定化学方案。显然，用于该偶联的化学方法可以非常多，因此Y、L¹、X¹和z可以有许多组合。构成氨基酸酯基序与环系统之间的连接化学的变量的精确组合将通常与作为整体的化合物的基础结合模式无关。另一方面，在一些情况下，连接化学将选择与酶采取其它结合相互作用。

还应当注意，当氨基酸酯基序与环系统A之间的连接基团不是细胞内肽酶活性(这种活性可导致从分子中切割下氨基酸)的底物时，氨基酸酯基序的益处(易于进入细胞、在细胞内被酯酶水解、以及在细胞内累积活性羧酸水解产物)最大。当然，也可将该化合物与破裂的细胞内容物一起孵育并分析任何此类切割来方便地测量对细胞内肽酶的稳定性。

当头脑中有了上述一般概念时，接下来就可以考虑构成基团-Y-L¹-X¹-[CH₂]_z-的各种变量：

z可以是0或1，因此环系统A上可任选连接有亚甲基；

当不需要巨噬细胞选择性时，特别优选的Y的例子包括-(C＝O)-、-(C＝O)NH-和-(C＝O)O-；当需要巨噬细胞选择性时，Y的任何其它选择，包括Y是键的情况，都是合适的。

在基团L¹中，当Alk¹和Alk²基团存在时，其例子包括-CH₂-、-CH₂CH₂-、-CH₂CH₂CH₂-、-CH₂CH₂CH₂CH₂-、-CH＝CH-、-CH＝CHCH₂-、-CH₂CH＝CH-、CH₂CH＝CHCH₂-、-C≡C-、-C≡CCH₂-、-CH₂C≡C-和CH₂C≡CCH₂。Alk¹和Alk²的其它例子包括-CH₂W-、-CH₂CH₂W-、-CH₂CH₂WCH₂-、-CH₂CH₂WCH(CH₃)-、-CH₂WCH₂CH₂-、-CH₂WCH₂CH₂WCH₂-和-WCH₂CH₂-，其中W是-O-、-S-、-NH-、-N(CH₃)-或-CH₂CH₂N(CH₂CH₂OH)CH₂-。Alk¹和Alk²进一步的例子包括二价环丙基、环戊基和环己基。

在L¹中，当n是0时，所述基团是烃链(任选被取代，且可能含有醚、硫醚或氨基连接基团)。目前优选L¹中没有任选的取代基。当m和p都是0时，L¹是含有5-13个环原子的二价单环或双环碳环或杂环基团(任选被取代)。当n是1且m和p中至少一个是1时，L¹是二价基团，包括一条或多条烃链以及含有5-13个环原子的单环或双环碳环或杂环基团(任选被取代)。当Q存在时它可以是，例如，二价苯基、萘基、环丙基、环戊基或环己基，或是含有5-13个环成员的单环或二环杂环基团，如哌啶基、哌嗪基、吲哚基、吡啶基、噻吩基或吡咯基，但目前优选1，4-亚苯基。

具体地说，在本发明的一些实施方案中，L¹、m和p可以是0而n为1。在其它实施方案中，n和p可以是0而m为1。在其它实施方案中，m、n和p可以都是0。再在其它实施方案中，m可以是0，n可以是1，而Q为单环杂环基团，且p可以是0或1。Alk¹和Alk²当存在时可以选自-CH₂-、-CH₂CH₂-或-CH₂CH₂CH₂-，而Q可以是1，4-亚苯基。

基团-Y-L¹-X¹-[CH₂]_z-的具体例子包括-C(＝O)-和-C(＝O)NH-、以及-(CH₂)_v-、-(CH₂)_vO-、-C(＝O)-(CH₂)_v-、-C(＝O)-(CH₂)_vO-、-C(＝O)-NH-(CH₂)_w-、-C(＝O)-NH-(CH₂)_wO-、

其中，v是1、2、3或4，w是1、2或3，如-Y-L¹-X¹-[CH₂]_z-，可以是-CH₂-、-CH₂CH₂-、-CH₂CH₂CH₂-、-CH₂CH₂CH₂CH₂-、-CH₂O-、-CH₂CH₂O-、-CH₂CH₂CH₂O-、-CH₂CH₂CH₂CH₂O-、-C(＝O)-CH₂-、-C(＝O)-CH₂O-、-C(＝O)-NH-CH₂-或-C(＝O)-NH-CH₂O-。

基团R₁

在本发明的一类化合物中，R₁是羧酸基团。尽管这类化合物可作为羧酸或其盐给予，但优选它们是由胞内酯酶作用于其中R₁是酯基的相应化合物而在细胞内产生的。

酯基R₁必须是本发明化合物中被一种或多种细胞内羧酸酯酶水解成羧酸基的基团。能够将本发明化合物的酯基水解成相应酸的细胞内羧酸酯酶包括三种已知的人类的酶的同种型hCE-1、hCE-2和hCE-3。尽管这些酶被认为是主要的酶，但其它的酶如联苯基水解酶(BPH)也具有水解酯的作用。通常，如果羧酸酯酶将游离的氨基酸酯水解成母体酸，则当共价结合到抑制剂时羧酸酯酶也会水解酯基序。因此，本文所述的破细胞测定法(broken cell assay)和/或分离的羧酸酯酶试验为具有所需水解曲线的酯提供了直接、快速且简便的初筛方法。当将用这种方法选出的酯基序通过所选的结合化学方法结合到抑制剂时可采用相同的羧酸酯酶测定法再次测定，以证实它仍旧是该背景下的羧酸酯酶底物。

为被细胞内羧酸酯酶水解，特定的酯基R₁的例子包括式-(C＝O)OR₁₄的基团，其中，R₁₄是R₈R₉R₁₀C-，其中：

(i)R₈是氢、氟或任选取代的(C₁-C₃)烷基-(Z¹)_a-[(C₁-C₃)烷基]_b-或(C₂-C₃)烯基-(Z¹)_a-[(C₁-C₃)烷基]_b-，其中a和b独立为0或1，Z¹是-O-、-S-或-NR₁₁-，其中R₁₁是氢或(C₁-C₃)烷基；且R₉和R₁₀独立为氢或(C₁-C₃)烷基-；

(ii)R₈是氢或任选取代的R₁₂R₁₃N-(C₁-C₃)烷基-，其中R₁₂是氢或(C₁-C₃)烷基和R₁₃是氢或(C₁-C₃)烷基；或R₁₂和R₁₃与它们所结合的氮一起形成任选取代的5-或6-个环原子的单环杂环或8-10个环原子的二环杂环系统，且R₉和R₁₀独立为氢或(C₁-C₃)烷基-；或

(iii)R₈和R₉与它们所结合的碳一起形成任选取代的3-7个环原子的单环碳环或8-10个环原子的二环碳环系统，且R₁₀是氢。

在上述情况(i)、(ii)和(iii)中，“烷基”包括氟烷基。

在(i)、(ii)和(iii)这些类别中，R₁₀通常是氢。R₁₄的具体例子包括：甲基，三氟甲基，乙基，正或异丙基，正、仲或叔丁基，环己基，烯丙基，苯基，苄基，2-、3-或4-吡啶基甲基，N-甲基哌啶-4-基，四氢呋喃-3-基，甲氧基乙基，2，3-二氢化茚基，降冰片基，二甲基氨基乙基，或吗啉代乙基。目前优选R₁₄是环戊基。

已知巨噬细胞通过释放细胞因子，尤其是TNFα和IL-1而在炎性疾病中发挥关键作用(van Roon等，Arthritis and Rheumatism，2003，1229-1238)。在类风湿性关节炎中，它们主要维持关节炎症和关节破坏。巨噬细胞也参与肿瘤的生长和发展(Naldini和Carraro，Curr Drug Targets Inflamm Allergy，2005，3-8)。因此，选择性靶向巨噬细胞增殖的试剂对于治疗癌症和自身免疫疾病很有价值。预计靶向特定细胞类型能降低副作用。发明人已经发现了将IKK抑制剂靶向巨噬细胞以及其他衍生自骨髓-单核细胞谱系的细胞如单核细胞、破骨细胞和树突细胞的方法。该方法基于以下发现，即酯酶基序与IKK激酶抑制剂的连接方式决定了它是否被水解，因此是否在不同细胞类型中累积。具体地说，已经发现巨噬细胞以及其他衍生自骨髓-单核细胞谱系的细胞含有人羧酸酯酶hCE-1，而其它细胞类型不含有。在通式(IA)或(IB)中，当酯酶基序R₁C(R₂)(R₃)NH-的氮不直接连接到羰基(-C(＝O)-)时，即当Y不是-C(＝O)、-C(＝O)O-或-C(＝O)NR₃-基团时，该酯将仅被hCE-1水解，因此该抑制剂将选择性累积于巨噬细胞相关细胞内。在本文中，除非具体说明“单核细胞”，术语巨噬细胞将用于指代巨噬细胞(包括肿瘤相关性巨噬细胞)和/或单核细胞。

取代基R ² 和R ³

取代基R₂和R₃可被认为是α，α-二取代的甘氨酸或α，α-二取代的甘氨酸酯的α-取代基。因此，这些取代基可以是除甘氨酸以外的天然或非天然α-氨基酸的侧链，且这种侧链中的任何官能团可被保护。

例如，R₂和R₃的例子包括苯基和式-CR_aR_bR_c的基团，式中：

R_a、R_b和R_c各自独立为氢、(C₁-C₆)烷基、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基、苯基(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₈)环烷基；或

R_c是氢，R_a和R_b独立为苯基或杂芳基，如吡啶基；或

R_c是氢、(C₁-C₆)烷基、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基、苯基(C₁-C₆)烷基或(C₃-C₈)环烷基，R_a和R_b与它们所结合的碳原子一起形成3-8元环烷基或5-6元杂环；或

R_a、R_b和R_c与它们所结合的碳原子一起形成三环(例如金刚烷基)；或

R_a和R_b各自独立为(C₁-C₆)烷基、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基、苯基(C₁-C₆)烷基、或是除氢之外的如下文对R_c定义的基团，或者R_a和R_b与它们所结合的碳原子一起形成环烷基或杂环，且R_c是氢、-OH、-SH、卤素、-CN、-CO₂H、(C₁-C₄)全氟烷基、-CH₂OH、-O(C₁-C₆)烷基、-O(C₂-C₆)烯基、-S(C₁-C₆)烷基、-SO(C₁-C₆)烷基、-SO₂(C₁-C₆)烷基、-S(C₂-C₆)烯基、-SO(C₂-C₆)烯基、-SO₂(C₂-C₆)烯基或基团-Q-W，其中，Q代表键或-O-、-S-、-SO-或-SO₂-，W代表苯基、苯基烷基、(C₃-C₈)环烷基、(C₃-C₈)环烷基烷基、(C₄-C₈)环烯基、(C₄-C₈)环烯基烷基、杂芳基或杂芳基烷基，基团W可任选被一个或多个独立选自下组的取代基取代：羟基、卤素、-CN、-CONH₂、-CONH(C₁-C₆)烷基、-CONH(C₁-C₆烷基)₂、-CHO、-CH₂OH、(C₁-C₄)全氟烷基、-O(C₁-C₆)烷基、-S(C₁-C₆)烷基、-SO(C₁-C₆)烷基、-SO₂(C₁-C₆)烷基、-NO₂、-NH₂、-NH(C₁-C₆)烷基、-N((C₁-C₆)烷基)₂、-NHCO(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷基、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基、(C₃-C₈)环烷基、(C₄-C₈)环烯基、苯基或苄基。

或者，取代基R₂和R₃与它们所结合的碳可一起形成3-6元饱和螺环烷基环，如环丙基、环戊基或环己基环，或形成螺杂环，如哌啶-4-基环。

一些情况下，取代基R₂和R₃中至少一个是C₁-C₆烷基取代基，例如甲基、乙基、或者正丙基或异丙基。

一些实施方式中，取代基R₂和R₃之一是C₁-C₆烷基取代基，例如甲基、乙基、或者正丙基或异丙基，而另一个选自下组：甲基，乙基，正丙基和异丙基，正丁基、仲丁基和叔丁基，苯基，苄基，噻吩基，环己基，和环己基甲基。

在具体例子中，取代基R₂和R₃各自是甲基。

对于要全身给予的本发明化合物，优选羧酸酯酶断裂速率慢的酯，因为这种酯不易被系统前代谢。因此它们完整到达其靶组织的能力增强，且所述酯可在靶组织的细胞内被转化成酸产物。然而，对于局部给药而言，此时酯被直接施加于靶组织或通过例如吸入直接到达靶组织，通常需要这种酯被酯酶快速断裂，以使全身暴露和随后不希望的副作用最小。在本发明的化合物中，如果邻近α氨基酸酯α碳原子的碳原子被单取代，即R₂和R₃是CH₂R^z(R^z为单取代基)，则与上述碳原子如果被二取代或三取代(例如R₂和R₃是苯基或环己基或一起形成环的情况)相比，这种酯趋于更快被断裂。

如上所述，本发明所涉及的化合物是IKK、尤其是IKK-β激酶活性抑制剂，因此可用于治疗受IKK活性和NF-kB级联调节的疾病。这种疾病包括肿瘤性/增生性疾病、免疫疾病和炎性疾病。具体地说，所述化合物的用途包括治疗癌症如肝细胞癌或黑色素瘤，但也包括肠癌、卵巢癌、头颈癌和宫颈鳞状细胞癌、胃癌或肺癌、间变性少突神经胶质瘤、多形性成胶质细胞瘤或髓母细胞瘤；以及治疗类风湿性关节炎、硬皮病、炎性肠病、克罗恩病、溃疡性结肠炎、慢性阻塞性肺病、哮喘、多发性硬化症、糖尿病、特应性皮炎、移植物抗宿主病、系统性红斑狼疮、代谢性疾病如II型糖尿病或神经性障碍如阿尔茨海默病。

可将本发明涉及的化合物制成通过任何与其药代动力学特性一致的任何途径给予。可口服给予的组合物的形式可以是片剂，胶囊，粉末，颗粒，锭剂，液体或凝胶制品如口服、局部或无菌肠胃外溶液或悬浮液。口服给药的片剂和胶囊可以是单位剂形，并且可含有常用赋形剂，例如粘合剂，如糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨糖醇、黄芪胶或聚乙烯吡咯烷酮；填充剂，如乳糖、糖、玉米淀粉、磷酸钙、山梨糖醇或甘氨酸；压片润滑剂，如硬脂酸镁、滑石粉、聚乙二醇或二氧化硅；崩解剂，如马铃薯淀粉；或者可接受的湿润剂如十二烷基硫酸钠。可按照普通药学实践中熟知的方法对片剂包衣。口服液体制剂可以是(例如)水性或油性混悬剂、溶液剂、乳剂、糖浆或酏剂的形式，或者可以是临用前用水或气体合适载体重建的干燥产品。这类液体制剂可含有常用添加剂，例如助悬剂，如山梨糖醇糖浆、甲基纤维素、葡萄糖糖浆、明胶、氢化食用油；乳化剂，如卵磷脂、去水山梨糖醇单油酸酯或阿拉伯胶；非水性载体(可包含食用油)，如杏仁油、分级椰子油，油酯如甘油、丙二醇或乙醇；防腐剂，如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯或者山梨酸，如果需要还含有常用调味剂或着色剂。

局部用于皮肤时，可将药物制成乳膏剂、洗剂或油膏剂。可用于该药物乳膏剂或油膏剂是本领域熟知的常规制剂，例如药剂学标准教科书如英国药典(British Pharmacopoeia)所述。

本发明的化合物可采取吸入形式给予。产生气溶胶时可采用(例如)压力驱动的喷射雾化器或超声雾化器，优选采用推进剂驱动的计量式气雾剂或者不采用推进剂，从例如吸入胶囊或其它“干粉”递送系统给予微粉化活性化合物。

可根据采用的吸入器系统按照上面的描述给予活性化合物。除了活性化合物，给药形式中可任选包含赋形剂，例如推进剂(例如，在计量式气雾剂中为Frigen)、表面活性物质、乳化剂、稳定剂、防腐剂、调味剂和填料(例如，在干粉吸入器中为乳糖)，或者，如果合适的话，其他活性化合物。

为了吸入，大量系统都是适用的，这些装置能产生最佳粒度的气溶胶并采用适合患者的吸入技术给予。除了采用适配器(间隔物(spacer)、扩展器)和梨形容器(例如Nebulator

Volumatic)以及发射吹入喷雾的自动装置(Autohaler)，为给予经过计量的气溶胶，尤其是采用干粉吸入器时，许多技术方案是适用的(例如，Diskhaler

Rotadisk

Turbohaler

或者例EP-A-0505321中描述的吸入器)。

为局部施用于眼睛，可用合适的水性或非水性无菌载体将药物制成溶液或悬浮液。也可含有添加剂，例如，缓冲剂，如偏亚硫酸氢钠或依地酸二钠；防腐剂，包括杀菌剂和杀真菌剂如醋酸苯汞或硝酸苯汞、苯扎氯铵或氯己定；以及增稠剂，如羟丙甲纤维素。

也可采用无菌介质肠胃外给予活性成分。根据所用的载体和浓度，药物可悬浮或溶解于该载体。优选将佐剂如局部麻醉剂、防腐剂和缓冲剂溶解于载体中。

本发明的化合物可与许多已知药物活性物质结合使用。例如，本发明的化合物可与细胞毒素、HDAC抑制剂、激酶抑制剂、氨基肽酶抑制剂、蛋白酶抑制剂、bcl-2拮抗剂、mTor抑制剂和单克隆抗体(例如定位于生长因子受体的那些)一起使用。优选的细胞毒剂包括，例如，紫杉烷类、铂类、抗代谢物如5-氟尿嘧啶、拓扑异构酶抑制剂等。因此包含式(IA)或(IB)的氨基酸衍生物、其互变异构体或其药学上可接受的盐、N-氧化物、水合物或溶剂合物的本发明药物通常还包含细胞毒素、HDAC抑制剂、激酶抑制剂、氨基肽酶抑制剂和/或单克隆抗体。

此外，本发明提供了含有以下组分的药物组合物：

(a)式(IA)或(IB)的氨基酸衍生物或其药学上可接受的盐、N-氧化物，水合物或溶剂合物：

(b)细胞毒剂、HDAC抑制剂、激酶抑制剂、氨基肽酶抑制剂、蛋白酶抑制剂、bcl-2拮抗剂、mTor抑制剂和/或单克隆抗体；和

(c)药学上可接受的载体或稀释剂。

还提供了包含以下组分的产品：

(a)式(IA)或(IB)的氨基酸衍生物或其药学上可接受的盐、N-氧化物，水合物或溶剂合物：和

(b)细胞毒剂、HDAC抑制剂、激酶抑制剂、氨基肽酶抑制剂、蛋白酶抑制剂、bcl-2拮抗剂、mTor抑制剂和/或单克隆抗体，以便单独、同时或依次用于人体或动物体的治疗。

合成

有多种合成策略可用来合成本发明所涉及的化合物(IA)或(IB)，但它们都依赖于已知的化学方法并为合成有机化学家所知晓。因此可按照标准文献中描述的并为精通本领域的技术人员熟知方法合成式(I)的化合物。典型的文献来源有“高级有机化学(Advanced organic chemistry)”，第四版(威利出版社(Wiley))，J March，“综合有机转化(Comprehensive Organic Transformation)”，第二版(威利出版社)，R.C.拉洛克(R.C.Larock)，“杂环化学手册(Handbook of Heterocyclic Chemistry)”，第二版(帕加蒙出版社(Pergamon))，A.R.Katritzky)，例如在“Synthesis”、“Acc.Chem.Res.”、“Chem.Rev”中找到的综述文章，或者通过标准在线文献检索找到的第一文献来源或来自诸如“Chemical Abstracts”或“Beilstein”等第二文献来源中找到的论文。

本发明的化合物可通过许多方法来制备，所述方法通常描述于下文并在下文的实施例中更加具体描述。在下面描述的反应中，可能需要保护最终产物中所需的反应性官能团，例如羟基、氨基和羧基，以避免它们参与不必要的反应[参见，例如，Greene，T.W.，“有机合成保护基(Protecting Groups in Organic Synthesis)”，约翰威利父子公司(John Wiley and Sons)，1999]。常规保护基可与标准方法结合使用。一些情况下，去保护可能是合成通式(IA)或(IB)的化合物的最终步骤，下文描述的本发明的方法应理解为扩展至此类保护基的去除。

如上所述，本发明所涉及的化合物是IkB家族，即IKK-α和IKK-β的抑制剂，因此可用于治疗人类或其他哺乳动物的细胞增殖疾病如癌症，以及用于治疗炎症。

缩写

MeOH＝甲醇

EtOH＝乙醇

EtOAc＝乙酸乙酯

DCM＝二氯甲烷

DIBAL＝二异丁基氢化铵

DMF＝二甲基甲酰胺

DME＝1，2-二甲氧基乙烷

DMSO＝二甲亚砜

DMAP＝4-二甲基氨基吡啶

TFA＝三氟乙酸

THF＝四氢呋喃

Na₂CO₃＝碳酸钠

HCl＝盐酸

DIPEA＝二异丙基乙胺

LiHMDS＝二(三甲基甲硅烷基)酰胺锂

MP-CNBH₃＝大孔三乙基铵甲基聚苯乙烯氰基硼氢化物

NaH＝氢化钠

NaOH＝氢氧化钠

NaHCO₃＝碳酸氢钠

Pd/C＝碳载钯

PdCl₂(dppf)＝[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)

EDCI＝1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺

KOAc＝乙酸钾

TBAI＝四丁基碘化铵

ml＝毫升

g＝克

mg＝毫克

mol＝摩尔

mmol＝毫摩尔

Sat＝饱和的

LCMS＝高效液相色谱/质谱

NMR＝核磁共振

RT＝室温

市售试剂和溶剂(HPLC级)无需进一步纯化即可使用。用Buchi旋转式蒸发仪除去溶剂。微波照射用设定在300W的CEM Discover进行。用获自Fluorochem的粒度为40-63μm(230-400目)的硅胶通过快速层析柱纯化化合物。用制备型HPLC纯化化合物是在Agilent prep系统上进行的，采用反相Agilent prep-C18柱(5μm，50x 21.2mm)，10分钟0-100％B梯度(A＝水/0.1％氨水或0.1％甲酸，B＝乙腈/0.1％氨水或0.1％甲酸)，流速＝28毫升/分钟，在254nm UV检测。

在氘化溶剂中用Bruker 400或300MHz AV光谱仪记录¹H NMR谱。化学位移(δ)用用百万分之一份表示。用Kieselgel 60 F₂₅₄(默克公司(Merck))板进行薄层色谱(TLC)分析并用UV光显色。

分析型HPLC/MS方法如下：Agilent Prep-C18柱，5μm(4.6x50mm，流速为2.5毫升/分钟)，用7分钟H₂O-MeCN(含0.1％v/v甲酸)梯度洗脱，在254nm UV检测。梯度信息：0.0-0.5分钟：95％ H₂O-5％ MeCN；0.5-5.0分钟；从95％ H₂O-5％ MeCN到5％ H₂O-95％ MeCN；5.0-5.5分钟：维持5％H₂O-95％MeCN；5.5-5.6分钟：维持5％ H₂O-95％ MeCN，流速升至3.5毫升/分钟；5.6-6.6分钟：维持5％ H₂O-95％ MeCN，流速为3.5毫升/分钟；6.6-6.75分钟：返回95％ H₂O-5％ MeCN，流速为3.5毫升/分钟；6.75-6.9分钟：维持95％ H₂O-5％MeCN，流速为3.5毫升/分钟；6.9-7.0分钟：维持95％ H₂O-5％ MeCN，流速降至2.5毫升/分钟。质谱采用Agilent多模式源以正(APCI+ESI⁺)或负(APCI+ESI^-)模式获得。

可用于合成本发明的通式(IA)和(IB)的化合物的这种方法的例子列在下面方案1-5所示的反应中，但不限于此。

方案1列举了制备下述例子的常规合成途径，它采用常规Suzuki化学方法将有关硼酸酯(或酸)与中间的噻吩核(中间体1)偶联起来以得到相应的中间体2。

方案2列举了制备实施例3的合成途径，它采用Suzuki化学方法将中间体6与中间的噻吩核(中间体1)偶联起来。

方案3描述了制备实施例4的合成途径。

方案4描述了制备实施例6和实施例10的合成途径。

方案5描述了制备实施例7和实施例11的合成途径。

中间体

中间体1：5-溴-2-(氨基甲酰基氨基)噻吩-3-羧酰胺

方案1阶段1-4描述的中间体1的合成详细描述于WO03104218。

中间体2：2-(氨基甲酰基氨基)-5-(3-甲酰基苯基)噻吩-3-羧酰胺

在DME(50ml)中5-溴-2-(氨基甲酰基氨基)噻吩-3-羧酰胺(1.0g，3.79mmol)、3-甲酰基苯基硼酸(0.625g，4.17mmol)和四(三苯基膦)催化剂(0.438g，0.379mmol)的混合物中加入饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)。反应容器用氮气吹扫并在90℃加热过夜。用旋转式蒸发仪减压浓缩反应混合物。将所得深棕色残余物溶于DCM(17ml)并与2M氢氧化钠水溶液(8.5ml)一起搅拌20分钟。加入乙醚(20ml)并将混合物再搅拌30分钟。所得悬浮液超声2分钟。过滤得到沉淀，沉淀与热的乙醚研磨以得到有色固体(440mg)。

LCMS：m/z 288[M-H]⁺，m/z 290[M+H]⁺。

中间体3：盐酸2-甲基丙氨酸环戊酯

中间体3用下面方案6所示的途径合成。

阶段1-N-[(叔丁氧基羰基)-2-甲基丙氨酸环戊酯

0℃下在N-[(叔丁氧基羰基)-2-甲基丙氨酸(1.00g，4.92mmol)的DCM(10mL)溶液中加入环戊醇(0.83ml，9.84mmol)、EDCI(1.06g，5.42mmol)，最后加入DMAP(60mg，0.49mmol)。反应混合物升至室温并搅拌18小时。在真空下除去DCM以得到澄清油状物。将粗制残余物溶于EtOAc(100ml)并用水、1M NaHCO₃和盐水洗涤。将有机相干燥(MgSO₄)并真空浓缩。粗制萃取物通过柱层析纯化(10％ EtOAC庚烷溶液)以得到所需澄清油状产物(0.254g，20％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：5.25-5.17(1H，m)，5.04(1H，br s)，1.93-1.54(8H，m)，1.49(6H，s)，1.45(9H，s)。

阶段2-盐酸2-甲基丙氨酸环戊酯(中间体3)

将N-[(叔丁氧基羰基)-2-甲基丙氨酸环戊酯(0.254g，0.93mmol)溶于THF(5mL)并用4M HCl/二噁烷(2mL)处理，将反应混合物室温搅拌24小时。粗制混合物被减压浓缩并与Et₂O研磨以得到白色沉淀。所得沉淀进一步用Et₂O洗涤以得到所需白色粉末状产物(0.16g，82％)。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ：8.58(3H，br s)，5.21-5.14(1H，m)，1.93-1.78(2H，m)，1.74-1.53(6H，m)，1.45(6H，s)。

中间体4：2-甲基丙氨酸叔丁酯

中间体4用下面方案7所示的途径合成。

阶段1-N-[(苄氧基)羰基)]-2-甲基丙氨酸叔丁酯

0℃氮气下向DCM(10mL，无水)、环己烷(10ml)中的N-[(苄氧基)羰基)]-2-甲基丙氨酸(1g，4.21mmol)溶液中加入乙醚合三氟化硼(7μl，催化量)。然后用30分钟缓慢加入2，2，2-三氯亚氨逐乙酸叔丁酯(1.51ml，8.43mmol)的环己烷(10ml)溶液，之后升至室温。将反应物在室温下搅拌16小时。在粗制反应混合物中加入190mg NaHCO₃并将反应物过滤。真空浓缩母液。粗制萃取物通过柱层析纯化(10％ EtOAC庚烷溶液)以得到所需产物(0.863g，70％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.39-7.31(5H，m)，5.46(1H，br s)，5.10(2H，s)，1.54(6H，s)，1.45(9H，s)。

阶段2-2-甲基丙氨酸叔丁酯(中间体4)

向N-[(苄氧基)羰基)]-2-甲基丙氨酸叔丁酯(0.86mg，2.90mmol)的EtOAc(20ml)溶液中加入100mg 10％碳载钯催化剂。将混合物抽真空并在氢气气氛下搅拌18小时，通过Celite

过滤，用EtOAc洗涤并真空浓缩。分离出的产物为黄色油状物(0.45mg，96％)，其中含有痕量EtOAc。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：1.48(9H，s)，1.32(6H，s)。

中间体5：盐酸2-氨基-2-乙基丁酸环戊酯

中间体5是按照与中间体3类似方法用方案6所述合成途径合成的。LCMS：m/z 200[M+H]⁺。

中间体6：N-[3-(二羟基硼基)苯甲酰基]-2-甲基丙氨酸环戊酯

0℃下向3-羧基苯硼酸(200mg，1.2mmol)的无水DCM(15mL)溶液中加入HOBt(162mg，1.2mmol)、EDCI(230mg，1.2mmol)并将混合物在0℃搅拌20分钟。加入中间体3(310mg，1.81mmol)的DCM溶液(3mL)并室温搅拌4小时。反应物用DCM(10ml)稀释并用1M HCl水溶液、1M Na₂CO₃水溶液和盐水洗涤。将有机相干燥(MgSO₄)并减压浓缩得到白色固体状所需产物(198mg，90％)。LCMS：m/z 320[M+H]⁺。

中间体7：2-[(3-溴苄基)氨基]-2-乙基丁酸环戊酯

在氮气下向3-溴苯甲醛(0.49g，2.64mmol)的无水DCM(10ml)溶液中加入中间体5(0.75g，3.17mmol)并将混合物搅拌20分钟，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.68g，7.93mmol)。将反应物室温搅拌过夜，然后用水(40ml)猝灭。将各层分离，水层用DCM萃取，并将合并的有机层干燥(MgSO₄)、过滤并蒸发至干以得到粗产物。通过柱层析纯化(50％EtOAc的庚烷溶液)得到无色油状标题化合物(0.5g，52％产率)。

LCMS：m/z 369[M+H]⁺。

中间体8：2-乙基-2-{[3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苄基]氨 基}丁酸环戊酯

在氮气气氛下将2-[(3-溴苄基)氨基]-2-乙基丁酸环戊酯(中间体7)(0.5g，1.37mmol)溶于DMSO(10ml)并加入双(频哪醇合)二硼(bis(pinacolato)diboron)(0.52g，2.06mmol)，随后加入PdCl₂(dppf)(0.056g，0.07mmol)和乙酸钾(0.2g，2.06mmol)。混合物在65℃加热3小时。将反应物冷却至室温并在EtOAc(20ml)和水(20ml)之间分配。水层用EtOAc萃取，合并的有机萃取物用盐水洗涤，用MgSO₄干燥并真空浓缩成棕色油状物。通过柱层析纯化(50％ EtOAc的庚烷溶液)得到黄色油状标题化合物(0.32g，58％产率)。

LCMS：m/z 416[M+H]⁺。

中间体9：N-(4-溴苄基)-2-甲基丙氨酸环戊酯

中间体9是按照与中间体7类似的方法用4-溴苯甲醛和中间体3制备的。

LCMS：m/z 341[M+H]⁺。

中间体10：2-甲基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苄基] 丙氨酸环戊酯

中间体10是按照与中间体8类似的方法用中间体9制备的。

LCMS：m/z 388[M+H]⁺。

中间体11：(3-溴苯基)乙醛

0℃下向2-(3-溴苯基)乙醇(4.9g，24.4mmol)的DCM(20ml)溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(Dess-Martin periodinane)(10.8g，25mmol)，使混合物升至室温并搅拌过夜。反应物用DCM(100ml)稀释并与饱和硫代硫酸钠溶液(100ml)和饱和NaHCO₃溶液(100ml)一起搅拌。将各层分离并将有机层干燥(MgSO₄)、过滤并减压蒸发以得到橙色油状粗产物(4.07g，84％)。该产物无需纯化即使用。

LCMS：m/z 200[M+H]⁺。

中间体12：N-[2-(3-溴苯基)乙基]-2-甲基丙氨酸环戊酯

中间体12是按照与中间体7类似的方法从中间体3和11制备的。

LCMS：m/z 355[M+H]⁺

中间体13：2-甲基-N-{2-[3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯 基]乙基}丙氨酸环戊酯

中间体13是按照与中间体8类似的方法从中间体12制备的。

LCMS：m/z 424[M+Na]

中间体14：(6-溴-2-萘基)甲醇

0℃下向6-溴-2-萘酸(1g，3.98mmol)的THF(20ml)溶液中分批加入2M硼烷-二甲基硫醚的THF溶液(0.53ml，5.97mmol)。使混合物升至室温并搅拌过夜。将反应物冷却至0℃并加入MeOH。将溶液减压浓缩。粗产物通过柱层析纯化(EtOAc的庚烷溶液)得到标题化合物(0.4g，89％)。

LCMS：m/z 238[M+H]⁺。

中间体15：6-溴-2-萘醛

向(6-溴-2-萘基)甲醇(中间体14)(0.84g，3.56mmol)的溶液中加入氧化锰(2.29g，26.45mmol)并将悬浮液室温搅拌48小时。反应混合物通过硅藻土垫过滤并减压浓缩。产物无需纯化即使用(0.8g，95％)。

LCMS：m/z 236[M+H]⁺。

中间体16：N-[(6-溴-2-萘基)甲基]-2-甲基丙氨酸环戊酯

中间体16是按照与中间体7类似的方法从中间体3和15制备的。

LCMS：m/z 391[M+H]⁺。

中间体17：2-甲基-N-{[6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-2-萘 基]甲基}丙氨酸环戊酯

中间体17是按照与中间体8类似的方法从中间体16制备的。

LCMS：m/z 438[M+H]⁺。

实施例

以下实施例列举了本发明的具体化合物的制备，以及其IKK抑制特性：

实施例1：N-{3-[4-氨基甲酰基-5-(氨基甲酰基氨基)-2-噻吩基]苄基}-2-甲基 丙氨酸环戊酯

在氮气下向2-(氨基甲酰基氨基)-5-(3-甲酰基苯基)噻吩-3-羧酰胺(中间体2)(0.24g，0.83mmol)的无水四氢呋喃(8ml)溶液中加入中间体3(0.197g，1.24mmol)，将混合物搅拌20分钟，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.528g，2.49mmol)。将反应物室温搅拌过夜。反应物用水猝灭。减压除去四氢呋喃并用二氯甲烷萃取产物(2x20ml)。将有机层合并、干燥(MgSO₄)、过滤并蒸发至干以得到粗产物。通过制备型HPLC纯化得到标题化合物(50mg)。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.74-7.67(2H，m)，7.61(1H，s)，7.53-7.44(1H，m)，7.42-7.36(1H，m)，5.40-5.32(1H，m)，4.23(2H，s)，2.02-1.69(8H，m)，1.67(6H，s)。LCMS：m/z 445[M+H]⁺。

以下实施例用与实施例1类似的方法制备。

实施例2：N-{3-[4-氨基甲酰基-5-(氨基甲酰基氨基)-2-噻吩基]苄基}-2-甲基 丙氨酸叔丁酯

从中间体2和中间体4制备。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.75-7.68(2H，m)，7.62(1H，s)，7.50(1H，t，J＝7.6Hz)，7.42-7.38(1H，m)，4.22(2H，s)，1.66(6H，s)，1.59(9H，s)。

LCMS：m/z 433[M+H]⁺。

实施例3：N-{3-[4-氨基甲酰基-5-(氨基甲酰基氨基)-2-噻吩基]苯甲酰基}-2- 甲基丙氨酸环戊酯

向中间体6(198mg，0.62mmol)的DME(4ml)溶液中加入中间体1(136mg，0.51mmol)和四(三苯膦)钯(0.06g)。然后加入2ml饱和NaHCO₃水溶液。用氮气将悬浮液脱气并加热回流16小时。反应物冷却至室温，倒入水(5ml)中，用EtOAc(2x20ml)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并减压浓缩得到粗产物。通过柱层析纯化(4％ MeOH的DCM溶液)得到淡橙色固体状标题化合物(195mg，25％)。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.97(3H，t，J＝1.5Hz)，7.74-7.69(1H，m)，7.67-7.60(2H，m)，7.44(1H，t，J＝7.8Hz)，5.21-5.14(1H，m)，1.89-1.58(8H，m)，1.55(6H，s)。LCMS：m/z 459[M+H]⁺。

实施例4：2-({3-[4-氨基甲酰基-5-(氨基甲酰基氨基)-2-噻吩基]苄基}氨 基)-2-乙基丁酸环戊酯

氮气下向中间体1(0.19g，0.73mmol)的DME(10ml)溶液中加入2-乙基-2-{[3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苄基]氨基}丁酸环戊酯(中间体8)(0.33g，0.8mmol)，然后加入Pd(PPh₃)₄(0.083g，0.07mmol)和饱和NaHCO₃水溶液(1ml)。反应混合物在80℃搅拌过夜，然后冷却至室温，在EtOAc(40ml)和水(40ml)之间分配。水层用EtOAc萃取，合并的有机萃取物用盐水洗涤，用MgSO₄干燥并真空浓缩。通过制备型HPLC纯化得到黄色油状标题化合物(0.015g，4％产率)。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ：11.04(1H，s)，9.28(2H，br s)7.81-7.68(3H，m)，(7.49-7.38(3H，m)，6.99(1H，br s)，5.26(1H，m)，4.12(2H，m)，2.01-1.91(6H，m)，1.71-1.66(6H，m)，0.94(6H，t，J＝7.3Hz)。LCMS：m/z 473[M+H]⁺。

实施例5-7按照与实施例4类似的方法制备。

实施例5：N-{4-[4-氨甲酰基-5-(氨基甲酰基氨基)-2-噻吩基]苄基}-2-甲基丙 氨酸环戊酯

从中间体10和中间体1制备。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ：11.00(1H，s)，7.84(2H，br s)，7.47(2H，d，J＝8.1Hz)，7.34(3H，d，J＝8.1Hz)，6.99(2H，br s)，5.13-5.06(1H，m)，3.59(2H，br s)，1.91-1.77(2H，m)，1.73-1.53(6H，m)，1.26(6H，s)。LCMS：m/z445[M+H]⁺。

实施例6：N-(2-{3-[4-氨基甲酰基-5-(氨基甲酰基氨基)-2-噻吩基]苯基}乙 基)-2-甲基丙氨酸环戊酯

从中间体1和中间体13制备。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ11.00(1H，s)，7.72(1H，s)，7.4(1H，br s)，7.27-7.38(3H，m)，7.07(1H，d，J＝7.3Hz)，6.95(2H，br s)，5.01(1H，s)，2.68(4H，d，J＝5.3Hz)，1.75(2H，br.s.)，1.54(6H，m)，1.16(6H，s)。LCMS：m/z 459[M+H]⁺。

实施例7：N-({6-[4-氨基甲酰基-5-(氨基甲酰基氨基)-2-噻吩基]-2-萘基}甲 基)-2-甲基丙氨酸环戊酯

从中间体1和中间体17制备。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ11.04(1H，br s)，7.98-7.94(1H，m)，7.92-7.85(3H，m)，7.80-7.68(3H，m)，7.51-7.45(1H，m)，7.35(1H，br s)，7.02(2H，br s)，5.14-5.07(1H，m)，3.75(2H，m)，1.93-1.77(2H，m)，1.74-1.52(6H，m)，1.28(6H，s)。LCMS：m/z 495[M+H]⁺。

实施例8：N-{3-[4-氨基甲酰基-5-(氨基甲酰基氨基)-2-噻吩基]苄基}-2-甲基 丙氨酸

从实施例2制备。

向N-{3-[4-氨基甲酰基-5-(氨基甲酰基氨基)-2-噻吩基]苄基}-2-甲基丙氨酸叔丁酯(实施例2)(30mg，0.07mmol)的二氯甲烷(1ml)溶液中加入三氟乙酸(1ml)。将反应物室温搅拌过夜。减压除去溶剂并将残余物与乙醚研磨。过滤收集所得固体并减压干燥。通过制备型HPLC纯化得到标题化合物(17mg，75％)。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.74-7.68(2H，m)，7.63-7.60(1H，m)，7.52-7.44(1H，m)，7.42-7.37(1H，m)，4.24(2H，s)，1.70(6H，s)。LCMS：m/z377[M+H]⁺。

实施例9：N-{3-[4-氨基甲酰基-5-(氨基甲酰基氨基)-2-噻吩基]苯甲酰基}-2- 甲基丙氨酸

从实施例3制备。

向N-{3-[4-氨基甲酰基-5-(氨基甲酰基氨基)-2-噻吩基]苯甲酰基}-2-甲基丙氨酸环戊酯(实施例3)(194mg，0.42mmol)的四氢呋喃(5ml)溶液中加入氢氧化锂(50mg，2.11mmol)的水(5ml)溶液。反应物在40℃搅拌过夜。真空除去溶剂，并在残余物中加入水(2ml)。用1M HCl将pH调至pH 5。通过过滤收集沉淀并依次用水和乙醚洗涤，然后减压干燥。粗产物通过制备型HPLC纯化得到标题化合物(33mg，20％)。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ8.02-7.99(2H，m)，7.79-7.64(2H，m)，7.63(1H，s)，7.45(1H，t，J＝7.8Hz)，1.60(6H，s)。LCMS：m/z 781[2M+H]⁺。

实施例10和11按照与实施例8相同的方法制备。

实施例10：N-(2-{3-[4-氨基甲酰基-5-(氨基甲酰基氨基)-2-噻吩基]苯基}乙 基)-2-甲基丙氨酸

从实施例6制备。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ11.0(1H，s)，9.0(1H，br s)，7.75(1H，s)，7.65(1H，s)，7.45(6H，m)，7.15(1H，m)，6.96(2H，m)，3.41(4H，m)，1.50(6H，s)。LCMS：m/z 391[M+H]⁺。

实施例11：N-({6-[4-氨基甲酰基-5-(氨基甲酰基氨基)-2-噻吩基]-2-萘基}甲 基)-2-甲基丙氨酸

从实施例7制备。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ11.06(1H，br s)，8.02-7.87(5H，m)，7.80-7.71(2H，m)，7.63-7.56(1H，m)，7.37(1H，br s)，7.03(2H，br s)，4.07(2H，s)，1.39(6H，s)。

测量生物学活性

IKKβ酶试验

由英国佩斯利的因维曲根公司(Invitrogen，Paisley，UK)进行试验测量化合物抑制IKK-β激酶活性的能力。Z′-LYTE^TM生化试验采用基于荧光的偶联酶模式并基于磷酸化肽和非磷酸化肽对蛋白水解切割的不同敏感性。肽底物用构成FRET对的两种荧光团标记(每个末端一种荧光团)。在初步反应中，激酶将ATP的γ磷酸转移到合成FRET-肽的单个丝氨酸或苏氨酸残基上。在二次反应中，位点特应性蛋白酶识别并切割非磷酸化的FRET-肽。FRET-肽的磷酸化能抑制被扩展剂(Development Reagent)切割。切割打断了FRET-肽上供体荧光团(即香豆素)和受体荧光团(即荧光素)之间的FRET，从而未被切割的磷酸化FRET-肽得以保留FRET。采用放射测量法来量化反应进程，该方法计算400nm激发供体荧光团之后供体发射与受体发射的比值(发射比)。

最终的10μL激酶反应物包括0.9-8.0ng IKBKB(IKK-β)、2μM Ser/Thr 05肽和ATP，用50mM HEPES pH 7.5、0.01％ BRIJ-35、10mM MgCl₂、1mM EGTA配制。试验在ATP浓度为或接近Km时进行。激酶反应物室温孵育60分钟后加入5μL 1：128稀释的扩展剂。试验平板再室温孵育60分钟，并用荧光平板阅读器读读数。

从DMSO配制的检测化合物原液的1/3 log连续稀释液获得一式两份数据点。从最高浓度10μM开始进行9次稀释，包括‘无化合物’空白。收集数据并采用IDBS的XLfit软件进行分析。剂量反应曲线是205号模型(S形剂量反应模型)的拟合曲线。从生成的曲线可确定并汇报50％抑制浓度。

THP-1细胞的LPS-刺激

以4x10⁴细胞/孔的密度将100μl THP-1细胞接种于V形底96孔组织培养处理平板并在5％ CO₂下于37℃孵育16小时。加入用100μl组织培养基配制的抑制剂2小时后用最终浓度为1μg/ml的LPS(大肠杆菌菌株005:B5，西格玛公司(Sigma))刺激细胞并在5％ CO₂下于37℃孵育6小时。用夹心ELISA(R&DSystems #QTA00B)测定无细胞上清液中的TNF-α水平。

人全血的LPS-刺激

用肝素化真空采血器(vacutainer)(BD公司(Becton Dickinson))通过静脉穿刺采集全血并用等体积RPMI1640组织培养基(西格玛公司)稀释。取100μl接种于V形底96孔组织培养处理平板。加入用100μl RPMI1640培养基配制的抑制剂2小时后用最终浓度为100ng/ml的LPS(大肠杆菌菌株005:B5，西格玛公司(Sigma))刺激所述血液并在5％ CO₂下于37℃孵育6小时。用夹心ELISA(R&D Systems #QTA00B)测定无细胞上清液中的TNF-α水平。

IC₅₀值被归入3个范围之一，如下：

范围A：IC50＜5000nM

范围B：500nM＜IC50＜1000nM

范围C：IC50＞1000nM

结果表格：

“NR”表示“无关”。实施例8-11是在细胞内切割氨基酸酯得到的羧酸类似物。当这些羧酸与细胞接触时，它们不会进入细胞因此在该试验中不会抑制TNF-α。

破细胞羧酸酯酶试验

可对任何给定的本发明化合物(其中R₁是酯基)通过以下试验进行检测以确定它是否能够满足被胞内酯酶水解的要求。

制备细胞提取物

U937或Hut116肿瘤细胞(约10⁹)，用4倍体积的Dulbeccos PBS(约1升)洗涤并在4℃以525g离心10分钟使其沉淀。重复两次，然后将最终的细胞沉淀物重悬于35ml冷的匀浆缓冲液(Trizma 10mM、NaCl 130mM、CaCl₂ 0.5mMPH 7.0，25℃)。通过氮气气蚀(nitrogen cavitation)制备匀浆(700psi，50分钟，4℃)。将匀浆保持在冰上并补充以下最终浓度的抑制剂混合物

亮肽素1μM

抑肽酶0.1μM

E64 8μM

胃酶抑素1.5μM

苯丁抑制素162μM

胰凝乳蛋白酶抑制剂33μM

将细胞匀浆在525g离心10分钟以使其澄清，所得上清液被用作酯酶活性来源并可储存于-80℃直至使用。

测量酯的切除

用如上制备的细胞提取物测量酯水解成相应羧酸。为达到这种效果，37℃，将细胞提取物(约30ug/0.5ml总测试体积)在Tris-HCl 25mM、125mM NaCl缓冲液(25℃时PH为7.5)中孵育。在0时刻加入最终浓度为2.5μM的酯(底物)并将样品在37℃孵育适当时间(通常为0或80分钟)。加入3倍体积的乙腈终止反应。对于0时刻样品，在加入酯化合物之前加入乙腈。12,000g离心5分钟后，在室温下通过LCMS(Sciex API 3000，HP1100二元泵，CTC PAL)分析样品中的酯及其相应的羧酸。色谱法基于MeCN(75x2.1mm)柱，流动相为5-95％乙腈水溶液/0.1％甲酸。

人全血试验

人肝素化血液(17-IU/ml)用等体积RPMI-1640稀释，然后等分入96孔微滴定孔(100μl/孔)。将RPMI-1640连续稀释的IKKβ抑制剂加入孔中(100μl/孔)以得到一系列最终浓度(5-10000nM)。在37℃培育2小时后，37℃，加入10μl LPS(大肠杆菌055:B5)至终浓度为100ng/ml以刺激TNFα产生，6小时。然后将平板800g离心3分钟并用QuantiGlo化学发光ELISA(R&D系统(R&D Systems))测量上清液中存在的TNFα。

表2

人全血试验在生理相关设置下测量了该化合物抑制IKKβ介导的LPS刺激人全血中TNFα产生的能力。因此，表2显示，相比于母体化合物(化合物1：WO 2004063186)，母体IKK抑制剂化合物与能被胞内羧酸酯酶水解的α，α-二取代的甘氨酸酯基序(实施例1)偶联导致在细胞和酶中的潜能之比显著降低，说明加入酯酶基序导致显示出增强的细胞潜能水平的化合物。

Claims (24)

1.式(IA)或(IB)的化合物或其盐：

式中：

R₇是H或任选取代的(C₁-C₆)烷基；和

A是5-13个环原子的任选取代芳基或杂芳基环或环系统；

Z是式R₁C(R₂)(R₃)NH-Y-L¹-X¹-(CH₂)_z-的基团，其中：

z是0或1；

Y是键、-C(＝O)-、-S(＝O)₂-、-C(＝O)NR₇-、-C(＝S)-NR₇、-C(＝NH)NR₇或-S(＝O)₂NR₇-，其中R₇是氢或任选取代的C₁-C₆烷基；

L¹是式-(Alk¹)_m(Q)_n(Alk²)_p-的二价基团，其中

m、n和p独立为0或1，

Q是：(i)具有5-13个环成员的任选取代的二价单环或双环碳环或杂环基团，或(ii)，当m和p都是0时，其是式-X²-Q¹-或-Q¹-X²-的二价基团，其中X²是-O-、S-或NR^A-，其中R^A是氢或任选取代的C₁-C₃烷基，Q¹是具有5-13个环成员的任选取代的二价单环或双环碳环或杂环基团，

Alk¹和Alk²独立代表任选取代的二价C₃-C₇环烷基，或任选取代的直链或支链的C₁-C₆亚烷基、C₂-C₆亚烯基或C₂-C₆亚炔基，所述基团可任选含有或终止于醚(-O-)、硫醚(-S-)或氨基(-NR^A-)连接基团，其中R^A是氢或任选取代的C₁-C₃烷基；以及

X¹代表键；-C(＝O)；或-S(＝O)₂-；-NR₄C(＝O)-、-C(＝O)NR₄-、-NR₄C(＝O)NR₅-、-NR₄S(＝O)₂-或-S(＝O)₂NR₄-，其中R₄和R₅独立为氢或任选取代的C₁-C₆烷基。

R₁是羧酸基(-COOH)，或可被一种或多种胞内羧酸酯酶水解成羧酸基的酯基；以及

R₂和R₃独立表示天然或非天然α氨基酸的侧链，但R₂和R₃都不是氢，或者R₂和R₃与它们所结合的碳原子一起形成C₃-C₇环烷基环。

2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R₇是氢。

3.如权利要求1或2所述的化合物，其特征在于，A是任选取代的1，4-亚苯基或1，3-亚苯基。

4.如上述权利要求中任一项所述的化合物，其特征在于，A中的任选取代基选自氟、氯、甲基或三氟甲基。

5.如上述权利要求中任一项所述的化合物，其特征在于，R₁是式-(C＝O)OR₁₄的酯基，其中R₁₄是R₈R₉R₁₀C-，其中

(i)R₈是氢、氟或任选取代的(C₁-C₃)烷基-(Z¹)_a-[(C₁-C₃)烷基]_b-或(C₂-C₃)烯基-(Z¹)_a-[(C₁-C₃)烷基]_b-，其中a和b独立为0或1，Z¹是-O-、-S-或-NR₁₁-，其中R₁₁是氢或(C₁-C₃)烷基；且R₉和R₁₀独立为氢或(C₁-C₃)烷基-；

(ii)R₈是氢或任选取代的R₁₂R₁₃N-(C₁-C₃)烷基-，其中R₁₂是氢或(C₁-C₃)烷基和R₁₃是氢或(C₁-C₃)烷基；或R₁₂和R₁₃与它们所结合的氮一起形成任选取代的5-或6-个环原子的单环杂环或8-10个环原子的二环杂环系统，且R₉和R₁₀独立为氢或(C₁-C₃)烷基-；或

(iii)R₈和R₉与它们所结合的碳一起形成任选取代的3-7个环原子的单环碳环或8-10个环原子的二环碳环系统，且R₁₀是氢。

6.如权利要求1-4中任一项所述的化合物，其特征在于，R₁是甲基，乙基，正丙基或异丙基，正丁基、仲丁基或叔丁基，环己基，烯丙基，苯基，苄基，2-、3-或4-吡啶基甲基，N-甲基哌啶-4-基，四氢呋喃-3-基、甲氧基乙基、2，3-二氢化茚基、降冰片基、二甲基氨基乙基或吗啉代乙基酯基团。

7.如上述权利要求中任一项所述的化合物，其特征在于，R₂和R₃独立为苯基、或杂芳基、或式-CR_aR_bR_c的基团，该式中：

R_a、R_b和R_c各自独立为氢、(C₁-C₆)烷基、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基、苯基(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₈)环烷基；或

R_c是氢，R_a和R_b独立为苯基或杂芳基，如吡啶基；或

R_c是氢、(C₁-C₆)烷基、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基、苯基(C₁-C₆)烷基或(C₃-C₈)环烷基，R_a和R_b与它们所结合的碳原子一起形成3-8元环烷基或5-6元杂环；或

R_a、R_b和R_c与它们所结合的碳原子一起形成三环(例如金刚烷基)；或

R_a和R_b各自独立为(C₁-C₆)烷基、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基、苯基(C₁-C₆)烷基、或是除氢之外的如下文对R_c定义的基团，或者R_a和R_b与它们所结合的碳原子一起形成环烷基或杂环，且R_c是氢、-OH、-SH、卤素、-CN、-CO₂H、(C₁-C₄)全氟烷基、-CH₂OH、-O(C₁-C₆)烷基、-O(C₂-C₆)烯基、-S(C₁-C₆)烷基、-SO(C₁-C₆)烷基、-SO₂(C₁-C₆)烷基、-S(C₂-C₆)烯基、-SO(C₂-C₆)烯基、-SO₂(C₂-C₆)烯基或基团-Q-W，其中，Q代表键或-O-、-S-、-SO-或-SO₂-，W代表苯基、苯基烷基、(C₃-C₈)环烷基、(C₃-C₈)环烷基烷基、(C₄-C₈)环烯基、(C₄-C₈)环烯基烷基、杂芳基或杂芳基烷基，基团W可任选被一个或多个独立选自下组的取代基取代：羟基、卤素、-CN、-CONH₂、-CONH(C₁-C₆)烷基、-CONH(C₁-C₆烷基)₂、-CHO、-CH₂OH、(C₁-C₄)全氟烷基、-O(C₁-C₆)烷基、-S(C₁-C₆)烷基、-SO(C₁-C₆)烷基、-SO₂(C₁-C₆)烷基、-NO₂、-NH₂、-NH(C₁-C₆)烷基、-N((C₁-C₆)烷基)₂、-NHCO(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷基、(C₂-C₆)烯基、(C₂-C₆)炔基、(C₃-C₈)环烷基、(C₄-C₈)环烯基、苯基或苄基。

8.如权利要求1-6中任一项所述的化合物，其特征在于，R₂和R₃独立为H-Alk⁴-、苯基、单环杂环基、C₃-C₇环烷基、苯基(Alk⁴)-、杂环基(Alk⁴)-或C₃-C₇环烷基(Alk⁴)-，其中的杂环基部分是具有3-7个环原子的单环杂环基，且其中的-Alk⁴-是直链或支链的二价(C₁-C₆)亚烷基、(C₂-C₆)亚烯基或(C₂-C₆)亚炔基，该基团可任选被醚(-O-)、硫醚(-S-)或氨基(-NR^A-)连接基团打断或终止，其中R^A是氢或任选取代的(C₁-C₃)烷基，其中的Alk⁴-或环部分是任选取代的。

9.如权利要求1-6中任一项所述的化合物，其特征在于，R₂和R₃独立为甲基、乙基、正丙基或异丙基、或者正丁基、伸丁基或叔丁基。

10.如上述权利要求中任一项所述的化合物，其特征在于，R₂和R₃中至少一个是甲基。

11.如权利要求1-6中任一项所述的化合物，其特征在于，R₂和R₃与它们所结合的碳原子一起形成C₃-C₇环烷基环，如环丙基、环丁基、环戊基或环己基环。

12.如上述权利要求中任一项所述的化合物，其特征在于，基团R₁C(R₂)(R₃)NH-Y-L¹X¹-(CH₂)_z-选自R₁C(R₂)(R₃)NH-C(＝O)-、R₁C(R₂)(R₃)NH-(CH₂)_a-、R₁C(R₂)(R₃)NH-(CH₂)_aO-或R₁C(R₂)(R₃)NH-CH₂CH＝CHCH₂-，其中a是1、2、3、4或5。

13.如权利要求1所述的化合物，所述化合物是：

N-{3-[4-氨基甲酰基-5-(氨基甲酰基氨基)-2-噻吩基]苄基}-2-甲基丙氨酸环戊酯，或

N-(2-{3-[4-氨基甲酰基-5-(氨基甲酰基氨基)-2-噻吩基]苯基}乙基)-2-甲基丙氨酸环戊酯

或它们的盐、N-氧化物、水合物或溶剂合物。

14.一种包含上述权利要求中任一项所述化合物以及一种或多种药学上可接受的载体和/或赋形剂的药物组合物。

15.如权利要求1-13中任一项所述的化合物在制备用于抑制IKK酶活性的组合物中的应用。

16.如权利要求15所述的应用，其特征在于，用于离体或体内抑制IKK-β活性。

17.如权利要求1-13中任一项所述的化合物在制备用于治疗肿瘤性/增生性疾病、免疫疾病或炎性疾病的组合物中的应用。

18.一种抑制IKK酶活性的方法，所述方法包括使所述酶接触有效进行这种抑制的量的如权利要求1-13中任一项所述的化合物。

19.如权利要求18所述的方法，其特征在于，用于离体或体内抑制IKK-β活性。

20.一种治疗肿瘤性/增生性疾病、免疫性疾病或炎性疾病的方法，该方法包括给予患有这种疾病的对象有效量的如权利要求1-13中任一项所述的化合物。

21.如权利要求15所述的应用或如权利要求20所述的方法，其特征在于，用于治疗癌细胞增殖。

22.如权利要求15所述的应用或如权利要求20所述的方法，其特征在于，用于治疗肝细胞癌或黑色素瘤。

23.如权利要求15所述的应用或如权利要求20所述的方法，其特征在于，用于治疗肠癌、卵巢癌、头颈癌和宫颈鳞状细胞癌、胃癌或肺癌、间变性少突神经胶质瘤、多形性成胶质细胞瘤或髓母细胞瘤。

24.如权利要求15所述的应用或如权利要求20所述的方法，其特征在于，用于治疗类风湿性关节炎、硬皮病、炎性肠病、克罗恩病、溃疡性结肠炎、慢性阻塞性肺病、哮喘、多发性硬化症、糖尿病、特应性皮炎、移植物抗宿主病、系统性红斑狼疮、II型糖尿病或阿尔茨海默病。